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KR20240154068A - P2x3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도 - Google Patents

P2x3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도 Download PDF

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KR20240154068A
KR20240154068A KR1020247032530A KR20247032530A KR20240154068A KR 20240154068 A KR20240154068 A KR 20240154068A KR 1020247032530 A KR1020247032530 A KR 1020247032530A KR 20247032530 A KR20247032530 A KR 20247032530A KR 20240154068 A KR20240154068 A KR 20240154068A
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South Korea
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acid
compound
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KR1020247032530A
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English (en)
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수에준 장
양 장
춘 리
시준 레이
리페이 리유
유안 리
칭펭 시아
리'에 리
준 양
Original Assignee
휴먼웰 헬스케어 (그룹) 씨오. 엘티디.
우한 휴먼웰 이노베이티브 드러그 리서치 앤드 디벨롭먼트 센터 리미티드 컴퍼니
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Abstract

본 발명은 P2X3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도에 관한 것이다. 본 발명은 우수한 의학적 특성을 갖는 식 I 화합물의 결정형을 제공한다. 또한, 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 얻었으며, 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A, 벤젠술폰산염 결정형 A, 말론산염 결정형 A와 같은 염의 결정형 생성물을 추가로 얻었다. 따라서, 효과적인 치료 약물의 개발에 있어서 중요한 의미가 있다.

Description

P2X3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도
본 출원은 2022년 3월 29일에 중국 국가지식재산권국에 제출된 출원번호가 202210326113.5이고 발명의 명칭이 "P2X3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도”인 선출원; 및 2023년 3월 21일에 중국 국가지식재산권국에 제출된 출원번호가 202310281376.3이고 발명의 명칭이 "P2X3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체 및 용도”인 선출원의 우선권을 주장하는 바, 상기 선출원의 모든 내용은 참조로서 본 출원에 인용된다.
본 발명은 의학 분야에 속하는 것으로, P2X3 억제제 화합물 및 이의 염, 다형체, 및 이들의 제조 방법 및 응용에 관한 것이다.
P2X 수용체는 주로 손상되거나 염증이 있는 조직에서 파생되는 세포외 ATP에 결합할 수 있는 비선택적 ATP 개폐 이온 채널 수용체인 퓨린성 수용체이다. 이 수용체는 신경계, 면역계, 심혈관계, 골격계, 위장관계, 호흡기계, 내분비계 등 시스템에서 널리 발현되며 심장 박동 및 수축성 조절, 혈관 긴장도 조절, 통각(특히 만성 통증) 조절, 사정 중 정관 수축, 배뇨 중 방광 수축, 혈소판 응집, 대식세포 활성화, 세포사멸 및 뉴런-신경교 상호작용 등 다양한 생리학적 과정에 관여한다. 상기 P2X 수용체에는 7가지 동종 수용체(P2X1, P2X2, P2X3, P2X4, P2X5, P2X6 및 P2X7)와 3가지 이종 수용체(P2X2/3, P2X4/6, P2X1/5)가 포함된다.
P2X3은 P2X 수용체 계열의 아형으로 신경 말단의 후근 신경절, 척수 및 뇌 뉴런, 즉 중소 직경의 일차 감각 뉴런에서 선택적으로 발현된다.
많은 연구에서 일차 감각 뉴런에서 발현되는 P2X3 및 P2X2/3의 활성화가 설치류의 급성 손상, 통각과민 및 과민증에서 중요한 역할을 한다는 것이 밝혀졌다. 많은 연구에서 P2X3 수용체 발현의 상향 조절이 통각과민의 형성을 유도하고 통증 신호 전달에 참여할 수 있음을 보여주었다. P2X3 유전자 녹아웃 마우스는 통증 반응이 감소한 것으로 나타났으며, P2X3 수용체 길항제는 통증 및 염증성 통증 모델에서 통각을 감소시키는 효과가 있음을 보여주었다.
P2X3은 기도 주변의 일차 구심성 신경에 분포되어 있으며 기침을 조절할 수 있다. 연구에 따르면 손상되거나 염증이 있는 기도 조직에서 방출된 ATP는 일차 뉴런의 P2X3 수용체에 작용하여 탈분극 및 활동 전위를 유발하며 이러한 전위의 전달은 기침 충동을 유발하고 기침을 유발한다. P2X3 수용체는 기침 반사 과민증에 중요한 역할을 하는데, P2X3 수용체에 대한 결합을 길항함으로써 기침 반사 과민성을 억제하여 만성 기침 환자의 과도한 기침을 억제할 수 있다. 또한, P2X3 길항제는 만성 폐쇄성 폐질환, 폐섬유화증, 폐동맥 고혈압 또는 천식을 치료할 수 있다는 연구 결과가 나와 있으므로, P2X3 길항제는 이러한 질환 치료를 위한 신약으로도 기대된다.
P2X3은 방광 용량 반사를 조절하는 구심성 경로에 관여하고, P2X3 유전자 녹아웃 마우스의 배뇨 빈도가 크게 감소하고 방광 용량이 크게 증가한 것으로 보고되었다. 따라서 P2X3 수용체 길항제가 P2X3 수용체에 결합하는 것을 억제하면 과민성 방광과 같은 요 축적 및 배뇨 장애의 병증을 치료하는 효과가 있다. 따라서, P2X3 길항제는 과민성 방광 등 관련 질환의 치료를 위한 잠재적인 약물이 될 수 있다.
