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KR950014309A - 진균성 프로테아제(Fungal protease) - Google Patents

진균성 프로테아제(Fungal protease) Download PDF

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KR950014309A KR1019940028594A KR19940028594A KR950014309A KR 950014309 A KR950014309 A KR 950014309A KR 1019940028594 A KR1019940028594 A KR 1019940028594A KR 19940028594 A KR19940028594 A KR 19940028594A KR 950014309 A KR950014309 A KR 950014309A
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Abstract

본 발명은 아스퍼질러스 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 신규한 DNA서열, 아스퍼질러스 아스파르트산 프로테아제 자체 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 이질성 단백질의 발현에 유용한, 아스파르트산 프로테아제-타입의 프로테아제가 결핍된 신규한 아스퍼질러스 돌연변이체 균주 및 이러한 돌연변이체 균주를 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

진균성 프로테아제(Fungal protease)
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (24)

  1. 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열을 포함하는 분리된 DNA분자.
  2. 제1항에 있어서, 서열확인번호 2에 나타난 아미노산 서열을 갖는 에니, 나이거(A. niger)아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열을 포함하는 DNA분자.
  3. 제2항에 있어서, 서열확인번호 1에 나타낸 DNA서열을 포함하는 DNA분자.
  4. 제1항에 따른 DNA 서열을 포함하는 하이브라드 벡터.
  5. 제4항에 있어서, 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열이, 적절한 숙주내에서 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절 영역과 작동적으로 결합된 하이브리드 벡터.
  6. 제5항에 있어서, 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA 서열이, 아스퍼질러스 균주 내에서 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절 영역과 작동적으로 결합된 하이브리드 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 목적하는 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자와 동질성인 프로모터를 포함하는 하이브리드 벡터.
  8. 제5항에 있어서, 목적하는 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자와 이질성인 아스퍼질러스 프로모터를 포함하는 하이브리드 벡터.
  9. 제1항에 따르는 DNA분자로 형질전환시킨 숙주세포를 배양한 다음, 숙주 세포로부터 상기 DNA분자를 분리시킴을 포함하여, 제1항에 따른 DNA분자를 제조하는 방법.
  10. 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자가 결핍된 아스퍼질러스 균주.
  11. 제10항에 있어서, 서열확인번호 1의 서열을 지니는 pepE 유전자가 결핍된 아스퍼질러스 균주.
  12. 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 시험관 내에서 돌연변이 유발시키고, 돌연변이된 외인성 유전자를 사용하여 상응하는 내재성 염색체성 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 지니는 아스퍼질러스 숙주를 형질전환시킨 다음, 내재성 유전자가 돌연변이된 외인성 유전자로 대체된 돌연변이체를 분리함을 포함 하여, 아스파르트산 프로테아제가 결핍된 아스퍼질러스 균주를 제조하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 분해시킴을 포함하는 방법.
  14. 제13항에 있어서, 서열확인번호 1의 서열을 지니는 에이. 나이거 pepE 유전자를 분열시킴을 포함하는 방법.
  15. 제10항에 따른 아스퍼질러스 균주를, 목적하는 폴리펩타이드의 발현에 적합한 발현 카세트를 지니는 발현 벡터로 형질전환시키고, 이와 같이 형질전환시킨 아스퍼질러스 균주를 목적는 폴리펩타이드의 발현에 적합한 조건하에서 배양한 다음, 목적하는 폴리펩타이드를 분리시킴을 포함하여, 목적하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법.
  16. 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제.
  17. 제16항에 있어서, 서열확인번호 2에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 에이. 나이거 아스파르트산 프로테아제.
  18. 적절한 숙주내에서 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절 영역과 작동적으로 결합된 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열을 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 적절한 숙주를 배양함을 포함하여, 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제를 제조하는 방법.
  19. 적절한 숙주내에서 아스퍼질러스 나이거 아스파라트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절영역과 작동적으로 결합된 아스퍼질러스 나이가 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열을 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 숙주.
  20. 제19항에 있어서, 아스퍼질러스 균주인 숙주.
  21. 제20항에 있어서, 아스퍼질러스 균주내에서 아스퍼질러스-아스파르트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절 요소를 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 아스퍼질러스 균주인 숙주.
  22. 제21항에 있어서, 목적하는 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자와 동질성인 프로모터를 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 아스퍼질러스 균주인 숙주.
  23. 제21항에 있어서, 목적하는 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자와 이질성인 프로모터를 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 형질전환시킨 아스퍼질러스 균주인 숙주.
  24. 적합한 숙주내에서 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제 유전자를 발현시키기에 적절한 조절 영역과 작동적으로 결합된 아스퍼질러스 나이거 아스파르트산 프로테아제를 암호화하는 DNA서열을 포함하는 하이브리드 발현 벡터로 적절한 숙주를 형질전환시킴을 포함하여, 제19항에 따른 형질전환된 숙주를 제조하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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