Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

UA40420U - Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines - Google Patents

Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines Download PDF

Info

Publication number
UA40420U
UA40420U UAU200812350U UAU200812350U UA40420U UA 40420 U UA40420 U UA 40420U UA U200812350 U UAU200812350 U UA U200812350U UA U200812350 U UAU200812350 U UA U200812350U UA 40420 U UA40420 U UA 40420U
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
mycotoxins
cell
determination
culture
deoxynivalenol
Prior art date
Application number
UAU200812350U
Other languages
Russian (ru)
Ukrainian (uk)
Inventor
Анна Анатольевна Фотина
Дмитрий Викторович Цыбульский
Юлия Евгениевна Дворская
Original Assignee
Сумский Национальный Аграрный Университет
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сумский Национальный Аграрный Университет filed Critical Сумский Национальный Аграрный Университет
Priority to UAU200812350U priority Critical patent/UA40420U/en
Publication of UA40420U publication Critical patent/UA40420U/en

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Method for determination of toxicity of myco-toxins includes use of suspension of culture of cells of pig intestines for determination of comparative toxicity of trychotycenum myco-toxins of deoxynivalenol, nivalenol, 3-acetyldioxynilvalenol and 15-O-acetyl-4-deoxynilvalenol.

Description

11111111; олим | лим | г2им | Бим (Контроль- 1009671111111111; olym | lime | g2im | Bym (Control - 10096711

Приклад 2. Для визначення токсичності мікотоксинів на культурі клітин кишечнику свині було взято суспензію клітин із розрахунку 200000 клітин/мл., у кількості О0,5мл. на 1 фільтр. У досліді був визначений вплив деоксиніваленолу, ніваленолу, З3-Ацетилдеоксиніваленолу та 15-0-Ацетил-4-деоксинівалеолу на розвиток клітинExample 2. To determine the toxicity of mycotoxins, a suspension of cells was taken at the rate of 200,000 cells/ml, in the amount of O0.5 ml, on a pig intestinal cell culture. for 1 filter. The study determined the effect of deoxynivalenol, nivalenol, 3-Acetyldeoxynivalenol and 15-0-Acetyl-4-deoxynivaleol on cell development

ІРЕС-1. Були досліджені показники транс епітеліального опору клітин, клітинна проникність та вивільнення ензимуIRES-1. Indicators of trans-epithelial cell resistance, cell permeability and enzyme release were investigated

ІОН із клітин під впливом токсинів.ION from cells under the influence of toxins.

Фінальна концентрація деоксиніваленолу, ніваленолу, З-Ацетилдеоксиніваленолу та 15-О-Ацетил-4- деоксинівалеолу у дослідах дорівнювала 5 М для кожного.The final concentration of deoxynivalenol, nivalenol, 3-Acetyldeoxynivalenol and 15-O-Acetyl-4-deoxynivaleol in the experiments was equal to 5 M for each.

Дослід по визначенню показників опору тривав впродовж 11 днів. Вимірювання здійснювали кожен день в один і той же час за допомогою вольтметру. Отримані результати дозволяють стверджувати, що даний метод визначення токсичності мікотоксинів на клітинах ІРЕС-1 є ефективним (таблиця 2).The experiment to determine resistance indicators lasted for 11 days. Measurements were made every day at the same time using a voltmeter. The obtained results allow us to state that this method of determining the toxicity of mycotoxins on IRES-1 cells is effective (table 2).

Таблиця 2Table 2

Зниження показників транс епітеліального опору клітин ІРЕС-1 в присутності деоксиніваленолу, ніваленолу, 3-Ацетилдеоксиніваленолу та 15-0О-Ацетил-4- деоксинівалеолу 11111113 116 | 9Reduction of trans-epithelial resistance of IRES-1 cells in the presence of deoxynivalenol, nivalenol, 3-Acetyldeoxynivalenol and 15-O-Acetyl-4-deoxynivaleol 11111113 116 | 9

Дослідження клітинної проникності та рівня вивільнення ензиму ІОН в процесі лізису клітин підтверджують попередньо отримані данні щодо токсичності представлених мікотоксинів. Цитотоксичний ефект деоксиніваленолу, ніваленолу та 15-0О-Ацетил-4-деоксинівалеолу становив 1395, 3790 та 2095 відповідно, а цитотоксичний ефект 3-Ацетилдеоксиніваленолу дорівнював показникам контрольних клітин.Studies of cellular permeability and the level of ION enzyme release in the process of cell lysis confirm previously obtained data on the toxicity of the presented mycotoxins. The cytotoxic effect of deoxynivalenol, nivalenol, and 15-O-Acetyl-4-deoxynivaleol was 1395, 3790, and 2095, respectively, and the cytotoxic effect of 3-Acetyldeoxynivalenol was equal to that of control cells.

