LU81836A1

LU81836A1 - PROCESS FOR THE PREPARATION OF KERATIN HYDROLYSATES AND OLIGOPEPTIDE COMPOSITION OBTAINED BY THIS PROCESS

Info

Publication number: LU81836A1
Application number: LU81836A
Authority: LU
Inventors: J Arnaud; P Bore
Original assignee: Oreal
Priority date: 1979-10-29
Filing date: 1979-10-29
Publication date: 1981-06-04
Also published as: JPS5673095A; AU6380780A; GB2061956A; DE3040748A1; GB2061956B; AU543085B2

Description

PROCEDE DE PREPARATION D'HYDROLYSATS DE KERATINE ET COMPOSITION OLIGOPEPTIDIQUE OBTENUE PAR CE PROCEDE.PROCESS FOR THE PREPARATION OF KERATIN HYDROLYSATES AND OLIGOPEPTIDE COMPOSITION OBTAINED BY THIS PROCESS.

La présente invention a trait à un procédé de préparation de composition oligopeptidique à partir d'un matériau 5 kératinique que l'on soumet à une hydrolyse enzymatique.The present invention relates to a process for the preparation of an oligopeptide composition from a keratinous material which is subjected to enzymatic hydrolysis.

On sait que les hydrolysats de kératine et, en particulier, les hydrolysats contenant une proportion majeure d'oligopeptides ont un grand intérêt dans l'industrie cosmétique pour leur action sur l'état de surface du cheveu ou sur la 10 peau et dans l'industrie alimentaire. Cependant, l'intérêt de ces compositions est essentiellement fonction de leur contenu en oligopeptides, c'est-à-dire que le matériau protéinique constitué par la kératine servant de matière première doit être fractionné en chaînes oligopeptidiques contenant plusieurs 15 acides aminés mais ayant un poids moléculaire suffisamment faible pour être hydrosoluble. L'intérêt des hydrolysats de kératine est donc d'autant plus grand que ces hydrolysats contiennent peu d'acides aminés libres. Par ailleurs, on a constaté qu'il était très intéressant de conserver dans les composi-20 tions oligopeptidiques les liaisons cystine existant dans la kératine, la cystine étant plus énergétique sous forme d'oligopeptides que sous forme d'acide aminé.It is known that keratin hydrolysates and, in particular, hydrolysates containing a major proportion of oligopeptides are of great interest in the cosmetic industry for their action on the surface state of the hair or on the skin and in the skin. food industry. However, the advantage of these compositions is essentially a function of their oligopeptide content, that is to say that the protein material consisting of keratin serving as raw material must be fractionated into oligopeptide chains containing several amino acids but having a molecular weight low enough to be water soluble. The advantage of keratin hydrolysates is therefore all the greater as these hydrolysates contain few free amino acids. Furthermore, it has been found that it is very advantageous to preserve in the oligopeptide compositions the cystine bonds existing in keratin, the cystine being more energetic in the form of oligopeptides than in the form of amino acid.

Dans l'état de la technique, on a proposé de préparer des hydrolysats de kératine soit à partir de matières premières 25 kératiniques non dégradées, par ëxemple les soies de porc, les plumes de volaille ou la corne, soit à partir de produits résiduaires fibreux et de déchets kératiniques, par exemple les sous-produits de charcuterie et de tannerie. On soumet ces » kératines ou dérivés kératiniques soit à des hydrolyses chimi-30 ques alcalines ou acides, partielles afin de limiter la production d'acides aminés libres, soit à des hydrolyses enzymatiques.In the state of the art, it has been proposed to prepare keratin hydrolysates either from non-degraded keratin raw materials, for example pig bristles, poultry feathers or horn, or from fibrous residual products and keratinous waste, for example by-products from charcuterie and tanning. These keratins or keratin derivatives are subjected either to partial alkaline or acidic chemical hydrolysis in order to limit the production of free amino acids, or to enzymatic hydrolysis.

On sait que les enzymes protéolytiques usuels (pepsine, trypsine, chymotrypsine, papaïne) n'ont aucune activité notable sur les kératines naturelles non dégradées c'est-à-dire 35 les kératines n'ayant subi aucun traitement chimique, industriel ou cosmétique. Même les enzymes décrits comme d'éventuels kéra-tinolytiques, comme par exemple les enzymes extraits des différentes souches de "Keratomices" (pronase, kératinase, M'zyme, / PSF 2019) ont, en fait, des activités très réduites sinon nulLejs 40 sur les principaux matériaux kératiniques naturels ; par exen^-//It is known that the usual proteolytic enzymes (pepsin, trypsin, chymotrypsin, papain) have no notable activity on natural non-degraded keratins, that is to say keratins which have not undergone any chemical, industrial or cosmetic treatment. Even the enzymes described as possible kera-tinolytics, such as for example the enzymes extracted from the different strains of "Keratomices" (pronase, keratinase, M'zyme, / PSF 2019) have, in fact, very reduced activities if not nullLejs 40 on the main natural keratin materials; for example ^ - //

VV

2 pie les rendements de digestion des cheveux humains soumis à de tels enzymes sont inférieurs à 10 %. Il est certain que les déchets et sous-produits kératiniques industriels peuvent être digérés par des enzymes protéolytiques ou kératinolytiques 5 mais, dans ce cas, cela provient du fait que le matériau kéra-tinique de départ est dégradé et que la plupart des liaisons cystiniques de la kératine ont disparu : il en résulte que les hydrolysats obtenus ne contiennent pratiquement pas de cystine. En fait, toutes les hydrolyses enzymatiques, qui ont 10 une efficacité non négligeable, sont des hydrolyses qui ou bien s'appliquent sur une matière première, dans laquelle les liaisons cystine ont déjà disparu en grande partie, ou bien s'appliquent sur un matériau auquel on fait subir un prétraitement ayant pour but de faire disparaître la majorité des liaisons 15 cystine. Dans tous les autres cas, l'action enzymatique sur la kératine a un rendement pratiquement nul.2 pie the digestion yields of human hair subjected to such enzymes are less than 10%. It is certain that industrial keratin waste and by-products can be digested by proteolytic or keratinolytic enzymes 5 but, in this case, this is due to the fact that the starting keratin material is degraded and that most of the cystinic bonds of the keratin has disappeared: the result is that the hydrolysates obtained contain practically no cystine. In fact, all the enzymatic hydrolyses, which have a not insignificant efficiency, are hydrolyses which either apply to a raw material, in which the cystine bonds have already largely disappeared, or else apply to a material which is subjected to a pretreatment intended to remove the majority of cystine bonds. In all other cases, the enzymatic action on keratin has a practically zero yield.

Dans l'état de la technique, on a également proposé, pour obtenir des hydrolysats de kératine, de réaliser des hydrolyses chimiques acides ou alcalines.Les hydrolyses acides 20 sont difficilement maîtrisables et les hydrolysats obtenus sont riches en acides aminés libres même lorsque les solutions acides sont peu concentrées : le rendement en oligopeptides est donc faible.-------------------------——----------------- 25 --------------------------------Les hydrolyses alcalines sont pratiquées en présence d'hydroxydes alcalins ou d'hydroxydes d'ammonium quaternaire et entraînent la destruction de certains acides aminés et, en particulier, de la cystine* : il y a for- * mation de H2S, de lanthionine, de lysinoalanine et de cystéine *, 30 Les hydrolysats ainsi obtenus sont donc encore très pauvres en cystine.In the state of the art, it has also been proposed, in order to obtain keratin hydrolysates, to carry out acid or alkaline chemical hydrolyses. The acid hydrolyses are difficult to control and the hydrolysates obtained are rich in free amino acids even when the solutions acids are not very concentrated: the yield of oligopeptides is therefore low .-------------------------——---------- ------- 25 -------------------------------- Alkaline hydrolyses are performed in the presence of hydroxides alkaline or quaternary ammonium hydroxides and lead to the destruction of certain amino acids and, in particular, of cystine *: there is * formation of H2S, lanthionine, lysinoalanine and cysteine *, 30 Hydrolysates thus obtained are therefore still very poor in cystine.

On constate donc que, dans l'état de la technique, aucune méthode de préparation d*hydrolysats de kératine ne permet d'obtenir des oligopeptides contenant une concentration impor-35 tante en cystine. Ou bien les hydrolysats ont un faible rendement en oligopeptides et comportent un grand nombre d'acides aminés libres, ou bien les hydrolysats ne contiennent pratiquement plus de cystine. ,It can therefore be seen that, in the state of the art, no method for the preparation of keratin hydrolysates makes it possible to obtain oligopeptides containing an important concentration of cystine. Either the hydrolysates have a low yield of oligopeptides and contain a large number of free amino acids, or else the hydrolysates contain practically no more cystine. ,

La présente invention a pour but de proposer un procédé AI ^ de préparation de composition oligopeptidique à forte concenjjAThe object of the present invention is to propose an AI ^ process for the preparation of an oligopeptide composition with a high concentration.

