Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

WO2006058630A1 - Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung - Google Patents

Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung Download PDF

Info

Publication number
WO2006058630A1
WO2006058630A1 PCT/EP2005/012465 EP2005012465W WO2006058630A1 WO 2006058630 A1 WO2006058630 A1 WO 2006058630A1 EP 2005012465 W EP2005012465 W EP 2005012465W WO 2006058630 A1 WO2006058630 A1 WO 2006058630A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
formula
mmol
compounds
compound
phenyl
Prior art date
Application number
PCT/EP2005/012465
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Susanne Röhrig
Jens Pohlmann
Sabine Arndt
Mario Jeske
Metin Akbaba
Elisabeth Perzborn
Christoph Gerdes
Karl-Heinz Schlemmer
Arounarith Tuch
Mario Lobell
Peter Nell
Nils Burkhardt
Original Assignee
Bayer Healthcare Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Healthcare Ag filed Critical Bayer Healthcare Ag
Priority to JP2007543733A priority Critical patent/JP2008521844A/ja
Priority to US11/792,108 priority patent/US20080214533A1/en
Priority to CA002589740A priority patent/CA2589740A1/en
Priority to EP05815274A priority patent/EP1819701A1/de
Publication of WO2006058630A1 publication Critical patent/WO2006058630A1/de

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors

Definitions

  • the present application relates to novel cyclic iminocarbamates, processes for their preparation, their use for the treatment and / or prophylaxis of diseases and their use for the production of medicaments for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular thromboembolic diseases.
  • Blood clotting is a protective mechanism of the organism that can quickly and reliably "seal" defects in the blood vessel wall, thus preventing or minimizing blood loss, and bleeding after vascular injury is essentially through the coagulation system, which involves an enzymatic cascade It involves numerous clotting factors, each of which, once activated, converts the next inactive precursor to its active form, and at the end of the cascade converts the soluble fibrinogen into the insoluble fibrin Traditionally, one distinguishes between the intrinsic and the extrinsic system of blood coagulation, which culminate in a concluding common pathway, in which the factor Xa, which is formed by the proenzyme factor X, plays a key role, as both coagulation pathway The activated serine protease Xa splits prothrombin into thrombin.
  • thrombin in turn splits fibrinogen to fibrin. Subsequent cross-linking of the fibrin monomers leads to the formation of blood clots and thus to haemostasis. In addition, thrombin is a potent trigger of platelet aggregation, which also makes a significant contribution to hemostasis.
  • Hemostasis is subject to a complex regulatory mechanism.
  • An uncontrolled activation of the coagulation system or a defective inhibition of the activation processes can cause the formation of local thromboses or embolisms in vessels (arteries, veins, lymphatics) or cardiac cavities. This can lead to serious thromboembolic diseases.
  • hypercoagulability - systemically - in case of consumption coagulopathy can lead to disseminated intravascular coagulation.
  • Thromboembolic complications also occur in microangiopathic hemolytic anemias, extracorporeal blood circuits such as hemodialysis, and heart valve prostheses.
  • thromboembolic disease is the leading cause of morbidity and mortality in most industrialized countries [Heart Disease: A Textbook of Cardiovascular Medicine, Eugene Braunwald, 5th Ed., 1997, WB Saunders Company, Philadelphia].
  • the known from the prior art anticoagulants, ie substances for the inhibition or prevention of blood clotting, have various, often serious disadvantages.
  • An efficient method of treatment or prophylaxis of thromboembolic diseases therefore proves to be very difficult and unsatisfactory in practice.
  • heparin is used, which is administered parenterally or subcutaneously. Due to more favorable pharmacokinetic properties, although increasingly low molecular weight heparin is nowadays increasingly preferred; However, this also the known disadvantages described below can not be avoided, which consist in the therapy with heparin. Thus, heparin is orally ineffective and has only a comparatively low half-life. Since heparin simultaneously inhibits several factors of the blood coagulation cascade, there is an unselective effect.
  • a second class of anticoagulants are the vitamin K antagonists. These include, for example, 1,3-indandiones, but especially compounds such as warfarin, phenprocoumon, dicumarol and other coumarin derivatives, which are unsuitable for the synthesis of various products of certain vitamin K-dependent coagulation factors in the liver. Due to the mechanism of action, the effect is only very slow (latency until the onset 36 to 48 hours). Although the compounds can be administered orally, due to the high risk of bleeding and the narrow therapeutic index, a complex individual adjustment and observation of the patient is necessary [J. Hirsh, J. Dalen, D.R.
  • factor Xa is one of the most important targets for anticoagulant drugs [J. Hauptmann, J. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S., Thrombosis Research 1999, 93, 203; SAV Raghavan, M. Dikshit, "Recent Advances in the Status and Targets of Antithrombotic Agents" Drugs Fut. 2002, 27, 669-683; HA Wieland, V. Laux, D. Kozian, M.
  • the object of the present invention is to provide novel substances for controlling diseases, in particular thromboembolic diseases.
  • the present invention relates to compounds of the general formula (I)
  • n is the number 1, 2 or 3
  • R 1 is hydrogen, (C r C4) alkyl, (C r C4) alkanoyl, cyano or hydroxy;
  • R 2 and R 3 are identical or different and independently of one another represent hydrogen, fluorine, chlorine, cyano, (C 1 -C 3 ) -alkyl, cyclopropyl, trifluoromethyl, hydroxy, (C 1 -C 3 ) -alkoxy, trifluoromethoxy or amino stand,
  • A is a phenylene or 5- or 6-membered heteroarylene ring, wherein the two carboxamide groups -CO-NH-phenyl and -CO-NH-Z on adjacent Ring atoms of the phenylene or heteroarylene ring are located and phenylene and heteroarylene may additionally be substituted by halogen and / or (Ci-C 4 ) alkyl,
  • Z is phenyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrazinyl or thienyl, each one or two times, identically or differently, by substituents selected from the group of
  • Compounds according to the invention are the compounds of the formula (I) and their salts, solvates and solvates of the salts comprising the compounds of the formulas below and their salts, solvates and solvates of the salts and of the formula (I) encompassed by formula (I), hereinafter referred to as exemplary compounds and their salts, solvates and solvates of the salts, as far as the compounds of formula (I), the compounds mentioned below are not already salts, solvates and solvates of the salts.
  • the compounds of the invention may exist in stereoisomeric forms (enantiomers, diastereomers).
  • the invention therefore includes the enantiomers or diastereomers and their respective mixtures. From such mixtures of enantiomers and / or diastereomers, the stereoisomerically uniform components can be isolated in a known manner.
  • the present invention encompasses all tautomeric forms.
  • Salts used in the context of the present invention are physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention. Also included are salts which are themselves unsuitable for pharmaceutical applications but can be used, for example, for the isolation or purification of the compounds of the invention.
  • Physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention include acid addition salts of mineral acids, carboxylic acids and sulfonic acids, for example hydrochloric, hydrobromic, sulfuric, phosphoric, methanesulfonic, ethanesulfonic, toluenesulfonic, benzenesulfonic, naphthalenedisulfonic, acetic, trifluoracetic, propionic, lactic Malic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid and benzoic acid.
  • mineral acids for example hydrochloric, hydrobromic, sulfuric, phosphoric, methanesulfonic, ethanesulfonic, toluenesulfonic, benzenesulfonic, naphthalenedisulfonic, acetic, trifluoracetic, propionic, lactic Malic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid and benzoic acid.
  • Physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention also include salts of customary bases, such as, by way of example and by way of preference, alkali metal salts (for example sodium and potassium salts), alkaline earth salts (for example calcium and magnesium salts) and ammonium salts derived from ammonia or organic amines having from 1 to 16 carbon atoms, such as, by way of example and by way of illustration, ethylamine, diethylamine, triethylamine, ethyldiisopropylamine, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, dicyclohexylamine, dimethylaminoethanol, procaine, dibenzylamine, N-methylmorpholine, arginine, lysine, ethylenediamine and N-methylpiperidine.
  • customary bases such as, by way of example and by way of preference, alkali metal salts (for example sodium and potassium salts), alkaline earth salts (for example calcium and magnesium salt
  • solvates are those forms of the compounds according to the invention which form a complex in the solid or liquid state by coordination with solvent molecules. Hydrates are a special form of solvates that coordinate with water. As solvates, hydrates are preferred in the context of the present invention.
  • the present invention also includes prodrugs of the compounds of the invention.
  • prodrugs includes compounds which may themselves be biologically active or inactive, but which are converted during their residence time in the body into compounds of the invention (for example metabolically or hydrolytically).
  • (C 1 -C 4) -AlkVl and (C 1 -C 4 -alkyl in the context of the invention represent a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 4 or 1 to 3 carbon atoms, preferably a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 3 carbon atoms and are preferably: methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, sec-butyl and tert-butyl.
  • (C 1 -C 6 -alkoxy in the context of the invention represents a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 3 carbon atoms and may be mentioned by way of example and preferably: methoxy, ethoxy, n-propoxy and isopropoxy.
  • (C j -CdValkanoyl [(Ci-C 4 ) acyl] in the context of the invention represents a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 4 carbon atoms, which carries a doubly bonded oxygen atom in the 1-position and linked via the 1-position
  • an alkanoyl radical having 2 or 3 carbon atoms may be mentioned by way of example and preferably: formyl, acetyl, propionyl, n-butyryl and isobutyryl.
  • Halogen in the context of the invention includes fluorine, chlorine, bromine and iodine. Preference is given to chlorine or fluorine.
  • 5- or 6-membered heteroarylene is a bivalent, monocyclic, aromatic heterocycle (heteroaromatic) having a total of 5 or 6 ring atoms and up to three identical or different ring heteroatoms from the series N, O and / or S, wherein the two carboxamide groups, independently of each other, in each case via a ring carbon atom or a ring nitrogen atom are linked to heteroaryls.
  • radicals are substituted in the compounds according to the invention, the radicals can, unless otherwise specified, be monosubstituted or polysubstituted. In the context of the present invention, the meaning is independent of each other for all radicals which occur repeatedly. Substitution with one, two or three identical or different substituents is preferred. Very particular preference is given to the substitution with a substituent.
  • a particular embodiment of the invention comprises compounds of the formula (I) in which
  • R 1 is hydrogen, (C, -C 4) alkyl, (C r C 4) is alkanoyl or cyano.
  • n for the number 1 or 2
  • R 1 is hydrogen
  • R 2 is hydrogen
  • R 3 is hydrogen, fluorine or methyl.
  • A is a group of the formula
  • R 4 is hydrogen, halogen or (C r C 4) alkyl
  • R ' is hydrogen or (C r C 4 ) -alkyl
  • # and * denote the sites of attachment to the -CO-NH-phenyl and -CO-NH-Z moieties.
  • A is a group of the formula
  • R 5 is hydrogen or (C r C 4 ) -alkyl
  • # and * denote the sites of attachment to the -CO-NH-phenyl and -CO-NH-Z moieties.
  • Z is a group of the formula
  • R 6 is fluorine, chlorine, cyano, methyl or ethynyl
  • $ means the point of attachment to the nitrogen atom.
  • n for the number 1 or 2
  • R 1 is hydrogen
  • R * is hydrogen
  • R J is hydrogen, fluorine or methyl
  • A is a group of the formula
  • A is a group of the formula
  • # and * are the linking sites with the -CO-NH-phenyl and the -CO-NH-Z grouping.
  • the invention further provides a process for the preparation of the compounds according to the invention of the formula (I) in which R 1 is hydrogen, which comprises reacting compounds of the formula (II)
  • PG is a hydroxy-protecting group, preferably trimethylsilyl or tert-butyldimethylsilyl,
  • n, A, PG, Z, R and R have the meanings given above,
  • n, A, Z, R 2 and R 3 have the meanings given above,
  • n, A, PG, Z, R and R have the meanings given above,
  • n, A, Z, R 2 and R 3 have the meanings given above,
  • Inert solvents for process step (II) + (III) - »(IV) are, for example, ethers, such as diethyl ether, dioxane, tetrahydrofuran, glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether,
  • Hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, hexane, cyclohexane or petroleum fractions,
  • Halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, trichloromethane, tetrachloromethane, 1,2-dichloroethane, trichlorethylene or chlorobenzene, or other solvents such as ethyl acetate, pyridine,
  • Suitable condensing agents for amide formation in process step (II) + (III) -> (IV) are, for example, carbodiimides such as N.N'-diethyl, NN'-dipropyl, N, N'-diisopropyl, N, N ' Dicyclohexylcarbodiimide (DCC), N- (3-dimethylaminoisopropyl) -N'-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC), or phosgene derivatives such as N.N'-carbonyldiimidazole, or 1,2-oxazolium compounds such as 2-ethyl-5 -phenyl-l, 2-oxazolium-3-sulfate or 2-ter / -butyl-5-methyl-isoxazolium perchlorate, or
  • the process step (II) + (DT) ⁇ (IV) is generally carried out in a temperature range from -2O 0 C to + 60 0 C, preferably from 0 0 C to + 4O 0 C.
  • the reaction can be carried out at normal, elevated or reduced pressure (for example from 0.5 to 5 bar). Generally, one works at normal pressure.
  • reaction sequence (VI) -> (VIT) -> (IA) in total is particularly preferred using an acid-labile hydroxy-protecting group, such as trimethylsilyl or tert-butyl-dimethylsilyl, in the presence of an excess of acid as a one-pot reaction, without Isolation of the intermediate (VII), performed.
  • an acid-labile hydroxy-protecting group such as trimethylsilyl or tert-butyl-dimethylsilyl
  • Suitable inert solvents for process steps (V) ⁇ (IA), (IV) ⁇ (VI) and (VII) ⁇ (IA) are in particular tetrahydrofuran, dichloromethane or acetonitrile or mixtures of these Solvent. These process steps are generally carried out in a temperature range of -20 0 C to +50 0 C, preferably from 0 0 C to + 4O 0 C is performed. The reactions can be carried out at normal, elevated or reduced pressure (eg from 0.5 to 5 bar). Generally, one works at normal pressure.
  • Suitable acids in process steps (V) -> (IA) and (VII) -> (IA) and the reaction sequence (VI) -> (VE) -> (IA) are in particular strong inorganic or organic acids such as, for example, hydrogen fluoride, Hydrogen chloride, hydrogen bromide, methanesulfonic acid, trifluoromethanesulfonic acid or trifluoroacetic acid.
  • the process step (IV) - »(VI) is preferably carried out in the presence of a base.
  • a base for this purpose, in particular inorganic bases such as alkali or alkaline earth metal carbonates or bicarbonates such as lithium, sodium, potassium, calcium or cesium carbonate or sodium or potassium bicarbonate, or alkali metal hydrides such as sodium hydride are suitable.
  • the compounds of the formula (II) can be synthesized, for example, by methods customary in the literature by reacting a carboxylic anhydride of the formula (VIII)
  • the compounds of the invention show an unpredictable, valuable spectrum of pharmacological activity.
  • the compounds according to the invention are selective inhibitors of the blood coagulation factor Xa, which act in particular as anticoagulants.
  • the compounds of the invention have favorable physicochemical properties, such as good solubility in water and physiological media, which is advantageous for their therapeutic use.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prophylaxis of diseases, preferably of thromboembolic diseases and / or thromboembolic complications.
  • thromboembolic disorders include in particular diseases such as myocardial infarction with ST segment elevation (STEMI) and without ST segment elevation (non-STEMI), stable angina pectoris, unstable angina pectoris, reocclusions and Restenosis following coronary interventions such as angioplasty or aortocoronary bypass, peripheral arterial occlusive disease, pulmonary embolism, deep venous thrombosis and renal vein thrombosis, transient ischemic attacks and thrombotic and thromboembolic stroke.
  • diseases such as myocardial infarction with ST segment elevation (STEMI) and without ST segment elevation (non-STEMI)
