SK82098A3

SK82098A3 - Biologically active benzothiazolone ethanamines

Info

Publication number: SK82098A3
Application number: SK820-98A
Authority: SK
Inventors: Roger Bonnert; Roger Brown; Peter Cage; David Cheshire; Francis Ince
Original assignee: Astra Pharma Prod
Priority date: 1995-12-23
Filing date: 1996-12-13
Publication date: 1998-11-04
Also published as: EE9800193A; EE03440B1; NO982927L; CZ288704B6; ATE209638T1; RU2177476C2; NZ325500A; TW401411B; NO982927D0; US5929100A; JP2000502681A; EP0918760A1; IL124998A0; HUP9900100A3; IL142502A0; DE69617472D1; TR199801196T2; KR19990076688A; AR005008A1; GB9526511D0

Description

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka nových etánamínov benzotiazolónu, spôsobov ich prípravy, farmaceutických kompozícií, ktoré ich obsahujú a spôsobov liečenia zahŕňajúcich ich použitie. Nové zlúčeniny sú indikované na použitie ako agonisty dopamín DA₂ receptora a agonisty β₂ -adrenoreceptora.

Doterajší stav techniky

Benzotiazolonové deriváty sú známe. Napríklad, medzinárodné patentové prihlášky, publikačné čísla W092/08708 a WO93/23385 popisujú biologicky aktívne amíny, medzi nimi biologicky aktívne deriváty aminoetyl benzotiazolónu, ktoré sú β₂adrenoreceptorovými agonistami a agonistami dopamín DA₂ -receptora, a ktoré sú indikované na liečbu reverzibilných ochorení upchávajúcich dýchacie cesty.

WO 93/24473 popisuje 7-(2-aminoetyl)-benzotiazolónové zlúčeniny vzorca _HN^(CH₂)_p-X-(CH₂),-Y-(CH₂)_r-Z

kde X a Y sú nezávisle -S(O)_n- alebo -O-: n je 0, 1 alebo 2: p, q a r sú nezávisle 2 alebo 3. Zje fenyl voliteľne substituovaný halogénom, OR¹, NO2 alebo NR²R³: alebo Z je 5- alebo 6-čleňný heterocyklus obsahujúci N, O alebo S: R¹, R² a R³ sú nezávisle vodík alebo C^alkyl. Zlúčeniny sú β2-3ύΓβηοΓβοβρΙονέ agonisty a DA₂-receptorové agonisty, a sú vhodné na liečbu reverzibilných ochorení upchávajúcich dýchacie cesty.

-2Teraz sme objavili skupinu nových benzotiazolónových etánamínov, ktoré sú vhodné ako agonisty DA₂-receptorov a p₂-adrenoreceptorov.

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka zlúčeniny vzorca I, ^(CH₂)_p-SO₂-(CH₂),-O<CH₂),-X kde

X predstavuje naftyl voliteľne substituovaný alkylom alebo halogénom: a p, q a r predstavujú nezávisle 2 alebo 3, a ich farmaceutický prijateľné soli.

Zlúčeniny sú farmakologicky aktívne. Prejavujú tak dopamín DA₂-receptorový agonizmus, ako aj p₂-adrenoreceptorový agonizmus. Vykazujú malý alebo žiadny a,adrenoreceptorový agonizmus. Zlúčeniny majú výhodnú dobu účinku a pomer DA₂/p₂.

Výhodne sú vo vyššie uvedenom vzorci I hodnoty pre p =3, q=2, r=2. Ako X je preferovaný nesubstituovaný naftyl.

Ak je X naftyl substituovaný alkylom, substituent môže byť vybraný z lineárnych alebo vetvených C^alkylových reťazcov, napr. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, ibutyl, lineárny alebo vetvený pentylový reťazec alebo lineárny alebo vetvený hexylový reťazec. Preferované halogénové substituenty sú F, Cl a Br. Kde je alkylov substituent chirálny, optické izoméry môžu byť utvorené a tieto sú zahrnuté v prehľade predloženého vynálezu. V predmete predloženého vynálezu sú tiež zahrnuté tautoméry látok vzorca I.

