TWI295996B

TWI295996B - Dipeptide derivatives

Info

Publication number: TWI295996B
Application number: TW091110028A
Authority: TW
Inventors: Anne Fink Cynthia
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2001-05-15
Filing date: 2002-05-14
Publication date: 2008-04-21
Also published as: HUP0304084A3; NO20035084D0; US6777443B2; WO2002092622A3; WO2002092622A2; KR100908152B1; US20060058242A1; CZ20033077A3; CN1649893A; RU2298559C2; US6992105B2; IL158772A0; EP2239268A1; AU2002314067B2; HUP0304084A2; EP1392720A2; RU2003134153A; MXPA03010403A; WO2002092622A8; PL366786A1

Description

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本發明的概池本發明係關於在以下説明的新穎血管肽酶抑制劑，以其作爲血管收縮素轉化酶（ACE)及中性肌鏈内切酶^^匕 EC 3·4·24·11)兩者之雙重抑制劑。本發明化合物特別有用於治療及/或預防反應ACE及ΝΕΡ抑制作用之病況，特別是心血管異常，如高血壓、離析的收縮高血壓、腎衰竭（包括水腫及鹽留存）、肺水腫、左心室肥厚、心臟衰竭（包括充血性心力衰竭）及動脈粥樣硬化症。本發明化合物也有用於降低在哺乳類中上升的膽固醇血漿値。而且，彼也會抑制内皮素轉化酶（ECE)，並也有用於治療及/或預防反應 ECE抑制作用之病況。有鑑於彼的中性肌鏈内切酶抑制作用，故本發明化合物也有用治療疼痛、憂蕾症、特定的精神病況及識別異常。其它潛在的適效包括治療絞痛、月經徵候群、美尼爾氏病、高路固酮血症、高鈣尿症、腹水、青光眼、氣喘及胃腸道異常（如腹瀉、應激性結腸徵候群及胃酸過高）。有鑑於彼的ECE抑制作用，故本發明化合物也有用治療及/或預防内皮素依賴型病況及疾病，包括腦局部缺血（中風）、珠網膜出血、創傷性腦部傷害、腦血管痙攣、動脈肥厚、再狹窄症、雷語氏病、心肌梗塞、肥胖症；也包括攝護腺增生、偏頭痛、糖尿病（糖尿病腎病變）、子痛前症、青光眼及移殖排斥（如主動脈或實體器官移殖）與勃起機能障礙。 -4-

1295996 A7 B7 五、發明説明（4 ) 及硫赶、醇或酚之S-醯基與0-醯基衍生物，其中醯基具有如本文定義之意義。在醫藥上可接受之酯類係以溶劑分解作用或在生理狀態下可轉化成式I之自由羧酸的前體藥物酯類衍生物較佳。在醫藥上可接受之前體藥物酯類係以例如低碳燒基酯、芳基-低碳燒基g旨、α-(低碳規酿氧基）-低碳虎基自旨（如特戊醯氧基甲酯）及α-(低碳烷氧基羰基、嗎啉代羰基、哌啶幷羰基、吡咯烷并羰基或二-低碳烷胺基羰基）_低碳烷基酯較佳。在醫藥上可接受之鹽類係衍生自本發明的任何酸性化合物（例如，那些其中C00R2代表羧基的化合物）在醫藥上可接受之驗的鹽類。這些係例如驗金屬鹽類（例如，鈉、許鹽類）、驗土金屬鹽類（例如，鎂、劈鹽類）、胺鹽類（例如’陀密塞胺（tromethamine)鹽類）。式I化合物具有二或多個不對稱碳原子，視取代基的本性而定。本發明包含所生成之非對映異構物及旋光相對物。將較佳的組態以式Ia表示〇 Η I Τ6 0 slk-X-R1 1 1 II I 1 c —Ν— C-Ν—CH——C00F?2 da)丨

R

Re 其中攜有取代基-alk-x-Rl及仏之不對稱碳典型係具有s•組態。以其中R及I代表氫’· Rl代表低碳烷基.、Cr或環烷 ϊμ張尺度適用標準(CNS) A4規格(2iox297“_)_ 1295996 A7 B7 五、發明説明（11 ) 醯氧基係以視需要經取代之低碳烷醯氧基、烷氧基羧氧^ 基、單環之碳環系芳醯氧基或單環之雜環系芳醯氧基較佳。芳基-低碳烷氧基羰基係以單環之碳環系-低碳烷氧基碳基較佳，以苄氧基羰基較有利。聯芳基代表以單環之碳環系或單環之雜環系芳基取代之單碳環系芳基，以視需要在1或2個苯環上以低碳烷基、低碳烷氧基、卣素或三氟甲基取代之4-聯苯基較有利。聯芳基-低碳烷基係以4-聯苯基-低碳烷基較佳，以4-聯苯基-曱基較有利。本發明的新穎化合物係抑制血管收縮素I轉化成增高血壓之血管收縮素II之ACE抑制劑，並-因此降低哺乳類的血壓。而且，以本發明化合物證明NEP的抑制作用及因此加強心房鈉尿因子（ANF)的心血管（例如，利尿及鈉尿）效應。組合的效應有利於治療哺乳類的心血管異常，特別是高血壓、心臟異常（如充血性心臟衰竭）及腎衰竭。以本發明化合物治療該心血管異常的進一步有利的效應在於ECE 之抑制作用。可以使用有利的哺乳類（例如，鐵鼠、老鼠、狗、猴子或分離的器官及其-製品··)的-活體外及活f内試驗·例證·以-上引證的特性。將該化合物以溶液形式施加於活體外，例如，以水溶液較佳，並以或經腸方式、非經腸方式、有利的經口服（p.o.)或經靜脈内（i.v.)施加於活體内，例如，以懸浮液或水溶液。在活體外的劑量可在介於約1〇_ό莫耳至 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐）

裝訂

1295996 A7 B7 五、發明説明（12 ) 1〇-9莫耳濃度之間改變。在活體内的劑量可在介於約0.01 至50毫克/公斤之間改變，以介於約0.1至25毫克/公斤之間較有利，其係依據投藥路徑而定。以活體外試驗最適合於本發明的自由羧酸。將試驗化合物溶解在二甲亞礙、乙醇或0.25克分子量碳酸氫銅中，並將溶液以緩衝液稀釋至預期的濃度。以類似於在第20册的Biochem. Pharmacol.第1637頁（1971) 提供的方法可以證明本發明化洽物在活體外的ACE抑制作用。ACE檢定的緩衝液係300毫克分子量NaCl及100毫克分子量KH2P〇4 (pH 8.3)。以100微升馬尿醯基-組胺醯基-亮胺酸（2毫克/毫升）加入含有酶及藥物的150微升體積之試管中開始反應，並將試管在37 °C下培育30分鐘。以加入0.75 毫升之0.6當量NaOH終止反應。將100微升新鮮配製的0-酞醛溶液（在甲醇中的2毫克/毫升）加入試管中，並將内容物混合及允許其放置在室溫下。在10分鐘之後，加入100 微升之6當量HC1。將試管離心及在360毫微米下讀取上層清液的光密度。將結果對藥物濃度作圖，以诀定IC50，即達到不含藥物之控制樣品的一半活性之藥物濃度。典型係以本發明化合物證明以約0.1-50毫微克分子量爲範圍之IC50的ACE抑制作用。以本發明例證的實例6(a)的化合物在活體外的檢定中證明約20毫微克分子量之IC50的ACE。以測量在血壓正常的老鼠中以血管收縮素I謗發之血壓增高反應的抑制作用可以證明在以p.o.或i.v.投藥的活體内 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 裝訂

