WO2021235508A1

WO2021235508A1 - 脂肪性肝疾患の治療用医薬

Info

Publication number: WO2021235508A1
Application number: PCT/JP2021/019088
Authority: WO
Inventors: 日出男雪岡; 淳行島崎; 忠輝濱田
Original assignee: 塩野義製薬株式会社
Priority date: 2020-05-21
Filing date: 2021-05-20
Publication date: 2021-11-25
Also published as: AU2021275292A1; US20230210822A1; CN115666558A; KR20230013126A; JPWO2021235508A1; CA3182134A1; TW202207919A; EP4154880A4; EP4154880A1; MX2022014553A

Abstract

優れたＡＣＣ２選択的阻害作用を有し、血漿トリグリセリド上昇または血小板濃度の低下などの副作用を伴わない、脂肪性肝疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防のための医薬組成物を提供する。　式（Ｉ）：（式（Ｉ）中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、Ｒ^３はハロゲンであり、環Ａは、式（ＩＩ）：で示される基であり、－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－等であり、Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、脂肪性肝疾患を治療および／または予防するための、医薬組成物。

Description

脂肪性肝疾患の治療用医薬

　本発明は、脂肪性肝疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患を治療および／または予防するための、新たな医薬組成物に関する。

　肝疾患は、世界中で主要な死因である。肝疾患は、感染、傷害、薬物または毒性の化合物、アルコール、食物中の不純物への曝露、および血液中の正常な物質の異常な蓄積、自己免疫過程、遺伝子欠損（ヘモクロマトーシスなど）または未知の原因（複数可）により引き起こされ得る。肝疾患は、疾患の期間に基づいて急性または慢性と一般的に分類される。
脂肪性肝疾患は、肝臓に中性脂肪が蓄積して肝障害を引き起こす疾患の総称である。肝臓の組織で、脂肪滴を伴う肝細胞が30％以上認められる場合を脂肪肝という。
脂肪肝は肝臓内に中性脂肪が蓄積した状態であり、肝臓での脂肪の蓄積は非進行性（可逆的）変化であるため、原因を除去すると肝臓での脂肪蓄積は正常に戻る。しかし、脂肪の蓄積が進行し、肝機能障害が生じることになると、肝硬変や肝臓ガンに発展する場合がある。飲酒が原因のアルコール性脂肪性肝炎（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ；　ＡＳＨ）が脂肪肝の典型例である。
一方で、アルコールをほとんど摂取しない人にも脂肪肝が生じる場合があり、これは非アルコール性脂肪肝疾患（ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｆａｔｔｙ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ：　ＮＡＦＬＤ）と呼ばれている。ＮＡＦＬＤの中でも重度のものは、非アルコール性脂肪肝炎（ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｓｔｅａｔｏ－ｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ＮＡＳＨ）と呼ばれている。ＮＡＳＨは肝硬変や肝臓ガンの重要な原因と考えられている。
アルコール性と非アルコール性、ふたつの肝炎の組織像は類似しており、肝臓内の酸化ストレスなど共通の発症メカニズムが研究されている。
米国肝臓協会によると、人口の２０パーセントより多くが非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を有する。無処置のままだと、ＮＡＦＬＤは、重篤な有害作用を引き起こす非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）に進行し得る。さらにＮＡＳＨは、未処置である場合、肝線維症、肝硬変症、肝不全、または肝細胞癌をもたらす可能性がある。米国における概算１６００万人の成人がＮＡＳＨを有し、概ね５０％はＮＡＳＨに関連する進行した肝線維症（架橋状線維症または肝硬変）を有する。これらの数字に基づき、ＮＡＳＨは２０２０年までに肝移植のための主要な適応症になると予想される。ＮＡＳＨは、脂肪症の存在によって、ならびに肝細胞性変性（気球状、マロリーヒアリン）、炎症性細胞浸潤および進行性線維症の発達を含む他の特性によって特徴付けられる。
ＮＡＳＨの処置のための現在承認されている療法も、ＮＡＳＨ患者において線維症および／または脂肪症を低減する療法もない。したがって、肝疾患または肝疾患の症状を処置するための新しい有効な薬剤を提供する必要性がまだある。

特許文献１には、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／または原発性胆汁性肝硬変の治療および／または予防方法が記載されており、該方法は、エイコサペンタエン酸またはこれらの誘導体を含む医薬組成物を、それを必要としている対象に投与することを含む。半合成胆汁酸で、核内受容体ＦＸＲ（ｆａｒｎｅｓｏｉｄ　Ｘ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）に対するアゴニストであるオベチコール酸は、欧米ではＮＡＳＨに起因する線維症を適応として申請されたことが報告されている。

ＡＣＣは、アセチル－ＣｏＡをカルボキシル化してマロニル－ＣｏＡに変換する酵素であり、脂肪酸の代謝に関与する。ＡＣＣには、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ１（以下、ＡＣＣ１という）及びＡＣＣ２の２つのアイソフォームが存在する。
　ＡＣＣ２は、おもに心臓や骨格筋で発現しており、ＡＣＣ２によって産生されるマロニル－ＣｏＡはカルニチンパルミトイルトランスフェラーゼＩ（ＣＰＴ－Ｉ）を阻害することにより脂肪酸の酸化を阻害する。
　ＡＣＣ２欠損マウスにおいて、心臓や骨格筋におけるマロニル－ＣｏＡ量の低下により、継続的な脂肪酸の酸化が起こっており、食餌量の増加にかかわらず、体重の減少が見られる。さらに、ＡＣＣ２欠損マウスは高脂肪／高炭水化物の餌の投与によって誘発される糖尿病や肥満に対して耐性を獲得していることも報告されている。
　以上の知見から、ＡＣＣ２は糖尿病や肥満症などの疾患に関与しており、その阻害剤は抗糖尿病薬や抗肥満薬となることが示唆される。
　一方、ＡＣＣ１欠損マウスは胎児期において致死的であることから、ＡＣＣ１を阻害することなくＡＣＣ２を阻害する選択的な阻害剤が望まれている。

特許文献２および３には、ＡＣＣ１及びＡＣＣ２の両方に対し阻害活性を有するチエノピリミジン誘導体を用いて非アルコール性脂肪肝疾患を処置する方法が記載されている。例えば、以下に示される化合物は、ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔ（ＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤）として知られており、非アルコール性脂肪性肝炎などを適応として開発されている。ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔはトランスポーターを介して肝臓に選択的に取り込まれるようにデザインされている。

ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔについては、２０１９年１２月１６日に４８週間にわたる第ＩＩ相ＡＴＬＡＳ試験のトップラインの成績が発表されている。第ＩＩ相ＡＴＬＡＳ試験は、ＮＡＳＨによる線維化が進行（Ｆ３－Ｆ４）した患者を対象として、ｃｉｌｏｆｅｘｏｒ（選択的非ステロイド系ＦＸＲ作動薬）　３０　ｍｇ、ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔ　２０　ｍｇ、およびｓｅｌｏｎｓｅｒｔｉｂ（ＡＳＫ１阻害薬）　１８　ｍｇによる単独療法と２剤併用療法の安全性および有効性を評価する、無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験である。その結果、いずれのレジメンでも、有効性の主要評価項目であるＮＡＳＨが悪化することなく、1 ステージ以上の線維化の改善を達成した患者の割合に統計学的に有意な増加は認められなかったと報告されている。先に実施された１２週間にわたる第ＩＩ相試験では、ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔを投与されたＮＡＦＬＤ患者で血漿トリグリセリド濃度が上昇したと報告されている。血漿トリグリセリド濃度の上昇は別のＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤であるＭＫ－４０７４を投与したＮＡＦＬＤ患者でも報告されている。血漿トリグリセリド濃度の上昇は心血管イベントの発生を増加させることが知られており、ＮＡＳＨ患者の死亡原因として最も多いのは心血管イベントであると報告されている。ＮＡＦＬＤは心血管病の独立したリスク因子であり、ＮＡＳＨに病態が進行することで心血管病のリスクが増大することが報告されている。ＡＴＬＡＳ試験ではｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔとｃｉｌｏｆｅｘｏｒを併用したＮＡＳＨ患者で血漿トリグリセリド濃度が上昇することが報告されている。

特許文献４には、ＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤が記載されている。例えば、以下に示される化合物は、PF－０５１７５１５７（ＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤）として知られており、健常者への反復投与によって血小板濃度を低下させた。

これは骨髄のＡＣＣ１阻害を介する脂肪酸合成の抑制によって血小板の生成が低下したためであると報告されている。

　特許文献５および６には、ＡＣＣ２を特異的に阻害するベンズイミダゾール誘導体が記載されているが、非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防に有効であることは記載されていない。
　以上のように、ＡＣＣ２選択的阻害作用を有する非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防のための医薬組成物は未だ知られていない。

米国出願公開公報２０１４／１８７６３３号国際公開第２０１３／０７１１６９号国際公開第２０１６／１１２３０５号国際公開第２０１１／０５８４７４号国際公開第２０１５／０５６７８２号国際公開第２０１６／１５９０８２号

　本発明の課題は、優れたＡＣＣ２選択的阻害作用を有し、血漿トリグリセリド上昇または血小板濃度の低下などの副作用を伴わない、脂肪性肝疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防のための医薬組成物を提供することにある。

　本発明者らは、前記課題を解決するために検討を重ねた結果、特許文献５および６に記載のＡＣＣ２選択的阻害作用を有する化合物のうち、特定の化合物（ＡＣＣ２の選択性が高く、かつ、代謝安定性が優れた化合物）が非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防に有効であり、かつ、血漿トリグリセリド上昇または血小板濃度の低下などの副作用を伴わないことを見出し、本発明を完成するに至った。本発明のＡＣＣ２選択的阻害剤は、ＡＣＣ１阻害による副作用を回避し、全身のＡＣＣ２を阻害することができる。その結果、本発明のＡＣＣ２選択的阻害剤はＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤及び、ｆｉｒｓｏｃｏｓｔａｔのような肝臓選択的ＡＣＣ１／２のデュアル阻害剤とは異なり、血小板低下を引き起こさず、血漿トリグリセリド濃度を上昇させず、インスリン抵抗性改善をはじめ、全身のＡＣＣ２阻害に基づく代謝改善作用を発揮できる。本発明は、以下に関する。

