SU1630711A1

SU1630711A1 - Method of nutrient substrate preparation for plant tissues of rhododendrons and azaleas cultivation

Info

Publication number: SU1630711A1
Application number: SU894678953A
Authority: SU
Inventors: Даце Хуговна Гертнере; Арнис Петрович Трейманис; Улдис Эрнестович Виестурс; Мария Кристовна Эисимонте; Елена Модрисовна Калниня; Рихард Язепович Кондратович
Original assignee: Латвийский Государственный Университет Им.П.Стучки; Институт химии древесины АН ЛатвССР
Priority date: 1989-03-06
Filing date: 1989-03-06
Publication date: 1991-02-28

Abstract

Изобретение относитс к биотехнологии , в частности к культивированию растительных тканей in vitro. Целью изобретени вл етс повышение интенсивности пролиферации и упрощение процесса культивировани . Способ состоит в тбм, что при приготовлении питательного суьстрата в качестве носител используют целлюлозу с пористостью 0,55-1,40 см3/г. 1 табл.This invention relates to biotechnology, in particular to the cultivation of plant tissues in vitro. The aim of the invention is to increase the intensity of proliferation and simplify the cultivation process. The method consists in tbm, that when preparing the nutrient substrate, cellulose with a porosity of 0.55-1.40 cm3 / g is used as a carrier. 1 tab.

Description

Изобретение относитс к биотехнологии , в частности к поверхностному культивированию растительных тканей в стерильных услови х на искусственных питательных средах.The invention relates to biotechnology, in particular to the surface cultivation of plant tissues under sterile conditions on artificial nutrient media.

Цель изобретени - повышение интенсивности пролиферации и упрощение процесса культивировани .The purpose of the invention is to increase the intensity of proliferation and simplify the cultivation process.

Способ состоит в том, что субстрат дл микрокультивировани приготавливают заранее и он может хранитьс в холодильнике при положительных температурах длительное врем . Дл приготовлени субстрата носитель - целлюлозное волокно со значением пористости во влажном состо нии в пределах 0,55-1,чО см3/г - пропитывают питательной средой, содержащей минеральные элементы, органические добавки, сахарозу и воду. После этого комплексный субстрат высушивают при t 60вС.The method consists in that the substrate for micro-cultivation is prepared in advance and it can be stored in a refrigerator at positive temperatures for a long time. For preparation of the substrate, the carrier — cellulose fiber with a porosity value in the wet state within 0.55–1, or cm 3 / g — is impregnated with a nutrient medium containing mineral elements, organic additives, sucrose, and water. After that, the complex substrate is dried at t 60 ° C.

40 Дл стерильного выращивани растительных тканей берут заранее приготовленный комплексный субстрат, помещают в пробирки, заливают дистиллированной водой (на 1 т субстрата 10-20 мл воды) и автокЛавируют при 0,11 МПа в течение 15 мин. После этого субстрат готов дл стериль- гной посадки растительных тканей.40 For sterile cultivation of plant tissues, a previously prepared complex substrate is taken, placed in test tubes, filled with distilled water (10-20 ml of water per 1 ton of substrate) and autoclaved at 0.11 MPa for 15 minutes. After that, the substrate is ready for sterile planting of plant tissues.

Ввиду того, что целлюлоза в завич симости от марки и способа получени имеет различную структуру и свойства, дл данных целей выбирают или подготавливают целлюлозное волокно с пористостью в пределах 0,55-1,40 см3/г, обеспечивающей оптимальные скорости сорбции и диффузии питательных веществ .Due to the fact that cellulose, depending on the brand and method of production, has different structure and properties, cellulose fiber with a porosity in the range of 0.55-1.40 cm3 / g is selected or prepared for these purposes, ensuring optimal sorption rates and diffusion of nutrients. .

Исследовани показывают, что при пористости целлюлозных волокон во влажном состо нии ниже 0,55 см3/г замедл етс дишгоузи компонентов субStudies show that when the cellulose fibers are porosity in the wet state below 0.55 cm3 / g, the decomposition of sub components is slowed down.

SS

(Л(L

0505

оэoh

страта, а при пористости выше 1,40 см3/г увеличиваетс необратима сорбци веществ. Последнее обсто тельство снижает концентрацию компо- нентов в жидкой фазе пительной средыwhen the porosity is above 1.40 cm3 / g, the sorption of substances is irreversible. The latter circumstance reduces the concentration of components in the liquid phase of the growth medium.

Субстрат, содержащий предлагаемую целлюлозу с оптимальными структурными характеристиками, улучшает пролиферацию микрочеренков асептической культуры рододендронов.The substrate containing the proposed cellulose with optimal structural characteristics, improves the proliferation of microcania aseptic culture of rhododendrons.

Пример 1. Приготовление субстрата дл микрокультивировани рододендронов . Готов т жидкую питательную среду дл пролиферации микрокультур рододендронов, предложенную Экономоу и Ридом, мг/л: 400; KN03 220; (. 132; CaClz2HaO 440; vMgS04. 7Н20 370;; КН2Р04 408; ГеЫаЭДТА 36; Hii30 6,2; MnS04H20 16,9; ZnS047H.j,0 rf,o; Na2Mo042H20 0,25; CuS045HJiO 0,025; 0,025; мезо-инозит 100; тиамин-HCl 0,4; сахароза 20000, 6-изопентенил-аденин-10.Example 1. Preparation of a substrate for micro-cultivation of rhododendrons. Preparing a liquid nutrient medium for the proliferation of rhododendron microcultures proposed by Economow and Reed, mg / l: 400; KN03 220; (. 132; CaClz2HaO 440; vMgS04. 7H20 370 ;; KH2P04 408; GeA-EDTA 36; Hii30 6.2; MnS04H20 16.9; ZnS047H.j, 0 rf, o; Na2Mo042H20 0.25; CuS045HJiO 0.025; o inositol 100; thiamine-HCl 0.4; sucrose 20,000, 6-isopentenyl-adenine-10.

