RU2464974C1 - Means for treatment of malignant ascitic tumours - Google Patents
Means for treatment of malignant ascitic tumours Download PDFInfo
- Publication number
- RU2464974C1 RU2464974C1 RU2011141223/15A RU2011141223A RU2464974C1 RU 2464974 C1 RU2464974 C1 RU 2464974C1 RU 2011141223/15 A RU2011141223/15 A RU 2011141223/15A RU 2011141223 A RU2011141223 A RU 2011141223A RU 2464974 C1 RU2464974 C1 RU 2464974C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- malignant
- ascites
- dopamine
- treatment
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и касается противоопухолевого средства, предназначенного для лечения злокачественных (малигнизированных) асцитов.The invention relates to medicine and relates to an antitumor agent intended for the treatment of malignant (malignant) ascites.
Злокачественный (малигнизированный) асцит - это патологическое накопление жидкости в брюшной полости, развивающееся вследствие опухолевого поражения брюшины. Асцит вызывает значительный дискомфорт и приводит к различным функциональным нарушениям у пациентов в запущенных стадиях онкологического заболевания и является сложной клинической проблемой. Малигнизированный асцит составляет примерно 10% среди всех случаев асцита и наиболее часто развивается при раке молочной железы, яичников, желудка, поджелудочной железы и толстой кишки.Malignant (malignant) ascites is a pathological accumulation of fluid in the abdominal cavity that develops as a result of tumor damage to the peritoneum. Ascites causes significant discomfort and leads to various functional disorders in patients in advanced stages of cancer and is a complex clinical problem. Malignant ascites is approximately 10% of all cases of ascites and most often develops in cancer of the breast, ovaries, stomach, pancreas and colon.
В настоящее время имеется огромный арсенал химиотерапевтических препаратов, применяемых для лечения злокачественных заболеваний различных групп: алкилирующие препараты, цитостатики, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, алкалоиды и другие биологические активные вещества растительного происхождения, а также ферментные и гормональные препараты (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., Медицина, 1984, часть 2, стр.425-475). Однако, несмотря на достигнутые успехи в химиотерапии злокачественных опухолей, поиск новых веществ, обладающих противоопухолевым действием, продолжается, поскольку все имеющиеся противоопухолевые препараты, как правило, затрагивают и нормальные ткани, обладают высокой токсичностью, вызывают побочные эффекты, связанные или не связанные с основным механизмом подавления размножения клеток: тошноту, рвоту, потерю аппетита, понос, снижение количества лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов в крови, стоматит, сердечно-сосудистые расстройства, временную утрату волосяного покрова и другие. В некоторых случаях это ограничивает дозировку либо даже заставляет приостановить или прекратить лечение.Currently, there is a huge arsenal of chemotherapeutic drugs used to treat malignant diseases of various groups: alkylating drugs, cytostatics, antimetabolites, antitumor antibiotics, alkaloids and other biological active substances of plant origin, as well as enzyme and hormonal drugs (Mashkovsky M.D. Medicines M., Medicine, 1984, part 2, pp. 425-475). However, despite the successes achieved in the chemotherapy of malignant tumors, the search for new substances with an antitumor effect continues, since all available antitumor drugs, as a rule, also affect normal tissues, have high toxicity, and cause side effects associated with or not associated with the main mechanism suppression of cell reproduction: nausea, vomiting, loss of appetite, diarrhea, a decrease in the number of leukocytes, platelets and red blood cells in the blood, stomatitis, cardiovascular disorders A temporary loss of hair, and others. In some cases, this limits the dosage or even forces you to pause or stop treatment.
Наиболее близким по технической сущности к заявляемому является соединение джасплакинолид (jasplakinolide) (см. Jasplakinolide - An Actin-Specific Reagent that Promotes Actin Polymerization, Methods in Molecular Biology, 2001, Volume 161, Part III, 109-120) - природный продукт, выделяемый из морских губок и имеющий противогрибковую и противораковую активности. Джасплакинолид связывается с белком, отвечающим за стабильность клетки и включенного в механизм клеточного деления, что является перспективным для разработки новых противоопухолевых препаратов.The closest in technical essence to the claimed is the compound jasplakinolide (see Jasplakinolide - An Actin-Specific Reagent that Promotes Actin Polymerization, Methods in Molecular Biology , 2001, Volume 161, Part III, 109-120) - a natural product secreted from sea sponges and having antifungal and anticancer activity. Jasplacinolide binds to a protein that is responsible for cell stability and is included in the cell division mechanism, which is promising for the development of new antitumor drugs.