  • stable angina pectoris such as myocardial infarction with ST segment elevation (STEMI) and without ST segment elevation (non-STEMI)
  • unstable angina pectoris unstable angina pectoris
  • reocclusions and Restenosis following coronary interventions such as angioplasty or aortocoronary bypass
  • the substances are therefore also useful in the prevention and treatment of cardiogenic thromboembolism, such as brain ischemia, stroke and systemic thromboembolism and ischaemia, in patients with acute, intermittent or persistent cardiac arrhythmias, such as atrial fibrillation, and those undergoing cardioversion patients with valvular heart disease or with artificial heart valves.
  • cardiogenic thromboembolism such as brain ischemia, stroke and systemic thromboembolism and ischaemia
  • cardiac arrhythmias such as atrial fibrillation
  • the compounds of the invention are suitable for the treatment of disseminated intravascular coagulation (DIC).
  • DIC disseminated intravascular coagulation
  • Thromboembolic complications also occur in microangiopathic hemolytic anemias, extracorporeal blood circuits such as hemodialysis, and heart valve prostheses.
  • the compounds according to the invention are also suitable for the prophylaxis and / or treatment of atherosclerotic vascular diseases and inflammatory diseases such as rheumatic diseases of the musculoskeletal system, moreover also for the prophylaxis and / or treatment of Alzheimer's disease.
  • the compounds of the present invention can inhibit tumor growth and metastasis, microangiopathies, age-related macular degeneration, diabetic retinopathy, diabetic nephropathy and other microvascular diseases and for the prevention and treatment of thromboembolic complications such as venous thromboembolism in tumor patients, particularly those that undergo major surgery or chemo- or radiotherapy.
  • the compounds of the invention may also be used to prevent coagulation ex vivo, e.g. for the preservation of blood and plasma products, for the cleaning / pretreatment of catheters and other medical devices and equipment, for the coating of artificial surfaces of in vivo or ex vivo used medical devices and devices or for biological samples containing factor Xa.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the manufacture of a medicament for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is a method for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases, using an anticoagulatory effective amount of the compound of the invention.
  • Another object of the present invention is a method for preventing blood coagulation in vitro, especially in blood or biological samples containing factor Xa, which is characterized in that an anticoagulatory effective amount of the compound of the invention is added.
  • compositions containing a erf ⁇ ndungs- proper compound and one or more other active ingredients are pharmaceutical compositions containing a erf ⁇ ndungs- proper compound and one or more other active ingredients, in particular for the treatment and / or prophylaxis of the aforementioned diseases.
  • suitable combination active ingredients may be mentioned by way of example and preferably: Lipid-lowering agents, in particular HMG-CoA (3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A) reductase inhibitors;
  • Coronary / vasodilators especially ACE (angiotensin converting enzyme) inhibitors; AII (angiotensin II) receptor antagonists; ⁇ -adrenoceptor antagonists; alpha 1-adrenoceptor antagonists; diuretics; Calcium channel B loose; Substances that one
  • cGMP cyclic guanosine monophosphate
  • plasminogen activators thrombolytics / fibrinolytics
  • thrombolysis / fibrinolysis-enhancing compounds such as inhibitors of plasminogen activator inhibitor (PAI inhibitors) or inhibitors of thrombin-activated fibrinolysis inhibitor (TAFI inhibitors);
  • anticoagulant substances anticoagulants
  • platelet aggregation inhibiting substances platelet aggregation inhibitors, antiplatelet agents
  • Fibrinogen receptor antagonists (glycoprotein IIb / IIIa antagonists);
  • compositions containing at least one compound of the invention usually together with one or more inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients, and their use for the purposes mentioned above.
  • the compounds according to the invention can act systemically and / or locally.
  • they may be applied in a suitable manner, e.g. oral, parenteral, pulmonary, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otic or as an implant or stent.
  • the compounds according to the invention can be administered in suitable administration forms.
  • the compounds of the invention rapidly and / or modified donating application forms containing the compounds of the invention in crystalline and / or amorphized and / or dissolved form, such as tablets (uncoated or coated Tablets, for example with enteric or delayed-dissolving or insoluble coatings controlling the release of the compound of the invention), rapidly disintegrating tablets or films / wafers, films / lyophilisates, capsules (eg hard or soft gelatin capsules), dragees, granules, pellets, powders , Emulsions, suspensions, aerosols or solutions.
  • tablets uncoated or coated Tablets, for example with enteric or delayed-dissolving or insoluble coatings controlling the release of the compound of the invention
  • Parenteral administration can be accomplished by bypassing a resorption step (e.g., intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinal, or intralumbar) or by resorting to absorption (e.g., intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously, or intraperitoneally).
  • a resorption step e.g., intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinal, or intralumbar
  • absorption e.g., intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously, or intraperitoneally.
  • parenteral administration are suitable as application forms u.a. Injection and infusion preparations in the form of solutions, suspensions, emulsions, lyophilisates or sterile powders.
  • Inhalation medicaments including powder inhalers, nebulizers
  • nasal drops solutions or sprays
  • lingual, sublingual or buccal tablets films / wafers or capsules
  • suppositories ear or ophthalmic preparations
  • vaginal capsules aqueous suspensions (lotions, shake mixtures)
  • lipophilic suspensions ointments
  • creams transdermal therapeutic systems (eg plasters)
  • milk pastes, foams, powdered powders, implants or stents.
  • the compounds according to the invention can be converted into the stated administration forms. This can be done in a conventional manner by mixing with inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients.
  • excipients for example microcrystalline cellulose, lactose, mannitol
  • solvents for example liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers and dispersants or wetting agents for example sodium dodecyl sulfate, polyoxysorbitanoleate
  • binders for example polyvinylpyrrolidone
  • synthetic and natural polymers for example albumin
  • Stabilizers eg antioxidants such as ascorbic acid
  • dyes eg inorganic pigments such as iron oxides
  • flavor and / or odoriferous include, among others.
  • Excipients for example microcrystalline cellulose, lactose, mannitol
  • solvents for example liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers and dispersants or wetting agents for example sodium dodecyl
  • the dosage is about 0.01 to 100 mg / kg, preferably about 0.01 to 20 mg / kg and most preferably 0.1 to 10 mg / kg of body weight.
  • Device type MS Micromass ZQ
  • Device type HPLC Waters Alliance 2795; Column: Phenomenex Synergi 2 ⁇ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.5 ml of 50% formic acid, eluent B: 1 l of acetonitrile + 0.5 ml of 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A - »2.5 min 30% A ⁇ 3.0 min 5% A ⁇ 4.5 min 5% A; Flow: 0.0 min 1 ml / min, 2.5 min / 3.0 min / 4.5 min 2 ml / min; Oven: 5O 0 C; UY detection: 210 nm.
  • Device type MS Micromass ZQ
  • Device type HPLC HP 1100 Series
  • UV DAD Column: Phenomenex Synergi 2 ⁇ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm
  • Eluent A 1 liter of water + 0.5 ml of 50% ant acid
  • eluent B 1 liter acetonitrile + 0.5 ml 50% formic acid
  • Flow 0.0 min 1 ml / min, 2.5 min / 3.0 min / 4.5 min 2 ml / min
  • Oven 5O 0 C
  • UV detection 210 nm.
  • Device type MS Micromass ZQ
  • Device type HPLC Waters Alliance 2795; Column: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50 mm x 4.6 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.5 ml of 50% formic acid, eluent B: 1 l of acetonitrile + 0.5 ml of 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 10% B ⁇ 3.0 min 95% B ⁇ 4.0 min 95% B; Oven: 35 ° C; Flow: 0.0 min 1.0 ml / min ⁇ 3.0 min 3.0 ml / min ⁇ 4.0 min 3.0 ml / min; UV detection: 210 nm.
  • Method 7 Method 7:
  • Instrument Micromass GCT, GC6890; Column: Restek RTX-35MS, 30 m ⁇ 250 ⁇ m ⁇ 0.25 ⁇ m; constant flow with helium: 0.88 ml / min; Oven: 6O 0 C; Inlet: 250 ° C; Gradient: 6O 0 C (0.30 keep min), 50 ° C min ⁇ 120 0 C, 16 ° C min ⁇ 250 0 C, 30 ° C (1.7 min hold) / / / min ⁇ 300 0C.
  • a solution of 101 g (716 mmol) of 4-fluoro-atrophenol in 500 ml of ethanol is mixed with 130 ml (2.15 mol, 3 eq.) Of 2-aminoethanol and 274 ml (1.57 mol, 2.2 eq.) Of N, N-diisopropylethylamine.
  • the reaction mixture is stirred at 50 ° C. overnight, then admixed with a further 86 ml (1.43 mol, 2.0 eq.) Of 2-aminoethanol and 249 ml (1.43 mol, 2.0 eq.) Of N, N-diisopropylethylamine and stirred for a further 12 h at 50 ° 0 C stirred.
  • the reaction solution is concentrated in vacuo and the residue is stirred with 600 ml of water. The resulting precipitate is filtered off, washed several times with water and dried.
  • the free base is obtained by stirring a solution of the corresponding salt (Example 1, 2 or 3) in THF with saturated aqueous sodium bicarbonate solution and subsequent extraction with dichloromethane.
  • the suspension is stirred for 2 d at 40 0 C and then diluted with 6 ml of water and 10 ml of dichloromethane. After phase separation, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo. The residue is stirred in diethyl ether, filtered and the solid dried in vacuo.
  • X is CH 3 SO 2 OH
  • the suspension is stirred for 2 d at 4O 0 C and then diluted with 3 ml of water and 4 ml of dichloromethane. After phase separation, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo. The residue is stirred in diisopropyl ether, filtered and the solid dried in vacuo.
  • the regioisomer mixture from example 9A (as crude product, about 27 mmol) and 7.2 g (27 mmol) of the compound from example IA are reacted.
  • the crude product obtained is purified by preparative RP-HPLC [column: Kromasil 100 C 18, 5 ⁇ m, 250 mm x 20 mm; Eluent: water / acetonitrile 1: 9], the two regioisomeric products being separated (see also Example 13).
  • the suspension is stirred for 4 d at 40 0 C and then diluted with 17 ml of water and 23 ml of dichloromethane. After phase separation, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo. The residue is stirred in diisopropyl ether, filtered and the solid dried in vacuo.
  • the regioisomer mixture from example 9A (as crude product, about 27 mmol) and 7.2 g (27 mmol) of the compound from example IA are reacted.
  • the crude product obtained is purified by preparative RP-HPLC [column: Kromasil 100 Cl 8, 5 ⁇ m, 250 mm ⁇ 20 mm; Eluent: water / acetonitrile 1: 9], the two regioisomeric products being separated (see also Example 12).
  • the suspension is stirred for 4 d at 40 0 C and then diluted with 2.5 ml of water and 3.5 ml of dichloromethane. After phase separation, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, over Dried magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo. The residue is purified by flash chromatography on silica gel (eluent: dichloromethane / methanol 200: 1).
  • reaction mixture is to come to RT, stirred for 15 min at RT, cooled again to 0 0 C and then treated with a solution of 90 mg (0:22 mmol) of 5 - [( ⁇ 4 - [(2 - ⁇ [TE7 " ⁇ -butyl (dimethyl) silyl] oxy ⁇ ethyl) amino] phenyl ⁇ amino) carbonyl] -1H-imidazole-4-carboxylic acid methyl ester.
  • the suspension is stirred for 2 d at 40 0 C and then diluted with 3 ml of water and 5 ml of dichloromethane. After phase separation, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo. The residue is purified by preparative RP-HPLC.
  • X is CH 3 SO 2 OH
  • the compounds according to the invention act in particular as selective inhibitors of the blood coagulation factor Xa and do not inhibit or only at significantly higher concentrations other serine proteases such as plasmin or trypsin.
  • “Selective” refers to those coagulation factor Xa inhibitors in which the IC 50 values for factor Xa inhibition are at least 100-fold smaller than the IC 50 values for the inhibition of other serine proteases, in particular plasmin and trypsin in which, with regard to the selectivity test methods, reference is made to the test methods of Examples Bal) and Ba2) described below.
  • the enzymatic activity of human factor Xa is measured by reaction of a FXa-specific chromogenic substrate.
  • the factor Xa cleaves from the chromogenic substrate p-nitroaniline. The determinations are carried out in microtiter plates as follows:
  • the control is pure DMSO.
  • the chromogenic substrate 150 .mu.mol / 1 Pefachrome ® FXa from Pentapharm
  • the absorbance at 405 nm is determined. The extinctions of the test mixtures with test substance are compared with the control batches without test substance and from this the IC 50 values are calculated.
  • test substances are tested for their inhibition of other human serine proteases, such as trypsin and plasmin.
  • trypsin 500 mU / ml
  • plasmin 3.2 nmol / l
  • the anticoagulant effect of the test substances is determined in vitro in human and rabbit plasma.
  • blood is taken off using a 0.11 molar sodium citrate solution as a template in a sodium citrate / blood mixing ratio of 1: 9.
  • the blood is mixed well immediately after collection and centrifuged for 10 minutes at about 2500 g.
  • the supernatant is pipetted off.
  • the prothrombin time (PT, synonyms: thromboplastin time, quick test) is determined in the presence of varying concentrations of test substance or the corresponding solvent using a commercial test kit (Hemoliance ® RecombiPlastin, from Instrumentation Laboratory.).
  • the test compounds are incubated for 3 minutes at 37 ° C. with the plasma.
  • Fasted rabbits (strain: ESD: NZW) are anesthetized by intramuscular administration of a Rompun / Ketavet solution (5 mg / kg or 40 mg / kg).
  • the thrombus formation is in an arteriovenous shunt based on that of CN.
  • Berry et al. [Semin. Thromb. Hemost. 1996, 22, 233-241].
  • the left jugular vein and the right carotid artery are dissected free.
  • An extracorporeal shunt is placed between the two vessels by means of a 10 cm long venous catheter.
  • This catheter is centered in another 4 cm long polyethylene tube (PE 160, Becton Dickenson) which incorporates a roughened and looped nylon thread to create a thrombogenic surface.
  • PE 160 polyethylene tube
  • Becton Dickenson a polyethylene tube
  • the extracorporeal circuit is maintained for 15 minutes. Then the shunt is removed and the nylon thread with the thrombus weighed immediately. The net weight of the nylon thread was determined before the start of the test.
  • the test substances are administered either intravenously via an ear vein or orally by gavage prior to application of the extracorporeal circuit.
  • the compounds according to the invention can be converted into pharmaceutical preparations as follows:
  • the mixture of compound of the invention, lactose and starch is granulated with a 5% solution (m / m) of the PVP in water.
  • the granules are mixed after drying with the magnesium stearate for 5 minutes.
  • This mixture is compressed with a conventional tablet press (for the tablet format see above).
  • a pressing force of 15 kN is used as a guideline for the compression.
  • a single dose of 100 mg of the compound of the invention corresponds to 10 ml of oral suspension.
  • the rhodigel is suspended in ethanol, the compound according to the invention is added to the suspension. While stirring, the addition of water. Until the completion of the swelling of Rhodigels is stirred for about 6 h.
  • a single dose of 100 mg of the compound according to the invention corresponds to 20 g of oral solution.
  • the compound of the invention is suspended in the mixture of polyethylene glycol and polysorbate with stirring. The stirring is continued until complete dissolution of the compound according to the invention.
  • the compound of the invention is dissolved at a concentration below saturation solubility in a physiologically acceptable solvent (e.g., isotonic saline, glucose solution 5% and / or PEG 400 solution 30%).
  • a physiologically acceptable solvent e.g., isotonic saline, glucose solution 5% and / or PEG 400 solution 30%.
  • the solution is sterile filtered and filled into sterile and pyrogen-free injection containers.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Die vorliegende Anmeldung betrifft neue cyclische Iminocarbamate der Formel (I), in welcher R1, R2, R3, A, Z und n die in den Ansprüchen angegebenen Bedeutungen haben, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere von thromboembolischen Erkrankungen.