3 * tration en cystine, ce procédé comportant une hydrolyse enzymatique de la kératine après que celle-ci ait subi un prétraitement ne détruisant pas la cystine. Dans l'état de la technique, tous les prétraitements appliqués aux matériaux kératini-5 ques pour permettre les actions enzymatiques étaient des prétraitements destructeurs de cystine. A cet égard, on peut citer les procédés par oxj'dation qui transforment de façon irréversible la cystine en acide cystéique, les procédés de traitement au sulfite, qui réduisent partiellement la cystine en 10 cystéine avec formation en quantité équivalente de S-sulfocys-téi'ne, les procédés par réduction aux thiols, qui transforment la cystine en cystéine mais également en lanthionine (avec perte de soufre) et en disulfure mixte. Dans tous les cas, les hydrolysats enzymatiques obtenus sont, bien entendu, pauvres 15 en cystine puisque l'action des enzymes avec un bon rendement était considérée dans l'état de la technique comme essentiellement incompatible avec la présence de liaisons cystine dans le matériau à hydrolyser.3 * tration into cystine, this process comprising an enzymatic hydrolysis of keratin after it has undergone a pretreatment which does not destroy the cystine. In the state of the art, all the pretreatments applied to keratinous materials to allow the enzymatic actions were pretreatments destroying cystine. In this regard, there may be mentioned the oxidation processes which irreversibly transform cystine into cysteic acid, the sulfite treatment methods, which partially reduce cystine to cysteine with formation in equivalent amount of S-sulfocys-tei 'ne, the thiol reduction processes, which transform cystine into cysteine but also into lanthionine (with loss of sulfur) and mixed disulfide. In all cases, the enzymatic hydrolysates obtained are, of course, poor in cystine since the action of the enzymes with good yield was considered in the prior art to be essentially incompatible with the presence of cystine bonds in the material to be hydrolyze.

Selon l'invention, on a découvert, de façon surprenante, 20 que l'on pouvait obtenir une action d'hydrolyse enzymatique avec un bon rendement sans détruire/fesa£ia?sons cystine initialement présentes dans le matériau kératinique soumis à l'hydrolyse, à condition de soumettre préalablement le matériau à hydrolyser à une action de sensibilisation réalisée soit 25 avec des agents rupteurs de liaisons hydrogène, soit avec des solvants polaires qui dissolvent les ciments interfibrilaires existant entre les paquets de fibriles constitués de micro-. fibriles elles-mêmes formées des chaînes protéiniques de la kératine, soit encore, dans le cas où le matériau kératinique 30 comporte une cuticule enveloppant le produit kératinique proprement dit, avec un agent décuticulant.According to the invention, it has surprisingly been found that it is possible to obtain an enzymatic hydrolysis action with good yield without destroying the cystine sounds initially present in the keratin material subjected to the hydrolysis , provided that the material to be hydrolyzed is subjected beforehand to an awareness-raising action carried out either with hydrogen bonding agents or with polar solvents which dissolve the interfibril cements existing between the bundles of fibrils made up of micro-. fibrils themselves formed protein chains of keratin, that is, in the case where the keratin material 30 comprises a cuticle enveloping the keratin product itself, with a decuticulating agent.

Dans tous les cas, le traitement de sensibilisation proposé selon l'invention n'a aucune action sensible au niveau des liaisons cystine de la kératine, de sorte que les hydroly-35 sats obtenus comportent toujours plus de 30 % des liaisons cystine existant dans le matériau kératinique de départ. Au contraire, dans les compositions analogues de l'état de la technique, riches en oligopeptides, on ne retrouvait jamais / plus de 10 % des liaisons cystine du matériau kératinique de /y 40 départ. /iy 4In all cases, the sensitization treatment proposed according to the invention has no significant action at the level of the cystine bonds of keratin, so that the hydrolyzates obtained always comprise more than 30% of the cystine bonds existing in the starting keratin material. On the contrary, in analogous compositions of the prior art, rich in oligopeptides, never / more than 10% of the cystine bonds of the starting keratin material were found. / iy 4

La présente invention a donc pour objet un nouveau procédé de préparation d’une composition oligopeptidique par hydrolyse d'un matériau kératinique, ce procédé comportant un traitement par des enzymes protéolytiques et/ou kératinolyti-5 ques, caractérisé par le fait qu'avant le traitement enzymatique, on soumet le matériau kératinique à un traitement de sensibilisation permettant l'action enzymatique ultérieure et ne détruisant pratiquement pas les liaisons cystine existant initialement dans le matériau kératinique traité.The present invention therefore relates to a new process for the preparation of an oligopeptide composition by hydrolysis of a keratin material, this process comprising a treatment with proteolytic and / or keratinolytic enzymes, characterized in that before the enzymatic treatment, the keratin material is subjected to an sensitization treatment allowing the subsequent enzymatic action and practically not destroying the cystine bonds initially existing in the keratin material treated.

10 Dans un premier mode de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, le traitement de sensibilisation est réalisé au moyen d'au moins un agent de sensibilisation pris dans le grou-* pe formé par les agents rupteurs de liaisons hydrogène et les solvants polaires. Dans le cas où l'on utilise un agent rupteur 15 de liaisons hydrogène, ledit agent peut avantageusement être pris dans le groupe formé par les électrolytes et l'urée ou ses dérivés, ces agents agissant en milieu aqueux à une concentration supérieure ou égale à 8 moles par litre. Parmi les électrolytes particulièrement intéressants, il convient de ci-20 ter le bromure de lithium. Quand l'agent de sensibilisation est constitué d'un ou plusieurs solvants polaires, on préfère que ce ou ces solvants constitue(nt) au moins 75 % en poids du milieu où s'effectue le traitement de sensibilisation. Parmi les solvants particulièrement utilisables, il convient de citer la 25 diméthyl-formamide et le méthanol.In a first embodiment of the method according to the invention, the sensitization treatment is carried out by means of at least one sensitizing agent taken from the group formed by the agents which break hydrogen bonds and the solvents. polar. In the case where a hydrogen bond breaking agent is used, said agent can advantageously be taken from the group formed by electrolytes and urea or its derivatives, these agents acting in an aqueous medium at a concentration greater than or equal to 8 moles per liter. Among the particularly interesting electrolytes, lithium bromide should be mentioned below. When the sensitizing agent consists of one or more polar solvents, it is preferred that this or these solvents constitute (s) at least 75% by weight of the medium in which the sensitization treatment is carried out. Among the solvents which can be particularly used, mention should be made of dimethylformamide and methanol.

Lorsque le traitement de sensibilisation est réalisé au moyen d'au moins un agent rupteur de liaisons hydrogène et/ou d'au moins un solvant polaire, ledit traitement s'effectue, de préférence, pendant un temps supérieur à 30mm et à une tempé-30 rature comprise entre la température ambiante et la température de reflux du milieu à pression atmosphérique.When the sensitization treatment is carried out using at least one hydrogen bond-breaking agent and / or at least one polar solvent, said treatment is preferably carried out for a time greater than 30 mm and at a temperature 30 rature between room temperature and the reflux temperature of the medium at atmospheric pressure.

Lorsque le matériau kératinique, qui constitue la matière première, est constitué de kératines à cuticule, le traitement de sensibilisation peut également être réalisé au moyen d'au 35 moins un agent décuticulant pris dans le groupe formé par d'une part, les ultra-sons et d'autre part, l'acide formique à une concentration supérieure à 90 % en poids dans le milieu de traitement. Si l'on utilise comme agent décuticulant l'acide for- / mique, le traitement de sensibilisation s'effectue, de préfé-V 40 rence, pendant un temps supérieur à 30mn et à une température?// 5 comprise entre la température ambiante et la température de reflux à la pression atmosphérique.When the keratin material, which constitutes the raw material, consists of cuticle keratins, the sensitization treatment can also be carried out by means of at least one decuticulating agent taken from the group formed on the one hand, the ultra- on the other hand, formic acid at a concentration greater than 90% by weight in the treatment medium. If formic acid is used as decuticulating agent, the sensitization treatment is carried out, preferably at 40 ° C., for a time greater than 30 minutes and at a temperature between 5 and 5 ambient temperature. and the reflux temperature at atmospheric pressure.

Lorsque l’agent décuticulant est une émission d'ultra-sons, on a constaté que l'on obtenait des résultats sa-5 tisfaisants lorsque les ultra-sons ont une fréquence comprise entre 20 KHz et 70 KHz et un temps d'action supérieur à 30 mn, la puissance dissipée étant comprise entre 50 et 150 watts par dm? traité.When the decuticulating agent is an emission of ultrasound, it has been found that satisfactory results are obtained when the ultrasound has a frequency between 20 KHz and 70 KHz and a longer action time. at 30 min, the power dissipated being between 50 and 150 watts per dm? treaty.

