TW201618785A - 使用ｅｒｋ抑制劑的治療方法 - Google Patents

Abstract

本發明提供治療、穩定或減輕與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法。

Description

使用ERK抑制劑的治療方法 相關申請案之交叉參考

本申請案主張2014年8月13日申請之美國臨時申請案序號62/037,091之優先權，該案之全文以引用的方式併入本文中。

本發明提供治療、穩定或減輕與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法。

近年來，通過更佳地明瞭與疾病相關聯的酵素及其他生物分子的結構，已極大地促進了新穎治療劑的研究。已成為廣泛研究之主體之一種重要類別酵素係蛋白激酶。

蛋白激酶構成負責控制細胞內各種訊號轉導過程之結構相關酵素之龐大家族。蛋白激酶因其結構及催化功能之保守而被認為演化自共同祖先基因。幾乎所有激酶含有類似250至300個胺基酸催化域。該等激酶可以其磷酸化的受質歸類成家族(例如，蛋白酪胺酸、蛋白絲胺酸/蘇胺酸、脂質等)。

涉及腫瘤生長、進展及轉移的過程係藉由癌細胞中經活化之訊號路徑介導。ERK路徑在藉由轉接來自配體結合細胞表面酪胺酸激酶受體(例如erbB家族、PDGF、FGF及VEGF受體酪胺酸激酶)之細胞外訊號來調節哺乳動物細胞生長中具有重要作用。ERK路徑之活化係經由開始於Ras活化之級聯磷酸化事件。Ras活化導致Raf(絲胺酸-蘇胺 酸激酶)的募集及活化。經活化之Raf隨後使MEK1/2磷酸化及活化，隨後使ERK1及ERK2中之一者或兩者磷酸化及活化。當ERK1及ERK2中之一者或兩者經活化時，其使若干涉及許多細胞事件(包括細胞骨架變化及轉錄活化)之下游標靶磷酸化。ERK/MAPK路徑係細胞增殖最重要的路徑之一，且人類腫瘤資料表明ERK/MAPK路徑在許多腫瘤中被頻繁活化。Ras基因(其係ERK1及ERK2中之一者或兩者之上游)在若干癌症包括(但不限於)結腸直腸腫瘤、黑色素腫瘤、肺腫瘤、乳房腫瘤及胰臟腫瘤中突變。在許多人類腫瘤中，高Ras活性伴隨高ERK活性。另外，BRAF(Raf家族之一種絲胺酸-蘇胺酸激酶)的突變與高RAF、MEK及ERK激酶活性相關聯。具有最頻繁突變之BRAF之腫瘤類型包括黑色素瘤(60%)、甲狀腺癌(大於40%)及結腸直腸癌。

許多疾病與由上述蛋白質激酶介導之事件觸發之異常細胞反應相關聯。因此，仍需要找到可用作治療劑之蛋白激酶抑制劑。

本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法。在一些態樣中，本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需要之患者投與一種醫藥上可接受之組合物，該組合物包含N-(2-((2-((2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-5-甲基苯基)丙烯醯胺 1或其醫藥上可接受之鹽：

化合物1 N-(2-((2-((2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-5-甲基苯基)丙烯醯胺在於2014年2月7日申請之且於2014年8月14日以WO2014/124230公開之PCT專利申請案序號PCT/US14/15256(在文中稱作「‘230公開案」，該案之全文以引用之方式併入本文中)中命名為化合物編號I-90。化合物1之合成詳細描述於‘230公開案之實例94中。化合物1在各種證實共價不可逆地抑制ERK1及ERK2激酶中之一者或兩者之分析及治療模型中具活性(參見，例如，該‘230公開案之表A)。因此，化合物1或其醫藥上可接受之鹽可用於治療一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者之活性相關聯之疾患，如下文中詳細描述。

例如，在一些實施例中，本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽(下圖所繪)之醫藥上可接受之組合物：

在一些實施例中，本發明提供治療、穩定或減輕增生性疾患之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。例如，在一些實施例中，本發明提供治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。

在一些實施例中，該癌症係局部晚期癌症。在一些實施例中， 該癌症係轉移性。在一些實施例中，該癌症係復發性(recurring)。在一些實施例中，該癌症係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係抗拒RAF抑制劑之癌症。在一些該等實施例中，該抗拒RAF抑制劑之癌症係抗拒BRAF抑制劑之癌症。

在一些實施例中，該癌症係抗拒MEK抑制劑之癌症。

在一些實施例中，該癌症係MAPK路徑介導之癌症。

在一些實施例中，該癌症係BRAF突變型癌症。在一些實施例中，該BRAF突變型癌症係BRAF^V600突變型癌症，例如BRAF^V600E、BRAF^V600K、BRAF^V600R及BRAF^V600D。

在一些實施例中，該癌症係RAS突變型癌症。在一些實施例中，該RAS突變涉及密碼子12、13或61。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係NRAS突變型癌症，包括(但不限於)NRAS^Q61R、NRAS^Q61K、NRAS^Q61L或NRAS^Q61H。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係HRAS突變型癌症，包括(但不限於)HRAS^G12V、HRAS^Q61R及HRAS^G12S。

在一些實施例中，該癌症係選自多發性骨髓瘤、乳房、卵巢、子宮頸、前列腺、睪丸、生殖泌尿道、食道、喉、神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、胃(stomach)(胃(gastric))、皮膚、角質棘皮瘤、肺、表皮様癌、大細胞癌、小細胞癌、肺、骨、結腸、甲狀腺、腺瘤、胰臟、腺癌、甲狀腺、濾泡性癌、未分化癌、乳突狀癌、精細胞瘤、黑色素瘤(包括葡萄膜黑色素瘤)肉瘤、膀胱癌、肝臟癌(例如，肝細胞癌(HCC)及膽道癌(biliary passage))、腎臟癌、骨髓樣疾病、淋巴樣疾病、霍奇金氏病、多毛細胞、頰腔及咽(口部)、唇、舌、口、咽、小腸、結腸直腸癌、大腸、直腸、大腦及中樞神經系統、子宮內膜癌、多發性骨髓瘤(MM)、前列腺、急性骨髓性白血病(AML)及白 血病。在一些該等實施例中，該癌症係復發性(relapsed)。在一些實施例中，該癌症係頑固性。在一些實施例中，該癌症係局部晚期。在一些實施例中，該癌症係轉移性。

在一些實施例中，該癌症係選自癌、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病。在一些實施例中，肉瘤係軟組織肉瘤。在一些實施例中，淋巴瘤係非霍奇金氏淋巴瘤。在一些實施例中，淋巴瘤係大細胞免疫母細胞淋巴瘤。在一些實施例中，該癌症係選自腺癌；腺瘤；腎上腺皮質癌；膀胱癌；骨癌；腦癌；乳癌；頰腔癌；子宮頸癌；結腸癌；結腸直腸癌；子宮內膜癌或子宮癌；表皮様癌；食道癌；眼癌；濾泡性癌；膽囊癌；前列腺、AML、多發性骨髓瘤(MM)、胃腸道癌諸如例如胃腸道基質腫瘤；生殖泌尿道癌症；神經膠質母細胞瘤；多毛細胞癌；各種類型的頭頸癌；肝癌；肝細胞癌症；霍奇金氏病；角質棘皮瘤；腎臟癌；大細胞癌；大腸癌；喉癌；肝臟癌；肺癌，諸如例如肺腺癌、肺退行性癌、乳突狀肺腺癌、小細胞肺癌、肺鱗狀癌、非小細胞肺癌；黑色素瘤及非黑色素瘤皮膚癌；淋巴疾病；骨髓增生疾病，諸如例如，真性紅細胞增多症、原發性血小板增多症、慢性自發性骨髓纖維化、合併骨髓纖維化之骨髓化生、慢性骨髓樣白血病(CML)、慢性骨髓單核細胞性白血病、慢性嗜酸性白血病、慢性淋巴球性白血病(CLL)、嗜酸性紅細胞增多症候群、全身性肥大細胞疾病、非典型CML、AML或幼年型骨髓單核細胞性白血病；漿細胞瘤；多發性骨髓瘤；神經母細胞瘤；卵巢癌；乳突狀癌；胰臟癌；腹膜癌；前列腺癌，包括良性前列腺增生；直腸癌；唾液腺癌；肉瘤；精細胞瘤；鱗狀細胞癌；小細胞癌；小腸癌；胃癌；睪丸癌；甲狀腺癌；未分化癌；及陰門癌症。在一些該等實施例中，該癌症係復發性。在一些實施例中，該癌症係頑固性。在一些實施例中，該癌症係局部晚期。在一些實施例中，該癌症係轉移性。

在一些實施例中，該癌症係選自黑色素瘤、胰臟癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肺癌(例如，非小細胞肺癌)、乳癌、子宮內膜癌、前列腺癌、卵巢癌、肝細胞癌(HCC)、多發性骨髓瘤(MM)及白血病。在一些實施例中，白血病係急性白血病。在一些實施例中，白血病係急性骨髓樣白血病。在一些實施例中，白血病係急性淋巴母細胞白血病。

在一些實施例中，該癌症係選自黑色素瘤、結腸直腸癌、肺癌或胰臟癌。

在一些實施例中，該癌症係黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係葡萄膜黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係皮膚黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係局部晚期。在一些實施例中，該黑色素瘤係轉移性。在一些實施例中，該黑色素瘤係復發性。在一些實施例中，該黑色素瘤係BRAF^v600突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係RAS突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係NRAS突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係KRAS、NRAS或BRAF之野生型。在一些實施例中，該黑色素瘤係抗拒BRAF抑制劑(例如，抗拒威羅菲尼(Vemurfenib)、抗拒達拉菲尼(dabrafenib)、抗拒恩卡拉菲尼(encorafenib)等)之黑色素瘤。在一些實施例中，該癌症係VemR(亦即，抗拒威羅菲尼)之BRAF突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係復發性。在一些實施例中，該黑色素瘤係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係局部晚期。在一些實施例中，該結腸直腸癌係轉移性。在一些實施例中，該結腸直腸癌係BRAF突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係BRAF^v600突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係RAS突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該 結腸直腸癌係KRAS突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係復發性。在一些實施例中，該結腸直腸癌係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係胰臟癌。在一些實施例中，該胰臟癌係局部晚期。在一些實施例中，該胰臟癌係轉移性。在一些實施例中，該胰臟癌係胰臟導管腺癌(PDAC)。在一些實施例中，該胰臟癌係RAS突變型胰臟癌。在一些實施例中，該胰臟癌係KRAS突變型胰臟癌。在一些實施例中，該RAS突變型胰臟癌係KRAS突變型胰臟癌，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該胰臟癌係復發性。在一些實施例中，該胰臟癌係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係局部晚期。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係轉移性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係復發性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係BRAF突變型乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係BRAF^v600突變型乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係復發性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係頑固性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺癌包括未分化或去分化組織組織學。

在一些實施例中，該癌症係肺癌。在一些實施例中，該肺癌係非小細胞肺癌(NSCLC)。在一些實施例中，該肺癌係局部晚期。在一些實施例中，該肺癌係轉移性。在一些實施例中，該肺癌係RAS突變型肺癌。在一些實施例中，該肺癌係KRAS突變型肺癌。在一些實施例中，該RAS突變型肺癌係KRAS突變型肺癌，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該肺癌係復發性。在一些實施例中，該肺癌係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係白血病。在一些實施例中，白血病 係慢性白血病。在一些實施例中，白血病係慢性骨髓樣白血病。在一些實施例中，白血病係急性白血病。在一些實施例中，白血病係急性骨髓樣白血病(AML)。在一些實施例中，白血病係急性單核細胞性白血病(AMoL或AML-M5)。在一些實施例中，白血病係急性淋巴母細胞白血病(ALL)。在一些實施例中，白血病係急性T細胞白血病。在一些實施例中，白血病係骨髓單核母細胞白血病。在一些實施例中，白血病係人類B細胞前體白血病。在一些實施例中，白血病具有Flt3突變或重排。在一些實施例中，該白血病係復發性。在一些實施例中，該白血病係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係CNS癌症，例如CNS腫瘤。在一些實施例中，CNS腫瘤係神經膠質母細胞瘤或多形性神經膠質母細胞瘤(GBM)。在一些實施例中，本發明關於一種治療胃(stomach)(胃(gastric))及食道腫瘤及癌症之方法。

在一些實施例中，該癌症係多發性骨髓瘤(MM)。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係局部晚期。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係轉移性。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係RAS突變型多發性骨髓瘤。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係KRAS突變型多發性骨髓瘤。在一些實施例中，該RAS突變型多發性骨髓瘤係KRAS突變型多發性骨髓瘤，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係復發性。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係頑固性。

在一些實施例中，該癌症係肝細胞癌(HCC)。在一些實施例中，該HCC係局部晚期。在一些實施例中，該HCC係轉移性。在一些實施例中，該癌症係RAS突變型HCC。在一些實施例中，該癌症係KRAS突變型HCC。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一 些實施例中，該肝細胞癌係復發性。在一些實施例中，該肝細胞癌係頑固性。

在一些實施例中，所提供之方法包括對患者經口投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，所提供之方法包括對患者經口投與包含化合物1之磷酸鹽之醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該等組合物係膠囊調配物。

一般而言，所提供之方法包括投與一種組合物，該組合物包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽及一或多種醫藥上可接受之賦形劑諸如例如一或多種增溶劑、表面活性劑/潤濕劑、分散劑、填充劑、崩解劑、助滑劑及潤滑劑。在一些實施例中，所提供之方法包括投與一種組合物，該組合物包含化合物1之磷酸鹽及一或多種醫藥上可接受之賦形劑諸如例如一或多種增溶劑、表面活性劑/潤濕劑、分散劑、填充劑、崩解劑、助滑劑及潤滑劑。

在一些實施例中，本發明亦提供對有此需要之患者投與化合物1或其醫藥上可接受之鹽之投藥計劃及方案。在一些實施例中，本發明亦提供對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之投藥計劃及方案。

圖1描繪化合物1之磷酸鹽之A型之XRPD圖案。

圖2描繪化合物1之磷酸鹽之B型之XRPD圖案。

圖3描繪化合物1之磷酸鹽之C型之XRPD圖案。

圖4描繪化合物1之磷酸鹽之D型之XRPD圖案。

圖5以圖形描繪當用化合物1之磷酸鹽治療時LOX IMVI(黑色素瘤)腫瘤異種移植之退化。在腫瘤細胞植入後第13天開始分別投與60.5mg/kg及121mg/kg的劑量，連續7天，在第20天觀察到腫瘤體積平均減小93%至95%(與媒劑對照相比)。

圖6以圖形描繪化合物1對HCT-116(KRAS^G13D突變體CRC)異種移 植之活體內抑制。化合物1之腫瘤生長抑制自在12.5mg/kg BID下之57%(與媒劑對照相比)至在100mg/kg QD劑量下之77%抑制變化。治療動物連續21天。

圖7描繪化合物1對抗三種細胞系之活體外分析。頂區，左：Panc-1(a.k.a PANC-1)胰臟癌細胞；頂區，右：MIA PaCa-2(a.k.a.Mia PaCa,a.k.a.MiaPaCa)胰臟癌細胞；及底區：HS294T黑色素瘤。

圖8描繪階段總體研究設計。

圖9描繪(a)化合物1對抗HCT-116結腸直腸癌細胞之第一活體外分析；及(b)化合物1對抗HCT-116結腸直腸癌細胞之第二活體外分析。 如圖9a中所示，化合物1在1321.30nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。如圖9b中所示，化合物1在1169.50nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖10描繪化合物1對抗KRAS突變體q61H NCI-H460肺癌細胞之活體外分析。如圖10中所示，化合物1在6839.12nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖11描繪化合物1對抗KRAS未知NCI-H522肺癌細胞之活體外分析。如圖11中所示，化合物1在2338.84nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖12描繪化合物1對抗p.G469A NCI-H1755肺癌細胞之活體外分析。如圖12中所示，化合物1在722.77nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖13描繪化合物1對抗KRAS突變體p.G12V NCI-H727肺癌細胞之活體外分析。如圖13中所示，化合物1在762.08nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖14描繪化合物1對抗KRAS未知NCI-H522肺癌細胞之活體外分析。如圖14中所示，化合物1在3006.08nM下誘導細胞死亡(細胞毒性) 效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖15描繪(a)化合物1對抗Mia PaCa-2胰臟癌細胞之第二活體外分析；及(b)化合物1對抗Mia PaCa-2胰臟癌細胞之第三活體外分析。如圖15a中所示，化合物1在1238.80nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。如圖9b中所示，化合物1在1534.62nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖16描繪化合物1對抗HS294T黑色素瘤細胞之第二活體外分析。如圖16中所示，化合物1在1202.26nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖17描繪化合物1對細胞增殖之效應。如圖17(左側圖)中所示，化合物1抑制NRAS及BRAF兩種突變體抗拒威羅菲尼之黑色素瘤細胞系之生長，且平均GI50為290nM。亦如圖17(右側圖)中所示，化合物1在10μM下誘導所有NRAS及BRAF突變體抗拒威羅菲尼之黑色素瘤細胞系(除細胞系4(其中該效應係細胞生長抑制性)以外)中之細胞死亡。

定義

如文中所使用，「與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患」意指其中已知或懷疑ERK1及ERK2中之一者或兩者或其突變體扮演重要角色之任何疾病或其他有害病症。如文中進一步所述，一般技術者將知曉ERK1及ERK2係MAPK路徑內之下游標靶。因此，不希望受任何特定理論約束，與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患包括彼等其中已知或懷疑MAPK路徑在任何水平(Ras-Raf-Mek-ERK)下之活化(包括ERK1及ERK2中之一者或兩者以及MAPK路徑中之位於ERK上游之其他節點(例如Ras、Raf及Mek))扮演重要角色者。因此，本發明之另一實施例係關於預防、治療、穩定或減輕一或多種其中已知或懷疑ERK1及ERK2中之一者或兩者或其突變體扮演重 要角色之疾病之嚴重度或進展。在一些實施例中，本發明係關於一種治療或減輕增生性疾患之嚴重度之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1或其醫藥上可接受之鹽或其醫藥上可接受之組合物。

如文中所使用，術語「不可逆」或「不可逆抑制劑」係指能夠以實質上不可逆方式共價結合至標靶蛋白激酶之抑制劑(亦即，化合物)。亦即，可逆抑制劑能夠結合至標靶蛋白激酶(但通常不能夠與標靶蛋白激酶形成共價鍵)，及因此可變得自標靶蛋白激酶解離，而不可逆抑制劑一旦已發生共價鍵形成，則將實質上保持結合至標靶蛋白激酶。不可逆抑制劑通常顯示時間相依性，因此抑制程度隨抑制劑與酵素接觸的時間而增加。用於識別化合物是否作為不可逆抑制劑之方法為一般技術者已知。該等方法包括(但不限於)化合物與蛋白激酶標靶之抑制曲線之酵素動力分析；使用在抑制劑化合物之存在下經修飾之蛋白質藥物之質譜法；間歇曝露(亦稱作「清除」)實驗；及使用標記(例如放射性標記抑制劑)以顯示酵素之共價修飾以及此項技術者已知的其他方法。

如文中所使用，「治療上有效量」意指發揮所需生物反應之物質(例如，治療劑、組合物及/或調配物)量。在一些實施例中，物質之治療上有效量係當作為投藥計劃之部分投與給罹患或疑似罹患疾病、疾患及/或病症之個體時，足以治療、診斷、預防及/或延遲該疾病、疾患及/或病症之發病之量。一般技術者將知曉，物質之該有效量可取決於諸如所需生物終點、待遞送之物質、標靶細胞或組織等因素而變化。例如，調配物中以治療疾病、疾患及/或病症之化合物之有效量係緩解、改善、舒解、抑制、預防、延遲(其發病)、減輕該疾病、疾患及/或病症之一或多種症狀或特徵之嚴重度及/或減少其發病率之量。在一些實施例中，「治療上有效量」係化合物或包含化合物之組 合物之至少最小量，該量係足以治療與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之一或多種症狀。

如文中所使用，術語「個體」意指哺乳動物且包括人類及動物個體，例如家畜(例如，馬、狗、貓等)。

如文中所使用，術語「治療」係指部分或完全緩解、抑制、延遲(其發病)、預防、改善及/或舒解疾患或病症或該疾患及/或病症之一或多種症狀。如文中所使用，術語「治療」係指部分或完全緩解、抑制、延遲(其發病)、預防、改善及/或舒解疾患或病症或該疾患及/或病症之一或多種症狀，如文中所述。在一些實施例中，治療可在已發展一或多種症狀後施予。在一些實施例中，術語「治療」包括預防或阻止疾病或疾患之進展。在其他實施例中，治療可在不存在症狀之情況下施予。例如，治療可施予至症狀發病前之疑似個體(例如，鑒於症狀歷史及/或鑒於遺傳或其他疑似因素)。治療亦可在已消除症狀後繼續，例如以預防或延遲其復發。因此，在一些實施例中，術語「治療」包括預防疾病或疾患之復發(relapse或recurrence)。

如文中所使用，表述語「單位劑型」係指適用於待治療個體之本發明調配物之物理離散單元。然而，應瞭解，本發明組合物之總每天用量將由醫師在合理醫療判斷範圍內決定。用於任何特定個體或有機體之特定有效劑量水平將取決於各種因素，包括治療中之疾患及該疾患之嚴重度；所使用之特定活性劑之活性；所使用之特定組合物；該個體之年齡、體重、一般健康狀況、性別、及膳食；所使用之特定活性劑之投與時間及排洩速率；治療之持續時間；所使用之特定化合物組合使用或偶爾使用之藥物及/或額外療法；及醫學技術中熟知的類似因素。

