TW202400656A

TW202400656A - 使用ctla-4及pd-1雙特異性抗體之治療方法

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Publication number: TW202400656A
Application number: TW112108310A
Authority: TW
Inventors: 謝爾比蓋尼爾; 迪帕蘇巴馬尼亞; 丹尼爾Ｊ弗里曼; 宋緒陽; 伊克貝爾亞屈爾; 查爾斯費特
Original assignee: 美商麥迪紐有限責任公司
Priority date: 2022-03-07
Filing date: 2023-03-07
Publication date: 2024-01-01
Also published as: WO2023170549A1; AU2023231766A1; US20230322928A1; IL315307A; KR20240153603A

Abstract

本發明提供向有需要的個體，例如患有癌症的個體投與特異性結合至人類計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體及其抗原結合片段的方法。

Description

使用CTLA-4及PD-1雙特異性抗體之治療方法

本發明大體上關於使用特異性結合至人類計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體及其抗原結合片段用於治療癌症(例如，腎細胞癌及非小細胞肺癌)的方法。

癌症持續為一種嚴重的全球健康負擔。儘管癌症治療取得進展，但對更有效及毒性較低的療法依然存在未滿足的醫學需求，尤其對於患有對現有療法具有抗性之晚期疾病或癌症的彼等患者而言。

免疫系統，尤其T細胞介導之細胞毒性在腫瘤控制中的作用已為所熟知。存在大量證據表明T細胞在癌症患者中在疾病之早期及晚期階段皆控制腫瘤之生長及存活。然而，難以在癌症患者中發起並維持腫瘤特異性T細胞反應。與利用非特異性化學治療劑及/或輻射之治療相比，刺激或增強針對癌症之先天性免疫反應的癌症免疫療法不斷進步及成功，使得該等治療劑成為有吸引力的治療選擇。

已鑑定出許多分子目標作為針對癌症的免疫腫瘤學(IO)治療劑的潛在效用。正在研究一些分子目標在免疫腫瘤學治療領域中的治療潛力，該等分子目標包括細胞毒性T淋巴球抗原-4 (CTLA-4或CD152)、計劃性死亡配位體1 (PD-L1或B7-H1或CD274)、計劃性死亡-1 (PD-1)、OX40 (CD134或TNFRSF4)及T細胞抑制性受體T細胞免疫球蛋白及含黏蛋白域-3 (TIM3)。雖然一些此等目標已成功地用於治療(例如，PD-1及CTLA-4)，但許多患者對已開發出的治療劑無反應。而且，雖然可以考慮包括較高劑量及/或免疫療法組合的治療方案，但該等療法可能與副作用風險增加相關，該等副作用往往隨著更高的劑量及累積的暴露而增加，且當與組合免疫療法一起使用時似乎係累加性的。一些常見副作用包括垂體炎、甲狀腺炎、腎上腺機能不足、小腸結腸炎、皮炎、肺炎、肝炎、胰臟炎、運動及感覺神經病變及關節炎。此外，由於免疫治療劑通常與高成本相關，所以包括免疫治療劑組合之療法對患者來說費用過高。

因此，仍需繼續鑑定IO治療劑的候選目標，開發針對現有目標的新治療劑，及開發避免當前使用中的免疫療法之缺點的治療策略，該等缺點包括缺乏患者反應及與組合治療有關之副作用的風險增加。對目標分子之組合為雙特異性的IO治療劑(例如，結合蛋白)，尤其當與對個別單特異性結合蛋白之組合的結合親和力相比時對目標分子表現出更大的結合親和力之彼等，代表一類尤其需要的有治療潛力的分子。

在一些態樣中，本文揭示一種治療個體之腎細胞癌(RCC)的方法，該方法包含向個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，本文揭示一種治療個體之腎細胞癌(RCC)的方法，該方法包含向個體投與約2.25 mg至約2500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，該等方法包含投與約500 mg或約750 mg的雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，該等方法進一步包含投與一或多種酪胺酸激酶抑制劑。

在一些態樣中，該等方法進一步包含投與酪胺酸激酶抑制劑阿昔替尼(axitinib)或樂伐替尼(lenvatinib)。

在一些態樣中，在投與雙特異性抗體或其抗原結合片段之前，自第-7天至第-1天，以5 mg之劑量每日兩次經口投與阿昔替尼。

在一些態樣中，在第1天投與雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每個治療週期投與一次。

在一些態樣中，治療週期為三週。

在一些態樣中，該等方法進一步包含該雙特異性抗體或其抗原結合片段及/或一或多個劑量之化學治療劑之維持給藥。

在一些態樣中，本文揭示一種治療個體之非小細胞肺癌(NSCLC)的方法，該方法包含向該個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，本文揭示一種治療個體之非小細胞肺癌(NSCLC)的方法，該方法包含向個體投與約2.25 mg至約2500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，本文揭示一種抑制個體之非小細胞肺腫瘤生長的方法，該方法包含向個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，本文揭示一種抑制個體之非小細胞肺腫瘤生長的方法，該方法包含向個體投與約2.25 mg至約2500 mg的特異性結合計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，該方法包含投與約500 mg或約750 mg的雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，該雙特異性抗體或其抗原結合片段每個治療週期投與一次。

在一些態樣中，治療週期為三週。

在一些態樣中，該方法包含投與一或多種化學治療劑。

在一些態樣中，NSCLC或非小細胞肺腫瘤為非鱗狀細胞肺癌。

在一些態樣中，NSCLC或非小細胞肺腫瘤為鱗狀細胞肺癌。

在一些態樣中，一或多種化學治療劑選自由卡鉑(carboplatin)、培美曲塞(pemetrexed)及其組合組成之群。

在一些態樣中，一或多種化學治療劑為卡鉑及培美曲塞。在一些態樣中，NSCLC或非小細胞肺腫瘤為非鱗狀細胞肺癌且一或多種化學治療劑為卡鉑及培美曲塞。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每三週投與，且卡鉑以AUC 6 mg/mL⋅min或AUC 5 mg/mL⋅min之劑量每三週投與。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段以約2000 mg之劑量投與，卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與。

在一些態樣中，每三週，雙特異性抗體或其抗原結合片段以約1500 mg之劑量投與，卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與，其中卡鉑投與4次劑量，之後係每三週該雙特異性抗體或其抗原結合片段及每三週培美曲塞之維持給藥。

在一些態樣中，每三週，雙特異性抗體或其抗原結合片段以約500 mg或約750 mg之劑量投與，卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與，其中卡鉑投與4次劑量，之後係每三週雙特異性抗體或其抗原結合片段之維持給藥及每三週培美曲塞之維持給藥。

在一些態樣中，一或多種化學治療劑選自由卡鉑、紫杉醇(paclitaxel)、奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇(Nab-paclitaxel)及其組合組成之群。

在一些態樣中，一或多種化學治療劑為卡鉑及紫杉醇。

在一些態樣中，一或多種化學治療劑為卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇。在一些態樣中，NSCLC或非小細胞肺腫瘤為鱗狀細胞肺癌且一或多種化學治療劑為卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，卡鉑每三週以AUC 6 mg/mL⋅min之劑量投與且紫杉醇每三週以200 mg/m ²之劑量投與。在一些態樣中，卡鉑及紫杉醇投與4次劑量。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，卡鉑每三週以AUC 6 mg/mL⋅min之劑量投與，且奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇在各3週週期之第1、8及15天以100 mg/m ²體表面積(BSA)之劑量投與。在一些態樣中，卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與4次劑量。

在一些態樣中，該方法進一步包含該雙特異性抗體或其抗原結合片段及/或該一或多種化學治療劑之維持給藥。

在一些態樣中，個體為人。

在一些態樣中，個體有晚期實體腫瘤。

在一些態樣中，投藥引起目標病變消失及/或總數減少。

在一些態樣中，目標病變消失及/或總數減少係藉由分析腫瘤活體組織切片樣品所確定。

在一些態樣中，樣品為新鮮樣品或福馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品。

在一些態樣中，樣品係藉由以下方法分析：RT-PCR、原位雜交、核糖核酸酶保護、基於RT-PCR之分析法、免疫組織化學(IHC)、酶聯免疫吸附分析法、活體內成像或流式細胞分析技術。

在一些態樣中，雙特異性抗體結合至食蟹獼猴PD-1及CTLA-4。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段結合至人類PD-1及CTLA-4。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段為人源化雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段係單價的。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段為DuetMab。

在一些態樣中，雙特異性抗體或抗原結合片段包含IgG重鏈恆定區。

在一些態樣中，恆定區包括L234F、L235E及P331S處之突變。

在一些態樣中，恆定區包含杵突變及臼突變，視情況其中杵突變在包含結合至CTLA-4的可變區的重鏈中，及臼突變在包含結合至PD-1的可變區的重鏈中。

在一些態樣中，IgG重鏈恆定區為IgG1重鏈恆定區。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段包含MEDI5752序列之抗PD-1及抗CTLA-4重鏈可變區(VH) CDR1、VH CDR2、VH CDR3、輕鏈可變區(VL) CDR1、VL CDR2及VL CDR3。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段包含：(a)包含SEQ ID NO:8之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:9之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列之VL CDR3；及(b)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之VL CDR3。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段為全長抗體。

在一些態樣中，雙特異性抗體為MEDI5752。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段為抗原結合片段。

在一些態樣中，抗原結合片段包含Fab、Fab'、F(ab')2、單鏈Fv(scFv)、二硫鍵連接之Fv、V-NAR域、IgNar、胞內抗體、雙特異性胞內抗體、IgGΔCH2、微型抗體、F(ab')3、四功能抗體、三功能抗體、雙功能抗體、單域抗體、DVD-Ig、Fcab、mAb2、(scFv)2或scFv-Fc。

在一些態樣中，本文提供一種治療個體之晚期腎細胞癌的方法，該方法包含每三週向該個體投與約750 mg的雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。

在一些態樣中，本文提供一種治療個體之晚期腎細胞癌的方法，該方法包含每三週向該個體投與約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。

在一些態樣中，本文提供一種治療個體之非小細胞肺癌的方法，該方法包含向個體投與(1)每三週約750 mg或約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈；(2)每三週劑量為AUC 5 mg/mL⋅min的卡鉑，持續4個週期；及(3)每三週劑量為500 mg/m ²的培美曲塞，持續週期，之後係雙特異性抗體及培美曲塞之維持給藥。

在一些態樣中，本文提供一種治療個體之非小細胞肺癌的方法，該方法包含向該個體投與：(1)每三週約750 mg或約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(2)每三週劑量為AUC 6 mg/mL⋅min的卡鉑；及(3)每三週劑量為200 mg/m ²的紫杉醇，或(4)在每三週週期之第1、8及15天，劑量為100 mg/m ²體表面積(BSA)之奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇，持續4個週期，及(5)該雙特異性抗體之維持給藥。

在一些態樣中，非小細胞肺癌及/或腎細胞癌包含約≥50%的表現PD-L1的腫瘤細胞。在一些態樣中，非小細胞肺癌及/或腎細胞癌包含約1至49%的表現PD-L1的腫瘤細胞。在一些態樣中，非小細胞肺癌及/或腎細胞癌包含約＜1%的表現PD-L1的腫瘤細胞。在一些態樣中，非小細胞肺癌及/或腎細胞癌包含約0%的表現PD-L1的腫瘤細胞。

在一些態樣中，本發明亦提供一種在有需要的個體中擴增T細胞的方法，其包含投與特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段，該抗體包含：(a)包含SEQ ID NO:8之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:9之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列之VL CDR3；及(b)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之VL CDR3。在一些態樣中，雙特異性抗體包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。在一些態樣中，雙特異性抗體以約225 mg至約1,500 mg之劑量投與。在一些態樣中，雙特異性抗體以約750 mg Q3W之劑量投與。在一些態樣中，每三週投與雙特異性抗體。在一些態樣中，個體患有非小細胞肺癌或腎細胞癌。在一些態樣中，新擴增的T細胞系之比例與投藥前的T細胞系數目相比高約50%、約60%、約70%或約75%。在一些態樣中，雙特異性抗體為MEDI5752。

相關申請之交叉引用本申請案主張2022年3月7日申請的美國臨時申請案第63/317,200號、2022年6月1日申請的美國臨時申請案第63/347,748號及2022年9月7日申請的美國臨時申請案第63/374,815號的優先權，其各者以引用之方式併入本文中。序列表之引用本申請案中提交的電子提交序列表(名稱：PDCT-200-WO-PCT.xml，大小：26.6 KB，及創建日期：2023年3月3日)之內容以全文引用之方式併入本文中。

