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WO2024190817A1 - 化合物またはその塩、脂質組成物、医薬組成物および送達キャリア - Google Patents

化合物またはその塩、脂質組成物、医薬組成物および送達キャリア Download PDF

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Publication number
WO2024190817A1
WO2024190817A1 PCT/JP2024/009719 JP2024009719W WO2024190817A1 WO 2024190817 A1 WO2024190817 A1 WO 2024190817A1 JP 2024009719 W JP2024009719 W JP 2024009719W WO 2024190817 A1 WO2024190817 A1 WO 2024190817A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
ethyl
hexyl
oxo
oate
oxy
Prior art date
Application number
PCT/JP2024/009719
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
達也 二田原
雅彦 山本
真太郎 田名部
Original Assignee
富士フイルム株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 富士フイルム株式会社 filed Critical 富士フイルム株式会社
Publication of WO2024190817A1 publication Critical patent/WO2024190817A1/ja

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    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
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    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C219/00—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C219/02—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C219/04—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C219/06—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the hydroxy groups esterified by carboxylic acids having the esterifying carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton

Definitions

  • the present invention relates to a compound or a salt thereof that facilitates the introduction of a nucleic acid into a cell, etc.
  • the present invention further relates to a lipid composition, a pharmaceutical composition, and a delivery carrier that contain the compound or a salt thereof.
  • Nucleic acid drugs have a clear mechanism of action against diseases, have few side effects, and are expected to be the next generation of medicines.
  • nucleic acid drugs that use siRNA small interfering RNA
  • siRNA small interfering RNA
  • diseases and symptoms caused by the abnormal expression of a specific gene or group of genes can be alleviated or treated.
  • viral vectors such as retroviruses or adenoviruses.
  • Methods using viral vectors have high gene transfer efficiency, but they are limited in the size of the gene to be transferred and have concerns about immunogenicity and safety.
  • gene transfer using lipid compositions has no restrictions on the gene to be transferred and can solve the above problems, so it is being actively developed.
  • Patent Document 1 describes an amino lipid or a salt thereof represented by a specific formula (1), and also describes a lipid composition containing the amino lipid or a salt thereof. Patent Document 1 also describes the use of the lipid composition to deliver nucleic acid to mouse cells.
  • Patent Document 2 describes a lipid composition that contains an amino lipid represented by a specific formula (1) or a salt thereof, a nonionic lipid, a lipid having a nonionic hydrophilic polymer structure, and a nucleic acid, and that may or may not contain a zwitterionic lipid. Patent Document 2 describes the use of the lipid composition to deliver a nucleic acid to a mouse cell.
  • Patent Document 3 describes a lipid composition that includes a first lipid, which is a lipid represented by a specific formula (1) or a salt thereof, sterols, and a nucleic acid, in which the ratio of the number of moles of the first lipid in the lipid composition to the number of moles of the sterols in the lipid composition is 0.300 or more and less than 1.299.
  • Patent Document 3 describes the use of the lipid composition to deliver a nucleic acid to a mouse cell.
  • the problem to be solved by the present invention is to provide a compound or a salt thereof constituting a lipid composition that can achieve a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery when using mRNA. Furthermore, the problem to be solved by the present invention is to provide a lipid composition, a pharmaceutical composition, and a delivery carrier that use the above compound or a salt thereof and can achieve a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery when using mRNA.
  • the inventors conducted extensive research to solve the above problems and confirmed that a lipid composition prepared using a compound represented by the following formula (1) or a salt thereof can achieve a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery when mRNA is used, leading to the completion of the present invention.
  • the present invention provides the following:
  • R 1 represents a hydrocarbon group having 1 to 24 carbon atoms
  • R2 represents a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms
  • R3 represents a hydrocarbon group having 6 to 24 carbon atoms and having a branched chain
  • R 4 and R 5 each independently represent a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms which may be substituted, and the substituent on the hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms which may be substituted represented by R 4 and R 5 each independently represents -O-R 6
  • R 6 represents a hydrogen atom or a hydrocarbon group having 1 to 18 carbon atoms
  • L is absent, *-O-C(O)-, or *-C(O)O-, * indicating the position of binding to R 1
  • a represents an integer from 1 to 12
  • b represents an integer of 1 to 4
  • c represents an integer of 1 to 4
  • d represents an integer of 1 to 4.
  • R 1 represents a hydrocarbon group having 6 to 14 carbon atoms
  • R2 represents a hydrocarbon group having 6 carbon atoms
  • R 3 represents a hydrocarbon group having 11 to 17 carbon atoms and having a branched chain
  • R 4 and R 5 each independently represent a hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms which may be substituted, the substituents on the hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms which may be substituted represented by R 4 and R 5 each independently represent -O-R 6
  • R 6 represents a hydrogen atom or a benzyl group
  • L represents *-O-C(O)-, * represents the bonding position with R1 ;
  • a represents an integer of 3 to 8;
  • b represents 2;
  • c represents 2;
  • d represents 2;
  • ⁇ 6> The lipid composition according to ⁇ 5>, wherein the lipid is at least one type of lipid selected from the group consisting of neutral lipids and lipids having a nonionic hydrophilic polymer chain.
  • ⁇ 7> The lipid composition according to ⁇ 5> or ⁇ 6>, further comprising a sterol.
  • ⁇ 8> The lipid composition according to any one of ⁇ 5> to ⁇ 7>, further comprising at least one selected from the group consisting of nucleic acids, proteins, peptides and small molecules.
  • a pharmaceutical composition comprising the lipid composition according to any one of ⁇ 5> to ⁇ 8>.
  • a delivery carrier comprising the lipid composition according to any one of ⁇ 5> to ⁇ 8>.
  • lipid composition, pharmaceutical composition, and delivery carrier that can achieve a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery when using mRNA.
  • the lipid composition, pharmaceutical composition, and delivery carrier of the present invention can achieve a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery when using mRNA.
  • FIG. 1 shows the amount of EPO (erythropoietin) expressed (dose responsiveness) of nucleic acid-encapsulated lipid nanoparticles.
  • the present invention relates to a compound represented by the following formula (1) or a salt thereof.
  • a compound represented by formula (1) or a salt thereof as a component of a lipid composition, a high nucleic acid encapsulation rate and excellent nucleic acid delivery can be achieved when using mRNA.
  • protein production according to a high dosage can be achieved. Dose responsiveness can also be achieved.
  • R 1 represents a hydrocarbon group having 1 to 24 carbon atoms
  • R2 represents a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms
  • R3 represents a hydrocarbon group having 6 to 24 carbon atoms and having a branched chain
  • R 4 and R 5 each independently represent a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms which may be substituted, and the substituent on the hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms which may be substituted represented by R 4 and R 5 each independently represents -O-R 6
  • R 6 represents a hydrogen atom or a hydrocarbon group having 1 to 18 carbon atoms
  • L is absent, *-O-C(O)-, or *-C(O)O-, where * indicates the position of binding to R 1 ;
  • a represents an integer from 1 to 12;
  • b represents an integer of 1 to 4;
  • c represents an integer of 1 to 4;
  • d represents an integer of 1 to 4.
  • R 1 is preferably a hydrocarbon group having 3 to 18 carbon atoms, more preferably a hydrocarbon group having 6 to 14 carbon atoms, and even more preferably a hydrocarbon group having 6 to 8 carbon atoms;
  • R2 preferably represents a hydrocarbon group having 3 to 6 carbon atoms, more preferably a hydrocarbon group having 4 to 6 carbon atoms, and particularly preferably a hydrocarbon group having 6 carbon atoms.
  • R3 is preferably a hydrocarbon group having 8 to 20 carbon atoms and having a branched chain, and more preferably a hydrocarbon group having 11 to 17 carbon atoms and having a branched chain.
  • the "hydrocarbon group having 6 to 24 carbon atoms and having a branched chain” represented by R3 is preferably R 31 (R 32 )CH- or R 33 (R 34 ) CH—CH 2 — It is a group represented by the following formula:
  • R 31 and R 32 each independently represent a hydrocarbon group, and the total number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 31 and R 32 is 5 to 23.
  • R 31 and R 32 each independently represent a linear hydrocarbon group, more preferably a linear alkyl group.
  • the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 31 and R 32 may be the same or different.
  • the difference in the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 31 and R 32 is preferably 5 or less, more preferably 3 or less, and even more preferably 1 or less.
  • the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 31 and R 32 is preferably the same.
  • R 31 and R 32 are each independently preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 4 to 10 carbon atoms, more preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 4 to 8 carbon atoms, and even more preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 6 to 8 carbon atoms.
  • R 33 and R 34 each independently represent a hydrocarbon group, and the total number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 33 and R 34 is 4 to 22.
  • R 33 and R 34 each independently represent a linear hydrocarbon group, more preferably a linear alkyl group.
  • the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 33 and R 34 may be the same or different.
  • the difference in the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 33 and R 34 is preferably 5 or less, more preferably 3 or less, and even more preferably 1 or less.
  • the number of carbon atoms in the hydrocarbon groups represented by R 33 and R 34 is preferably the same.
  • R 33 and R 34 are each independently preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 4 to 10 carbon atoms, more preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 4 to 8 carbon atoms, even more preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 6 to 8 carbon atoms, and particularly preferably a straight-chain hydrocarbon group (preferably an alkyl group) having 7 carbon atoms.
  • R 4 and R 5 each independently represent a hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms which may be substituted.
  • Substituents on the optionally substituted hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms represented by R4 and R5 each independently represent -O- R6 , where R6 preferably represents a hydrogen atom or a hydrocarbon group having 1 to 12 carbon atoms, more preferably a hydrogen atom or a hydrocarbon group having 7 to 12 carbon atoms, and particularly preferably a hydrogen atom or a benzyl group.
  • L preferably represents *--O--C(O)--, where * represents the bonding position with R1 .
  • a is preferably an integer of 2 to 10, and more preferably an integer of 3 to 8.
  • b preferably represents 2 or 3, and more preferably represents 2.
  • c preferably represents 2 or 3, and more preferably represents 2.
  • d is preferably 2 or 3, and more preferably 2.
  • R 1 represents a hydrocarbon group having 6 to 14 carbon atoms
  • R2 represents a hydrocarbon group having 6 carbon atoms
  • R 3 represents a hydrocarbon group having 11 to 17 carbon atoms and having a branched chain
  • R 4 and R 5 each independently represent a hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms which may be substituted, the substituents on the hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms which may be substituted represented by R 4 and R 5 each independently represent -O-R 6
  • R 6 represents a hydrogen atom or a benzyl group
  • L represents *-O-C(O)-
  • * represents the bonding position with R1 ;
  • a represents an integer of 3 to 8;
  • b represents 2;
  • c represents 2; d indicates 2.
  • the hydrocarbon group is preferably an alkyl group, an alkenyl group, or an alkynyl group.
  • the alkyl group may be linear or branched, and may be linear or cyclic. Specific examples of the alkyl group include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, cyclopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, cyclobutyl, pentyl, cyclopentyl, hexyl, cyclohexyl, heptyl, octyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl, tridecyl, trimethyldodecyl (preferably 3,7,11-trimethyldodecyl), tetradecyl, pentadecyl, hexadecyl, tetramethylhexadecyl (preferably 3,7,11,15-tetramethylhexadecyl), heptadecyl, octadecyl, 2-butylhex
  • hexadecenyl group (preferably, (Z)-hexadecanyl group), hexadecadienyl group, heptadecenyl group (preferably, (Z)-heptadecanyl group), heptadecadienyl group (preferably, (8Z,11Z)-heptadecanyl group, octadecenyl group (preferably, (Z)-octadecane-9-enyl group), octadecadienyl group (preferably, (9Z,12Z)-octadecanyl group, 12-octadecanyl group), etc.
  • the alkynyl group may be straight-chained or branched, and may be linear or cyclic. Specific examples include propargyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, heptynyl, octynyl, nonynyl, decynyl, undecynyl, dodecynyl, tetradecynyl, pentadecynyl, hexadecynyl, heptadecynyl, and octadecynyl groups.
  • each of the above alkenyl groups has one or two double bonds, and it is preferable that each of the alkynyl groups has one or two triple bonds.
  • the compound of the present invention may form a salt.
  • salts of basic groups include salts with mineral acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, nitric acid and sulfuric acid; salts with organic carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, citric acid, oxalic acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid, malic acid, tartaric acid, aspartic acid, trichloroacetic acid and trifluoroacetic acid; and salts with sulfonic acids such as methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, mesitylenesulfonic acid and naphthalenesulfonic acid.
  • mineral acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, nitric acid and sulfuric acid
  • organic carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, citric acid, oxalic acid, fumaric acid, maleic acid,
  • Salts of acidic groups include, for example, salts with alkali metals such as sodium and potassium; salts with alkaline earth metals such as calcium and magnesium; ammonium salts; and salts with nitrogen-containing organic bases such as trimethylamine, triethylamine, tributylamine, pyridine, N,N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylmorpholine, diethylamine, dicyclohexylamine, procaine, dibenzylamine, N-benzyl- ⁇ -phenethylamine, 1-ephenamine, and N,N'-dibenzylethylenediamine.
  • preferred salts include pharmacologically acceptable salts.
  • Compounds 1 to 16 Compound 1, Compound 2, Compound 3, Compound 4, Compound 5, Compound 6, Compound 7, Compound 8, Compound 9, and Compound 10 are preferred. Compounds 3, 4, 5, 6, 7, 8, and 9 are more preferred, and Compounds 3, 4, 6, 7, and 8 are particularly preferred.
  • Compounds 17 to 37 Compounds 17 to 25 are preferable. Compound 19 and Compounds 22 to 25 are more preferable.
  • Examples of leaving groups include a chloro group, a fluoro group, a bromo group, a trichloromethoxy group, a 4-nitro-phenoxy group, a 2,4-dinitrophenoxy group, a 2,4,6-trichlorophenoxy group, a pentafluorophenoxy group, a 2,3,5,6-tetrafluorophenoxy group, an imidazolyl group, a triazolyl group, a 3,5-dioxo-4-methyl-1,2,4-oxadiazolidyl group, an N-hydroxysuccinimidyl group, a methanesulfonyl group, and a 4-toluenesulfonyl group.
  • the compound of formula [4] can be prepared by reacting a compound of formula [2] with a compound of formula [3] in the presence or absence of a base.
  • Known examples of the compound of the formula [3] include 1,1'-carbonyldi(1,2,4-triazole), 1,1'-carbonyldiimidazole, 4-nitrophenyl chloroformate, triphosgene, and phosgene.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction. Examples of the solvent include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include ethers, with tetrahydrofuran being more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [2].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, preferably an organic base, such as triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [2].
  • the amount of the compound of the formula [3] used is not particularly limited, but may be 1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [2]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [6] can be prepared by reacting a compound of formula [4] with a compound of formula [5A] in the presence of a base.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction.
  • the solvent include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include ethers, with tetrahydrofuran being more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [4].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, such as potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and these bases may be used in combination.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [4].
  • the amount of the compound of the formula [5A] used is not particularly limited, but may be 0.5 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [4]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [1] can be produced by reacting a compound of formula [6] with a compound of formula [7] in the presence or absence of an acid, in the presence or absence of a condensing agent or an acid halide, and in the presence or absence of a base.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction.
  • the solvent include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include halogenated hydrocarbons, ethers and aromatic hydrocarbons, with dichloromethane, tetrahydrofuran and toluene being more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [6].
  • the acid used in this reaction may be an inorganic acid or an organic acid.
  • the acid is preferably a sulfonic acid, specifically, sulfuric acid, 4-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, etc.
  • Condensing agents used in this reaction include, for example, carbodiimides such as N,N'-dicyclohexylcarbodiimide and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide; carbonyls such as carbonyldiimidazole; acid azides such as diphenylphosphoryl azide; acid cyanides such as diethylphosphoryl cyanide; 2-ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydroquinoline; uroniums such as O-benzotriazol-1-yl-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate and O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate.
  • carbodiimides such as N,N'-dicyclohexylcarbodiimide and 1-ethyl-3-(3-dimethyla
  • the acid halide used in this reaction includes, for example, carboxylic acid halides such as acetyl chloride and trifluoroacetyl chloride; sulfonic acid halides such as methanesulfonyl chloride and tosyl chloride; chloroformates such as ethyl chloroformate and isobutyl chloroformate; and the like.
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, preferably an organic base, such as triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and these bases may be used in combination.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [6].
  • the amount of the compound of the formula [7] used is not particularly limited, but may be 0.8 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [6]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [1] can be produced by the same method as in Production Method 1 (1-2) using the compound of formula [4] and the compound of formula [5B] as raw materials.
  • the compound of formula [10] can be produced by reacting a compound of formula [8] with a compound of formula [9] in the presence or absence of an acid, in the presence or absence of a condensing agent or an acid halide, and in the presence or absence of a base.
  • a compound of formula [8] for example, 1-heptanol is known and is available as a commercial product.
  • compound of the formula [9] for example, 10-oxohexadecanoic acid and 5-oxoundecanoic acid are known, and they can be obtained by known methods or as commercially available products.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include aromatic hydrocarbons and ethers, and toluene and tetrahydrofuran are more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [8].
  • the acid used in this reaction may be an inorganic acid or an organic acid.
  • the acid is preferably a sulfonic acid, specifically, sulfuric acid, 4-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, etc.