（１）
式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、脂肪性肝疾患を治療および／または予防するための、医薬組成物。
（２）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（３）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（１）または（２）記載の医薬組成物。
（４）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（１）～（３）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（１）～（４）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（１）～（５）のいずれかに記載の医薬組成物。
（７）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（１）～（６）のいずれかに記載の医薬組成物。
（８）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（９）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１０）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１１）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１２）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１３）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１４）
前記医薬組成物の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１５）
前記医薬組成物の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１６）
前記医薬組成物の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１７）
前記医薬組成物の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（１８）
脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法であって、式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の有効量を、脂肪性肝疾患の治療および／または予防を必要とする個体に投与する工程を含む、脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法。
（１９）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（２０）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（１８）または（１９）記載の治療および／または予防方法。
（２１）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（１８）～（２０）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（２２）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（１８）～（２１）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（２３）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（１８）～（２２）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（２４）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（１８）～（２３）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（２５）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（２６）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（２７）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（２８）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（２９）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３０）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３１）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３２）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３３）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３４）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、上記項目（１８）記載の治療および／または予防方法。
（３５）
脂肪性肝疾患の治療および／または予防用医薬を製造するための、式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（３６）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（３５）記載の使用。
（３７）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（３５）または（３６）記載の使用。
（３８）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（３５）～（３７）のいずれかに記載の使用。
（３９）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（３５）～（３８）のいずれかに記載の使用。
（４０）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（３５）～（３９）のいずれかに記載の使用。
（４１）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（３５）～（４０）のいずれかに記載の使用。
（４２）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（３５）記載の使用。
（４３）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、上記項目（３５）記載の使用。
（４４）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（３５）記載の使用。
（４５）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（３５）記載の使用。
（４６）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（３５）記載の使用。
（４７）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（３５）記載の使用。
（４８）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、上記項目（３５）記載の使用。
（４９）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、上記項目（３５）記載の使用。
（５０）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、上記項目（３５）記載の使用。
（５１）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、上記項目（３５）記載の使用。
（５２）
式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（５３）
式（Ｉ）：

（式中、各記号は上記項目（５２）と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（５４）
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための
式（Ｉ）：

（式中、各記号は上記項目（５２）と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（５５）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（５２）～（５４）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５６）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（５２）～（５５）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５７）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（５２）～（５６）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５８）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（５２）～（５７）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５９）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（５２）～（５８）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６０）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（５２）～（５９）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６１）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（５２）～（５４）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６２）
脂肪性肝疾患を治療および／または予防するための、上記項目（５２）～（５４）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６３）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、上記項目（６２）記載の医薬組成物。
（６４）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（６２）記載の医薬組成物。
（６５）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（６２）記載の医薬組成物。
（６６）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（６２）記載の医薬組成物。
（６７）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（６２）記載の医薬組成物。
（６８）
式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を組み合わせて投与する脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法。
（６９）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（７０）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（６８）または（６９）記載の治療および／または予防方法。
（７１）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（６８）～（７０）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（７２）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（６８）～（７１）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（７３）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（６８）～（７２）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（７４）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（６８）～（７３）のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
（７５）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（７６）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（７７）
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（７８）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（７９）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。
（８０）
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（６８）記載の治療および／または予防方法。

（１Ａ）
式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、非アルコール性脂肪肝疾患を治療または予防するための、医薬組成物。
（２Ａ）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（３Ａ）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（１Ａ）または（２Ａ）記載の医薬組成物。
（４Ａ）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（１Ａ）～（３Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５Ａ）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（１Ａ）～（４Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６Ａ）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（１Ａ）～（５Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（７Ａ）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（１Ａ）～（６Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（８Ａ）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（９Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１０Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１１Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１２Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１３Ａ）
　前記医薬組成物の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１４Ａ）
　前記医薬組成物の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、上記項目（１３Ａ）記載の医薬組成物。
（１５Ａ）
　前記医薬組成物の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１６Ａ）
　前記医薬組成物の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、上記項目（１Ａ）記載の医薬組成物。
（１７Ａ）
　式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（１８Ａ）
　式（Ｉ）：

（式中、各記号は上記項目（１７Ａ）と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（１９Ａ）
　オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための
式（Ｉ）：

（式中、各記号は上記項目（１７Ａ）と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（２０Ａ）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（１７Ａ）～（１９Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（２１Ａ）
　非アルコール性脂肪肝疾患を治療または予防するための、上記項目（１７Ａ）～（２０Ａ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（２２Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（２１Ａ）記載の医薬組成物。
（２３Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（２１Ａ）記載の医薬組成物。
（２４Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（２１Ａ）記載の医薬組成物。
（２５Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（２１Ａ）記載の医薬組成物。
（２６Ａ）
　式（Ｉ）：

（式中、各記号は上記項目（１７Ａ）と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を組み合わせて投与する非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防方法。
（２７Ａ）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（２６Ａ）記載の治療および／または予防方法。
（２８Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（２６Ａ）または（２７Ａ）記載の治療および／または予防方法。
（２９Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（２６Ａ）または（２７Ａ）記載の治療および／または予防方法。
（３０Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（２６Ａ）または（２７Ａ）記載の治療および／または予防方法。
（３１Ａ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（２６Ａ）または（２７Ａ）記載の治療および／または予防方法。

（１Ｂ）
式（Ｉ）：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、非アルコール性脂肪肝疾患を治療または予防するための、医薬組成物。
（２Ｂ）
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（３Ｂ）
Ｒ^２が水素原子である、上記項目（１Ｂ）または（２Ｂ）記載の医薬組成物。
（４Ｂ）
環Ａが、式：

で示される基である、上記項目（１Ｂ）～（３Ｂ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５Ｂ）
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、上記項目（１Ｂ）～（４Ｂ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（６Ｂ）
Ｒ^４がアルキルである、上記項目（１Ｂ）～（５Ｂ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（７Ｂ）
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、上記項目（１Ｂ）～（６Ｂ）のいずれかに記載の医薬組成物。
（８Ｂ）
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（９Ｂ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１０Ｂ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１１Ｂ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１２Ｂ）
　前記非アルコール性脂肪肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１３Ｂ）
　前記医薬組成物の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１４Ｂ）
　前記医薬組成物の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、上記項目（１３Ｂ）記載の医薬組成物。
（１５Ｂ）
　前記医薬組成物の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。
（１６Ｂ）
　前記医薬組成物の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、上記項目（１Ｂ）記載の医薬組成物。

　本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物は、脂肪性肝疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防に有効であるという優れた効果を奏するものである。また、血漿トリグリセリド上昇または血小板濃度の低下などの副作用を伴わない、高い安全性を有する。さらに本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩は、非アルコール性脂肪肝疾患に対して有効性を示す作用機序の異なる他の医薬組成物（例えば、オベチコール酸など）と組み合わせることにより、それぞれ単独で用いるときよりも優れた効果を奏する。

図１は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合のシリウスレッド陽性面積率を示す。図２は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合のシリウスレッド陽性面積率を示す。図３は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の肝臓トリグリセリド量を示す。図４は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の肝臓トリグリセリド量を示す。図５は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の血漿 3-ヒドロキシ酪酸濃度を示す。図６は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の血漿 3-ヒドロキシ酪酸濃度を示す。図７は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の血漿トリグリセリド濃度を示す。図８は超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の血漿トリグリセリド濃度を示す。図９は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合のシリウスレッド陽性面積率を示す。図１０は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合のシリウスレッド陽性面積率を示す。図１１は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の肝臓トリグリセリド量を示す。図１２は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の肝臓トリグリセリド量を示す。図１３は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の血漿 3-ヒドロキシ酪酸濃度を示す。図１４は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の血漿 3-ヒドロキシ酪酸濃度を示す。図１５は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１２を投与した場合の血漿トリグリセリド濃度を示す。図１６は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合の血漿トリグリセリド濃度を示す。図１７は高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスに化合物Ｉ－１３を投与した場合のヘモグロビンA1c濃度を示す。

　以下に本明細書において用いられる各用語の意味を説明する。各用語は特に断りのない限り、単独で用いられる場合も、または他の用語と組み合わせて用いられる場合も、同一の意味で用いられる。
　「からなる」という用語は、構成要件のみを有することを意味する。
「含む」という用語は、構成要件に限定されず、記載されていない要素を排除しないことを意味する。
　以下、本発明について実施形態を示しながら説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。
　また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当上記分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。

　「ハロゲン」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、およびヨウ素原子を包含する。特にフッ素原子および塩素原子が好ましい。

　「アルキル」とは、炭素数１～１５、好ましくは炭素数１～１０、より好ましくは炭素数１～６、さらに好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分枝状の炭化水素基を包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシル、ｎ－へプチル、イソヘプチル、ｎ－オクチル、イソオクチル、ｎ－ノニル、ｎ－デシル等が挙げられる。
　「アルキル」の好ましい態様として、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチルが挙げられる。さらに好ましい態様として、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ－ブチルが挙げられる。特に好ましい態様として、メチルが挙げられる。

　「ハロアルキル」とは、上記「アルキル」の１以上の任意の水素原子が上記「ハロゲン」で置換された基を意味する。例えば、モノフルオロメチル、モノフルオロエチル、モノフルオロプロピル、２，２－ジフルオロエチル、２，２，３，３，３－ペンタフルオロプロピル、モノクロロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２－トリフルオロエチル、２，２，２－トリクロロエチル、１，２－ジブロモエチル、１，１，１－トリフルオロプロパン－２－イル等が挙げられる。

　「アルキルカルボニル」とは、上記「アルキル」がカルボニル基に結合した基を意味する。例えば、メチルカルボニル、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｔｅｒｔ－ブチルカルボニル、イソブチルカルボニル、ｓｅｃ－ブチルカルボニル、ペンチルカルボニル、イソペンチルカルボニル、へキシルカルボニル等が挙げられる。「アルキルカルボニル」の好ましい態様として、メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ－プロピルカルボニル等が挙げられる。さらに好ましい態様として、メチルカルボニルが挙げられる。

　「芳香族炭素環式基」とは、単環または２環以上の、環状芳香族炭化水素基を意味する。例えば、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル等が挙げられる。
　「芳香族炭素環式基」の好ましい態様として、フェニルが挙げられる。

　「芳香族炭素環」とは、上記「芳香族炭素環式基」から導かれる環を意味する。

　「非芳香族炭素環式基」とは、単環または２環以上の、環状飽和炭化水素基または環状非芳香族不飽和炭化水素基を意味する。２環以上の「非芳香族炭素環式基」は、単環または２環以上の非芳香族炭素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」における環が縮合したものも包含する。
　さらに、「非芳香族炭素環式基」は、以下のように架橋している基、またはスピロ環を形成する基も包含する。