為了使本發明可更易於理解，首先定義某些術語。如本申請案中所用，除非本文中另外明確提供，否則以下術語中之各者應具有以下闡述之含義。額外的定義在整個申請案中均有闡述。 5.1 定義

為了使本發明可更易於理解，首先定義某些術語。如本申請案中所用，除非本文中另外明確提供，否則以下術語中之各者應具有以下闡述之含義。額外的定義在整個申請案中均有闡述。

術語「抗體」意謂經由免疫球蛋白分子可變區內之至少一個抗原識別位點識別且特異性結合於目標(諸如蛋白質、多肽、肽、碳水化合物、聚核苷酸、脂質或上述各者之組合)的免疫球蛋白分子。如本文中所使用，術語「抗體」涵蓋完整多株抗體、完整單株抗體、嵌合抗體、人源化抗體、人類抗體、包含抗體之融合蛋白及任何其他經修飾之免疫球蛋白分子，只要抗體展現所需生物活性即可。抗體可為五大類免疫球蛋白中之任何一類：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，或其子類(同型)(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)，基於其重鏈恆定域之屬性分別稱為α (alpha)、δ (dalta)、ε (epsilon)、γ (gamma)及μ (mu)。不同類別的免疫球蛋白具有不同的且眾所周知的次單元結構及三維組態。抗體可為裸露的或與其他分子(諸如毒素，放射同位素等)結合。

當未明確說明時，及除非上下文另外指示，術語「抗體」包括單特異性、雙特異性或多特異性抗體，以及單鏈抗體。在一些態樣中，抗體為雙特異性抗體。術語「雙特異性抗體」係指結合至兩個不同抗原決定基之抗體。抗原決定基可在相同目標抗原上或可在不同目標抗原上。

術語「抗體片段」係指完整抗體之一部分。「抗原結合片段」、「抗原結合域」或「抗原結合區」係指結合至抗原之完整抗體的一部分。在雙特異性抗體之情形下，「抗原結合片段」結合兩種抗原。抗原結合片段可含有完整抗體之抗原識別位點(例如，足以特異性結合抗原之互補決定區(CDR))。抗體之抗原結合片段之實例包括(但不限於) Fab、Fab'、F(ab')2及Fv片段、線性抗體及單鏈抗體。抗體之抗原結合片段可衍生自任何動物物種，諸如嚙齒動物(例如小鼠、大鼠或倉鼠)及人類，或可人工產生。

「單株」抗體或其抗原結合片段係指參與單一抗原決定子或抗原決定基之高度特異性結合的均質抗體或抗原結合片段群體。此與多株抗體形成對比，多株抗體典型地包括針對不同抗原決定子之不同抗體。術語「單株」抗體或其抗原結合片段涵蓋完整及全長單株抗體以及抗體片段(諸如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)，單鏈(scFv)突變體，包含抗體部分之融合蛋白及包含抗原識別位點之任何其他經修飾的免疫球蛋白分子。此外，「單株」抗體或其抗原結合片段係指以任何多種方式，包括(但不限於)藉由融合瘤、噬菌體選擇、重組表現及轉殖基因動物製得之此等抗體及其抗原結合片段。

在一些態樣中，本文所揭示之抗體或其抗原結合片段為多價分子。如本申請案中所用之術語「價」表示抗體分子存在指定數目個結合位點。例如天然抗體或根據本發明之全長抗體有兩個結合位點且為「二價」。術語「四價」表示抗原結合蛋白存在四個結合位點。術語「三價」表示抗體分子存在三個結合位點。如本文所使用之術語「雙特異性，四價」表示根據本發明之抗原結合蛋白有四個抗原結合位點，其中至少一個結合至第一抗原及至少一個結合至第二抗原或抗原之另一抗原決定基。

如本文所用，術語「可變區」或「可變域」可互換使用且在此項技術中具有共性。可變區通常係指抗體之一部分，一般係指輕鏈或重鏈之一部分，通常係指成熟重鏈中胺基端約110至120個胺基酸或110至125個胺基酸以及成熟輕鏈中約90至115個胺基酸，其序列在抗體間不同且用於特定抗體對其特定抗原之結合及特異性。序列中之可變性集中於稱為互補決定區(CDR)之彼等區域中，而可變域中更高度保守之區域稱為構架區(FR)。在不希望受任何特定機制或理論束縛之情況下，咸信輕鏈及重鏈之CDR為引起抗體與抗原之相互作用及特異性的主要原因。在本發明之一些態樣中，可變區為人類可變區。在本發明之一些態樣中，可變區包含嚙齒動物或鼠類CDR及人類構架區(FR)。在本發明之特定態樣中，可變區為靈長類動物(例如，非人類靈長類動物)可變區。在本發明之一些態樣中，可變區包含嚙齒動物或鼠類CDR及靈長類動物(例如，非人類靈長類動物)構架區(FR)。

術語「VL」及「VL域」可互換地用於指抗體之輕鏈可變區。

術語「VH」及「VH域」可互換地用於指抗體之重鏈可變區。

術語「Kabat編號」及類似術語在此項技術中得到認可，且係指編號抗體或其抗原結合片段之重鏈及輕鏈可變區中之胺基酸殘基的系統。在某些態樣中，CDR可根據Kabat編號系統確定(參見例如Kabat EA及Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391, 及Kabat EA等人, (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第五版, U.S. Department of Health and Human Services, NIH公開案第91-3242號)。使用Kabat編號系統，抗體重鏈分子內之CDR通常存在於胺基酸位置31至35處，其在35之後可視情況包括一個或兩個另外的胺基酸(在Kabat編號方案中稱為35A及35B)(CDR1)；胺基酸位置50至65處(CDR2)及胺基酸位置95至102處(CDR3)。使用Kabat編號系統，抗體輕鏈分子內之CDR通常存在於胺基酸位置24至34處(CDR1)、胺基酸位置50至56處(CDR2)及胺基酸位置89至97處(CDR3)。在本發明之一些態樣中，已根據Kabat編號方案確定本文中所描述之抗體的CDR。

Chothia係指結構環之位置(Chothia及Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987))。當使用Kabat編號規約進行編號時，Chothia CDR-H1環之末端視環之長度而在H32及H34之間變化，(此係因為Kabat編號方案將插入置放於H35A及H35B處；若35A及35B均不存在，則環在32處結束；若僅存在35A，則環在33處結束；若35A及35B都存在，則環在34處結束)。AbM高變區代表Kabat CDR與Chothia結構環之間的折衷，且由Oxford Molecular的AbM抗體模型化軟體使用。

環	Kabat	AbM	Chothia
L1	L24-L34	L24-L34	L24-L34
L2	L50-L56	L50-L56	L50-L56
L3	L89-L97	L89-L97	L89-L97
H1	H31-H35B	H26-H35B	H26-H32..34
(Kabat編號)
H1	H31-H35	H26-H35	H26-H32
(Chothia編號)
H2	H50-H65	H50-H58	H52-H56
H3	H95-H102	H95-H102	H95-H102

如本文中所使用，術語「恆定區」及「恆定域」可互換且具有此項技術中之通用含義。恆定區為抗體部分，例如不直接參與抗體與抗原之結合但可展現各種效應功能(諸如與Fc受體之相互作用)的輕鏈及/或重鏈之羧基端部分。相對於免疫球蛋白可變域，免疫球蛋白分子之恆定區通常具有更保守的胺基酸序列。

如本文所使用，術語「重鏈」在用於提及抗體時可以基於恆定域之胺基酸序列指任何不同類型，例如α (alpha)、δ (delta)、ε (epsilon)、γ (gamma)及μ (mu)，其分別產生IgA、IgD、IgE、IgG及IgM類抗體，包括IgG之子類，例如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。重鏈胺基酸序列為此項技術中所熟知的。在本發明之一些態樣中，重鏈為人類重鏈。

如本文中所使用，術語「輕鏈」在提及抗體時可以基於恆定域之胺基酸序列指任何不同類型，例如κ (kappa)或λ (lambda)。輕鏈胺基酸序列為此項技術中所熟知的。在本發明之一些態樣中，輕鏈為人類輕鏈。

如本文所使用，術語「計劃性死亡1」、「計劃性細胞死亡1」、「蛋白PD-1」、「PD-1」、「PD1」、「PDCD1」、「hPD-1」及「hPD-I」可互換使用。完整的PD-1序列可在NCBI參考序列：NG_012110.1下找到。人類PD-1蛋白之胺基酸序列為：。

計劃性死亡-1 (「PD-1」)為T細胞調節子的擴展的CD28/CTLA-4家族的大約31 kD的I型膜蛋白成員(參見, Ishida, Y.等人. (1992) Induced Expression Of PD-1, A Novel Member Of The Immunoglobulin Gene Superfamily, Upon Programmed Cell Death」, EMBO J. 11:3887-3895)。

PD-1表現於活化T細胞、B細胞及單核球上(Agata, Y. 等人. (1996) 「Expression of the PD-1 Antigen on the Surface of Stimulated Mouse T and B Lymphocytes」, Int. Immunol. 8(5):765-772；Martin-Orozco, N. 等人. (2007) 「Inhibitory Costimulation and Anti-Tumor Immunity」, Semin. Cancer Biol. 17 (4):288-298)。PD-1係負責在藉由結合PDL-1或PDL-2活化後對免疫系統進行下調的受體(Martin-Orozco, N. 等人. (2007) 「Inhibitory Costimulation and Anti-Tumor Immunity」, Semin. Cancer Biol. 17 (4):288-298)且充當細胞死亡誘導劑(Ishida, Y. 等人. (1992) 「Induced Expression of PD-1, A Novel Member of The Immunoglobulin Gene Superfamily, Upon Programmed Cell Death」, EMBO J. 11: 3887-3895；Subudhi, S. K.等人. (2005) 「The Balance of Immune Responses: Costimulation Verse Coinhibition」, J. Molec. Med. 83: 193-202)。此過程在許多腫瘤中經由PD-L1之過表現被利用，導致免疫反應被抑制。

PD-1為腫瘤學中免疫介導療法的經過充分驗證之目標，在治療黑色素瘤及非小細胞肺癌(NSCLC)等臨床試驗中取得了積極成果。對PD-1/PD-L-1相互作用的拮抗性抑制增加T細胞活化，促進藉由宿主免疫系統對腫瘤細胞的識別及消除。已提出使用抗PD-L1抗體治療感染及腫瘤且增強適應性免疫反應(參見美國專利第7,521,051號；第7,563,869號；第7,595,048號)。

計劃性死亡配位體1 (PD-L1)亦係參與控制T細胞活化之受體及配位體的複雜系統的一部分。在正常組織中，PD-L1在T細胞、B細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、間葉幹細胞、骨髓源性肥大細胞以及各種非造血細胞上表現。其正常功能在於調節T細胞活化與經由與其計劃性死亡1 (亦稱為PD-1或CD279)及CD80 (亦稱為B7-1或B7.1)兩個受體相互作用而耐受之間的平衡。PD-L1亦由腫瘤表現且作用於多個位點以輔助腫瘤逃避宿主免疫系統之偵測及消除。PD-L1以高頻率表現在大量癌症中。在一些癌症中，PD-L1之表現與縮短之存活期及不利預後有關。阻斷PD-L1與其受體之間相互作用的抗體能夠減輕PD-L1依賴性免疫抑制作用且增強活體外抗腫瘤T細胞之細胞毒活性。度伐魯單抗(Durvalumab)為針對人類PD-L1之人類單株抗體，其能夠阻斷PD-L1結合至PD-1及CD80受體。已提出使用抗PD-L1抗體治療感染及腫瘤且增強適應性免疫反應(參見以全文引用之方式併入本文中之美國專利第8,779,108號及第9,493,565號)。

如本文所使用，術語「細胞毒素T淋巴球相關抗原-4」、「CTLA-4」、「CD152」及「hCTLA-4」可互換使用，且包括人類CTLA-4之變體、同功異型物、物種同系物。完整的CTLA-4序列可在NCBI參考序列：NG_011502.1下找到。人類CTLA-4蛋白之胺基酸序列為：。