Задача данного изобретения заключается в расширении арсенала средств, пригодных для лечения злокачественных асцитных опухолей и не токсичных для нормальных клеток и в целом для всего организма.The objective of the invention is to expand the arsenal of tools suitable for the treatment of malignant ascites tumors and non-toxic to normal cells and the whole organism.
Экспериментальным путем было установлено, что для решения этой задачи перспективным является давно известное вещество - дофамин.It was experimentally established that to solve this problem, the long-known substance dopamine is promising.
Дофамин - 3,4-диоксифенилэтиламин, окситирамин, C6H3(OH)2CH2CH2(NH2), промежуточный продукт биосинтеза катехоламинов, образующийся в результате декарбоксилирования диоксифенилаланина (ДОФА). Ряд органов и тканей (печень, легкие, кишечник и др.) содержат преимущественно дофамин. Наряду с адреналином и норадреналином дофамин в небольших количествах секретируется надпочечниками, что свидетельствует о возможной самостоятельной гормональной функции дофамина. В центральной нервной системе дофамин содержится преимущественно в двигательных центрах, выполняя функцию медиатора. Дофамин обладает рядом фармакологических свойств, характерных для гормональных и адренергических веществ. Однако возможность использования его в качестве цитотоксического средства для лечения злокачественных асцитов не описана.Dopamine - 3,4-dioxiphenylethylamine, oxytyramine, C 6 H 3 (OH) 2 CH 2 CH 2 (NH 2 ), an intermediate product of catecholamine biosynthesis resulting from decarboxylation of dioxiphenylalanine (DOPA). A number of organs and tissues (liver, lungs, intestines, etc.) contain mainly dopamine. Along with adrenaline and norepinephrine, small amounts of dopamine are secreted by the adrenal glands, which indicates a possible independent hormonal function of dopamine. In the central nervous system, dopamine is found mainly in the motor centers, performing the function of a mediator. Dopamine has a number of pharmacological properties characteristic of hormonal and adrenergic substances. However, the possibility of using it as a cytotoxic agent for the treatment of malignant ascites has not been described.
Техническим результатом, достигаемым при реализации изобретения, является обнаружение нового неочевидного свойства известного вещества - дофамина. Технический результат достигается тем, что известный дофамин общей формулы C6H3(OH)2CH2CH2(NH2) применяют в качестве средства для лечения злокачественных асцитов.The technical result achieved by the implementation of the invention is the discovery of a new non-obvious property of a known substance - dopamine. The technical result is achieved by the fact that the known dopamine of the general formula C 6 H 3 (OH) 2 CH 2 CH 2 (NH 2 ) is used as an agent for the treatment of malignant ascites.
Возможность использования дофамина для лечения злокачественных асцитов была подтверждена на асцитной карциноме Эрлиха мышей. Было показано, что недельный курс ежедневных внутрибрюшинных инъекций дофамина (ДА) концентрацией 10-2 М и 10-1 М снижает, соответственно, в 10 и 30 раз по сравнению с контролем (инъекции физраствора) суммарное количество и уменьшает на 27% и на 59% диаметр клеток в асцитной карциноме Эрлиха мышей.The possibility of using dopamine for the treatment of malignant ascites has been confirmed on mouse Ehrlich ascites carcinoma. It was shown that a weekly course of daily intraperitoneal injections of dopamine (DA) with a concentration of 10 -2 M and 10 -1 M reduces, respectively, 10 and 30 times in comparison with the control (saline injection) the total amount and decreases by 27% and 59 % cell diameter in mouse Ehrlich ascites carcinoma.
Сущность изобретения поясняется графическими материалами, где наThe invention is illustrated graphic materials, where
фиг.1 представлено влияние ДА на морфологию клеток перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха (АКЭ), выявляемую в световом микроскопе (при увеличении ×50) на 6-е сутки после введения дофамина в брюшную полость, как описано в примере, где А-В - вид опухолевых клеток из асцита интактных (А, В) и контрольной (Б) мышей на мазках (А, Б) и в гистологическом срезе (В). Г-Д - вид опухолевых клеток после воздействия ДА концентрацией 0,017 М (Г), 0,17 М (Д) и 10-2 М (Е) на мазках (Г, Д) и в гистологическом срезе (Е). Масштаб 20 мкм (А-В), 15 мкм (Г) и 10 мкм (Д, Е).figure 1 presents the effect of DA on the morphology of cells of transplantable Ehrlich ascites carcinoma (AKE), detected in a light microscope (at magnification × 50) on the 6th day after the introduction of dopamine into the abdominal cavity, as described in the example, where AB is a view tumor cells from ascites of intact (A, B) and control (B) mice on smears (A, B) and in the histological section (C). G-D is the type of tumor cells after exposure to DA with a concentration of 0.017 M (G), 0.17 M (D) and 10 -2 M (E) on smears (G, D) and in the histological section (E).