化合物1

如上文及文中所述，在一些實施例中，本發明提供治療、穩定 或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需要之患者投與一種包含化合物1(下圖所繪)或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物：

化合物1 N-(2-((2-((2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)胺基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)胺基)-5-甲基苯基)丙烯醯胺在於2014年2月7日申請之且於2014年8月14日以WO2014/124230公開之PCT專利申請案序號PCT/US14/15256(在文中稱作「‘230公開案」，該案之全文以引用之方式併入本文中)中命名為化合物編號I-90。化合物1之合成詳細描述於‘230公開案之實例94中。化合物1在各種證實共價不可逆地抑制ERK1及ERK2激酶中之一者或兩者之分析及治療模型中具活性(參見，例如，該‘230公開案之表A)。

例如，在一些實施例中，本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽(下圖所繪)之醫藥上可接受之組合物：

本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需 要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該醫藥上可接受之組合物係口服劑型。在一些實施例中，該醫藥上可接受之組合物係調配成膠囊。用於投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物之該等方法、投藥計劃及方案更詳細描述於下文中。

治療方法

文中所述之化合物1及組合物通常可用於抑制一或多種酵素之蛋白激酶活性。文中所述之化合物1及組合物抑制之且文中所述之方法可用於對抗之激酶之實例包括ERK1及ERK2中之一者或兩者或其突變體。

經典絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)路徑係三級激酶級聯(RAF-MEK-ERK)且回應於各種細胞外訊號調節增殖、分化及細胞週期進展中具有主要作用。MAPK路徑之異常活化係人類癌症中之頻繁事件及在治療初始腫瘤中之路徑活性通常係涉及原癌基因之RAS家族或RAF之B同功異型物(BRAF)之活化突變之結果。在約30%人類癌症中報告RAS之活化突變(McArthur GA，Lancet 2012第13卷，第8期，2012年8月，第744-745頁；Baines AT等人，Future Med.Chem.2011年10月；3(14)：1787-1808；J.Clin.Oncol.22(8)1430-1438)。RAS之體細胞點突變最常定位於三個密碼子(12、13及61)中之一者，該等三個密碼子損害GTP水解，因此促進連續活化之GTP結合之RAS之形成。RAS在人類腫瘤中亦可因受體酪胺酸激酶(RTK)之異常上游活化或因NF-1腫瘤抑制因子(其通常在負反饋環路中下調RAS活性)之功能損失而活化。約70至90%之胰臟導管腺癌(PDAC)、40%之結腸直腸癌及20至30%之肺腺癌顯示KRAS之活化突變及約10至15%之原發黑色素瘤顯示NRAS之突變(Neuzillet,C.等人2013 Cancer Metastasis Rev.2013年6月，32(1-2)：147-62；Riely G.J.等人2009 Proc.Am.Thorac.Soc.2009年4月 15日，6(2)：201-5.；Martin P等人J.Thorac.Oncol.2013年5月，8(5)：530-42.；Fedorenko I.V.Oncogene.2013年6月20日，32(25)：3009-18)。

涉及絲胺酸-蘇胺酸激酶BRAF之體細胞點突變通常涉及該激酶域之外顯子11(P環)及15(活化段)且大於90%涉及單一胺基酸取代(V600E或K)(Brose等人，2002 Cancer Res.2002 Dec 1；62(23)：6997-7000；Davies,H.等人2002 Nature June 27,417(6892)：949-54；Pratilas,C.等人Curr.Top.Micrbiol.Immunol.2012,355：83-98；De Luca等人，2012 Expert Opin.Ther.Targets.2012年4月，16 Suppl 2：S17-27)。BRAF突變型腫瘤中之MAPK路徑活化獨立於RTK訊號傳遞或RAS發生且不需要形成RAF二聚體(Poulikakos,P.I.等人Sci.Signal.2011年3月29日，4(166)：pe16))。已在8%的人類癌症中識別BRAF之活化突變且最常發現於多毛細胞白血病(實質上所有情況中)、轉移性黑色素瘤(50至60%)、乳突狀甲狀腺癌(約45%)及結腸直腸癌(5至8%)中(Pratilas,C.2012；Xing 2005 docr Relat.Cancer.2005 Jun；12(2)：245-62；Samuel J.N.Engl.J.Med.2014 Jan 16,370(3)：286-8)。致癌BRAF之下游受質係MEK1及MEK2，其等透過磷酸化而活化。

MEK1及MEK2係極具受質特異性且除ERK蛋白外無已知標靶之酪胺酸及絲胺酸/蘇胺酸雙特異性激酶。ERK(細胞外訊號調節激酶)1及ERK 2用作RAS及BRAF致癌蛋白之主要MAPK效應子。經活化ERK使諸多下游標靶包括RSK(p90核糖體S6激酶)磷酸化。RSK繼而使若干細胞質標靶及轉綠調節子磷酸化。ERK核受質包括三元複合體因子(TCF)轉綠因子，其在誘導IEG(即刻早期基因)表現中扮演主要角色。IEG產物例如c-Fos及c-Myc繼而活化後期反應基因，其促進細胞存活、增殖及移動。(Mendoza,M.C.等人，Trends Biochem.Sci.2011 Trends Biochem Sci.Jun 36(6)：320-8.doi)。

迄今為止，直接下調突變體RAS之活性之努力尚未廣泛成功。大 多數努力專注於抑制RAS之轉譯後修飾例如錨固RAS所需之羧基末端異戊二烯化(例如替吡法尼(tipifarnib))或開發與RAS競爭結合至血漿膜之內小葉狀物之化合物(例如薩利薩瑞(salisarib))。此等藥物候選者在罹患RAS突變型腫瘤之患者群體中之臨床開發通常不導致臨床有意義之結果改善[Baines,A.等人，Future Med.Chem.2011年10月3(14)：1787-808；Van Cutsem E等人2004)。

相比之下，突變體BRAF及MEK之小分子抑制劑之成功臨床開發已證實MAPK路徑抑制為一種可行治療途徑。突變體BRAF之抑制劑威羅菲尼(Roche/Genentech,So.San Francisco,CA)及達拉菲尼(Glaxo Smith-Klein,city,state)已被美國FDA、歐洲藥物管理局(European Medicines Agency)及澳大利亞TGA批准用於治療具有BRAF^V600突變之患者之局部晚期或轉移性黑色素瘤，基於與達卡巴嗪化療相比在反應速率、無進展存活期及總體存活期之強改善(McArthur,G.A.等人，Lancet Oncology,2014；Hauschild,A.等人，Lancet,2012年7月28日，380(9839)：358-65；Lancet Oncol.2012年11月13(11)：1087-95)。此外，Flaherty等人(Flaherty K等人，N Engl.J.Med.2012年7月12日；367(2)：107-14)報告罹患BRAF^V600突變型黑色素瘤之患者中，與化療(達卡巴嗪或太平洋紫杉醇)相比，與曲美替尼(trametinib)(一種異位口服MEK 1/2抑制劑)相關聯之無進展存活期及總體存活期之顯著改善，此為其FDA批准之基礎。與MEK抑制劑療法相關聯之結果並不如彼等在經BRAF抑制劑療法治療之患者中觀察到之結果強烈，至少部分歸因於威羅菲尼或達拉菲尼(其以突變體特異性方式影響BRAF)相比MEK抑制劑之更高治療指數(McArthur,G.A.等人，Lancet Oncology,2014；Hauschild,A.等人，Lancet,2012年7月28日，380(9839)：358-65；及Lancet Oncol.2012年11月13(11)：1087-95)。此外，Flaherty等人(Flaherty K等人，N.Engl.J.Med.2012年7月12日 367(2)：107-14)。

當作為單一療法投與此等藥劑時，雖然促進反應速率，但是已證明反應持續時間因耐藥性出現而較短(通常6至7個月)。已描述若干介導抗拒BRAF抑制劑之機制，包括經由尤其癌症大阪甲狀腺(cancer Osaka thyroid)(COT)激酶之表現、重生(de novo)NRAS或MEK突變之出現及變異剪接突變體之出現或突變體BRAF之擴增來再活化MAPK路徑(Solit,D.& Rosen,N.「Towards a Unified Model of RAF Inhibitor Resistance」Cancer Disc.2014 Cancer Discov.2014年1月4(1)：27-30.；Flaherty K等人，NEJM 2012))。

已描述MEK 1及MEK 2之活化突變為抗拒MEK抑制劑療法之機制。因此，基於上述結果，MAPK路徑訊號傳遞之再活化係經活體組織檢查處於進展之大多數黑色素瘤中抗拒BRAF或MEK抑制劑治療之重要且最常見機制。(Shi H等人，Cancer Discovery 2014.doi：10.1158/2159-8290.CD-13-0642.Epub 2013年11月21日；Van Allen等人，2014 Cancer Discov.2014年1月，,4(1)：94-109)。

BRAF抑制劑達拉菲尼與MEK抑制劑曲美替尼之組合在罹患BRAF V600突變體轉移性黑色素瘤之患者中之隨機化2期研究證實，與單獨達拉菲尼相比之更高反應速率及持續時間及更長無進展存活期，此表明BRAF及MEK抑制劑療法之組合可推遲但可能不能預防抗性之出現(Flaherty KT等人NEJM 2012；Wagle N Cancer Discovery 2013)。

若干近期觀察專注於直接藥理學抑制ERK作為消除RAS驅動腫瘤中以及抗拒BRAF/MEK抑制之情況中之MAPK路徑活性之方法之可能性：

1.)Hatzivassilou等人(Mol Cancer Ther.AACR 2-12,11(5)；1143-54)顯示，使能抗拒MEK抑制之三種RAS突變體細胞系(類基底乳癌細 胞系MDA-MB-231及兩種結腸直腸細胞系-HCT-116及LoVo)保持對MAPK路徑活化的「成癮」及ERK抑制可克服MEK抑制劑抗性，此表明ERK抑制可構成抗拒MEK(及潛在地BRAF)抑制劑療法之情況中之治療選項。

2.)ERK 1/2之選擇性高強力(IC₅₀：1至4奈莫耳)抑制劑(SCH772984)在帶BRAF^V600突變體黑色素瘤(LOX IMVI)或KRAS突變體胰臟腺癌(MiaPaCa)之裸小鼠中之異種移植研究在兩種模型中均顯示劑量相依性腫瘤體積減小。在LOX IMVI模型中，腫瘤減小伴隨腫瘤組織中之pERK表現之穩健抑制。分開地，SCH772984能夠有效降低使能雙重抗拒BRAF及MEK抑制之BRAF^V600突變體黑色素瘤細胞系(A101D)中之pERK及pRSK表現及抑制增殖。(Cancer Discov；AACR,2013 3(7)；742-50)。

3.)在組合之BRAF/MEK抑制劑療法之抗拒機制之第一報告中，Wagle等人顯示，在5種經歷全外顯子及RNA定序之抗性黑色素瘤中，3種存在再接合MAPK路徑效應子之明顯抗拒機制(一種新穎MEK2突變、一種BRAF剪接同功異型物及一種BRAF擴增)，此進一步表明選擇性ERK抑制可在復活ERK訊號傳遞之情境中提供克服BRAF/MEK抑制劑頑固性疾病之機會。(Cancer Discov.2014年1月4日(1)：61-8.doi：10.1158/2159-8290.CD-13-0631.Epub 2013年11月21日)。

化合物1係ERK1及ERK2之激酶活性之強力抑制劑且具有10至20nM範圍之IC₅₀。化合物1透過在鄰近ATP結合口袋中與關鍵半胱胺酸殘基(ERK1為胺基酸183及ERK2中為166)形成共價加成物來不可逆地抑制ERK 1及2。在258個激酶之分析中，化合物1顯示良好總體激酶選擇性特性。

化合物1已證實對抗各種組織起源之大量癌細胞系之強力活體外抗增殖活性。生物資訊分析指示具有BRAF活化突變之腫瘤係富含於 對化合物1敏感的細胞系組內：在經測試的27個BRAF突變體癌細胞系中，25(93%)個證實對化合物1抑制(GI₅₀<1μM)的敏感性。在相同癌細胞面板篩選中，37(76%)個KRAS突變體癌細胞系中有28個對化合物1敏感。化合物1顯示對抗已獲得對BRAF及MEK抑制之活體外抗性之A375黑色素瘤細胞之抑制活性。此非常重要，因為在臨床上已普遍觀察到對BRAF抑制之抗性且腫瘤證實抗拒BRAF抑制劑之患者可交叉抗拒MEK抑制劑。在此等情況下，ERK抑制劑可提供對抗拒BRAF或MEK之抑制劑之腫瘤之有效療法。

用於治療選定腫瘤類型之基本原理

胰臟導管腺癌(PDAC)

其中KRAS突變活化後發生CDKN2A、TP53及SMAD4腫瘤抑制基因之損失之PDAC腫瘤形成模型界定在自正常上皮透過胰臟導管內贅瘤形成之各種階段進展至侵襲性PDAC中的關鍵遺傳步驟(Hezel AF,Kimmelman AC,Stanger BZ等人，Genes & Development 2006；20：1218-49；Yeh JJ,Der C.,Expert Opin Ther Targets 2007；11(5)：673-94..)。已特別良好地界定此進展中之KRAS之頻繁及早期突變。24個胰臟癌之全外顯子定序(WES)之完成證實最常突變基因及細胞訊號傳遞路徑異常(其大多數已先前識別自活體外研究)。此分析之結果證實異常KRAS代表胰臟癌之關鍵驅動子突變(Jones S,Zhang X,Parsons DW,Lin JC,Leary RJ,Angenendt P.,Science 2008；321(5897)：1801 6.；Baines AT,Xu D,Der CJ.,Future Med Chem 2011；3(14)：1787-1808)。

Morris報告與以兩種劑量(25及50mg/kg BID)的SCH772984(ERK 1/2之選擇性可逆ATP競爭性抑制劑)治療測試動物相關之MiaPaCa(KRAS突變體胰臟癌)異種移植模型中之腫瘤退化。在兩種劑量下均未觀察到顯著體重變化或藥物相關致死率(Morris EJ,Jha S,Restaino CR等人，Cancer Discovery 2013；3：742-50)。

局部晩期或轉移性結腸直腸癌(CRC)

KRAS之活化突變佔約40%的CRC；此等幾乎僅涉及密碼子12及13(Neumann J,Zeindl-Eberhart E,Kirchner T,Jung A.,Pathology-Research and Practice 2009；205：858-62)。至於PDAC，KRAS之突變係自腸隱窩發育不良之早期病灶遺傳進展至侵襲性CRC中之早期事件。11個結腸直腸腫瘤之基因定序研究揭示，KRAS係所有突變基因中之最頻繁突變致癌基因且僅次於TP53突變(Baines AT,Xu D,Der CJ.,Future Med Chem 2011；3(14)：1787-1808)。

CRC中之KRAS突變之預後意義不明確。大量患者系列之多變量分析表明，預後對於彼等密碼子12對13中存在突變之患者可變化，後組顯示更大復發風險及更短總體存活期(Yokota T.,Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry 2012；12：163-71.)。因此，涉及KRAS之不同突變之生物意義似乎不均勻。

約8至10%的未選擇CRC患者罹患顯示BRAF^V600突變的腫瘤，且此比例上升至大於60%的腫瘤因錯配修復酵素之低表現而具有高微衛星不穩定性(Connolly K,Brungs D,Szeto E,Epstein RJ.,Curr Oncol 2014；21：e151-e154.)。KRAS及BRAF之突變互斥發生。一些臨床病例特徵在BRAF突變中比在非BRAF突變型腫瘤中更盛行：其更普遍涉及右半結腸，更通常與腹膜轉移相關聯，及更通常弱分化腺瘤或黏液癌。CRC中之BRAF突變之消極預後意義已得到良好確認(Yokota T.,Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry 2012；12：163-71)。相比於經BRAF抑制劑治療之黑色素瘤患者中觀察到之高反應率(60至80%)，已在少於10%的罹患BRAF突變型CRC的患者中報告反應(Kopetz S,Desai J,Chan E，等人，J Clin Oncol 2010；28：15s(摘要3534))；Falchook GS,Long GV,Kurzock R，等人，Lancet 2012；379：1893-1901)。在CRC中缺乏對BRAF抑制之反應似乎為回應於BRAF抑制劑 介導之MAPK路徑抑制而去阻遏下游訊號傳遞之EGFR相依性活化之結果(Corcoran RB,Hiromichi E,Turke AB，等人，Cancer Discov 2012；2(3)：227-35；Prahallad A,Sun C,Huang S等人，Nature 2012；483：100-4)。

腫瘤存在KRAS或BRAF^V600突變的患者通常不受益於包括抗EGFR(例如西妥昔單抗(cetuximab))療法之化療計劃(Yokota T.,Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry 2012；12：163-71；Di Nicolantonio F,Martini M,Molinari F，等人，J Clin Oncol 2008；26：5705-12；Loupakis F,Ruzzo A,CremoliniC等人，Brit J Cancer 2009；101：715-21)。大多數該等患者在以化療治療在一線情況中轉移性CRC，該化療通常由推注加上輸注5-氟尿嘧啶(5-FU)及爾可福鈣(leucovorin)(或卡培他濱(capcitabine))加上奧沙利鉑(oxaliplatin)(FOLFOX；CAPOX)或伊立替康(irinotecan)(FOLFIRI)與貝伐單抗(bevacizumab)組成。雖然在二線中無有關最佳療法之明確共識，但是在進展或第一復發時的治療通常包括伊立替康(對於在一線中接受奧沙利鉑的患者)或奧沙利鉑(對於在一線中接受伊立替康的患者)試驗加上或不加上額外5-FU或研究性療法。

局部晩期或轉移性黑色素瘤

超過50%的黑色素瘤在經典MAPK路徑中存在BRAF激酶之共同突變(BRAF^V600)且大多數回應於突變體BRAF及MEK激酶之抑制劑。已基於活體外研究以及在進展/復發時詢問經BRAF/MEK抑制劑治療之黑色素瘤兩者報告諸多抗拒單一藥劑BRAF及MEK抑制劑療法的機制。事實上，已在一些情況中報告相同進展腫瘤之不同抗性機制。大多數(但非全部)抗性機制似乎再接合經典MAPK路徑，如pERK及其他下游標記物之再表現所證實(Solit DB,Rosen N.,Cancer Discovery 2014；4：27-30；Van Allen EM,Wagle N,Sucker A等人，The genetic landscape of clinical resistance to RAF inhibition in metastatic melanoma.Cancer Discovery 2014；4(1)：94-109)。正如指出，對BRAF及/或MEK抑制具有獲得抗性之腫瘤細胞系證實保留對ERK抑制之敏感性(Morris EJ,Jha S,Restaino CR等人，Cancer Discovery 2013；3：742-50；Hatzivassiliou G,Liu B,O’Brien C等人，Mol Cancer Ther 2012；11：1143-54)。

治療方法

如上文一般所述，文中所述之化合物1及其醫藥上可接受之鹽係ERK1及ERK2中之一者或兩者之抑制劑。一般技術者將知曉ERK係RAS-RAF-MEK-ERK MAPK路徑中之一種關鍵組分及ERK1及ERK2係MAPK路徑內之下游節點。不希望受理論約束，因為ERK1及ERK1在MAPK路徑中之下游定位，因此ERK抑制劑可治療其中已知或懷疑MAPK路徑在任何水平(Ras-Raf-Mek-ERK)下之活化(包括ERK1及ERK2中之一者或兩者以及MAPK路徑中之位於ERK上游之其他節點(例如Ras、Raf及Mek))扮演重要角色的疾病或疾患。此外，因為ERK係下游標靶，因此咸信ERK抑制劑能夠克服(在一些情況中)由MAPK路徑內之ERK上游之標靶之抑制劑誘導之耐藥性。例如，用於治療K-RAS及B-RAF突變體腫瘤之RAF或MEK小分子抑制劑導致該等耐藥性。類似地，耐藥性與由MAPK路徑之高活化驅動之其他腫瘤(例如NF1突變體腫瘤)相關。激酶選擇性係透過以本發明共價抑制劑與ATP結合口袋中之獨特胺基酸間之相互作用之組合使選擇性Cys沉默來達成。與可逆抑制劑相比，靶向選擇性Cys提供使ERK活性沉默之延長藥效動力學以及在癌症治療中提供潛在更低劑量。

如上所述，在一些實施例中，化合物1及其醫藥上可接受之鹽係ERK1及ERK2蛋白激酶中之一者或兩者之抑制劑，且ERK1及ERK2係MAPK路徑內之下游標靶。不希望受任何特定理論約束，該等化合物 及組合物特別適用於治療或減輕其中已知或懷疑MAPK路徑在任何水平(Ras-Raf-Mek-ERK)下之活化扮演重要角色的疾病、病症或疾患之嚴重度。該疾病、病症或疾患可在文中稱作與MAPK路徑相關聯或者與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯。該等疾病、病症或疾患亦可在文中稱作「ERK1-或ERK2介導之疾病、病症或疾患」。

在一些實施例中，本發明提供治療或減輕疾病、病症或疾患之嚴重度之方法，其中該疾病、病症或疾患涉及MAPK路徑之活化(在Ras-Raf-Mek-ERK中之任何水平)(包括ERK1及ERK2蛋白激酶中之一者或兩者)，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1或其醫藥上可接受之鹽。