-3Farmaceuticky prijateľné soli látok vzorca I zahŕňajú kyslé adičné soli odvodené z anorganických a organických kyselín ako sú hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, fosfáty, maleáty, tartráty, citráty, benzoáty, 4-metoxybenzoáty, 2- alebo 4hydroxybenzoáty, 4-chlorobenzoáty, benzénsulfonáty, p-toluénsulfonáty. naftalénsulfonáty, metánsulfonáty, sulfamáty, askorbáty, salicyláty, acetáty, difenylacetáty, trifenylacetáty, adipáty, fumaráty, sukcináty, laktáty, glutaráty, glukonáty, hydroxy-naftalénkarboxyláty, napr. 1-hydroxy alebo 3-hydroxy-2naftalénkarboxyláty, alebo oleáty. Zlúčeniny môžu tvoriť tiež soli s vhodnými bázami. Zlúčeniny vzorca I môže byť získaná vo forme soli, vhodnejšie ako farmaceutický akceptovateľnej soli. Kde sa to vyžaduje, také soli môžu byť konvertované na voľné bázy s využitím konvenčných metód. Farmaceutický prijateľné soli môžu byť pripravené reakciou zlúčeniny vzorca I s príslušnou kyselinou alebo zásadou v prítomnosti vhodného rozpúšťadla.

Predložený vynález sa tiež týka postupu prípravy zlúčenín vzorca I, zahŕňajúci selektívnu redukciu zlúčeniny vzorca II,

II v ktorom p, q , r a X sú definované vyššie.

Medzi vhodné redukčné činidlá patria elektrofilné redukčné činidlá, napr. diborán a alán (alumínium hydrid), alebo nukleofilné redukčné činidlá, napr. komplex hydridov kovu ako napríklad sodium bis(2-metoxyetoxy)alumínium hydrid. Preferované redukčné činidlo je diborán. Rozpúšťadlo by malo byť inertné voči reakčným podmienkam. Výhodné sú aprotické rozpúšťadlá, napr. tetrahydrofurán, dietyléter, alebo 1,2

-4S lll )=O

N

H dimetoxyetán. Reakcia môže byť uskutočnená pri teplotách od 0°C do 100°C, výhodne teplote refluxu.

Zlúčeniny vzorca II môžu byť pripravené spojením aminu vzorca III

H₂N

V OH a príslušnej kyseliny vzorca IV

HOOC-(CH₂)_p.₁-SO₂-(CH₂)_q-O-(CH₂)_r-X IV alebo zodpovedajúceho chloridu kyseliny bežnými prostriedkami. Napríklad, spojenie môže byť uskutočnené v prítomnosti dicyklohexylkarbodiimidu použitím metódy Sheehan and Hess, J. Am. Chem. Soc., 1955, 77, 1067: alebo v prítomnosti 1,1'-karbonyldiimidazolu ako popísal Staab, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1962, 1, 351: alebo v bromotripyrolidínofosfónium hexafluorofosfátovom v rozpúšťadle ako napríklad DMF. Kyseliny potrebné na spôsob môžu byť získané zo zodpovedajúcich esterov, hydrolýzou hydroxidom lítnym vo vodnom metanole. Chloridy kyselín môžu byť pripravené z kyselín napr. reakciou s oxalyl chloridom alebo tionyl chloridom v toluéne pri teplote prostredia až refluxnej. Zlúčenina vzorca III môže byť pripravená známymi metódami, napr. metódou popísanou v J. Med. Chem. 1987, 30, 1116.

Zlúčeniny vzorca IV môžu byť pripravené ako je popísané v príkladoch uskutočnenia vynálezu, ktoré sú ľahko prispôsobiteľné odborníkom v oblasti na prípravu látok vzorca IV v požadovanom rozsahu.

Vo vyššie uvedených spôsoboch môže byť nevyhnutné pre ľubovoľnú z funkčných skupín, napr. hydroxy alebo amino skupinu, prítomnú vo východiskových

-5zlúčeninách, aby boli chránené. Vhodné chrániace skupiny a metódy na ich odstránenie sú opísané napr. v Protective Groups in Organic Synthesis by T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley and Sons Inc., 1991.