На фиг.2 представлены морфометрические данные по количеству и размерам клеток в асците интактных, контрольных и подопытных мышей, где А - количество опухолевых клеток, Б - диаметр опухолевых клеток, * - достоверное отличие от контроля при Р<0,05, ** - достоверное отличие от контроля и от подопытных значений, полученных при воздействиях ДА меньшей концентрацией при Р<0,05.Figure 2 presents morphometric data on the number and size of cells in the ascites of intact, control and experimental mice, where A is the number of tumor cells, B is the diameter of tumor cells, * is a significant difference from control at P <0.05, ** - a significant difference from the control and from experimental values obtained under the influence of DA with a lower concentration at P <0.05.
На фиг.3 показано влияние ДА на ультраструктуру клеток АКЭ, выявляемую в просвечивающем электронном микроскопе (при увеличении ×10000), где А-В - вид опухолевых клеток из асцита интактных (А, Б) и контрольных (В) мышей в ультратонких срезах. На вставках (а, в) даны изображения участков клеток, показывающие частичное рассасывание содержимого аденогранулы (а) и вакуолярную дистрофию клетки (в). Г-Е - вид опухолевых клеток после воздействия ДА концентрацией 10-1 М. Обозначения: MB - микровилли, Ц - цитозоль, Я - ядро, М - митохондрия, ЖК - жировая капля (аденогранула), (стрелка указывает на начало рассасывания содержимого гранулы). КС - кортикальный слой, МУ - муаровый узор. У - угловатость, КоС - кольчатая слоистость (annulate lamella), ФВ - фагоцитарная вакуоль. Масштабная линейка на рис.3А, а, Б, Г, г, Д, Е = 1 мкм, на рис 3в = 0,1 мкм.Figure 3 shows the effect of DA on the ultrastructure of AKE cells detected in a transmission electron microscope (at magnification × 10,000), where A-B is the type of tumor cells from ascites of intact (A, B) and control (C) mice in ultrathin sections. The insets (a, c) show images of cell areas showing partial resorption of the contents of the adenogranule (a) and vacuolar cell dystrophy (c). GE - the type of tumor cells after exposure to DA concentration of 10 -1 M. Designations: MB - microvilli, C - cytosol, I - core, M - mitochondria, LC - fat drop (adenogranule), (arrow indicates the beginning of resorption of the contents of the granule ) KS - cortical layer, MU - moire pattern. Y — angularity, CoC — annular lamella, PV — phagocytic vacuole. The scale bar in Fig. 3A, a, B, D, d, D, E = 1 μm, in Fig. 3c = 0.1 μm.
