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TW202136254A - 可作為t細胞活化劑之經取代雙環化合物 - Google Patents

可作為t細胞活化劑之經取代雙環化合物 Download PDF

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TW202136254A TW109145532A TW109145532A TW202136254A TW 202136254 A TW202136254 A TW 202136254A TW 109145532 A TW109145532 A TW 109145532A TW 109145532 A TW109145532 A TW 109145532A TW 202136254 A TW202136254 A TW 202136254A
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賈亞庫瑪 聖卡拉 沃利爾
路易斯 查帕克
丹妮絲 格恩菲爾德
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Abstract

本發明揭示式(I)化合物：
Figure 109145532-A0101-11-0001-1
或其鹽，其中：X為CR6 或N；Y為CR3 或N；R1 、R2 、R3 、R4 、R5 、R6 、R7 及m在本文中定義。本發明亦揭示使用此類化合物抑制二醯基甘油激酶α (diacylglycerol kinase alpha；DGKα)及二醯基甘油激酶ξ (diacylglycerol kinase zeta；DGKζ)中之一或兩者之活性的方法，及包含此類化合物之醫藥組合物。此等化合物可用於治療病毒感染及增殖性病症，諸如癌症。

Description

可作為T細胞活化劑之經取代雙環化合物
本發明大體上係關於活化T細胞、促進T細胞增殖及/或呈現抗腫瘤活性之經取代雙環化合物。本文提供經取代雙環化合物、包含此類化合物之組合物及其使用方法。本發明進一步關於包含至少一種根據本發明之化合物的醫藥組合物，其可用於治療諸如癌症之增殖性病症，及病毒感染。
人類癌症具有許多基因改變及表觀遺傳改變，其產生可被免疫系統潛在識別之新抗原(Sjoblom等人, (2006)Science 314:268-74)。由T及B淋巴球構成之適應性免疫系統具有強大的抗癌潛能，對不同腫瘤抗原作出反應的能力廣泛且特異性敏銳。另外，免疫系統展現相當大的可塑性及記憶分量。成功駕馭適應性免疫系統之所有此等特性將使得免疫療法在所有癌症治療模式當中成為獨一無二的。然而，儘管在臨床前模型及患者中觀測到針對癌症之內源免疫反應，但此反應的效率低，且已建立之癌症被免疫系統視為「自體」且被容忍。腫瘤可以利用若干不同機制主動地破壞抗腫瘤免疫，促進此容忍狀態。此等機制包括功能異常T細胞信號傳導(Mizoguchi等人, (1992)Science 258:1795-98)、抑制性調控細胞(Facciabene等人, (2012)Cancer Res. 72:2162-71)，及拉攏內源「免疫檢查點」，此用於下調適應性免疫反應強度且保護正常組織以防腫瘤躲避免疫摧毀而帶來的間接傷害(Topalian等人, (2012)Curr. Opin. Immunol. 24:1-6；Mellman等人(2011)Nature 480:480-489)。
二醯基甘油激酶(Diacylglycerol kinase；DGK)為脂質激酶，其介導二醯基甘油轉化為磷脂酸，藉此終止經由TCR信號傳導路徑傳播的T細胞功能。因此，DGK充當細胞內檢查點且預計抑制DGK可增強T細胞信號傳導途徑及T細胞活化。支援證據包括DGKα或DGKζ之基因剔除小鼠模型，其顯示高應答性T細胞表型且改良抗腫瘤免疫活性(Riese M.J.等人,Journal of Biological Chemistry , (2011) 7: 5254-5265；Zha Y等人,Nature Immunology , (2006) 12:1343；Olenchock B.A.等人, (2006) 11: 1174-81)。此外，觀測到自人類腎細胞癌患者分離之腫瘤浸潤性淋巴球過度表現DGKα，此造成T細胞功能抑制(Prinz, P.U.等人,J Immunology (2012) 12:5990-6000)。因此，DGKα及DGKζ視為癌症免疫療法之目標(Riese M.J.等人,Front Cell Dev Biol. (2016) 4: 108；Chen, S.S.等人,Front Cell Dev Biol. (2016) 4: 130；Avila-Flores, A.等人,Immunology and Cell Biology (2017) 95: 549-563；Noessner, E.,Front Cell Dev Biol. (2017) 5: 16；Krishna, S.,等人,Front Immunology (2013) 4:178；Jing, W.等人,Cancer Research (2017) 77: 5676-5686)。
仍需要適用作DGKα及DGKζ中之一或兩者之抑制劑的化合物。另外，仍需要適用作DGKα與DGKζ中之一或兩者之抑制劑的化合物，該等化合物對DGKα及DGKζ的選擇性超過其他二醯基甘油激酶、蛋白激酶及/或其他脂質激酶。
因此，在恢復T細胞活化、降低抗原臨限值、增強抗腫瘤功能及/或克服一或多種內源免疫檢查點(諸如PD-1、LAG-3及TGFβ)之抑制效果方面安全且有效的藥劑對於治療患有增殖性病症(諸如癌症)以及病毒感染之患者而言將具有重要的相加作用。
申請人已發現具有DGKα及DGKζ中之一或兩者之抑制劑活性的化合物。另外，申請人已發現具有DGKα及DGKζ中之一或兩者之抑制劑活性且選擇性超過其他二醯基甘油激酶、蛋白激酶及/或其他脂質激酶的化合物。提供此等化合物，其適用作具有對於其可用藥性重要之所需穩定性、生物可用性、治療指數及毒性值之藥品。
本發明提供經取代雙環式(I)化合物，其適用作DGKα、DGKζ或DGKα及DGKζ兩者之抑制劑，包含其鹽及前藥。
本發明亦提供醫藥組合物，其包含式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽；及醫藥學上可接受之載劑。
本發明亦提供一種治療與DGKα、DGKζ或DGKα及DGKζ兩者之活性有關之疾病或病症的方法，該方法包含向哺乳動物患者投與式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明亦提供用於製備式(I)化合物及/或其鹽之方法及中間物。
本發明亦提供一種供療法中使用的式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明亦提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用於治療增殖性病症(諸如癌症)及病毒感染的藥劑。
式(I)化合物及包含式(I)化合物的組合物可以用於治療、預防或治癒病毒感染及各種增殖性病症，諸如癌症。包含此等化合物之醫藥組合物在多個治療領域中可用於治療、預防或減緩疾病或病症(諸如病毒感染及癌症)進展。
本發明之此等及其他特徵將隨繼續揭示而以擴展形式闡述。
交叉引用 本申請案主張2019年12月23日申請之印度臨時申請案第201911053552號之權益，該案以其全文併入本文中。
本發明之第一態樣提供至少一種式(I)之化合物：
Figure 02_image005
或其鹽，其中： X為CR6 或N； Y為CR3 或N； L為-O-、-S-、-S(O)2 -、-NR4c -或-NR4d C(O)-； R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n Re 或-P(O)Re Re ； 各R1a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-OCH3 或-NRa Ra ； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； 各Re 獨立地為經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基或C1-3 烷基； R2 為H、經零至4個R2a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R2a 取代之C2-3 烯基或經零至4個R2a 取代之C3-4 環烷基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、C3-4 環烷基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-3 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、C3-4 氟環烷基、-NO2 或經零至2個R3a 取代之吡啶基； 各R3a 為鹵基、-CN、C1-3 烷基或C1-3 烷氧基； R4 為R4a 、-CH2 R4a 或-CH2 CH2 R4a ； R4a 為C3-6 環烷基、C5-14 雜環基、C6-10 芳基或C5-14 雜芳基，各自經零至4個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-3 氟烷基、C1-4 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-4 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-3 氟烷氧基、-O(CH)1-3 NRc Rc 、-OCH2 CH=CH2 、-OCH2 C≡CH、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-4 烷基)、-C(O)N(C1-4 烷基)2 、-NRc Rc 、-NRa S(O)2 (C1-3 烷基)、-NRa C(O)(C1-3 烷基)、-NRa C(O)O(C1-4 烷基)、-P(O)(C1-3 烷基)2 、-S(O)2 (C1-3 烷基)、-O(CH2 )1-2 (C3-6 環烷基)、-O(CH2 )1-2 (𠰌啉基)、C3-6 環烷基、氰基環丙基、甲基吖呾基、乙醯基吖呾基、三唑基、四氫哌喃基、𠰌啉基、苯硫基、甲基哌啶基或-CRc Rc (苯基)； 各Rc 獨立地為H或C1-2 烷基； R4c 為H、C1-6 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-6 烷基； 各R5 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-6 烷基、經零至4個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-4 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-4 炔基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基)、經零至4個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至4個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-O(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)，或與同一碳原子連接之兩個R5 形成=O； 各Rg 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、C1-3 烷氧基、C1-3 氟烷氧基、-O(CH2 )1-2 O(C1-2 烷基)、C3-5 環烷基或-NRc Rc ； 各R6 為H、F、Cl、-CN、-CH3 、-CH2 F、-CHF2 、-CF3 或-OCH3 ； R7 為H或-CH3 ； m為零、1、2或3；及 n為零、1或2。
本發明之第二態樣提供至少一種式(I)化合物：
Figure 02_image007
或其鹽，其中： X為CR6 或N； Y為CR3 或N； L為-O-、-S-、-S(O)2 -、-NR4c -或-NR4d C(O)-； R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n Re 或-P(O)Re Re ； 各R1a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-OCH3 或-NRa Ra ； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； 各Re 獨立地為經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基或C1-3 烷基； R2 為H、經零至4個R2a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R2a 取代之C2-3 烯基或經零至4個R2a 取代之C3-4 環烷基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、C3-4 環烷基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-3 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、C3-4 氟環烷基、-NO2 或經零至2個R3a 取代之吡啶基； 各R3a 為鹵基、-CN、C1-3 烷基或C1-3 烷氧基； R4 為R4a 、-CH2 R4a 或-CH2 CH2 R4a ； R4a 為C3-6 環烷基、C5-14 雜環基、C6-10 芳基或C5-14 雜芳基，各自經零至4個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-3 氟烷基、C1-4 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-4 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-3 氟烷氧基、-O(CH)1-3 NRc Rc 、-OCH2 CH=CH2 、-OCH2 C≡CH、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-4 烷基)、-C(O)N(C1-4 烷基)2 、-NRc Rc 、-NRa S(O)2 (C1-3 烷基)、-NRa C(O)(C1-3 烷基)、-NRa C(O)O(C1-4 烷基)、-P(O)(C1-3 烷基)2 、-S(O)2 (C1-3 烷基)、-O(CH2 )1-2 (C3-6 環烷基)、-O(CH2 )1-2 (𠰌啉基)、C3-6 環烷基、氰基環丙基、甲基吖呾基、乙醯基吖呾基、三唑基、四氫哌喃基、𠰌啉基、苯硫基、甲基哌啶基或-CRc Rc (苯基)； 各Rc 獨立地為H或C1-2 烷基； R4c 為H、C1-6 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-6 烷基； 各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-6 烷基、經零至4個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-4 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-4 炔基、經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基、經零至4個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至4個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)； 各Rg 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、C1-3 烷氧基、C1-3 氟烷氧基、-O(CH2 )1-2 O(C1-2 烷基)、C3-5 環烷基或-NRc Rc ； 各R6 為H、F、Cl、-CN、-CH3 、-CH2 F、-CHF2 、-CF3 或-OCH3 ； R7 為H或-CH3 ； m為零、1、2或3；及 n為零、1或2。
在一個實施例中，提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 ；及Y為CR3 或N。此實施例之化合物具有式(II)之結構：
Figure 02_image009
。
在一個實施例中，提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；及Y為CR3 。此實施例之化合物具有式(III)之結構：
Figure 02_image011
。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 及Y為CR3 。此實施例之化合物具有式(IV)之結構：
Figure 02_image013
。
此實施例中包括如下的化合物，其中L為O。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為CH。另外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R6 為H。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為N及Y為CR3 。此實施例之化合物具有式(V)之結構：
Figure 02_image015
。
此實施例中包括如下的化合物，其中L為O。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R6 為H。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 及Y為N。此實施例之化合物具有式(VI)之結構：
Figure 02_image017
。
此實施例中包括如下的化合物，其中L為O。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為CH。另外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R6 為H。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為N及Y為N。此實施例之化合物具有式(VII)之結構：
Figure 02_image019
。
此實施例中包括如下的化合物，其中L為O。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R6 為H。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至3個R1a 取代之環丙基、經零至3個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n CH3 或-P(O)(CH3 )2 ； 各R1a 獨立地為F、Cl或-CN； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； R2 為H、經零至2個R2a 取代之C1-2 烷基或經零至2個R2a 取代之C2-3 烯基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、環丙基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-2 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 或經零至1個R3a 取代之吡啶基； R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-2 氟烷基、C1-3 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-3 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-2 氟烷氧基、-O(CH)1-2 NRc Rc 、-C(O)(C1-3 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-3 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-3 烷基)、-C(O)N(C1-3 烷基)2 、-NRc Rc 、-S(O)2 (C1-2 烷基)、C3-6 環烷基或-CRc Rc (苯基)； R4c 為H、C1-4 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-4 烷基； 各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-5 烷基、經零至3個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-3 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-3 炔基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基)、經零至3個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至3個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-O(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)； 各R6 為H、F或-CH3 ；及 R7 為H或-CH3 。此實施例包括如下的化合物，其中R7 為H、D、-CH3 或-CD3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至3個R1a 取代之環丙基、經零至3個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n CH3 或-P(O)(CH3 )2 ； 各R1a 獨立地為F、Cl或-CN； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； R2 為H、經零至2個R2a 取代之C1-2 烷基或經零至2個R2a 取代之C2-3 烯基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、環丙基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-2 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基； R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-2 氟烷基、C1-3 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-3 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-2 氟烷氧基、-O(CH)1-2 NRc Rc 、-C(O)(C1-3 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-3 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-3 烷基)、-C(O)N(C1-3 烷基)2 、-NRc Rc 、-S(O)2 (C1-2 烷基)、C3-6 環烷基或-CRc Rc (苯基)； R4c 為H、C1-4 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-4 烷基； 各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-5 烷基、經零至3個Rg 取代之C1-2 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-3 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-3 炔基、經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基、經零至3個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至3個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)；及 各R6 為H、F或-CH3 。此實施例包括如下的化合物，其中R7 為H、D、-CH3 或-CD3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： X為CH且Y為CR3 ； X為N且Y為CR3 ；或 X為N且Y為N； L為-O-、-NH-、-N(CH3 )-或-N(CH3 )C(O)-； R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ； R2 為-CH3 ； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基； R4 為R4a 或-CH2 R4a ； R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基； 各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)；及 各R6 為H。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： X為CH且Y為CR3 ； X為N且Y為CR3 ；或 X為N且Y為N； L為-O-或-NH-； R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ； R2 為-CH3 ； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-2 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 或經零至1個R3a 取代之吡啶基； R4 為R4a 或-CH2 R4a ； R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基； 各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基； 各R6 為H；及 R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： X為CH且Y為CR3 ； X為N且Y為CR3 ；或 X為N且Y為N； L為-O-； R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ； R2 為-CH3 ； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基； R4 為R4a 或-CH2 R4a ； R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基； 各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)；及 各R6 為H；及 R7 為H或-CH3 。此實施例包括如下的化合物，其中R7 為H、D、-CH3 或-CD3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中： X為CH且Y為CR3 ； X為N且Y為CR3 ；或 X為N且Y為N； L為-O-； R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ； R2 為-CH3 ； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基； R4 為R4a 或-CH2 R4a ； R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基； 各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基； 各R6 為H；及 R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中：X為CH及Y為CR3 ；L為-O-；R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ；R2 為-CH3 ；R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；R4 為R4a 或-CH2 R4a ；R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代；各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基；各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)；及R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中：X為CH及Y為CR3 ；L為-O-；R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ；R2 為-CH3 ；R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；R4 為R4a 或-CH2 R4a ；R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基；各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基；各R6 為H；及R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽、其中：X為N及Y為CR3 ；L為-O-；R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ；R2 為-CH3 ；R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；R4 為R4a 或-CH2 R4a ；R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基；各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基；各R6 為H；及R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中：X為N及Y為N；L為-O-；R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ；R2 為-CH3 ；R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基；R4 為R4a 或-CH2 R4a ；R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基；各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基；各R6 為H；及R7 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中R7 為D。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-O-。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-S-或-S(O)2 -。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-S-。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-S(O)2 -。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-NR4c -或-NR4d C(O)-。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-NR4c -。此實施例中包括如下的化合物，其中R4c 為H或C1-4 烷基。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R4c 為R4a 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中L為-NR4d C(O)-。此實施例中包括如下的化合物，其中R4d 為H或C1-2 烷基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n Re 或-P(O)Re Re 。此實施例包括如下的化合物，其中R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至3個R1a 取代之環丙基、經零至3個R1a 取代之C1-3 烷氧基，-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n CH3 或-P(O)(CH3 )2 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-2 烷基、經零至1個R1a 取代之環丙基、經零至3個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n CH3 或-P(O)(CH3 )2 。另外，此實施例中包括如下的化合物，其中R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中各R1a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH或-OCH3 。此實施例中包括如下的化合物，其中各R1a 獨立地為F、Cl、-CN或-OCH3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R1a 獨立地為F、Cl或-CN。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中各Ra 獨立地為H或C1-2 烷基。此實施例中包括如下的化合物，其中各Ra 獨立地為H或-CH3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R2 為H、經零至3個R2a 取代之C1-3 烷基或經零至2個R2a 取代之C3-4 環烷基。此實施例包括如下的化合物，其中R2 為H或經零至2個R2a 取代之C1-2 烷基。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R2 為H或-CH3 。另外，此實施例中包括如下的化合物，其中R2 為-CH3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、環丙基、C3-4 烯基或C3-4 炔基。此實施例中包括如下的化合物，其中各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-OCH3 或環丙基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-3 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 或經零至2個R3a 取代之吡啶基。此實施例中包括如下的化合物，其中R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-2 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 或經零至1個R3a 取代之吡啶基。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基。另外，此實施例中包括如下的化合物，其中R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 或-NO2 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為Cl；及R3 為-CN。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為Br；及R3 為-CN。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為F；及R3 為-NO2 。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-OCH3 ；及R3 為-CN。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為-CN。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為-NO2 。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-C(O)NH2 ；及R3 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為-CH3 。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為F。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為Cl。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為-CN；及R3 為Br。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中X為CR6 或N；Y為CR3 ；R1 為Cl；及R3 為H。此實施例中包括如下的化合物，其中X為CR6 及Y為CR3 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中X為N及Y為CR3 。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a 或-CH2 R4a 。此實施例中包括如下的化合物，其中R4 為R4a 。此實施例中亦包括如下的化合物，其中R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a 或-CH2 R4a 。此實施例中包括如下的化合物，其中R4 為R4a 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R4 為-CH2 R4a 。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a ；及R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。此實施例中包括如下的化合物，其中R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a ；及R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。此實施例中包括如下的化合物，其中R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a 、-CH2 R4a 或-CH2 CH2 R4a ；及R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。此實施例中包括如下的化合物，其中R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4 為R4a 、-CH2 R4a 或-CH2 CH2 R4a ；及R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代。此實施例中包括如下的化合物，其中R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中R4a 為苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至2個R4b 取代；及各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1、2或3。此實施例中包括如下的化合物，其中m為零、1或2。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中m為1或2。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1、2或3；及各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-5 烷基、經零至3個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-3 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-3 炔基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基)、經零至3個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至3個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-O(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)。此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1、2或3；及各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-5 烷基、經零至3個Rg 取代之C1-2 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-3 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-3 炔基、經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基、經零至3個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至3個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)。此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為氫、F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-2 烷基，或C1-2 烷氧基。此外，此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1或2；及各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)。此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1；及R5 為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)。此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1或2；及各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基。此實施例中包括如下的化合物，其中各R5 獨立地為F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中m為1；及R5 為氫、F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基。此實施例中包括如下的化合物，其中R5 為F、-OH、C1-2 烷基或C1-2 烷氧基。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其具有選自以下之結構：
Figure 02_image021
。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其具有選自以下之結構：
Figure 02_image023
Figure 02_image025
。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中該化合物為：6-氟-4-(4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(1)；6-氟-4-(4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(2)；6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1H)-酮(3)；6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1H)-酮(4)；4-(4-((1H-吲唑-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(5)；3-((1-(6-氟-1-甲基-3-硝基-2-側氧基-1,2-二氫喹啉-4-基)哌啶-4-基)氧基)苯甲腈(6)；4-(4-(3-氯苯氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(7)；6-氟-4-(4-(2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(8)；6-氟-4-(4-(3-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(9)；或4-(4-(4-(三級丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫喹啉-6-甲腈(53)。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中該化合物為：4-((2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(243及246)；4-((2R,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(244-245)；4-((2R,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(248-249)；4-((2S,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(247及250)；4-((2R,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(251及253)；4-((2S,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(252及254)；4-((2R,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(256-257)；4-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(255及258)；(±)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(271-272)；(±)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(273-274)；6-氯-4-((3R,4R)-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(275)；(±)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(276-277)；4-((3R,4R)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(278-279)；6-氯-4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(300)；4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(301)；6-氯-4-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(302)；4-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(303)；6-氯-4-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(304)；4-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(305)；6-氯-4-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(306)；4-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(307)；1-甲基-2-側氧基-4-((2S,5S)-2,4,5-三甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(339-340)；(±)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(399)；反式-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(400-401)；反式-4-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(402-403)；或4-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(404-405)。
一個實施例提供一種式(I)化合物或其鹽，其中該化合物為：6-氯-4-(4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(10)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(11)；6-氯-4-(4-(3,4-二氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(12)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(13)；6-氯-4-(4-(4-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(14)；4-(4-(4-(三級丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(15)；6-氯-4-(4-(4-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(16)；6-氯-4-(4-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(17)；6-氯-4-(4-(2-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(18)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(19)；6-氯-4-(4-(4-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(20)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(21)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(22)；6-氯-4-(4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(23)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(24)；4-((1-(6-氯-3-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)哌啶-4-基)氧基)-N,N-二甲基苯甲醯胺(25)；4-(4-(4-溴-2-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(26)；6-氯-4-(4-(3-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(27)；6-氯-4-(4-(3-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(28)；6-氯-1-甲基-4-(4-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(29)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(30)；4-(4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(31)；6-氯-4-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(32)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(2-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(33)；6-氯-4-(4-(3-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(34)；6-氯-4-(4-(2-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(35)；6-氯-4-(4-(4-氟-2-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(36)；6-氯-4-(4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(37)；6-氯-4-(4-(3-氯-4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(38)；6-氯-4-(4-(4-氯-3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(39)；6-氯-4-(4-(3-氯-4-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(40)；6-氯-4-(4-(2-氯-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(41)；6-氯-4-(4-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(42)；6-氯-4-(4-(2-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(43)；6-氯-4-(4-(2-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(44)；6-氯-4-(4-(3-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(45)；6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-苯氧基哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(46)；6-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(47)；6-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(48)；1-甲基-2,6-二側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2,5,6-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(49)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(50)；5-甲基-7-硝基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(51)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(52)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(54)；8-(4-(4-苯甲基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(55)；8-(4-(4-丁基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(56)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(57)；8-(4-(4-環戊基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(58)；8-(4-(4-環丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(59)；8-(4-(4-異丙基-3-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(60)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-((5,6,7,8-四氫萘-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(61)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-戊基苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(62)；8-(4-(4-環己基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(63)；8-(4-(4-(2-環己基丙-2-基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(64)；8-(4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(65)；8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(66)；8-(4-((5-氯吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(67)；8-(4-((6-(三級丁基)嗒𠯤-3-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(68)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(喹㗁啉-2-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(69)；8-(4-((2,6-二甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(70)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(喹唑啉-4-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(71)；5-甲基-8-(4-((2-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(72)；8-(4-((7-氯-4-甲氧基喹啉-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(73)；8-(4-((1,7-㖠啶-8-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(74)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-(酞𠯤-1-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(75)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(76)；5-甲基-6-側氧基-8-(4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(77)；8-(4-((2-異丙基-6-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(78)；(+/-)6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(79)；6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(80)；6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(81)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(82-84)；8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(85-87)；8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(88-90)；8-((3R,4R)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(91-93)；8-((3R,4R)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(94-96)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(97-99)；8-((3R,4R)-4-(4-環戊基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(100-102)；8-((3R,4R)-4-(3,4-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(103-105)；8-((3R,4R)-4-(4-環己基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(106)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(107-109)；8-((3R,4R)-4-(4-乙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(110)；8-((3R,4R)-4-(4-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(111)；8-((3R,4R)-4-(2-氟-4-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(112)；8-((3R,4R)-4-(2,4-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(113-115)；8-((3R,4R)-4-(4-氟-2-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(116-118)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(119-121)；8-((3R,4R)-4-(3-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(122)；8-((3R,4R)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(123)；8-((3R,4R)-4-(2-氟-6-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(124)；8-((3R,4R)-4-(2,6-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(125-127)；8-((3R,4R)-4-(4-氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(128-130)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(2,4,6-三氟苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(131)；8-((3R,4R)-4-((3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]二氧呯-6-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(132)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(133-135)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(136)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(137-139)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(140-142)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(143-145)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(146-148)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(149-151)；8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(152-154)；8-((3R,4R)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(155-157)；8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(158-160)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-異丙氧基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(161)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(162-163)；8-((3R,4S)-3-乙基-4-(3-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(164)；8-((3R,4S)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(165-167)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(169-171)；8-((3R,4S)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(172-174)；8-((3R,4S)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(175)；8-((3R,4S)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(176-178)；8-((3R,4S)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(179-181)；8-((3R,4S)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(182-184)；(+/-) 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺(185)；(+/-) 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(186)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(187)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(188)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(189-191)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(192-194)；8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-氟-3-丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(195)；8-((3R,4R)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(196-198)；8-((3R,4R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(199-201)；8-((3R,4S)-3-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(202-204)；8-((3R,4S)-4-((5-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(205-207)；8-((3R,4S)-4-((5-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(208-210)；8-((3R,4S)-4-((4-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(211-213)；8-((3R,4S)-4-((6-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(214-216)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(嘧啶-2-基氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(217)；8-((3R,4S)-4-((4-甲氧基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(218)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-丙基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(219)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((2-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(220)；8-((3R,4S)-4-((5-乙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(221)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(222)；8-((3R,4S)-4-((5-環丙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(223)；8-((3R,4S)-4-((5-環丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(224)；5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(225-227)；(+/-) 8-((3R,4S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(228)；(+/-) 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(229)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(230)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(231)；(+/-)8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(232)；8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(233)；8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(234)；(+/-)5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(235)；(+/-)5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺(236)；7-氟-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(237)；7-氯-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(238)；7-溴-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(239)；7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(240)；7-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(241)；(+/-) 6-溴-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(242)；8-((2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(243及246)；8-((2R,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(244-245)；4-((2R,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(248-249)；4-((2S,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(247及250)；4-((2R,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(251及253)；4-((2S,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(252及254)；4-((2R,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(256-257)；8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(255及258)；(±)-反式-8-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(259-260)；(±)-反式-8-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(261-262)；8-((3R,4R)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(263-264)；(±)-順式-8-(3-氟-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(265-266)；(±)-反式-8-(3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(267-268)；(±)-反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(269-270)；8-((2S,5R)-4-((5-甲氧基吡啶-2-基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(280-281)；N-((2S,5R)-1-(6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-2,5-二甲基哌啶-4-基)-4-氟-N-甲基苯甲醯胺(282-283)；N-(1-(6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-4-氟-N-甲基苯甲醯胺(284-287)；N-(1-(3,6-二氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-N-甲基-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(288-293)；8-((2S,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(294)；8-((2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(295)；8-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(296)；8-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(297)；8-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(298)；8-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(299)；8-((2S,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(308)；8-((2R,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(309)；8-((2R,4R,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(310)；8-((2R,4S,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(311)；8-((2S,4R,5S)-2,5-二甲基-4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(312)；8-((2S,4R,5S)-4-(3-氯苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(313)；8-((2S,4R,5S)-4-(3-氰基苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(314)；8-((2S,4R,5S)-4-(4-氟苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(315)；8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(316A)；8-(2,5)-二甲基-4-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(316-319)；8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-(甲基(3-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(320-321)；8-(4-((4-氟苯甲基) (甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(322-325)；8-(4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(326-328)；8-(4-((4,4-二氟環己基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(329-330)；8-((2S,5R)-4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(331-332)；8-((2S,5S)-4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(333-334)；8-((2S ,5S )-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(335-336)；5-甲基-6-側氧基-8-((2S,5S)-2,4,5-三甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(337-338)；反式-8-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(341-342)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(343-344)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(345-346)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-異丙氧基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(347-348)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(349-350)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(351-352)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(甲磺醯基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(353-354)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((2-甲基苯并[d]㗁唑-5-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(355-356)；8-((3S,4S)-4-(4-氯-3-氟苯氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(357-358)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(359-362)；反式-8-(3-乙氧基-4-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(363-364)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(365-366)；反式-8-(3-乙氧基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(367-368)；順式-8-(3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(369-370)；順式-8-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(371-372)；反式-8-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(373-374)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((6-異丙氧基嗒𠯤-3-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(375-376)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡𠯤-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(377-378)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(379-380)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((3-(三氟甲基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(381-382)；8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)甲氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(383-384)；8-((3R,4R)-3-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(385-386)；8-((3R,4R)-3-(環丙基甲氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(387-388)；8-((3R,4R)-3-(2-甲氧基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(389-390)；5-甲基-8-((3R,4R)-3-(2-N-𠰌啉基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(391-392)；5-甲基-6-側氧基-8-((3R,4R)-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(393-394)；反式-8-(3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(395-396)；或反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(397-398)。
