RU2240818C1 - Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing - Google Patents
Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2240818C1 RU2240818C1 RU2003136947/15A RU2003136947A RU2240818C1 RU 2240818 C1 RU2240818 C1 RU 2240818C1 RU 2003136947/15 A RU2003136947/15 A RU 2003136947/15A RU 2003136947 A RU2003136947 A RU 2003136947A RU 2240818 C1 RU2240818 C1 RU 2240818C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- collagen
- washed
- skin
- reindeer
- product according
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицинской промышленности и касается коллагенсодержащего продукта медицинского назначения “КОЛОЛЕНЬ” и способа его получения. Изобретение может быть использовано в медицинской промышленности в качестве основы для изготовления рассасывающихся шовных хирургических и лигатурных нитей, аллопластики, ранозаживляющих и асептических пленок, гелей, мазей и губок, а также в косметической промышленности для создания широкого спектра мазей, кремов и аэрозолей.The invention relates to the medical industry and relates to a collagen-containing medical product “KNEE" and a method for its preparation. The invention can be used in the medical industry as the basis for the manufacture of absorbable suture surgical and ligature threads, alloplasty, wound healing and aseptic films, gels, ointments and sponges, as well as in the cosmetic industry to create a wide range of ointments, creams and aerosols.
Коллаген - основной белок соединительной ткани, составляющий у млекопитающих 50-60% всех белков организма. Он содержится во всех тканях, но особенно его высоким содержанием отличаются шкура и сухожилия. Структура нативного коллагена в настоящее время хорошо известна, он является фибриллярным белком, основная часть его молекулы представляет жесткую спираль из трех полипептидных цепей с не спиральными участками на концах. Область его применения в медицинской промышленности зависит от структуры используемого коллагена, которая в первую очередь определяется способом его приготовления.Collagen is the main protein of connective tissue, which makes up 50-60% of all body proteins in mammals. It is found in all tissues, but the skin and tendons are distinguished by its high content. The structure of native collagen is currently well known, it is a fibrillar protein, the main part of its molecule is a rigid helix of three polypeptide chains with non-helical sections at the ends. The scope of its application in the medical industry depends on the structure of collagen used, which is primarily determined by the method of its preparation.
Так, известен способ получения коллагена для лечения патологий тканей организма (1). Способ включает экстрагирование неколлагеновых примесей из шкуры животных (телят, коров, овец, кроликов) 0,3-0,2 М Nа2НРO4 при рН 8,7-9,1, экстрагирование коллагена органической кислотой и его очистку последовательным осаждением из кислого раствора хлористым натрием, диализом против 0,02 М Nа2НРO4 и растворением коллагена диализом против 0,1-0,017 М уксусной кислоты. Полученный по способу коллаген представляет собой нативный коллаген, т.е. коллаген с неповрежденной тройной спиралью, который в физиологических условиях, т.е. при ионной силе 0,15 М хлористого натрия при рН 7,0-7,5 и температуре 37°С дает гели, являющиеся по структуре аналогом для соединительной ткани. Все типы клеток при включении в такие гели или нанесении их на их поверхность живут и размножаются. В виду своей низкой иммуногенности, использование нативного коллагена для усиления соединительной ткани и лечения различных патологий как в сочетании с клетками, так и с лекарствами предусматривает его высокую степень очистки от неколлагеновых примесей, что делает способ трудоемким и дорогостоящим.Thus, a known method of producing collagen for the treatment of pathologies of body tissues (1). The method includes extraction of non-collagen impurities from the skin of animals (calves, cows, sheep, rabbits) of 0.3-0.2 M Na 2 HPO 4 at pH 8.7-9.1, extraction of collagen with an organic acid and its purification by sequential precipitation from acidic a solution of sodium chloride, dialysis against 0.02 M Na 2 HPO 4 and dissolution of collagen by dialysis against 0.1-0.017 M acetic acid. The collagen obtained by the method is native collagen, i.e. collagen with an intact triple helix, which under physiological conditions, i.e. with an ionic strength of 0.15 M sodium chloride at a pH of 7.0-7.5 and a temperature of 37 ° C gives gels, which are structurally similar to connective tissue. All types of cells, when incorporated into such gels or applied to their surface, live and multiply. In view of its low immunogenicity, the use of native collagen to strengthen connective tissue and treat various pathologies both in combination with cells and with drugs provides for its high degree of purification from non-collagen impurities, which makes the method time-consuming and expensive.