在一些實施例中，本發明提供一種克服對Raf或Mek抑制劑之耐藥性之方法，其包括對患者投與ERK1及ERK2中之一者或兩者之抑制劑化合物例如化合物1或其醫藥上可接受之鹽之步驟。在一些實施例中，耐藥性機制係透過標靶蛋白質之突變或MAPK路徑之再活化。

如文中所使用，術語「抗性」可係指編碼標靶蛋白質之野生型核酸序列之改變及/或標靶蛋白質之胺基酸序列之改變及/或另一蛋白質之胺基酸序列之改變，此改變、降低或消除抑制劑對標靶蛋白質之抑制效應。術語「抗性」亦可係指不同於標靶蛋白質之可再活化MAPK路徑或其他存活路徑之蛋白質之過度表現或沉默。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與治療上有效量之醫藥上可接受之組合物，其包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽。

在一些實施例中，治療係在已發展一或多種症狀後施予。在其他實施例中，治療係在不存在症狀之情況下施予。例如，治療施予至症狀發病前之疑似個體(例如，鑑於症狀歷史及/或鑑於遺傳或其他疑 似因素)。治療亦在已消除症狀後繼續，例如以預防或延遲其復發。

由化合物1及其醫藥上可接受之鹽治療之一般疾病、疾患或病症包括癌症、自體免疫疾患、神經退化性或神經性疾患、肝病、心臟病、精神分裂症或骨相關病。

在一些實施例中，本發明關於一種治療或減輕選自癌症、中風、糖尿病、肝腫大、心血管疾病(包括心臟肥大)、阿茲海默氏病、囊性纖維化、病毒性疾病、自體免疫病、動脈粥樣硬化、再狹窄、牛皮癬、過敏性疾患(包括哮喘)、發炎、神經性疾患及激素相關病之疾病、病症或疾患之嚴重度之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之組合物。

在一些實施例中，本發明關於一種治療癌症之方法。例如，在一些實施例中，本發明提供一種治療患者之癌症之方法，其包括對該患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之組合物。在一些實施例中，該癌症係復發性。在一些實施例中，該癌症係頑固性。在一些實施例中，該癌症係轉移性。在一些實施例中，該癌症係局部晚期。

在一些實施例中，該癌症係抗拒RAF抑制劑之癌症。在一些該等實施例中，該抗拒RAF抑制劑之癌症係抗拒BRAF抑制劑之癌症。

在一些實施例中，該癌症係抗拒MEK抑制劑之癌症。

在一些實施例中，該癌症係MAPK路徑介導之癌症。

在一些實施例中，該癌症係BRAF突變型癌症。在一些實施例中，該BRAF突變型癌症係BRAF^V600突變型癌症，例如BRAF^V600E、BRAF^V600K、BRAF^V600R及BRAF^V600D。

在一些實施例中，該癌症係RAS突變型癌症。在一些實施例中，該RAS突變涉及密碼子12、13或61。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係NRAS突變型 癌症，包括(但不限於)NRAS^Q61R、NRAS^Q61K、NRAS^Q61L或NRAS^Q61H。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係HRAS突變型癌症，包括(但不限於)HRAS^G12V、HRAS^Q61R及HRAS^G12S。

在一些實施例中，該癌症係選自多發性骨髓瘤、乳房、卵巢、子宮頸、前列腺、睪丸、生殖泌尿道、食道、喉、神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、胃(stomach)(胃(gastric))、皮膚、角質棘皮瘤、肺、表皮様癌、大細胞癌、小細胞癌、肺、骨、結腸、甲狀腺、腺瘤、胰臟、腺癌、甲狀腺、濾泡性癌、未分化癌、乳突狀癌、精細胞瘤、黑色素瘤(包括葡萄膜黑色素瘤)肉瘤、膀胱癌、肝臟癌(例如，肝細胞癌(HCC)及膽道癌)、腎臟癌、骨髓樣疾病、淋巴樣疾病、霍奇金氏病、多毛細胞、頰腔及咽(口部)、唇、舌、口、咽、小腸、結腸直腸癌、大腸、直腸、大腦及中樞神經系統、子宮內膜癌、多發性骨髓瘤(MM)、前列腺、急性骨髓性白血病(AML)及白血病。

在一些實施例中，該癌症係選自癌、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病。在一些實施例中，肉瘤係軟組織肉瘤。在一些實施例中，淋巴瘤係非霍奇金氏淋巴瘤。在一些實施例中，淋巴瘤係大細胞免疫母細胞淋巴瘤。在一些實施例中，該癌症係選自腺癌；腺瘤；腎上腺皮質癌；膀胱癌；骨癌；腦癌；乳癌；頰腔癌；子宮頸癌；結腸癌；結腸直腸癌；子宮內膜癌或子宮癌；表皮様癌；食道癌；眼癌；濾泡性癌；膽囊癌；前列腺、AML、多發性骨髓瘤(MM)、胃腸道癌諸如例如胃腸道基質腫瘤；生殖泌尿道癌症；神經膠質母細胞瘤；多毛細胞癌；各種類型的頭頸癌；肝癌；肝細胞癌症；霍奇金氏病；角質棘皮瘤；腎臟癌；大細胞癌；大腸癌；喉癌；肝臟癌；肺癌，諸如例如肺腺癌、肺退行性癌、乳突狀肺腺癌、小細胞肺癌、肺鱗狀癌、非小細胞肺癌；黑色素瘤及非黑色素瘤皮膚癌；淋巴疾病；骨髓增生疾病，諸如例如，真性紅細胞增多症、原發性血小板增多症、慢性自發 性骨髓纖維化、合併骨髓纖維化之骨髓化生、慢性骨髓樣白血病(CML)、慢性骨髓單核細胞性白血病、慢性嗜酸性白血病、慢性淋巴球性白血病(CLL)、嗜酸性紅細胞增多症候群、全身性肥大細胞疾病、非典型CML、AML或幼年型骨髓單核細胞性白血病；漿細胞瘤；多發性骨髓瘤；神經母細胞瘤；卵巢癌；乳突狀癌；胰臟癌；腹膜癌；前列腺癌，包括良性前列腺增生；直腸癌；唾液腺癌；肉瘤；精細胞瘤；鱗狀細胞癌；小細胞癌；小腸癌；胃癌；睪丸癌；甲狀腺癌；未分化癌；及陰門癌症。

在一些實施例中，該癌症係選自黑色素瘤、胰臟癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肺癌(例如，非小細胞肺癌)、乳癌、子宮內膜癌、前列腺癌、卵巢癌、肝細胞癌(HCC)、多發性骨髓瘤(MM)及白血病。在一些實施例中，白血病係急性白血病。在一些實施例中，白血病係急性骨髓樣白血病。在一些實施例中，白血病係急性淋巴母細胞白血病。

在一些實施例中，該癌症係選自黑色素瘤、結腸直腸癌、肺癌或胰臟癌。

在一些實施例中，該癌症係黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係葡萄膜黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係皮膚黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係局部晚期。在一些實施例中，該黑色素瘤係轉移性。在一些實施例中，該黑色素瘤係復發性。在一些實施例中，該黑色素瘤係頑固性。在一些實施例中，該黑色素瘤係BRAF^v600突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係RAS突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係NRAS突變型黑色素瘤。在一些實施例中，該黑色素瘤係KRAS、NRAS或BRAF之野生型。在一些實施例中，該黑色素瘤係抗拒BRAF抑制劑(例如，抗拒威羅菲尼、抗拒達拉菲尼、抗拒恩卡拉菲尼等)之黑色素瘤。在一些實 施例中，該癌症係VemR(亦即，抗拒威羅菲尼)之BRAF突變型黑色素瘤。

在一些實施例中，該癌症係結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係局部晚期。在一些實施例中，該結腸直腸癌係轉移性。在一些實施例中，該結腸直腸癌係復發性。在一些實施例中，該結腸直腸癌係頑固性。在一些實施例中，該結腸直腸癌係BRAF突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係BRAF^v600突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係RAS突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係KRAS突變型結腸直腸癌。在一些實施例中，該結腸直腸癌係NRAS突變型結腸直腸癌。

在一些實施例中，該癌症係胰臟癌。在一些實施例中，該胰臟癌係局部晚期。在一些實施例中，該胰臟癌係轉移性。在一些實施例中，該胰臟癌係局部復發性。在一些實施例中，該胰臟癌係頑固性。在一些實施例中，該胰臟癌係胰臟導管腺癌(PDAC)。在一些實施例中，該胰臟癌係RAS突變型胰臟癌。在一些實施例中，該胰臟癌係KRAS突變型胰臟癌。在一些實施例中，該胰臟癌係KRAS突變型胰臟癌，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。

在一些實施例中，該癌症係乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係局部晚期。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係轉移性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係頑固性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係復發性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係BRAF突變型乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係BRAF^v600突變型乳突狀甲狀腺癌。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺癌包括未分化或去分化組織組織學。

在一些實施例中，該癌症係肺癌。在一些實施例中，該肺癌係非小細胞肺癌(NSCLC)。在一些實施例中，該肺癌係局部晚期。在一 些實施例中，該肺癌係轉移性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係復發性。在一些實施例中，該乳突狀甲狀腺係頑固性。在一些實施例中，該肺癌係RAS突變型肺癌。在一些實施例中，該肺癌係KRAS突變型肺癌。在一些實施例中，該肺癌係KRAS突變型肺癌，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。

在一些實施例中，該癌症係白血病。在一些實施例中，白血病係慢性白血病。在一些實施例中，白血病係慢性骨髓樣白血病。在一些實施例中，白血病係急性白血病。在一些實施例中，白血病係急性骨髓樣白血病(AML)。在一些實施例中，白血病係急性單核細胞性白血病(AmoL或AML-M5)。在一些實施例中，白血病係急性淋巴母細胞白血病(ALL)。在一些實施例中，白血病係急性T細胞白血病。在一些實施例中，白血病係骨髓單核母細胞白血病。在一些實施例中，白血病係人類B細胞前體白血病。在一些實施例中，白血病具有Flt3突變或重排。

在一些實施例中，該癌症係CNS癌症，例如CNS腫瘤。在一些實施例中，CNS腫瘤係神經膠質母細胞瘤或多形性神經膠質母細胞瘤(GBM)。在一些實施例中，本發明係關於一種治療胃(stomach)(胃(gastric))及食道腫瘤及癌症之方法。

在一些實施例中，該癌症係多發性骨髓瘤(MM)。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係局部晚期。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係轉移性。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係局部復發性。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係頑固性。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係RAS突變型多發性骨髓瘤。在一些實施例中，該多發性骨髓瘤係KRAS突變型多發性骨髓瘤。在一些實施例中，該RAS突變型多發性骨髓瘤係KRAS突變型多發性骨髓瘤，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。

在一些實施例中，該癌症係肝細胞癌(HCC)。在一些實施例中，該HCC係局部晚期。在一些實施例中，該HCC係轉移性。在一些實施例中，該HCC係局部復發性。在一些實施例中，該HCC係頑固性。在一些實施例中，該癌症係RAS突變型HCC。在一些實施例中，該癌症係KRAS突變型HCC。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。

在一些實施例中，該癌症係選自乳房、結腸直腸、子宮內膜、血液性、白血病(例如，AML)、肝臟、肺、黑色素瘤、卵巢、胰臟、前列腺或甲狀腺。

在一些實施例中，該癌症係選自乳房、結腸直腸、子宮內膜、肝臟、肺、黑色素瘤、卵巢、胰臟或甲狀腺。

在一些實施例中，該癌症係選自結腸直腸、肺、黑色素瘤或胰臟。

在一些實施例中，該癌症係選自結腸直腸、黑色素瘤或胰臟。

在一些實施例中，該癌症係抗拒RAF抑制劑之癌症，例如該癌症係抗拒BRAF抑制劑之癌症。在一些實施例中，該癌症係抗拒MEK抑制劑之癌症。

投藥

如上所述，本發明提供治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或病症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。應瞭解，在其中文中所述方法係指投與化合物1之情況中，該等方法同等適用於投與化合物1之鹽形式(例如，化合物1之磷酸鹽)之方法。因此，應瞭解文中所提供之方法涵蓋投與化合物1或其醫藥上可接受之鹽。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約1%至約60%之化合物1或其醫藥上可接受之鹽，基於該調配物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽之醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約2%至約18%或約4%至約12%或約5%至約10%或約6%至約9%或約7%至約8%之化合物1之磷酸鹽，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約1%、約2%、約3%、約4%、約5%、約6%、約7%、約8%、約9%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%或約15%之化合物1之磷酸鹽，基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約20%至約60%或約25%至約55%或約30%至約50%或約40%至約50%或約45%至46%之化合物1之磷酸鹽，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約25%、約30%、約35%、約40%、約41%、約42%、約43%、約44%、約45%、約46%、約47%、約48%、約49%、約50%、約51%、約52%、約53%、約54%或約55%之化合物1之磷酸鹽，基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約6%、約7%、約8%、約9%、約10%、約11%、約12%或約13%之化合物1之磷酸鹽，基於既定組合物或調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約43%、約44%、約45%、約46%、約47%或約48%之化合物1之磷酸鹽，基於既定組合物或調配物 之總重量計。

在一些實施例中，所提供之方法包括每天一次、兩次、三次或四次投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。

在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次(「QD」)投與。

在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天兩次投與。在一些實施例中，每天兩次投與係指化合物或組合物「BID」投與。「BID」劑量係每天兩次投與之特定劑量(例如，150mg劑量)(亦即，在一天中的兩個不同時間投與兩次150mg劑量)。在一些實施例中，每天兩次投與係指化合物或組合物以兩個不同劑量投與，其中第一投與劑量不同於第二投與劑量。例如，每天兩次投與之180mg劑量可以兩個分開劑量(一個150mg劑量及一個30mg劑量)投與，其中各劑量在一天中的不同時間下投與。或者，每天兩次投與之180mg劑量可BID投與90mg(亦即，在一天中的不同時間下投與三個30mg劑量)。以非限制性實例說明之，化合物1或其醫藥上可接受之鹽之180mg總每天劑量可在既定時間點(例如，早晨)以150mg劑量投與及在稍後時間點(例如，晚上)以30mg劑量投與而投與。

在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天三次投與。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係「TID」投與，或在一天中之三個不同時間下投與三個相等劑量。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係以三個不同劑量投與，其中該等投與劑量中之至少一者不同於另一投與劑量。

在一些實施例中，醫藥上可接受之組合物包含化合物1或其醫藥 上可接受之鹽係每天四次投與。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係「QID」投與，或在一天中之四個不同時間下投與四個相等劑量。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係以四個不同劑量投與，其中該等投與劑量中之至少一者不同於另一投與劑量。

在一些實施例中，所提供之方法包括投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物，每天一次(「QD」)。在一些實施例中，所提供之方法包括投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物，每天兩次。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續時間為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28天。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係每天一次投與，持續時間為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28天。

在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續28天(「28天週期」)時間期內之某一時間量。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續至少28天週期。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次投與，持續至少一個28天週期之連續21天。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續至少兩個、至少三個、至少四個、至少五個或至少六個28天週期。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續至少七個、至少八個、至少九個、至少十個、至 少十一個或至少十二個28天週期。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，持續至少十三個、至少十四個、至少十五個、至少十六個、至少十七個、至少十八個、至少十九個或至少二十個28天週期。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係投與給患者，持續患者之生命時間。

在一些實施例中，兩個相鄰28天週期可經由休息期隔開。該休息期可係一、二、三、四、五、六、七或更多天，在此期間，不對患者投與單位劑量之化合物1或其醫藥上可接受之鹽。在一較佳實施例中，兩個相鄰28天週期係連續。

在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次或兩次投與，每七天中持續至少連續兩天、至少連續三天、至少連續四天、至少連續五天。在一些實施例中，包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物係每天一次投與，每七天中持續至少連續五天。在一些實施例中，化合物1或其醫藥上可接受之鹽係每隔一天投與。在一些實施例中，化合物1或其醫藥上可接受之鹽係每隔兩天投與。

單位劑型

所提供之調配物可製備成單位劑型。事實上，錠劑或膠囊係通常單位劑型。一般技術者將知曉文中所述之單位劑型係指活性醫藥成分(亦即，游離鹼形式化合物1)之量。熟習此項技術者將進一步知曉，當醫藥組合物包含化合物1之鹽形式(例如，磷酸鹽形式)，則該組合物中存在之鹽形式之量係等於單位劑量之游離鹼化合物1之量。例如，包含化合物1之磷酸鹽之醫藥組合物將含有遞送當量5mg單位劑量之游離鹼化合物1所必需之6.07mg磷酸鹽形式。在一些實施例中，單位劑型含有5mg化合物1。在一些實施例中，單位劑型含有30 mg化合物1。在一些實施例中，單位劑型含有150mg化合物1。

在一些實施例中，本發明提供一種用於治療、穩定或減輕有此需要之患者之一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對該患者投與一或多種單位劑量之所提供之調配物之步驟。在一些實施例中，本發明提供一種用於治療、穩定或減輕有此需要之患者之一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對該患者投與一或多種本發明單位劑量之步驟，其中該單位劑量提供約5mg至約1000mg化合物1。在一些實施例中，本發明之調配物提供約1mg、5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約100mg、約105mg、約110mg、約115mg、約120mg、約125mg、約130mg、約135mg、約140mg、約145mg、約150mg、約155mg、約160mg、約165mg、約170mg、約175mg、約180mg、約185mg、約190mg、約195mg、約200mg、約225mg、約250mg、約275mg、約300mg、約325mg、約350mg、約375mg、約400mg、約425mg、約450mg、約475mg、約500mg、約550mg、約600mg、約650mg、約700mg、約750mg、約800mg、約850mg、約900mg、約950mg或約1000mg化合物1。

在一些實施例中，本發明提供一種用於治療、穩定或減輕有此需要之患者之一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對該患者投與一或多個本發明單位劑量之步驟，其中單位劑量提供約5mg、30mg、或150mg化合物1。在一些實施例中，本發明單位劑量調配物提供約25mg、約50mg、約75mg、約100mg、約125mg、或約150mg化合物1。

在一些實施例中，本發明提供一種用於治療、穩定或減輕有此需要之患者之一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對該患者投與一或多個包含化合物1之磷酸鹽之單位劑量之步驟，其中化合物1之磷酸鹽係呈相當於化合物1之上述單位劑量之任一者之量。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約1mg至約10mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約2mg至約8mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約4mg至約6mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約5mg。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約20mg至約40mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約25mg至約35mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約28mg至約32mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約30mg。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約100mg至約200mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約125mg至約175mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包 含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約140mg至約160mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之組合物，其中該單位劑量係約150mg。

在一些實施例中，化合物1之單位劑量係每天一次(QD)投與。在一些實施例中，單位劑量化合物1係每天兩次投與。在一些實施例中，單位劑量化合物1係BID投與。

在一些實施例中，化合物1之該單位劑量係約25mg至750mg、或約25mg至約625mg、或約25mg至約500mg、或約25mg至約375mg、或約25mg至約250mg、或約25mg至約125mg、或約25mg至約75mg、或約75mg至約750mg、或約75mg至約625mg、或約75mg至約500mg、或約75mg至約375mg、或約75mg至約250mg、或約75mg至約125mg、或約125mg至約750mg、或約125mg至約625mg、或約125mg至約500mg、或約125mg至約375mg、或約125mg至約250mg、或約250mg至約750mg、或約250mg至約625mg、或約250mg至約500mg、或約250mg至約375mg、或約375mg至約750mg、或約375mg至約625mg、或約375mg至約500mg、或約500mg至約750mg、或約500mg至約625mg、或約625mg至約750mg。

在一些實施例中，化合物1之該單位劑量係約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約100mg、約105mg、約110mg、約115mg、約120mg、約125mg、約130mg、約135mg、約140mg、約145mg、約150mg、約155mg、約160mg、約165mg、約170mg、約175mg、約180mg、約185mg、約190mg、約195mg、約200mg、約205mg、約210mg、約215mg、約220mg、約225mg、約230mg、約235mg、約240mg、約245mg、約250mg、約255mg、約260mg、約265mg、約270mg、約275 mg、約280mg、約285mg、約290mg、約295mg、約300mg、約305mg、約310mg、約315mg、約320mg、約325mg、約330mg、約335mg、約340mg、約345mg、約350mg、約355mg、約360mg、約365mg、約370mg、約375mg、約380mg、約385mg、約390mg、約395mg、約400mg、約405mg、約410mg、約415mg、約420mg、約425mg、約430mg、約435mg、約440mg、約445mg、約450mg、約455mg、約460mg、約465mg、約470mg、約475mg、約480mg、約485mg、約490mg、約495mg、約500mg、約505mg、約510mg、約515mg、約520mg、約525mg、約530mg、約535mg、約540mg、約545mg、約550mg、約555mg、約560mg、約565mg、約570mg、約575mg、約580mg、約585mg、約590mg、約595mg、約600mg、約605mg、約610mg、約615mg、約620mg、約625mg、約630mg、約635mg、約640mg、約645mg、約650mg、約655mg、約660mg、約665mg、約670mg、約675mg、約680mg、約685mg、約690mg、約695mg、約700mg、約705mg、約710mg、約715mg、約720mg、約725mg、約730mg、約735mg、約740mg、約745mg或約750mg。

在一些實施例中，化合物1係每天一次投與。在一些實施例中，化合物1係在早晨每天一次投與。在一些實施例中，化合物1係在晚上每天一次投與。在一些實施例中，化合物1係在空腹條件下每天一次投與。在一些實施例中，化合物1係在空腹條件下在早晨每天一次投與。