本發明可在不背離其精神或基本特質之情況下以其他特定形式來實施。本發明涵蓋本文所提及之本發明態樣及/或實施例之所有組合。應理解，本發明之任何及所有實施例可結合任何其他一或多個實施例來描述額外實施例。亦應理解，實施例之各個別要素意欲與來自任何實施例之任何及所有其他要素組合以描述額外實施例。
定義 一般熟習此項技術者在閱讀以下實施方式後可更容易地理解本發明之特徵及優點。應瞭解，為了清楚起見，在單獨實施例之內容背景中在上文及下文中所描述之本發明之某些特徵亦可組合以形成單個實施例。相反地，為簡潔起見，描述於單個實施例之內容背景中之本發明之各種特徵亦可如此組合以形成其子組合。本文中鑑別為例示性或較佳的實施例意欲具說明性而非限制性。
除非本文中另外具體說明，否則以單數形式之指代亦可包括複數形式。舉例而言，「一(a/an)」可指一個，或一或多個。
如本文所用，片語「化合物及/或其鹽」係指至少一種化合物、該等化合物之至少一種鹽，或其組合。舉例而言，式(I)化合物及/或其鹽包括式(I)化合物；兩種式(I)化合物；式(I)化合物之鹽；式(I)化合物及式(I)化合物之一或多種鹽；以及式(I)化合物之兩種或更多種鹽。
除非另外指示，否則具有不飽和價數之任何原子假定具有足以使價數飽和的氫原子。
本文所闡述之定義優先於以引用之方式併入本文中之任何專利、專利申請案及/或專利申請公開案中所闡述之定義。
下文列舉用於描述本發明之各種術語之定義。此等定義適用於術語，因為其在整篇說明書中個別地或作為較大群組的一部分使用(除非其在特定情況下以其他方式被限制)。
在整篇說明書中，熟習此領域者可以選擇基團及其取代基以得到穩定的部分及化合物。
根據此項技術中所使用之慣例，
Figure 02_image027
在本文之結構式中用於描繪作為部分或取代基與核心或主鏈結構之連接點的鍵。
如本文所用，術語「鹵基」及「鹵素」係指F、Cl、Br及I。
術語「氰基」係指基團-CN。
術語「胺基」係指基團-NH2 。
術語「側氧基」係指基團=O。
如本文所用，術語「烷基」係指含有例如1至12個碳原子、1至6個碳原子及1至4個碳原子之分支鏈及直鏈飽和脂族烴基。烷基之實例包括(但不限於)甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正丙基及異丙基)、丁基(例如正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基)及戊基(例如正戊基、異戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基及4-甲基戊基。當數字以下標形式出現在符號「C」後時，下標以較多特異性定義特定基團可含有之碳原子之數目。舉例而言，「C1-4 烷基」表示具有一至四個碳原子之直鏈及分支鏈烷基。
如本文所用，術語「氟烷基」意欲包括經一或多個氟原子取代之分支鏈與直鏈飽和脂族烴基。舉例而言，「C1-4 氟烷基」意欲包括經一或多個氟原子取代之C1 、C2 、C3 及C4 烷基。氟烷基之代表性實例包括(但不限於)-CF3 及-CH2 CF3 。
術語「羥烷基」包括經一或多個羥基取代之分支鏈與直鏈飽和烷基。舉例而言，「羥烷基」包括˗CH2 OH、˗CH2 CH2 OH及C1˗4 羥烷基。
術語「烯基」係指含有2至12個碳原子及至少一個碳碳雙鍵之直鏈或分支鏈烴基。例示性此類基團包括乙烯基或烯丙基。舉例而言，「C2˗6 烯基」表示具有二至六個碳原子之直鏈及分支鏈烯基。
術語「炔基」係指含有2至12個碳原子及至少一個碳碳參鍵之直鏈或分支鏈烴基。例示性此類基團包括乙炔基。舉例而言，「C2˗6 炔基」表示具有二至六個碳原子之直鏈及分支鏈炔基。
如本文所用，術語「環烷基」係指藉由自飽和環碳原子移除一個氫原子而衍生自非芳族單環或多環烴分子之基團。環烷基之代表性實例包括(但不限於)環丙基、環戊基及環己基。當數字以下標形式出現在符號「C」之後時，下標更具體地定義特定環烷基可含有之碳原子數目。舉例而言，「C3-6 環烷基」表示具有三至六個碳原子之環烷基。
如本文所用，術語「氟環烷基」意欲包括經一或多個氟原子取代之環烷基。
如本文所用，術語「烷氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之烷基，例如甲氧基(-OCH3 )。舉例而言，「C1-3 烷氧基」表示具有一至三個碳原子之烷氧基。
術語「氟烷氧基」及「-O(氟烷基)」表示經由氧鍵(-O-)連接之如上文所定義之氟烷基。舉例而言，「C1-4 氟烷氧基」意欲包括C1 、C2 、C3 及C4 氟烷氧基。
術語「碳環(carbo環)」、「碳環(carbocyclic)」或「碳環基」可互換地使用且指具有至少一個飽和或部分飽和非芳族環之環狀基團，其中所有環之所有原子為碳。碳環基環可未經取代或在價態允許時可含有一或多個取代基。因此，該術語包括非芳族環，諸如環烷基、環烯基及環炔基環。例示性雙環碳環基包括茚烷基、茚基、二氫萘基、四氫萘基、六氫萘基、八氫萘基、十氫萘基、雙環庚烷基、雙環辛烷基及雙環壬烷基。
如本文所用，術語「芳基」係指藉由移除鍵結於芳環之一個氫而自含有芳環之分子衍生的原子基團。芳基之代表性實例包括(但不限於)苯基及萘基。芳環可未經取代或在價態允許時可含有一或多個取代基。
如本文所用，術語「苯甲基」係指一個氫原子經苯基置換的甲基。苯環可未經取代或在價態允許時可含有一或多個取代基。
術語「雜原子」係指氧(O)、硫(S)及氮(N)。
術語「雜環(hetero環)」、「雜環(heterocyclic)」或「雜環基」可互換使用且指具有至少一個飽和或部分飽和非芳族環的環狀基團，且其中一或多個環具有至少一個雜原子(O、S或N)，含該雜原子之環較佳具有1至3個獨立地選自O、S及/或N之雜原子。含有雜原子之此類基團之環可以含有一或兩個氧或硫原子及/或一至四個氮原子，其限制條件為各環中之雜原子總數目為四或更小，且另一限制條件為該環含有至少一個碳原子。氮及硫原子可視情況氧化且氮原子可視情況四級銨化。雜環基可在任一可用氮或碳原子處連接。雜環環可未經取代或在價態允許時可含有一或多個取代基。
例示性單環雜環基包括吡咯啶基、咪唑啉基、㗁唑啶基、異㗁唑啉基、噻唑啶基、異噻唑啶基、四氫呋喃基、哌啶基、哌𠯤基、2-側氧基哌𠯤基、2-側氧基哌啶基、2-側氧基吡咯啶基、2-側氧基氮呯基、氮呯基、4-哌啶酮基、四氫哌喃基、𠰌啉基、噻𠰌啉基、噻𠰌啉基亞碸、噻𠰌啉基碸、1,3-二氧雜環戊烷、四氫-1,1-二側氧基噻吩基、二氫異吲哚基及四氫喹啉基。
術語「雜芳基」係指在至少一個環中具有至少一個雜原子(O、S或N)之未經取代及經取代芳族基，該含雜原子環較佳地具有1、2或3個獨立地選自O、S及/或N之雜原子。含有雜原子之雜芳基之各環可含有一或兩個氧或硫原子及/或一至四個氮原子，其限制條件為各環中雜原子之總數為四個或更少且各環具有至少一個碳原子。5至14員雜芳基包括5或6員單環雜芳基、9或10員雙環雜芳基及11至14員三環雜芳基。包含雙環基團及三環雜芳基之稠環為芳族的且可僅含有碳原子。氮及硫原子可視情況氧化且氮原子可視情況四級銨化。雙環及三環雜芳基必須僅包括芳環。雜芳基可在任一環之任何可用氮或碳原子處連接。雜芳基環系統可未經取代或可含有一或多個取代基。
例示性單環雜芳基包括吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、苯硫基、㗁二唑基、吡啶基、吡𠯤基、嘧啶基、嗒𠯤基及三𠯤基。
例示性雙環雜芳基包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并間二氧雜環戊烯基、苯并㗁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氫異喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、苯并哌喃基、吲哚𠯤基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并哌喃基、㖕啉基、喹喏啉基、吲唑基及吡咯并吡啶基。
例示性三環雜芳基包括吖啶基、苯并喹啉基、苯并異喹啉基及苯并㖠啶基。
片語「醫藥學上可接受」在本文中用於指在合理醫學判斷範疇內，適用於與人類及動物之組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理益處/風險比相匹配的彼等化合物、材料、組合物及/或劑型。
式(I)化合物可以形成亦屬於本發明範疇內之鹽。除非另外指示，否則提及本發明化合物應理解為包括提及其一或多種鹽。術語「鹽」表示與無機及/或有機酸及無機及/或有機鹼形成之酸性及/或鹼性鹽。另外，術語「鹽」可包括兩性離子(內鹽)，例如當式(I)化合物含有鹼性部分(諸如胺或吡啶或咪唑環)與酸性部分(諸如羧酸)時。醫藥學上可接受之(亦即生理學上可接受之無毒)鹽為較佳的，諸如可接受之金屬及胺鹽，其中陽離子不會明顯促進鹽之毒性或生物活性。然而，其他鹽可適用於例如分離或純化步驟中，其可在製備期間得以採用，且因此涵蓋在本發明之範疇內。式(I)化合物之鹽例如可藉由使式(I)化合物與一定量(諸如等量)之酸或鹼在介質(諸如使鹽沈澱之介質)中或在水性介質中反應，繼而凍乾來形成。
例示性酸加成鹽包括乙酸鹽(諸如用乙酸或三鹵乙酸(例如三氟乙酸)形成之彼等鹽)、己二酸鹽、褐藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽(用鹽酸形成)、氫溴酸鹽(用溴化氫形成)、氫碘酸鹽、順丁烯二酸鹽(用順丁烯二酸形成)、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、甲烷磺酸鹽(用甲烷磺酸形成)、2-萘磺酸鹽、菸酸鹽、硝酸鹽、乙二酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽(諸如用硫酸形成之彼等鹽)、磺酸鹽(諸如本文中提及之彼等鹽)、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(toluenesulfonate) (諸如甲苯磺酸鹽(tosylate))、十一烷酸鹽及其類似鹽。
例示性鹼性鹽包括銨鹽；鹼金屬鹽，諸如鈉、鋰及鉀鹽；鹼土金屬鹽，諸如鈣及鎂鹽；鋇、鋅及鋁鹽；與有機鹼(例如有機胺)形成之鹽，有機鹼諸如三烷基胺(諸如三乙胺)、普魯卡因(procaine)、二苯甲基胺、N-苯甲基-β-苯乙胺、1-二苯羥甲胺、N,N'-二苯甲基伸乙基二胺、去氫松香胺、N-乙基哌啶、苯甲胺、二環己胺，或醫藥學上可接受之類似胺，及與胺基酸(諸如精胺酸、離胺酸及其類似者)形成之鹽。鹼性含氮基團可用藥劑四級銨化，諸如低碳數烷基鹵化物(例如甲基、乙基、丙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物)、二烷基硫酸鹽(例如二甲基、二乙基、二丁基及二戊基硫酸鹽)、長鏈鹵化物(例如癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物)、芳烷基鹵化物(例如苯甲基及苯乙基溴化物)及其他藥劑。較佳鹽包括單鹽酸鹽、硫酸氫鹽、甲烷磺酸鹽、磷酸鹽或硝酸鹽。
式(I)化合物可以非晶形固體或結晶固體形式提供。可採用凍乾，以得到呈固體狀之式(I)化合物。
應進一步理解，式(I)化合物之溶劑合物(例如水合物)亦在本發明之範疇內。術語「溶劑合物」意謂式(I)化合物與一或多個溶劑分子(無論有機還是無機)之物理性結合。此物理性結合包括氫鍵結。在某些情況下，例如當一或多個溶劑分子併入結晶固體之晶格時，溶劑合物將能夠分離。「溶劑合物」涵蓋溶液相及可分離溶劑合物兩者。例示性溶劑合物包括水合物、乙醇合物、甲醇合物、異丙醇合物、乙腈溶劑合物及乙酸乙酯溶劑合物。溶劑化方法在此項技術中已知。
前藥之各種形式為此項技術中熟知的且描述於Rautio, J.等人,Nature Review Drug Discovery , 17, 559-587 (2018)中。
另外，式(I)化合物在其製備後可經分離及純化，以得到式(I)化合物含量等於或大於99重量%之組合物(「實質上純的」)，其接著如本文所描述使用或調配。本文中亦涵蓋此類「實質上純的」式(I)化合物作為本發明之一部分。
「穩定化合物」及「穩定結構」意指足夠穩固能經受自反應混合物分離至適用純度且調配成有效治療劑的化合物。本發明意欲體現穩定化合物。
「治療有效量」意欲包括有效充當DGKα及/或DGKζ抑制劑或有效治療或預防病毒感染及增殖性病症(諸如癌症)之單獨之本發明化合物的量，或所主張之化合物組合的量，或本發明化合物與其他活性成分組合的量。
如本文所用，「治療(treating/treatment)」涵蓋治療哺乳動物，尤其人類之疾病病況，且其包括：(a)預防哺乳動物出現該疾病病況，尤其在此類哺乳動物傾向於患上該疾病病況但尚未診斷為患有該疾病病況時；(b)抑制該疾病病況，亦即遏制其產生；及/或(c)緩解該疾病病況，亦即使得疾病病況消退。
本發明化合物意欲包括存在於本發明化合物中之原子之所有同位素。同位素包括具有相同原子數但質量數不同之彼等原子。作為一般實例且非限制性地，氫同位素包括氘(D)及氚(T)。碳同位素包括13 C及14 C。本發明之同位素標記化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於本文所描述之方法，使用經適當同位素標記之試劑代替原來使用之未經標記之試劑來製備。
根據式(I)之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽可藉由適合於欲治療之病狀的任何方式投與，其可取決於位點特異性治療之需要或欲遞送之式(I)化合物之量。
本發明內亦涵蓋醫藥組合物類別，該類醫藥組合物包含式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽；及一或多種醫藥學上可接受之無毒性載劑及/或稀釋劑及/或佐劑(在本文中統稱為「載劑」材料)及必要時的其他活性成分。式(I)化合物可藉由任何適合途徑投與，較佳以適於此類途徑之醫藥組合物形式且以預期治療有效之劑量投與。本發明之化合物及組合物可例如以含有醫藥學上可接受之習知載劑、佐劑及媒劑之劑量單位調配物形式，經口、黏膜或非經腸(包括血管內、靜脈內、腹膜內、皮下、肌肉內及胸骨內)投與。舉例而言，醫藥載劑可含有甘露糖醇或乳糖與微晶纖維素之混合物。混合物可含有額外組分，諸如潤滑劑，例如硬脂酸鎂；及崩解劑，諸如交聯聚維酮(crospovidone)。可將載劑混合物填入明膠膠囊中或壓縮為錠劑。醫藥組合物可以例如口服劑型或輸注形式投與。
對於經口投與，醫藥組合物可呈例如錠劑、膠囊、液體膠囊、懸浮液或液體形式。醫藥組合物較佳以含有特定量活性成分之劑量單位形式製備。舉例而言，醫藥組合物可以包含約0.1至1000 mg，較佳約0.25至250 mg，且更佳約0.5至100 mg範圍內之量之活性成分之錠劑或膠囊形式提供。用於人類或其他哺乳動物之適合日劑量可能視患者之病狀及其他因素而廣泛變化，但可使用常規方法判定。
本文中涵蓋之任何醫藥組合物均可例如經由任何可接受且適合的口服製劑經口遞送。例示性口服製劑包括(但不限於)例如，錠劑、糖衣錠、口含錠、水性及油性懸浮液、可分散散劑或粒劑、乳液、硬及軟膠囊、液體膠囊、糖漿及酏劑。意欲經口投與之醫藥組合物可根據此項技術中已知之任何方法製備以便製造意欲經口投與之醫藥組合物。為了提供醫藥學上適口的製劑，根據本發明之醫藥組合物可含有至少一種選自以下之藥劑：甜味劑、調味劑、著色劑、緩和劑、抗氧化劑及防腐劑。
錠劑可例如藉由混合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種醫藥學上可接受之適於製備錠劑之無毒賦形劑來製備。例示性賦形劑包括(但不限於)例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣及磷酸鈉；粒化劑及崩解劑，諸如微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、玉米澱粉及褐藻酸；黏合劑，諸如澱粉、明膠、聚乙烯-吡咯啶酮及阿拉伯膠；及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸及滑石。另外，錠劑可為未包覆包衣或藉由已知技術包覆包衣以掩蔽口味不佳藥物之不良味道，或延遲活性成分在胃腸道中之崩解及吸收，從而使活性成分之作用持續較長時間。例示性水溶性味道掩蔽材料包括(但不限於)羥丙基甲基纖維素及羥丙基纖維素。例示性延遲材料包括(但不限於)乙基纖維素及乙酸丁酸纖維素。
硬明膠膠囊可例如藉由混合至少一種式(I)化合物及/或其至少一種鹽與至少一種惰性固體稀釋劑(諸如碳酸鈣；磷酸鈣；及高嶺土)製備。
軟明膠膠囊可例如藉由混合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種水溶性載劑(諸如聚乙二醇)；及至少一種油介質(諸如花生油、液體石蠟及橄欖油)製備。
可例如藉由混合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種適於製備水性懸浮液之賦形劑製備水性懸浮液。適用於製備水性懸浮液之例示性賦形劑包括(但不限於)例如懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基丙基甲基-纖維素、褐藻酸鈉、褐藻酸、聚乙烯-吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或潤濕劑，諸如天然產生之磷脂，例如卵磷脂；環氧烷與脂肪酸之縮合產物，諸如聚氧乙烯硬脂酸酯；環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物，諸如十七伸乙基-氧基十六醇；環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇之偏酯之縮合產物，諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；及環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐之偏酯之縮合產物，諸如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性懸浮液亦可含有至少一種防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯及對羥基苯甲酸正丙酯；至少一種著色劑；至少一種調味劑；及/或至少一種甜味劑，包括(但不限於)例如蔗糖、糖精及阿斯巴甜糖(aspartame)。
油性懸浮液可例如藉由使至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽懸浮於植物油(諸如花生油；橄欖油；芝麻油；及椰子油)；或礦物油(諸如液體石蠟)中製備。油性懸浮液亦可含有至少一種增稠劑，諸如蜂蠟；硬石蠟；及鯨蠟醇。為了提供適口的油性懸浮液，可向油性懸浮液中添加上文已描述之至少一種甜味劑及/或至少一種調味劑。油性懸浮液可另外含有至少一種防腐劑，包括(但不限於)例如抗氧化劑，諸如丁基化羥基大茴香醚及α-生育酚。
可分散散劑及粒劑可例如藉由混合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種分散劑及/或潤濕劑、至少一種懸浮劑及/或至少一種防腐劑來製備。適合的分散劑、潤濕劑及懸浮劑已如上文所描述。例示性防腐劑包括(但不限於)例如抗氧化劑，例如抗壞血酸。此外，可分散散劑及粒劑亦可含有至少一種賦形劑，包括(但不限於)例如甜味劑、調味劑及著色劑。
至少一種式(I)化合物及/或其至少一種醫藥學上可接受之鹽之乳液可以例如水包油乳液形式製備。包含式(I)化合物之乳液之油相可由已知成分以已知方式構成。油相可由(但不限於)例如以下各者提供：植物油，諸如橄欖油及花生油；礦物油，諸如液體石蠟；及其混合物。雖然該相可僅包含乳化劑，但其亦可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或脂肪與油之混合物。適合乳化劑包括(但不限於)例如天然產生之磷脂，例如大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐之酯或偏酯，諸如脫水山梨糖醇單油酸酯；及偏酯與環氧乙烷之縮合產物，諸如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。較佳地，包括親水性乳化劑以及充當穩定劑之親脂性乳化劑。較佳亦包括油與脂肪。乳化劑與穩定劑一起或不與穩定劑一起構成所謂的乳化蠟，且蠟與油及脂肪一起構成所謂的乳化軟膏基劑，其形成乳膏調配物之油性分散相。乳液亦可含有甜味劑、調味劑、防腐劑及/或抗氧化劑。適合用於本發明調配物中之乳化劑及乳液穩定劑包括例如Tween 60、Span 80、鯨蠟硬脂醇、肉豆寇醇、單硬脂酸甘油酯、月桂基硫酸鈉、單獨或含蠟之二硬脂酸甘油酯，或此項技術中所熟知之其他材料。
式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽亦可例如靜脈內、皮下及/或肌肉內經由任何醫藥學上可接受且適合之可注射形式遞送。示例性可注射形式包括(但不限於)例如包含可接受之媒劑及溶劑之無菌水溶液，該等媒劑及溶劑為諸如水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液；無菌水包油微乳液；及水性或油性懸浮液。
用於非經腸投與之調配物可呈水性或非水性等張無菌注射溶液或懸浮液形式。此等溶液及懸浮液可使用用於口服調配物之所提及載劑或稀釋劑中之一或多者或藉由使用其他適合的分散劑或潤濕劑及懸浮劑、由無菌散劑或粒劑製備。化合物可溶解於水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化鈉、黃蓍膠及/或各種緩衝液中。其他佐劑及投與模式為醫藥技術中眾所周知的。活性成分亦可藉由以具有適合載劑(包括鹽水、右旋糖或水)或具有環糊精(亦即Captisol)、共溶劑增溶(亦即丙二醇)或微胞增溶(亦即Tween 80)之組合物形式注射來投與。
無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如於1,3-丁二醇中之溶液。在可接受之媒劑及溶劑中，可使用的為水、林格氏溶液及等張氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發性油習用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和非揮發性油，包括合成單甘油酯或二甘油酯。另外，諸如油酸之脂肪酸可用於製備可注射劑。
無菌可注射水包油微乳液可例如如下製備：1)使至少一種式(I)化合物溶解於油相，諸如大豆油與卵磷脂之混合物中；2)將含有油相之式(I)與水及甘油混合物組合；及3)處理該組合以形成微乳液。
無菌水性或油性懸浮液可根據此項技術中已知之方法製備。舉例而言，無菌水性溶液或懸浮液可用非經腸可接受之無毒稀釋劑或溶劑(諸如1,3-丁二醇)製備；且無菌油性懸浮液可用可接受之無菌無毒溶劑或懸浮介質(諸如無菌不揮發性油(例如合成單甘油酯或二甘油酯)及脂肪酸(諸如油酸))製備。
可用於本發明之醫藥組合物中之醫藥學上可接受之載劑、佐劑及媒劑包括(但不限於)離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；自乳化藥物遞送系統(SEDDS)，諸如d-α-生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯；用於醫藥劑型中之界面活性劑，諸如吐溫、聚乙氧基化蓖麻油(諸如CREMOPHOR界面活性劑(BASF))或其他類似聚合遞送基質；血清蛋白質，諸如人類血清白蛋白；緩衝物質，諸如磷酸鹽；甘胺酸；山梨酸；山梨酸鉀；飽和植物脂肪酸之偏甘油酯混合物；水；鹽或電解液，諸如魚精蛋白硫酸鹽；磷酸氫二鈉；磷酸氫鉀；氯化鈉；鋅鹽；膠態二氧化矽；三矽酸鎂；聚乙烯吡咯啶酮；基於纖維素之物質；聚乙二醇；羧甲基纖維素鈉；聚丙烯酸酯；蠟；聚乙烯-聚氧化丙烯-嵌段聚合物；聚乙二醇及羊毛脂。環糊精(諸如α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精)或經化學修飾之衍生物(諸如羥烷基環糊精，包括2-羥丙基-環糊精及3-羥丙基-環糊精)或其他溶解的衍生物亦可有利地用於增強本文所描述式之化合物的遞送。
本發明之醫藥學活性化合物可根據習知製藥方法處理以製造用於投與患者(包括人類及其他哺乳動物)之藥劑。醫藥組合物可進行諸如滅菌之習知醫藥操作及/或可含有習知佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、潤濕劑、乳化劑、緩衝劑等。另外，錠劑及丸劑可用腸溶衣來製備。此類組合物亦可包含佐劑，諸如潤濕劑、甜味劑、調味劑及芳香劑。
化合物投與量及用本發明之化合物及/或組合物治療疾病病狀之給藥方案視多種因素而定，包括個體之年齡、體重、性別、醫學病狀；疾病類型；疾病嚴重程度；投藥途徑及頻率；及所採用之特定化合物。因此，給藥方案可廣泛變化，但可常規地使用標準方法判定。每公斤體重約0.001至100 mg之日劑量可為適當的，較佳在每公斤體重約0.0025與約50 mg之間且最佳在每公斤體重約0.005至10 mg之間。日劑量可以每天一至四次劑量投與。其他給藥時程包括每週一次劑量及每兩天一次劑量的循環。
出於治療目的，本發明之活性化合物通常與一或多種適合於指定投藥途徑的佐劑組合。若經口投與，則可將化合物與乳糖、蔗糖、澱粉粉末、烷酸之纖維素酯、纖維素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、氧化鎂、磷酸及硫酸之鈉鹽及鈣鹽、明膠、阿拉伯樹膠、褐藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮及/或聚乙烯醇混合且接著製錠或囊封以方便投與。此類膠囊或錠劑可含有控制釋放型調配物，其可以活性化合物於羥丙基甲基纖維素中之分散液形式提供。
本發明之醫藥組合物包含至少一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之至少一種鹽，及視情況存在之選自醫藥學上可接受之任何載劑、佐劑及媒劑的另一種藥劑。本發明之替代組合物包含本文所描述之式(I)化合物或其前藥及醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。
效用 式(I)化合物可用於治療癌症。
在另一實施例中，本發明提供一種式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽、其立體異構體或其互變異構體與額外治療劑之組合製劑，其同時、分開或依序用於治療及/或預防與T細胞中之DGK目標抑制有關的多種疾病或病症。
在另一態樣中，本發明提供一種治療罹患或易患與T細胞中之DGK目標抑制有關之醫學病狀之患者的方法。可治療多種醫學病狀。該方法包含向該患者投與治療有效量之組合物，該組合物包含式(I)化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽、其立體異構體或其互變異構體。舉例而言，本文所描述化合物可以用於治療或預防病毒感染及增殖性疾病，諸如癌症。
式(I)化合物及包含至少一種式(I)化合物的醫藥組合物可用於治療或預防與T細胞中之DGK目標抑制有關的任何疾病或病狀。此等疾病包括病毒感染及其他感染(例如皮膚感染、GI感染、泌尿道感染、泌尿生殖器感染、全身感染)及增殖性疾病(例如癌症)。式(I)化合物及包含至少一種式(I)化合物的醫藥組合物可以投與動物，較佳哺乳動物(例如馴養動物、貓、狗、小鼠、大鼠)，且更佳投與人類。任何投藥方法可用於向患者遞送化合物或醫藥組合物。在某些實施例中，式(I)化合物或至少包含式(I)化合物的醫藥組合物經口投與。在其他實施例中，式(I)或至少包含式(I)化合物的醫藥組合物係非經腸投與。
式(I)化合物可抑制二醯基甘油激酶α及ξ (diacylglycerol kinase alpha and zeta；DGKα/ζ)之活性。舉例而言，式(I)化合物可用於抑制細胞或個體中之DGKα及DGKζ之活性，該個體需要藉由投與抑制量之式(I)化合物或其鹽來調節DGKα及DGKζ。
本發明進一步提供治療與個體(例如患者)中之DGKα及DGKζ之活性或表現(包括異常活性及/或過度表現)有關之疾病的方法，其藉由向需要此類治療之個體投與治療有效量或劑量的式(I)化合物或其醫藥組合物。實例疾病可包括與DGKα及DGKζ酶之表現或活性(諸如過度表現或異常活性)直接或間接有關的任何疾病、病症或病狀。DGKα及DGKζ相關疾病亦可包括可藉由調節DGKα及DGKζ酶活性來預防、改善或治癒的任何疾病、病症或病狀。DGKα及DGKζ相關疾病之實例包括癌症及病毒感染，諸如HIV感染、B型肝炎及C型肝炎。
在一個態樣中，式(I)化合物依序地在免疫-腫瘤學藥劑投與之前投與。在另一態樣中，式(I)化合物與免疫-腫瘤學藥劑同時投與。在又另一態樣中，式(I)化合物依序地在投與免疫-腫瘤學藥劑之後投與。
在另一態樣中，式(I)化合物可以與免疫-腫瘤學藥劑共調配。
免疫-腫瘤學藥劑包括例如小分子藥物、抗體或其他生物製劑或小分子。生物免疫-腫瘤學藥劑之實例包括(但不限於)癌症疫苗、抗體及細胞激素。在一個態樣中，抗體為單株抗體。在另一態樣中，單株抗體為人類化抗體或人類抗體。
在一個態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為(i)刺激(包括共刺激)受體之促效劑或(ii) T細胞上之抑制(包括共抑制)信號之拮抗劑，此兩者均導致抗原特異性T細胞反應擴大(常稱為免疫檢查點調節劑)。
某些刺激及抑制分子為免疫球蛋白超家族(IgSF)成員。與共刺激或共抑制受體結合之膜結合配體的一個重要家族為B7家族，其包括B7-1、B7-2、B7-H1 (PD-L1)、B7-DC (PD-L2)、B7-H2 (ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5 (VISTA)及B7-H6。與共刺激或共抑制受體結合之另一膜結合配體家族為與同源TNF受體家族成員結合之分子之TNF家族，其包括CD40及CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、CD137 (4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、RANKL、TWEAKR/Fn14、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTβR、LIGHT、DcR3、HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2、TNFR1、淋巴毒素α/TNFβ、TNFR2、TNFα、LTβR、淋巴毒素α 1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。
在一個態樣中，T細胞反應可藉由式(I)化合物與以下中之一或多者之組合來刺激：(i)抑制T細胞活化之蛋白質之拮抗劑(例如免疫檢查點抑制劑)，諸如CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、半乳糖凝集素9、CEACAM-1、BTLA、CD69、半乳糖凝集素-1、TIGIT、CD113、GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1及TIM-4；及(ii)刺激T細胞活化之蛋白質之促效劑，諸如B7-1、B7-2、CD28、4-1BB (CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3及CD28H。
可與式(I)化合物組合以治療癌症之其他藥劑包括NK細胞上之抑制受體的拮抗劑或NK細胞上之活化受體的促效劑。舉例而言，式(I)化合物可以與KIR拮抗劑(諸如利瑞路單抗(lirilumab))組合。
用於組合療法之又其他藥劑包括抑制或耗乏巨噬細胞或單核球之藥劑，包括(但不限於)：CSF-1R拮抗劑，諸如CSF-1R拮抗劑抗體，包括RG7155 (WO11/70024、WO11/107553、WO11/131407、WO13/87699、WO13/119716、WO13/132044)或FPA-008 (WO11/140249、WO13169264、WO14/036357)。
在另一態樣中，式(I)化合物可與以下中之中之一或多者一起使用：連接陽性共刺激受體的促效劑；經由抑制受體減弱信號傳導的阻斷劑；拮抗劑；及全身性增加抗腫瘤T細胞頻率之一或多種藥劑；克服腫瘤微環境內之不同免疫抑制途徑(例如阻斷抑制性受體接合(例如PD-L1/PD-1相互作用)、耗乏或抑制Treg (例如使用抗CD25單株抗體(例如達利珠單抗(daclizumab))或藉由離體抗CD25珠粒耗乏)、抑制代謝酶(諸如IDO)，或逆轉/阻止T細胞惰能或耗竭的藥劑，及在腫瘤位點觸發先天免疫活化及/或發炎的藥劑。
在一個態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為CTLA-4拮抗劑，諸如拮抗CTLA-4抗體。適合的CTLA-4抗體包括例如YERVOY (伊匹單抗(ipilimumab))或曲美單抗(tremelimumab)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為PD-1拮抗劑，諸如拮抗PD-1抗體。適合之PD-1抗體包括例如OPDIVO (尼沃單抗(nivolumab))、KEYTRUDA (帕博利珠單抗(pembrolizumab))或MEDI-0680 (AMP-514；WO2012/145493)。免疫-腫瘤學藥劑亦可包括皮立珠單抗(pidilizumab) (CT-011)，儘管其對PD-1結合之特異性已受到質疑。靶向PD-1受體之另一方法為由PD-L2之胞外域(B7-DC)與IgG1之Fc部分融合而構成的重組蛋白，稱作AMP-224。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為PD-L1拮抗劑，諸如拮抗PD-L1抗體。適合的PD-L1抗體包括例如MPDL3280A (RG7446；WO2010/077634)、德瓦魯單抗(durvalumab) (MEDI4736)、BMS-936559 (WO2007/005874)及MSB0010718C (WO2013/79174)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為LAG-3拮抗劑，諸如拮抗LAG-3抗體。適合之LAG3抗體包括例如BMS-986016 (WO10/19570、WO14/08218)或IMP-731或IMP-321 (WO08/132601、WO09/44273)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為CD137 (4-1BB)促效劑，諸如促效CD137抗體。適合的CD137抗體包括例如優瑞路單抗(urelumab)及PF-05082566 (WO12/32433)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為GITR促效劑，諸如促效GITR抗體。適合的GITR抗體包括例如BMS-986153、BMS-986156、TRX-518 (WO06/105021、WO09/009116)及MK-4166 (WO11/028683)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為IDO拮抗劑。適合的IDO拮抗劑包括例如INCB-024360 (WO2006/122150、WO07/75598、WO08/36653、WO08/36642)、因多莫得(indoximod)、BMS-986205，或NLG-919 (WO09/73620、WO09/1156652、WO11/56652、WO12/142237)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為OX40促效劑，諸如促效OX40抗體。適合的OX40抗體包括例如MEDI-6383或MEDI-6469。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為OX40L拮抗劑，諸如拮抗OX40抗體。適合的OX40L拮抗劑包括例如RG-7888 (WO06/029879)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為CD40促效劑，諸如促效CD40抗體。在又另一實施例中，免疫-腫瘤學藥劑為CD40拮抗劑，諸如拮抗CD40抗體。適合的CD40抗體包括例如魯卡木單抗(lucatumumab)或達西珠單抗(dacetuzumab)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為CD27促效劑，諸如促效CD27抗體。適合的CD27抗體包括例如瓦里木單抗(varlilumab)。
在另一態樣中，免疫-腫瘤學藥劑為MGA271 (針對B7H3) (WO11/109400)。
組合療法意欲包括依序投與此等治療劑，亦即其中各治療劑在不同時間投與，以及此等治療劑或至少兩種治療劑實質上同時投與。實質上同時投與可例如藉由向個體投與具有固定比率之各治療劑的單一劑型或針對各治療劑之多種單一劑型來達成。依序或實質上同時投與各治療劑可藉由任何適當途徑實現，包括(但不限於)經口途徑、靜脈內途徑、肌肉內途徑，及經由黏膜組織直接吸收。治療劑可藉由相同途徑或藉由不同途徑投與。舉例而言，選定組合中之第一治療劑可藉由靜脈內注射投與，而組合中之其他治療劑可經口投與。替代地，例如，所有治療劑可經口投與或所有治療劑可藉由靜脈內注射投與。組合療法亦可涵蓋如上文所描述之治療劑另外與其他生物活性成分及非藥物療法(例如手術或輻射治療)組合投與。在組合療法進一步包含非藥物治療之情況下，非藥物治療可在任何適合的時間進行，只要治療劑與非藥物治療之組合之共同作用達成有益效果即可。舉例而言，在適當情況下，當非藥物治療暫時自治療劑投與中移除(可能隔數天或甚至數週)時，仍達成有益效果。
如本文所用，術語「細胞」意指活體外、離體或活體內之細胞。在一些實施例中，離體細胞可為自生物體(諸如哺乳動物)切除之組織樣本的一部分。在一些實施例中，活體外細胞可為細胞培養物中之細胞。在一些實施例中，活體內細胞為存活於生物體(諸如哺乳動物)中之細胞。
如本文所用，術語「接觸」係指使指定部分彙集於活體外系統或活體內系統中。舉例而言，DGKα及DGKζ酶與式(I)化合物「接觸」包括將本發明化合物投與至具有DGKα及DGKζ的個體或患者，諸如人類，以及例如將式(I)化合物引入包含含有DGKα及DGKζ酶之細胞或純化製劑的樣本中。
術語「DGKα及DGKζ抑制劑」係指能夠抑制T細胞中之二醯基甘油激酶α及/或二醯基甘油激酶ξ (DGKα及DGKζ)之活性、從而引起T細胞刺激的藥劑。DGKα及DGKζ抑制劑可為可逆或不可逆的DGKα及DGKζ抑制劑。「可逆的DGKα及DGKζ抑制劑」為在催化位點或在非催化位點處可逆地抑制DGKα及DGKζ酶活性的化合物，且「不可逆的DGKα及DGKζ抑制劑」為藉由與酶形成共價鍵而不可逆地破壞DGKα及DGKζ酶活性的化合物。
可用式(I)化合物治療之癌症類型包括(但不限於)腦癌、皮膚癌、膀胱癌、卵巢癌、乳癌、胃癌、胰臟癌、前列腺癌、結腸癌、血液癌、肺癌及骨癌。此類癌症類型之實例包括神經母細胞瘤、腸癌(諸如直腸癌、結腸癌、家族性腺瘤多發性息肉癌及遺傳性非多發性息肉大腸直腸癌)、食道癌、唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、髓質甲狀腺癌、乳頭狀甲狀腺癌、腎癌、腎實質癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、子宮內膜癌、絨毛膜癌、胰臟癌、前列腺癌、睪丸癌、乳癌、泌尿癌、黑色素瘤、腦瘤(諸如神經膠母細胞瘤、星形細胞瘤、腦膜瘤、神經管胚細胞瘤及周邊神經外胚層腫瘤)、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、成人T細胞白血病淋巴瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、肝細胞癌、膽囊癌、支氣管癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多發性骨髓瘤、基底癌、畸胎瘤、視網膜母細胞瘤、脈絡膜黑色素瘤、精原細胞瘤、橫紋肌肉瘤、顱咽管瘤、骨肉瘤、軟骨肉瘤、肌肉瘤、脂肪肉瘤、纖維肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing sarcoma)及漿細胞瘤。
一或多種額外醫藥劑或治療方法，諸如抗病毒劑、化學治療劑或其他抗癌劑、免疫增強劑、免疫抑制劑、輻射、抗腫瘤及抗病毒疫苗、細胞介素療法(例如IL2及GM-CSF)及/或酪胺酸激酶抑制劑，可以視情況與式(I)化合物組合使用以治療DGKα及DGKζ相關疾病、病症或病狀。該等藥劑可以與本發明化合物合併成單一劑型，或該等藥劑可作為各別劑型同時或依序投與。
適合的化學治療劑或其他抗癌劑包括例如烷基化劑(包括(但不限於)氮芥(nitrogen mustard)、乙烯亞胺衍生物、磺酸烷基酯、亞硝基脲及三氮烯)，諸如尿嘧啶氮芥、氮芥(chlormethine)、環磷醯胺(CYTOXAN®)、異環磷醯胺、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、哌泊溴烷(pipobroman)、三伸乙基-三聚氰胺、三伸乙基硫代磷胺、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈脲黴素(streptozocin)、達卡巴嗪(dacarbazine)及替莫唑胺(temozolomide)。
治療黑色素瘤時，適合與式(I)化合物組合使用之藥劑包括：達卡巴嗪(DTIC)，視情況與其他化學療法藥物(諸如卡莫司汀(BCNU)及順鉑(cisplatin))一起；「達特茅斯療法(Dartmouth regimen)」，其由DTIC、BCNU、順鉑及他莫昔芬(tamoxifen)組成；順鉑、長春鹼(vinblastine)及DTIC、替莫唑胺或YERVOY™之組合。式(I)化合物亦可與免疫療法藥物(包括細胞介素，諸如干擾素α、介白素2及腫瘤壞死因子(TNF))組合，以用於治療黑色素瘤。
式(I)化合物亦可與疫苗療法組合使用，以治療黑色素瘤。抗黑色素瘤疫苗在一些方面類似於用於預防由病毒引起之疾病(諸如脊髓灰質炎、麻疹及腮腺炎)的抗病毒疫苗。可將弱化的黑色素瘤細胞或稱為抗原之黑色素瘤細胞之一部分注射至患者中以刺激身體免疫系統來破壞黑色素瘤細胞。
侷限於臂或腿之黑色素瘤亦可使用高溫隔離肢體灌注技術、用包括一或多種式(I)化合物之藥劑組合來治療。此治療方案使所涉及肢體之循環與身體其餘部分暫時隔離，且向供給該肢體之動脈中注射高劑量之化學療法，因此在不使內臟暴露於此等劑量(否則其可能引起嚴重副作用)的情況下向腫瘤區域提供高劑量。通常，將流體升溫至38.9℃至40℃。美法侖係最常用於此化學療法程序中之藥物。其可與稱為腫瘤壞死因子(TNF)之另一種藥劑一起給與。
適合的化學治療劑或其他抗癌劑包括例如抗代謝物(包括(但不限於)葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物及腺苷脫胺酶抑制劑)，諸如甲胺喋呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶、氟尿苷(floxuridine)、阿糖胞苷(cytarabine)、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、噴司他丁(pentostatine)及吉西他濱(gemcitabine)。
適合的化學治療劑或其他抗癌劑進一步包括例如某些天然產物及其衍生物(例如長春花生物鹼(vinca alkaloid)、抗腫瘤抗生素、酶、淋巴因子及表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin))，諸如長春鹼、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)、博萊黴素(bleomycin)、放線菌素d (dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊達比星(idarubicin)、阿糖胞苷(ara-C)、太平洋紫杉醇(paclitaxel) (Taxol)、光神黴素(mithramycin)、脫氧柯福黴素(deoxycoformycin)、絲裂黴素-C (mitomycin-C)、L-天冬醯胺酶、干擾素(尤其IFN-a)、依託泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide)。
其他細胞毒性劑包括諾維本(navelbene)、CPT-11、阿那曲唑(anastrazole)、來曲唑(letrazole)、卡培他濱(capecitabine)、瑞洛薩芬(reloxafine)及著洛薩芬(droloxafine)。
亦適合的為細胞毒性劑，諸如表葉毒素；抗瘤形成酶；拓樸異構酶抑制劑；丙卡巴肼(procarbazine)；米托蒽醌(mitoxantrone)；鉑配位複合物，諸如順鉑及卡鉑(carboplatin)；生物學反應調節劑；生長抑制劑；抗激素治療劑；甲醯四氫葉酸(leucovorin)；喃氟啶(tegafur)；及造血生長因子。
其他抗癌劑包括抗體治療劑，諸如曲妥珠單抗(trastuzumab) (HERCEPTIN®)、針對共刺激分子(諸如CTLA-4、4-1BB及PD-1)的抗體或針對細胞介素(IL-1O或TGF-β)的抗體。
其他抗癌劑亦包括阻斷免疫細胞遷移之彼等抗癌劑，諸如針對趨化因子受體(包括CCR2及CCR4)之拮抗劑。
其他抗癌劑亦包括增強免疫系統之彼等抗癌劑，諸如佐劑或接受性T細胞轉移。
抗癌疫苗包括樹突狀細胞、合成肽、DNA疫苗以及重組病毒。
本發明的醫藥組合物可視情況包括至少一種信號轉導抑制劑(STI)。「信號轉導抑制劑」為選擇性抑制癌細胞正常功能中之信號傳導路徑中的一或多個重要步驟，藉此引起細胞凋亡的藥劑。適合的STI包括(但不限於)：(i) bcr/abl激酶抑制劑，諸如STI 571 (GLEEVEC®)；(ii)表皮生長因子(EGF)受體抑制劑，諸如激酶抑制劑(IRESSA®，SSI-774)及抗體(Imclone：C225 [Goldstein等人,Clin. Cancer Res ., 1:1311-1318 (1995)]及Abgenix：ABX-EGF)；(iii) her-2/neu受體抑制劑，諸如法呢基轉移酶抑制劑(FTI)，諸如L-744,832 (Kohl等人,Nat. Med. , 1(8):792-797 (1995))；(iv) Akt家族激酶或Akt路徑之抑制劑，諸如雷帕黴素(rapamycin) (參見例如Sekulic等人,Cancer Res. , 60:3504-3513 (2000))；(v)細胞週期激酶抑制劑，諸如夫拉平度(flavopiridol)及UCN-O1 (參見例如Sausville,Curr. Med. Chem. Anti-Canc. Agents , 3:47-56 (2003))；及(vi)磷脂醯基肌醇激酶抑制劑，諸如LY294002 (參見例如Vlahos等人,J. Biol. Chem. , 269:5241-5248 (1994))。替代地，至少一種STI及至少一種式(I)化合物可以在單獨的醫藥組合物中。在本發明之一具體實施例中，至少一種式(I)化合物及至少一種STI可以同時或依序投與至患者。換言之，首先可以投與至少一種式(I)化合物，首先可以投與至少一種STI，或至少一種式(I)化合物與至少一種STI可以同時投與。另外，當使用超過一種式(I)化合物及/或STI時，可以任何次序投與該等化合物。
本發明進一步提供用於治療患者之慢性病毒感染的醫藥組合物，其在醫藥學上可接受之載劑中包含至少一種式(I)化合物、視情況存在的至少一種化學治療藥物及視情況存在的至少一種抗病毒劑。
亦提供一種用於治療患者之慢性病毒感染的方法，其藉由投與有效量之上述醫藥組合物來進行。
在本發明之一具體實施例中，至少一種式(I)化合物與至少一種化學治療劑同時或依序投與至患者。換言之，可首先投與至少一種式(I)化合物，可首先投與至少一種化學治療劑，或可同時投與至少一種式(I)化合物及至少一種STI。另外，當使用超過一種式(I)化合物及/或化學治療劑時，該等化合物可以任何次序投與。類似地，任何抗病毒劑或STI亦可在相較於投與式(I)化合物的任何時點投與。
可以使用本發明組合療法治療之慢性病毒感染包括(但不限於)由以下引起之疾病：C型肝炎病毒(HCV)、人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、細胞巨大病毒(CMV)、單純性疱疹病毒(HSV)、埃-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus，EBV)、水痘帶狀疱疹病毒、科沙奇氏病毒(coxsackie virus)、人類免疫缺乏病毒(HIV)。值得注意的是，寄生蟲感染(例如瘧疾)亦可藉由上文方法來治療，其中視情況添加已知治療寄生蟲病狀之化合物來代替抗病毒劑。
預期與式(I)化合物組合使用的適合抗病毒劑可以包含核苷及核苷酸逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉錄酶抑制劑(NNRTI)、蛋白酶抑制劑以及其他抗病毒藥。
適合的NRTI之實例包括齊多夫定(zidovudine) (AZT)；地達諾新(didanosine) (ddl)；紮西他濱(zalcitabine) (ddC)；司他夫定(stavudine) (d4T)；拉米夫定(lamivudine) (3TC)；阿巴卡韋(abacavir) (1592U89)；阿丹弗酯(adefovir dipivoxil) [雙(POM)-PMEA]；洛布卡韋(lobucavir)；BCH-I0652；艾米特賓(emitricitabine) [(-)-FTC]；β-L-FD4 (亦稱為β-L-D4C且命名為β-L-2',3'-雙去氧-5-氟-胞嘧啶核苷)；DAPD ((-)-β-D-2,6-二胺基-嘌呤二氧雜環戊烷)；及洛德諾新(lodenosine) (FddA)。典型的適合NNRTI包括奈韋拉平(nevirapine) (BI-RG-587)；地拉韋啶(delaviradine) (BHAP、U-90152)；依法韋侖(efavirenz) (DMP-266)；PNU-142721；AG-1549；MKC-442 (1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2,4(1H,3H)-嘧啶二酮)；以及(+)-四環香豆素A (calanolide A) (NSC-675451)及四環香豆素B。典型的適合蛋白酶抑制劑包括沙奎那韋(saquinavir) (Ro 31-8959)；利托那韋(ritonavir) (ABT-538)；茚地那韋(indinavir) (MK-639)；奈非那韋(nelfnavir) (AG-1343)；安普那韋(amprenavir) (141W94)；拉西那韋(lasinavir)；DMP-450；BMS-2322623；ABT-378；及AG-1549。其他抗病毒劑包括羥基脲、利巴韋林(ribavirin)、IL-2、IL-12、潘它夫西地(pentafuside)及Yissum項目第11607號。
本發明亦包括適用於例如治療或預防DGKα及DGKζ相關疾病或病症及本文所提及之其他疾病的醫藥套組，其包括一或多個容器，該一或多個容器含有包含治療有效量之式(I)化合物的醫藥組合物。如對熟習此項技術者顯而易見的是，必要時，此類套組可進一步包括多種習知醫藥套組組件中之一或多者，諸如具有一或多種醫藥學上可接受之載劑的容器、額外容器。套組中亦可包括呈插頁或呈標籤形式之說明書，其指示所投與組分之量、投藥指南及/或用於混合組分之指南。
組合療法意欲包括依序投與此等治療劑，亦即其中各治療劑在不同時間投與，以及此等治療劑或至少兩種治療劑實質上同時投與。實質上同時投與可例如藉由向個體投與具有固定比率之各治療劑的單一劑型或針對各治療劑之多種單一劑型來達成。依序或實質上同時投與各治療劑可藉由任何適當途徑實現，包括(但不限於)經口途徑、靜脈內途徑、肌肉內途徑，及經由黏膜組織直接吸收。治療劑可藉由相同途徑或藉由不同途徑投與。舉例而言，選定組合中之第一治療劑可藉由靜脈內注射投與，而組合中之其他治療劑可經口投與。替代地，例如，所有治療劑可經口投與或所有治療劑可藉由靜脈內注射投與。組合療法亦可涵蓋如上文所描述之治療劑與其他生物活性成分及非藥物療法(例如手術或輻射治療)進一步組合投與。在組合療法進一步包含非藥物治療之情況下，非藥物治療可在任何適合的時間進行，只要治療劑與非藥物治療之組合之共同作用達成有益效果即可。舉例而言，在適當情況下，當非藥物治療暫時自治療劑投與中移除(可能隔數天或甚至數週)時，仍達成有益效果。
本發明亦提供醫藥學上可接受之組合物，其包含與一或多種醫藥學上可接受之載劑(添加劑)及/或稀釋劑一起調配的治療有效量之一或多種式(I)化合物且視情況包含一或多種上文所描述之額外治療劑。
本發明化合物可藉由任何適合手段投與，以用於本文所描述之任何用途，例如經口，諸如錠劑、膠囊(其各自包括持續釋放或定時釋放調配物)、丸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、懸浮液(包括奈米懸浮液、微米懸浮液、噴霧乾燥分散液)、糖漿及乳液；舌下；經頰；非經腸，諸如藉由皮下、靜脈內、肌肉內或胸骨內注射，或輸注技術(例如作為無菌可注射水溶液或非水溶液或懸浮液)；鼻，包括投與鼻膜，諸如藉由吸入噴霧；體表，諸如以乳霜或軟膏形式；或直腸，諸如以栓劑形式。其可單獨投與，但一般將與基於所選投藥途徑及標準醫藥實踐而選擇之醫藥載劑一起投與。
如本文所用，片語「醫藥學上可接受之載劑」意謂涉及將本發明化合物自身體之一個器官或部分載運或傳輸至身體之另一器官或部分的醫藥學上可接受之材料、組合物或媒劑，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、製造助劑(例如潤滑劑、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅，或硬脂酸)，或溶劑囊封材料。各種載劑就與調配物中之其他成分相容而言必須為「可接受的」，包括亦即佐劑、賦形劑或媒劑，諸如稀釋劑、防腐劑、填充劑、流動調節劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、甜味劑、調味劑、芳香劑、抗細菌劑、抗真菌劑、潤滑劑及分散劑，此視投藥模式及劑型之性質而定；且對患者無害。
術語「醫藥組合物」意謂包含本發明化合物與至少一種額外醫藥學上可接受之載劑組合的組合物。
醫藥學上可接受之載劑根據一般熟習此項技術者見識內的許多因素來調配。此等包括(但不限於)：所調配之活性劑的類型及性質；含有藥劑之組合物所投與的個體；組合物之預期投與途徑；以及所靶向之治療適應症。醫藥學上可接受之載劑包括水性及非水性液體介質，以及各種固體及半固體劑型。此類載劑可包括除活性劑之外的許多不同成分及添加劑，此類額外成分出於一般熟習此項技術者熟知的多種原因包括於調配物中，例如穩定活性劑、黏合劑等。醫藥學上可接受之適合載劑的描述及涉及其選擇的因素可見於多種容易獲得的來源中，諸如Allen, L. V. Jr.等人Remington: The Science and Practice of Pharmacy ( 第 2 卷 ) , 第22版(2012), Pharmaceutical Press。
本發明化合物之給藥方案當然將視已知因素而變化，諸如特定藥劑之藥力學特徵及其投藥模式及途徑；接受者之物種、年齡、性別、健康狀況、醫學條件及體重；症狀之性質及程度；同時發生之治療的種類；治療頻率；投藥途徑、患者之腎功能及肝功能以及所需效果。
藉助於一般導引，各活性成分在用於指定效果時的每日口服劑量將在每天約0.001至約5000 mg之間，較佳每天約0.01至約1000 mg之間，且最佳每天約0.1至約250 mg之間的範圍內。靜脈內投與時，在恆定速率輸注期間最佳劑量將在每分鐘約0.01至約10 mg/kg之範圍內。本發明化合物可以單次日劑量形式投與，或每日總劑量可分成每日兩次、三次或四次分次劑量投與。
化合物通常以與針對預期投藥形式(例如口服錠劑、膠囊、酏劑及糖漿)適當選擇且與習知醫藥實踐相符的適合醫藥稀釋劑、賦形劑或載劑(在本文中統稱為醫藥載劑)之混雜物形式投與。
適合於投與之劑型(醫藥組合物)可含有每劑量單位約1毫克至約2000毫克之活性成分。在此等醫藥組合物中，按組合物之總重量計，活性成分通常以約0.1-95重量%之量存在。
用於經口投與之典型膠囊含有至少一種本發明化合物(250 mg)、乳糖(75 mg)及硬脂酸鎂(15 mg)。使混合物穿過60目篩且裝入L號明膠膠囊中。
藉由將本發明化合物中之至少一者(250 mg)無菌置入小瓶中，無菌冷凍-乾燥及密封來製造典型可注射製劑。對於使用，將小瓶的內含物與2 mL生理食鹽水混合以產生可注射製劑。
本發明範疇內包括醫藥組合物，其包含治療有效量的本發明化合物中之至少一者(單獨或與醫藥載劑組合)作為活性成分。視情況，本發明化合物可單獨使用，與本發明其他化合物組合使用或與一或多種其他治療劑(例如抗癌劑或其他醫藥活性材料)組合使用。
不論所選投與途徑如何，藉由熟習此項技術者已知之習知方法，將可以適合水合形式使用之本發明化合物及/或本發明之醫藥組合物調配成醫藥學上可接受之劑型。
可改變本發明醫藥組合物中之活性成分之實際劑量水準以便獲得一定量之活性成分，該量之活性成分對於特定患者、組合物及投藥模式有效地達成治療反應，而對患者無毒。
所選劑量水準將視多種因素而定，包括所用之特定本發明化合物或其酯、鹽或醯胺之活性、投與途徑、投與時間、所用特定化合物之排泄或代謝速率、吸收速率及程度、治療持續時間、與所用特定化合物組合使用之其他藥物、化合物及/或材料、所治療之患者之年齡、性別、體重、病狀、一般健康及先前病史及醫學技術中熟知之類似因素。
一般熟習此項技術之醫師或獸醫可容易判定及開具所需醫藥組合物之有效量。舉例而言，醫師或獸醫開始可以低於為達成所要治療作用所需之水準給與醫藥組合物中所用之本發明化合物，且逐漸增加劑量直至達成該效果。
一般而言，本發明化合物之適合日劑量為有效產生治療作用之最低劑量的化合物量。此有效劑量將一般視上述因素而定。一般而言，本發明化合物用於患者之口服、靜脈內、腦室內及皮下劑量在每公斤體重每日約0.01 mg至約50 mg範圍內。
必要時，活性化合物之有效日劑量可以兩次、三次、四次、五次、六次或更多次子劑量投與，該等子劑量視情況以單位劑型在一天內以適當時間間隔單獨投與。在本發明之某些態樣中，給藥為每天投藥一次。
雖然本發明化合物可能單獨投與，但該化合物較佳以醫藥調配物(組合物)形式投與。
當與本發明化合物組合使用時，上述其他治療劑可例如以Physicians' Desk Reference (PDR)中所指示或如一般熟習此項技術者以其他方式測定之彼等量使用。在本發明之方法中，此類其他治療劑可在本發明化合物投與之前、同時或之後投與。
製備方法 本發明化合物可藉由熟習有機化學技術者可利用之多種方法合成。下文描述用於製備本發明化合物之通用合成流程。此等流程具說明性且不意欲限制熟習此項技術者可用於製備本文所揭示之化合物的可能技術。製備本發明化合物之不同方法對於熟習此項技術者為顯而易見的。下文所描述之實例章節中提供藉由通用流程所描述方法製備之本發明化合物之實例。同對掌性實例之製備可藉由熟習此項技術者已知之技術來進行。舉例而言，同對掌性化合物可藉由對掌性相製備型HPLC分離外消旋產物或非對映異構體來製備。替代地，實例化合物可藉由已知得到對映異構性或非對映異構性增濃產物之方法製備。
此章節中描述之反應及技術在適於所用試劑及材料之溶劑中進行且適合於所進行之轉化。另外，在下文指定之合成方法之說明中，應瞭解所提出之所有反應條件(包括溶劑選擇、反應氛圍、反應溫度、實驗持續時間及處理程序)均選擇熟習此項技術者應容易識別之該反應之標準條件。熟習有機合成技術者應瞭解，分子之各個部分上所存在之官能性須與所提出之試劑及反應相容。對與反應條件相容之取代基的此類限制係熟習此項技術者顯而易見的，當存在不相容取代基時需要替代方案。有時需要作出判斷以修改合成步驟次序或選擇一種特定方法流程而非另一種，從而獲得本發明化合物。亦認識到，在本領域中，任何合成途徑之規劃中的另一主要考慮因素為審慎選擇用於保護本發明所描述化合物中存在之反應性官能基的保護基。向經培訓之從業者描述許多替代方案的權威性說明為Wuts及Greene,Greene's Protective Groups in Organic Synthesis , 第四版, Wiley and Sons (2007)。
在其他實施例中，本發明之中間物及實例可使用此項技術中已知之立體選擇性方法製備，該等方法之實例顯示於以下流程中。 流程1
Figure 02_image029
可使所描繪類型之對掌性㗁唑啶酮之兩種對映體與醯氯在低溫下反應，得到N-醯基衍生物。此等可轉化成相關硼烯醇化物且與2-(2-烷基-1,3-二氧雜環戊-2-基)乙醛縮合，得到具有已知立體化學之4-苯甲基-3-(2-烷基-3-羥基-4-(2-烷基-1,3-二氧雜環戊-2-基)丁醯基)㗁唑啶酮。使用例如含氯化鐵之丙酮對產物二氧雜環戊烷進行去保護，可得到1-(4-苯甲基-2-側氧基㗁唑啶-3-基)-2-烷基-3-羥烷基-1,5-二酮。之後使用苯甲胺對例如三乙醯氧基硼氫化鈉進行還原胺化，可得到4-苯甲基-3-(5-(苯甲基胺基)-2-烷基-3-羥基烷醯基)㗁唑啶酮之非對映異構混合物。所得胺可藉由在微波條件下在MeOH中加熱而分子內環化，得到可層析分離的1-苯甲基-3-烷基-4-羥基-6-烷基哌啶-2-酮。之後用例如硼烷或LAH對產物哌啶酮進行還原，可得到N-苯甲基-2-烷基-4-羥基-5-烷基哌啶。在氫解條件下在二碳酸二-三級丁酯存在下移除苯甲基部分，可允許得到4-羥基-2,5-二烷基哌啶-1-甲酸三級丁酯，其為合成本發明之實例中的適用中間物。在另一步驟中，此等及相關中間物中之4-羥基部分之立體化學可使用標準光延條件(Mitsunobu condition)，用對硝基苯甲酸進行逆轉，得到酯，藉由鹼催化水解可自該等酯釋放所需醇。用適當功能化的㗁唑啶酮及醛，採用此等方法，可得到具有已知立體化學之中間物。利用此類化合物來得到本發明之額外實施例之實例顯示在概述於以下流程中之方法中。 流程2
Figure 02_image031
在此等情況下，N-boc保護的2,5-二烷基-4-羥基哌啶可首先在標準條件下去保護，且接著與適合衍生的1-烷基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮或1-烷基-1,5-㖠啶-2(1H)-酮反應，得到隨後可在任一種光延條件下反應的產物醇；或在SNAr條件下與所選擇雜環反應，得到本發明之實例。替代地，N-boc保護的2,5-二烷基-4-羥基哌啶可首先在光延條件下與適當功能化的苯酚反應，或在SNAr條件下與所選擇雜環反應，得到上文所描繪之類型的額外中間物。隨後與適當功能化的吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮或㖠啶-2(1H)-酮反應，可得到額外實例。在一些情況下，可使2,5-二烷基-4-羥基哌啶或其相關醚與4,6-二氯-1-烷基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮或4,6-二氯-1-烷基-1,5-㖠啶-2(1H)-酮反應，得到相關4-N-哌啶基衍生物，因此促進在雙環雜環之6位處引入額外官能性，例如腈基，其為本發明之其他實施例。
實例 以下實例說明本發明之特定及較佳實施例且不限制本發明之範疇。除非另外規定，否則化學縮寫及符號以及科學縮寫及符號具有其常見及慣用含義。本申請案中之實例及別處所用之其他縮寫如上文所定義。常見中間物一般適用於製備超過一個實例且依序標識(例如中間物1、中間物2等)且縮寫為Int. 1或I1、Int. 2或I2等。實例之化合物藉由製備其之實例及步驟標識(例如「1-A」表示實例1步驟A)，或僅藉由其中化合物為實例之標題化合物的實例標識(例如「1」表示實例1之標題化合物)。在一些情況下，描述中間物或實例之替代製備。熟習合成技術之化學家常可基於如下一或多個考慮因素設計可能適宜之替代製備，諸如：較短反應時間、較廉價之起始材料、操作或分離之簡易性、改良之產率、能夠催化、避免毒性試劑、專用儀器之可用性及減少線性步驟之數目。描述替代製法之意圖進一步使得能夠製備本發明之實例。在一些情況下，所概述實例及申請專利範圍中之一些官能基可經此項技術中已知之熟知生物電子等排替代物置換，例如用四唑或磷酸酯部分置換羧酸基團。氘化二甲亞碸中所收集之1 H NMR資料在資料處理時使用水抑制。就水抑制效應而言，所報導之頻譜未校正。鄰近於水抑制頻率3.35 ppm之質子呈現減弱之信號強度。
在實例中，使用散列楔形鍵隱含相對立體化學。化合物名稱前之「(+/-)」標示指示外消旋混合物。「(rel)」標示指示，化合物之所有立體化學標示為相對且不絕對的。在對掌性中心處使用非散列鍵隱含未知的相對立體化學。在下文表中，實例之立體化學顯示於「Stereo. Chem.」標記列中，其中標示「A」表示「非對掌性」，標示「R」表示外消旋混合物，且標示「H」表示同對掌性材料。 縮寫 Ac                           乙醯基 anhyd.                     無水 aq.                          水性 BOP                        六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基參-(二甲胺基)-鏻 Bu                           丁基 DCM                       二氯甲烷 DEA                        二乙胺 DIEA或DIPEA        二異丙基乙胺 DMF                       二甲基甲醯胺 DMSO                     二甲亞碸 dppf                        1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵 Et                            乙基 EtOAc                     乙酸乙酯 EtOH                       乙醇 h，hours或hrs        小時 HCl                         鹽酸 HPLC                      高壓液相層析 LC                          液相層析 LCMS                     液相層析質譜法 M                            莫耳 mM                         毫莫耳 Me                          甲基 MeOH                    甲醇 Mesyl-Cl                 甲磺醯氯 MHz                        百萬赫 mins                        分鐘 M+1 (M+H)+ MS                          質譜法 n或N                       正(常) NH4 OAc                  乙酸銨 nM                          奈莫耳 NMPN -甲基吡咯啶酮 Pd2 (dba)3 參-(二亞苄基丙酮)二鈀 pet ether                  石油醚 Ph                           苯基 POCl3 氧氯化磷 rt或Ret time            滯留時間 sat.                          飽和 TEA                        三乙胺 TFA                        三氟乙酸 THF                        四氫呋喃
合成適用於製備本發明之實例之中間物中可採用之方法顯示於以下流程中。
所顯示類型之苯并㗁 𠯤-2,4(1H)-二酮可用強鹼及諸如碘甲烷之甲基化試劑處理，得到1-甲基-2H-苯并[d][1,3]㗁 𠯤-2,4(1H)-二酮。此等可用例如硝基乙酸鹽處理，得到1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1H,3H)-二酮。此類化合物轉而可轉化成相關4-氯衍生物，其可與多種官能化的哌啶反應，得到本發明之實例。
在其他方法中，吡啶甲酸可在標準條件下經酯化且接著用例如乙酸酐處理，得到3-乙醯胺基吡啶甲酸乙酯。此等可在標準條件下經烷基化且隨後用過氧化氫與三氟乙酸酐之混合物處理，得到相關N-氧化物，例如2-(乙氧羰基)-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶1-氧化物。在此項技術中已知之條件下，此等中間物可轉化成6-氰基-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸酯，用鹼處理，其可進行環化，得到1,5-㖠啶-2,4(1H,3H)-二酮。此類型之化合物可以複數種方式進行衍生化，得到多種適用中間物。舉例而言，在標準硝化條件下處理可產生相關1-甲基-3-硝基-1,5-㖠啶-2,4(1H,3H)-二酮，其在標準條件下可轉化成4-氯-或4-三氟甲烷磺酸酯中間物，該等中間物可與多種官能化的哌啶反應，得到本發明之額外實例。替代地，在溴化條件(例如含N-溴丁二醯亞胺之DMF)下處理可產生相關3-溴衍生物，當如上文所描述進行衍生化時其允許在雜環之4位處引入多種哌啶以及在㖠啶之3位處進一步衍生化。舉例而言，可經由偶合此項技術中已知之化學物質而在此載體處引入芳族及雜芳族部分。
在額外方法中，自相關3-胺基-吡啶甲酸乙酯產生之3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯可如上文所描述進行處理，得到6-溴-1-甲基-1,5-㖠啶-2,4(1H,3H)-二酮，其允許在㖠啶雜環之6位處引入多種部分，一個例子為如流程1中所示，在此位置處引入氰基官能基。 流程1
Figure 02_image033
Figure 02_image035
Figure 02_image037
可用於合成本發明之中間物之額外方法顯示於以下流程中。
3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯用2-氰乙醯氯處理可進行環化，得到6-溴-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈。此等可在N1標準條件下進行烷基化且隨後轉化成適用於製備其他實例之相關三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯。替代地，依序用POCl3 及含HCl之二㗁烷處理，得到亦呈適用中間物之4,6-二氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈。 流程2
Figure 02_image039
Figure 02_image041
Figure 02_image043
可適用於在本發明之實例之6位處引入氰基模體之其他合成方法可能涉及在鈀催化條件下用鋅及氰化鋅對6-溴-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯中間物進行處理，得到3-(2-氰基乙醯胺基)-6-氰基吡啶甲酸乙酯。此等可使用如先前所描述之方法進行衍生化，得到4-氯-6-異氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈，其可與多種官能化的哌啶反應，得到多種本發明之實例。
額外適用中間物可藉由使適當官能化的㖠啶酮及喹啉酮雜環與不同地官能化的哌啶縮合來製備，如以下流程中所指示。此類中間物可藉由使用例如光延或SNAr 反應，用適當官能化的芳族或雜芳族偶合搭配物進一步加工來轉化成本發明之實例。 流程3
Figure 02_image045
用於製備適用哌啶中間物及額外實例之方法顯示於以下流程中。 流程4
Figure 02_image047
Figure 02_image049
在此等情況下，N-保護的順式-4-羥基-3-烷基哌啶可例如在光延條件下用羧酸處理，得到反式-4-苯甲醯氧基-3-烷基哌啶。隨後，此等可進行水解，得到可用於類似於先前論述之方法中之相關反式-4-羥基-3-烷基哌啶，由此隨後進行去保護且使中間物反式4-羥基-3-烷基哌啶與適當官能化的㖠啶酮或喹啉酮進行縮合，得到反式-4-羥基-3-烷基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶或相關喹啉酮中間物，其可在光延或SNAr 條件下再次進行反應得到本發明之其他實例。
在其他情況下，可能傾向於製備中間物哌啶醚，該中間物隨後可與適當官能化的㖠啶酮及喹啉酮反應，得到額外實例。一些說明性實例顯示於以下流程中。在此方法中，所顯示類型之N-保護的烷基哌啶-4-酮可藉由此項技術中已知之方法進行還原，得到N-保護的3-烷基哌啶-4-醇。 流程5
Figure 02_image051
Figure 02_image053
Figure 02_image055
Figure 02_image057
烷基及羥基取代基之相對立體化學可藉由多種方法來控制，一些實例為同時用磷酸及硼氫化鈉處理得到佔優勢地反式-產物，或如所顯示的使用含三二級丁基硼氫化鋰(L-selectride)之THF得到佔優勢地順式-產物。在SNAR 條件下用強鹼及適當官能化的雜環對此等中間物進行進一步處理，可導致合成N-保護的順式-或反式-3-烷基-4-(雜芳基氧基)哌啶。可使此等去保護之中間物與適當官能化的㖠啶酮或喹啉酮反應，得到多種本發明之實例。
中間物1 (+/-) 反式-1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-醇
Figure 02_image059
在-10℃下，向1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-酮(7.5 g，36.9 mmol)於水(50 mL)及甲醇(25 mL)中之溶液中逐滴添加磷酸(85%，4.25 g，36.9 mmol)。接著逐份添加硼氫化鈉(2.79 g，73.8 mmol)，且在添加後將所得混合物升溫至室溫且繼續攪拌隔夜。藉由添加5 M氫氧化鈉溶液將溶液之pH調整至~ 9。所得混合物用乙酸乙酯(3 × 15 mL)萃取，且經合併之萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黏稠黃色油狀之產物(4.65 g，22.65 mmol，61.4%產率)。LCMS(m/z) : (M+H)+ = 206.3,1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.52-7.12 (m, 5H), 3.71-3.40 (m, 2H), 3.22-3.10 (m, 1H), 2.93-2.86 (m, 1H), 2.85-2.79 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.97-1.87 (m, 1H), 1.76-1.56 (m, 3H), 1.54-1.39 (m, 1H), 1.05-0.86 (m, 3H)。
中間物2 (+/-) 反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image061
對(+/-) (反式)-1-苯甲基-3-甲基哌啶-4-醇(2.5 g，12.18 mmol)及Boc-酸酐(3.11 mL，13.39 mmol)於甲醇(50 mL)中之溶液進行脫氣，且用氮氣(2 ×)沖洗。接下來，添加10% Pd-C (1.2 g，1.128 mmol)，且再次對混合物抽真空且用氮氣(2 ×)沖洗，之後抽真空且在1個大氣壓(氣球)下填充氫氣。在氫氣氛圍下劇烈攪拌反應混合物2天。接著，其經由矽藻土過濾，且濾液用甲醇洗滌且將洗滌液與初始濾液合併。真空濃縮經合併之溶液，得到呈黏稠黃色油狀之產物(1.71 g，7.94 mmol，65.2%產率)。LCMS：(m/z) (M-tBu+ACN+H)+ = 201.2。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 4.10-3.85 (m, 2H), 3.40-3.24 (m, 1H), 2.93-2.71 (m, 1H), 2.62-2.34 (m, 1H), 1.99-1.87 (m, 1H), 1.50-1.46 (m, 11H), 1.57-1.40 (m, 12H), 1.06-0.99 (m, 3H)。
中間物3 (+/-) 5-異丙氧基-2-((反式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶·TFA
Figure 02_image063
向(+/-) 反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.557 mmol)於THF (4 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.393 mL，1.393 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(0.100 mL，0.836 mmol)。接著在60℃下加熱反應混合物隔夜。接著，藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯萃取。分離有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黃色油狀之粗產物。藉由製備型逆相HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統作為溶離劑，來純化此材料。合併均質級分(fraction)且減壓濃縮。接著，殘餘材料在室溫下用TFA (0.5 mL)於DCM (2 mL)中之混合物處理3 h。接著真空濃縮所得混合物，得到呈棕色油狀之產物(40 mg，0.110 mmol，19.70%產率)。
中間物4 (+/-) 2-((反式-3-乙基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶
Figure 02_image065
向(+/-) 反式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.436 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.090 mL，1.090 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌混合物30 min，接著添加含2-氟-5-異丙氧基吡啶(0.078 mL，0.654 mmol)之THF (1 mL)，且在氮氣下於60℃下加熱反應混合物5小時。將反應混合物冷卻至室溫，添加水，且所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取。合併有機層，用鹽水洗滌且接著經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠黃色油狀之粗產物。藉由矽膠急驟層析，使用20%乙酸乙酯/己烷作為溶離劑純化此材料。合併均質級分且真空蒸發，得到呈黏稠無色油狀之產物。此物質在室溫下直接用含TFA (1 mL)之DCM (3 mL)處理隔夜。接著，真空濃縮所得混合物，得到呈棕色油狀之標題化合物之TFA鹽(153 mg，0.311 mmol，71.3%產率)。LCMS：(m/z) 265: (M+H)+ = 265.25。
中間物5 (+/-) 5-異丙基-2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image067
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.697 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，逐份添加氫化鈉(60%，於礦物油中) (69.7 mg，1.742 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10 min，接著添加含2-氯-5-異丙基吡啶(163 mg，1.045 mmol)之THF (1 mL)。接著在60℃下加熱反應混合物隔夜。接著，藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取。收集有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到黏稠棕色油。藉由製備型逆相HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化粗產物。合併均質級分且真空蒸發，且殘餘物在室溫下用含TFA (1 mL)之DCM (2 mL)處理3 h。真空壓縮所得溶液，得到呈黃色油狀之標題化合物之TFA鹽(58.3 mg，0.126 mmol，18.10%產率)。LCMS：(m/z): 235.1:(M+H)+ 。
中間物6 (+/-) 5-異丙氧基-2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image069
