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    Evellyn Rayanne
    Este roteiro descreve os procedimentos para realizar uma aula prática de contagem global de leucócitos, incluindo a coleta de sangue, preparação de esfregaço sanguíneo, coloração panótica, visualização ao microscópio e contagem de leucócitos. O objetivo é compreender a realização do esfregaço sanguíneo e identificar leucócitos, além de contar o número total de leucócitos por mm3 de sangue.

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    Este roteiro descreve os procedimentos para realizar uma aula prática de contagem global de leucócitos, incluindo a coleta de sangue, preparação de esfregaço sanguíneo, coloração panótica, visualização ao microscópio e contagem de leucócitos. O objetivo é compreender a realização do esfregaço sanguíneo e identificar leucócitos, além de contar o número total de leucócitos por mm3 de sangue.

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    Este roteiro descreve os procedimentos para realizar uma aula prática de contagem global de leucócitos, incluindo a coleta de sangue, preparação de esfregaço sanguíneo, coloração panótica, visualização ao microscópio e contagem de leucócitos. O objetivo é compreender a realização do esfregaço sanguíneo e identificar leucócitos, além de contar o número total de leucócitos por mm3 de sangue.

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    Este roteiro descreve os procedimentos para realizar uma aula prática de contagem global de leucócitos, incluindo a coleta de sangue, preparação de esfregaço sanguíneo, coloração panótica, visualização ao microscópio e contagem de leucócitos. O objetivo é compreender a realização do esfregaço sanguíneo e identificar leucócitos, além de contar o número total de leucócitos por mm3 de sangue.

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    Roteiro de Aula Prática

    Código e nome da disciplina

    ARA0281 Hematologia Clínica

    Título da Prática:

    Contagem global de leucócitos

    Objetivos da aula:
    1) Compreender a realização do esfregaço sanguíneo.
    2) Compreender os fundamentos da coloração panótipo.
    3) Identificar os leucócitos presentes nas lâminas.
    4) Realizar a contagem global de leucócitos.

    Material necessário para a aula:

    Água, sabão e papel toalha


    Lâminas
    Lanceta estéril
    Kit de coloração panótico rápido
    Álcool 70%
    Gaze estéril
    Microscópio óptico
    Caneta ou lápis para lâmina
    Descarpack
    Contador de células
    Caneta ou lápis para identificação das lâminas

    Procedimentos:

    1. Os alunos deverão entrar no laboratório equipados com EPI'S e realizarem a


    higienização das mãos.
    2. Identificar uma das extremidades da lâmina, utilizando caneta ou lápis
    apropriados.
    3. Utilizar gaze embebida com álcool à 70%, para limpar toda a superfície da lâmina,
    até que não seja mais observado resquícios de gordura ou oleosidade.
    4. Higienizar o dedo do aluno utilizando gaze embebida com álcool à 70%.
    5. Utilizar a lanceta estéril para realizar um pequeno furo no dedo do aluno.
    6. Adicionar uma gota de sangue em uma das extremidades da lâmina, com cuidado
    para que o dedo não toque a superfície.
    7. Apoiar a lâmina com função extensora, respeitando ângulo de 45 oC, na superfície
    contendo gota de sangue.
    8. Com a lâmina extensora, realizar um movimento para trás sob a gota de sangue e
    aguardar que todo sangue se espalhe pela borda da mesma.
    9. Em seguida, com um único movimento rápido, realizar a distensão frontal do
    sangue.
    10. Aguardar a secagem total do esfregaço a temperatura ambiente.
    11. Mergulhar a lâmina em triarilmetano a 0,1% (metanol), movimentando-a para
    cima e para baixo, durante 5 segundos.
    12. Retirar a lâmina do triarilmetano a 0,1% e aguardar que todo fixador escorra da
    superfície.
    13. Mergulhar a lâmina em xantenos a 0,1% (eosina), movimentando-a para cima e
    para baixo, durante 5 segundos.
    14. Retirar a lâmina do xantenos a 0,1% e aguardar que todo corante escorra da
    superfície.
    15. Mergulhar a lâmina em tiazinas a 0,1% (azul de metileno), movimentando-a para
    cima e para baixo, durante 5 segundos.
    16. Retirar a lâmina da tiazinas a 0,1% e aguardar que todo corante escorra da
    superfície.
    17. Lavar o esfregaço, suavemente, com água corrente e aguarde a secagem.
    18. Avaliar no microscópio óptico a região caudal do esfregaço em diferentes
    aumentos (4, 10, e 40 x).
    19. Realizar a contagem global de leucócitos utilizando a objetiva de 40x.
    20. Realizar a leitura da lâmina em zigue-zague em 10 campos diferentes.
    21. Somar a quantidade de leucócitos visualizados nesses campos, e posteriormente
    dividir o valor encontrado por 10, dessa forma, obtendo o valor médio de leucócitos
    por campo.
    22. Multiplicar o valor médio por 3.000, e o resultado obtido dessa multiplicação,
    será correspondente a contagem global de leucócitos por mm³.

    Observações

    - Atenção com as normas de biossegurança.


    - Enfatizar que as lancetas devem ser descartadas no descarpack.
    - É essencial escorregar a segunda lâmina sem cessar o movimento, que deve ser
    uniforme.
    - Iniciar a visualização das lâminas no microscópio utilizando a lente de menor
    aumento.
    - O campo ideal de leitura, é aquele em que as células estão distribuídas
    homogeneamente, sem sobreposições e que não estejam tão afastadas umas das
    outras, para diminuir os erros de contagem que podem ocorrer devido à má
    distribuição dos leucócitos.
    - Ao realizar a leitura de lâmina em zigue-zague para evitar a contagem da mesma
    célula mais de uma vez.

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