  • Condensing agents used in this reaction include, for example, carbodiimides such as N,N'-dicyclohexylcarbodiimide and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide; carbonyls such as carbonyldiimidazole; acid azides such as diphenylphosphoryl azide; acid cyanides such as diethylphosphoryl cyanide; 2-ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydroquinoline; uroniums such as O-benzotriazol-1-yl-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate and O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluor
  • the acid halide used in this reaction includes, for example, carboxylic acid halides such as acetyl chloride and trifluoroacetyl chloride; sulfonic acid halides such as methanesulfonyl chloride and tosyl chloride; chloroformates such as ethyl chloroformate and isobutyl chloroformate; and the like.
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, preferably an organic base, such as triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and these bases may be used in combination.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [8].
  • the amount of the compound of formula [9] used is not particularly limited, but may be 0.8 to 10 times (v/w) the amount of the compound of formula [8]. This reaction may be carried out at -30 to 200°C, preferably 0 to 150°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [2] can be prepared by reacting the compound of formula [10] with a reducing agent.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction.
  • the solvent include halogenated hydrocarbons, alcohols, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include alcohols, ethers and aromatic hydrocarbons, and mixed solvents of alcohols and aromatic hydrocarbons are more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [10].
  • the reducing agent used in this reaction includes sodium borohydride, lithium borohydride, calcium borohydride, sodium cyanoborohydride, sodium triacetoxyborohydride, lithium aluminum hydride, and the like, with sodium borohydride being more preferred.
  • the amount of the reducing agent used may be 0.1 to 100 times, preferably 0.5 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [10]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [13] can be produced by reacting a compound of formula [11] with a compound of formula [12] in the presence or absence of a base and in the presence or absence of an additive.
  • Known examples of the compound of formula [11] include 2-aminoethanol, and known examples of the compound of formula [12] include benzyl 2-bromoethyl ether.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include halogenated hydrocarbons, alcohols, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include alcohols, and ethanol is more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [11].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, specifically, potassium hydroxide, sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, preferably an inorganic base, more preferably potassium carbonate.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [11].
  • the amount of the compound of the formula [12] used is not particularly limited, but may be 1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [11].
  • Specific examples of additives used in this reaction include lithium iodide, sodium iodide, potassium iodide, and benzyltriethylammonium iodide.
  • the amount of the additive used may be 0 to 10 times by mole relative to the compound of the formula [12]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [15] can be produced by the same method as in Production Method 3 (3-1) using the compound of formula [13] and the compound of formula [14] as starting materials.
  • the compound of formula [16] can be prepared by reacting the hydroxyl group of the compound of formula [15] with a reagent that converts the hydroxyl group into a leaving group, in the presence or absence of a base.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include ethers, and tetrahydrofuran is more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [15].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, such as potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine.
  • an inorganic base or an organic base such as potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine.
  • Reagents for converting a hydroxyl group into a leaving group used in this reaction include sulfonic acid halides such as methanesulfonyl chloride and tosyl chloride; and a combination of triphenylphosphine and carbon tetrahalide, with a combination of triphenylphosphine and carbon tetrabromide being more preferred.
  • the amount of the reagent used is not particularly limited, but may be 1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [15]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [5A] can be prepared by reacting a compound of formula [16] with a compound of formula [17] in the presence of a base and in the presence or absence of an additive.
  • a compound of the formula [17] for example, diethanolamine is known.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include halogenated hydrocarbons, alcohols, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include alcohols, and ethanol is more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [16].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, specifically, potassium hydroxide, sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and potassium carbonate is more preferred.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [16].
  • the amount of the compound of the formula [17] used is not particularly limited, but may be 1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [16].
  • Specific examples of additives used in this reaction include lithium iodide, sodium iodide, potassium iodide, and benzyltriethylammonium iodide.
  • the amount of the additive used may be 0.1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [16]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [5B] can be produced by the same method as in Production Method 1 (1-3) using the compound of formula [5A] and the compound of formula [7] as starting materials.
  • R 3 and X have the same meanings as above;
  • R 31 and R 32 represent a combination of hydrocarbon groups having a total of 5 to 23 carbon atoms.
  • the compound of formula [7A] can be prepared by reacting a compound of formula [16] with a compound of formula [17] in the presence of a base and in the presence or absence of an additive.
  • An example of a compound of the formula [16] is octanoic acid.
  • An example of the compound of the formula [17] is 1-iodohexane.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction.
  • the solvent examples include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination. Preferred solvents include ethers, with tetrahydrofuran being more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [16].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, such as sodium hydride, calcium hydride, lithium diisopropylamide, n-butyllithium, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and these bases may be used in combination.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [16].
  • the amount of the compound of the formula [17] used is not particularly limited, but may be 1 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [16].
  • Specific examples of additives used in this reaction include lithium iodide, sodium iodide, potassium iodide, and benzyltriethylammonium iodide.
  • the amount of the additive used may be 0 to 10 times by mole relative to the compound of the formula [17]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [20] can be prepared by reacting a compound of formula [18] with a compound of formula [19] in the presence of a base.
  • a compound of the formula [18] for example, di-tert-butyl malonate is known.
  • An example of the compound of the formula [19] is 1-bromooctane.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • Preferred solvents include mixed solvents of sulfoxides and aromatic hydrocarbons, and a mixed solvent of dimethyl sulfoxide and toluene is more preferred.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 1 to 500 times (v/w) the amount of the compound of the formula [18].
  • the base used in this reaction includes inorganic bases and organic bases, such as potassium hydroxide, sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, and 4-dimethylaminopyridine, and more preferably potassium hydroxide, sodium hydroxide, or lithium hydroxide.
  • the amount of the base used may be 1 to 50 times, preferably 1 to 10 times, the molar amount of the compound of the formula [18].
  • the amount of the compound of the formula [19] used is not particularly limited, but may be 2 to 10 times the molar amount of the compound of the formula [18]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [21] can be prepared by reacting a compound of formula [20] in the presence or absence of an acid, or in the presence or absence of a base.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction, and examples thereof include water, halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons, and these solvents may be used in combination.
  • a preferred solvent is a mixed solvent of water and aromatic hydrocarbons.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 0.1 to 10 times (v/w) the amount of the compound of the formula [20].
  • the acid used in this reaction may be an inorganic or organic acid, such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, sulfuric acid, formic acid, or trifluoroacetic acid, with trifluoroacetic acid being preferred.
  • the amount of the acid used is not particularly limited, but may be 1 to 50 times (v/w) the amount of the compound of the formula [20].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, such as potassium hydroxide, sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine.
  • the amount of the base used may be 2 to 50 times the molar amount of the compound of the formula [20]. This reaction may be carried out at -30 to 150°C, preferably 0 to 100°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • the compound of formula [7B] can be produced by reacting a compound of formula [21] in the presence or absence of an acid, in the presence or absence of a base, and in the presence or absence of a solvent.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as it does not affect the reaction. Examples of the solvent include halogenated hydrocarbons, ethers, esters, amides, nitriles, sulfoxides, and aromatic hydrocarbons. These solvents may be used in combination.
  • the amount of the solvent used is not particularly limited, but may be 0 to 10 times (v/w) the amount of the compound of the formula [21].
  • the acid used in this reaction may be an inorganic or organic acid, such as hydrochloric acid, phosphoric acid, sulfuric acid, formic acid, or trifluoroacetic acid.
  • the amount of the acid used is not particularly limited, but may be 1 to 50 times (v/w) the amount of the compound of the formula [21].
  • the base used in this reaction may be an inorganic base or an organic base, specifically, potassium hydroxide, sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, lithium carbonate, potassium phosphate, sodium phosphate, lithium phosphate, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine, pyridine, 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene, or 4-dimethylaminopyridine, and more preferably pyridine.
  • the amount of the base used may be 2 to 50 times the molar amount of the compound of the formula [21]. This reaction may be carried out at -30 to 250°C, preferably 0 to 200°C, for 5 minutes to 48 hours.
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 51 , L, a, b, c and d have the same meanings as above;
  • Ar represents an aromatic hydrocarbon group.
  • the compound of the general formula [1B] can be prepared by deprotecting the compound of the general formula [1A]. This reaction may be carried out, for example, according to the method described in T. W. Greene et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Edition, pp. 16-366, 2007, John Wiley & Sons, INC.
  • compounds having an amino group, a hydroxyl group, a carboxyl group, or the like can have these groups protected in advance with a conventional protecting group, and after the reaction, these protecting groups can be removed by a method known per se.
  • the compounds obtained by the above-mentioned production methods can be derived into other compounds by subjecting them to reactions known per se, such as condensation, addition, oxidation, reduction, rearrangement, substitution, halogenation, dehydration, or hydrolysis, or by appropriately combining these reactions.
  • a lipid composition containing the compound of the present invention or a salt thereof can be prepared.
  • at least one lipid selected from the group consisting of sterols and lipids having nonionic hydrophilic polymer chains can be used.
  • the lipid composition can further include a neutral lipid.
  • the lipid composition can further include a nucleic acid.
  • the amount of the compound represented by formula (1) or its salt is preferably 20 mol% to 80 mol% of the total lipid amount, more preferably 30 mol% to 70 mol%, and even more preferably 35 mol% to 65 mol%.
  • the lipid composition of the present invention preferably contains a sterol.
  • a sterol By containing a sterol in the lipid composition of the present invention, it is possible to reduce membrane fluidity and obtain a stabilizing effect of the lipid composition.
  • sterols include, but are not limited to, cholesterol, phytosterol (sitosterol), stigmasterol, fucosterol, spinasterol, brassicasterol, etc.), ergosterol, cholestanone, cholestenone, coprostanol, cholesteryl-2'-hydroxyethyl ether, cholesteryl-4'-hydroxybutyl ether, etc.
  • cholesterol is preferred.
  • the blending amount of sterol is preferably 10 mol% to 70 mol% relative to the total lipid amount, more preferably 20 mol% to 65 mol%, and even more preferably 25 mol% to 60 mol%.
  • the lipid composition of the present invention may contain neutral lipid.
  • the neutral lipid is not particularly limited, but may be phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, sphingomyelin, ceramide, etc., and phosphatidylcholine is preferred.
  • the neutral lipid may be used alone or in combination with a plurality of different neutral lipids.
  • Phosphatidylcholines include, but are not limited to, soybean lecithin (SPC), hydrogenated soybean lecithin (HSPC), egg yolk lecithin (EPC), hydrogenated egg yolk lecithin (HEPC), dimyristoyl phosphatidylcholine (DMPC), dipalmitoyl phosphatidylcholine (DPPC), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC), 1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylcholine (POPC), dioleoyl phosphatidylcholine (DOPC), etc.
  • SPC soybean lecithin
  • HSPC hydrogenated soybean lecithin
  • EPC egg yolk lecithin
  • HEPC hydrogenated egg yolk lecithin
  • DMPC dimyristoyl phosphatidylcholine
  • DPPC dipalmitoyl phosphatidylcholine
  • POPC 1-palmito
  • Phosphatidylethanolamines include, but are not limited to, dimyristoylphosphatidylethanolamine (DMPE), dipalmitoylphosphatidylethanolamine (DPPE), distearoylphosphatidylethanolamine (DSPE), dioleoylphosphatidylethanolamine (DOPE), dilinoleoylphosphatidylethanolamine (DLoPE), diphytanoylphosphatidylethanolamine (D(Phy)PE), 1-palmitoyl-2-oleoylphosphatidylethanolamine (POPE), ditetradecylphosphatidylethanolamine, dihexadecylphosphatidylethanolamine, dioctadecylphosphatidylethanolamine, diphytanylphosphatidylethanolamine, etc.
  • DMPE dimyristoylphosphatidylethanolamine
  • DPPE dipalmitoylphosphatidylethanolamine
  • DSPE di
  • Examples of sphingomyelin include, but are not limited to, egg yolk-derived sphingomyelin and milk-derived sphingomyelin.
  • Examples of ceramides include, but are not limited to, egg yolk-derived ceramide and milk-derived ceramide.
  • the amount of neutral lipid is preferably 0 mol% or more and 55 mol% or less, and more preferably 0 mol% or more and 40 mol% or less, based on the total amount of the constituent lipid components.
  • the lipid composition of the present invention may contain a lipid having a nonionic hydrophilic polymer chain in the oil phase.
  • a dispersion stabilization effect of the lipid composition can be obtained.
  • nonionic hydrophilic polymers include, but are not limited to, nonionic vinyl polymers, nonionic polyamino acids, nonionic polyesters, nonionic polyethers, nonionic natural polymers, nonionic modified natural polymers, and block polymers or graft copolymers having two or more of these polymers as constituent units.
  • nonionic hydrophilic polymers preferred are nonionic polyethers, nonionic polyesters, nonionic polyamino acids or nonionic synthetic polypeptides, more preferred are nonionic polyethers or nonionic polyesters, even more preferred are nonionic polyethers or nonionic monoalkoxy polyethers, and particularly preferred is polyethylene glycol (polyethylene glycol will also be referred to as PEG hereinafter).
  • the lipid having a nonionic hydrophilic polymer chain is not particularly limited, but includes PEG-modified phosphoethanolamine, diacylglycerol PEG derivative, monoacylglycerol PEG derivative, dialkylglycerol PEG derivative, cholesterol PEG derivative, ceramide PEG derivative, etc. Among these, monoacylglycerol PEG or diacylglycerol PEG is preferred.
  • the weight average molecular weight of the PEG chain of the nonionic hydrophilic polymer derivative is preferably 500 to 5,000, and more preferably 750 to 3,000.
  • the non-ionic hydrophilic polymer chain may be branched and may have a substituent such as a hydroxymethyl group.
  • the amount of lipid having a nonionic hydrophilic polymer chain is preferably 0.1 mol% to 12 mol% of the total lipid amount, more preferably 0.3 mol% to 6 mol%, and even more preferably 0.5 mol% to 5 mol%.
  • the lipid composition of the present invention may contain at least one selected from the group consisting of nucleic acids, proteins, peptides and small molecules.
  • nucleic acid include plasmid DNA, nanoplasmid DNA, single-stranded DNA, double-stranded DNA, siRNA (small interfering RNA), miRNA (micro RNA), mRNA, antisense oligonucleotide (also called ASO), ribozyme, aptamer, dsRNA, saRNA, sgRNA, shRNA, tRNA, cyclic RNA, and the like, and any of these may be included.
  • modified nucleic acids may be included.
  • RNA is particularly preferred, and RNA having 5 to 20,000 bases is preferred.
  • the mass ratio of lipid to nucleic acid is preferably 2-1000, more preferably 3-500, even more preferably 5-200, and particularly preferably 5-100.
  • proteins, peptides and small molecules include intracellular proteins, intracellular peptides, transmembrane proteins, transmembrane peptides, secreted proteins, secreted peptides, synthetic proteins, synthetic peptides, natural small molecular weight compounds, synthetic small molecular weight compounds and compounds having antitumor activity. More specifically, the proteins include gene editing-related proteins such as CRISPR-Cas proteins, Zinc-Fingers, and TALENs, hormones such as erythropoietin, biological factors such as VEGF, and cancer antigen proteins or antibodies.
  • the peptides include functional domains and recognition domains of the above proteins.
  • the peptides may include mRNA or DNA encoding the above proteins.
  • the peptide is natural.
  • the peptide structure may be linear or cyclic.
  • the linkage of the ring may be an amide bond, a disulfide bond, or the like.
  • low molecular weight compounds include anticancer agents, antibacterial agents, and antifungal agents. These proteins, peptides and small molecules may or may not have physiological activity in vivo.
  • small molecule refers to an organic compound with a molecular weight of about 1,000 or less.
  • the method for producing the lipid composition is not limited, but the lipid composition can be produced by dissolving all or a part of the oil-soluble components of the lipid composition in an organic solvent or the like to form an oil phase, dissolving the water-soluble components in water to form an aqueous phase, and mixing the oil phase and the aqueous phase.
  • a micromixer may be used for mixing, or the lipid composition may be emulsified using an emulsifier such as a homogenizer, an ultrasonic emulsifier, a high-pressure jet emulsifier, or the like.
  • the lipid-containing solution can be dried under reduced pressure using an evaporator or spray-dried using a spray dryer to prepare a dried mixture containing lipids, and this mixture can be added to an aqueous solvent and further emulsified using the emulsifier described above to produce the lipid-containing solution.
  • An example of a method for producing a lipid composition containing nucleic acid is Step (a): dissolving the components of the lipid composition including the compound of the present invention in an organic solvent to obtain an oil phase, and dissolving the nucleic acid in an aqueous solvent to obtain an aqueous phase; Step (b): mixing the oil phase and aqueous phase obtained in step (a) to obtain a lipid particle dispersion; Step (c): diluting the lipid particle dispersion obtained in step (b); Step (d): removing the organic solvent from the lipid particle dispersion; and Step (e): adjusting the concentration of the lipid particle dispersion.
  • step (a) the components of the lipid composition including the compound of the present invention are dissolved in an organic solvent (an alcohol such as ethanol, or an ester, etc.).
  • the total lipid concentration is not particularly limited, but is generally 1 mmol/L to 100 mmol/L, preferably 5 mmol/L to 50 mmol/L, and more preferably 10 mmol/L to 30 mmol/L.
  • the aqueous phase can be obtained by dissolving nucleic acid (e.g., siRNA, mRNA, antisense nucleic acid, etc.) in water or a buffer solution.
  • the concentration of the nucleic acid is not particularly limited, but is preferably 1 to 1000 ⁇ g/mL, more preferably 10 to 500 ⁇ g/mL.
  • components such as a buffer component for pH adjustment and an antioxidant can be added.
  • the pH of the aqueous phase is preferably 2.0 to 7.0, more preferably 3.0 to 6.0.
  • Acetic acid, citric acid, malic acid, phosphoric acid, MES, HEPES, etc. are preferably used as a buffer component for adjusting the above pH, and salts such as sodium chloride and potassium chloride may be added as necessary to adjust the salt strength, and sugars or sugar alcohols such as sucrose, trehalose, and mannitol may be added as necessary to adjust the osmotic pressure.