在一些實施例中，化合物1係每天兩次、三次或四次投與。在一些實施例中，化合物1係每天兩次、三次或四次投與，其中各劑量係相同。在一些實施例中，化合物1係每天兩次、三次或四次投與，其中至少一個劑量係不同於另一劑量。在一些該等實施例中，各劑量可獨立地選自前兩段中之彼等劑量或劑量範圍。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包 含一或多個單位劑量化合物1之醫藥組合物。在一些該等實施例中，單位劑量係約5mg、約30mg、或約150mg且以化合物1之磷酸鹽之形式存在。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之固體口服劑型，其中該單位劑量係約5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約100mg、約125mg、約150mg、約175mg、約200mg、約225mg、或約250mg。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與治療上有效量之化合物1，其中該治療上有效量係選自以下之總每天劑量：約5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約100mg、約105mg、約110mg、約115mg、約120mg、約125mg、約130mg、約135mg、約140mg、約145mg、約150mg、約155mg、約160mg、約165mg、約170mg、約175mg、約180mg、約185mg、約190mg、約195mg、約200mg、約205mg、約210mg、約215mg、約220mg、約225mg、約230mg、約235mg、約240mg、約245mg、約250mg、約255mg、約260mg、約265mg、約270mg、約275mg、約280mg、約285mg、約290mg、約295mg、約300mg、約305mg、約310mg、約315mg、約320mg、約325mg、約330mg、約335mg、約340mg、約345mg、約350mg、約355mg、約360mg、約365mg、約370mg、約375mg、約380mg、約385mg、約390mg、約395mg、約400 mg、約405mg、約410mg、約415mg、約420mg、約425mg、約430mg、約435mg、約440mg、約445mg、約450mg、約455mg、約460mg、約465mg、約470mg、約475mg、約480mg、約485mg、約490mg、約495mg、約500mg、約505mg、約510mg、約515mg、約520mg、約525mg、約530mg、約535mg、約540mg、約545mg、約550mg、約555mg、約560mg、約565mg、約570mg、約575mg、約580mg、約585mg、約590mg、約595mg、約600mg、約605mg、約610mg、約615mg、約620mg、約625mg、約630mg、約635mg、約640mg、約645mg、約650mg、約655mg、約660mg、約665mg、約670mg、約675mg、約680mg、約685mg、約690mg、約695mg、約700mg、約705mg、約710mg、約715mg、約720mg、約725mg、約730mg、約735mg、約740mg、約745mg、約750mg、約760mg、約770mg、約780mg、約790mg、約800mg、約825mg、約850mg、約875mg、約900mg、約925mg、約950mg、約975mg、約1000mg、約1025mg、約1050mg、約1075mg、約1100mg、約1125mg、約1150mg、約1175mg、約1200mg、約1225mg、約1250mg、約1275mg、約1300mg、約1325mg、約1350mg、約1375mg、約1400mg、約1425mg、約1450mg、約1475mg、約1500mg、約1525mg、約1550mg、約1575mg、約1600mg、約1625mg、約1650mg、約1675mg、約1700mg、約1725mg、約1750mg、約1775mg、約1800mg、約1825mg、約1850mg、約1875mg、約1900mg、約1925mg、約1950mg、約1975mg、約2000mg、約2050mg、約2100mg、約2150mg、約2200mg、約2250mg、約2300mg、約2350mg、約2400mg、約2450mg、約2500mg、約2550mg、約2600mg、約2650mg、約2700mg、約2750mg、約2800mg、約2850mg、約2900mg、約2950、或約3000mg。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與治療上有效量之化合物1，其中該治療上有效量係以下之總每天劑量：約100mg至約3000mg、或約500mg至約3000mg、或約100mg至約2500mg、或約500mg至約2500mg、或約100mg至約2200mg、或約500mg至約2200mg、或約600mg至約2200mg、或約700mg至約2200mg、或約800mg至約2200mg、或約800mg至約2100mg、或約800mg至約2000mg。在一些實施例中，該每天劑量係約800mg至約2000mg。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與治療上有效量之化合物1，其中該治療上有效量係以下之總每天劑量：約10mg至約500mg、或約10mg至約450mg、或約10mg至約425mg、或約10mg至約400mg、或約10mg至約375mg、或約10mg至約350mg、或約10mg至約325mg、或約10mg至約300mg、或約10mg至約275mg、或約10至約250mg、或約10至約225mg、或約10mg至約200mg、或約10mg至約190mg、或約10mg至約180mg、或約10mg至約170mg、或約10mg至約160mg、或約10mg至約150mg、或約10mg至約140mg、或約10mg至約130mg、或約10mg至約120mg、或約10mg至約110mg、或約10mg至約100mg、或約10mg至約90mg、或約10mg至約80mg、或約10mg至約70mg、或約10mg至約60mg、或約10mg至約50mg、或約10mg至約40mg、或約10mg至約30mg、或約20mg至約40mg、或約20mg至約60mg、或約20mg至約80mg、或約40mg至約200mg、或約40mg至約160mg、或約80mg至約320mg、或約80mg至約160mg。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係以單一劑量投與。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係在一天中以兩個、三 個或四個劑量投與，其中各劑量係相同。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係在一天中以兩個、三個或四個劑量投與，其中至少一個劑量係不同於另一劑量。

當在一天中投與多於一個劑量時，該等劑量係獨立地選自約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約100mg、約105mg、約110mg、約115mg、約120mg、約125mg、約130mg、約135mg、約140mg、約145mg、約150mg、約155mg、約160mg、約165mg、約170mg、約175mg、約180mg、約185mg、約190mg、約195mg、約200mg、約205mg、約210mg、約215mg、約220mg、約225mg、約230mg、約235mg、約240mg、約245mg、約250mg、約255mg、約260mg、約265mg、約270mg、約275mg、約280mg、約285mg、約290mg、約295mg、約300mg、約305mg、約310mg、約315mg、約320mg、約325mg、約330mg、約335mg、約340mg、約345mg、約350mg、約355mg、約360mg、約365mg、約370mg、約375mg、約380mg、約385mg、約390mg、約395mg、約400mg、約405mg、約410mg、約415mg、約420mg、約425mg、約430mg、約435mg、約440mg、約445mg、約450mg、約455mg、約460mg、約465mg、約470mg、約475mg、約480mg、約485mg、約490mg、約495mg、約500mg、約505mg、約510mg、約515mg、約520mg、約525mg、約530mg、約535mg、約540mg、約545mg、約550mg、約555mg、約560mg、約565mg、約570mg、約575mg、約580mg、約585mg、約590mg、約595mg、約600mg、約605mg、約610mg、約615mg、約620mg、約625mg、約630mg、約635mg、約640mg、約645mg、約650mg、約655mg、約660mg、約665mg、約670mg、約675mg、約680mg、約685mg、約690 mg、約695mg、約700mg、約705mg、約710mg、約715mg、約720mg、約725mg、約730mg、約735mg、約740mg、約745mg、約750mg、約760mg、約770mg、約780mg、約790mg、約800mg、約825mg、約850mg、約875mg、約900mg、約925mg、約950mg、約975mg、約1000mg、約1025mg、約1050mg、約1075mg、約1100mg、約1125mg、約1150mg、約1175mg、約1200mg、約1225mg、約1250mg、約1275mg、約1300mg、約1325mg、約1350mg、約1375mg、約1400mg、約1425mg、約1450mg、約1475mg、約1500mg、約1525mg、約1550mg、約1575mg、約1600mg、約1625mg、約1650mg、約1675mg、約1700mg、約1725mg、約1750mg、約1775mg、約1800mg、約1825mg、約1850mg、約1875mg、約1900mg、約1925mg、約1950mg、約1975mg、或約2000mg、約2050mg、約2100mg、約2150mg、約2200mg、約2250mg、約2300mg、約2350mg、約2400mg、約2450mg、約2500mg、約2550mg、約2600mg、約2650mg、約2700mg、約2750mg、約2800mg、約2850mg、約2900mg、約2950mg、或約3000mg。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係每天一次(QD)投與，其中該劑量係選自約5mg、約10mg、約20mg、約40mg、約80mg、約120mg、約180mg、約330mg、約480mg、或約640mg。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係每天一次(QD)投與，其中該劑量係選自約20mg、約40mg、約80mg、或約160mg。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係每天一次(QD)投與，其中該治療上有效量係選自以下之總每天劑量：約5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70mg、約75mg、約80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約100mg、約105mg、約 110mg、約115mg、約120mg、約125mg、約130mg、約135mg、約140mg、約145mg、約150mg、約155mg、約160mg、約165mg、約170mg、約175mg、約180mg、約185mg、約190mg、約195mg、約200mg、約205mg、約210mg、約215mg、約220mg、約225mg、約230mg、約235mg、約240mg、約245mg、約250mg、約255mg、約260mg、約265mg、約270mg、約275mg、約280mg、約285mg、約290mg、約295mg、約300mg、約305mg、約310mg、約315mg、約320mg、約325mg、約330mg、約335mg、約340mg、約345mg、約350mg、約355mg、約360mg、約365mg、約370mg、約375mg、約380mg、約385mg、約390mg、約395mg、約400mg、約405mg、約410mg、約415mg、約420mg、約425mg、約430mg、約435mg、約440mg、約445mg、約450mg、約455mg、約460mg、約465mg、約470mg、約475mg、約480mg、約485mg、約490mg、約495mg、約500mg、約505mg、約510mg、約515mg、約520mg、約525mg、約530mg、約535mg、約540mg、約545mg、約550mg、約555mg、約560mg、約565mg、約570mg、約575mg、約580mg、約585mg、約590mg、約595mg、約600mg、約605mg、約610mg、約615mg、約620mg、約625mg、約630mg、約635mg、約640mg、約645mg、約650mg、約655mg、約660mg、約665mg、約670mg、約675mg、約680mg、約685mg、約690mg、約695mg、約700mg、約705mg、約710mg、約715mg、約720mg、約725mg、約730mg、約735mg、約740mg、約745mg、約750mg、約760mg、約770mg、約780mg、約790mg、約800mg、約825mg、約850mg、約875mg、約900mg、約925mg、約950mg、約975mg、約1000mg、約1025mg、約1050mg、約1075mg、約1100mg、約1125mg、約1150mg、約1175mg、約1200mg、約1225mg、約1250mg、約1275mg、約1300mg、 約1325mg、約1350mg、約1375mg、約1400mg、約1425mg、約1450mg、約1475mg、約1500mg、約1525mg、約1550mg、約1575mg、約1600mg、約1625mg、約1650mg、約1675mg、約1700mg、約1725mg、約1750mg、約1775mg、約1800mg、約1825mg、約1850mg、約1875mg、約1900mg、約1925mg、約1950mg、約1975mg、約2000mg、約2050mg、約2100mg、約2150mg、約2200mg、約2250mg、約2300mg、約2350mg、約2400mg、約2450mg、約2500mg、約2550mg、約2600mg、約2650mg、約2700mg、約2750mg、約2800mg、約2850mg、約2900mg、約2950mg、或約3000mg。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係每天一次(QD)投與，其中該劑量係選自約100mg、約150mg、約200mg、約250mg、約300mg、約350mg、約400mg、約450mg、約500mg、約550mg、約600mg、約650mg、約700mg、約750mg、約800mg、約850mg、約900mg、約950mg、約1000mg、約1050mg、約1100mg、約1150mg、約1200mg、約1250mg、約1300mg、約1350mg、約1400mg、約1450mg、約1500mg、約1550mg、約1600mg、約1650mg、約1700mg、約1750mg、約1800mg、約1850mg、約1900mg、約1950mg、約2000mg、約2050mg、約2100mg、約2150mg、約2200mg、約2250mg、約2300mg、約2350mg、約2400mg、約2450mg、約2500mg、約2550mg、約2600mg、約2650mg、約2700mg、約2750mg、約2800mg、約2850mg、約2900mg、約2950mg、或約3000mg。

在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係每天兩次投與。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係「BID」投與。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之 組合物係以兩個不同劑量投與，其中第一投與劑量不同於第二投與劑量。

在一些實施例中，醫藥上可接受之組合物包含化合物1係每天三次投與。在一些實施例中，醫藥上可接受之組合物包含化合物1係「TID」投與。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係以三個不同劑量投與，其中該等投與劑量中之至少一者不同於另一投與劑量。在一些實施例中，醫藥上可接受之組合物包含化合物1係每天四次投與。在一些實施例中，醫藥上可接受之組合物包含化合物1係「QID」投與。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係以四個不同劑量投與，其中該等投與劑量中之至少一者不同於另一投與劑量。

在一些實施例中，化合物1之總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些該等實施例中，該總每天劑量係上述及文中所涵蓋之彼等中之任一者。

在一些實施例中，化合物1之100mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之200mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之300mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之400mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之500mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之600mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之700mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之800mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之900mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1000mg 總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1100mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1200mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1300mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1400mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1500mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1600mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1700mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1800mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之1900mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之2000mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。在一些實施例中，化合物1之大於2000mg總每天劑量係在空腹條件下每天一次投與給患者。

在一些實施例中，化合物1之治療上有效量係在連續28天(「28天週期」)時間期內投與。

在一些實施例中，化合物1之治療上有效量係在連續28天(「28天週期」)時間期內投與，其中投藥每天發生，在28天週期中持續連續21天。在一些該等實施例中，投藥發生每天一次。在一些該等實施例中，投藥在空腹條件下發生每天一次。

在一些實施例中，化合物1之治療上有效量係投與兩、三、四、五或六個28天週期。在一些實施例中，化合物1之治療上有效量係投與七個、八個、九個、十個、十一個、十二個或更多個28天週期。在一些實施例中，包含化合物1之醫藥上可接受之組合物係投與至少十三個、至少十四個、至少十五個、至少十六個、至少十七個、至少十 八個、至少十九個或至少二十個28天週期。在一些實施例中，化合物1之治療上有效量係投與給患者，持續患者之生命時間。

包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之調配物

如上所述，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該醫藥上可接受之組合物係口服劑型。在一些實施例中，該醫藥上可接受之組合物係調配成膠囊。在一些實施例中，該醫藥上可接受之組合物係摻合粉末。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽及一或多種醫藥上可接受之賦形劑諸如例如一或多種增溶劑、表面活性劑/潤濕劑、分散劑、填充劑、崩解劑、助滑劑及潤滑劑。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽之醫藥上可接受之組合物。

在一些實施例中，本發明提供一種組合物，其包含化合物1之選自由以下組成之群之醫藥上可接受之鹽形式：磷酸鹽形式、HCl鹽形式、HBr鹽形式、雙磷酸鹽形式、硫酸鹽形式、雙硫酸鹽形式、甲苯磺酸鹽形式、甲磺酸鹽形式、苯磺酸鹽形式、馬來酸鹽形式及草酸鹽形式。在一些實施例中，本發明提供一種組合物，其包含化合物1之選自由磷酸鹽形式組成之群之醫藥上可接受之鹽形式。

熟習此項技術者將容易明白列出之特定組分之類別無意具有限制性；在一些情況下，特定組分可適當符合多於一個類別。亦咸了解，在特定調配物之情境中，相同組分可有時表現不同功能，或可表現多於一種功能，例如取決於該成分之量及/或其他成分及/或活性化合物之存在。

i. 增溶劑

在一些實施例中，所提供之調配物可包含一或多種增溶劑。增溶劑包括(以實例之方式且不限於)環糊精例如α-環糊精、β-環糊精、γ-環糊精、2-羥丙基-β-環糊精、羥甲基環糊精、羥乙基環糊精及羥丁基環糊精、羧甲基環糊精、羧乙基環糊精、羧丙基環糊精、羧丁基環糊精、甲基羧甲基環糊精；胺基環糊精、磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽(「SBECD」，亦在文中稱作β環糊精(betadex)磺基丁基醚鈉、磺基丁基醚β環糊精或SBE β環糊精)及類似物及其組合。在一些實施例中，該增溶劑係磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自1%至約50%增溶劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自1%至約45%、或約1%至約40%、或約1%至約35%、或約1%至約30%、或約1%至約25%、或約1%至約20%增溶劑，基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約1%至約10%增溶劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約1%至約9%、或約1%至約8%、或約1%至約7%、或約1%至約6%、或約1%至約5%、或約2%至約4%增溶劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之增溶劑：約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%、約2.5%、約2.6%、約2.7%、約2.8%、約2.9%、約3.0%、約3.1%、約3.2%、約3.3%、約3.4%、約3.5%、約3.6%、約3.7%、約3.8%、約3.9%、或約4.0%。在一些實施例中，所提供之組合物包含約3.33%量之增溶劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約10%至約30%增溶劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約 10%至約25%、或約15%至約25%、或約17%至約23%、或約18%至約22%、或約19%至約21%增溶劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之增溶劑：約10%、約11%、約12%、約13%、約14%、約15%、約16%、約17%、約18%、約19%、約20%、約21%、約22%、約23%、約24%、約25%、約26%、約27%、約28%、約29%、約30%、約31%、約32%、約33%、約34%、約35%、約36%、約37%、約38%、約39%、或約40%。在一些實施例中，所提供之組合物包含約20%量之增溶劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑：約1%至約45%、或約1%至約40%、或約1%至約35%、或約1%至約30%、或約1%至約25%、或約1%至約20%增溶劑，基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約1%至約10%量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑：約1%至約9%、或約1%至約8%、或約1%至約7%、或約1%至約6%、或約1%至約5%、或約2%至約4%。在一些實施例中，所提供之組合物包含約3.33%量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約10%至約30%量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽：約10%至約25%、或約15%至約25%、或約17%至約23%、或約18%至約22%、或約19%至約21%。在一些實施例中，所提供之組合物包含約20%量之磺基丁基醚-β-環糊精鈉鹽作為增溶劑。

ii. 表面活性劑/潤濕劑

表面活性劑/潤濕劑係此項技術中熟知且通常藉由增強不良可溶 性藥物之溶解度而促進藥物釋放及吸收。代表性表面活性劑/潤濕劑包括(但不限於)泊洛沙姆、聚氧伸乙基醚(例如，聚乙二醇)、聚氧伸乙基山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧伸乙基脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯、聚氧伸乙基氫化蓖麻油、聚氧伸乙基烷基醚、聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯80)、鯨蠟醇、甘油脂肪酸酯(例如，三乙酸甘油酯、甘油單硬脂酸酯及類似物)、聚甲醛硬脂酸酯、月桂基硫酸鈉、山梨糖醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、氯化苄二甲烴銨、聚乙氧基化蓖麻油、多庫酯鈉、維生素E TPGS、共聚維酮、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯啶酮(PVP)、纖維素例如甲基纖維素(MC)、羥丙基纖維素(HPC)、羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羧甲基纖維素(CMC)、羥乙基甲基纖維素(HEMC)、磷脂(例如，卵磷脂)、氫化磷脂、Soluplus®(亦即聚乙烯基己內醯胺/聚乙酸乙烯酯/聚乙二醇接枝共聚物)及類似物及其組合。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約10%、或自約0.1%至約9%、或自約0.1%至約8%、或自約0.1%至約7%、或自約0.1%至約6%、或自約0.1%至約5%、或自約0.1%至約4%、或自約0.1%至約3%、或自約0.1%至約2%表面活性劑/潤濕劑、或自約0.1%至約1%、或自約0.1%至約0.5%、或自約0.2%至約0.4%表面活性劑/潤濕劑，基於該調配物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約10%、或自約0.2%至約8%、或自約0.5%至約5%、或自約1%至約5%、或自約1%至約4%、或自約1%至約3%、或自約1.5%至約2.5%表面活性劑/潤濕劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，提供組合物包含約2%表面活性劑/潤濕劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約 1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2.0%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%、約2.5%、約2.6%、約2.7%、約2.8%、約2.9%或約3.0%表面活性劑/潤濕劑。在一些實施例中，提供組合物包含約0.33%表面活性劑/潤濕劑。

在一些實施例中，表面活性劑/潤濕劑係例如月桂基硫酸鈉(SLS)之表面活性劑/潤濕劑。例如，在一些實施例中，表面活性劑/潤濕劑係以下量之月桂基硫酸鈉：約0.1%至約10%、或自約0.1%至約9%、或自約0.1%至約8%、或自約0.1%至約7%、或自約0.1%至約6%、或自約0.1%至約5%、或自約0.1%至約4%、或自約0.1%至約3%。在一些實施例中，表面活性劑/潤濕劑係約2%量之月桂基硫酸鈉。

在一些實施例中，表面活性劑/潤濕劑係以下量之月桂基硫酸鈉：約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2.0%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%、約2.5%、約2.6%、約2.7%、約2.8%、約2.9%或約3.0%。在一些實施例中，表面活性劑/潤濕劑係以約0.33%量之月桂基硫酸鈉。

iii. 分散劑

在一些實施例中，所提供之調配物可包含一或多種分散劑。分散劑係添加至調配物以預防沉降、凝集或膠化之物質。例如，在一些實施例中，化合物1在水分之存在下具有膠化傾向。已發現，使用一些分散劑可最小化該膠化。分散劑包括(以實例之方式且不限於)鹽例如碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鉀、碳酸氫鉀、碳酸鉀、磷酸二氫鉀及氯化鈉；糖例如甘露醇、果糖、蔗糖、木糖醇馬來酸、山梨醇及右旋糖；及酸例如D,L-蘋果酸；及類似 物及其組合。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約20%分散劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約15%、或約0.1%至約10%、或約0.1%至約8%、或約0.1%至約7%、或約0.1%至約6%、或約0.1%至約5%、或約0.1%至約4%、或約0.1%至約3%、或約0.1%至約2%、或約0.1%至約1%、或約0.2%至約0.8%、或約0.2%至約0.6%、或約0.3%至約0.5%分散劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.5%至約10%、或約0.5%至約5%、或約1%至約5%、或約1%至約4%、或約1%至約3.5%、或約1.5%至約3.5%、或約2%至約3%分散劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%、約2.5%、約2.6%、約2.7%、約2.8%、約2.9%或約3.0%分散劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.4%分散劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.5%分散劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.42%分散劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約2.0%分散劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約3.0%分散劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約2.5%分散劑。