Description

Cvclische Iminocarbamate und ihre Verwendung
Die vorliegende Anmeldung betrifft neue cyclische Iminocarbamate, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krank- heiten, insbesondere von thromboembolischen Erkrankungen.
Die Blutgerinnung ist ein Schutzmechanismus des Organismus, mit dessen Hilfe Defekte in der Gefäßwand rasch und zuverlässig „abgedichtet" werden können. So kann ein Blutverlust vermieden bzw. minimiert werden. Die Blutstillung nach Gefäßverletzung erfolgt im wesentlichen durch das Gerinnungssystem, bei dem eine enzymatische Kaskade komplexer Reaktionen von Plasmaproteinen ausgelöst wird. Hierbei sind zahlreiche Blutgerinnungsfaktoren beteiligt, von denen jeder, sobald aktiviert, die jeweils nächste inaktive Vorstufe in ihre aktive Form überfuhrt. Am Ende der Kaskade steht die Umwandlung des löslichen Fibrinogens in das unlösliche Fibrin, so dass es zu einem Blutgerinnsel kommt. Traditionell unterscheidet man bei der Blutgerinnung zwischen dem intrinsischen und dem extrinsischen System, die in einem abschließenden gemein- samen Reaktionsweg münden. Hierbei kommt dem Faktor Xa, der aus dem Proenzym Faktor X gebildet wird, eine Schlüsselrolle zur, da er beide Gerinnungswege verbindet. Die aktivierte Serin- protease Xa spaltet Prothrombin zu Thrombin. Das entstandene Thrombin wiederum spaltet seinerseits Fibrinogen zu Fibrin. Durch anschließende Quervernetzung der Fibrin-Monomere kommt es zur Bildung von Blutgerinnseln und damit zur Blutstillung. Darüber hinaus ist Thrombin ein potenter Auslöser der Thrombozytenaggregation, die ebenfalls einen erheblichen Beitrag bei der Hämostase leistet.
Die Hämostase unterliegt einem komplexen Regulationsmechanismus. Eine unkontrollierte Aktivierung des Gerinnungssystems oder eine defekte Hemmung der Aktivierungsprozesse kann die Bildung von lokalen Thrombosen oder Embolien in Gefäßen (Arterien, Venen, Lymphgefäßen) oder Herzhöhlen bewirken. Dies kann zu schwerwiegenden thromboembolischen Erkrankungen führen. Darüber hinaus kann eine Hyperkoagulabilität - systemisch - bei einer Verbrauchskoagulo- pathie zur disseminierten intravasalen Gerinnung führen. Thromboembolische Komplikationen treten ferner auf bei mikroangiopathischen hämolytischen Anämien, extrakorporalen Blutkreisläufen, wie Hämodialyse, sowie Herzklappenprothesen.
Thromboembolische Erkrankungen sind die häufigste Ursache von Morbidität und Mortalität in den meisten industrialisierten Ländern [Heart Disease: A Textbook of Cardiovascular Medicine, Eugene Braunwald, 5. Auflage, 1997, W.B. Saunders Company, Philadelphia]. Die aus dem Stand der Technik bekannten Antikoagulantien, d.h. Stoffe zur Hemmung oder Verhinderung der Blutgerinnung, weisen verschiedene, oftmals gravierende Nachteile auf. Eine effiziente Behandlungsmethode bzw. Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen erweist sich in der Praxis deshalb als sehr schwierig und unbefriedigend.
Für die Therapie und Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen findet zum einen Heparin Verwendung, das parenteral oder subkutan appliziert wird. Aufgrund günstigerer pharmakokinetischer Eigenschaften wird zwar heutzutage zunehmend niedermolekulares Heparin bevorzugt; allerdings können auch hierdurch die im folgenden geschilderten bekannten Nachteile nicht vermieden werden, die bei der Therapierung mit Heparin bestehen. So ist Heparin oral unwirksam und besitzt nur eine vergleichsweise geringe Halbwertszeit. Da Heparin gleichzeitig mehrere Faktoren der Blutgerinnungskaskade hemmt, kommt es zu einer unselektiven Wirkung. Darüber hinaus besteht ein hohes Blutungsrisiko, insbesondere können Hirnblutungen und Blutungen im Gastrointestinaltrakt auftreten, und es kann zu Thrombopenie, Alopecia medico- mentosa oder Osteoporose kommen [Pschyrembel, Klinisches Wörterbuch, 257. Auflage, 1994, Walter de Gruyter Verlag, Seite 610, Stichwort „Heparin"; Römpp Lexikon Chemie, Version 1.5, 1998, Georg Thieme Verlag Stuttgart, Stichwort „Heparin"].
Eine zweite Klasse von Antikoagulantien stellen die Vitamin K-Antagonisten dar. Hierzu gehören beispielsweise 1,3-Indandione, vor allem aber Verbindungen wie Warfarin, Phenprocoumon, Dicumarol und andere Cumarin-Derivate, die unselektiv die Synthese verschiedener Produkte bestimmter Vitamin K-abhängiger Gerinnungsfaktoren in der Leber hemmen. Durch den Wirkmechanismus bedingt, setzt die Wirkung aber nur sehr langsam ein (Latenzzeit bis zum Wirkeintritt 36 bis 48 Stunden). Die Verbindungen können zwar oral appliziert werden, aufgrund des hohen Blutungsrisikos und des engen therapeutischen Indexes ist aber eine aufwendige individuelle Einstellung und Beobachtung des Patienten notwendig [J. Hirsh, J. Dalen, D.R. Anderson et al., „Oral anticoagulants: Mechanism of action, clinical effectiveness, and optimal therapeutic ränge" Chest 2001, 119, 8S-21S; J. Ansell, J. Hirsh, J. Dalen et al., „Managing oral anticoagulant therapy" Chest 2001, 119, 22S-38S; P.S. Wells, A.M. Holbrook, N.R. Crowther et al, „Inter- actions of warfarin with drugs and ϊooά" Ann. Intern. Med. 1994, 121, 676-683].
In jüngster Zeit ist ein neuer Therapieansatz für die Behandlung und Prophylaxe von thrombo- embolischen Erkrankungen beschrieben worden. Ziel dieses neuen Therapieansatzes ist die Inhibierung von Faktor Xa. Entsprechend der zentralen Rolle, die Faktor Xa in der Blutgerinnungskaskade spielt, stellt Faktor Xa eines der wichtigsten Targets für antikoagulatorische Wirkstoffe dar [J. Hauptmann, J. Stürzebecher, Thrombosis Research 1999, 93, 203; S.A.V. Raghavan, M. Dikshit, „Recent advances in the Status and targets of antithrombotic agents" Drugs Fut. 2002, 27, 669-683; H.A. Wieland, V. Laux, D. Kozian, M. Lorenz, „Approaches in anticoagulation: Rationales for target positioning" Curr. Opin. Investig. Drugs 2003, 4, 264-271; UJ. Ries, W. Wienen, „Serine proteases as targets for antithrombotic therapy" Drugs Fut. 2003, 28, 355-370; L.-A. Linkins, J.I. Weitz, „New anticoagulant therapy" Annu. Rev. Med. 2005, 56, 63-77 (online- Publikation August 2004)].
Dabei ist gezeigt worden, dass verschiedene, sowohl peptidische wie nicht-peptidische Verbindungen in Tiermodellen als Faktor Xa-Inhibitoren wirksam sind. Eine große Anzahl von direkten Faktor Xa-Inhibitoren ist bislang bekannt [J.M. Walenga, W.P. Jeske, D. Hoppensteadt, J. Fareed, „Factor Xa Inhibitors: Today and beyond" Curr. Opin. Investig. Drugs 2003, 4, 272-281; J. Ruef, H.A. Katus, „New antithrombotic drugs on the horizon" Expert Opin. Investig. Drugs 2003, 12, 781- 797; M.L. Quan, J.M. Smallheer, „The race to an orally active Factor Xa inhibitor: Recent advances" Curr. Opin. Drug Discovery & Development 2004, 7, 460-469]. Weiterhin sind nicht-peptidische, niedermolekulare Faktor Xa-Inhibitoren beispielsweise auch in WO 03/047520, WO 02/079145, WO 02/000651 und WO 02/000647 beschrieben.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung liegt in der Bereitstellung neuer Substanzen zur Bekämpfung von Erkrankungen, insbesondere von thromboembolischen Erkrankungen.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der allgemeinen Formel (I)
Figure imgf000004_0001
in welcher
n für die Zahl 1 , 2 oder 3 steht,
R1 für Wasserstoff, (CrC4)-Alkyl, (CrC4)-Alkanoyl, Cyano oder Hydroxy steht,
R2 und R3 gleich oder verschieden sind und unabhängig voneinander für Wasserstoff, Fluor, Chlor, Cyano, (Ci-C3)-Alkyl, Cyclopropyl, Trifluormethyl, Hydroxy, (Ci-C3)-Alkoxy, Trifluor- methoxy oder Amino stehen,
A für einen Phenylen- oder 5- oder 6-gliedrigen Heteroarylen-Ring steht, wobei sich die beiden Carboxamid-Gruppierungen -CO-NH-Phenyl und -CO-NH-Z an benachbarten Ringatomen des Phenylen- bzw. Heteroarylen-Ringes befinden und Phenylen und Heteroarylen zusätzlich durch Halogen und/oder (Ci-C4)-Alkyl substituiert sein können,
und
Z für Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Pyrazinyl oder Thienyl steht, das jeweils ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, durch Substituenten ausgewählt aus der Gruppe von
Fluor, Chlor, Cyano, (C]-C4)-Alkyl, welches seinerseits durch Amino substituiert sein kann, Ethinyl und Amino substituiert sein kann,
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formeln und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) umfassten, nachfolgend als Ausführungsbeispiele genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in stereoisomeren Formen (Enantiomere, Diastereomere) existieren. Die Erfindung umfasst deshalb die Enantiomeren oder Diastereomeren und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren.
Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegende Erfindung sämtliche tautomere Formen.
Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind, jedoch beispielsweise für die Isolierung oder Reinigung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethan- sulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Trifluor- essigsaure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Benzoesäure. Physiologisch unbedenkliche Salze der erfϊndungsgemäßen Verbindungen umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C-Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methyl- morpholin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und N-Methylpiperidin.
Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfindungsgemäßen Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungs- mittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt. Als Solvate sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung Hydrate bevorzugt.
Außerdem umfasst die vorliegende Erfindung auch Prodrugs der erfindungsgemäßen Verbindungen. Der Begriff "Prodrugs" umfasst Verbindungen, welche selbst biologisch aktiv oder inaktiv sein können, jedoch während ihrer Verweilzeit im Körper zu erfindungsgemäßen Verbindungen umgesetzt werden (beispielsweise metabolisch oder hydrolytisch).
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:
(C1-C^)-AIkVl und (Cr-CiVAlkyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 4 bzw. 1 bis 3 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, iso-Butyl, sec.-Butyl und tert.-Butyl.
(Ci-CO-Alkoxy steht im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxy- rest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy und Isopropoxy.
(Cj-CdVAlkanoyl [(Ci-C4)-Acyl] steht im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, der in der 1 -Position ein doppelt gebundenes Sauerstoffatom trägt und über die 1 -Position verknüpft ist. Bevorzugt ist ein Alkanoylrest mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Formyl, Acetyl, Pro- pionyl, n-Butyryl und iso-Butyryl.
Halogen schließt im Rahmen der Erfindung Fluor, Chlor, Brom und Iod ein. Bevorzugt sind Chlor oder Fluor. 5- oder 6-gliedriges Heteroarylen steht im Rahmen der Erfindung für einen bivalenten, mono- cyclischen, aromatischen Heterocyclus (Heteroaromaten) mit insgesamt 5 oder 6 Ringatomen und bis zu drei gleichen oder verschiedenen Ring-Heteroatomen aus der Reihe N, O und/oder S, wobei die beiden Carboxamid-Gruppierungen, unabhängig voneinander, jeweils über ein Ring-Kohlen- stoffatom oder ein Ring-Stickstoffatom mit Heteroarylen verknüpft sind. Beispielhaft seien genannt: Furylen, Pyrrolylen, Thienylen, Pyrazolylen, Imidazolylen, Thiazolylen, Oxazolylen, Isoxa- zolylen, Isothiazolylen, Triazolylen, Oxadiazolylen, Thiadiazolylen, Pyridylen, Pyrimidinylen, Pyridazinylen, Pyrazinylen. Bevorzugt sind 5- oder 6-gliedrige Heteroarylen-Gruppen mit bis zu zwei Heteroatomen aus der Reihe N, O und/oder S wie beispielsweise Furylen, Pyrrolylen, Thienylen, Thiazolylen, Oxazolylen, Imidazolylen, Pyrazolylen, Pyridylen, Pyrimidinylen, Pyridazinylen, Pyrazinylen.
Wenn Reste in den erfindungsgemäßen Verbindungen substituiert sind, können die Reste, soweit nicht anders spezifiziert, ein- oder mehrfach substituiert sein. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung gilt, dass für alle Reste, die mehrfach auftreten, deren Bedeutung unabhängig voneinander ist. Eine Substitution mit ein, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Substituenten ist bevorzugt. Ganz besonders bevorzugt ist die Substitution mit einem Substituenten.
Eine besondere Ausführungsform der Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel (I), in welcher
R1 für Wasserstoff, (C,-C4)-Alkyl, (CrC4)-Alkanoyl oder Cyano steht.
Bevorzugt sind Verbindungen der Formel (I), in welcher
n für die Zahl 1 oder 2,
R1 für Wasserstoff,
R2 für Wasserstoff und
R3 für Wasserstoff, Fluor oder Methyl steht.
Bevorzugt sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000008_0001
steht, worin
R4 Wasserstoff, Halogen oder (CrC4)-Alkyl,
R' Wasserstoff oder (CrC4)-Alkyl
und
# und * die Verknüpfungsstellen mit der -CO-NH-Phenyl- und der -CO-NH-Z-Gruppierung bedeuten.
Bevorzugt sind weiterhin Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000009_0001
steht, worin
R5 Wasserstoff oder (CrC4)-Alkyl
und
# und * die Verknüpfungsstellen mit der -CO-NH-Phenyl- und der -CO-NH-Z-Gruppierung bedeuten.
Bevorzugt sind auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
Z für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000009_0002
steht, worin
R6 Fluor, Chlor, Cyano, Methyl oder Ethinyl
und
$ die Verknüpfungsstelle mit dem Stickstoffatom bedeutet.
Besonders bevorzugt sind Verbindungen der Formel (I), in welcher
n für die Zahl 1 oder 2,
R1 für Wasserstoff,
R* für Wasserstoff,
RJ für Wasserstoff, Fluor oder Methyl,
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000010_0001
worin
die Verknüpfungsstelle mit der -CO-NH-Phenyl-Gruppierung und
die Verknüpfungsstelle mit der -CO-NH-Z-Gruppierung bedeuten,
und
für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000010_0002
worin $ die Verknüpfungsstelle mit dem Stickstoffatom bedeutet,
stehen,
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
In einer besonderen Ausführungsform der Erfindung steht hierbei
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000010_0003
worin # und * die Verknüpfungsstellen mit der -CO-NH-Phenyl- und der -CO-NH-Z- Gruppierung bedeuten.
Ganz besonders bevorzugt sind die Verbindungen der Formel (I) mit folgenden Strukturen:
Figure imgf000011_0001
und
Figure imgf000011_0002
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Die in den jeweiligen Kombinationen bzw. bevorzugten Kombinationen von Resten im einzelnen angegebenen Reste-Definitionen werden unabhängig v^pn den jeweiligen angegebenen Kombina- tionen der Reste beliebig auch durch Reste-Definitionen anderer Kombinationen ersetzt.
Ganz besonders bevorzugt sind Kombinationen von zwei oder mehreren der oben genannten Vorzugsbereiche. Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung der erfϊndungsgemäßen Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 für Wasserstoff steht, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der Formel (II)
Figure imgf000012_0001
in welcher A und Z die oben angegebenen Bedeutungen haben,
zunächst in einem inerten Lösungsmittel unter Aktivierung der Carbonsäure-Funktion mit einer Verbindung der Formel (HT)
Figure imgf000012_0002
in welcher n, R und R die oben angegebenen Bedeutungen haben
und
PG für eine Hydroxy-Schutzgruppe, vorzugsweise für Trimethylsilyl oder tert.-Butyldimethyl- silyl, steht,
zu Verbindungen der Formel (IV)
Figure imgf000012_0003
in welcher n, A, PG, Z, R und R die oben angegebenen Bedeutungen haben,
umsetzt, anschließend entweder
[A] durch Abspaltung der Schutzgruppe PG unter üblichen Bedingungen zu Verbindungen der Formel (V)
Figure imgf000013_0001
in welcher n, A, Z, R2 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben,
gelangt und die Verbindungen der Formel (V) dann in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Säure mit Bromcyan in Verbindungen der Formel (I-A)
Figure imgf000013_0002
in welcher n, A, Z, R und R die oben angegebenen Bedeutungen haben,
überfuhrt
oder
[B] zuerst in einem inerten Lösungsmittel mit Bromcyan, vorzugsweise in Gegenwart einer Base, zu Verbindungen der Formel (VI)
Figure imgf000013_0003
in welcher n, A, PG, Z, R und R die oben angegebenen Bedeutungen haben,
umsetzt, anschließend durch Abspaltung der Schutzgruppe PG zu Verbindungen der Formel (VII)
Figure imgf000014_0001
in welcher n, A, Z, R2 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben,
gelangt und dann die Verbindungen der Formel (VII) in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Säure zu Verbindungen der Formel (I-A) cyclisiert
und die Verbindungen der Formel (I-A) gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen oder Säuren zu ihren Solvaten, Salzen und/oder Solvaten der Salze umsetzt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I), in welcher R1 nicht für Wasserstoff steht, können ausgehend von den Verbindungen der Formel (V) in Analogie zu literaturbekannten Ver- fahren hergestellt werden [vgl. z.B. für R1 = Alkanoyl: D. Douglass, J. Amer. Chem. Soc. 1934, 56, 719 und T. Shibanuma, M. Shiono, T. Mukaiyama, Chem. Lett. 1977, 575-576; für R1 = Cyano: a) R. Evers, M. Michalik, J. Prakt. Chem. 1991, 333, 699-710; N. Maezaki, A. Furusawa, S. Uchida, T. Tanaka, Tetrahedron 2001, 57, 9309-9316; G. Berecz, J. Reiter, G. Argay, A. Kaiman, J. Heterocycl. Chem. 2002, 39, 319-326; b) R. Mohr, A. Buschauer, W. Schunack, Arch. Pharm. (Weinheim Ger.) 1988, 321, 221-227; für R1 = Alkyl: a) V.A. Vaillancourt et al, J. Med. Chem. 2001, 44, 1231-1248; b) F.B. Dains et al, J. Amer. Chem. Soc. 1925, 47, 1981-1989; J. Amer. Chem. Soc. 1922, 44, 2637-2643 und T. Shibanuma, M. Shiono, T. Mukaiyama, Chem. Lett. 1977, 575-576.
Inerte Lösungsmittel für den Verfahrensschritt (II) + (III) — » (IV) sind beispielsweise Ether wie Diethylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether,
Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen,
Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Trichlormethan, Tetrachlormethan, 1,2-Dichlor- ethan, Trichlorethylen oder Chlorbenzol, oder andere Lösungsmittel wie Ethylacetat, Pyridin,
Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, NN'-Dimethylpropylenharnstoff (DMPU), N-Methyl- pyrrolidon (ΝMP), Acetonitril oder Aceton. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten
Lösungsmittel zu verwenden. Bevorzugt sind Dichlormethan, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Gemische dieser Lösungsmittel. AIs Kondensationsmittel für die Amidbildung im Verfahrensschritt (II) + (III) -> (IV) eignen sich beispielsweise Carbodiimide wie N.N'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, N,N'-Diisopropyl-, N,N'-Dicyclo- hexylcarbodiimid (DCC), N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC), oder Phosgen-Derivate wie N.N'-Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-l,2-oxazolium-3-sulfat oder 2-ter/.-Butyl-5-methyl-isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-l-ethoxycarbonyl-l,2-dihydrochinolin, oder Isobutyl- chlorformiat, Propanphosphonsäureanhydrid, Cyanophosphonsäurediethylester, Bis-(2-oxo-3-oxa- zolidinyl)-phosphorylchlorid, Benzotriazol- 1 -yloxy-tris(dimethylamino)phosphonium-hexafluoro- phosphat, Benzotriazol-l-yloxy-tris(pyrrolidino)phosphonium-hexafluorophosphat (PyBOP), O- (Benzotriazol-1 -yl)-N,N,N' N -tetramethyluronium-tetrafluoroborat (TBTU), 0-(Benzotriazol-l -yl> NNN'.N'-tetramethyluronium-hexafluorophosphat (HBTU), 2-(2-Oxo-l-(2H)-pyridyl)-l,l,3,3-te- tramethyluronium-tetrafluoroborat (TPTU), 0-(7-Azabenzotriazol-l -yO-N.N.N'.N'-tetramethyl- uronium-hexafluorophosphat (ΗATU) oder O-(lH-6-Chlorbenzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetramethyl- uronium-tetrafluoroborat (TCTU), gegebenenfalls in Kombination mit weiteren Ηilfsstoffen wie 1- Ηydroxybenzotriazol (ΗOBt) oder N-Ηydroxysuccinimid (ΗOSu), sowie als Basen Alkali- carbonate, z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat oder -hydrogencarbonat, oder organische Basen wie Trialkylamine, z.B. Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin oder NN-Diisopropyl- ethylamin. Bevorzugt wird TBTU in Kombination mitNN-Diisopropylethylamin verwendet.
