RU2165254C2

RU2165254C2 - Pharmaceutical composition for treatment of viral diseases

Info

Publication number: RU2165254C2
Application number: RU99101827/14A
Authority: RU
Inventors: В.С. Смирнов; С.В. Куликов; В.Ю. Власов
Original assignee: Закрытое акционерное общество Медико-биологический научно-производственный комплекс "Цитомед"
Priority date: 1999-01-20
Filing date: 1999-01-20
Publication date: 2001-04-20

Abstract

FIELD: pharmaceutical industry. SUBSTANCE: composition contains 0.004-0.040 g 2- benzimidazol hydrochloride, 0.025-0.100 g ascorbic acid, and 0.0005-0.005 g L-glutamyl-L-tryptophan monosodium salt as immunomodulating component per 1 dosed therapeutic unit. EFFECT: simplified administration and increased efficiency in treatment of diseases caused by interferon-sensitive viruses. 6 dwg, 2 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к лекарственным препаратам, а именно к средствам для лечения заболеваний, вызываемых вирусами, чувствительными к интерферону. К таким заболеваниям относятся грипп, острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ), гепатиты A и B, герпес и др. The invention relates to medicine, in particular to medicines, and in particular to agents for treating diseases caused by viruses sensitive to interferon. Such diseases include influenza, acute respiratory viral infections (ARVI), hepatitis A and B, herpes, etc.

Известно использование в качестве антивирусного лекарственного препарата лейкоцитарного интерферона из донорской крови человека [М.Д. Машковский. Лекарственные средства, изд. 12-е М.: Медицина, 1993. Ч. 2. С. 389-391]. Лейкоцитарный интерферон в виде водного раствора применяют интраназально при лечении ОРВИ и гриппа. It is known to use leukocyte interferon from human blood as an antiviral drug [M.D. Mashkovsky. Medicines, ed. 12th M .: Medicine, 1993. Part 2. S. 389-391]. Leukocyte interferon in the form of an aqueous solution is used intranasally in the treatment of acute respiratory viral infections and influenza.

Также известен рекомбинантный α- интерферон (реаферон), который используется для лечения вирусных инфекций в виде инъекций по 40 000 ME [Н.Г. Перминов и др. Реаферон. Кольцово, 1993. С. 69-72]. Also known is recombinant α-interferon (reaferon), which is used to treat viral infections in the form of injections of 40,000 ME [N.G. Perminov and others Reaferon. Koltsovo, 1993. S. 69-72].

Как лейкоцитарный интерферон, так и реаферон сокращают продолжительность болезни и снижают число осложнений, сопровождающих вирусные инфекции. Однако экзогенный интерферон любого происхождения быстро теряет активность с момента изготовления, из-за чего установленная доза может оказаться неэффективной. Кроме того, в случае применения экзогенного интерферона часто наблюдаются симптомы непереносимости, а именно: озноб, аллергические реакции, тромбоцитопения и т. п. [Лечение интерфероном. Доклад Научной группы ВОЗ. Серия технических докладов 676. Женева, 1984]. Both leukocyte interferon and reaferon shorten the duration of the disease and reduce the number of complications accompanying viral infections. However, exogenous interferon of any origin quickly loses activity from the moment of manufacture, which is why the established dose may be ineffective. In addition, in the case of exogenous interferon, symptoms of intolerance are often observed, namely: chills, allergic reactions, thrombocytopenia, etc. [Treatment with interferon. Report of the WHO Scientific Group. Series of technical reports 676. Geneva, 1984].