線 1295996 A7 B7 五、發明説明（13 ) 的ACE的抑制作用。以有意識的血壓正常的雄鼠進行以經靜脈内投予化合物的活體内試驗。分別將大腿動脈及大腿靜脈以環套住，以測量經靜脈内投予血管收縮素I及經靜脈内或口服投予本發明化合物的直接血壓。在基礎血壓穩定之後，在15分鐘的間隔時獲得對3或4次300毫微克/公斤血管收縮素I i.v.挑戰的血壓增高反應。經常在15、30、60及90分鐘時再獲得這些壓力反應，並接著在以i._v.或p.o.投予欲測試的化合物之後獲得每小時至最多6小時的壓力反應，並與初反應比較。任何觀察到的該血壓增高反應係ACE抑制作用的表現0 以本發明例證的實例6(a)的化合物_以10毫克/公斤i.v.之劑量會抑制以血管收縮素I謗發之血壓增高反應經3小時。實例1(a)的化合物以11.8毫克/公斤p.o.之劑量會抑制以血管收縮素I謗發之血壓增高反應經6小時。可以如下測定在活體外的NEP (EC 3.4.24.11)抑制作用：使用Orlowski及Wilk (1981)的改良式步驟，以基質戊二醯基-Ala-Ala-Phe-2-莕醯胺（GAAP)的水解作用測定NEP 3.4.24.11活性。培育混合物（125微升總體積）包括4.2微升蛋白質（以麥爾達（Maeda)等人（1983)的方法製備的老鼠腎皮質薄膜）、50毫克分子量tris缓衝液（在25 °C下pH 7.4 )、 500微克分子量基質（最終濃度）及亮胺酸胺基肽酶Μ( 2.5 微克）。將混合物在25 °C下培育10分鐘，並加入100微升快石榴石乙基（250微克快石榴石乙基/每毫升在1克分子量醋 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1295996 A7 _B7_._ 五、發明説明（I4 ) 酸鈉中的10% Tween 20 (pH 4.2))。在540毫微米下以光譜分析法測量活性。一單位NEP 24.11活性係定義爲在25 °C及 pH爲7.4之下每分鐘釋出1 nmol之2-莕胺。測量IC5〇値，即抑制50%的2-莕醯胺釋放所需要的試驗化合物濃度。也可以使用ANF作爲測定NEP活性的基質。使用3-分鐘反相-HPLC分離作用測量老鼠-ANF (r-ANF)消失，以測定 ANF退化活性。將一份在50毫克分子量tris HC1緩衝液 (pH 7.4)中的酶在37 °C下預培育-2分鐘，並以加入50微升總體積之4毫微莫耳r-ANF開始反應。在4分鐘之後，以加入 30微升之0.27%三氟醋酸（TFA)終止反應。將1單位活性定義成在37 °C及pH 7.4下每分鐘水解1毫微莫耳。測定IC50 値，即抑制50%的ANF水解放所需要的試驗化合物濃度。典型係以本發明化合物證明以約0.1-50毫微克分子量爲範圍之IC5〇的NEP抑制作用。以本發明例證的實例6(a)的化合物在活體外的檢定中證明在GAAP中約5毫微克分子量之IC50。可以如下測定本發明化合物對老鼠血漿ANF濃度的效應：將Sprague-Dawley雄鼠（275-390公克）以酮胺（150毫克/公斤）/乙醯普馬嗔（acepromazine)(10%)麻醉，並在大腿動脈及靜脈中以導管做儀器分析，分別獲得血液樣品及灌入 ANF。以迴旋系統約束老鼠及准許其以24小時復原，然後在有意識的未受限狀態下研究。在檢定中，在有或沒有NEP抑制作用下測定血漿ANF。 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 B7五、發明説明（15 ) 在研究的那一天，將所有的老鼠以450毫微克/公斤/分鐘 i.v.連續灌入ANF，即全部實驗5小時。在開始灌入60分鐘時獲得血液樣品的ANF基礎測量（時間0 )，並接著將老鼠隨意分成以試驗化合物或媒劑處理的群組。在投予試驗化合物之後的30、60、120、180及240分鐘時取得另外的血液樣品。以比放射免疫檢定測定血漿ANF濃度。將血漿在包括：50毫克分子量tris (pH 6.8)、154毫克分子量NaCl、 0.3%胎牛血清白蛋白及0.01% EDTA之緩衝液中稀釋 (xl2.5、x25 及x50)。將 100微升標準[rANF (99-126)]或樣品加入100微升兔子抗-rANF血清中，並在4 °C下培育16小時。接著將10000 cpm [125I] rANF加入反應混合物中，將其在4 °C下培育16小時。接著將10000 cpm [125I] rANF加入反應混合物中，將其在4 °C下再培育2 4小時。將連結至順磁性粒子之山羊抗-兔子IgG血清加入反應混合物中，並以混合物曝露於吸引磁架的方式將束縛的[125I] rANF製成片狀。將上層清液傾析及在r計數器中計算片狀物。重複所有的測量。將血漿ANF値以那些在只接受ANF (經靜脈内的450毫微克/公斤/分鐘）的以媒劑處理之動物中測量的數値之百分比表示。以本發明例證的實例1(a)的化合物以11.8毫克/公斤p.o之劑量會增加約70%之血漿ANF値。例如，分別根據巴希爾（Bazil)等人的22册J. Cardiovasc· Pharmacol.的第897-905頁（1993)及退潘尼（Trapani)等人的第 -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） !295996 A7 r^ ---Ξί_：五、發明説明（16 ) 14 册 J· Cardiovasc. Pharmacol.的第 419-424 頁（1989)，可在例如自發性高血壓老鼠（SHR)及DOCA-鹽高血壓老鼠中測足抗馬血壓活性。以本發明例證的實例1(a)的化合物以11.8毫克/公斤之口服一次的日劑量投藥會降低有意識的老鼠的平均動脈壓。可以如下測定在脱氧-皮質甾酮醋酸酯（DOCA)-鹽老鼠中的抗高血壓效應：以標準方法製備DOCA-鹽高血壓老鼠（280-380公克）。將老鼠進行單邊摘除手術，並在一週之後植入含有100毫克/ 公斤D0CA之矽橡膠片狀物。將老鼠以1% NaCl/0.2o/〇 KC1飲用水維持3至5週，直到建立持續性高血壓爲止。在此同時評估抗高血壓活性。 _ 在實驗前的兩天，將老鼠以甲氧敦燒麻醉及在大腿動脈中以導管做儀器分析，以測量動脈血壓。在48小時之後，使用1小時的期限記錄基礎動脈血壓及心速。接著投予試驗化合物或媒劑，並以另外5小時監控相同的心血管參數。在標準的利尿筛選中（如在Spectrum Publications的"New Anti-hypertensive Drugs"第 307-321 頁（1976)的説明）或以測量在老鼠中以ANF-謗發之鈉尿作用及利尿作用的差勢現象，可以測定利尿（saluretic)活性0 可以如下測定ANF之鈉尿效應的差勢現象：將 Sprague-Dawley 雄鼠（280-360 公克）以因芰汀（lnactin) (100毫克/公斤i.p.)麻醉，並在大腿動脈、靜脈及膀胱中 -19- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 _______._ 五、發明説明（以導管做儀器分析，分別測量動脈血壓、投予ANF及收集尿液。在整個實驗期間維持持續灌入正常的食鹽水（33微升/分鐘），以促進利尿作用及鈉分泌作用。實驗模式係由初期15-分鐘的收集期（稱爲預控制期）及接著以另外三個收集期所組成的。在完成預控制期之後，立刻投予試驗化合物或媒劑，接下來的45分鐘不做任何事。接著在第二個收集期（稱爲控制期，15分鐘）期間獲得血壓及腎臟測量。 - ^ 在該期間結束時，將ANF ( 1微-克/公斤i.v.藥丸）投予所有動物，並在兩個連續的15-分鐘收集期測定動脈壓及腎臟參數。測定所有收集期的平均動脈壓、尿液流動及尿鈉分泌作用。以Gould p50壓:力轉導器測量血壓，以比重法方式測量尿液流動、以火燄光度計測量納濃度，並以尿液流動及尿鈉濃度的結果計算尿鈉分泌作用。可如以下測定在活體外的ECE抑制作用：以DE 52陰離子交換管柱色層分離法部份純化來自豬的原主動脈内皮細胞的ECE，並以如第212册Ana· Biochem·的第434-436頁（1993)説明的放射免疫檢定（RIA)定量其活性。或者可以ECE的重組體形式取代天原生酶，如在例如第78 册Cell的第473_485頁（1994)的説明。已有許多團體説明人類ECE-1 (許密德特（Schmidt)等人的第356册FEBS Letters的第238-243頁（1卯4);寇（Kaw)等人的第四屆内皮素國際會議（Int· Conf. on Endothelin)，4 月 23-25 曰在倫敦（英國） (1995)C6 ;凡德蓁爾（Valdenaire)等人的第 270 册 J. Biol. Chem 的第 29794-29798 頁（1995);徐馬達（Shimada)等人的第 -20 - 尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) ' -- 1295996 A7 B7 五、發明説明（18 ) 207 册 Biochem· Biophys· Res· Commun·的第 807-812 頁（1995)) 。以RIA測量以大ET_1形成的ET_A可以測定ECE抑制作用，如第 31 册的 Biochem. Mol· Biol· Int· (No· 5)的第 861-867 頁（1993)的説明。或者可如以下使用重組體人類ECE-1 (rhECE-1): 在包括10%胎牛血清及lx抗菌素-抗霉菌素之DMEM/F12 介質中培育表現rhECE-1之中國田鼠卵巢細胞（寇等人的第四屆内皮素國際會議，4月23_25日在倫敦（英國）（1995) C6 )。以刮取方式收成細胞，以離心製成片狀物，並在4 °C下以包括5毫克分子量MgCl2、1微克分子量抑肽素A、 100毫克分子量亮肤素、1毫克分子量PMSF及20愛克分子量Tris (pH 7.0)之緩衝液中以每毫升％胞計2毫升缓衝液的比例均漿化。以短促的離心作用除去細胞碎屑，並將上層清液以100,000 xg離心30分鐘。將所得片狀物再懸浮在包括200毫克分子量NaCl2及50毫克分子量Tes (pH 7.0)(約15 毫克/毫升蛋白質濃度）之緩衝液中，並以整份儲存在-80 。。下。爲了評定抑制劑對ECE-1活性的效應，故將1〇微克蛋白質以在1 0微升體積之50毫克分子量Tes (pH 7.0)及0.005% Triton X-100中具有預期濃度的化合物在室溫下預培育20分鐘。接著將人類大ET-1 (5微升）加入0.2微克分子量的最終濃度中，並將反應混合物在37 °C下再培育2小時。以加入包括0.1% Triton X-100、0.2%牛血清白蛋白及在磷酸鹽緩衝的食鹽水中的0.02% NaN3之500微升RIA緩衝液終止反 -21- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1295996 A7 __B7_._ 五、發明説明（19 ) 應。將自以上的酶檢定獲得的稀釋樣品（200微升）在4 X：下以各自 25 微升的[125I] ET_1 ( 10,000 cpm/ 試管）及 1:20,000 倍稀釋的兔子抗體（特別辨識ET-1的羧基末端的色胺酸）在4 °C 下經隔夜培育。接著將連結至順磁性珠（70微克）之山羊抗 -兔子抗體加入每一個試管中，並將反應混合物在室溫下再培育30分鐘。以使用順磁架的方式將珠製成片狀。將上層清液傾析及在r計數器中計算片狀物的放射活性。分別在沒有無放射活性ET-1及抗-ET抗體的存在下測量總結合及非特異結合。在這些條件下，以ET-1及大ET-1代替與分另*J 具有 21士2 及 2 60,000土66,000 fmol (平均土SEM，η=3·5 )之 IC50 値的抗體結合的[125I] ET-1。 - 爲了測定抑制劑的IC5Q値，故測定每一個抑制劑的濃度 -反應曲線。使用與IBM-相容的ALLFIT程式版本將數據配合成單位置模式。以測量在經麻醉或有意識的老鼠中以大ET-1謗發的血壓增高反應的抑制作用，也可以測定在活體内的ECE抑制作用，如以下的説明。在Sprague-Dawley老鼠中測量抑制劑對以大ET-1挑戰所生成的血壓增高反應的效應，如在第31 册 Biochem. Mol· Int.(No· 5)的第 861-867 頁（1993)的説明。將結果以大ET-1謗發之血壓增高反應與媒劑比較的抑制百分比表示。將Sprague-Dawley雄鼠以因艾汁（100毫克/公斤i.p·)麻醉，並在大腿動脈及靜脈中以導管做儀器分析，分別記錄 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1295996 A7 B7 五、發明説明（20 ) 平均動脈壓（MAP)及投予化合物。進行氣管切開術，並將導管插入氣管中，以確定明顯的空氣通道。將動物體溫以加熱毯維持在37±1°C。在手術之後，允許MAP穩定，然後以氯異啕哚胺（3毫克/公斤i.v.)干擾自律神經傳遞。接著將老鼠以10毫克/公斤i.v.之試驗化合物或媒劑治療，並在 15及90分鐘之後以大ET-1(1毫微克/公斤i.v.)挑戰。通常在以試驗化合物或媒劑治療的動物中以大ET-1所產生增加最多的MAP作爲提出的數據報蚩。將Sprague-Dawley雄鼠以甲己酿銷（75毫克/公斤i.p·)麻醉，並在大腿動脈及靜脈中以導管做儀器分析，分別測量 MAP及投予藥物。將導管經由能夠使老鼠在再獲得意識之後自由移動的迴旋系統穿過。允許老鼠以24小時自該步驟復原，然後開始研究。在隔天經由大腿動脈導管記錄 MAP，並將試驗化合物及媒劑經由大腿靜脈投藥。在投予劑量之後，以1毫微莫耳/公斤i.v.之大ET-1在不同的時間挑戰動物。在適當的清洗期之後，依據劑量或攝取法而定，可將動物以另一個試驗化合物劑量或媒劑量再測試。通常在以試驗化合物或媒劑治療的動物中以大ET-1在2分鐘間隔時所產生的MAP與媒劑比較的差異作爲提出報告的數據。以測量在有意識SHR中以ET_1謗發的血壓增高反應的抑制作用，也可以測定在活體内的E C E抑制作用，例如，如第 204 册 Biochem· Biophys· Res· Commun.的第 407-412 頁（1994) 的説明。 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1295996 A7 B7 五、發明説明（21 ) 將或試驗化合物或媒劑（1克分子量NaHC03 )經由植入皮^ 下的滲透微幫浦投予雄SHR( 16-18週齡）。在第5天時，將大腿動脈及靜脈導管放入麻醉的老鼠中，分別測量MAP及投予試驗化合物。在48小時的復原期之後，經由與壓力轉導器連接之動脈導管記錄（第7天）MAP。允許血壓及心速經30分鐘穩定，然後使用氯異吲哚胺（10毫克/公斤i.v.)進行神經節阻斷。在約5分鐘之後，將大ET-1的藥丸劑量 (0·25毫微克/公斤i.v·)投予同時以媒劑及試驗化合物治療的老鼠。接著在兩組老鼠之間比較反應大ET-1的血壓變化。以測量以實驗謗發兔子的頭蓋骨底部腦動脈收縮的抑制作用，以證明腦血管痙攣的抑制作用（凱納（Caner)等人的第 85 册 J· Neurosurg·的第 917-922 頁（1996) ) 〇以第 112/113 册 Toxicology Letters 的第 453-459 頁（2000)説明的鼠科腿彎部淋巴節檢定可以測定本發明化合物缺乏不希望的免疫刺激潛在性或不希望的免疫刺激潛在性程度。本發明化合物的製備可藉由例如 a)將式II化合物