向順式-及反式-三級丁基-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸酯之9:1混合物(120 mg，0.557 mmol)於THF (4 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.393 mL，1.393 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌混合物30 min，接著添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(0.100 mL，0.836 mmol)，且在60℃下加熱反應混合物隔夜。接著，藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取。合併萃取物，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黃色油狀之粗產物。藉由逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化粗產物。合併均質級分，且減壓濃縮隔夜。接著，將殘餘物溶解於二氯甲烷(2 mL)中，且添加0.5 mL TFA。在室溫下攪拌溶液3小時。接著，真空蒸發混合物，得到呈黏稠棕色油狀之標題化合物之TFA鹽(40 mg，0.110 mmol，19.70%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 251.3。
中間物7 (+/-) 2-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶
Figure 02_image071
向4-羥基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.349 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(0.872 mL，0.872 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(0.062 mL，0.523 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，且接著藉由添加水來淬滅。所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取，且經合併之萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空蒸發，得到呈棕色油狀之粗產物。藉由逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化產物。收集均質級分且減壓濃縮。接著，將殘餘物溶解於DCM (3 mL)中，且在室溫下用TFA (1 mL)處理4小時。接著，真空濃縮溶液，得到呈黏稠棕色油狀之標題化合物之TFA鹽(24 mg，0.063 mmol，18.18%產率)。(m/z) :(M+H)+ = 251.3。
中間物8 (+/-) 5-(二氟甲基)-2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image073
向順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.557 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.393 mL，1.393 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著添加含2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(137 mg，0.836 mmol)之THF (1 mL)，且在60℃下加熱混合物隔夜。藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯萃取。經合併之萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色油狀之粗產物。接著，藉由逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化粗產物。合併均質級分且減壓濃縮。接著，將殘餘物溶解於二氯甲烷(1 mL)中，且在室溫下用TFA (0.5 mL)處理3 h。接著，真空蒸發混合物，得到呈黏稠棕色油狀之標題化合物之TFA鹽(160 mg，0.340 mmol，61.0%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 243.3。
中間物9 (+/-) 2-異丙基-6-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image075
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.697 mmol)於無水THF (2 mL)中之溶液中，逐份添加氫化鈉(69.7 mg，1.742 mmol) (60%，於礦物油中)。添加後，在室溫下攪拌反應混合物10 min，接著添加含2-氯-6-異丙基吡啶(163 mg，1.045 mmol)之THF (1 mL)，且在氮氣下在60℃下加熱混合物隔夜。接著，藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取。合併萃取物，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠棕色油狀之粗產物。藉由製備型逆相HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化產物。合併均質級分且減壓濃縮。將殘餘物溶解於DCM (2 mL)中且添加TFA (1 mL)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時，之後真空濃縮，得到呈黃色黏稠油狀之標題化合物之TFA鹽(53 mg，0.115 mmol，16.45%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+. = 235.1。
中間物10 (+/-) 2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-(三氟甲基)吡啶
Figure 02_image077
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.697 mmol)於無水THF (2 mL)中之溶液中，添加氫化鈉(69.7 mg，1.742 mmol) (60%，於礦物油中)。在室溫下攪拌混合物10 min，接著添加含2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(190 mg，1.045 mmol)之THF (1 mL)，且在60℃下加熱反應混合物3 h，之後藉由添加水來淬滅。接著，使用乙酸乙酯(3 ×)萃取混合物，合併萃取物且用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠棕色油狀之粗產物。使用逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化產物。合併均質級分且真空濃縮。接著，將殘餘物溶解於二氯甲烷(2 mL)中，添加TFA (1 mL)，且在室溫下攪拌所得混合物3 h，之後真空濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物之TFA鹽(157 mg，0.419 mmol，60.2%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ =  260.9。
中間物11 (+/-) 4-異丙基-2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image079
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.697 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.742 mL，1.742 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著添加含2-氯-4-異丙基吡啶(163 mg，1.045 mmol)之THF (1 mL)，且在氮氣下在60℃下加熱所得混合物隔夜。接著藉由添加水來淬滅反應物。接著，使用乙酸乙酯(3 ×)萃取混合物，合併萃取物且用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠棕色油狀之粗產物。使用逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化產物。合併均質級分且真空濃縮。接著，將殘餘物溶解於二氯甲烷(1 mL)中，添加TFA (0.5 mL)，且在室溫下攪拌所得混合物3 h，之後真空濃縮，得到呈黏稠黃色油狀之標題化合物之TFA鹽(42 mg，0.091 mmol，13.04%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 235.0。
中間物12 (+/-) 5-環丙基-2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶
Figure 02_image081
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.464 mmol)於無水THF (2 mL)中之溶液中，逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.161 mL，1.161 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌混合物30 min。接下來，接著添加含2-氯-5-環丙基吡啶(107 mg，0.697 mmol)之THF (1 mL)，且在60℃下加熱反應混合物隔夜。藉由添加水來淬滅反應物。所得混合物用乙酸乙酯(3 ×)萃取，且合併萃取物，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠黃色油狀之粗產物。使用逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，純化產物。合併均質級分且真空濃縮。接著，將殘餘物溶解於二氯甲烷(1 mL)中，添加TFA (0.5 mL)，且在室溫下攪拌所得混合物3 h，之後真空濃縮，得到呈黏稠黃色油狀之標題化合物之TFA鹽(10 mg，0.043 mmol，9.27%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 232.55。
其他相關中間物可藉由下文流程中所顯示之方法來製備，該流程涉及具有氯-嘧啶之無保護的羥基哌啶之鉀烷氧化物鹽的反應。
中間物13 (+/-) 2-((順式-3-甲基哌啶-4-基)氧基)嘧啶
Figure 02_image083
向(+/-) 順式-3-甲基哌啶-4-醇(104 mg，0.901 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(0.901 mL，0.901 mmol)，且在室溫下攪拌混合物30 min。胺基醇並不完全溶解於THF中，且始終觀測到懸浮液，即使在添加鹼後。接著添加2-氯嘧啶(86 mg，0.751 mmol)於THF (1 mL)之溶液，且在60℃下攪拌混合物隔夜。接著，將反應混合物蒸發至乾燥，且粗殘餘物用於隨後實驗中。LCMS：起始B%：0，最終B%：100。梯度時間：3.00 min。終止時間：3.50 min。流速：1.0 mL/min。波長1：220 nm。溶劑對：AA S174/S175。溶劑A：A1=10 mM NH4 OAc/CH3 CN:水(5:95) S174。溶劑B：B1=10 mM NH4 OAc/CH3 CN:水(95:5) S175。管柱，Id：3，名稱：3 (AA SCP 3 min) Acquity BEH C18 1.7 μm 2.1 × 50 mm。滯留時間= 1.213 min。(m/z) : (M+H)+ = 194.2。
以類似方式，製備以下中間物。
Figure 02_image085
表1
中間物編號 雜環 中間物 LCMS RT (min) (m/z) : (M+H)+
I-14
Figure 02_image087
Figure 02_image089
 1.63 236.3
I-15
Figure 02_image091
Figure 02_image093
 0.92 224.0
I-16
Figure 02_image095
Figure 02_image097
 1.02 234.0
I-17
Figure 02_image099
Figure 02_image101
 1.08 302.9 [+ACN]
I-18
Figure 02_image103
Figure 02_image105
 0.98 222.0
I-19
Figure 02_image107
Figure 02_image109
 0.88 208.0
中間物20 6-氟-1-甲基-2H-苯并[d][1,3]㗁 𠯤-2,4(1H)-二酮
Figure 02_image111
向6-氟-1H-苯并[d][1,3]㗁 𠯤-2,4-二酮(2 g，11.04 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中，逐份添加氫化鈉(0.530 g，13.25 mmol)於礦物油中之60%分散液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著逐滴添加碘甲烷(0.829 mL，13.25 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。藉由添加水來淬滅反應物，且分離出黃色固體，藉由過濾收集該黃色固體。將固體懸浮於乙酸乙酯中，且過濾所得混合物，且真空濃縮濾液，得到呈黃色固體狀之產物(395 mg，2.024 mmol，18.33%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 196。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.83-7.74 (m, 2H), 7.55-7.46 (m, 1H)。
中間物21 6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1H,3H)-二酮
Figure 02_image113
向在0℃下之圓底燒瓶中之2-硝基乙酸乙酯(293 mg，2.198 mmol)於NMP (5 ml)中之溶液中，逐份添加氫化鈉(96 mg，2.398 mmol)於礦物油中之60%分散液。在0℃下攪拌反應混合物5分鐘，接著在室溫下攪拌15分鐘。接著，添加6-氟-1-甲基-1H-苯并[d][1,3]㗁 𠯤-2,4-二酮(390 mg，1.998 mmol)，且在120℃下加熱反應混合物2小時。LC/MS顯示反應完成。藉由添加冰-水來淬滅反應物。混合物用1 N HCl溶液酸化。添加乙醚，且產生呈黃色固體狀之6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1H,3H)-二酮(140 mg，0.588 mmol，29.4%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 239。
中間物22 4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮
Figure 02_image115
在密封管中，添加6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2,4(1H,3H)-二酮(140 mg，0.588 mmol)及氧氯化磷(3 mL，32.2 mmol)。在95℃下加熱反應混合物4小時。將混合物倒入冰-水中，用飽和NaHCO3 溶液中和，且用二氯甲烷(2 × 20 mL)萃取。合併有機層，經乾燥(MgSO4 )且濃縮，得到呈橙色固體狀之4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(140 mg，0.546 mmol，93%產率)。LCMS：(m/z) 257 (MH+ )。
中間物23 3-胺基吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image117
經由1 L加料漏斗歷時60 min，向在0-5℃下之3-胺基吡啶甲酸(150 g，1086 mmol)於乙醇(1500 mL)中之攪拌懸浮液中添加H2 SO4 (463 mL，8688 mmol)。在完成添加之後，使透明棕色溶液在90℃下回流24 h。接著，將反應混合物冷卻至室溫，之後在頂部攪拌之情況下倒至10 L燒杯中之冰丸上。使用NH4 OH溶液(需要約2 L)將混合物鹼化至pH ~9，且在室溫下攪拌另外60 min。觀測到燒杯中出現固體材料，經由Buchner漏斗過濾，用水(1 L)洗滌且在真空管下乾燥，得到60 g呈淡黃色固體狀之產物。使用DCM (3 × 1000 mL)萃取濾液，且經合併之萃取物用鹽水(1 × 1.5 L)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到3-胺基吡啶甲酸乙酯(116 g，691 mmol，63.6%產率)。LCMS：m/z = 167.2(m/z) :(M+H)；RT 0.78 min；方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物24 3-乙醯胺基吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image119
在室溫下，向3-胺基吡啶甲酸乙酯(115 g，692 mmol)於THF(1000 mL)中之攪拌溶液中，添加Ac2 O (588 mL，6228 mmol)。在氮氣氛圍下將反應混合物加熱至60℃持續約7至8 h。將反應混合物冷卻至室溫，且在真空管下在水浴溫度(約50℃)下蒸發揮發物，隨後在50℃下在高真空下移除乙酸，得到灰白色固體。固體用石油醚(500 mL)濕磨，在室溫下攪拌30 min，接著經由Buchner漏斗過濾且用石油醚(500 mL)洗滌。在室溫下真空乾燥濾液3 h，得到呈灰白色固體狀之3-乙醯胺基吡啶甲酸乙酯(139 g，641 mmol，93%產率)。LCMS：m/z = 209.3(m/z) : (M+H)；rt 0.76 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物25 3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image121
在室溫下，向3-乙醯胺基吡啶甲酸乙酯(75 g，360 mmol)及碳酸銫(176 g，540 mmol)於DMF (750 mL)中之經攪拌淺棕色懸浮液中添加碘甲烷(36.0 mL，576 mmol) (觀測到稍微放熱)。在室溫下攪拌所得部分棕色混合物約8 h。反應物用水(1500 mL)淬滅[觀測到稍微放熱]且用DCM (3 × 1000 mL)萃取。經合併之萃取物用水(2 × 1000 mL)洗滌，且水層用DCM (2 × 500 mL)再萃取。合併之有機溶液用鹽水(2 × 1000 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在約50℃下濃縮，且接著在約60℃下真空乾燥，得到棕色溶液(含有一些DMF)。在高真空下在58℃下乾燥材料25 min，以移除DMF，得到棕色固體，將該棕色固體溶解於石油醚(1000 mL)中，在室溫下攪拌30 min，經由Buchner漏斗過濾，在過濾後用石油醚(500 mL)洗滌，在真空管下乾燥8 h，得到呈棕色固體狀之3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(70 g，302 mmol，84%產率)；LCMS：m/z = 223.2(m/z) : (M+H)；rt 0.64 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物26 2-(乙氧羰基)-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶1-氧化物
Figure 02_image123
向在0-5℃下之3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(70 g，315 mmol)於DCM (700 mL)中之經攪拌之透明棕色溶液中添加過氧化脲(44.4 g，472 mmol)，隨後歷時40 min經由100 mL加料漏斗緩慢添加三氟乙酸酐(66.7 mL，472 mmol)。在三氟乙酸酐添加期間，反應混合物凝固。在完成添加之後，在室溫下攪拌反應混合物約2 h。用10% NaHCO3 溶液(700 mL)來淬滅反應物。用DCM (3 × 500 mL)萃取反應混合物。經合併之有機層用鹽水溶液(2 × 500 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到呈淺黃色固體狀之2-(乙氧羰基)-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶1-氧化物(70 g，285 mmol，90%產率)；LCMS：m/z = 239.0(m/z) : (M+H)；rt 0.48 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物27 6-氰基-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image125
向在室溫下之2-(乙氧羰基)-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶1-氧化物(50 g，210 mmol)於DCM (500 mL)中之經攪拌淡黃色溶液中，添加氰化三甲基矽基(39.4 mL，294 mmol)。攪拌反應混合物10 min，且接著使其冷卻至-10℃。經由50 mL加料漏斗歷時15 min添加苯甲醯氯(34.1 mL，294 mmol)，隨後經由50 mL加料漏斗歷時20 min緩慢添加TEA (41.0 mL，294 mmol)。在TEA添加期間，觀測到放熱反應。反應混合物變得混濁(TEA鹽)，且在相同溫度下繼續攪拌2.5 h。藉由添加10% NaHCO3 溶液(500 mL)來淬滅反應物。用DCM (3 × 300 mL)萃取混合物。經合併之有機溶液用鹽水(2 × 250 mL)洗滌，接著經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到淺黃色粗材料。粗材料經由ISCO®正相RediSep二氧化矽管柱、使用EA/石油醚作為溶離劑來純化。藉由65-70% EA/石油醚分離產物，濃縮級分，得到呈淺棕色液體狀之6-氰基-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(43 g，83%產率)；LCMS：m/z = 248.0(m/z) :(M+H)；rt 1.26 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物28 8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image127
在-78℃下，歷時10 min向6-氰基-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(0.9 g，3.64 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中的攪拌溶液中添加KHMDS (4.80 mL，4.37 mmol)。攪拌反應混合物15 min。歷時30 min將反應混合物緩慢升溫至室溫且接著攪拌另外90 min。將反應混合物冷卻至0℃。藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液(70 mL)來淬滅反應物。用乙酸乙酯(2×100 mL)稀釋混合物。收集水層且用1.5 N HCl酸化以將pH調整至約3.0。攪拌混合物15分鐘以形成固體塊，經由Buchner漏斗過濾，產生呈棕色固體狀之8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(550 mg，75%產率)。LCMS：m/z = 202.0(m/z) :(M+H)；rt 0.36 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物29 8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image129
向8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.55 g，2.73 mmol)於乙腈(10 mL)中的攪拌溶液中添加POCl3 (1.53 mL，16.4 mmol)。歷時5 min將反應混合物加熱至85℃且接著攪拌16 h。減壓濃縮反應混合物，得到粗產物。將反應混合物冷卻至0℃。藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液(50 mL)來淬滅反應物。用DCM (3 × 100 mL)萃取所得混合物，且經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈棕色固體狀之8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.25 g，29.1%產率)。LCMS：m/z = 220.2(m/z) :(M+H)；rt 1.53 min；LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物30 三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯
Figure 02_image131
在0℃，向8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.3 g，1.49 mmol)、DMAP (0.018 g，0.15 mmol)及TEA (0.312 mL，2.24 mmol)於DCM (30 mL)中之混合物中逐滴添加含三氟甲烷磺酸酐(0.269 mL，1.640 mmol)之DCM (3 mL)。攪拌反應混合物3 h。反應混合物用DCM稀釋，用水洗滌，有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈淡黃色固體狀之三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(0.45 g，81%產率)；LCMS：m/z = 334.2(m/z) :(M+H)；rt 1.40 min。LC-MS方法：管柱-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物31 8-羥基-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image133
向8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(1 g，4.97 mmol)於乙酸(10 mL)中的攪拌溶液中添加硝酸(0.666 mL，14.91 mmol)。將混合物加熱至80℃持續1 h。將反應混合物冷卻至室溫且用水稀釋，攪拌10 min，且過濾所得固體，得到呈淡黃色固體狀之8-羥基-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.805 g，65.1%產率)；LCMS：m/z = 247.2:(M+H)；rt 1.19 min。LC-MS方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物32 8-氯-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image135
將8-羥基-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(192 mg，0.780 mmol)溶解於乙腈(3.1 mL)及DIEA (0.272 ml，1.560 mmol)之混合物中，得到黃色溶液。接著添加POCl3 (0.131 ml，1.404 mmol)，且在室溫下在氮氣下攪拌混合物1 h。添加氯化苯甲基三乙銨(200 mg，0.878 mmol)，且在65℃下加熱混合物1 h。真空濃縮混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且將所得溶液倒至冰上。保持此大致1 h，之後轉移至分液漏斗。收集有機層，且用額外乙酸乙酯萃取水溶液。經合併之有機層依序用1.5M K2 HPO4 溶液、飽和NaHCO3 溶液且接著鹽水洗滌。接著混合物經MgSO4 乾燥，過濾且接著真空蒸發，得到棕色結晶固體(204 mg，90%產率)。LCMS：(m/z) : (M+H)+ = 264.9.1 H NMR (氯仿-d) δ 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.89-7.97 (m, 1H), 3.82 (s, 3H)。
中間物33 三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-3-硝基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯
Figure 02_image137
在氮氣氛圍下，在0℃下，向8-羥基-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.25 g，1.016 mmol)於無水DCM (10 mL)中之懸浮液中添加TEA (0.212 mL，1.523 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸酐(0.183 mL，1.117 mmol)。攪拌反應混合物3 h。反應混合物用DCM稀釋，用水洗滌，有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈淺棕色固體狀之三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-3-硝基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(0.25 g，48.8%產率)；LCMS：m/z = 379.2(m/z) :(M+H)；rt 1.66 min。LC-MS方法：管柱-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物34 7-溴-8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image139
向8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(1000 mg，4.97 mmol)於無水DMF (10 mL)中的攪拌溶液中添加NBS (973 mg，5.47 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓移除溶劑，得到殘餘物。將殘餘物溶解於水中且攪拌10 min。過濾固體材料，且用石油醚洗滌，得到呈灰白色固體狀之7-溴-8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.8 g，56.9%產率)；LCMS：m/z = 282:(M+H)；rt 1.60 min。方法：管柱-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm - 2.6 μm)；移動相A：10 mM甲酸銨/水:乙腈(98:2)；移動相B：10 mM甲酸銨/水:乙腈(2:98)；梯度：20-100% B歷時4分鐘，流速1.0 mL/min，接著在100% B保持0.6分鐘，流速1.5 mL/min；接著梯度：100-20% B歷時0.1分鐘，流速1.5 mL/min。
中間物35 三氟甲烷磺酸3-溴-6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯
Figure 02_image141
在0℃下，向7-溴-8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.175 g，0.625 mmol)及TEA (0.131 mL，0.937 mmol)於無水DCM (10 mL)中的攪拌溶液中添加三氟甲烷磺酸酐(0.137 mL，0.812 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。反應混合物用DCM稀釋且用水洗滌，隨後用鹽水洗滌，有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈淡黃色固體狀之三氟甲烷磺酸3-溴-6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(190 mg，53.9%產率)；LCMS：m/z = 414(m/z) :(M+H)；rt 1.61 min。方法：管柱-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物36 3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image143
在配備有機械攪拌器、加料漏斗及熱電偶溫度探針的250 mL三頸圓底燒瓶中，將3-胺基吡啶甲酸乙酯(8.0 g，48.1 mmol)懸浮於水(66 mL)中。緩慢添加硫酸(1.7 mL，31.9 mmol)及乙酸(3.31 mL，57.8 mmol)，同時將燒瓶浸沒於室溫水浴中以控制溫度。在環境溫度下，在劇烈攪拌下，歷時15分鐘將溴(2.5 mL，48.5 mmol)於乙酸(17.5 mL，306 mmol)中的溶液添加至反應混合物中，同時維持反應混合物之內部溫度低於23℃。移除水浴且在環境溫度下攪拌反應混合物2小時。過濾反應懸浮液且用少量水沖洗，且接著在室溫下真空乾燥，得到呈黃色固體狀的3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(9.305 g)。LCMS：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：100%水+ 0.05%三氟乙酸；移動相B：100%乙腈+ 0.05%三氟乙酸；溫度：40℃；梯度：2-98%B歷時1.5分鐘，接著在98% B保持0.5分鐘；流速：0.8 mL/min；偵測：UV，220 nm。滯留時間0.94 min；加合物觀測值：[M+H]；質量觀測值：245.0。1 H NMR (DMSO-d6 ) δ 7.44 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J=8.7 Hz, 1H), 6.88 (br. s., 2H), 4.29 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.31 (t, J=7.1 Hz, 3H)。
中間物37 3-乙醯胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image145
將3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(1.31 g，5.35 mmol)溶解於THF(6 mL)中，隨後添加乙酸酐(1.6 mL，16.96 mmol)。反應混合物為懸浮液/部分溶液。將反應混合物置放在氮氣氛圍下且加熱至回流。反應混合物在15分鐘內變得均質。使反應混合物回流4小時。使用旋轉式蒸發器真空移除反應揮發物。添加少量乙酸乙酯至反應殘餘物中且濾出接近無色的固體且真空乾燥，得到3-乙醯胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(787 mg)。LCMS：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：100%水+ 0.05%三氟乙酸；移動相B：100%乙腈+ 0.05%三氟乙酸；溫度：40℃；梯度：2-98%B歷時1.5分鐘，接著在98% B保持0.5分鐘；流速：0.8 mL/min；偵測：UV，220 nm。滯留時間0.98 min；加合物觀測值：[M+H]；質量觀測值：287.0。1 H NMR (DMSO-d6 ) δ 10.40 (s, 1H), 8.32 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.83 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.33 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.2 Hz, 3H)。自濾液移除溶劑，得到額外695 mg產物(87%純)。
中間物38 6-溴-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image147
藉由將3-乙醯胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(5 g，17.41 mmol)溶解於DMF(100 mL)中來製備溶液。接著，添加碳酸銫(8.15 g，25.01 mmol)及碘甲烷(1.75 mL，28.0 mmol)。將反應混合物置放在氮氣氛圍下且在室溫下攪拌2小時40分鐘。使用旋轉式蒸發器/真空泵浦組合來真空移除溶劑。將乙酸乙酯及DCM與氯仿及甲苯一起添加至反應殘餘物中。混合物經由矽藻土墊過濾以移除鹽。使用旋轉式蒸發器再次真空移除溶劑。再次將反應殘餘物溶解於氯仿及甲苯中且經由矽藻土床過濾以移除仍存在的痕量不溶物。真空移除溶劑，得到5.35 g呈橙色油狀之產物。LCMS；管柱：Waters Acquity BEH 2.1 mm × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：10:90乙腈:水+ 0.1% TFA；移動相B：90:10乙腈:水+ 0.1% TFA；溫度：40℃；梯度0% B至100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持1分鐘；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射體積：1 μL。滯留時間1.07 min；加合物觀測值：[M+H]；質量觀測值：301.1。質子NMR顯示受限旋轉(旋轉異構體)之特徵；1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.72 (d, J=8.4 Hz, 0.8H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 0.2H), 7.51 (d, J=8.4 Hz, 0.8H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 0.2H), 4.50-4.36 (m, 2.0H), 3.37 (s, 0.6H), 3.19 (s, 2.4H), 2.24 (s, 0.6H), 1.82 (s, 2.5H), 1.43-1.36 (m, 3.1H)。
中間物39 6-溴-4-羥基-1-甲基-1,5-㖠啶-2(1H)-酮
Figure 02_image149
將KHMDS (4.3 mL，2.150 mmol)(0.5 M，於甲苯中)裝入25 mL圓底燒瓶中，置放在氮氣下且冷卻至-78℃。歷經大致3分鐘，向KHMDS溶液中緩慢添加6-溴-3-(N-甲基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(215mg，0.714 mmol)於THF (2.5 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫且添加乙酸乙酯與水之1:1混合物以填充60 mL分液漏斗。允許分離各相。水相用2.5 mL 1 N鹽酸酸化且在使用真空泵的旋轉式蒸發器上濃縮。使粗殘餘物在具有7 mL水之錐形瓶(Erlenmeyer flask)中渦旋。收集黃色固體，且真空乾燥，得到標題化合物(130.2 mg，72%)。LCMS：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 2.1 mm × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：100水+ 0.05% TFA；移動相B：100乙腈+0.05% TFA；溫度：40℃；梯度2% B至98% B歷時1.5分鐘，接著在100% B保持1 min；流速：0.8 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射體積：3 μL。滯留時間0.8 min；加合物觀測值：[M+H]；質量觀測值：254.9，256.9。
中間物40 三氟甲烷磺酸6-溴-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯
Figure 02_image151
在圓底燒瓶中，將6-溴-1-甲基-1,5-㖠啶-2,4(1H,3H)-二酮(200 mg，0.784 mmol)與DMAP (9.58 mg，0.078 mmol)、DIPEA (0.205 mL，1.176 mmol)及DCM (20 mL)合併。在0℃下，向所得懸浮液中逐滴添加三氟甲磺酸酐(0.141 mL，0.863 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。攪拌溶液3小時。LC/MS分析指示反應完成。減壓移除溶劑且粗物質藉由在24 g矽膠管柱上用1:1己烷:乙酸乙酯層析來純化，得到呈白色固體狀之產物(260 mg，86%)。分析型LC/MS條件：注射體積=1 μL，起始0% B，最終100% B，梯度時間2分鐘，流速1 mL/min，波長220 nm，溶劑對：乙腈/水/TFA，溶劑A：10%乙腈/90%水/0.1% TFA，溶劑B：90%乙腈/10%水/0.1% TFA，管柱：Acquity BEH C18 21. × 50 mm 1.7 μm，烘箱溫度= 40℃。LC\MS結果；滯留時間1.5分鐘，質量觀測值386.7，388.7 (M+ )。
中間物41 2-氰基乙醯氯
Figure 02_image153
向2-氰基乙酸(500 mg，5.88 mmol)於CH2 Cl2 (5 mL)中之溶液中添加幾滴DMF。接著，逐滴添加2 M乙二醯氯(3.23 mL，6.47 mmol)於二氯甲烷中之溶液。在室溫下攪拌反應混合物2小時且濃縮。
中間物42 6-溴-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image155
向3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(1.3 g，5.30 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中，添加DIPEA (2.78 mL，15.91 mmol)。接著，緩慢添加含2-氰基乙醯氯(0.609 g，5.88 mmol)之DCM (10 mL)。在室溫下攪拌反應混合物10 min。LC/MS顯示形成6-溴-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(MS在312)。用水淬滅反應物，且用二氯甲烷萃取所得混合物。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4 )且濃縮，得到微棕色稠油作為粗產物。粗產物用乙酸乙酯/己烷濕磨，得到黃色固體。1 HNMR確認其結構為與DIPEA的環化產物。產物用1 N HCl溶液洗滌，且產生呈灰白色固體狀之6-溴-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(650 mg，2.443 mmol，46.1%產率)。1 H NMR(DMSO-d6 )。LCMS：(m/z) ＞90%純，266，268 (MH+ )。
中間物43 6-溴-1-甲基-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image157
向6-溴-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(250 mg，0.940 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中，逐份添加含60%氫化鈉(113 mg，2.82 mmol)之礦物油。在室溫下攪拌反應混合物30 min，且添加碘甲烷(0.176 mL，2.82 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。
中間物44 三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯
Figure 02_image159
在0℃下，向6-溴-1-甲基-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(0.6 g，2.14 mmol)於DCM (8 mL)中的攪拌溶液中，添加TEA (0.896 mL，6.43 mmol)及DMAP (0.026 g，0.214 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸酐(0.724 mL，4.28 mmol)。使反應混合物緩慢升溫至室溫且攪拌3 h。藉由添加水(50 mL)來淬滅反應物。用DCM (3 × 100 mL)稀釋反應混合物。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發，得到棕色固體。粗化合物用DCM及己烷(1:4)濕磨，得到呈棕色固體狀之三氟甲烷磺酸6-溴-3-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(700 mg，79%產率)；LCMS：m/z = 414.1(m/z) :(M+H)；rt 0.65 min。LC-MS方法：管柱-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物45 6-溴-4-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image161
向裝有含6-溴-1-甲基-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(2.50 g，8.93 mmol)之乙腈(89 ml)之500 mL圓底燒瓶中添加DIEA (9.4 ml，53.8 mmol)，且攪拌混合物2 min，在此期間其變得均質。接著添加POCl3 (3.3 ml，35.4 mmol)，隨後添加氯化苯甲基三乙銨(2.68 g，11.77 mmol)，且在室溫下在氮氣下攪拌反應混合物隔夜。接著，最初在真空管下濃縮混合物，接著在高真空下濃縮。接著將殘餘物倒至冰與1.5 M K2 HPO4 溶液之混合物上。在30 min之後，使用氯仿(3 ×)萃取混合物。經合併之萃取物依序用K2 HPO4 溶液、1 N HCl溶液且接著鹽水洗滌。接著有機溶液經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈棕色固體狀之粗產物(3.1 g)。藉由矽膠急驟層析，使用2%乙酸乙酯/DCM作為溶離劑，來純化產物。合併均質級分且減壓蒸發，得到1.922 g呈黃色固體狀之產物(產率72%)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 298.05。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.83 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.68 (d,J =9.0 Hz, 1H)。
中間物46 4,6-二氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image163
向乾燥玻璃壓力管中之6-溴-4-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(1 g，3.35 mmol)中，添加HCl於二㗁烷(20 mL，80 mmol)中之4 M溶液。將反應混合物密封且在85℃下加熱4天。接著使混合物冷卻且真空濃縮。殘餘物用甲醇濕磨，且藉由過濾收集固體且真空乾燥，得到呈棕色固體狀之標題化合物之鹽酸鹽(0.78 g，2.68 mmol，80%產率)。(LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 254.15,1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.29 (d,J =9.0 Hz, 1H), 8.00 (d,J =9.0 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H)。
中間物47 6-溴-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image165
向3-胺基-6-溴吡啶甲酸乙酯(2.0 g，8.16 mmol)於DMF (15 mL)中之攪拌溶液中，添加2-氰基乙酸(1.388 g，16.32 mmol)及TEA (2.84 mL，20.40 mmol)，隨後添加1-丙烷膦酸酐(10.78 mL，17.95 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物16小時，且接著藉由小心添加水(100 mL)淬滅。攪拌所得混合物15 min，在此期間分離出固體，藉由過濾收集該固體，得到呈黃色固體狀之產物(2.45 g，7.85 mmol，96%產率)。
中間物48 6-氰基-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯
Figure 02_image167
在氮氣下，向6-溴-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(200 mg，0.641 mmol)於NMP (8 mL)中之攪拌溶液中，添加鋅(8.38 mg，0.128 mmol)及氰化鋅(150 mg，1.282 mmol)。用氮氣吹掃混合物3 min，其後添加dppf (21.31 mg，0.038 mmol)及Pd2 (dba)3 (58.7 mg，0.064 mmol)，且繼續吹掃另外3 min。接著歷時5 min將反應混合物加熱至80℃，且攪拌混合物額外一小時，之後使其冷卻至室溫。接著藉由添加水來淬滅反應物，且經由矽藻土床過濾所得混合物。使用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取濾液，且經合併之萃取物用鹽水溶液(50 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到棕色油。藉由矽膠急驟層析，使用34%-39%乙酸乙酯/石油醚作為溶離劑，來純化粗產物。合併均質級分且真空蒸發，得到呈棕色固體狀之產物(70 mg，0.271 mmol，42.3%產率)，LCMS方法；緩衝液：10 mM乙酸銨，用HCOOH調整至pH-5，移動相A：緩衝液:ACN (95:5)，移動相B：緩衝液:ACN (5:95)，描述：方法：% B：Omin-5%:1.1min -95%:1.7min-95%，管柱名稱：Acquity BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 μm，方法：C:\MassLynx\BMS_2013。流速：0.8 ml/min LCMS RT =1.10 min (M-H)- = 257.2。
中間物49 6,8-二側氧基-5,6,7,8-四氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image169
向6-氰基-3-(2-氰基乙醯胺基)吡啶甲酸乙酯(70 mg，0.271 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加三乙胺(0.113 mL，0.813 mmol)。將反應混合物升溫至45℃且接著攪拌3小時。減壓濃縮混合物，且殘餘物用乙酸乙酯濕磨15 min。過濾所得懸浮液，且減壓乾燥濾液，得到呈棕色固體狀之產物(54 mg，0.255 mmol，94%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 213.2
中間物50 5-甲基-6,8-二側氧基-5,6,7,8-四氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image171
在0℃下，向6,8-二側氧基-5,6,7,8-四氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(50 mg，0.236 mmol)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (28.3 mg，0.707 mmol)。接著將經攪拌混合物升溫至室溫。添加碘甲烷(0.044 mL，0.707 mmol)，且繼續在氮氣氛圍下攪拌3 h。藉由添加水(10 mL)來淬滅反應物。使用1.5 N HCl將混合物之pH調整至約6。攪拌所得混合物15 min，在此期間分離出固體，藉由過濾收集該固體，且接著減壓乾燥，得到呈棕色固體狀之產物(20 mg，0.088 mmol，37.5%產率)。LC-MS：方法資訊：管柱-Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm-2.7 μm)，移動相A：(2% ACN-98% H2 O-10 mM NH4 COOH)，移動相B：(98% ACN-2% H2 O-10 mM NH4 COOH)，流速= 1 mL/min，時間B%：(0.0 0.0)，(1.5 100.0)，(3.2 100.0)。LC-MS RT = 1.301 min(m/z) : (M+H)+ = 225.0。
中間物51 8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image173
將起始材料5-甲基-6,8-二側氧基-5,6,7,8-四氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈之鹽酸鹽在90℃下真空乾燥隔夜，之後進行反應。向5-甲基-6,8-二側氧基-5,6,7,8-四氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(10 g，38.1 mmol)於乙腈(100 mL)中之攪拌懸浮液中，添加DIPEA (19.95 mL，114 mmol)。使所得混濁棕色溶液冷卻至0-5℃，且歷時約20 min緩慢添加POCl3 (40.8 mL，438 mmol)，其後將混合物加熱至90℃持續約1 h。將反應混合物冷卻至室溫，且接著在高真空下濃縮，得到淡棕色殘餘物。添加冰丸且攪拌漿液約15 min，在此期間形成自由流動性固體。藉由添加NaHCO3 飽和溶液中和混合物，且使用DCM (4 × 500 mL)萃取產物。經合併之萃取物用鹽水(1 × 500 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈棕色固體狀之粗產物。此物質用丙酮(50 mL)濕磨，且藉由過濾收集產物且真空乾燥，得到6 g固體。濃縮濾液且殘餘物再次用丙酮濕磨，得到額外2.4 g固體。合併固體，得到呈棕色固體狀之標題化合物(8.4 g，33.8 mmol，89%產率)。
中間物52 6-氯-4-(4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image175
向4,6-二氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈鹽酸鹽(300 mg，1.033 mmol)及三乙胺(0.720 mL，5.16 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中，添加哌啶-4-醇(110 mg，1.084 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，之後藉由添加水來淬滅。攪拌後，分離出黃色固體且藉由過濾收集且接著真空乾燥，得到呈黃色固體狀之標題化合物(325 mg，1.020 mmol，99%產率)。LCMS:(m/z) : (M+H)+ = 319.08,1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.04 (d,J =9.2 Hz, 1H), 7.77 (d,J =9.2 Hz, 1H), 4.72 (d,J =4.4 Hz, 1H), 4.14-3.99 (m, 2H), 3.87 (br dd,J =8.1, 4.0 Hz, 1H), 3.59 (ddd,J =13.0, 9.4, 3.3 Hz, 2H), 3.53 (s, 3H), 1.98 (ddd,J =9.4, 5.7, 2.9 Hz, 2H), 1.70 (td,J =8.4, 4.4 Hz, 2H)。
中間物53 (+/-) 6-溴-4-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image177
向6-溴-4-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(1.0 g，3.35 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液中，添加(+/-) 順式-3-甲基哌啶-4-醇(0.405 g，3.52 mmol)及三乙胺(1.167 mL，8.37 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h。接著添加水且分離出橙色固體，藉由過濾收集該橙色固體。粗產物用甲醇/二氯甲烷濕磨，且藉由過濾獲得呈黃色固體狀之最終產物(0.82 g，2.174 mmol，64.9%產率)。LCMS：(m/z) : (M+H)+ = 376.9。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.97-7.87 (m, 1H), 8.02-7.79 (m, 1H), 4.79-4.64 (m, 1H), 3.91-3.71 (m, 4H), 3.51 (s, 3H), 3.45 (br dd,J =12.3, 10.1 Hz, 1H), 2.06 (ddd,J =9.7, 6.5, 3.2 Hz, 1H), 1.87 (br d,J =3.9 Hz, 2H), 0.91 (d,J =6.8 Hz, 3H)。
實例49 (+/-) 6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image179
向4-(三級戊基)苯酚(65.3 mg，0.398 mmol)於THF (8 mL)中之溶液中，添加於固體載體上之三苯基膦(194 mg，0.583 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接著，添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(98 mg，0.424 mmol)及(+/-) 6-溴-4-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(100 mg，0.265 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物6天。接著過濾反應混合物且真空濃縮濾液，得到黃色固體。使用逆相製備型HPLC管柱，使用CH3 CN-H2 O-TFA溶劑系統作為溶離劑，來純化產物。收集均質級分且真空濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物之TFA鹽(31 mg，0.049 mmol，18.34%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 523.0。1 H NMR (400 MHz, 丙酮) δ 7.98 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.86 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.30 (d,J =8.8 Hz, 2H), 7.01 (d,J =8.8 Hz, 2H), 4.40-4.32 (m, 2H), 4.31-4.23 (m, 1H), 3.77 (ddd,J =13.4, 10.9, 2.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.35 (dd,J =13.2, 9.8 Hz, 1H), 2.54-2.42 (m, 1H), 2.37 (ddd,J =12.6, 6.2, 2.9 Hz, 1H), 1.97-1.78 (m, 1H), 1.15 (d,J =6.6 Hz, 3H), 0.69 (t,J =7.5 Hz, 3H)。因為溶劑雜質混淆了某些化合物相關峰，所以未完整定出。
中間物55 8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image181
向8-羥基-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈鹽酸鹽(10 g，38.1 mmol)於乙腈(100 mL)中之攪拌懸浮液中，添加DIPEA (19.95 mL，114 mmol)。使混濁棕色溶液冷卻至0-5℃。接著經由滴液漏斗歷時約20 min緩慢添加POCl3 (40.8 mL，438 mmol)。將所得混合物加熱至90℃持續1 min且接著使其冷卻至室溫。在高真空下濃縮混合物，得到淡棕色殘餘物。添加冰丸且攪拌所得混合物約15 min，在此期間形成自由流動性固體。使用NaHCO3 飽和溶液中和混合物且接著用DCM (4 × 500 mL)萃取。經合併之萃取物用鹽水溶液(1 × 500 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且接著濃縮，得到棕色材料。產物用丙酮(50 mL)濕磨，且藉由過濾收集固體，真空乾燥該固體，得到呈棕色固體狀之標題化合物(6 g)。蒸發濾液且殘餘物再次用丙酮濕磨，且獲得額外產物。真空乾燥經合併之濾液，得到呈棕色固體狀之標題化合物(8.4 g，33.8 mmol，89%產率)。LCMS：(M+H+ H2 O)+ = 262.0。1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) δ 8.49-8.37 (m, 2H), 3.72-3.61 (m, 3H)。
中間物56 8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image183
向在50 mL圓底燒瓶中之乙腈(18.00 ml)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.95 ml，5.45 mmol)之混合物中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(0.600 g，1.800 mmol)及4-羥基哌啶(0.266 g，2.63 mmol)。在80℃下加熱混合物持續1 h。接著使非均質混合物在0℃冰浴中冷卻，且藉由過濾收集所得黃色沈澱且接著真空乾燥，得到呈黃色固體狀之產物(473 mg，92%)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.80 (d, J=8.7 Hz, 0.9H), 7.70 (d, J=8.7 Hz, 0.9H), 6.23 (s, 0.9H), 4.02 (br s, 1.0H), 3.94-3.85 (m, 2.0H), 3.64 (s, 3.0H), 3.27 (ddd, J=12.5, 9.1, 3.3 Hz, 2.0H), 2.15-2.07 (m, 1.9H), 1.87-1.76 (m, 2.0H)。
中間物57 (+/-) 4-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-氰基-1-甲基-1,5-㖠啶-2(1H)-酮
Figure 02_image185
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(100 mg，0.300 mmol)及休尼格氏鹼(Hunig's base) (0.105 mL，0.600 mmol)於DMF (4 mL)中之溶液中，添加順式-3-甲基哌啶-4-醇(34.6 mg，0.300 mmol)。在85℃下加熱混合物隔夜。在高真空下移除溶劑且將殘餘物溶解於EtOAc中。所得溶液用水(2 ×)洗滌且用鹽水洗滌一次。接著混合物經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到89 mg黃色固體(100%)。LCMS：RT = 1.01(m/z) : (M+H)+ = 299.03。1 H NMR (400 MHz,) δ 8.02 (d,J =7.8 Hz, 1H), 7.85 (d,J =7.8 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 3.72 (dddd,J =4.5, 4.2, 3.5, 3.4 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.36 (dd,J =3.1, -12.2 Hz, 1H), 3.35 (ddd,J =12.1, 3.1, -12.2 Hz, 1H), 2.88 (dd,J =12.2, 4.5 Hz, 1H), 2.88 (dd,J =12.2, 11.8 Hz, 1H), 2.12 (dqt,J =11.8, 6.6, 4.5 Hz, 1H), 1.78 (dddd,J =12.1, 3.4, 3.1, -13.5 Hz, 1H), 1.72 (ddd,J =3.5, 3.1, -13.5 Hz, 1H), 0.98 (d,J =6.6 Hz, 3H)。
中間物58 (+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image187
向(+/-) 順式-3-甲基哌啶-4-醇(1 g，8.68 mmol)及三乙胺(1.452 mL，10.42 mmol)於DCM (15 mL)中之懸浮液中，添加Boc-酸酐(2.419 mL，10.42 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，且接著用DCM稀釋且用1 N HCl溶液酸化至pH約6。分離有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發溶劑，得到微黃色油。接著藉由急驟層析，使用乙酸乙酯/己烷(10-40%)作為溶離劑，來純化粗產物。收集均質級分且減壓蒸發，得到呈無色黏稠油狀之產物(1.35 g，6.27 mmol，72.2%產率)。LCMS：216(m/z) :(M+H)+ = 216。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 3.98-3.81 (m, 1H), 3.69-3.52 (m, 2H), 3.42-3.25 (m, 1H), 3.16-2.96 (m, 1H), 1.86-1.64 (m, 3H), 1.48 (s, 9H), 0.96 (d, J=7.0 Hz, 3H)。
中間物59 (+/-) 反式-4-(苯甲醯氧基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image189
向(+/-) 順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.982 g，4.56 mmol)於THF (8 mL)中之溶液中，添加三苯基膦(1.675 g，6.39 mmol)及苯甲酸(0.780 g，6.39 mmol)。接下來，在0℃下逐滴添加含(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(1.470 g，6.39 mmol)之THF，且使混合物溫熱且在室溫下攪拌隔夜。接著減壓濃縮反應混合物，且藉由急驟層析，使用乙酸乙酯/己烷(10-30%)作為溶離劑，來純化殘餘物。合併均質級分且真空蒸發，得到呈黏稠無色油狀之產物(0.77 g，2.411 mmol，52.9%產率)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 8.07 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.66-7.53 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 4.94-4.73 (m, 1H), 4.10-3.94 (m, 2H), 3.21-2.99 (m, 1H), 2.89-2.58 (m, br, 1H), 2.22-2.03 (m, 1H), 1.99-1.86 (m, 1H), 1.69-1.60 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.01 (d, J=6.6 Hz, 3H)。
中間物60 (+/-) 反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image191
向(+/-) 反式-4-(苯甲醯氧基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.761 g，2.383 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中，添加氫氧化鈉(0.476 g，11.91 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物2 h。接著減壓濃縮混合物，且將殘餘物分配於乙酸乙酯與水之間。接著分離有機層，依序用水及鹽水洗滌，接著經MgSO4 乾燥，過濾且真空蒸發，得到呈黏稠無色油狀之產物(446 mg，2.072 mmol，87%產率)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 4.16-3.88 (m, 2H), 3.37-3.19 (m, 1H), 2.93-2.75 (m, 1H), 2.67-2.34 (m, br, 1H), 2.00-1.84 (m, 1H), 1.55-1.40 (m, 11H), 1.02 (d, J=6.6 Hz, 3H)。
中間物61 (+/-) 反式-3-甲基哌啶-4-醇
Figure 02_image193
向(+/-) 反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(440 mg，2.044 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL，12.98)，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。真空濃縮混合物，得到呈無色黏稠油狀之標題化合物之TFA鹽。
中間物62 (+/-) 8-(反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image195
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(487 mg，1.460 mmol)及休尼格氏鹼(1.275 mL，7.30 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中，添加(+/-) 反式-3-甲基哌啶-4-醇·三氟乙酸鹽(468 mg，2.044 mmol)。在85℃下加熱反應混合物隔夜。用水稀釋混合物，且分離出黃色固體，藉由過濾收集該黃色固體且真空乾燥，得到呈固體狀之產物(385 mg，1.290 mmol，88%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 299。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.16 (d, J=8.9 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.9 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.72 (d, J=5.5 Hz, 1H),4.08-3.96 (m, 1H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.25-3.14 (m, 1H), 3.00-2.88 (m, 1H), 2.72-2.62 (m, 1H), 1.97-1.83 (m, 1H), 1.70-1.49 (m, 2H), 0.98 (d, J=6.6 Hz, 3H)。
中間物63 6-氰基-1-甲基-4-(5-甲基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮
Figure 02_image197
向裝配有隔膜之乾燥20 mL閃爍瓶中裝入3 mmol/g三苯基膦(聚合物負載的) (2.212 mL，0.664 mmol)，且接著抽真空且用氮氣沖洗。接著添加THF (2 mL)，隨後在約1 min之後，添加4-(三氟甲氧基)苯酚(0.039 mL，0.302 mmol)。將所得混合物進行簡單混合，其後經由一次性注射器添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(111 mg，0.483 mmol)於THF (1 mL)中之溶液。在定軌振盪器上攪動混合物3 min，其後一次性添加8-(反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(90 mg，0.302 mmol)於THF (2 mL)中之溶液。接著小瓶在室溫下振盪隔夜。隨後過濾反應混合物，且蒸發至乾燥。將殘餘物溶解於2 mL DMF中，且經由條件為以下之製備型LC/MS分級分離所得溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在31% B保持0分鐘，31-71% B歷時25分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為32.9 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為100%。使用分析型LC/MS測定純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0%；質量觀測值：281.11；滯留時間：1.86 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0%；質量觀測值：281.11；滯留時間：1.69 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19-8.12 (m, 1H), 8.10-8.02 (m, 1H), 6.08-6.02 (m, 1H), 5.65-5.56 (m, 1H), 3.77-3.73 (m, 2H), 3.69-3.64 (m, 2H), 3.56-3.51 (m, 2H), 2.32-2.22 (m, 2H), 1.76-1.66 (m, 3H)。
中間物64 (+/-) 順式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image199
在-78℃下，向3-乙基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.5 g，11.00 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中，逐滴添加三二級丁基硼氫化鋰(16.50 mL，16.50 mmol)於THF中之1 M溶液。在氮氣下攪拌反應混合物2 h，隨後在相同溫度下依序添加EtOH (2 mL)、水(5 mL)及1 M NaOH溶液(5 mL)。接著將反應混合物升溫至0℃，且逐滴添加30% H2 O2 水溶液(5 mL)。移除冷浴且在室溫下攪拌反應混合物2 h，其後其用EtOAc稀釋。沈澱出不可溶白色固體，藉由過濾移除該白色固體沈澱。收集濾液，依序用NaHCO3 飽和溶液及鹽水洗滌，且接著經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到無色黏稠油。使用矽膠急驟層析，使用10-30% EtOAc/己烷作為溶離劑，分級分離此混合物。收集均質級分且真空蒸發，得到呈無色油狀之產物(1.6 g，6.98 mmol，63.4%產率)。LCMS：(M-(t-Bu)+ACN+H)+ = 215.35。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d)。所有信號均非常寬。
中間物65 (+/-) 順式-3-乙基哌啶-4-醇·TFA鹽
Figure 02_image201
向順式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(1.6 g，6.98 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中，添加TFA (2 mL，26.0 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，其後其經減壓濃縮，得到呈黏稠淡黃色油狀之產物TFA鹽(1.65 g，6.78 mmol，97%產率)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 9.03-8.82 (m, 1H), 8.82-8.60 (m, 1H), 4.19-4.02 (m, 1H), 3.38-3.20 (m, 2H), 3.17-2.99 (m, 2H), 2.08-1.97 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 1H), 1.52-1.40 (m, 1H), 1.40-1.29 (m, 1H), 1.02-0.94 (m, 3H)。
中間物66 (+/-) 反式-4-(苯甲醯氧基)-3-乙基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image203
向(+/-) 順式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(1.5 g，6.54 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中，添加三苯基膦(2.402 g，9.16 mmol)及苯甲酸(1.118 g，9.16 mmol)。在0℃下逐份添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(2.109 g，9.16 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且在氮氣下攪拌隔夜。接著減壓濃縮反應混合物，且藉由急驟層析，使用乙酸乙酯/己烷(0-20%)作為溶離劑，來純化殘餘物。合併均質級分且真空蒸發，得到呈黏稠無色油狀之產物(1.70 g，5.10 mmol，78%產率)。
中間物67 (+/-) 反式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image205
向(+/-) 反式-4-(苯甲醯氧基)-3-乙基哌啶-1-甲酸三級丁酯(1.7 g，5.10 mmol)於MeOH (15 mL)中之溶液中，添加氫氧化鈉(1.020 g，25.5 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。接著減壓濃縮混合物，且將殘餘物分配於乙酸乙酯與水之間。接著分離有機層，依序用水及鹽水洗滌，接著經MgSO4 乾燥，過濾且真空蒸發，得到呈黏稠油狀之粗產物。用矽膠急驟層析，使用10-30%乙酸乙酯/己烷作為溶離劑，來分級分離混合物。合併均質級分且減壓蒸發，得到呈黏稠無色油狀之反式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.68 g，2.97 mmol，58.2%產率)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 3.95 (br d,J =12.6 Hz, 1H), 3.46 (br d,J =0.9 Hz, 1H), 3.05-2.87 (m, 1H), 1.97-1.87 (m, 1H), 1.75 (br d,J =1.6 Hz, 1H), 1.51-1.40 (m, 11H), 1.40-1.30 (m, 1H), 1.25-1.15 (m, 1H), 0.99 (t,J =7.4 Hz, 3H)。頻譜為寬峰且不能完整定出。
中間物68 (+/-) 反式-3-乙基哌啶-4-醇·TFA
Figure 02_image207
向(+/-) 反式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.3 g，1.308 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中，添加1 mL TFA。在室溫下攪拌反應混合物3 h。真空濃縮混合物。
中間物69 (+/-) 8-(順式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image209
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(1.370 g，4.11 mmol)及休尼格氏鹼(2.87 mL，16.45 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液中，添加(+/-) 順式-3-乙基哌啶-4-醇TFA鹽(1.2 g，4.93 mmol)。在氮氣下在85℃下加熱反應混合物隔夜。所得混合物用水稀釋且接著用乙酸乙酯萃取。合併有機層，用鹽水洗滌且接著經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈橙色固體狀之粗產物。產物用甲醇濕磨，且藉由過濾收集殘餘固體及風乾，得到呈淺黃色固體狀之產物(520 mg，1.665 mmol，40.5%產率)。接著在以下條件下純化一部分濾液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在10% B保持0分鐘，在10-50% B歷時22分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.5%；質量觀測值：313.15；滯留時間：1.17 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：99.3%；質量觀測值：313.13；滯留時間：1.22 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.17-8.10 (m, 1H), 8.10-8.02 (m, 1H), 6.11-6.01 (m, 1H), 4.70-4.62 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.75-3.66 (m, 1H), 3.31-3.22 (m, 1H), 3.14-3.05 (m, 1H), 1.87-1.71 (m, 2H), 1.71-1.60 (m, 1H), 1.49-1.36 (m, 1H), 1.34-1.21 (m, 1H), 1.00-0.86 (m, 3H)。因為使用了水抑制技術，因此未完整定出完全頻譜。
中間物70 4-(3-氯苯氧基)哌啶.