Также известен способ получения нативного коллагена из сухожилей (сгибателей) копыт телят, включающий удаление оболочки сухожилий, измельчение материала, промывку измельченного материала физиологическим раствором фосфатного буфера, содержащим хлористый калий, экстракцией коллагена 0,5-2 М уксусной кислотой с добавлением ЭДТА, осаждением коллагена хлористым натрием и растворением его в уксусной кислоте (2).Also known is a method of producing native collagen from tendons (flexors) of calf hooves, including removing the tendon sheath, grinding the material, washing the crushed material with physiological phosphate buffer solution containing potassium chloride, extracting collagen with 0.5-2 M acetic acid with the addition of EDTA, collagen deposition sodium chloride and its dissolution in acetic acid (2).
Способ предусматривает использование дешевого сырья, является технологичным, но нативный коллаген, полученный по этому способу, получается недостаточно очищенным, и поэтому способ находит ограниченное применение.The method involves the use of cheap raw materials, it is technologically advanced, but the native collagen obtained by this method is not sufficiently purified, and therefore the method finds limited use.
Способы получения коллагена с использованием протеолетических ферментов весьма ограничены, т.к. хотя и приводят к повышению выхода коллагена и его очистки, однако связаны с наличием в продукте частичного деградированного коллагена, т.е. экстракция коллагена из сырья приводит к расщеплению молекул коллагена в концевых не спиральных областях, которые содержат межколлагенобразные поперечные сшивки (3), что сужает область применения такого продукта.Methods for producing collagen using proteolytic enzymes are very limited, because although they lead to an increase in the yield of collagen and its purification, however, they are associated with the presence of partial degraded collagen in the product, i.e. extraction of collagen from raw materials leads to the breakdown of collagen molecules in non-helical terminal regions that contain cross-collagen cross-links (3), which narrows the scope of such a product.
Описан способ приготовления нативного коллагена из шкуры телят с получением очень низкого содержания коллагена, около 1% (4). Способ заключается в подготовке телячьей шкуры, с которой срезают рыхлую соединительную ткань и сбривают волосы. Затем измельчают шкуры, промывают измельченный материал уксуснокислым натрием и далее проводят экстракцию цитратным буфером, а очистку коллагена осуществляют осаждением посредством диализа, осадок промывают водой, сушат и растворяют его в цитратном буфере. Способ имеет следующие недостатки: процедура удаления волос с телячьей шкуры производится механическим сбриванием, подобная процедура трудоемка и не позволяет полностью удалить волосы, что приводит к занижению выхода продукта при осуществлении технологического процесса и снижению его качества.A method is described for preparing native collagen from the skin of calves to obtain a very low collagen content, about 1% (4). The method consists in preparing calf skins, from which loose connective tissue is cut and hair is shaved off. The skins are then crushed, the crushed material is washed with sodium acetate and then extraction is carried out with citrate buffer, and the collagen is purified by precipitation by dialysis, the precipitate is washed with water, dried and dissolved in citrate buffer. The method has the following disadvantages: the procedure for removing hair from calf skins is performed by mechanical shaving, such a procedure is time-consuming and does not completely remove the hair, which leads to an underestimation of the yield of the product during the process and its quality.