在一些實施例中，分散劑係碳酸氫鹽，例如碳酸氫鈉。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之碳酸氫鈉作為分散劑：約0.1%至約15%、或約0.1%至約10%、或約0.1%至約8%、或約0.1%至約7%、或約0.1%至約6%、或約0.1%至約5%、或約0.1%至約4%、或 約0.1%至約3%。在一些實施例中，所提供之組合物包含以下量之碳酸氫鈉作為分散劑：約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%、約2.5%、約2.6%、約2.7%、約2.8%、約2.9%或約3.0%。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.4%碳酸氫鈉。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.5%碳酸氫鈉。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.42%碳酸氫鈉。

在一些實施例中，所提供之組合物包含約2.0%碳酸氫鈉。在一些實施例中，所提供之組合物包含約3.0%碳酸氫鈉。在一些實施例中，所提供之組合物包含約2.5%碳酸氫鈉。

iv. 填充劑

用於本發明之組合物可包含一或多種填充劑。填充劑係用於固體口服劑型之調配物中以將活性醫藥成分及非活性成分維持在一起呈內聚性混合物。

適宜填充劑(亦稱作「稀釋劑」及/或「黏結劑」)係此項技術中已知。例如，適宜填充劑包括(但不限於)澱粉、PVP(聚乙烯吡咯啶酮)、纖維素(例如低分子量HPC(羥丙基纖維素)、微晶纖維素(例如，Avicel®)、矽化微晶纖維素(Prosolv 50)、低分子量HPMC(羥丙基甲基纖維素)、低分子量羧甲基纖維素(例如，羧甲基纖維素鈉)及乙基纖維素)、預膠化澱粉、藻酸鹽、明膠、聚環氧乙烷、阿拉伯膠、糊精、蔗糖、乳糖(例如，單水合乳糖)、甘露醇、矽酸鎂鋁及聚甲基丙烯酸酯。

填充劑包括選自由以下組成之群之試劑：矽酸、微晶纖維素(例如，Avicel®)、澱粉、預膠化澱粉、糖(例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、右 旋糖、果糖、麥芽糖)、適宜無機鈣鹽(例如磷酸氫鈣及硫酸鈣)、多元醇(例如山梨醇、甘露醇、乳糖醇、麥芽糖醇及木糖醇)或其組合。

在一些實施例中，填充劑係選自由以下各物組成之群：微晶纖維素、澱粉、預膠化澱粉、右旋糖、蔗糖、二鹼式磷酸鈣、硫酸鈣、甘露醇或其組合。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約90%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自15%至約85%填充劑，基於該調配物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約50%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約40%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約30%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自15%至約25%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自20%至約25%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約14%、約15%、約16%、約17%、約18%、約19%、約20%、約21%、約22%、約23%、約24%、約25%、約26%、約27%、約28%、約29%或約30%填充劑。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自40%至約90%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自50%至約90%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自60%至約90%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自70%至約90%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自75%至約85%填充劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自78%至約82%填充劑，基於該調配物之總重量 計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約70%、約71%、約73%、約73%、約74%、約75%、約76%、約77%、約78%、約79%、約80%、約81%、約82%、約83%、約84%、約85%、約86%、約87%、約88%、約89%、或約90%填充劑。

在一些實施例中，該填充劑係微晶纖維素。在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約90%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自15%至約85%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約50%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約40%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自10%至約30%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自15%至約25%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自20%至約25%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約14%、約15%、約16%、約17%、約18%、約19%、約20%、約21%、約22%、約23%、約24%、約25%、約26%、約27%、約28%、約29%或約30%微晶纖維素。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自40%至約90%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自50%至約90%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自60%至約90%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自70%至約90%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自75%至約85%微晶纖維素，基於該調配物之總重量 計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自78%至約82%微晶纖維素，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含約70%、約71%、約73%、約73%、約74%、約75%、約76%、約77%、約78%、約79%、約80%、約81%、約82%、約83%、約84%、約85%、約86%、約87%、約88%、約89%、或約90%微晶纖維素。

v. 崩解劑

用於本發明之醫藥組合物可進一步包含一或多種崩解劑。將適宜崩解劑併入所提供之組合物中可促進所提供之組合物之分解。因此，包含崩解劑可為含有活性化合物之所提供之組合物特別所需。適宜崩解劑係此項技術中已知且包括(但不限於)黏土、瓊脂、碳酸鈣、碳酸鈉、碳酸氫鈉、交聯羧甲基纖維素鈉(交聯羧甲纖維素鈉)、澱粉、羧甲基澱粉鈉(澱粉羥乙酸鈉)、羧甲基纖維素鈣、預膠化澱粉、微晶纖維素、交聯聚乙烯吡咯啶酮(例如，交聯聚維酮)、馬鈴薯或木薯澱粉、藻酸、一些矽酸鹽、微晶澱粉、水不溶性澱粉、矽酸鎂鋁(Veegum)或其組合。

在一些實施例中，適宜崩解劑係選自交聯聚乙烯吡咯啶酮、澱粉、預膠化澱粉、澱粉羥乙酸鈉、交聯羧甲纖維素鈉、微晶纖維素、黏土或其組合。

在一些實施例中，所提供之調配物包含自約1%至約30%崩解劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之調配物包含自約1%至約25%、約1%至約20%崩解劑、約1%至約15%崩解劑、約1%至約10%崩解劑、約2%至約8%崩解劑、約3%至約7%崩解劑或約4%至約6%崩解劑。在一些實施例中，所提供之調配物包含約1%、約2%、約3%、約4%、約5%、約6%、約7%、約8%、約9%、或約10%崩解劑，基於該調配物之總重量計。在一些實施例中，所提供之調配物包含約5%崩解劑，基於該調配物之總重量計。

在一些實施例中，所提供之組合物中之崩解劑係交聯聚合物例如交聯聚乙烯吡咯啶酮。在一些實施例中，崩解劑係交聯聚乙烯吡咯啶酮。在一些實施例中，崩解劑係以下量之交聯聚乙烯吡咯啶酮：約1%至約25%、約1%至約20%崩解劑、約1%至約15%崩解劑、約1%至約10%崩解劑、約2%至約8%崩解劑、約3%至約7%崩解劑或約4%至約6%。在一些實施例中，所提供之調配物包含約1%、約2%、約3%、約4%、約5%、約6%、約7%、約8%、約9%、或約10%交聯聚乙烯吡咯啶酮，基於該調配物之總重量計。

vi. 助滑劑

本發明之醫藥組合物可進一步包含一或多種助滑劑。助滑劑係添加至粉末以改良其流動性之物質。該等化合物包括(但不限於)膠態矽石(亦稱作膠態二氧化矽)、發煙矽石、滑石、澱粉、DL-白胺酸、金屬硬脂酸鹽(例如硬脂酸鈉、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅及硬脂酸鎂)、月桂基硫酸鈉及類似物及其組合。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約3%助滑劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約2.5%、或約0.1%至約2.0%、或約0.1%至約1.5%、或約0.5%至約1.5%、或約0.8%至約1.2%助滑劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、或約2%助滑劑。

在一些實施例中，助滑劑係膠態矽石。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約2.5%、或約0.1%至約2.0%、或約0.1%至約1.5%、或約0.5%至約1.5%膠態矽石，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.5%至約1.5%膠態矽石。 在一些實施例中，所提供之組合物包含1.0%膠態矽石。

vii. 潤滑劑

本發明之醫藥組合物可進一步包含一或多種潤滑劑。潤滑劑係少量添加至調配物以改良一些加工特徵之試劑。例如，潤滑劑防止調配物混合物黏至壓縮機器並藉由降低顆粒間摩擦來增強產物流動。該等化合物包括(以實例之方式說明且不限於)油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸鎂、聚乙二醇、滑石、硼酸、礦物油、硬脂酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、DL-白胺酸、三萮酸甘油酯、月桂基硫酸鎂、月桂基硫酸鈉、氫化植物油、二硬脂酸甘油酯、硬脂酸基富馬酸鈉、油酸鈉、脂肪酸(例如，棕櫚酸及硬脂酸)及一般技術者已知的其他材料。

在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約3%潤滑劑，基於該組合物之總重量計。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約2.5%、或約0.1%至約2.0%、或約0.1%至約1.5%、或約0.5%至約1.5%、或約0.8%至約1.2%潤滑劑。在一些實施例中，所提供之組合物包含約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1.0%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、或約2%潤滑劑。

在一些實施例中，潤滑劑係硬脂酸鎂。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約2.5%硬脂酸鎂。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.1%至約2.0%硬脂酸鎂。在一些實施例中，所提供之組合物包含自0.5%至約1.5%硬脂酸鎂。在一些實施例中，所提供之組合物包含約1%硬脂酸鎂。

vi. 化合物1之磷酸鹽

如上所述，本發明提供一種治療癌症之方法，該方法包括對有 此需要之患者投與包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物。因此，在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽。

如上文及文中所述，在一些實施例中，本發明提供化合物1之醫藥上可接受之鹽。例如，在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽，下圖所繪：

化合物1之磷酸鹽

一般技術者咸了解磷酸與化合物1離子性結合以形成化合物1之磷酸鹽。預期化合物1之磷酸鹽可呈各種物理形式存在。例如，化合物1之磷酸鹽可呈溶液、懸浮液或呈固體形式。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係呈固體形式。當化合物1之磷酸鹽係呈固體形式時，該化合物可係非晶態、結晶、或其混合物。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係無水。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係水合物。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係溶劑化物。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係去水物。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係去溶劑化物。示例性固體形式係更詳細描述於下文中。

在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽實質上不含雜質。如文中所使用，術語「實質上不含雜質」意指該化合物不含顯著量之外來物質。該外來物質包括過量磷酸、過量化合物1、殘餘溶劑或可來源於化合物1之磷酸鹽之製備及/或單離之任何其他雜質。在一些實施例中，存在至少約95重量%之化合物1之磷酸鹽。在本發明之還有其他實施例中，存在至少約99重量%之化合物1之磷酸鹽。

根據一個實施例，化合物1之磷酸鹽係以至少約97、97.5、98.0、98.5、99、99.5、99.8重量%的量存在，其中該等百分比係基於該組合物之總重量計。根據另一個實施例，化合物1之磷酸鹽含有不多於約3.0面積百分比HPLC之總有機雜質及，在一些實施例中，不多於約1.5面積百分比HPLC總有機雜質，相對HPLC層析圖之總面積計。在其他實施例中，化合物1之磷酸鹽含有不多於約1.0%面積百分比HPLC之任何單一雜質，不多於約0.6面積百分比HPLC之任何單一雜質，及在一些實施例中，不多於約0.5面積百分比HPLC之任何單一雜質，相對HPLC層析圖之總面積計。

針對化合物1之磷酸鹽所描繪之結構亦意指包括化合物1之磷酸鹽之所有互變異構形式。此外，此處所繪結構亦意指包括僅在一或多種同位素富集原子之存在下不同之化合物。例如，具有本發明結構只是氫被化合物氘或氚置換或碳被¹³C-或¹⁴C富集碳置換之化合物位於本發明範圍內。

已發現化合物1之磷酸鹽可以各種固體形式存在。示例性該等形式包括多晶型物，例如彼等文中所述者。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係結晶固體。在其他實施例中，化合物1之磷酸鹽係實質上不含化合物1之非晶態磷酸鹽之結晶固體。如文中所使用，術語「實質上不含化合物1之非晶態磷酸鹽」意指該化合物不含顯著量之化合物1之非晶態磷酸鹽。在一些實施例中，存在至少約95重量%之化合物1之結晶磷酸鹽。在本發明之還有其他實施例中，存在至少約99重量%之化合物1之結晶磷酸鹽。

已發現化合物1之磷酸鹽可以至少四種獨特多晶型物形式存在。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作A型。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作B型。在一些實施例中，本 發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作C型。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作D型。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係非晶態。在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係非晶態，且係實質上不含化合物1之結晶磷酸鹽。

化合物1之磷酸鹽之多晶型物包括A型至D型，如下文進一步描述。因此，已發現化合物1之磷酸鹽可以至少四種獨特多晶型物形式存在。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作A型。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作B型。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作C型。在一些實施例中，本發明提供化合物1之磷酸鹽之一種多晶型物形式，其在文中稱作D型。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽之A型之醫藥上可接受之組合物。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係A型且具有至少1、2、3、4或5個選自下表1中列出之峰之譜峰。

在一些實施例中，A型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約6.8、10.1及20.8下之一或多個峰。在一些實施例中，A型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約6.8、10.1及20.8下之兩個或更多個峰。在一些實施例中，A型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約6.8、10.1及20.8下之所有三個峰。

在一些實施例中，該X射線粉末繞射圖案與圖1中所提供之XRPD實質上類似。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係B型且具有至少1、2、3、4或5個選自下表2中列出之峰之譜峰。

在一些實施例中，B型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約3.6、7.3及15.0下之一或多個峰。在一些實施例中，B型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約 3.6、7.3及15.0下之兩個或更多個峰。在一些實施例中，B型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約3.6、7.3及15.0下之所有三個峰。

在一些實施例中，該X射線粉末繞射圖案與圖2中所提供之XRPD實質上類似。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係C型且具有至少1、2、3、4或5個選自下表3中列出之峰之譜峰。

在一些實施例中，C型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約8.4、9.3及16.5下之一或多個峰。在一些實施例中，C型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約8.4、9.3及16.5下之兩個或更多個峰。在一些實施例中，C型之特徵在 於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約8.4、9.3及16.5下之所有三個峰。

在一些實施例中，該X射線粉末繞射圖案與圖3中所提供之XRPD實質上類似。

在一些實施例中，化合物1之磷酸鹽係D型且具有至少1、2、3、4或5個選自下表4中列出之峰之譜峰。

位置2θ係位於±0.2中。

在一些實施例中，D型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約9.1、10.4及25.1下之一或多個峰。在一些實施例中，D型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約9.1、10.4及25.1下之兩個或更多個峰。在一些實施例中，D型之特徵在於其在其X射線粉末繞射圖案中具有選自彼等在約9.1、10.4及25.1下之所有三個峰。

在一些實施例中，該X射線粉末繞射圖案與圖4中所提供之XRPD實質上類似。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約1%至約60%之化合物1之磷酸鹽，基於既定組合物或調配物之總重量計(重量%)。在一些實施例中，所提供之組合物或其調配物包含自約1重量%至約50重量%之化合物1之磷酸鹽。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約1重量%至約20重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約2重量%至約18重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約4重量%至約12重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約5重量%至約10重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約6重量%至約9重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約7重量%至約8重量%之化合物1之磷酸 鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約7.59重量%之化合物1之磷酸鹽。

在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約20重量%至約60重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約25重量%至約55重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約30重量%至約50重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約35重量%至約50重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約40重量%至約50重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約41重量%至約49重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約42重量%至約48重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約43重量%至約47重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約44重量%至約46重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約45重量%至約46重量%之化合物1之磷酸鹽。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與醫藥上可接受之組合物，其包含約45.53重量%之化合物1之磷酸鹽。

在一些該等實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之醫藥組合物，其中化合物1係呈磷酸鹽之A 型、B型、C型或D型中之任一者之形式，且其中該單位劑量係彼等上文及文中所述者中之任一者。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之醫藥組合物，其中化合物1係呈磷酸鹽之A型之形式，且其中該單位劑量係彼等上文及文中所述者中之任一者。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之醫藥組合物，其中化合物1係呈磷酸鹽之A型之形式，且其中該單位劑量係約5mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之醫藥組合物，其中化合物1係呈磷酸鹽之A型之形式，且其中該單位劑量係約30mg。在一些實施例中，所提供之方法包括對有此需要之患者投與包含單位劑量化合物1之醫藥組合物，其中化合物1係呈磷酸鹽之A型之形式，且其中該單位劑量係約150mg。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕文中所述癌症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕BRAF突變型癌症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。在一些該等實施例中，該BRAF突變型癌症係BRAF^V600突變型癌症，例如BRAF^V600E、BRAF^V600K、BRAF^V600R及BRAF^V600D。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕RAS突變型癌症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。在一些實 施例中，該RAS突變涉及密碼子12、13或61。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症，包括(但不限於)KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係NRAS突變型癌症，包括(但不限於)NRAS^Q61R、NRAS^Q61K、NRAS^Q61L或NRAS^Q61H。在一些實施例中，該RAS突變型癌症係HRAS突變型癌症，包括(但不限於)HRAS^G12V、HRAS^Q61R及HRAS^G12S。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕黑色素瘤之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕結腸直腸癌之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕胰臟癌之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕甲狀腺癌之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕肺癌之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕白血病之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕CNS癌症之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕多發性骨髓瘤之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕HCC之嚴重度或進展之方法，其中該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽或其醫藥上可接受之組合物。在一些實施例中，該方法包括對有此需要之患者投與化合物1之磷酸鹽之A型。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與包含化合物1之磷酸鹽之醫藥組合物，其中該磷酸鹽之量係足以遞送約5mg、約10mg、約20mg、約40mg、約80mg、約100mg、約120mg、約180mg、約330mg、約480mg、或約640mg化合物1之游離鹼。在一些該等實施例中，該醫藥組合物進一步包含一或多種選自一或多種以下各物之醫藥上可接受之賦形劑：增溶劑、表面活性劑/潤濕劑、分散劑、填充劑、崩解劑、助滑劑、潤滑劑或其組合。在一些該等實施例中，該醫藥組合物進一步包含一或多種選自以下各物之醫藥上可接受之賦形劑：β環糊精磺基丁基醚鈉、月桂基硫酸鈉、碳酸氫鈉、微晶 纖維素、交聯聚維酮、膠態二氧化矽及硬脂酸鎂，其中各組成之量係基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症(例如，BRAF突變型癌症、RAF突變型癌症、黑色素瘤、結腸直腸癌、肺癌、白血病或胰臟癌)之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與包含以下各物之醫藥組合物：(a)約1%至約60%化合物1之磷酸鹽；(b)約1%至約50%增溶劑；(c)約0.1%至約10%表面活性劑/潤濕劑；(d)約0.1%至約20%分散劑；(e)約10%至約90%填充劑；(f)約1%至約30%崩解劑；(g)約0.1%至約3%助滑劑；及(h)約0.1%至約3%潤滑劑；其中各組分之量係基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，本發明提供一種治療、穩定或減輕癌症(例如，RAS突變型癌症、RAF突變型癌症、黑色素瘤、結腸直腸癌、肺癌或胰臟癌)之嚴重度或進展之方法，該方法包括對有此需要之患者投與包含以下各物之醫藥組合物：(a)約1%至約60%化合物1之磷酸鹽；(b)約1%至約50%β環糊精磺基丁基醚鈉；(c)約0.1%至約10%月桂基硫酸鈉；(d)約0.1%至約20%碳酸氫鈉；(e)約10%至約90%微晶纖維素；(f)約1%至約30%交聯聚維酮；(g)約0.1%至約3%膠態二氧化矽；及(h)約0.1%至約3%硬脂酸鎂；其中各組分之量係基於該組合物之總重量計。

在一些實施例中，該醫藥組合物係選自彼等表5中之列出者：

V. 用於製備醫藥組合物之方法

乾式摻合方法：

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由乾式摻合化合物1或其醫藥上可接受之鹽及賦形劑來製備。示例性該等方法描述於下文及實例部分中。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合表面活性劑/潤濕劑、分散劑、增溶劑及崩解劑以形成第一摻合粉末；(b)將化合物1或其醫藥上可接受之鹽添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(c)篩選該第二摻合粉末；(d)將一部分填充劑添加至該經篩選的第二摻合粉末中並摻合以形成第三摻合粉末；(e)篩選該第三摻合粉末；(f)將助滑劑及剩餘填充劑添加至該經篩選的第三摻合粉末中並摻合以形成第四摻合粉末；及 (g)將潤滑劑添加至該第四摻合粉末中並摻合以形成第五摻合粉末。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合月桂基硫酸鈉、碳酸氫鈉、β環糊精磺基丁基醚鈉及交聯聚維酮以形成第一摻合粉末；(b)將化合物1或其醫藥上可接受之鹽添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(c)篩選該第二摻合粉末；(d)將一部分微晶纖維素添加至該經篩選的第二摻合粉末中並摻合以形成第三摻合粉末；(e)篩選該第三摻合粉末；(f)將膠態二氧化矽及剩餘微晶纖維素添加至該經篩選的第三摻合粉末中並摻合以形成第四摻合粉末；及(g)將硬脂酸鎂添加至該第四摻合粉末中並摻合以形成第五摻合粉末。