Известен индуктор эндогенного интерферона гидрохлорид 2-бензилбензимидазола (дибазол) - Фармакопейная статья 70.421.16. Дибазол индуцирует достоверный прирост циркулирующего эндогенного интерферона; он вызывает снижение выраженности симптоматики вирусных заболеваний, сокращает сроки лечения и не имеет побочных эффектов [Ф.И. Ершов и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1991. N 10. С. 42-45.]
Недостатком дибазола (и других индукторов эндогенного интерферона, таких как камедон, двухспиральная ДНК и др.) является тот факт, что вслед за индукцией интерферона в организме наступает фаза гипореактивности (рефрактерности); повторное введение дибазола в организм, находящийся в стадии рефрактерности, не сопровождается синтезом интерферона. Явление рефрактерности снижает эффективность применения дибазола как индуктора интерферона [Stringfellow D. A. et. aL. // J. Infect. Dis. 1977 135. P. 540-541; Tsai S.C., // AppeL V.J. J. Gen. Virol. 1983.219. P. 851-853]. Отмена состояния рефрактерности достигается применением пептидов тимуса [Носик Н.Н. и др. // Вопр. вирусологии. 1985. Т. 30. N 1. С. 64-67]. К числу таких пептидов относится дипептид L-глутамил-L-триптофан.Known inducer of endogenous interferon 2-benzylbenzimidazole hydrochloride (dibazole) - Pharmacopoeia article 70.421.16. Dibazole induces a significant increase in circulating endogenous interferon; it causes a decrease in the severity of the symptoms of viral diseases, reduces treatment time and has no side effects [F.I. Ershov et al. // Journal. microbiology, epidemiology and immunobiology. 1991. N 10. P. 42-45.]
The disadvantage of dibazole (and other inducers of endogenous interferon, such as comedone, double-stranded DNA, etc.) is the fact that following the induction of interferon in the body, a phase of hyporeactivity (refractoriness) occurs; re-introduction of dibazole into the body, which is in the stage of refractoriness, is not accompanied by the synthesis of interferon. The phenomenon of refractoriness reduces the effectiveness of dibazole as an inducer of interferon [Stringfellow DA et. aL. // J. Infect. Dis. 1977 135. P. 540-541; Tsai SC, // AppeL VJJ Gen. Virol. 1983.219. P. 851-853]. Cancellation of the refractory state is achieved by the use of thymus peptides [Nosik N.N. and others // Issues. virology. 1985. T. 30. N 1. S. 64-67]. Among these peptides is the dipeptide L-glutamyl-L-tryptophan.

Наиболее близкой по совокупности признаков и терапевтическому эффекту к заявляемой композиции является фармацевтическая композиция для лечения гриппа и ОРВИ, включающая индуктор эндогенного интерферона - дибазол, иммуномодулятор дипептид L-глутамил-L-триптофан и антиоксидант - аскорбиновую кислоту [патент РФ по заявке N 95116663/14 М.кл. А 61 К 31/00, опубл. 10.10.97. БИ N 28]. Все компоненты известной композиции взяты отдельно и принимаются по следующей схеме: дибазол перорально по 0.02 г три раза в сутки с 1-го по 3-й день заболевания; дипептид L-глутамил-L-триптофан (основание) - тимоген - в виде 0.01% водного раствора интраназально по 0.3 мл три раза в сутки со 2-го по 4-й дни заболевания; аскорбиновая кислота - перорально по 0.1 г 3 раза в сутки с 1-го по 4-й день заболевания. The closest in combination of features and therapeutic effect to the claimed composition is a pharmaceutical composition for the treatment of influenza and acute respiratory viral infections, including an endogenous interferon inducer, dibazole, an immunomodulator dipeptide L-glutamyl-L-tryptophan and an antioxidant ascorbic acid [RF patent application N 95116663/14 M.cl. A 61 K 31/00, publ. 10/10/97. BI N 28]. All components of the known composition are taken separately and are taken according to the following scheme: dibazole orally at 0.02 g three times a day from the 1st to the 3rd day of the disease; dipeptide L-glutamyl-L-tryptophan (base) - thymogen - in the form of a 0.01% aqueous solution, 0.3 ml intranasally three times a day from the 2nd to 4th days of the disease; ascorbic acid - orally, 0.1 g 3 times a day from the 1st to the 4th day of the disease.

Указанная композиция при правильном приеме сокращает продолжительность заболевания, облегчает течение болезни, снижает число осложнений и эффективно также для профилактики ОРВИ и гриппа. The specified composition when taken correctly reduces the duration of the disease, facilitates the course of the disease, reduces the number of complications and is also effective for the prevention of acute respiratory viral infections and flu.