r6 0 丨 aik-X-F^ 1 1 nh2 ? c N CH^COOF^ 1 1 R (其中符號alk、X、R、R!、R6及R7具有如以上定義的意義及COOR2代表酯化羧基）與式III之羧酸 -24- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1295996

——C- -COOH

Rc R4 ^其反應性g能衍生物（其中&及〜具有⑹以上定義的意、代表氫或傾向S-保護基，例如，醯基、特丁基或視需要取代之苄基）濃縮；或 ' b)將式iv化合物 (IV)

FVS -C-c NH—-C -COOH

Rs 或其反應性官能衍生物（其中符號Rs，、R4-Rs及R6_R?具有如以上定義的意義）與式V之胺基酸酯 alk-X-R,

I RNH—CH-COOF^ 《V) ! j (其中X、尺及心具有如以上定義的意義及C〇〇R2代表醋化羧基）濃縮；或 C)將式VI化合物 ° H R6 0 alk-X-R,

I I I I II I γ——V-C-N-C-c——N——CH—COOF^ ( VI)

I I I

Rs R7 R (其中符號R、Ri、COOR2、R4-R7、alk及x具有如以上定義的意義及Y代表作爲離棄基的反應性醋化羥基（例如， -25- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) ^95996

氯基或溴基））與式VII化合物八3 0X1 (VH) 或其鹽（其中r3.代表氫或傾向3_保護基，例如，酿基、特丁基或視需要取代之爷基）在驗性條件下濃縮，及將所生成之產物轉化成式I化合物，其中R3係氫；並在以上的該方法中，如果暫時保護任何干擾反應基 (類）時，則除去該保護基（類），並接著分離所生成之本發明化合物；以及若必要’將任—何所生成之本發明化合物轉化成另一個本發明化合物；及/或若必要，將自由羧酸官能轉化成在醫藥上可接受之g旨衍生物，或將所生成之醋轉化成自由酸或成另一個酯衍生物；及/或若必要，將所生成之自由化合物轉化成鹽或將所生成之鹽轉化成自由化合物或成另一個鹽；及/或若必要，將異構物或外消旋物的混合物分離；及/或若必要，將所獲得的外消旋物溶解成旋光相對物。視需要以製備有機化學中常見熟知的保護基保護在以本文説明的方式轉化成本發明化合物的原料化合物及中間物中存在的官能基，如硫赶、羧基、胺基及羥基。經保護之硫赶、羧基、胺基及羥基係那些在溫和條件下可轉化成自由硫赶、羧基、胺基及羥基的基，沒有發生其它不希望的副反應。引入保護基的目的係保護官能基免於與反應組份及在用於進行預期的化學轉變作用的條件下有不希望的反應。那些熟悉本技藝的人已知就特殊反應所需要及選擇的保護 26 1295996 A7 B7 五、發明説明（24 ) — 基，並依據欲保護的官護基本性（硫赶、羧基、胺基等）、分子（取代基係其一部份）的結構及穩定性、以及反應條件而定。例如，在 J. F· W.麥克歐米爾（McOmie)之"Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London, N.Y. (1973) ； T. W.葛瑞恩（Greene)及 P. G· M.烏兹（Wuts)的第三版"Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley，Ν· Υ· (1999)及也在許若艾迪（Schroeder)及劉貝克（Luebke)的第 1 册”The Peptides"， Academic Press, London，Ν· Υ· (1965)中説明符合這些條件的熟知的保護基，以及彼等的引入及去除。以熟知的肽合成方法進行本發明化合物根據方法（a)的製備作用，其包含以式Π之胺與式III之酸或其官能基反應性衍生物的濃縮作用。在濃縮劑（如二環己基碳化二醯亞胺或N- ( 3-二甲胺基丙基）-N·-乙基碳化二醯亞胺及羥基苯幷三唑、1-羥基-7-氮雜苯幷三唑、氯基二甲氧基三嗪、六氟磷酸苯幷三唑-1-氧基叁（二甲胺基）燐（BOP試劑）或六氟0- ( 7-氮雜苯幷三唑-卜基）-Ν，Ν，Ν·，Ν·-四甲基脲陽離子（HATU)及三乙胺或N-甲基嗎啉）存在下的惰性極性溶劑中（如二甲基甲醯胺或二氯甲烷）有利於進行以式II之胺基酯與式III之自由羧酸根據方法（a)的濃縮作用，以在室溫下較佳。在鹼（例如，無機鹼（如碳酸鉀）或有機鹼（如三乙胺、N-甲基嗎啉或吡啶）存在下的惰性溶劑中（如甲苯或二氯甲烷）有利於進行式Π之胺基酯與具有醯基卣或混合的酐形 -27- 本紙張尺度適用中國國家榡準(CNs) A4規格(210 X 297公釐） 1295996 A7 --------— B7 五、發明説明（25 ) 式I式111之酸的反應性官能衍生物（以醯基氯較有利）的濃· 縮作用，以在室溫下較佳。式ΙΠ之羧酸的反應性官能衍生物係以醯基鹵（例如，醯基氯）及混合的酐（如特丁醯基或異丁氧基羰基酐）或活化醋（如苯弁三唑、7_氮雜苯幷三唑或六氟苯基酯）較佳。可以根據本文説明及在實例中例證的方法製備式Η之原式1之原料製備作用包含式νιπ之酯 alk-X-^ RNH——CH-COOR2 ( VII!) (其中alk、X、R&Rl具有如以上定義的意義及c〇〇r2代表酯化羧基（例如，其中R2係低碳烷基或苄基））與式Ιχ之適當的經N-保護之胺基酸（或反應性官能衍生物）