ПримерExample
В экспериментах использовали 140 самцов беспородных мышей линии SHK возрастом около 3 месяцев, весом 28-36 г, 20 из них - для пассирования опухоли. Работу с животными осуществляли в соответствии с международно признанными правилами и этическими нормами. Объектом исследования был штамм ELD перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха (АКЭ). Инокуляцию опухоли производили инъекцией в брюшную полость мыши 106 клеток АКЭ в 0,1 мл физиологического раствора (ФР) для инфузий. Величина инокулята была выбрана в предварительных экспериментах с учетом ранее описанной методологии работы с АКЭ (Е.В.Инжеваткин. Практикум по экспериментальной онкологии на примере асцитной карциномы Эрлиха: Метод. разработка. Красноярск. 2004. 10 с.) и результатов предшествующих опытов, проведенных нами в условиях in vitro на культурах клеток (Мошков Д.А., Абрамова М.Б. и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2010. Т.149, №3, С.335-339).In the experiments, 140 male outbred mice of the SHK line were used, about 3 months old, weighing 28-36 g, 20 of them for passaging the tumor. Work with animals was carried out in accordance with internationally recognized rules and ethical standards. The object of the study was the ELD strain of transplantable Ehrlich ascites carcinoma (AKE). Tumor inoculation was performed by injection into the abdominal cavity of the
Дофамин (ДА) вводили мышам с инокулированной АКЭ внутрибрюшинно в объеме 1 мл через 18 часов после инокуляции опухоли и далее в течение 6 суток инъецировали ДА 2 раза в день с интервалом между инъекциями 5 час. Для этого использовали аптечный препарат ДА из ампул, содержащих 4% (или примерно 0,2 М) раствор с метабисульфитом (Pedrosa R., Soares-da-Siva P. et al. // Br. J. Pharmacol. 2002. Vol.137, N8. P.1305-1313, ОАО «Биохимик», РФ и Orion, Pharma, Финляндия), разбавленный аптечным физиологическим раствором (ФР) для инъекций до рабочих концентраций 0,02 М, 10-1 М, 10-2 М или неразведенный. Контрольным мышам инъецировали одновременно с инъекцией ДА равный по объему ФР. Часть мышей с перевитой опухолью оставляли интактными до конца эксперимента. По завершении экспериментов мышей забивали методом цервикальной дислокации, извлекали асцитную жидкость в пенициллиновые флаконы; отбирали пробы для подсчета количества клеток с помощью камеры Горяева, а оставшиеся асциты использовали для морфологического анализа клеток в мазках, в гистологических и ультратонких срезах. Статистическую обработку результатов проводили в программе Microsoft Excel (Microsoft Office 2003). Значимость различий данных определяли при помощи t-теста Стьюдента. Количественные данные представлены значениями среднего арифметического ± ошибка среднего при уровне значимости доверительного интервала 0,05.Dopamine (DA) was injected intraperitoneally in mice with inoculated AKE in a volume of 1 ml 18 hours after tumor inoculation and then, DA was injected for 6 days 2 times a day with an interval between injections of 5 hours. For this, a pharmaceutical preparation DA from ampoules containing a 4% (or approximately 0.2 M) solution with metabisulfite (Pedrosa R., Soares-da-Siva P. et al. // Br. J. Pharmacol. 2002. Vol. 137, No. 8. P.1305-1313, OJSC “Biochemist”, Russian Federation and Orion, Pharma, Finland), diluted with pharmacy physiological saline (RF) for injection to working concentrations of 0.02 M, 10 -1 M, 10 -2 M or undiluted. Control mice were injected simultaneously with DA injection of equal volume RF. Some of the mice with the inoculated tumor were left intact until the end of the experiment. At the end of the experiments, the mice were sacrificed by the cervical dislocation method, ascites fluid was removed into penicillin vials; Samples were taken to count the number of cells using the Goryaev’s camera, and the remaining ascites were used for morphological analysis of cells in smears, in histological and ultrathin sections. Statistical processing of the results was carried out in Microsoft Excel (Microsoft Office 2003). The significance of the data differences was determined using the Student t-test. Quantitative data are represented by arithmetic mean ± error of the mean at a significance level of the confidence interval of 0.05.
Подсчет клеток в асците выявил (фиг.2), что в интактных и контрольных группах мышей злокачественных клеток в асците было в 10 раз больше по сравнению с подопытными группами, получавшими инъекции ДА в концентрации 0,02 М, 10-2 М, и более чем 25 раз больше, чем у мышей, получавших инъекции ДА в концентрации 10-1 М, или неразведенный. Размер клеток, выделенных из асцита подопытных мышей, по сравнению с интактными и контрольными мышами, при замерах на мазках и в гистологических срезах оказался меньше на четверть и на половину, в зависимости от концентраций ДА. Известно, что изменение объема клеток АКЭ прямо обусловлено степенью полимеризации цитозольного актина и формированием Ф-актинового цитоскелета (Pedersen S.F., Hoffmann E.K. et al. // Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. 2001. Vol.130, N.3. P.385-399). Цитологические (гистологические, ультраструктурные) исследования (фиг.1, 3) подтвердили, что дофамин вызывает полимеризацию актина и нарушение цитоскелета у злокачественных клеток.Counting cells in ascites revealed (Fig. 2) that in the intact and control groups of mice, the number of malignant cells in ascites was 10 times higher than in the experimental groups receiving DA injections at a concentration of 0.02 M, 10 -2 M, and more than 25 times more than in mice that received injections of DA at a concentration of 10 -1 M, or undiluted. Compared to intact and control mice, the size of cells isolated from ascites in experimental mice, when measured on smears and in histological sections, turned out to be a quarter and a half smaller, depending on DA concentrations. It is known that the change in the volume of AKE cells is directly due to the degree of polymerization of the cytosolic actin and the formation of the F-actin cytoskeleton (Pedersen SF, Hoffmann EK et al. // Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. 2001. Vol.130, N.3. P. 385-399). Cytological (histological, ultrastructural) studies (Figs. 1, 3) confirmed that dopamine causes actin polymerization and cytoskeleton disruption in malignant cells.