Однако практика лечения гриппа и ОРВИ указанной композицией показала, что раздельное применение ее компонентов затруднительно для многих больных. Несоблюдение же правил приема приводит к снижению эффективности лечения. Кроме того, гиперемированные и отечные слизистые носа при ОРВИ и гриппе недостаточно полно усваивают иммуномодулятор тимоген. However, the practice of treating influenza and acute respiratory viral infections with this composition has shown that the separate use of its components is difficult for many patients. Non-compliance with the rules of admission leads to a decrease in the effectiveness of treatment. In addition, hyperemic and edematous nasal mucous membranes with ARVI and influenza do not fully absorb the immunogen modulator thymogen.

Задача, решаемая в заявляемом изобретении, - это создание фармацевтической композиции, собранной в одну лекарственную форму для упрощения ее применения и повышения эффективности использования. The problem to be solved in the claimed invention is the creation of a pharmaceutical composition, assembled in one dosage form to simplify its use and increase the efficiency of use.

Указанная цель достигается тем, что в фармацевтической композиции для лечения вирусных инфекций, включающей гидрохлорид 2-бензидбензимидазола, аскорбиновую кислоту и иммуномодулятор дипептид, в качестве иммуномодулятора используют мононатриевую соль L-глутамил-L- триптофана, при следующем соотношении компонентов в одной дозированной единице, г):
Гидрохлорид 2-бензилбенимидазола - 0.004-0.040
Аскорбиновая кислота - 0.025 -0.100
Мононатриевая соль L-глутамил-L-триптофана - 0.0005 - 0.005
Фармацевтическая композиция может быть расфасована в желатиновые капсулы или выпускаться в виде таблеток или таблеток, покрытых оболочкой.This goal is achieved by the fact that in the pharmaceutical composition for the treatment of viral infections, including 2-benzidobenzimidazole hydrochloride, ascorbic acid and the immunomodulator dipeptide, the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan is used as the immunomodulator, with the following ratio of components in one dosage unit, g ):
2-benzylbenimidazole hydrochloride - 0.004-0.040
Ascorbic acid - 0.025-0.100
Monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan - 0.0005 - 0.005
The pharmaceutical composition can be packaged in gelatin capsules or available in the form of tablets or coated tablets.

Гидрохлорид 2-бензилбензимидазола (дибазол) выпускается промышленностью (ФС 70.421.16), так же как аскорбиновая кислота (ФС 79.301.15). Мононатриевая соль L-глутамил-L-триптофана синтезирована как, как это описано в нашем патенте РФ по заявке N 96116461/04, МКИ C 07 K 1/06, положительное решение от 26.03.97 г. 2-Benzylbenzimidazole hydrochloride (dibazole) is commercially available (FS 70.421.16), as well as ascorbic acid (FS 79.301.15). The monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan is synthesized as described in our patent of the Russian Federation on application N 96116461/04, MKI C 07 K 1/06, positive decision of 03/26/97.

Гидрохлорид 2-бензилбензимидазола (дибазол) и аскорбиновая кислота предназначены для перорального применения. Поскольку ни L- глутамил-L-триптофан основание, ни его мононатриевая соль не применялись перорально, было изучено взаимодействие мононатриевой соли L- глутамил-L-триптофана с нативным желудочным соком человека. С этой целью 2 мг указанной соли растворяли в 1 мл желудочного сока. Раствор выдерживали при 37^oC в течение 30 мин, 2 час и 24 час, после чего растворы исследовали хроматографически по методике, описанной в ВФС 42-1981-90. Для сравнения были получены хроматограммы мононатриевой соли L-глутамил-L-триптофана и L- триптофана. Использовалась колонка длиной 250 мм с внутренним диаметром 4.6 мм, набитая октадодецилсиликагелем. Элюэнт - смесь 15 мас.% ацетонитрила с 85 мас.% водного раствора трифторуксусной кислоты концентрации 0.05 мас.% Скорость элюции - 1 мл/мин, режим - изократический. Идентификация веществ - спектрофотометрическая.2-Benzylbenzimidazole hydrochloride (dibazole) and ascorbic acid are intended for oral use. Since neither L-glutamyl-L-tryptophan base nor its monosodium salt was used orally, the interaction of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan with human native gastric juice was studied. To this end, 2 mg of this salt was dissolved in 1 ml of gastric juice. The solution was kept at 37 ^° C for 30 minutes, 2 hours and 24 hours, after which the solutions were examined chromatographically by the procedure described in VFS 42-1981-90. For comparison, chromatograms of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan and L-tryptophan were obtained. A column 250 mm long with an inner diameter of 4.6 mm packed with octadodecyl silica gel was used. The eluent is a mixture of 15 wt.% Acetonitrile with 85 wt.% Aqueous solution of trifluoroacetic acid at a concentration of 0.05 wt.%. The elution rate is 1 ml / min, the mode is isocratic. Identification of substances - spectrophotometric.