(IX) (其中R6及具有如以上定義的意義及係傾向胺基保護基，例如，特丁氧基羰基）的醯化作用，以獲得對應於式 II之經N-保護之化合物。以熟知的肽合成方法進行式VII化合物與式IX化合物的濃縮作用，例如，以上濃縮式II化合物與式HI化合物的說明。根據本技藝熟知的方法除去經N-保護之基，例如，無水酸（如三氟醋酸或HC1)除去特丁氧基羰基。 -28 - ^紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐) ' ___ 1295996 A7

a在本技藝中或已知各自的式νπι及ix化合物之胺基酯及酸原料，或可以根據本技藝熟知的方法（例如，或以本文例證的方法）製備如果是新的該原料。式VIII<胺基酸= 係以S-對映異構物較佳。曰已知式III之原料，或可以根據熟知的方法製備如果是新的該原料。例如，以對應的外消旋物或旋光活性…胺基酸製備原料’該製備係藉由將其轉化成α-胺基衍生物，接著以使用適當的式VII之硫赶衍生物在鹼性條件下的組態轉換的置換作用，例如，如1993年i月27日發表的歐洲專利申請案第524,553號的例證。以還原裂解作用進行所生成之最終產物的S-去苄基化作用，例如，以在乙醇中的瑞尼 (Raney)鎳。以例如以稀釋的水性氫氧化鈉的鹼催化之水解作用進行S-去苄基化作用。式ΙΠ之環系原料的製備可藉由以硫在強鹼（如二乙基醯胺鋰）的存在下處理環系羧酸（例如，環戊烷羧酸）。以類似於方法（a)的方式進行根據方法⑻的本發明化合物的製備作用，其包含以式…之酸與式V之胺基酸醋的濃縮作用。式IV之原料的製備同樣係藉由式in之酸與對應於式IX之經孿二取代之胺基酸的酯（Rs目前是氫）在類似於那些上述的條件下濃縮，接著除去羧基保護基。根據本技藝熟知的方法進行根據方法（c)的本發明化合物的製備作用，其包含以作爲其鹽的硫赶衍生物R3LSH置換在式VI化合物中的離棄基γ。以Y代表的反應性酯化羥基係以強無機酸或有機酸酯化 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

裝訂

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之經基。㈣的γ基特別是自基（例如，氯基、溴基或破. 基），也是磺醯氧基（如低碳烷基_)或芳基磺醯氧基（例如，（曱烷-、乙烷-、苯-或甲苯·）磺醯氧基），也是三氟曱基續酸氧基。在鹼存在下（如碳酸鉀、三乙胺、二異丙基乙胺、沁曱基嗎啉及類似物）的惰性溶劑中（如二甲基甲醯胺或二氣甲烷）及在室溫或上升的溫度下進行置換作用。在沒有鹼存在下的惰性落劑中（如四氫吡喻或二甲基甲醯胺）進行使用 R/SH的鹽（例如，硫代醋酸鉀）反應。式VI之原料的製備同樣可藉由以之二肽衍生物與式 X之酸 γ—~C〇0H (X)

- I (其中R4和R5及γ具有如以上定義的意義）在方法⑷所説明的條件下反應。已知及例如以1999年11月4日發表的國際專利申請案第 W0 99/55726號的説明製備式X化合物，其中γ係卣基，如 α-溴基羧酸。根據本技藝已知及本文例證的方法，以具有alk-X，侧缝之對應化合物（其中X，代表胺基、羥基、硫赶或適合的離棄基）製備具有alk-X-R!側鏈之本發明化合物及中間物，例如，那些式II、V及VI化合物。以絲胺酸、高絲胺酸、蘇胺酸、半胱胺酸及類似物（以旋光活性形式較佳）開始可以獲得式V之酸及酯。 -30-

