RU2692655C2 - Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing - Google Patents
Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2692655C2 RU2692655C2 RU2017143084A RU2017143084A RU2692655C2 RU 2692655 C2 RU2692655 C2 RU 2692655C2 RU 2017143084 A RU2017143084 A RU 2017143084A RU 2017143084 A RU2017143084 A RU 2017143084A RU 2692655 C2 RU2692655 C2 RU 2692655C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- bth
- bacillus thuringiensis
- darmstadiensis
- thuringiensis var
- Prior art date
Links
- 241000905455 Bacillus thuringiensis serovar darmstadiensis Species 0.000 title claims abstract description 14
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000012272 crop production Methods 0.000 claims 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 abstract description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 10
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 36
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 22
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 22
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 20
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 17
- 241000258916 Leptinotarsa decemlineata Species 0.000 description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 230000001666 entomocidal effect Effects 0.000 description 13
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 description 12
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 12
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 12
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 7
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 7
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 7
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 6
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 6
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 5
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 5
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 5
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 description 4
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 241001124134 Chrysomelidae Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 3
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 3
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193364 Bacillus thuringiensis serovar thuringiensis Species 0.000 description 2
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 2
- 241000123650 Botrytis cinerea Species 0.000 description 2
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 2
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 2
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 2
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 2
- 240000001980 Cucurbita pepo Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000257159 Musca domestica Species 0.000 description 2
- 241000588701 Pectobacterium carotovorum Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 235000021013 raspberries Nutrition 0.000 description 2
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- IIYFAKIEWZDVMP-UHFFFAOYSA-N tridecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCC IIYFAKIEWZDVMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000902876 Alticini Species 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000193369 Bacillus thuringiensis serovar tenebrionis Species 0.000 description 1
- 241000190150 Bipolaris sorokiniana Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 241000719178 Carangoides ruber Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 244000189548 Chrysanthemum x morifolium Species 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 1
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 235000009852 Cucurbita pepo Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- 241000219130 Cucurbita pepo subsp. pepo Species 0.000 description 1
- 235000003954 Cucurbita pepo var melopepo Nutrition 0.000 description 1
- 241000254171 Curculionidae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 240000006497 Dianthus caryophyllus Species 0.000 description 1
- 235000009355 Dianthus caryophyllus Nutrition 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 101000993347 Gallus gallus Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 241001091440 Grossulariaceae Species 0.000 description 1
- 241001299255 Henosepilachna Species 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 241000322338 Loeseliastrum Species 0.000 description 1
- 108010048581 Lysine decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000257226 Muscidae Species 0.000 description 1
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 1
- 241001491877 Operophtera brumata Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 241001558871 Phyllocoptes gracilis Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 241000233639 Pythium Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 description 1
- 235000001537 Ribes X gardonianum Nutrition 0.000 description 1
- 235000001535 Ribes X utile Nutrition 0.000 description 1
- 235000002357 Ribes grossularia Nutrition 0.000 description 1
- 235000016919 Ribes petraeum Nutrition 0.000 description 1
- 244000281247 Ribes rubrum Species 0.000 description 1
- 235000002355 Ribes spicatum Nutrition 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 1
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241001414989 Thysanoptera Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- RIOXQFHNBCKOKP-UHFFFAOYSA-N benomyl Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)NCCCC)C(NC(=O)OC)=NC2=C1 RIOXQFHNBCKOKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 125000001547 cellobiose group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- RKTYLMNFRDHKIL-UHFFFAOYSA-N copper;5,10,15,20-tetraphenylporphyrin-22,24-diide Chemical compound [Cu+2].C1=CC(C(=C2C=CC([N-]2)=C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(N=2)=C(C=2C=CC=CC=2)C2=CC=C3[N-]2)C=2C=CC=CC=2)=NC1=C3C1=CC=CC=C1 RKTYLMNFRDHKIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 230000000361 pesticidal effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000885 phytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000004476 plant protection product Substances 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011172 small scale experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 235000020354 squash Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству и касается нового штамма бактерий p. Bacillus в качестве средства для защиты растений от насекомых-вредителей и грибных болезней, а также стимулирования их роста.The invention relates to biotechnology and agriculture and relates to a new strain of bacteria p. Bacillus as a means to protect plants from insect pests and fungal diseases, as well as to stimulate their growth.
Интенсификация сельского хозяйства обусловила необходимость применения биологических средств защиты растений от вредных насекомых, уничтожающих до 30% урожая [1].The intensification of agriculture has necessitated the use of biological plant protection products against harmful insects, which destroy up to 30% of the crop [1].
К наиболее опасным насекомым относятся жесткокрылые насекомые, в частности, колорадский жук, который поражает картофель, баклажаны, томаты, перец. Картофель - излюбленное кормовое растение. Жуки хорошо адаптируются к разнообразным экологическим условиям, а также по отношению к корму. Оказавшись на томате (на неблагоприятном для них кормовом растении) жуки очень быстро привыкают к нему. Столь быстрое привыкание к новому корму объясняется возможностью адаптивных перестроек пищеварительной системы, связанной с активностью гидролитических ферментов. Для колорадского жука в Европейской части ареала характерна постоянно высокая плотность популяции. При высокой плодовитости самок (обычно около 500, но в ряде случаев - более 4000), наличие трех и даже двух генераций, потомство одной самки теоретически к концу сезона может достичь 30 млн особей [2].The most dangerous insects include beetles, in particular, the Colorado potato beetle, which infects potatoes, eggplants, tomatoes, and pepper. Potatoes are a favorite food plant. Beetles adapt well to a variety of environmental conditions, as well as in relation to food. Once on the tomato (on an unfavorable food plant for them) the beetles very quickly get used to it. Such a fast getting used to the new food is explained by the possibility of adaptive rearrangements of the digestive system associated with the activity of hydrolytic enzymes. For the Colorado potato beetle in the European part of the range is characterized by a constantly high population density. With fecundity of females (usually around 500, but in some cases more than 4000), the presence of three and even two generations, the offspring of one female theoretically could reach 30 million individuals by the end of the season [2].
Для борьбы с колорадский жуком используются в основном химические инсектициды: Актар, Фастап, Регент, Конфидор, Танрет и др. Однако по мере использования этих препаратов, у насекомых возникает к ним устойчивость, в результате чего их эффективность снижается. Это заставляет либо повышать дозу применения препарата, либо проводить ротацию инсектицида. Кроме того, химические инсектициды небезопасны экологически, не обладают избирательностью действия, могут накапливаться в почве, воде, опасны для человека и теплокровных животных.To combat the Colorado potato beetle, mainly chemical insecticides are used: Aktar, Fastpas, Regent, Konfidor, Tanret, etc. However, as these drugs are used, insects become resistant to them, as a result of which their effectiveness decreases. This causes either to increase the dose of the drug, or to carry out the rotation of the insecticide. In addition, chemical insecticides are environmentally unsafe, do not possess selectivity of action, can accumulate in soil, water, and are dangerous to humans and warm-blooded animals.
В качестве альтернативных средств используются биологические инсектициды: Боверин, Битоксибациллин, Колорадо, Новодор, однако они не охватывают целой группы массовых вредоносных видов жесткокрылых насекомых.Biological insecticides are used as alternatives: Bowerin, Bitoxibacillin, Colorado, Novodor, but they do not cover a whole group of mass harmful species of coleoptera.
К числу экономически значимых болезней растений относятся болезни, вызываемые микроскопическими грибами [3]. Для борьбы с возбудителями болезней растений грибного или бактериального происхождения также широко используются химические фунгициды: Альто, Раксил, Фундазол, Фоликур, эффективность пестицидного действия которых составляет не более 50-60%. Но эти препараты способны накапливаться в окружающей среде, вызывая фитоток-сический эффект. Кроме того, после их применения необходим период регламентированного ожидания до появления на обработанных участках людей и техники. В качестве альтернативных средств защиты растений от грибных болезней используются биологические препараты, основу которых составляют метаболиты бактериального происхождения, проявляющие антагонистическую активность по отношению к различным их возбудителям: Флавобактерин, Мизорин, Агат-25, Бактофит и др. [4].Among the economically significant plant diseases are diseases caused by microscopic fungi [3]. To combat the pathogens of plants of fungal or bacterial origin, chemical fungicides are also widely used: Alto, Raksil, Fundazol, Folikur, the effectiveness of which pesticidal action is no more than 50-60%. But these drugs are able to accumulate in the environment, causing a phytotoxic effect. In addition, after their application, a period of regulated waiting is necessary before people and equipment appear on the treated areas. As an alternative means of protecting plants against fungal diseases, biological preparations are used which are based on bacterial-derived metabolites exhibiting antagonistic activity against their various pathogens: Flavobacterin, Mizorin, Agat-25, Baktofit, etc. [4].