На фиг. 1 представлена хроматограмма свежеприготовленного водного раствора мононатриевой соли L- глутамил-L-триптофана. Пик t=5.329 мин отвечает 98.44% соли. In FIG. 1 is a chromatogram of a freshly prepared aqueous solution of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan. The peak t = 5.329 min corresponds to 98.44% salt.

На фиг. 2-4 представлены хроматограммы соли, растворенной в желудочном соке. После инкубации раствора при температуру 37^oC в течение 30 мин (фиг. 2) 32.63 мас.% соли остается неразложившейся (пик t= 3.405 мин); пик t=2.901 мин соответствует триптофану, появившемуся в результате взаимодействия соли с желудочным соком. После выдержки раствора при 37^oC в течение 2 час (фиг. 3) раствор содержит 30.4% неразложившейся соли (пик t=3.412 мин). Даже после 24-часовой выдержки раствор содержит 11.42% неразложившейся соли (фиг. 4, пик t=3.426 мин).In FIG. 2-4 are chromatograms of salt dissolved in gastric juice. After incubating the solution at a temperature of 37 ^o C for 30 min (Fig. 2) 32.63 wt.% Salt remains undecomposed (peak t = 3.405 min); peak t = 2.901 min corresponds to tryptophan, resulting from the interaction of salt with gastric juice. After holding the solution at 37 ^o C for 2 hours (Fig. 3), the solution contains 30.4% undecomposed salt (peak t = 3.412 min). Even after 24 hours exposure, the solution contains 11.42% undecomposed salt (Fig. 4, peak t = 3.426 min).

На фиг. 5 представлена хроматограмма триптофана (раствор 1 мг в 1 мл воды); на фиг. 6 - хроматограмма желудочного сока. In FIG. 5 presents a chromatogram of tryptophan (1 mg solution in 1 ml of water); in FIG. 6 is a chromatogram of gastric juice.

Таким образом, эксперимент in vitro показывает, что за время пребывания в желудке 30% мононатриевой соли L-глутамил-L-триптофана может быть усвоено организмом. В силу этого доза иммуномодулятора в заявляемой композиции была увеличена по сравнению с дозой в композиции по прототипу. Thus, an in vitro experiment shows that during the stay in the stomach 30% of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan can be absorbed by the body. Due to this, the dose of the immunomodulator in the claimed composition was increased compared with the dose in the composition of the prototype.

Исследования токсичности мононатриевой соли L-глутамил-L- триптофана показали, что 10000-кратный избыток ее по сравнению с максимальным заявляемым количеством не токсичен. Studies of the toxicity of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan showed that a 10,000-fold excess of it compared with the maximum claimed amount is non-toxic.

Пример 1. В смеситель кипящего слоя загружают 40 г порошка 2- бензилбензимидазола гидрохлорида, 250 г порошка аскорбиновой кислоты и 10 г L-глутамил-L-триптофана мононатриевой соли и перемешивают в течение 2 мин. Смесь перегружают в дозатор из которого расфасовывают в желатиновые капсулы по 30 мг смеси. Example 1. 40 g of 2-benzylbenzimidazole hydrochloride powder, 250 g of ascorbic acid powder and 10 g of L-glutamyl-L-tryptophan monosodium salt were charged into a fluidized bed mixer and stirred for 2 minutes. The mixture is loaded into a dispenser from which 30 mg of the mixture is packaged in gelatin capsules.