在一些實施例中，膠囊係經該最終摻合粉末填充。

在一些實施例中，使用上述程序以製備含有以下量之化合物1或其醫藥上可接受之鹽之膠囊：約1重量%至約20重量%、或自約2重量%至約18重量%、或自約4重量%至約12重量%、或自約5重量%至約10重量%、或自約6重量%至約9重量%、或自約7重量%至約8重量%。在一些實施例中，使用上述程序以製備含有約7.59重量%的量之化合物1之磷酸鹽之膠囊。在一些該等實施例中，化合物1之磷酸鹽係A型。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合表面活性劑/潤濕劑及分散劑以形成第一摻合粉末； (b)篩選該第一摻合粉末；(c)將崩解劑添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(d)篩選該第二摻合粉末；(e)將增溶劑添加至該經篩選的第二摻合粉末中並摻合以形成第三摻合粉末；(f)篩選該第三摻合粉末；(g)將助滑劑及填充劑添加至該經篩選的第三摻合粉末中並摻合以形成第四摻合粉末；(h)篩選該第四摻合粉末；(i)將化合物1或其醫藥上可接受之鹽添加至該第四摻合粉末中並摻合以形成第五摻合粉末；(j)篩選該第五摻合粉末；(k)摻合該經篩選的第五摻合粉末；及(l)將潤滑劑添加至該經篩選的第五摻合粉末中以形成第六摻合粉末。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合月桂基硫酸鈉及碳酸氫鈉以形成第一摻合粉末；(b)篩選該第一摻合粉末；(c)將交聯聚維酮添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(d)篩選該第二摻合粉末；(e)將β環糊精磺基丁基醚鈉添加至該經篩選的第二摻合粉末中並摻合以形成第三摻合粉末；(f)篩選該第三摻合粉末； (g)將膠態二氧化矽及微晶纖維素添加至該經篩選的第三摻合粉末中並摻合以形成第四摻合粉末；(h)篩選該第四摻合粉末；(i)將化合物1或其醫藥上可接受之鹽添加至該第四摻合粉末中並摻合以形成第五摻合粉末；(j)篩選該第五摻合粉末；(k)摻合該經篩選的第五摻合粉末；及(l)將硬脂酸鎂添加至該經篩選的第五摻合粉末中以形式第六摻合粉末。

在一些實施例中，膠囊係經該最終摻合粉末填充。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合月桂基硫酸鈉、碳酸氫鈉及β環糊精磺基丁基醚鈉以形成第一摻合粉末；(b)將化合物1、交聯聚維酮、微晶纖維素及膠態二氧化矽添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(c)篩選該第二摻合粉末；(d)再一次摻合該經篩選的第二摻合粉末；(e)將硬脂酸鎂添加至該經篩選的第二摻合粉末中以形成第三粉末；及(f)摻合該第三粉末。

在一些實施例中，所提供之調配物係藉由包含以下步驟之方法來製備：(a)摻合月桂基硫酸鈉、碳酸氫鈉及交聯聚維酮以形成第一摻合粉末；(b)將化合物1、β環糊精磺基丁基醚鈉、微晶纖維素及膠態二氧 化矽添加至該第一摻合粉末中並摻合以形成第二摻合粉末；(c)篩選該第二摻合粉末；(d)再一次摻合該經篩選的第二摻合粉末；(e)再一次篩選該第二摻合粉末；(f)將硬脂酸鎂添加至該經篩選的第二摻合粉末中以形成第三粉末；及(g)摻合該第三粉末。

在一些實施例中，使用上述程序以製備含有以下量之化合物1或其醫藥上可接受之鹽之膠囊：約20重量%至約60重量%、或自約25重量%至約55重量%、或自約30重量%至約50重量%、或自約35重量%至約50重量%、或自約40重量%至約50重量%、或自約41重量%至約49重量%、或自約42重量%至48重量%、或自約43重量%至47重量%、或自約44重量%至約46重量%、或自約45重量%至約46重量%。在一些實施例中，使用上述程序以製備含有約45.53重量%的量之化合物1之磷酸鹽之膠囊。在一些該等實施例中，化合物1之磷酸鹽係A型。

本發明之各態樣之所有特徵在細節上做必要修正(mutatis mutandis)適用於所有其他態樣。

為更充分瞭解文中所述之本發明，描述以下實例。應瞭解，此等實例僅出於說明性目的且不應理解為以任何方式限制本發明。

例證

如下文實例中所描繪，在一些示例性實施例中，根據以下一般程序製備化合物。應明白，儘管該等一般方法描繪一些本發明化合物之合成，但該等以下一般方法及一般技術者所知之其他方法可應用於如文中所述之所有化合物及此等化合物之各者之亞類及種類。

實例1 化合物1之一般製法

如下文實例中所描繪，在一些示例性實施例中，化合物1係根據以下一般程序來製備。

於Bruker AVANCE-300MHz NMR光譜儀上獲得質子核磁共振(¹H NMR)譜。使用氘化DMSO作為溶劑。

根據下文及‘230公開案(其全文以引用之方式併入本文中)中所之述步驟及中間物製備該標題化合物。

步驟1：N-(2-(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基胺基)5-甲基苯基)丙烯醯胺(中間物1)

在rt下，將碳酸鉀(46.0mmol)添加至含於二甲基乙醯胺(25mL)中之N-(2-胺基-5-甲基苯基)丙烯醯胺(22.2mmol)之攪拌溶液中，並攪拌該混合物15分鐘。將2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(22.2mmol)添加至此反應混合物中，並在60℃下繼續攪拌1小時。完成後，用水(2 x 50mL)稀釋該反應混合物並用EtOAc(2 x 100mL)萃取。於硫酸鈉上乾燥有機層並濃縮以獲得粗製產物。此粗製產物藉由矽膠管柱層析純化且隨後藉由製備型HPLC純化以獲得所需中間物1。

步驟2：酸催化之偶合方法

將2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-胺(3.51mmol)添加至中間物1(2.923 mmol)含於0.04M PTSA的1,4-二噁烷溶液(20mL)中之溶液中，並在95℃下攪拌混合物16小時。完成後，該反應混合物直接吸附於矽膠上並藉由管柱層析純化。於DCM：EtOAc：乙醚(10mL：10mL：30mL)混合物中攪拌所得產物10min，隨後過濾並於真空下乾燥以獲得所需化合物。

MS m/z 459.2(ES+,M+H)。¹HNMR(DMSO-d ₆ )δ 2.10(s,3H),2.32(s,3H),3.75(s,3H),5.78(dd,1H,J=2.0,10.0Hz),6.28(dd,1H,J=2.0,16.8Hz),6.45(dd,1H,J=10.6,16.8Hz),7.09(br t,3H,J=8.0Hz),7.50(d,1H,J=8.4Hz),7.79(s,1H),8.36(s,2H),8.72(s,1H),10.25(s,1H)。

替代性步驟2：Pd-催化之偶合方法：

或者，可藉由在Na₂CO₃、經除氣之溶劑(例如，第三戊醇)、適宜鈀觸媒(例如，參-二苄基胺基二鈀)及適宜膦配體(例如，Dave Phos)之存在下在適於實施偶合之條件下將中間物1添加至適宜偶合搭配物來進行步驟2。

化合物1顯示在‘230公開案之實例415至418中所述之各種分析及表A(參見其中之化合物I-90)中之活性。其中揭示之針對化合物1之資料重現於下表6中。

如‘230公開案中所述，活性水平「A」標示對應100nM之EC₅₀/IC₅₀/GI₅₀；「B」標示對應101至500nM之EC₅₀/IC₅₀/GI₅₀；「C」標示對應501至999nM之EC₅₀/IC₅₀/GI₅₀；「E」標示對應70%之質量修飾。

如‘230公開案中詳細所述，表6匯總化合物1在各以下分析中之活性：ERK1 Omnia WT ATP KM IC ₅₀ (nM)-量測野生型(「WT」)ERK1活性之抑制程度；ERK1/ERK2 PRSK MSD HT29 EC ₅₀ (nM)-量測在HT-29細胞(結腸直腸腺癌)中ERK1及ERK2使受質p90RSK磷酸化之激酶活性之抑制程度；ERK1質量修飾(%)-量測在培養化合物1與ERK1一小時後共價修飾蛋白質之百分比；HT-29 GI ₅₀ (nM)-量測化合物1達成HT-29細胞生長之50%抑制之劑量ERK1/ERK2 PRSK A375 EC ₅₀ (nM)-量測在A375細胞(惡性黑色素瘤細胞系)中ERK1及ERK2使受質p90RSK磷酸化之激酶活性之抑制程度；ERK1/ERK2 PRSK HCT116 EC ₅₀ (nM)-量測在HCT116細胞(結腸直腸癌細胞系)中ERK1及ERK2使受質p90RSK磷酸化之激酶活性之抑制程度；A375 GI ₅₀ (nM)-量測化合物1達成A375細胞生長(惡性黑色素瘤細胞系)之50%抑制之劑量。

實例2 化合物1之磷酸鹽之合成

如下製備化合物1之磷酸鹽之A型。

程序A：使化合物1溶解於15X四氫呋喃中。添加1莫耳當量的2莫耳磷酸之乙腈溶液。在20℃下使該批料漿化1至2小時。於減壓下移除溶劑。在20℃下，使所得固體於丙酮中漿化約16小時，過濾並乾燥。

程序B：使化合物1溶解於THF中。添加等莫耳當量的1.08M磷酸之乙腈溶液。在周圍溫度下以200RPM振盪該樣品1小時。於氮氣吹掃下移除溶劑。在周圍溫度下用攪拌棒使所得固體於丙酮中漿化過夜，隨後過濾並在30℃下於真空烘箱中乾燥過夜。

程序C：在20℃下，使化合物1溶解於THF(20X體積)中。添加化合物1之A型之晶種(5重量%)。添加(1mol當量)之1M磷酸的乙醇溶液。於強力攪拌下靜置該批料2小時。於減壓下及不超過40℃的溫度下以恆定體積蒸餾進行溶劑交換成乙酸異丙酯。使該批料冷卻至20℃。於氮氣吹掃下移除溶劑。過濾該批料，用乙酸異丙酯清洗兩次並在~40℃下在真空下於真空烘箱中以氮氣流乾燥過夜。

程序D：使化合物1溶解於9X體積THF/H₂O(95：5體積)中。將H₃PO₄(1.2mol當量)之乙醇溶液添加至第二燒瓶中，添加A型之晶種(5%)並開始強力攪拌。歷時1小時將化合物1之該溶液添加至H₃PO₄溶液中(反向添加)。使該漿液老化1小時。開始溶劑交換成乙醇(以連續添加乙醇進行之恆定體積真空蒸餾，最終THF NMT 0.5%)。使該批料冷卻至20℃，過濾並在真空下在~40℃下於真空烘箱中以氮氣流乾燥 過夜。

程序E：使化合物1溶解於10X體積THF/H₂O(95：5體積)中。添加異丙醇(5X體積)。在大氣壓下開始以連續添加異丙醇進行之恆定體積蒸餾。進行溶劑交換直至THF含量低於5%。使化合物1在溶劑交換期間再結晶。使該批料冷卻至30℃。歷時2小時添加1M H₃PO₄之IPA溶液。隨後添加A型之晶種(1%)。強力攪拌該批料過夜。過濾該批料並在真空下在~40℃下於真空烘箱中以氮氣流乾燥過夜。

程序F：使化合物1溶解於9X體積THF/H₂O(95：5體積)中。拋光過濾後，進行蒸餾以使體積自9X減小至5X，接著添加8X乙酸乙酯以使總體積達到13X。以恆定體積蒸餾進行溶劑交換成乙酸乙酯(最終THF NMT 2%)。溫度隨後減小至30℃。添加化合物1之磷酸鹽之晶種(1重量%)。超過2小時內進料H₃PO₄(1.2當量)之乙醇溶液(5X)。溫度減小至20℃，於強力攪拌下使該批料老化12小時，隨後過濾，用乙酸乙酯清洗兩次並在真空下在~40℃下於真空烘箱中以氮氣流乾燥過夜。

程序G：將化合物1添加至反應器中，隨後添加乙醇(4X體積)及乙酸乙酯(6X)。在30℃下攪拌該批料。歷時2小時添加H₃PO₄(1.2mol當量)之乙醇溶液(2X體積)。添加A型之晶種(1%)。過濾該批料，用乙酸乙酯清洗兩次，在伴有氮氣流之真空下在~40℃下乾燥過夜。

所得材料之表徵證實化合物1之磷酸鹽之結晶無水A型。在95%相對濕度下，針對此形式觀察到多達3.8%水吸取。

表1(同上)重現於下文中並描述針對化合物1之磷酸鹽之A型所觀察到之X射線繞射峰。

圖1描繪化合物1之磷酸鹽之A型之XRPD圖案。

實例3 多重細胞毒性分析

此實驗描述對化合物1或其醫藥上可接受之鹽處理敏感之一些腫瘤細胞系之識別。

使細胞在37℃下5%CO₂增濕氛圍中生長於RPMI1640、10%FBS、 2mM L-丙醯胺基-L-穀胺醯胺、1mM丙酮酸鈉或特殊培養基中。將細胞接種於384孔板中並在37℃下5%CO₂增濕氛圍中培養。自樣品資訊章節中指定之最高測試濃度開始，連續稀釋化合物3.16倍並分析10個濃度，最終分析濃度為0.1% DMSO。細胞接種後24小時添加化合物。同時，產生時間零點之未處理細胞板。

72小時培養後，將細胞用螢光標記抗體及核染料固定並染色以容許核、凋亡細胞及有絲分裂細胞可視化。藉由併入之核染料之訊號強度來量測細胞增殖。

使用GE Healthcare IN細胞分析儀1000進行自動螢光顯微法，並以4X物鏡收集影像。

使用IN細胞分析儀1000 3.2獲得十二位元tiff影像並用Developer Toolbox 1.6軟體分析。使用非線性回歸將資料擬合至S形4點4參數單個位點劑量反應模型(其中：y(擬合值)=A+[(B-A)/(1+((C/x)^D))])計算EC₅₀及IC₅₀值。曲線擬合，EC₅₀/IC₅₀計算及報告生成係使用基於定制資料縮減引擎MathIQ之軟體(AIM)進行。

為確定細胞增殖終點，使用下式將細胞增殖資料輸出轉變成對照百分比(POC)：POC=相對細胞計數(化合物孔)/相對細胞計數(媒劑孔)x 100。

GI₅₀係所觀察生長減半所需之濃度。此係抑制未處理細胞與接種於孔中之細胞數量(時間零點值)之間之生長中途之濃度。下表提供關於指定腫瘤細胞系對化合物1之敏感性之資料。下表提供之腫瘤細胞系之增殖被化合物1抑制。

KRAS突變體細胞系

下表7顯示KRAS突變體細胞系之GI₅₀資料。

表7

NRAS及HRAS突變體細胞系

下表8及表9分別顯示NRAS突變體及HRAS突變體細胞系之GI₅₀資料。

BRAF突變體細胞系

下表10顯示BRAF突變體細胞系之GI₅₀。

BRAF V600 E資料

下表11顯示BRAF突變體細胞系之GI₅₀資料。

額外細胞系

下表12顯示額外細胞系之GI₅₀資料。

實例4 對帶HCT116結腸腫瘤異種移植之小鼠投與化合物1後之腫瘤生長抑制及標靶佔有率

此研究之目標係測定化合物1(呈游離鹼形式投與)在HCT116人類結腸直腸癌異種移植(KRAS突變型癌症(KRAS^G13D))中之腫瘤生長抑制並關聯療效與標靶佔有率。此實例使用佔有率分析A(概述於下文中)。

簡言之，對8-至12-週齡雌性nu/nu小鼠皮下植入5 x 10⁶個HCT116 細胞。化合物1係以50或100mg/kg每天一次(QD)或以12.5、25、50或75mg/kg每天兩次(BID)經由經口餵食(PO)投與，直至第21天(D21)。在最後一次投藥後定量腫瘤中化合物1之ERK佔有率及化合物1之血漿濃度。藉由量測腫瘤生長抑制(TGI)確定療效，腫瘤生長抑制定義為藥物處理組之D21中值腫瘤體積與媒劑處理組之D21中值腫瘤體積之間之百分比差異。化合物1在HCT116異種移植模型中引發劑量及時間表相依性腫瘤生長抑制(57%至93%TGI)，且最小有效劑量(70%TGI)為50mg/kg/天，且與最後一天投藥時之1470ng．hr/mL之血漿濃度-時間曲線下面積(AUC)相關(參見圖6)。ERK之佔有率(亦即，結合至化合物1之ERK蛋白質比例)(於最後一天投藥化合物1時收集之腫瘤溶胞物中測得)相當於腫瘤生長抑制，且匯總於表13中。

AUC=濃度-時間曲線下面積；BID=每天兩次；ND=未測定；QD=每天一次；SD=標準差；TGI=腫瘤生長抑制。

^a化合物1之劑量係指游離鹼。

^b分別地，媒劑對照腫瘤溶胞物中之佔有率係-23.6±7.47(SD)，腫瘤溶胞物中之佔有率係-20.2±31.4。

^c投藥因毒性而於第6天終止。

^d於第18天測定，因為毒性及投藥終止。投藥後4小時測定之佔有率。

佔有率分析A：藉由首先以過量共價結合至ERK之探針化合物(在溶解緩衝液中之最終濃度為0.6μM)培養人類rERK1來製備重組體ERK1(Millipore 14-439，批號2052233)之標準曲線。將該rERK1標準物隨後稀釋至0.34、1.02、3.06、9.18、27.54、82.62、250ng/60μL之濃度且向樣品板添加60μL。使用以下方案以測定腫瘤均勻物中之Erk佔有率。

為量測異種移植腫瘤中之ERK佔有率，在室溫下用共價探針化合物(1μL，60μM)培養22.5μg各腫瘤均勻物蛋白質1小時。藉由添加10μL 1mM銅螯合生物素-疊氮化物、50mM抗壞血酸鈉、0.5mM THPTA配體及Cu(II)SO₄使生物素點擊至共價探針化合物I-362(描述於‘230公開案中)。隨後於28℃下培養樣品10分鐘。將各樣品轉移至96孔Zeba脫鹽管柱(Thermo Scientific,Rockford,IL #89807,7K MW截留值)之孔中，接著轉移至10μL水堆積箱中。以1,000 x g離心該板2分鐘，密封並在-80℃下冷藏，直至在MSD分析中進行分析。

藉由首先於板振盪器上在4℃下融解含有rERK1標準曲線樣品及腫瘤溶胞物之板來完成該MSD分析。根據套組說明書，用3% BSA之TBST溶液阻斷用於偵測總ERK 1/2(MesoScale Discovery，目錄號K15107A-3)之MSD ERK板。移除阻斷試劑並用MSD清洗緩衝液(1X TBST)清洗板3次。將所有樣品與等體積之經0.5% SDS添料至0.25%最終SDS濃度之MSD溶胞緩衝液(含有2X蛋白酶及磷酸酶抑制劑)混合。隨後將等體積的點擊樣品添加至兩個各別的MSD孔中，一個用於偵測生物素探針(用於測定游離ERK)及一個用於偵測總ERK以供標準化。

在室溫下在恆定振盪下培養該板2小時，用MSD清洗緩衝液清洗3次，敲乾，隨後用25μL/孔ERK SULFO-TAG偵測抗體(用於總ERK偵測，1：50稀釋於1%BSA之TBST溶液中)或SULFO-TAG鏈黴親和素偵測蛋白(MesoScale Discovery目錄號R32AD-1；用於游離ERK偵測， 1：500稀釋於1%BSA之TBST溶液中)培養。在室溫下於恆定振盪下培養1小時後，用MSD清洗緩衝液再清洗該板3次，敲乾，並添加150μL 1X MSD讀取緩衝液(根據套組說明書)。隨後於MSD板讀取儀中讀取板。減去背景MSD讀數(相同孔中之BSA點)後，藉由將各樣品參考ERK1標準曲線來測定總ERK及游離ERK之濃度，一個用於tERK及另一個用於fERK。將彼等標準曲線各擬合至非線性回歸，從而產生關聯MSD訊號與ERK1之奈克之函數。因此藉由游離ERK濃度除以總ERK濃度乘以100來測定游離ERK百分比。

實例5 對帶A375人類黑色素瘤腫瘤異種移植之小鼠每天一次及每天兩次投與化合物1後之血漿曝露量及標靶佔有率

進行此初始研究以評估化合物1對帶A375腫瘤之裸小鼠(BRAF^V600E突變型癌症)之每天一次及每天兩次投藥。除腫瘤生長抑制以外，亦在研究結束時收集之樣品中表徵腫瘤溶胞物中之血漿曝露量及ERK佔有率。此實例使用佔有率分析B(概述於下文中)。

在A375異種移植模型中以100mg/kg QD及50mg/kg BID投與化合物1後之腫瘤生長抑制(如與實例4中之相同方式計算)分別為84%及87%(表14)。最後投藥後2至8小時之腫瘤溶胞物中之佔有率(亦即，結合至化合物1之磷酸化ERK蛋白之比例)在50mg/kg BID處理組中為48%至54%及在100mg/kg QD處理組中為82%至86%(表14)。在50mg/kg BID組中化合物1之血漿曝露量為9280ng．hr/mL(表14)。

表14：經化合物1處理之帶A375人類異種移植之小鼠中之腫瘤抑制、曝露量及標靶佔有率

AUC_0-last=至在時間t下之最後一次可觀察濃度之濃度-時間曲線下面積；BID=每天兩次；NC=不可計算；QD=每天一次；TGI=腫瘤生長抑制。

^a化合物1之劑量係指游離鹼。

^c在投藥後2、4及8小時下之經化合物1之磷酸化ERK(pERK)之佔有率在MSD分析中分別表示為媒劑對照訊號之%。

^d在100mg/kg QD劑量組中，在2小時時間點下犧牲之小鼠中之化合物1之血漿濃度係低於定量下限(BLOQ)。在此等小鼠中未觀察到佔有率，很可能是因為在投藥此等小鼠時之技術誤差。