Известно изобретение «Инсектицидный препарат «Колорадо» против жесткокрылых насекомых и штамм бактерий Bacillus thuringiensis, используемый для получения инсектицидного препарата по патенту №2081583, заявка 93018092/13 с приоритетом от 7.04.1993 г., МПК A01N 63/00, C12N 1/20, опубликовано 20.06.1997 г.Known invention "Insecticidal drug" Colorado "against Coleoptera and the bacterial strain Bacillus thuringiensis, used to obtain insecticidal drug for patent No. 2081583, application 93018092/13 with priority from 04/07/1993, IPC A01N 63/00, C12N 1/20 published on 06/20/1997
В патенте описан штамм Bacillus thuringiensis var. tenebrionis, депонированный в ВКПМ под №В-6306, на основании которого создан жидкий биоинсектицид «Колорадо», содержащий в качестве действующего начала 5-эндотоксин, активный против колорадского жука, щавелевого листоеда, пьявицы красногрудой. Препарат содержит в своем составе глицерин, масло тридекан, углерод технический в качестве фотопротектора, в качестве ПАВ - Слан 60 и неонол, а также отдушку. Титр штамма ВКПМ №6306 при культивировании на дрожжеполисахаридной среде при 30°С через 48 ч составляет 3,4 млрд спор/мл, однако при этом иногда наблюдается спонтанный выход фага. Препарат рекомендуется применять против личинок 1-2 возраста. Недостатком «Колорадо» является сравнительно низкая эффективность, приводящая к высоким нормам расхода: 4-5 кг/га.The patent describes a strain of Bacillus thuringiensis var. tenebrionis, deposited in VKPM under No. V-6306, on the basis of which the Colorado liquid bioinsecticide was created, containing 5-endotoxin as an active principle, active against the Colorado potato beetle, oxal leaf beetle, and red-breast milker. The preparation contains glycerin, tridecane oil, technical carbon as a photoprotector, as a surfactant - Slan 60 and neonol, as well as a perfume. The titer of the strain VKPM No. 6306 when cultivated on a yeast polysaccharide medium at 30 ° C after 48 h is 3.4 billion spores / ml, however, spontaneous phage yield is sometimes observed. The drug is recommended to use against larvae 1-2 age. The disadvantage of the "Colorado" is a relatively low efficiency, leading to high consumption rates: 4-5 kg / ha.
Известно изобретение «Штамм Bacillus thuringiensis - продуцент эндотоксина против жесткокрылых насекомых и способ его культивирования» по патенту №2108384, заявка №95111008 с приоритетом от 27.06.1995 г., МПК C12N 1/20, A01N 63/00, опубликовано 10.04.1998 г.Known invention "Strain of Bacillus thuringiensis - producing endotoxin against Coleoptera and method of its cultivation" in patent No. 2108384, application No. 95111008 with priority from 06.26.1995, IPC C12N 1/20, A01N 63/00, published 04/10/1998 g .
В патенте описан штамм бактерий Bacillus thuringiensis 16931, который выделен из озимой совки и депонирован в ВКПМ под № В-6649. Показано, что этот штамм эффективен против жесткокрылых насекомых, в т.ч. против колорадского жука. При воздействии разведенной в 10 раз культуральной жидкости на личинок колорадского жука 1-2 возраста наблюдается их 100% гибель.The patent describes a bacterial strain Bacillus thuringiensis 16931, which is isolated from a winter moth and deposited in VKPM under No. B-6649. It is shown that this strain is effective against Coleoptera, including against the Colorado potato beetle. When exposed to a culture liquid diluted 10 times on the larvae of the Colorado potato beetle 1-2 years old, their mortality is 100%.
Известно изобретение «Штамм Bacillus thuringiensis var. thuringiensis №800/15 в качестве средства для получения энтомоцидного биопрепарата» по патенту №2514211, заявка 2012143320 с приоритетом от 10.10.2012 г., МПК C12N 1/20, A01N 63/00, опубликовано 27.04.2014 г.Known invention of the Strain Bacillus thuringiensis var. thuringiensis No. 800/15 as a means for producing an entomocidal biological product "according to patent No. 2514211, application 2012143320 with priority of 10.10.2012, IPC C12N 1/20, A01N 63/00, published on April 27, 2014
Штамм Bacillus thuringiensis var. thuringiensis №800/15 (BtH1 800/15) выделен из трупов личинок колорадского жука и депонирован в ВКСМ ГНУ ВНИСХМ под per. №611. В патенте описан пример получения препарата жидкой формы, созданного на основе штамма BtH1 800/15 (Битоксин), который обладает энтомоцидной активностью против - насекомых-фитофагов.Strain of Bacillus thuringiensis var. thuringiensis No. 800/15 (BtH 1 800/15) was isolated from the bodies of the larvae of the Colorado potato beetle and deposited with the VKSM GNU VNISHM under per. No. 611. The patent describes an example of obtaining a preparation of a liquid form, created on the basis of the strain BtH 1 800/15 (Bitoxin), which has an entomocidal activity against phytophagous insects.
Известно изобретение «Штамм бактерий Bacillus thuringiensis, проявляющий фунгицидную активность, инсектицидную активность и подавляющий вирулентные свойства фитопатогенных бактерий Erwinia carotovora» по патенту №2347809, заявка 2007132825 с приоритетом от 31.08.2007 г., МПК C12N 1/20, A01N 63/00, опубликовано 27.02.2009 г.The invention is known: “Bacillus thuringiensis bacterial strain, showing fungicidal activity, insecticidal activity and inhibiting virulent properties of Erwinia carotovora phytopathogenic bacteria” according to patent No. 2347809, application 2007132825 with priority from 08.31.2007, IPC C12N 1/20, A01N 63/00, published 27.02.2009
Штамм бактерий Bacillus thuringiensis получен путем аналитической селекции из материала, выделенного из природных образцов и депонирован под номером ВКПМ В-9790. Штамм обладает инсектицидной и фунгицидной активностью против личинок колорадского жука, большого мучного хрущака, щавелевого и калинового листоедов, а также способностью подавлять вирулентные свойства фитопатогенных бактерий Erwinia carotovora spp.carotovora.The bacterial strain Bacillus thuringiensis obtained by analytical selection of material isolated from natural samples and deposited under the number VKPM B-9790. The strain has insecticidal and fungicidal activity against the larvae of the Colorado potato beetle, a large mealworm, oxalic and Kalinov leaf beetles, as well as the ability to suppress the virulent properties of the phytopathogenic bacteria Erwinia carotovora spp.carotovora.
Известно изобретение «Штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis №25 в качестве средства комплексного воздействия на вредных жесткокрылых насекомых и фитопатогенные грибы» по патенту №2514023, заявка 2012156501, с приоритетом от 25.11.2012 г., МПК A01N 63/00, C12N 1/20, опубликовано 27.04.2014 г. (прототип).Known invention of the Strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis No. 25 as a means of complex impact on harmful beetles and phytopathogenic fungi ”according to patent No. 2514023, application 2012156501, with priority from November 25, 2012, IPC A01N 63/00, C12N 1/20, published on April 27, 2014. (prototype).
Штамм Bacillus thuringiensis Н10 №25 (BtH10 №25) выделен из трупов колорадского жука и депонирован в ГНУ ВНИИСХМ под per. номером RCAM 01490 В патенте приведен пример получения препарата на основе этого штамма (Бациколин), обладающего энтомоцидными свойствами против вредных жесткокрылых насекомых и антифунгальной активностью против фитопатогенных грибов.The strain Bacillus thuringiensis H 10 No. 25 (BtH 10 No. 25) was isolated from the bodies of the Colorado potato beetle and deposited in the GNU VNIISM under per. No. RCAM 01490 The patent gives an example of obtaining a preparation based on this strain (Batsikolin), which has entomocytic properties against harmful Coleoptera and antifungal activity against phytopathogenic fungi.
Задачей изобретения является выявление нового штамма на основе экологически безопасной бактерии из группы Bacillus thuringiensis, пригодного для использования в сельском хозяйстве и обладающего полифункциональными свойствами: энтомоцидной активностью в отношении разных видов массовых вредоносных жесткокрылых насекомых, антифунгальной активностью против фитопатогенных грибов и ростостимулирующим действием на растения.The objective of the invention is to identify a new strain based on environmentally safe bacteria from the Bacillus thuringiensis group, suitable for use in agriculture and possessing multifunctional properties: entomocidal activity against various types of massive harmful coleoptera, antifungal activity against phytopathogenic fungi and growth-promoting effect on plants.
Указанная задача решается за счет того, что в качестве полифункционального средства для сельского хозяйства, обладающего энтомоцидной, антифунгальной активностью и ростостимулирующими свойствами, используют новый штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56.This problem is solved due to the fact that as a polyfunctional means for agriculture, which has entomocidal, antifungal activity and growth-promoting properties, use a new strain of Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56.
Штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 был выделен из трупов колорадского жука в Ленинградской области с последующей многоступенчатой селекцией в результате анализа физиологических и хозяйственно - ценных свойств штамма в ряде генераций по этапам:Strain of Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 was isolated from the corpses of the Colorado potato beetle in the Leningrad region, followed by a multi-stage selection as a result of analyzing the physiological and economically valuable properties of the strain in a number of generations in stages:
- рассев культуры на твердые питательные среды (МПА, РА);- sowing culture on solid nutrient media (MPA, RA);
- изучение морфологии колоний;- study of the morphology of the colonies;
- микроскопический анализ культуры с учетом образования кристаллов эндотоксина и спор (оптимальное соотношение 1:1);- microscopic analysis of the culture, taking into account the formation of crystals of endotoxin and spores (optimal ratio of 1: 1);
- оценка на экзотоксиногенность для BtH10 (тест - объект Musca domestica);- assessment of exotoxinogenicity for BtH 10 (test - object Musca domestica);
- оценка на энтомоцидную активность (тест - объект личинки 2-го возраста колорадского жука).- assessment of entomocidal activity (test - the object of the 2nd instar larva of the Colorado potato beetle).
Штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) депонирован 01.12.2017 г. В Ведомственной коллекции полезных микроорганизмов сельскохозяйственного назначения (RCAM) ФАНО ФГБНУ ВНИИСХМ под регистрационным номером RCAM 04725, что подтверждается справкой о депонировании от 04.12.2017 г. (справка прилагается).Strain of Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56) was deposited on 12/01/2017 in the Departmental Collection of Useful Microorganisms for Agricultural Purposes (RCAM) FANO FGBNU VNIISM under registration number RCAM 04725, which is confirmed by the deposit certificate of 04/12/2017 (reference attached).
Морфологические признаки и физиолого-биохимические свойства изучали стандартно. Предварительную идентификацию бактерий проводили по Определителю Берги. Штамм BtH10 56 характеризуется следующими свойствами.Morphological features and physiological and biochemical properties were studied standardly. Preliminary identification of bacteria was carried out according to the determinant Bergi. Strain BtH 10 56 characterized by the following properties.
Культурально-морфологические свойства.Cultural and morphological properties.
Вегетативные клетки грамположительные, палочковидной формы, размером (1,2-1,5)×(2,5-4,5) мкм, единичные с перитрихиальным типом жгутикования. Образуют наряду со спорой параспоральный кристалл тетрагональной, бипирамидальной или овоидной формы размером (0,2-0,6)×(0,3-0,8) мкм по длине края. Споры овальные, субтерминальные размером (0,6-0,8)×(1,4-1,6) мкм. В клетке образуется одна спора и один кристалл эндотоксина. В рыбном бульоне (РБ) рост хороший, образует пленку. При выращивании штамма на рыбном агаре (РА) через 48 ч при 28-30°С образует колонии плоские, шероховатые серовато-белого цвета неправильной округлой формы, непрозрачные. Диаметр колоний 8-10 мм. На ломтиках картофеля рост умеренный серовато-зеленого цвета. При культивировании в жидких питательных средах штамм растет при температуре 20-36°С (оптимум 28-32°С) и при показателе кислотности среды рН 6,2-9,0 (оптимум 6,8-7,2) при скорости вращения на качалке 220 об/мин. Образование спор и кристаллов эндотоксина заканчивается через 60-72 часа роста.Vegetative cells are gram-positive, rod-shaped, (1.2–1.5) × (2.5–4.5) μm in size, single with a peritrichous flagellation. Along with the spore, a parasporal crystal is formed of a tetragonal, bipyramidal or ovoid shape with a size of (0.2-0.6) × (0.3-0.8) μm along the length of the edge. Spores are oval, subterminal size (0.6-0.8) × (1.4-1.6) microns. One spore and one endotoxin crystal are formed in the cell. In fish broth (RB) growth is good, forms a film. When the strain is grown on fish agar (RA), after 48 hours at 28–30 ° C, flat, rough, grayish-white, irregularly rounded, non-transparent colonies form colonies. The diameter of the colonies of 8-10 mm. On slices of potato growth is moderate grayish-green. When cultivated in liquid nutrient media, the strain grows at a temperature of 20-36 ° C (optimum 28-32 ° C) and with the pH of the medium pH 6.2-9.0 (optimum 6.8-7.2) at a rotation speed of rocking chair 220 rpm The formation of spores and endotoxin crystals ends after 60-72 hours of growth.
Биохимические свойства.Biochemical properties.
Факультативный анаэроб.Optional anaerobic.
Хорошо развивается на средах, содержащих органический азот: пептон, гидролизат казеина, рыбный бульон, кормовые дрожжи.It develops well on media containing organic nitrogen: peptone, casein hydrolyzate, fish broth, fodder yeast.
Из глюкозы, мальтозы, целлобиозы образует кислоту, но не газ. Не усваивает галактозу, арабинозу, маннозу, лактозу, рамнозу, ксилозу, раффинозу, маннит, сорбит, дульцит, инозит, инулин.From glucose, maltose, cellobiose forms acid, but not gas. Does not assimilate galactose, arabinose, mannose, lactose, rhamnose, xylose, raffinose, mannitol, sorbitol, dulcite, inositol, inulin.
Гидролизует эскулин и крахмал, салицин не расщепляет, цитрат натрия не использует в качестве единственного источника углерода. Образует амилазу, протеиназу, каталазу и нитратредуктазу. Не образует лецитиназу, уреазу, лизиндекарбоксилазу, фенилаланиндезаминазу, индол и сероводород.Hydrolyzes esculin and starch, salicin does not cleave, does not use sodium citrate as the sole carbon source. Forms amylase, proteinase, catalase and nitrate reductase. Does not form lecithinase, urease, lysine decarboxylase, phenylalanine disaminase, indole and hydrogen sulfide.
Пигмента не образует.Pigment does not form.
Штамм продуцирует водорастворимый термостабильный экзотоксин.The strain produces a water-soluble thermostable exotoxin.
Антигенные свойства.Antigenic properties.
Дает положительную реакцию жгутикового антигена с типовой сывороткой Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis (идентифицирован по этой реакции и по классификации Bacillus thuringiensis (1990) H.de Barjack. По серологическим свойствам относится к 10 серотипу Bacillus thuringiensis.Gives a positive reaction to flagellate antigen with typical Bacillus thuringiensis var serum. darmstadiensis (identified by this reaction and according to the classification of Bacillus thuringiensis (1990) H.de Barjack. By serological properties refers to 10 serotypes of Bacillus thuringiensis.
Штамм устойчив к основным производственным фагам: М, К, Э-5, Д2-Д5.The strain is resistant to the main production phages: M, K, E-5, D 2 -D 5 .
По показателям вирулентности, токсичности и токсигенности штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) не патогенен для теплокровных животных, относится к 4 классу опасности (малоопасен) и удовлетворяет требованиям, предъявляемым к промышленным микроорганизмам.In terms of virulence, toxicity and toxigenicity, the strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56) is not pathogenic for warm-blooded animals, belongs to the 4th hazard class (low hazard) and meets the requirements for industrial microorganisms.
Штамм хранится на агаровых питательных средах: на мясопептонном (МПА), рыбном агаре (РА) в пробирках под вазелиновым маслом, в кристаллах натрия хлорида, методом криоконсервации при температуре минус 80°С.The strain is stored on agar nutrient media: meat-peptone (MPA), fish agar (RA) in test tubes under liquid paraffin, in sodium chloride crystals, by cryopreservation at a temperature of minus 80 ° C.
В процессе исследований было установлено, что для культивирования штамма BtH10 56 могут быть использованы различные источники азота: соевая, ячменная, гороховая, овсяная мука. При этом обеспечивается продуктивность в пределах (2,7-4,4)⋅109 спор/мл культуральной жидкости, оптимальные показатели получены при использовании гороховой и соевой муки (4,1-4,35)⋅109 спор/мл.In the process of research it was found that for the cultivation of the BtH 10 56 strain various nitrogen sources can be used: soybean, barley, pea, oatmeal. This ensures productivity in the range of (2.7-4.4) ⋅10 9 spores / ml of culture liquid, the optimal indicators were obtained using pea and soy flour (4.1-4.35) 10 9 spores / ml.
Выявлено, что штамм бактерий Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) обладает выраженными энтомоцидными свойствами против жесткокрылых насекомых-фитофагов, антифунгальными свойствами против фитопа-тогенных грибов и оказывает ростостимулирующее действие на растения.The bacterial strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56) has pronounced entomocidal properties against Coleoptera phytophages, antifungal properties against phytopathogenic fungi and has a growth-promoting effect on plants.