Hydroxyskupiny môžu, napr. byť chránené arylmetyl skupinami ako napríklad fenylmetyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl, alebo s tetrahydropyranyl derivátmi. Vhodné amino ochranné skupiny zahŕňajú arylmetyl skupiny ako sú benzyl, (R,S)-afenyletyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl, a acylové skupiny ako sú acetyl, trichloroacetyl alebo trifluoroacetyl. Môžu byť použité bežné spôsoby ochrany. Arylmetyl skupiny môžu byť, napr. odstránené hydrogenolýzou v prítomnosti kovového katalyzátora, napr. paládia na uhlí. Tetrahydropyranylové skupiny môžu byť štiepené hydrolyticky v kyslých podmienkach. Acylové skupiny môžu byť odstránené hydrolýzou s bázou ako je hydroxid sodný alebo uhličitan draselný, alebo skupina ako je trichloroacetyl môže byť odstránená redukciou, napr. so zinkom a kyselinou octovou.

Medziprodukty vzorca II sú nové a sú predložené v súlade s ďalším aspektom predloženého vynálezu.

Zlúčeniny vzorca I a ich soli sú dopamín DA₂-receptorové agonisty. Väzbové afinity testovaných látok pre DA₂ receptorové väzbové miesta v membránach hovädzích hypofýz môžu byť stanovené vytesnením [³H]-N-n-propylnorapomorfínu a [³H]-spiperónu v neprítomnosti alebo prítomnosti nehydrolyzovateľného GTP analógu,

D.R.Sibley, A. DeLean and I. Creese, Anterior Pituitary Dopamin Receptors, Demonstration of Interconvertible High and Low Affinity States of the D-2 Dopamine Receptors, J. Biol. Chem., 1982, 257(11), 6351-6361. DA₂-receptorová aktivita môže byť tiež demonštrovaná vo funkčnom tkanive ušnej tepny izolovanej z králika ako popísali Brown and O'Connor, Br. J. Pharmacol, 1981, 73, 189P. Zlúčeniny sú tiež β₂adrenoreceptorovými agonistami. Táto aktivita môže byť demonštrovaná v cieve z morských prasiat, ako popísali I.G. Dougall, D. Harper, D.M. Jackson, änd P. Leff, Br. J. Pharmacol., 1991, 104, 1057.

α,-Receptorová aktivita môže byť analyzovaná pomocou testu použitím izolovanej králičej ušnej tepny ako je popísané v príkladoch.

Trvanie pôsobenia môže byť analyzované podľa metódy Coleman et al., v Novel and versatile superfusion systém: its use in the evaluation of some spasmogenic and spasmolytic agents using guinea-pig isolated tracheal smooth muscle, Journal of Pharmacological Methods 21, 71-86, (1989).

Zlúčeniny vzorca I a ich soli sú indikované na použitie na liečbu početných ochorení dýchacích ciest, vrátane takých stavov ako je astma, vrátane bronchiálnej astmy, alergickej astmy, vnútornej astmy (napr. neskorej astmy a hypercitlivosti dýchacích ciest): a bronchitídy a podobne (viď napr. UK Patent č. 2022078 a Br. J. Pharmacol., 1987, 24, 4983).

Zlúčeniny vzorca I a ich soli sú tiež indikované na použitie na liečbu glaukómu a rôznych ďalších stavov, napr. zápalových a alergických kožných ochorení a rakoviny, napr. rakoviny malých pľúcnych buniek a zlyhania srdca v dôsledku venastázy.

Pojem „liečba, ktorý sa tu používa, zahŕňa profylaxiu ako aj zmiernenie symptómov ochorenia.

Podľa ďalšieho aspektu predloženého vynálezu, je poskytnuté použitie zlúčeniny vzorca I, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli v terapii.

Ďalej vynález chráni použitie zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na liečbu ochorenia dýchacích ciest, zvlášť na liečbu astmy alebo chronickej bronchitídy.