Figure 02_image211
向4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.497 mmol)及3-氯苯酚(63.9 mg，0.497 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中，添加三苯基膦(156 mg，0.596 mmol)。在0℃下攪拌反應混合物15 min，其後逐滴添加DIAD (0.116 mL，0.596 mmol)。接著使反應混合物升溫至室溫且在氮氣下攪拌隔夜。藉由添加水來淬滅反應物，且所得混合物用乙酸乙酯(2 × 20 mL)萃取。合併有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體狀之粗產物。將此材料溶解於DCM (5 mL)中，且添加3 mL TFA。在室溫下攪拌混合物2 h且接著濃縮，得到黃色黏稠油。用逆相製備型HPLC，使用CH3 OH-H2 O-TFA緩衝液系統，來純化混合物。合併均質級分且減壓蒸發，得到呈白色固體狀之標題化合物之TFA鹽(101.5 mg，0.312 mmol，62.7%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 212.0。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.30 (t, J=8.2 Hz, 1H), 7.08-7.06 (m, 1H), 7.03-6.99 (m, 1H), 6.98-6.94 (m, 1H), 4.96-4.87 (m, 1H), 4.79-4.66 (m, 1H), 3.48-3.37 (m, 2H), 3.28-3.15 (m, 2H), 2.25-2.11 (m, 2H), 2.11-1.96 (m, 2H)。
中間物71 4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶
Figure 02_image213
將於固體載體上之三苯基膦(3 mmol/g) (289 mg，1.1 mmol)添加至乾燥的20 mL閃爍瓶，接著加蓋且用氮氣沖洗。將樹脂懸浮於DCM (3 mL)中，且將反應瓶置於定軌振盪器上2 min。接著一次性添加3-氟-5-甲基苯酚(0.081 mL，0.745 mmol)，且另外簡單攪動混合物，其後添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(183 mg，0.795 mmol)。接著將混合物振盪另外3 min，且接著添加4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.497 mmol)，且在室溫下攪動所得混合物隔夜。過濾懸浮液，且用DCM洗滌樹脂。將洗滌液及濾液合併且減壓蒸發。殘餘物用6 mL DCM與TFA之1:1混合物處理30 min，且將所得混合物蒸發至乾燥。將殘餘物溶解於DCM中且添加5 N NaOH溶液。使用DCM萃取混合物。合併萃取物，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈無色油狀之產物(63 mg，61%)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ = 210.10。
中間物72 (+/-) 順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶.TFA.
Figure 02_image215
向順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.464 mmol)於THF (2 mL)中之溶液中，添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.161 mL，1.161 mmol)於THF中之1.0 M溶液。在室溫下攪拌反應混合物30 min，接著添加含1-氟-4-(三氟甲基)苯(114 mg，0.697 mmol)之THF (1 mL)。接著在60℃下加熱反應混合物4 h。接著用水淬滅反應物。用乙酸乙酯萃取所得混合物。分離有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到油。用製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統作為溶離劑，來分級分離產物。合併均質級分且減壓濃縮24 h。將殘餘物溶解於DCM (3 mL)中且添加1 mL TFA。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，且接著真空濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物之TFA鹽(120 mg，0.321 mmol，69.2%產率)。LCMS：(m/z) :(M+H)+ =260。1 H NMR (CD3 OD):1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d4 ) δ 7.63 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.19 (d, J=8.5 Hz, 2H), 4.77-4.73 (m, 1H), 3.28-3.12 (m, 4H), 2.33-2.18 (m, 2H), 2.08-1.93 (m, 1H), 1.11 (d, J=6.9 Hz, 3H)。
使用以下方法(方法A)來製備以下多種本發明之實例。
實例1 6-氟-4-(4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮
Figure 02_image217
向4-氯-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(20.44 mg，0.080 mmol)及休尼格氏鹼(0.028 mL，0.159 mmol)於DMF中之溶液中，添加4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶(20 mg，0.096 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物隔夜。接著過濾粗反應混合物，隨後經由製備型LC/MS使用以下條件來純化：管柱：XBridge C18，19 × 200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：41-81% B歷時25分鐘，接著在100% B保持6分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為22.1 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0%；質量觀測值：429.94；滯留時間：2.34 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：429.95；滯留時間：2.33 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.76-7.57 (m, 3H), 6.75-6.62 (m, 2H), 6.64-6.55 (m, 1H), 4.68 (dt, J=7.7, 3.9 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.45-3.31 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.22-2.10 (m, 2H), 1.97-1.81 (m, 2H)。因為NMR實驗中採用水抑制技術，所以無法實現頻譜中所有峰之完整定出。
根據方法B製備以下實例。
實例2 6-氟-4-(4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮
Figure 02_image219
將於固體載體上之三苯基膦3 mmol/g (82.0 mg，0.313 mmol)添加至乾燥的20 mL閃爍瓶。在氮氣下，將樹脂懸浮於無水DCM (3 mL)中2 min時段。添加4-異丙基苯酚(12.72 mg，0.093 mmol)，且隨後在5 min之後添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(22.93 mg，0.100 mmol)。在定軌振盪器上攪動所得懸浮液3 min，且一次性添加6-氟-4-(4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(20 mg，0.062 mmol)。在室溫下繼續振盪隔夜。接著真空濃縮反應混合物，且用2 mL DMF濕磨殘餘物。接著過濾懸浮液且使用製備型LC/MS，用以下條件分級分離粗產物：管柱：XBridge C18，19 × 200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：53-93% B歷時20分鐘，接著在100% B保持6分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.8 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：440.16；滯留時間：2.56 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：440.18；滯留時間：2.54 min。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.74-7.67 (m, 2H), 7.63 (dd, J=9.4, 2.0 Hz, 1H), 7.16 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 6.93 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 4.62 (br s, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.14-3.07 (m, 1H), 2.87-2.77 (m, 1H), 2.19-2.07 (m, 2H), 1.93-1.83 (m, 2H), 1.17 (d, J=7.0 Hz, 6H)。與哌𠯤環相關之一些峰被獲取頻譜中所使用之水抑制技術遮蔽。
以類似方式，製備以下實例。
方法A：
Figure 02_image221
方法B：
Figure 02_image223
表2
實例 編號 Ar結構 立體化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 合成 方法
3
Figure 02_image225
 A 1 2.40 482.0 B
4
Figure 02_image227
 A 1 2.34 412.1 B
5
Figure 02_image229
 A 1 1.76 438.1 B
6
Figure 02_image231
 A 1 2.10 423.1 B
7
Figure 02_image233
 A 1 2.39 432.1 B
8
Figure 02_image235
 A 1 2.32 496.1 B
9
Figure 02_image237
 A 1 2.26 416.1 B
使用方法A來製備以下多種實例。
實例10 6-氯-4-(4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image239
向4,6-二氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈鹽酸鹽(15 mg，0.052 mmol)於DMF (1.5 mL)中之溶液中，添加4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶鹽酸鹽(13.84 mg，0.057 mmol)及三乙胺(0.036 mL，0.258 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h。其接著用甲醇(2 mL)稀釋，過濾，且經由製備型LC/MS用以下條件純化粗混合物：管柱：XBridge C18，19 × 200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：38-78% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為16.5 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：425.06；滯留時間：2.05 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：425.1；滯留時間：2.09 min。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.07 (br d,J =8.8 Hz, 1H), 7.81 (br d,J =8.8 Hz, 1H), 7.20 (t,J =8.3 Hz, 1H), 6.65-6.49 (m, 3H), 4.78 (dt,J =7.4, 3.8 Hz, 1H), 4.09-3.97 (m, 2H), 3.77-3.69 (m, 4H), 2.19 (td,J =6.1, 2.9 Hz, 2H), 1.99-1.79 (m, 2H)。因為在獲取頻譜中使用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
使用以下方法(方法B)來製備以下多種本發明之實例。
實施例11 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image241
向2-(三氟甲基)苯酚(30.5 mg，0.188 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中，添加三苯基膦(49.4 mg，0.188 mmol)。在室溫下攪拌混合物5 min，接著添加6-氯-4-(4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(15 mg，0.047 mmol)，且攪拌反應混合物15 min，之後一次性添加DIAD (0.037 mL，0.188 mmol)。在氮氣下在室溫下攪拌所得混合物隔夜。接著對其進行真空濃縮，且將殘餘物溶解於CAN與DMF之1:1混合物(1.8 mL)中。接著經由製備型LC/MS使用以下條件來純化此粗混合物：管柱：XBridge C18，19 × 200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：41-81% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.0 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：463.02；滯留時間：2.20 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：463.01；滯留時間：2.24 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.08 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.82 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.65 (br d,J =7.0 Hz, 2H), 7.42 (br d,J =8.5 Hz, 1H), 7.11 (t,J =7.6 Hz, 1H), 5.03 (br s, 1H), 4.01-3.94 (m, 2H), 3.86-3.79 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 2.24 (br d,J =12.2 Hz, 2H), 1.96 (br d,J =6.4 Hz, 2H)。
以類似於前述兩種方法之方式，可製備以下實例。
方法C：
Figure 02_image243
方法D：
Figure 02_image245
表3
實例 編號 Ar結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
12
Figure 02_image247
 A 1 2.14 431.1 B
13
Figure 02_image249
 A 1 2.31 479.0 B
14
Figure 02_image251
 A 1 2.00 425.1 B
15
Figure 02_image253
 A 1 2.53 451.0 A
16
Figure 02_image255
 A 2 4.22 428.9 A
17
Figure 02_image257
 A 1 2.38 497.1 B
18
Figure 02_image259
 A 1 2.16 429.1 A
19
Figure 02_image261
 A 1 2.30 478.9 A
20
Figure 02_image263
 A 1 2.10 413.1 B
21
Figure 02_image265
 A 2 4.11 408.9 A
22
Figure 02_image267
 A 1 2.21 409.1 B
23
Figure 02_image269
 A 2 4.12 446.9 A
24
Figure 02_image271
 A 1 2.30 463.1 B
25
Figure 02_image273
 A 1 1.65 466.1 B
26
Figure 02_image275
 A 1 2.43 487.0 A
27
Figure 02_image277
 A 1 2.26 428.9 A
28
Figure 02_image279
 A 2 4.17 426.9 A
29
Figure 02_image281
 A 1 2.47 493.1 B
30
Figure 02_image283
 A 1 2.32 463.1 B
31
Figure 02_image285
 A 1 2.31 467.1 B
32
Figure 02_image287
 A 1 1.93 420.1 B
33
Figure 02_image289
 A 1 2.27 479.1 B
34
Figure 02_image291
 A 1 1.97 420.1 B
35
Figure 02_image293
 A 1 1.98 425.1 B
36
Figure 02_image295
 A 1 1.95 443.0 B
37
Figure 02_image297
 A 1 2.47 437.1 B
38
Figure 02_image299
 A 1 2.16 454.0 B
39
Figure 02_image301
 A 1 2.27 459.1 B
40
Figure 02_image303
 A 1 2.49 443.1 B
41
Figure 02_image305
 A 1 2.46 513.1 B
42
Figure 02_image307
 A 1 2.49 513.0 B
43
Figure 02_image309
 A 1 1.86 420.0 B
44
Figure 02_image311
 A 1 2.07 413.1 B
45
Figure 02_image313
 A 1 2.08 413.1 B
46
Figure 02_image315
 A 1 2.07 395.1 B
實施例47 6-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image317
向6-溴-4-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(50 mg，0.167 mmol)於DMF (4 mL)中之溶液中，添加4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶(48.1 mg，0.184 mmol)及三乙胺(0.093 mL，0.670 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，且接著藉由添加水來淬滅。分離出白色固體且藉由過濾收集，85 mg。將20 mg此材料溶解於DMF與甲醇之1:1混合物中，且經由製備型LC/MS用以下條件來純化此溶液：管柱：XBridge C18，19 × 200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：41-81% B歷時15分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為9.5 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為99%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.7 %；質量觀測值：523.02；滯留時間：2.34 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：98.8 %；質量觀測值：523.03；滯留時間：2.36 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.97-7.92 (m, 1H), 7.91-7.87 (m, 1H), 7.30 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 7.14 (br d,J =8.9 Hz, 2H), 4.80 (br d,J =3.4 Hz, 1H), 4.12-3.99 (m, 2H), 3.72 (br t,J =10.1 Hz, 1H), 2.19 (br s, 2H), 1.95-1.80 (m, 2H)。因為在獲取頻譜中使用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
實施例48 6-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image319
將6-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(30 mg，0.057 mmol)、5-[二(1-金剛烷基)膦基]-1',3',5'-三苯基-1'h-[1,4']聯吡唑(3.80 mg，5.73 µmol)、碳酸銫(18.68 mg，0.057 mmol)及Pd(OAc)2 (0.644 mg，2.87 µmol)負載至乾燥小瓶中，隨後將小瓶密封，抽真空且用氮氣沖洗。接著添加乙腈(2 mL)及甲醇(0.1 mL)，且在80℃下加熱反應混合物隔夜。經由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗材料：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在41% B保持0分鐘，41-81% B歷時25分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.4 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：475.04；滯留時間：2.24 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：475.05；滯留時間：2.18 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.02 (br d,J =9.2 Hz, 1H), 7.31 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 7.25 (d,J =9.2 Hz, 1H), 7.15 (br d,J =8.9 Hz, 2H), 4.78 (br s, 1H), 4.14 (br d,J =12.5 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.79 (br t,J =9.6 Hz, 2H), 2.22 (br s, 2H), 1.91 (br d,J =8.2 Hz, 2H)。
實例50 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image321
將6-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(50 mg，0.096 mmol)、鋅(1.249 mg，0.019 mmol)、氰化鋅(6.73 mg，0.057 mmol)及1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(7.80 mg，9.55 µmol)負載至乾燥微波小瓶中，將微波小瓶密封，抽真空且接著用氮氣沖洗。添加NMP (4 mL)，且在75℃下於微波中照射所得混合物4.5小時。接著將反應混合物冷卻至室溫，用乙腈稀釋且過濾。使用逆相製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-TFA系統，來分級分離濾液。合併均質級分，用NaHCO3 飽和溶液中和且接著真空濃縮。得到呈黃色固體狀之產物(22.5 mg，0.048 mmol，50.2%產率)。LCMS：(m/z) (方法2) RT = 4.39 min。(m/z) :(M+H)+ = 470.1。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.28 (d,J =8.8 Hz, 1H), 8.17 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.31 (br d,J =8.8 Hz, 2H), 7.16 (d,J =9.0 Hz, 2H), 4.83 (dt,J =7.4, 4.0 Hz, 1H), 4.18-4.02 (m, 2H), 3.78 (br t,J =9.5 Hz, 2H), 3.55 (s, 3H), 2.29-2.16 (m, 2H), 2.02-1.84 (m, 2H)。
實例51 5-甲基-7-硝基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image323
向8-氯-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(15 mg，0.057 mmol)於DMF (1.5 mL)中之溶液中，添加4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶(16.29 mg，0.062 mmol)及三乙胺(0.024 mL，0.170 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物過週末。經由製備型HPLC，用以下條件來純化所得溶液：管柱：XBridge C18，19×200 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：38-78% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為19.1 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為99%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：490.09；滯留時間：2.3 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：99.1 %；質量觀測值：490.1；滯留時間：2.25 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.43-8.12 (m, 1H), 7.43-7.03 (m, 2H), 4.90-4.59 (m, 1H), 3.70-3.48 (m, 2H), 2.25-2.12 (m, 1H), 1.97-1.85 (m, 1H)。因為在獲取頻譜中使用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
使用以下方法(方法A)來製備以下多種本發明之實例。
實例52 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image325
將8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(22 mg，0.100 mmol)溶解於一打蘭壓力小瓶中所含之DMF (1 mL)中。添加4-[4-三氟甲氧基)苯氧基]哌啶(32 mg，0.122 mmol)與碳酸鉀(40 mg，0.289 mmol)，且將反應容器抽真空，用氮氣沖洗，密封且接著在90℃油浴中加熱5 h。使反應混合物冷卻，之後藉由添加乙腈及兩滴水稀釋至2 mL之體積。過濾此混合物，且經由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在33% B保持0分鐘，33-73% B歷時25分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為26.1 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：445.12；滯留時間：2.19 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：445.14；滯留時間：2.12 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.10-7.96 (m, 1.9H), 7.25 (br d, J=8.2 Hz, 1.9H), 7.08 (br d, J=8.9 Hz, 2.0H), 6.12 (s, 0.9H), 4.65 (br s, 0.9H), 3.75 (br d, J=7.6 Hz, 1.2H), 3.51 (s, 2.6H), 3.33 (br t, J=9.2 Hz, 1.9H), 2.09 (br s, 2.1H), 1.83-1.68 (m, 2.0H)。所報告化學位移未針對水抑制作用進行校正。
使用以下方法(方法B)來製備以下多種本發明之實例。
實例53 4-(4-(4-(三級丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫喹啉-6-甲腈
Figure 02_image327
將三苯基膦樹脂(56.6 mg，0.217 mmol) (70 mg，在約3 mmol/g下)置於經烘乾真空冷卻的一打蘭小瓶中)且在氮氣下懸浮於NMP (0.5 mL)中，且使混合物靜置2 min。接著添加4-三級丁基苯酚(23.0 mg，0.153 mmol)及偶氮二甲酸二-三級丁酯(43 mg，0.187 mmol)，且使混合物振盪另外5 min。添加8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈於N-甲基-2-吡咯啶酮(1.0 mL，28 mg，0.098 mmol)中之溶液，且將所得懸浮液維持在氮氣下且在室溫下攪動隔夜。接著過濾混合物，且藉由添加更多NMP將濾液之體積調整至2 mL。粗材料經由使用以下條件的製備型LC/MS純化：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在42% B保持0分鐘，42-82% B歷時20分鐘，接著在100% B保持7分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.6 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為96%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：417.18；滯留時間：2.31 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.4 %；質量觀測值：417.06；滯留時間：2.27 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.16 (d, J=8.9 Hz, 1.0H), 8.08 (d, J=8.9 Hz, 1.0H), 7.29 (br d, J=8.5 Hz, 1.9H), 6.92 (br d, J=8.5 Hz, 1.9H), 6.14 (s, 1.0H), 4.66-4.55 (m, 1.0H), 3.82-3.71 (m, 2.0H), 3.54 (s, 1.8H), 2.16-2.02 (m, 2.0H), 1.88-1.73 (m, 1.9H), 1.25 (s, 9.0H)。
以類似方式，可製備以下實例。
方法A：
Figure 02_image329
方法B：
Figure 02_image331
表4
實例 編號 Ar結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
54
Figure 02_image333
 A 1 2.51 431.1 B
55
Figure 02_image335
 A 1 2.26 451.2 B
56
Figure 02_image337
 A 1 2.40 417.1 B
57
Figure 02_image339
 A 1 2.33 403.3 B
58
Figure 02_image341
 A 1 2.54 429.1 B
59
Figure 02_image343
 A 1 2.10 401.0 B
60
Figure 02_image345
 A 1 2.38 417.0 B
61
Figure 02_image347
 A 1 2.27 415.0 B
62
Figure 02_image349
 A 1 2.57 431.1 B
63
Figure 02_image351
 A 1 2.55 443.1 B
64
Figure 02_image353
 A 1 2.48 479.1 B
65
Figure 02_image355
 A 1 2.18 433.3 B
使用以下方法(方法A)來製備以下多種本發明之實例。
實施例66 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image357
在乾燥一打蘭小瓶中，在氮氣下，將8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(29 mg，0.102 mmol)溶解於NMP (1.0 mL)中。接著添加氫化鈉(10.6 mg，0.265 mmol)，且攪拌混合物3 min，其後添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(17 µL，0.142 mmol)。繼續在室溫下攪拌隔夜。接著藉由添加乙酸淬滅反應物，且藉由添加NMP將體積調整至1.8 mL。過濾此混合物，且接著經由製備型LC/MS，用以下條件來純化：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在30% B保持0分鐘，30-70% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為9.3 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為97%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：97.3 %；質量觀測值：420.07；滯留時間：1.95 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：98.8 %；質量觀測值：420.32；滯留時間：1.85 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.11 (s, 1.0H), 8.07-8.00 (m, 1.0H), 7.79 (d, J=3.1 Hz, 1.0H), 7.36 (dd, J=8.9, 3.1 Hz, 1.0H), 6.74 (d, J=9.2 Hz, 1.0H), 6.13 (s, 1.0H), 5.18-5.04 (m, 1.0H), 4.49 (dt, J=12.1, 6.0 Hz, 1.0H), 3.85-3.71 (m, 1.7H), 3.30 (br t, J=9.6 Hz, 1.8H), 2.18-2.04 (m, 2.0H), 1.87-1.71 (m, 2.0H), 1.23 (d, J=5.8 Hz, 6.0H)。在3.57 ppm下之水抑制減小相鄰信號之強度。
以類似方式，可製備以下實例。
Figure 02_image359
表5
實例 編號 雜芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
67
Figure 02_image361
 A 1 1.97 396.0 A
68
Figure 02_image363
 A 1 1.64 419.3 A
69
Figure 02_image365
 A 1 1.92 413.3 A
70
Figure 02_image367
 A 1 1.14 391.1 A
71
Figure 02_image369
 A 1 1.46 413.0 A
72
Figure 02_image371
 A 1 1.10 377.1 A
73
Figure 02_image373
 A 1 2.30 476.1 A
74
Figure 02_image375
 A 1 1.46 413.0 A
75
Figure 02_image377
 A 1 1.28 412.9 A
76
Figure 02_image379
 A 1 1.80 431.3 A
77
Figure 02_image381
 A 1 2.11 430.2 A
78
Figure 02_image383
 A 1 1.34 419.3 A
實例79 (+/-) 6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮
Figure 02_image385
向裝配有隔膜之乾燥20 mL閃爍瓶中裝入3 mmol/g三苯基膦(聚合物負載的) (2.212 mL，0.664 mmol)，且接著抽真空且用氮氣沖洗。接著添加THF (2 mL)，隨後在約1 min之後，添加4-(三氟甲氧基)苯酚(0.039 mL，0.302 mmol)。將所得混合物進行簡單混合，其後經由一次性注射器添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(111 mg，0.483 mmol)於THF (1 mL)中之溶液。在定軌振盪器上攪動混合物3 min，其後一次性添加8-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(90 mg，0.302 mmol)於THF (2 mL)中之溶液。接著小瓶在室溫下振盪隔夜。隨後過濾反應混合物，且蒸發至乾燥。將殘餘物溶解於2 mL DMF中，且經由製備型LC/MS在以下條件下分級分離所得溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在31% B保持0分鐘，31-71% B歷時25分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為13.3 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：459.09；滯留時間：2.44 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：459.08；滯留時間：2.28 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.21-8.13 (m, 1H), 8.18-8.04 (m, 2H), 8.12-8.04 (m, 1H), 7.33-7.24 (m, 2H), 7.15-7.08 (m, 2H), 6.17-6.11 (m, 1H), 4.27 (br d,J =3.7 Hz, 1H), 4.04-3.87 (m, 2H), 3.59-3.51 (m, 3H), 3.39 (br d,J =4.9 Hz, 1H), 3.23-3.12 (m, 1H), 3.00 (br t,J =11.3 Hz, 1H), 2.24-1.99 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 1H), 1.07 (br d,J =6.4 Hz, 3H)。
藉由對掌性SFC分離法解析上文外消旋混合物。將大致10.1 mg之外消旋體解析至收集於IPA w/0.1% DEA中之兩個峰中。基於下文製備型層析估計分離物之對掌性純度。 分離物                               對掌性純度 第1溶離峰                          ＞95 % 第2溶離峰                         ＞95 %
製備型層析條件： 儀器：         Waters 100 Prep SFC 管柱：         Chiral AD，30 × 250 mm，5微米 移動相：      75% CO2 / 25% IPA w/0.1% DEA 流動條件：   100 mL/min 偵測波長：   220 nm 注射細節：   1500 μL 10.1 mg，溶解於4 mL MeOH中
分析型層析條件(在製備型之前)： 儀器：         Shimadzu Nexera UC SFC 管柱：         Chiralpak AD，4.6 × 100 mm，5微米 移動相：      75% CO2 / 25% IPA w/0.1% DEA 流動條件：   2 mL/min 偵測波長：   220 nm 實例80： 分離物1：第一溶離峰 實例81： 分離物2：第二溶離峰
實例80 6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(rel)
Figure 02_image387
使用分析型LC/MS測定純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.7 %；質量觀測值：458.95；滯留時間：2.2 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.3 %；質量觀測值：459.1；滯留時間：2.26 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.32-7.90 (m, 2H), 7.33-7.02 (m, 4H), 6.13 (s, 1H), 4.31-4.18 (m, 1H), 4.03-3.88 (m, 2H), 3.57-3.51 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 1H), 3.04-2.93 (m, 1H), 2.24-2.15 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.74-1.55 (m, 1H), 1.10-1.02 (m, 3H)。
實例81 6-氰基-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(rel)
Figure 02_image389
使用分析型LC/MS測定純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：99.3 %；質量觀測值：459.08；滯留時間：2.2 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：97.8 %；質量觀測值：459.24；滯留時間：2.26 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19-8.00 (m, 2H), 7.32-7.05 (m, 4H), 6.13 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 4.02-3.88 (m, 2H), 3.57-3.52 (m, 3H), 3.21-3.10 (m, 1H), 3.05-2.90 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.72-1.57 (m, 1H), 1.09-1.02 (m, 3H)。
使用類似方法及純化技術，製備以下實例。
Figure 02_image391
表6
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
82
Figure 02_image393
 R 1 2.60 445.2 A
83
Figure 02_image395
 H 1 2.60 445.3 A
84
Figure 02_image397
 H 1 2.60 445.3 A
85
Figure 02_image399
 R 1 2.27 447.1 A
86
Figure 02_image401
 H 3 2.23 447.1 A
87
Figure 02_image403
 H 3 2.23 447.1 A
88
Figure 02_image405
 R 1 2.46 431.0 A
89
Figure 02_image407
 H 3 2.40 431.1 A
90
Figure 02_image409
 H 3 2.40 431.1 A
91
Figure 02_image411
 R 3 2.25 415.2 A
92
Figure 02_image413
 H 3 2.22 415.3 A
93
Figure 02_image415
 H 3 2.22 415.3 A
94
Figure 02_image417
 R 1 2.53 417.2 A
95
Figure 02_image419
 H 1 2.405 417.3 A
96
Figure 02_image421
 H 1 2.40 417.3 A
97
Figure 02_image423
 R 1 2.44 443.1 A
98
Figure 02_image425
 H 1 2.26 443.2 A
99
Figure 02_image427
 H 1 2.25 443.2 A
100
Figure 02_image429
 R 1 2.60 443.3 A
101
Figure 02_image431
 H 3 2.57 443.4 A
102
Figure 02_image433
 H 3 2.57 443.3 A
103
Figure 02_image435
 R 1 2.11 411.1 A
104
Figure 02_image437
 H 1 2.10 411.1 A
105
Figure 02_image439
 H 1 2.10 411.1 A
106
Figure 02_image441
 R 3 2.69 457.1 A
107
Figure 02_image443
 R 3 2.14 389.2 A
108
Figure 02_image445
 H 4 2.13 389.1 A
109
Figure 02_image447
 H 4 2.107 389.3 A
110
Figure 02_image449
 R 1 2.26 403.2 A
111
Figure 02_image451
 R 1 2.24 415.2 A
112
Figure 02_image453
 R 1 2.27 461.1 A
113
Figure 02_image455
 R 1 2.06 411.1 A
114
Figure 02_image457
 H 1 2.05 411.1 A
115
Figure 02_image459
 H 1 2.05 411.1 A
116
Figure 02_image461
 R 1 2.24 461.1 A
117
Figure 02_image463
 H 3 2.20 461.2 A
118
Figure 02_image465
 H 3 2.20 461.2 A
119
Figure 02_image467
 R 3 2.12 389.2 A
120
Figure 02_image469
 H 3 2.08 389.4 A
121
Figure 02_image471
 H 3 2.07 389.3 A
122
Figure 02_image473
 R 1 2.35 417.2 A
123
Figure 02_image475
 R 1 2.42 431.2 A
124
Figure 02_image477
 R 1 2.22 461.1 A
125
Figure 02_image479
 R 1 2.06 411.1 A
126
Figure 02_image481
 H 3 2.01 411.1 A
127
Figure 02_image483
 H 3 2.01 411.2 A
128
Figure 02_image485
 R 1 2.00 393.3 A
129
Figure 02_image487
 H 3 1.96 393.0 A
130
Figure 02_image489
 H 3 1.96 393.4 A
131
Figure 02_image491
 R 1 2.12 429.1 A
132
Figure 02_image493
 R 1 1.91 447.2 A
使用與先前流程及表中呈現之方法相關之方法且在光延反應中採用(+/-) 8-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈作為偶合搭配物以及適當官能化的苯酚，可製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image495
表7
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
136
Figure 02_image497
 R 1 2.12 414.2 A
使用相關方法且在光延反應中採用(+/-) 8-(順式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈作為偶合搭配物以及適當官能化的苯酚，可製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image499
表8
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+ 方法
137
Figure 02_image501
 R 3 2.44 431.2 A
138
Figure 02_image503
 H 5 2.48 431.1 A
139
Figure 02_image505
 H 5 2.48 431.1 A
140
Figure 02_image507
 R 3 2.41 457.1 A
141
Figure 02_image509
 H 3 2.31 457.3 A
142
Figure 02_image511
 H 3 2.30 457.2 A
143
Figure 02_image513
 R 1 2.53 431.1 A
144
Figure 02_image515
 H 3 2.48 431.0 A
145
Figure 02_image517
 H 3 2.48 431.4 A
146
Figure 02_image519
 R 1 2.38 457.0 A
147
Figure 02_image521
 H 3 2.39 457.3 A
148
Figure 02_image523
 H 3 2.39 457.3 A
149
Figure 02_image525
 R 1 2.73 459.1 A
150
Figure 02_image527
 H 3 2.73 459.1 A
151
Figure 02_image529
 H 3 2.74 459.1 A
152
Figure 02_image531
 R 3 2.54 445.1 A
153
Figure 02_image533
 H 3 2.61 445.1 A
154
Figure 02_image535
 H 3 2.62 445.1 A
155
Figure 02_image537
 R 3 2.32 429.2 A
156
Figure 02_image539
 H 1 2.35 429.2 A
157
Figure 02_image541
 H 1 2.35 428.9 A
158
Figure 02_image543
 R 1 2.36 460.9 A
159
Figure 02_image545
 H 3 2.40 461.1 A
160
Figure 02_image547
 H 3 2.39 461.2 A
161
Figure 02_image549
 R 3 2.38 447.1 A
162
Figure 02_image551
 H 3 2.35 472.9 A
163
Figure 02_image553
 H 3 2.35 473.3 A
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且在光延反應中採用(+/-) 8-(反式-3-乙基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈作為偶合搭配物以及適當官能化的苯酚，可製備以下實例。使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image555
表9
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
164
Figure 02_image557
 R 3 2.58 431.1
165
Figure 02_image559
 R 3 2.54 445.3
166
Figure 02_image561
 H 3 2.54 445.0
167
Figure 02_image563
 H 3 2.66 445.1
168
Figure 02_image565
 R 1 2.37 457.1
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且在光延反應中採用(+/-) 8-(反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈作為偶合搭配物以及適當官能化的苯酚，可製備以下實例。使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image567
表10
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
169
Figure 02_image569
 R 1 2.64 444.9
170
Figure 02_image571
 H 3 2.62 445.0
171
Figure 02_image573
 H 3 2.62 445.2
172
Figure 02_image575
 R 1 2.28 446.9
173
Figure 02_image577
 H 3 2.31 447.1
174
Figure 02_image579
 H 3 2.32 447.1
175
Figure 02_image581
 R 1 2.52 431.0
176
Figure 02_image583
 R 1 2.40 417.3
177
Figure 02_image585
 H 3 2.43 417.0
178
Figure 02_image587
 H 3 2.43 417.3
179
Figure 02_image589
 R 3 2.24 415.0
180
Figure 02_image591
 H 1 2.26 415.3
181
Figure 02_image593
 H 1 2.26 415.3
182
Figure 02_image595
 R 1 2.43 417.3
183
Figure 02_image597
 H 3 2.46 417.1
184
Figure 02_image599
 H 3 2.46 417.3
實例185 (+/-) 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺
Figure 02_image601
在氮氣下，在80℃下加熱氫化鈉(3.54 mg，0.074 mmol)及(+/-) 8-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(20 mg，0.067 mmol)於DMF (2 mL)中之懸浮液15分鐘。接著一次性添加1-氟-4-(三氟甲基)苯(9.36 µL，0.074 mmol)，且繼續加熱隔夜，且將反應混合物保持在室溫下48 h。粗材料經由使用以下條件的製備型LC/MS純化：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在24% B保持0分鐘，24-64% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.1 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為92%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.2 %；質量觀測值：317.13；滯留時間：1.29 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：91.8 %；質量觀測值：317.14；滯留時間：1.12 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.21-8.14 (m, 1H), 8.08-8.01 (m, 1H), 7.82-7.74 (m, 1H), 7.51-7.46 (m, 1H), 6.07-6.02 (m, 1H), 3.84-3.75 (m, 1H), 3.57-3.50 (m, 1H), 3.19-3.07 (m, 1H), 2.06-1.95 (m, 1H), 1.90-1.71 (m, 2H), 0.97-0.85 (m, 3H)。因為水抑制，所以並未定出全部信號。外消旋。
實例186 (+/-) 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image603
向三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(30 mg，0.090 mmol)及休尼格氏鹼(0.047 mL，0.270 mmol)於DMF (1.5 mL)中之溶液中，添加(+/-) 順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶之TFA鹽(40.3 mg，0.108 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物隔夜。經由製備型LC/MS，用以下條件純化粗材料：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；梯度：在40% B保持0分鐘，40-80% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：99.3 %；質量觀測值：442.98；滯留時間：2.3 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：443.21；滯留時間：2.33 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.20-8.11 (m, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.72-7.57 (m, 2H), 7.32-7.12 (m, 2H), 6.21-6.06 (m, 1H), 4.84-4.63 (m, 1H), 2.36-2.21 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 2H), 1.12-0.91 (m, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
使用SFC-對掌性層析，進一步分級分離外消旋產物。得到以下兩種對映異構體且對其進行表徵。
實例187 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(rel)
Figure 02_image605
使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：97.5 %；質量觀測值：442.84；滯留時間：2.25 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：99.4 %；質量觀測值：443.07；滯留時間：2.25 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.22-8.12 (m, 1H), 8.12-8.01 (m, 1H), 7.69-7.58 (m, 2H), 7.28-7.17 (m, 2H), 6.23-6.09 (m, 1H), 4.84-4.66 (m, 1H), 2.39-2.19 (m, 1H), 2.13-1.92 (m, 2H), 1.12-0.88 (m, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
實例188 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(rel)
Figure 02_image607
使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：96.4 %；質量觀測值：443.09；滯留時間：2.26 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：98.6 %；質量觀測值：443.07；滯留時間：2.25 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.23-8.11 (m, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.78-7.55 (m, 2H), 7.31-7.15 (m, 2H), 6.21-6.05 (m, 1H), 4.82-4.62 (m, 1H), 2.37-2.12 (m, 1H), 2.06-1.92 (m, 2H), 1.06-0.92 (m, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且採用三氟甲烷磺酸3,6-二氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯作為偶合搭配物以及適當官能化的(+/-) 順式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中間物，製備以下實例。使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image609
表11
實例 編號 芳基 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
189
Figure 02_image611
 R 3 2.31 468.0
190
Figure 02_image613
 H 1 2.25 468.1
191
Figure 02_image615
 H 1 2.25 468.1
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且採用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯作為偶合搭配物以及適當官能化的(+/-) 反式-3-乙基-4-芳基氧基哌啶中間物，製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image617
表12
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
192
Figure 02_image619
 R 1 2.17 447.9
193
Figure 02_image621
 H 1 2.13 448.3
194
Figure 02_image623
 H 1 2.13 448.1
195
Figure 02_image625
 R 1 2.50 449.2
196
Figure 02_image627
 R 3 2.62 445.3
197
Figure 02_image629
 H 3 2.62 445.2
198
Figure 02_image631
 H 3 2.62 445.2
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且採用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯作為偶合搭配物以及適當官能化的(+/-) 反式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中間物，製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image633
表13
實例 編號 芳基結構 立體化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
199
Figure 02_image635
 非對映異構混合物 3 2.00 434.1
200
Figure 02_image637
 H 1 2.12 434.3
201
Figure 02_image639
 H 1 2.12 434.3
使用與在先前表中呈現之方法相關之方法且在SNAr 反應中採用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯作為偶合搭配物以及適當官能化的(+/-) 順式-3-乙基-4-芳基氧基哌啶中間物，可製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image641
表14
實例 編號 芳基 立體化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
202
Figure 02_image643
 R 3 2.18 448.1
203
Figure 02_image645
 H 3 2.04 448.2
204
Figure 02_image647
 H 3 2.04 448.4
使用與先前表中呈現之方法相關之方法且採用三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯作為偶合搭配物以及適當官能化的(+/-) 順式-3-甲基-4-芳基氧基哌啶中間物，製備以下實例。可使用如上文所描述之製備型HPLC技術達成特定對映異構體之分離。
Figure 02_image649
表15
實例 編號 芳基結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT (m/z) : (M+H)+
205
Figure 02_image651
 R 3 1.88 418.1
206
Figure 02_image653
 H 3 1.78 418.2
207
Figure 02_image655
 H 3 1.79 418.2
208
Figure 02_image657
 R 3 2.01 426.3
209
Figure 02_image659
 H 1 1.99 426.1
210
Figure 02_image661
 H    1 1.99 426.0
211
Figure 02_image663
 R 1 1.74 418.3
212
Figure 02_image665
 H 3 1.73 418.1
213
Figure 02_image667
 H 3 1.73 418.1
214
Figure 02_image669
 R 3 2.12 418.1
215
Figure 02_image671
 H 3 1.92 418.1
216
Figure 02_image673
 H 3 1.92 418.1
217
Figure 02_image675
 R 1 1.46 377.1
218
Figure 02_image677
 R 3 1.39 407.1
219
Figure 02_image679
 R 1 1.86 419.1
220
Figure 02_image681
 R 1 1.18 391.1
221
Figure 02_image683
 R 1 1.71 405.1
222
Figure 02_image685
 R 1 1.88 445.1
223
Figure 02_image687
 R 1 1.81 417.0
224
Figure 02_image689
 R 3 1.84 416.1
225
Figure 02_image691
 R 3 2.23 444.0
226
Figure 02_image693
 H 3 2.17 443.9
227
Figure 02_image695
 H 3 2.17 444.2
實例228 (+/-) 8-(順式-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image697
向(+/-) 8-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(30 mg，0.101 mmol)於無水N-甲基-2-吡咯啶酮(1.0 mL)中之溶液中，添加氫化鈉(60%於礦物油中，10.05 mg，0.251 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5分鐘，且接著添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(0.018 ml，0.151 mmol)，且繼續在室溫下攪拌隔夜。反應物藉由添加乙酸(0.014 ml，0.251 mmol)淬滅，用乙腈稀釋且接著過濾。經由製備型LC/MS，用以下條件純化濾液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+乙酸銨；梯度：在26% B保持0分鐘，26-66% B歷時30分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.8 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：434.20；滯留時間：2.08 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：434.13；滯留時間：2.04 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.23-8.15 (m, 1H), 8.14-8.03 (m, 1H), 7.88-7.78 (m, 1H), 7.46-7.35 (m, 1H), 6.88-6.70 (m, 1H), 6.19-6.08 (m, 1H), 5.28-5.18 (m, 1H), 4.60-4.47 (m, 1H), 3.64-3.45 (m, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 1H), 2.01-1.89 (m, 1H), 1.35-1.23 (m, 6H), 1.10-0.94 (m, 3H)。外消旋。因為採用水抑制技術，所以未完全定出頻譜。
實例229 (+/-) 5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image699
在微波管中，添加(+/-) 6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈之TFA鹽(31 mg，0.049 mmol)、鋅(0.636 mg，9.73 µmol)、氰化鋅(3.43 mg，0.029 mmol)及1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(3.97 mg，4.86 µmol)。將管密封，抽真空且接著用氮氣沖洗。接著添加NMP (1.5 mL)，且在80℃下加熱反應混合物4 h。接著使混合物冷卻，之後藉由添加乙腈稀釋至2 mL之體積。過濾所得混合物，且藉由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 Mm乙酸銨；梯度：在52% B保持0分鐘，52-92% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為10.2 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為98%.  使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.5 %；質量觀測值：469.88；滯留時間：2.62 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：98.8 %；質量觀測值：470.17；滯留時間：2.61 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.26 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.15 (d,J =9.2 Hz, 1H), 7.24 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 6.96 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 4.32 (br dd,J =7.5, 4.4 Hz, 1H), 4.26-4.14 (m, 1H), 4.26-4.11 (m, 1H), 3.77-3.60 (m, 1H), 2.36-2.25 (m, 1H), 2.23-2.11 (m, 1H), 1.78-1.63 (m, 1H), 1.62-1.53 (m, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.04 (br d,J =6.7 Hz, 3H), 0.64 (br t,J =7.2 Hz, 3H)。外消旋。因為使用水抑制技術，所以並未定出全部信號。
使用SFC-對掌性層析進一步純化外消旋材料。獲得兩種對映異構體。
實例230 5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(rel)
Figure 02_image701
使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：96.6 %；質量觀測值：470.36；滯留時間：2.61 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：95.8 %；質量觀測值：470.33；滯留時間：2.60 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.26 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.15 (d,J =9.2 Hz, 1H), 7.24 (br d,J =8.9 Hz, 2H), 6.96 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 4.32 (td,J =8.7, 4.0 Hz, 1H), 4.25-4.12 (m, 2H), 3.78-3.62 (m, 1H), 2.31 (br dd,J =12.5, 2.7 Hz, 1H), 2.20 (br d,J =5.5 Hz, 1H), 1.76-1.66 (m, 1H), 1.58 (q,J =7.3 Hz, 2H), 1.22 (s, 6H), 1.03 (br d,J =6.4 Hz, 3H), 0.63 (t,J =7.3 Hz, 3H。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
實例231 5-甲基-8-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(rel)
Figure 02_image703
使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：98.2 %；質量觀測值：470.34；滯留時間：2.61 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：95.6 %；質量觀測值：470.32；滯留時間：2.6 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.25 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.14 (d,J =9.2 Hz, 1H), 7.23 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 6.96 (br d,J =8.5 Hz, 2H), 4.32 (dt,J =9.3, 4.5 Hz, 1H), 4.25-4.11 (m, 2H), 3.77-3.61 (m, 1H), 2.31 (br d,J =9.8 Hz, 1H), 2.22-2.08 (m, 1H), 1.76-1.64 (m, 1H), 1.58 (br d,J =7.3 Hz, 2H), 1.21 (s, 6H), 1.03 (br d,J =6.4 Hz, 3H), 0.63 (t,J =7.3 Hz, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
實例232 (+/-) 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image705
向(+/-) 2-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶之TFA鹽(24 mg，0.063 mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.040 mL，0.231 mmol)於DMF (1.5 mL)中之溶液中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(19.21 mg，0.058 mmol)，且在70℃下加熱反應混合物隔夜。使混合物冷卻至室溫，且接著用乙腈稀釋至2 mL之體積。過濾此溶液，且接著使用製備型LC/MS，用以下條件分級分離：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在40% B保持0分鐘，40-80% B歷時20分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為16.4 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：448.32；滯留時間：2.33 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：448.17；滯留時間：2.17 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.20-8.13 (m, 1H), 8.08 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.82 (d,J =3.1 Hz, 1H), 7.39 (dd,J =9.0, 2.9 Hz, 1H), 6.79 (d,J =8.9 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.90 (br dd,J =9.2, 3.7 Hz, 1H), 4.52 (dt,J =12.0, 6.1 Hz, 1H), 3.80 (br d,J =12.5 Hz, 1H), 3.23-3.15 (m, 1H), 3.05 (br d,J =13.1 Hz, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 1.86 (br dd,J =9.0, 4.1 Hz, 1H), 1.26 (d,J =5.8 Hz, 5H), 1.16 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
藉由SCP，使用SFC-對掌性層析來進一步純化外消旋材料。獲得兩種對映異構體。實例232為第一溶離異構體。
實例233 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(rel)
Figure 02_image707
產物產量為4.2 mg，且其純度為96%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：99.3 %；質量觀測值：448.36；滯留時間：2.19 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.4 %；質量觀測值：447.92；滯留時間：2.04 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.18-8.14 (m, 1H), 8.08 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.82 (d,J =3.1 Hz, 1H), 7.39 (dd,J =9.2, 3.1 Hz, 1H), 6.79 (d,J =8.9 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.90 (dd,J =8.7, 3.8 Hz, 1H), 4.52 (dt,J =12.0, 6.1 Hz, 1H), 3.80 (br d,J =11.9 Hz, 1H), 3.55 (s, 1H), 3.23-3.12 (m, 1H), 3.05 (br d,J =12.2 Hz, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.85 (br dd,J =9.0, 4.1 Hz, 1H), 1.26 (d,J =6.1 Hz, 6H), 1.16 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。實例233為第二溶離異構體。
實例234 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(rel)
Figure 02_image709
產物產量為3.6 mg，且其純度為98%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：448.38；滯留時間：2.19 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：97.5 %；質量觀測值：447.90；滯留時間：2.04 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.21-8.13 (m, 1H), 8.08 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.82 (d,J =2.7 Hz, 1H), 7.39 (dd,J =8.9, 3.1 Hz, 1H), 6.78 (d,J =9.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.90 (dd,J =8.9, 4.0 Hz, 1H), 4.52 (dt,J =12.1, 6.0 Hz, 1H), 3.80 (br d,J =12.2 Hz, 1H), 3.55 (s, 1H), 3.25-3.13 (m, 1H), 3.05 (br d,J =12.2 Hz, 1H), 2.15-2.09 (m, 1H), 1.90-1.80 (m, 1H), 1.26 (d,J =5.8 Hz, 6H), 1.16 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)。因為採用水抑制技術，所以未定出完全頻譜。
實例235 (+/-) 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image711
向(+/-) 8-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(25 mg，0.084 mmol)於THF (5 mL)中之懸浮液中，添加氫化鈉(4.02 mg，0.084 mmol)。在氮氣下在室溫下攪拌反應混合物10 min。一次性添加1-(溴甲基)-4-(三氟甲氧基)苯(0.013 mL，0.084 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。添加兩滴冰乙酸，且過濾混合物且接著使用製備型LC/MS，用以下條件純化：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在40% B保持0分鐘，40-80% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.8 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為99%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：99.3 %；質量觀測值：473.15；滯留時間：2.49 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：99.1 %；質量觀測值：473.09；滯留時間：2.38 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.16-8.11 (m, 1H), 8.08-8.03 (m, 1H), 7.51 (br d, J=8.2 Hz, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 6.10-6.07 (m, 1H), 4.64 (br d, J=12.2 Hz, 1H), 4.52 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 3.71-3.64 (m, 1H), 2.17 (br s, 1H), 1.99 (br s, 1H), 1.86-1.74 (m, 2H), 1.03 (br d, J=6.7 Hz, 3H)。因為在獲取頻譜中使用水抑制技術，所以未定出哌啶之全部質子。
自相同粗材料中分離出額外組分實例236。
實例236 (+/-) 5-甲基-8-(順式-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺
Figure 02_image713
經由製備型LC/MS，用以下條件，來純化實例235之粗材料：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在40% B保持0分鐘，40-80% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.9 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為94%.  使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：96.2 %；質量觀測值：491.12；滯留時間：2.03 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：93.9 %；質量觀測值：491.15；滯留時間：2.12 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.22-8.14 (m, 1H), 8.09-8.01 (m, 1H), 7.83-7.74 (m, 1H), 7.55-7.47 (m, 3H), 7.41-7.30 (m, 2H), 6.11-6.03 (m, 1H), 4.73-4.62 (m, 1H), 4.53-4.47 (m, 1H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.43-3.32 (m, 1H), 3.32-3.22 (m, 1H), 2.27-2.15 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.03-0.93 (m, 3H)。因為在獲取光譜中使用水抑制技術，所以未定出哌啶之全部質子。