A7 B7 1295996 五、發明説明（28 ) 根據本技藝熟知的通用反應，可將本發明的特定化合物-及中間物互相轉化。可將自由硫醇轉化成S-酿基衍生物’其係藉由與幾酸的反應性衍生物（對應於在式I中的R3係醯基）（如酸奸或酿基氯）在溶劑中（如乙腈或二氣甲烷）反應，以在鹼的存在下 (如三乙胺）較佳。可將自由醇及酚轉化成對應的醯基衍生物，例如，與對應的醯基氯在鹼的存在下（如三_乙胺）反應。可將其中&代表氫之自由硫醇氧化成對應的二硫化物，例如’以2氣氧化作用或使用在醇系溶液中的溫和氧化劑 (如碘）。反之，可將二硫化物還原成對應的硫醇，例如，以還原劑（如硼氫化鈉、鋅及醋酸或三丁膦）。根據本技藝熟知的方法，可以羧酸製備羧酸酯，其係藉由例如與對應於R^OH之鹵化物在鹼的存在下濃縮，或與過量醇在酸觸媒的存在下濃縮。可將羧酸酯及S-醯基衍生物以例如水性鹼（如鹼金屬碳酸鹽或氫氧化物）水解。可以選擇性除去孓醯基及酯基，如本文的例證。較佳的是及無論在任何可能之處，以純對映異構物製備本發明的式la較佳的異構物。在獲得立體異構物（例如，非對映異構物）的混合物之案例中可知這些以已知的步驟分離，如分餾蒸餾作用及色層分離法（例如，以薄層、管柱、閃蒸色層分離法）。可將外消旋自由酸解析成旋光相對物，其係藉由右旋-或左旋_ ^- 29 1295996 五、發明説明（， (CX-甲基芊胺、辛可尼丁、n皆 J尼丁辛可寧、奎寧、奎尼定、 deh—a祕ylamme、以繁驗或馬錢子驗）鹽及類似的分餾結晶作用。如果外消旋產物不是非對映異構物，則可將其先以旋光活性劑轉化成非對映異構物（如以旋光活性醇形成酉旨），接著將其以如上述的方式分離及例如水解成單獨的對映異構物。也可將外消旋產物以對掌性色層分離法解析，例如，使用對掌性吸收劑的高壓液相色層分離法；也可以酶解析作用解析，例如！以驗酶的醋解析作用。 ^根據標㈣方&，分別在有或沒有稀釋劑（以如對試劑無反應及其係該試劑的溶劑較佳）、觸媒、鹼或酸性濃縮劑或該其它試劑的存在下及/或惰性氣體下以低溫、室溫或上升的溫度（以接近所使用的溶劑沸點較佳）及大氣壓力或超大氣壓力下進行上述反應。本發明尚包括以上方法的任何變體，其中可將以本方法的任何階段可獲得的中間產物作爲原料使用，並在其任何階段進行任何其餘的步驟或終止本方法，或其中在反應條件下形成原料，或其中使用鹽形式或旋光性純相對物形式之反應組份。在該反應中大部份應該使用那些原料，以今丨起那些上述化合物的形成作用較佳。本發明另外係關於以本發明化合物及彼在醫藥上可接受之無毒的酸加成鹽或彼之醫藥組合物在哺乳類中作爲用於抑制ACE及NEP兩者，以及例如以或單獨或與一或多種有用於治療以下異常的其它試劑的組合預防或治療心血管異常（如高血壓、水腫、鹽留存及充血性心力衰竭）之藥劑。 32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1295996 A7 __B7 ___ 五、發明説明（30 ) 這些試劑可以是抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化症試劑、心— 臟試劑、利尿劑、抗糖尿病劑、降膽固醇劑及類似試劑。在使用與其它的治療劑組合時，則可將其單獨或以混合式組合物投藥。可以組合使用的治療劑的實例係血管收縮素II受體拮抗劑（如顯沙坦（valsartan)、羅沙坦（losartan)、坎狄沙坦 (candesartan)、艾波沙坦（eprosartan)、伊貝沙坦（irbesartan) 及替米沙坦（telmisartan))、阻斷劑（如披索洛爾 (bisoprolol)、普潘洛爾（propanolol)、阿替洛爾（atenolol)、索他洛爾（sotalol)及美托洛爾（metoprolol))、血管緊張肽原酶抑制劑、#5管道阻斷劑（如氨氣地平（amlodipine)、異搏停 (verapamil)、迪太贊（diltizaem)、爷普_地爾（bepridil)、非洛地平（felodipine)、依斯拉地平（isradipine)、尼卡地平 (nicardipine)、尼菲迪平（nifedipine)、尼莫地平（nimodipine) 及尼梭地平（nisoldipine))、酸甾酮合成酶抑制劑/臨甾酮拮抗劑（如依普利酮（eplerenone)、（+)-法屈峻（fadrozole) (W0 01/76574)、螺旋狀丙酯（spironolactone)及烯睾丙内酯 (canrenone))、利尿劑（如弗西邁（furosemide)、氫氯塞秦 (hydrochlorothiazide)、達帕胺（indapamide)、米它柔酮 (metazolone)、氨氯比咪（amiloride)及氨苯噪淀（triamterene)) 、後葉加壓素受體拮抗劑（如OPC 21268、SR 49059、 SR121463A、SR49059、VPA985、OPC31260 及 YM087))、強心藥（如依諾昔酮（enoximone)及左西孟旦（levosimendan))、内皮素拮抗劑及ECE抑制劑（如（波生坦bosentan)、 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1295996 A7 _B7_._ 五、發明説明（31 ) BMS 193884、TBC 3711 及在 W0 99/55726揭示的化合物）、抗動脈粥樣硬化症試劑，特別是降膽固醇劑（如膽汁酸萃取液（例如，消膽胺（cholestyramine)及降膽寧（colestipol))、膽固醇吸收抑制劑（如依沙替密伯（ezetimible))、（三）苯氧芳酸（fibrate)(如非語貝特（fenofibrate)及健菲布脂 (gemfibrozil) )、士它汀（statin)HMG CoA 還原酶抑制劑（如阿托發士它汀（atorvastatin)、氟發士它 ί丁（fluvastatin)、羅發士它汀（lovastatin)、普發士它丨丁（provastatin)、西姆發士它 ί丁 (simvastatin)及皮它發士它汀（pitavastatin))、煙酸衍生物、 thyromimetic試劑（如那些在美國專利申請案第5,569,674號及W0 00/58279所揭示的試劑）、也是抗糖尿病試劑（如瑞格列奈（repaglinide)、納提格列奈（nateglinide)、糖克能 (metformin)、羅格列酮（rosiglitazone)、匹格列酮 (pioglitazone)、優降糖（glyburide)、格列卩比嗪（glipizide)、格列美吡拉（glimepiride)、DPP 728、LAF 237、NH 622 及 DRF 4158) 〇本發明也關於以本發明化合物製備醫藥組合物之用途，尤其是具有ACE及NEP抑制活性及例如抗高血壓活性之醫藥組合物。根據本發明的醫藥組合物係那些適合於經腸（如口服或經直腸）、經皮膚及非經腸投予哺乳類（包括人類）的組合物，以治療心血管異常（如高血壓），該組合物包含有效劑量之本發明的藥理活性化合物或其在醫藥上可接受之鹽，以單獨或與一或多種在醫藥上可接受之載體組合及與其它 ___ -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1295996 A7 _ B7 五、發明説明（32~) "~"~ 也有用於治療如上述的心血管異常之治療劑組合投藥。本發明的藥理活性化合物有用於製造包含有效劑量之該化合物與適合於或經腸或非經腸施藥的賦形劑或載體結合或掺合之醫藥組合物。以包含活性成份與a)稀釋劑（例如，乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素及/ 或甘胺酸）、b)潤滑劑（例如，二氧化矽、滑石粉、硬脂酸、其鎂或鈣鹽及/或聚乙二醇）、就藥片而言，也與c)結合劑（包括梦酸鍰銘、殿粉糊、白明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、幾甲基纖維素鈉及/或聚乙晞環峨咬_)、若必要的 d)崩散劑（例如，澱粉、瓜膠、藻酸或其鈉鹽或起泡混合物）及若必要的吸收劑、著色劑、調味劑及甜味劑一起的藥片及明膠膠囊較佳。可注射之組合物係以等滲水溶液或懸浮液較佳，並以脂肪乳液或懸浮液製備栓劑較有利。可將該組合物消毒及/或包括佐劑，如保存劑、溶解劑、濕潤劑或懸浮劑、溶液促進劑、調節等滲壓之鹽類及/或缓衝液。此外，組合物也可以包括其它在治療上有價値的物質。分別根據熟知的混合、成粒或塗佈法製備該組合物，並包括約0.1-75%活性成份，以約1-50%較佳。適合於經皮膚施藥的调配物包括有效劑量之本發明化合物與載體。有利的載體包括可吸收之在藥理上可接受之溶劑’以支援經由宿主皮膚的通道。經皮膚投藥之設計以具有繃帶形式爲特徵，其包含背襯元件、包括化合物的儲液、視需要的載體、視需要的速度控制屏障（使化合物以控制及預定的速度經延長的時間期限輸送至宿主皮膚）及 -35-

1295996 A7 B7 五、發明説明（33 ) --—-- 將設計固定於皮膚的裝置。適合於約50-70公斤的哺乳類之單位劑量可以包括介於約10至200毫克活性成份。活性化合物的劑量係依據溫血動物的種類（哺乳類）、體重' 年齡及個人病況與投藥形式而定。希望由以下的實例例證本發明，並不是將其解釋成對本發明的限制。提供以攝氏度數之溫度。如果沒有另外其它的説明，則在減壓下進行所有的蒸發作用，以介於約15至 100耄米汞柱之間較佳。在室溫下以589毫微米（鈉的D線）或其它在實例中指定的波長測量旋光度（以度表示）。以標準的为析法確認化合物的結構，如以質譜法、元素分析、 NMR、IR光譜學及類似方法。使用附加的R及S指出在每一個不對稱中心的絕對組態。實例1 (a) N-[2-[(S)_2-乙酿硫基冬甲基丁酿基胺基卜2-甲基丙醯基卜0-芊基絲胺酸乙酯

將N- [ 2~ [ (R)-3-漠基_3_甲基丁酿基胺基]-2-甲基丙酿 -36- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 B7 基卜〇β卞基絲胺酸乙酯（4.96公克，10.5毫莫耳）溶解在四氯峨喃（100亳升）中，並加入硫代醋酸鉀（6.00公克， 52.5亳莫耳）將混合物在室溫下撗:掉4小時，接著以醋酸

乙酉日（500笔升）稀釋，並以水（100毫升）、碳酸氫鈉溶液 (2><1〇〇*升）、水（2x100毫升）及接著以食鹽水（50毫升）清洗將’合液經硫酸鈉乾燥及在眞空中濃縮。將粗物質以閃蒸色層分離法（矽膠，3:2之己烷/醋酸乙酯）純化，以產生標題化合物；熔點 55_57。〇 ; [a]2〇D _63 5<3(c=〇 99，CH3〇H); MS(M+H):467 〇原料的製備如下：將在乙醇（200毫升）中的〇-苄基-L-絲胺酸（9.75公克，. 5〇亳莫耳）之溶液以HC1氣體經8分鐘飽和。將混合物在室溫下禮掉隔夜及接著在眞空中濃縮。將固體以二乙醚清洗及以過濾收集，以產生成爲白色固體之〇_苄基·絲胺酸乙酯氫氯酸鹽。將二乙胺（1.52公克，15毫莫耳）加入在二氯甲烷（15〇亳升）中的BOC-a-甲基丙胺酸（3·〇5公克，15毫莫耳）、〇_苄基_ L-絲胺酸乙酯氫氣酸鹽（3.89公克，15毫莫耳）、1-乙基_3-(3-二甲胺基丙基）碳化二醯亞胺（EDCI，2 88公克，15亳莫耳）及1-羥基-7-氮雜苯弁三唑（H〇AT，2.04公克，15毫莫耳）之落液中。將混合物擺掉隔夜及接著在眞空中濃縮。將殘餘物再溶解在醋酸乙酯中，並以水、j當量 HC1、水及食鹽水清洗。將溶液經硫酸鈉乾燥及濃縮，以產生下式之N-[2-(BOC-胺基）-2-甲基丙醯基]_〇_芊基_L_ -37- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)

裝

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絲胺酸乙酯

將以上的胺基甲酸酯（6·12公克，15毫莫耳）溶解在二氯甲燒（200毛升）中，並在冰浴中驟冷。將溶液以體氣體經 10刀鐘飽和及接著在室溫下攪掉隔夜。將殘餘物濃縮。加裝氯甲烷及再丨辰縮殘餘物，以得到成爲泡沫狀之(孓胺基-2-甲基丙醯基·）_〇_芊基_L_絲胺酸乙酯氫氯酸鹽； MS(M+H):309 〇訂

