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Dra Edna Cristina Franco - Aula Biologia e Aplicações Das Células-Tronco
Dra Edna Cristina Franco - Aula Biologia e Aplicações Das Células-Tronco
Dra Edna Cristina Franco - Aula Biologia e Aplicações Das Células-Tronco
PLURIPOTENTES
CONCEITOS-CHAVE
Adultas
Potencial Terapêu co
Regeneração Tecidual
Questão É ca
iPS cells
MULTIPOTENTES
CÉLULAS-TRONCO ADULTAS
• Alguns exemplos de células-tronco adultas:
Células-tronco multipotentes
Células progenitoras intermediárias Alteração da
(células de amplificação transiente) expressão gênica
População de células específicas
• Mecanismos epigenéticos:
Células-tronco hematopoiéticas:
Células que não estão em contato com
osteoblastos se diferenciam
CÉLULAS DIFERENCIADAS X CÉLULAS-TRONCO
Evans MJ, Kaufman MH. Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos.
Nature. 1981 Jul 9;292(5819):154-6.
MEF LIF (fator inibidor leucemia)
célula-tronco embrionária
Parte 2: Como as CT estão sendo usadas?
PLASTICIDADE DAS CÉLULAS-TRONCO
• Plasticidade: potencial de formação de diferentes tipos de células maduras
• Células-tronco hematopoiéticas:
– Foi a primeira a ser descrita;
– É a melhor compreendida;
– É a mais aplicada em protocolos clínicos;
– Fácil acesso: sangue periférico
medula óssea
sangue do cordão umbilical
Conceito de célula-tronco (reconstituição do sistema hematopoiético de
camundongos letalmente irradiados após transplante de células da medula
óssea de camundongos singênicos normais).
Autorrenovação
Capacidade de gerar células diferenciadas
Autorrenovação: Experimento de
transferência seqüencial para receptores
secundários (Fig. 4.2)
CÉLULAS-TRONCO HEMATOPOIÉTICAS
• Outros:
– Fator de células-tronco (SCF)
– Ligante do receptor Flt3/Flt2 (FL)
– Interleucinas 1, 3 e 6 (IL1, IL3 e IL6)
OBS: São estimulantes da proliferação de CT e células progenitoras
FONTE DE COLETA DE CTH
• Medula óssea
• Sangue periférico
• Introdução:
• CTM são uma população rara de células multipotenciais presentes na MO
• Tem como característica serem capazes de se diferenciar em diversas linhagens
celulares:
• Condrócitos, osteócitos, adipócitos, tenócitos, células do tecido nervoso e hepático
Fibroblasto em Cultura
MECANISMO DE AÇÃO DAS CTM
O potencial angiogênico e
imunomodulador pode favorecer
o aparecimento de tumores?
Células-Tronco Pluripotentes Induzidas
(iPS Cells)
CÉLULAS-TRONCO PLURIPOTENTES INDUZIDAS
●
Contexto histórico:
– CTE podem ser usadas no tratamento de doenças (Parkinson, lesão medular, diabetes)
– Problemas éticos (uso de embriões)
– Possibilidade de rejeição do tecido após o transplante no hospedeiro
●
Como contornar esses problemas?
– Gerando células pluripotentes a partir das células do próprio paciente
●
Reprogramação de células somáticas:
– Transferência nuclear (Wilmut et al., 1997)
– Fusão com células tronco embrionárias (Tada et al., 2001; Cowan et al., 2005)
– Ovócitos e CTE contêm fatores que conferem a totipotência (pluripotência) em células
somáticas.
RESULTADOS:
Não havia formação de colônias
G418-resistentes com a remoção de
Oct3/4 (14) ou Klf4 (20).
A re rada de Sox2 (15) resultou na
formação de poucas colônias.
Colônias formadas após a re rada
de c-Myc (22) não nham
morfologia semelhante a CTE.
CONCLUSÃO:
Oct3/4, Klf4, Sox2 e c-Myc têm um
papel importante na geração de
células iPS
mesoderme endoderme ectoderme
CÉLULAS-TRONCO PLURIPOTENTES INDUZIDAS
Como o processo ocorre?
(DOWNREGULATION)
(UPREGULATION)
(UPREGULATION)
(REATIVAÇÃO)
AP = Fosfatase alcalina
Fbx15 = Proteína box15
SSEA1 = Antígeno embrionario específico do estágio 1
MODELO DOS DOIS ESTÁGIOS
Conclusões
APLICAÇÃO CLÍNICA DAS CÉLULAS-TRONCO
• Medicina regenerativa:
– Área promissora da pesquisa com células-tronco.
• Pré-requisito:
– Evidências de que elas são de seguras;
– Disponibilidade das células em quantidades suficientes para tratar os pacientes;
– Disponibilidade das células para tratamentos repetidos no caso delas perderem
a função ao longo do tempo (ex: lenta rejeição pelo sistema imunológico);
– Os custos para o sistema de saúde deve ser sustentável.
Prof. Dr. Ricardo Ribeiro (FIOCRUZ - BA)
Novas Tecnologias (Terapia Celular)