При этом штамм BtH10 56 обладает энтомоцидным действием в отношении широкого круга вредителей-фитофагов (колорадского жука, картофельной коровки, крестоцветных блошек, листоедов, долгоносиков), обитающих на различных сельскохозяйственных культурах (овощные, зерновые и ягодные). Он проявляет эффективность против фитопатогенов на ряде культур в различных зонах и при различных технологиях выращивания (в том числе, против серой гнили на землянике, фузариозного увядания томатов, льна, ризоктониоза на картофеле. Штамм стимулирует всхожесть семян (например, капусты, томата, огурцов, кабачков, свеклы).At the same time, the BtH 10 56 strain has an entomocidal action against a wide range of phytophagous pests (Colorado potato beetle, potato cow, cruciferous flea beetles, leaf beetles, weevils) inhabiting various crops (vegetables, grains and berries). It shows efficacy against phytopathogens on a number of crops in various zones and with different growing technologies (including against gray rot on strawberries, fusarium wilting of tomatoes, flax, and rhizoctoniosis on potatoes. The strain stimulates the germination of seeds (for example, cabbage, tomato, cucumbers, squash, beet).
Ниже приведен пример получения биопрепарата с полифункциональными свойствами на основе штамма BtH10 56, названого авторами Энтобакт.Below is an example of obtaining a biological product with polyfunctional properties based on the strain BtH 10 56, named by the authors Entobact.
Сначала в колбах (1 л) готовят дрожжеполисахаридную питательную среду следующего состава, мас. %: Мука соевая - 2,5; крахмал кукурузный - 2,5; дрожжи кормовые - 0,5; К2HPO4 - 0,3; MgSO4×7H2O - 0,02; СаС12×2H2O - 0,1; остальное (до 100) - вода. РН среды до стерилизации 7,4-7,8.First, in flasks (1 l) prepare yeast polysaccharide nutrient medium of the following composition, wt. %: Soy flour - 2.5; corn starch - 2.5; feed yeast - 0.5; K 2 HPO 4 - 0.3; MgSO 4 × 7H 2 O — 0.02; CaCl 2 × 2H 2 O — 0.1; the rest (up to 100) is water. The pH of the medium before sterilization is 7.4-7.8.
Подготовленную среду разливают в колбы Эрленмейера по 40-50 мл и стерилизуют в автоклаве при температуре +(120-125)°С в течение 40 минут. РН среды после стерилизации 6,8-7,2. Стерильную питательную среду охлаждают до 30-35°С и засевают культурой штамма из пробирки. Для чего в пробирку с культурой на скошенном рыбном агаре вносят 5-8 мл стерильной воды или физиологического раствора. Этой же пипеткой осторожно растирают культуру, взбалтывают до гомогенной суспензии и вносят в колбы по 0,2-0,5 мл. Культуру в колбах выращивают на качалке при скорости вращения 220-250 об/мин и температуре 28-30°С в течение 56-72 часов до полного высыпания спор и образования кристаллов эндотоксинов (проверку осуществляют микроскопированием). Выращенную в колбах культуральную жидкость штамма BtH10 56 используют для засева среды в ферментерах.The prepared medium is poured into Erlenmeyer flasks of 40-50 ml and sterilized in an autoclave at a temperature of + (120-125) ° C for 40 minutes. The pH of the medium after sterilization is 6.8-7.2. Sterile nutrient medium is cooled to 30-35 ° C and seeded with strain culture from a test tube. For this, 5-8 ml of sterile water or saline are added to a culture test tube on oblique fish agar. With the same pipette, gently triturate the culture, shake until a homogeneous suspension and make 0.2-0.5 ml in flasks. The culture in flasks is grown on a rocking chair at a rotation speed of 220-250 rpm and a temperature of 28-30 ° C for 56-72 hours until the spore is completely rained and the formation of endotoxin crystals (as checked by microscopy). Grown in flasks, the culture fluid of the strain BtH 10 56 is used for seeding the environment in fermenters.
Для выращивания культуры в ферментере может быть использована любая питательная среда, оптимально - того же состава, который был использован для получения посевной культуральной жидкости в колбах Эрленмейера (состав указан выше). В ферментере любой емкости, заполненном на 25% водой, сначала растворяют соли, затем заваривают расчетное количество кукурузного крахмала при 80-85°С, охлаждают до 40°С, добавляют расчетное количество соевой муки, затем добавляют воду до 50% от объема ферментера и перемешивают с водой в течение 20 минут. Доводят рН среды до 8,0 с помощью 40% едкого натра (каустической соды) и стерилизуют при 1 атм в течение 1 часа, после чего охлаждают до 32-35°С.Перед внесением посевного материала из ферментера берут пробу среды для контроля стерильности. При просмотре под микроскопом в поле зрения не должно быть наличия микроорганизмов.For growing the culture in the fermenter, any nutrient medium can be used, optimally - the same composition that was used to obtain the seed culture liquid in Erlenmeyer flasks (the composition is indicated above). In the fermenter of any capacity filled with 25% water, salts are first dissolved, then the calculated amount of corn starch is brewed at 80-85 ° C, cooled to 40 ° C, the calculated amount of soy flour is added, then water is added to 50% of the fermenter’s volume and stirred with water for 20 minutes. The pH of the medium is adjusted to 8.0 using 40% caustic soda (caustic soda) and sterilized at 1 atm for 1 hour, after which it is cooled to 32-35 ° C. Before introducing the inoculum from the fermenter, a sample of the sterility is taken. When viewed under a microscope in the field of view should not be the presence of microorganisms.
После этого в питательную среду в ферментере вносят 1-2% культуральной жидкости из колб Эрленмейера.After that, 1-2% of culture liquid from Erlenmeyer flasks is added to the nutrient medium in the fermenter.
Процесс выращивания культуры в ферментере ведут при температуре 28-30°С, непрерывном перемешивании среды при помощи мешалки, при давлении в ферментере 0,2-0,4 атм и соответствующей аэрации:The process of growing the culture in the fermenter is carried out at a temperature of 28-30 ° C, continuous mixing of the medium using a stirrer, at a pressure in the fermenter of 0.2-0.4 atm and appropriate aeration:
до 3 час - только перемешивание;up to 3 hours - only mixing;
с 3-12 час - 0,5V воздуха/V среды/мин;from 3-12 hours - 0.5V air / V medium / min;
с 12-42 час - 1,0V воздуха/V среды/мин;from 12-42 hours - 1.0V air / V medium / min;
с 42 час до окончания ферментации - 0,5V воздуха/V среды/мин.from 42 hours before the end of fermentation - 0.5V air / V medium / min.
То есть процесс ферментации проводят в условиях высокой аэрации и заканчивают при достижении соотношения 1:1 количества свободных спор и кристаллов эндотоксина при общем их количестве 70-80% от общего количества включений. Титр спор определяют общепринятым методом серийных разведений. При этом титр спор штамма BtH10 56 в полученном препарате составляет не менее (2,8-4,2)⋅109 спор/мл при отсутствии посторонней микрофлоры и вирулентного фага.That is, the fermentation process is carried out under conditions of high aeration and ends when the ratio of 1: 1 is reached, the number of free spores and endotoxin crystals with a total amount of 70-80% of the total number of inclusions. The titer of the dispute is determined by the conventional method of serial dilution. At the same time, the spore titer of the BtH 10 56 strain in the resulting preparation is not less than (2.8-4.2) ⋅10 9 spores / ml in the absence of extraneous microflora and virulent phage.
Таким образом был получен биопрепарат Энтобакт на основе штамма бактерий BtH10 56, представляющий собой жидкость, легко разбавляемую водой до необходимой рабочей концентрации, удобной для применения серийной опрыскивающей аппаратуры. Технология его производства не требует больших энергозатрат, необходимых для сушки при получении препаратов сухой формы.Thus, the biological product Entobact was obtained on the basis of the strain of bacteria BtH 10 56, which is a liquid that is easily diluted with water to the necessary working concentration, convenient for applying serial spraying equipment. The technology of its production does not require large energy consumption required for drying upon receipt of preparations of the dry form.
Энтомоцидные свойства штамма Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) против жесткокрылых насекомых-фитофагов подтверждают следующие опыты.Entomocidal properties of the strain Bacillus thuringiensis var. The following experiments confirm darmstadiensis 56 (BtH 10 56) against Coleoptera phytophagous insects.