細胞毒性T淋巴球相關蛋白4 (CTLA-4)表現於活化T細胞上且用作共抑制劑以在CD28介導之T細胞活化後控制T細胞反應。咸信CTLA-4在TCR參與後調節幼稚及記憶T細胞之早期活化的幅度，且為影響抗腫瘤免疫及自體免疫兩者的中樞抑制路徑之一部分。CTLA-4僅在T細胞上表現，且其配位體CD80 (B7.1)及CD86 (B7.2)之表現主要受限於抗原呈現細胞、T細胞及其他免疫介導細胞。已報導阻斷CTLA-4傳訊路徑之拮抗性抗CTLA-4抗體能增強T細胞活化。FDA已在2011年批准一種此類抗體，亦即伊派利單抗(ipilimumab)，用於治療轉移性黑色素瘤。已提出使用抗CTLA-4抗體治療感染及腫瘤且上調適應性免疫反應(參見以全文引用之方式併入本文中之美國專利第6,682,736號、第7,109,003號、第7,132,281號、第7,411,057號、第7,824,679號、第8,143,379號、第7,807,797號、第8,491,895號、第8,883,984號及美國公開案第20150104409號)。

術語「嵌合」抗體或其抗原結合片段係指其中胺基酸序列衍生自兩種或更多種物種之抗體或其抗原結合片段。通常，輕鏈及重鏈二者之可變區對應於衍生自一種哺乳動物(例如小鼠、大鼠、兔等)的具有所需特異性、親和力及能力的抗體或其抗原結合片段之可變區，而恆定區則與衍生自另一物種(通常係人)的抗體或其抗原結合片段中之序列同源，以避免在彼物種中引發免疫反應。

術語「人源化」抗體或其抗原結合片段係指非人類(例如鼠類)抗體或抗原結合片段之形式，其為特異性免疫球蛋白鏈、嵌合免疫球蛋白或其含有最小非人類(例如鼠類)序列之片段。通常，人源化抗體或其抗原結合片段為人類免疫球蛋白，其中來自互補決定區(CDR)之殘基經來自非人類物種((例如小鼠、大鼠、兔子、倉鼠)CDR之具有所需特異性、親和力及能力的殘基置換(「CDR接枝」) (Jones 等人, Nature 321:522-525 (1986)；Riechmann 等人, Nature 332:323-327 (1988)；Verhoeyen 等人, Science 239:1534-1536 (1988))。在一些情況下，人類免疫球蛋白之某些Fv構架區(FR)殘基經來自非人類物種之具有所需特異性、親和力及能力的抗體或片段之對應殘基置換。人源化抗體或其抗原結合片段可藉由Fv構架區中及/或非人類CDR殘基內之額外殘基的取代進行進一步修飾，以改善且最佳化抗體或其抗原結合片段特異性、親和力及/或能力。一般而言，人源化抗體或其抗原結合片段將包含含有所有或實質上所有對應於非人類免疫球蛋白之CDR區的可變域，而所有或實質上所有FR區為人類免疫球蛋白共通序列之彼等區。人源化抗體或其抗原結合片段亦可包含免疫球蛋白恆定區或域(Fc)之至少一部分，通常人類免疫球蛋白之至少一部分。用於生成人源化抗體之方法的實例描述於美國專利第5,225,539號；Roguska等人, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91 (3):969-973 (1994), 及Roguska等人, Protein Eng. 9 (10):895-904 (1996)中。在本發明之一些態樣中，「人源化抗體」為表面重塑之抗體。

術語「人類」抗體或其抗原結合片段意謂具有源於人類免疫球蛋白基因座之胺基酸序列的抗體或其抗原結合片段，其中此類抗體或抗原結合片段係使用此項技術中已知之任何技術製得。人類抗體或其抗原結合片段之此定義包括完整或全長抗體及其片段。

「結合親和力」通常係指分子(例如，抗體或其抗原結合片段)之單個結合位點與其結合搭配物(例如，抗原)之間的非共價相互作用之總和的強度。除非另外指示，否則如本文中所使用，「結合親和力」係指反映結合對成員(例如，抗體或其抗原結合片段及抗原)之間的1:1相互作用的固有結合親和力。分子X對其搭配物Y之親和力通常可由解離常數(KD)表示。親和力可以此項技術中已知之多種方式量測及/或表示，包括(但不限於)平衡解離常數(KD)及平衡締合常數(KA)。KD係由k _off/k _on之商來計算，而KA係是由k _on/k _off之商來計算。k _on係指例如抗體或其抗原結合片段與抗原的締合速率常數，而k _off係指例如抗體或其抗原結合片段與抗原的解離。k _on及k _off可藉由一般技術者所熟知之技術測定，諸如BIAcore®或KinExA。

如本文中所使用，「抗原決定基」為此項技術中之術語且係指抗體或其抗原結合片段可特異性結合之抗原的局部區域。抗原決定基可為例如多肽之相鄰胺基酸(線性或相鄰抗原決定基)，或抗原決定基可例如由一或多個多肽之兩個或更多個非相鄰區域聚集在一起得到(構形、非線性、非連續或非相鄰抗原決定基)。在本發明之一些態樣中，抗體或其抗原結合片段特異性結合之抗原決定基可藉由例如NMR光譜法、X射線繞射結晶學研究、ELISA分析、氫/氘交換結合質譜分析(例如，液相層析電噴質譜分析)、基於陣列之寡肽掃描分析及/或突變誘發定位(例如，定點突變誘發定位)來測定。對於X射線結晶學而言，結晶可使用此項技術中已知之任何方法實現(例如, Giegé R等人, (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50 (Pt 4): 339-350；McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23；Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274；McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303)。抗體/其抗原結合片段：可使用熟知的X射線繞射技術進行研究且可使用電腦軟體進行提煉，諸如X-PLOR (Yale University, 1992, 由Molecular Simulations, Inc.分發；參見例如Meth Enzymol (1985) 第114及115卷, Wyckoff HW等人編；U.S. 2004/0014194)及BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49 (Pt 1): 37-60；Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, Carter CW編；Roversi P等人, (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56 (Pt 10): 1316-1323)。突變誘發定位研究可使用熟習此項技術者已知之任何方法來實現。關於突變誘發技術(包括丙胺酸掃描突變誘發技術)之描述，參見例如Champe M等人., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394及Cunningham BC及Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085。

與參考抗體「結合至相同抗原決定基」之抗體係指與參考抗體結合至相同胺基酸殘基的抗體。抗體與參考抗體相同抗原決定基的結合能力可藉由氫/氘交換分析(參見Coales等人., Rapid Commun. Mass Spectrom. 2009; 23: 639-647)或x射線晶體學測定。

若抗體優先結合至給定抗原決定基或重疊抗原決定基，以至於其在一定程度上阻斷參考抗體與該抗原決定基之結合，則稱該抗體「競爭性抑制」或「交叉競爭」參考抗體與給定抗原決定基的結合。競爭性抑制可藉由此項技術中已知之任何方法測定，例如競爭ELISA分析法。可稱抗體競爭性抑制參考抗體與給定抗原決定基的結合至少90%、至少80%、至少70%、至少60%或至少50%。

「經分離」之多肽、抗體、聚核苷酸、載體、細胞或組合物為呈自然界中不存在之形式的多肽、抗體、聚核苷酸、載體、細胞或組合物。經分離之多肽、抗體、聚核苷酸、載體、細胞或組合物包括已在一定程度上純化，使其不再呈自然界中所發現之形式的彼等物。在本發明之一些態樣中，分離之抗體、聚核苷酸、載體、細胞或組合物為實質上純的。如本文所使用，「實質上純」係指至少50%純(即，無污染物)、至少90%純、至少95%純、至少98%純或至少99%純的物質。

術語「多肽」、「肽」及「蛋白質」在本文中可互換使用，係指任何長度之胺基酸之聚合物。聚合物可為線性或分支的，其可以包含經修飾之胺基酸，且其可以間雜有非胺基酸。術語亦涵蓋經天然或藉由干預修飾之胺基酸聚合物；舉例而言，二硫鍵形成、糖基化、脂質化、乙醯化、磷酸化或任何其他操作或修飾，諸如與標記組分結合。該定義亦包括例如含有胺基酸之一或多種類似物(包括例如非天然胺基酸等)之多肽，以及此項技術中已知之其他修飾。應理解，由於本發明之多肽係基於抗體，因此在本發明之一些態樣中，多肽可以單鏈或締合鏈形式存在。

如本文所使用，術語「MEDI5752」係指抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體，其包含輕鏈SEQ ID NO:1及重鏈SEQ ID NO:2 (PD-1)以及輕鏈SEQ ID NO:3及重鏈SEQ ID NO:4 (CTLA-4)。MEDI5752揭示於美國專利第10,457,732號，其以全文引用之方式併入本文中。

如本文所使用，術語「醫藥調配物」係指一種製劑，其形式允許活性成分之生物活性為有效的，且其不含有對投與該製劑之個體有不可接受之毒性的額外成分。調配物可為無菌的。

如本文所使用之術語「投與(administer/administering/administration)」及其類似術語係指可用於使藥物(例如抗PD1/CTLA-4抗體或其抗原結合片段)能夠遞送至所需生物作用部位的方法(例如靜脈內投藥)。可與本文所描述之藥劑及方法一起採用的投與技術見於例如Goodman及Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 現行版, Pergamon；及Remington's, Pharmaceutical Sciences, 現行版, Mack Publishing Co., Easton, Pa。

如本文所使用，術語「組合」或「組合投與」意謂本文所述之抗體或其抗原結合片段可與一或多種額外的治療劑一起投與。在一些態樣中，抗體或其抗原結合片段可與一或多種額外的治療劑同時或相繼投與。在一些態樣中，本文所述之抗體或其抗原結合片段可與一或多種額外的治療劑在相同或不同的組合物中投與。

如本文所使用，術語「個體」及「患者」可互換使用。個體可為動物。在本發明之一些態樣中，個體為哺乳動物，諸如非人類動物(例如，牛、豬、馬、貓、狗、大鼠、小鼠、猴或其他靈長類動物等)。在本發明之一些態樣中，個體為食蟹獼猴。在本發明之一些態樣中，個體為人類。

術語「治療有效量」係指有效治療個體之疾病或病症的藥物(例如抗PD1/CTLA-4抗體或其抗原結合片段)的量。諸如「治療(treating/treatment/to treat)」、「緩解(alleviating/to alleviate)」之術語係指治癒、減緩病理性病狀或病症、減輕其症狀及/或中斷其進展的治療性手段。因此，需要治療之彼等者包括已診斷患有或懷疑患有該病症之彼等者。

除非上下文另外明確規定，否則如本發明及申請專利範圍所使用，單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數形式。

應理解，每當在本文中用措辭「包含」描述本發明之態樣時，亦提供用術語「由…組成」及/或「基本上由…組成」描述之另外類似的態樣。

除非明確陳述或自上下文顯而易見，否則如本文所用，術語「或」應理解為包括性的。諸如「A及/或B」之片語中所使用之術語「及/或」在本文中意欲包括「A及B」、「A或B」、「A」及「B」。同樣地，諸如「A、B及/或C」之片語中所使用之術語「及/或」意欲涵蓋以下態樣中之各者：A、B及C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A及C；A及B；B及C；A (單獨)；B (單獨)；及C (單獨)。

如本文所使用，術語「約」及「大約」，當用於修飾數值或數字範圍時，表示高於該數值或範圍5%至10%及低於該數值或範圍5%至10%之偏差仍在所述數值或範圍之預期含義之內。

本文中所提供之任何組合物或方法可與本文中所提供之任何其他組合物及方法中之一或多者組合。

單位、字首及符號以其國際單位制(SI)接受之形式表示。數值範圍包括界定該範圍之數字。本文提供之標題並非本發明之各種態樣的限制，該等態樣可藉由參考整個說明書來獲得。因此，下文緊接著定義之術語藉由參考說明書的全部內容而得到更充分的定義。 5.2 本發明之方法

在一個態樣中，本發明係有關一種治療有需要之個體之腎細胞癌或非小細胞肺癌的方法。包含抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體或其抗原結合片段之療法使得患病個體獲得更佳治療結果(例如客觀反應率及疾病控制率)。

在一個態樣中，本發明包括選擇人類患者之腎細胞癌或非小細胞肺癌進行免疫療法的方法，其包含測定腫瘤樣品之PD-L1表現量。在一些態樣中，腫瘤樣品為PD-L1陽性。在一些態樣中，腫瘤樣品為PD-L1陰性