Анализ гистологического строения клеток АКЭ, выявляемого на тотальных препаратах (мазках) и в толстых срезах, показывает, что опухолевые клетки имеют округлую форму и примерно одинаковый размер (фиг.1). Клетки опухоли интактных и контрольных животных на мазках имеют четкие контуры, цитоплазма у них плотная без заметных вакуолей или включений, контрольные препараты характеризовались несколько большей пропорцией поврежденных клеток, чем интактные, причина чего не выяснялась. В срезах они имеют несколько размытые контуры, различную плотность и более вариабельный размер, все это зависит от уровня среза индивидуальных клеток. При всех прочих равных условиях клетки АКЭ мышей, подвергнутые действию ДА, как на мазках, так и в срезах визуально имеют заметно меньший диаметр, и он более вариабелен в пределах одного кадра.Analysis of the histological structure of AKE cells detected on total preparations (smears) and in thick sections shows that the tumor cells have a rounded shape and approximately the same size (figure 1). Tumor cells of intact and control animals on smears have clear contours, their cytoplasm is dense without noticeable vacuoles or inclusions, control preparations were characterized by a slightly larger proportion of damaged cells than intact cells, the reason for which was not clarified. In slices, they have somewhat blurry contours, different densities and more variable sizes; all this depends on the cut level of individual cells. With all other conditions being equal, the cells of mouse AKE exposed to DA, both on smears and in sections, visually have a noticeably smaller diameter, and it is more variable within one frame.
По результатам электронно-микроскопических исследований (фиг.3А, Б) ультраструктура клеток асцитов, взятых из интактных и контрольных мышей, идентична описанной ранее ультраструктуре клеток классического «дикого» штамма АКЭ (Roth J., Li W.P., Knibbs R.N. et al. // Proc Natl Acad Sci USA. 1994. Vol.91, N.24. P.11353-11357).According to the results of electron microscopic studies (figa, B), the ultrastructure of ascites cells taken from intact and control mice is identical to the previously described ultrastructure of cells of the classic "wild" strain of AKE ( Roth J., Li WP, Knibbs RN et al. // Proc Natl Acad Sci USA . 1994. Vol. 91, N.24. P.11353-11357).
Как видно из фиг 3А, Б, поверхность округлых или имеющих заметно угловатую форму клеток опухоли интактных мышей по всему периметру покрыта частично деформированными узкими и короткими микроворсинками. Сразу под плазматической мембраной располагается узкий кортикальный слой, составленный из параллельно расположенных актиновых нитей. Кортикальный слой неравномерный, в виде островков, между ними цитозоль выходит непосредственно к мембране. Изредка под мембраной встречаются фагоцитозные вакуоли небольшого размера. Остальную часть цитоплазмы занимают многочисленные митохондрии ортодоксальной конформации, с продольными или поперечными кристами и светлым матриксом, очень редкие фрагменты одиночных цистерн шероховатого ретикулума и бесчисленные свободно лежащие рибосомы. Одним из идентификационных признаков клеток АКЭ являются округлые осмиофильные аденогранулы (липидные капли), рудимент секретируемого эпителия молочной железы, из которых произошел этот тип раковых клеток. Их заполненный или опорожненный полностью или частично вид (фиг.3, вставка а) свидетельствует о включении гранул в метаболизм карциномных клеток. В ядрах интактных клеток АКЭ хроматин сильно сконденсирован, ядрышки очень крупные. Ультраструктура клеток асцита контрольных и интактных мышей идентична. Главная особенность тех и других заключается в том, что они не содержат заметного Ф-актинового цитоскелета. Это отчетливо видно на живых по ультраструктурным признакам, но частично поврежденных клетках, в которых матрикс достаточно хорошо просматривается из-за потери части рибосом. Цитоплазма таких клеток претерпевает сильную вакуольную дистрофию и актиновые нити цитоскелета присутствуют только в кортикальном слое (фиг.3В, вставка в).As can be seen from FIGS. 3A, B, the surface of rounded or markedly angular tumor cells of intact mice around the entire perimeter is covered with partially deformed narrow and short microvilli. Immediately beneath the plasma membrane is a narrow cortical layer composed of parallel actin filaments. The cortical layer is uneven, in the form of islands, between them the cytosol goes