Были проведены лабораторные испытания энтомоцидной эффективности препарата на основе штамма BtH10 56 (Энтобакт) по отношению к массовым насекомым-фитофагам сельскохозяйственных культур: к личинкам колорадского жука и картофельной коровки 2-го возраста (L2). При этом корм (листья картофеля) обрабатывали водной суспензией штамма BtH10 56 (Энтобакт) в концентрациях 5,0, 1,0 и 0,2%. В каждый вариант опыта сажали по 25 личинок колорадского жука или картофельной коровки 2-го возраста (в четырехкратной повторности). Для сравнения в опытах при тех же условиях при тех же концентрациях использовали препарат на основе штамма-прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и препарат штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин). Учет гибели личинок колорадского жука и картофельной коровки проводили на 7 день.Laboratory tests were carried out on the efficiency of the preparation based on the strain BtH 10 56 (Entobact) against mass insect-phytophagous agricultural crops: the larvae of the Colorado potato beetle and the 2nd-age potato cow (L 2 ). The feed (potato leaves) was treated with an aqueous suspension of the BtH 10 56 strain (Entobact) in concentrations of 5.0, 1.0, and 0.2%. In each variant of the experiment, 25 larvae of the Colorado potato beetle or potato cow of the 2nd age were planted (fourfold). For comparison, in experiments with the same conditions at the same concentrations, a preparation based on the prototype BtH 10 strain No. 25 (Batsikolin) and the preparation of the strain analog BtH 1 No. 800/15 (Bitoxin) were used. Accounting for the death of the larvae of the Colorado potato beetle and potato cows was carried out on day 7.
Содержание экзотоксина в препарате определяли на личинках комнатной мухи по следующей методике.The content of exotoxin in the preparation was determined on the larvae of the room fly by the following method.
Препарат на основе штамма BtH10 56 (Энтобакт) в количестве 20 мл центрифугировали 15 мин при 8000 об/мин. Полученный фугат автоклавировали при давлении 0,1 МПа и температуре 105°С в течение 20 мин. Затем готовили разведения препарата: 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32, что соответствует концентрациям 50; 25; 12,5; 6,25; 3,125 мкл/г корма. Каждую концентрацию испытывали в четырех параллельных определениях.The preparation based on the BtH 10 56 strain (Entobact) in an amount of 20 ml was centrifuged for 15 min at 8000 rpm. The resulting centrate was autoclaved at a pressure of 0.1 MPa and a temperature of 105 ° C for 20 minutes. Then prepared the dilution of the drug: 1: 2; 1: 4; 1: 8; 1:16; 1:32, which corresponds to a concentration of 50; 25; 12.5; 6.25; 3.125 μl / g feed. Each concentration was tested in four parallel determinations.
Для испытаний в стеклянную банку объемом 200 мл вносили: 2 мл препарата на основе штамма BtH10 56 (Энтобакт) соответствующего разведения; 11 мл 2,5% - водной суспензии сухого молока; 7 г стерилизованных пшеничных отрубей. В контрольном опыте в банки вместо разведенного препарата вносили 2 мл стерильной воды. Корм с соответствующими разведениями препарата в каждой банке тщательно перемешивали и помещали туда по 25 личинок комнатной мухи, отверстия банок завязывали бязью и содержали в термостате при температуре (28±1)°С и относительной влажности 70-85%). На 5-е сутки выбирали пупарии и оставляли в тех же условиях до вылета мух.For testing, a 200 ml glass jar was used to add: 2 ml of the preparation based on strain BtH 10 56 (Entobact) of the appropriate dilution; 11 ml of 2.5% - aqueous suspension of powdered milk; 7 g of sterilized wheat bran. In the control experiment, 2 ml of sterile water was added to the banks instead of the diluted drug. Food with the appropriate dilutions of the preparation in each jar was thoroughly mixed and 25 larvae of the housefly were placed there, the openings of the cans were tied with a calico and kept in a thermostat at a temperature of (28 ± 1) ° C and a relative humidity of 70-85%). On the 5th day, puparia were chosen and left under the same conditions until the flies were flown.
Для сравнения в опытах при тех же условиях и при тех же концентрациях использовали препарат на основе штамма-прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и препарат на основе штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин).For comparison, in experiments with the same conditions and at the same concentrations, a preparation based on the BtH 10 prototype strain No. 25 (Batsikolin) and a preparation based on the analogue strain BtH 1 No. 800/15 (Bitoxin) were used.
Активность экзотоксина оценивали по числу погибших на 8 день мух с поправкой на гибель в контроле определяли по формуле:The activity of exotoxin was estimated by the number of flies killed on day 8, corrected for death in the control was determined by the formula:
Х=(К-В)/К×100, гдеX = (KV) / K × 100, where
К - количество мух, вылетевших в контроле; В - количество мух, вылетевших в опыте.K - the number of flies taken off in the control; In - the number of flies, took off in the experience.
По результатам указанных выше лабораторных опытов для каждого случая был определен показатель ЛК50 - доза препарата (в %, в мкл/г корма, в кг, в мл и пр.), которая вызывает 50% гибели насекомых.According to the results of the above laboratory experiments for each case, the indicator LC 50 was determined - the dose of the drug (in%, in μl / g of feed, in kg, in ml, etc.), which causes 50% of the death of insects.
Значение ЛК50 рассчитывали по формуле Кербера (см., например, [5]):The value of LC 50 was calculated using the Kerber formula (see, for example, [5]):
Lg ЛК50=lg Cм-δ(ΣL1-0,5),Lg LC 50 = lg C m -δ (ΣL 1 -0,5),
где: Cм - максимальная из испытанных концентраций;where: C m - the maximum of the tested concentrations;
σ - логарифм отношения каждой предыдущей концентрации к последующей (логарифм кратности разведений);σ is the logarithm of the ratio of each previous concentration to the next (logarithm of the multiplicity of dilutions);
ΣL1 - сумма отношений числа насекомых, которые погибли от данной концентрации, к общему числу насекомых, которые подверглись действию этой концентрации.ΣL 1 is the sum of the ratios of the number of insects that died from a given concentration to the total number of insects that were exposed to this concentration.
Значения ЛК50 для препаратов на основе: штамма BtH10 56 (Энтобакт), а также штамма-прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин), характеризующие их биологическую (энтомоцидную) активность, представлены в таблице 1.The values of LC 50 for preparations based on: BtH 10 56 (Entobact) strain, as well as prototype BtH 10 strain No. 25 (Batsikolin) and BtH 1 analog strain No. 800/15 (Bitoxin), characterizing their biological (entomocytic) activity, presented in table 1.
Из результатов, представленных в таблице 1, следует, что препарат на основе штамма BtH10 56 (Энтобакт) по энтомоцидной активности (ЛК50) в отношении личинок картофельной коровки в 1,5 и 1,6 раза активнее соответственно препаратов на основе штамма -прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин), а по содержанию экзотоксина он превосходит их в 1,3 раза. При этом значения энтомоцидной активности против личинок колорадского жука всех испытанных препаратов на основе штаммов Bt сопоставимы.From the results presented in table 1, it follows that the preparation based on the strain BtH 10 56 (Entobact) on entomocidal activity (LC 50 ) with respect to the larvae of the potato cow is 1.5 and 1.6 times more active, respectively, of the preparations based on the strain of the prototype BtH 10 No. 25 (Batsikolin) and strain analog BtH 1 No. 800/15 (Bitoxin), and it exceeds them by 1.3 times in the content of exotoxin. At the same time, the values of entomocidal activity against the larvae of the Colorado potato beetle of all the tested preparations based on Bt strains are comparable.
Были проведены также полевые мелкоделяночные опыты на картофеле против картофельной коровки Henosepilachna vigintictomaculate Motch в Приморском крае, Уссурийского района в зоне подзолистых почв. Посевы картофеля, заселенные картофельной коровкой с соотношением личинок по возрастам: L1=35,7%; L2=62,4%; L5=l,9%, обрабатывали жидким препаратом Энтобакт на основе штамма BtH10 56, полученным описанным выше в Примере способом. Для сравнения в опытах при тех же условиях использовали препараты Бациколин на основе штамма-прототипа BtH10 №25 и Битоксин на основе штамма-аналога BtH1 №800/15. Среднее значение личинок картофельной коровки на 25-ти кустах учитывали до обработки, а также на 5-й и 10-й дни после обработки. Обработку выполняли ручным опрыскивателем, доза препарата 15 л/га, расход рабочей жидкости 400 л/га. Результаты полевых опытов приведены в таблице 2.Field small-scale experiments were also conducted on potatoes against the potato ladybug Henosepilachna vigintictomaculate Motch in Primorsky Krai, Ussuri region, in the podzolic soils zone. Potato crops inhabited by a potato cow with a ratio of larvae by age: L 1 = 35.7%; L 2 = 62.4%; L 5 = l, 9%, was treated with a liquid preparation Entobact on the basis of strain BtH 10 56, obtained as described above in the Example method. For comparison, the Batsikolin preparations based on the prototype BtH 10 strain No. 25 and Bitoxin based on the BtH 1 analog strain No. 800/15 were used in the experiments under the same conditions. The average value of potato bug larvae on 25 bushes was taken into account before processing, as well as on the 5th and 10th days after processing. The treatment was performed with a hand sprayer, the dose of the drug was 15 l / ha, the flow rate of the working fluid was 400 l / ha. The results of field experiments are shown in table 2.