實例237 7-氟-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image715
將5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(25 mg，0.056 mmol)溶解於乙腈(0.4 mL)與THF (0.2 mL)之混合物中，且使所得混合物在氮氣氛圍下冷卻至0℃。添加溶解於水與THF之1:1混合物(0.3 mL)中之1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸酯) (22.4 mg，0.063 mmol)，且使混合物升溫至室溫且繼續攪拌2 h。藉由添加DMF將混合物稀釋至1.8 mL之體積，且經由製備型LC/MS，用以下條件，來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在40% B保持0分鐘，40-80% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為12.6 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：463.11；滯留時間：2.26 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：463.11；滯留時間：2.25 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.18-8.13 (m, 1.0H), 8.12-8.08 (m, 1.0H), 7.28 (br d, J=8.2 Hz, 2.0H), 7.11 (br d, J=8.9 Hz, 2.0H), 4.69 (dt, J=7.6, 3.5 Hz, 1.0H), 3.71 (br d, J=13.7 Hz, 1.3H), 3.60 (s, 0.5H), 3.42 (br J=9.9 Hz, 1.1H), 2.18-2.07 (m, 2.0H), 1.87-1.75 (m, 1.9H)。與水抑制頻率相鄰之信號呈現強度降低。所報告值未針對水抑制作用進行校正：質子解耦頻譜中所觀測到之19 F信號：19 F NMR (471 MHz, DMSO-d6 ) δ -57.23, -140.76 ppm。
實例238 7-氯-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image717
將5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(20 mg，0.045 mmol)溶解於無水DMF (0.4 ml)中，且使溶液在氮氣下冷卻至0℃。接著添加NCS (9.4 mg，0.070 mmol)，且攪拌混合物5 min，且接著加熱至50℃持續2 h。經由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在41% B保持0分鐘，41-81% B歷時25分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為11.8 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100.0 %；質量觀測值：479.08；滯留時間：2.35 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100.0 %；質量觀測值：479.09；滯留時間：2.39 min。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.86-7.78 (m, 1.0H), 7.76-7.70 (m, 1.0H), 7.22-7.13 (m, 2.0H), 7.03-6.93 (m, 2.0H), 4.61 (tt, J=7.2, 3.6 Hz, 1.0H), 3.90-3.78 (m, 2.1H), 3.74 (s, 3.0H), 3.57 (ddd, J=13.1, 7.7, 3.4 Hz, 2.1H), 2.28-2.18 (m, 2.0H), 2.11-1.99 (m, 2.0H)。
實例239 7-溴-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image719
將5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(20 mg，0.045 mmol)溶解於乾燥一打蘭小瓶中之DMF (0.45 mL)中。添加NBS (9.1 mg，0.051 mmol)，且在氮氣下在室溫下攪拌混合物4 h。接著添加一滴水，且藉由添加乙腈將反應混合物稀釋至1.8 mL。經由製備型LC/MS，用以下條件來純化此粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在45% B保持0分鐘，45-85% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.3 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為95%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：95.1 %；質量觀測值：523.03；滯留時間：2.4 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.2 %；質量觀測值：523.01；滯留時間：2.4 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.20-8.15 (m, 1.0H), 8.15-8.09 (m, 1.0H), 7.28 (br d, J=8.5 Hz, 2.0H), 7.13 (br d, J=8.9 Hz, 2.0H), 4.72 (dt, J=7.8, 4.0 Hz, 1.0H), 3.72-3.60 (m, 1.6H), 3.53-3.43 (m, 0.4H), 2.14 (br d, J=10.1 Hz, 2.0H), 1.92-1.78 (m, 2.0H)。與3.57 ppm之水抑制頻率相鄰之信號呈現強度降低。
實例240 7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image721
在乾燥一打蘭小瓶中，置放雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (3.9 mg，5.56 µmol)、氯化亞銅(I) (19.1 mg，0.193 mmol)、氯化鋰(13 mg，0.307 mmol)及7-溴-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(25 mg，0.048 mmol)及2-甲氧基-5-(三丁基錫烷基)吡啶(34 mg，0.085 mmol)。添加無水DMSO (0.48 mL)，且將小瓶密封，抽真空且接著用氮氣沖洗。接著在100℃下加熱反應混合物隔夜。接著使其冷卻且過濾，且藉由添加DMF將體積調整至1.8 mL。經由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在45% B保持0分鐘，45-85% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為15.1 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為96%.  使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：97.1 %；質量觀測值：552.13；滯留時間：2.4 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.0 %；質量觀測值：552.15；滯留時間：2.28 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19-8.13 (m, 1.1H), 8.12-8.07 (m, 1.0H), 8.05 (s, 1.0H), 7.65 (br d, J=9.2 Hz, 1.1H), 7.23 (br d, J=8.2 Hz, 2.1H), 7.04 (br d, J=8.9 Hz, 2.1H), 6.91 (d, J=8.5 Hz, 1.0H), 4.53 (br s, 1.0H), 3.89 (s, 2.9H), 3.59 (s, 0.3H), 3.23 (br d, J=12.8 Hz, 1.5H), 2.82 (br t, J=10.2 Hz, 1.9H), 1.96 (br d, J=11.3 Hz, 2.0H), 1.76-1.64 (m, 2.1H)。所報告值未針對水抑制作用進行校正。
實例241 7-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image723
在乾燥一打蘭小瓶中，負載雙(三苯基膦)二氯化鈀(II) (3.7 mg，5.27 µmol)、氯化亞銅(I) (19.0 mg，0.192 mmol)、氯化鋰(13.2 mg，0.311 mmol)、3-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫喹啉-6-甲腈(25 mg，0.048 mmol)及2-甲氧基-4-(三丁基錫烷基)吡啶(32 mg，0.080 mmol)。添加無水DMSO (0.48 ml)，且將小瓶密封，抽真空且接著用氮氣沖洗。接著在100℃下加熱反應混合物隔夜。接著使其冷卻且過濾，且藉由添加DMF將體積調整至1.8 mL。藉由製備型LC/MS，用以下條件來純化粗物質溶液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在44% B保持0分鐘，44-84% B歷時20分鐘，接著在100% B保持4分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為12.7 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為97%.  使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：97.8 %；質量觀測值：552.14；滯留時間：2.37 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：96.6 %；質量觀測值：552.15；滯留時間：2.14 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.24-8.15 (m, 2.0H), 8.13-8.07 (m, 1.0H), 7.23 (br d, J=8.5 Hz, 2.0H), 7.04 (br d, J=8.9 Hz, 2.1H), 6.88 (br d, J=4.9 Hz, 1.0H), 6.74 (s, 1.0H), 4.62-4.50 (m, 1.0H), 3.88 (s, 2.7H), 3.59-3.56 (m, 0.3H), 3.25 (br d, J=13.7 Hz, 1.3H), 2.84 (br t, J=10.1 Hz, 1.8H), 1.97 (br d, J=10.7 Hz, 2.0H), 1.77-1.65 (m, 2.0H)。所報告值未針對水抑制作用進行校正。
實例242 (+/-) 6-溴-1-甲基-4-(反式-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈
Figure 02_image725
向4-(三級戊基)苯酚(65.3 mg，0.398 mmol)於THF (8 mL)中之溶液中，添加於固體載體上之三苯基膦(194 mg，0.583 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接著，添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(98 mg，0.424 mmol)及(+/-) 6-溴-4-(順式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(100 mg，0.265 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物6天。接著過濾反應混合物且真空濃縮濾液，得到黃色固體。使用逆相製備型HPLC管柱，使用CH3 CN-H2 O-TFA溶劑系統作為溶離劑，來純化產物。收集均質級分且真空濃縮，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物之TFA鹽(31 mg，0.049 mmol，18.34%產率)。LCMS：(m/z) : (M+H)+ = 523.0。1 H NMR (400 MHz, 丙酮) δ 7.98 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.86 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.30 (d,J =8.8 Hz, 2H), 7.01 (d,J =8.8 Hz, 2H), 4.40-4.32 (m, 2H), 4.31-4.23 (m, 1H), 3.77 (ddd,J =13.4, 10.9, 2.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.35 (dd,J =13.2, 9.8 Hz, 1H), 2.54-2.42 (m, 1H), 2.37 (ddd,J =12.6, 6.2, 2.9 Hz, 1H), 1.97-1.78 (m, 1H), 1.15 (d,J =6.6 Hz, 3H), 0.69 (t,J =7.5 Hz, 3H)。因為溶劑雜質混淆了某些化合物相關峰，所以未完整定出。
先前表中所採用之LCMS方法：
方法1：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm × 50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
方法2：開始B% = 0，最終B% = 100，梯度時間= 4 min，流速= 0.8 ml/min，波長= 220，溶劑對= 水-甲醇-0.1% TFA，溶劑A = 90%水-10% 甲醇- 0.1% TFA，溶劑B = 10%水-90%甲醇-0.1% TFA，管柱2 = (2)PHENOMENEX-LUNA 2.0 × 50mm 3 μm，
方法3：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm × 50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
方法4：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1% 三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0-100% B歷時3分鐘，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法5：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
LCMS條件：
方法A：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-90% B歷時1.1分鐘，接著在90% B保持0.6分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法B：管柱：Ascentis Express C18 (2.1 × 50 mm)，2.7 µm；移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)，移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法C：管柱：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm)，2.5 μm；移動相A：95%水:5%乙腈+ 10 mM乙酸銨；移動相B：5%水:95%乙腈+ 10 mM乙酸銨；流速：1.1 mL/min；溫度：50℃；時間(min)：0-3；B%：0-100%)
方法D：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
中間物73 3-((3-甲氧基-2-甲基-3-側氧基丙基)胺基)丁酸乙酯
Figure 02_image727
在回流下加熱3-胺基丁酸乙酯(25 g，191 mmol)、甲基丙烯酸甲酯(50 mL，191 mmol)、乙酸(1.5 mL，26.2 mmol)及乙醇(40 mL)之混合物16 h。將反應混合物冷卻至室溫且倒入含有乙醚(300 mL)之燒杯中。分離出固體且用乙醚(50 mL)洗滌。有機相用NaHCO3 飽和溶液(2 × 50 mL)、鹽水(30 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發，得到呈黃色液體狀之3-((3-甲氧基-2-甲基-3-側氧基丙基)胺基)丁酸乙酯。LCMS：m/z，232.2 (M+H)；rt 1.42 min；LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:2)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。
中間物73A及73B (±)-順式三級丁基-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸酯及(±)-反式三級丁基-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image729
將金屬鈉(2.98 g，130 mmol)溶解於二甲苯(100 mL)中且加熱至100℃，向溶液中緩慢添加3-胺基丁酸乙酯及3-((3-甲氧基-2-甲基-3-側氧基丙基)胺基)丁酸乙酯(30 g，130 mmol)於二甲苯(30 mL)中之混合物。繼續在140℃下加熱2 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除二甲苯，得到呈棕色固體狀之粗物質3-(乙氧羰基)-2,5-二甲基-4-哌啶酮。在0℃下，在2 h中，向此粗混合物中緩慢添加20% HCl (100 mL)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，且在100℃下回流16 h。將反應混合物冷卻至室溫且減壓蒸發，得到呈棕色固體狀之粗物質。將殘餘物溶解於甲醇(450 mL)中，且添加TEA (50 mL，359 mmol)及Boc-酸酐(50 mL，215 mmol)。將反應混合物加熱至回流持續2 h，冷卻至室溫，且減壓蒸發溶劑。將殘餘物溶解於乙醚(400 mL)中，用水(2 × 50 mL)、鹽水(2 × 50 mL)洗滌，經乾燥且減壓蒸發，得到棕色液體，藉由矽膠層析(ELSD法)使用己烷/乙酸乙酯(80:20)作為溶離劑來純化，得到順式-哌啶酮及反式-哌啶酮。
中間物73A：(±)-順式哌啶酮異構體(固體)：LCMS：m/z，[(M-Boc)+H] 172.2；rt 2.29 min；LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:2)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(02:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。1 H NMR (CDCl3 ) δ ppm 4.87- 4.52 (m, 1H), 4.38-4.15 (m, 1H), 2.84 - 2.82 (m, 1H), 2.68 (dd,J = 6.8 Hz,J = 13.6 Hz, 1H), 2.54-2.52 (m, 1H), 2.25 (dd,J = 2.0 Hz,J = 13.6 Hz, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.15 (d,J = 6.8 Hz, 3H), 1.02 (d,J = 6.4 Hz, 3H)。
中間物73B：(±)-反式哌啶酮異構體(黃色液體)：LCMS：m/z，[(M-Boc)+H] 172.2；rt 2.19 min。LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:02)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。1 H NMR (CDCl3 ) δ ppm 4.60-4.56 (m, 1H), 3.77 (dd, J = 4.6 Hz, J= 13.8 Hz, 1H), 3.64 (dd, J= 4.4 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 2.64 (dd, J = 6.8 Hz, J= 15.2 Hz, 1H), 2.53-2.48 (m, 1H), 2.09 (dd, J = 3.6 Hz, J = 15.2 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.14 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
中間物74 (±)-順式-三級丁基-4-羥基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image731
向在0℃下之(±)-順式-三級丁基-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸酯(800 mg，3.52 mmol)於無水MeOH (6.0 mL)中之攪拌溶液中，添加硼氫化鈉(333 mg，8.80 mmol)，且在室溫下攪拌2 h。用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應物。向混合物中添加乙酸乙酯且攪拌混合物10分鐘。分離有機層，且用乙酸乙酯(2 × 50 mL)萃取水層。經合併之有機層經硫酸鈉乾燥且減壓蒸發，得到(±)-順式-三級丁基-4-羥基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯之非對映異構混合物。LCMS：m/z，230.2 [M+H]；rt 2.0 min。LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:02)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(02:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。
中間物75 (±)-順式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image733
在氮氣氛圍下，向(±)-順式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯(500 mg，2.18 mmol)及2-氟-5-異丙氧基吡啶(338 mg，2.18 mmol)於DMSO (15 mL)中之混合物中，添加三級丁醇鉀(294 mg，2.62 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物16 h。反應混合物用乙醚稀釋，用水洗滌，經硫酸鈉乾燥且減壓蒸發，得到粗產物，藉由矽膠層析(ELSD法)使用己烷/乙酸乙酯(80:20)作為溶離劑來純化該粗產物，得到(±)-順式-(2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯。LCMS：m/z，365.2 [M+ H]；rt 4.0 min。LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:02)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。
中間物76 (±)-順式-2-(2,5)-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶
Figure 02_image735
在室溫下，向(±)-順式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯(350 mg，0.96 mmol)於DCM (5.0 mL)中之溶液中，添加TFA (0.370 mL，4.80 mmol)。攪拌反應混合物4 h。減壓蒸發反應混合物，得到淡黃色液體(±)-順式-2-(2,5)-二甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶。LCMS：m/z，265.2 [M+ H]；rt 1.58 min。LCMS方法：管柱-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 μm)；移動相A：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(98:2)，移動相B：水(+ 10 mM NH4 COOH):乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4.0分鐘，流速：1.0 mL；接著在100% B保持0.6分鐘，流速：1.5 mL；接著100-20% B歷時0.1 min，流速：1.5 mL；接著在20% B保持0.3分鐘，流速：1.5 mL；偵測：ELSD。
實例243至246 (±)-順式-(-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image737
Figure 02_image739
向(±)-順式-6-氯-4-(-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(50 mg，0.11 mmol)於THF (2.0 mL)及水(1.0 mL)中之攪拌溶液中，添加氰化鋅(25.6 mg，0.22 mmol)。混合物用氬氣吹掃5分鐘，且在室溫下添加氯[2-(二-三級丁基膦)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基][2-(2-胺乙基)苯基)]鈀(II), [2-(二-三級丁基膦)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基][2-(2-胺乙基)苯基)]氯化鈀(II)(tBuXPhos-Pd-G1) (0.750 mg，1.09 µmol)。在40℃下加熱反應混合物24 h。將反應混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，經硫酸鈉乾燥，減壓蒸發，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化粗產物，得到外消旋體混合物1及外消旋體混合物2。製備型HPLC方法：管柱：Sunfire C-18 (150 mm × 21.2 mm ID，5 μm)，移動相A = 10 mM乙酸銨/水，移動相B =乙腈:MeOH (1:1)，梯度：在60% B保持0分鐘，72% B歷時25分鐘，流速：20 mL/min。
對掌性分離外消旋體混合物1，得到實例243 (rt = 8.24 min)及實例244 (rt = 9.22 min)。對掌性HPLC方法：Cellulose-5 (250 × 21.2) mm-5 μm，移動相A：乙腈(+ 0.1% DEA):MeOH (90:10)，移動相B：流速：22 mL/min。
對掌性分離上文外消旋體混合物2，得到實例245 (rt = 16.2 min)及實例246 (rt = 20.0 min)。對掌性HPLC方法：Cellulose-5 (250 × 21.2) mm-5 μm，移動相A：乙腈(+ 0.1% DEA):MeOH (90:10)，移動相B：流速：22 mL/min。
實例243：LCMS：m/z，449.2 [M+H]；rt 2.86 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例244：LCMS：m/z，449.2 [M+H]；rt 2.85 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例245：m/z，449.2 [M+H]；rt 2.91 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例246：LCMS：m/z，449.2 [M+H]；rt 2.91 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
根據相同通用程序，例如243至246，藉由用適當哌啶異構體替代(±)-順式-三級丁基-4-羥基-2,5-二甲基哌啶-1-甲酸酯，製備表16中之實例。當反應得到非對映異構體混合物時，在最後階段利用製備型對掌性層析來分離混合物。在新形成的碳-氧鍵處不指定絕對立體化學。 表16
實例 編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
247
Figure 02_image741
 H D 2.85 449.3
248
Figure 02_image743
 H D 2.87 449.3
249   
Figure 02_image745
 H D 2.90 449.3
250
Figure 02_image747
 H D 2.90 449.3
根據通用程序，例如243-246，藉由用1-氟-3-(三氟甲基)苯替代2-氟-5-異丙氧基吡啶以及適當哌啶，製備表17中之實例。當反應得到非對映異構體混合物時，在最後階段利用製備型對掌性層析來分離混合物。在新形成的碳-氧鍵處不指定絕對立體化學。 表17
實例 編號 結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
251
Figure 02_image749
 H D 3.07 458.3
252
Figure 02_image751
 H D 3.07 458.3
253
Figure 02_image753
 H D 3.12 458.3
254
Figure 02_image755
 H D 3.12 458.3
根據通用程序，例如243-246，藉由用1-氟-3-(三氟甲基)苯替代2-氟-5-異丙氧基吡啶，製備表18中之實例。當反應得到非對映異構體混合物時，在最後階段利用製備型對掌性層析來分離混合物。在新形成的碳-氧鍵處不指定絕對立體化學。 表18
實例 編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
255
Figure 02_image757
 H D 3.09 458.3
256
Figure 02_image759
 H D 3.09 458.3
257
Figure 02_image761
 H D 3.18 458.3
258
Figure 02_image763
 H D 3.18 458.3
中間物77及78 (±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(I-78)及(±)-反式-三級丁基-4-羥基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(I-79)
Figure 02_image765
在室溫下，向三級丁基-7-氧雜-3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-3-甲酸酯(1.5 g，7.53 mmol)於乙醇(15 mL)中之攪拌溶液中，添加K2 CO3 (1.04 g，7.53 mmol)及3-(三氟甲基)苯酚(1.22 g，7.53 mmol)。將反應混合物加熱至80℃持續3 h。將反應混合物冷卻至室溫，經由矽藻土墊過濾，用過量EtOH洗滌，且減壓濃縮濾液，得到粗產物。粗殘餘物經由急驟層析，使用24 g矽膠管柱且用30% EtOAc/石油醚溶離來純化，得到(±)-反式-三級丁基-4-羥基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯及(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯。
中間物77：LCMS：m/z，262.2 (M-100)；rt 1.76 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物78：LCMS：m/z，262.2 (M-100)；rt 1.82 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物79 (±)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇·HCl
Figure 02_image767
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(170 mg，0.47 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M，於二㗁烷中) (0.6 mL，2.36 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇·HCl。LCMS：m/z，262.2 (M+1)；rt 1.01 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例259及260 (+/-)-反式-8-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image769
向(±)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇·HCl (140 mg，0.47 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.4 mL，2.35 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(188 mg，0.56 mmol)。在85℃下加熱反應混合物隔夜。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化該粗產物(管柱：DAD-1-Cellulose-5 (250 × 4.6 mm)，5 μm，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH，流速：1.5 mL/min，注射體積：8.0 μL，運行時間：25 min)。
實例259：LCMS：m/z = 445.2 (M+H)；rt 1.75 min；(LCMS方法：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.22-8.13 (m, 1H), 8.11-7.98 (m, 1H), 7.59-7.47 (m, 1H), 7.36 (br d,J = 4.9 Hz, 2H), 7.28 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 6.16 (s,1H), 4.50-4.46 (m, 2H), 4.08 (br dd,J = 3.8, 12.8 Hz, 1H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.81 (dt,J = 4.4, 8.3 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.34-3.22 (m, 1H), 3.12 (dd,J =9.0, 12.7 Hz, 1H), 2.26-2.17 (m, 1H)。
實例260：LCMS：m/z = 445.2 (M+H)；rt 1.75 min；(LCMS方法：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.22-8.14 (m, 1H), 8.12-8.03 (m, 1H), 7.58-7.47 (m, 1H), 7.42-7.32 (m, 2H), 7.28 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 1H),5.60-5.34 (m, 1H), 4.53-4.42 (m, 1H), 4.15-4.05 (m, 1H), 3.96-3.86 (m, 1H), 3.84-3.77 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.28 (br s, 1H), 3.12 (dd, J = 9.4, 12.6 Hz,1H), 2.26-2.18 (m, 1H)。
中間物80 (±)-反式-三級丁基-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image771
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.28 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%，於礦物油中) (44.3 mg，1.11 mmol，60% w/w)。在5分鐘之後，添加碘甲烷(0.04 mL，0.55 mmol)於THF (2 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物2 h。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(±)-反式-三級丁基-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯。LCMS：m/z，276.1  (M-100)；rt 2.24 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物81 (±)-反式-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶鹽酸鹽
Figure 02_image773
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.27 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M，於二㗁烷中) (0.6 mL，2.6 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶·HCl。LCMS：m/z，276.1 (M+1)；rt 1.16 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例261及262 (±)-反式-8-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image775
向(±)-反式-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶·HCl (80 mg，0.26 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.23 mL，1.28 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接下來，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(103 mg，0.31 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化該粗產物(方法：管柱：DAD-1-Cellulose-5 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH，流速：1.5 mL/min，注射體積：4.0 μL，運行時間：20 min)。
實例261：LCMS：m/z，459.2 (M+H)；rt 2.04 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.23-8.16 (m, 1H), 8.13-8.07 (m, 1H), 7.59-7.47 (m, 1H), 7.44-7.34 (m, 2H), 7.30 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H),4.71-4.58 (m, 1H), 4.32-4.22 (m, 1H), 3.75-3.65 (m, 1H), 3.62-3.53 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 3.27-3.19 (m, 2H), 2.27-2.16 (m, 1H), 1.82-1.66 (m, 1H)。
實例262：LCMS：m/z，459.2 (M+H)；rt 2.04 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.23-8.15 (m, 1H), 8.14-8.07 (m, 1H), 7.60-7.48 (m, 1H), 7.46-7.34 (m, 2H), 7.30 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H),4.72-4.60 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 1H), 3.64-3.55 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.41 (s, 3H), 3.27-3.16 (m, 2H), 2.27-2.16 (m, 1H), 1.80 -1.69 (m, 1H)。
根據實例259及260中所揭示之通用程序，由適當烷基鹵化物製備表19中之實例。 表19
實例 編號 結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
263
Figure 02_image777
Figure 02_image779
 H C 2.15 473.3
264 H C 2.15 473.3
中間物82 (±)-反式-三級丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image781
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-4-羥基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(75 mg，0.21 mmol)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%，於礦物油中) (34 mg，0.83 mmol)。在5分鐘之後，添加碘甲烷(0.03 mL，0.41 mmol)於THF (1 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物2 h。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物，且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(±)-反式-三級丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯。LCMS：m/z，276.1 (M-100)；rt 2.10 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物83 (±)-反式-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶·HCl
Figure 02_image783
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(75 mg，0.20 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M，於二㗁烷中) (0.25 mL，1.00 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-4-甲氧基-3-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶·HCl。LCMS：m/z，276.1  (M+1)；rt 1.13 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例265及266 (±)-順式-8-(3-氟-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image785
在-78℃下，向(±)-反式-8-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(130 mg，0.29 mmol)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中，添加DAST (0.05 mL，0.35 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物16 h。用飽和NaHCO3 溶液淬滅反應物。用DCM (2×50 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化該粗產物[方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：17-52% B歷時19分鐘，接著在20% B保持5分鐘；流速：20 mL/min]。
實例265：LCMS：m/z，447.2 (M+H)；rt 1.92 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.21-8.11 (m, 1H), 8.05 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.62-7.46 (m, 1H), 7.37-7.19 (m, 3H), 5.83 (s, 1H), 5.53-5.42 (m, 1H),5.30 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.95-4.72 (m, 1H), 4.66-4.45 (m, 1H), 3.79-3.68 (m, 1H), 3.64-3.54 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 2.55-2.45 (m, 1H) 2.26-2.12 (m, 1H)。
實例266：LCMS：m/z，447.2 (M+H)；rt 2.01 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.24-8.17 (m, 1H), 8.14-8.07 (m, 1H), 7.61-7.50 (m, 1H), 7.46-7.37 (m, 2H), 7.33 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H),4.99-4.77 (m, 1H), 4.32-4.19 (m, 1H), 3.83-3.70 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.48 (br dd,J = 5.1, 13.4 Hz, 1H), 3.40-3.27 (m, 2H), 2.35-2.19 (m, 1H), 1.86 -1.72 (m, 1H)。
中間物84 (±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image787
在室溫下，向7-氧雜-3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-3-甲酸三級丁酯(250 mg，1.25 mmol)於EtOH (3 mL)中之攪拌溶液中，添加K2 CO3 (173 mg，1.25 mmol)及5-異丙氧基吡啶-2-醇(192 mg，1.25 mmol)。在80℃下加熱反應混合物16 h。將反應混合物冷卻至室溫，經由矽藻土墊過濾，用過量EtOH洗滌，且減壓濃縮濾液，得到粗產物。粗殘餘物經由24 g矽膠管柱急驟層析且用30% EtOAc/石油醚溶離來純化，得到(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯。LCMS：m/z，353.2 (M+1)；rt 1.71 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物85 (±)-反式-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇·HCl
Figure 02_image789
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.28 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M，於二㗁烷中) (0.35 mL，1.42 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇·HCl。LCMS：m/z，253.2  (M+1)；rt 0.76 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例267及268 (±)-反式-8-(3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image791
向(±)-反式-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-3-醇·HCl (80 mg，0.277 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.25 mL，1.38 mmol)，隨後添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(111 mg，0.33 mmol)。在85℃下加熱反應混合物3 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化該粗產物[方法：管柱：DAD-1-Cellulose-5 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH，流速：1.5 mL/min，注射體積：2.0 μL，運行時間：30 min]。
實例267：LCMS：m/z = 436.3 (M+H)；rt 1.57 min；(LCMS方法：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.22-8.15 (m, 1H), 8.12-8.03 (m, 1H), 7.82 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 3.1, 8.9 Hz, 1H), 6.77 (d,J = 8.8 Hz, 1H),6.15 (s, 1H), 5.41-5.19 (m, 1H), 4.93 (dt,J = 4.5, 8.4 Hz, 1H), 4.52 (td,J = 6.0, 12.2 Hz, 1H), 4.12-3.99 (m, 1H), 3.90-3.76 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.23 (brs, 1H), 3.11 (dd,J = 8.9, 12.6 Hz, 1H), 2.31-2.22 (m, 1H), 1.70-1.54 (m, 1H), 1.24 (d,J = 6.1 Hz, 6H)。
實例268：LCMS：m/z = 436.2 (M+H)；rt 1.57 min；(LCMS方法：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.22-8.14 (m, 1H), 8.12-8.02 (m, 1H), 7.82 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 3.1, 8.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 9.0 Hz, 1H),6.15 (s, 1H), 5.38-5.23 (m, 1H), 4.98-4.86 (m, 1H), 4.52 (td, J = 6.0, 12.2 Hz, 1H), 4.12-4.00 (m, 1H), 3.90-3.74 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.23 (br s, 1H),3.11 (dd, J = 8.9, 12.6 Hz, 1H), 2.32-2.21 (m, 1H), 1.70-1.56 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.1 Hz, 6H)。
中間物86 (±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image793
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.28 mmol)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%，於礦物油中) (45.4 mg，1.14 mmol)。在5分鐘之後，添加碘甲烷(0.035 mL，0.57 mmol)於THF (1 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物3 h。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物，且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯。LCMS：m/z，367.3 (M+1)；rt 2.08 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物87 (±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl
Figure 02_image795
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.273 mmol)於DCM (15 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M，於二㗁烷中) (0.35 mL，1.364 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl。LCMS：m/z ，267.2  (M+1)；rt 0.86 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例269及270 (±)-反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image797
向(±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-甲氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl (80 mg，0.26 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.23 mL，1.32 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min，且接著添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(106 mg，0.31 mmol)。在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化該粗產物(方法：管柱：DAD-1：Cellulose-2 (250 × 4.6 mm)，5微米，DAD-2：Cellulose-4 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH，流速：2.0 mL/min，注射體積：6.0 μL，運行時間：20 min)。
實例269：LCMS：m/z，450.2 (M+H)；rt 1.82；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.22-8.16 (m, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.83 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 3.1, 8.9 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H),6.16 (s, 1H), 5.12-5.04 (m, 1H), 4.53 (quin, J = 6.0 Hz, 1H), 4.21-4.11 (m, 1H), 3.58 (br d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.41 (s, 3H), 3.33-3.27 (m, 3H), 2.31 -2.22 (m, 1H), 1.72 (br dd, J = 4.3, 8.4 Hz, 1H), 1.25 (d, J = 6.1 Hz, 6H)。
實例270：LCMS 450.3 (M+H)；rt 1.82 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.23-8.15 (m, 1H), 8.14-8.06 (m, 1H), 7.83 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 3.1, 8.9 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H),6.16 (s, 1H), 5.14-5.01 (m, 1H), 4.52 (td, J = 6.1, 12.0 Hz, 1H), 4.24-4.08 (m, 1H), 3.70-3.51 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 3.26 (br dd, J = 5.4, 13.2 Hz, 3H), 2.31-2.18 (m, 1H), 1.76-1.65 (m, 1H), 1.25 (d, J = 5.9 Hz, 6H)。
實例271及272 (+/-)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮
Figure 02_image799
向(±)-反式-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-3-醇·HCl (600 mg，2.02 mmol)於乙腈(15 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (1.8 mL，10.08 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接下來，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(556 mg，2.42 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，該粗產物藉由24 g矽膠管柱急驟層析且用3% MeOH/DCM溶離來純化，得到(±)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮。藉由製備型HPLC純化產物[方法：管柱：DAD-1：Cellulose-2 (250 × 4.6 mm)，5微米，DAD-2：Cellulose-4 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH，流速：2.0 mL/min，注射體積：6.0 μL，運行時間：20 min。
實例271：LCMS：m/z，455.1 (M+H)；rt 1.82 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 7.95 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.29 (d, J = 7.8 Hz, 1H),5.53-5.44 (m, 1H), 4.85-4.72 (m, 1H), 4.57-4.48 (m, 1H), 3.87-3.76 (m, 1H), 3.76-3.65 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.27-2.17 (m, 1H), 1.68-1.56 (m, 1H)，
實例272：LCMS：m/z,: 455.1 (M+H)；rt 1.82 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 7.95 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.57-7.43 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.32-7.23 (m, 1H), 5.54 -5.45 (m, 1H), 4.85-4.70 (m, 1H), 4.57-4.48 (m, 1H), 3.85-3.76 (m, 1H), 3.74-3.69 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.27-2.18 (m, 1H), 1.68-1.57 (m, 1H)。
實例273及274 (+/-)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image801
向(±)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(100 mg，0.22 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加鋅(22 mg，0.33 mmol)、氰化鋅(77 mg，0.66 mmol)及TEA (0.12 mL，0.88 mmol)。將反應混合物脫氣5 min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)𠮿
Figure 109145532-0000-3
]鈀(II) (33.2 mg，0.04 mmol)。在90℃下加熱反應混合物隔夜。使反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土墊過濾。濾液用水、鹽水洗滌，且有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物[方法：管柱：DAD-1：Cellulose-2 (250 × 4.6mm)，5微米，DAD-2：Cellulose-4 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH；流速：2.0 mL/min，注射體積：6.0 μL，運作時間：20 min]。
實例273：LCMS：m/z，446.2 (M+H)；rt 1.65 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.26 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 8.01 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 7.58-7.49 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.29 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 5.61- 5.43 (m, 1H), 4.94-4.66 (m, 1H), 4.61-4.10 (m, 2H), 3.97-3.81 (m, 1H), 3.78-3.66 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 1H), 1.79-1.48 (m, 1H)。
實例274：LCMS：m/z,: 446.2 (M+H)；rt 1.66 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.26 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58-7.49 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.29 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.61- 5.43 (m, 1H), 4.94-4.66 (m, 1H), 4.61-4.10 (m, 2H), 3.97-3.81 (m, 1H), 3.78-3.66 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 1H), 1.79-1.48 (m, 1H)。
實例275 6-氯-4-((3R,4R)-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮
Figure 02_image803
在0℃下，向(±)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(125 mg，0.275 mmol)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%，於礦物油中) (44.0 mg，1.10 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加碘甲烷(0.04 mL，0.55 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且在室溫下攪拌3 h。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由急驟層析，該粗產物使用矽膠12 g管柱且用5% MeOH/CHCl3 溶離來純化，得到(±)-反式-6-氯-4-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮。LCMS：m/z，469.2  (M+1)；rt 1.84 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM NH4 OAc:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例276及277 (±)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image805
向(±)-反式-6-氯-4-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(70 mg，0.15 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加鋅(15 mg，0.22 mmol)、氰化鋅(53 mg，0.45 mmol)及TEA (0.08 mL，0.60 mmol)。反應混合物用氬氣脫氣5 min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)𠮿
Figure 109145532-0000-3
]鈀(II) (23 mg，0.03 mmol)。在90℃下加熱反應混合物隔夜。使反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土墊過濾。濾液用水、鹽水洗滌，且有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物(方法：管柱：DAD-1-Cellulose-5 (250 × 4.6 mm)，5微米，移動相：10 mM乙酸銨/MeOH；流速：1.5 mL/min，注射體積：2.0 μL，運行時間：20 min)。
實例276：LCMS：m/z，460.2 (M+1)；rt 2.71 min。管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.28 (d,J =9.0 Hz, 1H), 8.04 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.61-7.46 (m, 1H), 7.40-7.29 (m, 3H), 5.24-4.87 (m, 1H), 4.78-4.50 (m, 1H), 4.26 (br s, 1H), 3.60-3.50 (m, 3H), 3.47 (s, 3H), 3.39-3.35 (m, 3H), 2.32-2.12 (m, 1H), 1.73-1.60 (m, 1H)。
實例277：LCMS：m/z，460.2  (M+1)；rt 2.71 min。管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.27 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.03 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.58-7.45 (m, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.31 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 5.24-4.87 (m, 1H), 4.78-4.69 (m, 1H), 4.26 (br s, 3H), 3.64-3.51 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 3.39-3.35 (m, 3H), 2.32-2.06 (m, 1H), 1.74 (br d, J=13.4 Hz, 1H)。
根據實例276及277中所揭示之通用程序，由適當烷基鹵化物製備表20中之實例。 表20
實例 編號 結構 立體 化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
278
Figure 02_image777
Figure 02_image807
 H D 2.91 474.2
279 H D 2.91 474.2
表中所採用之LCMS方法：
方法1：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm × 50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.75 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
方法2：開始B% = 0，最終B% = 100，梯度時間= 4 min，流速= 0.8 ml/min，波長= 220 nm，溶劑對= 水-甲醇-0.1% TFA，溶劑A = 90%水-10% 甲醇- 0.1% TFA，溶劑B = 10%水-90%甲醇-0.1% TFA，管柱2 = (2) PHENOMENEX-LUNA 2.0 × 50 mm 3 μm，
方法3：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm × 50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
方法4：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1% 三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0-100% B歷時3分鐘，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法5：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
中間物88及89 N-(2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺(88)及N-(2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺(89)
Figure 02_image809
向(+/-) (2,5-反式)-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.440 mmol)於1,2-二氯乙烷(5 mL)中之溶液中，添加5-甲氧基吡啶-2-胺(54.6 mg，0.440 mmol)及乙酸(0.025 mL，0.440 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物15 min，其後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(112 mg，0.528 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物7天。用飽和NaHCO3 溶液淬滅反應物。混合物用二氯甲烷萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到呈黏稠黃色油狀之粗產物。使用製備型HPLC，使用CH3 CN-H2 O-乙酸銨系統作為溶離劑，來純化粗產物。合併均質級分且減壓凍乾，得到兩種非對映異構材料之混合物。將混合物溶解於二氯甲烷(2 mL)中且用TFA (1 mL)處理。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓濃縮混合物，得到呈黏稠黃色油狀之兩種標題化合物之雙TFA鹽(25 mg，0.054 mmol，12.26%產率)。未測定中間物88及89之絕對立體化學。結構表示與哌啶基環連接之取代基之相對取向。
實例280及281 8-((2S,5R)-4-((5-甲氧基吡啶-2-基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(rel)
Figure 02_image811
向N-((2,5-反式)-2,5-二甲基哌啶-4-基)-5-甲氧基吡啶-2-胺·雙三氟乙酸鹽(25 mg，0.054 mmol)及休尼格氏鹼(0.039 mL，0.225 mmol)於乙腈(1.5 mL)中之溶液中，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(14.98 mg，0.045 mmol)。在60℃下加熱反應混合物。接著，使用製備型LC/MS，用以下條件，來分級分離粗反應混合物：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在19% B保持0分鐘，19-59% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。
實例280 (第1溶離產物)：產物產量為1.4 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：419.05；滯留時間：1.7 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：419.07；滯留時間：1.13 min。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.98-7.94 (m, 1H), 7.91-7.87 (m, 1H), 7.50 (d,J =2.9 Hz, 1H), 6.91 (dd,J =8.8, 2.9 Hz, 1H), 6.25 (d,J =9.2 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.86 (d,J =8.4 Hz, 1H), 3.56 (dd,J =12.5, 4.0 Hz, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.35 (s, 1H), 3.34-3.32 (m, 1H), 3.39-3.25 (m, 1H), 2.33 (br dd,J =12.1, 10.3 Hz, 1H), 1.95 (dt,J =12.8, 3.7 Hz, 1H), 1.73 (br dd,J =6.2, 3.7 Hz, 1H), 1.56 (s, 1H), 1.23-1.11 (m, 1H), 0.86 (d,J =5.9 Hz, 3H), 0.67 (d,J =6.6 Hz, 3H)。一些峰由於所用的水抑制技術而遮蔽。
實例281 (第2溶離產物)：產物產量為3.2 mg，且其根據LCMS分析之估計純度為98%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：99.1 %；質量觀測值：419.06；滯留時間：1.74 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：98.3 %；質量觀測值：419.05；滯留時間：1.16 min。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.17 (d,J =8.8 Hz, 1H), 8.07 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.73 (d,J =3.3 Hz, 1H), 7.13 (dd,J =8.8, 2.9 Hz, 1H), 6.53 (d,J =9.2 Hz, 1H), 6.10 (d,J =7.7 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.81 (br s, 1H), 4.27 (ddt,J =12.4, 8.2, 4.2 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 2.55 (s, 6H), 2.39 (br d,J =1.5 Hz, 1H), 2.18-2.07 (m, 1H), 1.54 (br d,J =12.8 Hz, 1H), 1.18 (d,J =6.6 Hz, 4H), 0.96 (d,J =7.0 Hz, 3H)。一些峰由於所用的水抑制技術而遮蔽。
中間物90 3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image813
向3-甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(1 g，4.69 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中，添加甲胺(0.88 mL，9.38 mmol，於MeOH中之33重量%溶液)。將反應混合物加熱至65℃持續2 h。將反應混合物冷卻至室溫。添加硼氫化鈉(0.36 g，9.38 mmol)，且攪拌反應混合物12 h。用飽和NH4 Cl淬滅反應物。將反應混合物溶解於EtOAc (100 mL)中，用飽和NaHCO3 (20 mL)、水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.95 g，89%產率)。LCMS：m/z = 229.3 (M+H)；滯留時間0.64及0.92 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物91 4-(4-氟-N-甲基苯甲醯胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image815
向4-氟苯甲酸(295 mg，2.1 mmol)及3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(400 mg，1.75 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中，添加HATU (799 mg，2.1 mmol)，隨後添加DIPEA (0.92 mL，5.26 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物12 h。用飽和NH4 Cl淬滅反應物。將反應混合物溶解於EtOAc (100 mL)中，用飽和NaHCO3 (20 mL)、水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物，藉由矽膠層析，使用0-10% MeOH/CHCl3 作為溶離劑，來純化該粗產物。收集純級分且濃縮，得到呈黃色液體狀之4-(4-氟-N-甲基苯甲醯胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，81%產率)。LCMS：m/z = 295.1 [(M-t Bu) +H)]；滯留時間1.54 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物93 4-氟-N -甲基-N -(3-甲基哌啶-4-基)苯甲醯胺·TFA
Figure 02_image817
向4-(4-氟-N-甲基苯甲醯胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.57 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中，添加TFA (0.44 mL，5.71 mmol)。攪拌反應混合物2 h。減壓濃縮反應混合物且與DCM (2 × 5 mL)一起共蒸餾，得到4-氟-N -甲基-N -(3-甲基哌啶-4-基)苯甲醯胺·TFA (200 mg，96%產率)。LCMS：m/z = 251.2 (M+H)；滯留時間0.56及0.58 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
實例284-287N -(1-(6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-4-氟-N -甲基苯甲醯胺
Figure 02_image819
向4-氟-N -甲基-N -(3-甲基哌啶-4-基)苯甲醯胺·TFA (200 mg，0.549 mmol)於乙腈(3 mL)中之溶液中，添加DIPEA (0.29 mL，1.65 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(220 mg，0.66 mmol)。將反應混合物加熱至85℃且攪拌16 h。將反應混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，且藉由矽膠層析，使用0-10% MeOH/CHCl3 作為溶離劑來純化。收集純級分且濃縮，得到黃色液體，該黃色液體藉由LC分離(LC管柱：YMC EXRS (250 × 19 ID) 5微米；移動相A：10 mM乙酸銨/水，pH 4.5；移動相B：乙腈，流速：18 mL/min；梯度：45至69.8% B歷時10 min，接著100% B歷時0.01 min且在100% B保持3 min，得到非對映異構混合物1及非對映異構混合物2。使用SFC分離非對映異構混合物1及2，得到對映異構體。
藉由對掌性SFC分離非對映異構混合物1 (管柱/尺寸：ChiralCel OJ-H (250 × 21) mm，5 μm；CO2 %：90%；共溶劑%：10%之甲醇；總流量：100.0 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：220 nm)，得到異構體1：實例284，滯留時間= 6.9 min；及異構體2：實例285，滯留時間= 10.5 min。
藉由對掌性SFC分離非對映異構混合物2 (管柱/尺寸：Chiralpak AS-H (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：80%；共溶劑%：20%之甲醇；總流量：100.0 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：220 nm)，得到異構體3：實例286，滯留時間= 9 min；及異構體4：實例287，滯留時間= 11 min。
實例284：(3.7 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 434.3 (M+H)；滯留時間= 1.51 min。LCMS方法：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.23-8.12 (m, 1H), 8.12-7.98 (m, 1H), 7.55-7.38 (m, 2H), 7.34-7.19 (m, 2H), 6.21-5.99 (m, 1H), 4.39-3.96 (m, 3H), 3.53 (d, J = 9.3 Hz, 3H), 3.26-2.98 (m, 1H), 2.92-2.76 (m, 3H), 2.73-2.67 (m, 1H), 2.41-2.31 (m, 1H), 2.20-1.90 (m, 2H), 1.88-1.70 (m, 1H), 0.97-0.65 (m, 3H)。
實例285：(4.2 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 434.2 (M+H)；滯留時間= 1.51 min。LCMS方法：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.22-8.13 (m, 1H), 8.12-7.99 (m, 1H), 7.55-7.38 (m, 2H), 7.35-7.17 (m, 2H), 6.20-6.02 (m, 1H), 4.40-4.11 (m, 2H), 4.08-3.95 (m, 1H), 3.53 (d, J = 9.0 Hz, 3H), 3.27-3.04 (m, 1H), 2.90-2.74 (m, 3H), 2.74-2.61 (m, 1H), 2.40-2.29 (m, 1H), 2.19-1.91 (m, 2H), 1.87-1.68 (m, 1H), 0.96-0.63 (m, 3H)。
實例286：(1.9 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 434.2 (M+H)；滯留時間= 1.58 min。LCMS方法：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例287：(2.0 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 434.2 (M+H)；滯留時間= 1.55 min。LCMS方法：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.21-8.14 (m, 1H), 8.11-8.04 (m, 1H), 7.53-7.43 (m, 2H), 7.33-7.20 (m, 2H), 6.12 (s, 1H), 4.47-4.26 (m, 1H), 4.16-4.07 (m, 1H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.93-2.90 (m, 5H), 2.39-2.26 (m, 2H), 1.88-1.77 (m, 1H), 1.58-1.56 (m, 1H), 1.24-1.21 (m, 4H)。