  • the oil phase and the aqueous phase may be mixed by any method, including a batch method and an in-line method using a flow channel device.
  • a micro flow channel device is preferably used, and examples of the micro flow channel device that can be used include a Y-shaped mixer, a T-shaped mixer, a herringbone mixer, a ring micro mixer, and an impingement jet mixer.
  • the mixing ratio (volume ratio) of the aqueous phase and the oil phase is preferably 5:1 to 1:1, and more preferably 4:1 to 2:1.
  • the lipid particle dispersion is mixed with a diluent solution to reduce the content of organic solvent and stabilize the lipid particles.
  • the diluent solution may be water, but may also include adjusting the pH or salt strength.
  • the components contained in the diluent solution may be selected arbitrarily depending on the purpose.
  • a buffer solution e.g., citrate buffer, citrate buffered saline, acetate buffer, acetate buffered saline, phosphate buffered saline, Tris buffer, MES buffer, HEPES buffer, etc.
  • a buffer solution e.g., citrate buffer, citrate buffered saline, acetate buffer, acetate buffered saline, phosphate buffered saline, Tris buffer, MES buffer, HEPES buffer, etc.
  • sodium chloride, potassium chloride, sucrose, trehalose, fructose, mannitol, etc. may be included for the purpose of adjusting the salt strength or osmotic pressure, and the above buffer solutions to which these additives have been further added may also be used.
  • the lipid particle dispersion and the dilution solution may be mixed by any method, including a batch method and an in-line method using a flow path device.
  • the flow path device used during mixing may be a Y-shaped mixer, a T-shaped mixer, or the like.
  • the time from mixing the oil phase and the aqueous phase to mixing the dilution solution is not particularly limited, but it is preferable to perform the dilution within 30 seconds, and more preferably within 10 seconds, after mixing the oil phase and the aqueous phase.
  • the mixing ratio (liquid volume ratio) of the lipid particle dispersion and the dilution solution is preferably 1:0.5 to 1:10, and more preferably 1:1 to 1:5.
  • the lipid particle dispersion in step (c), may be mixed with the dilution solution multiple times depending on the purpose.
  • the dilution solutions used may be the same or different.
  • the particle size of the lipid particles may change depending on the pH, so adjusting the pH of the dispersion is important. Therefore, for example, in order to adjust the pH of the lipid particle dispersion after mixing with the dilution solution, a buffer solution having an appropriate concentration and pH, or a buffer solution containing other components, may be used.
  • the interval between one dilution step and the next dilution step may be set arbitrarily, for example, the interval may be 10 seconds, 30 seconds, 1 minute, 5 minutes, 10 minutes, 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 3 hours, 4 hours, 6 hours, 12 hours, or 24 hours.
  • the pH of the lipid particle dispersion after step (c) is preferably from pH 3.0 to 10.0, more preferably from pH 3.5 to pH 9.0, and particularly preferably from pH 4.0 to pH 8.5.
  • the lipid composition may be subjected to sizing as necessary.
  • the method of sizing is not particularly limited, but the particle size may be reduced using an extruder or the like.
  • the dispersion containing the lipid composition of the present invention can be subjected to freezing or lyophilization by a general method.
  • the method for removing the organic solvent from the lipid particle dispersion is not particularly limited, and a general method can be used.
  • a pH buffer solution such as phosphate buffered saline or Tris buffer can be used as the dialysis fluid, and additives such as any salt or sugar can be added as necessary to adjust the osmotic pressure or protect the dispersion from freezing.
  • step (e) the concentration of the lipid particle dispersion obtained in step (d) can be adjusted.
  • a solution such as phosphate buffered saline, saline, Tris buffer, or sucrose-containing Tris buffer can be used as a diluent to dilute to an appropriate concentration.
  • the dispersion obtained in step (d) can be concentrated by ultrafiltration using an ultrafiltration membrane. The concentrated dispersion can be used as is, or it can be concentrated and then adjusted to the desired concentration using the diluent.
  • the organic solvent removal step (step (d)) and the concentration adjustment step (step (e)) can be carried out continuously using tangential flow filtration (TFF).
  • TDF tangential flow filtration
  • the organic solvent removal step and the concentration adjustment step may be carried out in any order. If necessary, the organic solvent removal step and the concentration adjustment step may each be carried out multiple times.
  • the solution that can be used for dialysis in step (d) and dilution in step (e) may contain excipients, cryoprotectants, buffers, and antioxidants.
  • excipients and cryoprotectants include, but are not limited to, sugars and sugar alcohols.
  • sugars include sucrose, trehalose, maltose, glucose, lactose, and fructose
  • sugar alcohols include mannitol, sorbitol, inositol, and xylitol.
  • buffers include, but are not limited to, ACES, BES, Bicine, CAPS, CHES, DIPSO, EPPS, HEPES, HEPPSO, MES, MOPS, MOPSO, TAPS, TAPSO, TES, Tricine, Tris, phosphoric acid, acetic acid, and citric acid.
  • antioxidants include EDTA, ascorbic acid, and tocopherol.
  • the lipid particle dispersion of the present invention In order to make the lipid particle dispersion of the present invention into a pharmaceutical composition, it is preferable to carry out sterilization filtration.As a filtration method, it is possible to remove insoluble matter from the lipid particle dispersion using a hollow fiber membrane, a reverse osmosis membrane, a membrane filter, etc.In the present invention, although not particularly limited, it is preferable to carry out filtration using a filter with a pore size that can be sterilized (preferably a 0.2 ⁇ m filtration sterilization filter).In addition, it is preferable to carry out sterilization filtration after step (d) or step (e). Furthermore, the lipid particle dispersion of the present invention can be subjected to freezing or lyophilization, if necessary. The lipid particle dispersion of the present invention can be subjected to freezing or lyophilization by a general method, and the method is not particularly limited.
  • the lipid composition may be a lipid particle.
  • the lipid particle means a particle composed of lipid, and includes a composition having any structure selected from lipid aggregates, micelles, liposomes, lipid nanoparticles (LNPs), and lipoplexes, but the structure of the lipid particle is not limited to these as long as it is a composition containing lipid.
  • the liposome has a lipid bilayer structure, has an aqueous phase inside, and includes a single-layered liposome with a bilayer membrane and a multilayered liposome with multiple layers.
  • the present invention may include either type of liposome.
  • the morphology of lipid particles can be confirmed by electron microscopy or structural analysis using X-rays. For example, by using a cryo-transmission electron microscope (cryo-TEM) it can be confirmed whether the lipid particles have a lipid bilayer structure (lamellar structure) and an inner water layer like liposomes, or whether the particles have a core with high electron density inside and are packed with lipids and other components. Small angle X-ray scattering (SAXS) measurements can also be used to confirm whether lipid particles have a lipid bilayer structure (lamellar structure).
  • SAXS Small angle X-ray scattering
  • the particle size of the lipid particles of the present invention is not particularly limited, but is preferably 10 to 1000 nm, more preferably 30 to 500 nm, and even more preferably 50 to 250 nm.
  • the particle size of the lipid particles can be measured by a general method (e.g., dynamic light scattering method, laser diffraction method, etc.).
  • a lipid composition containing a nucleic acid, a protein, a peptide, or a small molecule can be introduced into a cell to introduce the nucleic acid, protein, peptide, or small molecule into the cell.
  • the lipid composition of the present invention contains a nucleic acid, a protein, a peptide, or a small molecule having a pharmaceutical use
  • the lipid composition can be administered to a living body as a pharmaceutical composition.
  • the lipid composition may be a lipid composition containing only lipid components, without containing nucleic acids, proteins, peptides or small molecules.
  • a lipid composition containing only lipid components can be prepared and then mixed with nucleic acids, proteins, peptides or small molecules to obtain a lipid composition containing nucleic acids, proteins, peptides or small molecules.
  • the lipid composition of the present invention can be administered to a living body alone or in admixture with a pharma- ceutically acceptable administration medium (e.g., physiological saline or phosphate buffer).
  • a pharma- ceutically acceptable administration medium e.g., physiological saline or phosphate buffer.
  • concentration of the lipid composition in the mixture with the pharma- ceutically acceptable administration medium is not particularly limited, and can generally be 0.05% by mass to 90% by mass.
  • the pharmaceutical composition containing the lipid composition of the present invention may contain other pharma- ceutically acceptable additives, such as a pH adjusting buffer, an osmotic pressure adjusting agent, etc.
  • the route of administration of the pharmaceutical composition containing the lipid composition of the present invention is not particularly limited, and the composition can be administered by any method.
  • the administration method include oral administration and parenteral administration (intra-articular administration, intravenous administration, intra-arterial administration, subcutaneous administration, intradermal administration, intravitreal administration, intraperitoneal administration, intramuscular administration, intravaginal administration, intravesical administration, intrathecal administration, pulmonary administration, rectal administration, colonic administration, buccal administration, nasal administration, intracisternal administration, inhalation, etc.).
  • Parenteral administration is preferred, and the preferred administration methods are intravenous injection, subcutaneous injection, intradermal injection, or intramuscular injection.
  • the pharmaceutical composition containing the lipid composition of the present invention can also be administered by direct injection into the diseased site.
  • the dosage form of the lipid composition of the present invention is not particularly limited, but when administered orally, the lipid composition of the present invention can be used in the form of tablets, troches, capsules, pills, suspensions, syrups, etc., in combination with a suitable excipient.
  • preparations suitable for parenteral administration can appropriately contain additives such as antioxidants, buffers, bacteriostatic agents, and isotonic sterile injections, suspending agents, solubilizing agents, thickening agents, stabilizers, or preservatives.
  • the lipid composition of the present invention is very useful as a delivery carrier for nucleic acids because it can hold nucleic acids at a high encapsulation rate.
  • the obtained lipid composition can be mixed with nucleic acids and transfected in vitro, ex vivo or in vivo to introduce nucleic acids into cells.
  • the delivery carrier using the present invention is also useful as a nucleic acid delivery carrier in nucleic acid medicine. That is, the lipid composition of the present invention is useful as a composition for nucleic acid delivery in vitro, ex vivo or in vivo (preferably in vivo).
  • purification by column chromatography was performed using an automatic purification apparatus ISOLERA (Biotage), a medium pressure fractionation purification apparatus Purif-al-2 (Shoko Science Co., Ltd.), or a medium pressure liquid chromatograph YFLC W-prep 2XY (Yamazen Co., Ltd.).
  • the carrier used in silica gel column chromatography was Chromatorex Q-Pack SI50 (Fuji Silysia Chemical Ltd.) or Hi-Flash Column W001, W002, W003, W004 or W005 (Yamazen Corporation).
  • the NH silica gel used was Chromatorex Q-Pack NH60 (Fuji Silysia Chemical Ltd.).
  • the NMR spectrum was measured using tetramethylsilane as an internal standard with a Bruker AVNEO400 (manufactured by Bruker Corporation), and all ⁇ values are shown in ppm. MS spectra were measured using an ACQUITY SQD LC/MS System (Waters).
  • Example 1 (1) To a solution of 1.0 g of 10-oxohexadecanoic acid in 10 mL of dichloromethane, 0.64 mL of octan-1-ol, 1.0 g of 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride, 0.9 g of 4-dimethylaminopyridine, and 2.1 mL of triethylamine were added and stirred at room temperature for 6 hours. After the solvent was removed from the reaction mixture under reduced pressure, ethyl acetate and water were added, and the organic layer was separated.
  • Example 2 (1) To a solution of 1.6 g of 2-(ethylamino)ethanol in 32 mL of ethanol, 5.0 g of benzyl 2-bromoethyl ether and 7.4 g of potassium carbonate were added, and the mixture was stirred at room temperature for 15 minutes and then heated under reflux for 12 hours. After removing the insoluble matter from the reaction mixture by filtration, the filtrate was distilled off under reduced pressure.
  • Example 3 (1) To a mixture of 0.45g of 60% sodium hydride and 15mL of tetrahydrofuran, 1.5g of octanoic acid was added in portions under ice cooling, and the mixture was stirred at the same temperature for 30 minutes. 12mL of 1mol/L lithium diisopropylamide (tetrahydrofuran-heptane solution) was added dropwise to the reaction mixture under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, after which 2.7g of 1-iodohexane was added dropwise and the mixture was stirred at 45°C for 2 hours.
  • Example 4 (1) To a 30 mL toluene solution of 4.0 g of 5-oxoundecanoic acid synthesized according to the method described in WO2019/235635, 2.4 mL of 1-octanol and 130 mg of 4-toluenesulfonic acid monohydrate were added, and the mixture was stirred under heating and reflux for 5 hours. The solvent in the reaction mixture was distilled off under reduced pressure, and the residue was purified by NH silica gel column chromatography (ethyl acetate-hexane) to obtain 4.6 g of octyl 5-oxoundecanoate (A5) as a pale yellow oil.
  • Example 6 (1) To a solution of 1.8 g of hexyl 10-hydroxyhexadecanoate (A10) in 18 mL of tetrahydrofuran, 1.3 g of 1,1'-carbonyldi(1,2,4-triazole) was added and stirred at room temperature for 6 hours. Ethyl acetate and water were added to the reaction mixture, and the organic layer was separated. The organic layer was washed with saturated saline, and then dried by adding anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure.
  • A10 hexyl 10-hydroxyhexadecanoate
  • 1,1'-carbonyldi(1,2,4-triazole) 1,1'-carbonyldi(1,2,4-triazole) was added and stirred at room temperature for 6 hours. Ethyl acetate and water were added to the reaction mixture, and the organic layer was separated. The organic layer was washed with saturated saline, and then dried by adding an
  • Example 7 (1) To a solution of 2.3 g of 16-(hexyloxy)-16-oxohexadecan-7-yl 1H-1,2,4-triazole-1-carboxylate (A15) in 23 mL of acetonitrile, 2.1 g of 2,2'-((2-(diethylamino)ethyl)azanediyl)bis(ethan-1-ol) and 2.3 mL of 1,8-diazabicyclo[5.4.0]-7-undecene were added and stirred at 50°C for 3 hours. Ethyl acetate and water were added to the reaction mixture, and the organic layer was separated.
  • Example 10 (1) To a solution of 240 mg of octyl 5-ethyl-8-(2-((3-heptyldecanoyl)oxy)ethyl)-14-hexyl-12-oxo-1-phenyl-2,11,13-trioxa-5,8-diazaoctadecane-18-oate (compound 11) in 5 mL of methanol, 72 mg of 10% palladium carbon (55% water-wet product) and 167 mg of ammonium formate were added and stirred under reflux for 3 hours. Insoluble matter was removed by filtration through Celite, and the filtrate was evaporated under reduced pressure.
  • Example 11 A pale yellow solid 2-nonylundecanoic acid (C6) was obtained in the same manner as in Examples 3(2) to (4), except that 1-bromononane was used instead of 1-bromoheptane in Example 3(2).
  • 6-Hydroxydodecanoate heptyl (AX2) was obtained in the same manner as in Example 84(1) described in WO2019/235635, except that monomethyl adipate was used instead of 10-methoxy-10-oxodecanoic acid, and 1-heptanol was used instead of 2-butyloctan-1-ol.
  • Test Example 1 Preparation of mRNA-encapsulated lipid nanoparticles and measurement of reporter protein expression rate in mice ⁇ Preparation of EPO (erythropoietin) mRNA-encapsulated lipid nanoparticles>
  • EPO erythropoietin
  • mRNA-encapsulated lipid nanoparticles The compounds shown in Table 9, 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (product name: COATSOME® MC-8080; NOF corporation) (hereinafter, DSPC), cholesterol (product name: Cholesterol HP; Nippon Fine Chemicals Co., Ltd.), 1,2-dimyristoyl-rac-glycero-3-(methylpolyoxyethylene 2000) (hereinafter, DMG-PEG2000) (product name: SUNBRIGHT® GM-020; NOF Corporation) was dissolved in ethanol in a molar ratio (mol%) of the compound shown in Table 9: 1,2-distearoy
  • EPO mRNA product name: CleanCap EPO mRNA (5 moU); TriLink
  • aqueous phase and oil phase were then mixed using a NanoAssemblr (Precision NanoSystems) so that the volume ratio of aqueous phase:oil phase was 3:1, and the mixture was diluted 2-fold with phosphate-buffered saline (PBS) or water to obtain a dispersion of mRNA lipid nanoparticles.
  • PBS phosphate-buffered saline
  • This dispersion was dialyzed against 20 mM Tris buffer containing 8% sucrose using a dialysis cassette (Slide-A-Lyzer G2, MWCO: 10 kD, Thermo Fisher Scientific) to remove the ethanol, yielding lipid nanoparticles encapsulating EPO mRNA.
  • a dialysis cassette Slide-A-Lyzer G2, MWCO: 10 kD, Thermo Fisher Scientific
  • PdI particle size and polydispersity index
  • EPO mRNA was diluted with MilliQ water to prepare a 2-fold dilution series from 100 ⁇ g/mL to 3.1 ⁇ g/mL, and a calibration curve solution was prepared. 50 ⁇ L of the calibration curve solution or mRNA lipid nanoparticles was mixed with 450 ⁇ L of methanol to prepare a measurement solution. The absorbance of each measurement solution was measured at 260 nm and 330 nm using a UV plate reader (Multiskan Go, Thermo Fisher Scientific), and the absorbance of each measurement solution was determined by subtracting the absorbance of 330 nm from the absorbance of 260 nm. The total aqueous phase nucleic acid concentration was calculated from the calibration curve using the absorbance of each sample measurement solution.
  • the nucleic acid concentration in the external aqueous phase was quantified by the standard addition method using Quant-iT RiboGreen RNA Assay Kit (Thermo Fisher Scientific).
