Avaliação de Níveis de Ferro, Versao Final
Avaliação de Níveis de Ferro, Versao Final
Avaliação de Níveis de Ferro, Versao Final
ISCISA
Estudante
Supervisor
Código
TFCTBLZA 15/19
Hb – Hemoglobina
RI – Resistência a Insulina
Índice
1 Introdução.................................................................................................................................5
2 Revisão da literatura.................................................................................................................7
2.1 Conceitos...........................................................................................................................7
4 Hipótese..................................................................................................................................13
5 Justificativa.............................................................................................................................14
6 Objectivos...............................................................................................................................15
7 Material e métodos.................................................................................................................16
7.9.1 Materiais..................................................................................................................18
7.9.2 Equipamentos..........................................................................................................18
7.10 Procedimentos.................................................................................................................18
7.18 Cronograma.....................................................................................................................22
7.19 Orçamento.......................................................................................................................23
Referências bibliográficas.............................................................................................................24
APÊNDICES.................................................................................................................................27
ANEXOS.......................................................................................................................................28
1 Introdução
O ferro é um mineral vital para a homeostase celular e está presente principalmente no complexo
porfirínico e nas proteínas do seu armazenamento, ferritina e hemossiderina. Sendo que o ferro faz
parte da hemoglobina, da mioglobina e de algumas enzimas, onde participa em vários processos
vitais como os mecanismos oxidativos celulares e o transporte de oxigénio no organismo (Grotto,
2010; Motta, 2009; Sakai & Monterio, 2018).
O ferro no organismo apresenta-se sob duas formas: ferro ferroso (Fe 2+) encontrado na hemoglobina,
ferro férrico (Fe3+) está armazenada na ferritina e hemossiderina. O fe 3+ também pode estar
combinado a transferrina, proteína responsável por transporte de ferro no sangue. Quando a
concentração de fe3+ ultrapassa 5g está-se perante sobrecarga de ferro que pode complicar a saúde
(Bringhenti, 2011; Motta, 2009).
A sobrecarga de ferro é uma condição clínica em que há aumento nos níveis de ferro no organismo
devido a vários factores entre eles as transfusões de sangue repetitivas causadas por anemias, doenças
hematológicas e doenças hepáticas ou uso indevido de ferro pelo organismo e é mais frequente em
pacientes com talassemia, anemia falciforme, anemia aplásica refratária, síndromes mielodisplásicas,
aplasia pura de série eritróide e leucemias agudas (Hoffbrand, 2013; Motta, 2009 & Ward, 2010).
Algumas evidências apontam para um menor impacto da sobrecarga de ferro sobre os tecidos nos
pacientes com anemia falciforme em relação aos pacientes com talassemias e raramente, os doentes
de leucemias agudas podem, em virtude das transfusões repetitivas podem apresentar sobrecarga de
ferro (Sheth, 2014).
O desenvolvimento desta pesquisa pode despertar a classe médica na tomada de medidas após
politransfusão sobre questões relacionadas com sobrecarga de ferro induzidas pelas transfusões
sanguíneas, dai a realização do presente estudo com objectivo de avaliar as alterações de níveis de
ferro, ferritina, transferrina e capacidade plasmática total de ligação do ferro em pacientes
politransfundidos nas enfermarias de Oncologia e Hematologia.
2 Revisão da literatura
2.1 Conceitos
O ferro é um mineral vital para a homeostase celular, pois é essencial para o transporte de oxigénio,
para a síntese de ADN e metabolismo energético. É um cofactor importante para enzimas da cadeia
respiratória mitocondrial e na fixação do nitrogénio (Grotto, 2010; Motta, 2009).
O ferro é útil quando estiver ligado as proteínas criando capacidade de oxidar substratos. Quando
estiver livre representa um risco muito grande para a vida, pois, passa a agir contra o organismo
produzindo radicais livres. Duas proteínas são importantes para regular os níveis de ferro: a ferritina
e transferrina (Prá, 2008).
Transferrina é uma glicoproteína que transporta ferro pelo plasma. A ferritina é sintetizada e
secretada pelo fígado é responsável por doar o ferro para as células através da interacção da
transferrina com capacidade total de ligação de ferro TIBC (Grotto, 2010; Motta, 2009).
circulação sanguínea onde será transportado pela transferrina. O ferro orgânico é absorvido pelas
células da mucosa intestinal onde se separa do heme pela acção da enzima hemeoxigenase e depois
segue a mesma via do ferro inorgânico (Grotto, 2010; Motta, 2009).