Lorsque le matériau kératinique servant de matière 10 première a subi le traitement de sensibilisation sus-mentionné, on peut réaliser une hydrolyse enzymatique mettant en oeuvre des enzymes protéolytiques et/ou kératinolytiques et obtenir des rendements d'hydrolyse très satisfaisants. Le traitement enzymatique est avantageusement réalisé à un pH inférieur ou 15 égal à 9 et à une température inférieure à 50°C pour éviter une hydrolyse alcaline perturbante, de sorte que les enzymes ne sont pas forcément au pH correspondant à leur optimum de cinétique. La concentration d'enzymes utilisée est fonction des conditions opératoires et suffisante pour obtenir une 20 action enzymatique dans le milieu. Le traitement enzymatique a généralement une durée comprise entre 20 h et 90 h.When the keratin material used as raw material has undergone the abovementioned sensitization treatment, an enzymatic hydrolysis can be carried out using proteolytic and / or keratinolytic enzymes and very satisfactory hydrolysis yields can be obtained. The enzymatic treatment is advantageously carried out at a pH less than or equal to 9 and at a temperature below 50 ° C to avoid disturbing alkaline hydrolysis, so that the enzymes are not necessarily at the pH corresponding to their optimum kinetics. The concentration of enzymes used depends on the operating conditions and is sufficient to obtain an enzymatic action in the medium. The enzymatic treatment generally lasts between 20 h and 90 h.

L'hydrolysat obtenu peut être, soit utilisé sous forme de solution après ajustement du pH, soit lyophylisé, sait dialysé, soit atomisé sans élévation de température, soit récupéré sous 25 forme de résidu sec dans un évaporateur rotatif à 40°C environ à condition d'avoir neutralisé le milieu, soit précipité en milieu solvant. Dans tous les cas, on constate que la composition oligopeptidique obtenue comporte peu d'acides aminés libres, est riche en oligopeptides ayant un poids moléculaire 30 compris entre 1000 et 5000 et renferme plus de 30 % des liaisons cystine contenues dans le matériau kératinique de départ.The hydrolyzate obtained can be either used in the form of a solution after adjusting the pH, or lyophilized, can be dialyzed, or atomized without raising the temperature, or recovered in the form of a dry residue in a rotary evaporator at approximately 40 ° C. provided to have neutralized the medium, or precipitated in a solvent medium. In all cases, it can be seen that the oligopeptide composition obtained contains few free amino acids, is rich in oligopeptides having a molecular weight between 1000 and 5000 and contains more than 30% of the cystine bonds contained in the starting keratin material. .

La présente invention a également pour objet le produit industriel nouveau que constitue une ccmposiüon oUgopeptidigue obtenue par le procédé ci-dessus défini, caractérisée par le 35 fait que plus de 75% en poids des oligopeptides, qu'elle contient, ont un poids moléculaire compris entre 1000 et 5000, la composition contenant, en outre, plus de 30¾ en poids des groupes cystine contenus dans le matériau kératinique ayant servi , de matière première. / 40 La présente invention a également pour objet l'uti4/ 6 lisation de la composition oligopeptidique ci-dessus définie pour le traitement des cheveux ou de la peau ou dans l’industrie alimentaire.The present invention also relates to the new industrial product that constitutes an ovopeptidic composition obtained by the process defined above, characterized in that more than 75% by weight of the oligopeptides, which it contains, have a molecular weight included between 1000 and 5000, the composition containing, in addition, more than 30% by weight of the cystine groups contained in the keratin material used, as raw material. / 40 The present invention also relates to the use of the oligopeptide composition defined above for the treatment of hair or skin or in the food industry.

Pour mieux faire comprendre l'objet de l'invention, 5 on va en décrire maintenant, à titre d'exemples purement illustratifs et non limitatifs, plusieurs modes de mise en oeuvre.To better understand the object of the invention, we will now describe, by way of purely illustrative and nonlimiting examples, several modes of implementation.

Dans ces exemples, le rendement de la digestion enzymatique est calculé par analyse (chromatographie sur résine 10 échangeuse d'ions), après hydrolyse, d'une partie aliquote du surnageant filtré et centrifugé. Dans chaque exemple, on a comparé le rendement de digestion enzymatique pour le matériau kératinique traité avec ou sans sensibilisation préalable. De plus, on a comparé le taux de cystine initialement présent 15 dans la kératine naturelle traitée et le taux de cystine dans l'hydrolysat obtenu (analyse protéique)._ À / f * / 7In these examples, the yield of the enzymatic digestion is calculated by analysis (chromatography on ion exchange resin), after hydrolysis, of an aliquot of the filtered and centrifuged supernatant. In each example, the enzymatic digestion yield was compared for the keratin material treated with or without prior sensitization. In addition, the level of cystine initially present in the treated natural keratin was compared with the level of cystine in the hydrolyzate obtained (protein analysis).

Exemple 1 : a) Première étape : Sensibilisation 100 g de cheveuxcoupés(portions de 2 cm de long) sont immergés dans deux litres de diméthyl-formamide pré-5 chauffée à 120°C.Example 1: a) First step: Sensitization 100 g of cut hair (2 cm long portions) are immersed in two liters of pre-5 dimethylformamide heated to 120 ° C.

La solution est laissée durant deux heures à 120°C. Les cheveux sont ensuite filtrés ; ils sont rincés plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The solution is left for two hours at 120 ° C. The hair is then filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

10 b) Deuxième étape : Digestion enzymatique10 b) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la Proteinase "PSF 2019" (Société 0RIL - PARIS) est préparée juste avant l'emploi. Sa formule est la suivante : - Proteinase "PSF 2019" purifiée 15 (11 000 unités Anson/mg) 3,2 g - Acide borique 22,5 g - Soude normale 130 ml - MgCl2, 6H20 0,03 g - Eau déminéralisée...qsp... 2000,00 ml 20 Les cheveux présensibilisés à la diméthyl-formamide sont immergés dans la solution enzymatique portée à 40°C.An enzyme solution containing Proteinase "PSF 2019" (Company 0RIL - PARIS) is prepared just before use. Its formula is as follows: - Proteinase "PSF 2019" purified 15 (11,000 Anson units / mg) 3.2 g - Boric acid 22.5 g - Normal soda 130 ml - MgCl2, 6H20 0.03 g - Demineralized water. ..qsp ... 2000.00 ml 20 Hair presensitized with dimethylformamide is immersed in the enzyme solution brought to 40 ° C.

Un agitateur à pales assure une agitation continue.A paddle stirrer ensures continuous agitation.

La digestion dure quatre jours. Après filtration du résidu insoluble, la solution est neutralisée.Digestion lasts four days. After filtration of the insoluble residue, the solution is neutralized.

25 Les résultats obtenus sont les suivants : r§ndement_ de_ la_ di ges tion__ enzymati que : - cheveux témoins non sensibilisés : 5 % - cheveux sensibilisés : 38 % 2) çaraçtérisation_de_l2hy^glysat_de_kératine : 30 - taux de cystine dans l'hydrolysat : 56 x 10~3 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _o 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-35 que totale25 The results obtained are as follows: performance_ of_ the enzymatic di ges tion: - non-sensitized control hair: 5% - sensitized hair: 38% 2) karatinization of keratin: 30 - cystine in hydrolyzate level: 56 x 10 ~ 3 mole per 100 g of total protein material - cystine level in the initial keratin: _o 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 2 : a) Première étape ; SensibilisationExample 2: a) First step; Sensitization

On utilise un mode opératoire identique à celui de/ l'exemple 1, mais on maintient la sensibilisation pendant A/ 40 quatre heures. /jjj 8 b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueA procedure identical to that of Example 1 is used, but the sensitization is maintained for A / 40 four hours. / dd 8 b) Second step: Enzymatic digestion

On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 1.A procedure identical to that of Example 1 is used.

Les résultats obtenus sont les suivants : 5 1) rendement_de_la_<ftgestion,, enzymatique :The results obtained are as follows: 5 1) yield_of_the_ <management ,, enzymatic:

- cheveux témoins non sensibilisés 5 X- control hair not sensitized 5 X

- cheveux sensibilisés 95 % - taux de cystine dans l'hydrolysat : _o 10 50 x 10 mole pour 100 g de matière protéi que totale - taux de cystine dans la kératine initiale : 62 x 10”J mole pour 100 g de matière protéique totale 15 Exemple 3 : a) Première étape : Sensibilisation- hair sensitized 95% - rate of cystine in the hydrolyzate: _o 10 50 x 10 mole per 100 g of total protein material - rate of cystine in the initial keratin: 62 x 10 ”J mole per 100 g of total protein material 15 Example 3: a) First step: Awareness

On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 1, mais on maintient la sensibilisation pendant six heures.A procedure identical to that of Example 1 is used, but the sensitization is maintained for six hours.