Известный способ, связанный с получением коллагена из отходов шкур, предусматривает предварительные операции, заключающиеся в обеззоливании и обезжиривании сырья, далее часть операций выполняется с использованием ультразвука и включает щелочно-солевую обработку сырья, растворение в органической кислоте, диализе до нейтральных значений рН и перерастворении в органической кислоте в зависимости от использования (5). Однако полученный по способу продукт используют только для нужд ветеринарии и косметической промышленности.The known method associated with the production of collagen from waste skins, involves preliminary operations consisting in desalting and degreasing the raw materials, then some of the operations are performed using ultrasound and include alkaline-salt processing of the raw materials, dissolution in organic acid, dialysis to neutral pH values and re-dissolving in organic acid depending on use (5). However, the product obtained by the method is used only for the needs of veterinary medicine and the cosmetic industry.
Наиболее близким аналогом является продукт, содержащий коллаген “Каллон”, представляющий собой комплексный препарат, содержащий 30-39% мукополисахаридов и 60-69% коллагена. Продукт также содержит низкомолекулярные пептиды в количестве 0,5-1%. Продукт может быть использован в медицине для лечения длительно незаживающих ран и в косметологии в качестве биологически активного компонента различных косметических составов (6).The closest analogue is a product containing Collon collagen, which is a complex preparation containing 30-39% mucopolysaccharides and 60-69% collagen. The product also contains low molecular weight peptides in an amount of 0.5-1%. The product can be used in medicine for the treatment of long-term non-healing wounds and in cosmetology as a biologically active component of various cosmetic formulations (6).
Способ получения такого продукта заключается в измельчении соединительной ткани животных, трахей, хрящей, ушей, хвостов, сухожилий, кожи и кишечника, проведении гидролиза измельченной ткани посредством обработки 2-8% раствором гидроокиси натрия, экстрагировании целевого продукта хлорной кислотой при рН 1,5-2,5 при комнатной температуре, отделении жмыха фильтрацией или центрифугированием, а фильтрат диализуют через полупроницаемую мембрану против дистиллированной воды. Целевой продукт, оставшийся на стенках диализных мешков, центрифугируют и лиофилизируют. Выход составляет 3,5-7,0%.A method of obtaining such a product consists in grinding the connective tissue of animals, trachea, cartilage, ears, tails, tendons, skin and intestines, hydrolyzing the crushed tissue by treatment with 2-8% sodium hydroxide solution, extracting the target product with perchloric acid at pH 1.5- 2.5 at room temperature, separating the cake by filtration or centrifugation, and the filtrate was dialyzed through a semipermeable membrane against distilled water. The desired product remaining on the walls of the dialysis bags is centrifuged and lyophilized. The yield is 3.5-7.0%.
Указанное изобретение имеет следующие недостатки: полученный продукт “Каллон” имеет ограниченное медицинское применение, способ получения продукта при крупномасштабном производстве технологически сложен, в качестве сырья предусматривается использование соединительной ткани животных, сравнительно небольшой выход целевого продукта, который составляет 3,5-7,0%.The specified invention has the following disadvantages: the obtained product “Kallon” has limited medical use, the method of obtaining the product in large-scale production is technologically complicated, the use of animal connective tissue is provided as a raw material, a relatively small yield of the target product, which is 3.5-7.0% .
Задача изобретения заключается в разработке коллагенсодержащего продукта, имеющего универсальный состав, позволяющий его использовать в качестве основы для получения губок, пленок, гелей, шовных хирургических нитей, мазей, кремов, аэрозолей и пищевых добавок, а способ его получения заключается в упрощении и в использовании дешевого сырья.The objective of the invention is to develop a collagen-containing product having a universal composition that allows it to be used as the basis for the production of sponges, films, gels, suture surgical sutures, ointments, creams, aerosols and food additives, and the method for its preparation is to simplify and use cheap raw materials.