  • the 20x TE buffer included in the above kit was diluted with water to obtain 1x TE buffer.
  • TE stands for Tris/EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid).
  • EPO mRNA was diluted with TE buffer to a final concentration of 0 to 400 ng/mL to prepare a nucleic acid dilution series.
  • mRNA encapsulation rate (%) (total mRNA concentration - mRNA concentration in external aqueous phase) ⁇ total mRNA concentration ⁇ 100
  • EPO enzyme activity The dispersion of mRNA lipid nanoparticles prepared in the above ⁇ Preparation of EPO mRNA-encapsulated lipid nanoparticles> was intravenously administered to ICR mice at an mRNA dose of 0.1 mg/kg. Six hours after administration, blood was collected from the posterior vena cava to obtain plasma. Human EPO enzyme activity was quantified using the obtained plasma using an Erythropoietin (EPO) Human Elisa Kit (Abcam). The quantified value was expressed as the relative EPO protein amount when the comparative example was set to 1. The results are shown in Table 10.
  • EPO Erythropoietin
  • the nucleic acid-lipid composition of the present invention was shown to have a higher EPO protein expression rate.
  • EPO enzyme activity measurement (dose response)> The dispersion of mRNA lipid nanoparticles prepared in the above ⁇ Preparation of EPO mRNA-encapsulated lipid nanoparticles> was intravenously administered to ICR mice at mRNA doses of 0.1, 0.5, and 1 mg/kg. Six hours after administration, blood was collected from the posterior vena cava to obtain plasma. Human EPO enzyme activity was quantified using the obtained plasma using an Erythropoietin (EPO) Human Elisa Kit (Abcam). The quantified value was described as the relative EPO protein amount when the EPO protein amount at 0.1 mg/kg administration in the comparative example was set to 1.
  • EPO Erythropoietin
  • the nucleic acid-lipid composition of the present invention was shown to express EPO protein in a dose-responsive manner.

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Abstract

本発明の課題は、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる脂質組成物を構成する化合物またはその塩；並びにｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる、脂質組成物、医薬組成物および送達キャリアを提供することである。本発明によれば、下記式（１）で示される化合物またはその塩が提供される。 式中、Ｒ１は、炭素数１～２４の炭化水素基を示し、Ｒ２は、炭素数１～６の炭化水素基を示し、Ｒ３は、炭素数６～２４であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５は、置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基を示し、Ｒ６は、水素原子または炭素数１～１８の炭化水素基を示し、Ｌは、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、または＊－Ｃ（Ｏ）Ｏ－を示し、ａは、１～１２の整数を示し、ｂ、ｃおよびｄは、１～４の整数を示す。

Description

化合物またはその塩、脂質組成物、医薬組成物および送達キャリア
　本発明は、核酸を細胞内等に導入することを容易にする化合物またはその塩に関する。本発明はさらに、上記化合物またはその塩を含む脂質組成物、医薬組成物および送達キャリアに関する。
　核酸医薬は、疾患に対する作用機序が明確で、副作用も少なく、次世代の医薬品として期待されている。例えば、ｓｉＲＮＡ（ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ）を用いた核酸医薬は、細胞内で配列特異的に標的遺伝子の発現を阻害することができる。その結果、特定の遺伝子または遺伝子群の異常な発現が原因となって生じる疾患および症状を軽減または治療することができる。これらの核酸の機能を発現させるためには、核酸医薬を細胞内に送達することが必要である。
　核酸を細胞内に効率よく送達する方法として、レトロウイルスまたはアデノウイルスなどのウイルスベクターを用いる方法がある。ウイルスベクターを用いる方法では、遺伝子導入効率が高い反面、導入する遺伝子の大きさに制限があることや、免疫原性および安全性の面で懸念がある。一方、脂質組成物による遺伝子導入は、導入遺伝子に制限がなく、上記の問題を解消できるため、その開発が活発に行われている。
　特許文献１には、所定の式（１）で表されるアミノ脂質又はその塩が記載されており、上記アミノ脂質又はその塩を含む脂質組成物も記載されている。特許文献１には、上記脂質組成物を用いて核酸をマウス細胞に送達することが記載されている。
　特許文献２には、所定の式（１）で表されるアミノ脂質又はその塩、非イオン性脂質、非イオン性親水性高分子構造を有する脂質および核酸を含み、双性イオン性脂質を含むか、または含まない、脂質組成物が記載されている。特許文献２には、上記脂質組成物を用いて核酸をマウス細胞に送達することが記載されている。
　特許文献３には、所定の式（１）で表される脂質又はその塩である第一の脂質、ステロール類、および核酸を含む脂質組成物であって、脂質組成物中の第一の脂質のモル数の、脂質組成物中のステロール類のモル数に対する比が０．３００以上１．２９９未満である、脂質組成物が記載されている。特許文献３には、上記脂質組成物を用いて核酸をマウス細胞に送達することが記載されている。
国際公開ＷＯ２０１９／２３５６３５号公報 国際公開ＷＯ２０２０／２４６５８１号公報 国際公開ＷＯ２０２１／０９５８７６号公報
　従来技術においては、ｍＲＮＡを用いた際のタンパク発現、および高用量の投与量において用量反応的なタンパク質生産が難しかった。本発明は、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる脂質組成物を構成する化合物またはその塩を提供することを解決すべき課題とした。さらに本発明は、上記の化合物またはその塩を用いた、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる、脂質組成物、医薬組成物および送達キャリアを提供することを解決すべき課題とした。
　本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、下記式（１）で示される化合物またはその塩を使用して調製した脂質組成物が、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できることを確認し、本発明を完成するに至った。本発明によれば、以下の発明が提供される。
＜１＞　下記式（１）で示される化合物またはその塩。
式中、Ｒ１は、炭素数１～２４の炭化水素基を示し、
　Ｒ２は、炭素数１～６の炭化水素基を示し、
　Ｒ３は、炭素数６～２４であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
　Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基上の置換基はそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６は、水素原子または炭素数１～１８の炭化水素基を示し、
　Ｌは、不存在であるか、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、または＊－Ｃ（Ｏ）Ｏ－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
　ａは、１～１２の整数を示し、
　ｂは、１～４の整数を示し、
　ｃは、１～４の整数を示し、
　ｄは、１～４の整数を示す。
＜２＞　Ｒ１が、炭素数６～１４の炭化水素基を示し、
　Ｒ２が、炭素数６の炭化水素基を示し、
　Ｒ３が、炭素数１１～１７であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
　Ｒ４およびＲ５がそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基上の置換基がそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６が、水素原子またはベンジル基を示し、
　Ｌが、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
　ａが、３～８の整数を示し、
　ｂが、２を示し、
　ｃが、２を示し、
　ｄが、２を示す、
＜１＞に記載の化合物またはその塩。
＜３＞　Ｒ１が、炭素数６～８の直鎖の炭化水素基を示す、＜２＞に記載の化合物またはその塩。
＜４＞　以下の化合物から選ばれる化合物またはその塩：
オクチル　６－（２－（（２－ブチルオクタノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート；
ヘキシル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート
ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート

ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
オクチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
オクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
２－ペンチルヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
２－ヘキシルオクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１－フェニル－２，１１，１３－トリオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート
オクチル　６－エチル－９－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１５－ヘキシル－１３－オキソ－１－フェニル－２，１２，１４－トリオキサ－６，９－ジアザノナデカン－１９－オエート
オクチル　７－エチル－１０－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１６－ヘキシル－１４－オキソ－１－フェニル－２，１３，１５－トリオキサ－７，１０－ジアザイコサン－２０－オエート
オクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
オクチル　４－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－４，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート
オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
ヘプチル６－（２－（（２－デシルドデカノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－７－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－６－（３－（（２－ヘプチルノナニル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－６－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
ヘプチル３－エチル－７－（３－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
ヘプチル３－エチル－７－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
＜５＞　＜１＞～＜４＞の何れか一に記載の化合物またはその塩と、脂質とを含む、脂質組成物。
＜６＞　上記脂質が、中性脂質および非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質からなる群から選択される少なくとも一種の脂質である、＜５＞に記載の脂質組成物。
＜７＞　ステロールをさらに含む、＜５＞または＜６＞に記載の脂質組成物。
＜８＞　核酸、タンパク質、ペプチドおよび低分子からなる群から選択される少なくとも一種をさらに含む、＜５＞から＜７＞の何れか一に記載の脂質組成物。
＜９＞　＜５＞から＜８＞の何れか一に記載の脂質組成物を含有する、医薬組成物。
＜１０＞　＜５＞から＜８＞の何れか一に記載の脂質組成物を含有する、送達キャリア。
　本発明の化合物を使用することにより、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる脂質組成物、医薬組成物および送達キャリアを製造することができる。本発明の脂質組成物、医薬組成物および送達キャリアは、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる。
図１は、核酸内包脂質ナノ粒子のＥＰＯ（エリスロポエチン）発現量（用量反応性）を示す。
　以下、本発明について詳細に説明する。
　本明細書において「～」は、その前後に記載される数値をそれぞれ最小値および最大値として含む範囲を示す。
＜本発明の化合物＞
　本発明は、下記式（１）で示される化合物またはその塩に関する。式（１）で示される化合物またはその塩を脂質組成物の構成成分として使用することにより、ｍＲＮＡを用いた際に高い核酸内包率および優れた核酸送達を実現できる。さらに、本発明によれば、高い投与量に応じたタンパク産生を実現することができる。用量反応性も達成することができる。
式中、Ｒ１は、炭素数１～２４の炭化水素基を示し、
　Ｒ２は、炭素数１～６の炭化水素基を示し、
　Ｒ３は、炭素数６～２４であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
　Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基上の置換基はそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６は、水素原子または炭素数１～１８の炭化水素基を示し、
　Ｌは、不存在であるか、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、または＊－Ｃ（Ｏ）Ｏ－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
　ａは、１～１２の整数を示し、
　ｂは、１～４の整数を示し、
　ｃは、１～４の整数を示し、
　ｄは、１～４の整数を示す。
　Ｒ１は、好ましくは炭素数３～１８の炭化水素基を示し、より好ましくは炭素数６～１４の炭化水素基を示し、さらに好ましくは炭素数６～８の炭化水素基を示し、
　Ｒ２は、好ましくは炭素数３～６の炭化水素基を示し、より好ましくは炭素数４～６の炭化水素基を示し、特に好ましくは炭素数６の炭化水素基を示す。
　Ｒ３は、好ましくは炭素数８～２０であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、より好ましくは炭素数１１～１７であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示す。
　Ｒ３が示す「炭素数６～２４であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基」としては、好ましくは、
Ｒ３１（Ｒ３２）ＣＨ－
または
Ｒ３３（Ｒ３４）ＣＨ－ＣＨ２－
で示される基である。
　Ｒ３１およびＲ３２は、それぞれ独立に炭化水素基を示し、Ｒ３１およびＲ３２が示す炭化水素基の炭素原子数の合計は５～２３である。好ましくは、Ｒ３１およびＲ３２は、それぞれ独立に直鎖の炭化水素基を示し、さらに好ましくは直鎖のアルキル基を示す。
　Ｒ３１およびＲ３２が示す炭化水素基の炭素原子数は、同一でも相違していてもよい。Ｒ３１およびＲ３２が示す炭化水素基の炭素原子数の差は、好ましくは５以下であり、より好ましくは３以下であり、さらに好ましくは１以下である。Ｒ３１およびＲ３２が示す炭化水素基の炭素原子数は、同一であることが好ましい。
　Ｒ３１およびＲ３２は、それぞれ独立に、好ましくは炭素数４～１０の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）であり、より好ましくは炭素数４～８の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）であり、さらに好ましくは炭素数６～８の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）である。
　Ｒ３３およびＲ３４は、それぞれ独立に炭化水素基を示し、Ｒ３３およびＲ３４が示す炭化水素基の炭素原子数の合計は４～２２である。好ましくは、Ｒ３３およびＲ３４は、それぞれ独立に直鎖の炭化水素基を示し、さらに好ましくは直鎖のアルキル基を示す。
　Ｒ３３およびＲ３４が示す炭化水素基の炭素原子数は、同一でも相違していてもよい。Ｒ３３およびＲ３４が示す炭化水素基の炭素原子数の差は、好ましくは５以下であり、より好ましくは３以下であり、さらに好ましくは１以下である。Ｒ３３およびＲ３４が示す炭化水素基の炭素原子数は、同一であることが好ましい。
　Ｒ３３およびＲ３４は、それぞれ独立に、好ましくは炭素数４～１０の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）であり、より好ましくは炭素数４～８の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）であり、さらに好ましくは炭素数６～８の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）であり、特に好ましくは炭素数７の直鎖の炭化水素基（好ましくはアルキル基）である。
　Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、好ましくは置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基を示す。
　Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基上の置換基はそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６は、好ましくは水素原子または炭素数１～１２の炭化水素基を示し、より好ましくは水素原子または炭素数７～１２の炭化水素基を示し、特に好ましくは水素原子またはベンジル基を示す。
　Ｌは、好ましくは、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を示し、＊はＲ１との結合位置を示す。
　ａは、好ましくは２～１０の整数を示し、より好ましくは３～８の整数を示す。
　ｂは、好ましくは２または３を示し、より好ましくは２を示す。
　ｃは、好ましくは２または３を示し、より好ましくは２を示す。
　ｄは、好ましくは２または３を示し、より好ましくは２を示す。
　式（１）において、好ましくは、
　Ｒ１が、炭素数６～１４の炭化水素基を示し、
　Ｒ２が、炭素数６の炭化水素基を示し、
　Ｒ３が、炭素数１１～１７であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
　Ｒ４およびＲ５がそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基上の置換基がそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６が、水素原子またはベンジル基を示し、
　Ｌが、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
　ａが、３～８の整数を示し、
　ｂが、２を示し、
　ｃが、２を示し、
　ｄが、２を示す。
　式（１）において、より好ましくは、Ｒ１が、炭素数６～８の直鎖の炭化水素基を示す。
　炭化水素基は、アルキル基、アルケニル基またはアルキニル基であることが好ましい。
　アルキル基は直鎖でも分岐であってもよく、鎖状でも環状であってもよい。アルキル基としては、具体的には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、シクロブチル基、ペンチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、シクロヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、トリメチルドデシル基（好ましくは、３，７，１１－トリメチルドデシル基）、テトラデシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、テトラメチルヘキサデシル基（好ましくは、３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデシル基）、ヘプタデシル基、オクタデシル基、２－ブチルヘキシル基、２－ブチルオクチル基、１－ペンチルヘキシル基、２－ペンチルヘプチル基、３－ペンチルオクチル基、１－ヘキシルヘプチル基、１－ヘキシルノニル基、２－ヘキシルオクチル基、２－ヘキシルデシル基、３－ヘキシルノニル基、１－ヘプチルオクチル基、２－ヘプチルノニル基、２－ヘプチルウンデシル基、３－ヘプチルデシル基、１－オクチルノニル基、２－オクチルデシル基、２－オクチルドデシル基、３－オクチルウンデシル基、２－ノニルウンデシル基、３－ノニルドデシル基、２－デシルドデシル基、２－デシルテトラデシル基、３－デシルトリデシル基、２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクチル基などが挙げられる。
　アルケニル基は直鎖でも分岐であってもよく、鎖状でも環状であってもよい。具体的には、アリル基、プレニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基、ヘプテニル基、オクテニル基、ノネニル基（好ましくは、（Ｚ）－２－ノネニル基または、（Ｅ）－２－ノネニル基）、デセニル基、ウンデセニル基、ドデセニル基、ドデカジエニル基、トリデセニル基（好ましくは、（Ｚ）－トリデカ－８－エニル基）、テトラデセニル基（好ましくは、テトラデカ－９－エニル基）、ペンタデセニル基（好ましくは、（Ｚ）－ペンタデカ－８－エニル基）、ヘキサデセニル基（好ましくは、（Ｚ）－ヘキサデカ－９－エニル基）、ヘキサデカジエニル基、ヘプタデセニル基（好ましくは、（Ｚ）－ヘプタデカ－８－エニル基）、ヘプタデカジエニル基（好ましくは、（８Ｚ，１１Ｚ）－ヘプタデカ－８，１１－ジエニル基）、オクタデセニル基（好ましくは、（Ｚ）－オクタデカ－９－エニル基）、オクタデカジエニル基（好ましくは、（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエニル基）などが挙げられる。
　アルキニル基は直鎖でも分岐であってもよく、鎖状でも環状であってもよい。具体的には、プロパルギル基、ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基、ヘプチニル基、オクチニル基、ノニニル基、デシニル基、ウンデシニル基、ドデシニル基、テトラデシニル基、ペンタデシニル基、ヘキサデシニル基、ヘプタデシニル基、オクタデシニル基などが挙げられる。
　上記のアルケニル基はいずれも二重結合を１つまたは２つ有することが好ましく、アルキニル基はいずれも三重結合を１つまたは２つ有することが好ましい。
　本発明の化合物は塩を形成していてもよい。
　塩基性基における塩としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸および硫酸などの鉱酸との塩；ギ酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、アスパラギン酸、トリクロロ酢酸およびトリフルオロ酢酸などの有機カルボン酸との塩；並びにメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メシチレンスルホン酸およびナフタレンスルホン酸などのスルホン酸との塩が挙げられる。