Ďalej, predložený vynález poskytuje spôsob liečby ochorenia dýchacích ciest, ktorý zahŕňa podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický akceptovateľnej soli, pacientovi trpiacemu na /alebo citlivému na takýto stav.

-ΊPodľa ďalšieho aspektu vynálezu, je poskytnutý spôsob liečby alebo profylaxie glaukómu, ktorý zahŕňa podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, pacientovi trpiacemu na/ alebo citlivému na takýto stav.

Pri vyššie spomenutých použitiach budú podané dávky samozrejme kolísať podľa spôsobu podania a požadovanej liečby. Vo všeobecnosti sa však získajú uspokojivé výsledky, keď zlúčenina vzorca I je podaná v dennom dávkovaní od 1 pg do 20 mg na kg živočíšnej telesnej hmotnosti, najlepšie podávanej v delených dávkach 1 až 4-krát denne alebo vo forme s trvalým uvoľňovaním. Pre človeka je celková denná dávka v rozsahu od 70 pg do 1400 mg a jednotkové dávky vhodné na podanie obsahujú od 20 pg do 1400 mg zlúčeniny primiešanej k pevnému alebo tekutému farmaceutickému rozpúšťadlu alebo k nosiču.

Zlúčenina vzorca I môže byť použitá ako samotná alebo vo forme vhodných farmaceutických kompozícií na vonkajšie, enterálne alebo parenterálne podanie. Napr. inhalačné prístroje s odmeriavanou dávkou môžu byť použité na podanie zlúčeniny, dispergovanej vo vhodnej hnacej látke a/ alebo bez dodatočných vehikúl ako sú etanol, surfaktanty, mazadlá a stabilizačné činidlá.

Vhodné hnacie látky zahŕňajú uhľovodík, chlorofluorokarbón a hydrofluoroalkánové hnacie látky alebo zmesi ktorýchkoľvek z týchto hnacích látok. Veľmi výhodné hnacie látky sú P134a a P227 , z ktorých každý môže byť použitý sám alebo v kombinácii s ďalšími hnacími látkami a/alebo surfaktantami a/alebo vehikulami, napr. vo vzájomnej kombinácii.

Rozprášené, vodné suspenzie, alebo výhodne roztoky, môžu byť použité s alebo bez vhodnej úpravy pH a/alebo tonicity, buď ako jednodávkové alebo multidávkové prípravky.

-8Suché práškové inhalátory môžu byť použité na podanie zlúčeniny, a to samotnej alebo v kombinácii s farmaceutický akceptovateľným nosičom, v druhom prípade buď ako jemne delený prášok alebo ako usporiadaná zmes. Inhalátor suchého prášku môže byť použitý ako jednodávkový alebo mnohodávkový a môže používať suchý prášok alebo kapsulu obsahujúcu prášok.

Inhalátory s meraním dávky, rozprašovače a inhalátory suchého prášku sú dobre známe a k dispozícii sú rôzne takéto prístroje.

Tablety a želatínové kapsule, ktoré môžu byť potiahnuté, ak je to požadované, obsahujúce aktívnu látku, môžu tiež napr. zahŕňať jednu alebo viac prísad vybraných z rozpúšťadiel, nosičov, spojív, mazadiel, stabilizátorov a iných obvyklých prísad.

Injekčné roztoky aktívnej zložky môžu tiež obsahovať, napr. jednu alebo viac prísad z konzervačných, stabilizačných činidiel, činidiel regulujúcich viskozitu, emulzifikačných činidiel, pufrov a ďalších obvyklých prísad.

Podľa vynálezu je tiež poskytnutá farmaceutická kompozícia zahŕňajúca výhodne menej ako 80 % a výhodnejšie menej ako 50 % hmotnosti zlúčeniny vzorca I, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, v zmesi s farmaceutický prijateľným rozpúšťadlom alebo nosičom.