在一些態樣中，本發明包括抑制人類患者之腎細胞癌生長的方法，其包含向患者投與抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體。在一個態樣中，本發明包括一種治療人類患者之腎細胞癌的方法，其包含向患者投與抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體。在一些態樣中，雙特異性抗體為MEDI5752。

在一些態樣中，本發明包括一種抑制人類患者之非小細胞肺癌生長的方法，其包含向患者投與抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體。在一個態樣中，本發明包括一種治療人類患者之非小細胞肺癌的方法，其包含向患者投與抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體。在一些態樣中，雙特異性抗體為MEDI5752。

在一些態樣中，治療腎細胞癌或非小細胞肺癌之方法包含向個體投與約100 mg至約1500 mg之雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段。在一些態樣中，該方法包含投與約100 mg、150 mg、200 mg、250 mg、300 mg、350 mg、400 mg、450 mg、500 mg、550 mg、600 mg、650 mg、700 mg、750 mg、800 mg、850 mg、900 mg、950 mg、約1000 mg、約1010 mg、約1020 mg、約1030 mg、約1040 mg、約1050 mg、約1060 mg、約1070 mg、約1080 mg、約1090 mg、約1100 mg、約1120 mg、約1130 mg、約1140 mg、約1150 mg、約1160 mg、約1170 mg、約1180 mg、約1190 mg、約1200 mg、約1250 mg、約1300 mg、約1350 mg、約1400 mg、約1450 mg或約1500 mg。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg、約1000 mg、約1250 mg或約1500 mg之初始劑量(priming dose)，接著係約225 mg、約500 mg、約750 mg、1000 mg或約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約225 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約750 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約1000 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約225 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約750 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約1000 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約750 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1000 mg之初始劑量及約225 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1000 mg之初始劑量及約500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1000 mg之初始劑量及約750 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1000 mg之初始劑量及約1000 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1000 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1250 mg之初始劑量及約225 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1250 mg之初始劑量及約500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1250 mg之初始劑量及約750 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1250 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1250 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1500 mg之初始劑量及約225 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1500 mg之初始劑量及約500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1500 mg之初始劑量及約750 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1500 mg之初始劑量及約1500 mg之維持劑量。在一些態樣中，該方法包含投與約1500 mg之初始劑量及約1250 mg之維持劑量。在一些態樣中，隨著繼續投藥可減少所投與之MEDI5752之劑量。

在一些態樣中，治療腎細胞癌或非小細胞肺癌之方法包含向個體投與約500 mg或750 mg之雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段。在一些態樣中，治療腎細胞癌或非小細胞肺癌之方法包含投與約1000 mg之雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，治療腎細胞癌或非小細胞肺癌之方法包含投與約1125 mg之雙特異性抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，每個治療週期向個體投與一次劑量之雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，治療週期為三週。在一些態樣中，每三週投與一次劑量之雙特異性抗體或其抗原結合片段，持續約12個月、約24個月、約36個月或約48個月。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段與一或多種化學治療劑組合投與。在一些態樣中，化學治療劑為卡鉑。在一些態樣中，化學治療劑為培美曲塞。在一些態樣中，化學治療劑為阿昔替尼。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段與超過一種的化學治療劑組合投與。在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法進一步包含投與化學治療劑卡鉑及培美曲塞。在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法進一步包含投與化學治療劑卡鉑及紫杉醇。一或多種化學治療劑為卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇。

在一些態樣中，卡鉑以約AUC 4 mg/mL⋅min與AUC 6 mg/mL⋅min之間之劑量投與。在一些態樣中，培美曲塞以約400 mg/m ²與600 mg/m ²之間之劑量投與。在一些態樣中，奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇以約50 mg/m ²及150 mg/m ²之間之劑量投與。在一些態樣中，紫杉醇以約150 mg/m ²及250 mg/m ²之間之劑量投與。在一些態樣中，阿昔替尼以約4 mg及6 mg之間之劑量投與。在一些態樣中，樂伐替尼以約8 mg及20 mg之間之劑量投與。在一些態樣中，樂伐替尼以約8 mg、10 mg、12 mg、14 mg、16 mg、18 mg或20 mg之劑量投與。在一些態樣中，每日一次投與樂伐替尼。

在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法包含雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段以約500 mg或750 mg之劑量投與，卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與及培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與。在一些態樣中，每三週投與卡鉑及培美曲塞，持續四個週期(亦即，十二週)。在一些態樣中，投藥之後係維持給藥。維持給藥涉及每三週一次投與雙特異性抗體或其抗原結合片段與培美曲塞之組合。在一些態樣中，維持給藥可以係不定的。

在一些態樣中，治療腎細胞癌之方法進一步包含投與化學治療劑阿昔替尼。在一些態樣中，在投與雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段之前，自第-7天至第-1天，以5 mg之劑量每日兩次經口投與化學治療劑(例如，阿昔替尼)。在此等態樣中，在第1天投與雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，阿昔替尼以5 mg之劑量每日兩次投與，且雙特異性抗體或其抗原結合片段以1500 mg之劑量每三週一次投與。在此等態樣中，阿昔替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約12個月、約24個月或約36個月。在一些態樣中，阿昔替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約12個月。在一些態樣中，阿昔替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約24個月。在一些態樣中，阿昔替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約36個月。在一些態樣中，阿昔替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約48個月。

在一些態樣中，治療腎細胞癌之方法進一步包含投與化學治療劑樂伐替尼。在一些態樣中，在投與雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段之前，自第-7天至第-1天，以14 mg或18 mg之劑量每日一次經口投與化學治療劑(例如，樂伐替尼)。在此等態樣中，在第1天投與雙特異性抗體或其抗原結合片段。在一些態樣中，樂伐替尼以14 mg或18 mg之劑量每日一次投與，且雙特異性抗體或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每三週或每四週一次投與。在此等態樣中，樂伐替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約12個月、約24個月或約36個月。在一些態樣中，樂伐替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約12個月。在一些態樣中，樂伐替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約24個月。在一些態樣中，樂伐替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約36個月。在一些態樣中，樂伐替尼及雙特異性抗體或其抗原結合片段投與約48個月。

在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法包含雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每三週投與，卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量每三週投與，持續4個週期(亦即，十二週)，及培美曲塞以500 mg/m ²之劑量每三週投與。在此等態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及培美曲塞投與約12個月、約24個月、約36個月或約48個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及培美曲塞投與約12個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及培美曲塞投與約24個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及培美曲塞投與約36個月或更久。

在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法包含投與雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段與卡鉑及紫杉醇之組合。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，卡鉑每三週以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與，持續4個週期，且紫杉醇在每三週週期之第1、8及15天以200 mg/m ²體表面積(BSA)之劑量投與，持續4個週期。在此等態樣中，卡鉑在投與紫杉醇之後立即投與。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及紫杉醇投與約12個月、約24個月、約36個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及紫杉醇投與約12個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及紫杉醇投與約24個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與約36個月或更久。

在一些態樣中，治療非小細胞肺癌之方法包含投與雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段與卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇之組合。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，卡鉑每三週以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與，持續4個週期，且奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇在每三週週期之第1、8及15天以100 mg/m ²體表面積(BSA)之劑量投與，持續4個週期。在此等態樣中，卡鉑在投與奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇之後立即投與。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與約12個月、約24個月、約36個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與約12個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與約24個月。在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段、卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇投與約36個月或更久。

在一些態樣中，本發明包括在患有腎細胞癌或非小細胞肺癌人類患者中延長無進展存活期超過12個月的方法，該方法包含向患者投與本文所揭示之免疫療法，其中患者表明無進展存活期超過12個月。在一些態樣中，相比於標準照護療法，患者的無進展存活期可在投藥之後延長超過13個月、約14個月、約15個月、約16個月、約17個月、約18個月、約2年、約3年、約4年、約5年、約6年、約7年、約8年、約9年或約10年。

在一些態樣中，本發明包括延長總反應率(ORR)之方法，與標準照護療法相比，總反應率至少約為10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%更長或更高。

在一些態樣中，本發明包括延長總存活期之方法，與標準照護療法相比，總存活期至少約為10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%更長或更高。在一些態樣中，經本發明之方法治療的患者的總存活期為至少約12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24個月或更多個月。

在又其他態樣中，本發明包括在罹患腎細胞癌或非小細胞肺癌之人類患者中減小腫瘤尺寸至少10%的方法，該方法包含投與本文所揭示之免疫療法，其中與投藥前之腫瘤尺寸相比，投藥使腫瘤尺寸減小至少約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%或100%。在一些態樣中，該方法包含在投藥前鑑定患者具有PD-L1陽性腫瘤。

在一些態樣中，本發明包括在患者群體中將客觀反應率增加至高於15%的方法。在一些態樣中，客觀反應率高於10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或更高。在一些態樣中，該方法包含在投藥前鑑定患者具有PD-L1陽性腫瘤。

在一些態樣中，方法中之各患者均經歷(i)延長無進展存活期超過12個月，(ii)與投藥前之腫瘤尺寸相比，腫瘤尺寸減小至少約10%、約20%、約30%、約40%或約50%，或(iii)二者。

由於投與本文所揭示之免疫療法，本發明之方法可治療腎細胞癌或非小細胞肺癌，減小腫瘤尺寸，抑制腫瘤生長，消除患者之腫瘤，防止腫瘤復發，誘導患者的緩解，或其任何組合。在某些態樣中，投與本文所揭示之免疫療法誘導完全反應。在其他態樣中，投與本文所揭示之免疫療法誘導部分反應。在一些態樣中，根據RECIST評估反應。在一些態樣中，根據iRECIST評估反應。在一些態樣中，根據病理反應評估反應。

在一些態樣中，PD-L1陽性腫瘤包含至少約1%、至少約2%、至少約3%、至少約4%、至少約5%、至少約7%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或100%的表現PD-L1的細胞。在一些態樣中，PD-L1陽性腫瘤包含約1%至約49%的表現PD-L1的細胞。在一些態樣中，PD-L1陽性腫瘤包含約≥50%的表現PD-L1的細胞。

在一些態樣中，PD-L1陽性腫瘤包含少於約1%的表現PD-L1的細胞。在一些態樣中，腫瘤包含0%的表現PD-L1的細胞。在一些態樣中，PD-L1陽性腫瘤百分比可藉由熟習此項技術者已知的分析來測定。在一些態樣中，可使用Ventana PD-L1 (SP263)。

在一些態樣中，PD-L1表現藉由接收能夠測定PD-L1表現之分析的結果來測定。

在一些態樣中，本發明之方法改變活性/增殖及效應T細胞之頻率。在一些態樣中，T細胞藉由基於流式細胞分析技術之分析或免疫組織化學來量測。

在一些態樣中，本發明之方法改變生物標誌物之蛋白或基因表現，諸如(但不限於) PD-1、PD-L1、CTLA-4、CD8及IFN-γ。

為了評定基因或蛋白質之表現(例如，PD-L1)，在一個態樣中，測試組織樣品係獲自需要療法之患者。在一些態樣中，測試組織樣品包括(但不限於)任何臨床上相關的組織樣品，諸如腫瘤活體組織切片、粗針活體組織切片樣品、細針抽出物或體液樣品，諸如血液、血漿、血清、淋巴、腹水、囊性流體或尿液。在一些態樣中，測試組織樣品來自原發腫瘤。在一些態樣中，測試組織樣品來自癌轉移。在一些態樣中，測試組織樣品於多個時間點採集自個體，例如，治療前、治療期間及/或治療後。在一些態樣中，測試組織樣品採集自個體之不同位置，例如，來自原發腫瘤之樣品及來自遠端位置中癌轉移之樣品。

在一些態樣中，測試組織樣品為石臘包埋固定組織樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為福馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為新鮮組織(例如，腫瘤)樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為冷凍組織樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為新鮮冷凍(FF)組織(例如，腫瘤)樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為分離自液體之細胞。在一些態樣中，測試組織樣品包含循環腫瘤細胞(CTC)。在一些態樣中，測試組織樣品包含腫瘤浸潤淋巴球(TIL)。在一些態樣中，測試組織樣品包含腫瘤細胞及腫瘤浸潤淋巴球(TIL)。在一些態樣中，測試組織樣品包含循環淋巴球。在一些態樣中，測試組織樣品為存檔組織樣品。在一些態樣中，測試組織樣品為具有已知診斷、治療及/或結果病史的存檔組織樣品。在一些態樣中，樣品為組織塊。在一些態樣中，測試組織樣品為分散的細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約1×10 ⁶個細胞或更多。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約1×10 ⁵個細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約10,000個細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約1,000個細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約100個細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為約1個細胞至約10個細胞。在一些態樣中，樣品尺寸為單個細胞。