根據實例284至287中所揭示之通用程序，由適當哌啶、苯甲酸、㖠啶衍生物製備表21中之實例。 表21
實例 編號 結構 立體化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
282
Figure 02_image821
 同對掌性 C 2.32 448.2
283
Figure 02_image823
 同對掌性 C 2.40 448.2
283A
Figure 02_image825
 同對掌性 C 2.38 448.2
283B
Figure 02_image827
 同對掌性 C 2.30 448.2
288
Figure 02_image829
 同對掌性 C 2.25 459.2
289
Figure 02_image831
 同對掌性 C 2.28 459.2
290
Figure 02_image833
 同對掌性 C 2.61 509.2
291
Figure 02_image835
 同對掌性 C 2.61 509.2
292
Figure 02_image837
 同對掌性 C 2.64 509.3
293
Figure 02_image839
 同對掌性 C 2.64 509.3
中間物95 (R)-4-苯甲基-3-丁醯基㗁唑啶-2-酮
Figure 02_image841
在氮氣下，在-78℃下，向(R)-4-苯甲基㗁唑啶-2-酮(10 g，56.4 mmol)於THF (120 mL)中之攪拌溶液中，逐滴添加正丁基鋰(33.9 mL，67.7 mmol)。在添加鹼期間出現橙色。添加後，維持攪拌30 min，其後逐滴添加丁醯氯(8.76 mL，85 mmol)。在此過程期間，顏色變為淡黃色。使反應混合物升溫至室溫，且繼續攪拌隔夜。接著，使用飽和NH4 Cl溶液淬滅反應物。使用EtOAc (3 ×)萃取所得混合物。經合併之萃取物用鹽水洗滌，經硫酸鈉脫水，過濾且蒸發，得到15 g極淡的黃色油。使用矽膠急驟層析，使用20%乙酸乙酯/己烷作為溶離劑，來分級分離粗產物。合併均質級分且真空蒸發，得到呈無色油狀之產物(12.9 g，92%)。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.43-7.12 (m, 5H), 4.75-4.64 (m, 1H), 4.26-4.12 (m, 2H), 3.32 (dd, J=13.4, 3.3 Hz, 1H), 3.05-2.84 (m, 2H), 2.79 (dd, J=13.4, 9.6 Hz, 1H), 1.76 (ddd, J=14.7, 7.4, 2.6 Hz, 2H), 1.04 (t, J=7.5 Hz, 3H)。
中間物96 (R)-4-苯甲基-3-((2R,3S)-2-乙基-3-羥基-4-(2-甲基-1,3-二氧雜環戊-2-基)丁醯基)㗁唑啶-2-酮
Figure 02_image843
向在氬氣下在-78℃下之(R)-4-苯甲基-3-丁醯基㗁唑啶-2-酮(4.95 g，20 mmol)於DCM (40 mL)中之攪拌溶液中，緩慢添加二丁基(((三氟甲基)磺醯基)氧基)硼烷(26.0 mL，26.0 mmol)，隨後添加三乙胺(3.90 mL，28.0 mmol)，且繼續攪拌30 min。使反應混合物升溫至0℃持續1 h，且接著使其再冷卻至-78℃。逐滴添加含2-(2-甲基-1,3-二氧雜環戊-2-基)乙醛(2.86 g，22.00 mmol)之DCM (10 mL)。在30 min之後，使反應混合物升溫至0℃且攪拌3 h。接下來，添加pH 7緩衝溶液(100 mL)、甲醇(30 mL)及H2 O2 (30 mL，30%水溶液)，且在室溫下攪拌混合物1.5 h。分離各層且用DCM萃取水層，且經合併之有機層經MgSO4 乾燥，過濾，且真空蒸發溶劑，得到10.2 g無色黏稠油。藉由管柱層析，使用30-50% EtOAc:己烷混合物作為溶離劑，來純化此粗產物。合併均質級分且真空蒸發，得到呈無色黏稠油狀之純化產物(5.97 g，75%)。LCMS (方法A*)：RT = 1.321 min。(M+Na)+ = 399.95。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.40-7.22 (m, 5H), 4.74 (ddt, J=10.3, 7.2, 3.1 Hz, 1H), 4.23-4.13 (m, 3H), 4.05-3.92 (m, 4H), 3.62 (d, J=1.5 Hz, 1H), 3.37 (dd, J=13.2, 3.3 Hz, 1H), 2.72 (dd, J=13.2, 10.1 Hz, 1H), 1.99-1.86 (m, 3H), 1.75 (ddd, J=13.7, 7.5, 4.5 Hz, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (t, J=7.5 Hz, 3H)。
中間物97 (2R,3S)-1-((R)-4-苯甲基-2-側氧基㗁唑啶-3-基)-2-乙基-3-羥基己烷-1,5-二酮
Figure 02_image845
向(R)-4-苯甲基-3-((2R,3S)-2-乙基-3-羥基-4-(2-甲基-1,3-二氧雜環戊-2-基)丁醯基)㗁唑啶-2-酮(276 mg，0.731 mmol)於丙酮(14 mL)中之溶液中，添加5重量%於二氧化矽上之氯化鐵(III) (60 mg，0.018 mmol)。在氮氣下在25℃下攪拌反應混合物30 min，且接著過濾，添加至水中，且用乙酸乙酯萃取產物。經合併之萃取物經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈無色油狀之產物(220 mg，90%)。LCMS：(方法A*) RT = 1.242 min，95%。(M+Na)+ = 355.9。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.39-7.24 (m, 5H), 4.75 (ddt, J=10.3, 7.3, 3.1 Hz, 1H), 4.41 (ddt, J=9.5, 5.5, 2.8 Hz, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 4.10 (dt, J=9.5, 4.8 Hz, 1H), 3.37 (dd, J=13.2, 3.3 Hz, 1H), 3.23 (d, J=3.0 Hz, 1H), 2.83-2.61 (m, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.99-1.86 (m, 1H), 1.77-1.66 (m, 1H), 1.00 (t, J=7.5 Hz, 3H)。
中間物98A及98B (R)-4-苯甲基-3-((2R,3S,5R)-5-(苯甲基胺基)-2-乙基-3-羥基己醯基)㗁唑啶-2-酮及(R)-4-苯甲基-3-((2R,3S,5S)-5-(苯甲基胺基)-2-乙基-3-羥基己醯基)㗁唑啶-2-酮
Figure 02_image847
在室溫下，在氮氣下，向(2R,3S)-1-((R)-4-苯甲基-2-側氧基㗁唑啶-3-基)-2-乙基-3-羥基己烷-1,5-二酮(4 g，12.00 mmol)於DCE (40.0 ml)中之溶液中，添加苯甲胺(1.350 ml，12.36 mmol)，且攪拌混合物30 min。接著，使其冷卻至0℃，且歷時約10 min逐份添加三乙醯氧基硼氫化鈉(2.54 g，12.00 mmol)。接著，使混合物升溫至室溫，且繼續攪拌隔夜。藉由添加飽和NaHCO3 水溶液淬滅反應物，且在室溫下攪拌所得混合物15分鐘。接著，用EtOAc (3 ×)萃取此混合物，且經合併之萃取物依次用飽和NaHCO3 水溶液及鹽水洗滌，且接著經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色油狀之粗產物。
中間物99A及99B (3R,4S,6R)-1-苯甲基-3-乙基-4-羥基-6-甲基哌啶-2-酮及(3R,4S,6S)-1-苯甲基-3-乙基-4-羥基-6-甲基哌啶-2-酮
Figure 02_image849
將(R)-4-苯甲基-3-((2R,3S,5R)-5-(苯甲基胺基)-2-乙基-3-羥基己醯基)㗁唑啶-2-酮與(R)-4-苯甲基-3-((2R,3S,5S)-5-(苯甲基胺基)-2-乙基-3-羥基己醯基)㗁唑啶-2-酮之混合物(1 g)溶解於MeOH (18 mL)中，且在微波反應器中在90℃下照射3 h。接著，減壓蒸發所得溶液，得到油，使用製備型逆相層析，在以下條件下來分級分離該油：管柱：Biotage Sfar C18 D 120 g。溶離劑：A：95%水+ 0.05%TFA，5% ACN + 0.05%TFA；B：5%水+ 0.05%TFA，95% ACN + 0.05% TFA。平衡：0% B 3 CV，梯度：0-80% B 10 CV，80-100% 5 CV，100-100% 3 CV。合併含有哌啶酮產物之級分且真空濃縮以移除ACN。藉由添加飽和NaHCO3 溶液鹼化所得混合物，且使用DCM (3 ×)萃取產物。經合併之萃取物經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到無色油。藉由急驟層析，使用20-25%丙酮/己烷作為溶離劑，進一步分級分離此材料。合併均質級分且減壓蒸發，得到以下產物。較高Rf級分：LCMS (方法A)；RT = 1.380 min，m/z = 247.90 (M+H)+ 。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.43-7.04 (m, 6H), 5.35 (d,J =15.3 Hz, 1H), 4.14 (d,J =15.3 Hz, 1H), 3.96-3.81 (m, 1H), 3.39 (dt,J =9.9, 5.8 Hz, 1H), 2.39 (dt,J =9.1, 4.6 Hz, 1H), 2.19 (dt,J =13.1, 4.4 Hz, 1H), 2.08 (td,J =6.9, 4.7 Hz, 1H), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.69-1.62 (m, 1H), 1.26 (d,J =6.4 Hz, 3H), 1.01 (t,J =7.5 Hz, 3H)。較低Rf級分：LCMS (方法A)；RT = 1.326 min，m/z = 247.95 (M+H)+ 。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.42-7.13 (m, 5H), 5.25 (d,J =15.3 Hz, 1H), 4.22-4.02 (m, 2H), 3.63-3.52 (m, 1H), 3.70-3.47 (m, 1H), 2.50-2.28 (m, 1H), 2.00-1.84 (m, 4H), 1.22 (d,J =6.6 Hz, 3H), 1.02 (t,J =7.4 Hz, 3H)。
中間物100 (2S,4S,5S)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇
Figure 02_image851
向(3R,4S,6S)-1-苯甲基-3-乙基-4-羥基-6-甲基哌啶-2-酮(425 mg，1.718 mmol)於THF (6 ml)中之溶液中，添加BH3 .THF (6.87 ml，6.87 mmol)，且在密封小瓶中在66℃下加熱所得溶液3.5 h。將反應混合物冷卻至室溫。藉由依序添加水(5 mL)，隨後添加1 M NaOH (9 mL)，淬滅反應物。所得混合物用EtOAc (3 × 5 mL)萃取，且經合併之有機層經MgSO4 乾燥，過濾且接著真空濃縮，得到273 mg粗產物。將此材料溶解於MeOH中且在回流下加熱45 min。LCMS (方法A)；RT = 0.958 min，m/z = 233.95 (M+H)+ 。
中間物101 (2S,4S,5S)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image853
向(2S,4S,5S)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇(400 mg，1.714 mmol)及二碳酸二-三級丁酯(0.438 mL，1.886 mmol)於乙酸乙酯(20 mL)中之溶液中，添加Pd-C (100 mg，0.094 mmol)。所得混合物依序經受降壓且用氮氣(3×)沖洗。對混合物再一次抽真空，且接著用氫氣沖洗。在室溫下劇烈攪拌所得懸浮液隔夜。接著，反應混合物在氮氣保護下過濾，且減壓濃縮濾液(水浴溫度50℃)，得到呈無色油狀之粗產物。將此產物吸附至矽膠上且使用急驟層析採用20-40% EtOAc/己烷作為溶離劑分級分離。合併均質級分且減壓蒸發，得到93 mg無色油。LCMS (方法A)：RT = 1.668 min，m/z = 166.00，(M-CO2 -t-Bu+Na)+ 。
中間物102 (2S,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image855
向(2S,4S,5S)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(146 mg，0.600 mmol)於THF (6 mL)中之溶液中，添加氫化鈉(27.8 mg，0.660 mmol)，且在室溫下攪拌所得懸浮液10 min。接著添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(93 mg，0.600 mmol)，且在63℃下攪拌混合物隔夜。使用製備型逆相HPLC分級分離粗產物。合併均質級分且真空蒸發，得到21 mg呈無色油狀之產物。LCMS (方法A)：RT = 1.370 min，m/z = 279.20，(M-CO2 -t-Bu+H)+ 。
中間物103 2-(((2S,4S,5S)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶
Figure 02_image857
向(2S,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，0.159 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中，添加三氟乙酸(5 mL，64.9 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物30 min。接著，將溶液真空濃縮。
中間物104 (2R,4S,5S)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇
Figure 02_image859
向(3R,4S,6R)-1-苯甲基-3-乙基-4-羥基-6-甲基哌啶-2-酮(293 mg，1.185 mmol)於THF (5.9 mL)中之溶液中，添加BH3 .THF (4738 µL，4.74 mmol)。在密封小瓶中在66℃下加熱所得溶液3.5 h。將反應混合物冷卻至室溫。藉由依序添加水(1 mL)及1 M NaOH (3 mL)淬滅反應物。混合物用EtOAc (3 × 5 mL)萃取，且經合併之有機層經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到80 mg粗產物。將此粗產物溶解於MeOH中，且在回流下加熱所得溶液45 min。接著，對其進行減壓蒸發，且將殘餘物分配於水與乙酸乙酯之間。收集有機層，且水層用1 N NaOH溶液鹼化且用乙酸乙酯萃取(2 ×)。經合併之萃取物經MgSO4 乾燥，過濾且真空蒸發，得到71 mg呈無色油狀之產物。LCMS (方法A)：RT = 0.995 min，m/e = 234.00 (M+H)+ 。1 H NMR (500 MHz, 氯仿-d) δ 7.74 (d, J=7.0 Hz, 4H), 7.49-7.22 (m, 11H), 3.99 (d, J=13.6 Hz, 1H), 3.38 (br dd, J=9.7, 5.5 Hz, 1H), 3.15 (br d, J=13.6 Hz, 1H), 2.86 (dd, J=11.0, 2.7 Hz, 1H), 2.17-2.00 (m, 1H), 1.91-1.77 (m, 1H), 1.69-1.46 (m, 4H), 1.11-1.03 (m, 11H), 1.02-0.86 (m, 4H), 0.73 (t, J=7.5 Hz, 3H)。
中間物105 (2R,4S,5S)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image861
向(2R,4S,5S)-1-苯甲基-5-乙基-2-甲基哌啶-4-醇(247 mg，1.058 mmol)及二碳酸二-三級丁酯(0.270 mL，1.164 mmol)於乙酸乙酯(10 mL)中之溶液中，添加Pd-C (113 mg，1.058 mmol)。所得混合物依序經受降壓且用氮氣(3×)沖洗。對混合物再一次抽真空，且接著用氫氣沖洗，且在室溫下劇烈攪拌所得懸浮液隔夜。接著，反應混合物在氮氣保護下過濾，且減壓濃縮濾液(水浴溫度50℃)，得到呈無色油狀之粗產物。
中間物106 (2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image863
向(2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(52 mg，0.137 mmol，12.29%產率)於THF (10 mL)中之溶液中，添加氫化鈉(51.8 mg，1.230 mmol)。在室溫下攪拌混合物10 min。添加2-氟-5-異丙氧基吡啶(173 mg，1.118 mmol)，且在63℃下加熱所得混合物24 h。使用製備型逆相HPLC分級分離粗產物。合併均質級分且真空蒸發，得到52 mg呈無色油狀之產物。LCMS (方法A)：RT = 1.364 min，m/z = 279.15，(M-CO2 -t-Bu+H)+ 。
中間物107 2-(((2R,4S,5S)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶
Figure 02_image865
向(2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，0.198 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中，添加三氟乙酸(5 mL，64.9 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物30 min。接著，將溶液真空濃縮。
中間物108 (2R,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-((4-硝基苯甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image867
向(2R,4R,5R)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(550 mg，2.260 mmol)於THF (15 mL)中之溶液中，添加三苯基膦(830 mg，3.16 mmol)及4-硝基苯甲酸(529 mg，3.16 mmol)。接著，在0℃下逐份添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(729 mg，3.16 mmol)，其後使反應混合物升溫至室溫且接著攪拌48 h。接著，真空濃縮所得混合物，且藉由矽膠急驟層析，使用15%乙酸乙酯/己烷作為溶離劑來純化殘餘物。收集均質級分且減壓濃縮，得到呈白色固體狀之產物(450 mg，1.147 mmol，50.7%產率)。LC/MS (方法A) 2.423 min，不存在分子態離子。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 8.38-8.29 (m, 2H), 8.27-8.16 (m, 2H), 5.54-5.32 (m, 1H), 4.64-4.32 (m, 1H), 4.16-3.84 (m, 1H), 3.13-2.85 (m, 1H), 2.10-1.89 (m, 2H), 1.78-1.61 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.44-1.30 (m, 2H), 1.23 (d,J =7.1 Hz, 3H), 0.97 (t,J =7.4 Hz, 3H)。
中間物109 (2R,4S,5R)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image869
向(2R,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-((4-硝基苯甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(445 mg，1.134 mmol)於MeOH (20 mL)中之溶液中，添加氫氧化鈉(227 mg，5.67 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。接著，真空濃縮反應混合物，且將殘餘物分配於乙酸乙酯與水之間。接著，收集有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且減壓蒸發至乾燥，得到呈白色固體狀之粗產物。藉由使用矽膠急驟層析，使用5%-40%乙酸乙酯/己烷作為溶離劑，來純化此粗產物。收集均質級分且真空濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物(225 mg，0.925 mmol，82%產率)。LC/MS (方法B) 1.719 min，不存在分子態離子。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 4.44-4.26 (m, 1H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.89-3.74 (m, 1H), 2.97-2.80 (m, 1H), 1.89-1.72 (m, 2H), 1.51-1.25 (m, 16H), 0.99 (t,J =7.4 Hz, 3H)。
中間物110 8-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image871
向(2S,4R,5R)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.205 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中，添加TFA (1 mL)，且在室溫下攪拌混合物2 h。接著，將其真空濃縮，得到黏稠油，將該黏稠油溶解於乙腈(3 mL)中。向此溶液中添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(65.2 mg，0.196 mmol)及DIPEA (0.137 mL，0.783 mmol)，且在氮氣下在65℃下加熱所得混合物隔夜。接著，真空濃縮反應混合物，且使用製備型HPLC，使用乙腈:水:乙酸銨溶液溶離劑系統，來分級分離殘餘物。收集均質級分，合併且接著減壓濃縮，得到呈淺黃色固體狀之產物(35.8 mg，0.110 mmol，56.1%產率)。LC/MS (方法A) 1.289 min，327.05 (MH+ )。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.81 (d,J =8.7 Hz, 1H), 7.72 (d,J =8.8 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H),  4.13-3.98 (m, 1H), 3.98-3.87 (m, 1H), 3.78-3.70 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.99-2.73 (m, 1H), 2.37-2.19 (m, 1H), 1.86-1.63 (m, 3H), 1.41-1.20 (m, 5H), 0.97 (t,J =7.4 Hz, 3H)。
使用上文方法，採用(R)-4-苯甲基-3-丁醯基㗁唑啶-2-酮作為起始材料，製備以下中間物。 表22
中間物編號 結構 LCMS方法 LCMS RT (min) M+H
I-111
Figure 02_image873
 A 1.767 247.9
I-112
Figure 02_image875
 A 1.763 377.9
I-113
Figure 02_image877
 A 1.592 333.9
I-114
Figure 02_image879
 A 1.546， 1.573 425.1， 425.1
I-115
Figure 02_image881
 A 1.428 248.2
I-116
Figure 02_image883
 A 1.415 248.0
I-117
Figure 02_image885
 A 1.661 不存在分子態離子
I-118
Figure 02_image887
 A 1.335 279.0
I-119
Figure 02_image889
 A 1.682 不存在分子態離子。
I-120
Figure 02_image891
 A 1.303 279.1
I-121
Figure 02_image893
 A 1.522 不存在分子態離子
I-122
Figure 02_image895
 B 1.413 279.1
I-123
Figure 02_image897
 B 1.318 327.1
I-124
Figure 02_image899
 B 1.600 327.0
I-125
Figure 02_image901
 A 1.602 364.0
I-126
Figure 02_image903
 A 1.457 319.9
I-127
Figure 02_image905
 A 1.388， 1.422 411.0， 411.0
I-128
Figure 02_image907
 A 1.285 234.1
I-129
Figure 02_image909
 A 1.308 233.9
I-130
Figure 02_image911
 A 0.966 220.0
I-131
Figure 02_image913
 A 1.492 不存在分子態離子。
I-132
Figure 02_image915
 A 1.075 313.0
I-133
Figure 02_image917
 A 0.890 220.0
I-134
Figure 02_image919
 A 1.541 不存在分子態離子。
I-135
Figure 02_image921
 A 1.305 313.0
I-136
Figure 02_image923
 A 2.355 不存在分子態離子。
I-137
Figure 02_image925
 A 1.502 不存在分子態離子。
I-138
Figure 02_image927
 A 2.378 不存在分子態離子。
I-139
Figure 02_image929
 A 1.430 不存在分子態離子。
使用上文方法，使用(R)-4-苯甲基-3-丁醯基㗁唑啶-2-酮及丙醯氯作為起始材料，製備以下中間物。 表23
中間物編號 結構 LCMS方法 LCMS RT (min) M+H
I-140
Figure 02_image931
 - - -
I-141
Figure 02_image933
 B 1.889 302  (缺失水)
I-142
Figure 02_image935
 B 1.546，1.597 411.10，411.03
I-143
Figure 02_image937
 B 1.256 233.9
I-144
Figure 02_image939
 B 1.232 233.9
I-145
Figure 02_image941
 B 1.128 219.9
I-146
Figure 02_image943
 B 1.107 219.9
中間物147 8-((2R,4S,5S)-4-羥基-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image945
在圓底燒瓶中，將(2R,4S,5S)-1-苯甲基-2,5-二甲基哌啶-4-醇(400 mg，1.824 mmol)及鈀/碳(194 mg，1.824 mmol)在氮氣下合併，且將其溶解於MeOH (6 mL)中。將反應混合物置於1個大氣壓之氫氣下，且在室溫下攪拌隔夜。LC/MS分析顯示無殘餘起始材料。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，經由矽藻土過濾且在旋轉式蒸發器處濃縮。在反應小瓶中，將粗還原產物與休尼格氏鹼(0.956 mL，5.47 mmol)及含三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(729 mg，2.189 mmol)之乙腈(10 mL)合併，且在80℃下加熱隔夜。移除溶劑，且將粗物質再溶解於4 mL DMF中且在具有用TFA緩衝之乙腈及水之redi-sep管柱上進行層析。合併均質級分且蒸發，得到標題化合物(300 mg，0.960 mmol，52.7%產率)。LCMS：(方法A*) RT = 1.455 min，94%。(M+2H2 O+H)+ = 348.95。NMR:1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 7.96-7.78 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 4.34-4.21 (m, 1H), 3.95-3.84 (m, 1H), 3.82-3.68 (m, 3H), 3.53 (dd,J =13.0, 6.0 Hz, 1H), 2.39-2.27 (m, 1H), 2.17-1.96 (m, 1H), 1.84-1.69 (m, 1H), 1.41 (d,J =6.5 Hz, 3H), 1.15 (d,J =7.0 Hz, 3H)。
中間物148 8-((2S,4S,5S)-4-羥基-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image947
在圓底燒瓶中，將(2R,4S,5S)-1-苯甲基-2,5-二甲基哌啶-4-醇(670 mg，3.05 mmol)及鈀/碳(194 mg，1.824 mmol)在氮氣下合併，且將其溶解於MeOH (6 mL)中。將反應混合物置於1個大氣壓之氫氣下，且在室溫下攪拌隔夜。LC/MS分析顯示無殘餘起始材料。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，經由矽藻土過濾且在旋轉式蒸發器處濃縮。在反應小瓶中，將粗還原產物與休尼格氏鹼(1.601 mL，9.16 mmol)及含三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(1222 mg，3.67 mmol)之乙腈(15 mL)合併，且在80℃下加熱隔夜。T移除溶劑，且將粗物質再溶解於4 mL DMF中且在具有用TFA緩衝之乙腈及水之redi-sep管柱上進行層析。合併均質級分且蒸發，得到標題化合物。LCMS：(方法A*) RT = 1.719 min，87%。(M+H)+ = 312.95。NMR:1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.21-8.11 (m, 1H), 8.09-8.00 (m, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.78 (br s, 1H), 4.61 (d,J =5.9 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.48-3.38 (m, 2H), 2.92 (t,J =12.5 Hz, 1H), 1.79 (ddd,J =12.7, 4.6, 2.0 Hz, 1H), 1.72-1.52 (m, 2H), 1.18 (d,J =7.0 Hz, 3H), 1.01 (d,J =6.5 Hz, 3H)。
實例294 8-((2S,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image949
在65℃下加熱休尼格氏鹼(0.033 mL，0.191 mmol)、2-(((2S,4S,5S)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶2,2,2-三氟乙酸鹽(25 mg，0.064 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(21.23 mg，0.064 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液隔夜。將粗反應混合物冷卻至室溫，過濾且接著使用製備型LC/MS使用以下條件分級分離：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；梯度：在30% B保持0分鐘，30-70% B歷時25分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.4 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：462.09；滯留時間：2.4 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：462.05；滯留時間：2.01 min。在氘化DMSO中獲取質子NMR。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.16 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.10-8.05 (m, 1H), 7.82 (d,J =3.0 Hz, 1H), 7.36 (dd,J =8.9, 2.8 Hz, 1H), 6.73 (d,J =8.9 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.28-5.06 (m, 1H), 4.71-4.57 (m, 1H), 4.55-4.46 (m, 1H), 4.04-3.86 (m, 1H), 3.11-2.90 (m, 2H), 2.10 (br d,J =11.8 Hz, 1H), 1.98-1.87 (m, 1H), 1.82-1.57 (m, 2H), 1.29 (d,J =7.0 Hz, 3H), 1.25 (br d,J =6.0 Hz, 6H), 0.97 (t,J =7.5 Hz, 3H)。
實例295 8-((2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image951
在65℃下加熱休尼格氏鹼(0.069 mL，0.398 mmol)、2-(((2R,4S,5S)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶2,2,2-三氟乙酸鹽(52 mg，0.133 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(44.2 mg，0.133 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液隔夜。將粗反應混合物冷卻至室溫，過濾且接著使用製備型LC/MS用以下條件分級分離：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；梯度：在30% B保持0分鐘，30-70% B歷時25分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.4 mg，且其藉由LCMS分析所估計之純度為100%。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：462.09；滯留時間：2.4 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：462.05；滯留時間：2.01 min。在氘化DMSO中獲取質子NMR。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.18-8.12 (m, 1H), 8.11-8.05 (m, 1H), 7.83 (br d,J =1.2 Hz, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 6.81-6.70 (m, 1H), 6.26-6.19 (m, 1H), 4.98 (br d,J =3.6 Hz, 1H), 4.60-4.47 (m, 1H), 4.15 (br d,J =4.1 Hz, 1H), 3.91-3.77 (m, 1H), 3.10-2.88 (m, 2H), 1.91 (br d,J =2.0 Hz, 1H), 1.68 (dt,J =13.5, 6.8 Hz, 1H), 1.61-1.46 (m, 1H), 1.40-1.30 (m, 1H), 1.27-1.23 (m, 6H), 1.18-1.13 (m, 3H), 0.92-0.83 (m, 3H)。
使用上文方法及中間物，可以類似方式製備以下實例。
實例編號 結構 LCMS方法 LCMS RT (min) M+H
296
Figure 02_image953
 C 2.39 462.1
297
Figure 02_image955
 C 2.39 462.1
298
Figure 02_image957
 C 2.44 462.2
299
Figure 02_image959
 C 2.364 462.1
實例300 6-氯-4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮
Figure 02_image961
向2-(((2S,4R,5R)-5-乙基-2-甲基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶2 TFA (37 mg，0.073 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液中，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(24.01 mg，0.073 mmol)及DIPEA (0.051 mL，0.292 mmol)。在70℃下加熱反應混合物1小時。接著，減壓濃縮反應混合物，且將殘餘物溶解於乙腈與DMF之混合物中。過濾該溶液，且接著使用製備型逆相HPLC在以下條件下分級分離：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在42% B保持0分鐘，42-82% B歷時20分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥，得到6-氯-4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(27.6 mg，80%產率)。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：472.02；滯留時間：2.11 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：472.07；滯留時間：2.34 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.99-7.89 (m, 1H), 7.86-7.75 (m, 2H), 7.47-7.28 (m, 1H), 6.93 (d,J =5.3 Hz, 1H), 5.49-5.29 (m, 1H), 5.07-4.89 (m, 1H), 4.66-4.34 (m, 1H), 3.79-3.59 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.13-2.86 (m, 1H), 2.24-2.05 (m, 1H), 1.98-1.69 (m, 2H), 1.50-1.33 (m, 5H), 1.26 (d,J =5.8 Hz, 6H), 0.97 (t,J =7.1 Hz, 3H)。
實例301 4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image963
在微波管中，添加6-氯-4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(25 mg，0.053 mmol)、鋅(3.46 mg，0.053 mmol)、氰化鋅(7.46 mg，0.064 mmol)及1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(4.33 mg，5.30 µmol)。反應容器依序經受抽真空及氮氣沖洗(3×)，之後置放在氮氣氛圍下。接著，添加NMP (1.5 mL)，且將反應小瓶在80℃下在微波條件下照射3小時。接著，反應混合物用CH3 CN稀釋至2 mL之體積，過濾，且使用製備型逆相HPLC在以下條件下分級分離濾液：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在33% B保持0分鐘，33-73% B歷時20分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS及UV信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥，得到4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(14.2 mg，58.0%產率)。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：463.11；滯留時間：2.23 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：463.12；滯留時間：1.87 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.08-7.92 (m, 1H), 7.80-7.66 (m, 1H), 7.65-7.51 (m, 1H), 7.25-7.08 (m, 1H), 6.56 (d,J =8.9 Hz, 1H), 5.29-4.99 (m, 1H), 4.81-4.58 (m, 1H), 4.39-4.19 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.55-3.39 (m, 1H), 2.89-2.64 (m, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.75-1.63 (m, 1H), 1.63-1.51 (m, 1H), 1.29-1.10 (m, 5H), 1.02 (d,J =6.0 Hz, 6H), 0.81-0.68 (m, 3H)。
使用上文方法及中間物，以類似方式製備以下實例。
實例編號 結構 LCMS方法 LCMS RT (min) M+H
302
Figure 02_image965
 A 2.229 472.1
303
Figure 02_image967
 C 2.23 463.1
304
Figure 02_image969
 B 3.193 472.1
305
Figure 02_image971
 C 2.27 463.1
306
Figure 02_image973
 B 2.305 472.1
307
Figure 02_image975
 C 2.192 463.1
實例308 8-((2S,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image977
向3-(三氟甲基)苯酚(23.84 mg，0.147 mmol)於THF (4 mL)中之溶液中，添加於固體載體上之三苯基膦(71.9 mg，0.216 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min，其後添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-三級丁酯(36.1 mg，0.157 mmol)及8-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-羥基-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(32 mg，0.098 mmol)。在氮氣下在室溫下攪拌反應混合物隔夜。接著過濾該反應混合物且真空濃縮，且將殘餘物溶解於DMF/CH3 CN中，且過濾所得溶液且接著使用製備型逆相HPLC在以下條件下分級分離：管柱：XBridge C18，200 mm × 19 mm，5 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：在43% B保持0分鐘，43-83% B歷時20分鐘，接著在100% B保持0分鐘；流速：20 mL/min；管柱溫度：25℃。藉由MS信號觸發級分收集。合併含有產物之級分且經由離心蒸發乾燥，得到8-((2S,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(0.8 mg，1.700 µmol，1.734%產率)。使用分析型LC/MS測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射1結果：純度：100 %；質量觀測值：471.09；滯留時間：2.52 min。注射2條件：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。注射2結果：純度：100 %；質量觀測值：471.06；滯留時間：2.28 min。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.23-8.03 (m, 2H), 7.64-7.46 (m, 1H), 7.43-7.23 (m, 3H), 6.19 (s, 1H), 5.13-4.88 (m, 1H), 4.67-4.51 (m, 1H), 3.61-3.52 (m, 4H), 3.12-2.89 (m, 1H), 2.27-2.14 (m, 1H), 1.91-1.75 (m, 1H), 1.59-1.31 (m, 3H), 1.19 (d,J =6.6 Hz, 3H), 0.80 (t,J =7.2 Hz, 3H)。
使用上文光延條件，用適當中間物，製備以下實例。
實例編號 結構 LCMS方法 LCMS RT (min) M+H
309
Figure 02_image979
 C 2.41 471.1
310
Figure 02_image981
 C 2.53 471.1
311
Figure 02_image983
 C 2.44 457.0
312
Figure 02_image985
 A* 1.49 407.0
313
Figure 02_image987
 A* 1.60 402.9
314
Figure 02_image989
 A* 1.42 408.9
315
Figure 02_image991
 A* 1.62 423.0
方法A：管柱：Waters Acquity BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.05% TFA；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.05% TFA；梯度：0-100% B歷時3分鐘，接著在100% B保持0.50分鐘；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法A*：管柱：Waters Acquity BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 0.05% TFA；移動相B：95:5乙腈:水+ 0.05% TFA；梯度：0-100% B歷時1.8分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法B：管柱：Waters Acquity BEH C18，2.1 × 50 mm，1.7 μm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；梯度：0%-100% B歷時3分鐘，接著在100% B下保持0.50分鐘；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
方法C：管柱：Waters XBridge C18，2.1 mm×50 mm，1.7 µm粒子；移動相A：5:95乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；移動相B：95:5乙腈:水+ 10 mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B至100% B歷時3 min，接著在100% B保持0.50 min；流速：1 mL/min；偵測：MS及UV (220 nm)。
中間物149 (+/-) 三級丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image993
在室溫下，向(+/-)三級丁基-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸酯(600 mg，2.64 mmol)、4-(三氟甲基)苯胺(425 mg，2.64 mmol)於THF (10 mL)中之混合物中，以逐滴方式添加TiCl4 (1.32 mL，1.32 mmol，1 M溶液於THF中)。攪拌反應混合物另外30 min，且添加三乙醯氧基硼氫化鈉(727 mg，3.43 mmol)且攪拌12 h。用飽和NH4 Cl溶液淬滅反應物。反應混合物用EtOAc (100 mL)萃取，用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物。經由矽膠層析(0-100% EtOAc/石油醚)純化粗產物，得到(+/-) 三級丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-甲酸酯(800 mg，81%產率)。LCMS：m/z = 317.3 [(M-t Bu) +H)]；滯留時間2.22 min。LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (3 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：2.5 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：2.5 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 60-98% B歷時1.1分鐘，接著在98% B保持0.6分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm。
中間物150 (+/-) 2,5-二甲基-N -(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺
Figure 02_image995
向(+/-)-三級丁基-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-甲酸酯(800 mg，2.15 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中，添加TFA (1.66 mL，21.48 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，減壓濃縮，得到(+/-)-2,5-二甲基-N-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺·TFA (800 mg，96%產率)。LCMS：m/z = 273.2 (M +H)；滯留時間1.16及1.21 min。LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (3 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：2.5 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：2.5 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 60-98% B歷時1.1分鐘，接著在98% B保持0.6分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例316A (+/-) 8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image997
向2,5-二甲基-N -(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-胺·TFA (800 mg，2.07 mmol)於乙腈(6 mL)中之溶液中，添加DIPEA (1.09 mL，6.21 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(828 mg，2.49 mmol)。在85℃下攪拌反應混合物16 h，減壓濃縮，得到粗產物。藉由矽膠層析(0-20% MeOH/CHCl3 )純化粗產物。收集純級分且濃縮，得到呈黃色液體狀之8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(700 mg，74%產率)。LCMS：m/z = 456.2 (M +H)；滯留時間= 1.91 min。LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (3 × 50 mm) 1.7 µm，移動相A：2.5 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：2.5 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 90-98% B歷時1.1分鐘，接著在98% B保持0.6分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例316-319 8-(2,5)-二甲基-4-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(同對掌性)
Figure 02_image999
在室溫下，向8-(2,5)-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(150 mg，0.33 mmol)、甲醛(9.89 mg，0.33 mmol)於THF (2 mL)中之混合物中，添加TiCl4 (0.17 mL，0.17 mmol，1 M溶液於THF中)。在相同溫度下繼續攪拌30 min。接著，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(91 mg，0.428 mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物隔夜。用飽和NH4 Cl溶液淬滅反應物。將反應混合物溶解於EtOAc (100 mL)中，用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到呈淺黃色液體狀之粗產物。藉由矽膠層析，藉由使用0-10% MeOH/CHCl3 作為溶離劑，來純化粗物質。收集純級分且濃縮，得到異構體混合物，經由製備型SFC純化異構體混合物(對掌性SFC方法：管柱/尺寸：Whelk (R,R) (250 × 30) mm，5 μm，CO2 %：70%；共溶劑：15%之MeOH，總流量：140.0 g/min，溫度：40℃，壓力：100巴；UV：220 nm)。
第一溶離異構體實例294：滯留時間= 5.33 min；第二溶離異構體實例295：滯留時間= 6.58 min；第三溶離異構體實例296：滯留時間= 9.48 min；第四溶離異構體實例297：滯留時間= 11.44 min。
實例294：(1.5 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 470.2 (M+H)；滯留時間= 3.43 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例295：(1.32 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 470.2 (M+H)；滯留時間= 3.42 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例296：(2.0 mg，1%產率)；LCMS：m/z = 470.2 (M+H)；滯留時間= 3.44 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例297：(2.1 mg，1.3%產率)；LCMS：m/z = 470.2 (M+H)；滯留時間= 3.44 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
根據實例294至297中所揭示之通用程序，由3-(三氟甲基)苯胺製備表24中之實例。 表24
實例編號 結構 立體化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
320   
Figure 02_image1001
 非對映異構混合物 C 3.53 470.2
321   
Figure 02_image1003
 非對映異構混合物 C 3.55 470.2
中間物152 3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1005
向3-甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，2.344 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中，添加甲胺(0.44 mL，33%於MeOH中，4.69 mmol)，且將反應混合物加熱至85℃持續2 h。將反應混合物冷卻至室溫。添加硼氫化鈉(177 mg，4.69 mmol)，且攪拌反應混合物12 h。用飽和NH4 Cl淬滅反應物。將反應混合物溶解於EtOAc (100 mL)中，用飽和NaHCO3 (20 mL)、水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(330 mg，62%產率)。LCMS：m/z = 229.2 (M+H)；滯留時間1.07 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物153 4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1007
向3-甲基-4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(330 mg，1.45 mmol)於乙腈(5 mL)中之溶液中，添加1-(氯甲基)-4-氟苯(313 mg，2.17 mmol)、DIPEA (0.505 mL，2.89 mmol)及碘化鈉(217 mg，1.45 mmol)，且在85℃加熱持續4 h。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc (100 mL)稀釋且用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物，藉由矽膠層析，藉由使用0-10% MeOH/CHCl3 作為溶離劑來純化該粗產物。收集純級分且濃縮，得到呈黃色液體狀之4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(420 mg，86%產率)。LCMS：m/z = 337.2 (M+H)；滯留時間2.12 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
中間物154N -(4-氟苯甲基)-N ,3-二甲基哌啶-4-胺·TFA
Figure 02_image1009
向4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(400 mg，1.19 mmol)於CH2 Cl2 (4 mL)中之溶液中，添加TFA (0.916 mL，11.89 mmol)，且攪拌2 h。減壓濃縮反應混合物，得到N -(4-氟苯甲基)-N ,3-二甲基哌啶-4-胺·TFA (400 mg，96%產率)。LCMS：m/z = 237.2 (M+H)；滯留時間1.15 min。LC-MS方法：管柱-Aquity UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 μm；移動相A：緩衝液:乙腈(95:5)；移動相B：緩衝液:乙腈(5:95)，緩衝液：10 mM乙酸銨；梯度：20-100% B歷時2.0分鐘，接著在100% B保持0.2分鐘，流速0.7 mL/min。
實例322-325 8-(4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈
Figure 02_image1011
向N-(4-氟苯甲基)-N,3-二甲基哌啶-4-胺·TFA (200 mg，0.57 mmol)於乙腈(3 mL)中之溶液中，添加DIPEA (0.3 mL，1.71 mmol)及8-氯-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(209 mg，0.856 mmol)。在85℃下加熱反應混合物16 h。將反應混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，且藉由矽膠層析，使用0-10% MeOH/CHCl3 作為溶離劑來純化。收集純級分且濃縮，得到黃色液體，藉由製備型HPLC分離該黃色液體(管柱：Sunfire C-18 (150 mm × 21.2 mm ID，5 μm)；移動相A：10 mM乙酸銨/水，pH 4.5；移動相B：乙腈，流速：20 mL/min；梯度值：25至45% B歷時20 min)，得到非對映異構混合物1及非對映異構混合物2。
藉由對掌性SFC分離非對映異構混合物1 (管柱/尺寸：Chiralpak IG (250 × 4.6) mm，5 μm；共溶劑%：40%；共溶劑：0.2% DEA/IPA +乙腈(1+1)；總流量：4 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃)，得到異構體1：實例322，滯留時間= 2.5 min；及異構體2：實例323，滯留時間= 3.49 min。
藉由對掌性SFC分離非對映異構混合物2 (管柱/尺寸：Cellulose 4 (250 × 4.6) mm，5 μm；共溶劑%：50%；共溶劑：0.2%之含4 M甲醇氨之甲醇；總流量：4 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃)，得到異構體3：實例324，滯留時間= 2.09 min；及異構體4：實例325，滯留時間= 2.82 min。
實例322：(9 mg，3.5%產率)；LCMS：m/z = 445.2 (M+H)；滯留時間= 1.33 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例323：(10 mg，4 % 產率)；LCMS：m/z = 445.4 (M+H)；滯留時間= 1.24 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例324：(11 mg，4%產率)；LCMS：m/z = 445.4 (M+H)；滯留時間= 1.24 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例325：(6 mg，2.5%產率)；LCMS：m/z = 445.3 (M+H)；滯留時間= 1.32 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
根據實例322至325中所揭示之通用程序，由三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯製備表25中之實例。 表25
實例 編號 結構 立體化學 LCMS方法 LCMS RT M+H
326
Figure 02_image1013
 同對掌性 A 2.17 420.3
327
Figure 02_image1015
 同對掌性 A 2.17 420.3
328
Figure 02_image1017
 同對掌性 A 2.31 420.3
329
Figure 02_image1019
 同對掌性 C 2.30 455.2
330
Figure 02_image1021
 同對掌性 C 2.29 455.2
331
Figure 02_image1023
 同對掌性 C 1.31 434.4
332
Figure 02_image1025
 同對掌性 C 1.21 434.4
333
Figure 02_image1027
 同對掌性 C 1.20 434.4
334
Figure 02_image1029
 同對掌性 C 1.23 434.4
中間物155 (±)-(2S,5S)-4-羥基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1031
在氮氣下，歷時3 min，向在-30℃下之(2S,5S)-2,5-二甲基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，2.20 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之攪拌溶液中，逐滴添加含溴化甲基鎂之乙醚(3.7 mL，11.00 mmol)。使反應混合物緩慢升溫至室溫且攪拌16 h。用飽和氯化銨水溶液(100 mL)淬滅反應物。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)稀釋反應混合物。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗產物，藉由矽膠層析(使用15%-20%乙酸乙酯/石油醚)純化該粗產物，得到(2S,5S)-4-羥基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(420 mg，78%產率)。1 H NMR (300MHz, CDCl3 ) δ　4.42-4.23 (m, 1H), 3.81-3.59 (m, 1H), 2.92-2.77 (m, 1H), 1.78-1.66 (m, 1H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.49-1.44 (m, 10H), 1.28 (d,J =7.2 Hz, 3H), 1.21-1.17 (m, 3H), 0.95-0.87 (m, 3H) ppm。
中間物156 (±) (2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1033
向三級丁基-4-羥基-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸酯(200 mg，0.82 mmol)於DMSO (8 mL)中之攪拌溶液中，添加在0℃下之NaH (60% w/w，99 mg，2.47 mmol)以及2-氟-5-異丙氧基吡啶(191 mg，1.23 mmol)。在65℃下加熱反應混合物20 h。用水(50 mL)淬滅反應物。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗產物，藉由矽膠管柱(10%-20%乙酸乙酯/石油醚)純化該粗產物，得到(2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(110 mg，0.17 mmol，20.86%產率)。LCMS：m/z = 379.2 (M+H)；滯留時間4.18 min；LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
中間物157 (±) 5-異丙氧基-2-(((2S,5S)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶鹽酸鹽
Figure 02_image1035
向(±) (2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.317 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加含HCl之二㗁烷(0.05 mL，1.59 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h。減壓濃縮反應混合物，得到(±) 5-異丙氧基-2-(((2S,5S)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶(80 mg，91%產率)。LCMS：m/z = 279.2 (M+H)；滯留時間1.932 min。LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm。
實例335及336 8-((2S ,5S )-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1037
向6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(100 mg，0.30 mmol)於乙腈(8 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.16 mL，0.90 mmol)及5-異丙氧基-2-(((2S,5S)-2,4,5-三甲基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl (113 mg，0.36 mmol)。在85℃下加熱反應混合物16 h。用水(20 mL)淬滅反應物。用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取反應混合物。經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗產物，藉由製備型SFC [SFC條件：管柱/尺寸：ChiralCel OJ-H (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：85%；共溶劑%：15% MEOH；總流量：100.0 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：227 nm]來純化該粗產物，得到實例362 (14 mg，10%產率)及實例363 (13 mg，10%產率)。
實例362：LCMS：m/z = 462.3 (M+H)；滯留時間2.416 min；[LCMS方法：管柱：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm]。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.18-8.10 (m, 1H), 8.09-7.99 (m, 1H), 7.79 (d,J = 2.9 Hz, 1H), 7.33-7.36 (m, 1H), 6.72 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.73-4.63 (m, 1H), 4.49-4.54 (m, 1H),3.52 (s, 3H), 3.39-3.44 (m, 2H), 3.07-3.11 (m, 1H), 2.01-1.90 (m, 1H), 1.80-1.85 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.23-1.25 (m, 6H), 1.09 (d,J = 6.8 Hz, 3H), 1.03 (d,J = 7.1 Hz, 3H)。
實例363：LCMS：m/z = 462.3 (M+H)；滯留時間2.417 min [LCMS方法：管柱：XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm，2.5 μm；移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)；梯度= 0-100% B歷時3分鐘；溫度：50℃；流速：1.1 mL/min；偵測：UV，220 nm]。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19-8.08 (m, 1H), 8.08-7.96 (m, 1H), 7.84-7.74 (m, 1H), 7.32-7.35 (m, 1H), 6.79-6.65 (m, 1H), 6.10 -5.97 (m, 1H), 4.76-4.61 (m, 1H), 4.48-4.54 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.42-3.36 (m, 2H), 3.08-3.11 (m, 1H), 2.01-1.90 (m, 1H), 1.87-1.77 (m, 1H), 1.51 (d,J = 2.4 Hz, 3H), 1.27-1.21 (m, 6H), 1.08-1.10 (m, 3H), 1.02-1.08 (m, 3H)。
根據實例335及336中所揭示之通用程序，由適當起始材料製備表26中之實例。 表26
實例編號 結構 LCMS方法 LCMS RT M+H 立體化學
337
Figure 02_image1039
 A 2.44 471.3 同對掌性
338
Figure 02_image1041
 A 2.44 471.3 同對掌性
339
Figure 02_image1043
 A 2.17 472.2 同對掌性
340
Figure 02_image1045
 A 2.18 472.4 同對掌性
中間物158 (±)-3-乙氧基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1047
在0℃下，向(±)-3-羥基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(8 g，30.6 mmol)於THF (80 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%，於礦物油中) (1.71 g，42.9 mmol，60% w/w)。在5分鐘之後，添加碘乙烷(4.95 mL，61.2 mmol)之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，該粗產物經由急驟層析，使用120 g矽膠管柱且用30%-50% EtOAc/石油醚溶離來進行純化，得到(±)-3-乙氧基-4,4-二甲氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(5 g，56%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 4.02-4.21 (m, 1 H), 3.59-3.90 (m, 2 H), 3.11 (s, 3 H), 3.09 (s, 3 H), 2.54-2.93 (m, 3 H), 1.63-1.73 (m, 1 H), 1.46-1.61 (m, 1 H), 1.39 (s, 9 H), 1.02-1.18 (m, 3 H)。
中間物159 (±)-3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1049
向3,4,4-三乙氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(9 g，28.4 mmol)於二氯甲烷(70 mL)中之攪拌溶液中，逐滴添加TFA (10.9 mL，142 mmol)，且在50℃下加熱反應混合物16 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，將粗產物溶解於DCM (50 mL)中。在室溫下依序添加TEA (19.8 mL，142 mmol)、BOC2 O (9.9 mL，42.5 mmol)，且攪拌隔夜。用DCM (2 × 100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，該粗產物經由急驟層析，使用120 g矽膠管柱且用10-15% EtOAc/石油醚溶離來進行純化，得到(±)-3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(5 g，72%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 3.96-4.42 (m, 2 H), 3.64-3.89 (m, 2 H), 3.19-3.59 (m, 3 H), 2.47-2.65 (m, 2 H), 1.50 (s, 9 H), 1.25 (t, J=7.0 Hz, 3 H)。
中間物160 3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1051
在氮氣下，在0℃下，向(±)-3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(3 g，12.3 mmol)於MeOH (20 mL)中之溶液中，逐份添加硼氫化鈉(0.93 g，24.66 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌2 h。將反應混合物冷卻至0℃。逐滴用NH4 Cl飽和水溶液淬滅反應物。用EtOAc (3 × 100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(2.5 g，83%產率)。1 H NMR 300 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 4.50-4.95 (m, 1H), 3.38-3.74 (m, 5 H), 2.97-3.29 (m, 3 H), 1.42-1.80 (m, 2 H), 1.38 (s, 9 H), 1.04-1.16 (m, 3 H)。
中間物161 3-乙氧基哌啶-4-醇·HCl鹽
Figure 02_image1053
在0℃下，向3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯(3 g，12.23 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液中，添加含4M HCl之二㗁烷(3.72 mL，122 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，其後將其減壓濃縮，得到3-乙氧基哌啶-4-醇·HCl鹽(1.5 g，84%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 9.16-9.37 (m, 1 H), 8.47-8.70 (m, 1 H), 3.81-3.96 (m, 1 H), 3.42-3.76 (m, 5 H), 2.93-3.11 (m, 3 H), 1.53-1.86 (m, 2 H), 1.14 (t, J=7.0 Hz, 3 H)
中間物161及162 (±)順式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈及(±)反式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1055
在室溫下，向3-乙氧基哌啶-4-醇·HCl鹽(1.4 g，9.64 mmol)於乙腈(15 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (5.1 mL，28.9 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(3.21 g，9.64 mmol)。在80℃下加熱反應混合物12 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析(80-100% EtOAc/石油醚)純化粗產物，得到8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈之非對映異構混合物。LCMS：m/z ，329.2  (M+1)；滯留時間：0.79及0.82 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
藉由製備型SFC [管柱：Princeton Diol (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：90%；共溶劑%：10%之甲醇；總流量：150.0 g/min；背壓：100巴；溫度：40℃；UV：226 nm]來進一步純化順式/反式非對映異構體。
中間物136：(±)順式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈；峰-1：(1.7 g，52.1%產率)；LCMS：m/z ，329.2  (M+1)；滯留時間：1.02 min。(LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物137：(±)反式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈：峰-2 (反式-異構體/外消旋體)：(0.7 g，20%產率)；LCMS：m/z ，329.2  (M+1)；滯留時間：1.25 min。(LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例341及342 反式-8-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1057
在室溫下，向(±)-順式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(100 mg，0.30 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌溶液中，依序添加三苯基膦(176 mg，0.67 mmol)、DIAD (0.12 mL，0.61 mmol)及苯酚(57.3 mg，0.61 mmol)。在60℃下加熱反應混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Luxcellulose-4 (250 × 21.5) mm，5 μm；CO2 %：70%；共溶劑%：30%之含4 M甲醇氨之MeOH；總流量：80.0 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃；UV：226 nm)來純化該粗產物。
實例341：(同對掌性)：(6.2 mg，5%產率)；LCMS：m/z，405.2 (M+H)；滯留時間：1.91；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.22-8.14 (m, 1H), 8.12-8.01 (m, 1H), 7.37-7.23 (m, 2H), 7.04 (d, J=7.8 Hz, 2H), 6.94 (t, J=7.3 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.52-4.40 (m, 1H), 4.21-4.11 (m, 1H), 3.79-3.57 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.30-3.15 (m, 2H), 2.27-2.15 (m, 1H), 1.80-1.66 (m, 1H), 1.07 (t, J=7.0 Hz, 3H)。
實例342：(同對掌性) ：(3.2 mg，2.5%產率)；LCMS 405.3 (M+H)；滯留時間：1.91 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.22-8.14 (m, 1H), 8.12-8.03 (m, 1H), 7.36-7.24 (m, 2H), 7.04 (d, J=7.8 Hz, 2H), 6.94 (t, J=7.3 Hz, 1H), 6.15 (s, 1H), 4.47 (td, J=7.7, 4.4 Hz, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.78-3.56 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.29-3.17 (m, 2H), 2.27-2.18 (m, 1H), 1.81-1.68 (m, 1H), 1.07 (t, J=7.0 Hz, 3H)。
根據實例341及342中所揭示之通用程序，由適當起始材料製備表27中之實例。 表27
實例編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
343
Figure 02_image1059
 同對掌性 A 2.19 473.2
344
Figure 02_image1061
 同對掌性 A 2.19 473.2
345
Figure 02_image1063
 同對掌性 A 2.12 473.3
346
Figure 02_image1065
 同對掌性 A 2.12 473.2
347
Figure 02_image1067
 同對掌性 A 2.24 463.3
348
Figure 02_image1069
 同對掌性 A 2.25 463.2
349
Figure 02_image1071
 同對掌性 A 2.34 489.2
350
Figure 02_image1073
 同對掌性 A 2.33 489.2
351
Figure 02_image1075
 同對掌性 A 2.37 489.2
352
Figure 02_image1077
 同對掌性 A 2.37 489.2
353
Figure 02_image1079
 同對掌性 A 1.55 483.2
354
Figure 02_image1081
 同對掌性 A 1.55 483.2
355
Figure 02_image1083
 同對掌性 A 1.59 460.1
356
Figure 02_image1085
 同對掌性 A 1.66 460.1
357
Figure 02_image1087
 同對掌性 A 2.08 457.1
358
Figure 02_image1089
 同對掌性 A 2.07 457.1
359
Figure 02_image1091
 同對掌性 A 2.04 474.3
360
Figure 02_image1093
 同對掌性 A 2.03 474.2
361
Figure 02_image1095
 同對掌性 A 2.07 474.2
362
Figure 02_image1097
 同對掌性 A 2.07 474.2
實例363及364 反式-8-(3-乙氧基-4-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1099