Vynález je ilustrovaný, ale žiadnym spôsobom nie obmedzený nasledovnými príkladmi, v ktorých teploty sú v stupňoch Celzia.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

4-Hydroxy-7-[2-[3-[2-[2-(1-naftalenyl)etoxy]etylsulfonyl]propylamino]etyl]-1,3benzotiazol-2(3H)-ón hydrochlorid

a) 1-[2-(Etenyloxy)etyl]naftalén

-9Zmes čerstvo destilovaného etylvinyléteru (60 ml), 2-(1-naftalenyl)etanolu (8,61 g) a octanu ortuťnatého (0,4 g) bola zahrievaná pod refluxom počas 20 hod. Prchavý materiál bol odstránený vákuovo (vodná pumpa) a zvyšok destilovaný podľa Kugelrohra, aby sa získala zlúčenina uvedená v podnadpise vo forme oleja (8,15 g), ktorý bol znečistený malým množstvom 2-(1-naftalenyl)etanolu.

teplota varu 160 - 170 °C pri 0,04 mm Hg:

Hmotnostné spektrum: gc/ms 198 (M), 155 (100).

b) Metyl 3-[2-[2-(1-naftalenyl)etoxy]etyltio]propanoát

Produkt kroku a) (8,15 g), metyl 3-merkaptopropanoát (4,86 g) a 2,2'-azobis(2metylpropanonitril) (0,2 g) boli zahrievané na 50 °C počas 1 hod., potom tlc (tenkovrstvová chromatografia) indikovala, že niečo z východiskového materiálu zostalo. Bolo pridané ďalšie množstvo 2,2'-azobis(2-metylpropanonitril)-u (0,15 g) a zmes bola zahrievaná na 60° ďalšiu hodinu. Surová reakčná zmes bola purifikovaná impulznou chromatografiou (benzín'.éter, 5:1 ako eluant) na získanie v podnadpise uvedenej zlúčeniny vo forme oleja(11,07 g).

Hmotnostné spektrum: gc/ms 318 (M), 154 (100).

¹H nmr (360 mHz, CDCI₃ 5:2,61 (2H, t), 2,72 (2H, t), 2,81 (2H, t) 3,38 (2H, t), 3,64 (2H, t), 3,70 (3H, s), 3,80 (2H, t), 7,40 (2H, m), 7,5 (2H, m), 7,73 (1H, d), 7,85 (1H, d), 8,06 (1H, d).

c) Metyl 3-[2-[2-(1-naftalenyl)etoxy]etylsulfonyl]propanoát

Roztok OXÔNE™ (18,4 g) vo vode (70 ml) bol prikvapkaný pri 10° k roztoku produktu kroku b) (3,18 g) v metanole (70 ml). Suspenzia bola miešaná pri izbovej teplote počas 5 hod. Reakčná zmes bola zriedená vodou (200 ml) a extrahovaná s dichlorometánom (3x50 ml). Kombinované organické extrakty boli premyté vodou a roztokom siričitanu sodného a potom vysušené a odparené, aby sa získala v

-10podnadpise uvedená zlúčenina (3,39 g), ktorá bola použitá v nasledujúcom kroku bez ďalšej purifikácie.

Hmotnostné spektrum: gc/ms 350 (M), 154 (100):

¹H nmr (360 mHz, CDCI₃) δ:2,70 (2H, t),. 3,06 (2H, t), 3,17 (2H, t), 3,26 (2H, t), 3,71 (3H, s), 3,85 (4H, m), 7,40 (2H, m), 7,5 (2H, m), 7,73 (1H, d), 7,85 (1H, d), 8,06 (1H, d).

d) 3-[2-[2-(1-Naftalenyl)etoxy]etylsulfonyl]propánová kyselina

Roztok monohydrátu hydroxidu lítneho (2,02 g) vo vode (30 ml) bol pridaný do suspenzie produktu kroku c) (3,35 g) v metanole (40 ml). Zmes bola miešaná pri izbovej teplote 6 hod. a potom tlc (éter) indikovala, že ester bol spotrebovaný. Väčšina metanolu bola odstránená vákuovo a zvyšok bol zriedený vodou (100 ml). Bázický roztok bol premytý éterom. Vodná vrstva bola potom okyslená s HCI a extrahovaná éterom. Éter bol vymytý vodou, odparením zahustený a potom vysušený (MgSOJ a rozpúšťadlo odstránené vákuovo, čím sa získala v podnadpise uvedená zlúčenina (3,08 g). Táto bola ďalej purifikovaná impulznou chromatografiou (chloroform: kyselina octová 9:1 ako eluant), čím po rozmelnení s hexánom vznikla zlúčenina uvedená v podnadpise, ako biela tuhá látka (0,687 g).