P2X3 길항제는 현재 일반적으로 사용되는 임상 기침약인 가바펜틴, 모르핀 및 아미트리프틸린 또는 언어 병리학 치료에 사용될 수 있어 전망이 좋다. 이러한 치료법은 많은 환자의 기침을 개선할 수 있지만 모든 환자에게 적합하지는 않으며, 가바펜틴과 같은 중추 약물은 부작용이 있을 수 있어 장기간 사용하기에 적합하지 않기 때문에, 의사에게 약물 옵션을 제공하기 위해 장기간 사용할 수 있는 만성 난치성 기침에 대한 약물을 개발하는 것이 시급한 임상적 필요성이 있으므로, P2X3 길항제의 개발은 임상적으로 중요한 의미가 있다.
중국 특허 출원 CN202111165441.3은 식 I 화합물의 구조를 개시하고 있으며,
식 I 화합물
이 식 I 화합물은 P2X3 수용체 활성을 효과적으로 길항할 수 있으며 P2X3 관련 질환 치료용 약물 제조에 광범위한 응용 전망을 가지고 있으므로, 식 I 화합물 및 이의 염 형태, 결정형에 대한 추가 연구는 효과적인 치료 약물의 개발에 있어서 중요한 의미가 있다.
선행기술에 존재하는 문제를 해결하기 위해, 일 양태에 따르면, 본 발명은 하기와 같은 구조를 갖는 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형을 제공한다.
식 I
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A를 제공하며, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.44°, 14.87°, 15.77°, 17.81°, 18.61°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.44°, 11.14°, 11.36°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 7.44°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 22.36°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 5.99°, 7.44°, 9.01°, 9.93°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 13.88°, 14.20°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 22.36°, 24.07°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 5.99°, 7.44°, 9.01°, 9.93°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 13.88°, 14.20°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 19.39°, 20.26°, 21.14°, 22.36°, 23.34°, 24.07°, 26.33°, 26.78°, 27.18°, 28.17°, 30.20°, 33.88°, 34.35°, 37.23°, 37.70°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 유리염기 결정형 A는 기본적으로 도 1-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 유리염기 결정형 A는,
(1) 유리염기 결정형 A의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 1.28±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 유리염기 결정형 A의 DSC 곡선은 175.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
(3) 유리염기 결정형 A의 DSC 곡선은 176.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 유리염기 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 1-2에 도시된 바와 같고; 상기 유리염기 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 1-3에 도시된 바와 같다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 유리염기 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 유리염기 결정형 A는 응집된 침상 결정 형태이다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B를 제공하며, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 19.09°, 19.56°, 22.09°, 26.49°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 16.72°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 22.09°, 26.49°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 8.35°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 15.05°, 16.72°, 17.80°, 18.39°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 21.67°, 22.09°, 22.97°, 25.16°, 26.49°, 27.49°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 8.35°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 15.05°, 16.72°, 17.80°, 18.39°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 21.67°, 22.09°, 22.97°, 25.16°, 25.45°, 26.49°, 27.49°, 28.66°, 29.10°, 29.35°, 31.71°, 32.00°, 32.85°, 33.70°, 34.23°, 36.78°, 38.26°, 38.70°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 유리염기 결정형 B는 기본적으로 도 2-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 유리염기 결정형 B는,
(1) 유리염기 결정형 B의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 2.36±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 유리염기 결정형 B의 DSC 곡선은 177.0±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
(3) 유리염기 결정형 B의 DSC 곡선은 179.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 유리염기 결정형 B의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 2-2에 도시된 바와 같고; 상기 유리염기 결정형 B의 1H NMR 스펙트럼은 도 2-3에 도시된 바와 같다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 유리염기 결정형 B는 무수 결정형이다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하며, 이는 식 I 화합물과 무기산 또는 유기산으로 형성된 염으로부터 선택될 수 있고, 예를 들어 상기 무기산은 염산, 황산, 인산, 질산, 브롬화수소산을 포함하며; 예를 들어, 상기 유기산은 말레산, L-아스파르트산, 푸마르산, L-타르타르산, 구연산, D-글루쿠론산, L-말산, 히푸르산, D-글루콘산, DL-락트산, 숙신산, L-아스코르브산, 아디프산, 아세트산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 옥살산, 2-히드록시에탄술폰산, 말론산, 겐티스산, 벤조산을 포함하고;
본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물의 염산염, 말레산염, p-톨루엔술폰산염, 벤젠술폰산염 또는 말론산염이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 당업자는 상기 식 I 화합물이 산과 함께 염을 형성하는 경우, 상기 식 I 화합물 대 산의 몰비는 5:1~1:5, 예를 들어 3:1, 2:1, 1:1, 1:1.5, 1:2, 1:2.5, 1:3일 수 있음을 이해할 수 있다. 바람직하게는, 상기 식 I 화합물 대 산의 몰비는 1:1 또는 2:1이다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 염산염 결정형 A를 제공하며, 상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 19.24°, 24.49°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 18.01°, 19.24°, 20.05°, 21.28°, 23.38°, 23.79°, 24.49°, 26.07°, 28.33°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 18.01°, 19.24°, 20.05°, 21.28°, 21.59°, 22.67°, 23.38°, 23.79°, 24.49°, 26.07°, 27.17°, 28.33°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 염산염 결정형 A는 기본적으로 도 3-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 염산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 염산의 몰비는 2:1이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 염산염 결정형 A는 기본적으로 도 9-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 염산염 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 염산염 결정형 A는,
(1) 염산염 결정형 A의 TGA 곡선은 100.0±3℃에서 약 2.19±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 염산염 결정형 A의 TGA 곡선은 100.0±3℃ 내지 160.0±3℃의 온도 구간에서 약 3.90±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(3) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 143.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
(4) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 157.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징;
(5) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 176.0±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징; 및
(6) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 179.0±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 염산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 9-2에 도시된 바와 같고; 상기 염산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 3-2에 도시된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 상기 염산염 결정형 A에는 용매가 남아 있지 않다.