將（）2 ✓臭基-3-甲基丁敗一異丙胺鹽（4.03公克，14毫莫耳）^乙基-3-(3-二曱胺基丙基）碳化二醯亞胺（EDCI， 2.70公克，14毫莫耳）及卜羥基氮雜苯幷三唑（h〇at， 1.90公克，14耄莫耳）加入在二氯甲烷（15〇毫升）中以上的胺氫氯酸鹽（4.90公克，14毫莫耳）之溶液中。將混合物在室溫下授掉隔夜及接著在眞空中濃縮。將殘餘物溶解在醋酸乙酯中，並以水、稀釋的碳酸氫鈉、水、i當量HU及接著以食鹽水清洗。將溶液經硫酸鈉乾燥及濃縮，以得到固體。將固體以閃蒸色層分離法(矽膠，2:ι之己烷，醋酸乙酯）純化，以得到下式iN_ [孓[(R)1溴基甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基卜芊基絲胺酸乙酯

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備如下：將B〇C心絲胺酸（7·80公克，38毫莫耳）在〇。〇下加入在 Ν，Ν·二甲基甲醯胺（6〇毫升）中的氯化鋼（在油中祕，⑽ Α克76笔莫耳）之懸浮液中。將混合物攪拌j小時及接著加入間-三氟曱基苄基氣（7 39公克，％毫莫耳）。允許混合物溫熱至室溫及攪拌隔夜。將混合物以水中止。加入醋酸乙酯，並將混合物以食鹽水清洗，經MgS〇4乾燥及濃縮，以得到黃色油，將其以閃蒸色層分離法（Si〇2，己烷/ 醋酸乙酯）純化，以得到澄清油。將殘餘物溶解在乙醇 (120笔升）中’將溶液冷卻至〇 I及以HC1氣體經5分鐘飽和。允許混合物溫熱至室溫及攪拌隔夜。將混合物濃縮，以得到0- (4-三氟甲基芊基）-L-絲胺酸乙酯氫氣酸鹽。 (g)成爲油之N- [ 2- [ (S)-2-乙醯硫基-3-曱基丁醯基胺基卜2-甲基丙醯基卜0-(4-氟芊基）-L-絲胺酸乙酯 -41- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 B7 五、發明説明（39

(h)成爲油之N-[2-[(S)_2_乙醯碜基冬甲基丁醯基胺基]_2_ 曱基丙醯基卜0- (4•氟苯基卜L_高絲胺酸乙酯

〇- ( 4-氟苯基）-L·高絲胺酸乙酯氫氯酸鹽原料的製備如下：將三苯膦（7.59公克，29毫莫耳）、對-氟酚（2.08公克， 18.6¾莫耳）及1，1·_偶氮雙（ν,Ν-二甲基甲醯胺）（3.2公克， 18·6毫莫耳）加入在四氫吡喃中的b〇C-L-高絲胺酸特丁酯 (3.2公克，11.6毫莫耳）之溶液中。將混合物攪拌隔夜，以食鹽水清洗，經MgSCU乾燥及除去溶劑，以得到橘色油。將油以閃蒸色層分離法（Si〇2，85%己院/ 15%醋酸乙酯）純 -42- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7

!295996 A7 B7 五、發明説明---- 原料的製備如下：將0-爷基-L-絲胺酸（10·0公克，513毫莫耳）、二碳酸二特丁醋（11.2公克，51·4毫莫耳）及1當量氫氧化鈉（103亳升’ 103愛莫耳）一起在100毫升二哼烷中及室溫下攪拌16 小時。將混合物在眞空中濃縮，以水處理，以6當量jjci 酸化成pH 1及以醋酸乙酯萃取。將有機層以水及接著以食鹽水清洗，並經無水硫酸鎂乾燥。將混合物過濾及在眞空中濃縮，以得到成爲油之BOC-Q—芊基-L_絲胺酸。將4- ( 2 _ 氯乙醯基）嗎啉（1.22公克，7.48毫莫耳）加入在5毫升N，N-二甲基曱醯胺·中的BOC-O-芊基絲胺酸（2.20公克，7.46 晕莫耳）、三乙胺（〇·75公克，7·43毫莫耳）及碘化鈉（o.u 公克’ 0·73毫莫耳）之溶液中，並將瀑合物在室溫下攪摔2 小時。將混合物以醋酸乙酯稀釋，以水及接著以食鹽水清洗，並經無水硫酸鎂乾燥。將混合物過濾及在眞空中濃縮，以得到黃色油。將油在以己烷：醋酸乙酯：甲醇 (35:60:5)之矽膠上經色層分離，以得到成爲無色油之b〇c_ Ο-苄基-L-絲胺酸嗎琳代羧基甲酯。將起泡的hci氣體經5 分鐘流經在二氯甲烷（50毫升）中的胺基甲酸酯（172公克’ 4·08毫莫耳）之溶液’並將混合物在室溫下檀掉3小時。將所得混合物在眞空中濃縮，以產生成爲泡沫狀之〇_ 芊基-L-絲胺酸嗎啉代羰基甲酯。 (k)如實例1⑴之化合物的説明方式製備及純化之N_ [孓 [(S)-2-乙醯硫基_3_甲基丁醯基胺基]甲基丙醯基卜〇_ 节基-L-絲胺酸二甲胺基談基甲酉旨 -44-

1295996 A7 B7 五、發明説明（42 )

(1)如實例1G)之化合物的說明方式製備及在以己烷、醋酸乙酯、甲醇（35:60:5)之碎膠上的色層分離法純化之忖_ [(S)-2-乙醯硫基_3_甲基丁醯基胺基]_2_甲基丙醯基卜〇_苄基絲胺二乙胺基複基甲酉旨

基]甲基丙醯基]-0-芊基-L·絲胺酸乙酯；[a]D_55 27 (c=1.084? CH3OH) -45- 1295996 A7 B7

1295996 A7 B7 五、發明説明（44 )

(D)-oc-溴基-α_ ( 4-四氫p比喃基卜醋酸原料的製備可以如下：將在35毫升水中的亞硝酸鈉（4 71公克，68.3毫莫耳）之溶液逐滴加入在35毫升水中的（D)-a-溴基-a- ( 4-四氫吡喃基）-甘胺酸（第 117 册 J· Am. Chem. _Soc.的第 9375-9376 頁 (1995) ) ( 7.05 公克，44.3 毫莫耳）及 48% HBr (水性）（7 0 毫升）之冷凍（0 °C )溶液中。在加完時，允許混合物溫熱至室溫及在室溫下攪拌3小時。將混合物以醋酸乙酯萃取，將有機層連續以水、5%水性硫代硫酸鈉及食鹽水清洗，接著經無水硫酸鎂乾燥。將混合物乾燥及在眞空中濃縮，以產生成爲固體之（D)-a-溴基-a- ( 4-四氫p比喃基）-醋酸。 (p) N- [ 2- [ (S)_2- [ ( 1，2,4-三唑基）乙醯硫基卜甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基]芊基-L-絲胺酸乙酯；熔點1〇6-1〇7 °C ; [a]D-61.46。（c=1.09，CH3OH) -47- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1295996

A7 B7 五、發明説明（45 )

(q) N- [ 2- [ (S)-2- [ ( 4-甲基哌畊幷）乙醯硫基]-3-甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基]-0-芊基-L-絲胺酸乙酯；熔點95-96 °C ； [a]D -48.5° (c=0.935? CH30H)

(r) N- [ 2- [ (S)-2-乙醯硫基-3-曱基丁醯基胺基]-2-乙基丙醯基]-0-芊基-L-絲胺酸乙酯；[cx]d-83.6°(c=1.07，CH3OH)

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

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以類似於實例i的方式製備及自甲基特丁醚/己烷再結晶標題化合物，熔點69-7TC。原料的製備如下：將起泡的HC1(氣體）以15分鐘流入在乙醇（2〇〇毫升）中的 BOC-S-苄基-L-半胱胺酸（9.33公克，30亳莫耳）之溶液中。將容器加蓋及在室溫下攪拌隔夜。在眞空中除去溶劑，並將殘餘物在二乙醚（150亳升）中攪摔L5小時，以產生成爲固體之S-苄基-L-半胱胺酸乙酯氫氣酸鹽。將在二氯甲燒（200毫升）中的s-芊基半胱胺酸乙酯氫氯酸鹽（7.98公克，2 9毫莫耳）、BOCw曱基丙胺酸（5.89 公克，29毫莫耳）、三乙胺（2·93公克，29毫莫耳）、〗_羥基苯并三唑（ΗΟΒΤ，3.92公克，29毫莫耳）及EDCI(5.57公克，29毫莫耳）之混合物在氬氣下及室溫下攪拌隔夜。將反應混合物蒸發至乾燥及將殘餘物溶解在醋酸乙酯（2〇〇毫升）中。將溶液以水（50毫升）、1當量HC1 ( 50毫升）、水 (50毫升）、5%碳酸氫鈉（50毫升）、水（50毫升）及最後以食鹽水（25毫升）清洗。接著將溶液經硫酸鋼乾燥，過滤及蒸發至乾燥，以得到N- [ 2- ( BOC-胺基）-2-甲基丙醯基]-S-卞基-L-半脱胺酸乙醋。實例3 N- [ 2- [ (S)-2-乙醯硫基-3-甲基丁醯基胺基]-2-曱基丙醯基]-(S)-2-胺基-3-(苄基磺醯基）-丙酸乙酯 -51- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X297公釐) 1295996 A7 B7