directly to the membrane. Occasionally, small phagocytotic vacuoles are found under the membrane. The rest of the cytoplasm is occupied by numerous mitochondria of the orthodox conformation, with longitudinal or transverse cristae and a light matrix, very rare fragments of single cisterns of the rough reticulum and countless free-lying ribosomes. One of the identifying signs of AKE cells is the rounded osmiophil adenogranules (lipid droplets), the rudiment of secreted mammary epithelium, from which this type of cancer cell originated. Their full or partially filled or empty form (Fig. 3, insert a) indicates the inclusion of granules in the metabolism of carcinoma cells. In the nuclei of intact AKE cells, chromatin is highly condensed, the nucleoli are very large. The ultrastructure of the ascites cells of the control and intact mice is identical. The main feature of both of them is that they do not contain a noticeable F-actin cytoskeleton. This is clearly seen in living cells according to ultrastructural characteristics, but partially damaged cells, in which the matrix is clearly visible due to the loss of part of the ribosomes. The cytoplasm of such cells undergoes strong vacuole dystrophy and actin filaments of the cytoskeleton are present only in the cortical layer (Fig. 3B, insert c).
Иной вид имели раковые клетки, подвергаемые периодическим воздействиям ДА. Микровилли повреждаются, становятся существенно шире и длиннее или же приобретают грибовидную форму с ярко выраженной тонкой ножкой и широкой округлой головкой, внутри них часто располагаются крупные вакуоли, свидетельствующие о возросшей фагоцитарной активности клеток (фиг.3Г, Д). Кортикальный слой становится гораздо толще, чем в контроле. Размер и осмиофильность аденогранул уменьшается, почти все они имеют следы рассасывания содержимого, митохондрии приобретают конденсированную конформацию, с набухшими кристами и темным матриксом, рибосомы большей частью исчезают, и цитозоль в целом существенно просветляется. Отчетливо видно, что вся толща цитоплазмы от плазматической мембраны до ядра заполнена густой сетью актиновых нитей (фиг.3 вставка г, Д). Кроме того, в цитоплазме клеток отмечается формирование муаровых узоров (фиг.3Е), таких же, как в культивируемых клетках после хронического действия ДА (Парнышкова Е.Ю., Лавровская В.П. и др. // Морфология. 2011. Т.140, №6. 00-00), вызванное неравномерной конденсацией цитоплазмы из-за массовой полимеризации Г-актина под действием ДА. Ядра клеток не изменяются от действия ДА, но часто встречаются апоптозные тела вместо ядер, свидетельствующие о повышенной гибели клеток. Наблюдаются значительные изменения структуры поверхности (Г), заполнение всего пространства между плазматической мембраной и ядерной оболочкой сетью актиновых филаментов (г), возникновение грибовидных микровиллей (Д).Cancer cells subjected to periodic exposure to DA had a different look. Microvilli are damaged, become significantly wider and longer, or acquire a mushroom shape with a pronounced thin stalk and a wide round head, large vacuoles are often located inside them, indicating an increased phagocytic activity of cells (Fig. 3G, D). The cortical layer becomes much thicker than in the control. The size and osmiophilicity of adenogranules decreases, almost all of them have traces of resorption of the contents, mitochondria acquire a condensed conformation, with swollen cristae and a dark matrix, the ribosomes for the most part disappear, and the cytosol as a whole is substantially clarified. It is clearly seen that the entire thickness of the cytoplasm from the plasma membrane to the nucleus is filled with a dense network of actin filaments (Fig. 3 insert g, D). In addition, in the cytoplasm of cells, the formation of moiré patterns is observed (Fig. 3E), the same as in cultured cells after the chronic action of DA (Parnyshkova E.Yu., Lavrovskaya V.P. et al. // Morphology. 2011. T. 140, No. 6. 00-00), caused by uneven condensation of the cytoplasm due to the mass polymerization of G-actin under the influence of DA. Cell nuclei do not change from the action of DA, but apoptotic bodies are often found instead of nuclei, indicating increased cell death. Significant changes in the surface structure (G), filling the entire space between the plasma membrane and the nuclear membrane with a network of actin filaments (g), the emergence of mushroom-like microvillas (D) are observed.