Поставленная задача достигается за счет получения коллагенсодержащего продукта, представляющего собой гелеобразную массу с рН 2,5-4,5, полученную из шкуры северного оленя, и содержащую гетерогенный по молекулярной массе (ММ) коллаген в количестве не менее 75%, в состав которого входит коллаген с ММ 2,0-20 кД в количестве не менее 80% и заключающегося в том, что шкуру северного оленя промывают водой, из промытой шкуры удаляют остатки мяса, жира и подкожной клетчатки, отмоченную шкуру подвергают обработке 4% раствором гидроксида натрия, с ткани удаляют волосяной покров и остатки подкожной клетчатки, полученное голье отмывают от щелочи, измельчают, обрабатывают раствором уксусной кислоты до рН 2,5-4,5 и гомогенизируют.The task is achieved by obtaining a collagen-containing product, which is a gel-like mass with a pH of 2.5-4.5, obtained from the skin of a reindeer, and containing collagen heterogeneous in molecular weight (MM) in an amount of at least 75%, which includes collagen with MM 2.0-20 kD in an amount of not less than 80% and consisting in the fact that the reindeer skin is washed with water, the remains of meat, fat and subcutaneous tissue are removed from the washed skin, the soaked skin is treated with 4% sodium hydroxide solution, s removing tissue t scalp and subcutaneous tissue residues obtained pelts are washed free of alkali, crushed, treated with acetic acid to pH 2.5-4.5 and homogenized.
Оленеводство в России является основной отраслью животноводства Крайнего Севера. Одним из основных продуктов, получаемым при убое оленей является шкура. Это ценное меховое и кожевенное сырье, из которого изготавливают одежду, обувь, высококачественную замшу, а также используют в качестве покрытия для жилищ оленеводов. Однако в настоящее время огромное количество шкур северного оленя из-за наличия в них большого количества дыр, являющихся результатом поражения шкур оводом выбраковывается. Невостребованное сырье в значительных количествах накапливается на убойных пунктах, портится и утилизируется в связи с чем, по данной продукции хозяйства несут существенные убытки. На основании вышеизложенного актуальное значение приобрела проблема переработки имеющихся запасов невостребованного коллагенсодержащего сырья (шкур северного оленя) с целью использования отходов оленеводческого производства.Reindeer husbandry in Russia is the main livestock industry in the Far North. One of the main products obtained by slaughtering deer is the skin. This is a valuable fur and leather raw material from which clothes, shoes, high-quality suede are made, and also used as a cover for reindeer herders' dwellings. However, at present, a huge number of reindeer skins are discarded due to the presence of a large number of holes in them, which are the result of hitting the skins. Significant quantities of unclaimed raw materials are accumulated at slaughterhouses, deteriorated and disposed of, which is why farms incur significant losses on these products. Based on the foregoing, the problem of processing existing stocks of unclaimed collagen-containing raw materials (reindeer skins) with the aim of using wastes from reindeer husbandry has acquired urgent importance.
Сущность изобретения включает.The invention includes.
Коллагенсодержащий продукт медицинского назначения, представляющего собой гелеобразную массу с рН 2,5-3,5, полученную из шкуры северного оленя с содержанием гетерогенного по молекулярной массе (ММ) коллагена не менее 75%, в состав которого входит коллаген с ММ 2,0-20 кДа в количестве не менее 80%.A collagen-containing medical product, which is a gel-like mass with a pH of 2.5-3.5, obtained from reindeer skin with a collagen heterogeneous molecular weight (MM) of at least 75%, which includes collagen with a MM of 2.0- 20 kDa in an amount of at least 80%.
Еще одним аспектом изобретения является то, что коллагенсодержащий продукт содержит фрагменты коллагена с ММ менее 2,0 кДа не более 10%.Another aspect of the invention is that the collagen-containing product contains collagen fragments with an MM of less than 2.0 kDa of not more than 10%.