Проникність ентероцитів в присутності досліджуваних мікотоксинів підвищилась у 5; 4,5 та майже 11 разів в порівнянні з контрольними клітинами для деоксиніваленолу, ніваленолу та 15-0О-Ацетил-4-деоксинівалеолу, відповідно, в той час як показники 3-Ацетилдеоксиніваленолу дорівнювали показникам контрольних клітин (таблиця 3).The permeability of enterocytes in the presence of the studied mycotoxins increased by 5; 4.5 and almost 11-fold compared to control cells for deoxynivalenol, nivalenol and 15-0O-Acetyl-4-deoxynivaleol, respectively, while 3-Acetyldeoxynivalenol values were equal to those of control cells (Table 3).

Таблиця ЗTable C

Визначення рівня проникності клітин та вивільнення ензиму ОН клітинами ІРЕС-1 в присутності деоксиніваленолу, ніваленолу, Ацетилдеоксиніваленолу та 15-0О-Ацетил- 4 деоксинівалеолу 111111111111111111111111111111111110| БивільненняензимуТОН | ПроникністьклітинDetermination of the level of cell permeability and release of OH enzyme by IRES-1 cells in the presence of deoxynivalenol, nivalenol, Acetyldeoxynivalenol and 15-0O-Acetyl-4 deoxynivaleol 111111111111111111111111111111111110| Release of the enzyme TON | Cell permeability

З-Ацтилдеоксиніваленол./:/777771Ї777777771711111110111111111111111 11111111 Ло88о6110 (Контроль -О(ЦОН); 10095(проникністьклтин) | ////777777171717171111111Ї1с1сЗ-Actyldeoxynivalenol./:/777771Ї777777771711111110111111111111111 11111111 Ло88о6110 (Control -О(ЦОН); 10095 (permeability of protein) | ////777777171717171111111Ї1с1с

Напротязі всього етапу дослідження для проліферації клітин використовували поживне середовище, яке складається із: середовища ОМЕМ НАМ Б-12 - Зідта, О5А, сироватки телячого ембріону, І-глютаміну (200МмМ) виробник - Єигобіо (Франція), водного розчину антибіотиків (пеніцилін й стрептоміцин) по 10000 шиті, рідини ІТ5 (інсулін-(5 нд/ті), трансферин (5 до/ті) й селен (5 пд/ті)) та ЕСЕ (епідермальний фактор росту) - 100 род/ті. Для диференціації - такий самий склад, але замість сироватки телячого ембріону додавали дексаметазон (20 дд/ті).Throughout the entire research stage, a nutrient medium was used for cell proliferation, which consists of: OMEM NAM B-12 medium - Zidt, O5A, calf embryo serum, I-glutamine (200 mM) manufacturer - Eigobio (France), an aqueous solution of antibiotics (penicillin and streptomycin ) 10,000 stitches each, IT5 fluids (insulin (5 days/ti), transferrin (5 do/ti) and selenium (5 pd/ti)) and ESE (epidermal growth factor) - 100 rods/ti. For differentiation - the same composition, but instead of calf embryo serum, dexamethasone (20 dd/ti) was added.

Проведені дослідження показали, що культура клітин кишечнику свині ІРЕС-1 є гарною модельною тест- системою для визначення токсичності трихотиценових мікотоксинів. За допомогою наведених методів й використання культури клітин ми довели, що трихотиценові мікотоксини пригнічують бар'єрну функцію кишечнику, здійснюючи цитотоксичний вплив на ентероцити. Встановили, що 15-0О-Ацетил-4-деоксинівалеол є токсичним за деоксиніваленол й в свою чергу 3-Ацетилдеоксиніваленол є найменш токсичним з поміж них трьох.The conducted studies showed that the IRES-1 pig intestinal cell culture is a good model test system for determining the toxicity of trichoticene mycotoxins. With the help of the mentioned methods and the use of cell culture, we proved that trichoticene mycotoxins inhibit the intestinal barrier function, exerting a cytotoxic effect on enterocytes. It was found that 15-0O-Acetyl-4-deoxynivaleol is more toxic than deoxynivalenol and, in turn, 3-Acetyldeoxynivalenol is the least toxic of the three.

При порівнянні токсичності деоксиніваленолу й ніваленолу слід зазначити, що ніваленол є більш токсичним для росту даної культури клітин, але деоксиніваленол виявляє сильніший цитотоксичний ефект на функціональну здатність клітин.When comparing the toxicity of deoxynivalenol and nivalenol, it should be noted that nivalenol is more toxic for the growth of this cell culture, but deoxynivalenol shows a stronger cytotoxic effect on the functional capacity of cells.

