Este documento describe diversas pruebas cualitativas para la identificación de grupos funcionales en extractos de plantas, incluyendo pruebas para triterpenos, esteroles, flavonoides, sesquiterpenlactonas, alcaloides, insaturaciones, azúcares, lactonas, naftaquinonas, oxihídrilos fenólicos, cumarinas, saponinas y compuestos aromáticos. Se detallan los reactivos y procedimientos para cada prueba.
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Este documento describe diversas pruebas cualitativas para la identificación de grupos funcionales en extractos de plantas, incluyendo pruebas para triterpenos, esteroles, flavonoides, sesquiterpenlactonas, alcaloides, insaturaciones, azúcares, lactonas, naftaquinonas, oxihídrilos fenólicos, cumarinas, saponinas y compuestos aromáticos. Se detallan los reactivos y procedimientos para cada prueba.
Este documento describe diversas pruebas cualitativas para la identificación de grupos funcionales en extractos de plantas, incluyendo pruebas para triterpenos, esteroles, flavonoides, sesquiterpenlactonas, alcaloides, insaturaciones, azúcares, lactonas, naftaquinonas, oxihídrilos fenólicos, cumarinas, saponinas y compuestos aromáticos. Se detallan los reactivos y procedimientos para cada prueba.
Este documento describe diversas pruebas cualitativas para la identificación de grupos funcionales en extractos de plantas, incluyendo pruebas para triterpenos, esteroles, flavonoides, sesquiterpenlactonas, alcaloides, insaturaciones, azúcares, lactonas, naftaquinonas, oxihídrilos fenólicos, cumarinas, saponinas y compuestos aromáticos. Se detallan los reactivos y procedimientos para cada prueba.
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PRUEBAS CUALITATIVAS (EXTRACCIN EN PLANTAS)
Pruebas para Grupos Funcionales
Para realizar las pruebas se utilizaron soluciones a 50 mg/ml de los extractos disueltos en metanol (es un ejemplo) Prueba de Liebermann-Burchard: Prueba utilizada para determinar triterpenos y compuestos esteroidales. Se coloc una gota de la solucin del extracto sobre una placa de porcelana de 12 pozos, se evapor el solvente y posteriormente se agreg una gota de cloroformo y dos gotas del reactivo; posteriormente se observaron cambios de coloracin. El reactivo utilizado se prepar utilizando una gota de cido sulfrico a una mezcla de 1.0 ml de anhdrido actico y 1.0 ml de cloroformo.
Prueba de Salkowski: Se utiliz para determinar esteroles y metilesteroles, es
similar a la de Liebermann-Burchard, la muestra en cloroformo se puso en contacto con una gota de cido sulfrico, la prueba fue positiva s se desarrollaron colores amarillo o rojo. Prueba de Shinoda: Se utiliz para la identificacin de compuestos de tipo flavonoide; 1.0 mg de la muestra se disolvieron en metanol y unas limaduras de magnesio, se le aplic calor (60C) y despus unas gotas de HCl por las paredes. Se consider positiva con la aparicin de colores naranja, rojo, rosa, azul o violeta. Prueba de Baljet: Para sesquiterpenlactonas, se utilizan 2 soluciones que se mezclan en volmenes iguales antes de usarse, la solucin A, un gramo de cido pcrico en 100 ml de metanol; solucin B, 10 g de hidrxido de sodio en 100 ml de agua. Para la prueba se colocan 10 mg de compuesto y 3-4 gotas de reactivo, la prueba es positiva si se forma una coloracin naranja o rojo obscuro. Prueba de Dragendorff: Se utiliza la modificacin de Munier y Machelobuf para la determinacin de alcaloides. Para ello se preparan dos soluciones, la solucin A
con 0.85 g de nitrato de bismuto, los cuales se mezclaron con 10 ml de cido