Дополнительно коллагенсодержащий продукт содержит коллаген с ММ более 20 кДа не более 20%.Additionally, the collagen-containing product contains collagen with an MM of more than 20 kDa of not more than 20%.
Оптимально коллагенсодержащий продукт имеет зольность не более 0,5%.Optimally collagen-containing product has an ash content of not more than 0.5%.
Способ получения коллагенсодержащего продукта медицинского назначения, заключается в том, что пресно-сухую шкуру северного оленя промывают водой при температуре 18-26°С, из промытой шкуры удаляют остатки мяса, жира и подкожной клетчатки и отмоченную шкуру выдерживают в 4% растворе гидроксида натрия в течение 15-28 часов, из обработанной ткани удаляют волосяной покров и остатки подкожной клетчатки, полученное голье отмывают от щелочи проточной водой и измельчают до фарша, коллаген экстрагируют 3% раствором уксусной кислоты в течение 30-72 часов при периодическом перемешивании и полученную массу гомогенизируют.A method of obtaining a collagen-containing medical product is that the freshly dry reindeer skin is washed with water at a temperature of 18-26 ° C, the remaining meat, fat and subcutaneous tissue are removed from the washed skin and the soaked skin is kept in a 4% sodium hydroxide solution in within 15-28 hours, the skin is removed from the treated tissue and the remains of subcutaneous tissue, the obtained clay is washed from alkali with running water and ground to forcemeat, the collagen is extracted with 3% acetic acid solution for 30-72 hours with periodic stirring and the resulting mass is homogenized.
Еще одним вариантом способа получения коллагенсодержащего продукта является то, что пресно-сухую шкуру северного оленя промывают в течение 5-12 часов.Another variant of the method for producing a collagen-containing product is that the freshly dried reindeer skin is washed for 5-12 hours.
Еще одним вариантом способа получения является то, что щелочную обработку осуществляют при комнатной температуре при соотношении исходное сырье: 4% гидроксид натрия 1:15-30, при периодическом перемешивании.Another option for the production method is that the alkaline treatment is carried out at room temperature with a ratio of feedstock: 4% sodium hydroxide 1: 15-30, with periodic stirring.
Дополнительным аспектом изобретения по способу получения является то, что отмывку от щелочи проводят дробно, предварительно голье отмывают от остатков волоса и гнейста, измельчают его на куски размером 5×5 см и затем окончательно отмывают до рН воды.An additional aspect of the invention according to the production method is that washing from alkali is carried out fractionally, pre-wash the hair from the remnants of hair and gneist, grind it into pieces 5 × 5 cm in size and then finally wash to pH of water.
Еще одним вариантом способа получения является то, что экстракцию коллагена из измельченной до фарша ткани проводят при соотношении исходное сырье: 3% уксусная кислота 1:10-15.Another option for the production method is that the extraction of collagen from tissue minced to ground meat is carried out at a ratio of feedstock: 3% acetic acid 1: 10-15.
Разработанный способ позволяет приготовить коллагенсодержащий продукт из шкуры северного оленя названный “КОЛОЛЕНЬ”, который характеризуется свойствами, представленными в таблице. На продукт разработан проект Фармакопейной статьи предприятия (ФСП).The developed method allows you to prepare a collagen-containing product from the skin of a reindeer called “KNEE”, which is characterized by the properties shown in the table. A draft Pharmacopeia article of the enterprise (FSP) was developed for the product.
Разработка заявленного продукта дает возможность обеспечить российских предпринимателей недорогой, природной, полученной из экологически чистого сырья, белковой основой для изготовления различных изделий медицинского, косметического, пищевого и микробиологического назначения.The development of the claimed product makes it possible to provide Russian entrepreneurs with an inexpensive, natural, protein derived from environmentally friendly raw materials for the manufacture of various medical, cosmetic, food and microbiological products.
Заявленный способ иллюстрируется следующими примерами.The claimed method is illustrated by the following examples.