五、發明説明（49 )

以類似於實例1的方式製備以上化合物。原料的製備如下·· 將間-氯基過苯甲酸（8·77公克，51毫莫耳）在氬氣下加入在二氯甲烷（250亳升）中的ν· [ 2- ( BOC-胺基）-2-甲基丙醯基卜S-苄基_L-半胱胺酸乙酯（7 21公克，17毫莫耳）之溶液中，並將混合物在室溫下攪捽隔夜。將混合物蒸發至乾燥及將殘餘物溶解在醋酸乙酯（300毫升）中。將溶液以5 % 碳酸氫鈉（3x50毫升）、水（50毫升）及食鹽水（25亳升）清洗。將溶液經硫酸鈉乾燥，過濾及在眞空中蒸發，以得到 N_ [ 2- (BOC-胺基）-2-甲基丙醯基]_(S)-2-胺基-3-(苄基磺醯基）-丙酸乙醋。實例4 (a) N2- [ 2- [ (S)-2-乙醯硫基-3-甲基丁醯基胺基卜2-甲基丙醯基]-(S)-2-胺基-3-(苯醯基胺基）-丙酸甲酯 -52- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

裝 1295996 A7 _______B7 五、發明説明（5〇 )

將在二氣甲烷（10毫升）中的苯醯氯（0.085毫升，〇·73毫

莫耳）、N2-[2-[(S)-2-乙酿硫基-3、-甲基丁酿基胺基]-2-甲基丙酿基]-(S)-2,3-二胺基丙酸甲酯氫氣酸鹽（0.29公克，on 毫莫耳）及三乙胺（0·15亳升，ι·49毫莫耳）之混合物在室溫裝下檀拌16小時。將反應混合物在眞空中蒸發至乾燥，將殘餘物溶解在醋酸乙酯中，並將溶液以水、接著以碳酸氫鈉飽和溶液及食鹽水清洗，經無水硫酸鎂乾燥及蒸發至乾訂

燥’以得到油。將油在以己烷及醋酸乙酯（50:50)之矽膠上經色層分離，以產生成爲白泡沫狀之標題化合物；熔點 48-54 〇C 〇 (b)以類似方式製備之N2- [ 2· [ (S)-2-乙醯硫基_3-曱基丁龜基胺基卜2-甲基丙醯基]-(S)-2-胺基-3-(苯磺醯胺基）丙酸甲酯；熔點47-51 〇C ; [a]D20 -41.72 (c=：L〇3，CH3OH) 原料的製備如下：將在二氯甲烷（50毫升）中的（S)-2-胺基-3- ( BOC-胺基）丙酸甲酯氫氯酸鹽（4·6公克，2·1毫莫耳）、N-CBZ-a-曱基丙胺酸（5·0公克，2.1毫莫耳）、ΗΟΑΤ(2·87公克，2.1毫莫耳）、EDCI(4.02公克，2.1毫莫耳）及三乙胺（2.93公克， __ -53- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1295996 A7 B7 五、發明説明（51 ) — 一—-- 2.1毫莫耳）之混合物在室溫下攪摔“小時。將反應混合物以食鹽水清洗，經無水硫酸鎂乾燥及在眞空中濃縮。將所得油在以己烷及醋酸乙酯（1:1)之矽膠上經色層分離，以產生成爲白泡沫狀之N1 2_[2_(CBZ_胺基）_2甲基丙醯基卜⑻_ 2-胺基_3-(B0C_胺基）丙酸甲酯；熔點1〇〇-1〇1。〔。將在乙轉（5〇毫升）中的以上產物（2.14公克，4.90毫莫耳）及在木炭上的1〇%鈀（0·27公克）之混合物在45磅/平芳英吋壓力下的帕爾瓶中以4小時氫化。將混合物經由c鹽墊過濾及在眞空中濃縮，以得到成爲油之ν2_[2·胺基_2_甲基丙醯基]_(S)-2-胺基-3- ( BOC-胺基）丙酸甲酯氫氣酸鹽。將在二氯甲燒（75毫升）中的以上產物（2.28公克，8.09毫莫耳）、（R)-2-溴基-3-甲基丁酸二異丙胺鹽（2 16公克， 7.13毫莫耳）、edcjo 43公克，7 49毫莫耳）及η〇ατ(1·15 公克’ 8·52亳莫耳）之溶液在室溫下攪掉16小時。將反應混合物在眞空中蒸發至乾燥及將殘餘物以醋酸乙酯處理。將醋酸乙酯溶液以水、碳酸氫鈉飽和溶液及食鹽水清洗，並接著經無水硫酸鎂乾燥及在眞空中濃縮。將所得油在以己烷及醋酸乙酯（40:60)之矽膠上經色層分離，以得到成爲白泡沫狀之Ν2- [ 2- [ (R)-2-溴基-3·甲基丁醯基胺基]_2_甲基丙醯基]-(S)-2-胺基-3-(BOC_胺基）丙酸甲酯。將在四氫吡喃（50毫升）中的以上產物（131公克，2 82毫莫耳）及硫代醋酸鉀（1.28公克，η·2毫莫耳）之混合物在室溫下攪摔4小時，並以醋酸乙酯稀釋。將混合物以水、竣酸氫鈉飽和溶液及食鹽水清洗，接著經硫酸鎂乾燥。將反 1 -54- 2 ^紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公董） " ^---- 1295996 A7 ~-------___B7 五、發明説明（52 ) '-- 應混合物在眞空中濃縮至乾燥，並將所得油在以己虎及醋酸乙g曰（40.60)之矽膠上經色層分離，以得到ν· [ 2_ [⑻·2_ 乙醯硫基-3-甲基丁醯基胺基卜2_甲基丙醯基] <幻_2•胺基_ 3-(BOC·胺基）丙酸甲酯。將起泡的氫氯酸氣體以約5分鐘流經在5〇毫升二氯甲烷中的以上化合物（1·01公克，2 19毫莫耳）之溶液，並將混合物在1：溫下攪摔3小時，接著在眞空濃縮，以產生ν2_ [2-[(S)-2·乙醯硫基-弘甲基丁醯奉胺基卜2_甲基丙醯基卜(s)_ 2,3-二甲基丙酸甲酯氫氣酸鹽。實例5 將三乙胺（0.48毫升，3.42毫莫耳）加入在二氯甲烷中的1- [ (R)-2-溴基-3-甲基丁醯基胺基]環戊烷羧酸（〗公克， 3.42毫莫耳）、〇-芊基絲胺酸乙酯氫氣酸鹽（0.89公克， 3.42毫莫耳）、二環己基碳化二醯亞胺（〇7公克，3·42毫莫耳）及1-羥基-7-氮雜苯幷三唑（〇·47公克，3.42毫莫耳）之溶液中。將混合物攪拌2 4小時，並接著以食鹽水清洗及在眞空中濃縮，以得到淺黃色油。將殘餘物以閃蒸色層分離法（矽膠，己烷/醋酸乙酯）純化，以得到下式之Ν-[卜[(R)_ 2-溴基-3-甲基丁醯基胺基卜環戊烷羰基卜〇_芊基絲胺酸乙酯 -55 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公 1295996 A7 B7 五、發明説明（53

將溴基化合物（0.7公克，1.41毫莫耳）溶解在四氫吡喃 (50毫升）中，並加入硫代醋酸鉀（〇 19公克，i 69毫莫耳）。將混合物在室溫下攪拌18小時及接著以醋酸乙酯稀釋，並以食鹽水清洗，經硫酸鎂乾燥及在眞空中濃縮，以得到黃色油。將粗物質以閃蒸色層分離法（矽膠，己烷/醋酸乙酯）純化，以得到半固體，將其以己烷濕磨，以產生下式之N- [ 1- [ (S)-2-乙酿硫基-3-甲基丁醯基胺基卜環戊燒羰基]-0-苄基-L·絲胺酸乙酯

基本上以WO 99/55726説明的方法製備u [ (κ)-2_溴基冬甲基丁醯基胺基]-環戊烷羧酸原料，其係藉由（R)_2_溴基· 甲基丁故一異丙胺鹽（以L-顯胺私製得的）與環亮胺酸甲酯氫氯酸鹽的濃縮作用。 -56- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 . B7 五、發明説明（54 實例6 (a) N- [2- [ (S)-2_黢基·3·甲基丁醯基胺基甲基丙醯基]· 0-苄基-L-絲胺酸