　単環の非芳香族炭素環式基としては、炭素数３～１６が好ましく、より好ましくは炭素数３～１２、さらに好ましくは炭素数３～６であり、特に好ましくは炭素数３～４である。例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロヘキサジエニル等が挙げられる。
　２環以上の非芳香族炭素環式基としては、炭素数８～２０が好ましく、より好ましくは炭素数８～１６である。例えば、インダニル、インデニル、アセナフチル、テトラヒドロナフチル、フルオレニル等が挙げられる。

　「非芳香族炭素環」とは、上記「非芳香族炭素環式基」から導かれる環を意味する。

　「芳香族複素環式基」とは、Ｏ、ＳおよびＮから任意に選択される同一または異なるヘテロ原子を環内に１以上有する、単環または２環以上の、芳香族環式基を意味する。
　２環以上の芳香族複素環式基は、単環または２環以上の芳香族複素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」における環が縮合したものも包含し、該結合手はいずれの環に有していても良い。
　単環の芳香族複素環式基としては、５～８員が好ましく、より好ましくは５員または６員である。５員芳香族複素環式基としては、例えば、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル等が挙げられる。６員芳香族複素環式基としては、例えば、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル等が挙げられる。
　２環の芳香族複素環式基としては、８～１０員が好ましく、より好ましくは９員または１０員である。例えば、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、プリニル、プテリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジル、トリアゾロピリジル、イミダゾチアゾリル、ピラジノピリダジニル、オキサゾロピリジル、チアゾロピリジル等が挙げられる。
　３環以上の芳香族複素環式基としては、１３～１５員が好ましい。例えば、カルバゾリル、アクリジニル、キサンテニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、ジベンゾフリル等が挙げられる。

　「芳香族複素環」とは、上記「芳香族複素環式基」から導かれる環を意味する。

　「非芳香族複素環式基」とは、Ｏ、ＳおよびＮから任意に選択される同一または異なるヘテロ原子を環内に１以上有する、単環または２環以上の、非芳香族環式基を意味する。２環以上の非芳香族複素環式基は、単環または２環以上の非芳香族複素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」、「非芳香族炭素環式基」、および／または「芳香族複素環式基」におけるそれぞれの環が縮合したもの、さらに、単環または２環以上の非芳香族炭素環式基に、上記「芳香族複素環式基」における環が縮合したものも包含し、該結合手はいずれの環に有していても良い。
　さらに、「非芳香族複素環式基」は、以下のように架橋している基、またはスピロ環を形成する基も包含する。

　単環の非芳香族複素環式基としては、３～８員が好ましく、より好ましくは５員または６員である。
　３員非芳香族複素環式基としては、例えば、チイラニル、オキシラニル、アジリジニルが挙げられる。４員非芳香族複素環式基としては、例えば、オキセタニル、アゼチジニルが挙げられる。５員非芳香族複素環式基としては、例えば、オキサチオラニル、チアゾリジニル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、テトラヒドロフリル、ジヒドロチアゾリル、テトラヒドロイソチアゾリル、ジオキソラニル、ジオキソリル、チオラニル等が挙げられる。６員非芳香族複素環式基としては、例えば、ジオキサニル、チアニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、モルホリノ、チオモルホリニル、チオモルホリノ、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロオキサジニル、テトラヒドロピリダジニル、ヘキサヒドロピリミジニル、ジオキサジニル、チイニル、チアジニル等が挙げられる。７員非芳香族複素環式基としては、例えば、ヘキサヒドロアゼピニル、テトラヒドロジアゼピニル、オキセパニルが挙げられる。
　２環以上の非芳香族複素環式基としては、８～２０員が好ましく、より好ましくは８～１０員である。例えば、インドリニル、イソインドリニル、クロマニル、イソクロマニル等が挙げられる。

　「非芳香族複素環」とは、上記「非芳香族複素環式基」から導かれる環を意味する。

　脂肪性肝疾患は、肝臓に中性脂肪が蓄積して肝障害を引き起こす疾患の総称である。以前はアルコールが原因であることが多いとされてきたが、最近では飲酒習慣が無いものの肥満を有している人などに増えてきている。このような明らかな飲酒歴が無いにもかかわらず、肝組織所見はアルコール性肝障害に類似した肝脂肪沈着を特徴とする肝障害のことを非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）と呼んでいる。

非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、組織診断、あるいは画像診断で脂肪肝を認め、アルコール性肝障害など他の肝疾患を除外した病態である。ＮＡＦＬＤは肝細胞における脂肪の蓄積によって特徴付けられ、メタボリックシンドロームの一部の態様（例えば、２型真性糖尿病、インスリン抵抗性、高脂血症、高血圧）にしばしば関連している。この疾患の頻度は、炭水化物に富むおよび高脂肪の食事の消費のためにますます一般的になっている。ＮＡＦＬＤ患者のサブセットは、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を起こす。

　脂肪性肝疾患のサブタイプであるＮＡＳＨは、ＮＡＦＬＤのより重度の病態である。それは、大滴性脂肪変性（ｍａｃｒｏｖｅｓｉｃｕｌａｒｓｔｅａｔｏｓｉｓ）、肝細胞のバルーン変性（ｂａｌｌｏｏｎｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）および／または肝臓の瘢痕化（すなわち、線維症）に最終的につながる炎症によって特徴付けられる。ＮＡＳＨと診断された患者は、進行したステージの肝臓線維症および最終的に肝硬変に進行する。末期疾患の肝硬変ＮＡＳＨ患者のための現在の処置は、肝移植である。

肝線維症は、ほとんどのタイプの慢性肝疾患において起こる、コラーゲンを含む細胞外マトリクスタンパク質の過剰な蓄積である。進行した肝線維症は肝硬変、肝不全および門脈圧亢進をもたらし、肝移植をしばしば必要とする。

肝線維症が進むと肝細胞の周囲が線維化で囲まれ肝硬変になる。肝硬変が進行すると、浮腫、腹水、黄疸などの症状がみられるようになり、食道胃静脈瘤などの消化管の病変を併発すると、吐血などを生じる場合もある。また、肝線維化が進むにつれて、肝がんを発生しやすくなる。

肝細胞癌は、肝臓に由来するがんの中で最もよくみられ、通常は、肝臓に重度の瘢痕（肝硬変）がある患者に発生する。進行した肝臓線維化および肝硬変患者は５年以内に５－３０％の頻度で肝癌を発生すると報告されている。

アルコール性肝疾患（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ；　ＡＬＤ）は、脂肪肝（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｆａｔｔｙ　ｌｉｖｅｒ；ＡＦＬ）、アルコール性肝炎（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ；　ＡＳＨ）、重症型アルコール性肝炎（ｓｅｖｅｒｅ　ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ；ＳＡＨ）、肝線維症（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｌｉｖｅｒ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、肝硬変と幅広い疾患を包含する。
本発明に係る化合物は、優れたＡＣＣ２選択的阻害作用を有するため、ＡＬＤの治療剤及び／又は予防剤としても有用である。

　式（Ｉ）で示される化合物における、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｌ^１および環Ａの好ましい態様を以下に示す。式（Ｉ）で示される化合物としては、以下に示される具体例のすべての組み合わせの態様が例示される。

Ｒ^１は、ハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基である。
Ｒ^１は、好ましくは、非芳香族炭素環式基である。
Ｒ^１は、より好ましくは、単環の非芳香族炭素環式基であり、特に好ましくは、シクロプロピルまたはシクロブチルである。
Ｒ^１の別の好ましい態様として、好ましくは、２，２－ジフルオロエチルが挙げられる。

Ｒ^２は、水素原子またはハロゲンである。
Ｒ^２は、好ましくは、水素原子またはフッ素原子である。
Ｒ^２は、より好ましくは、水素原子である。

Ｒ^３は、ハロゲンである。
Ｒ^３は、好ましくは、フッ素原子または塩素原子である。
Ｒ^３は、より好ましくは、フッ素原子である。

Ｒ^４は、アルキルまたはハロアルキルである。
Ｒ^４は、好ましくは、アルキルである。
Ｒ^４は、より好ましくは、メチルである。
Ｒ^４の別の好ましい態様として、好ましくは、モノフルオロメチルが挙げられる。

Ｒ^５は、アルキルカルボニルまたはカルバモイルである。
Ｒ^５は、好ましくは、メチルカルボニルまたはカルバモイルである。

環Ａは、式：

で示される基である。
環Ａは、好ましくは、式：

で示される基である。
環Ａは、より好ましくは、式：

で示される基である。
環Ａは、さらに好ましくは、式：

で示される基である。

－Ｌ^１－は、－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）である。
－Ｌ^１－は、好ましくは、－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である。

　式（Ｉ）で示される化合物としては、特に以下に示される化合物、またはその製薬上許容される塩が好ましい。

　本発明の非アルコール性脂肪肝疾患を治療および／または予防するための医薬組成物は、有効成分として式（Ｉ）：

（式中、各記号は前記と同意義）
で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物であることを特徴とする。

　本発明で用いられるＡＣＣ２阻害作用を有する化合物は、式（Ｉ）で示される化合物、その製薬上許容される塩、またはそれらの溶媒和物である。

　式（Ｉ）で示される化合物は、公知の方法、例えば、国際公開第２０１５／０５６７８２号および国際公開第２０１６／１５９０８２号に記載の方法に従って合成することができる。

　式（Ｉ）で示される化合物は、特定の異性体に限定するものではなく、全ての可能な異性体（例えば、ケト－エノール異性体、イミン－エナミン異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体、回転異性体等）、ラセミ体またはそれらの混合物を含む。

　式（Ｉ）で示される化合物の一つ以上の水素、炭素および／または他の原子は、それぞれ水素、炭素および／または他の原子の同位体で置換され得る。そのような同位体の例としては、それぞれ^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、¹²³Ｉおよび^３６Ｃｌのように、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素および塩素が包含される。式（Ｉ）で示される化合物は、そのような同位体で置換された化合物も包含する。該同位体で置換された化合物は、医薬品としても有用であり、式（Ｉ）で示される化合物のすべての放射性標識体を包含する。また該「放射性標識体」を製造するための「放射性標識化方法」も本発明に包含され、該「放射性標識体」は、代謝薬物動態研究、結合アッセイにおける研究および／または診断のツールとして有用である。