Пример 1. 1 кг пресно-сухой шкуры северного оленя промывают в воде с температурой 18°С в течение 5 часов. Из промытой шкуры удаляют остатки мяса, жира и подкожной клетчатки, а затем шкуру оставляют на 5 часов в воде при комнатной температуре. В емкость с мешалкой помещают отмоченную шкуру и заливают ее 15 л 4% раствора натрия гидроокиси (соотношение исходное сырье: 4% раствор гидроксида натрия 1:15). Содержимое емкости перемешивают в течение 15 минут, затем дальнейшее перемешивание содержимого емкости проводят с интервалом в 5 часов в течение 15 минут. Продолжительность процесса 15-20 часов. По истечении указанного времени жидкость из емкости утилизируют. Со шкуры вначале снимают волосяной покров вместе с эпидермисом, а затем удаляют остатки подкожной клетчатки до кровеносных сосудов. Приготовленное голье отмывают в проточной воде от остатков волоса и гнейста, измельчают на куски размером 5×5 см, а затем голье промывают в проточной воде при комнатной температуре 20°С в течение 1 часа до достижения сырьем рН 5,0. Куски голья измельчают на мясорубке с диаметром ячеек 3 мм, после чего полученный из голья фарш помещают в реактор и заливают его 10 л 3% раствора уксусной кислоты. Соотношение сырье: уксусная кислота составляет 1:10. Экстрагирование коллагена проводят при периодическом перемешивании по 10 минут в течение 30 часов с интервалом 5 часов при комнатной температуре. По окончании экстрагирования полученную массу помещают в микроизмельчитель ткани и подвергают гомогенизации в течение 3-10 минут. При фасовке под давлением гомогенат продавливают через сетчатый фильтр.Example 1. 1 kg of fresh-dry reindeer skins are washed in water at a temperature of 18 ° C for 5 hours. From the washed skin, the remains of meat, fat and subcutaneous tissue are removed, and then the skin is left for 5 hours in water at room temperature. The soaked skin is placed in a container with a stirrer and it is poured with 15 l of a 4% sodium hydroxide solution (ratio of feedstock: 4% sodium hydroxide solution 1:15). The contents of the container are mixed for 15 minutes, then further mixing of the contents of the container is carried out at intervals of 5 hours for 15 minutes. The duration of the process is 15-20 hours. After the specified time, the liquid from the tank is disposed of. First, the skin is removed from the skin along with the epidermis, and then the remnants of the subcutaneous tissue to the blood vessels are removed. The prepared clay is washed in running water from the remnants of hair and gneist, crushed into pieces 5 × 5 cm in size, and then the clay is washed in running water at room temperature 20 ° C for 1 hour until the raw material reaches a pH of 5.0. The pieces of minced meat are ground in a meat grinder with a mesh diameter of 3 mm, after which the minced meat obtained from the minced meat is placed in a reactor and 10 l of a 3% solution of acetic acid is poured into it. The ratio of raw materials: acetic acid is 1:10. The extraction of collagen is carried out with periodic stirring for 10 minutes for 30 hours with an interval of 5 hours at room temperature. At the end of the extraction, the resulting mass is placed in a micronizer, and subjected to homogenization for 3-10 minutes. When packing under pressure, the homogenate is forced through a strainer.
Характеристика полученного продукта представлена в таблице.The characteristics of the resulting product are presented in the table.
Полученный коллагенсодержащий продукт представляет собой гелеобразную массу с рН 2,5-4,5, содержащую гетерогенную по ММ коллаген в количестве не менее 75%, в состав которого входит коллаген с ММ 2,0-20 кДа не менее 80% и фрагменты коллагена с ММ менее 2,0 кДа не более 10% и коллаген с ММ более 20 кДа не более 10% и имеет зольность не более 0,5%.The resulting collagen-containing product is a gel-like mass with a pH of 2.5–4.5, containing at least 75% heterogeneous collagenous in molecular weight collagen in the amount of collagen with 2.0–20 kDa molecular mass of at least 80% and collagen fragments with MM less than 2.0 kDa is not more than 10% and collagen with MM more than 20 kDa is not more than 10% and has an ash content of not more than 0.5%.