在另一態樣中，對表現之評定可在不獲得測試組織樣品之情況下實現。在一些態樣中，選擇合適的患者包括(i)視情況提供自患有組織癌症之患者獲得的測試組織樣品，該測試組織樣品包含腫瘤細胞及/或腫瘤浸潤炎性細胞；及(ii)基於測試組織樣品中之細胞比例高於預定臨限水平的評定，評定測試組織樣品中表現感興趣的基因/蛋白質的細胞的比例。

在任何本方法中之某些態樣中，表現PD-L1之細胞的比例藉由進行偵測PD-L1 RNA之存在的分析來評定。在其他態樣中，PD-L1 RNA之存在藉由RT-PCR、原位雜交或核糖核酸酶保護來偵測。在一些態樣中，PD-L1 RNA之存在藉由基於RT-PCR之分析法來偵測。在一些態樣中，對基於RT-PCR之分析進行評分包含評定測試組織樣品中PD-L1 RNA表現相對於預定量的量。

在其他態樣中，表現感興趣的基因/蛋白質(例如PD-L1)的細胞的比例藉由進行偵測PD-L1多肽之存在的分析來評定。在其他態樣中，多肽之存在藉由IHC、酶聯免疫吸附分析法(ELISA)或活體內成像來偵測。在一些態樣中，蛋白表現藉由IHC來分析。 5.3 患者群體

本發明提供使用本文所揭示之任何方法治療人類患者之癌症(例如晚期腎細胞癌或非小細胞肺癌)的臨床方法，例如，雙特異性抗體(例如，MEDI5752)或其抗原結合片段作為單一試劑投與或視情況與一或多種化學治療劑組合投與。在一些態樣中，患者有晚期實體腫瘤。在一些態樣中，患者尚未接受過先前免疫療法暴露，且其腫瘤對於標準療法係難治性的或不存在針對該等腫瘤之標準療法。在一些態樣中，患者未經免疫療法治療且有晚期或轉移性實體腫瘤。在一些態樣中，患者有晚期透明細胞腎細胞癌。在一些態樣中，患者患有一線IIIB期或IV期非鱗狀非小細胞肺癌。在一些態樣中，患者有資格接受基於鉑之雙重化學療法。

在一些態樣中，患者患有鱗狀非小細胞肺癌。在一些態樣中，患者患有非鱗狀非小細胞肺癌。在一些態樣中，患者有晚期實體腫瘤。 5.4 結果

根據本文所揭示之方法治療的患者較佳經歷至少一種癌症徵象改善。在一個態樣中，改善藉由可量測的腫瘤病變之數量及/或大小的減少來量測。在另一態樣中，病變可在胸部x射線或CT或MRI片上量測。在另一態樣中，細胞學或組織學可用於評估對治療的反應。在一些態樣中，腫瘤對投與雙特異性抗體或其抗原結合片段的反應可藉由調查員對腫瘤評定的審查測定且藉由RECIST v1.1指南定義。額外的腫瘤量測可由調查員決定或根據機構慣例進行。

在一些態樣中，經治療之患者表現出完全反應(CR)，亦即全部目標病變消失。在一些態樣中，經治療之患者表現出部分反應(PR)，亦即以基線直徑之和為參考，目標病變直徑之和至少減少30%。在一些態樣中，經治療之患者表現出疾病進展(PD)，亦即以研究中最小的總和為參照(此包括基線總和，若其為研究中最小的)，目標病變直徑之和至少增加20%。除了20%的相對增加外，總和亦必須展現至少5 mm的絕對增加。(註：可將出現的一或多個新的病變視為進展)。在一些態樣中，經治療之患者表現出疾病穩定(SD)，亦即，以研究時最小直徑之和作為參考，既沒有足夠的萎縮以符合PR，亦沒有足夠的增加以符合PD。

在另一態樣中，經治療之患者經歷腫瘤收縮及/或生長速率降低，亦即腫瘤生長受抑制。在一些態樣中，不希望的細胞增殖減少或受抑制。在一些態樣中，可出現以下各者中之一或多者：癌細胞之數目可以減少；腫瘤尺寸可以減小；癌細胞對周圍器官之浸潤可以經抑制、延緩、減緩或停止；腫瘤轉移可以經減緩或抑制；腫瘤生長可以受抑制；腫瘤復發可以預防或推遲；與癌症相關之一或多種症狀可以在一定程度上緩解。

在其他態樣中，投與根據本文所提供之任何方法中的雙特異性抗體或其抗原結合片段產生至少一種治療效果，該治療效果選自由腫瘤尺寸減小、隨時間出現之轉移性病變數目減少、完全緩解、部分緩解或疾病穩定組成之群。

在一些態樣中，一或多種腫瘤活體組織切片可用於測定腫瘤對根據本文所提供之任何方法投與雙特異性抗體或其抗原結合片段的反應。在一些態樣中，樣品為福馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品。在一些態樣中，樣品為新鮮樣品。腫瘤樣品(例如，活體組織切片)可用於鑑定與免疫及腫瘤微環境相關之預測性及/或藥效性生物標誌物。該等生物標誌物可由包括IHC、腫瘤突變分析、RNA分析及蛋白質體分析的分析法測定。在某些態樣中，腫瘤生物標誌物之表現藉由以下方法偵測：RT-PCR、原位雜交、核糖核酸酶保護、基於RT-PCR之分析法、免疫組織化學、酶聯免疫吸附分析法、活體內成像或流式細胞分析技術。 5.5 雙特異性抗體及其抗原結合片段

本發明提供治療個體(例如，人類個體)之癌症的方法，其包含向個體投與特異性結合至PD-1及CTLA-4 (例如，人類PD-1及CTLA-4)之抗體(例如，雙特異性、單株抗體，諸如嵌合、人源化或人類抗體)及其抗原結合片段。在一些態樣中，可用於本文提供之方法中的PD-1及CTLA-4 (例如人類PD-1及CTLA-4)抗體及其抗原結合片段包括MEDI5752，一種單價雙特異性人源化免疫球蛋白G1 (IgG1)單株抗體(mAb)，具有工程化片段可結晶(Fc)域以降低Fc效應功能，特異性結合PD-1及CTLA-4。

MEDI5752構築在DuetMab分子之骨架上。DuetMab設計描述於Mazor等人, MAbs. 7 (2): 377-389, (2015年3月-2015年4月)中，其以全文引用之方式併入本文中。「DuetMab」設計包括用於2條不同重鏈之異二聚化的杵臼(KIH)技術，且藉由用工程化二硫鍵置換CH1-CL界面中之一者的天然二硫鍵來提高同源重鏈及輕鏈配對的效率。

MEDI5752之Fc域攜帶經設計以降低Fc介導之免疫效應功能的三重突變(TM) (L234F、L235E及P331S) (Oganesyan等人, Acta Crystallogr D Biol Crystallogr, 2008, 64 (Pt 6): 700-704)。MEDI5752包括抗PD-1及抗CTLA-4 Fab、抗CTLA-4 CH1-CL界面中之工程化鏈間二硫化物及杵臼IgG1-TM Fc。MEDI5752包括包含結合至CTLA-4之可變區之重鏈中的杵突變及包含結合至PD-1之可變區之重鏈中的臼突變。

MEDI5752描述於美國專利第10,457,732號中，其以全文引用之方式併入本文中。

在本發明之一些態樣中，用於本文所描述之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段特異性結合至人類PD-1及人類CTLA-4且包含如表1中所提供的所列MEDI5752抗體之六個CDR。表 1.VH CDR胺基酸序列 ¹

抗體	VH CDR1 (SEQ ID NO:)	VH CDR2 (SEQ ID NO:)	VH CDR3 (SEQ ID NO:)
MEDI 5752 PD-1	GFTFSDYGMH (SEQ ID NO:8)	YISSGSYTIYSADSVKG (SEQ ID NO:9)	RAPNSFYEYYFDY (SEQ ID NO:10)
MEDI 5752 CTLA-4	GFTFSSYGMH (SEQ ID NO:14)	VIWYDGSNKYYADSVKG (SEQ ID NO:15)	DPRGATLYYYYYGMDV (SEQ ID NO:16)

¹根據Kabat測定表1中之VH CDR。表 2. VL CDR 胺基酸序列 ²

抗體	VL CDR1 (SEQ ID NO:)	VL CDR2 (SEQ ID NO:)	VL CDR3 (SEQ ID NO:)
MEDI 5752 PD-1	SASSKHTNLYWSRHMYWY (SEQ ID NO:5)	TSNRAT (SEQ ID NO:6)	QQWSSNP (SEQ ID NO:7)
MEDI 5752 CTLA-4	RASQSINSYLD (SEQ ID NO:11)	AASSLQS (SEQ ID NO:12)	QQYYSTP (SEQ ID NO:13)

²根據Kabat測定表2中之VH CDR。

在本發明之一些態樣中，用於本文所描述之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段特異性結合至人類PD-1及CTLA-4且包含MEDI5752抗體之可變重鏈(VH)及可變輕鏈(VI)。

在本發明之一些態樣中，用於本文所描述之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段特異性結合至人類PD-1及CTLA-4且包含表3中所列MEDI5752抗體之重鏈(HC)。表 3 ： 全長重鏈胺基酸序列

抗體	胺基酸序列(SEQ ID NO)
MEDI 5752 PD-1	EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYGMHWVRQAPGKGLEWVAYISSGSYTIYSADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRAPNSFYEYYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSREEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:2)
MEDI 5752 CTLA-4	QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDPRGATLYYYYYGMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVCPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSVDKTHTCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCREEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO:4)

在本發明之一些態樣中，用於本文所描述之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段特異性結合至人類PD-1及CTLA-4且包含表4中所列MEDI5752抗體之輕鏈(LC)。表 4 ： 全長輕鏈胺基酸序列

抗體	胺基酸序列(SEQ ID NO)
MEDI 5752 PD-1	QIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSASSKHTNLYWSRHMYWYQQKPGQAPRLLIYLTSNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQWSSNPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO:1)
MEDI 5752 CTLA-4	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSINSYLDWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPFTFGPGTKVEIKGQPKAAPSVTLFPPCSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTEVS (SEQ ID NO:3)

在一些態樣中，可用於所揭示之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段包括特異性結合至人類PD-1及CTLA-4且與MEDI5752交叉競爭結合至人類PD-1及CTLA-4的經分離之抗體。在一些態樣中，可用於所揭示之方法的雙特異性抗體或其抗原結合片段包括與MEDI5752一樣結合人類PD-1及CTLA-4上相同抗原決定基的經分離抗體。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段包含： (a)包含SEQ ID NO:8之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:9之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列之VL CDR3；及 (b)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之VL CDR3。

在一些態樣中，雙特異性抗體或其抗原結合片段包含 (a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及 (b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。

在一些態樣中，雙特異性抗體或抗原結合片段包含IgG重鏈恆定區。在一些態樣中，IgG重鏈恆定區為IgG1重鏈恆定區。

如本文所提供，用於本文所描述之方法的免疫特異性結合至PD-1及CTLA-4 (例如，人類PD-1及CTLA-4)的抗體或其抗原結合片段，例如，與具有野生型IgG1序列的抗體或其抗原結合片段相比時，可以具有降低的效應功能。降低的效應功能可以例如係抗體或其抗原結合片段之恆定區之序列的結果。

如本文所提供，用於本文所描述之方法的免疫特異性結合至PD-1及CTLA-4 (例如人類PD-1及CTLA-4)的抗體或其抗原結合片段可缺少CDC及/或ADCC活性，例如係恆定區之序列的結果。 5.6 醫藥組合物