teplota topenia: 105-108°

Hmotnostné spektrum: gc/ms 336 (M), 141 (100):

¹H nmr (360 mHz, CDCI₃) δ: 2,73 (2H, t), 3,15-3,22 (4H, m), 3,33-3,37 (2H, t), 3,79-3,86 (4H, m), 7,33-7,54 (4H, m), 7,72 (1H, d), 7,84 (1H, d), 8,00 (1H, d).

Analýza: Nájdené C,60,90, H, 6,34, S,9,48%.

Požadované: C,60,70, H,5,99: S,9,53%.

e) N-[2-(4-Hydroxy-2-oxo-3H-1,3-benzotiazol-7-yl)etyl]-3-[2-[2-(1-naftalenyl)etoxyjetylsulfonyljpropánamid

Produkt kroku d) (0,625 g) bol rozpustený v dimetylformamide (10 ml) pod dusíkom. K tomuto miešanému roztoku bol pridaný 1,ľ-karbonyldiimidazol (0,301 g) a zmes bola miešaná 2 hod. pri laboratórnej teplote. 7-(2-aminoetyl)-4-hydroxy-1,3benzotiazol(3H)-2-ón hydrobromid¹ (0,541 g) bol pridaný a neskôr trietylamín (0,259 ml). Zmes bola miešaná cez noc, prchavé zložky boli odstránené vákuovo. Zvyšok bol daný do etylacetátu a premytý zriedenou HCI kyselinou a potom odparený. Organická vrstva bola vysušená (MgSO₄) a rozpúšťadlo odstránené vákuovo, čím sa získala vyššie uvedená zlúčenina (1,30 g) vo forme oleja, ktorý bol použitý bez ďalšej purifikácie.

Hmotnostné spektrum: FAB 529 (M+H).

¹J. Med. Chem., 1987, 30,1166.

f) 4-Hydroxy-7-[2-[3-[2-[2-(1 -naftalenyl)etoxy]etylsulfonyl]propylamino]etyl]-1,3benzotiazol-2(3H)-ón hydrochlorid

Roztok borán-tetrahydrofuránu (1,0 M v THF, 8,6 ml) bol prikvapkaný do miešaného roztoku produktu kroku e) (1,30 g) v suchom tetrahydrofuráne (100 ml). Reakčná zmes bola potom zahrievaná pod refluxom v inertnej atmosfére počas 1 hod. Reverzná fáza HPLC s využitím acetonitrilu a 0,1% kyseliny trifluórooctovej ako eluentu ukázala, že zostalo veľké množstvo východiskového materiálu, takže bolo pridané ďalšie množstvo boránu (8,6 ml) a zmes sa zahrievala pod refluxom ďalšiu hodinu. Reakčná zmes bola ochladená a metanol (3,5 ml) bol opatrne pridaný. Rozpúšťadlá boli vákuovo odstránené a zvyšok rozpustený v metanole (100 ml), ku ktorému bola pridaná koncentrovaná HCI (sg. 1,18, 0,75 ml). Tento roztok bol zahrievaný pod refluxom 20 min a potom rozpúšťadlo bolo odstránené vákuovo. Zvyšok bol purifikovaný preparatívnou HPLC s reverznou fázou použijúc acetonitril a 0,1% kyselinu trifluórooctovú ako eluent. Nakoniec, príprava chlorovodíkovej soli a

-12rekryštalizácia z etanolu poskytli látku, označenú v nadpise vo forme bieleho prášku (0,38 g).