　酸性基における塩としては、例えば、ナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属との塩；カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩；アンモニウム塩；並びにトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ－ベンジル－β－フェネチルアミン、１－エフェナミンおよびＮ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミンなどの含窒素有機塩基との塩などが挙げられる。
　上記した塩の中で、好ましい塩としては、薬理学的に許容される塩が挙げられる。
　本発明の化合物の好ましい具体例としては、後記する実施例に記載の化合物１～化合物３７が挙げられるが、本発明がこれにより限定して解釈されるものではない。
　化合物１～化合物１６の中でも、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、化合物９、および化合物１０が好ましい。さらに、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８、および化合物９が好ましく、特には化合物３、化合物４、化合物６、化合物７、および化合物８が好ましい。
　化合物１７～化合物３７の中でも、化合物１７～２５が好ましい。さらに、化合物１９、および化合物２２～２５が好ましい。
＜製造方法＞
　本発明の化合物の製造法について説明する。
　本発明の化合物は、公知の方法を組み合わせることにより製造することができるが、例えば、以下に示す製造法に従い、製造することができる。
［製造法１］
式［２］の化合物から式［１］の化合物を製造する方法。
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｌ、ａ、ｂ、ｃ及びｄは上記と同じ意味を有し；Ｘ１及びＸ２は脱離基を意味する。
　脱離基として、例えば、クロロ基、フルオロ基、ブロモ基、トリクロロメトキシ基、４－ニトロ－フェノキシ基、２，４－ジニトロフェノキシ基、２，４，６－トリクロロフェノキシ基、ペンタフルオロフェノキシ基、２，３，５，６－テトラフルオロフェノキシ基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、３，５－ジオキソ－４－メチル－１，２，４－オキサジアゾリジル基、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミジル基、メタンスルホニル基、４－トルエンスルホニル基などが挙げられる。
（１－１）
式［４］の化合物は、塩基の存在下もしくは不存在下、式［２］の化合物を式［３］の化合物と反応させることにより製造することができる。
　式［３］の化合物として、例えば、１，１’－カルボニルジ（１，２，４－トリアゾール）、１，１’－カルボニルジイミダゾール、クロロギ酸４－ニトロフェニル、トリホスゲン及びホスゲンなどが知られている。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
　好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられ、テトラヒドロフランがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［２］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。塩基は有機塩基が好ましく、具体的には、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられる。
　塩基の使用量は、式［２］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［３］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［２］の化合物に対して、１～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（１－２）
式［６］の化合物は、塩基の存在下、式［４］の化合物を式［５Ａ］の化合物と反応させることにより製造することができる。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
　好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられ、テトラヒドロフランがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［４］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、これらの塩基は混合して使用してもよい。
　塩基の使用量は、式［４］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［５Ａ］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［４］の化合物に対して、０．５～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（１－３）
式［１］の化合物は、酸の存在下もしくは不存在下、縮合剤または酸ハロゲン化物の存在下もしくは不存在下、塩基の存在下もしくは不存在下、式［６］の化合物を式［７］の化合物と反応させることにより製造することができる。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
　好ましい溶媒としては、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン及びトルエンがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［６］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる酸としては、無機酸または有機酸が挙げられる。酸はスルホン酸類が好ましく、具体的には、硫酸、４－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸などが挙げられる。
この反応に使用される縮合剤としては、例えば、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド及び１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドなどのカルボジイミド類；カルボニルジイミダゾールなどのカルボニル類；ジフェニルホスホリルアジドなどの酸アジド類；ジエチルホスホリルシアニドなどの酸シアニド類；２－エトキシ－１－エトキシカルボニル－１，２－ジヒドロキノリン；Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスフェートならびにＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスフェートなどのウロニウム類などが挙げられる。
　この反応に使用される酸ハロゲン化物としては、例えば、塩化アセチル及びトリフルオロアセチルクロリドなどのカルボン酸ハロゲン化物類；塩化メタンスルホニル及び塩化トシルなどのスルホン酸ハロゲン化物類；クロロギ酸エチル及びクロロギ酸イソブチルなどのクロロギ酸エステル類などが挙げられる。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。有機塩基が好ましく、具体的には、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、これらの塩基は混合して使用してもよい。
　塩基の使用量は、式［６］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［７］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［６］の化合物に対して、０．８～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（１－４）
式［１］の化合物は、式［４］の化合物及び式［５Ｂ］の化合物を原料として、製造法１（１－２）と同様の方法により製造することができる。
［製造法２］
式［８］の化合物から式［２］の化合物を製造する方法。

式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｌ及びａは上記と同じ意味を有し；Ａ及びＢは、水酸基またはカルボキシル基を意味する。
（２－１）
式［１０］の化合物は、酸の存在下もしくは不存在下、縮合剤または酸ハロゲン化物の存在下もしくは不存在下、塩基の存在下もしくは不存在下、式［８］の化合物を式［９］の化合物と反応させることにより製造することができる。
式［８］の化合物として、例えば、１－ヘプタノールなどが知られており、市販品として得ることができる。
式［９］の化合物として、例えば、１０－オキソヘキサデカン酸や５－オキソウンデカン酸が知られており、公知の方法もしくは市販品として得ることができる。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、芳香族炭化水素類及びエーテル類が挙げられ、トルエン及びテトラヒドロフランがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［８］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる酸としては、無機酸または有機酸が挙げられる。酸はスルホン酸類が好ましく、具体的には、硫酸、４－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸などが挙げられる。
この反応に使用される縮合剤としては、例えば、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド及び１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドなどのカルボジイミド類；カルボニルジイミダゾールなどのカルボニル類；ジフェニルホスホリルアジドなどの酸アジド類；ジエチルホスホリルシアニドなどの酸シアニド類；２－エトキシ－１－エトキシカルボニル－１，２－ジヒドロキノリン；Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスフェートならびにＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスフェートなどのウロニウム類などが挙げられる。
　この反応に使用される酸ハロゲン化物としては、例えば、塩化アセチル及びトリフルオロアセチルクロリドなどのカルボン酸ハロゲン化物類；塩化メタンスルホニル及び塩化トシルなどのスルホン酸ハロゲン化物類；クロロギ酸エチル及びクロロギ酸イソブチルなどのクロロギ酸エステル類などが挙げられる。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。有機塩基が好ましく、具体的には、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、これらの塩基は混合して使用してもよい。
　塩基の使用量は、式［８］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［９］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［８］の化合物に対して、０．８～１０倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応は、－３０～２００℃、好ましくは０～１５０℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（２－２）
式［２］の化合物は、式［１０］の化合物を還元剤と反応させることにより製造することができる。
この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
好ましい溶媒としては、アルコール類、エーテル類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、アルコール類と芳香族炭化水素類の混合溶媒がより好ましい。
溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１０］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる還元剤としては、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素カルシウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム及び水素化アルミニウムリチウムなどが挙げられ、水素化ホウ素ナトリウムがより好ましい。
還元剤の使用量は、式［１０］の化合物に対して、０．１～１００倍モル、好ましくは、０．５～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
［製造法３］
式［１１］の化合物から式［５Ａ］及び［５Ｂ］の化合物を製造する方法。
式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ｂ、ｃ及びｄは上記と同じ意味を有し；Ｘは上記と同じ脱離基を；Ｒ４１及びＲ５１は炭素数１～６の炭化水素基を；Ｒ４２及びＲ５２は水素原子または炭素数１～１８の炭化水素基を；Ｃは酸素原子または不存在であることを意味する。
（３－１）
式［１３］の化合物は、塩基の存在下もしくは不存在下、添加剤の存在下もしくは不存在下、式［１１］の化合物を式［１２］の化合物と反応させることにより製造することができる。
式［１１］の化合物として、例えば、２－アミノエタノールなどが、式［１２］の化合物として、例えば、ベンジル２－ブロモエチルエーテルなどが知られている。
この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、アルコール類が挙げられ、エタノールがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１１］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、無機塩基が好ましく、炭酸カリウムがより好ましい。
　塩基の使用量は、式［１１］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［１２］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［１１］の化合物に対して、１～１０倍モルであればよい。
この反応に用いられる添加剤としては、具体的には、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム及びヨウ化ベンジルトリエチルアンモニウムなどが挙げられる。
　添加剤の使用量は、式［１２］の化合物に対して、０～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（３－２）
式［１５］の化合物は、式［１３］の化合物及び式［１４］の化合物を原料として、製造法３（３－１）と同様の方法により製造することができる。
（３－３）
式［１６］の化合物は、塩基の存在下もしくは不存在下、式［１５］の化合物の水酸基を脱離基に変換する試薬と反応させることにより製造することができる。
この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられ、テトラヒドロフランがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１５］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられる。
　この反応に使用される、水酸基を脱離基に変換する試薬としては、塩化メタンスルホニル及び塩化トシルなどのスルホン酸ハロゲン化物類；トリフェニルホスフィン及び四ハロゲン化炭素の組み合わせが挙げられ、トリフェニルホスフィン及び四臭化炭素の組み合わせがより好ましい。
　試薬の使用量は、特に限定されないが、式［１５］の化合物に対して、１～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（３－４）
　式［５Ａ］の化合物は、塩基の存在下、添加剤の存在下もしくは不存在下、式［１６］の化合物を式［１７］の化合物と反応させることにより製造することができる。
　式［１７］の化合物として、例えば、ジエタノールアミンなどが知られている。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、アルコール類が挙げられ、エタノールがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１６］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、炭酸カリウムがより好ましい。
　塩基の使用量は、式［１６］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［１７］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［１６］の化合物に対して、１～１０倍モルであればよい。
　この反応に用いられる添加剤としては、具体的には、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム及びヨウ化ベンジルトリエチルアンモニウムなどが挙げられる。
　添加剤の使用量は、式［１６］の化合物に対して、０．１～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（３－５）
　式［５Ｂ］の化合物は、式［５Ａ］の化合物及び式［７］の化合物を原料として、製造法１（１－３）と同様の方法により製造することができる。
［製造法４］
式［１６］の化合物から式［７Ａ］の化合物を製造する方法。
式中、Ｒ３及びＸは上記と同じ意味を有し；Ｒ３１及びＲ３２は炭素数の総和が５～２３となる炭化水素基の組み合わせを意味する。
式［７Ａ］の化合物は、塩基の存在下、添加剤の存在下もしくは不存在下、式［１６］の化合物を式［１７］の化合物と反応させることにより製造することができる。
式［１６］の化合物として、例えば、オクタン酸などが知られている。
式［１７］の化合物として、例えば、１－ヨードヘキサンなどが知られている。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられ、テトラヒドロフランがより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１６］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水素化ナトリウム、水素化カルシウム、リチウムジイソプロピルアミド、ｎ－ブチルリチウム、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、これらの塩基は混合して使用してもよい。
　塩基の使用量は、式［１６］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［１７］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［１６］の化合物に対して、１～１０倍モルであればよい。
この反応に用いられる添加剤としては、具体的には、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム及びヨウ化ベンジルトリエチルアンモニウムなどが挙げられる。
　添加剤の使用量は、式［１７］の化合物に対して、０～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
［製造法５］
式［１８］の化合物から式［７Ｂ］の化合物を製造する方法。
式中、Ｒ３及びＸは上記と同じ意味を有し；Ｒ３３は炭素数２～１１となる炭化水素基を；Ｒは炭素数１～１０となる炭化水素基を意味する。
（５－１）
　式［２０］の化合物は、塩基の存在下、式［１８］の化合物を式［１９］の化合物と反応させることにより製造することができる。
　式［１８］の化合物として、例えば、マロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチルなどが知られている。
　式［１９］の化合物として、例えば、１－ブロモオクタンなどが知られている。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類の混合溶媒が挙げられ、ジメチルスルホキシド及びトルエンの混合溶媒がより好ましい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［１８］の化合物に対して、１～５００倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、または水酸化リチウムがより好ましい。
　塩基の使用量は、式［１８］の化合物に対して、１～５０倍モル、好ましくは、１～１０倍モルであればよい。
　式［１９］の化合物の使用量は、特に限定されないが、式［１８］の化合物に対して、２～１０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（５－２）
式［２１］の化合物は、酸の存在下もしくは不存在下、塩基の存在下もしくは不存在下、式［２０］の化合物を反応させることにより製造することができる。
　この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、水、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、水及び芳香族炭化水素類の混合溶媒が挙げられる。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［２０］の化合物に対して、０．１～１０倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる酸としては、無機酸または有機酸が挙げられる。具体的には、塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ギ酸、またはトリフルオロ酢酸などが挙げられ、トリフルオロ酢酸が好ましい。
　酸の使用量は、特に限定されないが、式［２０］の化合物に対して、１～５０倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられる。
　塩基の使用量は、式［２０］の化合物に対して、２～５０倍モルであればよい。
この反応は、－３０～１５０℃、好ましくは０～１００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
（５－３）
式［７Ｂ］の化合物は、酸の存在下もしくは不存在下、塩基の存在下もしくは不存在下、溶媒の存在下もしくは不存在下、式［２１］の化合物を反応させることにより製造することができる。
この反応に使用される溶媒としては、反応に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、エステル類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類及び芳香族炭化水素類が挙げられ、これらの溶媒は混合して使用してもよい。
　溶媒の使用量は、特に限定されないが、式［２１］の化合物に対して、０～１０倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
　この反応に用いられる酸としては、無機酸または有機酸が挙げられる。具体的には、塩化水素酸、リン酸、硫酸、ギ酸、またはトリフルオロ酢酸などが挙げられる。
　酸の使用量は、特に限定されないが、式［２１］の化合物に対して、１～５０倍量（ｖ／ｗ）であればよい。
この反応に用いられる塩基としては、無機塩基または有機塩基が挙げられる。具体的には、水酸化カリウム、水酸化ナトリム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸リチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、４－メチルモルホリン、 ピリジン、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン、または４－ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、ピリジンがより好ましい。
　塩基の使用量は、式［２１］の化合物に対して、２～５０倍モルであればよい。
　この反応は、－３０～２５０℃、好ましくは０～２００℃で５分間～４８時間実施すればよい。
［製造法６］
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ５１、Ｌ、ａ、ｂ、ｃ及びｄは上記と同じ意味を有し；Ａｒは芳香族炭化水素基を意味する。
　一般式［１Ｂ］の化合物は、一般式［１Ａ］の化合物を脱保護することにより製造することができる。
　この反応は、例えば、Ｔ．Ｗ．グリーン（Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ）ら、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第16～366頁、2007年、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載の方法に準じて行えばよい。
　上記した製造法で使用される化合物において、異性体（例えば、光学異性体、幾何異性体および互変異性体など）が存在する場合、これらの異性体も使用することができる。
　また、溶媒和物、水和物および種々の形状の結晶が存在する場合、これらの溶媒和物、水和物および種々の形状の結晶も使用することができる。
　上記した製造法で使用される化合物において、例えば、アミノ基、水酸基またはカルボキシル基などを有している化合物は、予めこれらの基を通常の保護基で保護しておき、反応後、自体公知の方法でこれらの保護基を脱離することができる。