^e在100mg/kg QD劑量組中，在15分鐘及2小時時間點下放血之小鼠中之化合物1之血漿濃度係低於定量下限(BLOQ)，很可能是因為在投藥此等小鼠時之技術誤差。

佔有率分析B：為測定pERK佔有率及總ERK水平，使用Mesoscale Discovery之tERK/pERK套組(MSD K15107D-3,Rockville,MD)。該套組含有捕獲板，其含有tERK點、pERK點及2個BSA點。在室溫下用3%牛血清白蛋白(BSA)阻斷平行板1小時。棄除該阻斷緩衝液並對各板添加30μL溶胞物。將該pERK共價探針化合物的10mM原液於溶胞緩衝液中稀釋至2μM。對各孔添加3.3μL探針化合物，使得每孔最終濃度為0.2μM。在室溫下振盪2小時後，用1X Tris清洗緩衝液清洗板並對該等板中之一者添加25μL SULFO-TAG鏈黴親和素(於清洗緩衝液中稀釋至1μg/mL)以測定ERK佔有率。對第二個板添加25 μL SULFO-TAG抗ERK抗體(根據製造商說明書稀釋)以測定總ERK。然後在室溫下將板置於振盪器上1小時，隨後用1X Tris清洗緩衝液清洗，接著添加150μL 1X讀取緩衝液T(MSD R92TC-1,Rockville,MD)，及使用MSD板讀取儀偵測化學發光訊號。為測定pERK之百分比佔有率，藉由來自用於測定佔有率之板之讀數除以來自用於測定總ERK之板之對應讀數來標準化訊號。計算經處理之動物中之pERK之百分比佔有率，假定媒劑對照之平均值具有100%游離ERK：100(媒劑之游離ERK%)-游離ERK%(經處理之動物)=佔有率%。

pERK共價探針化合物

實例6 劑量時間表對向帶A375人類黑色素瘤異種移植之小鼠投與化合物1後之腫瘤生長抑制及標靶佔有率之效應

此研究之目標係測定化合物1(呈游離鹼形式投與)之劑量時間表對A375人類異種移植之腫瘤生長抑制之效應並關聯療效與標靶佔有率。此實例使用佔有率分析A(概述於上文中)。

簡言之，對8-至12-週齡雌性nu/nu小鼠皮下植入1mm³ A375片段。化合物1係以25、50或100mg/kg每天一次(QD)、以50、100或200mg/kg每隔一天(QOD)或以100、200或300mg/kg每隔兩天(Q3D)經由經口餵食(PO)投與，直至第12天媒劑投藥對照腫瘤達到2000mm³之平均尺寸。在最後一次投藥後定量腫瘤溶胞物中之ERK佔有率及化合物 1之血漿濃度。所有經測試劑量之化合物1之投與係良好耐受。在投藥200mg/kg QOD及200mg/kg Q3D之各組中有一隻死亡，及在投藥25mg/kg QD之組中有2隻死亡。注意此等為非處理相關。使用用於偵測ERK1/2之市售套組量測總ERK及游離ERK(不與化合物1結合之ERK)及使用共價探針化合物量測佔據之ERK1/2來測定腫瘤中之ERK佔有率。用評估之投藥計劃獲得之ERK佔有率水平呈現於表15中。藉由LC/MS/MS測定各組中最終投藥後之化合物1之血漿濃度及血漿曝露量匯總於表15中。

AUC=濃度-時間曲線下面積；QD=每天一次；QOD=每隔一天；Q3D=每三天一次；TGI=腫瘤生長抑制。

^a化合物1之劑量係指游離鹼。

^c媒劑對照腫瘤溶胞物中之佔有率係-34±13(平均值±標準差 [SD])。

^d與劑量計劃無關，在曝露量評定研究之最後一天投藥之小鼠。

^e此組中自發性退化之腫瘤，其可能增加TGI。

化合物1抑制A375異種移植小鼠模型中的腫瘤生長，且最小有效劑量為50mg/kg/天，其對應4350ng．hr/mL之AUC_0-8hr及59%之標靶佔有率。在以25mg/kg每天一次或以50mg/kg每隔一天投藥之小鼠中觀察到相當腫瘤生長抑制(兩組均為53%)，且以50mg/kg每天一次投藥及彼等以100mg/kg每隔一天投藥之小鼠之間相似(分別為68%及69%)。此等數據表明減低劑量頻率可如每天投與般有效地抑制腫瘤生長。

實例7 化合物1對LOX-IVMI異種移植模型中之腫瘤生長之效應

於LOX-IMVI人類黑色素瘤異種移植模型(BRAF^v600E突變型癌症)中評估化合物1之抗腫瘤活性。將LOX-IMVI細胞植入雌性嚴重組合免疫缺陷(SCID)小鼠之脅腹中。用化合物1之磷酸鹽處理隨機組之小鼠(n=10隻/組)，每天一次[PO、QD]口服7天(接種後第13天至第20天)。此研究中所評估之化合物1之磷酸鹽之劑量(30.25、60.5及121mg/kg)分別對應25、50及100mg/kg之游離鹼當量劑量。用化合物1之磷酸鹽處理後觀察到LOX-IMVI人類黑色素瘤腫瘤生長之顯著抑制(30.25、60.5及121mg/kg，與媒劑對照相比分別導致77.7%、92.9%、94.7%抑制)。對30.25mg/kg及60.5mg/kg劑量水平之化合物1之磷酸鹽觀察到劑量相依性腫瘤抑制；然而，60.5mg/kg與121mg/kg劑量水平間之腫瘤體積無差異。在第20天，經60.5mg/kg及121mg/kg劑量水平之化合物1之磷酸鹽處理之動物具有低於第13天時之初始體積之平均腫瘤體積，此指示該藥物處理引起建立之腫瘤之退化(針對60.5mg/kg及121mg/kg，與第13天時之初始體積相比分別為-54.7% -65.1%)(圖5)。未 在處理組中之任一者中觀察到體重之顯著變化。

實例8 抗拒BRAFi及抗拒MEKi之細胞對化合物1敏感

將A375細胞(BRAF V600E突變體)培養在存在10%FBS之IMDM培養基中及藉由在存在漸增濃度的威羅菲尼下進行連續培養使其抗拒Raf抑制劑。此等細胞稱作A375-R。類似地，藉由在存在漸增濃度的曲美替尼下進行連續培養使HCT-116細胞(KRAS突變體)抗拒MEK抑制劑(此處稱作HCT116R)。

藉由量測經化合物1處理之細胞及經DMSO(對照)處理之細胞之間之72小時後細胞生長差異來分析增殖之抑制。將細胞以3000個細胞/孔接種於96孔板之全培養基(對於A375及A375-R，10%FBS含於DMEM中，或對於HCT-116或HCT-116R，10%FBS含於RPMI中)。將化合物1以3倍稀釋連續稀釋於DMSO中，並以0.1% DMSO、5% FBS之最終濃度添加至接種後6小時之細胞中。為測定實驗開始時之細胞數量，製備另一板並在第0天接種後6小時讀取，其包括第0天經接種細胞之標準曲線(以50,000個細胞開始，以8-點2倍連續稀釋)及複製孔。在37℃、5% CO₂下培養細胞72小時，並用cell titer glo(Promega)量測細胞數量。藉由相對該標準曲線之線性回歸而將發光轉化成細胞數量。GI₅₀定義為處理後第0天至72小時之細胞生長相對經DMSO處理對照之50%抑制。化合物1在親本A375、抗拒BRAF抑制劑之A375細胞、HCT-116親本及抗拒Mek-抑制劑之HCT-116中之GI₅₀結果顯示於下表16中。如表16及17中所示，A375R及HCT116R細胞對化合物1之敏感性分別大於對BRAF抑制劑(BRAFi)或MEK抑制劑(MEKi)之敏感性。

表16

A-375=BRAF^V600E突變體黑色素瘤系。

A-375R=抗拒威羅菲尼之A-375。

ERKi=ERK抑制劑。

MEKi=MEK抑制劑。

BRAFi=BRAF抑制劑。

HCT-116=KRAS^G13D結腸癌。

HCT-116R=抗拒曲美替尼之HCT-116。

ERKi=ERK抑制劑。

MEKi=MEK抑制劑。

實例9 活體外分析

此實例描述關於化合物1(游離鹼)對Panc1(a.k.a.PANC-1)胰臟癌細胞系、MIA PaCa-2胰臟癌細胞系、HS294T黑色素瘤細胞系、HCT-116結腸直腸癌細胞系、KRAS突變體q61H NCI-H460肺癌細胞系、 KRAS未知NCI-H522肺癌細胞系、p.G469A NCI-1755肺癌細胞系、KRAS突變體p.G12V NCI-H727肺癌細胞系及KRAS突變體NCI-H522肺癌細胞系之效應之實驗。

對於劑量反應活力分析，將細胞以3000個細胞/孔之密度接種於96孔透明底部黑孔板(Corning目錄號3904)上之90μL生長培養基中並在37℃，5%CO₂之標準細胞培養生長條件下培養過夜。孔之最外行及列填充有培養基，但無細胞，以避免對後續讀出之蒸發效應。

第二天，對各細胞系使用一個板以用於「第0天」細胞生長對照讀出，並根據CellTiter Glo(Promega)試劑，根據製造商說明書量測細胞活力。簡言之，使第0天對照板於組織培養罩中平衡至室溫達30分鐘，隨後將90μL CellTiter Glo試劑(與細胞培養基體積相等之體積)添加至各孔。該等板用箔覆蓋以避光並放置在低速振盪器上達5分鐘，接著無振盪培養10分鐘。於spectramax L發光偵測器上讀取CellTiter Glo試劑訊號，並使用Excel及Prism軟體處理資料。

同時(在第0天使板平衡至室溫的同時)，用化合物1或DMSO媒劑對照處理剩餘板中之細胞，如對各細胞系所指定。對於細胞處理，將化合物自含於DMSO中之初始濃度10mM原液稀釋至10μM初始孔內濃度(3個稀釋步驟，首先連續稀釋於DMSO中，隨後稀釋於細胞生長基中)，使得含有細胞之孔中之生長培養基中之所得DMSO濃度係0.1%。用化合物1之9點3倍稀釋液及DMSO對照處理細胞。各處理含於添加至各自孔中之10μL處理培養基中。以一式三份測試各濃度。

因此，處理孔中之最終濃度係：(以nM計)10000.00、3333.33、1111.11、370.37、123.46、41.15、13.72、4.57、1.52、0。

72小時後，藉由對各處理孔添加100μL CellTiter Glo試劑(等於培養基及化合物之體積)量測「第3天」細胞活力。如針對「第0天」對照所述評定細胞活力。

結果以圖形繪示於圖7及圖9至16中。在X軸下方交叉之曲線指示細胞數量已下降至初始點以下(亦即細胞正在死亡)。

圖9描繪(a)化合物1對抗HCT-116結腸直腸癌細胞之第一活體外分析；及(b)化合物1對抗HCT-116結腸直腸癌細胞之第二活體外分析。如圖9a中所示，化合物1在1321.30nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。如圖9b中所示，化合物1在1169.50nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖10描繪化合物1對抗KRAS突變體q61H NCI-H460肺癌細胞之活體外分析。如圖10中所示，化合物1在6839.12nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖11描繪化合物1對抗KRAS未知NCI-H522肺癌細胞之活體外分析。如圖11中所示，化合物1在2338.84nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖12描繪化合物1對抗p.G469A NCI-H1755肺癌細胞之活體外分析。如圖12中所示，化合物1在722.77nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖13描繪化合物1對抗KRAS突變體p.G12V NCI-H727肺癌細胞之活體外分析。如圖13中所示，化合物1在762.08nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖14描繪化合物1對抗KRAS未知NCI-H522肺癌細胞之活體外分析。如圖14中所示，化合物1在3006.08nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖15描繪(a)化合物1對抗Mia PaCa-2胰臟癌細胞之第二活體外分析；及(b)化合物1對抗Mia PaCa-2胰臟癌細胞之第三活體外分析。如圖15a中所示，化合物1在1238.80nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。如圖9b中所示，化合物1在1534.62nM下 誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

圖16描繪化合物1對抗HS294T黑色素瘤細胞之第二活體外分析。如圖16中所示，化合物1在1202.26nM下誘導細胞死亡(細胞毒性)效應(藉由交叉X軸之曲線記錄)。

實例10 投藥及投與方案

以下方案描述化合物1之磷酸鹽在罹患局部晚期或轉移性、復發性或頑固性BRAF(例如，BRAF^V600)或RAS突變型惡性腫瘤之個體中之1a期多中心、開放標簽安全性及藥物動力學研究。為便於閱讀，此實例之正文有時係指「化合物1」而非「化合物1之磷酸鹽」；然而，應瞭解研究中係化合物1之磷酸鹽。

目標：

主要目標：該研究之主要目標係評定在經口投與給罹患局部晚期或轉移性、復發性或頑固性BRAF-(例如，BRAF^V600)或RAS突變型實體腫瘤之個體時，化合物1之磷酸鹽之安全性、抗性及PK，及界定其最大耐受劑量(MTD)。

次要目標：該研究之次要目標係進行化合物1之磷酸鹽之抗腫瘤活性之初步評定。

探索目標：該研究之探索目標係(1)探索化合物1曝露量(AUC)與反應(安全性及療效)之間之關係；(2)探索可影響化合物1曝露量之內在及外在因素(例如，年齡、性別、體重、腫瘤類型、末梢器官功能之衡量、化合物1接受者中之相關個體間及殘餘活力，等)之影響；(3)評估周邊血液單核細胞(PBMC)及腫瘤活體組織檢查中至ERK之化合物1結合，以及化合物1處理之前及期間獲得之腫瘤活體組織檢查中ERK訊號傳遞之抑制；(4)表徵血漿中化合物1之主要代謝物；及(5)探索在化合物1處理之前及期間獲得之血漿樣品中4β-羥膽固醇(CYP3A 活性之標記物)之水平之變化。

研究終點：

此研究之主要終點係(1)由不良事件之類型、發生率及嚴重度所界定之安全性；劑量限制性毒性；化合物1之MTD，及選定實驗室分析物之自基線之變化、生命徵象及ECG結果；及(2)PK終點：C_max、AUC、T_max、t_1/2、CL/F、Vz/F及化合物1之累積指數。

此研究之次要終點係如由反應速率、反應持續時間、疾病控制率、無進展存活期及總體存活期衡量之抗腫瘤活性。

探索終點係(1)如由非混合效應建模(NMEM)隔室分析評定之PK終點；(2)自群體PK分析之化合物1曝露量之臨床相關內在/外在共變量；(3)化合物1曝露量與反應關係之基於機制之建模；(4)在處理期間對處理前獲得之PBMC及腫瘤活體組織檢查中化合物1曝露量(如由AUC衡量)與對ERK結合之間之關係；(5)在處理期間對處理前獲得之腫瘤活體組織檢查中對ERK之化合物1結合與ERK訊號傳遞之抑制之間之關係；及(6)在腫瘤中生物標記物(ERK結合、ERK訊號傳遞之抑制)與臨床結果之間之關係；(7)血漿中化合物1代謝物之曲線；及(8)化合物1投與之前及期間4β-羥膽固醇之血漿水平。

實例11 額外細胞活力分析

為評定化合物1對細胞增殖之效應，將具有N-RAS或B-RAF突變之抗拒威羅菲尼之黑色素瘤細胞系接種於96孔板中，24至48小時後，添加8至10個半數log₁₀劑量之化合物1或媒劑對照二甲亞碸(DMSO)。使用IncuCyte活細胞成像系統(Essen Instruments)或使用標準磺基羅丹明B(SRB)分析評定細胞數量(Monks等人，J.Natl.Cancer Inst.,83：757-766,1991；Skehan等人，J.Natl Cancer Inst.,82：1107-1112,1990)。在所有實驗中，接種細胞，使得在培養結束時之細胞匯 合度在對照(經DMSO處理)孔中小於90%。GI₅₀定義為化合物1之誘導細胞數量之50%減少之濃度且使用GraphPad Prism(GraphPad Software)測定。如圖17(左側圖)中所示，化合物1抑制NRAS及BRAF兩種突變體抗拒威羅菲尼之黑色素瘤細胞系之生長，且平均GI₅₀為290nM。亦如圖17(右側圖)中所示，化合物1在10μM下誘導所有NRAS及BRAF突變體抗拒威羅菲尼之黑色素瘤細胞系(除細胞系4(其中該效應係細胞生長抑制性)以外)中之細胞死亡。

總體研究設計

此研究係在罹患局部晚期或轉移性RAS或BRAF(例如，BRAF^V600)突變型實體腫瘤之個體中之開放標簽、多中心、1a期研究，該個體在至少一線療法後不耐受、耐藥或已復發且對其不存在標準療法。該研究將分兩個部分進行：劑量遞增(第1部分)及群組擴展(第2部分)。對於兩個部分，各28天週期將由化合物1處理之連續21天及接著7天休息期組成。個體可繼續化合物1，直至其潛在惡性腫瘤進展、出現不可耐受毒性或醫師/個體決定中斷化合物1。因除進展之外之原因而中斷研究處理之個體將被要求繼續關於研究之隨訪，直至進展、新穎抗癌療法之開始或同意撤銷以供進一步研究參與。

第1部分：罹患BRAF(例如，BRAF^V600)突變型癌症(例如黑色素瘤、結腸直腸癌(CRC)、乳突狀甲狀腺癌)或RAS突變型癌症(例如胰臟導管腺癌(PDAC)、CRC、黑色素瘤、非小細胞肺癌(NSCLC))或復發性或頑固性腫瘤之個體群組將接受漸增劑量之化合物1，以評定其安全性及抗性、MTD及PK曲線。初始群組將每天接受20mg。針對非耐受劑量(NTD)及MTD測定之目的，第1週期(第1至28天)將構成劑量限制性毒性(DLT)評定期。將使用一種經修改之加速滴定設計以建立初始毒性。在加速期期間，一或多個個體之群組各將接受劑量以100%增量增加之化合物1，直至在第1週期中首次出現2級研究藥物 相關毒性。此刻，該加速期將結束且所有後續群組(包括論述中之群組)將擴展至6至9個後期招募之個體。劑量增量不超過50%之劑量遞增時間表將同時開始，以建立NTD及MTD。若必要，可基於毒性、PK/PD或腫瘤活體組織檢查結果來評估劑量群組中之較小劑量增量及/或額外個體以及經修改之投藥時間表(例如，每隔一天投藥)。在研究評審委員會(SRC)(包含發起者代表(亦即，醫療監護者、藥物安全性醫師及研究管理者)以及招募一或多個研究個體之各參與機構之主要研究者)之判定下做出劑量遞增決定。參見圖8。

若劑量群組中之>33%之可評估個體在第1週期期間經歷DLT，則劑量視為不耐受。推定MTD將定義為低於NTD之最後一次劑量，在該劑量下，33%之可評估個體在第1週期期間經歷DLT。可需要NTD與推定MTD之間之中間劑量之研究以測定具有更大精確度之MTD，因為若出現的PK結果表明其可適當，則可替換方案。還可在開始第2部分(見下文)後探索NTD與推定MTD之間之中間劑量。

若a.)第1部分個體在第1週期中至少80%之處理天數(亦即，21天中之17天)接受規定劑量之化合物1，且具有足夠資料以供SRC進行安全性評估，或b.)經歷DLT，則第1部分個體為DLT可評估。將替換既定劑量群組中之非DLT可評估個體。10個劑量群組中約40個個體參與第1部分以供安全性、NTD/MTD及PK(集中取血樣)之初始評定。

在DLT評定期期間不允許個體內劑量遞增；然而，在第2週期及以後，無疾病進展跡象之耐受化合物1之指派劑量之個體可(在研究者之判定下)遞增至此研究中至少一個個體群組顯示充分耐受之最高劑量水平(亦即，在該劑量水平下，33%之可評估個體經歷DLT)。

第2部分：在第2部分中，個體將接受處於或低於MTD下之化合物1，直至疾病進展、不耐受毒性或醫師/個體決定中斷化合物1。將評估屬於三個腫瘤特異性群組中之一者之約42至60個個體之安全性、 PK(集中抽樣)及抗腫瘤活性之額外評定：

˙復發/進展NRAS(G12、G13或Q61)或BRAF^V600突變體(例如，V600E或V600K)黑色素瘤(n=14至20)

˙復發/進展KRAS(G12、G13或Q61)或BRAF^V600突變體局部晚期或轉移性CRC(n=14至20)

˙復發/進展局部晚期或轉移性PDAC(n=14至20)

此等腫瘤特異性擴展群組中之一或多者可經修改(或可添加額外群組)，此將允許化合物1在其他受關注腫瘤類型中之評定。

第2部分中之個體將被要求進行腫瘤活體組織檢查，以獲得在篩選(直至第1週期前之28天，化合物1之第1天)時及第1週期期間(第16天至第21天)用於PD生物標記物之腫瘤組織。各腫瘤特異性群組之招募將遵循兩個階段設計：若自首先招募之14個療效可評估患者中觀察到至少一種客觀性反應或3個個體具有持續16週(亦即，經過2^nd治療，腫瘤評定時間點)之穩定疾病，則該群組之剩餘者(2^nd階段)將完成，以確保約20個可評估個體之資料之可利用性。若必要，則可暫停進行至2^nd階段，直至確信可確定符合至少一個用於2^nd階段招募之上述標準。在不存在上述任一標準之情況下，將在14個個體後停止既定群組之招募。將根據安全性評審委員會之商討作出擴展或減少各腫瘤特異性群組之招募之決定。