　式（Ｉ）で示される化合物の放射性標識体は、当該技術分野で周知の方法で調製できる。例えば、式（Ｉ）で示されるトリチウム標識化合物は、トリチウムを用いた触媒的脱ハロゲン化反応によって、式（Ｉ）で示される特定の化合物にトリチウムを導入することで調製できる。この方法は、適切な触媒、例えばＰｄ／Ｃの存在下、塩基の存在下または非存在下で、式（Ｉ）で示される化合物が適切にハロゲン置換された前駆体とトリチウムガスとを反応させることを包含する。トリチウム標識化合物を調製するための他の適切な方法は、“Ｉｓｏｔｏｐｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｌａｂｅｌｅｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　（Ｐａｒｔ　Ａ），Ｃｈａｐｔｅｒ　６　（１９８７年）”を参照することができる。^１４Ｃ－標識化合物は、^１４Ｃ炭素を有する原料を用いることによって調製できる。

　式（Ｉ）で示される化合物の製薬上許容される塩としては、例えば、式（Ｉ）で示される化合物と、アルカリ金属（例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム等）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、バリウム等）、マグネシウム、遷移金属（例えば、亜鉛、鉄等）、アンモニア、有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、メグルミン、エチレンジアミン、ピリジン、ピコリン、キノリン等）およびアミノ酸との塩、または無機酸（例えば、塩酸、硫酸、硝酸、炭酸、臭化水素酸、リン酸、ヨウ化水素酸等）、および有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、マンデル酸、グルタル酸、リンゴ酸、安息香酸、フタル酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等）との塩が挙げられる。これらの塩は、通常行われる方法によって形成させることができる。

　本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩は、溶媒和物（例えば、水和物等）、共結晶および／または結晶多形を形成する場合があり、本発明はそのような各種の溶媒和物、共結晶および結晶多形も包含する。「溶媒和物」は、式（Ｉ）で示される化合物に対し、任意の数の溶媒分子（例えば、水分子等）と配位していてもよい。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、大気中に放置することにより、水分を吸収し、吸着水が付着する場合や、水和物を形成する場合がある。また、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、再結晶することで結晶多形を形成する場合がある。「共結晶」は、式（Ｉ）で示される化合物または塩とカウンター分子が同一結晶格子内に存在することを意味し、任意の数のカウンター分子を含んでいても良い。

　本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩は、プロドラッグを形成する場合があり、本発明はそのような各種のプロドラッグも包含する。プロドラッグは、化学的又は代謝的に分解できる基を有する本発明化合物の誘導体であり、加溶媒分解により又は生理学的条件下でインビボにおいて薬学的に活性な本発明化合物となる化合物である。プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素的に酸化、還元、加水分解等を受けて式（Ｉ）で示される化合物に変換される化合物、胃酸等により加水分解されて式（Ｉ）で示される化合物に変換される化合物等を包含する。適当なプロドラッグ誘導体を選択する方法および製造する方法は、例えば “Ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，　Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，　Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，　１９８５”に記載されている。プロドラッグは、それ自身が活性を有する場合がある。

　本発明に係る化合物は、優れたＡＣＣ２選択的阻害作用を有するため、脂肪性肝疾患、特に非アルコール性脂肪肝疾患の治療剤及び／又は予防剤として有用である。非アルコール性脂肪肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）に限定されず、ＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症、肝硬変または肝細胞癌（ＨＣＣ）の治療剤及び／又は予防剤としても有用である。
　さらに本発明化合物は、医薬としての有用性を備えており、好ましくは、下記のいずれか、または複数の優れた特徴を有している。
ａ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ３Ａ４等）に対する阻害作用が弱い。
ｂ）高いバイオアベイラビリティー、適度なクリアランス等良好な薬物動態を示す。
ｃ）代謝安定性が高い。
ｄ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ３Ａ４）に対し、本明細書に記載する測定条件の濃度範囲内で不可逆的阻害作用を示さない。
ｅ）変異原性を有さない。
ｆ）心血管系のリスクが低い。
ｇ）高い溶解性を示す。
ｈ）血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない。
ｉ）心血管疾患の副作用を伴わない。
ｊ）インスリン抵抗性が改善される。
ｋ）血小板濃度の低下の副作用を伴わない。
ｌ）本発明化合物は、非アルコール性脂肪肝疾患に対して有効性を示す作用機序の異なる他の医薬組成物（例えば、オベチコール酸など）と組み合わせることにより、それぞれ単独で用いるときよりも優れた効果を奏し、さらに該化合物の投与量を低減することができる。

　本発明の医薬組成物は、経口的、非経口的のいずれの方法でも投与することができる。非経口投与の方法としては、経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、点耳、膣内投与等が挙げられる。

　経口投与の場合は常法に従って、内用固形製剤（例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、フィルム剤等）、内用液剤（例えば、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、酒精剤、芳香水剤、エキス剤、煎剤、チンキ剤等）等の通常用いられるいずれの剤型に調製して投与すればよい。錠剤は、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、徐放錠、トローチ錠、舌下錠、バッカル錠、チュアブル錠または口腔内崩壊錠であってもよく、散剤および顆粒剤はドライシロップであってもよく、カプセル剤は、ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤または徐放性カプセル剤であってもよい。

　非経口投与の場合は、注射剤、点滴剤、外用剤（例えば、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、塗布剤、含嗽剤、浣腸剤、軟膏剤、硬膏剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤、坐剤等）等の通常用いられるいずれの剤型でも好適に投与することができる。注射剤は、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ／Ｏ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型等のエマルジョンであってもよい。

　本発明化合物の有効量にその剤型に適した賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等の各種医薬用添加剤を必要に応じて混合し、医薬組成物とすることができる。さらに、該医薬組成物は、本発明化合物の有効量、剤型および／または各種医薬用添加剤を適宜変更することにより、小児用、高齢者用、重症患者用または手術用の医薬組成物とすることもできる。例えば、小児用医薬組成物は、新生児（出生後４週未満）、乳児（出生後４週～１歳未満）、幼児（１歳以上７歳未満）、小児（７歳以上１５歳未満）若しくは１５歳～１８歳の患者に投与されうる。例えば、高齢者用医薬組成物は、６５歳以上の患者に投与されうる。

　本発明の医薬組成物の投与量は、患者の年齢、体重、疾病の種類や程度、投与経路等を考慮した上で設定することが望ましいが、経口投与する場合、通常０．０５～１００ｍｇ／ｋｇ／日であり、好ましくは０．１～１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。非経口投与の場合には投与経路により大きく異なるが、通常０．００５～１０ｍｇ／ｋｇ／日であり、好ましくは０．０１～１ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。これを１日１回～数回に分けて投与すれば良い。

　本発明の式（Ｉ）：

（式中、各記号は前記と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩は、該化合物の作用の増強または該化合物の投与量の低減等を目的として、ＦＸＲアゴニスト、ＧＬＰ１受容体アゴニスト、ＴＨβ受容体アゴニスト、ＭＧＡＴ２阻害剤、ＤＧＡＴ阻害剤、ＰＰＡＲアゴニスト、ＦＧＦ２１および、ＦＧＦ２１に修飾を加えた薬剤と組み合わせて用いることができる。例えば、オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩（以下、併用薬剤と称する）と組み合わせて用いることができる。この際、本発明化合物と併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを投与対象に対し、同時にまたは連続的に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。さらに、本発明化合物と併用薬剤とは、それぞれの活性成分を含む２種類以上の製剤として投与されてもよいし、それらの活性成分を含む単一の製剤として投与されてもよい。

　併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、本発明化合物と併用薬剤の配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状、組み合わせ等により適宜選択することができる。例えば、投与対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬剤を０．０１～１００重量部用いればよい。　

　オベチコール酸は、半合成胆汁酸で、核内受容体ＦＸＲ（ｆａｒｎｅｓｏｉｄ　Ｘ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ）に対するアゴニストである。以下に、オベチコール酸の化学構造式を示す。

欧米では、原発性胆汁性胆管炎治療薬として既に上市されている。また、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）などの非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を適応とした開発も進められている。

　セマグルチドは、ヒトグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）類縁体であり、２型糖尿病治療薬として既に上市されている。また、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を適応とした皮下注射剤が開発されている。

　Ｒｅｓｍｅｔｉｒｏｍは、甲状腺ホルモン受容体β（ＴＨＲ－β）選択的アゴニスト作用を有する低分子化合物である。以下に、Ｒｅｓｍｅｔｉｒｏｍの化学構造式を示す。

　欧米では、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）などを適応として開発が進められている。

　以下に実施例および試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。

調製例１：リコンビナントヒトＡＣＣ２の調製
ヒトＡＣＣ２蛋白質（Ｎ末より２７アミノ酸残基～２４５８アミノ酸残基）をコードするｃＤＮＡをヒト腎臓ｃＤＮＡライブラリー（クロンテック社）よりクローニングし、５’末端にＨｉｓ－ｔａｇ配列を導入後、ｐＦａｓｔＢａｃ１（インビトロジェン社）に挿入した。Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃバキュロウイルス発現システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）のプロトコールに従い、組換えバキュロウィルスを作製後、Ｓｆ－９細胞に感染させ、ヒトＡＣＣ２蛋白質を発現させた。回収した細胞を破砕し、フィルターろ過後、Ｎｉアフィニティクロマトグラフィー及び陰イオン交換クロマトグラフィーに供した。ヒトＡＣＣ２蛋白質が含まれている画分を回収し、リコンビナントヒトＡＣＣ２を得た。

調製例２：リコンビナントヒトＡＣＣ１の調製
ヒトＡＣＣ１蛋白質（Ｎ末より１アミノ酸残基～２３４６アミノ酸残基）をコードするｃＤＮＡをヒト肝臓ｃＤＮＡライブラリー（ＢｉｏＣｈａｉｎ社）よりクローニングし、３’末端にｍｙｃタグ及びＨｉｓ－ｔａｇ配列を導入後、ｐＩＥＸＢＡＣ３（ノバジェン社）に挿入した。ＦｌａｓｈＢＡＣＧＯＬＤ（オックスフォードエクスプレッションテクノロジーズ社）のプロトコールに従い、組換えバキュロウィルスを作製後、Ｓｆ－９細胞に感染させ、ヒトＡＣＣ１蛋白質を発現させた。回収した細胞を破砕し、フィルターろ過後、Ｎｉアフィニティクロマトグラフィー及び陰イオン交換クロマトグラフィーに供した。ヒトＡＣＣ１蛋白質が含まれている画分を回収し、リコンビナントヒトＡＣＣ１を得た。