將1當量氫氧化鈉（5 〇毫升，5毫莫耳）加入在甲醇（1〇毫升）中的實例1之S-乙醯基乙酯（〇 47公克，1毫莫耳）之溶液中。將混合物在室溫下攪拌4小時，以1當量HC1酸化成 pH 1及接著在眞空中濃縮。將醋酸乙酯加入殘餘物中。將混合物以1當量Na〇H清洗。接著將合併的水相酸化及以醋酸乙酯萃取。將有機相以食鹽水清洗，經硫酸鈉乾燥及接著在眞空中濃縮。以己烷濕磨，以產生白泡沫；熔點π-ΤΟΌ ; [a]D2()-16.8°(c气〇32，DMS〇) ; MS(M+H):397 。以同樣方式製備以下： (b) N-[ 1-[ (S)-2·巯基_3_曱基丁醯基胺基卜環戊烷羰基卜〇_ 卞基絲胺酸；熔點132-136°C(自己烷/特丁基甲醚結晶）本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 B7

1295996 A7 B7 五、發明説明（56 ) (e) N- [ 2- [ (S)-2-鲩基-3,3·二甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基]-0-苄基-L-絲胺酸；熔點 128-130 X： ; [oc]d-2.46(c=1.06, DMS0)

(f) N- [ 2- [ (S)-2-巯基-3-甲基丁醯基胺基]-2-曱基丙醯基]-0-（ 4 -氣卞基）*"L_絲胺;溶點50-54 C

(g) N- [ 2- [ (S)-2-巯基-3-甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基]-〇-(4-氟苯基）-L-高絲胺酸；熔點127-128°C -59- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1295996 A7 B7

1295996 A7 B7 五、發明説明（58 ) 基丙醯基]-0-芊基-L_絲胺酸；熔點184-189 1; [〇〇1)2()-24.94 (c=l.013, DMS0)

實例7 (a) N- [ 2- [ (S)-2-巯基-3-甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙醯基]-S-芊基_L-半胱胺酸乙酯

在氬氣下，將實例2之硫代乙醯基化合物（0.48公克， 1·〇毫莫耳）溶解在絕對EtOH(5毫升）中，並以1當量 NaOH( 1.0毫升，1.0毫莫耳）處理。將混合物在室溫下攪拌 4小時，然後以1當量HC1處理，直到pH 3爲止。將混合物蒸發，以除去大部份EtOH，並將水殘餘物以EtOAc(2xlO 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1295996 A7 -___ ______B7 __ 五、發明説明（59 ) 亳升）萃取。將合併的萃取液以H20 ( 5毫升）及接著以食鹽-水溶液（5毫升）清洗。將溶液經Na2s〇4乾燥，過濾及在眞空中濃縮。自特丁基甲醚/己烷固化產物，以得到產物；熔點 87-91 °C。 (b)以同樣方式製備N-[2-[(S)-2-鐃基-2·(4_四氫吡喃基）乙醯基胺基]-2-甲基丙酿基卜〇-苄基絲胺酸乙酯；熔點85_ 93 °C ； [a]D-37.21°(c=1.012, DMS0)

⑷以同樣方式製備N- [2- [ (S)-2-巯基_3,3-二甲基丁醯基胺基]-2-甲基丙酿基]爷基絲胺酸乙醋；油；[〇c]D -20 9。 (c=1.025, DMS0)

-62- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1295996 A7 B7

Claims

I29韻辦10028號專利申請案中文申請專利範圍替換本(96年6月) 六、申請專利範園 1. 一種式（I)化合物R. 〇

公告本 Η Γ Re C· alk-X-^ ?-〇~N—CH—0001¾k R ⑴ 其中 R代表氫或C1-7烷基；心代表聯芳基、單環碳環系芳基或單環雜環系芳基；或R!代表（單環-或雙環_)碳環系芳基· c i 7烷基、 (單環-或雙環-)雜環系芳基-Cl.7烷基或聯芳基_Ci_7 烧基， R2代表氫、C i _ 7烷基、經取代之c丨_ 7烷基或二^ 1 1-7 烧基胺基； R3代表C ! · 7烷醯基或經取代之C i · 7烷醯基； R4及R5獨立為氫、氮雜環烷基、c〗_7烷基或經取代之Ci-7烷基，其中視需要心及尺5和與彼附著之碳原子一起代表亞環烷基； R0及R7獨立為C〗-7烧基或環院基，其中視需要心及 R7和與彼附著之碳原子一起代表5-至6 -員亞環燒基； alk代表伸烷基；及 X 代表-0-、-S-、-S(0)2-或-NHCO-; 或其醫藥上可接受鹽。 2·根據申凊專利範圍第1項之化合物，其具有如下化學式·· 77906-960608.DOC 1295996 申請專利範園 (la) -C- 〇 |ik-x.Rl • c—|jj 一 CH —COORj R 或其在醫藥上可接受之鹽類。 3·根據申請專利範圍第i項之化合物，其中汉及心代表氫；Rl代表單環碳環系芳基、單環雜環系芳基或（單環碳環系或單環雜環系芳基）_Ci_7烷基；说代表I?伸烷基；X代表-〇-、1或_8〇2_; Rs代表Ci 7烷醢基;& 代表氫、Cl_7烷基、經取代之Cle7烷基或氧雜環烷基；R5代表氫；其中視需要R4及R5與彼附著之碳原子代表Cr或C6·亞環烷基，· R0及R7代表c〗_ 7烷基；其中視需要R6及R7和與彼附著之碳原子一起代表5_或6_員亞環烷基，· &代表氫、C丨·7烷基、經取代之c卜7院基或 Cl·7烧基胺基；或其在醫藥上可接受之鹽類。 4.根據申凊專利範圍第2項之化合物，其中r及代表氫，R!代表單環碳環系芳基、單環雜環系芳基或（單環碳環系或單環雜環系芳基）-C i · 7烷基；alk代表c ! _ 7伸烷基；X代表_〇_、s^_s〇2_ ; r3代表Cl 7烷醯基； R4代表氫、C ! _7烷基、經取代之c 1巧烷基或氧雜環烷基，R5代表虱，其中視需要R4及只5與彼附著之碳原子代表C5·或CV亞環烧基；及r7代表c〗_ 7烧基；其中視需要R0及R7和與彼附著之碳原子一起代表5-或6-員亞環炫基，· R2代表氫、C ! · 7烧基、經取代c i _ 7烧基或 -2- 77906-960608.DOC 本紙張尺度適用中國國家檬準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 8 8 8 8 ABCD 1295996 六、申請專利範園二- Ci_7烷基胺基；或其在醫藥上可接受之鹽類。 5·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R及代表氫；心代表苯基，其視需要可以1或2個羥基、Ci 7烷醯氧基、烷基、Cl·7烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基或齒基取代；I代表C 1 · 7烷醯基；&代表‘四氫南基或CVC4·烧基；^及化代表甲基；X代表_〇_ ; alk代表伸甲基或伸乙基；及化代表氫或Ci_C4_烷基；或其在醫藥上可接受之鹽。 6.根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R及&代表氫；心代表苯基，其視需要可以丨或之個羥基、Ci_7烷醯氧基、Cb?烷基、Cm烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基或自基取代；A代表C i · 7烷醯基；&代表心四氫吡喃基或CK(V烷基；R6及R7代表甲基；X代表; alk代表伸甲基或伸乙基；及1代表氫或Ci_C4_烷基；或其在醫藥上可接受之鹽。 7·根據申請專利範圍第i項之化合物，其中R及&代表氫，Rl代表苯基、氟苯基、芊基或氟苄基；R3代表 C^·7烧酿基或以Cl_7烷氧基取代之烷醯基；心代表異丙基、特丁基、1-甲氧基乙基或4_四氫吡喃基； R6及R7代表甲基；X代表-0- ; alk代表伸甲基；及 C00R2代表羧基或Cl j烷氧基羰基；或其在醫藥上可接受之鹽。 8·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R及心代表氫；Ri代表苯基、氟苯基、苄基或氟苄基；R3代表 Cu烷醯基或以Cl·7烷氧基取代之Ci-7烷醯基；&代 77906-960608.DOC 本紙張尺度適财S S家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) ' ----- 1295996

表異丙基、特丁基、^甲氧基乙基或4-四氫吡喃基； &及R?代表曱基；X代表; alk代表伸曱基；及 COOK代表羧基或Clj烷氧基羰基；或其在醫藥上可接受之鹽。 9.根據中請專㈣圍第1G項之化合物，其中代表氫；，代表字基；R3代表乙酿基或曱氧基乙醯基；I 代表異丙基或特丁基；R6AR7代表甲基；x代表_0_; 必代表伸甲基；及⑶叫代表絲或乙氧基数基；或其在醫藥上可接受之鹽。 10·種如申咁專利範圍第1項化合物之用途，其係製備在哺乳類中抑制血管收縮素轉化酶及中性肌鍵内切酶之藥物。 11· 一種如申請專利範圍第！ #人 … T孕固弟1項化合物之用途，其係製備在哺乳類中治療心血管異常之藥物。 12_根據申請專利範圍第1 〇項步貝之用途，係供治療高血壓或充血性心衰竭。 13· —種在哺乳類中抑制血瞢你給丨市』&收細素轉化酶及中性肌鏈内切酶之醫藥組合物，j：包合右八匕3有戏劑量之根據申請專利範圍第1項之化合物與一哎吝插— π” $夕種在醫藥上可接受之载體的組合。 77906-960608.DOC . _ ·4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X297公誉了 -；----