Данные результатов, представленные в таблице 2, свидетельствуют о высокой эффективности препарата на основе штамма BtH10 56 (Энтобакт) против картофельной коровки в полевых опытах. Его эффективность на 15 и 16% выше эффективности препаратов на основе штамма-прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и препарата на основе штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин) соответственно. При этом прибавка урожая при обработке препаратом Энтобакт на основе штамма BtH10 56 была выше на 21,7 и 26,7%, чем при обработке препаратами Бациколин и Битоксин соответственно.The results data presented in Table 2 indicate the high efficacy of the preparation based on the strain BtH 10 56 (Entobact) against potato cow in field experiments. Its effectiveness is 15 and 16% higher than the effectiveness of preparations based on the BtH 10 prototype strain No. 25 (Batsikolin) and the preparation based on the BtH 1 analog strain No. 800/15 (Bitoxin), respectively. At the same time, the yield increase during the treatment with Entobact based on the BtH 10 56 strain was higher by 21.7 and 26.7% than with the treatment with Batsikolin and Bitoxin, respectively.
Были проведены полевые опыты по исследованию энтомоцидной эффективности препарата Энтобакт, полученного на основе штамма BtH10 56 указанным выше в Примере способом, на различных культурах против различных видов насекомых - фитофагов.Field experiments were conducted to investigate the entomocidal efficacy of Entobact preparation, obtained on the basis of the BtH 10 56 strain in the above-mentioned Example, in various cultures against various species of insects, phytophages.
Обработку расположенных в разных регионах страны участков (Ленинградская обл., Ставропольский и Приморский края), занятых культурами, проводили опрыскиванием, используя ручной опрыскиватель. Доза расхода препарата была в пределах 12-20 л/га. Расход рабочей жидкости составлял 300-400 л/га. При этом, в зависимости от вида сельскохозяйственной культуры и основного вида насекомых - фитофагов на ней, расход препарата составил: на капусте против белянок, на малине против малинного клеща, на зерновых против злаковой пьявицы и на цветочных культурах в теплицах (розе, гвоздике, хризантеме) против трипсов: 12, 15, 20 и 20 л/га соответственно. Заселенность культур вредителями учитывали до обработки, а также на 10-е сутки после обработки, вычисляя % их гибели и определяя таким образом биологическую активность препарата Энтобакт, полученного на основе штамма BtH10 56. Результаты опытов представлены в таблице 3.The cultivation of plots located in different regions of the country (Leningrad region, Stavropol and Primorsky Krai) was carried out by spraying using a manual sprayer. The dose of the drug was in the range of 12-20 l / ha. The flow rate of the working fluid was 300-400 l / ha. At the same time, depending on the type of crop and the main type of insect phytophagans on it, the consumption of the drug was: on cabbage against white flowers, on raspberries against raspberry mites, on cereals against cereal grass and on flower crops in greenhouses (rose, carnation, chrysanthemum ) against thrips: 12, 15, 20 and 20 l / ha, respectively. Pest culture of the crops was taken into account before treatment, as well as on the 10th day after treatment, calculating the% of their deaths and thus determining the biological activity of the drug Entobact obtained on the basis of the BtH 10 56 strain. The results of the experiments are presented in Table 3.
Данные таблицы 3 свидетельствуют о высокой энтомоцидной активности препарата на основе штамма BtH10 56 против различных видов насекомых - фитофагов на различных сельскохозяйственных и цветочных культурах.The data of table 3 indicate a high entomocidal activity of the preparation based on the BtH 10 56 strain against various insect phytophagous species on various agricultural and flower cultures.
Опытным путем были выявлены антифунгальные свойства штамма бактерий Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) по отношению к различным фитопатогенным грибам, возбуждающим болезни растений, в частности: Bipolaris sorokiniana (гельминтоспориоз или темнобурая пятнистость) - на зерновых (пшенице, ячмене, ржи); Rhizoctonia solani Kuhn (ризоктониоз) - на картофеле; Botrytis cinerea Pers (серая гниль) - на ягодниках (землянике, малине, смородине, крыжовнике); Pythium spp. (питиозная корневая гниль) - на зерновых, горохе, свекле.The antifungal properties of the bacterial strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56) in relation to various phytopathogenic fungi that excite plant diseases, in particular: Bipolaris sorokiniana (gelmintosporiosis or dark brown spot) - on cereals (wheat, barley, rye); Rhizoctonia solani Kuhn (Rhizoctoniosis) - on potatoes; Botrytis cinerea Pers (gray rot) - on the berries (strawberries, raspberries, currants, gooseberries); Pythium spp. (pith root rot) - on cereals, peas, beets.
Антифунгальную активность штамма BtH10 56 против различных фитопатогенных грибов определяли методом агаровых блоков в чашках Петри [6] Препарат на основе штамма BtH10 56, полученный указанным выше в Примере способом, вносили в расплавленную и охлажденную до 40°С среду Чапека. На поверхность застывшего агара помещали блоки, вырезанные из 10-суточной культуры испытуемых грибов. Контролем служила среда без добавления препарата. Для сравнения в опытах при тех же условиях и при тех же концентрациях использовали препараты на основе штамма-прототипа BtH10 №25 (Бациколин) и штамма-аналога BtH1 №800/15 (Битоксин).Antifungal activity of the BtH 10 56 strain against various pathogenic fungi was determined by the method of agar blocks in Petri dishes [6]. A preparation based on the BtH 10 56 strain, obtained as described above in the Example, was added to the Chapek medium melted and cooled to 40 ° C. Blocks cut from a 10-day culture of the tested fungi were placed on the surface of frozen agar. The control was the medium without the addition of the drug. For comparison, in the experiments under the same conditions and at the same concentrations, preparations based on the prototype BtH 10 strain No. 25 (Batsikolin) and the analog strain BtH 1 No. 800/15 (Bitoxin) were used.
Диаметр колоний гриба измеряли через 3 суток. Ингибирующую активность рассчитывали по формуле:The diameter of the colonies of the fungus was measured after 3 days. Inhibitory activity was calculated by the formula:
Х=(Дк-До)/Дк×100, гдеX = (D to -D about ) / D to × 100, where
X - степень ингибирования роста колоний гриба, см;X is the degree of inhibition of the growth of colonies of the fungus, cm;
Дк и До - диаметр колоний гриба в контроле и опыте соответственно.D to and D about - the diameter of the colonies of the fungus in the control and experience, respectively.
Результаты опытов представлены в таблице 4.The results of the experiments are presented in table 4.
Из результатов, представленных в таблице 4 следует, что антифунгальный эффект препарата Энтобакт на основе штамма BtH10 56 на 14-18% выше, чем препарата Бациколин на основе штамма-прототипа BtH10 25, и в несколько раз превосходит эффект от препарата Битоксин на основе штамма BtH1 №800/15 по всем представленным видам фитопатогенов. При этом 100% эффект инги-бирования роста гриба возникает при действии препаратов Энтобакт и Бациколин на гриб Botrytis cinerea Pers - возбудителя серой гнили на ягодниках.From the results presented in table 4 it follows that the antifungal effect of the drug Entobact on the basis of the BtH 10 56 strain is 14–18% higher than that of the Batsikolin preparation on the basis of the prototype BtH 10 25 strain, and several times higher than the effect of the Bitoxin preparation on the basis of strain BtH 1 No. 800/15 for all represented species of phytopathogens. At the same time, a 100% effect of inhibiting the growth of the fungus arises under the action of the preparations Entobact and Batsikolin on the fungus Botrytis cinerea Pers - the causative agent of gray rot on the berries.
Опытным путем было также установлено ростостимулирующее свойство штамма бактерий Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56).The growth-promoting property of the bacterial strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56).
Способность штамма BtH10 56 оказывать на растения ростостимулирующее действие исследовали в лабораторных опытах. Семена сельскохозяйственных растений: салата, огурца, кабачка, тыквы, перед посевом замачивали на 3 часа в препарате Энтобакт на основе штамма BtH10 56, полученном описанным выше в Примере способом, а также для сравнения - замачивали в препарате Бациколин на основе штамма-прототипа BtH10 №25, а в контроле - в воде. После замачивания семена проращивали в рулонах фильтровальной бумаги при температуре 26°С и влажности 86%. Через 5 дней учитывали всхожесть семян, а через 3 недели контролировали длину ростков и корней.The ability of the strain BtH 10 56 to exert a plant-promoting effect on plants was investigated in laboratory experiments. The seeds of agricultural plants: lettuce, cucumber, zucchini, pumpkin, before sowing were soaked for 3 hours in the preparation of Entobact based on the BtH 10 56 strain obtained as described above in the Example, and also for comparison, soaked in the prototype BtH strain 10 No. 25, and in control - in water. After soaking, the seeds were germinated in rolls of filter paper at a temperature of 26 ° C and a humidity of 86%. After 5 days, seed germination was taken into account, and after 3 weeks they controlled the length of sprouts and roots.