試験例１：ヒトＡＣＣ１及びＡＣＣ２阻害活性の測定
上記の調製例により得たリコンビナントヒトＡＣＣ１及びリコンビナントヒトＡＣＣ２を、アッセイ緩衝液（５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ－ＫＯＨ（ｐＨ　７．４）、１０ｍＭ塩化マグネシウム、６～１０ｍＭクエン酸カリウム、４ｍＭ還元型グルタチオン、１．５ｍｇ／ｍｌ牛血清アルブミン）中で１時間プレインキュベーションを行った。ついで、０．２μＬの各々の本発明化合物溶液（ＤＭＳＯ）を分注した３８４穴マイクロプレートに、プレインキュベーションした酵素溶液５μＬと基質溶液（５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ－ＫＯＨ（ｐＨ　７．４）、１ｍＭ　ＡＴＰ、０．８ｍＭアセチルＣｏＡ、２５～５０ｍＭ炭酸水素カリウム）５μＬを添加し、遠心、振とう後、湿潤箱中で室温、１～３時間インキュベーションした。インキュベーション後にＥＤＴＡの添加により酵素反応を停止し、その後、ＭＡＬＤＩターゲットプレート上でＣＨＣＡ（α－ｃｙａｎｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙ　ｃｉｎｎａｍｉｃ　ａｃｉｄ）マトリックスと共結晶させ、マトリックス支援レーザー脱離イオン化－飛行時間型質量分析計（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦＭＳ）を用いて、リフレクターネガティブモードで測定を行った。基質のアセチルCoA（ＡｃＣｏＡ）と反応産物であるマロニルCoA（ＭａｌＣｏＡ）の脱プロトン化イオンを検出し、それぞれのシグナル強度を用いてマロニルＣｏＡ又はスクシニルCoAへの変換率Intensity of [MalCoA-H]―/（Intensity of [MalCoA-H]―+Intensity of [AcCoA-H]―）を算出した。各化合物濃度における酵素反応の阻害率から５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）を算出した。なお、アッセイ緩衝液中のクエン酸カリウム濃度、基質溶液中の炭酸水素カリウム濃度及びインキュベーションの時間は、使用する酵素のロット毎に上記の濃度又は反応時間内で調整した。

　試験例１の結果を以下に示す。

試験例２：代謝安定性試験
市販のプールドヒト肝ミクロソームと本発明化合物を一定時間反応させ、反応サンプルと未反応サンプルの比較により残存率を算出し、本発明化合物が肝で代謝される程度を評価した。

ヒト肝ミクロソーム０．５ｍｇタンパク質／ｍＬを含む０．２ｍＬの緩衝液（５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌｐＨ７．４、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化カリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化マグネシウム）中で、１ｍｍｏｌ／ＬＮＡＤＰＨ存在下で３７℃、０分あるいは３０分間反応させた（酸化的反応）。反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液の１００μＬに反応液５０μＬを添加、混合し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心した。その遠心上清中の本発明化合物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳまたは固相抽出(ＳＰＥ)／ＭＳにて定量し、０分反応時の化合物量を１００％として反応後の本発明化合物の残存量を計算した。

　試験例２の結果を以下に示す。

試験例３：組織移行性試験
８週齢、雄性のＣｒｌ：　ＣＤ　（ＳＤ）ラットに非絶食下で本発明化合物を０．５　ｍｇ／ｍＬ／ｋｇの用量で静脈内投与し、投与３０分後に麻酔下で腹部大動脈より全採血により放血死させた。その後、肝臓および筋肉を摘出し、蒸留水で２５％のホモジネートを調製した。一方、得られた血液は遠心処理後、血漿にした。その後、組織ホモジネートサンプルにはコントロール血漿を、血漿サンプルにはコントロール組織ホモジネートを１：１で添加し、それぞれのサンプルをＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。得られた測定時のエリア比（組織／血漿）を組織Ｋｐ値とした。化合物Ｉ－１２は肝臓で６．１０、筋肉で１．２９、化合物Ｉ－１３は肝臓で４．０６、筋肉で０．９１８であった。よって、本発明化合物はｉｎ　ｖｉｖｏにおいて肝臓と筋肉に分布する特性を有している。

試験例４：肝臓および筋肉中のマロニルCoA濃度評価試験
８週齢、雄性のBKS.Cg-+ Lepr ^db/+ Lepr ^db/Jclマウスを４時間絶食したのちに、本発明化合物を０．３～６ｍｇ／５ｍＬ／ｋｇの用量で経口投与し、投与２時間後に麻酔下で腹部大静脈より全採血により放血死させた。その後、肝臓および筋肉を摘出しホモジナイズバッファー（蒸留水：６０％過塩素酸：８５％リン酸＝４３：５：２）で９％のホモジネートを調製した。組織中のマロニルＣｏＡ濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにて定量した。化合物Ｉ－１２および化合物Ｉ－１３はともに、肝臓、筋肉のマロニルＣｏＡ濃度を化合物投与量依存的に低下させた。

試験例5：超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料給餌マウスにおける肝臓線維化進展への効果
６週齢、雄性のＣ５７ＢＬ／６ＪＪｃｌマウスに超高脂肪コリン欠乏メチオニン減量飼料（６０ｋｃａｌ％　脂肪含有量、ラード使用、コリン欠乏、メチオニン減量（０．１％））を給餌すると同時に本発明化合物を３～４５ｍｇ／ｋｇ／１０ｍＬの投与量となるように媒体（０．５％　メチルセルロース水溶液）に懸濁し、経口反復投与（b.i.d.）を８週間行った。反復投与期間中に尾静脈より採血を行い、血漿中の生化学パラメーターを測定した。８週間投与後、麻酔下で腹部大静脈採血を行ったのち、肝臓を採取した。採取した肝臓から作成したパラフィン包埋切片にシリウスレッド染色を施した。肝臓における線維化進展の程度をシリウスレッド陽性面積率により求め評価した。

化合物Ｉ－１２は３０　ｍｇ／ｋｇの投与量において、シリウスレッド陽性面積率が媒体投与群と比較して有意に低値となった。図１および表４に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
*：媒体投与群に対して p<0.05（ダネット検定）

化合物Ｉ－１３は４５ｍｇ／ｋｇの投与量において、シリウスレッド陽性面積率が媒体投与群と比較して有意に低値となった。図２および表５に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
*：媒体投与群に対して p<0.05（ダネット検定）

化合物Ｉ－１２は１０，３０ｍｇ／ｋｇの投与量で、化合物Ｉ－１３は４５ｍｇ／ｋｇの投与量で肝臓中のトリグリセリド量が媒体投与群と比較して有意に低値であった。図３、４および表６、７に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
*：媒体投与群に対して p<0.05（ダネット検定）

データ: 平均値±標準誤差
**：媒体投与群に対して p<0.05（ダネット検定）

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３投与群はともに媒体投与群と比較して、血漿中の３-ヒドロキシ酪酸の濃度が高値であり、肝臓での脂肪酸酸化が亢進した。図５、６および表８、９に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
媒体投与群に対して *: p<0.05, **: p<0.01（ダネット検定）

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３投与群はともに媒体投与群と比較して、血漿中トリグリセリド濃度が低値であった。図７、８および表１０、１１に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
媒体投与群に対して *: p<0.05, **: p<0.01, ***:p<0.001（ダネット検定）

データ: 平均値±標準誤差
媒体投与群に対して *: p<0.05, **: p<0.01, ***:p<0.001（ダネット検定）

化合物Ｉ－１３を投与した際に肝臓のＳｒｅｂｆ１とＦａｓの上昇は認められず、肝臓での新規脂肪合成の亢進は刺激されなかった。肝臓における遺伝子発現量を以下に示す。

データ: 平均値±標準誤差

試験例6：高脂肪飼料負荷脂肪肝自然発症マウスにおける肝臓線維化進展への効果
８週齢、雄性のＦＬＳ．Ｂ６－Ｌｅｐ＜ｏｂ＞／Ｓｈｉマウスに高脂肪飼料（６０ｋｃａｌ％脂肪含有量、ショートニング使用、２％コレステロールおよび８．７％フルクトース含有）を給餌すると同時に本発明化合物を５．５～６０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの投与量となるように０．５％　ＭＣ水溶液に懸濁し、経口反復投与（b.i.d.）を４週間行った。反復投与期間中に尾静脈より採血を行い、血漿中の生化学パラメーターを測定した。４週間投与後、麻酔下で腹部大静脈採血を行ったのち、肝臓を採取した。採取した肝臓から作成したパラフィン包埋切片にシリウスレッド染色を施した。肝臓における線維化進展の程度をシリウスレッド陽性面積率により求め評価した。

化合物Ｉ－１２は５．５ｍｇ／ｋｇの投与量において、シリウスレッド陽性面積率が媒体投与群と比較して有意に低値となった。図９および表１３に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
*：媒体投与群に対して p<0.05（ダネット検定）

化合物Ｉ－１３は３０、４５、６０ｍｇ／ｋｇの投与量において、シリウスレッド陽性面積率が媒体投与群と比較して有意に低値となった。図１０および表１４に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差
***: 媒体投与群に対して p<0.001（ダネット検定）

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３はともに肝臓中のトリグリセリド量が媒体投与群と有意な差は認めなかった。図１１、１２および表１５、１６に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差

データ: 平均値±標準誤差

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３ともに媒体投与群と比較して、血漿中の３-ヒドロキシ酪酸の濃度が高値傾向を示した。図１３、１４および表１７、１８に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差

データ: 平均値±標準誤差

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３ともに、血漿中トリグリセリド濃度は媒体投与群と有意な差は認めなかった。図１５、１６および表１９、２０に結果を示す。

データ: 平均値±標準誤差

データ: 平均値±標準誤差

化合物Ｉ－１３の投与によってヘモグロビンＡ１ｃの上昇が抑制される傾向が認められた。図１７および表２１に結果を示す。

試験例７：血小板数への影響
６週齢、雄性のＣｒｌ：ＣＤ（ＳＤ）ラットに非絶食下で本発明化合物を５０～６００　ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投与量となるように０．５％メチルセルロース溶液に懸濁し、４日間反復経口投与を行った。投与開始５日目に麻酔下で腹部大静脈より採血を行い、血漿を採取した。血漿中の血小板数を自動血球計数装置により評価した。