適用於投與人類患者之醫藥組合物通常經調配以用於非經腸投與，例如，在液體載劑中，或適用於復原成液體溶液或懸浮液以用於靜脈內投與。

一般而言，該等組合物通常包含醫藥學上可接受之載劑。如本文所使用，術語「醫藥學上可接受」意謂經政府監管機構批准或被列入美國藥典或另一公認藥典，用於動物，尤其人類。術語「載劑」指與化合物一起投與的稀釋劑、佐劑、賦形劑或媒劑。該等醫藥學載劑可為無菌液體，諸如水及油，包括石油、動物、植物或合成來源之油，諸如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油、甘油聚乙二醇蓖麻油酸酯及其類似物。可以採用水或鹽水溶液及葡萄糖及甘油水溶液作為載劑，尤其用於注射溶液。用於非經腸投與之液體組合物可調配為藉由注射或連續輸注投與。藉由注射或輸注之投藥途徑包括靜脈內、腹膜內、肌內、鞘內及皮下。

以下實例係為了說明，而非為了限制而提供。 6. 實例

此章節(亦即，章節6)中之實例係為了說明，而非為了限制而提供。 6.1 實例1：MEDI5752之1期臨床評估

在1期、首次用於人體、多中心、開放標籤、劑量遞增及劑量擴展的研究中評定MEDI5752，以評估MEDI5752作為單一藥劑或與化學療法組合投與時在患有晚期實體腫瘤之成年個體中的安全性及耐受性以及早期功效證據(圖1A至圖1D)。此研究之目的為提供安全概況，描述藥物動力學(PK)、藥效學(PD)及早期抗腫瘤功效跡象。將有多達約396名個體入組研究：在劑量遞增階段有多達約86名個體，腎細胞癌(RCC)擴展群組中有約92名個體入組，非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)擴展群組中有約198名個體入組，且鱗狀NSCLC擴展群組中有約20名個體入組。

個體將在全球約50個地點入組。截至資料截止日，共有178名患有晚期實體腫瘤之患者以10種劑量水平之一接受至少一種劑量的MEDI5752單藥療法(2.25 mg及7.5 mg各1人、22.5 mg 3人、75 mg 5人、225 mg 10人、500 mg 20人、750 mg 40人、1500 mg 39人、2000 mg 34人及2500 mg 7人)。共有152名患有晚期非鱗狀NSCLC之參與者接受或即將接受至少一種劑量的MEDI5752與卡鉑及培美曲塞的組合(500 mg約35人、750 mg約125人、1500 mg 20人、2000 mg 7人)。共有20名患有晚期鱗狀NSCLC之參與者接受了至少一種劑量的MEDI5752與卡鉑及紫杉醇或奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇(750 mg)的組合。共有92名對111名患有腎細胞癌之參與者接受了至少一種劑量的MEDI5752 (500 mg 33人，750 mg 32人及1500 mg 27人)。

研究包括2個階段：劑量遞增及劑量擴展(圖1A至圖1D)。劑量遞增階段評估了10種劑量水平以確定最大耐受劑量(MTD)、最佳生物劑量(OBD)或方案定義之最高劑量(HPDD)。劑量遞增階段之後為劑量擴展階段，該階段評估了2個未曾接受過免疫療法的患有晚期透明細胞RCC的個體群組(RCC-C1擴展群組中之一線至三線，及RCC-C2擴展群組中之一線)、2個未曾接受過治療免疫療法的患有一線IIIB期至IV期非鱗狀NSCLC的個體群組(NSCLC擴展群組NSCLC-C1及NSCLC-C2)以及1個未曾接受過免疫療法的患有一線IIIB期至IV期鱗狀NSCLC的個體群組(NSCLC擴展群組NSCLC-C3)。RCC-C2及NSCLC-C1擴展中之個體經隨機分組進行治療。個體繼續接受治療，直至出現確定的疾病進展(PD)、開始替代的癌症療法、不可接受的毒性、撤回同意或其他中斷治療的原因。對所有個體的存活情況進行隨訪，直至研究結束(最後一名個體進入研究後2年或研究停止，以先發生者為準)。 劑量遞增階段

劑量遞增係由10種劑量水平之MEDI5752組成(劑量水平2.25、7.5、22.5、75、225、500、750、1500、2000及2500 mg)，其經由IV輸注投與。一旦確定OBD、MTD或HPDD，就可以按OBD、MTD或HPDD探索由多達6名腎小球濾過率(GFR)在30與45毫升/分鐘之間的個體構成的特定群組(亦即藥效學群組)。多達約111名個體入組劑量遞增階段。 劑量擴展階段

一旦在劑量遞增階段確定MTD、OBD或HPDD，就開始劑量擴展階段。在擴展群組中，僅未曾接受過免疫療法的符合條件的轉移性個體入組。

RCC及NSCLC擴展群組提供幾種劑量水平之MEDI5752在此等目標群體中的額外安全性、耐受性、功效、PK及PD資料。NSCLC群組亦評估了MEDI5752與卡鉑加培美曲塞及卡鉑加紫杉醇或奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇之組合。此外，在患有非鱗狀NSCLC之個體中，將MEDI5752與卡鉑加培美曲塞之組合與帕博利珠單抗與卡鉑加培美曲塞之組合的抗腫瘤活性進行比較。

RCC擴展群組(RCC-C1及RCC-C2)中之個體接受以下： ● 500 mg、750 mg及1500 mg之MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)；當兩個群組都開放時，500 mg及750 mg之個體按1:1之比例隨機分組。 ● MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)：單次初始劑量為750 mg、1000 mg、1250 mg或1500 mg，之後維持劑量為225 mg、500 mg、750 mg、1000 mg或1250 mg。

非鱗狀NSCLC擴展群組(NSCLC-C1)中之個體接受以下： ● 安全性導入(NSCLC-C1S)：2000 mg的MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)，組合了濃度-時間曲線下面積(AUC)為5 mg/mL⋅min之卡鉑及培美曲塞500 mg/m ²(Q3W)，遞送4次劑量，隨後無限期維持MEDI5752及培美曲塞維持療法Q3W。 ● 以1:1之比例隨機分組(NSCLC-C1R)，從而接受： A臂：1500 mg的MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)，組合了濃度-時間曲線下面積(AUC)為5 mg/mL⋅min之卡鉑及培美曲塞500 mg/m ²(Q3W)，遞送4次劑量，隨後無限期維持MEDI5752及培美曲塞維持療法Q3W；或 B臂：帕博利珠單抗200 mg加卡鉑AUC 5 mg/mL⋅min及培美曲塞500 mg/m ²Q3W遞送4次劑量，隨後帕博利珠單抗持續21個月(共24個月)及無限期培美曲塞維持療法Q3W。

非鱗狀NSCLC擴展群組(NSCLC-C2)中之個體接受： ● 500 mg或750 mg的MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)，組合了濃度-時間曲線下面積(AUC)為5 mg/mL⋅min之卡鉑及培美曲塞500 mg/m ²(Q3W)，遞送4次劑量，隨後無限期維持MEDI5752及培美曲塞維持療法Q3W。

鱗狀NSCLC擴展群組(NSCLC-C3)中之個體接受： ● 500 mg或750 mg的MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)，組合了卡鉑(AUC) 6 mg/mL⋅min Q3W及紫杉醇200 mg/m ²Q3W或在各3週週期之第1、8及15天奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇100 mg/m ²，4次劑量，隨後無限期MEDI5752維持療法Q3W。終點

劑量遞增階段之主要安全性終點係評定AE、SAE及DLT的存在以及在不超過MTD之情況下測定MEDI5752之MTD、OBD或HPDD。

RCC及非鱗狀NSCLC擴展群組之主要目標為評估MEDI5752單藥療法在RCC中以及MEDI5752+卡鉑+培美曲塞(對比帕博利珠單抗+卡鉑+培美曲塞在NSCLC-C1中)在非鱗狀NSCLC中的初步抗腫瘤活性。主要終點為OR，其通常用於腫瘤學研究，評估患有晚期實體腫瘤(包括RCC或NSCLC)之個體。鱗狀NSCLC擴展群組之主要目標為評估MEDI5752在與化學療法組合時在患有晚期實體腫瘤之個體中的安全性及耐受性。

次要終點包括安全性評估、額外的抗腫瘤活性、PK、免疫原性及生物標誌物評估。

將在已提供存檔或新鮮腫瘤活體組織切片的個體中評定PD-L1狀態。對於NSCLC擴展群組，定義PD-L1陽性為腫瘤細胞≥1%的基線PD-L1表現，及定義PD-L1陰性為腫瘤細胞＜1%的基線PD-L1表現。

結果

安全性資料

共有136名個體經MEDI5752治療。表5顯示截至資料快照日期，在所選擇的MEDI5752單藥療法及組合劑量水平中觀測到暴露及MEDI5752相關AE。表 5 截至 2023 年 1 月 25 日 ( 資料快照日期 ) ， MEDI5752 相關之不良事件

個體具有至少一種：	單藥療法	組合：
	全部 N=178	225 mg N=10	500 mg N=38	750 mg N=40	1500 mg N = 39	卡鉑及培美曲塞	卡鉑及紫杉烷
500 mg N=33	750 mg N=72	1500 mg N=20	750 mg N=18
暴露持續時間中位數(月)	3.50	3.12	5.42	3.79	3.48	2.99	4.14	4.16	2.00
暴露持續時間範圍(月)	0.5, 50.4	1.3, 50.4	0.7, 23.5	0.5, 18.6	0.5, 14.0	0.6, 6.2	0.3, 16.4	0.7, 25.0	0.7, 7.6
週期數中位數	4.00	4.00	7.50	5.00	4.00	4.00	5.50	4.50	3.00
週期範圍	1.0, 71.0	2.0, 71.0	1.0, 33.0	1.0, 27.0	1.0, 19.0	1.0, 9.0	1.0, 17.0	1.0, 33.0	1.0, 10.0
AE (全部級別)	89.3%	70%	86.8%	95%	94.9%	72.7%	80.6%	100%	77.8%
3級或4級AE	46.1%	10%	31.6%	55%	59%	18.2%	36.1%	70%	44.4%
SAE	34.8%	20%	18.4%	45%	43.6%	18.2%	23.6%	55%	16.7%
導致中斷的AE	38.8%	0	26.3%	40%	56.4%	9.1%	16.7%	75%	11.1%
AE，不良事件；N，數目；SAE，嚴重不良事件

表6提供了在RCC群組中觀測到的暴露及MEDI5752相關AE。表 6 截至 2023 年 1 月 25 日 ( 資料快照日期 ) ， RCC 群組中之不良事件

MEDI5752 不良事件概況	劑量探索 (n=19)	劑量擴展 1500 mg (n=27)	劑量擴展 750 mg (n=32)	劑量擴展 500 mg (n=33)
暴露之持續時間中位數，月(範圍)	2.14 (0.7-15.2)	3.91 (0.5-14.0)	5.52 (0.7-18.6)	5.06 (0.7-13.1)
導致IP中斷的TEAE，n (%)	11 (57.9)	20 (74.1)	15 (46.9)	9 (27.3)
任何級別之TRAE，n (%)	19 (100)	26 (96.3)	31 (96.9)	29 (87.9)
3級或4級TRAE，n (%)	13 (68.4)	20 (74.1)	19 (59.4)	10 (30.3)
由於TRAE導致的死亡，n (%)	1 (5.3) ^‡	1 (3.7) ^†	0	0

表 7 截至 2023 年 1 月 25 日 ( 資料快照日期 ) ， NSCLC 群組中之不良事件

MEDI5752 不良事件概況	非鱗狀		鱗狀
經隨機分組之群組(N=41)		單臂群組		單臂群組		單臂群組
MEDI5752 1500 mg + CTx (n=20)		帕博利珠單抗+ CTx (n=21)		MEDI5752 750 mg + CTx (n=72)		MEDI5752 500 mg + CTx (n=33)		MEDI5752 750 mg + CTx (n=18)
暴露於MEDI5752的持續時間中位數，週期(範圍)	4.5 (1-33)		NA		5.5 (1-17)		4.0 (1-9)		3.0 (1-10)
任一種TEAE，n (%)	20 (100.0)		21 (100.0)		69 (95.8)		30 (90.9)		17 (94.4)
導致IP中斷的TEAE，n (%)	15 (75)		6 (28.6)		26 (36.1)		4 (12.1)		3 (16.7)
任何級別之TRAE，n (%)*	20 (100.0)		21 (100.0)		68 (94.4)		27 (81.8)		17 (94.4)
3級或4級TRAE，n (%)*	16 (80.0)		13 (61.9)		47 (65.3)		15 (45.5)		13 (72.2)
由於TRAE導致的死亡，n (%)*	0		1 (4.8)†		4 (5.6)‡		1 (3)^		1 (5.6)^^

