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Artigo - Parabenos (Farmacotecnica)
Artigo - Parabenos (Farmacotecnica)
Artigo - Parabenos (Farmacotecnica)
6, 890-893, 2013
ESTUDO DAS RELAES ENTRE ESTRUTURA E ATIVIDADE DE PARABENOS: UMA AULA PRTICA
Educao
Joo Paulo dos Santos Fernandes*, Giovanna Savino e Andr Cortinas Gonalves Amarante
Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Presbiteriana Mackenzie, R. Consolao, 930, 01302-907 So Paulo
SP, Brasil
Milena Rodrigues de Sousa e Geane Ramos da Silva
Universidade Camilo Castelo Branco, R. Carolina Fonseca, 584, 08230-030 So Paulo SP, Brasil
Maria Eliza Cianciulli
Universidade do Grande ABC, Av. Industrial, 3330, 09080-501 Santo Andr SP, Brasil
Michelle Fidelis Corra e Mrcio Ferrarini
Centro Universitrio So Camilo, Av. Nazar, 1501, 04263-100 So Paulo SP, Brasil
INTRODUO
que o grupo importante para a mesma. Por outro lado, se a atividade CH2CH), 4,24 (t, 2H, J = 6,6 Hz, OCH2), 6,80 (d, J = 8,6 Hz, H-3/5),
permanece inalterada ou modifica muito pouco, porque tal grupo 7,09 (s, 1H, OH), 7,93 (d, J = 8,6 Hz, H-2/6).
no tem grande influncia.8
Na prtica acadmica, transmitir a importncia do estudo das Determinao da concentrao inibitria minima (CIM)
REA a alunos uma tarefa s vezes no muito fcil. Muitas vezes
os alunos compreendem o significado de tais regras, porm, no A CIM contra cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923 e
conseguem facilmente vislumbrar como so determinadas na prtica. Escherichia coli ATCC 25922 foi determinada utilizando-se a tcnica
Desta forma, o objetivo deste trabalho foi propor uma aula prtica de macrodiluio em tubos, preconizada pelo Clinical Laboratories
para a disciplina de Qumica Farmacutica que demonstre todas as Standards Institute.9 Foram preparadas solues em etanol absoluto
etapas do desenvolvimento de uma molcula bioativa, como a sntese, a 100, 75 ou 50 mg/mL dos parabenos a serem testados (dependendo
determinao estrutural e avaliao da atividade antimicrobiana e da solubilidade). A seguir, foram enumerados 12 tubos de ensaio
determinao das REA. contendo 5 mL de caldo Brain Heart Infusion (BHI) estril cada.
Os tubos 11 e 12 so, respectivamente, controle negativo (contendo
PARTE EXPERIMENTAL apenas meio de cultura) e controle positivo (contendo meio e inculo).
As diluies preparadas em cada tubo so apresentadas na Tabela 1.
Todos os materiais de partida utilizados na sntese foram obtidos Os alunos devem ser estimulados a calcular as concentraes finais
comercialmente em pureza adequada para tal. O ponto de fuso dos dos compostos em cada tubo.
produtos obtidos foi medido no aparelho de ponto de fuso capilar O inculo foi preparado adicionando-se uma colnia isolada do
Sppencer Scientific modelo PFM II. Os espectros de RMN-1H foram microrganismo diretamente em meio de cultura e este foi incubado
obtidos em equipamento Bruker modelo DPX-300, operando a 300 a 35 C por tempo necessrio para o crescimento entre 1 e 2 x 108
MHz, com tetrametilsilano como referncia e utilizando CDCl3 como UFC/mL (determinado espectrofotometricamente a 625 nm como
solvente; os deslocamentos qumicos foram determinados em ppm e absorbncia entre 0,08 e 0,13).9 A cada tubo foram ento adicionados
as constantes de acoplamento em Hz. 30 mL do inculo, e os tubos incubados a 35 C por 24 h. A CIM
determinada como a menor concentrao do composto capaz de inibir
Procedimento geral para a sntese de parabenos completamente o crescimento visvel do microrganismo.
Em um balo de fundo redondo equipado com condensador de Determinao do coeficiente de partio octanol/gua
refluxo e aquecimento com agitao magntica, foram adicionados calculado (ClogP)
10 mmol de cido 4-hidrxibenzoico em 15 mL do lcool apropriado
(ou em 15 mL de diclorometano, com quantidades estequiomtricas As estruturas dos parabenos obtidos foram construdas no progra-
do lcool isopentlico na sntese do isopentilparabeno). A seguir, 0,5 ma MarvinBeans,10 e o ClogP determinado pelo plugin logP. O pro-
mL de cido sulfrico concentrado foram adicionados e a soluo foi grama permite calcular o logP atravs dos mtodos de Viswanadhan
deixada em refluxo por 1 h. Ao final, a soluo foi neutralizada com et al., Klopman et al. e da base de dados do PhysProp, e fazer uma
soluo de Na2CO3 (at pH 8-9) e o produto precipitado foi filtrado, mdia ponderada dos valores.10 Neste trabalho, o peso de cada me-
lavado com gua destilada e seco em dessecador. Os esquemas das todologia seguiu as configuraes padro do programa, sendo iguais
reaes so mostrados na Figura 1. para cada metodologia de clculo.
Tubos
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Soluo teste (mL) 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20
a avaliar possveis alternativas para aumentar o rendimento sinttico. Um dado no relatado na literatura, mas que pode ser definido
Deve ser levada em conta nessa discusso a quantidade utilizada dos atravs destes experimentos, que a ramificao da cadeia alqulica
reagentes, bem como o custo de cada um deles e a viabilidade na no altera de maneira significativa a atividade antimicrobiana, uma
etapa de purificao.11 O mecanismo da esterificao de Fischer vez que o propilparabeno e o isopropilparabeno apresentaram a mes-
apresentado na Figura 2. Na reao de obteno do isopentilparabeno, ma CIM, porm, ambos os compostos apresentam lipofilicidade seme-
pode-se discutir a importncia da estequiometria na etapa de purifi- lhante. Diante disso, os alunos so encorajados a calcular o ClogP dos
cao, j que o lcool isopentlico apresenta alto ponto de ebulio compostos e relacion-lo com a atividade antimicrobiana. Isso pode
(~ 131 C) e solubilidade semelhante ao produto obtido. ser feito atravs da construo de um simples grfico de correlao
e sua posterior visualizao (Figura 3). Para manter a linearidade, os
valores de CIM devem ser transformados para unidade mol/L e, a se-
guir, em pCIM (-logCIM). O ClogP pode ser facilmente obtido atravs
de vrios programas disponveis na internet, como o MarvinBeans,10
utilizado neste trabalho, ou outros como Molinspiration,13 ALOGPS14
e Osiris.15 Os dados do ClogP dos compostos so apresentados na
Tabela 2. Assim, pode ser levantada uma discusso da importncia
do logP para a atividade biolgica desses compostos.
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