　上記した製造法で得られる化合物は、例えば、縮合、付加、酸化、還元、転位、置換、ハロゲン化、脱水もしくは加水分解などの自体公知の反応に付すことにより、または、それらの反応を適宜組み合わせることにより、他の化合物に誘導することができる。
＜脂質組成物＞
　本発明においては、本発明の化合物またはその塩を含む脂質組成物を調製することができる。脂質組成物を調製する際には、本発明の化合物に加えて、ステロールおよび非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質からなる群から選択される少なくとも一種の脂質を使用することができる。脂質組成物は、さらに中性脂質を含むことができる。脂質組成物は、さらに核酸を含むことができる。
　本発明の脂質組成物において、本発明の式（１）で示される化合物またはその塩の配合量は、全脂質量に対して２０ｍｏｌ％～８０ｍｏｌ％であることが好ましく、３０ｍｏｌ％～７０ｍｏｌ％であることがより好ましく、３５ｍｏｌ％～６５ｍｏｌ％であることがさらに好ましい。
＜ステロール＞
　本発明における脂質組成物は、ステロールを含むことが好ましい。本発明の脂質組成物において、ステロールを含むことで、膜流動性を低下させ、脂質組成物の安定化効果を得ることができる。
　ステロールとしては、特に限定されないが、コレステロール、フィトステロール（シトステロール）、スチグマステロール、フコステロール、スピナステロール、ブラシカステロールなど）、エルゴステロール、コレスタノン、コレステノン、コプロスタノール、コレステリル－２’－ヒドロキシエチルエーテル、コレステリル－４’－ヒドロキシブチルエーテルなどを挙げることができる。これらの中でも、コレステロールが好ましい。
　本発明の脂質組成物において、ステロールの配合量は、全脂質量に対して１０ｍｏｌ％～７０ｍｏｌ％であることが好ましく、２０ｍｏｌ％～６５ｍｏｌ％であることがより好ましく、２５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％であることがさらに好ましい。
＜中性脂質＞
　本発明における脂質組成物は、中性脂質を含んでもよい。中性脂質としては、特に限定されないが、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン、セラミドなどが挙げられ、ホスファチジルコリンが好ましい。また、中性脂質としては、単独でも、複数の異なる中性脂質を組み合わせても良い。
　ホスファチジルコリンとしては、特に限定されないが、大豆レシチン（ＳＰＣ）、水添大豆レシチン（ＨＳＰＣ）、卵黄レシチン（ＥＰＣ）、水添卵黄レシチン（ＨＥＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフォコリン（ＤＳＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）などが挙げられる。
　ホスファチジルエタノールアミンとしては特に限定されないが、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジリノレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＬｏＰＥ）、ジフィタノイルホスファチジルエタノールアミン（Ｄ（Ｐｈｙ）ＰＥ）、１－パルミトイル－２－オレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジテトラデシルホスファチジルエタノールアミン、ジヘキサデシルホスファチジルエタノールアミン、ジオクタデシルホスファチジルエタノールアミン、ジフィタニルホスファチジルエタノールアミンなどが挙げられる。
　スフィンゴミエリンとしては、特に限定されないが、卵黄由来スフィンゴミエリン、牛乳由来スフィンゴミエリンなどが挙げられる。
　セラミドとしては、特に限定されないが、卵黄由来セラミド、牛乳由来セラミドなどが挙げられる。
　本発明の脂質組成物において、中性脂質の配合量は、構成脂質成分全量に対して０ｍｏｌ％以上５５ｍｏｌ％以下であることが好ましく、０ｍｏｌ％以上４０ｍｏｌ％であることがより好ましい。
＜非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質＞
　本発明における脂質組成物は、油相に非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質を含んでもよい。本発明において、油相に非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質を含むことで、脂質組成物の分散安定化効果を得ることができる。
　非イオン性親水性高分子の例としては、特に限定されないが、非イオン性のビニル系高分子、非イオン性ポリアミノ酸、非イオン性ポリエステル、非イオン性ポリエーテル、非イオン性天然高分子、非イオン性改変天然高分子、これらの２種以上の高分子を構成単位とするブロック重合体またはグラフト共重合体が挙げられる。
　これらの非イオン性親水性高分子のうち、好ましくは非イオン性ポリエーテル、非イオン性ポリエステル、非イオン性ポリアミノ酸もしくは非イオン性合成ポリペプチドであり、さらに好ましくは非イオン性ポリエーテルまたは非イオン性ポリエステル、よりさらに好ましくは非イオン性ポリエーテルまたは非イオン性モノアルコキシポリエーテルであり、特に好ましくはポリエチレングリコール（ポリエチレングリコールは、以下においてＰＥＧとも称する）である。
　非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質としては、特に限定されないが、ＰＥＧ修飾ホスホエタノールアミン、ジアシルグリセロールＰＥＧ誘導体、モノアシルグリセロールＰＥＧ誘導体、ジアルキルグリセロールＰＥＧ誘導体、コレステロールＰＥＧ誘導体、セラミドＰＥＧ誘導体などが挙げられる。これらの中でも、モノアシルグリセロールＰＥＧもしくはジアシルグリセロールＰＥＧが好ましい。
　上記非イオン性親水性高分子誘導体のＰＥＧ鎖の重量平均分子量は、５００～５０００が好ましく、７５０～３０００がより好ましい。
　非イオン性親水性高分子鎖は分岐していてもよく、ヒドロキシメチル基のような置換基を有していてもよい。
　本発明の脂質組成物において、非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質の配合量は、全脂質量に対して０．１ｍｏｌ％～１２ｍｏｌ％であることが好ましく、０．３ｍｏｌ％～６ｍｏｌ％であることがより好ましく、０．５ｍｏｌ％～５ｍｏｌ％であることがさらに好ましい。
＜核酸、タンパク質、ペプチドおよび低分子＞
　本発明の脂質組成物は、核酸、タンパク質、ペプチドおよび低分子からなる群から選択される少なくとも一種を含んでいても良い。
　核酸としてはプラスミドＤＮＡ、ナノプラスミドＤＮＡ、１本鎖ＤＮＡ、２本鎖ＤＮＡ、ｓｉＲＮＡ（ｓｍａｌｌ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ　ＲＮＡ） 、ｍｉＲＮＡ（ｍｉｃｒｏ　ＲＮＡ）、ｍＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド(ＡＳＯとも言う)、リボザイム、アプタマー、ｄｓＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、ｓｇＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｔＲＮＡ、環状ＲＮＡ等が挙げられ、いずれを含んでもよい。また、修飾化された核酸を含んでもよい。核酸としては、ＲＮＡが特に好ましく、塩基数としては５～２００００塩基であるＲＮＡが好ましい。
　本発明の脂質組成物において、核酸に対する脂質の質量比は２～１０００であることが好ましく、３～５００であることがより好ましく、５～２００であることがさらに好ましく、５～１００であることが特に好ましい。
　タンパク質、ペプチドおよび低分子としては、細胞内タンパク質、細胞内ペプチド、膜貫通タンパク質、膜貫通ペプチド、分泌タンパク質、分泌ペプチド、合成タンパク質、合成ペプチド、天然低分子化合物、合成低分子化合物および抗腫瘍活性を有する化合物等が挙げられる。
　より具体的には、タンパク質としてはＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓタンパク質やＺｉｎｃ－Ｆｉｎｇｅｒ、ＴＡＬＥＮなどの遺伝子編集関連タンパク質、エリスロポエチンなどのホルモン、ＶＥＧＦなどの生体内因子、がん抗原タンパク質または抗体などが挙げられる。ペプチドとしては上記タンパク質の機能性ドメインや被認識ドメインなどが挙げられる。上述のタンパク質をコードするｍＲＮＡやＤＮＡを含んでいてもよい。
　ペプチドとしては、、天然であることが望ましい。また、ペプチド構造は直鎖状であっても環状であってもよい。ペプチドが環状の場合、その環の連結部は、アミド結合、ジスルフィド結合等が挙げられる。
　低分子化合物としては抗がん剤、抗菌剤および抗真菌剤などが挙げられる。
　これらタンパク質、ペプチドおよび低分子は、生体内で生理活性を有するものであってもよいし、生理活性を有さないものでもよい。ここで、低分子とは、分子量が約１,０００以下の有機化合物を指す。
＜脂質組成物の製造方法＞
　本発明の脂質組成物の製造方法について説明する。
　脂質組成物の製造方法は限定されないが、脂質組成物の構成成分全てまたは一部の油溶性成分を有機溶媒等に溶解させ油相とし、水溶性成分を水に溶解させ水相とし、油相と水相を混合して製造することができる。混合にはマイクロミキサーを使用してもよく、ホモジナイザー等の乳化機、超音波乳化機、高圧噴射乳化機等により乳化してもよい。
　あるいは、脂質を含む溶液をエバポレータなどによる減圧乾固または噴霧乾燥機などによる噴霧乾燥などにより脂質を含む乾燥した混合物を調製し、この混合物を水系溶媒に添加し、さらに前述の乳化機などで乳化することで製造することもできる。
　核酸を含む脂質組成物の製造方法の一例としては、
　工程（ａ）；本発明の化合物を含む脂質組成物の構成成分を有機溶媒に溶解して油相を、核酸を水性溶媒に溶解して水相を、それぞれ得る工程
　工程（ｂ）；工程（ａ）で得た油相と水相を混合して脂質粒子の分散液を得る工程
　工程（ｃ）；工程（ｂ）で得た脂質粒子の分散液を希釈する工程
　工程（ｄ）；脂質粒子の分散液から上記有機溶媒を除去する工程
　工程（ｅ）；脂質粒子の分散液の濃度を調節する工程
　を含む方法が挙げられる。
　工程（ａ）においては、本発明の化合物を含む脂質組成物の構成成分を、有機溶媒（エタノールなどのアルコール、またはエステルなど）に溶解させる。総脂質濃度は特に限定されないが、一般的には１ｍｍｏｌ／Ｌ～１００ｍｍｏｌ／Ｌであり、好ましくは５ｍｍｏｌ／Ｌ～５０ｍｍｏｌ／Ｌであり、より好ましくは１０ｍｍｏｌ／Ｌ～３０ｍｍｏｌ／Ｌである。
　水相は、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｍＲＮＡ、アンチセンス核酸など）を、水または緩衝液に溶解することで得ることができる。核酸の濃度は特に限定されないが、１～１０００μｇ／ｍＬが好ましく、１０～５００μｇ／ｍＬがより好ましい。必要に応じてｐＨ調整のための緩衝成分や酸化防止剤などの成分を添加することができる。水相のｐＨは２．０～７．０であることが好ましく、３．０～６．０であることがより好ましい。上記ｐＨに調整するために緩衝成分として酢酸、クエン酸、リンゴ酸、リン酸、ＭＥＳ、ＨＥＰＥＳなどが好ましく用いられ、必要に応じて塩強度を調整することを目的に、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの塩や、浸透圧を調整することを目的に、スクロース、トレハロース、マンニトールなどの糖や糖アルコールを添加してもよい。
　工程（ｂ）において、油相と水相は任意の方法で混合してよく、バッチ式でも流路デバイスを用いたインライン方式でもよい。インライン方式としてはマイクロ流路デバイスを用いることが好ましく、用いるマイクロ流路デバイスとしては、Ｙ字ミキサー、Ｔ字ミキサー、ヘリンボーンミキサー、リングマイクロミキサー、インピンジメントジェットミキサーなどを用いることができる。水相と油相を混合する比率（体積比）は、５：１～１：１が好ましく、４：１～２：１がより好ましい。
　工程（ｃ）において、脂質粒子の分散液を希釈溶液と混合することにより、有機溶媒の含率を下げ、脂質粒子を安定化することができる。希釈溶液は、水でもよいが、ｐＨや塩強度を調整することを含んでもよい。希釈溶液に含まれる成分は目的に応じて任意に選択することができる。例えば、ｐＨを調整する目的で、緩衝液（例えばクエン酸緩衝液、クエン酸緩衝生理食塩水、酢酸緩衝液、酢酸緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、トリス緩衝液、ＭＥＳ緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液など）を用いてもよい。また、塩強度や浸透圧を調整することを目的として塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロース、トレハロース、フルクトースまたはマンニトールなどを含んでもよく、上記緩衝液にこれらの添加剤をさらに添加したものも使用できる。
　脂質粒子の分散液と希釈溶液は任意の方法で混合してよく、バッチ式でも流路デバイスを用いたインライン方式でもよい。混合時に用いる流路デバイスは、Ｙ字ミキサー、Ｔ字ミキサーなどを用いることができる。また、油相と水相を混合してから希釈溶液を混合するまでの時間は特に限定されないが、油相及び水相を混合してから３０秒以内に希釈を実施することが好ましく、１０秒以内に希釈を実施することがより好ましい。
　脂質粒子の分散液と希釈溶液を混合する比率（液量比）は、１：０．５～１：１０が好ましく、１：１～１：５がより好ましい。
　いくつかの実施形態では、工程（ｃ）において脂質粒子の分散液は目的に応じて複数回希釈溶液と混合してもよい。また用いる希釈溶液は同一であっても異なっていてもよい。脂質粒子の分散液では、ｐＨによって脂質粒子の粒径が変化することがあり、分散液のｐＨ調整は重要となる。そのため、例えば希釈溶液との混合後の脂質粒子の分散液のｐＨを調整するために、それに適した濃度およびｐＨを有する緩衝液や、さらに他の成分を含む緩衝液を用いてもよい。
　さらに、複数の希釈工程は連続的に実施してもよく、希釈工程と次の希釈工程の間隔を任意に設定することができ、例えば、その間隔は１０秒、３０秒、１分、５分、１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、１２時間または２４時間であってもよい。
　また、工程（ｃ）を行った後の脂質粒子の分散液のｐＨはｐＨ３．０～１０．０が好ましく、ｐＨ３．５～ｐＨ９．０がより好ましく、ｐＨ４．０～ｐＨ８．５が特に好ましい。
　脂質組成物には、必要に応じてサイジングを施すことができる。サイジングの方法は、特に限定されないが、エクストルーダーなどを用いて粒子径を小さくすることができる。
　また、本発明の脂質組成物を含む分散液には、一般的な方法により、凍結や凍結乾燥を施すことができる。
　工程（ｄ）において、脂質粒子の分散液から有機溶媒を除去する方法としては、特に限定されず、一般的な手法を使用することができる。例えば、透析液としてはリン酸緩衝生理食塩水、トリス緩衝液などのｐＨ緩衝液を用いることができ、必要に応じて浸透圧の調整や凍結からの保護を目的として任意の塩や糖などの添加剤を加えることができる。
　工程（ｅ）において、工程（ｄ）で得られた脂質粒子の分散液の濃度を調整することができる。希釈する場合は、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、トリス緩衝液、スクロース含有トリス緩衝液などの溶液を希釈液として用いて適切な濃度に希釈することができる。濃縮する場合は、工程（ｄ）で得られた分散液を、限外ろ過膜を用いた限外ろ過などにより濃縮することができる。濃縮した分散液をそのまま用いても好ましく、濃縮した後に上記希釈液を用いて所望の濃度に調整しても好ましい。
　また、いくつかの実施形態では、接線流ろ過（ＴＦＦ）を用いて有機溶媒除去工程（工程（ｄ））、濃度調整工程（工程（ｅ））を連続的に行うことができる。本工程において有機溶媒除去工程と濃度調整工程を任意の順番で実施してもよい。必要に応じて有機溶媒除去工程と濃度調整工程をそれぞれ複数回ずつ実施してもよい。
　工程（ｄ）における透析や、工程（ｅ）における希釈において用いることのできる溶液としては、賦形剤、凍結保護剤、緩衝剤や酸化防止剤を添加してもよい。賦形剤や凍結保護剤としては、特に限定されないが、糖類や糖アルコール類が挙げられる。糖類としては、例えばスクロース、トレハロース、マルトース、グルコース、ラクトース、フルクトースなどが、糖アルコール類としては、例えばマンニトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトールなどが挙げられる。緩衝剤としては、特に限定されないが、例えば、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、Ｂｉｃｉｎｅ、ＣＡＰＳ、ＣＨＥＳ、ＤＩＰＳＯ、ＥＰＰＳ、ＨＥＰＥＳ、ＨＥＰＰＳＯ、ＭＥＳ、ＭＯＰＳ、ＭＯＰＳＯ、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳＯ、ＴＥＳ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、トリス、リン酸、酢酸、クエン酸などが挙げられる。酸化防止剤としては、ＥＤＴＡ、アスコルビン酸、トコフェロールなどが挙げられる。
　本発明の脂質粒子の分散液を医薬組成物とするために、無菌ろ過を行うことが好ましい。ろ過の方法としては、中空糸膜、逆浸透膜、メンブレンフィルターなどを用いて、脂質粒子の分散液から不溶なものを除去することができる。本発明では、特に限定されないが、滅菌できる孔径を有するフィルター（好ましくは０．２μｍのろ過滅菌フィルター）によってろ過することが好ましい。また、無菌ろ過を行うのは、工程（ｄ）または工程（ｅ）のあとが好ましい。
　さらに必要に応じて本発明の脂質粒子の分散液を、凍結や凍結乾燥を施すことができる。本発明の脂質粒子の分散液は、一般的な方法により凍結や凍結乾燥を施すことができ、その手法は特に限定されない。
＜脂質組成物について＞
　本発明において、脂質組成物は脂質粒子でもよい。脂質粒子とは、脂質から構成される粒子を意味し、脂質が凝集している脂質凝集体、ミセル、リポソーム、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）、リポプレックスから選択されるいずれかの構造を有する組成物が含まれるが、脂質を含む組成物である限り脂質粒子の構造はこれらに限定されない。リポソームとしては、脂質二重層構造を有し、内部に水相を有し、二重膜が単層のリポソーム、多数層状に重なった多重層リポソームがある。本発明にはどちらのリポソームが含まれてもよい。
　脂質粒子の形態は、電子顕微鏡観察またはエックス線を用いた構造解析などにより確認できる。例えば、Ｃｒｙｏ透過型電子顕微鏡観察（ＣｒｙｏＴＥＭ法）を用いた方法により、リポソームのように脂質粒子が脂質二分子膜構造（ラメラ構造）および内水層を持つ構造であるか、粒子内部に電子密度が高いコアを持ち、脂質をはじめとする構成成分が詰まった構造を有しているか、などが確認できる。エックス線小角散乱（ＳＡＸＳ）測定によっても、脂質粒子についての脂質二分子膜構造（ラメラ構造）の有無を確認できる。
　本発明の脂質粒子の粒子径は特に限定されないが、好ましくは１０～１０００ｎｍであり、より好ましくは３０～５００ｎｍであり、さらに好ましくは５０～２５０ｎｍである。脂質粒子の粒子径は、一般的な方法（例えば、動的光散乱法、レーザー回折法など）により測定することができる。
＜脂質組成物の利用＞
　本発明における脂質組成物の利用の一例としては、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子を含む脂質組成物を細胞に導入することによって、細胞に核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子を導入することができる。また、本発明における脂質組成物に、医薬用途を有する、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子を含む場合、脂質組成物は医薬組成物として生体に投与することができる。
　また、脂質組成物としては、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子を含まず、脂質成分のみの脂質組成物であってもよい。脂質成分のみの脂質組成物を調製し、後から核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子と混合することで、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子を含む脂質組成物を得ることもできる。
　本発明における脂質組成物を医薬組成物として使用する場合には、本発明の脂質組成物は単独でまたは薬学的に許容される投与媒体（例えば、生理食塩水またはリン酸緩衝液）と混合して、生体に投与することができる。
　薬学的に許容される投与媒体との混合物中における脂質組成物の濃度は、特に限定されず、一般的には０．０５質量％から９０質量％とすることができる。また、本発明の脂質組成物を含む医薬組成物には、薬学的に許容される他の添加物質、例えば、ｐＨ調整緩衝剤、浸透圧調整剤などを添加してもよい。
　本発明の脂質組成物を含む医薬組成物を投与する際の投与経路は、特に限定されず、任意の方法で投与することができる。投与方法としては、経口投与、非経口投与（関節内投与、静脈内投与、動脈内投与、皮下投与、皮内投与、硝子体内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、膣内投与、膀胱内投与、髄腔内投与、肺投与、直腸投与、結腸投与、頬投与、鼻投与、大槽内投与、吸入など）が挙げられる。非経口投与が好ましく、投与方法としては静脈注射、皮下注射、皮内注射または筋肉内注射が好ましい。本発明の脂質組成物を含む医薬組成物は、疾患部位に直接注射することにより投与することもできる。
　本発明の脂質組成物の剤形は、特に限定されないが、経口投与を行う場合には、本発明の脂質組成物は、適当な賦形剤と組み合わせて、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、丸剤、懸濁剤、シロップ剤などの形態で使用することができる。また、非経口投与に適した製剤には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌薬、および等張滅菌注射剤、懸濁化剤、溶解補助剤、粘稠化剤、安定化剤または保存料などの添加剤を適宜含めることができる。
＜送達キャリア＞
　本発明の脂質組成物は、高い内包率で核酸を保持することが可能であるため、核酸のための送達キャリアとして非常に有用である。本発明を利用した送達キャリアによれば、例えば、得られた脂質組成物を核酸などと混合して、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ　ｖｉｖｏでトランスフェクションをすることにより、細胞に核酸などを導入することができる。また、本発明を利用した送達キャリアは、核酸医薬における核酸送達キャリアとしても有用である。すなわち、本発明の脂質組成物は、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ　ｖｉｖｏ（好ましくはｉｎ　ｖｉｖｏ）での核酸送達のための組成物として有用である。
　次に本発明について実施例を挙げて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
　特に記載のない場合、カラムクロマトグラフィーによる精製は、自動精製装置ＩＳＯＬＥＲＡ（Ｂｉｏｔａｇｅ社）、中圧分取精製装置Ｐｕｒｉｆ－ｅｓｐｏｉｒ－２（昭光サイエンス株式会社）または中圧液体クロマトグラフＹＦＬＣ Ｗ－ｐｒｅｐ ２ＸＹ（山善株式会社）を使用した。
　特に記載のない場合、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにおける担体は、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ　Ｑ－Ｐａｃｋ　ＳＩ５０（富士シリシア化学株式会社）、ハイフラッシュカラムＷ００１、Ｗ００２、Ｗ００３、Ｗ００４またはＷ００５（山善株式会社）を使用した。
ＮＨシリカゲルは、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｑ－Ｐａｃｋ ＮＨ６０（富士シリシア化学株式会社）を使用した。
　ＮＭＲスペクトルは、内部基準としてテトラメチルシランを用い、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＮＥＯ４００（Ｂｒｕｋｅｒ社製）を用いて測定し、全δ値をｐｐｍで示した。
　ＭＳスペクトルは、ＡＣＱＵＩＴＹ ＳＱＤ ＬＣ／ＭＳ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を用いて測定した。
比較例
ＷＯ２０１９／２３５６３５に記載の方法（［実施例１０８］２－ブチルオクチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（オクタノイルオキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート）に従って、合成した。
［実施例１］
（１） 
　１０－オキソヘキサデカン酸1.0gのジクロロメタン10mL溶液に、オクタン－1－オール0.64mL、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩1.0g、４－ジメチルアミノピリジン0.9g及びトリエチルアミン2.1mLを添加し、室温で6時間攪拌した。反応混合物を減圧下で溶媒を留去後、酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、白色固体の１０－オキソヘキサデカン酸オクチル（Ａ１）1.1gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 2.37 (4H, t, J=7.4Hz), 2.28 (2H, t, J=7.6Hz), 1.65-1.50 (10H, m), 1.36-1.21 (22H, m), 0.91-0.84 (6H, m).