Таким образом, установлено, что ДА в условиях in vivo оказывает на клетки АКЭ цитотоксическое действие, схожее с ранее выявленным эффектом на культивированных фибробластоподобных и раковых клетках в условиях in vitro. Ультраструктурные особенности клеток АКЭ, подвергнутых действию ДА, свидетельствуют о том, что механизм его цитотоксичности заключается во взаимодействии с цитозольным Г-актином, судя по схожести эффектов ДА на АКЭ, на культивируемые клетки разного типа и на модельные системы, в том числе на выделенный Г-актин (Мошков Д.А., Павлик Л.Л., Шубина B.C., Парнышкова Е.Ю. и др. // Биофизика. 2010. Т.55, №5, С.850-856).Thus, it was found that DA in vivo exerts a cytotoxic effect on AKE cells, similar to the previously identified effect on cultured fibroblast-like and cancer cells in vitro. The ultrastructural features of AKE cells exposed to DA indicate that the mechanism of its cytotoxicity consists in interaction with cytosolic G-actin, judging by the similarity of the effects of DA on AKE, on cultured cells of various types and on model systems, including isolated G -actin (Moshkov D.A., Pavlik L.L., Shubina BC, Parnyshkova E.Yu. et al. // Biophysics. 2010. V. 55, No. 5, S.850-856).
В частности, заметная деформация микровиллей и расширение кортикального слоя, сформированных преимущественно филаментозным актином, появление в цитозоле обширной сети, образованной нитями, которые мы идентифицируем как актиновые филаменты по их диаметру и локализации в местах, ранее занятых исключительно Г-актином, а также обнаруженное впервые существенное уменьшение размера клеток под действием ДА.In particular, a noticeable deformation of microvilli and an expansion of the cortical layer, formed mainly by filamentous actin, the appearance in the cytosol of an extensive network formed by filaments, which we identify as actin filaments by their diameter and localization in places previously occupied exclusively by G-actin, as well as discovered for the first time a significant reduction in cell size under the influence of DA.
Эксперименты, проведенные на животных, показали, что онкотерапевтически эффективная концентрация ДА для АКЭ, привитой животным, на порядок выше той, которая считалась летальной для клеток АКЭ в культуре, возможно, в связи с объемным характером АКЭ и двухмерностью культур клеток, выращиваемых в чашках. Дальнейшее наблюдение за группой животных, получавших только в течение 6 суток дофамин (так как проведенное исследование не ставило задачу вылечить животных) в концентрации 10-1 М или неразведенный, показало, что они прожили на 2 месяца дольше, чем контрольные животные.Animal experiments have shown that the oncotherapeutically effective concentration of DA for AKE inoculated in animals is an order of magnitude higher than that considered lethal for AKE cells in culture, possibly due to the volumetric nature of AKE and the two-dimensionality of cell cultures grown in plates. Further observation of a group of animals that received dopamine only for 6 days (since the study did not set the goal of curing the animals) at a concentration of 10 -1 M or undiluted showed that they lived 2 months longer than control animals.