actico glacial y 40 ml de agua y Solucin B con 8 g de yoduro de potasio disuelto en 20 ml de agua. El reactivo se prepara mezclando 5 ml de A, 4 ml de B y 100 ml de agua (este reactivo es estable por un ao). Se disuelven de 1 2 mg de la muestra en etanol y se colocan unas gotas en una placa de porcelana, luego se aaden unas gotas del reactivo, la prueba es positiva si se presentan coloraciones rojo o naranja, persistentes por 24 h. Prueba de bromo en tetracloruro de carbono: Para insaturaciones, a 2 mg de la muestra se le agregan una solucin de bromo al 2 % en tetracloruro de carbono; la prueba se considera positiva si la coloracin de la solucin desaparece al principio. Prueba del permanganato de potasio: Para dobles enlaces, se prepar una solucin de permanganato de potasio al 2 % en agua, se disuelven 0.2 mg de la muestra en agua, acetona, o metanol, se toma con un capilar y se le agrega la solucin de permanganato de potasio. La prueba es positiva si se produce la decoloracin del reactivo. Prueba de 2,4- Dinitrofenilhidracina: Para grupo carbonilo. En un tubo de ensaye se disuelven 50 mg de 2,4-dinitrofenilhidracina en 1 ml de metanol caliente. Se agregan 50 mg del compuesto carbonlico y se calent a bao Mara por 10 a 15 min; se deja en reposo y se enfro en bao de hielo, la aparicin de un precipitado naranja indica la presencia de un grupo carbonilo. Prueba de Molisch: Para azcares. En un tubo de ensaye se coloca la muestra, se aadieron 3 gotas del reactivo de Molisch, y se agit. Despus se inclina el tubo y se deslizan por la pared 2 ml de cido sulfrico concentrado. La prueba es positiva si se forma un anillo coloreado en la interfase. El reactivo se prepara disolviendo 1 g de -naftol en 100 ml de metanol al 95 %. Prueba de NaOH: Para determinar lactonas. Se disolvieron 1-2 mg de muestra en solucin alcohlica de NaOH al 10 %. La presencia de color naranja que desaparece al agregar HCl indica la presencia de un anillo lactnico.
Prueba de Brntrager: Para determinar naftaquinonas y antraquinonas. Se hierve
por 10 min una pequea porcin de extracto con hidrxido de potasio (KOH 2-5%) para luego enfriarla, se acidula con HCl 1N y se extrae con benceno. La capa se separa y se agita con un poco de la solucin de KOH. Si la fase del benceno se decolora y la alcalina se torna roja, esto indic presencia de quinonas. Prueba del cloruro frrico FeCl3: Para determinar oxihdrilos fenlicos. Se disuelven 1 a 2 mg del extracto muestra en 1 ml de etanol, mas una gota de solucin de cloruro frrico en agua al 15 %. Fue positiva para la presencia de oxihdrilos fenlicos con la aparicin de coloracin o precipitado rojo, azul, violeta o verde. Cumarinas: Se disuelve una porcin de extracto muestra (1-2 mg) en solucin alcohlica de KOH al 10 %. Una coloracin amarilla, que desapareci al acidular con HCL 1N se registra como positiva. Prueba del bicarbonato de sodio. La sal se prepara al 10% en agua. Se disuelven de 1-2 mg de la muestra disuelta en agua o etanol y se le agregan de 2-3 gotas de cido sulfrico concentrado. Se agita ligeramente. Luego se agregan 2-3 gotas de la solucin de bicarbonato de sodio. La aparicin de burbujas y su permanencia por ms de 1 minuto indican la presencia de saponinas. Prueba del H2SO4. Una pequea cantidad de muestra se disuelve en H2SO4 y se observa coloracin amarilla para flavonoides, naranja-guinda para flavonas, rojoazuloso para chalconas y rojo-prpura para quinonas. Prueba del cido sulfrico-formaldehdo. Se prepara una mezcla de 1 mr. De cido sulfrico concentrado con una gota de formaldehdo. Se agregan de 1-5 mg. de la muestra disuelta en disolvente no aromtico, se aaden unas gotas de la mezcla anterior y si aparece un color rojo-violeta, la prueba es positiva para compuestos aromticos. (Harborne J.B., 1998)