O Fe3+ é reduzido a Fe2+ pela enzima redutase férrica no interior no lúmen intestinal do enterócito
permitindo a sua saída para o plasma, atravessando a barreira de células epiteliais onde é transportado
para os depósitos de ferro (ferritina e Hemossiderina), assim como para os eritroblastos da medula
óssea para síntese da hemoglobina (Costa et al., 2013).
O Fe2+ absorvido pelos enterócitos no duodeno proximal e libertado pela membrana basolateral para
corrente sanguínea via ferroportinas e é oxidado em uma membrana de cobre e a enzima hefastina
ferroxidase para se ligar a transferrina onde é transportado pela corrente sanguínea para as células ou
órgão alvo (Grotto, 2010; Motta, 2009).
A ligação do ferro à transferrina possibilita o aumento da sua solubilidade e atenua sua reactividade
garantindo o transporte seguro e libertação para as células, entretanto, em situações de excesso de
ferro, quando a capacidade de ligação da transferrina está saturada, o ferro não ligado a transferrina
(NTBI) aparece no plasma sanguíneo (Grotto, 2010).
pode levar a sobrecarga de ferro caso essas transfusões não seja acompanhada com terapia de
estratificação de ferro (Shah, Sayani, Trompeter, Drasar, & Piga, 2019).
Em caso de paciente que se apresentem com alteração nos padrões normais destes exames, a
estratificação destes pacientes de acordo com o grau de sobrecarga de ferro por forma a definir
melhor a conduta clínica deve ser feita (Murray et al., 2016).
Até finais da década de 90 a desferroxamina era o único agente quelante de ferro aprovado e
disponível para tratamento de sobrecarga de ferro. Actualmente existem mais opções de quelantes
como é o caso da Deferiprona (1,2-dimetil-3hidroxil-4-piridona) oral de 500 mg com dose
recomendada de 25mg/kg e Deferasirox (Murray et al., 2016; Valent et al., 2018).
De acordo com Kroot, et al, (2011) o organismo não possui um mecanismo específico para excretar o
excesso de ferro, transfusões contínuas realizadas por um longo período levam ao desenvolvimento
de sobrecarga de ferro nos macrófagos e hepatócitos, e esses não são mais capazes de reter e reservar
o ferro excedente.
Em um esquema típico de transfusão sanguínea, pacientes com anemias hemolítica acumulam ferro a
uma taxa de 0,3 a 0,6 mg/kg de peso corporal por dia. O excesso de ferro no organismo humano é
tóxico em níveis acima de 12 a 24g de ferro total. Esse excesso acumula-se no coração, fígado e
sistema endócrino responsável pelas hormonas reprodutoras (Cappellini, Cohen, Porter, Taher, &
Viprakasit, 2014; Yardumian et al., 2016).
A dosagem da ferritina sérica é o teste diagnóstico mais usado na prática clínica para avaliação de
sobrecarga de ferro é um método quantitativo, reprodutível, sensível e de fácil execução. Quando os
valores ferritina estiverem reduzidos pode indicar diminuição ou ausência de ferro nos locais de
depósito enquanto o seu aumento indica depósito de ferro no organismo (Rocha, Dantas, Carvalho,
& Moreira, 2011).
O excesso de ferro pode levar à cardiomiopatia, o risco de fibrose hepática, cirrose hepática,
carcinoma hepatocelular e distúrbios endócrinos tais como hipogonadismo, crescimento retardado,
puberdade atrasada, infertilidade, diabetes, hipotireoidismo e hipoparatireoidismo (Cappellini et al.,
2014; Yardumian et al., 2016).
Dada a raridade destas condições patológicas na literatura, foi encontrada pouca informação em
relação a frequência da sobrecarga de ferro a nível mundial. O estudo feito em 2003 no Reino Unido,
onde a população com β-talassemia foi estimada em 3% (Mcleod et al., 2009).
O estudo feito no Brasil, um país com população de aproximadamente 200 milhões de habitantes
onde eram estimados cerca de 490 indivíduos com β-talassemia, a frequência de sobrecarga de ferro
na população geral estimou-se em 0.02% (Silva & Santos, 2009).
Olhando para as consequências da sobrecarga do ferro podem acarretar custos para as famílias assim
como o sistema de saúde, não foram encontrados artigos com dados globais oficiais que indiquem a
magnitude do problema a nível mundial, em África e em Moçambique. Este é um dos motivos que
suscita interesse para o estudo do presente problema como forma de trazer informação sobre a
magnitude da sobrecarga de ferro ao nível local.