20 b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueB) Second step: Enzymatic digestion

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_ l§_dig§stion_enzymatique :The results obtained are the following: 1) enzymatic_digit_dig§stion:

25 - cheveux témoins non sensibilisés 5 X25 - non-sensitized control hair 5 X

- cheveux sensibilisés 98 X- sensitized hair 98 X

2) Ç§ï§Çtérisati2n_de_l^hydrolysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : _q 35 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-30 que totale - taux de cystine dans la kératine initiale :2) Ç§ï§Çtérisati2n_de_l ^ hydrolyzate_de_kératine: - level of cystine in the hydrolyzate: _q 35 x 10 mole per 100 g of proteinaceous 30 total - rate of cystine in the initial keratin:

.O.O

62 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 4 : 35 a) Première étape : Sensibilisation 100 g de cheveix coupés (portions de 2 cm de long) sont immergés dans deux litres de diméthyl-formamide préchauffée à 140 °C. jExample 4:35 a) First step: Sensitization 100 g of cut cheveix (2 cm long portions) are immersed in two liters of dimethylformamide preheated to 140 ° C. j

La solution est portée à ébullition et le refluA / 40 est maintenu pendant une heure. fJf 9The solution is brought to the boil and the refluA / 40 is maintained for one hour. fJf 9

Les cheveux sont filtrés; ils sont rincés plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion Enzymatique 5 On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 1,b) Second Step: Enzymatic Digestion 5 A procedure identical to that of Example 1 is used,

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_la_ digestion_ enzymati que : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % 10 - cheveux sensibilisés 81 % 2) 9§ractérisation_de_l2hydrolysat_de_kératine : - tauxde cystine dans l'hydrolysat : 25 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale 15 - taux de cystine dans la kératine initiale :The results obtained are the following: 1) enzymatic_digestation_of_digestion_ that: - non-sensitized control hair 5% 10 - sensitized hair 81% 2) 9§cracterisation_de_l2hydrolysat_de_kératine: - cystine in hydrolyzate: 25 x 10 mole per 100 g of material total protein 15 - cystine level in the initial keratin:

_ O_ O

Exemple 5 : a) Première étape : Sensibilisation 20 100 g de cheveuxcoupés (portions de 2 cm de long) sont immergés dans deux litres d'une solution constituée de 1 500 ml de diméthyl-formamide et de 500 ml d'eau déminéralisée.Example 5: a) First step: Sensitization 20 100 g of cut hair (portions of 2 cm long) are immersed in two liters of a solution consisting of 1500 ml of dimethylformamide and 500 ml of demineralized water.

Cette solution est portée à ébullition et le 25 reflux est maintenu durant trois heures.This solution is brought to the boil and the reflux is maintained for three hours.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont rincés plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils'sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They're dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatique 30 On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 1.b) Second step: Enzymatic digestion A procedure identical to that of Example 1 is used.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_la_digestion_enzymaticjue_ : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % 35 - cheveux sensibilisés 59 % 2) ç§raçtérisation_de_l'hydrglysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : / 42 x 10“3 mole pour 100 g de matière protéi- / que totale /j 10 - taux de cystine dans la kératine initiale : 62 x 10“3 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) yield_of_the_digestion_enzymaticjue_: - non-sensitized control hair 5% 35 - sensitized hair 59% 2) keratin hydriglysate: - cystine in the hydrolyzate: / 42 x 10 “3 mole per 100 g of total protein material / day 10 - cystine level in the initial keratin: 62 x 10 “3 mole per 100 g of total protein material

Exemple 6 : 5 a) Première étape : Sensibilisation 100 g de cheveux coupés(portions de 2 cm de long) sont immergés dans deux litres de méthanol,Example 6: 5 a) First step: Sensitization 100 g of cut hair (portions of 2 cm long) are immersed in two liters of methanol,

La solution est portée à ébullition et le reflux est maintenu durant douze heures.The solution is brought to a boil and the reflux is maintained for twelve hours.

10 Les cheveux sont filtrés ; ils sont séchés à tem pérature ambiante.10 The hair is filtered; they are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

15 Les résultats obtenus sont les suivants : 1) ï§5^®5§?£.^§_l§.^Î:S§§Îign_enzymatigue : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 16 % 20 - taux de cystine dans l'hydrolysat : _o 60 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _o 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-25 que totale15 The results obtained are as follows: 1) ï§5 ^ ®5§? £. ^ §_L§. ^ Î: S§§Îign_enzymatigue: - non-sensitized control hair 5% - sensitized hair 16% 20 - cystine level in the hydrolyzate: _o 60 x 10 mole per 100 g of total protein material - cystine level in the initial keratin: _o 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 7 : a) Première étape : SensibilisationExample 7: a) First step: Awareness

On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 6, mais on maintient la sensibilisation pendant 30 vingt quatre heures.A procedure identical to that of Example 6 is used, but the sensitization is maintained for 24 hours.

b) Deuxième étape ; Digestion enzymatiqueb) Second step; Enzymatic digestion

Les résultats obtenus sont les suivants : 35 1) rendement^de_la_digestion_enzymatigue : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 19 % / » ^ (f 11 2) 95ï§2iéïî:§§ti:2?-4ê,3rl^yëï2Î-Y§§t_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : _o 58 x 10 mole pour 100 g de matière protéique normale 5 - taux de cystine dans la kératine initiale : _q 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) yield of enzymatic digestion: - control hair not sensitized 5% - sensitized hair 19% / »^ (f 11 2) 95ï§2iéïî: §§ti: 2? -4ê, 3rl ^ yëï2Î -Y§§t_de_kératine: - cystine level in the hydrolyzate: _o 58 x 10 mole per 100 g of normal protein material 5 - cystine level in the initial keratin: _q 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 8 : a) Première étape : Sensibilisation 100 g de cheveuxcoupés(portions de 2 cm de long) 10 sont immergés dans deux litres d'acide formique préchauffé à 90°C.Example 8: a) First step: Sensitization 100 g of cut hair (2 cm long portions) 10 are immersed in two liters of formic acid preheated to 90 ° C.

La solution est portée à ébullition et le reflux est maintenu pendant trente minutes.The solution is brought to a boil and the reflux is maintained for thirty minutes.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondam-15 ment à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther.The hair is filtered; they are washed thoroughly with demineralized water, then with alcohol and ether.

Ils sont séchés à température ambiante.They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

20 Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_la_digestion_enzymatique : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 14 % 25 , - taux de cystine dans 1 hydrolysat : _q 59 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _q 3q 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéi que totale20 The results obtained are as follows: 1) enzymatic_digestion_return: - non-sensitized control hair 5% - sensitized hair 14% 25, - level of cystine in 1 hydrolyzate: _q 59 x 10 mole per 100 g of total protein matter - level of cystine in the initial keratin: _q 3q 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 9 : a) Première étape : Sensibilisation 100 g de cheveux coupés (portions de 2 cm de long) 35 sont immergés dans deux litres d'acide formique préchauffé à 90 °C,Example 9: a) First step: Sensitization 100 g of cut hair (2 cm long portions) 35 are immersed in two liters of formic acid preheated to 90 ° C,

La solution est portée à ébullition et le reflux / est maintenu pendant trente minutes. /YThe solution is brought to a boil and the reflux / is maintained for thirty minutes. / Y

/ r/t 12/ r / t 12

Les cheveux sont filtrés. Ils sont immergés à nouveau dans deux litres d'acide formique et agités durant 16 heures à température ambiante.The hair is filtered. They are immersed again in two liters of formic acid and stirred for 16 hours at room temperature.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondam-5 ment à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are washed thoroughly with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

10 Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_la_digestion_enzymatique : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 23 % j 2) Ç§ï§9t|çisation_de_l^hYdrolysat>_de><ikératine : 15 - taux de cystine dans l'hydrolysat : 57 x 10”3 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _q 62 x 10 mole pour 100 g de matière 20 protéique totale10 The results obtained are as follows: 1) enzymatic_digestion_ yield: - non-sensitized control hair 5% - sensitized hair 23% j 2) Ç§ï§9t | çisation_de_l ^ hYdrolysate> _de> <ikératine: 15 - cystine level in the hydrolyzate: 57 x 10 ”3 mole per 100 g of total protein material - cystine level in the initial keratin: _q 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 10 : a) Première étape : SensibilisationExample 10: a) First step: Awareness

On prépare une solution de bromure de lithium en solubilisant 1 737 g de L.jBr dans de l'eau déminéralisée 25 ajustant le volume à deux litres.A solution of lithium bromide is prepared by dissolving 1,737 g of L.jBr in demineralized water, adjusting the volume to two liters.

100 g de cheveux coupés (portions de 2 cm de long) sont immergés dans les deux litres de solution sensibilisante préchauffée à 90°C.100 g of cut hair (2 cm long portions) are immersed in the two liters of sensitizing solution preheated to 90 ° C.

La solution est portée à ébullition et le reflux 30 est maintenu pendant une heure.The solution is brought to the boil and the reflux is maintained for one hour.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are washed abundantly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape - Digestion enzymatique 35 On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 1.b) Second step - Enzymatic digestion A procedure identical to that of Example 1 is used.

Les résultats obtenus sont les suivants : rendement_de la digestion enzymatique : / - cheveux témoins non sensibilisés 5 % A /The results obtained are as follows: yield of the enzymatic digestion: / - non-sensitized control hair 5% A /

40 - cheveux sensibilisés 75 °/J U40 - sensitized hair 75 ° / J U

13 2) Ç§ïëÇ£érisation_de_l^hYdrolysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : 53 x 10~J mole pour 100 g de matière protéique totale 5 - taux de cystine dans la kératine initiale : -3 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale13 2) Ç§ïëÇ £ erisation_de_l ^ hYdrolysat_de_kératine: - rate of cystine in the hydrolyzate: 53 x 10 ~ J mole per 100 g of total protein material 5 - rate of cystine in the initial keratin: -3 62 x 10 mole for 100 g total protein material

Exemple 11 : a) Première étape : Sensibilisation 10 On prépare une solution de bromure de lithium en solubilisant 1 390 g de L^Br dans de l'eau déminéralisée et en ajustant le volume à deux litres.Example 11: a) First step: Sensitization 10 A solution of lithium bromide is prepared by dissolving 1390 g of L ^ Br in demineralized water and adjusting the volume to two liters.