*與MEDI5752、帕博利珠單抗及/或CTx相關。 ^†一名經帕博利珠單抗+ CTx治療之患者死於發熱性嗜中性白血球減少症。 ^‡一名經MEDI5752 750 mg + CTx治療之患者死於肺炎，兩名死於發熱性嗜中性白血球減少症及一名死於敗血性休克。 ^一名經MEDI5752 500 mg + CTx治療之患者死於發熱性嗜中性白血球減少症。 ^^一名經MEDI5752 750 mg + CTx治療之患者死於呼吸源性敗血症。

在2000 mg (同一個體之3級肺炎及1級心肌炎)及2500 mg (3級斑丘疹)單藥療法群組中，各有一名個體報導劑量限制性毒性(DLT)。兩例死亡經判定與MEDI5752治療有關；一名個體死於糖尿病酮酸症及甲狀腺高能症，而另一名個體死於心肌梗塞。

對經MEDI5752治療之個體的益處-風險概況的審查表明，由於治療中斷率較高(主要由3/4級肝毒性驅動)，1500 mg及以上劑量之長期給藥不適合進一步發展。 功效資料

在劑量遞增及最大耐受劑量(MTD)/最佳生物劑量(OBD)群組的86名MEDI5752單藥療法個體中，無論劑量如何，在反應可評估分析集中，總客觀反應率(ORR)(根據實體腫瘤反應評估準則[RECIST]版本[v]1.1)為19.8% (17/86)，有1例完全反應(CR)。在劑量遞增期間經500 mg MEDI5752治療的5名個體中，2名個體具有部分反應(PR)之最佳總體反應(BOR)，2名個體具有疾病穩定(SD)，及1名個體具有疾病進展(PD)。在劑量遞增期間經750 mg MEDI5752治療的8名個體中，4名個體具有SD之BOR，3名個體具有PD，及1名個體不可評估。MEDI5752單藥療法之反應持續時間中位數為17.5個月(圖9)。在MEDI5752劑量範圍內，MEDI5752單藥療法亦顯示出對不同的未曾接受過IO治療之腫瘤的持久反應(圖10)。

在非小細胞肺癌(NSCLC)擴展群組(NSCLC-C1R)中，MEDI5752 1500 mg+卡鉑/培美曲塞臂之ORR為50.0% (10/20)，而帕博利珠單抗+卡鉑/培美曲塞臂之ORR為47.6% (10/21)。表8提供此群組的功效資料。亦參見圖14。表 8 截至 2023 年 1 月 25 日 ( 資料快照日期 ) ， MEDI5752 1500 mg + 卡鉑 / 培美曲塞 臂 相對於 帕博利珠單抗 + 卡鉑 / 培美曲塞 臂在 一線非鱗狀 NSCLC 中的功效

一線非鱗狀 NSCLC	MEDI5752 1500 mg + 卡鉑/ 培美曲塞 (n=20)	帕博利珠單抗 + 卡鉑/ 培美曲塞 (n=21)
隨訪中位數，月(範圍)	20.1 (0.8-32.5)	14.5 (1.6-34.3)
ORR, n (%)	10 (50.0)	10 (47.6)
疾病控制率，n (%)	17 (85.0)	20 (95.2)
DOR中位數，月(95% CI)	20.5 (4.1-NE)	9.9 (2.8-NE)
PFS中位數，月	15.1	8.9
OS中位數，月	25.3	16.5
ORR，PD-L1＜1%，n/N (%) (95% CI)	5/9 (55.6)	3/10 (30.0)
PFS中位數，PD-L1＜1%，月	13.4	9

NE，不可估計

在非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)擴展群組(NSCLC-C2)中，在經MEDI5752 750 mg +卡鉑/培美曲塞臂治療之首批66名個體中，反應可評估的群體之ORR為45.5% (30/66)。在PD-L1＜1%之子組中，ORR為50% (24/48)。隨訪持續時間中位數為7.2個月(範圍，0.3-16.4個月) (圖15B)。

在非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)擴展群組(NSCLC-C2)中，在經MEDI5752 500 mg +卡鉑/培美曲塞臂治療之個體中，反應可評估的群體之ORR為25% (8/32)，而CR+PR+未確認之PR的初步反應為34.4% (11/32)。隨訪持續時間中位數為3.3個月(範圍，0.6-6.5個月) (圖15B)。

在鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)擴展群組(NSCLC-C2)中，在經MEDI5752 750 mg +卡鉑/培美曲塞臂治療之個體中，反應可評估的群體之ORR為22.2% (4/18)，CR+PR+未確認之PR的初步反應為55.6% (10/18)。隨訪持續時間中位數為2.8個月(範圍，0.7-7.6個月) (圖15C)。

在接受MEDI5752 1500 mg之腎細胞癌(RCC)擴展群組中(RCC-C1)，ORR為38.5% (10/26)，有2例CR。此外，一線RCC個體之ORR為58.3% (7/12) (圖12)。此外，發現一線RCC群組之反應係持久的(圖13)。500 mg及750 mg之功效呈現於表9 (圖12)。表 9截至2023年1月25日(資料快照日期)，MEDI5752 750 mg及500 mg在一線RCC中之功效。

一線腎細胞癌( 有透明細胞組分)	MEDI5752 500 mg (n=33)	MEDI5752 750 mg (n=32)
隨訪中位數，月(範圍)	8.6 (1.6-14.7)	15.9 (2.2-20.4)
ORR, n (%)	15 (45.5)	15 (46.9)
CR	2 (6.1)	3 (9.4)
疾病控制率，n (%)	23 (69.7)	28 (87.5)
ORR，IMDC：中等/較差，n/N (%)	8/21 (38.1)	13/24 (54.2)
CR	0	2 (8.3)
ORR，IMDC：良好，n/N (%)	7/12 (58.3)	2/8 (25)
CR	2 (16.7)	1 (12.5)

MEDI5752 藥物動力學 / 藥效學資料

資料表明，MEDI5752表現出非線性PK，此可能係由於劑量＜22.5 mg時目標介導之清除達到飽和，且另外可能潛在地係由於ADA對MEDI5752清除的影響。圖4顯示前84天平均MEDI5752 PK曲線。

藥效學資料表明，MEDI5752導致CD4+T細胞增殖之劑量依賴性增加，在500/750 mg及以上時趨於平穩(圖5及圖7A)。在＞225 mg之劑量時，MEDI5752展現持續的周邊PD-1受體佔用率(＞90%) (圖6)。單藥療法設置中之藥效學資料亦表明，MEDI5752導致CD4+T細胞活化之劑量依賴性增加，及T細胞擴展在500/750 mg及以上時趨於平穩(分別為圖7B及圖8A-圖8B)。化學療法組合設置中之藥效學資料顯示，與帕博利珠單抗與化學療法之組合相比，750 mg及1500 mg劑量的MEDI5752與化學療法之組合在第1週期第8天時CD4+ T細胞增殖增加較高，及在第2週期時新擴增的T細胞系比例較高(分別為圖7C及圖8C)。 6.2 實例2：MEDI5752與阿昔替尼之組合在患有晚期腎細胞癌之個體中的1b期臨床評估

在一項1b期、多中心、開放標籤、劑量探索及劑量擴展研究中評定MEDI5752，以評估MEDI5752與阿昔替尼及樂伐替尼之組合在先前未經治療之晚期RCC個體中的安全性、耐受性、PK、免疫原性及抗腫瘤活性。

該研究包括劑量探索階段，隨後係劑量擴展階段。劑量探索階段評估了多達2種計劃之劑量水平的MEDI5752與阿昔替尼的組合(A部分)以及多達3種以上額外的計劃之劑量水平的MEDI5752與樂伐替尼的組合(B部分)之安全性及耐受性。2種劑量水平的MEDI5752與阿昔替尼的組合在各有1名個體入組後關閉。因此，僅確定MEDI5752與樂伐替尼的組合的推薦2期劑量(RP2D)。RP2D將藉由評定在劑量探索階段中評估之最大耐受劑量(MTD)以及MEDI5752項目其他部分之全部臨床資料來測定。各劑量群組入組多達9名個體。若基於新出現的PK/藥效學及臨床資料探索另外的群組、治療方案或劑量，則可能需要另外的個體。一旦在劑量探索階段測定MEDI5752與樂伐替尼的組合的MTD或MAD，在劑量擴展階段中入組多達50名個體。 目標個體群體

個體年齡≥18歲，經組織學或細胞學證實為晚期RCC，有透明細胞組分，先前尚未經治療。 治療組及療法

多達約70名個體在2個階段入組，且經分配以如下詳述進行研究治療。 劑量探索階段劑量探索階段，A部分(MEDI5752+阿昔替尼)包括以下2種計劃之劑量水平： ● 劑量水平1 (起始劑量；n=多達9名個體)(在1名個體入組後關閉)： ○ 阿昔替尼5 mg PO BID (導入：第-7天至第-1天) ○ MEDI5752 1500 mg靜脈內(IV)，每3週(Q3W)，及阿昔替尼5 mg PO BID (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) ● 劑量水平-1 (遞減劑量；n=多達9名個體)(在1名個體入組後關閉) ○ 阿昔替尼5 mg PO BID (導入：第-7天至第-1天) ○ MEDI5752 750 mg IV Q3W及阿昔替尼5 mg PO BID (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) 劑量探索階段，B部分(MEDI5752 + 樂伐替尼)包括以下3個計劃之劑量水平： ● 劑量水平-3 LEN (起始劑量；n=多達9名個體) ○ MEDI5752 500 mg IV Q3W及樂伐替尼14 mg PO QD (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) ● 劑量水平-2 LEN (LEN劑量遞增；n=多達9名個體) ○ MEDI5752 500 mg IV Q3W及樂伐替尼18 mg PO QD (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) ● 劑量水平-1 LEN (MEDI5752劑量遞增，LEN遞減[必要時]；n=多達9名個體) ○ MEDI5752 750 mg IV Q3W及樂伐替尼(14 mg或18 mg；經由前兩種劑量水平知曉劑量) PO QD (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) ● 額外的劑量水平 ○ MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)：單次初始劑量為750 mg、1000 mg、1250 mg或1500 mg，隨後維持劑量為225 mg、500 mg、750 mg、1000 mg或1250 mg，及樂伐替尼(10 mg、14 mg或18 mg) PO QD (自第1週期、第2週期或第3週期之第1天開始) ○ MEDI5752 Q3W，經由IV輸注，歷時60分鐘(±10分鐘)：500 mg或750 mg，及樂伐替尼(10 mg) PO QD (自第1週期之第1天開始) 劑量擴展階段 ：● MEDI5752 IV Q3W及樂伐替尼PO QD (在第1天[亦即，第1週期第1天]開始)，以在劑量探索階段中確定的組合劑量投與(在第1天[亦即，第1週期第1天]開始) (n=多達50名個體)

個體接受MEDI5752與阿昔替尼或樂伐替尼之組合，直至出現疾病進展、開始替代的癌症療法、不可接受的毒性、撤回同意或其他中斷治療的原因。對個體的存活情況進行隨訪，直至研究結束，研究結束定義為最後一名個體進入研究後約3年，除非研究在彼時間之前結束。 研究終點

安全性：AE/SAE發生率、劑量限制性毒性、導致治療中斷的AE、異常實驗室參數、生命體征、ECG結果。

功效：RECIST v1.1將用於評定中期分析中之反應可評估的群體以及最終分析中之接受治療的群體的BOR、ORR、DCR、DoR及TTR。PFS(根據RECIST v1.1)。

藥物動力學：MEDI5752在血清中之濃度

免疫原性：針對MEDI5752之ADA的發生率。

圖1A-圖1D為MEDI5752之首次用於人體(first-in-human)之劑量遞增(圖1A)及劑量擴展(圖1B-圖1D)研究的流程圖。

圖2顯示IV輸注MEDI5752 Q3W後預測的MEDI5752濃度-時間曲線與投影的PD1的EC ₂₀、EC ₅₀及EC ₉₀。

圖3顯示IV輸注MEDI5752 Q3W後預測的MEDI5752濃度-時間曲線與投影的CTLA-4的EC ₂₀及EC ₉₀以及PD-1的EC ₂₀及EC ₉₀。

圖4顯示IV輸注MEDI5752 Q3W後的平均MEDI5752藥物動力學曲線。

圖5顯示在MEDI5752治療後的暴露(C _谷值)對比CD4 T細胞增殖。

圖6顯示在MEDI5752後藉由流式細胞分析技術縱向量測的CD4 T細胞上游離PD1之百分比(PD1受體佔有率)。

圖7A至圖7C顯示在MEDI5752作為單藥療法或與化學療法組合後藉由流式細胞分析技術量測的周邊血液T細胞增殖(CD4+ Ki67+)(圖7A)及(圖7C)以及T細胞活化(CD4T細胞上之ICOS表現)(圖7B)。