化合物Ｉ－１２、化合物Ｉ－１３はともに評価に用いた投与量域内でＳＤラットの血小板数に影響を与えなかった。試験例７の結果を以下に示す。

データ: 平均値±標準偏差

データ: 平均値±標準偏差

試験例８：マウスにおけるオベチコール酸との併用効果試験
　8週齢、雄性のＦＬＳ．Ｂ６－Ｌｅｐ＜ｏｂ＞／Ｓｈｉマウスに高脂肪飼料（６０ｋｃａｌ％脂肪含量、ショートニング使用、２％コレステロールおよび８．７％フルクトース含有）を給餌すると同時に本発明化合物を３０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの投与量となるように０．５％　ＭＣ水溶液に懸濁し、経口反復投与（ｂ．ｉ．ｄ）を１０週間行った。オベチコール酸は１０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの投与量となるように０．５％　ＭＣ水溶液に懸濁し、経口反復投与（ｑ．ｄ）を１０週間行った。さらに、本発明化合物３０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの経口反復投与（ｂ．ｉ．ｄ）とオベチコール酸１０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの経口反復投与（ｑ．ｄ）を併用する群も設けた。反復投与期間中に尾静脈より採血を行い、血漿中の生化学パラメーターおよび線維化マーカーを測定した。１０週間投与後、麻酔下で腹部大静脈採血を行ったのち、肝臓を採取した。採取した肝臓から作成したパラフィン包埋切片にシリウスレッド染色を施した。肝臓における線維化進展の程度をシリウスレッド陽性面積率により求め評価した。
　その結果、本発明化合物をオベチコール酸と併用することにより、それぞれ単独で用いたときよりも強い線維化マーカーおよび線維化進展の抑制を認めた。

試験例９：マウスにおけるセマグルチドまたはＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍとの併用効果試験
　雄性のＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに高脂肪飼料とフルクトースを最大３２週間給餌した後、本発明化合物を最大３０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの投与量となるように０．５％　ＭＣ水溶液に懸濁し、経口反復投与（ｂ．ｉ．ｄ）を最大１２週間行う。セマグルチドは最大３０ｎｍｏｌ／ｋｇ／５ｍＬの投与量で皮下反復投与（ｑ．ｄ）、Ｒｅｓｍｅｔｉｒｏｍは最大３ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの投与量で経口反復投与（ｑ．ｄ）を最大１２週間行う。さらに、本発明化合物３０ｍｇ／ｋｇ／５ｍＬの経口反復投与（ｂ．ｉ．ｄ）とセマグルチドもしくはＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍを併用する群も設ける。反復投与期間中に尾静脈より採血を行い、血漿中の生化学パラメーターを測定する。反復投与終了後、麻酔下で腹部大静脈採血を行ったのち、肝臓を採取する。採取した肝臓から作成したパラフィン包埋切片にシリウスレッド染色を施す。肝臓における線維化進展の程度をシリウスレッド陽性面積率により求め評価する。

試験例１０：ＣＹＰ阻害試験
　市販のプールドヒト肝ミクロソームを用いて、ヒト主要ＣＹＰ５分子種（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、３Ａ４）の典型的基質代謝反応である７－エトキシレゾルフィンのＯ－脱エチル化（ＣＹＰ１Ａ２）、トルブタミドのメチル－水酸化（ＣＹＰ２Ｃ９）、メフェニトインの４’－水酸化（ＣＹＰ２Ｃ１９）、デキストロメトルファンのＯ脱メチル化（ＣＹＰ２Ｄ６）、テルフェナジンの水酸化（ＣＹＰ３Ａ４）を指標とし、それぞれの代謝物生成量が本発明化合物によって阻害される程度を評価した。

　反応条件は以下のとおり：基質、０．５μｍｏｌ／Ｌ　エトキシレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２）、１００μｍｏｌ／Ｌ　トルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９）、５０μｍｏｌ／Ｌ　Ｓ－メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、５μｍｏｌ／Ｌ　デキストロメトルファン（ＣＹＰ２Ｄ６）、１μｍｏｌ／Ｌ　テルフェナジン（ＣＹＰ３Ａ４）；反応時間、１５分；反応温度、３７℃；酵素、プールドヒト肝ミクロソーム０．２ｍｇ　タンパク質／ｍＬ；本発明化合物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。

　９６穴プレートに５０ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｈｅｐｅｓ緩衝液中に各５種の基質、ヒト肝ミクロソーム、本発明化合物を上記組成で加え、補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して、指標とする代謝反応を開始した。３７℃、１５分間反応した後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（Ｖ／Ｖ）溶液を添加することで反応を停止した。３０００ｒｐｍ、１５分間の遠心後、遠心上清中のレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２代謝物）を蛍光マルチラベルカウンタまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量し、トルブタミド水酸化体（ＣＹＰ２Ｃ９代謝物）、メフェニトイン４’水酸化体（ＣＹＰ２Ｃ１９代謝物）、デキストロルファン（ＣＹＰ２Ｄ６代謝物）、テルフェナジンアルコール体（ＣＹＰ３Ａ４代謝物）をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量した。

　本発明化合物の代わりに化合物を溶解した溶媒であるＤＭＳＯのみを反応溶液に添加したものをコントロール（１００％）とし、残存活性（％）を算出し、濃度と抑制率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ_５０を算出した。

試験例１１：ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験
　ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験は、代謝反応による本発明化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害の増強を調べる試験である。ＣＹＰ３Ａ４酵素（大腸菌発現酵素）により７－ベンジルオキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＢＦＣ）が脱ベンジル化されて、蛍光を発する代謝物７－ハイドロキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＨＦＣ）が生じる。７－ＨＦＣ生成反応を指標としてＣＹＰ３Ａ４阻害を評価した。

　反応条件は以下のとおり：基質、５．６μｍｏｌ／Ｌ　７－ＢＦＣ；プレ反応時間、０または３０分；反応時間、１５分；反応温度、２５℃（室温）；ＣＹＰ３Ａ４含量（大腸菌発現酵素）、プレ反応時６２．５ｐｍｏｌ／ｍＬ、反応時６．２５ｐｍｏｌ／ｍＬ（１０倍希釈時）；本発明化合物濃度、０．６２５、１．２５、２．５、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（６点）。

　９６穴プレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中に酵素、本発明化合物溶液を上記のプレ反応の組成で加え、別の９６穴プレートに基質とＫ－Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるようにその一部を移行し、補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して指標とする反応を開始し（プレ反応無）、所定の時間反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（Ｖ／Ｖ）を加えることによって反応を停止した。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加しプレ反応を開始し（プレ反応有）、所定時間プレ反応後、別のプレートに基質とＫ－Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるように一部を移行し指標とする反応を開始した。所定の時間反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（Ｖ／Ｖ）を加えることによって反応を停止した。それぞれの指標反応を行ったプレートを蛍光プレートリーダーで代謝物である７－ＨＦＣの蛍光値を測定した。（Ｅｘ＝４２０ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）。なお，希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

　本発明化合物を溶解した溶媒であるＤＭＳＯのみを反応系に添加したものをコントロール（１００％）とし、本発明化合物をそれぞれの濃度添加したときの残存活性（％）を算出し、濃度と抑制率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ_５０を算出した。ＩＣ_５０値の差が５μｍｏｌ／Ｌ以上の場合を（＋）とし、３μｍｏｌ／Ｌ以下の場合を（－）とした。

試験例１２：ＣＹＰ３Ａ４（ＭＤＺ）ＭＢＩ試験
　本発明化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害に関して、本発明化合物の代謝反応に起因した阻害作用の増強からＭｅｃｈａｎｉｓｍ　ｂａｓｅｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ（ＭＢＩ）能を評価する試験である。プールドヒト肝ミクロソームを用いてミダゾラム（ＭＤＺ）の１－水酸化反応を指標としてＣＹＰ３Ａ４阻害を評価した。

　反応条件は以下のとおり：基質、１０μｍｏｌ／Ｌ　ＭＤＺ；プレ反応時間、０または３０分；基質代謝反応時間、２分；反応温度、３７℃；プールドヒト肝ミクロソーム、プレ反応時０．５ｍｇ／ｍＬ、反応時０．０５ｍｇ／ｍＬ（１０倍希釈時）；本発明化合物プレ反応時の濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。

　９６穴プレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールドヒト肝ミクロソーム、本発明化合物溶液を上記のプレ反応の組成で加え、別の９６穴プレートに基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるようにその一部を移行し、補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して指標とする反応を開始し（Ｐｒｅｉｎｃｕｂａｔａｉｏｎ　０ｍｉｎ）、所定の時間反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（Ｖ／Ｖ）溶液を加えることによって反応を停止した。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加しプレ反応を開始し（Ｐｒｅｉｎｃｕｂａｔａｉｏｎ　３０ｍｉｎ）、所定時間プレ反応後、別のプレートに基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるように一部を移行し指標とする反応を開始した。所定の時間反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（Ｖ／Ｖ）溶液を加えることによって反応を停止した。それぞれの指標反応を行ったプレートを３０００ｒｐｍ、１５分間の遠心後、遠心上清中の１－水酸化ミダゾラム　をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

　本発明化合物の代わりに化合物を溶解した溶媒であるＤＭＳＯのみを反応液に添加したものをコントロール（１００％）とし、本発明化合物をそれぞれの濃度添加したときの残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣを算出した。Ｐｒｅｉｎｃｕｂａｔａｉｏｎ　０ｍｉｎのＩＣ／Ｐｒｅｉｎｃｕｂａｔａｉｏｎ　３０ｍｉｎのＩＣをＳｈｉｆｔｅｄ　ＩＣ値とし，Ｓｈｉｆｔｅｄ　ＩＣが１．５以上であればＰｏｓｉｔｉｖｅとし、Ｓｈｉｆｔｅｄ　ＩＣが１．０以下であればＮｅｇａｔｉｖｅとした。