Tendo em conta que os efeitos e as complicações resultantes do excesso do ferro livre no organismo
que pode ser induzida por transfusões, nos leva a seguinte questão:
Quais são os níveis de ferro, ferritina, transferrinae TIBC em pacientes politransfudidos nas
enfermarias de Oncologia e Hematologia do HCM de Janeiro a Fevereiro de 2020?
4 Hipótese
H0: A sobrecarga de ferro em pacientes politransfundidos é superior ou igual a 5%
5 Justificativa
Em vários casos vividos profissionalmente e nos estágios escolares, apenas foram vistos pedidos de
controlo de Hemoglobina (Hb) e raros ou quase poucos pedidos de controlo da cinética do ferro
(ferro sérico, ferritina, transferrina e TIBC) em pacientes após transfusão.
E sabendo que, a correcção tardia da sobrecarga de ferro, além de constituir um desafio para a
equipe médica, cria encargos financeiros para o paciente, a família e o Sistema Nacional de Saúde
(SNS) como um todo nas despesas do tratamento dessas complicações geralmente difíceis de tratar.
Esta pesquisa ao trazer informações importantes para os clínicos através do envio do relatório final
do estudo nas enfermarias em estudo, de modo a fazer mapeamento precoce da sobrecarga de ferro
bem como no seguimento dos pacientes de forma a evitar precocemente as complicações. Espera-se
com presente estudo contribuir com evidências científicas para tomada de decisão na gestão clínica
dos casos de forma a oferecer melhor qualidade de vida aos pacientes politransfundidos, através do
controlo seriado regular da cinética de ferro (ferro, ferritina, transferrina e TIBC) em pacientes alvos
de complicações e que estejam em seguimento nos serviços de Hematologia e Oncologia e ainda
poderá servir de fonte de consulta para posteriores pesquisas académicas.
6 Objectivos
6.1 Objectivo geral
Avaliar os níveis de ferro, ferritina, transferrina e capacidade plasmática total de ligação do
ferro em pacientes, politransfudidos com idade igual ou superior a 18 anos nas enfermarias de
Oncologia e Hematologia do HCM de Janeiro a Fevereiro 2020
7 Material e métodos
7.1 Descrição do Local de estudo
O estudo será realizado nas enfermarias de Oncologia e Hematologia do Hospital Central de Maputo
(HCM).
O HCM localiza-se na Cidade de Maputo, Distrito Municipal Ka Mpfumo, Bairro Central, com uma
extensão territorial que ocupa uma área de 163800 m2, e é uma Unidade Sanitária de referência
nacional, de nível 4, oferece atendimento de mais de 20 especialidades médicas e cirúrgicas e conta
com 1500 camas (CMCM, 2013).
No Laboratório de bioquímica realizam-se os testes de perfil hepático, perfil renal, perfil cardíaco,
perfil glicémico, perfil anémico, marcadores tumorais, hormonais e de doenças infecciosas. As
amostras serão processadas no Laboratório de Bioquímica do HCM.
Z 2 . p (1−p ) . N
n=
d 2 ( N−1 ) + Z 2 . p(1− p)
n=75.90≃ 76
Será usado a técnica de observação participativa e vai se usar ficha de recolha de dados (Apêndice).
A ficha será preenchida pelo observador (investigador principal) nas enfermarias para dados
demográficos (sexo e idade) e atribuição do código do participante e no laboratório para os valores
fornecidos pelos analisadores automáticos.
7.9.2 Equipamentos
Centrífuga e analisadores automáticos (BACKMAN COULTER AU680)
7.10 Procedimentos
Os pacientes serão abordados dentro das enfermarias onde se encontram internados . Os pacientes que
aceitarem participar no estudo, serão explicados os objectivos, os procedimentos do estudo e a
voluntariedade da participação. Se a ideia de participar se mantiver, os mesmos serão convidados a
assinar o termo de consentimento (Anexo 1) e será feito o acompanhamento dos doentes a partir da
primeira transfusão, onde será colhida amostra de sangue no tubo seco antes e depois de cada
transfusão para posteriormente serem processadas nos analisadores automáticos BACKMAN
COULTER AU680.
Após determinar os níveis de ferro, ferritina, transferrina e TIBC antes de cada transfusão, vai se
determinar os mesmos níveis após a transfusão a fim de verificar o quanto o participante ganhou pela
transfusão e quanto vai absorver no intervalo das transfusões.