該研究設計包括：(1)第-28天至第-1天之篩選期；(2)治療及評估期，在此期間，在28天週期之第1至21天投與化合物1，直至腫瘤進展、不可接受之毒性或個體/醫師決定中斷化合物1(第1部分：劑量遞增；第2部分：群組擴展)；及(3)治療結束及隨訪期，其包含治療程序結束及針對最後一劑化合物1後28天或直至疾病進展(在除進展以外之原因而中斷化合物1之個體中)之安全性隨訪。

研究設計基本原理：此係經口投與化合物1之1a期、多中心、開 放標簽研究。化合物1具有強生物學基本原理以治療罹患其中MAPK路徑失調為致病機理之局部晚期或轉移性、復發性或頑固性癌症之個體。此研究中將評估化合物1之安全性、抗性、PK/PD及初步療效。如上所述，該研究將分兩個部分進行：劑量遞增(第1部分)及群組擴展(第2部分)。在兩個部分中，資格將局限於彼等腫瘤存在特異性活化突變RAS或BRAF(例如，BRAF^V600)之患者。涉及密碼子12、13及61之誤譯突變造成絕大多數RAS驅動型腫瘤。類似地，BRAF之密碼子600之穀胺醯胺及離胺酸取代(V600E或V600K)包含所有BRAF突變中的絕大多數。BRAF之密碼子600之其他取代(例如，V600R、V600D)以及BRAF之非V600活化突變(例如，L597R S或Q、K601E)係罕見。BRAF中具有非V600活化突變之腫瘤可對MEK抑制劑療法具有反應性及因此，腫瘤存在此等突變之個體可招募於該研究之第1部分中以供NTD/MTD測定。

在第1部分中，預期使用經修改之加速滴定設計更有效，其方式為藉由限制以較低假定亞治療劑量治療之個體之數量及增加處於或接近MTD治療之個體之比例，同時藉由使各連續群組劑量增倍直至首次出現2級毒性來減少該研究之持續時間。

第2部分將招募約42至60個罹患預定腫瘤類型之個體，該等預定腫瘤類型之特徵為視作對其繼續生長及增殖而言重要之經典MAPK路徑中之突變。第2部分將進一步評定化合物1在第1部分中所建立之劑量及時間表下之安全性及抗性曲線並提供抗腫瘤活性之初步評定。

研究群體

第1部分及第2部分之疾病特異性納入標準：

(1)罹患組織學或細胞學確診的晚期不可切除或轉移性BRAF(例如，在V600[E、K、D或R]、L597[R、S或Q]或K601E具有活化突變)或RAS突變(例如，KRAS、NRAS或HRAS(在G12、G13或Q61具有活 化突變)的突變體實體腫瘤之18歲或更大的男人及女人，其在至少一線療法後耐藥性或不耐受或已進展且不存在標準療法。在考慮此腫瘤類型中此突變之已知極高盛行率下，罹患PDAC之個體不需要有存在KRAS突變的記錄。

(2)東部腫瘤協作組體能狀態(ECOG PS)為0或1

(3)至少一種如根據實體腫瘤之反應評估標準(RECIST)1.1版所定義之可量測病灶。

疾病特異性納入標準-僅第I部分：組織學或細胞學確診之不可切除或轉移性BRAF(在V600[E、K、D或R]、L597[R、S或Q]或K601E具有活化突變)或K、N或HRAS(在G12、G13或Q61具有活化突變)的突變體實體腫瘤，其在至少一線療法後耐藥或已進展(或其中該個體係不耐受療法)且不存在標準療法。不耐受前線療法係定義為出現與最少2個週期之標準療法相關聯之不可接受之毒性。

疾病特異性納入標準-僅第II部分：由於第2部分(在篩選時及在第1週期中)中需要配對腫瘤樣品，因此將考慮獲得能使用非顯著風險活體組織檢查程序進行活體組織檢查(包括但不限於肝臟、皮膚/皮下或表面淋巴結活體組織檢查)之腫瘤組織之個體用於研究參與。

組織學上或細胞學上確診之以下類型之腫瘤，其在至少一線療法後耐藥或已進展(或其中該個體係不耐受療法，如上定義)且不存在標準療法：

黑色素瘤：復發/進展、局部晚期、不可切除或轉移性NRAS突變體(G12、G13或Q61)黑色素瘤；用BRAF抑制劑(例如，威羅菲尼、達拉菲尼)、MEK抑制劑(例如，曲美替尼、卡博替尼(cobimetinib)[前稱GDC-0973]或司美替尼(selumetinib))或組合BRAF/MEK抑制劑療法時進展之局部晚期、不可切除或轉移性BRAF^V600突變體黑色素瘤(例如，V600E、V600K等)。具有在招募入此試驗之前以抗CTLA 4(伊匹 單抗(ipilimumab)；Yervoy^®)或其他免疫檢查點阻塞抑制劑(例如，派姆單抗(pembrolizumab)；尼沃單抗(nivolumab))作為最後療法之歷史之個體符合資格，只要其具有由免疫相關反應標準定義之疾病進展之放射影像證明即可。

結腸直腸癌(CRC)：在至少一種基於氟嘧啶之療程後復發或進展之復發/進展、局部晚期、不可切除或轉移性BRAF-(例如，BRAF^V600)或RAS-(例如，KRAS-(G12、G13或Q61))突變體CRC。

胰臟導管腺癌(PDAC)：在至少一種基於吉西他濱或氟嘧啶之療程後復發或進展之復發/進展、局部晚期、不可切除或轉移性PDAC。

用於第1部分及第2部分之一般納入標準(除非另有指定)包括但不限於顯示以下實驗室值之個體：˙絕對嗜中性粒細胞計數(ANC)1.5 x 10⁹/L；˙血紅素(Hgb)9g/dl；˙血小板計數(plt)75 x 10⁹/L；˙血清鉀濃度位於正常範圍內，或可經輔助物糾正；˙若存在肝臟轉移，血清AST/SGOT及ALT/SGPT3.0 x正常上限值(ULN)或5.0 x ULN；˙若存在肝臟轉移，血清總膽紅素1.5 x ULN或2 x ULN；˙血清肌酐1.5 x ULN，或24-hr肌酐清除率測量值50mL/min；˙可能懷孕之女性在開始研究治療前之72小時內具有血清或尿陰性妊娠測試結果(見下文)；˙充分左心室功能(LVEF>50%，如在MUGA或ECHO中測得)。

研究治療之描述

調配：化合物1將以三種強度(5、30及150mg)的膠囊形式提供以用於經口投與。該5、30及150mg化合物1膠囊係分別等於6.07、36.42 及182.10mg化合物1磷酸鹽。該5、30及150mg強度劑量分別囊封於4號紅棕色、4號紅棕色/白色不透明及0號紅棕色膠囊殼中(參見上表5)。

該等膠囊含有以下賦形劑：β環糊精磺基丁基醚鈉、月桂基硫酸鈉、碳酸氫鈉、微晶纖維素、交聯聚維酮、膠態二氧化矽及硬脂酸鎂。

治療投與及時間表

在第1部分及第2部分中，在整夜空腹持續至少6小時後，在早晨以至少200mL水每天一次空腹(亦即，早餐前1小時)投與化合物1。個體將在各28天治療週期之第1天至第21天投與化合物1。在要求PK評定之研究天時，化合物1將在完成任何投藥前評定後在臨床中在空腹狀態下投與。在所有其他天，個體將在家自投與其指派劑量。個體可繼續研究治療，只要其繼續獲得臨床效益即可或直至出現記錄之疾病進展、不耐受毒性或個體/研究者因其他原因而決定中斷研究治療。

在第1部分中，使用交互式語音應答方案(IVRS)對個體依序指派各連續劑量群組。一個劑量水平至下一個更高劑量水平之進展將遵循來自較低劑量群組之相關安全性及可用PK/PD資料之滿意評審(見下文)。在第一劑量已投與給招募至劑量遞增之間之既定群組中之最後一個個體後最少存在28天。在各劑量群組內，錯開招募，使得各個體之第1週期第1天劑量之間存在至少24小時，以評估急性毒性。在第2部分中，將以處於或低於由指定腫瘤類型定義之群組內之MTD治療個體。

劑量限制性毒性之定義

將使用國家癌症研究所不良事件之常用術語標準(NCI CTCAE)4版以評級所有不良事件(AE)之嚴重度。劑量限制性毒性(DLT)定義為出現一或多種以下AE。

第1週期期間任何持續時間之疑似與研究藥物相關之任何4級非血液學毒性。

疑似與化合物1相關且始於第一劑量之28天內之臨床相關3級臨床AE，以下除外：

。脫毛；

。座瘡樣、膿皰性或斑丘疹類型之3級皮疹，其在研究藥物中斷之4天內消除至2級且在最佳醫療管理之情境下以相同劑量恢復化合物1時不復現至相同程度

。在最佳醫療管理下持續<72小時之3級腹瀉、噁心或嘔吐；

。3級疲勞，其在研究藥物中斷之4天內消除至2級且以相同劑量恢復研究藥物時不復現至相同嚴重度。

。無症狀性且快速可逆轉之任何非血液學3級實驗室異常(亦即，治療中斷之4天內恢復至1級)。在遇到該3級異常時必須維持治療，直至明確其因果性與化合物1無關。

疑似與化合物1相關且開始治療之28天內出現之血液學AE如下：。3級發熱性嗜中性球減少症；。持續>7天之4級嗜中性球減少症；。持續>7天之4級血小板減少症；。具有臨床上顯著流血之3級或4級血小板減少症；。3級溶血性貧血；需要在第1週期中減小化合物1劑量或中斷長達4天以上之任何AE。

注意：經BRAF抑制劑(使用或不使用伴隨MEK抑制劑療法)治療之任何黑色素瘤個體在第1週期第1天之6個月內出現第二原發性皮膚贅瘤將因劑量遞增決策判定目的而不視為劑量限制性毒性。所提出的6個月潛伏期與BRAF抑制劑威羅菲尼(ZELBORAF^®包裝插頁)及達拉 菲尼(TAFINLAR^®包裝插頁)之處方資訊一致，此指示在BRAF抑制劑治療中斷後監視第二原發性皮膚贅瘤多達6個月之重要性。

無相關臨床徵兆或症狀之單獨實驗室變化可不包括在DLT定義內。此等結果將由安全性評審委員會討論及評審。

第1部分中之劑量遞增之標準

在完成加速期(亦即，單一個體群組)後，群組將由6至9個個體組成。劑量遞增之演算法如下：在第1部分期間第1週期中發生之AE之劑量減小將構成DLT。然而，在第1部分及第2部分中任何週期(包括第1週期)中允許劑量減小且允許個體以減少劑量繼續IP。

除非另有指定，否則針對AE將允許至多2次劑量減小。非血液學及血液學毒性之劑量減小指導分別提供於表15及16中。

一旦減小化合物1之劑量，則可在研究者之判定下但僅在以下情況後重新遞增：˙導致劑量減小之AE已降低嚴重度至1級，及˙在以研究之醫療監護者會診後。

個體在化合物1中斷期間應繼續遵循研究訪視/評定之方案指定之時間表。可在繼續/恢復較低劑量之化合物1治療後進行重複PK/PD評估。

因治療相關毒性而需要中斷投藥達超過第1週期多於28天之個體將永久性中斷化合物1治療。罕見的是，該等個體可自恢復化合物1治療獲得益處。研究者應向發起之監護者通告因TEAE所致之研究治療之任何永久性中斷。

表15：化合物1劑量減小指導-非血液學不良事件

腫瘤評定

第1部分及第2部分中之個體將在篩選時及在第1週期之第16天至第21天之間(後者僅發生於在篩選時具有FDG腫瘤更新之個體中)進行FDG-PET成像，以評定對化合物1投與之早期代謝反應之預測值。

1期實驗資料結果

總計7個患者在各28天週期已經20至160mg/天變化之劑量之化合物1之磷酸鹽投與連續21天治療且接著7天無治療間隔。治療此等個體之各種復發性/頑固性實體腫瘤，包括胰臟癌、非小細胞肺癌(NSCLC；n=2)、結腸直腸癌(CRC)、空腸腺癌、子宮內膜癌及高級神經內分泌腫瘤。所有個體均罹患存在KRAS突變之腫瘤(假定包括罹患胰臟癌之個體)。治療持續時間自約4週變化至9週。迄今為止，已顯示毒性曲線為可接受且報告大多數1級及2級(輕度或中度)毒性。尚未確定最大耐受劑量。

群組

群組#1係以20mg/天治療胰臟癌(按照方案，非測試腫瘤之RAS突變)之單一個體群組；Rx之持續時間：2個週期(在第2週期後因進展性疾病而結束研究)。

群組#2係以40mg/天治療空腸腺癌(KRAS G12C突變)之單一個體群組；Rx之持續時間：2個週期(在第2週期後因進展性疾病而結束研究)。

群組#3係以80mg/天治療高級神經內分泌腫瘤(KRAS G12突變)之單一個體群組；Rx之持續時間：1個週期(在第1週期後因進展性疾病而結束研究)。

群組#4表示第一四個個體群組。

群組#4個體1係以160mg/天治療NSCLC(KRAS G12C突變)；Rx之持續時間：2.5個週期(以50%劑量(80mg/天)繼續研究-迄今為止反應：穩定疾病)。

群組#4個體2係以160mg/天治療NSCLC(KRAS G12C突變)；Rx之持續時間：0.75個週期(繼續研究；迄今為止，無反應評定)。

群組#4個體3係以160mg/天治療子宮內膜癌(KRAS G12D突變)；Rx之持續時間：0.75個週期(繼續研究；迄今為止，無反應評定)。

群組#4個體4係以160mg/天治療CRC(KRAS G12V突變)；Rx之持續時間：0.5個週期(繼續研究；迄今為止，無反應評定)。

Claims (53)

1. 一種治療、穩定或減輕一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患之嚴重度或進展之方法，其包括對有此需要之患者投與治療上有效量之包含化合物1或其醫藥上可接受之鹽之醫藥上可接受之組合物：
2. 如請求項1之方法，其中該治療上有效量係約100mg至約2000mg之總每天劑量。
3. 如請求項2之方法，其中該總每天劑量係QD投與。
4. 如請求項2之方法，其中該總每天劑量係在空腹狀況下投與。
5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中化合物1或其醫藥上可接受之鹽係呈化合物1之磷酸鹽形式投與：
6. 如請求項1至5中任一項之方法，其中該一或多種與ERK1及ERK2中之一者或兩者相關聯之疾病或疾患係癌症。
7. 如請求項6之方法，其中該癌症係MAPK介導之癌症。
8. 如請求項6之方法，其中該癌症係BRAF突變型癌症。
9. 如請求項8之方法，其中該BRAF突變型癌症係BRAF^V600突變型癌症。
10. 如請求項9之方法，其中該BRAF^V600突變型癌症係BRAF^V600E、BRAF^V600K、BRAF^V600R或BRAF^V600D。
11. 如請求項6之方法，其中該癌症係RAS突變型癌症。
12. 如請求項11之方法，其中該RAS突變型癌症係KRAS突變型癌症。
13. 如請求項12之方法，其中該KRAS突變型癌症係KRAS^G12C/D/V、KRAS^G13C/D或KRAS^Q61L/H/R。
14. 如請求項11之方法，其中該RAS突變型癌症係NRAS突變型癌症。
15. 如請求項14之方法，其中該NRAS突變型癌症係NRAS^Q61R、NRAS^Q61K、NRAS^Q61L或NRAS^Q61H。
16. 如請求項11之方法，其中該RAS突變型癌症係HRAS突變型癌症。
17. 如請求項16之方法，其中該HRAS突變型癌症係HRAS^G12V、HRAS^Q61R或HRAS^G12S。
18. 如請求項6之方法，其中該癌症係選自多發性骨髓瘤、乳房、卵巢、子宮頸、前列腺、睪丸、生殖泌尿道、食道、喉、神經膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、胃(stomach)(胃(gastric))、皮膚、角質棘皮瘤、肺、表皮様癌、大細胞癌、小細胞癌、肺、骨、結腸、甲狀腺、腺瘤、胰臟、腺癌、甲狀腺、濾泡性癌、未分化癌、乳突狀癌、精細胞瘤、黑色素瘤(包括葡萄膜黑色素瘤)、肉瘤、膀胱癌、肝臟癌及膽道癌(biliary passage)、腎臟癌、骨髓樣疾病、淋巴樣疾病、霍奇金氏病、多毛細胞、頰腔及咽(口部)、唇、舌、口、咽、小腸、結腸直腸癌、大腸、直腸、大腦及中樞神經系統、及白血病。
19. 如請求項6之方法，其中該癌症係選自癌、淋巴瘤、母細胞瘤、 肉瘤及白血病。
20. 如請求項6之方法，其中該癌症係選自腺癌；腺瘤；腎上腺皮質癌；膀胱癌；骨癌；腦癌；乳癌；頰腔癌；子宮頸癌；結腸癌；結腸直腸癌；子宮內膜癌或子宮癌；表皮様癌；食道癌；眼癌；濾泡性癌；膽囊癌；胃腸道癌，諸如例如胃腸道基質腫瘤；生殖泌尿道癌症；神經膠質母細胞瘤；多毛細胞癌；各種類型的頭頸癌；肝癌；肝細胞癌症；霍奇金氏病；角質棘皮瘤；腎臟癌；大細胞癌；大腸癌；喉癌；肝臟癌；肺癌，諸如例如肺腺癌、肺退行性癌、乳突狀肺腺癌、小細胞肺癌、肺鱗狀癌、非小細胞肺癌；黑色素瘤及非黑色素瘤皮膚癌；淋巴疾病；骨髓增生疾病，諸如例如，真性紅細胞增多症、原發性血小板增多症、慢性自發性骨髓纖維化、合併骨髓纖維化之骨髓化生、慢性骨髓樣白血病(CML)、慢性骨髓單核細胞性白血病、慢性嗜酸性白血病、慢性淋巴球性白血病(CLL)、嗜酸性紅細胞增多症候群、全身性肥大細胞疾病、非典型CML或幼年型骨髓單核細胞性白血病；漿細胞瘤；多發性骨髓瘤；神經母細胞瘤；卵巢癌；乳突狀癌；胰臟癌；腹膜癌；前列腺癌，包括良性前列腺增生；直腸癌；唾液腺癌；肉瘤；精細胞瘤；鱗狀細胞癌；小細胞癌；小腸癌；胃癌；睪丸癌；甲狀腺癌；未分化癌；及陰門癌症。
21. 如請求項6之方法，其中該癌症係選自黑色素瘤、胰臟癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌、肺癌、乳癌、卵巢癌及白血病。
22. 如請求項6之方法，其中該癌症係選自黑色素瘤、結腸直腸癌或胰臟癌。
23. 如請求項6之方法，其中該癌症係黑色素瘤。
24. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係葡萄膜黑色素瘤。
25. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係局部晚期。
26. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係轉移性。
27. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係復發性。
28. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係抗拒BRAF抑制劑之黑色素瘤。
29. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係BRAF^v600突變型黑色素瘤。
30. 如請求項23之方法，其中該黑色素瘤係NRAS突變型黑色素瘤。
31. 如請求項6之方法，其中該癌症係結腸直腸癌。
32. 如請求項31之方法，其中該結腸直腸癌係局部晚期。
33. 如請求項31之方法，其中該結腸直腸癌係轉移性。
34. 如請求項31之方法，其中該結腸直腸癌係BRAF^v600突變型結腸直腸癌。
35. 如請求項31之方法，其中該結腸直腸癌係RAS突變型結腸直腸癌。
36. 如請求項30之方法，其中該結腸直腸癌係KRAS突變型結腸直腸癌。
37. 如請求項6之方法，其中該癌症係胰臟癌。
38. 如請求項37之方法，其中該胰臟癌係局部晚期。
39. 如請求項37之方法，其中該胰臟癌係轉移性。
40. 如請求項37之方法，其中該胰臟癌係胰臟導管腺癌(PDAC)。
41. 如請求項37之方法，其中該胰臟癌係RAS突變型胰臟癌。
42. 如請求項37之方法，其中該胰臟癌係KRAS突變型胰臟癌。
43. 如請求項6之方法，其中該癌症係乳突狀甲狀腺癌。
44. 如請求項43之方法，其中該乳突狀甲狀腺癌係局部晚期。
45. 如請求項43之方法，其中該乳突狀甲狀腺癌係轉移性。
46. 如請求項43之方法，其中該乳突狀甲狀腺癌係復發性。
47. 如請求項43之方法，其中該乳突狀甲狀腺癌係BRAF^v600突變型乳突狀甲狀腺癌。
48. 如請求項6之方法，其中該癌症係肺癌。
49. 如請求項48之方法，其中該肺癌係局部晚期。
50. 如請求項48之方法，其中該肺癌係轉移性。
51. 如請求項48之方法，其中該肺癌係非小細胞肺癌(NSCLC)。
52. 如請求項48之方法，其中該肺癌係RAS突變型肺癌。
53. 如請求項48之方法，其中該肺癌係KRAS突變型肺癌。