100 g de cheveuxcoupés (portions de 2 cm de long) j sont immergés dans les deux litres de solution sensibilisante, 15 préchauffée à 90°C.100 g of cut hair (2 cm long portions) are immersed in the two liters of sensitizing solution, preheated to 90 ° C.

La solution est portée à ébullition et le reflux est maintenu pendant quatre heures.The solution is brought to a boil and the reflux is maintained for four hours.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à 20 l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are washed thoroughly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

Les résultats obtenus sont les suivants : 25 1) rendement_de_la_dig§stion_enzymatique : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 15 % 2) caraçtérisation_de_l_[hydrolys§t_de_kératine '· - taux de cystine dans l'hydrolysat : _o 30 54 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _o 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale 35 Exemple 12 : a) Première étape : SensibilisationThe results obtained are as follows: 25 1) enzymatic_digestion_stress: - non-sensitized control hair 5% - sensitized hair 15% 2) caracterization_of_ [hydrolys§t_de_kératine '· - cystine level in hydrolyzate: _o 30 54 x 10 mole per 100 g of total protein material - level of cystine in the initial keratin: _o 62 x 10 mole per 100 g of total protein material 35 Example 12: a) First step: Sensitization

On prépare une solution de bromure de lithium en solubilisant 1 737 g de L.Br dans de l'eau déminéralisée, / ajustant le volume à deux litres. a / 40 100 g de cheveuc coupés (portions de 2 cm de long)/ \m 14 sont immergés dans les deux litres de la solution sensibilisante .A solution of lithium bromide is prepared by dissolving 1,737 g of L.Br in demineralized water, / adjusting the volume to two liters. a / 40 100 g of cut hair (2 cm long portions) / \ m 14 are immersed in the two liters of the sensitizing solution.

La solution est portée à 100°C, puis maintenue à cette température pendant seize heures.The solution is brought to 100 ° C., then maintained at this temperature for sixteen hours.

5 Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondam ment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante, b) Deuxième étape : Digestion enzymatique5 The hair is filtered; they are washed thoroughly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature, b) Second step: Enzymatic digestion

On utilise un mode opératoire identique à celui 10 de l'exemple 1.A procedure identical to that of Example 1 is used.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_d§_la_digestion_enzymatique : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 13 % 15 2) çaraçtérisation_de_l2hydrqlysat_de_kératine - taux de cystine dans l'hydrolysat : 60 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : 20 62 x 10’ mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) yield_d§_la_digestion_enzymatique: - non-sensitized control hair 5% - sensitized hair 13% 15 2) karatinization_de_l2hydrqlysat_de_kératine - cystine in hydrolyzate: 60 x 10 mole per 100 g of total protein matter - cystine level in the initial keratin: 20 62 x 10 'mole per 100 g of total protein material

Exemple 13 : a) Première étape : SensibilisationExample 13: a) First step: Awareness

On utilise un mode opératoire identique à celui 25 de l'exemple 10.A procedure identical to that of Example 10 is used.

Après reflux d' une heure dans la solution de bromure de lithium, les cheveux sont filtrés puis lavés abondamment à l'eau déminéralisée chaude et à l'alcool.After refluxing for one hour in the lithium bromide solution, the hair is filtered and then washed abundantly with hot demineralized water and alcohol.

Ils sont ensuite immergés dans deux litres de dimé-30 thyl-forraamide préchauffée à 140°C. La solution est portée à ébullition et le reflux est maintenu pendant trente minutes.They are then immersed in two liters of dimé-30 thyl-forraamide preheated to 140 ° C. The solution is brought to a boil and the reflux is maintained for thirty minutes.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont rincés plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

35 b) Deuxième étape - Digestion enzymatique35 b) Second step - Enzymatic digestion

Les résultats obtenus sont les suivants : / 1) rendement_ de_la_ di gestion_ enzymati que : / 40 - cheveux témoins non sensibilisés 5 %/y/ 15 - cheveux sensibilisés 91 % 2) çaraçtérisation_de_!2hydrolysat_de_keratine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : _q 50 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-5 que totale - taux de cystine dans la kératine initiale : _o 62 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: / 1) yield_ of the enzymatic management: / 40 - non-sensitized control hair 5% / y / 15 - sensitized hair 91% 2) çaracterisation_de_! 2 hydrolyzate_de_keratine: - cystine level in the hydrolyzate: _q 50 x 10 mole per 100 g of total protein material - cystine level in the initial keratin: _o 62 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 14 : 10 a) Première étape : SensibilisationExample 14: 10 a) First step: Awareness

On prépare une solution d’urée, en solubilisant 1 440 g d'urée à 80°C dans de l’eau déminéralisée et en ajustant le voliane final à deux litres.A urea solution is prepared by dissolving 1,440 g of urea at 80 ° C in demineralized water and adjusting the final volume to two liters.

100 g de cheveik coupés (portions de 2 cm de long) 15 sont immergés dans les deux litres de solution sensibilisante et maintenus pendant deux heures à 80°C.100 g of cut cheveik (portions 2 cm long) are immersed in the two liters of sensitizing solution and kept for two hours at 80 ° C.

Les cheveux sont filtrés ; ils sont lavés abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l’éther. Ils sont séchés à température ambiante.The hair is filtered; they are washed thoroughly with warm demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de_la_ digestion_ enzymati gue : 25 - cheveux témoins non sensibilisés 5 % - cheveux sensibilisés 12 % 2) £§ï§2£érisation_de_l2hydrolysat_de_keratine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : * ,q 59 x lo” mole pour 100 g de matière protéi-30 que totale ί - taux de cystine dans la kératine initiale : 62 x 10 mole, pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) yield_of_the_ digestion_ enzymati gue: 25 - control hair not sensitized 5% - hair sensitized 12% 2) £ §ï§2 £ érisation_de_l2hydrolysat_de_keratine: - cystine level in the hydrolyzate: *, q 59 x lo ”mole per 100 g of total protein material ί - cystine level in the initial keratin: 62 x 10 mole, per 100 g of total protein material

Exemple 15 : 35 a) Première étape : SensibilisationExample 15:35 a) First step: Awareness

On utilise un mode opératoire identique à celui de l'exemple 14, mais on maintient la sensibilisation pendant huit heures.A procedure identical to that of Example 14 is used, but the sensitization is maintained for eight hours.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatique ^ / 40 On utilise un mode opératoire identique à celui dé ψ 16 l'exemple 1,b) Second step: Enzymatic digestion ^ / 40 A procedure identical to that of ψ 16 Example 1 is used.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_ de_1§_ diggstion_ enzymati gue : - cheveux témoins non sensibilisés 5 % 5 - cheveux sensibilisés 17 % 2) Ç^ïêÇtéHiSftign^de^l^hydrolysat^de^kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : 56 x 10"3 mole pour 100 g de matière protéique totale 10 - taux de cystine dans la kératine initiale : 62 x 10~3 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) yield_ of_1§_ diggstion_ enzymati gue: - control hair not sensitized 5% 5 - hair sensitized 17% 2) Ç ^ ïêÇtéHiSftign ^ of ^ hydrolyzate ^ of ^ keratin: - cystine level in the hydrolyzate: 56 x 10 "3 mole for 100 g of total protein material 10 - cystine level in the initial keratin: 62 x 10 ~ 3 mole for 100 g of total protein material

Exemple 16 : a) Première étape : Sensibilisation 15 On prépare une solution de bromure de lithium en solubilisant 1 737 g de L^Br dans de l'eau déminéralisée, en ajustant le volume à deux litres.Example 16: a) First step: Sensitization 15 A solution of lithium bromide is prepared by dissolving 1,737 g of L 2 Br in demineralized water, adjusting the volume to two liters.

100 g de poudre de corne sont immergés dans les deux litres de solution sensibilisante, préchauffée à 90°C.100 g of horn powder are immersed in the two liters of sensitizing solution, preheated to 90 ° C.

20 La solution est portée à l'ébullition et le reflux est maintenu pendant une heure.The solution is brought to the boil and the reflux is maintained for one hour.

La poudre de corne est filtrée ; elle est lavée abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Elle est séchée à température ambiante.The horn powder is filtered; it is washed thoroughly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. It is dried at room temperature.