在室溫下，向(±)-反式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(100 mg，0.30 mmol)於DMSO (3 mL)中之攪拌溶液中，添加三級丁醇鉀(68.3 mg，0.61 mmol)及2-氟-6-(三氟甲基)吡啶(75 mg，0.46 mmol)，且攪拌2 h。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 10 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Luxcellulose-4 (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：65%；共溶劑%：35%之含0.2%氨水之MeOH；總流量：70.0 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃；UV：225 nm)來純化該粗產物。
實例363：(11 mg，8%產率)；LCMS：m/z，474.2 (M+H)；滯留時間：2.06；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.16-8.21 (m, 1 H), 8.07-8.13 (m, 1 H), 7.95-8.01 (m, 1 H), 7.48-7.53 (m, 1 H), 7.16-7.21 (m, 1 H), 6.17 (s, 1 H), 5.13-5.20 (m, 1 H), 4.12-4.19 (m, 1 H), 3.54-3.78 (7 H), 2.28-2.37 (m, 1 H), 1.75-1.85 (m, 1 H), 1.07 (t, J=7.0 Hz, 3 H)。
實例364：(10 mg，7%產率)；LCMS 474.2 (M+H)；滯留時間：2.07 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.15-8.21 (m, 1 H), 8.06-8.13 (m, 1 H), 7.96-8.03 (m, 1 H), 7.46-7.53 (m, 1 H), 7.19 (d,J =8.3 Hz, 1 H), 6.16 (s, 1 H), 5.11-5.20 (m, 1 H), 4.11-4.18 (m, 1 H), 3.52-3.79 (m, 7 H), 2.27-2.38 (m, 1 H), 1.73-1.85 (m, 1 H), 1.07 (t,J =7.0 Hz, 3 H)。
根據實例363及364中所揭示之通用程序，由適當起始材料製備表28中之實例。 表28
實例編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
365
Figure 02_image1101
 同對掌性 A 2.07 474.2
366
Figure 02_image1103
 同對掌性 A 2.07 474.2
實例367及368 反式-8-(3-乙氧基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1105
在室溫下，向(±)-反式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(60 mg，0.18 mmol)於DMF (3mL)中之攪拌溶液中，添加Cs2 CO3 (179 mg，0.55 mmol)及2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(43.1 mg，0.24 mmol)。在100℃下加熱反應混合物6 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋且用EtOAc (2 × 10 mL)萃取。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Cellulose-4 (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：50%；共溶劑%：50%之MeOH；總流量：70.0 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃；UV：225 nm)來純化該粗產物。
實例367：(3.4 mg，4%產率)；LCMS：m/z，474.2 (M+H)；滯留時間：2.05 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.59-8.64 (m, 1 H), 8.18-8.24 (m, 1 H), 8.08-8.13 (m, 2 H), 7.07 (d,J =8.6 Hz, 1 H), 6.18 (s, 1 H), 5.26-5.33 (m, 1 H), 4.21-4.29 (m, 1 H), 3.68-3.79 (m, 3 H), 3.54-3.63 (m, 4 H), 3.17-3.24 (m, 2 H), 2.29-2.36 (m, 1 H), 1.72-1.87 (m, 1 H), 1.07 (t,J =7.0 Hz, 3 H)。
實例368：(2 mg，4%產率)；LCMS 474.2 (M+H)；滯留時間：2.14 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.59-8.62 (m, 1 H), 8.19 (d,J =9.0 Hz, 1 H), 8.08-8.13 (m, 2 H), 7.06 (d,J =9.0 Hz, 1 H), 6.18 (s, 1 H), 5.26-5.33 (m, 1 H), 4.22-4.29 (m, 1 H), 3.69-3.78 (m, 3 H), 3.54-3.63 (m, 4 H), 3.16-3.23 (m, 2 H), 2.27-2.32 (m, 1 H), 1.74-1.85 (m, 1 H), 1.07 (t,J =7.0 Hz, 3 H)。
實例369及370 順式-8-(3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1107
在室溫下，向(±)-反式-8-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(70 mg，0.21 mmol)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中，依序添加三苯基膦(123 mg，0.47 mmol)、DIAD (0.08 mL，0.43 mmol)及3-(三氟甲基)苯酚(69 mg，0.43 mmol)。在60℃下加熱反應混合物2 h，接著冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Luxcellulose-4 (250 × 30) mm，5 μ；CO2 %：65%；共溶劑%：35%之MeOH；總流量：130.0 g/min；背壓：100巴；溫度：40℃；UV：226 nm)來純化該粗產物。
實例369：(12 mg，12%產率)；LCMS：m/z，473.3 (M+H)；滯留時間：2.20 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.18 (d,J =8.8 Hz, 1 H), 8.06-8.11 (m, 1 H), 7.48-7.55 (m, 1 H), 7.33-7.40 (m, 2 H), 7.29 (d,J =7.6 Hz, 1 H), 6.16 (s, 1 H), 4.59-4.65 (m, 1 H), 4.24-4.30 (m, 1 H), 3.64-3.77 (m, 3 H), 3.52-3.60 (m, 4 H), 3.12-3.23 (m, 2 H), 2.19-2.27 (m, 1 H), 1.72-1.82 (m, 1 H), 1.04 (t,J =7.0 Hz, 3 H)。
實例370：(10 mg，10%產率)；LCMS 473.2 (M+H)；滯留時間：2.23 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.44 (d,J =8.8 Hz, 1 H), 8.33-8.38 (m, 1 H), 7.75-7.82 (m, 1 H), 7.54-7.68 (m, 3 H), 6.42 (s, 1 H), 4.84-4.93 (m, 1 H), 4.50-4.58 (m, 1 H), 3.91-4.02 (m, 3 H), 3.79-3.86 (m, 4 H), 3.41-3.50 (m, 2 H), 2.46-2.55 (m, 1 H), 1.98-2.09 (m, 1 H), 1.30 (t,J =7.1 Hz, 3 H)。
中間物163 (±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image1109
在-78℃下，向f (±)-3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯(6.3 g，25.9 mmol)於THF (60 mL)中之溶液中，逐滴添加三二級丁基硼氫化鋰之溶液(38.8 mL，38.8 mmol，1 M於THF中)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至0℃。逐滴用NH4 Cl飽和水溶液淬滅反應物。用EtOAc (3 × 100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，該粗產物經由急驟層析，使用120 g矽膠管柱且用10-15% EtOAc/石油醚溶離來進行純化，得到(±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(5.3 g，83%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 3.86 (br s, 1 H), 3.63-3.74 (m, 1 H), 3.20-3.61 (m, 6 H), 2.37 (br s, 1 H), 1.75-1.85 (m, 1 H), 1.57-1.70 (m, 1 H), 1.45 (s, 9 H), 1.20 (br t, J=6.9 Hz, 3 H)。
中間物164 (±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image1111
在室溫下，向(±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.41 mmol)於DMSO (2 mL)中之攪拌溶液中，添加三級丁醇鉀(60 mg，0.82 mmol)及2-氟-5-異丙氧基吡啶(95 mg，0.61 mmol)，且攪拌2 h。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 10 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，經由急驟層析(60-80% EtOAc/石油醚)純化該粗產物，得到(±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(120 mg，80%產率)。LCMS：m/z ，381.3  (M+1)；滯留時間：2.07 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物165 (±)-順式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶·TFA
Figure 02_image1113
使(±)-順式-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基) 哌啶-1-甲酸三級丁酯(0.1 g，0.26 mmol)於DCM (15 mL)中之攪拌溶液冷卻至0℃，且向其中添加TFA (0.1 mL，1.31 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h且減壓濃縮，得到(±)-順式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶(90 mg，90%產率)。LCMS：m/z ，281.3 (M+1)；滯留時間：1.01 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例371及372 順式-8-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1115
在室溫下，向(±)-順式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶.TFA (70 mg，0.25 mmol)於乙腈(3 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.13 mL，0.75 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(83 mg，0.25 mmol)。在80℃下加熱反應混合物12 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC [管柱：Luxcellulose-4 (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：60%；共溶劑%：40%之MeOH；總流量：140.0 g/min；背壓：100巴；溫度：40℃；UV：226 nm]來純化該粗產物。
實例371：(8.7 mg，7%產率)；LCMS：m/z，464.2 (M+H)；滯留時間：1.81 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.14-8.22 (m, 1 H), 8.06-8.12 (m, 1 H), 7.79-7.85 (m, 1 H), 7.35-7.42 (m, 1 H), 6.78 (d,J =8.8 Hz, 1 H), 6.15 (s, 1 H), 5.29-5.37 (m, 1 H), 4.52 (dt,J =12.0, 6.1 Hz, 1 H), 3.98-4.07 (m, 1 H), 3.82-3.87 (m, 1 H), 3.52-3.66 (m, 5 H), 3.34-3.50 (m, 3 H), 2.08-2.17 (m, 1 H), 1.85-1.95 (m, 1 H), 1.24 (d,J =6.1 Hz, 6 H), 0.95 (t,J =6.8 Hz, 3 H)。
實例372：(12 mg，11%產率)；LCMS：m/z，464.2 (M+H)；滯留時間：1.81 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.15-8.21 (m, 1 H), 8.05-8.12 (m, 1 H), 7.78-7.84 (m, 1 H), 7.34-7.43 (m, 1 H), 6.78 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 6.15 (s, 1 H), 5.29-5.39 (m, 1 H), 4.48-4.56 (m, 1 H), 3.98-4.08 (m, 1 H), 3.81-3.89 (m, 1 H), 3.52-3.68 (m, 5 H), 3.35-3.49 (m, 3 H), 2.06-2.19 (m, 1 H), 1.85-1.96 (m, 1 H), 1.24 (d, J=6.1 Hz, 6 H), 0.95 (t, J=7.0 Hz, 3 H)。
中間物166 (±)-反式-三級丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image1117
在室溫下，向(±)-順式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(2.0 g，8.15 mmol)於THF (20 mL)中之攪拌溶液中，依序添加4-硝基苯甲酸(2.04 g，12.2 mmol)及三苯基膦(3.21 g，12.23 mmol)。將反應混合物冷卻至0℃，且逐滴添加DIAD (3.2 mL，16.31 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。減壓移除溶劑，得到粗產物，該粗產物經由急驟層析使用40 g矽膠管柱且用10-15% EtOAc/石油醚溶離來純化，得到(±)-反式-三級丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(2.3 g，71%產率)。LCMS：m/z ，417.2  (M+23)；滯留時間：3.39 min。(LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物167 (±)-反式-3-乙氧基-4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1119
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-乙氧基-4-((4-硝基苯甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(2.3 g，5.83 mmol)於THF (20 mL)/水(5 mL)中之攪拌溶液中，添加NaOH (1.17 g，29.2 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。反應混合物用EtOAc (3 × 70 mL)萃取，用水、鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且減壓濃縮，得到粗產物，粗產物經由急驟層析，使用40 g矽膠管柱且用20-30% EtOAc/石油醚溶離來純化，得到(±)-反式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(1.1 g，77%產率)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 4.16-4.49 (m, 1 H), 3.95-4.13 (m, 1 H), 3.67-3.83 (m, 1 H), 3.50-3.58 (m, 2 H), 3.01-3.14 (m, 1 H), 2.72-2.86 (m, 1 H), 2.39-2.62 (m, 2 H), 1.90-2.01 (m, 1 H), 1.49-1.53 (m, 1 H), 1.47 (s, 9 H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 3 H)。
中間物168 (±)-反式-三級丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image1121
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(100 mg，0.41 mmol)於THF或DMF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%於礦物油中，33 mg，0.82 mmol，60% w/w)。在5分鐘之後，添加2-溴苯并[d]噻唑(131 mg，0.611 mmol)於THF (2 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫且攪拌3 h。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，該粗產物經由急驟層析，使用12 g矽膠管柱且用30%-40% EtOAc/石油醚溶離來進行純化，得到(±)-反式-三級丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯(120 mg，78%產率)。LCMS：m/z ，379.2  (M+1)；滯留時間：3.16 min。(LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物169 (±)-反式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑·HCl
Figure 02_image1123
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯(0.12 g，0.32 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中，添加含4 M HCl之二㗁烷(0.4 mL，1.6 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，其後將其減壓濃縮，得到(±)-反式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑·HCl (100 mg，定量的)。LCMS：m/z ，279.2  (M+1)；滯留時間：1.28 min。(LCMS方法：管柱：Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm；移動相A：10 mM甲酸銨:乙腈(98:2)，移動相B：10 mM甲酸銨:乙腈(2:98)，梯度= 20-100% B歷時4分鐘，接著在100% B保持0.6分鐘；溫度：27℃；流速：1.0 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例373及374 反式-8-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1125
在室溫下，向(±)-反式-2-(3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)苯并[d]噻唑·HCl鹽(100 mg，0.36 mmol)於乙腈(3 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.2 mL，1.1 mmol)及三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(180 mg，0.54 mmol)。在80℃下加熱反應混合物12 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC [管柱/尺寸：Chiralpak IC (250 × 21) mm，5 μm；CO2 %：70%；共溶劑%：30% ACN:IPA (50:50)；總流量：90.0 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：220 nm]來純化該粗產物。
實例373：(2.3 mg，1%產率)；LCMS：m/z，462.2 (M+H)；滯留時間：1.92 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.17-8.22 (m, 1 H), 8.11 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 7.88-7.92 (m, 1 H), 7.70 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.38-7.45 (m, 1 H), 7.26-7.32 (m, 1 H), 6.20 (s, 1 H), 5.24-5.32 (m, 1 H), 4.29-4.36 (m, 1 H), 3.73-3.86 (m, 3 H), 3.59-3.67 (m, 1 H), 3.56 (s, 3 H), 3.21-3.30 (m, 1 H), 3.13-3.20 (m, 1 H), 2.40-2.47 (m, 1 H), 1.86-1.99 (m, 1 H), 1.10 (t,J =7.0 Hz, 3 H)
實例374：(3 mg，2%產率)；LCMS 462.0 (M+H)；滯留時間：1.98 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): 8.17-8.22 (m, 1 H), 8.11 (d,J =9.0 Hz, 1 H), 7.88-7.92 (m, 1 H), 7.70 (d,J =8.0 Hz, 1 H), 7.38-7.45 (m, 1 H), 7.26-7.32 (m, 1 H), 6.20 (s, 1 H), 5.24-5.32 (m, 1 H), 4.29-4.36 (m, 1 H), 3.73-3.86 (m, 3 H), 3.59-3.67 (m, 1 H), 3.56 (s, 3 H), 3.21-3.30 (m, 1 H), 3.13-3.20 (m, 1 H), 2.40-2.47 (m, 1 H), 1.86-1.99 (m, 1 H), 1.10 (t,J =7.0 Hz, 3 H)。
根據實例373及374中所揭示之通用程序，由適當起始材料製備表29中之實例。 表29
實例編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
375
Figure 02_image1127
 同對掌性 A 1.77 465.2
376 同對掌性 A 1.77 465.1
377
Figure 02_image1129
 同對掌性 A 1.98 465.2
378 同對掌性 A 1.98 465.1
379
Figure 02_image1131
 同對掌性 A 1.65 465.2
380 同對掌性 A 1.65 465.2
381
Figure 02_image1133
 同對掌性 A 2.07 487.1
382 同對掌性 A 2.07 487.2
383
Figure 02_image1135
 同對掌性 A 1.71 478.2
384 同對掌性 A 1.72 478.2
根據實例259及260中所揭示之通用程序，由適當烷基鹵化物製備表30中之實例。 表30
實例編號 結構 立體化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
385
Figure 02_image1137
 H A 1.61 516.3
386 H A 1.61 516.3
387
Figure 02_image1139
 H A 2.26 499.3
388 H A 2.26 499.3
389
Figure 02_image1141
 H A 2.02 503.3
390 H A 2.02 503.2
391
Figure 02_image1143
 H A 1.90 558.2
392 H A 1.90 558.2
393
Figure 02_image1145
 H A 2.27 527.2
394 H A 2.27 527.2
中間物170 (±)-反式-(3-乙醯氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1147
在0℃下，向(±)-反式-3-羥基-4-(3(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(650 mg，1.80 mmol)於吡啶(7 mL)中之攪拌溶液中，添加Ac2 O (0.8 mL，9.0 mmol)。使反應混合物達到室溫且攪拌16 h。減壓蒸發溶劑，得到粗產物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(±)-反式-(3-乙醯氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(600 mg，83%產率)。LCMS：m/z，421.2  (M+18)；滯留時間：1.20 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物171 (±)-反式-3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1149
在-40℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-乙醯氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(600 mg，1.49 mmol)於THF (12 mL)中之攪拌溶液中，添加吡啶(0.7 mL，8.92 mmol)，隨後添加泰伯氏試劑(Tebbe's reagent) (8.92 mL，4.46 mmol，0.5 M溶液於甲苯中)。使反應混合物達到室溫且攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至0℃。用1 M NaOH水溶液淬滅反應物。用EtOAc (2 × 100 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，經由急驟層析，使用12 g矽膠管柱且用25%-30% EtOAc/石油醚溶離來純化該粗產物，得到(±)-反式3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，50%產率)。1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 7.36-7.44 (m, 1 H), 7.20-7.26 (m, 2 H), 7.10-7.16 (m, 1 H), 4.43-4.59 (m, 1 H), 4.05-4.12 (m, 1 H), 3.98 (s, 2 H), 3.76-3.92 (m, 1 H), 3.39-3.69 (m, 3 H), 2.07-2.20 (m, 1 H), 1.78-1.93 (m, 1 H), 1.75 (s, 3 H), 1.48 (s, 9 H)。
中間物172 (+/-)-反式-4-羥基-3-甲基哌啶-1-甲酸反式-三級丁酯
Figure 02_image1151
對(±)-反式3-(丙-1-烯-2-基氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(350 mg，0.87 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液進行脫氣，且用氮氣(2 ×)沖洗。接下來，添加10% Pd-C (37.1 mg，0.35 mmol)，且再次對混合物抽真空且用氮氣(2 ×)沖洗，之後抽真空且在1個大氣壓(氣球)下填充氫氣。在氫氣氛圍下劇烈攪拌反應混合物隔夜。經由矽藻土過濾反應混合物，且濾液用甲醇洗滌且將洗滌液與初始濾液合併。真空濃縮所合併溶液，得到(±)-3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸反式-三級丁酯(350 mg，68%產率)。LCMS：m/z，304.2  (M-100+H)；滯留時間：1.52 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物173 (±)-反式-3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶
Figure 02_image1153
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-甲酸酯(300 mg，0.74 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M於二㗁烷中) (1.9 mL，7.44 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到粗產物，該粗產物用DCM (50 mL)稀釋且用NaHCO3 水溶液中和。分離水層且用DCM (2 × 50 mL)再萃取。經合併之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且減壓濃縮，得到(±)-反式-3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶(200 mg，89%產率)。LCMS：m/z，304.2 (M+1)；滯留時間：1.63 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例395及396 反式-8-(3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1155
向(±)-反式-3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶(150 mg，0.5 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.4 mL，2.47 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接下來，添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(330 mg，0.989 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Luxcellulose-4 (250 × 21.5) mm，5 μm；CO2 %：65%；共溶劑%：35%之MeOH；總流量：85.0 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：273 nm)來純化該粗產物。
實例396：LCMS：m/z，487.2 (M+H)；滯留時間：2.46 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.15-8.22 (m, 1 H), 8.10 (d,J =9.0 Hz, 1 H), 7.49-7.55 (m, 1 H), 7.33-7.41 (m, 2 H), 7.26-7.31 (m, 1 H), 6.14 (s, 1 H), 4.53-4.62 (m, 1 H), 4.32-4.40 (m, 1 H), 3.80-3.88 (m, 1 H), 3.66-3.78 (m, 2 H), 3.55 (s, 3 H), 3.11-3.21 (m, 1 H), 2.98 (dd,J =12.3, 9.3 Hz, 1 H), 2.19-2.29 (m, 1 H), 1.71-1.85 (m, 1 H), 1.09 (d,J =6.0 Hz, 3 H), 0.96 (d,J =6.0 Hz, 3 H)。
實例397：LCMS：m/z，487.2 (M+H)；滯留時間：2.46 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.16-8.20 (m, 1 H), 8.08-8.11 (m, 1 H), 7.49-7.55 (m, 1 H), 7.33-7.39 (m, 2 H), 7.28 (d,J =7.6 Hz, 1 H), 6.15 (s, 1 H), 4.53-4.61 (m, 1 H), 4.31-4.39 (m, 1 H), 3.83 (dt,J =12.2, 6.1 Hz, 1 H), 3.65-3.76 (m, 2 H), 3.54 (s, 3 H), 3.11-3.20 (m, 1 H), 2.98 (dd,J =12.3, 9.7 Hz, 1 H), 2.20-2.27 (m, 1 H), 1.72-1.83 (m, 1 H), 1.09 (d,J =6.1 Hz, 3 H), 0.95 (d,J =6.1 Hz, 3 H)。
中間物174 (±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯
Figure 02_image1157
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-甲酸酯(200 mg，0.56 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加NaH (60%於礦物油中) (68.1 mg，1.70 mmol)。在5分鐘之後，添加碘乙烷(0.1 mL，1.13 mmol)於THF (1 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物3 h。將反應混合物冷卻至0℃。用冰冷的水淬滅反應物。用EtOAc (2 × 50 mL)萃取反應混合物。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-甲酸酯。LCMS：m/z，381.3 (M+1)；滯留時間：1.23 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物175 (±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶.HCl
Figure 02_image1159
在0℃下，向(±)-反式-三級丁基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-甲酸酯(200 mg，0.53 mmol)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中，添加HCl (4 M於二㗁烷中) (0.7 mL，2.63 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3 h。減壓蒸發溶劑，得到(±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl。LCMS：m/z ，281.2  (M+1)；滯留時間：1.28 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例397及398 反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈
Figure 02_image1161
向(±)-反式-5-異丙氧基-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)吡啶·HCl (190 mg，0.60 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.5 mL，2.63 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min，且接著添加三氟甲烷磺酸6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基酯(175 mg，0.52 mmol)。在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Cellulose-4 (250 × 30) mm，5 μm；CO2 %：50%；共溶劑%：50%之MeOH；總流量：70.0 g/min；背壓：100巴；溫度：30℃；UV：300 nm)來純化該粗產物。
實例397：LCMS：m/z，464.3 (M+H)；滯留時間：1.92 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.22-8.14 (m, 1H), 8.13-8.06 (m, 1H), 7.83 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 3.1, 8.9 Hz, 1H), 6.78 (d,J = 8.8 Hz, 1H),6.15 (s, 1H), 5.05 (dt,J = 4.4, 7.9 Hz, 1H), 4.52 (td,J = 6.1, 12.0 Hz, 1H), 4.20-4.09 (m, 1H), 3.77-3.55 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.29-3.15 (m, 2H), 2.31 -2.20 (m, 1H), 1.76-1.63 (m, 1H), 1.25 (d,J = 5.9 Hz, 6H), 1.06 (t,J = 7.0 Hz, 3H)。
實例398：LCMS 464.3 (M+H)；滯留時間：1.92 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.21-8.12 (m, 1H), 8.11-8.05 (m, 1H), 7.82 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 7.39 (dd,J = 3.2, 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d,J = 8.8 Hz, 1H),6.15 (s, 1H), 5.09-4.99 (m, 1H), 4.52 (td,J = 6.1, 12.0 Hz, 1H), 4.21-4.10 (m, 1H), 3.78-3.55 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.28-3.18 (m, 2H), 2.34-2.18 (m,1H), 1.76-1.63 (m, 1H), 1.25 (d,J = 6.1 Hz, 6H), 1.06 (t,J = 7.0 Hz, 3H)。
實例399 (±)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮
Figure 02_image1163
向(±)-反式-2-((3-乙氧基哌啶-4-基)氧基)-5-異丙氧基吡啶(150 mg，0.54 mmol)於乙腈(15 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (0.5 mL，2.68 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接下來，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(246 mg，1.07 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析(3% MeOH/DCM)純化該粗產物，得到(±)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮。LCMS：m/z ，474.3  (M+1)；滯留時間：1.77 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例400及401 反式-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image1165
向(±)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(180 mg，0.38 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加鋅(37 mg，0.57 mmol)、氰化鋅(134 mg，1.14 mmol)及TEA (0.2 mL，1.52 mmol)。對反應混合物進行脫氣5 min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)𠮿
Figure 109145532-0000-3
]鈀(II) (115 mg，0.15 mmol)。在90℃下加熱反應混合物隔夜。使反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土墊過濾。濾液用水、鹽水洗滌，且有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗產物。藉由製備型SFC [方法：管柱：Chiralpak IG (250 × 30) mm，5 μ；CO2 %：60%；共溶劑%：40%之含4 M甲醇氨之MeOH；總流量：100 g/min；背壓：100巴；溫度：35℃；UV：220 nm]來純化粗產物。
實例400：LCMS：m/z，465.3 (M+H)；滯留時間：1.97 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ = 8.26 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.40 (dd, J=9.0, 3.2 Hz, 1H), 6.78 (d,J=9.0 Hz, 1H), 5.16-5.07 (m, 1H), 4.94-4.70 (m, 1H), 4.53 (dt, J=12.0, 6.1 Hz, 1H), 4.43-3.81 (m, 3H), 3.68-3.49 (m, 3H), 3.46 (s, 3H), 2.29 -2.17 (m, 1H), 1.74-1.62 (m, 1H), 1.25 (d, J=6.1 Hz, 6H), 1.05-0.87 (m, 3H)。
實例401：LCMS：m/z，465.2 (M+H)；滯留時間：1.97 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.27 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.84 (d, J=2.9 Hz, 1H), 7.41 (dd, J=8.9, 3.1 Hz, 1H), 6.79 (d,J=9.0 Hz, 1H), 5.17-5.09 (m, 1H), 4.96-4.81 (m, 1H), 4.58-4.09 (m, 3H), 3.91 (br s, 1H), 3.67-3.51 (m, 3H), 3.47 (s, 3H), 2.28-2.20 (m, 1H),1.76-1.63 (m, 1H), 1.26 (d, J=6.1 Hz, 6H), 0.97 (br s, 3H)。
中間物176 (+/-) 順式-3-乙氧基哌啶-4-醇·HCl鹽
Figure 02_image1167
向三級丁基-順式-3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-甲酸酯(2 g，8.15 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液中，添加HCl於二㗁烷中之4 N溶液(2.5 mL，82 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h，其後將其減壓濃縮，得到順式-3-乙氧基哌啶-4-醇·HCl鹽。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 8.58 (br s, 1 H), 8.28 (br s, 1 H), 3.77-3.90 (m, 1 H), 3.50-3.65 (m, 3 H), 2.88-3.18 (m, 4 H), 1.61-1.90 (m, 2 H), 1.14 (t, J=7.0 Hz, 3 H)。
中間物177 (±)-順式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮
Figure 02_image1169
向(±)-順式-3-乙氧基哌啶-4-醇(0.7 g，4.82 mmol)於乙腈(15 mL)中之攪拌溶液中，添加DIPEA (2.5 mL，14.5 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5 min。接下來，添加4,6-二氯-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.1 g，4.82 mmol)，且在85℃下加熱反應混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析(3% MeOH/DCM)純化該粗產物，得到(±)-順式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮。LCMS：m/z ，339.2  (M+1)；滯留時間：0.83 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM乙酸銨:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
中間物178 (±)-順式-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image1171
向(±)-順式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.5 g，1.48 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中，添加鋅(0.15 g，2.21 mmol)、氰化鋅(0.26 g，2.21 mmol)及TEA (0.6 mL，4.43 mmol)。將反應混合物脫氣5 min，且添加二氯[9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)𠮿
Figure 109145532-0000-3
]鈀(II) (0.11 g，0.15 mmol)。在90℃下加熱反應混合物隔夜。使反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土墊過濾。濾液用水、鹽水洗滌，且有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓蒸發，得到粗產物，藉由矽膠層析(3% MeOH/DCM)純化該粗產物，得到(±)-順式-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈。LCMS：m/z ，329.2  (M+1)；滯留時間：0.71 min。(LCMS方法：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm，移動相A：10 mM乙酸銨:乙腈(95:5)；移動相B：10 mM NH4 OAc:乙腈(5:95)，梯度= 20-100% B歷時2分鐘，接著在100% B保持0.3分鐘；溫度：50℃；流速：0.7 mL/min；偵測：UV，220 nm)。
實例402及403 反式-4-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈
Figure 02_image1173
在室溫下，向(±)-順式-4-(3-乙氧基-4-羥基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(100 mg，0.30 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌溶液中，依序添加三苯基膦(120 mg，0.45 mmol)、DIAD (0.12 mL，0.61 mmol)及苯酚(43 mg，0.45 mmol)。在60℃下加熱反應混合物2 h。將反應混合物冷卻至室溫，且減壓移除溶劑，得到粗產物，藉由製備型SFC (管柱：Luxcellulose-4 (250 × 21.5) mm，5 μm；CO2 %：55%；共溶劑%：45%之MeOH；總流量：140.0 g/min；背壓：100巴；溫度：40℃；UV：220 nm)來純化該粗產物。
實例402：LCMS：m/z，406.1 (M+H)；滯留時間：1.69 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.27 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 8.02 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.37-7.23 (m, 2H), 7.08-6.99 (m, 2H), 6.93-7.00 (m, 1 H), 4.53-4.59 (m, 1 H), 3.53-3.67 (m, 3 H), 3.47 (s, 3 H), 2.16-2.26 (m, 1 H), 1.65-1.77 (m, 1 H), 0.89-1.05 (m, 3 H)。
實例403：LCMS 406.1 (M+H)；滯留時間：1.69 min；LC/MS方法：管柱：Waters XBridge C18，19 × 150 mm，5 μm粒子；移動相A：10 mM乙酸銨；移動相B：乙腈；梯度：20-65% B歷時20分鐘，接著在100% B保持5分鐘；流速：15 mL/min。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ ppm 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.37-7.24 (m, 2H), 7.10-6.99 (m, 2H), 6.99-6.88 (m, 1H), 5.01 -4.70 (m, 1H), 4.61-4.51 (m, 1H), 4.45-4.03 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.67-3.52 (m, 3H), 3.46 (s, 3H), 2.24-2.16 (m, 1H), 1.76-1.63 (m, 1H), 1.10-0.90 (m,3H)。
根據實例402及403中所揭示之通用程序，由適當苯酚製備表31中之實例。 表31
實例編號 結構 立體 化學 LCMS 方法 LCMS RT M+H
404
Figure 02_image1175
 同對掌性 A 1.96 474.1
405 同對掌性 A 1.86 474.1
生物分析 本發明化合物之藥理學特性可藉由多種生物分析確認。已對本發明化合物進行下文所例示之生物分析。
分析1：活體外DGK抑制分析——方法A 使用擠出脂質體進行DGKα及DGKζ反應(DGKα及DGKζ LIPGLO分析)。反應係在50 mM MOPS pH 7.5、100 mM NaCl、10 mM MgCl2 、1 μM CaCl2 及1 mM DTT (分析緩衝液)中進行。對於擠出脂質體反應而言，脂質受質濃度為2 mM PS、0.25 mM DAG及2.75 mM PC。反應在150 μM ATP中進行。DGKα及DGKζ之酶濃度為5 nM。
化合物抑制研究如下進行：將各種測試化合物溶解於DMSO中之50 nL微滴(各種化合物的最高濃度為10 mM，11點，3倍連續稀釋)轉移至白色1536孔盤(Corning 3725)之各孔中。藉由將2.5 mL 4×酶溶液(20 nM DGKα或DGKζ (如下文所描述製備)，於分析緩衝液中)與2.5 mL 4×脂質體溶液(下文所描述之組成)合併來製備2×最終反應濃度的5 mL酶/受質溶液，且在室溫下培育10分鐘。接下來，將1 μL 2×酶/受質溶液添加至含有測試化合物之孔中，且經由添加1 μL 300 μM ATP來起始反應。使反應進行1小時，其後添加2 μL Glo試劑(Promega V9101)且培育40分鐘。接下來，添加4 μL激酶偵測試劑且培育30分鐘。使用EnVision微量培養盤讀取器記錄發光。根據ATP轉化來計算抑制百分比，無酶對照反應所產生之ATP轉化對應於100%抑制且僅媒劑的反應對應於0%抑制。評價11種濃度的化合物以測定IC50 。
4×脂質體製劑 脂質組成為5 mol% DAG (Avanti 800811O)、40 mol% PS (Avanti 840035P)及55 mol% PC (Avanti 850457)，4×脂質體溶液的總脂質濃度為15.2 mg/mL。將PC、DAG及PS溶解於氯仿中，合併且真空乾燥成薄膜。使脂質在50 mM MOPS pH 7.5、100 mM NaCl、5 mM MgCl2 中水合至20 mM，且冷凍-解凍五次。脂質懸浮液經由100 nm聚碳酸酯過濾器擠出十一次。執行動態光散射以確認脂質體尺寸(50-60 nm半徑)。脂質體製劑在4℃下儲存長達四週。
人類DGKα及DGKζ之桿狀病毒表現 使用Bac對Bac桿狀病毒表現系統(Invitrogen)，根據製造商方案，產生人類DGK-α-TVMV-His-pFBgate及人類DGK-ξ-轉錄物變體-2-TVMV-His-pFBgate桿狀病毒樣本。用於表現DGK-α及DGK-ξ之DNA分別具有SEQ ID NO: 1及3。使用被感染的Sf9細胞，以1:1500個病毒/細胞比率達成桿狀病毒擴增，且在轉染後，在27℃下生長65小時。
在得自GE Healthcare Bioscience之Cellbag 50L WAVE生物反應器系統20/50中，進行各種蛋白質之表現按比例擴大。ESF921昆蟲培養基(Expression System)中所生長之12 L Sf9細胞(2 × 106 個細胞/毫升) (Expression System, Davis, CA)以1:200個病毒/細胞比率用病毒原液感染，且在感染後，在27℃下生長66-68小時。藉由在SORVALL® RC12BP離心機中、在4℃下以2000 rpm離心20 min，來收穫經感染之細胞培養物。細胞集結粒(cell pellet)儲存在-70℃下直至純化。
人類DGK-α及DGK-ξ純化 自Sf9桿狀病毒感染之昆蟲細胞漿中純化全長人類DGKα及DGKζ，其各自表現含有TVMV可裂解C端六His標籤序列(分別為SEQ ID NO: 2及4)且如上文所描述產生。利用氮氣空化方法，使用氮氣彈(Parr Instruments)溶解細胞，且藉由離心澄清溶解物。在ÄKTA Purifier Plus系統上，使用三個連續管柱層析步驟將澄清的溶解物純化至約90%均質性。三步管柱層析包括鎳親和樹脂捕獲(亦即，粗HisTrap FF，GE Healthcare)，隨後為尺寸排阻層析(亦即，DGK-α為製備級HiLoad 26/600 Superdex 200，GE Healthcare；且DGK-ξ為HiPrep 26/600 Sephacryl S 300_HR，GE Healthcare)。第三步驟為離子交換層析，且對於兩種同功異型物而言為不同的。使用Q-瓊脂糖陰離子交換層析(GE Healthcare)精製DGKα。使用SP瓊脂糖陽離子交換層析(GE Healthcare)精製DGKζ。蛋白質遞送濃度≥2 mg/mL。兩種蛋白質的調配緩衝液相同：50 mM Hepes pH 7.2、500 mM NaCl、10% v/v甘油、1 mM TCEP及0.5 mM EDTA。
分析2：活體外DGK抑制分析——方法B 使用任一種擠出脂質體進行DGKα及DGKζ反應(DGKα及DGKζ LIPGLO分析)。反應係在50 mM MOPS pH 7.5、100 mM NaCl、10 mM MgCl2 、1 μM CaCl2 及1 mM DTT (分析緩衝液)中進行。對於擠出脂質體反應(5 mM總脂質)而言，脂質受質濃度為2 mM PS、0.25 mM DAG及2.75 mM PC。反應在150 μM ATP中進行。DGKα及DGKζ之酶濃度為5 nM。
化合物抑制研究如下進行：將各種測試化合物溶解於DMSO中之25 nL微滴(各種化合物的最高濃度為10 mM，11點，3倍連續稀釋)轉移至白色1536孔盤(Corning 3725)之各孔中。藉由將2.5 mL 4×酶溶液(20 nM DGKα或DGKζ (如下文所描述製備)，於分析緩衝液中)與2.5 mL 4×清潔劑/脂質微胞溶液(下文所描述之組成)合併來製備2×最終反應濃度的5 mL酶/脂質受質溶液，且在室溫下培育10分鐘。接下來，將1 μL 2×酶/脂質受質溶液添加至含有測試化合物之孔中且經由添加1 μL 300 μM ATP來起始反應。使反應進行2小時，其後添加2 μL Glo試劑(Promega V9101)且培育40分鐘。接下來，添加4 μL激酶偵測試劑且培育30分鐘。使用EnVision微量培養盤讀取器記錄發光。根據ATP轉化來計算抑制百分比，無酶對照反應所產生之ATP轉化對應於100%抑制且僅媒劑的反應對應於0%抑制。評價11種濃度的化合物以測定IC50 。
2×脂質體製劑 脂質組成為5 mol% DAG (Avanti 800811O)、40 mol% PS (Avanti 840035P)及55 mol% PC (Avanti 850457)，脂質體溶液的總脂質濃度為7-8 mg/mL。將PC、DAG及PS溶解於氯仿中，合併且真空乾燥成薄膜。使脂質在50 mM MOPS pH 7.5、100 mM NaCl、5 mM MgCl2 中水合至20 mM，且冷凍-解凍五次。脂質懸浮液經由100 nm聚碳酸酯過濾器擠出10-12次。執行動態光散射以確認脂質體尺寸(50-60 nm半徑)。脂質體製劑在4℃下儲存長達四週。
幾乎全長人類DGKα及全長DGKζ之桿狀病毒表現 使用Bac對Bac桿狀病毒表現系統(Invitrogen)，根據製造商方案，產生人類MA-hDGKα-(S9-S727)-Ct-TVMV-His-pFBgate及全長人類DGK-ξ-轉錄物變體-2-TVMV-His-pFBgate桿狀病毒樣本(注意：DGKα試劑名稱中之MA-指示添加在Ser-9前的兩個額外胺基酸)。用於表現DGK-α(9-727)及DGK-ζ之DNA分別具有SEQ ID NO: 5及3。使用被感染的Sf9細胞，以1:1500個病毒/細胞比率達成桿狀病毒擴增，且在轉染後，在27℃下生長65小時。
在2 L燒瓶中進行幾乎全長DGK-α(9-727)蛋白之表現按比例擴大，且使用得自GE Healthcare Bioscience之Cellbag 50L WAVE生物反應器系統20/50進行全長DGKζ之表現按比例擴大。蛋白質以不同體積使用類似條件表現。對於DGKα(9-727)之表現，使用2 × 2 L燒瓶，其各自含有0.8 L最終體積之培養基，且使DGKζ以12 L規模在50 L細胞袋中生長。對於各者而言，將初始密度2 × 106 個細胞/毫升Sf9細胞(Expression System, Davis, CA)接種於ESF921昆蟲培養基(Expression System)中，以1:200個病毒/細胞比率用病毒原液感染，且在感染後在27℃下生長66-68小時。藉由在SORVALL® RC12BP離心機中、在4℃下以2000 rpm離心20 min，來收穫經感染之細胞培養物。細胞集結粒儲存在-80℃下直至純化。
人類DGK-α及DGK-ξ純化 自Sf9桿狀病毒感染之昆蟲細胞漿中純化人類DGKα(9-727)及全長DGKζ，其各自表現含有TVMV可裂解C端六His標籤序列(分別為SEQ ID NO: 2及4)且如上文所描述產生。將細胞漿解凍且懸浮於緩衝液(50 mM HEPES，pH 7.2，300 mM NaCl，10% v/v甘油，含有核酸酶及蛋白酶抑制劑之1 mM TCEP)中至1:10 v/v初始培養物體積。利用氮氣空化方法，使用氮氣彈(Parr Instruments)溶解細胞，且藉由高速離心澄清溶解物。在ÄKTA Purifier Plus系統上，分別使用兩個或三個連續管柱層析步驟將澄清的溶解物純化至約90%均質性。藉由具有咪唑梯度溶離之鎳親和純化(亦即，HisTrap FF，GE Healthcare)，隨後為尺寸排阻層析(亦即，DGKα(9-727)為製備級HiLoad 26/600 Superdex 200，GE Healthcare；且DGKξ為HiPrep 26/600 Sephacryl S 300 HR，GE Healthcare)來純化兩種同功異型物。此等兩個步驟產生純度＞90%之DGKα(9-727)。達成類似的全長DGKζ純度需要第三步驟，採用陽離子交換層析(SP瓊脂糖凝膠FF，GE Healthcare)且用NaCl梯度溶離。兩種蛋白質之最終調配緩衝液類似，其中DGKα(9-727)製備於50 mM Hepes、pH 7.3、300 mM NaCl、10% v/v甘油及1 mM TCEP中，且全長DGKζ製備於50 mM Hepes、pH 7.3、500 mM NaCl、5% v/v甘油及1 mM TCEP中。將蛋白質濃縮至1-2 mg/mL，急驟冷凍且保持在-80℃下進行長期儲存。
分析3：Raji CD4 T細胞IL2分析 使用預活化的CD4 T細胞及Raji細胞，以4 µL體積進行1536孔IL-2分析。在分析之前，藉由分別為1.5 µg/mL、1 µg/mL及10 µg/mL的α-CD3、α-CD28及PHA處理而使CD4 T細胞預活化。用10,000 ng/mL的葡萄球菌腸毒素B (SEB)處理Raji細胞。首先將連續稀釋的化合物轉移至1536孔分析盤(Corning，#3727)中，隨後添加2 µL預活化的CD4 T細胞(最終密度為6000個細胞/孔)及2 µL經SEB處理之Raji細胞(2000個細胞/孔)。在37℃/5% CO2 培育箱中培育24小時之後，將4 µl IL-2偵測試劑添加至分析盤(Cisbio，#64IL2PEC)中。在Envision讀取器上讀取分析盤。為了評定化合物的細胞毒性，將Raji或CD4 T細胞與連續稀釋的化合物一起培育。在培育24小時之後，添加4 µL Cell Titer Glo (Promega，#G7572)，且在Envision讀取器上讀盤。使用四參數對數邏輯式y = A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))計算50%有效濃度(IC50 )，其中A及B分別表示最小及最大活化或抑制%，C為IC50 ，D為希爾斜率(hill slope)且x表示化合物濃度。
分析4：CellTiter-Glo CD8 T細胞增殖分析 使冷凍的原生人類CD8 T細胞解凍於RPMI+10% FBS中，在37℃培育2小時且計數。384孔組織培養盤在4℃下用20 μl含有0.1 μg/mL抗人類CD3之普通RPMI塗佈隔夜，自培養盤移出，之後向各孔中添加每40 μL 20k個CD8 T細胞與0.5 μg/ml可溶性抗人類CD28。塗鋪細胞之後，立即將化合物轉至(echoed to)細胞盤中。在37℃培育箱中培育72 h之後，向各孔中添加10 μL CellTiter-glo試劑(Promega目錄號G7570)。將培養盤劇烈振盪5分鐘，在室溫下再培育15分鐘且在Envision上讀取以測定CD8 T細胞增殖。在分析中，0.1 μg/mL抗CD3及0.5 μg/mL抗CD28刺激的CD8T細胞信號為背景。使用3 μM的參考化合物8-(4-(雙(4-氟苯基)甲基)哌𠯤-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈設定100%範圍，且EC50 為絕對50%以使資料標準化。
分析5：DGK AP1-報導子分析 使用得自SABiosciences的Cignal Lenti AP1報導子(luc)套組(CLS-011L)產生Jurkat AP1-螢光素酶報導子。
使用Echo550儀將化合物自Echo LDV盤轉移至384孔盤(白色，實心底，不透明PE CulturPlate 6007768)之個別孔中。樣本大小為每孔30 nL；且每個源盤一個目的盤。藉由將40 mL細胞(2 × 20 mL)轉移至潔淨的50 mL錐形管中來製備細胞懸浮液。藉由離心(1200 rpm；5分鐘；環境溫度)濃縮細胞。移除上清液且將所有細胞懸浮於RPMI (Gibco 11875) + 10% FBS中以達成1.35×106 個細胞/毫升濃度。使用多通道移液管，手動地將細胞(每孔30微升細胞懸浮液)添加至含有化合物的384孔TC盤中(每孔4.0×104 個細胞)。在37℃及5% CO2 下培育細胞盤20分鐘。
在培育期間，藉由將3 μL aCD3 (1.3 mg/mL)與10 mL培養基混合來製備抗CD3抗體(αCD3)溶液[最終濃度=0.4 μg/mL]。接下來，將1.5 μl aCD3 (1.3 mg/mL)與0.5 mL培養基混合[最終濃度=4 μg/ml]。20分鐘之後，將10 μL培養基添加至第1列的所有孔(孔A至M)中，且在第1列、第N至P行中每孔添加10 μL αCD3 (4 μg/mL)用作參考。接著使用多通道移液管，每孔添加10 μL αCD3 (0.4 μg/mL)。經αCD3刺激+/-經化合物處理之細胞在37℃、5% CO2 下培育6小時。
在此培育期期間，使Steady-Glo (Promega E2520)試劑緩慢解凍至環境溫度。接下來，使用多點Combi分配器每孔添加20 μL Steady-Glo試劑。藉由離心(2000 rpm，環境溫度，10秒)移除氣泡。在室溫下培育細胞5分鐘。藉由使用Envision讀盤器儀器、依發光方案量測相對光單位(RLU)來表徵樣本。藉由利用參考化合物8-(4-(雙(4-氟苯基)甲基)哌𠯤-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈來分析資料以使100%抑制標準化。
分析6：鼠類細胞毒性T淋巴球分析 開發抗原特異性溶胞T細胞(CTL)分析來評價DGKα及DGKζ抑制劑在功能上增強效應T細胞介導之腫瘤細胞殺傷活性的能力。自OT-1轉殖基因小鼠分離之CD8+ T細胞識別呈遞卵白蛋白衍生肽SIINFEKL的抗原呈遞細胞MC38。同源抗原之識別起始OT-1抗原特異性CD8+ T細胞之溶胞活性。
功能CTL細胞如下產生：自8-12週齡小鼠分離OT-1脾細胞且在1 μg/mL之SIINFEKL肽及10 U/mL之mIL2存在下擴增。三天之後，添加含有mIL2 U/ml的新鮮培養基。擴增第5天，分離CD8 T細胞且準備使用。活化的CTL細胞可以冷凍儲存6個月。一百萬個MC38腫瘤細胞在37℃下分別經1 μg/mL SIINFEKL-OVA肽脈衝3小時。用新鮮培養基洗滌細胞(3×)以移除過量肽。最後，將96孔U底盤中經DGK抑制劑預處理1小時的CTL細胞與載有抗原的MC38腫瘤細胞以1:10比率合併。接著，以700 rpm使細胞離心5 min且置放於37℃培育箱中隔夜。24小時之後，收集上清液以便藉由購自Perkin Elmer的AlphaLisa分析IFN-γ細胞介素含量。
分析7：PHA增殖分析 將來自冷凍原液的經植物凝血素(PHA)刺激之母細胞(blast cell)在補充有10%胎牛血清(Sigma Aldrich, St. Louis, MO)的RPMI培養基(Gibco, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA)中培育一小時，隨後添加至384孔盤之個別孔中(每孔10,000個細胞)。將化合物轉移至384孔盤之個別孔中，且將經處理之細胞維持在含有人類IL2 (20 ng/mL)之培養基中37℃、5% CO2 下72 h，隨後使用MTS試劑[3-(4,5-二甲基-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓]遵循製造商說明書(Promega, Madison, WI)量測生長。計算抑制百分比，比較經IL2刺激(0%抑制)與未刺激之對照(100%抑制)之間的數值。基於對IL2刺激處理與未刺激處理之間之誘導倍數的50%抑制來計算抑制濃度(IC50 )測定值。
分析8：人類CD8 T細胞IFN-γ分析 將冷凍的原生人類CD8 T細胞解凍於AIM-V培養基中，在37℃培育2 h且計數。384孔組織培養盤在4℃下用20 μL含有0.05 μg/mL抗人類CD3之PBS塗佈隔夜，自培養盤移出，之後向各孔中添加每40微升40,000個細胞(CD8 T細胞)與0.1 μg/mL可溶性抗人類CD28。塗鋪細胞之後，立即使用Echo液體處置器將化合物轉移至細胞盤中。在37℃培育箱中培育20小時後，將每孔3微升上清液轉移至新的384孔白色分析盤中以便量測細胞介素。
使用AlphLISA套組(目錄號AL217)，如製造商手冊(Perkin Elmer)所描述，定量干擾素-γ (IFN-γ)。將各孔計數轉換成IFN-γ濃度(pg/mL)。藉由將0.05 μg/mL 抗CD3加0.1 μg/mL 抗CD28設定為基線及將3 μM參考化合物8-(4-(雙(4-氟苯基)甲基)哌𠯤-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈與抗CD3加抗CD28之共刺激設定為100%活化，來測定化合物EC50 值。
分析9：人類CD8 T細胞pERK分析 將冷凍的原生人類CD8 T細胞解凍於AIM-V培養基中，在37℃培育2 h且計數。CD8陽性T細胞於AIM-V培養基中以每孔20,000個細胞添加至384孔組織培養盤中。向各孔中添加一種化合物，接著添加最終濃度為0.3 μg/mL的珠粒結合之抗人類CD3及抗CD28 mAb。在37℃下培育細胞10分鐘。藉由添加來自AlphaLISA Surefire套組(Perkin Elmer，目錄號ALSU-PERK-A)的溶解緩衝液來終止反應。將溶解物(5微升/孔)轉移至新的384孔白色分析盤中以便量測pERK活化。
藉由將抗CD3加抗CD28設定為基線及將3 μM 8-(4-(雙(4-氟苯基)甲基)哌𠯤-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈與抗CD3加抗CD28之共刺激設定為100%活化來測定化合物EC50 。
分析10：人類全血IFN-γ分析 獲自健康供體之人類靜脈全血(每孔22.5 μL)在加濕的95%空氣/5% CO2 培育箱中、在37℃用化合物預處理一小時。血液在37℃下用最終濃度各為1 μg/mL的2.5 μL抗人類CD3及抗CD28 mAb刺激24小時。使用AlphLISA套組(目錄號AL217)量測上清液中的IFN-γ。
藉由將抗CD3加抗CD28設定為基線及將3 μM參考化合物8-(4-(雙(4-氟苯基)甲基)哌𠯤-1-基)-5-甲基-7-硝基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈與抗CD3加抗CD28之共刺激設定為100%活化來測定化合物EC50 。
分析11：DGK人類全血pERK分析 使用獲自健康供體之人類靜脈全血(與作為抗凝劑之肝素一起抽取)進行人類全血ERK磷酸化分析。使用ECHO 550聲波分配器(Labcyte)，以每孔20 nL向384孔盤中添加化合物於DMSO中之連續稀釋液(11點，3倍)，以達成分析中最終起始濃度為20 μM。以每孔9 μL向化合物盤中添加肝素化的人類全血，且在37℃加濕95%、空氣/5% CO2 培育箱中培育一小時。化合物培育一小時之後，向孔中添加最終濃度為1 μg/mL之1 μL在交聯抗體山羊抗小鼠IgG (4 μg/mL)存在下之人類抗CD3抗體(自產的)以刺激路徑，且另外在37℃下培育15分鐘。藉由添加90 μL固定/溶解緩衝液(BD 558049)終止刺激。洗滌細胞且在室溫下用抗CD8 PE (BD 555635)抗體染色60分鐘，再次洗滌，且使用Perm III緩衝液(BD 558050)在冰上滲透30分鐘。接著，細胞用1:50稀釋度之Alexa Fluor® 647抗ERK1/2 Phospho (Thr202/Tyr204)抗體(Bioleged 675504)染色60分鐘。洗滌樣本且將其再懸浮於含有1% BSA之DPBS (dPBS，Gibco 14190136；BSA，Sigma-Aldrich A9205)中。使用Intellicyt® iQue Screener PLUS分析樣本。藉由CD8陽性群體內pERK陽性群體之百分比來定量pERK活化。基於20 μM濃度下之內部化合物為100%活化且抗-CD3對照為0%活化來計算化合物效能。 表A 活性資料
實例 編號 DGKα LIPGLO IC50 (μM)    DGKα ADPGLO IC50 (μM)    DGKζ LIPGLO IC50 (μM)    HuCD8 INFG 經標準化的 EC50 (μM) msCTL INFg IC50 (μM) INFg 全血 經標準化的 促效劑 EC50 (μM) DGK HWB pERK IC50 (μM) CD8 GLO 經標準化的 EC50 (μM)
1 0.24 - 100 - 5.2 10 - 1.6
2 - - - - - - - 0.34
3 0.11 - 240 - 1.5 10 - 0.49
4 - - - - - - - 0.44
5 - - - - - - - 10
6 - - - - - - - 10
7 - - - - - - - 2.3
8 - - - - - - - 0.32
9 - - - - - - - 0.79
10 0.15 - 2.8 - 4.5 5.0 - 0.14
11 12 - 150 - 0.83 10 - 10
12 3.2 - 27 - 3.8 5.0 - 2.3
13 2.0 - 240 - 1.5 5.0 - 1.2
14 0.25 - 13 - 0.83 7.0 - 0.28
15 0.51 - 7.4 0.87 0.29 7.6 - 0.32
16 1.7 - - - 1.1 10 - 0.093
17 1.1 - 240 - 1.1 10 - 0.47
18 2.6 - 13 0.19 1.5 10 - 0.079
19 0.32 - - - 0.21 10 - 0.28
20 0.43 - 16 - - - - 0.87
21 0.77 - 7.8 0.16 1.7 - - 0.092
22 0.15 - 5.7 - - - - 0.62
23 66 - 58 - 10 - - -
24 2.0 - 27 - 1.5 - - 0.75
25 0.73 - 240 - 10 - - 1.2
26 - - - - 10 - - 2.7
27 - - - - 7.4 - - 0.073
28 1.6 - 5.4 - 10 - - -
29 3.8 - 240 - 10 - - 5.9
30 0.98 - 240 - 3.5 - - 10
31 0.28 - 11 - 10 - - 0.044
32 - - - - 10 - - -
33 2.8 - 240 - 3.8 - - 10
34 1.1 - 9.0 - 8.5 - - 4.1
35 0.29 - 12 - - - - 0.21
36 1.6 - 32 - - - - -
37 0.49 - 240 - - - - 1.1
38 1.8 - 9.0 - 10 - - 1.6
39 0.35 - 14 - 3.7 - - 0.13
40 0.74 - 9.0 - 10 - - 1.2
41 1.1 - 23 - 10 - - 0.21
42 5.4 - 240 - 10 - - 0.70
43 1.5 - 27 - 10 - - 10
44 1.7 - 59 - - - - 1.5
45 - - - - 10 - - 0.098
46 0.15 - 27 - 8.5 - - 1.2
47 0.45 - 240 - 0.68 - - 0.49
48 2.7 - 3.4 - 0.27 6.4 - 0.13
49 - - - - - - - -
50 1.6 - 12 - 0.99 5.0 - 0.055
51 0.23 - 3.0 - 0.18 1.7 2.5 0.14
52 0.80 - 3.8 1.0 0.15 2.7 - -
53 0.77 - 2.0 - - 1.8 2.8 -
54 0.54 - 2.1 - - 2.3 - -
55 0.95 - 3.8 - - 3.7 - -
56 0.84 - 13 - - 3.8 - -
57 0.73 - 6.1 - - 4.3 - -
58 0.34 - 2.9 - - 5.9 - -
59 1.0 - 3.7 - - 6.4 - -
60 0.24 - 5.5 - - 7.9 - -
61 0.73 - 4.7 - - 8.5 - -
62 1.5 - 5.2 - - 20 - -
63 0.74 - 38 - - - - -
64 0.76 - 20 - - - 2.9 -
65 0.56 - 3.3 - - 6.8 - -
66 1.2 - 4.0 - - 0.82 2.7 -
67 1.6 - 7.1 - - 2.7 - -
68 1.7 - 1.7 - - 9.6 - -
69 5.7 - 1.4 - - 17 - -
70 12 - 11 - - 20 - -
71 2.3 - 3.0 - - 20 - -
72 4.2 - 39 - - 20 20 -
73 2.2 - 8.3 - - 20 - -
74 2.8 - 3.3 - - 20 - -
75 27 - 18 - - 20 - -
76 11 - 34 - - 20 20 -
77 3.0 - 3.0 - - - - -
78 0.81 - 16 - - - 20 -
79 0.17 - 4.7 - - 2.2 - -
80 0.11 - 39 - - 2.4 - -
81 0.85 - 7.7 - - 2.0 - -
82 0.030 - 3.9 - - 0.65 - -
83 0.28 - 5.8 0.0025 - 0.36 - -
84 0.048 - 23 - - 1.2 - -
85 0.080 - 3.0 0.61 - 2.2 - -
86 0.72 - 2.9 - - 0.69 - -
87 0.050 - 2.5 - - 2.0 - -
88 0.12 - 8.3 - - 0.88 - -
89 0.037 - 5.6 - - 0.98 - -
90 0.047 - 50 - - 5.6 - -
91 0.065 - 14 - - 4.4 - -
92 0.028 0.00051 16 - - 0.91 - -
93 0.30 - 18 - - 5.9 - -
94 0.080 - 6.1 - - 1.1 3.9 -
95 0.40 - 5.0 - - 1.0 - -
96 0.057 - 20 - - 2.6 - -
97 0.0042 - 11 - - 1.9 3.0 -
98 0.22 - 43 - - 1.2 - -
99 2.5 - 21 - - 2.9 - -
100 0.11 - 28 - - 2.7 - -
101 0.43 - 6.8 - - 1.4 - -
102 0.068 - 83 - - 3.3 - -
103 0.33 - 7.7 - - 1.5 5.5 -
104 0.076 - 15 - - 1.8 1.1 -
105 2.6 - 11 - - 2.0 - -
106 0.081 - 83 - - 2.2 - -
107 0.13 - 24 - - 13 - -
108 0.91 - 11 - - 3.0 - -
109 0.12 - 29 - - 4.2 - -
110 0.24 - 27 - - 3.0 - -
111 0.17 - 25 - - 3.3 - -
112 0.34 - 7.5 - - 4.1 - -
113 0.31 - 12 - - 4.1 - -
114 0.51 - 60 - - - - -
115 2.7 - 15 - - - - -
116 0.45 - 13 - - 4.7 - -
117 2.0 - 20 - - 4.6 - -
118 0.25 - 52 - - 4.7 - -
119 0.24 - 20 - - 6.6 - -
120 0.35 - 73 - - 4.7 - -
121 1.8 - 9.9 - - 6.7 - -
122 0.017 - 28 - - 5.8 - -
123 0.028 0.003 - - - 19 - -
124 1.4 - 28 - - 20 - -
125 0.83 - 17 - - 20 - -
126 6.5 - 250 - - 20 - -
127 0.45 - 250 - - 20 - -
128 0.39 - 45 - - 20 - -
129 3.4 - 13 - - 20 - -
130 0.13 - 100 - - - - -
131 3.1 - 250 - - - - -
132 0.011 - 4.3 - - - - -
136 0.81 - 250 - - 20 - -
137 0.036 - 0.92 - - - - -
138 0.024 0.0052 0.80 - - 0.34 - -
139 0.10 - 1.7 - - 1.5 5.3 -
140 0.13 - - - - 1.2 - -
141 0.068 - 0.26 - - 0.50 1.0 -
142 4.7 - 1.1 - - 3.0 - -
143 0.27 - 1.5 - - 2.2 - -
144 0.096 - 2.1 - - 0.80 0.88 -
145 0.70 - 3.1 - - 7.8 - -
146 0.44 - 1.6 - - 1.7 - -
147 0.38 - 1.8 - - 1.2 0.61 -
148 5.6 - 6.0 - - 12 - -
149 0.23 - 2.1 - - 1.4 - -
150 0.10 - 3.8 - - 1.4 - -
151 1.1 - 5.3 - - 2.4 - -
152 0.14 - 1.7 - - 1.5 - -
153 0.050 - 2.1 - - 1.7 - -
154 0.89 - 6.3 - - 11 - -
155 0.34 - 1.9 - - 20 - -
156 0.024 - 0.71 - - 1.8 - -
157 0.049 - 1.1 - - 2.8 - -
158 0.36 - 1.9 - - 2.0 - -
159 0.13 - 2.3 - - 4.2 - -
160 1.7 - 3.3 - - 4.5 - -
161 0.011 - 0.54 - - 2.4 - -
162 1.7 - 1.1 - - - - -
163 0.042 - 0.36 - - - - -
164 - - - - - 0.79 5.1 -
165 0.096 - 1.2 - - 0.84 - -
166 0.046 - 1.6 - - 0.79 - -
167 0.12 - 1.0 - - 1.6 2.0 -
168 1.0 - 0.89 - - 1.6 3.7 -
169 0.60 - 1.4 - - 1.7 - -
170 0.37 - 1.1 - - 0.86 0.54 -
171 1.4 - 3.7 - - 3.0 - -
172 0.62 - 1.2 - - 1.5 - -
173 0.74 - 0.89 - - 1.1 - -
174 1.6 - 5.1 - - 3.6 - -
175 0.43 - 0.98 - - 1.4 0.80 -
176 0.041 - 1.3 - - 2.3 - -
177 0.14 - 1.1 - - 3.5 - -
178 0.062 - 0.53 - - 4.6 2.3 -
179 0.069 - 1.2 - - 2.4 - -
180 0.045 - 1.0 - - - - -
181 0.061 - 1.4 - - - - -
182 1.1 - 1.8 - - 2.8 - -
183 0.71 - 0.94 - - 2.6 - -
184 1.4 - 6.0 - - 4.0 - -
185 77 - 250 - - - - -
186 0.61 - 0.62 - - 1.6 - -
187 1.7 - 1.5 - - 1.7 1.8 -
188 1.8 - 8.7 - - 6.4 - -
189 1.4 - 4.1 - - 20 - -
190 2.2 - 3.1 - - 20 - -
191 1.8 - 8.6 - - 20 - -
192 0.049 - 0.42 - - 0.29 - -
193 0.28 0.040 2.2 - - 0.37 0.40 -
194 1.4 0.75 1.8 - - 1.8 3.0 -
195 0.0042 - 0.58 - - 0.33 - -
196 0.037 - 1.0 - - 0.29 - -
197 0.011 0.0054 0.25 - - 0.57 0.60 -
198 0.16 - 1.3 - - 3.1 - -
199 0.051 - 1.7 - - 2.1 - -
200 0.039 - 1.6 - - 1.5 3.3 -
201 0.32 - 0.30 - - 0.92 3.9 -
202 0.11 - 0.70 - - 2.0 - -
203 0.25 - 0.23 - - - - -
204 0.20 - 0.33 - - - - -
205 0.16 - 0.071 - - 0.37 - -
206 0.62 - 0.23 - - 0.41 3.6 -
207 0.73 - 1.7 - - 1.3 12 -
208 0.28 - 0.30 - - 2.1 - -
209 0.26 - 3.1 - - 1.8 18 -
210 0.35 - 0.50 - - 1.2 13 -
211 0.093 - 0.50 - - 3.9 - -
212 0.46 - 13 - - 1.9 - -
213 0.031 - 0.14 - - 4.9 - -
214 0.044 - 3.6 - - 5.0 - -
215 0.025 - 0.99 - - 2.1 - -
216 0.30 - 1.2 - - 1.4 14 -
217 0.95 - 7.1 - - 20 - -
218 0.43 - 0.82 - - 20 - -
219 0.48 - 2.6 - - - - -
220 0.41 - 4.0 - - - - -
221 0.35 - 1.8 - - - - -
222 0.85 - 1.6 - - 3.9 - -
223 0.26 - 1.3 - - 17 - -
224 0.63 - 1.0 - - 5.8 - -
225 0.94 - 2.9 - - 1.8 - -
226 1.2 - 0.37 - - 2.4 - -
227 0.88 - 3.7 - - 4.2 - -
228 0.94 - 1.9 - - 1.1 1.5 -
229 0.28 - 250 - - - - -
230 3.3 - 250 - - - - -
231 0.49 1.6 83 - - 0.51 0.40 -
232 0.016 - 4.3 - - 7.0 - -
233 0.018 - 0.39 - - 3.3 - -
234 0.31 - 0.62 - - 9.3 - -
235 0.44 - 4.8 - - 5.2 - -
236 2.2 - 250 - - 20 - -
237 0.56 - 4.0 0.34 0.20 3.3 - -