（２）
　１０－オキソヘキサデカン酸オクチル（Ａ１）1.1gのテトラヒドロフラン6mL及びメタノール6mLの混合溶液に、氷冷下で水素化ホウ素ナトリウム0.17gを添加し、氷冷下0.5時間攪拌した。反応混合物を氷水へ滴下後、1N塩酸水溶液を酸性になるまで添加した。酢酸エチルを添加後、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物の１０－ヒドロキシヘキサデカン酸オクチル（Ａ２）1.1gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:24.69 (1H, t, J=5.5Hz), 4.08 (2H, d, J=5.5Hz), 3.75-3.67 (2H, m), 3.61-3.53 (2H, m), 3.22-3.15 (4H, m), 1.55-1.47 (4H, m), 1.33-1.20 (26H, m), 0.90-0.85 (6H, m).
（３）
　１０－ヒドロキシヘキサデカン酸オクチル（Ａ２）1.1gのテトラヒドロフラン11mL溶液に、クロロギ酸４－ニトロフェニル0.87g及びトリエチルアミン1.2mLを添加し、室温で2時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物の１０－（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデカン酸オクチル（Ａ３）1.58gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:8.28 (2H, d, J=9.2Hz), 7.38 (2H, d, J=9.2Hz), 4.86-4.76 (1H, m), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 2.28 (2H, t, J=7.5Hz), 1.77-1.52 (8H, m), 1.47-1.21 (28H, m), 0.95-0.82 (6H, m).
（４）
　１０－（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデカン酸オクチル（Ａ３）1.58gのテトラヒドロフラン16mL溶液に、２,２’－（（2-(ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－1－オール）1.47g、４－ジメチルアミノピリジン1.05g及びトリエチルアミン1.2mLを添加し、80℃で5時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール－酢酸エチル)で精製した後、NHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物のオクチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－ヒドロキシエチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート（Ａ４）1.05gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.72-4.63 (1H, m), 4.19 (2H, t, J=5.9Hz), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 3.53 (2H, t, J=5.0Hz), 2.88 (2H, t, J=6.1Hz), 2.73-2.64 (4H, m), 2.58-2.50 (4H, m), 2.47 (2H, t, J=6.0Hz), 2.28 (2H, t, J=7.6Hz), 1.66-1.45 (10H, m), 1.38-1.20 (26H, m), 1.15 (6H, t, J=7.1Hz), 0.92-0.83 (6H, m).
（５）
オクチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－ヒドロキシエチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート（Ａ４）300mgのジクロロメタン3mL溶液に、２－ブチルオクタン酸153mg、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩191mg、４－ジメチルアミノピリジン179mg及びトリエチルアミン0.4mLを添加し、室温で一晩攪拌した。反応混合物を減圧下で溶媒を留去後、酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物を シリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール－酢酸エチル)で精製した後、NHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物のオクチル　６－（２－（（２－ブチルオクタノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート（化合物１）358mgを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.71-4.63 (1H, m), 4.19-4.09 (4H, m), 4.05 (2H, m), 2.87-2.78 (4H, m), 2.71-2.63 (2H, m), 2.57-2.47 (6H, m), 2.34-2.24 (3H, m), 1.67-1.49 (12H, m), 1.47-1.18 (40H, m), 1.01 (6H, t, J=7.1Hz), 0.93-0.83 (12H, m).
MS m/z(M+H):798.
［実施例２］
（１）
　２－（エチルアミノ）エタノール1.6gのエタノール32mL溶液に、ベンジル２－ブロモエチルエーテル5.0g及び炭酸カリウム7.4gを添加し、室温で15分攪拌した後、加熱還流下12時間攪拌した。反応混合物の不溶物をろ去後、ろ液を減圧下留去した。得られた残留物をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物の２－（（２－（ベンジルオキシ）エチル）（エチル）アミノ）エタン－１－オール（Ｂ１）3.13gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:7.37-7.23 (5H, m), 4.53 (2H, s), 3.58-3.53 (4H, m), 2.76 (2H, t, J=5.7Hz), 2.70-2.61 (4H, m), 1.04 (3H, t, J=7.1Hz).
（２）
　２－（（２－（ベンジルオキシ）エチル）（エチル）アミノ）エタン－１－オール（Ｂ１）1.0gのテトラヒドロフラン16mL溶液に、四臭化炭素3.0gを添加後、氷冷下でトリフェニルホスフィン2.3gのテトラヒドロフラン4mL溶液を滴下し、室温で1時間攪拌し、２－（ベンジルオキシ）－Ｎ－（２－ブロモエチル）－Ｎ－エチルエタン－１－アミン（Ｂ２）の混合物を得た。得られた反応混合物に、エタノール52mL、ジエタノールアミン0.95g及び炭酸カリウム1.9gを添加し、室温で15分攪拌した後、加熱還流下3時間攪拌した。反応混合物の不溶物をろ去後、ろ液を減圧下留去した。得られた残留物をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、淡黄色油状物の２，２’－（（２－（（２－（ベンジルオキシ）エチル）（エチル）アミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）（Ｂ３）1.22gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:7.39-7.24 (5H, m), 4.53 (2H, s), 3.66-3.51 (6H, m), 2.82-2.55 (14H, m), 1.07 (3H, t, J=7.0Hz).
（３）
　実施例２（１）、（２）と同様の方法により、２，２’－（（２－（（３－（ベンジルオキシ）プロピル）（エチル）アミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）（Ｂ４）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:7.38-7.23 (5H, m), 4.49 (2H, s), 3.61-3.54 (4H, m), 3.50 (2H, t, J=6.1Hz), 2.73-2.48 (12H, m), 1.87-1.74 (2H, m), 1.06 (3H, t, J=7.1Hz).
（４）
　実施例２（１）、（２）と同様の方法により、２，２’－（（２－（（４－（ベンジルオキシ）ブチル）（エチル）アミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）（Ｂ５）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:7.36-7.24 (5H, m), 4.49 (2H, s), 3.62-3.54 (4H, m), 3.52-3.45 (2H, m), 2.73-2.45 (12H, m), 1.65-1.53 (4H, m), 7.04 (3H, t, J=7.0Hz).
［実施例３］
（１）
　６０％水素化ナトリウム0.45gのテトラヒドロフラン15mL混合物に、氷冷下でオクタン酸1.5gを分割添加後、同温度で30分間攪拌した。反応混合物に氷冷下で、1mol/Lリチウムジイソプロピルアミド（テトラヒドロフラン・ヘプタン溶液）12mLを滴下し、室温で30分間攪拌後、１－ヨードヘキサン2.7gを滴下し、45℃で2時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル及び氷水を添加し、1N塩酸水溶液を酸性になるまで添加した。有機層を分取後、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、黄色油状物の２－ヘキシルオクタン酸（Ｃ１）1.33gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:2.41-2.31 (1H, m), 1.67-1.41 (4H, m), 1.36-1.20 (16H, m), 0.94-0.83 (6H, m).
（２）
　ジメチルスルホキシド50mL及びトルエン30mLの混合物に、粉末状の水酸化カリウム6.6gを添加し、氷冷下でマロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル10gのトルエン10mL溶液及び１－ブロモヘプタン19.9gのトルエン10mL溶液を添加し、30℃以下で1晩撹拌した。反応混合物を氷浴で撹拌し、塩酸を加えて中和した後、有機層を分取した。得られた有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去し、淡黄色油状物の２，２－ジヘプチルマロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（Ｃ２）22.9gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:1.79-1.74 (4H, m), 1.44 (18H, s), 1.32-1.10 (20H, m), 0.87 (6H, t, J=6.8Hz).
（３）
　２，２－ジヘプチルマロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（Ｃ２）22.9gのトルエン23mL及び水2.3mLの混合物に、トリフルオロ酢酸45mLを添加後、室温にて2時間撹拌し、減圧下溶媒を留去した。残留物にヘキサン23mLを添加し、氷冷撹拌後、生じた固形物をろ取した。得られた固形物を乾燥させ白色固体の２，２－ジヘプチルマロン酸（Ｃ３）11.7gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:1.97-1.92 (4H, m), 1.32-1.17 (20H, m), 0.87 (6H, t, J=7.3Hz).
（４）
　２，２－ジヘプチルマロン酸（Ｃ３）11.7gを165℃で3時間撹拌し、淡黄色油状物の２－ヘプチルノナン酸（Ｃ４）11.7gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:2.39-2.32 (1H, m), 1.96-1.93 (1H, m), 1.68-1.41 (4H, m), 1.36-1.16 (20H, m), 0.89-0.85 (6H, m).
（５）
　実施例３（２）で、１－ブロモヘプタンを用いた代わりに１－ブロモオクタンを用いること以外は実施例３（２）～（４）と同様の方法で、淡黄色固体の２－オクチルデカン酸（Ｃ５）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:2.38-2.31 (1H, m), 1.68-1.41 (4H, m), 1.36-1.18 (24H, m), 0.89-0.86 (6H, m).
［実施例４］
（１）
　ＷＯ２０１９／２３５６３５に記載の方法に従って合成した５－オキソウンデカン酸4.0gのトルエン30mL溶液に、１－オクタノール2.4mL及び４－トルエンスルホン酸一水和物130mgを添加し、加熱還流下5時間攪拌した。反応混合物の溶媒を減圧下で留去後、残留物をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、淡黄色油状物の５－オキソウンデカン酸オクチル（Ａ５）4.6gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 2.46 (2H, t, J=7.2Hz), 2.41-2.28 (4H, m), 1.93-1.83 (2H, m), 1.65-1.49 (4H, m), 1.37-1.20 (16H, m), 0.92-0.83 (6H, m).
（２）
実施例１（１）または実施例４（１）と同様の方法により、表１の中間体（Ａ６）～（Ａ９）を得た。
［実施例５］
中間体（Ａ５）～（Ａ９）を原料として、実施例１（２）と同様の方法により、表２の中間体（Ａ１０）～（Ａ１４）を得た。
［実施例６］
（１）
　１０－ヒドロキシヘキサデカン酸ヘキシル（Ａ１０）1.8gのテトラヒドロフラン18mL溶液に、１,１’－カルボニルジ（１,２,４－トリアゾール）1.3gを添加し、室温下6時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物の１６－（ヘキシルオキシ）－１６－オキソヘキサデカン－７－イル　１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－カルボキシラート（Ａ１５）2.3gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:8.81 (1H, s), 8.07 (1H, s), 5.21-5.11 (1H, m), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 2.28 (2H, t, J=7.5Hz), 1.84-1.65 (4H, m), 1.65-1.53 (4H, m), 1.44-1.21 (24H, m), 0.92-0.83 (6H, m).
（２）
中間体（Ａ１１）～（Ａ１４）を原料として、実施例６（１）と同様の方法により、表３の中間体（Ａ１６）～（Ａ１９）を得た。
［実施例７］
（１）
　１６－（ヘキシルオキシ）－１６－オキソヘキサデカン－７－イル　１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－カルボキシラート（Ａ１５）2.3gのアセトニトリル23mL溶液に、２,２’－（（２－（ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）2.1g及び１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン2.3mLを添加し、50℃で3時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル及び水を添加し、有機層を分取した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール－酢酸エチル)で精製した後、NHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物のヘキシル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－ヒドロキシエチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート（Ａ２０）1.5gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.71-4.63 (1H, m), 4.19 (2H, t, J=5.8Hz), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 3.53 (2H, t, J=5.0Hz), 2.88 (2H, t, J=6.1Hz), 2.73-2.64 (4H, m), 2.58-2.50 (4H, m), 2.47 (2H, t, J=5.9Hz), 2.28 (2H, t, J=7.6Hz), 1.70-1.45 (8H, m), 1.41-1.21 (24H, m), 1.02 (6H, t, J=7.1Hz), 0.93-0.82 (6H, m).
MS m/z(M+H):588.
（２）
中間体（Ａ１６）～（Ａ１９）を原料として、実施例７（１）と同様の方法により、表４の中間体（Ａ２１）～（Ａ２４）を得た。
［実施例８］
中間体（Ａ１６）並びに中間体（Ｂ３）～（Ｂ５）を原料として、実施例７（１）と同様の方法により、表５の中間体（Ａ２５）～（Ａ２７）を得た。
［実施例９］
中間体（Ａ２０）～（Ａ２７）並びに中間体（Ｃ１）、（Ｃ４）、（Ｃ５）及びＷＯ２０１９／２３５６３５に記載の３－ヘプチルデカン酸を原料として、実施例１（５）と同様の方法により、表６の化合物群、ヘキシル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート（化合物２）、ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物３）、ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物４）、ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物５）、ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物６）、オクチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物７）、オクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物８）、２－ペンチルヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物９）、２－ヘキシルオクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物１０）、オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１－フェニル－２，１１，１３－トリオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物１１）、オクチル　６－エチル－９－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１５－ヘキシル－１３－オキソ－１－フェニル－２，１２，１４－トリオキサ－６，９－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物１２）及びオクチル　７－エチル－１０－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１６－ヘキシル－１４－オキソ－１－フェニル－２，１３，１５－トリオキサ－７，１０－ジアザイコサン－２０－オエート（化合物１３）を得た。
［実施例１０］
（１）
　オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１－フェニル－２，１１，１３－トリオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物１１）240mgのメタノール5mL溶液に、１０％パラジウム炭素 （５５％水湿潤品）72mg及びギ酸アンモニウム167mgを添加し、還流下3時間攪拌した。不溶物をセライトろ去後、ろ液を減圧下に留去した。得られた残留物をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－ヘキサン)で精製し、無色油状物のオクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物１４）147mgを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ:4.74-4.64 (1H, m), 4.24-4.11 (4H, m), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 3.62-3.48 (2H, m), 2.89-2.77 (4H, m), 2.76-2.45 (8H, m), 2.31 (2H, t, J=6.9Hz), 2.22 (2H, d, J=6.8Hz), 1.87-1.78 (1H, m), 1.76-1.47 (8H, m), 1.38-1.17 (42H, m), 1.12-0.98 (3H, m), 0.94-0.82 (12H, m).
MS m/z(M+H):814.
（２）
実施例１０（１）と同様の方法により、表７の化合物、オクチル　４－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－４，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート（化合物１５）及びオクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物１６）を得た。
［実施例１１］
（１）
　実施例３（２）で、１－ブロモヘプタンを用いた代わりに１－ブロモノナンを用いること以外は実施例３（２）～（４）と同様の方法で、淡黄色固体の２－ノニルウンデカン酸（Ｃ６）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 2.39-2.28 (1H, m), 1.70-1.55 (2H, m), 1.54-1.39 (2H, m), 1.37-1.16 (28H, m), 0.93-0.81 (6H, m).