25 b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueB) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la protéinase "PSF 2019" (Société ORXL - PARIS) est préparée juste avant l'emploi. Sa formule est la suivante : - Protéinase "PSF 2019" purifiée 30 (11 000 unités Anson /mg) ‘ 2,5 g - Tris (hydroxyméthyl)aminométhane 24,2 g - HCl (solution normale) 55 ml - MgCl2, 6H20 0,03 g - Eau déminéralisée...qsp... 2 000 ml 35 La poudre de corne présensibilisée au bromure de lithium est immergée dans la solution enzymatique portée à 40°C. Un agitateur assure une agitation continue. .An enzyme solution containing proteinase "PSF 2019" (Company ORXL - PARIS) is prepared just before use. Its formula is as follows: - Purified "PSF 2019" proteinase 30 (11,000 Anson units / mg) '2.5 g - Tris (hydroxymethyl) aminomethane 24.2 g - HCl (normal solution) 55 ml - MgCl2, 6H20 0 , 03 g - Demineralized water ... qs ... 2,000 ml 35 The horn powder presensitized with lithium bromide is immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C. An agitator ensures continuous agitation. .

La digestion dure quatre jours.Digestion lasts four days.

Le résidu insoluble est filtré et la solution est/ / 40 neutralisée. {/ 17The insoluble residue is filtered and the solution is / / 40 neutralized. {/ 17

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendexnent^ de^ 1§_ tion_enzymaticjue : - poudre de corne témoin non sensibilisée 46 % 5 - poudre de corne sensibilisée 62 % 2) Ç§ï§Ç£érisation_de_l^hydrolysat_de_îœr§tine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : -3 25 x 10 mole, pour 100 g de matière protéique totale 10 - taux de cystine dans la kératine initiale : -3 31 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-. que totaleThe results obtained are as follows: 1) rendexnent ^ de ^ 1§_ tion_enzymaticjue: - non-sensitized control horn powder 46% 5 - sensitized horn powder 62% 2) Ç§ï§Ç £ erisation_de_l ^ hydrolysat_de_îœr§tine: - level of cystine in the hydrolyzate: -3 25 x 10 mole, for 100 g of total protein material 10 - level of cystine in the initial keratin: -3 31 x 10 mole for 100 g of protein material. that total

Exemple 17 : a) Première étape : Sensibilisation 15 100 g de poudre de corne sont immergés dans deux litres de diméthyl-formamide, préchauffée à 120°C.Example 17: a) First step: Sensitization 15 100 g of horn powder are immersed in two liters of dimethylformamide, preheated to 120 ° C.

La solution est laissée pendant quatre heures à 120°C.The solution is left for four hours at 120 ° C.

La poudre de corne est filtrée ; elle est rincée 20 plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Elle est séchée à température ambiante.The horn powder is filtered; it is rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. It is dried at room temperature.

b) Deuxième étape î Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la chymotryp-sine est préparée juste avant l'emploi.An enzyme solution containing chymotryp-sine is prepared just before use.

25 Sa formule est la suivante : - Alpha-chymotrypsine (47 u/mg) 1,5 g - Tris (hydroxyméthyl)aminométhane 24,2 g - HCl (solution normale) 100 ml - Eau déminéralisée...qsp... 2000 ml 30 La poudre de corne présensibilisée à la diméthyl- formamide est immergée dans la solution enzymatique portée à 40°C. Un agitateur assure une agitation continue.25 Its formula is as follows: - Alpha-chymotrypsin (47 u / mg) 1.5 g - Tris (hydroxymethyl) aminomethane 24.2 g - HCl (normal solution) 100 ml - Demineralized water ... qs ... 2000 ml 30 The horn powder presensitized with dimethylformamide is immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C. An agitator ensures continuous agitation.

La digestion dure quatre jours.Digestion lasts four days.

Le résidu insoluble est filtré et la solution est 35 neutralisée.The insoluble residue is filtered and the solution is neutralized.

Les résultats obtenus sont les suivants : rendement^,de_la_digestion_enzymatique : - poudre de corne témoin non * / sensibilisée 18 7, / Jj 40 - poudre de corne sensibilisée 35 ♦ 18 2) Ç§ï§Çtérisation_de_l^hydrolysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : 24 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale 5 - taux de cystine dans la kératine initiale :The results obtained are as follows: yield ^, of enzymatic_digestion: - control horn powder not * / sensitized 18 7, / DD 40 - sensitized horn powder 35 ♦ 18 2) This is the keratin hydrolysate: - cystine level in hydrolyzate: 24 x 10 mole per 100 g of total protein material 5 - cystine level in the initial keratin:

w Ow O

31 x 10“J mole pour 100 g de matière protéique totale31 x 10 “J mole per 100 g of total protein material

Exemple 18 : a) Première étape : Sensibilisation 10 100 g de poils de lapin propres sont immergés dans deux litres de diméthyl-formamide préchauffée à 120°C.Example 18: a) First step: Sensitization 10 100 g of clean rabbit hair are immersed in two liters of dimethylformamide preheated to 120 ° C.

La solution est laissée pendant trois heures à 120°C.The solution is left for three hours at 120 ° C.

Les poils de lapin sont filtrés ; ils sont rincés 15 plusieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante.Rabbit hair is filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueb) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la Prônase (KOCH-LIGHT) est préparée juste avant l'emploi.An enzyme solution containing Prônase (KOCH-LIGHT) is prepared just before use.

20 Sa formule est la suivante : - Pronase (ex**·streptomyces griseus) 2,4 g - Acide borique (H^BO^) 22,5 g - Soude normale 130 ml - MgC^, 6H20 0,03 g 25 - Eau déminéralisée..,qsp,,. 2000 ml20 Its formula is as follows: - Pronase (ex ** streptomyces griseus) 2.4 g - Boric acid (H ^ BO ^) 22.5 g - Normal soda 130 ml - MgC ^, 6H20 0.03 g 25 - Demineralized water .., qsp ,,. 2000 ml

Les poils de lapin présensibilisés à la diméthyl-formamide sont immergés dans la solution enzymatique portée à 40°C. Un agitateur assure une agitation continue.Rabbit hair presensitized with dimethylformamide is immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C. An agitator ensures continuous agitation.

La digestion dure quatre jours.Digestion lasts four days.

30 Le résidu insoluble est filtré et la solution est neutralisée.The insoluble residue is filtered and the solution is neutralized.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) rendement_de-la_digestion_enzymatigue : - poils de lapin témoins non 35 sensibilisés 4 % - poils de lapin sensibilisés 78 % 2) Ç§ïëÇ£éri§atign_de_!^hydrglysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : j 23,5 x 10"3 moles pour 100 g de matière proté IA/ 40 que totale. Jjj » 19 - taux de cystine dans la kératine initiale : -3 31 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) enzymatic_digestion-yield: - non-sensitized control rabbit hair 4% - sensitized rabbit hair 78% 2) _ri ^atign_de _! ^ Keratin hydrglysat: - cystine level in the hydrolyzate: d 23.5 x 10 "3 moles per 100 g of protein material IA / 40 than total. Dd» 19 - cystine level in the initial keratin: -3 31 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 19 : 5 a) Première étape : SensibilisationExample 19: 5 a) First step: Awareness

On prépare une solution de bromure de lithium en solubilisant 1 737 g de L^Bj. dans de l'eau déminéralisée, en ajustant le volume à deux litres.A lithium bromide solution is prepared by dissolving 1,737 g of L ^ Bj. in demineralized water, adjusting the volume to two liters.

100 g de poils de lapin propres sont immergés dans 10 les deux litres de solution sensibilisante, préchauffée à 90 °C.100 g of clean rabbit hair are immersed in two liters of sensitizing solution, preheated to 90 ° C.

La solution est portée à ébullition et le reflux est maintenu pendant une heure.The solution is brought to a boil and the reflux is maintained for one hour.

Les poils de lapin sont filtrés ; ils sont lavés 15 abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Ils sont séchés à température ambiante, b) Deuxième étape : Digestion enzymatiqueRabbit hair is filtered; they are washed thoroughly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature, b) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la trypsine est préparée juste avant l'emploi.An enzyme solution containing trypsin is prepared just before use.

20 Sa formule est la suivante : - Trypsine pure (317 u/mg) 15 g - Acide borique (H^BO^) 50 g - Soude normale 290 ml - Eau déminéralisée...qsp... 5000 ml 25 Les poils de lapin pré sensibilisé s au bromure de lithium sont immergés dans la solution enzymatique portée à v 40°C. Un agitateur assure une agitation continue.20 Its formula is as follows: - Pure trypsin (317 u / mg) 15 g - Boric acid (H ^ BO ^) 50 g - Normal soda 290 ml - Demineralized water ... qs ... 5000 ml 25 The hairs of rabbits pre-sensitized to lithium bromide are immersed in the enzymatic solution brought to v 40 ° C. An agitator ensures continuous agitation.

La digestion dure quatre jours.Digestion lasts four days.

Le résidu insoluble est filtré et la solution est 30 neutralisée.The insoluble residue is filtered and the solution is neutralized.