Hmotnostné spektrum: FAB 515 (M+H).

Ή nmr (360 mHz, D₆-DMSO) δ: 2,00-2,08 (2H, m), 2,86-2,91 (2H, m), 2,96 (2H, m), 3,06 (2H, m), 3,15 (2H, t), 3,33 (2H, t), 3,38-3,40 (2H, m), 3,76-3,82 (4H, m), 6,80 (1H, d), 6,89 (1H, d), 7,42-7,58 (4H, m),.7,80 (1H, d), 7,92 (1H, d), 8,09 (1H, d) 9,22 (2H, brs), 10,20 (1H, s), 11,82 (1H, s).

Analýza: Nájdené C,56,16: H,5,98. N,5,40: S,11,77: CI,6,00: H₂O,1,20%

Požadované na 0,28 molov vody: C,56,16: H,5,89: N,5,04: S,11,52: Cl.6,39: H₂O,0,91%.

Aktivita DA₂-receptoru bola demonštrovaná vo funkčnej skúške v ušnej tepne izolovanej z králika, ako popísal Brown and O'Connor, Br. J. Pharmacol., 1981, 73, 189P.

Aktivita p₂-adrenoreceptoru bola demonštrovaná v izolovanej cieve morského prasaťa ako popísal I.G. Dougall, D. Harper, D.M. Jackson, and P. Leff, Br. J. Pharmacol., 1991, 104, 1057.

Aktivita a, - receptoru bola analyzovaná pomocou skríningu ušnej tepny izolovanej z králika nasledovne:

Ušná tepna izolovaná z králika

Samce NZW králika (2,5-3,0 kg) boli usmrtené intravenóznou injekciou pentobarbitonátu sodného (60 mg/kg). Uši boli odstránené a proximálna časť strednej ušnej tepny bola odložená a kanylovaná použitím polypropylénovej kanyly (0,75 mm vonkajší priemer). Po odstránení bola tepna očistená od priliehajúceho spojivového tkaniva a bolo pripravených 6 krúžkov širokých 5 mm zachovávajúcich rovinu kruhového hladkého svalstva. Tkanivá boli upevnené na jemné volfrámové drôtené

-13 háčiky (0,25 mm v priemere) v 20 ml orgánového kúpeľa obsahujúceho Krebsov roztok s nasledovným zložením (mM): NaC1117,56: NaHCO₃ 25,00: KCI 5,36: NaH₂PO₄ 0,89: MgSO₄ 1,18: glukóza 11,10 a CaCI₂ 2,55. Do Krebsovho roztoku boli pridané kokaín (30 μΜ) a propanolol (1μΜ), aby blokovali neuronálne vzruchy, resp. β-receptory. Bol tiež pridaný askorbát (100 μΜ), aby zabránil oxidácii katecholamínu. Tento roztok bol udržiavaný pri 37 °C a sústavne sýtený plynom s 95 % O₂:5 % CO₂. Horný drôtený háčik bol pripevnený k silovému prevodníku ORMED, spodný háčik bol pripevnený ku stacionárnej podložke v kúpeli. Zmeny v izometrickej sile boli zaznamenávané na záznamníku Advance Bryans AB500.

Experimentálna časť

Všeobecná časť

Na začiatku každého experimentu bola na každé tkanivo aplikovaná sila 1,0 g. Táto sila bola znovu navrátená 2 alebo 3-krát do pôvodného stavu počas stabilizačnej periódy 60 minút, pokiaľ nezostala konštantná. V tom istom čase ako bola znovu ustanovená sila, boli vymyté kúpele. Krivky závislosti účinku na koncentrácii agonistu, E/[A], boli konštruované kumulatívnym pridávaním agonistu s prírastkom 0,5 log₁₀. Odpovede (kontrakcie) boli zaznamenávané ako percento maximálnej odpovede štandardného agonistu.