圖8A至圖8C顯示在MEDI5752作為單藥療法或與化學療法組合後藉由T細胞受體定序(TCRseq)量測的擴增的T細胞系之總量(圖8A)與新擴增的T細胞系的比例(圖8B及圖8C)。

圖9顯示不同劑量之MEDI5752單藥療法的反應持續時間中位數。

圖10顯示MEDI5752劑量範圍中的不同未曾接受過IO治療之腫瘤的MEDI5752單藥療法的客觀反應。

圖11顯示750 mg之功效類似於1500 mg的MEDI5752單藥療法。

圖12顯示經1,500 mg Q3W (上)、750 mg Q3W (中)及500 mg Q3W (下)的MEDI5752治療之一線腎細胞癌群組的反應。

圖13顯示了750 mg及1500 mg MEDI5752單藥療法的一線RCC群組相對於基線之變化(%)以及以1500mg治療的一線RCC者的反應持續時間中位數及PFS中位數。

圖14顯示與經帕博利珠單抗(pembolizumab)及化學療法治療之患者相比，經MEDI5752 1,500 mg及化學療法治療之患者的無進展存活期(PFS)。MEDI5752治療使20名個體(11個事件)的PFS中位數為15.1個月。帕博利珠單抗使21名個體(16個事件)的PFS中位數為8.9個月。

圖15A顯示在PD-L1＜1%、PD-L1 1-49%、PD-L1＞50%及PD-L1不可評估的NSCLC患者中用MEDI5752 750 mg及化學療法治療的功效的瀑布圖。圖15B顯示治療非鱗狀NSCLC-群組2的功效瀑布圖，其中個體經500mg MEDI5752+卡鉑/培美曲塞及750 mg MEDI5752+卡鉑/培美曲塞治療。圖15C顯示鱗狀NSCLC擴增群組2的瀑布圖，患者經750 mg MEDI5752+卡鉑/培美曲塞治療。

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Claims

一種治療個體之腎細胞癌(RCC)的方法，該方法包含向該個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。
一種抑制個體之腎細胞癌(RCC)腫瘤生長的方法，該方法包含向該個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項1或2之方法，其包含投與約500 mg或約750 mg的該雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項1至3中任一項之方法，其進一步包含投與一或多種酪胺酸激酶抑制劑。
如請求項1至4中任一項之方法，其進一步包含投與該酪胺酸激酶抑制劑阿昔替尼(axitinib)或樂伐替尼(lenvatinib)。
如請求項5之方法，其中在投與該雙特異性抗體或其抗原結合片段之前，自第-7天至第-1天，以5 mg之劑量每日兩次經口投予該阿昔替尼。
如請求項6之方法，其中在第1天投與該雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項1至7中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每個治療週期投與一次。
如請求項8之方法，其中該治療週期為三週。
如請求項4至9中任一項之方法，其進一步包含該雙特異性抗體或其抗原結合片段及/或一或多個劑量之該等化學治療劑之維持給藥。
一種治療個體之非小細胞肺癌(NSCLC)的方法，該方法包含向該個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。
一種抑制個體之非小細胞肺腫瘤生長的方法，該方法包含向該個體投與約250 mg至約1500 mg的特異性結合計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項11或12之方法，其包含投與約500 mg或約750 mg的該雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項11至13中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段每個治療週期投與一次。
如請求項14之方法，其中該治療週期為三週。
如請求項11至15中任一項之方法，其進一步包含投與一或多種化學治療劑。
如請求項11至16中任一項之方法，其中該NSCLC或非小細胞肺腫瘤為非鱗狀細胞肺癌。
如請求項11至16中任一項之方法，其中該NSCLC或非小細胞肺腫瘤為鱗狀細胞肺癌。
如請求項11至17中任一項之方法，其中該一或多種化學治療劑選自由卡鉑(carboplatin)、培美曲塞(pemetrexed)及其組合組成之群。
如請求項19之方法，其中該一或多種化學治療劑為卡鉑及培美曲塞。
如請求項16之方法，其中該NSCLC或非小細胞肺腫瘤為非鱗狀細胞肺癌且其中該一或多種化學治療劑為卡鉑及培美曲塞。
如請求項11至16及19中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段以500 mg或750 mg之劑量每三週投與，且該卡鉑以AUC 6 mg/mL⋅min或AUC 5 mg/mL⋅min之劑量每三週投與。
如請求項20之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段以約2000 mg之劑量投與，該卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且該培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與。
如請求項20之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段以約1500 mg之劑量投與，該卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且該培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與，每三週持續4次給藥，之後係每三週該雙特異性抗體或其抗原結合片段及每三週培美曲塞之維持給藥。
如請求項20之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段以約500 mg或約750 mg之劑量投與，該卡鉑以AUC 5 mg/mL⋅min之劑量投與且該培美曲塞以500 mg/m ²之劑量投與，每三週持續4次給藥，之後係每三週該雙特異性抗體或其抗原結合片段之維持給藥及每三週該培美曲塞之維持給藥。
如請求項11至16及18中任一項之方法，其中該一或多種化學治療劑選自由卡鉑、紫杉醇(paclitaxel)、奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇(Nab-paclitaxel)及其組合組成之群。
如請求項26之方法，其中該一或多種化學治療劑為卡鉑及紫杉醇。
如請求項26之方法，其中該一或多種化學治療劑為卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇。
如請求項16之方法，其中該NSCLC或非小細胞肺腫瘤為鱗狀細胞肺癌且其中該一或多種化學治療劑為卡鉑及奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇。
如請求項27之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，該卡鉑每三週以AUC 6 mg/mL⋅min之劑量投與且該紫杉醇每三週以200 mg/m ²之劑量投與。
如請求項28之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段每三週以500 mg或750 mg之劑量投與，該卡鉑每三週以AUC 6 mg/mL⋅min之劑量投與，且該奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇在各3週週期之第1、8及15天以100 mg/m ²體表面積(BSA)之劑量投與。
如請求項1至31中任一項之方法，其中投藥進行四個3週週期。
如請求項4至10及16至32中任一項之方法，其進一步包含該雙特異性抗體或其抗原結合片段及/或該一或多種化學治療劑之維持給藥。
如請求項1至33中任一項之方法，其中該個體為人。
如請求項1至34中任一項之方法，其中該個體有晚期實體腫瘤。
如請求項1至35中任一項之方法，其中該投藥引起目標病變消失及/或總數減少。
如請求項1至36中任一項之方法，其中該目標病變消失及/或總數減少藉由分析腫瘤活體組織切片樣品所確定。
如請求項37之方法，其中該樣品為新鮮樣品或福馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品。
如請求項36或37中任一項之方法，其中該樣品藉由以下方法分析：RT-PCR、原位雜交、核糖核酸酶保護、基於RT-PCR之分析法、免疫組織化學(IHC)、酶聯免疫吸附分析法、活體內成像或流式細胞分析技術。
如請求項1至39中任一項之方法，其中該雙特異性抗體結合至食蟹獼猴PD-1及CTLA-4。
如請求項1至40中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段結合至人類PD-1及CTLA-4。
如請求項1至41中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段為人源化雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如請求項1至42中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段係單價的。
如請求項1至43中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段為DuetMab。
如請求項1至44中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或抗原結合片段包含IgG重鏈恆定區。
如請求項45之方法，其中該恆定區包括L234F、L235E及P331S處之突變。
如請求項45或46之方法，其中該恆定區包含杵突變及臼突變，視情況其中該杵突變在包含結合至CTLA-4的可變區的重鏈中，及該臼突變在包含結合至PD-1的可變區的重鏈中。
如請求項45至47中任一項之方法，其中該IgG重鏈恆定區為IgG1重鏈恆定區。
如請求項1至48中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段包含MEDI5752序列之抗PD-1及抗CTLA-4重鏈可變區(VH) CDR1、VH CDR2、VH CDR3，輕鏈可變區(VL) CDR1、VL CDR2及VL CDR3。
如請求項1至49中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段包含： (a)包含SEQ ID NO:8之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:9之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列之VL CDR3；及 (b)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之VL CDR3。
如請求項1至50中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段包含： (a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及 (b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。
如請求項1至51中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段為全長抗體。
如請求項1至52中任一項之方法，其中該雙特異性抗體為MEDI5752。
如請求項1至50中任一項之方法，其中該雙特異性抗體或其抗原結合片段為抗原結合片段。
如請求項54之方法，其中該抗原結合片段包含Fab、Fab'、F(ab')2、單鏈Fv (scFv)、二硫鍵連接之Fv、V-NAR域、IgNar、胞內抗體、雙特異性胞內抗體、IgGΔCH2、微型抗體、F(ab')3、四功能抗體、三功能抗體、雙功能抗體、單域抗體、DVD-Ig、Fcab、mAb2、(scFv)2或scFv-Fc。
一種治療個體之晚期腎細胞癌的方法，該方法包含每三週向該個體投與約750 mg的雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。
一種治療個體之晚期腎細胞癌的方法，該方法包含每三週向該個體投與約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。
一種治療個體之非小細胞肺癌的方法，該方法包含向該個體投與(1)每三週約750 mg或約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈；(2)每三週劑量為AUC 5 mg/mL⋅min的卡鉑，持續4個週期；及(3)每三週劑量為500 mg/m ²的培美曲塞，持續週期，之後係該雙特異性抗體及培美曲塞之維持給藥。
一種治療個體之非小細胞肺癌的方法，該方法包含向該個體投與： (1)每三週約750 mg或約500 mg雙特異性抗體，該雙特異性抗體特異性結合至PD-1及CTLA-4，且包含：(a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及(b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈；及 (2)每三週劑量為AUC 6 mg/mL⋅min的卡鉑；及 (3)每三週劑量為200 mg/m ²的紫杉醇，或 (4)在每三週週期之第1、8及15天，劑量為100 mg/m ²體表面積(BSA)之奈米粒子白蛋白結合型紫杉醇，及 (5)該雙特異性抗體之維持給藥。
如前述請求項中任一項之方法，其中該非小細胞肺癌及/或該腎細胞癌包含約≥50%的表現PD-L1的腫瘤細胞。
如前述請求項中任一項之方法，其中該非小細胞肺癌及/或該腎細胞癌包含約1至49%的表現PD-L1的腫瘤細胞。
如前述請求項中任一項之方法，其中該非小細胞肺癌及/或該腎細胞癌包含約＜1%的表現PD-L1的腫瘤細胞。
如前述請求項中任一項之方法，其中該非小細胞肺癌及/或該腎細胞癌包含約0%的表現PD-L1的腫瘤細胞。
一種在有需要的個體中擴增T細胞的方法，其包含投與特異性結合至計劃性細胞死亡-1 (PD-1)及細胞毒性T淋巴球相關抗原-4 (CTLA-4)的雙特異性抗體或其抗原結合片段，該抗體包含： (a)包含SEQ ID NO:8之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:9之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:7之胺基酸序列之VL CDR3；及 (b)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之VH CDR1、包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之VH CDR2、包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之VH CDR3、包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之VL CDR1、包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之VL CDR2及包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之VL CDR3。
如請求項64之方法，其中該雙特異性抗體包含： (a)包含SEQ ID NO:2中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的輕鏈；及 (b)包含SEQ ID NO:4中所示之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO:3中所示之胺基酸序列的輕鏈。
如請求項64或65之方法，其中該雙特異性抗體以約225 mg至約1,500 mg之劑量投與。
請求項64至66中任一項之方法，其中該雙特異性抗體以約750 mg Q3W之劑量投與。
如請求項66之方法，其中每三週投與該雙特異性抗體。
如請求項64至68中任一項之方法，其中該個體患有非小細胞肺癌或腎細胞癌。
如請求項64至69中任一項之方法，其中新擴增的T細胞系之比例與投藥前的T細胞系數目相比高約50%、約60%、約70%或約75%。
如請求項64至70中任一項之方法，其中該雙特異性抗體為MEDI5752。