Les résultats obtenus sont les suivants : 1) de_1§-: - poils de lapin témoins non sensibilisés 3 % 35 - poils de lapin sensibilisés 33 % 2) ç§ï§çtérisation_de_l2hydrolysat-de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : / 25 x 10~3 mole pour 100 g de matière protéi/l/ que totale /ί 4 20 - taux de cystine dans la kératine initiale : -3 v 31 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 1) de_1§-: - non-sensitized control rabbit hair 3% 35 - sensitized rabbit hair 33% 2) ç§ï§çterisation_de_l2hydrolysat-de_kératine: - cystine level in the hydrolyzate: / 25 x 10 ~ 3 mole for 100 g of protein material / l / that total / ί 4 20 - cystine level in the initial keratin: -3 v 31 x 10 mole for 100 g of total protein material

Exenple 20 : 5 a) Première étape : SensibilisationExample 20: 5 a) First step: Awareness

On prépare une solution d'urée en solubilisant 1 440 g d'urée à 80°C dans de l'eau déminéralisée et en ajustant le volume final à deux litres.A urea solution is prepared by dissolving 1,440 g of urea at 80 ° C in demineralized water and adjusting the final volume to two liters.

100 g de plumes de volaille (duvet) sont immergés 10 dans les deux litres de solution sensibilisante et maintenus pendant cinq heures à 80°C.100 g of poultry feathers (down) are immersed in the two liters of sensitizing solution and kept for five hours at 80 ° C.

Les plumes sont filtrées ; elles sont lavées abondamment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Elles sont séchées à température ambiante.The feathers are filtered; they are washed abundantly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

15 b) Deuxième étape : Digestion enzymatique15 b) Second step: Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la papaïne est préparée juste avant l'emploi.An enzymatic solution containing papain is prepared just before use.

Sa formule est la suivante : - Papai'ne 8 g 20 - Acétate de sodium 32,8 g - Acide acétique 24 g - Eau déminéralisée...qsp... 4000 mlIts formula is as follows: - Papai'ne 8 g 20 - Sodium acetate 32.8 g - Acetic acid 24 g - Demineralized water ... qs ... 4000 ml

Les plumes sensibilisées à l'urée sont immergées dans la solution enzymatique portée à 40°C. Un agitateur 25 assure une agitation continue.The feathers sensitized to urea are immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C. An agitator 25 ensures continuous agitation.

La digestion dure quatre jours.Digestion lasts four days.

Le résidu insoluble est filtré et la solution est neutralisée.The insoluble residue is filtered and the solution is neutralized.

Les résultats obtenus sont les suivants : 30 1) rendement^ de_1§_ digestion_ enzymati que : - plumes de volaille témoins non sensibilisées 7 % - plumes de volaille sensibilisées 12 % 35 2) çaraçtérisatign_de_ljhydrglys§t_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : 30 x 10’3 mole pour 100 g de matière protéi- / '........_/ » 21 - taux de cystine dans la kératine initiale : _3 34 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totaleThe results obtained are as follows: 30 1) yield of enzymatic digestion: - control poultry feathers not sensitized 7% - sensitized poultry feathers 12% 35 2) çaraçtérisatign_de_ljhydrglys§t_de_kératine: - cystine level in hydrolysate : 30 x 10'3 mole per 100 g of protein material - / ........_ / "21 - cystine level in the initial keratin: _3 34 x 10 mole per 100 g of total protein material

Exemple 21 : 5 a) Première étape : Sensibilisation 100 g de plumes de volaille (duvet) sont immergés dans deux litres de diméthyl-formatai de, préchauffée à 120°C.Example 21: 5 a) First step: Sensitization 100 g of poultry feathers (down) are immersed in two liters of dimethyl format, preheated to 120 ° C.

10 Les plumes sont filtrées ; elles sont rincées plu sieurs fois à l'eau déminéralisée, puis à l'alcool et à l'éther. Elles sont séchées à température ambiante, b) Deuxième étape ; Digestion enzymatique10 The feathers are filtered; they are rinsed several times with demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature, b) Second step; Enzymatic digestion

Une solution enzymatique contenant de la Pronase 15 (KOCH-LIGHT) est préparée juste avant l'emploi.An enzyme solution containing Pronase 15 (KOCH-LIGHT) is prepared just before use.

Sa formule est la suivante : - Pronase (ex^-streptomyces griseus) 2,4 g - Tri s(hydroxymé thyl)aminomé thane 24,2 g - HOl (solution normale) 55 ml 20 - MgCl2, 6H20 0,03 g - Eau déminéralisée...qsp... 2000 mlIts formula is as follows: - Pronase (ex ^ -streptomyces griseus) 2.4 g - Tri s (hydroxymé thyl) aminomé thane 24,2 g - HOl (normal solution) 55 ml 20 - MgCl2, 6H20 0,03 g - Demineralized water ... qs ... 2000 ml

Les plumes présensibilisées à la diméthyl-formamide sont immergées dans la solution enzymatique portée à 40°C.The feathers presensitized with dimethylformamide are immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C.

Un agitateur assure une agitation continue.An agitator ensures continuous agitation.

25 La digestion dure quatre jours.25 Digestion lasts four days.

, Les résultats obtenus sont les suivants : 1) r§nd§ment_de_l§_digestign_enzym§tigue : 30 - plumes témoins non sensibilisées 10 % - plumes sensibilisées 27 2) Ç§?§Ç£iïi§§tion_de<iil^hydrolysat_de_kératine ; - taux de cystine dans l'hydrolysat : 31,5 x 10 mole pour 100 g de matière protéi-35 que totale - taux de cystine dans la kératine initiale : / -3 / 34 x 10 mole pour 100 g de matière protéi- / que totale / '/., The results obtained are as follows: 1) r§nd§ment_de_l§_digestign_enzym§tigue: 30 - non-sensitized control feathers 10% - sensitized feathers 27 2) Ç§? §Ç £ iïi§§tion_de <iil ^ hydrolysate_de_kératine; - cystine level in the hydrolyzate: 31.5 x 10 mole per 100 g of total proteinaceous material - cystine level in the initial keratin: / -3 / 34 x 10 mole per 100 g of proteinic material - / than total / '/.

< 22<22

Exemple 22 : a) Première étape : SensibilisationExample 22: a) First step: Awareness

On prépare une solution d'urée, en solubilisant 1 440 g d'urée à 80°C dans de l'eau déminéralisée et en 5 ajustant le volume final à deux litres.A urea solution is prepared by dissolving 1,440 g of urea at 80 ° C in deionized water and adjusting the final volume to two liters.

100 g de plumes de volaille sont immergés dans les deux litres de solution sensibilisante et maintenus durant cinq heures à 80°C.100 g of poultry feathers are immersed in the two liters of sensitizing solution and kept for five hours at 80 ° C.

Les plumes sont filtrées ; elles sont lavés abon-10 damment à l'eau déminéralisée chaude, puis à l'alcool et à l'éther. Elles sont séchées à température ambiante.The feathers are filtered; they are washed thoroughly with hot demineralized water, then with alcohol and ether. They are dried at room temperature.

b) Deuxième étape : Digestion enzymatique • Une solution enzymatique contenant de la Pepsine est préparée juste avant l'emploi ; sa formulation est la 15 suivante : - Pepsine (2 870 u/mg)...................... 2,4 g - Acide chlorhydrique IN.................... 20 ml - Eau déminéralisée.. .q.s.p.................2 000 mlb) Second step: Enzymatic digestion • An enzymatic solution containing Pepsin is prepared just before use; its formulation is as follows: - Pepsin (2,870 u / mg) ...................... 2.4 g - IN hydrochloric acid .... ................ 20 ml - Demineralized water .. .qsp ................ 2000 ml

Les plumes sensibilisées à l'urée sont immergées 20 dans la solution enzymatique portée à 40°C. Un agitateur assure une agitation continue. La digestion dure quatre jours.The feathers sensitized to urea are immersed in the enzymatic solution brought to 40 ° C. An agitator ensures continuous agitation. Digestion lasts four days.

Les résultats obtenus sont les suivants : 25 1) rendement_de_la_digestign_enzym§tique :The results obtained are as follows: 1) yield_of_the_digestign_enzym§tique:

- plumes témoins non sensibilisées 6 Z- non-sensitized control feathers 6 Z

- plumes sensibilisées 24 7 2) çaraçtérisatign_de_li[hydrglysat_de_kératine : - taux de cystine dans l'hydrolysat : 30 28 x 10~3 mole pour 100 g de matière protéique totale - taux de cystine dans la kératine initiale : 34 x 10 mole pour 100 g de matière protéique totale 35 Les hydrolysats de protéines ont une influence béné fique sur le cheveu lorsqu'ils entrent dans la composition de produits de soin ou de traitement. Les effets physiologiques et cosmétiques positifs s'expliquent par la formation d'un j dépôt plus ou moins ordonné au niveau de la cuticule du che-yi / 40 veu, qui le protège ainsi des attaques chimiques ou physico/ /, f / y 23 chimiques et qui lui transfère des vertus coiffantes appréciables. Les hydrolysats de kératine qui ont une formule riche en soufre, sont, de par leur composition chimique, très proches des cheveux et constituent donc les protéines idéa-5 les pour les soins capillaires.- sensitized feathers 24 7 2) çaraçtérisatign_de_li [hydrglysat_de_kératine: - cystine level in the hydrolyzate: 30 28 x 10 ~ 3 mole per 100 g of total protein material - cystine rate in the initial keratin: 34 x 10 mole per 100 g of total protein material 35 Protein hydrolysates have a beneficial influence on the hair when they are used in the composition of care or treatment products. The positive physiological and cosmetic effects are explained by the formation of a more or less ordered deposit in the cuticle of the che-yi / 40 veu, which thus protects it from chemical or physical attacks / /, f / y 23 chemicals and which gives it appreciable styling properties. The keratin hydrolysates which have a formula rich in sulfur, are, by their chemical composition, very close to the hair and therefore constitute the ideal proteins for hair care.