일부 실시형태에서, 상기 염산염 결정형 A는 불규칙한 입자 형태이다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A를 제공하며, 상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 6.73°, 10.84°, 14.68°, 16.26°, 18.23°, 18.44°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.43°, 6.73°, 10.84°, 14.68°, 16.26°, 16.82°, 18.23°, 18.44°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.43°, 6.73°, 9.95°, 10.84°, 11.75°, 13.50°, 14.68°, 16.26°, 16.82°, 18.23°, 18.44°, 20.17°, 22.79°, 23.22°, 24.00°, 26.07°, 27.72°, 28.86°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 말레산염 결정형 A는 기본적으로 도 4-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 말레산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 말레산의 몰비는 2:1이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 말레산염 결정형 A는 기본적으로 도 10-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 말레산염 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 말레산염 결정형 A는,
(1) 말레산염 결정형 A의 TGA 곡선은 110.0±3℃에서 약 1.65±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 말레산염 결정형 A의 TGA 곡선은 110.0±3℃ 내지 220.0±3℃의 온도 구간에서 약 11.88±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(3) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 107.8±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징;
(4) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 143.4±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
(5) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 144.1±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징;및
(6) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 160.2±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개 또는 그 이상을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 말레산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 10-2에 도시된 바와 같고; 상기 말레산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 4-2에 도시된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A를 제공하며, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 15.40°, 17.73°, 21.01°, 24.13°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 15.20°, 15.40°, 16.68°, 17.73°, 19.71°, 21.01°, 24.13°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 14.45°, 14.88°, 15.20°, 15.40°, 16.41°, 16.68°, 17.45°, 17.73°, 19.16°, 19.71°, 20.66°, 21.01°, 21.76°, 22.41°, 24.13°, 25.76°, 26.18°, 27.25°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 14.45°, 14.88°, 15.20°, 15.40°, 16.41°, 16.68°, 17.45°, 17.73°, 19.16°, 19.71°, 20.66°, 21.01°, 21.76°, 22.41°, 24.13°, 25.76°, 26.18°, 27.25°, 27.95°, 29.23°, 30.69°, 31.00°, 31.78°, 38.41°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는 기본적으로 도 5-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 p-톨루엔술폰산의 몰비는 1:1이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는,
(1) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 0.73±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 157.1±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
(3) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 159.2±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 11-2에 도시된 바와 같고; 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 5-2에 도시된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A를 제공하며, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 16.20°, 18.55°, 21.49°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 16.20°, 18.55°, 19.28°, 21.49°, 21.81°, 23.21°, 25.05°, 25.74°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 10.66°, 14.55°, 15.00°, 16.20°, 16.93°, 17.85°, 18.55°, 19.28°, 19.74°, 20.80°, 21.49°, 21.81°, 23.21°, 23.68°, 23.98°, 25.05°, 25.74°, 26.65°, 27.82°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A는 기본적으로 도 6-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 벤젠술폰산의 몰비는 1:1이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A는,
(1) 벤젠술폰산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃에서 약 1.35±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 벤젠술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 159.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
(3) 벤젠술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 160.9±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 6-2에 도시된 바와 같고; 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 6-3에 도시된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A를 제공하며, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 6.75°, 9.96°, 10.67°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 18.04°, 18.29°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 27.38°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 20.27°, 22.57°, 22.95°, 27.38°, 28.83°에서 회절 피크를 갖고; 또한, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 18.63°, 20.27°, 21.57°, 22.57°, 22.95°, 24.11°, 24.83°, 26.02°, 27.38°, 28.83°에서 회절 피크를 가지며; 또한, 상기 말론산염 결정형 A는 기본적으로 도 7-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 말론산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 말론산의 몰비는 2:1이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 말론산염 결정형 A는 기본적으로 도 7-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 말론산염 결정형 A는 무수 결정형이다.
일부 실시형태에서, 상기 말론산염 결정형 A는,
(1) 말론산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃에서 약 2.99±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(2) 말론산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃ 내지 200.0±3℃의 온도 구간에서 약 11.02±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
(3) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 155.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
(4) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 156.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징; 및
(5) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 172.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개를 갖는다.
일부 실시형태에서, 상기 말론산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 7-2에 도시된 바와 같고; 상기 말론산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 7-3에 도시된 바와 같다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 하기 몇 가지 방법을 포함한다.