Der Verfahrensschritt (II) + (DT) → (IV) wird im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -2O0C bis +600C, bevorzugt von 00C bis +4O0C, durchgeführt. Die Umsetzung kann bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. von 0.5 bis 5 bar). Im Allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck.
In den Verfahrensschritten (PV) — > (V) bzw. (VI) -> (VII) kann die Abspaltung von Trimethylsilyl oder tert.-Butyldimethylsilyl als bevorzugt verwendeten Ηydroxy-Schutzgruppen (PG) vorzugs- weise mit Hilfe von N-Tetrabutylammoniumfluorid (TBAF) oder im Falle der Reaktion (IV) -» (V) auch mit Fluorwasserstoff erfolgen. Die Umsetzungen werden im Allgemeinen in Tetrahydro- furan als Lösungsmittel in einem Temperaturbereich von O0C bis +4O0C durchgeführt.
Die Reaktionssequenz (VI) -> (VIT) — > (I-A) insgesamt wird besonders bevorzugt unter Verwendung einer säurelabilen Hydroxy-Schutzgruppe, wie beispielsweise Trimethylsilyl oder tert.-Butyl- dimethylsilyl, in Gegenwart eines Überschusses einer Säure als Eintopf-Reaktion, ohne Isolierung der Zwischenstufe (VII), durchgeführt.
Als inerte Lösungsmittel für die Verfahrensschritte (V) → (I-A), (IV) → (VI) und (VII) → (I-A) eignen sich insbesondere Tetrahydrofuran, Dichlormethan oder Acetonitril oder Gemische dieser Lösungsmittel. Diese Verfahrensschritte werden im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -200C bis +500C, bevorzugt von 00C bis +4O0C, durchgeführt. Die Umsetzungen können bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. von 0.5 bis 5 bar). Im Allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck.
Als Säuren eignen sich bei den Verfahrensschritten (V) -> (I-A) und (VII) -> (I-A) und der Reaktionssequenz (VI) — > (VE) — > (I-A) insbesondere starke anorganische oder organische Säuren wie beispielsweise Fluorwasserstoff, Chlorwasserstoff, Bromwasserstoff, Methansulfonsäure, Trifluor- methansulfonsäure oder Trifluoressigsäure.
Der Verfahrensschritt (IV) -» (VI) wird bevorzugt in Gegenwart einer Base durchgeführt. Hierfür eignen sich insbesondere anorganische Basen wie beispielsweise Alkali- oder Erdalkalicarbonate oder -hydrogencarbonate wie Lithium-, Natrium-, Kalium-, Calcium- oder Cäsiumcarbonat oder Natrium- oder Kaliumhydrogencarbonat, oder Alkalihydride wie Natriumhydrid.
Die Verbindungen der Formel (II) können beispielsweise nach literaturüblichen Verfahren durch Umsetzung eines Carbonsäureanhydrids der Formel (VIII)
Figure imgf000016_0001
in welcher A die oben angegebenen Bedeutungen hat,
mit einem Amin der Formel (IX)
H2N-Z (IX),
in welcher Z die oben angegebenen Bedeutungen hat,
erhalten werden.
Die Verbindungen der Formel (III) können in Analogie zu literaturbekannten Verfahren beispielsweise durch Umsetzung von Verbindungen der Formel (X)
Figure imgf000017_0001
in welcher R2 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben,
mit Verbindungen der Formel (XI)
"(CH2)n
HO NH0 (XI),
in welcher n die oben angegebenen Bedeutungen hat,
zu Verbindungen der Formel (XII)
Figure imgf000017_0002
in welcher n, R2 und R3 die oben angegeben Bedeutungen haben,
nachfolgende Einführung der Hydroxy-Schutzgruppe PG und anschließende Reduktion der Nitro- Gruppe zum Amin erhalten werden.
Die Verbindungen der Formeln (VIII), (IX), (X) und (XI) sind kommerziell erhältlich, literaturbekannt oder können in Analogie zu literaturbekannten Verfahren hergestellt werden.
Die Herstellung der erfmdungsgemäßen Verbindungen kann durch das folgende Syntheseschema veranschaulicht werden: Schema
Imidazol
Figure imgf000018_0001
'BuMe2SiO 1BuMe2SiO
Figure imgf000018_0003
Figure imgf000018_0002
Figure imgf000018_0004
'BuMe2SiO
Figure imgf000018_0005
Figure imgf000018_0006
[Abkürzungen: 1Bu = tert.-Butyl; Et = Ethyl; Me = Methyl; 1Pr = Isopropyl; TBTU = 0-(Benzo- triazol- 1 -yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluoroborat] .
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches Wirkspektrum.
Sie eignen sich daher zur Verwendung als Arzneimittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten bei Menschen und Tieren.
Bei den erfindungsgemäßen Verbindungen handelt es sich um selektive Inhibitoren des Blutgerinnungsfaktors Xa, die insbesondere als Antikoagulantien wirken.
Darüber hinaus verfügen die erfindungsgemäßen Verbindungen über günstige physikochemische Eigenschaften, wie beispielsweise eine gute Löslichkeit in Wasser und physiologischen Medien, was für ihre therapeutische Anwendung von Vorteil ist.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist der Einsatz der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, vorzugsweise von thromboembo- lischen Erkrankungen und/oder thromboembolischen Komplikationen.
Zu den „thromboembolischen Erkrankungen" im Sinne der vorliegenden Erfindung zählen insbesondere Erkrankungen wie Herzinfarkt mit ST-Segment-Erhöhung (STEMI) und ohne ST- Segment-Erhöhung (non-STEMI), stabile Angina Pectoris, instabile Angina Pectoris, Reokklusio- nen und Restenosen nach Koronarinterventionen wie Angioplastie oder aortokoronarem Bypass, periphere arterielle Verschlusskrankheiten, Lungenembolien, tiefe venöse Thrombosen und Nierenvenenthrombosen, transitorische ischämische Attacken sowie thrombotischer und thrombo- embolischer Hirnschlag.
Die Substanzen eignen sich daher auch zur Prävention und Behandlung von kardiogenen Thrombo- embolien, wie beispielsweise Hirn-Ischämien, Schlaganfall und systemischen Thromboembolien und Ischämien, bei Patienten mit akuten, intermittierenden oder persistierenden Herzarrhythmien, wie beispielsweise Vorhofflimmern, und solchen, die sich einer Kardioversion unterziehen, ferner bei Patienten mit Herzklappen-Erkrankungen oder mit künstlichen Herzklappen. Darüber hinaus sind die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung der disseminierten intravasalen Gerinnung (DIC) geeignet.
Thromboembolische Komplikationen treten ferner auf bei mikroangiopathischen hämolytischen Anämien, extrakorporalen Blutkreisläufen, wie Hämodialyse, sowie Herzklappenprothesen. Außerdem kommen die erfϊndungsgemäßen Verbindungen auch für die Prophylaxe und/oder Behandlung von atherosklerotischen Gefäßerkrankungen und entzündlichen Erkrankungen wie rheumatische Erkrankungen des Bewegungsapparats in Betracht, darüber hinaus ebenso für die Prophylaxe und/oder Behandlung der Alzheimer'schen Erkrankung. Außerdem können die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Inhibition des Tumorwachstums und der Metastasenbildung, bei Mikroangiopathien, altersbedingter Makula-Degeneration, diabetischer Retinopathie, diabetischer Nephropathie und anderen mikrovaskulären Erkrankungen sowie zur Prävention und Behandlung thromboembolischer Komplikationen, wie beispielsweise venöser Thromboembolien, bei Tumorpatienten, insbesondere solchen, die sich größeren chirurgischen Eingriffen oder einer Chemo- oder Radiotherapie unterziehen, eingesetzt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können darüber hinaus auch zur Verhinderung von Koagulation ex vivo eingesetzt werden, z.B. zur Konservierung von Blut- und Plasmaprodukten, zur Reinigung/Vorbehandlung von Kathetern und anderen medizinischen Hilfsmitteln und Geräten, zur Beschichrung künstlicher Oberflächen von in vivo oder ex vivo eingesetzten medizinischen Hilfsmitteln und Geräten oder bei biologischen Proben, die Faktor Xa enthalten.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer antikoagulatorisch wirksamen Menge der erfindungsgemäßen Verbindung.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Verhinderung der Blutkoagulation in vitro, insbesondere bei Blutkonserven oder biologischen Proben, die Faktor Xa enthalten, das dadurch gekennzeichnet ist, dass eine antikoagulatorisch wirksame Menge der erfindungsgemäßen Verbindung zugegeben wird.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, enthaltend eine erfϊndungs- gemäße Verbindung und einen oder mehrere weitere Wirkstoffe, insbesondere zur Behandlung und/oder Prophylaxe der zuvor genannten Erkrankungen. Als geeignete Kombinationswirkstoffe seien beispielhaft und vorzugsweise genannt: • Lipidsenker, insbesondere HMG-CoA-(3-Hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzym A)-Reduktase- Inhibitoren;
• Koronartherapeutika/Vasodilatatoren, insbesondere ACE-(Angiotensin-Converting-Enzyme)- Inhibitoren; AII-(Angiotensin II)-Rezeptor-Antagonisten; ß-Adrenozeptor- Antagonisten; alpha- 1-Adrenozeptor-Antagonisten; Diuretika; Calciumkanal-B locker; Substanzen, die eine
Erhöhung von cyclischem Guanosinmonophosphat (cGMP) bewirken, wie beispielsweise Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase;
• Plasminogen-Aktivatoren (Thrombolytika/Fibrinolytika) und die Thrombolyse/Fibrinolyse steigernde Verbindungen wie Inhibitoren des Plasminogen-Aktivator-Inhibitors (PAI-Inhibi- toren) oder Inhibitoren des Thrombin-aktivierten Fibrinolyse-Inhibitors (TAFI-Inhibitoren);
• antikoagulatorisch wirksame Substanzen (Antikoagulantien);
• plättchenaggregationshemmende Substanzen (Plättchenaggregationshemmer, Thrombozytenaggregationshemmer);
• Fibrinogen-Rezeptor-Antagonisten (Glycoprotein-IIb/IIIa- Antagonisten) ;
• sowie Antiarrhythmika.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat bzw. Stent.
Für diese Applikationswege können die erfϊndungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Appli- kationsformen verabreicht werden.
Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende, die erfindungsgemäßen Verbindungen schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nicht-überzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophylisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weichgelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen.
Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.
Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen, -lösungen oder -sprays, lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augen- präparationen, Vaginalkapseln, wässrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme (z.B. Pflaster), Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.
Bevorzugt sind die orale oder parenterale Applikation, insbesondere die orale Applikation.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überfuhrt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharma- zeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Lactose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige PoIy- ethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecyl- sulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispiels- weise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.
Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 0.001 bis 1 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 0.5 mg/kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0.01 bis 100 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 20 mg/kg und ganz besonders bevorzugt 0.1 bis 10 mg/kg Körpergewicht. Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindest- menge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele erläutern die Erfindung. Die Erfindung ist nicht auf die Beispiele beschränkt.
Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.
A. Beispiele
Abkürzungen und Akronyme;
d Tag(e)
DCI direkte chemische Ionisation (bei MS)
DMF N.N-Dimethylformamid
DMSO Dimethylsulfoxid d. Th. der Theorie (bei Ausbeute) eq. Äquivalent(e)
ESI Elektrospray-Ionisation (bei MS)
GC-MS Gaschromatographie-gekoppelte Massenspektroskopie h Stunde(n)
HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie
LC-MS Flüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektroskopie min Minute(n)
MS Massenspektroskopie
NMR Kernresonanzspektroskopie
RP reverse phase (bei HPLC)
RT Raumtemperatur
R1 Retentionszeit (bei HPLC)
THF Tetrahydrofuran
LC-MS-, HPLC- und GC-MS-Methoden:
Methode 1:
Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A — » 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 5O0C; UY-Detektion: 210 nm.
Methode 2:
Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisen- säure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -> 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 5O0C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 3:
Instrument: Micromass Quattro LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -» 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 5O0C; UV-Detektion: 208-400 nm.
Methode 4:
Instrument: Micromass Platform LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -» 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min, 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 500C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 5:
Instrument: Micromass Platform LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Thermo HyPURITY Aquastar 3μ 50 mm x 2.1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 100% A → 0.2 min 100% A → 2.9 min 30% A → 3.1 min 10% A → 5.5 min 10% A; Ofen: 500C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 6:
Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50 mm x 4.6 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 10% B → 3.0 min 95% B → 4.0 min 95% B; Ofen: 350C; Fluss: 0.0 min 1.0 ml/min → 3.0 min 3.0 ml/min → 4.0 min 3.0 ml/min; UV-Detektion: 210 nm. Methode 7:
Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO4 (70%-ig) / 1 Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2% B → 0.5 min 2% B → 4.5 min 90% B -> 9 min 0% B -> 9.2 min 2% B → 10 min 2% B; Fluss: 0.75 ml/min; Säulentemperatur: 300C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 8:
Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO4 (70%-ig) / 1 Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2% B → 0.5 min 2% B → 4.5 min 90% B → 15 min 90% B → 15.2 min 2% B → 16 min 2% B; Fluss: 0.75 ml/min; Säulentemperatur: 3O0C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 9:
Instrument: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: 5 ml HClO4 (70%-ig) / 1 Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2% B → 0.5 min 2% B → 4.5 min 90% B → 6.5 min 90% B → 6.7 min 2% B -> 7.5 min 2% B; Fluss: 0.75 ml/min; Säulentemperatur: 3O0C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 10:
Instrument: Micromass GCT, GC6890; Säule: Restek RTX-35MS, 30 m x 250 μm x 0.25 μm; konstanter Fluss mit Helium: 0.88 ml/min; Ofen: 6O0C; Inlet: 2500C; Gradient: 6O0C (0.30 min halten), 50°C/min → 1200C, 16°C/min → 2500C, 30°C/min → 3000C (1.7 min halten).
Ausgangsverbindungen und Intermediate:
Beispiel IA
N-(2- { [tert. -Buty l(dimethyl)silyl] oxy } ethyl)benzol- 1 ,4-diamin
Figure imgf000027_0001
Stufe a): 2-[(4-Νitrophenyl)amino]ethanol
Figure imgf000027_0002
Eine Lösung aus 101 g (716 mmol) 4-Fluoraitrophenol in 500 ml Ethanol wird mit 130 ml (2.15 mol, 3 eq.) 2-Aminoethanol und 274 ml (1.57 mol, 2.2 eq.) N,N-Diisopropylethylamin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird bei 500C über Nacht gerührt, anschließend mit weiteren 86 ml (1.43 mol, 2.0 eq.) 2-Aminoethanol und 249 ml (1.43 mol, 2.0 eq.) N,N-Diisopropylethylamm versetzt und weitere 12 h bei 5O0C gerührt. Die Reaktionslösung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit 600 ml Wasser verrührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mehrmals mit Wasser gewaschen und getrocknet.
Ausbeute: 127 g (97% d. Th.)
LC-MS (Methode 5): Rt = 2.32 min;
MS (ESIpos): m/z = 183 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 7.99 (d, 2H), 7.30 (t, IH), 6.68 (d, 2H), 4.82 (t, IH), 3.63- 3.52 (m, 2H), 3.30-3.19 (m, 2H). Stufe b): N-(2- { [tert. -Butyl(dimethyl)sily 1] oxy } ethyl)-4-nitroanilin
Figure imgf000028_0001
Eine Lösung aus 30.8 g (169 mmol) 2-[(4-Νitrophenyl)amino]ethanol in 300 ml DMF wird bei RT mit 30.6 g (203 mmol, 1.2 eq.) tert.-Butyldimethylchlorsilan und 17.3 g (254 mmol, 1.5 eq.) Imidazol versetzt und bei RT 2.5 h lang gerührt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in 200 ml Dichlormethan und 100 ml Wasser gelöst. Nach Phasentrennung wird die wässrige Phase dreimal mit jeweils 80 ml Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit 100 ml gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt.
Ausbeute: 49.7 g (quant.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 3.09 min;
MS (ESIpos): m/z = 297 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7.98 (d, 2H), 7.29 (t, IH), 6.68 (d, 2H), 3.77-3.66 (m, 2H), 3.35-3.24 (m, 2H), 0.81 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe c): N-(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)benzoI-l,4-diamin
Figure imgf000028_0002
Eine Lösung aus 59.5 g (201 mmol) N-(2-{[fert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)-4-nitroanilin in 500 ml Ethanol wird unter Argon mit 4 g Palladium auf Aktivkohle (10%-ig) versetzt und in einer Wasserstoffatmosphäre bei RT und Normaldruck hydriert. Der Katalysator wird über eine Filter- Schicht abgetrennt, mit Ethanol gewaschen und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Ausbeute: 53 g (quant.)
LC-MS (Methode 2): R, = 1.83 min;
MS (ESIpos): m/z = 267 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 6.42-6.30 (m, 4H), 4.48 (t, IH), 4.21 (br. s, 2H), 3.68-3.58 (m, 2H), 3.04-2.93 (m, 2H), 0.82 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Beispiel 2A
N-(3-{[ter£-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}propyl)benzol-l,4-diamin
Figure imgf000029_0001
Die Darstellung der Titelverbindung erfolgt durch analoge Reaktionsfolge wie bei Beispiel IA beschrieben.
LC-MS (Methode 6): R, = 1.73 min;
MS (ESIpos): m/z = 281 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz5 DMSOd6): δ = 6.39 (d, 2H)5 6.30 (d, 2H), 4.56 (br. s, IH), 4.19 (br. s, 2H), 3.69-3.60 (m, 2H), 2.97-2.88 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 2H), 0.83 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Beispiel 3A
3 - { [(5 -Chlorpy ridin-2-y l)amino] carbony 1 } pyrazin-2-carbonsäure
Figure imgf000029_0002
68.0 g (0.53 mol) 2-Amino-5-chlorpyridin werden in 1100 ml THF gelöst und portionsweise mit 95.3 g (0.63 mol) 2,3-Pyrazindicarbonsäureanhydrid versetzt. Die Suspension wird eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird der Niederschlag abfiltriert. Das Filtrat wird eingeengt und der Rückstand mit dem Niederschlag vereinigt. Es wird in Diethylether verrührt, erneut filtriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 154 g (99% d. Th.)
HPLC (Methode 9): R, = 3.50 min;