Все изложенное показывает, что дофамин, который является природным веществом, синтезируемом в организме, может рассматриваться как прототип нового класса соединений (Takeuchi H., Ara G. // Cancer Chemother. Pharmacol. 1998. Vol.42, N.6. P.491-496), обладающих противораковой активностью, действующих на основе прямого воздействия на Г-актин как на терапевтическую мишень клеток, патологически высокое содержание которого свойственно для раковых клеток, в частности для клеток асцитных опухолей.All the above shows that dopamine, which is a natural substance synthesized in the body, can be considered as a prototype of a new class of compounds (Takeuchi H., Ara G. // Cancer Chemother. Pharmacol. 1998. Vol.42, N.6. P. 491-496), possessing anticancer activity, acting on the basis of a direct effect on G-actin as a therapeutic target of cells, the pathologically high content of which is characteristic of cancer cells, in particular, ascites tumor cells.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011141223/15A RU2464974C1 (en) | 2011-10-12 | 2011-10-12 | Means for treatment of malignant ascitic tumours |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011141223/15A RU2464974C1 (en) | 2011-10-12 | 2011-10-12 | Means for treatment of malignant ascitic tumours |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2464974C1 true RU2464974C1 (en) | 2012-10-27 |
Family
ID=47147258
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011141223/15A RU2464974C1 (en) | 2011-10-12 | 2011-10-12 | Means for treatment of malignant ascitic tumours |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2464974C1 (en) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2035182C1 (en) * | 1994-02-18 | 1995-05-20 | Тамара Васильевна Воробьева | Antitumor and immunomodulating agent and method for treatment of oncologic patients and for treatment of dermic disease and trophic ulcers |
RU2361587C1 (en) * | 2008-02-14 | 2009-07-20 | Михаил Владимирович Кутушов | Medical product for treatment of oncologic diseases |
US20090226431A1 (en) * | 2005-12-02 | 2009-09-10 | Nabil Habib | Treatment of Cancer and Other Diseases |
-
2011
- 2011-10-12 RU RU2011141223/15A patent/RU2464974C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2035182C1 (en) * | 1994-02-18 | 1995-05-20 | Тамара Васильевна Воробьева | Antitumor and immunomodulating agent and method for treatment of oncologic patients and for treatment of dermic disease and trophic ulcers |
US20090226431A1 (en) * | 2005-12-02 | 2009-09-10 | Nabil Habib | Treatment of Cancer and Other Diseases |
RU2361587C1 (en) * | 2008-02-14 | 2009-07-20 | Михаил Владимирович Кутушов | Medical product for treatment of oncologic diseases |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Holzinger A. "Jasplakinolide: an actin-specific reagent that promotes actin polymerization". Methods Mol Biol. 2009; 586:71-87. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Saravanan et al. | Emerging theranostic silver and gold nanobiomaterials for breast cancer: present status and future prospects | |
KR20170074996A (en) | Differentiation-induced cell population from which undifferentiated cells have been removed, use of same, and method for producing same | |
JP6488264B2 (en) | NIK inhibitor | |
EP3789396B1 (en) | Synthetic peptide sp2 and use thereof | |
RU2464974C1 (en) | Means for treatment of malignant ascitic tumours | |
Yu et al. | Inhibition of autophagy enhanced cobalt chloride-induced apoptosis in rat alveolar type II epithelial cells | |
CN109627289B (en) | BH3 polypeptide analogue with anti-tumor activity | |
TW202110433A (en) | Chidamide-containing pharmaceutical composition and use thereof | |
CN101225106B (en) | Short peptide suppressing growth of cancer cell and uses thereof | |
Huang et al. | Cell Models in Autophagy Research | |
CN115245517A (en) | Application of dihydrotanshinone I in preparation of breast cancer and lung metastasis inhibitor thereof | |
US20230181514A1 (en) | New triglyceride obtained from a macrocybe titans extract, clinical applications and production method | |
EP3675841B1 (en) | A novel quinochalcone compound and uses thereof for treating cancer or inflammation | |
CN101229147B (en) | Use of N-4-hydroxyphenyl retinamide on preparing anti-hepatic fibrosis medicine | |
CN101497652B (en) | Peptide for inhibiting solid tumor and leukaemia cancer cell growth and use thereof | |
US20240287130A1 (en) | Compound for alcoholic liver injury, preparation method, composition, food and use | |
Chen et al. | Artemisia argyi mitigates doxorubicin‐induced cardiotoxicity by inhibiting mitochondrial dysfunction through the IGF‐IIR/Drp1/GATA4 signaling pathway | |
CN106138067A (en) | Bufadienolide compound application in preparation anti-gastric cancer medicament | |
CN117085051B (en) | A pharmaceutical composition of Chinese medicine Sophora japonica ethanol solution extract combined with cisplatin and its application | |
TW201607955A (en) | Polypeptide used for manufacturing multi-effect pharmaceutical composition of living body | |
CN105853402B (en) | A kind of purposes of terpene complex ester | |
RU2487930C1 (en) | PREPARATION WITH POLYFUNCTIONAL MEDICAL-BIOLOGICAL ACTIVITY THAT INFLUENCES TISSUE EXCHANGE BASED ON FUNGUS STRAIN Pleurotus ostreatus VKPM F-819 | |
CN104130311A (en) | Antitumor peptide variant and application thereof | |
WO2022014508A1 (en) | Cancer cell proliferation inhibitor and health food | |
CN113004136B (en) | PIN1 protein small molecule inhibitor and application thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131013 |