（２）
　実施例３（２）で、１－ブロモヘプタンを用いた代わりに１－ブロモデカンを用いること以外は実施例３（２）～（４）と同様の方法で、淡黄色固体の２－デシルドデカン酸（Ｃ７）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 2.40-2.28 (1H, m), 1.70-1.54 (2H, m), 1.54-1.39 (2H, m), 1.38-1.17 (32H, m), 0.93-0.81 (6H, m).
（３）
　３，３’－アザンジイルビス（プロパン－１－オール）2.0gのアセトニトリル20mL溶液に、３－クロロ－Ｎ，Ｎ－ジエチルプロパン－１－アミン3.2g及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン5.2gを添加し、６０℃で５時間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、得られた残留物をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル－メタノール)で精製し、淡黄色油状物の３，３’－（（３－（ジエチルアミノ）プロピル）アザンジイル）ビス（プロパン－１－オール）（Ｂ６）3.1gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 3.74 (4H, t, J=5.6Hz), 2.62 (4H, t, J=6.3Hz), 2.53 (4H, q, J=7.1Hz), 2.48-2.39 (4H, m), 1.89-1.54 (8H, m), 1.02 (6H, t, J=7.1Hz).
（４）
中間体（Ａ１７）を原料として、２,２’－（（２－（ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）の代わりに、ＷＯ２０２２／２３０９６４に記載の２，２’－（（３－（ジエチルアミノ）プロピル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）を用い、実施例７（１）と同様の方法により、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－ヒドロキシエチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート（ＡＸ１）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 4.74-4.62 (1H, m), 4.22-4.11 (2H, m), 4.05 (2H, t, J=6.8Hz), 3.60-3.53 (2H, m), 2.76 (2H, t, J=6.1Hz), 2.66-2.40 (10H, m), 2.35-2.27 (2H, m), 1.77-1.47 (8H, m), 1.38-1.20 (18H, m), 1.02 (6H, t, J=7.2Hz), 0.93-0.82 (6H, m).
MS m/z(M+H): 546.
（５）
ＷＯ２０１９／２３５６３５に記載の実施例８４（１）にて、１０－メトキシ－１０－オキソデカン酸の代わりに、アジピン酸モノメチルを用いること、および２－ブチルオクタン－１－オールの代わりに、１－ヘプタノールを用いること以外は同様にして、６－ヒドロキシドデカン酸ヘプチル（ＡＸ２）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 4.06 (2H, t, J=6.8Hz), 3.65-3.53 (1H, m), 2.32 (2H, t, J=7.4Hz), 1.74-1.20 (27H, m), 0.94-0.82 (6H, m).
（６）
中間体（ＡＸ２）を原料として、実施例６（１）と同様の方法により、１－（ヘプチルオキシ）－１－オキソドデカン－６－イル１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－カルボキシラート（ＡＸ３）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 8.82 (1H, s), 8.07 (1H, s), 5.21-5.12 (1H, m), 4.04 (2H, t, J=6.8Hz), 2.31 (2H, t, J=7.4Hz), 1.87-1.50 (10H, m), 1.43-1.19 (18H, m), 0.93-0.81 (6H, m).
（７）
中間体（ＡＸ３）を原料として、実施例１１（４）と同様の方法により、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－ヒドロキシエチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（ＡＸ４）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 4.74-4.63 (1H, m), 4.23-4.11 (2H, m), 4.05 (2H, t, J=6.8Hz), 3.60-3.53 (2H, m), 2.76 (2H, t, J=6.1Hz), 2.66-2.40 (10H, m), 2.30 (2H, t, J=7.5Hz), 1.71-1.47 (10H, m), 1.45-1.20 (19H, m), 1.02 (6H, t, J=7.1Hz), 0.93-0.82 (6H, m).
MS m/z(M+H):560.
（８）
中間体（ＡＸ３）を原料として、２,２’－（（２－（ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）の代わりに、ＷＯ２０２２／２３０９６４に記載のに記載の３，３’－（（２－（ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（プロパン－１－オール）を用い、実施例７（１）と同様の方法により、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－ヒドロキシプロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（ＡＸ５）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 5.83 (1H, brs), 4.74-4.63 (1H, m), 4.23-4.11 (2H, m), 4.05 (2H, t, J=6.7Hz), 3.72 (2H, t, J=5.3Hz), 2.63-2.46 (12H, m), 2.30 (2H, t, J=7.5Hz), 1.91-1.79 (2H, m), 1.73-1.46 (10H, m), 1.45-1.20 (18H, m), 1.02 (6H, t, J=7.2Hz), 0.93-0.83 (6H, m).
MS m/z(M+H):538.
（９）
中間体（ＡＸ３）を原料として、２,２’－（（２－（ジエチルアミノ）エチル）アザンジイル）ビス（エタン－１－オール）の代わりに、中間体（Ｂ６）を用い、実施例７（１）と同様の方法により、ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－ヒドロキシプロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（ＡＸ６）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ: 4.99 (1H. brs), 4.74-4.63 (1H, m), 4.22-4.11 (2H, m), 4.05 (2H, t, J=6.8Hz), 3.81-3.74 (2H, m), 2.68-2.60 (2H, m), 2.59-2.36 (10H, m), 2.30 (2H, t, J=7.5Hz), 1.92-1.80 (2H, m), 1.73-1.46 (12H, m), 1.45-1.20 (18H, m), 1.01 (6H, t, J=7.2Hz), 0.92-0.84 (6H, m).
MS m/z(M+H):589.
［実施例１２］
　中間体（Ａ２２）、（ＡＸ１）、（ＡＸ４）、（ＡＸ５）、（ＡＸ６）並びに中間体（Ｃ１）、（Ｃ４）、（Ｃ５）、（Ｃ６）、（Ｃ７）、２－ヘキシルデカン酸、及びＷＯ２０１９／２３５６３５に記載の３－ヘプチルデカン酸を原料として、実施例１（５）と同様の方法により、表８の化合物群、ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物１７）、ヘプチル６－（２－（（２－デシルドデカノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物１８）、ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート（化合物１９）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート（化合物２０）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２１）、ヘプチル３－エチル－７－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２２）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２３）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２４）、ヘプチル３－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２５）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２６）、ヘプチル３－エチル－６－（３－（（２－ヘプチルノナニル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２７）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２８）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物２９）、ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物３０）、ヘプチル３－エチル－６－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート（化合物３１）、ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３２）、ヘプチル３－エチル－７－（３－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３３）、ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３４）、ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３５）、ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３６）、ヘプチル３－エチル－７－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート（化合物３７）を得た。
試験例１：ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子の調製とマウスにおけるレポータータンパク発現率の測定
＜ＥＰＯ（エリスロポエチン）ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子の調製＞
　表９に記載の化合物、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフォコリン(製品名：ＣＯＡＴＳＯＭＥ（Ｒ）ＭＣ－８０８０；ＮＯＦ　ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ) （以下、ＤＳＰＣ）、コレステロール（製品名：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ＨＰ；日本精化株式会社）、１，２－ジミリストイル－ｒａｃ－グリセロ－３－（メチルポリオキシエチレン２０００）（以下、ＤＭＧ－ＰＥＧ２０００）（製品名：ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ（Ｒ）ＧＭ－０２０；ＮＯＦ　ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を、表９に記載の化合物：１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフォコリン：コレステロール：ＤＭＧ－ＰＥＧ２０００＝５０：１０：３８．５：１．５のモル比（ｍｏｌ％）で、総脂質濃度が１２．５ｍｍｏｌ／Ｌとなるようにエタノールに溶解させ、油相を得た。
　ＥＰＯ　ｍＲＮＡ（製品名：ＣｌｅａｎＣａｐ　ＥＰＯ　ｍＲＮＡ（５ｍｏＵ）；ＴｒｉＬｉｎｋ）をｐＨ４．０の５０ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸バッファーで、総脂質濃度のｍＲＮＡ濃度に対する重量比が約２０：１になるように希釈して水相を得た。つづいて水相と油相の体積比が水相：油相＝３：１となるようにＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ＮａｎｏＳｙｓｔｅｍｓ）を使用して混合し、混合液をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）もしくは水で２倍希釈してｍＲＮＡ脂質ナノ粒子の分散液を得た。この分散液を８％スクロースを含む２０ｍＭ　Ｔｒｉｓ緩衝液にて透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ　Ｇ２，　ＭＷＣＯ：１０ｋＤ，　Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて透析することによりエタノールの除去を行い、ＥＰＯ　ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子を得た。
＜粒子径・多分散指数（ＰｄＩ）の測定＞
　ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子の粒子径および多分散指数（ＰｄＩ）は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈した脂質ナノ粒子分散液を粒径測定装置ＮａｎｏＳＡＱＬＡ（大塚電子）を用いて、測定することで得た。結果を表９に示す。
＜ｍＲＮＡの内包率の評価＞
（総ｍＲＮＡ濃度定量）
　ＥＰＯ　ｍＲＮＡをＭｉｌｌｉＱ水で希釈して１００μｇ／ｍＬから３．１μｇ／ｍＬまでの２倍希釈系列で希釈サンプルを調製し、検量線溶液を調製した。検量線溶液もしくはｍＲＮＡ脂質ナノ粒子５０μＬをメタノール４５０μＬと混合して測定溶液を調製した。
　ＵＶプレートリーダー（Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ　Ｇｏ，Ｔｈｅｒｍｏ　ｆｉｓｈｅｒ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて各測定溶液の２６０ｎｍおよび３３０ｎｍにおける吸光度を測定し、２６０ｎｍの吸光度から３３０ｎｍの吸光度を差し引き、各測定溶液の吸光度とした。各サンプル測定溶液の吸光度を用いて、検量線から全水相核酸濃度を算出した。
（外水相におけるｍＲＮＡ濃度の定量）
　Ｑｕａｎｔ－ｉＴ　ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ　ＲＮＡ　Ａｓｓａｙ　Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用い、標準添加法により外水相核酸濃度を定量した。まず、上述のキットに含まれる２０×ＴＥバッファーを水で希釈し、１×ＴＥバッファーとした。なお、ＴＥは、Ｔｒｉｓ／ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を示す。ＥＰＯ ｍＲＮＡを終濃度が０～４００ｎｇ/ｍＬになるようにＴＥバッファーで希釈し、核酸希釈系列を調製した。ＴＥバッファーで５倍希釈したｍＲＮＡ脂質ナノ粒子を１０μＬと核酸希釈系列９０μＬを９６ウェルプレートで混合後、ＴＥバッファーで２００倍に希釈したＲｉｂｏＧｒｅｅｎ試薬１００μLを各ウェルに加え，蛍光プレートリーダー（Ｉｎｆｉｔｉｔｅ　２００　Ｐｒｏ　Ｍ　ｎａｎｏ　＋、ＴＥＣＡＮ）を用いて蛍光 (励起波長：４８５　ｎｍ，蛍光波長：５３５　ｎｍ) を測定した。得られた結果から標準添加法に則り、各測定溶液の外水相核酸濃度を算出した。
（内包率の算出）
　上述の工程で得られた総ｍＲＮＡ濃度および外水相でのｍＲＮＡ濃度の定量結果を用いて、下記式に従って、ｍＲＮＡ脂質ナノ粒子のｍＲＮＡ内包率を算出した。結果を表９に示す。
ｍＲＮＡ内包率（％）＝（総ｍＲＮＡ濃度－外水相におけるｍＲＮＡ濃度）÷総ｍＲＮＡ濃度×１００
＜ＥＰＯ酵素活性測定＞
　ＩＣＲマウスに上記＜ＥＰＯ　ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子の調製＞において調製したｍＲＮＡ脂質ナノ粒子の分散液をｍＲＮＡ投与量として０．１ｍｇ／ｋｇになるように静脈内投与した。投与６時間後に後大静脈より採血を行い、血漿を得た。得られた血漿を用いてＥｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ （ＥＰＯ） Ｈｕｍａｎ Ｅｌｉｓａ Ｋｉｔ（Ａｂｃａｍ）を使用してヒトＥＰＯ酵素活性を定量した。定量値は比較例を１としたときの相対的ＥＰＯタンパク量で記載した。
　結果を表１０に示す。
　比較例の核酸脂質組成物と比べて、本発明の核酸脂質組成物は、ＥＰＯタンパク発現率が高いことが示された。
＜ＥＰＯ酵素活性測定（用量反応性）＞
　ＩＣＲマウスに上記＜ＥＰＯ　ｍＲＮＡ内包脂質ナノ粒子の調製＞において調製したｍＲＮＡ脂質ナノ粒子の分散液をｍＲＮＡ投与量として０．１、０．５、１ｍｇ／ｋｇになるように静脈内投与した。投与６時間後に後大静脈より採血を行い、血漿を得た。得られた血漿を用いてＥｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ （ＥＰＯ） Ｈｕｍａｎ Ｅｌｉｓａ Ｋｉｔ（Ａｂｃａｍ）を使用してヒトＥＰＯ酵素活性を定量した。定量値は比較例の０．１ｍｇ／ｋｇ投与時のＥＰＯタンパク量を１としたときの相対的ＥＰＯタンパク量で記載した。
　結果を表１１と図１に示す。
　比較例の核酸脂質組成物と比べて、本発明の核酸脂質組成物は、ＥＰＯタンパクを用量反応的に発現することが示された。

Claims (10)

  1. 下記式（１）で示される化合物またはその塩。
    式中、Ｒ１は、炭素数１～２４の炭化水素基を示し、
    　Ｒ２は、炭素数１～６の炭化水素基を示し、
    　Ｒ３は、炭素数６～２４であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
    　Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数１～６の炭化水素基上の置換基はそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６は、水素原子または炭素数１～１８の炭化水素基を示し、
    　Ｌは、不存在であるか、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、または＊－Ｃ（Ｏ）Ｏ－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
    　ａは、１～１２の整数を示し、
    　ｂは、１～４の整数を示し、
    　ｃは、１～４の整数を示し、
    　ｄは、１～４の整数を示す。
  2. 　Ｒ１が、炭素数６～１４の炭化水素基を示し、
    　Ｒ２が、炭素数６の炭化水素基を示し、
    　Ｒ３が、炭素数１１～１７であり、かつ分岐鎖を有する炭化水素基を示し、
    　Ｒ４およびＲ５がそれぞれ独立に、置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基を示し、Ｒ４およびＲ５が示す置換されていてもよい炭素数２～４の炭化水素基上の置換基がそれぞれ独立に、－Ｏ－Ｒ６を示し、Ｒ６が、水素原子またはベンジル基を示し、
    　Ｌが、＊－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を示し、＊はＲ１との結合位置を示し、
    　ａが、３～８の整数を示し、
    　ｂが、２を示し、
    　ｃが、２を示し、
    　ｄが、２を示す、
    請求項１に記載の化合物またはその塩。
  3. 　Ｒ１が、炭素数６～８の直鎖の炭化水素基を示す、請求項２に記載の化合物またはその塩。
  4. 以下の化合物から選ばれる化合物またはその塩：
    オクチル　６－（２－（（２－ブチルオクタノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート；
    ヘキシル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘニコサン－２１－オエート
    ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル　３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    オクチル　３－エチル－６－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    オクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ２－ペンチルヘプチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ２－ヘキシルオクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１－フェニル－２，１１，１３－トリオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    オクチル　６－エチル－９－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１５－ヘキシル－１３－オキソ－１－フェニル－２，１２，１４－トリオキサ－６，９－ジアザノナデカン－１９－オエート
    オクチル　７－エチル－１０－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１６－ヘキシル－１４－オキソ－１－フェニル－２，１３，１５－トリオキサ－７，１０－ジアザイコサン－２０－オエート
    オクチル　３－エチル－６－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１２－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    オクチル　４－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－４，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート
    オクチル　５－エチル－８－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１４－ヘキシル－１－ヒドロキシ－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－５，８－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル６－（２－（（２－デシルドデカノイル）オキシ）エチル）－３－エチル－１２－ヘキシル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル３－エチル－１２－ヘキシル－６－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－３，６－ジアザヘキサデカン－１６－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザヘプタデカン－１７－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－７－（２－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－７－（２－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）エチル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－７－（２－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）エチル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，７－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－６－（３－（（２－ヘプチルノナニル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１３－ヘキシル－６－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－６－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１３－ヘキシル－１１－オキソ－１０，１２－ジオキサ－３，６－ジアザオクタデカン－１８－オエート
    ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルオクタノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
    ヘプチル３－エチル－７－（３－（（２－ヘプチルノナノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
    ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－オクチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
    ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ノニルウンデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
    ヘプチル３－エチル－１４－ヘキシル－７－（３－（（２－ヘキシルデカノイル）オキシ）プロピル）－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
    ヘプチル３－エチル－７－（３－（（３－ヘプチルデカノイル）オキシ）プロピル）－１４－ヘキシル－１２－オキソ－１１，１３－ジオキサ－３，７－ジアザノナデカン－１９－オエート
  5. 請求項１～４の何れか一項に記載の化合物またはその塩と、脂質とを含む、脂質組成物。
  6. 前記脂質が、中性脂質および非イオン性親水性高分子鎖を有する脂質からなる群から選択される少なくとも一種の脂質である、請求項５に記載の脂質組成物。
  7. ステロールをさらに含む、請求項５または６に記載の脂質組成物。
  8. 核酸、タンパク質、ペプチドおよび低分子からなる群から選択される少なくとも一種をさらに含む、請求項５から７の何れか一項に記載の脂質組成物。
  9. 請求項５から８の何れか一項に記載の脂質組成物を含有する、医薬組成物。
  10. 請求項５から８の何れか一項に記載の脂質組成物を含有する、送達キャリア。
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