MS (ESIpos): m/z = 279 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 13.89 (br. s, IH), 11.07 (s, IH), 8.90 (dd, 2H), 8.44 (s, IH), 8.20 (d, IH), 8.01 (dd, IH).
Beispiel 4A
3-{[(5-MethyIpyridin-2-yl)amino]carbonyl}pyrazin-2-carbonsäure
Figure imgf000030_0001
2.5 g (23.3 mmol) 5-Methylpyridin-2-amin und 3.5 g (23.3 mmol) 2,3-Pyrazindicarbonsäure- anhydrid werden analog der für Beispiel 3A beschriebenen Methode umgesetzt.
Ausbeute: 5.2 g (94% Reinheit, 82% d. Th.)
LC-MS (Methode 5): Rt = 1.96 min;
MS (ESIpos): m/z = 215 [M+H-CO2]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 10.71 (s, IH), 8.89 (d, 2H), 8.22 (s, IH), 8.08 (d, IH), 7.70 (s, IH), 2.30 (s, 3H).
Beispiel 5A
3-{ [(5-Cyanopyridin-2-yl)amino]carbonyl}pyrazin-2-carbonsäure
Figure imgf000031_0001
1.0 g (8.4 mmol) 6-Aminonicotinonitril und 1.3 g (8.4 mmol) 2,3-Pyrazindicarbonsäureanhydrid werden analog der für Beispiel 3A beschriebenen Methode umgesetzt. Das Rohprodukt wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol 120:1 -» 40:1) ge- reinigt.
Ausbeute: 765 mg (90% Reinheit, 30% d. Th.)
HPLC (Methode 7): Rt = 3.21 min;
MS (DCI, NH3): m/z = 287 [M+NH,]*;
1H-NMR (300 MHz5 DMSO-d6): δ = 14.1 (br. s, IH), 11.44 (s, IH), 8.90 (dd, 2H), 8.85 (s, IH), 8.40-8.22 (m, 2H).
Beispiel 6A
3-{[(4-Cyanophenyl)amino]carbonyl}pyrazin-2-carbonsäure
Figure imgf000031_0002
1.0 g (8.5 mmol) 4-Aminobenzonitril und 1.3 g (8.5 mmol) 2,3-Pyrazindicarbonsäureanhydrid wer- den analog der für Beispiel 3A beschriebenen Methode umgesetzt.
Ausbeute: 2.1 g (92% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 1.06 min;
MS (ESIpos): m/z = 225 [M+H-CO2]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 13.92 (br. s, IH), 11.22 (s, IH), 8.92 (dd, 2H), 7.99 (d, 2H), 7.87 (d, 2H). Beispiel 7 A
3 - { [(4-Ethiny lpheny l)amino] carbonyl} pyrazin-2-carbonsäure
Figure imgf000032_0001
500 mg (4.27 mmol) 4-Ethinylanilin und 641 mg (4.27 mmol) 2,3-Pyrazindicarbonsäureanhydrid werden analog der für Beispiel 3A beschriebenen Methode umgesetzt.
Ausbeute: 1.08 g (96% Reinheit, 91% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 1.49 min;
MS (ESIpos): m/z = 224 [M+H-CO2]+.
Beispiel 8A
3-{ [(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}thiophen-2-carbonsäure und
2-{[(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}thiophen-3-carbonsäure (Regioisomerengemisch)
Figure imgf000032_0002
Eine Lösung von 1.17 g (9.08 mmol) 2-Amino-5-chlorpyridin und 1.40 g (9.08 mmol) Thieno[2,3- c]furan-4,6-dion [Reinecke, M.G.; Newsom, J.G.; Chen, L.-J., J. Am. Chem. Soc. 1981, 103, 2760- 2769] in 30 ml THF wird für 20 h bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mit THF gewaschen und im Vakuum getrocknet. Ausbeute: 1.05 g (41% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 1.77 min und 2.03 min;
MS (ESIpos): m/z = 283 [M+H]+.
Beispiel 9A
4-{[(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}-2-methyl-l,3-thiazol-5-carbonsäure und
5-{[(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}-2-methyl-l,3-thiazol-4-carbonsäure (Regioisomeren- gemisch)
Figure imgf000033_0001
Stufe a): 2-Methylfuro[3,4-d][l,3]thiazol-4,6-dion
Figure imgf000033_0002
Eine Lösung von 5.0 g (26.9 mmol) 2-Methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarbonsäure [Rublew et al, Justus Liebigs Ann. Chem. 1890, 259, 272-274] in 20 ml Thionylchlorid wird für 2 h unter Rückfluss gerührt und anschließend im Vakuum eingeengt und getrocknet. Das Rohprodukt (5.45 g) wird ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.
GC-MS (Methode 10): Rt = 7.57 min; MS (ESIpos): m/z = 169 [M]+.
Stufe b): 4-{[(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}-2-methyl-l,3-thiazol-5-carbonsäure und
5-{[(5-Chlorpyridin-2-yl)amino]carbonyl}-2-methyl-l,3-thiazol-4-carbonsäure (Regioisomerengemisch)
Figure imgf000034_0001
Eine Lösung von 4.54 g (26.8 mmol) 2-Methylfuro[3,4-d][l,3]thiazol-4,6-dion und 3.45 g (26.8 mmol) 2-Amino-5-chlorpyridin in 161 ml THF wird mit 4.7 ml (26.8 mmol) NN-Diiso- propylethylamin versetzt und 17 h bei RT gerührt. Die Reaktionslösung wird im Vakuum einge- engt und das Rohprodukt (12.3 g) als Regioisomerengemisch ohne weitere Reinigung in der nächsten Reaktion eingesetzt.
LC-MS (Methode 3): R, = 1.99 min;
MS (ESIpos): m/z = 253 [M+H-CO2]+.
Beispiel IQA
5,10-Dioxo-5H, 10H-diimidazo[l ,5-a: 1 ',5'-d]pyrazin-l ,6-dicarbonsäurephenylester
Figure imgf000034_0002
Stu fe a): 5, 10-Dioxo-5H, 1 OH-diimidazo[l ,5-a: 1 'jS'-dJpyrazin-ljö-dicarbonsäurechlorid
Figure imgf000035_0001
Eine Lösung von 1.0 g (6.5 mmol) 4,5-Imidazoldicarbonsäure in 5 ml Toluol wird in einem ausgeheizten Kolben vorgelegt, 2.8 ml Thionylchlorid und 30 μl Dimethylfbrmamid werden hinzugegeben und das Reaktionsgemisch für 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach dem Abkühlen wird der entstandene Niederschlag abfiltriert, zweimal mit Toluol gewaschen und im Vakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.
Stufe b): 5, 10-Dioxo-5H, 10H-diimidazo[l ,5-a: 1 ',5'-d]pyrazin-l ,6-dicarbonsäurephenylester
Figure imgf000035_0002
Eine Lösung von 899 mg (2.87 mmol) 5,10-Dioxo-5H,10H-diimidazo[l,5-a:l',5'-d]pyrazin-l,6-di- carbonsäurechlorid in 17 ml Dichlormethan wird unter Argon bei RT mit 568 mg (6.03 mmol) Phenol und anschließend bei O0C innerhalb von 2 min mit 490 μl (6.03 mmol) Pyridin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 2 h bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, zweimal mit Dichlormethan gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 1.08 g (87% d. Th.)
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 9.14 (s, 2H), 7.59-7.48 (m, 4H), 7.41-7.31 (m, 6H).
Beispiel IIA
5,10-Dioxo-5H, 10H-diimidazo[l ,5-a: 1 ',5'-d]pyrazin-l ,6-dicarbonsäuremethylester
Figure imgf000036_0001
Eine Lösung von 250 mg (0.80 mmol) 5,10-Dioxo-5H,10H-diimidazo[l,5-a:l',5'-d]pyrazin-l,6-di- carbonsäurechlorid in 5 ml Dichlormethan wird unter Argon bei RT mit 70 μl (1.68 mmol) Methanol und anschließend bei 00C innerhalb von 2 min mit 140 μl (1.68 mmol) Pyridin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 1 h bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, zweimal mit Dichlormethan gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 212 mg (87% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R4 = 1.06 min;
MS (ESIpos): m/z = 305 [M+Η]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 8.98 (s, 2H), 3.92 (s, 6H).
Beispiel 12A
4- { [(4-Chlorpheny l)amino] carbony 1 } - 1 -methy 1- 1 H-pyrrol-3-carbonsäure
Figure imgf000036_0002
Stufe a): l-Methyl-lH-pyrrol-3,4-dicarbonsäureethylester
Figure imgf000036_0003
Eine Lösung von 1.5 g (7.1 mmol) 3,4-Pyrroldicarbonsäureethylester in 5 ml Dimethylformamid wird bei RT portionsweise mit 852 mg (21.3 mmol) Natriumhydrid (60%-ig in Mineralöl) und dann tropfenweise mit 1.33 ml (21.3 mmol) Iodmethan versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht bei RT gerührt und anschließend mit 0.5 N Salzsäure und Dichlormethan versetzt. Nach Phasentrennung wird die wässrige Phase mit Dichlormethan extrahiert, die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Die Titelverbindung wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 2:1) isoliert.
Ausbeute: 666 mg (98% Reinheit, 41% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R1 = 1.78 min;
MS (ESIpos): m/z = 226 [M+H]+.
Stufe b): l-Methyl-lH~pyrrol-3,4-dicarbonsäure
Figure imgf000037_0001
Eine Lösung von 578 mg (2.57 mmol) l-Methyl-lH-pyrrol-3,4-dicarbonsäureethylester in 20 ml TΗF-Wasser (3:1) wird bei RT mit 123 mg (5.13 mmol) Lithiumhydroxid versetzt und über Nacht bei 6O0C gerührt. Das TKF wird im Vakuum entfernt und der Rückstand mit 1 N Salzsäure auf pH 1 angesäuert. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 346 mg (80% d. Th.)
LC-MS (Methode 5): Rt = 1.99 min;
MS (ESIpos): m/z = 170 [M+Η]+.
Stufe c): 5-Methyl-lH-furo[3,4-c]pyrrol-l,3(5H)-dion
Figure imgf000038_0001
Eine Lösung von 329 mg (1.95 mmol) 1 -Methyl- lH-pyrrol-3,4-dicarbonsäure in 5.5 ml TBDF wird bei RT mit einer Lösung von 441 mg (2.14 mmol) N.N'-Dicyclohexylcarbodiimid in 2.5 ml TΗF versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach dem Abkühlen wird der entstandene Niederschlag abfiltriert. Die Mutterlauge wird im Vakuum eingeengt und das Rohprodukt ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe eingesetzt.
Ausbeute: 360 mg (78% Reinheit, 94% d. Th.)
GC-MS (Methode 10): Rt = 10.37 min;
MS (ESIpos): m/z = 151 [M]+.
Stufe d): 4- { [(4-Chlorpheny l)amino] carbonyl } - 1 -methyl- 1 H-pyrrol-3 -carbonsäure
Figure imgf000038_0002
Eine Lösung von 200 mg (1.32 mmol) 5-Methyl-lH-furo[3,4-c]pyrrol-l,3(5H)-dion in 5 ml TEDF wird bei RT mit 169 mg (1.32 mmol) 4-Chloranilin versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet.
Ausbeute: 205 mg (56% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): Rt = 2.21 min;
MS (ESIpos): m/z = 279 [M+Η]+. Ausführungsbeispiele;
Allgemeine Methode 1 : Amid-Kupplung
Die betreffende Carbonsäure und N,N-Diisopropylethylamin (1.05 eq.) werden in Dichlormethan vorgelegt und 15 min bei RT gerührt. Anschließend wird eine Lösung des Anilin-Derivats (1.0 eq.) in Dichlormethan zugetropft. Man gibt 6>-(Benzotriazol-l-yl)-N,N,N'N'-tetramethyluronium-Tetra- fluoroborat (1.05 eq.) hinzu und rührt bei Raumtemperatur über Nacht. Anschließend wird die Reaktionslösung mit Wasser, mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung und erneut mit Wasser gewaschen. Das Lösungsmittel wird im Vakuum entfernt und der Rückstand mit Essig- säureethylester versetzt. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und mit Pentan gewaschen. Das Filtrat wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand säulenchromatographisch gereinigt.
Beispiel 1
N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000039_0001
Stufe a): N-{4-[(2-{ [/ert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N-(5-chlorpyridin-
2-y l)pyrazin-2,3 -dicarboxamid
Figure imgf000039_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 104.5 g (0.38 mol) der Verbindung aus Beispiel 3A und 100.0 g (0.38 mol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 101.3 g (51% d. Th.) LC-MS (Methode 3): R, = 2.96 min;
MS (ESIpos): m/z = 527 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 11.07 (s, IH), 10.37 (s, IH), 8.85 (s, 2H), 8.38 (s, IH), 8.21 (d, IH), 7.95 (d, IH), 7.45 (d, 2H), 6.53 (d, 2H), 5.40 (t, NH), 3.67 (t, 2H), 3.10 (dt, 2H), 0.83 (s, 9H), 0.00 (s, 6H).
Stufe b): N-{4-[(2-{[fcrt-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N-(5- chlorpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000040_0001
15.0 g (28.5 mmol) N-{4-[(2-{pert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N-(5-chlor- pyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid werden mit 65 ml THF versetzt und 7.17 g (85.4 mmol) Νatriumhydrogencarbonat zugegeben. Anschließend werden 3.6 g (34.2 mmol) Bromcyan hinzugefügt. Die Suspension wird 12 h bei 4O0C gerührt. Man setzt 250 ml Wasser und 300 ml Dichlor- methan zu. Die organische Phase wird abgetrennt, mit 300 ml einer gesättigten wässrigen Νatrium- hydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diethylether verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 13.7 g (82% d. Th., 94% Reinheit)
HPLC (Methode 8): R1 = 5.72 min;
MS (ESIpos): m/z = 552 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.16 (s, IH), 10.86 (s, IH), 9.05 (s, 2H), 8.44 (s, IH)5 8.27 (d, IH), 8.03 (dd, IH), 7.86 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 3.80-3.90 (m, 4H), 0.86 (s, 9H), 0.00 (s, 6H). Stufe c): N-(5-Chloφyridin-2-yl)-N-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000041_0001
32.0 g (58 mmol) N-{4-[(2-{[re^.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(5- chlorpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid werden mit 170 ml Acetonitril und 11.5 g (120.0 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 35 h bei RT gerührt. Der Feststoff wird abfϊltriert und dreimal mit Acetonitril gewaschen. Anschließend wird der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 25.1 g (81% d. Th.)
HPLC (Methode 7): R1 = 3.65 min;
MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 11.13 (s, IH), 11.07 (s, IH), 9.58 (s, IH), 8.97 (s, 2H), 8.78- 8.85 (m, IH), 8.43 (s, IH), 8.20 (d, IH), 8.01 (d, IH), 7.96 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.29 (s, 3H).
Analog werden die folgenden Salze durch Umsetzung mit entsprechenden Säuren dargestellt:
Beispiel 2
N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-iV-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid- Hydrobromid
Figure imgf000041_0002
LC-MS (Methode 2): Rt = 1.39 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.12 (s, IH), 10.97 (s, IH), 8.96 (s, 2H), 8.73-8.69 (m, IH), 8.43 (s, IH), 8.22 (d, IH), 8.00 (dd, IH), 7.90 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 4.71 (t, 2H), 4.16 (t, 2H).
Beispiel 3
N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N-[4-(2-imino-l,3-oxazolidm-3-yl)phenyl]pyrazin-253-dicarboxamid- Hydrochlorid
Figure imgf000042_0001
LC-MS (Methode 2): Rt = 1.16 min;
MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.13 (s, IH), 11.01 (s, IH), 9.64-9.60 (m, IH), 8.97 (s, 2H), 8.85-8.81 (m, IH), 8.43 (s, IH), 8.21 (d, IH), 8.00 (dd, IH), 7.96 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H).
Beispiel 4
N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000042_0002
Die freie Base wird erhalten durch Rühren einer Lösung des entsprechenden Salzes (Beispiel 1, 2 bzw. 3) in THF mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung und anschließende Extraktion mit Dichlormethan.
LC-MS (Methode 5): R, = 2.55 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.12 (s, IH), 10.77 (s, IH), 8.92 (s, 2H), 8.41 (s, IH), 8.24 (d, IH), 8.00 (dd, IH), 7.79 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 4.47-4.30 (m, 2H), 4.19-3.92 (m, 2H).
Beispiel 5
N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N-[4-(2-imino-l,3-oxazinan-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000043_0001
Sto/e α): N-{4-[(3-{[^ert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}propyl)amino]phenyl}-N'-(5-chlor- pyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000043_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 8.24 g (29.4 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A und 8.19 g (29.4 mmol) der Verbindung aus Beispiel 3 A umgesetzt.
Ausbeute: 10.7 g (80% Reinheit, 54% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R, = 2.85 min;
MS (ESIpos): m/z = 541 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 11.08 (s, IH), 10.49 (s, IH), 8.88 (s, 2H), 8.40 (d, IH), 8.23 (d, IH), 7.98 (dd, IH), 7.48 (d, 2H), 6.50 (d, 2H), 5.49 (t, IH), 3.68 (t, 2H), 3.04 (dt, 2H), 1.71 (q, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.02 (s, 6H). Stufe b): N-{4-[(3-{[/er?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}propyl)(cyano)amino]phenyl}-N-(5- chlorpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000044_0001
Eine Lösung aus 7.5 g (11.1 mmol) N-{4-[(3-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}propyl)amino]- phenylJ-N-CS-chlorpyridin^-yOpyrazin^-dicarboxamid in 40 ml THF wird bei RT mit 2.8 g
(33.3 mmol, 3 eq.) Νatriumhydrogencarbonat und 4.4 ml (13.3 mmol, 1.2 eq.) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 8 h bei 400C gerührt und anschließend mit 155 ml Wasser und 190 ml Dichlormethan versetzt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit 190 ml einer gesättigten wässrigen Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diisopropylether verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 6.3 g (98% Reinheit, 99% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): R, = 3.13 min;
MS (ESIpos): m/z = 566 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.08 (s, IH), 10.81 (s, IH), 8.90 (s, 2H), 8.39 (s, IH), 8.21 (d, IH), 7.96 (dd, IH), 7.80 (d, 2H), 7.14 (d, 2H), 3.73-3.60 (m, 4H), 1.82 (q, IH), 0.82 (s, 9H), 0.00 (s, 6H).
Stufe c): N-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N-[4-(2-imino-l,3-oxazinan-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-di- carboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000044_0002
Eine Lösung aus 2.20 g (3.89 mmol) N-{4-[(3-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}propyl)(cyano)- amino]phenyl}-Nl-(5-chlorpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 100 ml Acetonitril wird bei RT mit 555 μl (8.55 mmol, 2.2 eq.) Methansulfonsäure versetzt, über Nacht bei RT gerührt, mit weiteren 126 μl (1.94 mmol, 0.5 eq.) Methansulfonsäure versetzt und erneut über Nacht gerührt. Das Reaktionsgemisch wird eingeengt und das Rohprodukt mittels Flash-Chromatographie gereinigt (Kieselgel 60, Eluent: Dichlormethan/Methanol 20:1 -> 5:1).
Ausbeute: 1.54 g (72% d. Th.)
HPLC (Methode 9): Rt = 3.73 min;
MS (ESIpos): m/z = 452 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.14 (s, IH), 11.08 (s, IH), 8.96 (s, 2H), 8.75 (br. s, IH), 8.44 (s, IH), 8.21 (d, IH), 8.02 (d, IH), 7.98 (d, 2H), 7.74 (br. s, IH), 7.51 (d, 2H), 4.60 (dd, 2H), 3.65 (dd, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.29 (m, 2H).
Beispiel 6
N-[4-(2-Imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-N'-(5-methylpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000045_0001
Stufe a): N- {4-[(2-{ [tert. -Butyl(dimethy l)silyl]oxy } ethyl)amino]phenyl} -N'-(5-methyl- pyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000045_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 1.0 g (3.9 mmol) der Verbindung aus Beispiel 4A und 1.0 g (3.9 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 737 mg (38% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 2.49 min;
MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H]+.
Stufe b): N-{4-[(2-{[^rt.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(5- methylpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000046_0001
Eine Lösung von 320 mg (0.63 mmol) N-{4-[(2-{[te^-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N'-(5-methylpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 4 ml THF wird bei RT mit 159 mg (1.89 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 230 μl (0.69 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 16 h bei 400C gerührt und anschließend mit 3 ml Wasser und 5 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat ge- trocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diisopropylether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 219 mg (65% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): Rt = 2.83 min;
MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.80 (s, 2H), 8.95 (s, 2H), 8.22 (s, IH), 8.12 (d, IH), 7.85 (d, 2H), 7.70 (d, IH), 7.20 (d, 2H), 3.90-3.79 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe c): N-[4-(2-Imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-N-(5-methylpyridin-2-yl)pyrazin-2,3- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000047_0001
Eine Lösung von 50 mg (0.09 mmol) N-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N'-(5-methylpyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 5 ml Acetonitril wird bei RT mit 13 μl (0.20 mmol) Methansulfonsäure versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Das Reaktions- gemisch wird anschließend im Vakuum eingeengt und der Rückstand getrocknet.