Результаты опытов представлены в таблице 5.The results of the experiments are presented in table 5.
Результаты испытаний, представленные в таблице 5, показали, что препарат Энтобакт на основе штамма BtH10 56 стимулирует всхожесть семян, рост проростков и корней растений, что подтверждает ростостимулирующие свойства штамма BtH10 56. При этом ростостимулирующая активность нового штамма BtH10 56 на 5-22% больше, чем у штамма-прототипа BtH10 №25.The test results presented in Table 5 showed that Entobact, based on the BtH 10 56 strain, stimulates seed germination, growth of seedlings and plant roots, which confirms the growth-promoting properties of the BtH 10 56 strain. At the same time, the growth-promoting activity of the new BtH 10 56 strain is 5- 22% more than the prototype strain BtH 10 No. 25.
Были проведены также полевые опыты по исследованию способности штамма BtH10 56 оказывать ростостимулирующее действие на растения (ботву) и урожайность картофеля.Field experiments were also conducted to investigate the ability of the BtH 10 56 strain to have a growth-promoting effect on plants (tops) and potato yield.
Опыты проводили путем предпосевного замачивании клубней картофеля для посадки в препарате Энтобакт на основе штамма BtH10 56, полученного способом, описанным выше в Примере, а также для сравнения замачивали в препарате Бациколин на основе штамма-прототипа BtH10 №25, а в контроле - в воде. После замачивания посевные клубни сажали в землю и выращивали обычным методом. Через 1,5 месяца после посадки срезали картофельную ботву, измеряли количество и высоту стеблей, вес растений, а также определяли полученный урожай картофеля.The experiments were carried out by pre-sowing soaking of potato tubers for planting in Entobact preparation on the basis of BtH 10 56 strain, obtained by the method described above in Example, and also for comparison were soaked in Batsikolin preparation on the basis of BtH 10 prototype strain No. 25, and in control water. After soaking, sowing tubers were planted in the ground and grown in the usual manner. 1.5 months after planting, the potato tops were cut, the number and height of the stems, the weight of the plants were measured, and the resulting potato harvest was determined.
Результаты полевых опытов приведены в таблице 6.The results of field experiments are shown in table 6.
Результаты опытов, приведенные в таблице 6, свидетельствуют о росто-стимулирующем влиянии препарата Энтобакт на основе штамма BtH10 56 на ботву и урожайность картофеля при замачивании в нем посевных клубней. При этом вес растений, высота стеблей и урожай при предпосевной обработке клубней препаратом Энтобакт выше на 19,4; 17; 16% соответствующих показателей при замачивании препаратом Бациколин на основе штамма-прототипа BtH10 №25. Контрольный вариант при предпосевном замачивании клубней в воде уступает препарату Энтобакт на основе штамма BtH10 56, соответственно, на 27, 23 и 22%.The results of the experiments are shown in table 6, indicate a growth-stimulating effect of the drug Entobact on the basis of strain BtH 10 56 on the tops and yield of potatoes while soaking tubers in it. At the same time, the weight of the plants, the height of the stems and the yield during the presowing treatment of tubers with Entobact are higher by 19.4; 17; 16% of the relevant indicators when soaking the Batsikolin preparation based on the prototype BtH 10 strain No. 25. The control variant with pre-sowing soaking of tubers in water is inferior to Entobact based on the BtH 10 56 strain, respectively, by 27, 23 and 22%.
Таким образом, штамм бактерий Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56), кроме выраженной энтомоцидной активности в отношении широкой группы массовых вредоносных видов насекомых, обладает высокой антифунгальной активностью против различных фитопатогенных грибов - возбудителей болезней сельскохозяйственных культур, а также ростостимулирующим действием на растения, то есть обладает полифункциональными свойствами.Thus, the strain of bacteria Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56), besides pronounced enomocidal activity against a wide group of mass harmful insect species, has a high antifungal activity against various pathogenic fungi that cause crop diseases, as well as a growth-promoting effect on plants, that is, it has polyfunctional properties.
Кроме того, были проведены лабораторные опыты по определению сохранения титра спор штамма BtH10 56 и содержанию экзотоксина в препарате Энтобакт через 6 месяцев хранения при различных плюсовых температурах: 5, 15, 25, 30°С без консервирующих добавок в контроле и с добавкой в виде 0,5% цитрата натрия (Na3C6H5O7) или 10% хлористого натрия (NaCl) в качестве консерванта. Исходные значения: титр спор штамма BtH10 56 - 3,5⋅109/мл, а содержание экзотоксина, которое оценивалось через показатель ЛК50 для L2 комнатной мухи, - 3,21 мкл/г корма.In addition, laboratory experiments were carried out to determine the preservation of the titer of the spores of the BtH 10 56 strain and the content of exotoxin in Entobact after 6 months of storage at various positive temperatures: 5, 15, 25, 30 ° C without preservative additives in the control and with the addition of 0.5% sodium citrate (Na 3 C 6 H 5 O 7 ) or 10% sodium chloride (NaCl) as a preservative. Baseline values: the spore titer of the BtH 10 56–3.5 910 9 / ml strain, and the exotoxin content, which was estimated using the LC 50 index for L 2 house flies, was 3.21 μl / g of feed.
Результаты опыта представлены в таблице 7.The results of the experiment are presented in table 7.
Из приведенных в таблице 7 данных следует, что при хранении препарата на основе штамма BtH10 56 в течение 6 мес.при температурах +(5-15)°С, с консервирующей добавкой или без нее, его титр спор составил 97,1-92,2%) от исходного значения, т.е. снизился незначительно; и только при высоких температурах хранения +(25-30)°С он снизился на 12-17,2% по сравнению с исходным.From the data in Table 7 it follows that during storage of the preparation on the basis of the BtH 10 56 strain for 6 months at temperatures of + (5-15) ° C, with or without preservative, its spore titer was 97.1-92 , 2%) of the original value, i.e. decreased slightly; and only at high storage temperatures + (25-30) ° C, it decreased by 12-17.2% compared with the original.
При этом уровень содержания экзотоксина, определенный через показатель ЛК50, во всех вариантах опыта остался высоким - в пределах 3,35-3,71 мкл/г корма по сравнению с исходным - 3,21 мкл/г корма.At the same time, the level of exotoxin, determined through the indicator LC50, remained high in all variants of the experiment - within 3.35-3.71 μl / g of feed compared to the initial one - 3.21 μl / g of feed.
Результаты описанных опытов показывают, что препарат Энтобакт на основе штамма BtH10 56 может храниться при различных плюсовых температурах от 5°С до 30°С не менее 6 месяцев, в значительной мере сохраняя свою биологическую активность.The results of the described experiments show that the drug Entobact on the basis of the BtH 10 56 strain can be stored at different positive temperatures from 5 ° C to 30 ° C for at least 6 months, largely preserving its biological activity.
По показателям вирулентности, диссеминации, токсичности и токсигенности штамм Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis №56 (BtH10 56) не патогенен для теплокровных животных и в соответствии с «Методическими указаниями…» №2620-82 и №4263-87, штамм BtH10 56 относится к 4 классу опасности (малоопасен) и удовлетворяет требованиям, предъявляемым к промышленным микроорганизмам. Результаты по безопасности данного биопрепарата согласуются с мировой практикой широкого использования биоинсектицидов на основе штаммов бактерий группы Bacillus thuringiensis.In terms of virulence, dissemination, toxicity and toxigenicity, the strain Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis No. 56 (BtH 10 56) is not pathogenic for warm-blooded animals and in accordance with the “Guidelines ...” No. 2620-82 and No. 4263-87, the BtH 10 56 strain belongs to hazard class 4 (low hazard) and satisfies the requirements imposed on industrial microorganisms. The safety results of this biological product are consistent with the global practice of widespread use of bio-insecticides based on bacteria strains of the Bacillus thuringiensis group.
Таким образом, опытным путем было установлено, что новый выявленный штамм бактерий Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH10 56) обладает одновременно высокой энтомоцидной активностью в отношении широкой группы массовых вредоносных видов насекомых - фитофагов, высокой антифунгальной активностью против различных фитопатогенных грибов - возбудителей болезней сельскохозяйственных культур и ростостимулирующим действием на растения, т.е. является эффективным полифункциональным средством для использования в растениеводстве сельского хозяйства.Thus, experimentally it was found that the newly identified strain of the bacteria Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 (BtH 10 56) possesses simultaneously high entomocidal activity against a wide group of mass harmful insect species - phytophages, high antifungal activity against various pathogenic fungi - pathogens of agricultural crops, and growth-promoting effect on plants, i.e. It is an effective polyfunctional tool for use in crop farming.