방법 1: 식 I 화합물을 유기 용매 I에 첨가하여 용해시킨 후 여과하고, 실온에서 휘발시키며;
바람직하게는, 상기 유기 용매 I는 아세톤, 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, 아세토니트릴 및 에틸아세테이트 중 하나 이상으로부터 선택되고;
방법 2: 식 I 화합물을 유기 용매 II에 완전히 용해시키고, 고체가 석출될 때까지 교반 조건 하에 투명한 용액에 반용매를 적가하며; 고체가 석출되지 않으면, 현탁 및 교반하고; 여전히 고체가 석출되지 않으면, 온도를 낮추고 현탁 및 교반한 후, 투명한 용액을 실온에서 휘발시키며;
상기 유기 용매 II는 메탄올, 아세톤, 에틸아세테이트, 테트라히드로푸란, 클로로포름, N,N-디메틸아세트아미드 및 N-메틸피롤리돈 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있고;
상기 반용매는 물, m-자일렌, n-헥산, 큐멘, 톨루엔, 시클로헥산, n-헵탄, n-펜탄 및 p-시멘 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있으며, 예를 들어, 물, 물과 m-자일렌의 혼합물, 물과 n-헥산의 혼합물, 물과 큐멘의 혼합물, 물과 톨루엔의 혼합물, 시클로헥산과 p-시멘의 혼합물로부터 선택된다.
방법 3: 식 I 화합물이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 용매가 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 상기 용매에 잠기지 않으며;
상기 용매는 에탄올, 디클로로메탄, 아세토니트릴, 아세톤, 톨루엔, N,N-디메틸아세트아미드 및 n-헥산 중 하나 이상으로부터 선택되고;
바람직하게는, 방치 시간은 1~8일이다.
방법 4: 식 I 화합물 용액이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 반용매가 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 상기 반용매에 잠기지 않으며;
상기 식 I 화합물 용액 중의 용매는 이소프로필알코올, 메틸이소부틸케톤, 1,4-디옥산 및 디메틸술폭시드 중 하나 이상으로부터 선택되고, 바람직하게는 디메틸술폭시드이며;
상기 반용매는 n-펜탄, 메틸부틸에테르, 물 및 m-자일렌 중 하나 이상으로부터 선택되고, 바람직하게는 n-펜탄과 메틸부틸에테르의 혼합물, 물과 m-자일렌의 혼합물이다.
방법 5: 식 I 화합물 용액에 중합체를 첨가하고, 실온에서 방치하여 휘발시키며;
상기 식 I 화합물 용액 중의 용매는 메탄올, 2-부타논, 메틸아세테이트, 이소프로필아세테이트, 에탄올, 디클로로메탄 및 2-메틸테트라히드로푸란 중 하나 이상으로부터 선택되고;
상기 중합체는 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올, 폴리염화비닐, 폴리비닐아세테이트, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌글리콜, 폴리메틸메타크릴레이트, 알긴산나트륨 및 히드록시에틸셀룰로오스 중 하나 이상으로부터 선택되며;
바람직하게는, 상기 중합체는 혼합 중합체 A 또는 혼합 중합체 B로부터 선택되고; 상기 혼합 중합체 A는 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올, 폴리염화비닐, 폴리비닐아세테이트, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 및 메틸셀룰로오스로 구성되며, 상기 혼합 중합체 B는 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌글리콜, 폴리메틸메타크릴레이트, 알긴산나트륨 및 히드록시에틸셀룰로오스로 구성되고;
바람직하게는, 상기 중합체 대 식 I 화합물의 질량비는 1:(5~20)이다.
방법 6: 식 I 화합물이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 포화염 용액 또는 물이 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 용매에 잠기지 않으며;
바람직하게는, 상기 포화염 용액은 무기염 포화 용액이고, 예를 들어, 포화 아세트산칼륨 용액, 포화 탄산칼륨 용액, 포화 브롬화나트륨 용액 또는 포화 브롬화칼륨 용액으로부터 선택될 수 있으며;
바람직하게는, 시스템의 습도는 15~100% RH이다.
방법 7: 식 I 화합물의 현탁액을 온도 순환 하에 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
상기 현탁액 중의 용매는 n-헵탄, 메틸부틸에테르, 아니솔, 디시클로헥실아민, 아세톤, 에탄올, 에틸아세테이트, 메틸시클로헥산, 클로로포름, 2-부타논, m-자일렌 및 물 중 하나 이상로부터 선택되고, 예를 들어, n-헵탄, 메틸부틸에테르, 아니솔, 부타논과 물의 혼합물, 에탄올과 물의 혼합물, 에틸아세테이트와 메틸시클로헥산의 혼합물, 클로로포름과 n-헵탄의 혼합물, 또는 2-부타논과 m-자일렌의 혼합물로부터 선택되며;
바람직하게는, 상기 온도 순환의 조건은 50℃~5℃, 0.1~0.5℃/min, 최소 2회 순환을 포함한다.
방법 8: 식 I 화합물을 일반 용매에 완전히 용해시키고, 고체가 석출될 때까지 교반 조건 하에 투명한 용액에 반용매를 적가하며; 고체가 석출되지 않으면, 현탁 및 교반하고; 여전히 고체가 석출되지 않으면, 온도를 낮추고 현탁 및 교반한 후, 투명한 용액을 실온에서 휘발시키며;
상기 일반 용매는 에탄올, 에틸아세테이트, 2-메틸테트라히드로푸란, 2-부타논, 아세토니트릴, 디클로로메탄 및 1,4-디옥산 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있고;
상기 반용매는 n-헵탄, 테트라히드로푸란 및 물 중 하나 이상으로부터 선택된다.