Ausbeute: 47 mg (quant.)
LC-MS (Methode 2): Rt = 1.29 min;
MS (ESIpos): m/z = 418 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 11.02 (s, IH), 10.89 (s, IH), 9.58 (s, IH), 8.96 (s, 2H), 8.80 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.06 (d, IH), 7.94 (d, 2H), 7.73 (d, IH), 7.51 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.29 (s, 3H).
Beispiel 7
N-(5 -Cy anopyridin-2-y I)-N- [4-(2-imino- 1 ,3 -oxazolidin-3 -yl)pheny l]pyrazin-2,3 -dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000047_0002
Stufe a): N-{4-[(2-{[?e?-^-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)ammo]phenyl}-N'-(5-cyanopyri- din-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000048_0001
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 250 mg (0.93 mmol) der Verbindung aus Beispiel 5A und 247 mg (0.93 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 205 mg (97% Reinheit, 41% d. Th.)
LC-MS (Methode 1 ): Rt = 2.63 min;
MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]+.
Stufe b): N-{4-[(2-{[/erZl.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(5- cyanopyridin-2-yl)pyrazin~2,3-dicarboxamid
Figure imgf000048_0002
Eine Lösung von 114 mg (0.22 mmol) N-{4-[(2-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N'-(5-cyanopyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 2 ml THF wird bei RT mit 56 mg (66 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 80 μl (0.24 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird über Nacht bei 4O0C gerührt, dann mit weiteren 16 μl (0.04 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt und erneut bei 400C über Nacht gerührt. Nach Zugabe von 2 ml Wasser / 4 ml Dichlormethan und Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diiso- propylether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 90 mg (91% Reinheit, 67% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R1 = 2.40 min; MS (ESIpos): m/z = 543 [M+H]+.
Stufe c): N-(5-Cyanopyridin-2-yl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000049_0001
Eine Lösung von 61 mg (0.11 mmol) N-{4-[(2-{[fert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- ammo]phenyl}-N'-(5-cyanopyridin-2-yl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 5 ml Acetonitril wird bei RT mit 15 μl (0.24 mmol) Methansulfonsäure versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird anschließend im Vakuum eingeengt und der Rückstand getrocknet.
Ausbeute: 60 mg (quant.)
LC-MS (Methode 6): Rt = 1.23 min;
MS (ESIpos): m/z = 429 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.49 (s, IH), 11.11 (s, IH), 9.57 (s, IH), 8.97 (s, 2H), 8.82 (s, 2H), 8.34 (s, 2H), 7.98 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.32 (s, 3H).
Beispiel 8
N-(4-Cyanophenyl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid-Methan- sulfonat
Figure imgf000049_0002
Stufe a): N-{4-[(2-{[^ert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N'-(4-cyano- pheny l)pyrazin-2,3 -dicarboxamid
Figure imgf000050_0001
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 500 mg (1.86 mmol) der Verbindung aus Beispiel 6A und 497 mg (1.86 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 437 mg (45% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): R, = 2.89 min;
MS (ESIpos): m/z = 517 [M+H]+.
Stufe b): N-{4-[(2-{[^r/.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(4- cyanophenyl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000050_0002
Eine Lösung von 200 mg (0.39 mmol) N-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N'-(4-cyanophenyl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 2 ml THF wird bei RT mit 98 mg (1.16 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 143 μl (0.43 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird über Nacht bei 400C gerührt und anschließend mit 3 ml Wasser und 5 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt.
Ausbeute: 159 mg (76% d. Th.)
LC-MS (Methode 1): Rt = 2.57 min;
MS (ESIpos): m/z = 542 [M+H]+; 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 11.18 (s, IH), 10.84 (s, IH), 8.99 (s, 2H), 7.97 (d, 2H), 7.86 (d, 2H), 7.82 (d, 2H), 7.22 (d, 2H), 3.90-3.79 (m, 4H), 0.86 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe c): N-(4-Cyanophenyl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarb- oxamid-Methansulfonat
Figure imgf000051_0001
Eine Lösung von 50 mg (0.09 mmol) N-{4-[(2-{[fe/t.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N'-(4-cyanophenyl)pyrazm-2,3-dicarboxamid in 5 ml Acetonitril wird bei RT mit 13 μl (0.19 mmol) Methansulfonsäure versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird anschließend im Vakuum eingeengt und der Rückstand getrocknet.
Ausbeute: 47 mg (97% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R, = 1.20 min;
MS (ESIpos): m/z = 428 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.22 (s, IH), 11.06 (s, IH), 9.58 (s, IH), 9.00 (s, 2H), 8.81 (s, IH), 7.99-7.88 (m, 4H), 7.84 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.31 (s, 3H).
Beispiel 9
N-(4-Ethinylphenyl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarboxamid-Methan- sulfonat
Figure imgf000051_0002
Stufe a): N-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N-(4-ethinyl- phenyl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000052_0001
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 400 mg (1.50 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 398 mg (1.50 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 376 mg (49% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): R, = 3.08 min;
MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]+.
Stufe b): N-{4-[(2-{[ferf.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(4- ethinylphenyl)pyrazin-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000052_0002
Eine Lösung von 150 mg (0.29 mmol) N-{4-[(2-{[ter/.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N-(4-ethinylphenyl)pyrazm-2,3-dicarboxamid in 2 ml THF wird bei RT mit 73 mg (0.87 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 107 μl (0.32 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 15 h bei 400C gerührt und anschließend mit 1.5 ml Wasser und 2 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diisopropylether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 65 mg (41 % d. Th.) LC-MS (Methode 3): Rt = 2.61 min;
MS (ESIpos): m/z = 541 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 10.90 (s, IH), 10.79 (s, IH), 8.94 (s, 2H), 7.82-7.72 (m, 4H), 7.46 (d, 2H), 7.19 (d, 2H), 4.12 (s, IH), 3.86-3.74 (m, 4H), 0.82 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe c): N-(4-Ethinylphenyl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]pyrazin-2,3-dicarb- oxamid-Methansulfonat
Figure imgf000053_0001
Eine Lösung von 50 mg (0.09 mmol) N-{4-[(2-{[ter?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N'-(4-ethinylphenyl)pyrazin-2,3-dicarboxamid in 10 ml Acetonitril wird bei RT mit 13 μl (0.19 mmol) Methansulfonsäure versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 18 mg (37% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 1.47 min;
MS (ESIpos): m/z = 427 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 11.02 (s, IH), 10.97 (s, IH), 9.57 (s, IH), 8.98 (s, 2H), 8.81 (s, IH), 7.92 (d, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.55-7.44 (m, 4H), 4.85 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 4.15 (s, IH), 2.29 (s, 3H).
Beispiel 10
N3-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N2-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]thiophen-2,3-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000054_0001
x CH3SO2OH
Stufe a): N2-{4-[(2-{[fcrt.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N3-(5-chlorpyri- din-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000054_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 928 mg (2.95 mmol) des Regioisomerengemisches aus Beispiel 8A und 787 mg (2.95 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt. Das Rohprodukt wird mittels präparativer RP-HPLC gereinigt [Säule: YMC-Pack Polyamine II, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Eluent: Ethanol/Isohexan 1 :4], wobei die beiden regioisomeren Produkte getrennt werden (vgl. auch Beispiel 11).
Ausbeute: 370 mg (24% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R1 = 3.20 min;
MS (ESIpos): m/z = 531 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 11.63 (s, IH), 10.89 (s, IH), 8.43 (d, IH), 8.20 (d, IH), 7.97 (dd, IH), 7.81 (d, IH), 7.67 (d, IH), 7.35 (d, 2H), 6.58 (d, 2H), 5.50 (t, IH), 3.69 (t, 2H), 3.12 (qd, 2H), 0.85 (s, 9H), 0.03 (s, 6H).
Stufe b): N2-{4-[(2-{[fer?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N3-(5- chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000054_0003
Eine Lösung von 370 mg (0.70 mmol) N2-{4-[(2-{[terf.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-NV5-chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid in 3 ml THF wird bei RT mit 175 mg (2.09 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 280 μl (0.84 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 2 d bei 400C gerührt und anschließend mit 6 ml Wasser und 10 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diethylether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 275 mg (71% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R, = 3.27 min;
MS (ESIpos): m/z = 556 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 11.48 (s, IH), 11.19 (s, IH), 8.47 (d, IH), 8.23 (d, IH), 8.00 (dd, IH), 7.90 (d, IH), 7.73 (d, IH), 7.71 (d, 2H), 7.22 (d, 2H), 3.85 (br. s, 4H), 0.86 (s, 9H), 0.0
(s, 6H).
Stufe c): N3-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N2-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]thiophen-2,3- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000055_0001
x CH3SO2OH
Eine Lösung von 275 mg (0.49 mmol) N2-{4-[(2-{[te^-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N3-(5-chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid in 37 ml Acetonitril wird bei RT mit 70 μl (1.04 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 4 d bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 230 mg (87% d. Th.)
HPLC (Methode 7): R, = 4.01 min;
MS (ESIpos): m/z = 442 [M+H]+ (freie Base); 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.38 (s, IH), 11.34 (s, IH), 9.58 (br. s, IH), 8.81 (br. s, IH), 8.45 (d, IH), 8.19 (d, IH), 7.99 (dd, IH), 7.90 (d, IH), 7.82 (d, 2H), 7.73 (d, IH), 7.52 (d, 2H), 4.86 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.32 (s, 3H).
Beispiel 11
N2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N3-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]thiophen-2,3-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000056_0001
X CH3SO2OH
Stufe a): N3- {4-[(2- { [tert. -Butyl(dimethyl)silyl]oxy } ethyl)amino]phenyl} -N2-(5-chlorpyri- din-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000056_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 928 mg (2.95 mmol) des Regioisomerengemisches aus Beispiel 8A und 787 mg (2.95 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt. Das Rohprodukt wird mittels präparativer RP-HPLC gereinigt [Säule: YMC-Pack Polyamine II, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Eluent: Ethanol/Isohexan 1 :4], wobei die beiden regioisomeren Produkte getrennt werden (vgl. auch Beispiel 10).
Ausbeute: 188 mg (12% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 3.22 min;
MS (ESIpos): m/z = 531 [M+H]+;
1H-NMR (300 MHz, DMSOd6): δ = 13.11 (s, IH), 10.40 (s, IH), 8.40 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.00 (d, IH), 7.95 (dd, IH), 7.71 (d, IH), 7.39 (d, 2H), 6.60 (d, 2H), 5.58 (t, IH), 3.70 (t, 2H), 3.14 (qd, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.03 (s, 6H). Stufe b): N3-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N2-(5- chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid
Figure imgf000057_0001
Eine Lösung von 188 mg (0.35 mmol) N3-{4-[(2-{[^rf.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N2-(5-chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid in 3 ml THF wird bei RT mit 89 mg (1.06 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und insgesamt 160 μl (0.49 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 2 d bei 4O0C gerührt und anschließend mit 3 ml Wasser und 4 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesium- sulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diisopropylether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 146 mg (74% d. Th.)
LC-MS (Methode 2): R, = 3.33 min;
MS (ESIpos): m/z = 556 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 12.73 (s, IH), 10.72 (s, IH), 8.43 (d, IH), 8.23 (d, IH), 8.04 (d, IH), 7.99 (dd, IH), 7.81-7.60 (2d, 3H), 7.27 (d, 2H), 3.85 (br. s, 4H), 0.85 (s, 9H), 0.01 (s, 6H).
Stufe c): N2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N3-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]thiophen-2,3- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000057_0002
x CH 3SO2 ,OH
Eine Lösung von 146 mg (0.26 mmol) N3-{4-[(2-{[^err.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N2-(5-chlorpyridin-2-yl)thiophen-2,3-dicarboxamid in 50 ml Acetonitril wird bei RT mit 40 μl (0.55 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 3 d bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Vakuum getrocknet. Die Mutterlauge wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol 8:1 — » 4:1) aufgereinigt.
Ausbeute: zusammen 131 mg (93% d. Th.)
HPLC (Methode 7): R, = 4.18 min;
MS (ESIpos): m/z = 442 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ = 12.53 (s, IH), 10.91 (s, IH), 9.44 (br. s, IH), 8.95 (br. s, IH), 8.42 (d, IH), 8.22 (d, IH), 8.07 (d, IH), 7.99 (dd, IH), 7.88 (d, 2H), 7.74 (d, IH), 7.57 (d, 2H), 4.84 (t, 2H), 4.23 (t, 2H), 2.30 (s, 3H).
Beispiel 12
N4-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N5-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-di- carboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000058_0001
Stufe a): N5-{4-[(2-{[/er?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N4-(5-chlorpyri- din-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000058_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden das Regioisomerengemisch aus Beispiel 9A (als Rohprodukt, ca. 27 mmol) und 7.2 g (27 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt. Das erhaltene Rohprodukt wird mittels präparativer RP-HPLC gereinigt [Säule: Kromasil 100 C 18, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Eluent: Wasser/Acetonitril 1 :9], wobei die beiden regioisomeren Produkte getrennt werden (vgl. auch Beispiel 13).
Ausbeute: 2.5 g (17% d. Th.)
LC-MS (Methode 1): Rt = 3.46 min;
MS (ESIpos): m/z = 546 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 12.16 (s, IH), 10.42 (s, IH), 8.50 (d, IH), 8.25 (d, IH), 8.05 (dd, IH), 7.41 (d, 2H), 6.62 (d, 2H), 5.54 (t, IH), 3.71 (t, 2H), 3.15 (qd, 2H), 2.76 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.03 (s, 6H).
Stufe b): N5-{4-[(2-{[^rΛ-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N4-(5- chlorpyridin-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000059_0001
Eine Lösung von 1.09 g (2.0 mmol) N5-{4-[(2-{[to^.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenylJ-iV-CS-chlorpyridin^-yO^-methyl-l^-thiazoMjS-dicarboxamid in 17 ml THF wird bei RT mit 503 mg (6.0 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und insgesamt 1.1 ml (3.2 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 4 d bei 400C gerührt und dann mit 17 ml Wasser und 23 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diisopropyl- ether verrührt, filtriert und der Feststoff im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 1.19 g (quant.)
HPLC (Methode 8): R, = 6.19 min;
MS (ESIpos): m/z = 571 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.30 (s, IH), 10.46 (s, IH), 8.51 (d, IH), 8.27 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.7,4 (d, 2H), 7.26 (d, 2H), 3.86 (m, 4H), 0.86 (s, 9H), 0.0 (s, 6H). Stufe c): N4-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N5-[4-(2-immo-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-2-methyl-l,3- thiazol-4,5-dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000060_0001
Eine Lösung von 1.38 g (2.42 mmol) N5-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N4-(5-chlorpyridin-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid in 450 ml Aceto- nitril wird bei RT mit 329 μl (5.07 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 5 d bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 1.33 g (98% d. Th.)
HPLC (Methode 7): R, = 4.33 min;
MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 12.37 (s, IH), 10.45 (s, IH), 9.58 (br. s, IH), 8.83 (br. s, IH), 8.50 (s, IH), 8.21 (d, IH), 8.07 (d, IH), 7.85 (d, 2H), 7.56 (d, 2H), 4.86 (t, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
Beispiel 13
N5-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N4-[4-(2-imino-l ,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-2-methyl-l ,3-thiazol-4,5-di- carboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000060_0002
Stufe a): N4-{4-[(2-{[rert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N5-(5-chlorpyri- din-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000061_0001
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden das Regioisomerengemisch aus Beispiel 9A (als Rohprodukt, ca. 27 mmol) und 7.2 g (27 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt. Das erhaltene Rohprodukt wird mittels präparativer RP-HPLC gereinigt [Säule: Kromasil 100 Cl 8, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Eluent: Wasser/Acetonitril 1:9], wobei die beiden regioisomeren Produkte getrennt werden (vgl. auch Beispiel 12).
Ausbeute: 2.38 g (16% d. Th.)
HPLC (Methode 8): R, = 4.97 min;
MS (ESIpos): m/z = 546 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 13.90 (s, IH), 10.41 (s, IH), 8.40 (d, IH), 8.18 (d, IH), 7.93 (dd, IH), 7.46 (d, 2H), 6.58 (d, 2H), 5.55 (t, IH), 3.68 (t, 2H), 3.11 (qd, 2H), 2.71 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe b): N4-{4-[(2-{[to^.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N5-(5- chlorpyridin-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000061_0002
Eine Lösung von 147 mg (0.27 mmol) N4-{4-[(2-{[^er?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N5-(5-chlorpyridin-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid in 2.5 ml THF wird bei RT mit 68 mg (0.81 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und insgesamt 144 μl (0.43 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 4 d bei 400C gerührt und dann mit 2.5 ml Wasser und 3.5 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan/Methanol 200:1) gereinigt.
Ausbeute: 84 mg (49% d. Th.)
HPLC (Methode 8): R4 = 5.86 min;
MS (ESIpos): m/z = 571 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 13.59 (s, IH), 10.84 (s, IH), 8.46 (d, IH), 8.23 (d, IH), 8.00 (dd, IH), 7.87 (d, 2H), 7.26 (d, 2H), 3.85 (br. s, 4H), 2.79 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).
Stufe c): N5-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N4-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-2-methyl-l,3- thiazol-4,5-dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000062_0001