Serão colhidas 3-4ml de sangue no tubo seco e levada imediatamente ao laboratório enquanto ocorre
o processo de coagulação e de seguida será centrifugada a 3500rpm durante 10min e o soro serão
depositados nas respectivas cuvetes e programadas para a corrida no equipamento BACKMAN
COULTER AU680.
Na determinação de ferro in vitro usa-se o método cromogéneo usando TPTZ [2,4,6-Tri- (2-piridil)
-5-triazina] num meio ácido, onde o ferro ligado à transferrina dissolve-se em iões de ferro livre e
apotransferrina. O ácido clorídrico e o ascorbato de sódio convertem os iões de ferro no estado
ferroso e estes reagem depois com o TPTZ para formar um complexo de cor azul que pode ser
medido bicromaticamente a 600/800nm.
Na determinação de transferrina in vitro ocorre quando uma amostra de soro é misturada com tampão
R1 e solução anti-soro R2, a transferrina humana reage especificamente com anticorpos transferrina
anti-humanos para produzir agregados insolúveis, onde esses agregados são proporcionais á
concentração de transferrina na amostra.
Na determinação de capacidade de ligação de ferro não, o ferro ferroso (Fe 2+) a pH alcalino,
adicionado ao soro, liga-se especificamente à transferrina nos locais de ligação do ferro não saturado.
O ferro ferroso não ligado remanescente reage com o Nitroso-PSAP [2-Nitroso-5- (N-propil-
Nsulfopropilamino) fenol] para formar um intenso complexo verde. A diferença entre a alteração
resultante na absorvância medida e a absorvância da quantidade total adicionada ao soro é
equivalente à quantidade ligada à transferrina.
Os dados serão armazenados na base de dados usando o pacote SPSS Statistics 20. E o processamento
será na mesma base e este, envolverá o cálculo de média, desvio padrão, e frequência e serão
representados na forma de tabelas ou gráficos de dados obtidos. Para comparar as diferentes variáveis
obtidas como número de transfusão, os níveis de ferro, ferritina, transferrina e TIBC será feita usando
o teste ANOVA onde será considerado um nível de significância menor que 0.05 (p <0.05). Se a
sobrecarga de ferro for maior a 5%, valida-se a hipótese nula e se for menor a 5% rejeita-se a
hipótese nula.
A pesquisa poderá ser interrompida ou suspensa por motivo de força maior que impossibilite o
estudante de continuar com a pesquisa como no caso de doença ou avaria dos equipamentos.
Para a elaboração do presente protocolo e do relatório final, usar-se-á o modelo de escrita científica
APA, 6ª edição e obedecendo o modelo preconizado pelo Instituto Superior de Ciência de Saúde
ISCISA para elaboração de um protocolo de pesquisa.
Este protocolo de pesquisa, tem carta de cobertura passada pelo Hospital Central de Maputo, local
onde será realizado o estudo. O protocolo de pesquisa será submetido ao Comité Institucional de
Bioética do Instituto Superior de Ciências de Saúde (CIBS–ISCISA) para sua apreciação e só depois
da aprovação será feita a recolha de dados no HCM.
As informações obtidas sobre os sujeitos da pesquisa serão apenas usadas para os fins da pesquisa
onde cada participante será identificado por um código atribuído pelo pesquisador e não pelo
laboratório de modo a garantir a preservação da confidencialidade e serão arquivadas de modo que
apenas o investigador terá acesso para salvaguardar a protecção dos dados pessoais dos pacientes. Os
dados recolhidos serão utilizados unicamente para fins mencionados neste presente trabalho.
A pesquisa não terá nenhum benefício directo aos participantes neste estudo, entretanto os resultados
da pesquisa irão servir para esclarecimento de algumas questões relacionadas com sobrecarga de
ferro induzidas pelas transfusões sanguíneas, por outro lado, com a realização dessa pesquisa poderá
mudar as política de transfusões permitindo a testagem laboratorial do perfil anémico (ferro, ferritina,
transferrina e TIBC) tanto para o doente assim como para o dador, de modo a transfundir sangue de
acordo com tipo de anemia, reduzindo a susceptibilidade de sobrecarga de ferro.
Todos os pacientes que aceitarem participar no estudo serão informados sobre os objectivos, os
procedimentos e a voluntariedade da participação. A participação neste estudo é legitimada pela
assinatura do termo de consentimento onde será de forma voluntária e estará livre de desistir a
qualquer momento sem afectar o procedimento clinico subsequente.
Todos pacientes seleccionados terão mesma probabilidade de fazer parte do estudo, o critério de
recolha de amostras, analise e interpretação de dados será a mesma para todos.