방법 9: 식 I 화합물의 혼탁액을 실온에서 자기 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
상기 혼탁액의 용매는 이소부틸알코올, 메틸 tert-부틸 에테르, 시클로헥산, 톨루엔, 이소프로필아세테이트, 물, 메틸시클로헥산, 테트라히드로푸란, n-펜탄, 아세톤, 이소프로필알코올, 시클로펜틸메틸에테르, 메탄올, p-시멘, 디클로로메탄, n-헵탄, 아세토니트릴, 1,4-디옥산 및 N-메틸피롤리돈 중 하나 이상으로부터 선택되고; 예를 들어, 상기 혼탁액의 용매는 이소부틸알코올, 메틸 tert-부틸 에테르, 시클로헥산, 톨루엔, 이소프로필아세테이트와 톨루엔의 혼합물, 물, 메틸시클로헥산, 테트라히드로푸란과 n-펜탄의 혼합물, 아세톤과 이소프로필알코올의 혼합물, 이소프로필알코올과 시클로펜틸메틸에테르의 혼합물, 디클로로메탄과 n-헵탄의 혼합물, 아세토니트릴과 물의 혼합물, 1,4-디옥산과 물의 혼합물, 또는 N-메틸피롤리돈과 물의 혼합물로부터 선택되며;
바람직하게는, 상기 자기 교반의 회전속도는 700~1200rpm이다.
방법 10: 식 I 화합물을 HPLC 병에 칭량하고, HPLC 병에 용매를 첨가한 후, 가열하고 교반하여 평형을 이룬 후 여과하여 상청액을 취하고; 상기 상청액을 생물학적 인큐베이터에 넣고 0.05℃/분으로 50℃에서 5℃로 낮춘 후 5℃에서 항온을 유지하고, 투명한 용액을 -20℃로 옮겨 항온을 유지하며, 석출된 고체를 수집하고, 고체가 석출되지 않은 샘플을 실온으로 옮겨 휘발시키며;
상기 용매는 이소프로필알코올, 아니솔, 이소프로필아세테이트, 테트라히드로푸란 및 물 중 하나 이상으로부터 선택되고;
45~55℃, 바람직하게는 50℃까지 가열한다.
방법 11: 식 I 화합물의 현탁액을 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
상기 현탁액 중의 용매는 n-부탄올(n-BuOH), 톨루엔, 디이소프로필에테르(Isopropyl ether), 메틸시클로헥산, 큐멘, 아니솔, 물, 석유에테르, 디시클로헥실아민, 2-메틸테트라히드로푸란, n-헥산, 2-부타논, 이소프로필아세테이트, 클로로포름, m-자일렌, 테트라히드로푸란, 메틸이소부틸케톤, 시클로펜틸메틸에테르 및 벤질알코올 중 하나 이상으로부터 선택되고; 예를 들어 n-부탄올과 톨루엔의 혼합물, 디이소프로필에테르, 메틸시클로헥산, 큐멘, 아니솔, 물, PET, 디시클로헥실아민, 2-부타논과 큐멘의 혼합물, 이소프로필아세테이트와 톨루엔의 혼합물, 클로로포름과 m-자일렌의 혼합물, 이소프로필아세테이트와 물의 혼합물, 테트라히드로푸란과 물의 혼합물, 메틸이소부틸케톤과 시클로펜틸메틸에테르의 혼합물, 또는 벤질알코올과 톨루엔의 혼합물이며;
상기 현탁액을 45~55℃, 바람직하게는 50℃에서 교반하고;
바람직하게는, 상기 교반은 자기 교반이며, 예를 들어, 상기 자기 교반의 회전속도는 700~1200rpm이다.
다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은,
식 I 화합물의 유리산 결정형 A를 1,4-디옥산에 용해시킨 후 n-헥산 분위기에서 기체-액체 확산을 수행하여 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B를 얻는 단계를 포함한다.
본 발명은 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법을 더 제공하며, 상기 방법은 적합한 용매에서 식 I 화합물 또는 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A를 염 형성 시약(예를 들어, 상응하는 산)과 혼합하여 혼합액을 얻는 단계를 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 제조 방법은, 상기 혼합액을 교반 또는 슬러리화하고, 고체를 분리한 후, 진공 건조시켜 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 얻는 단계를 더 포함하고, 바람직하게는, 상기 교반, 슬러리화, 진공 건조는 실온 조건에서 수행된다.
일부 실시형태에서, 상기 제조 방법은 상기 혼합액의 과포화도를 높이는 단계(예를 들어, 반용매 첨가 단계)를 더 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 용매는 에탄올, 헵탄, 에틸아세테이트, MTBE, 아세토니트릴, 물 및 아세톤 중 하나 또는 다수의 혼합물로부터 선택된다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 약학적 조성물을 제공하며, 상기 약학적 조성물은 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형(예를 들어, 유리염기 결정형 A, 유리염기 결정형 B), 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염(이의 결정형 형태 포함) 중 하나 이상을 포함한다.