Eine Lösung von 83 mg (0.15 mmol) N4-{4-[(2-{[^ert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N5-(5-chloφyridin-2-yl)-2-methyl-l,3-thiazol-4,5-dicarboxamid in 26 ml Aceto- nitril wird bei RT mit 20 μl (0.31 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 1 d bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Acetonitril/Dichlormethan verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 29 mg (36% d. Th.)
HPLC (Methode 9): Rt = 4.37 min;
MS (ESIpos): m/z = 457 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 13.40 (s, IH), 11.04 (s, IH), 9.62 (br. s, IH), 8.92 (br. s, IH), 8.47 (d, IH), 8.23 (d, IH), 8.03 (d, IH), 8.00 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 4.87 (t, 2H), 4.28 (t, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.30 (s, 3H). Beispiel 14
N4-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N5-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-lH-imidazol-4,5-dicarbox- amid-Methansulfonat
Figure imgf000063_0001
Stufe a): 5-[( {4-[(2- { [tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy } ethyl)amino]phenyl} amino)carbonyl]- 1 H-imidazol-4-carbonsäuremethy lester
Figure imgf000063_0002
Eine Suspension von 895 mg (2.94 mmol) der Verbindung aus Beispiel I IA in 45 ml THF wird unter Argon bei RT innerhalb von 2 min mit einer Lösung von 1.57 g (5.9 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA in 5 ml THF versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht bei RT gerührt, anschließend das THF im Vakuum entfernt und der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen. Diese Lösung wird mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe umgesetzt.
Ausbeute: 2.2 g (87% Reinheit, 77% d. Th.)
LC-MS (Methode 1): R, = 2.46 min;
MS (ESIpos): m/z = 419 [M+H]+.
Stufe b): N5-{4-[(2-{[/ert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N4-(5-chlorpyri- din-2-yl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000064_0001
Eine Lösung von 55 mg (0.43 mmol) 2-Amino-5-chlorpyridin in 2 ml Dichlormethan wird unter Argon bei O0C tropfenweise mit 540 μl Trimethylaluminium-Lösung (2 M in Hexan, 1.08 mmol) versetzt. Das Reaktionsgemisch wird auf RT kommen gelassen, 15 min bei RT gerührt, erneut auf 00C gekühlt und dann mit einer Lösung von 90 mg (0.22 mmol) 5-[({4-[(2-{[te7"Λ-Butyl(dimethyl)- silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}amino)carbonyl]-lH-imidazol-4-carbonsäuremethyIester versetzt. Das Reaktionsgemisch wird bei RT gerührt und anschließend tropfenweise mit 20%-iger Kalium- tartrat-Lösung (Vorsicht: starkes Aufschäumen!) versetzt. Nach Zugabe von Dichlormethan und Phasentrennung wird die organische Phase mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Die Aufreinigung des Rohproduktes erfolgt mittels präparativer RP-ΗPLC.
Ausbeute: 20 mg (18% d. Th.)
LC-MS (Methode 1): R, = 3.15 min;
MS (ESIpos): m/z = 515 [M+Η]+.
Stufe c): N5-{4-[(2-{[fer/.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N4-(5- chlorpyridin-2-yl)- 1 H-imidazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000064_0002
Eine Lösung von 75 mg (0.15 mmol) N5-{4-[(2-{[^er/.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N4-(5-chlorpyridin-2-yl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid in 2.3 ml TΗF wird bei RT mit 37 mg (0.44 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und insgesamt 100 μl (0.32 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 2 d bei 40°C gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfϊltriert, mit TΗF gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 14 mg (18% d. Th.) LC-MS (Methode 1): Rt = 3.05 min;
MS (ESIpos): m/z = 540 [M+H]+.
Stufe d): N4-(5-Chlorpyridin-2-yl)-N5-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-lH-imidazol-
4,5-dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000065_0001
x CH3SO2OH
Eine Lösung von 17 mg (0.03 mmol) N5-{4-[(2-{[ter/>Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N4-(5-chlorpyridin-2-yl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid in 5 ml Acetonitril wird bei RT mit 4 μl (0.07 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 1 d bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in einem Diethylether/Methanol/Aceto- nitril-Gemisch verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 12 mg (77% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R1 = 1.38 min;
MS (ESIpos): m/z = 426 [M+Η]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 13.06 (s, IH), 11.13 (s, IH), 9.60 (br. s, IH), 8.88 (br. s, IH), 8.47 (d, IH), 8.32 (d, IH), 8.13 (s, IH), 8.03 (d, 3H), 7.58 (d, 2H), 4.87 (t, IH), 4.28 (t, 2H), 2.34 (s, 3H).
Beispiel 15
N4-(4-Chlorphenyl)-N5-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid- Methansulfonat
Figure imgf000066_0001
Stufe a): 5-[( {4-[(2- { [tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy } ethyl)amino]phenyl} amino)carbonyl]- lH-imidazol-4-carbonsäurephenylester
Figure imgf000066_0002
Eine Suspension von 887 mg (2.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 1OA in 12 ml TΗF wird unter Argon bei RT innerhalb von 2 min mit einer Lösung von 1.1 g (4.14 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA in 3 ml TΗF versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht bei RT gerührt, anschließend das TΗF im Vakuum entfernt und der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen. Diese Lösung wird mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird ohne weitere Reinigung in der nächsten Stufe umgesetzt.
Ausbeute: 1.95 g (98% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R, = 2.97 min;
MS (ESIpos): m/z = 481 [M+Η]+.
Stufe b): 5-[({4-[(2-{[/er/.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}amino)carbonyl]- lH-imidazol-4-carbonsäure
Figure imgf000066_0003
Eine Lösung von 1.95 g (4.06 mmol) 5-[({4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}amino)carbonyl]-lH-imidazol-4-carbonsäurephenylester in 97.5 ml TΗF/Wasser (3:1) wird bei RT mit 194 mg (8.11 mmol) Lithiumhydroxid versetzt und bei 600C über Nacht gerührt. Das TΗF wird im Vakuum entfernt und der Rückstand mit 1 N Salzsäure auf pH 1 angesäuert. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 1.65 g (90% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 2.49 min;
MS (ESIpos): m/z = 405 [M+Η]+.
Stufe c): N5-{4-[(2-{[rert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N4-(4-chlor- phenyl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000067_0001
Eine Lösung von 100 mg (0.25 mmol) 5-[({4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}amino)carbonyl]-lH-imidazol-4-carbonsäure in 2 ml TΗF und 0.5 ml Dimethylformamid wird bei RT mit 56 μl (0.32 mmol) NN-Diisopropylethylamin, 32 mg (0.25 mmol) 4-Chloranilin und 122 mg (0.32 mmol) 0-(7-Azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium-hexafluoro- phosphat (ΗATU) versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht bei RT gerührt, dann das TΗF im Vakuum entfernt und das Rohprodukt mittels präparativer RP-ΗPLC aufgereinigt.
Ausbeute: 63 mg (50% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 3.39 min;
MS (ESIpos): m/z = 514 [M+Η]+.
Stufe d): N5-{4-[(2-{[^^.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N4-(4- chlorphenyl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid
Figure imgf000068_0001
Eine Lösung von 60 mg (0.12 mmol) N5-{4-[(2-{[ter£-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N4-(4-chlorphenyl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid in 5 ml TΗF wird bei RT mit 29 mg (0.35 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und insgesamt 70 μl (0.21 mmol) einer 3 M Lösung von Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 2 d bei 400C gerührt und dann mit 3 ml Wasser und 5 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird mittels präparativer RP-ΗPLC gereinigt.
Ausbeute: 21 mg (33% d. Th.)
LC-MS (Methode 1): Rt = 3.13 min;
MS (ESIpos): m/z = 539 [M+Η]+.
Stufe e): N4-(4-Chlorphenyl)-N5-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-lH-imidazol-4,5- dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000068_0002
X CH3SO2OH
Eine Lösung von 20 mg (0.04 mmol) N5-{4-[(2-{[fert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N4-(4-chlorphenyl)-lH-imidazol-4,5-dicarboxamid in 10 ml Acetonitril wird bei RT mit insgesamt 6 μl (0.10 mmol) Methansulfonsäure versetzt und 2 d bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Diisopropylether verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 16 mg (77% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): R, = 1.61 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 12.06 (s, IH), 11.13 (s, IH), 9.60 (br. s, IH), 8.83 (br. s, IH), 8.10 (s, IH), 7.97 (d, 2H), 7.84 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.48 (d, 2H), 4.87 (t, IH), 4.26 (t, 2H), 2.34 (s, 3H).
Beispiel 16
N-(4-Chlorpheny I)-N '-[4-(2-imino- 1 ,3 -oxazolidin-3 -y l)phenyl]- 1 -methy 1- 1 H-pyrrol-3 ,4-dicarbox- amid-Methansulfonat
Figure imgf000069_0001
Stufe a): N-{4-[(2-{[rer?.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]phenyl}-N'-(4-chlor- phenyl)-l-methyl-lH-pyrrol-3,4-dicarboxamid
Figure imgf000069_0002
Nach der Allgemeinen Methode 1 werden 205 mg (0.74 mmol) der Verbindung aus Beispiel 12A und 196 mg (0.74 mmol) der Verbindung aus Beispiel IA umgesetzt.
Ausbeute: 221 mg (57% d. Th.)
LC-MS (Methode 1 ) : R, = 3.12 min;
MS (ESIpos): m/z = 527 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12.11 (s, IH), 10.51 (s, IH), 7.68 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 6.58 (d, 2H), 5.39 (t, IH), 3.72 (s, 3H), 3.70 (t, 2H), 3.13 (qd, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H). Stu fe b): N-{4-[(2-{[/ert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)amino]phenyl}-N'-(4- chlorphenyl)- 1 -methyl- 1 H-pyrrol-3 ,4-dicarboxamid
Figure imgf000070_0001
Eine Lösung von 150 mg (0.29 mmol) N-{4-[(2-{[tert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)amino]- phenyl}-N'-(4-chlorphenyl)-l-methyl-lH-pyrrol-3,4-dicarboxamid in 5 ml TΗF wird bei RT mit
72 mg (0.85 mmol) Νatriumhydrogencarbonat und 114 μl (0.34 mmol) einer 3 M Lösung von
Bromcyan in Dichlormethan versetzt. Die Suspension wird 1 d bei 400C gerührt und dann mit 4 ml
Wasser und 6 ml Dichlormethan verdünnt. Nach Phasentrennung wird die organische Phase mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in Diethylether verrührt, abfϊltriert und im
Vakuum getrocknet.
Ausbeute: 108 mg (69% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 3.23 min;
MS (ESIpos): m/z = 552 [M+Η]+.
Stufe c); N-(4-Chlorphenyl)-N'-[4-(2-imino-l,3-oxazolidin-3-yl)phenyl]-l-methyl-lH- pyrrol-3,4-dicarboxamid-Methansulfonat
Figure imgf000070_0002
Eine Lösung von 108 mg (0.20 mmol) N-{4-[(2-{[^ert.-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)(cyano)- amino]phenyl}-N'-(4-chlorphenyl)-l-methyl-lH-pyrrol-3,4-dicarboxamid in 10 ml Acetonitril wird bei RT mit insgesamt 27 μl (0.41 mmol) Methansulfonsäure versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Der entstandene Niederschlag wird abfϊltriert und im Vakuum getrocknet. Ausbeute: 26 mg (25% d. Th.)
LC-MS (Methode 3): Rt = 1.65 min;
MS (ESIpos): m/z = 437 [M+H]+ (freie Base);
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11.67 (s, IH), 11.29 (s, IH), 9.55 (br. s, IH), 8.78 (br. s, IH), 7.85 (d, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 4.85 (t, 2H), 4.24 (t, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
Beispiel 17
N-(5-Chlθφyridin-2-yl)-N'-{4-[(2Z)-2-(hydroxyimino)-l,3-oxazolidin-3-yl]phenyl}pyrazm-2,3-di- carboxamid
Figure imgf000071_0001
1000 mg (1.87 mmol) der Verbindung aus Beispiel 1, 2596 mg (30.90 mmol, 16.5 eq.) Natrium- hydrogencarbonat und 1952 mg (28.09 mmol, 15 eq.) Hydroxylammoniumchlorid werden in 45 ml eines Ethanol/Wasser-Gemisches (2:1) suspendiert und 14 h bei 6O0C gerührt. Das Ethanol wird im Vakuum entfernt und der Feststoff durch Filtration abgetrennt. Dieser wird mittels RP-HPLC aufgereinigt. Das resultierende Rohprodukt wird in Diethy lether verrührt, filtriert und der Feststoff im Hochvakuum getrocknet.
Ausbeute: 125 mg (15% d. Th.)
HPLC (Methode 7): R1 = 3.65 min;
MS (ESIpos): m/z = 454 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSOd6): δ = 11.12 (s, IH), 10.70 (s, IH), 8.93-8.91 (s, 2H), 8.60 (s, IH), 8.42 (s, IH), 8.24 (d, IH), 7.99 (d, IH), 7.74 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 4.44 (t, 2H), 3.94 (t, 2H). B. Bewertung der pharmakologischen Wirksamkeit
Die erfindungsgemäßen Verbindungen wirken insbesondere als selektive Inhibitoren des Blutgerinnungsfaktors Xa und hemmen nicht oder erst bei deutlich höheren Konzentrationen auch andere Serinproteasen wie Plasmin oder Trypsin.
Als „selektiv" werden solche Inhibitoren des Blutgerinnungsfaktors Xa bezeichnet, bei denen die IC50- Werte für die Faktor Xa-Inhibierung gegenüber den IC50- Werten für die Inhibierung anderer Serinproteasen, insbesondere Plasmin und Trypsin, um mindestens das 100-fache kleiner sind, wobei bezüglich der Testmethoden für die Selektivität Bezug genommen wird auf die im folgenden beschriebenen Testmethoden der Beispiele B.a.l) und B.a.2).
Die vorteilhaften pharmakologischen Eigenschaften der erfindungsgemäßen Verbindungen können durch folgende Methoden festgestellt werden:
a) Testbeschreibungen (in vitro)
a.1) Messung der Faktor Xa-Hemmung:
Die enzymatische Aktivität von humanem Faktor Xa (FXa) wird über die Umsetzung eines für den FXa-spezifϊschen chromogenen Substrats gemessen. Dabei spaltet der Faktor Xa aus dem chromo- genen Substrat p-Nitroanilin ab. Die Bestimmungen werden wie folgt in Mikrotiterplatten durchgeführt:
Die Prüfsubstanzen werden in unterschiedlichen Konzentrationen in DMSO gelöst und für 10 Minuten mit humanem FXa (0.5 nmol/1 gelöst in 50 mmol/1 Tris-Puffer [C,C,C-Tris(hydroxy- methyl)aminomethan], 150 mmol/1 NaCl, 0.1% BSA [bovine serum albumine], pH = 8.3) bei 250C inkubiert. Als Kontrolle dient reines DMSO. Anschließend wird das chromogene Substrat (150 μmol/1 Pefachrome® FXa der Firma Pentapharm) hinzugefügt. Nach 20 Minuten Inkubationsdauer bei 250C wird die Extinktion bei 405 nm bestimmt. Die Extinktionen der Testansätze mit Prüfsubstanz werden mit den Kontrollansätzen ohne Prüfsubstanz verglichen und daraus die IC50- Werte berechnet.
Repräsentative Wirkdaten aus diesem Test sind in der folgenden Tabelle 1 aufgeführt: Tabelle 1
Figure imgf000073_0001
a.2) Bestimmung der Selektivität:
Zum Nachweis der selektiven FXa-Inhibition werden die Prüfsubstanzen auf ihre Hemmung anderer humaner Serinproteasen wie Trypsin und Plasmin hin untersucht. Zur Bestimmung der en2ymatischen Aktivität von Trypsin (500 mU/ml) und Plasmin (3.2 nmol/l) werden diese Enzyme in Tris-Puffer (100 mmol/1, 20 mmol/1 CaCl2, pH = 8.0) gelöst und für 10 Minuten mit Prüfsubstanz oder Lösungsmittel inkubiert. Anschließend wird durch Zugabe der entsprechenden spezifischen chromogenen Substrate (Chromozym Trypsin® und Chromozym Plasmin®; Fa. Roche Dia- gnostics) die enzymatische Reaktion gestartet und die Extinktion nach 20 Minuten bei 405 nm bestimmt. Alle Bestimmungen werden bei 37°C durchgeführt. Die Extinktionen der Testansätze mit Prüfsubstanz werden mit den Kontrollproben ohne Prüfsubstanz verglichen und daraus die IC5o-Werte berechnet.
a.3) Bestimmung der antikoagulatorischen Wirkung:
Die antikoagulatorische Wirkung der Prüfsubstanzen wird in vitro in Human- und Kaninchenplasma bestimmt. Dazu wird Blut unter Verwendung einer 0.11 molaren Natriumcitrat-Lösung als Vorlage in einem Mischungsverhältnis Natriumcitrat/Blut 1 :9 abgenommen. Das Blut wird unmittelbar nach der Abnahme gut gemischt und 10 Minuten bei ca. 2500 g zentrifugiert. Der Überstand wird abpipettiert. Die Prothrombinzeit (PT, Synonyme: Thromboplastinzeit, Quick-Test) wird in Gegenwart variierender Konzentrationen an Prüfsubstanz oder dem entsprechenden Lösungsmittel mit einem handelsüblichen Testkit (Hemoliance® RecombiPlastin, Fa. Instrumentation Laboratory) bestimmt. Die Testverbindungen werden 3 Minuten bei 370C mit dem Plasma inkubiert. Anschließend wird durch Zugabe von Thromboplastin die Gerinnung ausgelöst und der Zeitpunkt des Gerinnungseintritts bestimmt. Es wird die Konzentration an Prüfsubstanz ermittelt, die eine Ver- doppelung der Prothrombinzeit bewirkt. b) Bestimmung der antithrombotischen Wirkung (in vivo)
b.1) Arteriovenöses Shunt-Modell (Kaninchen) :
Nüchterne Kaninchen (Stamm: Esd: NZW) werden durch intramuskuläre Gabe einer Rompun/ Ketavet-Lösung -narkotisiert (5 mg/kg bzw. 40 mg/kg). Die Thrombusbildung wird in einem arteriovenösen Shunt in Anlehnung an die von CN. Berry et al. [Semin. Thromb. Hemost. 1996, 22, 233-241] beschriebene Methode ausgelöst. Dazu werden die linke Vena jugularis und die rechte Arteria carotis freipräpariert. Ein extracorporaler Shunt wird mittels eines 10 cm langen Venenkatheders zwischen den beiden Gefäßen gelegt. Dieser Katheder ist in der Mitte in einen weiteren, 4 cm langen Polyethylenschlauch (PE 160, Becton Dickenson), der zur Erzeugung einer thrombogenen Oberfläche einen aufgerauhten und zu einer Schlinge gelegten Nylonfaden enthält, eingebunden. Der extrakorporale Kreislauf wird 15 Minuten lang aufrechterhalten. Dann wird der Shunt entfernt und der Nylonfaden mit dem Thrombus sofort gewogen. Das Leergewicht des Nylonfadens ist vor Versuchsbeginn ermittelt worden. Die Prüfsubstanzen werden vor Anlegung des extrakorporalen Kreislaufs entweder intravenös über eine Ohrvene oder oral mittels Schlund- sonde verabreicht.
C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden:
Tablette:
Zusammensetzung:
100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.
Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm.
Herstellung:
Die Mischung aus erfindungsgemäßer Verbindung, Lactose und Stärke wird mit einer 5%-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat 5 Minuten gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet.
Oral applizierbare Suspension:
Zusammensetzung:
1000 mg der erfmdungsgemäßen Verbindung, 1000 mg Ethanol (96%), 400 mg Rhodigel® (Xanthan gum der Firma FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser.
Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.
Herstellung:
Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, die erfindungsgemäße Verbindung wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluß der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt. Oral applizierbare Lösung:
Zusammensetzung:
500 mg der erfmdungsgemäßen Verbindung, 2.5 g Polysorbat und 97 g Polyethylenglycol 400. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 20 g orale Lösung.
Herstellung:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in der Mischung aus Polyethylenglycol und Polysorbat unter Rühren suspendiert. Der Rührvorgang wird bis zur vollständigen Auflösung der erfindungsgemäßen Verbindung fortgesetzt.
i.v.-Lösung:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in einer Konzentration unterhalb der Sättigungslöslichkeit in einem physiologisch verträglichen Lösungsmittel (z.B. isotonische Kochsalzlösung, Glucose- lösung 5% und/oder PEG 400-Lösung 30%) gelöst. Die Lösung wird steril filtriert und in sterile und pyrogenfreie Injektionsbehältnisse abgefüllt.

