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    Guia Aerobios Mesofilos

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    Este documento describe el método para determinar los mesoaerobios o aerobios mesófilos en alimentos. El procedimiento incluye preparar el medio de cultivo, macerar la muestra, realizar diluciones seriadas, sembrar las diluciones en placas de petri y contar las colonias después de incubar a 35°C durante 24-48 horas. Los resultados se expresan como el número de unidades formadoras de colonias por mililitro o gramo de muestra.

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    Este documento describe el método para determinar los mesoaerobios o aerobios mesófilos en alimentos. El procedimiento incluye preparar el medio de cultivo, macerar la muestra, realizar diluciones seriadas, sembrar las diluciones en placas de petri y contar las colonias después de incubar a 35°C durante 24-48 horas. Los resultados se expresan como el número de unidades formadoras de colonias por mililitro o gramo de muestra.

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    SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

    CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS


    LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

    DETERMINACION DE MESOAEROBIOS O AEROBIOS MESOFILOS


    EN ALIMENTOS

    Juan Guillermo Cubillos Hinojosa


    Microbiologo Agroindustrial, (c)MSc
    1. INTRODUCCION

    Los mesoaerobios son el indicador ms amplios en los alimentos, debido a que incluye
    todos los gneros aerobios y facultativos que crecen en medios simples a una temperatura
    de 20C y 45C.

    El recuento de este grupo de microorganismos se considera como un indicador del grado de


    contaminacin de los alimentos en cualquier etapa del proceso de produccin, permite
    tambin obtener informacin sobre la alteracin incipiente de los alimentos y su probable
    vida til.

    2. OBJETIVOS

    Adquirir destreza en la determinacin de aerobios mesfilos en alimentos.


    Realizar informe de los resultados obtenidos por la muestra analizada.

    3. MATERIALES

    Standar Plate Count Agar


    Cajas petri
    Erlenmeyer
    Tubos de ensayo
    Morteros
    Agua peptonada
    Puntas estriles
    Micropipetas

    4. METODOLOGIA

    1. Preparar el medio de cultivo SPC.


    2. Tomar 10g de muestra y macerarla; en caso que la muestra sea liquida tome 10mL en
    una probeta estril.
    3. Agregar la muestra al erlenmeyer que contiene 90mL de agua peptonada.
    4. Realice diluciones seriadas hasta 10-3.
    5. Siembre en profundidad por duplicado cada una de las diluciones.
    6. Incubar a 35C+/-2 durante 24-48 horas.

    Muestra
    de 10g
    90mL
    H2O
    Peptonada

    9mL
    H2O
    Sembrar en Peptonada
    profundidad

    10-1 10-2 10-3

    2x

    Figura 1. Esquema de determinacin de aerobios mesfilos en alimentos

    5. LECTURA DE RESULTADOS

    a) Despus del perodo de incubacin especificado, se cuentan las colonias de las cajas,
    empleando el equipo de recuento de colonias bajo luz tenue.
    b) Seleccione las dos cajas correspondientes a la misma dilucin que presenten entre 30 y
    300 colonias. Hallar la media de los valores y multiplicar por el factor de dilucin. Si se
    presentan recuentos menores a 15 y mayores a 150 se deben contar todas las diluciones
    sacando el promedio entre ellas.
    c) Es importante que las colonias en punta de alfiler sean incluidas en el recuento, pero es
    esencial que la persona que realiza la lectura evite confundir las partculas no disueltas o
    precipitadas con colonias en punta de alfiler.
    d) Se recomienda examinar con atencin los elementos dudosos, empleando una lupa cuando sea
    necesario, con el objeto de diferenciar las colonias de partculas extraas.
    e) Las colonias invasoras deben ser consideradas como una sola colonia. Si menos de un cuarto de la
    placa est invadida por dichas colonias, se cuentan las colonias de la parte no afectada
    de la placa y se calcula el nmero correspondiente a la placa entera. Si est invadido ms
    de un cuarto de la placa, se desecha el recuento.

    6. EXPRESION DE RESULTADOS

    Se redondea el resultado calculado con dos cifras significativas. Se toma como resultado el
    nmero de unidades formadoras de colonias, UFC/ml o UFC/g de producto, expresado
    como un nmero entre 1,0 y 9,9 multiplicado por 10x donde x es la potencia apropiada de 10.

    Se calcula el nmero de N de colonias por mililitro o por gramo de producto, dependiendo


    del caso, usando la siguiente ecuacin:

    7. BIBILOGRAFIA

    ICONTEC. 2009. Norma Tcnica Colombiana NTC 4519. Microbiologa de los alimentos
    para consumo humano y animal. Mtodo horizontal para el recuento de microorganismos.
    Tcnica de recuento de colonias a 30 C.
    ICONTEC. 2009. Norma Tcnica Colombiana NTC 4092. Microbiologa de alimentos y
    productos para alimentacin animal. Requisitos generales y directrices para anlisis
    microbiolgicos.
    INVIMA. 1998. Manual de tcnicas de anlisis para control de calidad microbiolgico
    de alimentos para consumo humano. 110-111pp.

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