7.18 Cronograma
201 2020
Actividade/etapa 9 Responsável
Jan- Jun- Fer Mar- Mai Jun
Mai Out -Mar Abr
Revisão da literatura Estudante
Elaboração do protocolo Estudante
Submissão de protocolo para Estudante
revisão ética
Aprovação do protocolo CIBS
Recolha de dados Estudante
Análise e processamento de Estudante
dados
7.19 Orçamento
Tabela 2: proposta de orçamento
A cotação referente aos materiais de escritório foi feita na reprografia da faculdade de medicina da
Universidade Eduardo Mondlane, enquanto de reagentes e tubos seco foi feita na HOSPITEC, Rua
Lagos Amaramba 1625/3 Bairro Malanga, cidade de Maputo e as luvas, seringas e máscaras na
FARMAC, Avenida Eduardo Mondlane.
Referências bibliográficas
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Wood, J. C. (2010). Diagnosis and management of transfusion iron overload: The role of imaging.
O presente guião de recolha de dados destina-se aos pacientes transfundidos que de forma
voluntária aceitarão participar no estudo.
O estudante
_______________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy)
Prezado participante
No âmbito de aquisição de grau de Licenciatura em Tecnologia Biomédica Laboratorial,
encontro-me a desenvolver um estudo “Avaliação de níveis de ferro, ferritina, transferrina e
capacidade plasmática total de ligação do ferro em pacientes politransfudidos com idade igual ou
superior a 18 anos nas enfermarias de Oncologia e Hematologia do Hospital Central de Maputo –
Marco a Abril 2020”.
Investigador principal Zainadine Tamimo Sumela Agy, estudante do 4º ano do curso de
Licenciatura em Tecnologia Biomédica e Laboratorial.
Propósito do estudo: A pesquisa tem como propósito Avaliar de níveis de ferro, ferritina,
transferrina e TIBC em pacientes politransfudidos nas enfermarias de Oncologia e Hematologia
do Hospital Central de Maputo – Janeiro a Fevereiro 2020 com vista a facultar a elaboração de
trabalho final do curso.
A sua participação consistirá em permitir que 3ml de sangue seja colhido antes e depois de cada
da transfusão e seja usado para esse estudo
Riscos: O estudo não apresenta riscos significativos, dada a quantidade de sangue a ser usada. E
todas cautelas serão tomadas em caso de ocorrência. Será garantido o sigilo e os resultados do
estudo não serão usados para outros fins diferentes do proposto.
Benefícios: A pesquisa não dará benefícios directos nem monetários aos participantes,
entretanto, os resultados da pesquisa irão servir para esclarecimento de algumas questões
relacionadas com sobrecarga de ferro induzidas pelas transfusões sanguíneas.
Privacidade: Toda informação obtida nesta investigação será de carácter confidencial. Os
resultados poderão ser apresentados em jornadas científicas e publicados em revistas científicas
sem a identificação dos participantes.
Voluntariedade: A participação nesse estudo é voluntária e os participantes gozam de liberdade
para interromper a participação em qualquer fase da pesquisa ou no momento em que julguem
necessário sem que a sua relação com o hospital esteja em causa.
Em caso de dúvida ou desistência no estudo serão fornecidos os seguintes contactos:
Contactos: Instituto Superior de Ciências de Saúde (ISCISA), Avenida Tomás Ndunda, 977,
R/C, Telefone: 21-496083.
Celular (Pessoal) +258847493953 ou +258827185697 ou pelo correio electrónico
zainadineagy4@gmail.com
DECLARAÇÃO DE CONSENTIMENTO
O participante O estudante
_____________________________ _______________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy)
COMPROMISSO DO INVESTIGADOR EM MANTER OS PRINCÍPIOS DE BIOÉTICA
O estudante O supervisor
________________________________ ____________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy) (Folário Draiva Tefo)
DECLARAÇÃO DE COMPROMISSO DO ESTUDANTE NO CUMPRIMENTO DOS
PRINCÍPIOS DE BIOÉTICA
O estudante
_____________________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy)
DECLARAÇÃO DE ACEITAÇÃO DAS NORMAS E PROCEDIMENTOS DO
CIBS-ISCISA
O estudante
_____________________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy)
CARTA DE AUTORIZAÇÃO DO SUPERVISOR
PARA A SUBMISSÃO DO PROTOCOLO
O estudante O supervisor
___________________________________ ______________________________
(Zainadine Tamimo Sumela Agy) (Folário Draiva Tefo)