В экспериментах используют указан- ный состав и соотношени элементов питательной среды (1 Эк.-Р.)и 2/3, 3/4, 5/4 4/3 от полной концентрации питательной среды, сохран соотношени питательных элементов (2/3 Эк.-Р., 3/4 Эк.-Р., 5/4 Эк.-Р., 4/3 Эк.-Р.). In the experiments, the indicated composition and ratios of the elements of the nutrient medium (1 Ek.-P.) and 2/3, 3/4, 5/4 4/3 of the total concentration of the nutrient medium are used, keeping the ratio of nutrients (2/3 Ek . -R., 3/4 Ek.-P., 5/4 Ek.-R., 4/3 Ek.-P.).

100 г целлюлозных волокон со значением объема субмикроскопических капилл ров в пределах 0,40-1,50 см3/г пропитывают 1000 мл питательной ере- ды. Затем массу высушивают при 40 - 60° С и дозируют по 0,25 г. Приготовленный комплексный субстрат хран т в холодильнике при положительных температурах .100 g of cellulose fibers with a value of the volume of submicroscopic capillaries in the range of 0.40-1.50 cm3 / g are impregnated with 1000 ml of nutrient medium. Then the mass is dried at 40-60 ° C and dispensed at 0.25 g. The prepared complex substrate is stored in a refrigerator at positive temperatures.

Микрокультивирование рододендронов (лини R-81/1).Micro-cultivation of rhododendrons (line R-81/1).

В каждой пробирке помещают 0,25 г субстрата и заливают 4 мл дистиллированной воды. Пробирки закрывают, ватными пробками и автоклавируют при 0,11 МПа в течение 15 мин. После автоклавировани в стерильных услови х на субстрат высаживают де- капитированные микрочеренки с 4 междоузли ми , полученные от асептичес- кой культуры рододендронов. Через 5 недель культивировани при 23-25 dEach tube is placed 0.25 g of the substrate and pour 4 ml of distilled water. The tubes are closed with cotton plugs and autoclaved at 0.11 MPa for 15 minutes. After autoclaving under sterile conditions, decapitated microcurrents with 4 interstices, obtained from aseptic rhododendron cultures, are planted on the substrate. After 5 weeks of cultivation at 23-25 d

в 16-часовом фотопериоде с интенсивностью освещени 3 клк, оценивают количество, длину вновь образовавшихс микропобегов. Повторноеть 20- кратна .in a 16-hour photoperiod with an illumination intensity of 3 klx, the number and length of the newly formed microshoots are estimated. Repeat 20-fold.

Пример 2. Все приемы и оперции осуществл ют аналогично примеру 1. Также исследуют возможность культивировани на питательном субстрате , содержащем в качестве носител целлюлозу различной пористости. В исследовани вовлекают тепличные азлии (лини А-88/1).Example 2. All the techniques and operations are carried out analogously to Example 1. The possibility of cultivation on a nutrient substrate containing cellulose of various porosity as a carrier is also examined. Greenhouse azlias (lines A-88/1) are involved in the studies.

П р и м е р 3. Культивирование провод т на агаризованной питательной среде Экономоу-Рида.PRI me R 3. The cultivation is carried out on an agar nutrient medium, Economy-Reed.

Прим ер 4. Культивирование ведут на питательном субстрате, содержащем в качестве основы среду Экономоу-Рида, а в качестве носител - вискозу с пористостью 0,35- 0,40 см3/г.Example 4. Cultivation is carried out on a nutrient substrate containing, as a base, an Economoude-Reed medium and, as a carrier, viscose with a porosity of 0.35-0.40 cm3 / g.

Результаты опытов приведены в таблице.The results of the experiments are given in the table.

Таким образом, предлагаемый субстрат улучшает услови пролиферации микрокультуры рододендронов открытого грунта (R-81/1) и тепличных азалий (А-88/1), на что указывают больший выход и длина микропобегов . Кроме того, заранее приготовленный комплексный субстрат сокращает трудозатраты на приготовление питательных сред, что особенно важно в услови х промышленного микроразмножени .Thus, the proposed substrate improves the conditions for the proliferation of microculture of open-source rhododendrons (R-81/1) and greenhouse azaleas (A-88/1), as indicated by the higher yield and length of micro-shoots. In addition, a pre-prepared complex substrate reduces labor costs for the preparation of nutrient media, which is especially important in the conditions of industrial micropropagation.

Claims

Invention Formula

A method of preparing a nutrient substrate for cultivating plant tissues of rhododendrons and azaleas, comprising mixing a nutrient base and a cellulose-containing carrier, characterized in that, in order to increase the intensity of proliferation and simplify the cultivation process, Economou and Reed are used as nutrient media - cellulose with a porosity of 0.55-1.40 cm3 / g.