Пример 2. 1 кг пресно-сухой шкуры северного оленя промывают в воде с температурой 26°С в течение 12 часов. Из промытой шкуры удаляют остатки мяса, жира и подкожной клетчатки, а затем шкуру оставляют на 10 часов в подогретой до 30°С воде. В емкость с мешалкой помещают отмоченную шкуру и заливают ее 30 л 4% раствора натрия гидроокиси. Соотношение сырье: раствор гидроксида натрия 1:30. Содержимое емкости перемешивают в течение 30 минут, затем дальнейшее перемешивание содержимого емкости проводят с интервалом 5 часов в течение 30 минут. Продолжительность процесса 28 часов. По истечении указанного времени жидкость из емкости утилизируют. Со шкуры вначале снимают волосяной покров вместе с эпидермисом, а затем удаляют остатки подкожной клетчатки до кровеносных сосудов. Приготовленное голье отмывают в проточной воде от остатков волоса и гнейста, измельчают на куски размером 10×10 см, а затем голье промывают в проточной воде при температуре 20°С в течение 4 часов до достижения сырьем рН 7,0. Куски голья подвергают измельчению на мясорубке с диаметром ячеек 4 мм, а затем полученный из голья фарш помещают в экстрактор и заливают 15 л 3% раствора уксусной кислоты. Соотношение сырье: уксусная кислота 1:15. Экстрагирование коллагена проводят при периодическом перемешивании по 15 минут в течение 72 часов с интервалом 7 часов. Температурный режим процесса экстрагирования 40°С. По окончании экстрагирования полученную массу помещают в микроизмельчитель ткани и подвергают гомогенизации в течение 10 минут.Example 2. 1 kg of fresh-dry reindeer skins are washed in water at a temperature of 26 ° C for 12 hours. Remains of meat, fat and subcutaneous tissue are removed from the washed skin, and then the skin is left for 10 hours in water heated to 30 ° C. In a container with a stirrer, place the soaked skin and fill it with 30 l of a 4% sodium hydroxide solution. The ratio of raw materials: sodium hydroxide solution is 1:30. The contents of the container are mixed for 30 minutes, then further mixing of the contents of the container is carried out at intervals of 5 hours for 30 minutes. The duration of the process is 28 hours. After the specified time, the liquid from the tank is disposed of. First, the skin is removed from the skin along with the epidermis, and then the remnants of the subcutaneous tissue to the blood vessels are removed. The prepared clay is washed in running water from the hair and gneist residues, crushed into pieces 10 × 10 cm in size, and then the clay is washed in running water at a temperature of 20 ° C for 4 hours until the raw material reaches a pH of 7.0. Chunks of minced meat are subjected to grinding in a meat grinder with a mesh diameter of 4 mm, and then minced minced meat is placed in an extractor and 15 l of a 3% solution of acetic acid are poured. The ratio of raw materials: acetic acid 1:15. The extraction of collagen is carried out with periodic stirring for 15 minutes for 72 hours with an interval of 7 hours. The temperature of the extraction process is 40 ° C. At the end of the extraction, the resulting mass is placed in a micronizer, and subjected to homogenization for 10 minutes.
Характеристика полученного продукта представлена в таблице. Полученный продукт имеет срок хранения 1 год при температуре 4-8°С в защищенном от света месте. Из продукта изготавливают медицинские противоожоговые пленки и губки, соответствующие требованиям ГФ.The characteristics of the resulting product are presented in the table. The resulting product has a shelf life of 1 year at a temperature of 4-8 ° C in a dark place. Medical anti-burn films and sponges that meet the requirements of the Global Fund are made from the product.