238 0.70 - 12 0.16 - - - -
239 0.78 - 27 0.82 - - - -
240 0.30 - 41 1.0 0.58 5.3 - -
241 0.058 - 22 1.3 0.57 10 - -
243 - 0.59 0.36 - - - 0.59 -
244 - 0.32 0.92 - - 0.78 3.1 -
245 - 0.43 0.050 - - 0.41 0.80 -
246 - 0.069 0.87 - - 0.45 0.83 -
247 - 1.9 0.081 - - - 0.74 -
248 - 0.080 0.081 - - - 0.74 -
249 - 2.0 0.050 - - - 0.49 -
250 - 0.098 1.8 - - - 2.1 -
251 - 31 0.056 - - - 1.8 -
252 - 10 2.0 - - - 3.5 -
253 - 4.3 0.33 - - - 2.3 -
254 - 22 0.98 - - - 2.3 -
255 - 17 0.81 - - - 2.2 -
256 - 24 2.7 - - - 4.7 -
257 - 5.2 0.029 - - - 0.80 -
258 - 16 0.68 - - - 1.2 -
259 - 1.1 150 - - 20 - -
260 - 1.9 140 - - - - -
261 - 0.20 1.4 - - 0.91 1.5 -
262 - 3.7 15 - - 12 - -
263 - 0.21 0.11 - - 0.18 0.20 -
264 - 4.0 17 - - 6.5 - -
265 - 8.5 250 - - 20 - -
266 - 0.21 8.1 - - 4.4 - -
267 - 0.26 10 - - 17 - -
268 - 1.3 17 - - 13 - -
269 - 0.047 1.5 - - 1.6 2.1 -
270 - 2.4 12 - - 5.4 - -
271 - 10 28 - - 20 - -
272 - 19 24 - - 16 - -
273 - - 4.7 - - - - -
274 - 14 15 - - 8.2 - -
276 - 1.0 2.0 - - 1.0 - -
277 - 4.9 3.9 - - 4.5 - -
278 - 2.4 1.2 - - 0.64 - -
279 - 6.5 3.6 - - 8.7 - -
280 - 0.38 170 - - 20 - -
281 - 2.7 2.8 - - 9.8 - -
282 - 12 14 - - - - -
283 - 0.78 22 - - - - -
284 - 23 120 - - - 20 -
285 - 30 130 - - - 20 -
286 - 5.2 9.2 - - - 8.7 -
287 - 3.2 7.4 - - - - -
288 - 4.3 130 - - - 20 -
289 - 4.0 130 - - - 20 -
290 - 8.7 130 - - - - -
291 - 1.4 130 - - - - -
292 - 10 130 - - - 20 -
293 - 5.3 85 - - - 20 -
294 - 2.3 19 - - - - -
295 - 11 0.96 - - - - -
296 - 0.058 5.0 - - - 13 -
297 - 0.41 0.46 - - - 0.68 -
298 - 0.19 0.41 - - - 0.91 -
299 - 0.24 1.9 - - - 0.78 -
300 - 0.49 47 - - - 8.3 -
301 - 0.19 6.1 - - - 11 -
302 - - - - - - - -
303 - 0.68 0.13 - - - 0.38 -
304 - - - - - - - -
305 - 0.94 0.25 - - - 0.73 -
307 - 0.029 0.92 - - - 0.17 -
308 - 4.3 3.1 - - - - -
309 - 2.8 7.8 - - - 4.0 -
310 - 3.8 4.6 - - - 9.9 -
312 - 6.6 10 - - - 6.0 -
313 - 11 11 - - - 7.1 -
314 - 21 13 - - - 16 -
315 - 2.9 21 - - - - -
316 - - - - - - - -
317 - - - - - - - -
318 - 130 130 - - - 20 -
319 - 61 130 - - - - -
320 - 5.0 120 - - - - -
321 - 11 9.9 - - - - -
322 - 6.8 78 - - - 20 -
323 - 3.5 18 - - - 12 -
324 - 130 130 - - - 20 -
325 - 49 50 - - - 20 -
326 - 12 40 - - - - -
327 - 1.3 3.8 - - - 1.9 -
328 - 0.17 - - - - - -
329 - 5.9 83 - - - 13 -
330 - 6.3 77 - - - 20 -
331 - 14 19 - - - 11 -
332 - 13 9.1 - - - 16 -
333 - 8.7 28 - - - 5.5 -
334 - 24 7.8 - - - 20 -
335 - 2.0 13 - - - - -
336 - 4.5 0.56 - - - - -
337 - 24 1.9 - - - - -
338 - 3.8 7.4 - - - - -
339 - 38 1.2 - - - - -
340 - 0.35 1.5 - - - - -
341 - 0.28 0.53 - - - 0.59 -
342 - 0.58 0.96 - - - 0.84 -
343 - 0.11 0.13 - - - 0.32 -
344 - 6.5 85 - - - 20 -
345 - 0.85 0.89 - - - 0.82 -
346 - 38 40 - - - 20 -
347 - 0.044 0.12 - - - 0.35 -
348 - - 36 - - - - -
349 - 0.077 0.11 - - - - -
350 - 0.33 0.58 - - - - -
351 - 0.13 0.16 - - - 0.21 -
352 - 2.4 12 - - - 12 -
353 - 0.61 2.0 - - - - -
354 - - - - - - 20 -
355 - 13 13 - - - 20 -
356 - 1.8 0.62 - - - 3.9 -
357 - 68 63 - - - 20 -
358 - 1.4 6.9 - - - 7.0 -
359 - 10 - - - - 20 -
360 - 0.26 0.28 - - - 0.70 -
361 - 0.96 0.21 - - - 3.0 -
362 - 11 3.5 - - - 20 -
363 - 0.56 0.58 - - - 1.1 -
364 - 3.2 3.4 - - - 20 -
365 - 0.20 0.21 - - - 0.60 -
366 - 13 14 - - - 20 -
367 - 0.45 0.18 - - - 0.64 -
368 - 4.0 10 - - - - -
369 - 0.25 0.19 - - - 0.62 -
370 - 5.1 5.6 - - - 6.7 -
371 - 9.1 4.0 - - - 3.6 -
372 - 24 9.8 - - - 18 -
373 - 0.52 2.4 - - - 1.6 -
374 - 25 97 - - - 20 -
375 - 0.48 1.8 - - - 2.3 -
376 - 4.3 14 - - - 20 -
377 - 0.13 0.075 - - - 0.45 -
378 - 7.7 5.2 - - - 10 -
379 - 0.58 3.1 - - - 7.0 -
380 - 1.3 14 - - - 20 -
381 - 0.31 7.4 - - - 0.24 -
382 - 17 130 - - - 20 -
383 - 6.1 8.6 - - - 20 -
384 - 0.82 0.75 - - - 4.0 -
385 - 100 130 - - - - -
386 - 130 42 - - - 20 -
387 - 2.1 0.097 - - - 0.65 -
388 - - - - - - 20 -
389 - 2.5 0.27 - - - 3.0 -
390 - 2.2 1.9 - - - 20 -
391 - - - - - - 17 -
392 - 42 24 - - - 13 -
393 - 1.1 0.38 - - - 0.68 -
394 - 14 51 - - - 6.2 -
395 - 0.32 0.069 - - - 0.91 -
396 - 38 3.6 - - - 14 -
397 - - 0.42 - - - 0.14 -
398 - - 1.2 - - - 2.8 -
400 - 6.1 0.70 - - - 9.2 -
401 - 0.83 0.39 - - - 2.3 -
402 - 2.1 0.90 - - - 2.8 -
403 - 19 5.3 - - - 11 -
404 - 5.6 1.2 - - - 1.3 -
405 - 7.3 14 - - - - -
283A - 26 14 - - - - -
283B - 42 42 - - - - -
表A列舉DGKα及DGKζ脂質體(LIPGLO)分析中所量測之活體外DGK抑制IC50 活性值。
本發明化合物具有DGKα及DGKζ酶中之一或兩者之抑制劑活性，且因此可以用於治療與DGKα及DGKζ活性抑制有關的疾病。
編碼hDGKα-(M1-S735)-Ct-TVMV-His之核苷酸序列：
Figure 02_image1177
Figure 02_image1179
hDGKα-(M1-S735)-Ct-TVMV-His之胺基酸序列：
Figure 02_image1181
編碼hDGKζ-(M1-A928)-轉錄物變體-2 Ct-TVMV-His之核苷酸序列：
Figure 02_image1183
Figure 02_image1185
hDGKζ-(M1-A928)-轉錄物變體-2 Ct-TVMV-His之胺基酸序列：
Figure 02_image1187
Figure 02_image1189
編碼MA-hDGKα-(S9-S727)-Ct-TVMV-His之核苷酸序列：
Figure 02_image1191
Figure 02_image1193
MA -hDGKα-(S9-S727)-Ct-TVMV-His之胺基酸序列：
Figure 02_image1195
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 12_A0101_SEQ_0015
Figure 12_A0101_SEQ_0016
Figure 12_A0101_SEQ_0017
Figure 12_A0101_SEQ_0018
Figure 12_A0101_SEQ_0019
Figure 12_A0101_SEQ_0020
Figure 12_A0101_SEQ_0021
Figure 12_A0101_SEQ_0022
Figure 12_A0101_SEQ_0023
Figure 12_A0101_SEQ_0024
Figure 12_A0101_SEQ_0025
Figure 12_A0101_SEQ_0026
Figure 12_A0101_SEQ_0027
Figure 12_A0101_SEQ_0028
Figure 12_A0101_SEQ_0029
Figure 12_A0101_SEQ_0030
Figure 12_A0101_SEQ_0031
Figure 12_A0101_SEQ_0032
Figure 12_A0101_SEQ_0033
Figure 12_A0101_SEQ_0034
Figure 12_A0101_SEQ_0035
Figure 12_A0101_SEQ_0036
Figure 12_A0101_SEQ_0037
Figure 12_A0101_SEQ_0038
Figure 12_A0101_SEQ_0039
Figure 12_A0101_SEQ_0040
Figure 12_A0101_SEQ_0041
Figure 12_A0101_SEQ_0042
Figure 109145532-A0101-11-0002-3

Claims (15)

  1. 一種式(I)化合物：
    Figure 03_image1197
    或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： X為CR6 或N； Y為CR3 或N； L為-O-、-S-、-S(O)2 -、-NR4c -或-NR4d C(O)-； R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n Re 或-P(O)Re Re ； 各R1a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-OCH3 或-NRa Ra ； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； 各Re 獨立地為經零至4個R1a 取代之C3-4 環烷基或C1-3 烷基； R2 為H、經零至4個R2a 取代之C1-3 烷基、經零至4個R2a 取代之C2-3 烯基或經零至4個R2a 取代之C3-4 環烷基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、C3-4 環烷基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-3 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、C3-4 氟環烷基、-NO2 或經零至2個R3a 取代之吡啶基； 各R3a 為鹵基、-CN、C1-3 烷基或C1-3 烷氧基； R4 為R4a 、-CH2 R4a 或-CH2 CH2 R4a ； R4a 為C3-6 環烷基、C5-14 雜環基、C6-10 芳基或C5-14 雜芳基，各自經零至4個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-3 氟烷基、C1-4 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-4 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-3 氟烷氧基、-O(CH)1-3 NRc Rc 、-OCH2 CH=CH2 、-OCH2 C≡CH、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-4 烷基)、-C(O)N(C1-4 烷基)2 、-NRc Rc 、-NRa S(O)2 (C1-3 烷基)、-NRa C(O)(C1-3 烷基)、-NRa C(O)O(C1-4 烷基)、-P(O)(C1-3 烷基)2 、-S(O)2 (C1-3 烷基)、-O(CH2 )1-2 (C3-6 環烷基)、-O(CH2 )1-2 (𠰌啉基)、C3-6 環烷基、氰基環丙基、甲基吖呾基、乙醯基吖呾基、三唑基、四氫哌喃基、𠰌啉基、苯硫基、甲基哌啶基或-CRc Rc (苯基)； 各Rc 獨立地為H或C1-2 烷基； R4c 為H、C1-6 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-6 烷基； 各R5 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-6 烷基、經零至4個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-4 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-4 炔基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基)、經零至4個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至4個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-O(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)，或與同一碳原子連接之兩個R5 形成=O； 各Rg 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、C1-3 烷氧基、C1-3 氟烷氧基、-O(CH2 )1-2 O(C1-2 烷基)、C3-5 環烷基或-NRc Rc ； 各R6 為H、F、Cl、-CN、-CH3 、-CH2 F、-CHF2 、-CF3 或-OCH3 ； R7 為H或-CH3 ； m為零、1、2或3；及 n為零、1或2。
  2. 如請求項1之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： R1 為H、F、Cl、Br、-CN、經零至4個R1a 取代之C1-3 烷基、經零至3個R1a 取代之環丙基、經零至3個R1a 取代之C1-3 烷氧基、-C(O)NRa Ra 、-NRa Ra 、-S(O)n CH3 或-P(O)(CH3 )2 ； 各R1a 獨立地為F、Cl或-CN； 各Ra 獨立地為H或C1-3 烷基； R2 為H、經零至2個R2a 取代之C1-2 烷基或經零至2個R2a 取代之C2-3 烯基； 各R2a 獨立地為F、Cl、-CN、-OH、-O(C1-2 烷基)、環丙基、C3-4 烯基或C3-4 炔基； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、C1-2 烷基、C1-2 氟烷基、C3-4 環烷基、-NO2 或經零至1個R3a 取代之吡啶基； R4a 為C3-6 環烷基、氧環丁基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、哌啶基、哌𠯤基、𠰌啉基、苯基、萘基、呋喃基、哌喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異㗁唑基、㗁唑基、㗁二唑基、三唑基、吲哚基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、三𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-OH、C1-6 烷基、C1-2 氟烷基、C1-3 羥烷基、-(CH2 )1-2 O(C1-3 烷基)、C1-4 烷氧基、-O(C1-3 羥烷基)、-O(CH)1-3 O(C1-3 烷基)、C1-2 氟烷氧基、-O(CH)1-2 NRc Rc 、-C(O)(C1-3 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-3 烷基)、-C(O)NH2 、-C(O)NH(C1-3 烷基)、-C(O)N(C1-3 烷基)2 、-NRc Rc 、-S(O)2 (C1-2 烷基)、C3-6 環烷基或-CRc Rc (苯基)； R4c 為H、C1-4 烷基或R4a ； R4d 為H或C1-4 烷基； 各R5 獨立地為F、-CN、-OH、經零至4個Rg 取代之C1-5 烷基、經零至3個Rg 取代之C1-3 烷氧基、經零至4個Rg 取代之C2-3 烯基、經零至4個Rg 取代之C2-3 炔基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之C3-4 環烷基)、經零至3個Rg 取代之苯基、經零至3個Rg 取代之㗁二唑基、經零至3個Rg 取代之吡啶基、-(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-O(CH2 )1-2 (經零至4個Rg 取代之雜環基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc C(O)O(C1-4 烷基)、-(CH2 )1-2 NRc S(O)2 (C1-4 烷基)、-C(O)(C1-4 烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4 烷基)、-C(O)O(C3-4 環烷基)、-C(O)NRa Ra 或-C(O)NRa (C3-4 環烷基)；及 各R6 為H、F或-CH3 。
  3. 如請求項1至2中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： X為CH且Y為CR3 ； X為N且Y為CR3 ；或 X為N且Y為N； L為-O-、-NH-、-N(CH3 )-或-N(CH3 )C(O)-； R1 為F、Cl、Br、-CN、-OCH3 或-C(O)NH2 ； R2 為-CH3 ； R3 為H、F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-NO2 、甲基吡啶基或甲氧基吡啶基； R4 為R4a 或-CH2 R4a ； R4a 為環己基、苯基、吲唑基、呔𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹㗁啉基、喹唑啉基、1,7-㖠啶基或二氫苯并[b][1,4]二氧呯基，各自經零至3個R4b 取代； 各R4b 獨立地為F、Cl、Br、-CN、-CH3 、-CH2 CH3 、-CH2 CH2 CH3 、-CH(CH3 )2 、-CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )3 、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH3 、-C(CH3 )2 CH2 CH3 、-CHF2 、-CF3 、-OCH3 、-OCH(CH3 )2 、-OC(CH3 )3 、-OCF3 、-C(O)N(CH3 )2 、-S(O)2 CH3 、-CH2 (苯基)、-C(CH3 )2 (苯基)、環丙基、環戊基或環己基； 各R5 獨立地為氫、F、-OH、C1-2 烷基、C1-3 烷氧基、-CH2 CF3 、-OCH2 CH2 OCH3 、-OCH2 CH2 N(CH3 )2 、-OCH2 (環丙基)或-OCH2 CH2 (𠰌啉基)；及 各R6 為H。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： X為N；及 Y為CR3 。
  5. 如請求項1至3中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： X為CR6 ；及 Y為CR3 。
  6. 如請求項1至3中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中： X為N；及 Y為N。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中L為-O-。
  8. 如請求項1至6中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中L為-NR4c -。
  9. 如請求項1至6中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中L為-NR4d C(O)-。
  10. 如請求項1至6中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其具有選自以下之結構：
    Figure 03_image1199
    。
  11. 如請求項1之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體，其中該化合物為： 6-氟-4-(4-(3-氟-5-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(1)； 6-氟-4-(4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(2)； 6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1H)-酮(3)； 6-氟-1-甲基-3-硝基-4-(4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)喹啉-2(1H)-酮(4)； 4-(4-((1H-吲唑-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(5)； 3-((1-(6-氟-1-甲基-3-硝基-2-側氧基-1,2-二氫喹啉-4-基)哌啶-4-基)氧基)苯甲腈(6)； 4-(4-(3-氯苯氧基)哌啶-1-基)-6-氟-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(7)； 6-氟-4-(4-(2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(8)； 6-氟-4-(4-(3-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-3-硝基喹啉-2(1H)-酮(9)； 6-氯-4-(4-(3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(10)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(11)； 6-氯-4-(4-(3,4-二氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(12)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(13)； 6-氯-4-(4-(4-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(14)； 4-(4-(4-(三級丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(15)； 6-氯-4-(4-(4-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(16)； 6-氯-4-(4-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(17)； 6-氯-4-(4-(2-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(18)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(19)； 6-氯-4-(4-(4-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(20)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(21)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(22)； 6-氯-4-(4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(23)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(24)； 4-((1-(6-氯-3-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)哌啶-4-基)氧基)-N,N-二甲基苯甲醯胺(25)； 4-(4-(4-溴-2-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(26)； 6-氯-4-(4-(3-氯苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(27)； 6-氯-4-(4-(3-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(28)； 6-氯-1-甲基-4-(4-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(29)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(30)； 4-(4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-氯-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(31)； 6-氯-4-(4-(4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(32)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(2-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(33)； 6-氯-4-(4-(3-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(34)； 6-氯-4-(4-(2-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(35)； 6-氯-4-(4-(4-氟-2-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(36)； 6-氯-4-(4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(37)； 6-氯-4-(4-(3-氯-4-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(38)； 6-氯-4-(4-(4-氯-3-甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(39)； 6-氯-4-(4-(3-氯-4-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(40)； 6-氯-4-(4-(2-氯-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(41)； 6-氯-4-(4-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(42)； 6-氯-4-(4-(2-氰基苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(43)； 6-氯-4-(4-(2-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(44)； 6-氯-4-(4-(3-氟苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(45)； 6-氯-1-甲基-2-側氧基-4-(4-苯氧基哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(46)； 6-溴-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(47)； 6-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(48)； 1-甲基-2,6-二側氧基-4-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2,5,6-四氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(49)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(50)； 5-甲基-7-硝基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(51)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(52)； 4-(4-(4-(三級丁基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫喹啉-6-甲腈(53)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(54)； 8-(4-(4-苯甲基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(55)； 8-(4-(4-丁基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(56)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(57)； 8-(4-(4-環戊基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(58)； 8-(4-(4-環丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(59)； 8-(4-(4-異丙基-3-甲基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(60)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-((5,6,7,8-四氫萘-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(61)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-戊基苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(62)； 8-(4-(4-環己基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(63)； 8-(4-(4-(2-環己基丙-2-基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(64)； 8-(4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(65)； 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(66)； 8-(4-((5-氯吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(67)； 8-(4-((6-(三級丁基)嗒𠯤-3-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(68)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(喹㗁啉-2-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(69)； 8-(4-((2,6-二甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(70)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(喹唑啉-4-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(71)； 5-甲基-8-(4-((2-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(72)； 8-(4-((7-氯-4-甲氧基喹啉-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(73)； 8-(4-((1,7-㖠啶-8-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(74)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-(酞𠯤-1-基氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(75)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(76)； 5-甲基-6-側氧基-8-(4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(77)； 8-(4-((2-異丙基-6-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(78)； (+/-)6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(79)； 6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(80)； 6-氰基-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,5-㖠啶-2(1H)-酮(81)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(82-84)； 8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(85-87)； 8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(88-90)； 8-((3R,4R)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(91-93)； 8-((3R,4R)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(94-96)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(97-99)； 8-((3R,4R)-4-(4-環戊基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(100-102)； 8-((3R,4R)-4-(3,4-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(103-105)； 8-((3R,4R)-4-(4-環己基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(106)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(107-109)； 8-((3R,4R)-4-(4-乙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(110)； 8-((3R,4R)-4-(4-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(111)； 8-((3R,4R)-4-(2-氟-4-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(112)； 8-((3R,4R)-4-(2,4-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(113-115)； 8-((3R,4R)-4-(4-氟-2-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(116-118)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(119-121)； 8-((3R,4R)-4-(3-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(122)； 8-((3R,4R)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(123)； 8-((3R,4R)-4-(2-氟-6-(三氟甲基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(124)； 8-((3R,4R)-4-(2,6-二氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(125-127)； 8-((3R,4R)-4-(4-氟苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(128-130)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(2,4,6-三氟苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(131)； 8-((3R,4R)-4-((3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]二氧呯-6-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(132)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(間甲苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(136)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(137-139)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(140-142)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(143-145)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(146-148)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(149-151)； 8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(152-154)； 8-((3R,4R)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(155-157)； 8-((3R,4R)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(158-160)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-異丙氧基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(161)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(162-163)； 8-((3R,4S)-3-乙基-4-(3-異丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(164)； 8-((3R,4S)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(165-167)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(169-171)； 8-((3R,4S)-4-(4-(三級丁氧基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(172-174)； 8-((3R,4S)-4-(4-(三級丁基)苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(175)； 8-((3R,4S)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(176-178)； 8-((3R,4S)-4-(3-環丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(179-181)； 8-((3R,4S)-4-(4-異丙基苯氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(182-184)； (+/-) 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺(185)； (+/-) 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(186)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(187)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(188)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(189-191)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(192-194)； 8-((3R,4R)-3-乙基-4-(4-氟-3-丙基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(195)； 8-((3R,4R)-4-(3-(三級丁基)苯氧基)-3-乙基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(196-198)； 8-((3R,4R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(199-201)； 8-((3R,4S)-3-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(202-204)； 8-((3R,4S)-4-((5-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(205-207)； 8-((3R,4S)-4-((5-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(208-210)； 8-((3R,4S)-4-((4-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(211-213)； 8-((3R,4S)-4-((6-異丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(214-216)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-(嘧啶-2-基氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(217)； 8-((3R,4S)-4-((4-甲氧基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(218)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-丙基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(219)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((2-甲基嘧啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(220)； 8-((3R,4S)-4-((5-乙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(221)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(222)； 8-((3R,4S)-4-((5-環丙基嘧啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(223)； 8-((3R,4S)-4-((5-環丙基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(224)； 5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(225-227)； (+/-) 8-((3R,4S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(228)； (+/-) 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(229)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(230)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(231)； (+/-)8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(232)； 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(233)； 8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3,3-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(234)； (+/-)5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(235)； (+/-)5-甲基-8-((3R,4S)-3-甲基-4-((4-(三氟甲氧基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲醯胺(236)； 7-氟-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(237)； 7-氯-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(238)； 7-溴-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(239)； 7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(240)； 7-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基-6-側氧基-8-(4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(241)； (+/-) 6-溴-1-甲基-4-((3R,4R)-3-甲基-4-(4-(三級戊基)苯氧基)哌啶-1-基)-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-3-甲腈(242)； 8-((2S,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(243及246)； 8-((2R,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(244-245)； 4-((2R,5S)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(248-249)； 4-((2S,5R)-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(247及250)； 4-((2R,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(251及253)； 4-((2S,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(252及254)； 4-((2R,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(256-257)； 8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(255及258)； (±)-反式-8-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(259-260)； (±)-反式-8-(3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(261-262)； 8-((3R,4R)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(263-264)； (±)-順式-8-(3-氟-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(265-266)； (±)-反式-8-(3-羥基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(267-268)； (±)-反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-甲氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(269-270)； (±)-反式-6-氯-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(271-272)； (±)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(273-274)； 6-氯-4-((3R,4R)-3-甲氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(275)； (±)-反式-4-(3-羥基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(276-277)； 4-((3R,4R)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(278-279)； 8-((2S,5R)-4-((5-甲氧基吡啶-2-基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(280-281)； N-((2S,5R)-1-(6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-2,5-二甲基哌啶-4-基)-4-氟-N-甲基苯甲醯胺(282-283) N-(1-(6-氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-4-氟-N-甲基苯甲醯胺(284-287)； N-(1-(3,6-二氰基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-1,5-㖠啶-4-基)-3-甲基哌啶-4-基)-N-甲基-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(288-293)； 8-((2S,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(294)； 8-((2R,4S,5S)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(295)； 8-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(296)； 8-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(297)； 8-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(298)； 8-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(299)； 6-氯-4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(300)； 4-((2S,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(301)； 6-氯-4-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(302)； 4-((2R,4R,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(303)； 6-氯-4-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(304)； 4-((2R,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(305)； 6-氯-4-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(306)； 4-((2S,4S,5R)-5-乙基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2-甲基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(307)； 8-((2S,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(308)； 8-((2R,4S,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(309)； 8-((2R,4R,5R)-5-乙基-2-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(310)； 8-((2R,4S,5R)-2,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(311)； 8-((2S,4R,5S)-2,5-二甲基-4-(對甲苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(312)； 8-((2S,4R,5S)-4-(3-氯苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(313)； 8-((2S,4R,5S)-4-(3-氰基苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(314)； 8-((2S,4R,5S)-4-(4-氟苯氧基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(315)； 8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-((4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(316A)； 8-(2,5)-二甲基-4-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(316-319)； 8-((2S,5S)-2,5-二甲基-4-(甲基(3-(三氟甲基)苯基)胺基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(320-321)； 8-(4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(322-325)； 8-(4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(326-328)； 8-(4-((4,4-二氟環己基)(甲基)胺基)-3-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2,7-二甲腈(329-330)； 8-((2S,5R)-4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(331-332)； 8-((2S,5S)-4-((4-氟苯甲基)(甲基)胺基)-2,5-二甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(333-334)； 8-((2S ,5S )-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-2,4,5-三甲基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(335-336)； 5-甲基-6-側氧基-8-((2S,5S)-2,4,5-三甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(337-338)； 1-甲基-2-側氧基-4-((2S,5S)-2,4,5-三甲基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(339-340)； 反式-8-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(341-342)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(343-344)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(2-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(345-346)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-異丙氧基苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(347-348)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(349-350)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(351-352)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(甲磺醯基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(353-354)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((2-甲基苯并[d]㗁唑-5-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(355-356)； 8-((3S,4S)-4-(4-氯-3-氟苯氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(357-358)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(359-362)； 反式-8-(3-乙氧基-4-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(363-364)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(365-366)； 反式-8-(3-乙氧基-4-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(367-368)； 順式-8-(3-乙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(369-370)； 順式-8-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(371-372)； 反式-8-4-(苯并[d]噻唑-2-基氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(373-374)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((6-異丙氧基嗒𠯤-3-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(375-376)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡𠯤-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(377-378)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基嘧啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(379-380)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((3-(三氟甲基)苯甲基)氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(381-382)； 8-((3S,4S)-3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)甲氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(383-384)； 8-((3R,4R)-3-(2-(二甲胺基)乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(385-386)； 8-((3R,4R)-3-(環丙基甲氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(387-388)； 8-((3R,4R)-3-(2-甲氧基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(389-390)； 5-甲基-8-((3R,4R)-3-(2-N-𠰌啉基乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(391-392)； 5-甲基-6-側氧基-8-((3R,4R)-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(393-394)； 反式-8-(3-異丙氧基-4-(3-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(395-396)； 反式-8-(4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)-3-乙氧基哌啶-1-基)-5-甲基-6-側氧基-5,6-二氫-1,5-㖠啶-2-甲腈(397-398)； (±)-反式-6-氯-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-2(1H)-酮(399)； 反式-4-(3-乙氧基-4-((5-異丙氧基吡啶-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(400-401)； 反式-4-(3-乙氧基-4-苯氧基哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(402-403)；或 4-((3S,4S)-3-乙氧基-4-(4-(三氟甲基)苯氧基)哌啶-1-基)-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-甲腈(404-405)。
  12. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至11中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體；及醫藥學上可接受之載劑。
  13. 一種如請求項1至11中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體之用途，其用於製造用於治療癌症或病毒感染之藥物。
  14. 如請求項13之用途，其中該癌症係選自結腸癌、胰臟癌、乳癌、前列腺癌、肺癌、卵巢癌、子宮頸癌、腎癌、頭頸癌、淋巴瘤、白血病及黑色素瘤。
  15. 一種如請求項1至11中任一項之化合物或其鹽、水合物、立體異構體或互變異構體之用途，其用於製造用於抑制至少一種選自二醯基甘油激酶α (diacylglycerol kinase alpha；DGKα)及二醯基甘油激酶ζ (diacylglycerol kinase zeta；DGKζ)之二醯基甘油激酶之活性的藥物。
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CR20220303A (es) 2019-12-24 2022-09-02 Gilead Sciences Inc Compuestos moduladores de la diacilglicerol quinasa
EP4359389A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222439A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222277A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
AU2022297367A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
WO2023122778A1 (en) * 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023150186A1 (en) * 2022-02-01 2023-08-10 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
WO2023165525A1 (en) * 2022-03-01 2023-09-07 Insilico Medicine Ip Limited Diacylglycerol kinase (dgk) alpha inhibitors and uses thereof
CN118871438A (zh) 2022-03-01 2024-10-29 英矽智能科技知识产权有限公司 二酰基甘油激酶(DGK)α抑制剂及其用途
WO2023184327A1 (en) * 2022-03-31 2023-10-05 InventisBio Co., Ltd. Kinase inhibitors, preparation methods and uses thereof
WO2024137865A1 (en) * 2022-12-22 2024-06-27 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
WO2024160277A1 (en) * 2023-02-02 2024-08-08 Beigene, Ltd. Heterocyclic compounds
WO2024165468A1 (en) 2023-02-06 2024-08-15 Bayer Aktiengesellschaft Combination of ccr8 antibodies with dgk inhibitors in the treatment of cancer

Family Cites Families (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4324893A (en) 1979-04-18 1982-04-13 American Home Products Corporation 4-Amino-3-carboxy or cyano-1,2-dihydro-2-oxo-1,8-naphthyridine derivatives
UY27304A1 (es) 2001-05-24 2002-12-31 Avanir Pharmaceuticals Inhibidores del factor inhibidor de la migración de los macrófagos y métodos para su identificación
RU2005102004A (ru) 2002-06-27 2005-10-20 Шеринг Акциенгезельшафт (De) Замещенные хинолины как антагонисты рецептора ccr5
GB0230018D0 (en) 2002-12-23 2003-01-29 Syngenta Ltd Fungicides
TW200418829A (en) 2003-02-14 2004-10-01 Avanir Pharmaceutics Inhibitors of macrophage migration inhibitory factor and methods for identifying the same
TWI289141B (en) 2003-03-11 2007-11-01 Hoffmann La Roche F. Ag. Quinolinone derivatives and uses thereof
JP2006521400A (ja) 2003-03-26 2006-09-21 バイエル・フアーマシユーチカルズ・コーポレーシヨン 糖尿病及び関連障害の処置のための化合物及びそれらの使用
GB0316915D0 (en) 2003-07-18 2003-08-20 Glaxo Group Ltd Compounds
WO2005009967A2 (en) 2003-07-22 2005-02-03 Janssen Pharmaceutica, N.V. Quinolinone derivatives as inhibitors of c-fms kinase
WO2005021546A1 (en) 2003-08-22 2005-03-10 Avanir Pharmaceuticals Substituted naphthyridine derivatives as inhibitors of macrophage migration inhibitory factor and their use in the treatment of human diseases
US7381401B2 (en) * 2004-01-08 2008-06-03 The University Of Chicago T cell anergy is reversed by active Ras and regulated by diacylglycerol kinase
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
DK1866339T3 (da) 2005-03-25 2013-09-02 Gitr Inc GTR-bindende molekyler og anvendelser heraf
ME02461B (me) 2005-05-10 2017-02-20 Incyte Holdings Corp Modulatori indoleamina 2,3-dioksigenaze i metode za upotrebu istih
EP1907424B1 (en) 2005-07-01 2015-07-29 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
ES2540561T3 (es) 2005-12-20 2015-07-10 Incyte Corporation N-hidroxiamidinoheterociclos como moduladores de indolamina 2,3-dioxigenasa
GB0605689D0 (en) 2006-03-21 2006-05-03 Novartis Ag Organic compounds
JP2007308402A (ja) 2006-05-17 2007-11-29 Sumitomo Chemical Co Ltd シンナモイル化合物及びその用途
JP2007308441A (ja) 2006-05-22 2007-11-29 Sumitomo Chemical Co Ltd 含複素環化合物及びその用途
EP2064207B1 (en) 2006-09-19 2013-11-06 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
CL2007002650A1 (es) 2006-09-19 2008-02-08 Incyte Corp Compuestos derivados de heterociclo n-hidroxiamino; composicion farmaceutica, util para tratar cancer, infecciones virales y desordenes neurodegenerativos entre otras.
JP2010504945A (ja) 2006-09-29 2010-02-18 テイボテク・フアーマシユーチカルズ・リミテツド キノリノン誘導体
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
EP3124046B1 (en) 2007-07-12 2019-12-25 GITR, Inc. Combination therapies employing gitr binding molecules
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
CN101932325B (zh) 2007-11-30 2014-05-28 新联基因公司 Ido抑制剂
WO2009156652A1 (fr) 2008-05-29 2009-12-30 Saint-Gobain Centre De Recherches Et D'etudes Europeen Structure en nid d'abeille a base de titanate d'aluminium
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
US20110281908A1 (en) 2008-10-06 2011-11-17 Emory University Aminoquinoline Derived Heat Shock Protein 90 Inhibitors, Methods Of Preparing Same, And Methods For Their Use
KR20200047793A (ko) 2008-12-09 2020-05-07 제넨테크, 인크. 항-ｐｄ-ｌ１ 항체 및 ｔ 세포 기능을 향상시키기 위한 그의 용도
WO2010088414A2 (en) 2009-01-28 2010-08-05 Emory University Subunit selective nmda receptor potentiators for the treatment of neurological conditions
EP2473531A4 (en) 2009-09-03 2013-05-01 Merck Sharp & Dohme ANTI-GITRANT ANTIBODIES
WO2011056652A1 (en) 2009-10-28 2011-05-12 Newlink Genetics Imidazole derivatives as ido inhibitors
PE20121398A1 (es) 2009-12-10 2012-10-26 Hoffmann La Roche Anticuerpos ligantes preferentemente al dominio extracelular 4 de csf1r humano
PT2542256T (pt) 2010-03-04 2019-09-05 Macrogenics Inc Anticorpos reativos com b7-h3, fragmentos imunologicamente ativos dos mesmos e sua utilização
CN102918060B (zh) 2010-03-05 2016-04-06 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗人csf-1r抗体及其用途
RU2617966C2 (ru) 2010-03-05 2017-04-28 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Антитела против csf-1r человека и их применение
NZ712765A (en) 2010-05-04 2017-01-27 Five Prime Therapeutics Inc Antibodies that bind csf1r
EP2592933B1 (en) 2010-07-16 2017-04-05 Anderson Gaweco Mif inhibitors and their uses
HUE041958T2 (hu) 2010-09-09 2019-06-28 Pfizer 4-IBB-t kötõ molekulák
EP3354640A3 (en) 2011-04-13 2018-10-31 Innovimmune Biotherapeutics, Inc. Mif inhibitors and their uses
NO2694640T3 (zh) 2011-04-15 2018-03-17
HUE037651T2 (hu) 2011-04-20 2018-09-28 Medimmune Llc B7-Hl-et és PD-l-et kötõ ellenanyagok és más molekulák
RS61033B1 (sr) 2011-11-28 2020-12-31 Merck Patent Gmbh Antitela na pd-l1 i njihova upotreba
CA2853889A1 (en) 2011-12-15 2013-06-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against human csf-1r and uses thereof
CA2861122A1 (en) 2012-02-06 2013-08-15 Genentech, Inc. Compositions and methods for using csf1r inhibitors
AR089939A1 (es) 2012-02-09 2014-10-01 Glenmark Pharmaceuticals Sa COMPUESTOS BICICLICOS COMO INHIBIDORES DE mPGES-1
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
RU2670743C9 (ru) 2012-05-11 2018-12-19 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Способы лечения состояний антителами, которые связывают рецептор колониестимулирующего фактора 1 (csf1r)
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
KR20200140400A (ko) 2012-08-31 2020-12-15 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 집락 자극 인자 1 수용체(csf1r)에 결합하는 항체로 질환을 치료하는 방법
US9937205B2 (en) 2012-09-04 2018-04-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Inhibition of diacylglycerol kinase to augment adoptive T cell transfer
EA201792214A1 (ru) 2015-04-10 2018-01-31 Араксис Фарма Ллк Соединения замещенного хиназолина
ES2883285T3 (es) 2015-12-17 2021-12-07 Merck Patent Gmbh Antagonistas de tlr7/8 y sus usos
US10946020B2 (en) 2016-04-06 2021-03-16 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for treating cancer
NZ754994A (en) 2016-12-22 2022-12-23 Amgen Inc Benzisothiazole, isothiazolo[3,4-b]pyridine, quinazoline, phthalazine, pyrido[2,3-d]pyridazine and pyrido[2,3-d]pyrimidine derivatives as kras g12c inhibitors for treating lung, pancreatic or colorectal cancer
GB201700814D0 (en) 2017-01-17 2017-03-01 Liverpool School Tropical Medicine Compounds
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
US20200231551A1 (en) 2017-06-26 2020-07-23 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and uses thereof
EP3689876A4 (en) 2017-09-28 2021-05-05 Nanjing Transthera Biosciences Co. Ltd. PDE9 INHIBITOR AND ITS USE
AU2019291794B2 (en) * 2018-06-27 2022-06-16 Bristol-Myers Squibb Company Substituted naphthyridinone compounds useful as T cell activators
HRP20230627T1 (hr) 2018-06-27 2023-09-29 Bristol-Myers Squibb Company Spojevi naftiridinona korisni kao aktivatori t ćelija
CN111471059B (zh) * 2019-01-23 2022-12-02 药捷安康(南京)科技股份有限公司 Pde9抑制剂及其用途
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
CA3162767A1 (en) 2019-11-28 2021-06-03 Bayer Aktiengesellschaft Substituted aminoquinolones as dgkalpha inhibitors for immune activation
BR112022010112A2 (pt) 2019-11-28 2022-09-06 Bayer Ag Aminoquinolonas substituídas como inibidores de dgkalfa para ativação imunológica
EP4065584A1 (en) 2019-11-28 2022-10-05 Bayer Aktiengesellschaft Substituted aminoquinolones as dgkalpha inhibitors for immune activation

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