試験例１３：ＢＡ試験
経口吸収性の検討実験材料と方法
（１）使用動物：マウスあるいはラットを使用した。
（２）飼育条件：マウスあるいはラットは、固形飼料および滅菌水道水を自由摂取させた。
（３）投与量、群分けの設定：所定の投与量で経口投与および静脈内投与した。以下のように群を設定した。（化合物ごとで投与量は変更有）
　経口投与　２～６０μｍｏｌ／ｋｇあるいは１～３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
　静脈内投与　１～３０μｍｏｌ／ｋｇあるいは０．５～１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
（４）投与液の調製：経口投与は溶液または懸濁液として投与した。静脈内投与は可溶化して投与した。
（５）投与方法：経口投与は、経口ゾンデにより強制的に胃内に投与した。静脈内投与は、注射針を付けたシリンジにより尾静脈から投与した。
（６）評価項目：経時的に採血し、血漿中本発明化合物濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
（７）統計解析：血漿中本発明化合物濃度推移について、モーメント解析法により血漿中濃度‐時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、経口投与群と静脈内投与群の投与量比およびＡＵＣ比から本発明化合物のバイオアベイラビリティ（ＢＡ）を算出した。
　なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例１４：クリアランス評価試験
実験材料と方法
（１）使用動物：ＳＤラットを使用した。
（２）飼育条件：ＳＤラットは、固形飼料および滅菌水道水を自由摂取させた。
（３）投与量、群分けの設定：静脈内投与を所定の投与量により投与した。以下のように群を設定した。
　静脈内投与　１μｍｏｌ／ｋｇ（ｎ＝２）
（４）投与液の調製：ジメチルスルホキシド／プロピレングリコール＝１／１溶媒を用いて可溶化して投与した。
（５）投与方法：注射針を付けたシリンジにより尾静脈から投与した。
（６）評価項目：経時的に採血し、血漿中本発明化合物濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
（７）統計解析：血漿中本発明化合物濃度推移について、モーメント解析法により全身クリアランス（CLtot）を算出した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例１５：Ｆｌｕｃｔｕａｔｉｏｎ　Ａｍｅｓ　Ｔｅｓｔ
　本発明化合物の変異原性を評価する。
　凍結保存しているネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ　ＴＡ９８株、ＴＡ１００株）２０μＬを１０ｍＬ液体栄養培地（２．５％　Ｏｘｏｉｄ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｂｒｏｔｈ　Ｎｏ．２）に接種し３７℃にて１０時間、振盪前培養した。ＴＡ９８株は７．７０～８．００ｍＬの菌液を遠心（２０００×ｇ、１０分間）して培養液を除去した。遠心に用いた菌液と同容量のＭｉｃｒｏ　Ｆ緩衝液（Ｋ_２ＨＰＯ_４：３．５ｇ／Ｌ、ＫＨ_２ＰＯ_４：１ｇ／Ｌ、（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４：１ｇ／Ｌ、クエン酸三ナトリウム二水和物：０．２５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ_４・７Ｈ_２０：０．１ｇ／Ｌ）に菌を懸濁し、１２０ｍＬのＥｘｐｏｓｕｒｅ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏＦ緩衝液）に添加した。ＴＡ１００株は３．１０～３．４２ｍＬの菌液をＥｘｐｏｓｕｒｅ培地１２０～１３０ｍＬに添加し試験菌液を調製した。本発明化合物ＤＭＳＯ溶液（最高用量５０ｍｇ／ｍＬから２～３倍公比で数段階希釈）、陰性対照としてＤＭＳＯ、陽性対照として非代謝活性化条件ではＴＡ９８株に対しては５０μｇ／ｍＬの４－ニトロキノリン－１－オキシドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００株に対しては０．２５μｇ／ｍＬの２－（２－フリル）－３－（５－ニトロ－２－フリル）アクリルアミドＤＭＳＯ溶液、代謝活性化条件ではＴＡ９８株に対して４０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００株に対しては２０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液それぞれ１２μＬと試験菌液５８８μＬ（代謝活性化条件では試験菌液４９８μＬとＳ９　ｍｉｘ　９０μＬの混合液）を混和し、３７℃にて９０分間、振盪培養した。本発明化合物を曝露した菌液４６０μＬを、Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬ、ブロモクレゾールパープル：３７．５μｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏＦ緩衝液）２３００μＬに混和し、５０μＬずつマイクロプレート４８ウェル／用量に分注し、３７℃にて３日間、静置培養した。アミノ酸（ヒスチジン）合成酵素遺伝子の突然変異によって増殖能を獲得した菌を含むウェルは、ｐＨ変化により紫色から黄色に変色するため、１用量あたり４８ウェル中の黄色に変色した菌増殖ウェルを計数し、陰性対照群と比較して評価した。変異原性が陰性のものを（－）、陽性のものを（＋）として示した。
なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例１６：ｈＥＲＧ試験
　本発明化合物の心電図ＱＴ間隔延長リスク評価を目的として、ｈｕｍａｎ　ｅｔｈｅｒ－ａ－ｇｏ－ｇｏ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　（ｈＥＲＧ）チャネルを発現させたＣＨＯ細胞を用いて、心室再分極過程に重要な役割を果たす遅延整流Ｋ^＋電流（Ｉ_Ｋｒ）への本発明化合物の作用を検討した。
　全自動パッチクランプシステム（ＱＰａｔｃｈ；Ｓｏｐｈｉｏｎ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ａ／Ｓ）を用い、ホールセルパッチクランプ法により、細胞を－８０ｍＶの膜電位に保持し、－５０ｍＶのリーク電位を与えた後、＋２０ｍＶの脱分極刺激を２秒間、さらに－５０ｍＶの再分極刺激を２秒間与えた際に誘発されるＩ_Ｋｒを記録した。ジメチルスルホキシドを０．１％に調整した細胞外液（ＮａＣｌ：１４５　ｍｍｏｌ／Ｌ、ＫＣｌ：４　ｍｍｏｌ／Ｌ、ＣａＣｌ_２：２　ｍｍｏｌ／Ｌ、ＭｇＣｌ_２：１　ｍｍｏｌ／Ｌ、グルコース：１０　ｍｍｏｌ／Ｌ、ＨＥＰＥＳ（４－（２－ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ）－１－ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ　ａｃｉｄ、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）：１０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ＝７．４）を媒体とし、媒体及び本発明化合物を目的の濃度で溶解させた細胞外液をそれぞれ室温条件下で、７分以上細胞に適用させた。得られたＩ_Ｋｒから、解析ソフト（ＱＰａｔｃｈ　Ａｓｓａｙ　ｓｏｆｔｗａｒｅ；Ｓｏｐｈｉｏｎ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ａ／Ｓ）を使用して、保持膜電位における電流値を基準に最大テール電流の絶対値を計測した。さらに、媒体適用後の最大テール電流に対する本発明化合物適用後の最大テール電流を阻害率として算出し、本発明化合物のＩ_Ｋｒへの影響を評価した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例１７：Ａｍｅｓ試験
　サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ＴＡ９８株、ＴＡ１００株、ＴＡ１５３５株、ＴＡ１５３７株および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）ＷＰ２ｕｖｒＡ株を試験菌株としたＡｍｅｓ試験により、本発明化合物の変異原性を評価した。本発明化合物のＤＭＳＯ溶液０．１ｍＬに、代謝活性化条件ではＳ９ｍｉｘを０．５ｍＬ、非代謝活性化条件ではリン酸緩衝液を０．５ｍＬと試験菌液０．１ｍＬを混和し、ヒスチジン及びビオチン、またはトリプトファン含有の重層用軟寒天２ｍＬと共に最少グルコース寒天平板に重層した。同時に、陰性対照物質（ＤＭＳＯ）および陽性対照物質（２－（２－フリル）－３－（５－ニトロ－２－フリル）アクリルアミド、アジ化ナトリウム、９－アミノアクリジン、または２－アミノアントラセン）についても同様に実施した。３７℃で４８時間培養した後、出現した復帰変異コロニーを計数し、陰性対照群と比較して評価した。復帰変異コロニー数が濃度依存的に増加し、かつ陰性対照群のコロニー数の２倍以上となる場合を陽性（＋）と判断した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例１８：光溶血試験
　本発明化合物を目的の濃度で溶解させ、マイクロプレート上において、ヒツジ脱繊維血から調製した０．１～０．０００８％濃度の赤血球浮遊液（２．５ｖ／ｖ％）と混合し、紫外線蛍光ランプ（ＧＬ２０ＳＥランプ、三共電気およびＦＬ２０Ｓ―ＢＬＢランプ、パナソニック）を用いてＵＶＡおよびＵＶＢ領域での光照射（１０　Ｊ／ｃｍ^２、２９０～４００ｎｍ）を行う。光照射終了後の混合液を採取し、遠心を行う。遠心後の上清を採取しマイクロプレートに移した後、上清の吸光度（５４０または６３０ｎｍ）を測定、吸光度を基にした判定を行う。５４０および６３０ｎｍでの吸光度は、それぞれ生体膜損傷（光溶血率％）および脂質膜過酸化（メトヘモグロビン産生）の指標とする。光溶血率が１０％未満であり、かつ、６３０ｎｍでの吸光度の変化量が０．０５未満の場合を（－）とし、光溶血率が１０％以上または６３０ｎｍでの吸光度の変化量が０．０５以上の場合を（＋）とする。

試験例１９：Ｐ－ｇｐ基質試験
　ヒトＭＤＲ１発現細胞または親細胞を単層培養したトランスウェル（登録商標、ＣＯＲＮＩＮＧ社）の片側に本発明化合物を添加し、一定時間反応させた。ＭＤＲ１発現細胞と親細胞についてＡｐｉｃａｌ側からＢａｓｏｌａｔｅｒａｌ側方向（Ａ→Ｂ）とＢａｓｏｌａｔｅｒａｌ側からＡｐｉｃａｌ側方向（Ｂ→Ａ）の膜透過係数を算出し，ＭＤＲ１発現細胞と親細胞のＥｆｆｌｕｘ　Ｒａｔｉｏ（ＥＲ；Ｂ→ＡとＡ→Ｂの膜透過係数の比）値を算出した。ＭＤＲ１発現細胞と親細胞のＥｆｆｌｕｘ　Ｒａｔｉｏ（ＥＲ値）を比較し、本発明化合物がＰ－ｇｐ基質であるか否かを判断した。

試験例２０：溶解性試験
　本発明化合物の溶解度は、１％ＤＭＳＯ添加条件下で決定した。ＤＭＳＯにて１０ｍｍｏｌ／Ｌ化合物溶液を調製した。本発明化合物溶液２μＬをそれぞれＪＰ－１液、ＪＰ－２液１９８μＬに添加した。室温で１時間振盪させた後、混液を吸引濾過した。濾液をメタノール／水＝１／１（Ｖ／Ｖ）またはアセトニトリル／メタノール／水＝１／１／２（Ｖ／Ｖ／Ｖ）にて１０または１００倍希釈し、絶対検量線法によりＬＣ／ＭＳまたは固相抽出（ＳＰＥ）／ＭＳを用いて濾液中濃度を測定した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

　ＪＰ－１液の組成は、以下の通りである。
　塩化ナトリウム２．０ｇ、塩酸７．０ｍＬに水を加えて１０００ｍＬとした。
　ＪＰ－２液の組成は、以下の通りである。
　リン酸二水素カリウム３．４０ｇおよび無水リン酸水素二ナトリウム３．５５ｇを水に溶かし１０００ｍＬとしたもの１容量に水１容量を加えた。