Claims

Patentansprfiche
1. Verbindung der Formel (I)
Figure imgf000077_0001
in welcher
n für die Zahl 1 , 2 oder 3 steht,
R1 für Wasserstoff, (Ci-C4)-Alkyl, (CrC4)-Alkanoyl, Cyano oder Hydroxy steht,
R2 und R3 gleich oder verschieden sind und unabhängig voneinander für Wasserstoff, Fluor, Chlor, Cyano, (CrC3)-Alkyl, Cyclopropyl, Trifluormethyl, Hydroxy, (C,- C3)-Alkoxy, Trifluormethoxy oder Amino stehen,
A für einen Phenylen- oder 5- oder 6-gliedrigen Heteroarylen-Ring steht, wobei sich die beiden Carboxamid-Gruppierungen -CO-NH-Phenyl und -CO-NH-Z an benachbarten Ringatomen des Phenylen- bzw. Heteroarylen-Ringes befinden und Phenylen und Heteroarylen zusätzlich durch Halogen und/oder (Ci-C4)-Alkyl substituiert sein können,
und
Z für Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Pyrazinyl oder Thienyl steht, das jeweils ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, durch Substituenten ausgewählt aus der Gruppe von Fluor, Chlor, Cyano, (Ci-C4)-Alkyl, welches seinerseits durch Amino substituiert sein kann, Ethinyl und Amino substituiert sein kann,
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
2. Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, in welcher
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000078_0001
steht, worin
R4 Wasserstoff, Halogen oder (CrO-Alkyl,
R5 Wasserstoff oder (CrC4)-Alkyl
und
# und * die Verknüpfungsstellen mit der -CO-NH-Phenyl- und der -CO-NH-Z- Gruppierung bedeuten.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder 2, in welcher
Z für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000079_0001
Figure imgf000079_0002
steht, worin
R6 Fluor, Chlor, Cyano, Methyl oder Ethinyl
und
die Verknüpfungsstelle mit dem Stickstoffatom bedeutet.
4. Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 , in welcher
für die Zahl 1 oder 2,
R1 für Wasserstoff,
R2 für Wasserstoff,
R für Wasserstoff, Fluor oder Methyl,
A für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000079_0003
worin
# die Verknüpfungsstelle mit der -CO-NH-Phenyl-Gruppierung und
die Verknüpfungsstelle mit der -CO-NH-Z-Gruppierung bedeuten,
und für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000080_0001
worin $ die Verknüpfungsstelle mit dem Stickstoffatom bedeutet,
stehen,
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
5. Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, mit folgender Struktur:
Figure imgf000081_0001
oder
Figure imgf000081_0002
sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, in welcher R1 für Wasserstoff steht,
dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der Formel (II)
Figure imgf000082_0001
in welcher A und Z die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
zunächst mit einer Verbindung der Formel (HI)
Figure imgf000082_0002
in welcher n, R und R die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben
und
PG für eine Hydroxy-Schutzgruppe steht,
zu Verbindungen der Formel (FV)
Figure imgf000082_0003
in welcher n, A, PG, Z, R und R die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
umsetzt,
anschließend entweder
[A] durch Abspaltung der Schutzgruppe PG zu Verbindungen der Formel (V)
Figure imgf000083_0001
in welcher n, A, Z, R und R die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
gelangt und die Verbindungen der Formel (V) dann mit Bromcyan in Verbindungen der Formel (I-A)
Figure imgf000083_0002
in welcher n, A, Z, R2 und R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
überfuhrt
oder
[B] zuerst mit Bromcyan zu Verbindungen der Formel (VI)
Figure imgf000083_0003
in welcher n, A, PG, Z, R2 und R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
umsetzt,
anschließend durch Abspaltung der Schutzgruppe PG zu Verbindungen der Formel (VII)
Figure imgf000084_0001
in welcher n, A, Z, R2 und R3 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
gelangt und dann die Verbindungen der Formel (VE) zu Verbindungen der Formel (I-A) cyclisiert
und die Verbindungen der Formel (I-A) gegebenenfalls mit den entsprechenden (i)
Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen oder Säuren zu ihren Solvaten, Salzen und/oder SoI- vaten der Salze umsetzt.
7. Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten.
8. Verwendung einer Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen.
9. Verwendung einer Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, zur Verhinderung der Blutkoagulation in vitro.
10. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, in Kombination mit einem inerten, nicht-toxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoff.
11. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, in Kombination mit einem weiteren Wirkstoff.
12. Arzneimittel nach Anspruch 10 oder 11 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen.
13. Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen bei Menschen und Tieren unter Verwendung einer antikoagulatorisch wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, oder eines Arzneimittels, wie in einem der Ansprüche 10 bis 12 definiert. 14. Verfahren zur Verhinderung der Blutkoagulation in vitro, dadurch gekennzeichnet, dass eine antikoagulatorisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, zugegeben wird.
PCT/EP2005/012465 2004-12-02 2005-11-22 Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung WO2006058630A1 (de)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2007543733A JP2008521844A (ja) 2004-12-02 2005-11-22 環状イミノカルバメート類およびそれらの使用
US11/792,108 US20080214533A1 (en) 2004-12-02 2005-11-22 Cyclic Iminocarbamates And Their Use
CA002589740A CA2589740A1 (en) 2004-12-02 2005-11-22 Cyclic iminocarbamates and use thereof
EP05815274A EP1819701A1 (de) 2004-12-02 2005-11-22 Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102004058062A DE102004058062A1 (de) 2004-12-02 2004-12-02 Cyclische Iminocarbamate und ihre Verwendung
DE102004058062.6 2004-12-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2006058630A1 true WO2006058630A1 (de) 2006-06-08

Family

ID=36087625

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2005/012465 WO2006058630A1 (de) 2004-12-02 2005-11-22 Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20080214533A1 (de)
EP (1) EP1819701A1 (de)
JP (1) JP2008521844A (de)
CA (1) CA2589740A1 (de)
DE (1) DE102004058062A1 (de)
WO (1) WO2006058630A1 (de)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007137792A1 (de) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Substituierte heterozyklen und ihre verwendung
WO2007137793A1 (de) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Dihydro-pyrrolopyridin-, dihydro-pyrrolopyridazin- und dihydro-pyrrolopyrimidin-derivate und ihre verwendung
WO2015150449A2 (en) 2014-04-02 2015-10-08 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amido-substituted azole compounds
EP3078378A1 (de) 2015-04-08 2016-10-12 Vaiomer Verwendung von faktor-xa-inhibitoren zur regulierung von glykämie

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102004059219A1 (de) * 2004-12-09 2006-06-14 Bayer Healthcare Ag Pyrazindicarbonsäureamide und ihre Verwendung
MX369466B (es) 2011-10-28 2019-11-08 Lumena Pharmaceuticals Inc Inhibidores de la recirculación de ácidos biliares para el tratamiento de enfermedades hepáticas colestásicas pediátricas.
US20140323412A1 (en) 2011-10-28 2014-10-30 Lumena Pharmaceuticals, Inc. Bile acid recycling inhibitors for treatment of hypercholemia and cholestatic liver disease
WO2017055316A1 (en) * 2015-10-01 2017-04-06 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amido-substituted azole compounds

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002000651A2 (en) * 2000-06-27 2002-01-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Factor xa inhibitors
WO2002079145A1 (en) * 2001-03-30 2002-10-10 Millennium Pharmaceuticals, Inc. BENZAMIDE INHIBITORS OF FACTOR Xa

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002000651A2 (en) * 2000-06-27 2002-01-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Factor xa inhibitors
WO2002079145A1 (en) * 2001-03-30 2002-10-10 Millennium Pharmaceuticals, Inc. BENZAMIDE INHIBITORS OF FACTOR Xa

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007137792A1 (de) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Substituierte heterozyklen und ihre verwendung
WO2007137793A1 (de) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Dihydro-pyrrolopyridin-, dihydro-pyrrolopyridazin- und dihydro-pyrrolopyrimidin-derivate und ihre verwendung
WO2015150449A2 (en) 2014-04-02 2015-10-08 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amido-substituted azole compounds
WO2015150449A3 (en) * 2014-04-02 2016-01-14 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amido-substituted azole compounds as inhibitors of tnks1 and/or tnks2
CN106459015A (zh) * 2014-04-02 2017-02-22 拜耳医药股份公司 作为tnks1和/或tnks2的抑制剂的酰胺基取代的唑类化合物
US9884063B2 (en) 2014-04-02 2018-02-06 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amido-substituted azole compounds
EP3078378A1 (de) 2015-04-08 2016-10-12 Vaiomer Verwendung von faktor-xa-inhibitoren zur regulierung von glykämie
WO2016162472A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 Vaiomer Use of factor xa inhibitors for regulating glycemia

Also Published As

Publication number Publication date
DE102004058062A1 (de) 2006-06-08
EP1819701A1 (de) 2007-08-22
CA2589740A1 (en) 2006-06-08
US20080214533A1 (en) 2008-09-04
JP2008521844A (ja) 2008-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1928867B1 (de) 2-aminoethoxyessigsäure-derivate und ihre verwendung zur behandlung thromboembolischer erkrankungen
WO2004101557A1 (de) Heterocyclische verbindungen
EP2029546B1 (de) Aryl-substituierte heterozyklen und ihre verwendung
EP2084154B1 (de) Aminoacyl-prodrug derivate und arzneimittel zur behandlung von thromboembolischen erkrankungen
EP1928868A1 (de) Iminooxazolidin-derivate und ihre verwendung
WO2007137793A1 (de) Dihydro-pyrrolopyridin-, dihydro-pyrrolopyridazin- und dihydro-pyrrolopyrimidin-derivate und ihre verwendung
WO2006058630A1 (de) Cyclische iminocarbamate und ihre verwendung
WO2007137801A1 (de) Tetrahydro-pyrrolopyridin-, tetrahydro-pyrazolopyridin-, tetrahydro-imidazopyridin- und tetrahydro-triazolopyridin-derivate und ihre verwendung
EP1945634B1 (de) Phenylen-bis-oxazolidin-derivate und ihre verwendung als antikoagulantien
EP1824844B1 (de) Pyrazindicarbonsäureamide und ihre verwendung
EP2029586B1 (de) Isoindolin-1-on-, isoindolin-3-on- und isoindolin-1,3-dion-derivate und ihre verwendung
DE102006025316A1 (de) Isoindolin-1-on-, Isoindolin-3-on- und Isoindolin-1,3-dion-Derivate und ihre Verwendung
EP1874764B1 (de) Imino-oxazolidine und ihre verwendung als antikoagulantien
WO2007137792A1 (de) Substituierte heterozyklen und ihre verwendung

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KM KN KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV LY MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NG NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SM SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LT LU LV MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2005815274

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2589740

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2007543733

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2005815274

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 11792108

Country of ref document: US