On va donner ci-après, deux exemples d'utilisation des hydrolysats de kératine selon l'invention.Two examples of the use of keratin hydrolysates according to the invention will be given below.

Exemple 23 : Lotion vitalisantéEXAMPLE 23 Vitalizing Lotion

La lotion a la formulation suivante : 10 - Hydrolysat de kératine....................... 1 g - Ether oléique polyoxyéthyléné à 20 moles d'oxyde d'éthylène (vendu sous le nom de "BRIJ 98" par la société ATLAS).............. 0,1 g - Acide acétique___q.s.p.......................pH 7 15 - Colorant..................................... 0,1 g - Parfum....................................... 0,1 g - Alcool (à 96e)............................... 10 ml - Eau déminéralisée.. .q.s.p.................... 100 mlThe lotion has the following formulation: 10 - Keratin hydrolyzate ....................... 1 g - Polyoxyethylenated oleic ether containing 20 moles of ethylene oxide (sold under the name of "BRIJ 98" by the company ATLAS) .............. 0.1 g - Acetic acid ___ q.sp ............ .......... pH 7 15 - Colorant ................................... .. 0.1 g - Perfume ....................................... 0.1 g - Alcohol (96th) ............................... 10 ml - Demineralized water ... qs ... ................ 100 ml

La lotion est appliquée sur les cheveux. Un léger 20 massage permet de bien répartir le liquide. Le séchage s'effectue à température ambiante ou sous casque.The lotion is applied to the hair. A light massage helps distribute the liquid well. Drying takes place at room temperature or under a helmet.

Exemple 24 : Lotion à rincerEXAMPLE 24 Rinse Lotion

La lotion a la formulation suivante : - Hydro lysat de kératine....................... 1 g 25 - Ether oléique polyoxyéthyléné à 20 moles d'oxyde d'éthylène (vendu sous le nom de "BRIJ 98" par la société ATIAS).............. 0,1 g - Acide acétique.. .q.s.p.......................pH 7 - Colorant..................................... 0,1 g 30 - Parfum....................................... 0,1 g - Eau déminéralisée.. .q.s.p.................... 100 mlThe lotion has the following formulation: - Hydro lysate of keratin ....................... 1 g 25 - Polyoxyethylenated oleic ether with 20 moles of oxide ethylene (sold under the name "BRIJ 98" by the company ATIAS) .............. 0.1 g - Acetic acid .. .qsp ......... ............. pH 7 - Colorant ................................. .... 0.1 g 30 - Perfume ....................................... 0.1 g - Demineralized water ... qs ................... 100 ml

Cette lotion est appliquée sur les cheveux propres de manière homogène. Après une pose d'environ 5 mn, la chevelure est rincée à l'eau et séchée sous casque.This lotion is applied to clean hair evenly. After a pose of approximately 5 mn, the hair is rinsed with water and dried under helmet.

35 On a comparé l'effet des hydrolysats de kératine selon l'invention et des hydrolysats de kératine de l'état de la technique. A cet effet, on a étudié les microstructures déposées en surface et on a comparé, dans les lotions / des exemples 23 et 24, trois types d'hydrolysats de kéra- Π 40 tine : / / * 24 1'hydrolysat préparé selon l'exemple numéro 2 de la présente demande de brevet, un hydrolysat chlorhydrique de kératine, et un hydrolysat enzymatique préparé à partir d'une kératine dégradée pauvre en cystine.The effect of the keratin hydrolysates according to the invention and the keratin hydrolysates of the state of the art was compared. To this end, the microstructures deposited on the surface were studied and, in the lotions / examples 23 and 24, three types of keratin hydrolysates were compared: / 40 * the hydrolyzate prepared according to Example number 2 of this patent application, a hydrochloric keratin hydrolyzate, and an enzymatic hydrolyzate prepared from a degraded keratin poor in cystine.

5 Dans l'échelle arbitraire utilisée, le domaine cosmétique se situe entre 0 et 50. Plus le nombre est proche de 0, meilleure est la qualité du dépôt.5 In the arbitrary scale used, the cosmetic field is between 0 and 50. The closer the number is to 0, the better the quality of the deposit.

Lotion vitalisante Lotion à rincer 10 Hvdrnivsat utilisé appliquée sur appliquée surVitalizing Lotion Rinse-off rinse 10 Hvdrnivsat used applied on applied on

Hydrolysat utilise cheveu décoloré cheveu décoloré (ex. 23) (ex. 24)Hydrolysate uses discolored hair discolored hair (ex. 23) (ex. 24)

Hydrolysat de kératine préparé selon l'exemple 2 - riche 19 11 15 en cystine (1000<Poids moléculaire < 5000)Keratin hydrolyzate prepared according to example 2 - rich in cystine 19 11 15 (1000 <molecular weight <5000)

Hydrolysat chlorhydrique 48 31 (Poids moléculaire 20 moyen cd 130)Hydrochloric acid 48 31 (Average molecular weight 20 cd 130)

Hydrolysat enzymatique, de kératine dégradée - pauvre 65 49 en cystine λ,. (1000 <Poids molé- culaire<5000)Enzymatic hydrolyzate, of degraded keratin - poor 65 49 in λ, cystine. (1000 <Molecular weight <5000)

Il apparaît que 1'hydrolysat de kératine préparé selon l'exemple 2 de la présente demande de brevet est celui dont le dépôt est le plus cosmétique. Le cheveu ainsi traité.It appears that the keratin hydrolyzate prepared according to Example 2 of the present patent application is the one whose deposit is the most cosmetic. The hair thus treated.

30 n'est pas alourdi par le dépôt et acquiert des qualité*—/ appréciables. /]/30 is not weighed down by the deposit and acquires appreciable * - / qualities. /] /

Claims

1. Process for the preparation of an oligopeptide composition by hydrolysis of a keratinous material, this process comprising a treatment with proteolytic and / or keratinolitic enzymes, characterized in that before the enzymatic treatment, the · keratinous material is subjected to an sensitization treatment allowing the subsequent enzymatic action and practically not destroying the cystine bonds initially existing in the keratin material treated. 10

2 - Process according to claim 1, characterized in that the sensitization treatment is carried out by means of at least one sensitization agent taken from the 1 group formed by the hydrogen bond breaking agents and the polar solvents. 15

3 - Process according to claim 2, characterized in that the hydrogen bond breaking agents are taken from the group formed by the electrolytes and urea or its derivatives, these agents acting in an aqueous medium at a concentration greater than or equal to 8 moles per liter. 20

4 - Method according to claim 3, characterized in that the electrolyte used is lithium bromide.

5. Method according to claim 2, characterized in that the polar solvents constitute during the sensitization treatment at least 75% by weight of the medium, where the treatment is carried out.

6 · <· Process according to claim 5, characterized in that the polar solvent is taken from the group formed * by dimethyl "" forraamide and methanol.

7. Method according to one of claims 2 to 6, ca-30 characterized by the fact that the sensitization treatment is carried out for a time greater than 30 min and at a temperature between room temperature and the reflux temperature of the medium at atmospheric pressure.

8. Method according to claim 1, characterized in that the keratin material consists of cuticle keratins and that the sensitization treatment is carried out by means of at least one decuticulating agent taken from the group formed by ultrasound and formic acid at a concentration greater than 90% by weight in the treatment medium. J 40

9 - The method of claim 8, wherein 1 * 26 decuticulating gent is formic acid, characterized in that the sensitization treatment is carried out for a time greater than 30 minutes and at a temperature between room temperature and reflux temperature at atmospheric pressure.

10. The method of claim 8, wherein the decuticulating agent is an emission of ultrasound, characterized in that the ultrasound has a frequency between 20 KHz and 70 KHz and an action time greater than 30 10 tnn, the dissipated power being between 50 and 150 watts O per dm treated.

11. Method according to one of claims 1 to 10, "characterized in that the enzymatic treatment after the sensitization treatment is carried out at a pH in-15 lower or equal to 9, at a temperature below 50 ° C and with an active concentration of enzymes.

12. Method according to claim 11, characterized in that the enzymatic treatment has a duration of between 20 --- h and 90 ---- h. 20

13 - oligopeptide composition * obtained by the process according to one of claims 1 to 12, characterized in that at least 75% by weight of the oligopeptides which it contains have a molecular weight of between 1,000 and 5,000, the composition containing, in addition, at least 30% by weight of the cystine groups contained in the keratinous material having served as raw material.

14. Use of the composition according to claim 13 for the treatment of hair or skin or in the food industry. ^; ..... Z ........ r- ... IA ......... ...... ^ ....... · ^ ^ ΛΜ. ...... ......% ....... -n: ...... To ......... · * - ·· '- · -' ψ · * · ^