일부 실시형태에서, 상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 더 포함한다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 약물의 제조에서 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형(예를 들어, 유리염기 결정형 A, 유리염기 결정형 B), 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염(이의 결정형 형태 포함) 또는 상기 약학적 조성물의 용도를 제공하며, 상기 약물은 P2X3 관련 질환의 치료 및/또는 예방에 사용된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 본 발명에 따른 식 I 화합물의 유리염기 결정형(예를 들어, 유리염기 결정형 A, 유리염기 결정형 B), 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염(이의 결정형 형태 포함) 또는 상기 약학적 조성물을 사용하면 이를 필요로 하는 환자에게 더 우수하고 더 효과적인 임상 치료 약물 또는 방안을 제공할 수 있다.
본 발명은 P2X3 관련 질환의 치료 및/또는 예방 방법을 더 제공하며, 상기 방법은, 환자에게 치료적 유효량의 상술한 식 I 화합물의 결정형, 상술한 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 상술한 염의 결정형, 또는 상술한 약학적 조성물; 바람직하게는, 상술한 식 I 화합물의 유리염기 결정형(예를 들어, 유리염기 결정형 A, 유리산 결정형 B), 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염(이의 결정형 형태 포함) 또는 상기 약학적 조성물을 포함하는 약제학적 제제를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 바람직한 실시형태에서, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물과 염산, 황산, 말레산, L-아스파르트산, 인산, 푸마르산, L-타르타르산, 구연산, D-글루쿠론산, L-말산, 히푸르산, D-글루콘산, DL-락트산, 숙신산, L-아스코르브산, 아디프산, 아세트산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 옥살산, 2-히드록시에탄술폰산, 말론산, 겐티스산, 벤조산으로부터 선택된 산으로 형성된 염을 포함한다.
바람직하게는, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 상기 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A, 벤젠술폰산염 결정형 A, 말론산염 결정형 A, 또는 이들의 염의 임의의 조합을 포함한다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 P2X3 관련 질환은 통증, 비뇨생식기계 질환 또는 호흡기계 질환을 포함한다.
바람직하게는, 상기 통증은 염증성 통증, 수술 통증, 내장 통증, 치통, 월경전 통증, 중추 통증, 화상으로 인한 통증, 편두통 또는 군발성 두통을 포함하며; 바람직하게는, 상기 비뇨생식기계 질환은 요실금, 과민성 방광, 배뇨곤란, 방광염, 자궁내막증, 자궁내막증 관련 통증을 포함하고; 바람직하게는, 상기 호흡기계 질환은 기침, 특발성 폐섬유화증(IPF), 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)을 포함하며; 바람직하게는, 상기 기침은 아급성 또는 만성 기침, 치료 저항성 기침, 특발성 만성 기침, 바이러스 감염 후 기침, 의원성 기침, 호흡기계 질환(예를 들어, COPD, 천식 및 기관지 경련)과 관련된 기침을 포함한다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 P2X3 관련 질환은 만성 기침, 특히 난치성 만성 기침(RCC), 원인 불명의 만성 기침(UCC)으로부터 선택된 적어도 하나를 포함한다.
본 발명은 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형의 품질 검출 방법을 더 제공하며, 상기 방법은 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 상기 결정형의 함량을 검출하는 단계를 포함하고; 상기 고성능 액체 크로마토그래피에 사용되는 이동상은 이동상 A 및 이동상 B를 포함하며;
상기 이동상 A는 포름산(FA) 및 아세토니트릴(ACN)의 수용액이고; 상기 이동상 B는 아세토니트릴이다.
바람직하게는, 상기 이동상 A는 0.05~0.15% 포름산 및 2~7% 아세토니트릴의 수용액, 예시적으로 0.1% 포름산 및 5% 아세토니트릴의 수용액이다.
바람직하게는, 상기 품질 검출 방법은 순도 검출 방법, 용해도 검출 방법, 안정성 검출 방법을 포함한다.
바람직하게는, 상기 고성능 액체 크로마토그래피는 구배 용리를 사용한다.
바람직하게는, 상기 이동상의 유속은 1±0.2mL/min이고; 상기 구배 용리의 시간은 5~60min, 보다 바람직하게는 10~30min이다.
바람직하게는, 상기 구배 용리에서 이동상 A 대 이동상 B의 부피비는 1:9~9:1이다.
용어 정의 및 해석
본 발명에서 사용되는 다양한 용어 및 문구는 당업자에게 공지된 일반적인 의미를 갖지만, 본 발명은 여기서 이들 용어 및 문구에 대한 보다 상세한 설명 및 해석을 제공하고자 하며, 언급된 용어 및 문구가 공지된 의미와 일치하지 않는 경우, 본 발명에서 표현된 의미를 기준으로 한다.
달리 명시하지 않는 한, 본 명세서 및 청구범위에 기재된 수치 범위는 적어도 그 중 각각의 구체적인 정수 수치를 기재하는 것과 동일하다. 예를 들어, 2개 이상은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 이상을 의미한다. 특정 수치 범위가 "숫자”로 정의되거나 이해될 때 해당 범위의 두 끝점, 해당 범위 내의 각 정수 및 해당 범위 내의 각 소수가 기재되는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, "0~10의 수”는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10의 각 정수를 기재하는 것뿐만 아니라, 적어도 그 중 각 정수와 각각 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9의 합을 기재하는 것으로 이해되어야 한다.