Кроме того, новый штамм BtH10 56 и биопрепараты, полученные на его основе, расширяют арсенал подобных средств.In addition, the new strain BtH 10 56 and the biologics obtained on its basis expand the arsenal of such means.
ЛИТЕРАТУРАLITERATURE
1. Кандыбин Н.В., Патыка Т.И., Ермолова В.П., Патыка В.Ф. Микробиоконтроль численности насекомых и его доминанта Bacillus thuringiensis. Санкт-Петербург, Пушкин, 2009, 245 с.1. Kandybin N.V., Patyka T.I., Yermolova V.P., Patyka V.F. Microbiocontrol of insect numbers and its dominant Bacillus thuringiensis. St. Petersburg, Pushkin, 2009, 245 p.
2. Богданов-Патьков Н.Н. Колорадский картофельный жук Septinatarsa desemlineata say и его карантинное значение. Л. Тип. «Печ. Двор», 1947, 200 с.2. Bogdanov-Patkov N.N. Colorado potato beetle Septinatarsa desemlineata say and its quarantine value. L. Type. “Pec. The Yard, 1947, 200 p.
3. Мюллер Э., Леффлер В. Микология. Перевод с нем. М., Мир, 1995, 114 с.3. Muller E., Leffler V. Mycology. Translation from it. M., Mir, 1995, 114 p.
4. Смирнов О.В., Гришечкина С.Д. Изучение действия биопрепаратов на основе Bacillus thuringiensis на фитопатогенные грибы. Вестник защиты растений, №1, 2010, с. 27-35.4. Smirnov OV, Grishechkina S.D. Studying the effect of biopreparations based on Bacillus thuringiensis on phytopathogenic fungi. Plant Protection Bulletin, №1, 2010, p. 27-35.
5. Патыка В.Ф., Патыка Т.И., Экология Bacillus thuringiensis, Киев, изд. ПГАА, 2007 г., 217 стр.5. Patyka V.F., Patyka T.I., Ecology of Bacillus thuringiensis, Kiev, ed. PGAA, 2007, 217 p.
6. Методы экспериментальной микологии, под редакцией Билай В.И., Киев, изд. «Наукова думка», 1982 г., 552 с.6. Methods of experimental mycology, edited by Bilai VI, Kiev, ed. Naukova Dumka, 1982, 552 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017143084A RU2692655C2 (en) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017143084A RU2692655C2 (en) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017143084A3 RU2017143084A3 (en) | 2019-06-13 |
| RU2017143084A RU2017143084A (en) | 2019-06-13 |
| RU2692655C2 true RU2692655C2 (en) | 2019-06-25 |
Family
ID=66947199
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017143084A RU2692655C2 (en) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2692655C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2729465C1 (en) * | 2019-11-05 | 2020-08-06 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Complex biological insecticidal preparation against gypsy moth lymantria dispar |
| RU2812480C1 (en) * | 2023-08-04 | 2024-01-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 109/7 strain as polyfunctional plant protector and stimulation of their growth |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2453595C1 (en) * | 2011-03-18 | 2012-06-20 | Государственное научное учреждение Дальневосточный зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ДальЗНИВИ Россельхозакадемии) | Strain of bacteria bacillus thuringiensis for obtaining bio- insecticide for control of greater wax moth |
| RU2514211C1 (en) * | 2012-10-10 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук | BACTERIAL STRAIN Bacillus thuringiensis varthuringiensis N800/15 AS AGENT FOR PREPARING ENTOMOCIDAL BIOPREPARATION |
| RU2514023C1 (en) * | 2012-12-26 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИСХМ Россельхозакадемии) | Strain bacillus thuringiensis var darmstadiensis n25 as means of integrated effect on harmful coleopteran insects and phytopathogenic fungi |
-
2017
- 2017-12-11 RU RU2017143084A patent/RU2692655C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2453595C1 (en) * | 2011-03-18 | 2012-06-20 | Государственное научное учреждение Дальневосточный зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ДальЗНИВИ Россельхозакадемии) | Strain of bacteria bacillus thuringiensis for obtaining bio- insecticide for control of greater wax moth |
| RU2514211C1 (en) * | 2012-10-10 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук | BACTERIAL STRAIN Bacillus thuringiensis varthuringiensis N800/15 AS AGENT FOR PREPARING ENTOMOCIDAL BIOPREPARATION |
| RU2514023C1 (en) * | 2012-12-26 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИСХМ Россельхозакадемии) | Strain bacillus thuringiensis var darmstadiensis n25 as means of integrated effect on harmful coleopteran insects and phytopathogenic fungi |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2729465C1 (en) * | 2019-11-05 | 2020-08-06 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Complex biological insecticidal preparation against gypsy moth lymantria dispar |
| RU2812480C1 (en) * | 2023-08-04 | 2024-01-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 109/7 strain as polyfunctional plant protector and stimulation of their growth |
| RU2815318C1 (en) * | 2023-11-20 | 2024-03-13 | Общество с ограниченной ответственностью (ООО) "Микопро" | Strain of spore-forming bacteria bacillus thuringiensis species morrisoni, having insectoacaricidal, fungicidal and plant growth stimulating activity |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017143084A3 (en) | 2019-06-13 |
| RU2017143084A (en) | 2019-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10273445B2 (en) | Isolated strain of Clonostachys rosea for use as a biological control agent | |
| KR101974265B1 (en) | Microbial pesticides against thrips | |
| JPH04501111A (en) | Preparation of nematocide | |
| US20140086875A1 (en) | Composition based on bacillus spp. and correlate genera and their use in pest control | |
| KR20180079240A (en) | Novel Beauveria bassiana M130 and biological control method of greenhouse whitefly and bemisia tabaci using the same | |
| Maniania | Evaluation of three formulations of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. for control of the stem borer Chilo partellus (Swinhoe)(Lep., Pyralidae) | |
| JP7425884B2 (en) | Bacillus subtilis JCK-1398 strain that induces resistance in various plants, composition and method for controlling pine wood nematode disease using the same | |
| KR100294023B1 (en) | Bacteria for disease prevention of crops, microorganisms containing them and uses thereof | |
| RU2514023C1 (en) | Strain bacillus thuringiensis var darmstadiensis n25 as means of integrated effect on harmful coleopteran insects and phytopathogenic fungi | |
| RU2692655C2 (en) | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing | |
| KR101773339B1 (en) | Composition for simultaneous control of both aphid, and Pythium ultimum, or Colletotrichum acutatum using Isaria fumosorosea Pf212 and its culture media | |
| KR102126582B1 (en) | Microbial agent for simultaneous control of both Colletotrichum acutatum and Thrips spp. using Isaria javanica FT333 and its culture media | |
| RU2630661C1 (en) | Streptomyces globisporus k-35/15 strain as means for plants protection against harmful insects - phytophages | |
| CA2055424A1 (en) | Production of enhanced biocontrol agents | |
| KR102342488B1 (en) | Composition for controlling Rhynchophorus ferrugineus comprising Beauveria bassiana JEF-507 as an active ingredient | |
| KR102125465B1 (en) | Microbial agents for controlling stink bugs comprising an Aspergillus flavus strain | |
| RU2812480C1 (en) | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 109/7 strain as polyfunctional plant protector and stimulation of their growth | |
| Ashrafi et al. | Rosemary wilting disease and its management by soil solarization technique in Iran | |
| KR102207732B1 (en) | Microbial agent for control of Plutella xylostella larva using Metarhizium anisopliae FT319 and its culture media | |
| KR102125506B1 (en) | Microbial agents for controlling stink bugs comprising an Aspergillus flavus strain | |
| KR102145620B1 (en) | Microbial agent for control of Plutella xylostella larva using Isaria fumosorosea FT337 and its culture media | |
| Saeidi et al. | Bio-control efficiency of Bacillus thuringiensis (Berliner) against the citrus leaf miner, Phyllocnistis citrella Stainton (Lep., Gracillariidae) under laboratory conditions | |
| Dearlove | Multiple stressor effects in biological pest control: improving efficacy in challenging environments | |
| Ramsoondar et al. | Gummy stem blight: an emerging epiphytotic disease of pumpkin in Trinidad, West Indies | |
| Belay | Development of Mycopesticide for the Management of Sorghum Chafer, Pachnoda Interrupta (Olivier)(Coleoptera: Scarabaeidae) in Ethiopia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20211111 Effective date: 20211111 |