Пример 2. Смешение ведут как в примере 1, но смешивают 400 г порошка 2-бензилбензимидазола гидрохлорида, 1000 г порошка аскорбиновой кислоты и 50 г L-глугамил-L-триптофана мононатриевой соли. Расфасовку ведут как в примере 1, но загружают по 145 мг смеси. Example 2. Mixing is carried out as in example 1, but 400 g of a powder of 2-benzylbenzimidazole hydrochloride, 1000 g of a powder of ascorbic acid and 50 g of L-glugamyl-L-tryptophan monosodium salt are mixed. Packing is carried out as in example 1, but load 145 mg of the mixture.

Пример 3. Смешение ведут как в примере 1, но смешивают 200 г порошка 2-бензилбензимидазола гидрохлорида, 500 г порошка аскорбиновой кислоты и 5 г L-глутамил-L-триптофана мононатриевой соли. Расфасовку ведут как в примере 1, но загружают по 70.5 мг смеси. Example 3. Mixing is carried out as in example 1, but 200 g of a powder of 2-benzylbenzimidazole hydrochloride, 500 g of ascorbic acid powder and 5 g of L-glutamyl-L-tryptophan monosodium salt are mixed. Packing is carried out as in example 1, but loaded with 70.5 mg of the mixture.

Для исследования эффекта индукции эндогенного интерферона заявляемая композиция была растворена в воде и раствор вводили внутрижелудочно белым мышам с помощью калиброванного металлического зонда. Вводимая доза в объеме 0.1 мл содержала 1 мг/кг дибазола, 2 мг/кг аскорбиновой кислоты и 10 мкг/кг мононатриевой соли L-глутамил-L-триптофана. Препарат вводили 2 раза в день в течение 4 дней. Контрольным животным вводили аликвотное количество изотонического раствора хлорида натрия. Содержание эндогенного интерферона определяли на 2-е, 3-и и 4-е сутки от начала опыта в сыворотке крови и ткани легкого. To study the effect of induction of endogenous interferon, the claimed composition was dissolved in water and the solution was administered intragastrically to white mice using a calibrated metal probe. The administered dose in a volume of 0.1 ml contained 1 mg / kg of dibazole, 2 mg / kg of ascorbic acid, and 10 μg / kg of the monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan. The drug was administered 2 times a day for 4 days. Aliquots of an isotonic sodium chloride solution were injected into control animals. The content of endogenous interferon was determined on the 2nd, 3rd and 4th day from the start of the experiment in blood serum and lung tissue.

Результаты представлены в табл. 2
Как видно из представленных данных, пероральное применение заявляемой композиции сопровождается отчетливой индукцией эндогенного интерферона, проявляющейся нарастанием титров в сыворотке крови и ткани легкого. Таким образом, показано, что при сочетанном применении компонентов композиции проявляется индукторный эффект, так же как и при раздельном.The results are presented in table. 2
As can be seen from the data presented, oral administration of the claimed composition is accompanied by a clear induction of endogenous interferon, manifested by an increase in titers in blood serum and lung tissue. Thus, it is shown that with the combined use of the components of the composition, an inductor effect is manifested, as well as with a separate one.

Использование композиции в одной лекарственной форме упрощает ее применение, исключает нарушения правил приема, снижающие эффективность лечения, а пероральное введение иммуномодулятора исключает влияние состояния слизистой оболочки носа и позволяет повысить точность дозирования иммуномодулятора. The use of the composition in one dosage form simplifies its use, eliminates violations of the rules of admission, reducing the effectiveness of treatment, and oral administration of an immunomodulator eliminates the influence of the condition of the nasal mucosa and improves the accuracy of dosage of the immunomodulator.

Claims

A pharmaceutical composition for treating viral diseases, including 2-benzylbenzimidazole hydrochloride, ascorbic acid and a dipeptide immunomodulator, characterized in that the composition contains L-glutamyl-L-tryptophan monosodium salt in the following ratio of components in one dosage unit, g:
2-benzylbenzimidazole hydrochloride - 0.004 - 0.040
Ascorbic acid - 0.025 - 0.100
Monosodium salt of L-glutamyl-L-tryptophan - 0.0005 - 0.005