본 명세서 및 청구범위에서 "약” 특정 수치가 기재되는 경우, 해당 수치 자체, 및 해당 분야에서 허용되는 해당 수치 전후 범위 내의 수치, 예를 들어 해당 수치±15% 범위 내의 수치, 해당 수치±10% 범위 내의 수치, 해당 수치±5% 범위 내의 수치 등을 포함한다. 예를 들어, 약 10은 10±1.5 범위 내, 즉 8.5~11.5 범위 내의 수치; 10±1.0 범위 내, 즉 9.0~11.0 범위 내의 수치; 및 10±0.5 범위 내, 즉 9.5~10.5 범위 내의 수치를 포함함을 나타낸다.
본 발명의 식 I 화합물의 염, 다형체는 알레르기 반응과 같은 다른 부작용을 유발하지 않는 한 다른 활성 성분과 조합하여 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "조성물”은 지정된 양의 지정된 각 성분을 함유하는 제품, 및 지정된 양의 지정된 각 성분의 조합으로부터 직접 또는 간접적으로 생성되는 임의의 제품을 포함하는 것을 의미한다.
용어 "환자”는 포유동물을 포함하는 임의의 동물, 바람직하게는 마우스, 랫트, 기타 설치류, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 말 또는 영장류, 가장 바람직하게는 인간을 의미한다.
용어 "치료적 유효량”은 연구원, 수의사, 의사 또는 기타 임상의가 조직, 시스템, 동물, 개체 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하려고 하는 활성 화합물 또는 약물의 양을 의미하며, 이는 (1) 질환 예방: 예를 들어 질환, 장애 또는 병증에 감염되기 쉽지만 아직 질환의 병리 또는 증상을 경험하거나 발생하지 않은 개체에서 질환, 장애 또는 병증을 예방하는 것; (2) 질환 억제: 예를 들어 질환, 장애 또는 병증의 병리 또는 증상을 경험하거나 발생하고 있는 개체에서 질환, 장애 또는 병증을 억제하는 것(즉, 병리 및/또는 증상의 추가 발생을 방지하는 것); (3) 질환 완화: 예를 들어 질환, 장애 또는 병증의 병리 또는 증상을 경험하거나 발생하고 있는 개체에서 질환, 장애 또는 병증을 완화시키는 것(즉, 병리 및/또는 증상을 역전시키는 것); 중 하나 이상을 포함한다.
용어 "약학적으로 허용 가능한”은 처방 성분 또는 활성 성분이 일반적인 치료 대상의 건강에 과도한 해로운 영향을 미치지 않음을 의미한다.
용어 "약학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체”는 인간 사용에 적합하고 순도가 충분하고 독성이 충분히 낮아야 하는 하나 이상의 상용성 고체 또는 액체 충전제 또는 겔 물질을 의미한다. "상용성”은 조성물의 각 성분이 화합물의 약효를 크게 감소시키지 않고 본 발명의 화합물과 서로 혼합될 수 있는 것을 의미한다. 약학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체의 일부 예에는 셀룰로오스 및 이의 유도체(예를 들어, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 에틸셀룰로오스나트륨, 셀룰로오스아세테이트 등), 젤라틴, 활석, 고체 윤활제(예를 들어, 스테아르산, 스테아르산마그네슘), 황산칼슘, 식물성 오일(예를 들어, 콩기름, 참기름, 땅콩기름, 올리브유 등), 폴리올(예를 들어, 프로필렌글리콜, 글리세린, 만니톨, 소르비톨 등), 유화제, 습윤제(예를 들어, 라우릴황산나트륨 등), 착색제, 조미제, 안정제, 항산화제, 방부제, 발열원 없는 물 등이 있다. 상기 약학적 조성물은 특히 고체 또는 액체 형태의 경구 투여용, 비경구 주사용, 또는 직장 투여용으로 특별히 제제화될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 투여가 용이하도록 경구 제제(예를 들어, 정제, 캡슐제, 용액제 또는 현탁제), 주사용 제제(예를 들어, 주사 전 약물 용매를 첨가한 후 즉시 사용 가능한 주사용 용액 또는 현탁액 또는 주사용 동결건조 분말)와 같은 다양한 제형으로 제제화될 수 있다.
상기 치료 및/또는 예방 용도로 사용되는 경우, 본 발명의 식 I 화합물의 염, 다형체 및 약학적 조성물의 총 1일 투여량은 신뢰할 수 있는 의학적 판단의 범위 내에서 주치의에 의해 결정되어야 한다. 임의의 구체적인 환자의 경우, 구체적인 치료적 유효량 수준은 여러 요인에 따라 결정되며, 상기 요인은, 치료되는 장애 및 해당 장애의 중증도; 사용된 구체적인 화합물의 활성; 사용된 구체적인 조성물; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별 및 식이요법; 사용된 구체적인 화합물의 투여 시간, 투여 경로 및 배설 속도; 치료 기간; 사용된 특정 화합물과 조합하여 사용되거나 동시에 사용되는 약물; 및 의료 분야에서 공지된 유사한 요소를 포함한다. 예를 들어, 원하는 치료 효과를 얻기 위해 필요한 것보다 낮은 수준에서 화합물의 투여량을 시작하고 원하는 효과가 얻어질 때까지 투여량을 점진적으로 증가시키는 것이 당업계의 일반적인 관행이다.
용어 "API"는 유리염기, 즉 식 I 화합물을 의미한다.