Источники информацииSources of information
1. RU №2214827 С1, 27.10.2003 г.1. RU No. 2214827 C1, 10.27.2003
2. US №5106949 А, 21.04.1992 г.2. US No. 5106949 A, 04/21/1992
3. US №4019956 А, 30.07.1977 г.3. US No. 4019956 A, 07/30/1977
4. Gallop P.M., Seifter S., “Preparation and properties of soluble collagen”, Method in enzymology, A.P. New York, 1963, v.6, pр.635-641.4. Gallop P.M., Seifter S., “Preparation and properties of soluble collagen”, Method in enzymology, A.P. New York, 1963, v. 6, pp. 635-641.
5. RU №2031597 С1, 27.03.1995 г.5. RU No. 2031597 C1, 03/27/1995
6. RU №2082416 C1, 27.06.1997 г.6. RU No. 2082416 C1, 06/27/1997
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003136947/15A RU2240818C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003136947/15A RU2240818C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2240818C1 true RU2240818C1 (en) | 2004-11-27 |
Family
ID=34311382
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003136947/15A RU2240818C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2240818C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2825463C1 (en) * | 2023-06-22 | 2024-08-26 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северный государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of producing xenogenic biomaterial from reindeer dermis collagen in form of film |
-
2003
- 2003-12-24 RU RU2003136947/15A patent/RU2240818C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2825463C1 (en) * | 2023-06-22 | 2024-08-26 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северный государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of producing xenogenic biomaterial from reindeer dermis collagen in form of film |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100347192C (en) | Collagen and method for producing same | |
| US5420248A (en) | Unpigmented fish skin, particularly from flat fish, as a novel industrial source of collagen, extraction method, collagen and biomaterial thereby obtained | |
| US4066083A (en) | Sterile surgical collagen product | |
| EP0479709B1 (en) | Method of preparing a collagen casing for food such as sausage | |
| CN107653291A (en) | The standby method for hiding Yak-skin Gelatin original albumen and collagen polypeptide of multi-step enzyme method coordinate system | |
| CN101570772B (en) | Method for preparing natural ossein | |
| KR101871395B1 (en) | Method for production collagen with high yield | |
| JPH06505982A (en) | Method for producing collagen, collagen produced by this method, and uses of collagen | |
| KR101760890B1 (en) | Preparing method of Collagen | |
| KR101489916B1 (en) | A method for extracting high purity collagen from animal byproducts | |
| JP4587711B2 (en) | Soluble fish collagen, method for producing the same and collagen cosmetic | |
| CN105481978B (en) | Preparation method of high-purity collagen | |
| Matinong et al. | Collagen Extraction from Animal Skin. Biology 2022, 11, 905 | |
| RU2240818C1 (en) | Collagen-containing preparation "kololen" for medicinal designation and method for its preparing | |
| DE1806008C3 (en) | Process for the production of porridges, dispersions and jellies with proteins of animal origin | |
| RU2353397C2 (en) | Bioabsorbable collagen matrix, method of production and application | |
| BR102016027429A2 (en) | COLLAGEN EXTRACTION PROCESS FROM CHICKEN BONE BONE CARTILAGE | |
| RU2825463C1 (en) | Method of producing xenogenic biomaterial from reindeer dermis collagen in form of film | |
| RU2259779C2 (en) | Method for production of collagen dispersion | |
| RU2743860C1 (en) | Method for obtaining collagen extract from broiler chicken legs | |
| Halson et al. | Extraction and characterization of collagen from cattle horns for potential wound healing | |
| AU2005201970B2 (en) | Collagen and method for producing same | |
| CN114163518A (en) | Method for extracting active collagen from porcine small intestine submucosa | |
| RU2173709C1 (en) | Method of preparing collagen from leather production waste | |
| CN117402234A (en) | Collagen extraction process for removing pepsin residues |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20071225 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20100127 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131225 |