Таким чином використання культури клітин ІРЕС-1, як способу визначення токсичності мікотоксинів, є доцільним, адже протягом наших досліджень вона зарекомендувала себе гарною тест-системою, яка дозволяє у короткий термін визначити властивості речовин, їх токсичність та шкідливість й дає змогу робити висновки про доцільність їх подальшого вивчення для розробки нових засобів захисту тварин. Крім того, позитивними властивостями, якими відзначається даний метод, можна вважати його високу відтворну здатність і чутливість, низьку собівартість та більш швидке отримання результатів в порівнянні з класичними методами.Thus, the use of IRES-1 cell culture as a method of determining the toxicity of mycotoxins is expedient, because during our research it has proven itself to be a good test system that allows us to determine the properties of substances, their toxicity and harmfulness in a short period of time and allows us to draw conclusions about the expediency their further study for the development of new means of animal protection. In addition, the positive properties of this method can be considered its high reproducibility and sensitivity, low cost and faster results compared to classical methods.

UAU200812350U 2008-10-20 2008-10-20 Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines UA40420U (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200812350U UA40420U (en) 2008-10-20 2008-10-20 Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200812350U UA40420U (en) 2008-10-20 2008-10-20 Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA40420U true UA40420U (en) 2009-04-10

Family

ID=50619775

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAU200812350U UA40420U (en) 2008-10-20 2008-10-20 Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA40420U (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2465592C1 (en) * 2011-06-06 2012-10-27 Федеральное государственное учреждение здравоохранения Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора METHOD FOR ASSESSING CYTOTOXICITY OF Burcholderia pseudomallei antigens in vitro

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2465592C1 (en) * 2011-06-06 2012-10-27 Федеральное государственное учреждение здравоохранения Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора METHOD FOR ASSESSING CYTOTOXICITY OF Burcholderia pseudomallei antigens in vitro

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hibdon et al. Notch and mTOR signaling pathways promote human gastric cancer cell proliferation
Kulkarni et al. Dissolved fulvic acids from a high arsenic aquifer shuttle electrons to enhance microbial iron reduction
Zhuang et al. Effects of nitrogen and phosphorus concentrations on the growth of microalgae Scenedesmus. LX1 in suspended-solid phase photobioreactors (ssPBR)
Tian et al. Aggregate size and glucose level affect priming sources: a three-source-partitioning study
WO2009034708A1 (en) Cell proliferation method, and pharmaceutical agent for repair and regeneration of tissue
Anskjær et al. Effect of pH on the toxicity and bioconcentration of sulfadiazine on Daphnia magna
RU2015150203A (en) METHOD FOR SCREENING OF MEDICINES ON THE BASIS OF CELLS AND ITS APPLICATION
Zhang et al. Effects of benthic algae on release of soluble reactive phosphorus from sediments: a radioisotope tracing study
Wang et al. Non-microbial methane emissions from soils
CN105283541B (en) Culture medium is used in stem cell culture
Cheng et al. Mechanism for the instant blood-mediated inflammatory reaction in rat islet transplantation
CN107043738A (en) A kind of porcine hepatocyte serum free medium and preparation method thereof
CN103492878A (en) Methods for detecting contaminants in solutions containing glucose polymers
Chen et al. Lead exposure promotes the inflammation via the circRNA-05280/miR-146a/IRAK1 axis in mammary gland
Domenici et al. PDX-derived Ewing’s sarcoma cells retain high viability and disease phenotype in alginate encapsulated spheroid cultures
UA40420U (en) Method for determination of mycotoxins with use of culture of cell of pig intestines
CN103667122B (en) Compound bacterium and application thereof
Modh et al. Specific detection of tetanus toxoid using an aptamer-based matrix
Su et al. Spatiotemporal dynamics, bioaccumulation, and critical influencing factors of antibiotics in tilapia aquaculture: A study on source identification and environmental fate within typical farming systems
Hellmold et al. Sequential Treatment with Temozolomide Plus Naturally Derived AT101 as an Alternative Therapeutic Strategy: Insights into Chemoresistance Mechanisms of Surviving Glioblastoma Cells
CN103911423A (en) Antibacterial peptide activity detection kit and detection method
CN103525762A (en) Formula and method for preparing specific T cells and formula preparation method thereof
Wan et al. Permeability decides the effect of antibiotics on sedimentary nitrogen removal in Jiulong River Estuary
Kanai et al. Suppression of parathyroid hormone production in vitro and in vivo by RNA interference
Bobilya et al. Zinc-related metallothionein metabolism in bovine pulmonary artery endothelial cells