試験例２１：粉末溶解度試験
　適当な容器に本発明化合物を適量入れ、各容器にＪＰ－１液（塩化ナトリウム２．０ｇ、塩酸７．０ｍＬに水を加えて１０００ｍＬとする）、ＪＰ－２液（リン酸二水素カリウム３．４０ｇおよび無水リン酸水素二ナトリウム３．５５ｇを水に溶かし１０００ｍＬとしたもの１容量に水１容量を加えた）、２０ｍｍｏｌ／Ｌ　タウロコール酸ナトリウム（ＴＣＡ）／ＪＰ－２液（ＴＣＡ１．０８ｇにＪＰ－２液を加え１００ｍＬとした）を２００μＬずつ添加した。試験液添加後に全量溶解した場合には、適宜、本発明化合物を追加した。密閉して３７℃で１時間振とう後に濾過し、各濾液１００μＬにメタノール１００μＬを添加して２倍希釈を行った。希釈倍率は、必要に応じて変更した。気泡および析出物がないかを確認し、密閉して振とうした。絶対検量線法によりＨＰＬＣを用いて本発明化合物を定量した。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更した。

試験例２２：目視溶解性試験
化合物約５ｍｇを微量試験管３本に秤量し、各媒体(注射用水、生食注、０．５％ブドウ糖液)を化合物濃度２０％になるように添加する。ボルテックスにて撹拌後、目視にて溶解の有無を確認する。溶解していればその媒体での溶解度を＞２０％とする。それら試験液に各媒体(注射用水、生食注、ブドウ糖液)を更に加えて化合物濃度１０％の試験液を調製し、ボルテックスにて撹拌後、目視にて溶解の有無を確認する。溶解していればその媒体での溶解度を２０％～１０％とする。同様に５％濃度、２．５％濃度、１％濃度まで試験をし、1%濃度で溶解しない場合はその媒体での溶解度を<1%とする。１％濃度の試験液でのpHを測定し、記録する。なお、希釈濃度や希釈溶媒は、必要に応じて変更してもよい。

試験例２３：ｐＫａ測定（キャピラリー電気泳動法 (capillary electrophoresis法，CE法)の測定方法）
キャピラリーゾーン電気泳動技術を用いた手法で，電解質を含む緩衝液中での各試料成分の自由泳動を利用した分離方法である。
ｐＨ２．５～１１．５に調製した緩衝液が充填されたフューズドシリカキャピラリーに、化合物溶液を注入した後、キャピラリーに高電圧 (Inlet側＋，Outlet側－) をかけると、化合物は緩衝液pHにおけるイオン化状態を反映した速度 (＋チャージした化合物は速く、－チャージした化合物は遅く) で移動する。この化合物の移動時間と中性分子　（ＤＭＳＯ）の移動時間との差をｐＨに対してプロットし、フィッティングをかけてｐＫａを算出した。測定条件を以下に示す。
使用装置：Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｐ／ＡＣＥシステムＭＤＱ　ＰＤＡ
泳動液：pH2.5～11.5　Buffer (10vol%　MeOH含有)
サンプル溶液：Ｂｌａｎｋ　ＤＭＳＯ　１０μＬ＋注用水９０μＬ混合
　　　　　　　Ｓａｍｐｌｅ　１０ｍＭ　ＤＭＳＯ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　４μＬ　＋　ＤＭＳＯ　６μＬ　＋　注用水　９０μＬ
（メソッド）
キャピラリー　　　　：Ｆｕｓｅｄ　ｓｉｌｉｃａ　ｃａｐｉｌｌａｒｙ　（ＢＥＣＫＭＡＮ　ＣＯＵＬＴＥＲ，内径５０　μｍ，全長３０．２　ｃｍ，有効長２０．０　ｃｍ）
印加電圧　　　　　：１０ｋＶ　（３３１　Ｖ／ｃｍ）
印加空気圧　　　　：０．７　ｐｓｉ
キャピラリー温度　　　：２５℃
電気浸透流マーカー　　：ＤＭＳＯ
検出　　　　　　：紫外部多波長吸光検出 (測定波長；２１５　ｎｍ，２３８　ｎｍ)
試料注入　　　　　：加圧法 (０．５　ｐｓｉ，５　ｓｅｃ)

　以下に示す製剤例は例示にすぎないものであり、発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。
　本発明の化合物は、任意の従来の経路により、特に、経腸、例えば、経口で、例えば、錠剤またはカプセル剤の形態で、または非経口で、例えば注射液剤または懸濁剤の形態で、局所で、例えば、ローション剤、ゲル剤、軟膏剤またはクリーム剤の形態で、または経鼻形態または座剤形態で医薬組成物として投与することができる。少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と一緒にして、遊離形態または薬学的に許容される塩の形態の本発明の化合物を含む医薬組成物は、従来の方法で、混合、造粒またはコーティング法によって製造することができる。例えば、経口用組成物としては、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等および有効成分等を含有する錠剤、顆粒剤、カプセル剤とすることができる。また、注射用組成物としては、溶液剤または懸濁剤とすることができ、滅菌されていてもよく、また、保存剤、安定化剤、緩衝化剤等を含有してもよい。

　本発明の非アルコール性脂肪肝疾患の治療および／または予防方法、およびそれに用いる治療用医薬組成物は、活性成分の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の所定量を、非アルコール性脂肪肝疾患の患者に対して投与することにより、優れた治療効果を示すと考えられる。また、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与による血漿トリグリセリド上昇または血小板濃度の低下などの副作用は認められず、極めて安全に適用することができ、長期間の投与にも適していることから、本発明の治療および／または予防方法および治療用医薬組成物は、きわめて優れた治療および／または予防方法および治療用医薬組成物である。

Claims

式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、脂肪性肝疾患を治療および／または予防するための、医薬組成物。
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、請求項１記載の医薬組成物。
Ｒ^２が水素原子である、請求項１または２記載の医薬組成物。
環Ａが、式：

で示される基である、請求項１～３のいずれかに記載の医薬組成物。
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、請求項１～４のいずれかに記載の医薬組成物。
Ｒ^４がアルキルである、請求項１～５のいずれかに記載の医薬組成物。
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、請求項１～６のいずれかに記載の医薬組成物。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、請求項１記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項１記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項１記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、請求項１記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、請求項１記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項１記載の医薬組成物。
前記医薬組成物の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、請求項１記載の医薬組成物。
前記医薬組成物の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、請求項１記載の医薬組成物。
前記医薬組成物の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、請求項１記載の医薬組成物。
前記医薬組成物の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、請求項１記載の医薬組成物。
脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法であって、式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の有効量を、脂肪性肝疾患の治療および／または予防を必要とする個体に投与する工程を含む、脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法。
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^２が水素原子である、請求項１８または１９記載の治療および／または予防方法。
環Ａが、式：

で示される基である、請求項１８～２０のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、請求項１８～２１のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^４がアルキルである、請求項１８～２２のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、請求項１８～２３のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、請求項１８記載の治療および／または予防方法。
脂肪性肝疾患の治療および／または予防用医薬を製造するための、式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、請求項３５記載の使用。
Ｒ^２が水素原子である、請求項３５または３６記載の使用。
環Ａが、式：

で示される基である、請求項３５～３７のいずれかに記載の使用。
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、請求項３５～３８のいずれかに記載の使用。
Ｒ^４がアルキルである、請求項３５～３９のいずれかに記載の使用。
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、請求項３５～４０のいずれかに記載の使用。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、請求項３５記載の使用。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項３５記載の使用。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項３５記載の使用。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、請求項３５記載の使用。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、請求項３５記載の使用。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項３５記載の使用。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血漿トリグリセリド上昇の副作用を伴わない、請求項３５記載の使用。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、心血管疾患の副作用を伴わない、請求項３５記載の使用。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、インスリン抵抗性が改善される、請求項３５記載の使用。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の投与によって、血小板濃度の低下の副作用を伴わない、請求項３５記載の使用。
式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
式（Ｉ）：

（式中、各記号は請求項５２と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩と併用して投与するための
式（Ｉ）：

（式中、各記号は請求項５２と同意義である。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、請求項５２～５４のいずれかに記載の医薬組成物。
Ｒ^２が水素原子である、請求項５２～５５のいずれかに記載の医薬組成物。
環Ａが、式：

で示される基である、請求項５２～５６のいずれかに記載の医薬組成物。
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、請求項５２～５７のいずれかに記載の医薬組成物。
Ｒ^４がアルキルである、請求項５２～５８のいずれかに記載の医薬組成物。
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、請求項５２～５９のいずれかに記載の医薬組成物。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、請求項５２～５４のいずれかに記載の医薬組成物。
脂肪性肝疾患を治療および／または予防するための、請求項５２～５４のいずれかに記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項６２記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項６２記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、請求項６２記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、請求項６２記載の医薬組成物。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項６２記載の医薬組成物。
式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１はハロアルキルまたは非芳香族炭素環式基であり、
Ｒ^２は水素原子またはハロゲンであり、
Ｒ^３はハロゲンであり、
環Ａは、式：

で示される基であり、
－Ｌ^１－は－Ｏ－（ＣＨ_２）－、－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）－（ＣF_２）－または－（ＣF_２）－（ＣＨ_２）－（ここで、左の結合手は環Ａに結合し、右の結合手は式：

で示される基に結合する。）であり、
Ｒ^４はアルキルまたはハロアルキルであり、
Ｒ^５はアルキルカルボニルまたはカルバモイルである。）で示される化合物またはその製薬上許容される塩；および、
オベチコール酸、セマグルチド、およびＲｅｓｍｅｔｉｒｏｍからなる群より選択される少なくとも一つの化合物またはその製薬上許容される塩を組み合わせて投与する脂肪性肝疾患の治療および／または予防方法。
Ｒ^１が非芳香族炭素環式基である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^２が水素原子である、請求項６８または６９記載の治療および／または予防方法。
環Ａが、式：

で示される基である、請求項６８～７０のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
－Ｌ^１－が－Ｏ－（ＣＨ_２）－または－（ＣＨ_２）_２－である、請求項６８～７１のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^４がアルキルである、請求項６８～７２のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
Ｒ^５がメチルカルボニルまたはカルバモイルである、請求項６８～７３のいずれかに記載の治療および／または予防方法。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩が、下式：

からなる群から選択される化合物またはその製薬上許容される塩である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患が非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝線維症である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝硬変である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。
前記脂肪性肝疾患がＮＡＳＨによって引き起こされる肝細胞癌（ＨＣＣ）である、請求項６８記載の治療および／または予防方法。