Kvantifikácia agonizmu

Fenylefrín bol použitý ako štandardný agonista. Krivka E/[A] k fenylefrínu bola konštruovaná najskôr. Fenylefrín bol potom odmytý a bola konštruovaná krivka E/[A] testovanej zlúčeniny. Odpovede látok, ktoré produkovali agonizmus, boli vyjadrené ako percento maximálnej odpovede na fenylefrín. Hodnota asymptoty krivky testovanej zlúčeniny vo vzťahu k fenylefrínu indikuje vnútornú aktivitu látok. (Predpokladalo sa, že fenylefrín má vnútornú aktivitu rovnú 1).

-14Hodnota p[A₅₀] je mierou agonistického potenciálu. Je to záporný logaritmus koncentrácie agonistu, ktorý produkuje odpoveď, ktorá je polovičkou z maximálnej odpovede. Pre zlúčeniny s vlastnou aktivitou významne menšou ako 1, napr..=<0,8 je možné vypočítať hodnoty účinnosti (τ) a hodnoty afinity (pK_A) s využitím porovnávacích analytických metód. Táto analýza predpokladá, že fenylefrín pôsobí v tomto systéme ako úplný agonista a tak možno definovať parametre funkčného modelu E_m a n (viď. Leff, a kol., Estimation of agonist affinity and afficacy by direct and operational model fitting., J. Pharmacol. Methods, 1989, 23, 225-237). Tieto parametre môžu potom byť využité na uskutočnenie porovnávacej analýzy na zlúčeniny, ktorá má byť testovaná. Afinita je vyjadrená ako pK_A (záporný logaritmus koncentrácie agonistu, ktorý obsadzuje polovicu receptorov).

Kvantifikácia antagonizmu

Zlúčeniny, ktoré nepreukázali agonizmus, boli skúmané ako antagonisty pomocou inkubácie tkanív s tak vysokou koncentráciou zlúčeniny ako je to len možné a následne sa konštruovali fenylefrínové krivky E/[A], Stupeň posunu týchto fenylefrinových kriviek doprava v porovnaní s kontrolnou fenylefrínovou krivkou dovolilo odhadnúť afinitu testovanej zlúčeniny. Také odhady afinity sa uvádzajú ako pA₂ hodnoty (záporný logaritmus koncentrácie antagonistu, ktorý vytvára 2-násobný posun kontrolnej krivky E/[AJ) doprava).

Potvrdenie α,-sprostredkovaného agonizmu

Ako štandardný a! agonista bol použitý prazosín. Ak testovaná zlúčenina vykazovala agonizmus, potom po dosiahnutí asymptoty krivky testovanej zlúčeniny E/[A], bol pridaný prazosín, aby bolo možné pozorovať, či odpoveď bola reverzibilná. Ak a, revertuje odpoveď testovanej zlúčeniny, naznačuje to, že agonizmus je sprostredkovaný cez a,.

Claims

PATENTOVÉ NÄROKY

1. Zlúčenina vzorca 1 _HNA^cH₂)_p-SO₂-(CH₂)_q-O-(CH₂),-X kde

X predstavuje naftyl voliteľne substituovaný alkylom alebo halogénom, p, q a r nezávisle predstavujú 2 alebo 3 a ich farmaceutický prijateľné soli.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde p je 3.
3. Zlúčenina podľa nároku 1, kde q je 2.
4. Zlúčenina podľa nároku 1, kde r je 2.
5. Zlúčenina podľa nároku 1, kde je nesubstituovaný naftyl.
6. Spôsob prípravy zlúčenín vzorca I, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa selektívnu redukciu zlúčeniny vzorca II kde p, q r, a X sú ako je definované vyššie.
7. Zlúčenina vzorca II kde p, q , r a X sú definované vyššie.
8. Použitie zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1 alebo jej farmaceutický prijateľnej soli v terapii.
9. Použitie zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1 alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na liečenie ochorení upchávajúcich dýchacie cesty, hlavne na liečbu astmy alebo chronickej bronchitídy.
10. Spôsob liečby ochorení dýchacích ciest, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli pacientovi, ktorý trpí, alebo je citlivý na taký stav.
11. Spôsob liečby alebo profylaxie gíaukómu, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli pacientovi, ktorý trpí, alebo je citlivý na taký stav.