1) 본 발명은 우수한 의학적 특성을 갖는 식 I 화합물의 결정형을 제공한다. 여기서, 유리염기 결정형 A는 흡습성이 낮고 용해도 및 물리적, 화학적 안정성이 우수하며, 상기 유리염기 결정형 A는 실온 및 50℃ 조건에서 열역학적으로 안정한 결정형으로, 이는 약물의 보관, 품질 안정성 및 추가 제조에 유리하다.
2) 본 발명은 최적화 시험 스크리닝을 통해 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 얻었고, 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A, 벤젠술폰산염 결정형 A, 말론산염 결정형 A와 같은 염의 결정형 생성물을 얻었으며, 그 중 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는 흡습성이 거의 없고 물리적, 화학적 안정성이 우수하며 생물학적 용매에 대한 용해도가 더 높고 약학적 가치가 더 좋다.
도 1-1은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 1-2는 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 1-3은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 1-4는 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 PLM 스펙트럼이다.
도 2-1은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 XRPD 스펙트럼이다.
도 2-2는 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 2-3은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 2-4는 유리염기 결정형 A/B 현탁 경쟁 시험 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 3-1은 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 3-2는 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 4-1은 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 4-2는 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 5-1은 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 5-2는 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 6-1은 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 6-2는 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 6-3은 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 7-1은 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 7-2는 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 7-3은 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 7-4는 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 VT-XRPD 스펙트럼이다.
도 8-1은 샘플 1 및 2의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 8-2는 샘플 3, 4, 5 및 6의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 9-1은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 9-2는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 9-3은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 9-4는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 VT-XRPD 스펙트럼이다.
도 9-5는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 PLM 스펙트럼이다.
도 10-1은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 10-2는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 10-3은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 10-4는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 VT-XRPD 스펙트럼이다.
도 10-5는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 PLM 스펙트럼이다.
도 11-1은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼이다.
도 11-2는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼이다.
도 11-3은 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 11-4는 반복적으로 제조된 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 PLM 스펙트럼이다.
도 12는 37℃에서의 동적 용해도 곡선을 보여준다.
도 13은 H2O에서 유리염기 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 14는 SGF에서 유리염기 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 15는 FaSSIF에서 유리염기 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 16은 FeSSIF에서 유리염기 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 17은 H2O에서 염산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 18은 SGF에서 염산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 19는 FaSSIF에서 염산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 20은 FeSSIF에서 염산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 21은 H2O에서 말레산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 22는 SGF에서 말레산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 23은 FaSSIF에서 말레산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 24는 FeSSIF에서 말레산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 25는 H2O에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 26은 SGF에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 27은 FaSSIF에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 28은 FeSSIF에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 29는 유리염기 결정형 A의 DVS 스펙트럼이다.
도 30은 유리염기 결정형 A의 DVS 테스트 전후의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 31은 염산염 결정형 A의 DVS 스펙트럼이다.
도 32는 염산염 결정형 A의 DVS 테스트 전후의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 33은 말레산염 결정형 A의 DVS 스펙트럼이다.
도 34는 말레산염 결정형 A의 DVS 테스트 전후의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 35는 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DVS 스펙트럼이다.
도 36은 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DVS 테스트 전후의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 37은 유리염기 결정형 A의 안정성 평가 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 38은 염산염 결정형 A의 안정성 평가 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 39는 말레산염 결정형 A의 안정성 평가 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 40은 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 안정성 평가 샘플의 XRPD 오버레이를 보여준다.
도 41은 대응되는 화합물을 투여한 동물의 물/퀴닌 워터 섭취 배수에 대한 시험 결과를 보여준다.
도 42는 기니피그에 대응되는 화합물을 투여한 후 히스타민/구연산에 의해 자극된 기침 횟수에 대한 시험 결과를 보여준다.
도 43은 기니피그에 대응되는 화합물을 투여한 후 ATP/구연산에 의해 자극된 기침 횟수에 대한 시험 결과를 보여준다.
이하에서는 구체적인 실시예를 결합하여 본 발명의 기술적 해결수단을 더욱 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하고 해석하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 보호 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다는 점을 이해해야 한다. 본 발명의 상기 내용을 기초로 구현된 모든 기술은 본 발명이 의도하는 보호 범위에 포함된다.
달리 명시하지 않는 한, 다음 실시예에서 사용된 원료 및 시약은 모두 시판되거나 공지된 방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 사용된 기기 및 검출 방법은 다음과 같다.
가. X선 분말 회절(XRPD)
PANalytacal에서 생산한 X선 분말 회절 분석기에서 XRPD 스펙트럼을 수집하였으며, 스캔 매개변수는 하기 표 A-1에 나타낸 바와 같다.
나. 열중량 분석(TGA) 및 시차 주사 열량 분석(DSC)
TA 5500 열중량 분석기 및 TA 2500시차 주사 열량 분석기에서 TGA 및 DSC 스펙트럼을 각각 수집하였으며, 테스트 매개변수는 하기 표 A-2에 나열되어 있다.
다. 동적 수분 흡착(DVS)
표면 측정 시스템(Surface Measurement Systems, SMS)의 DVS IntrInsic에서 동적 수분 흡착(DVS) 곡선을 수집하였다. LiCl, Mg(NO3)2 및 KCl의 조해점을 이용하여 25℃일 때의 상대 습도를 보정하였다. DVS 테스트 매개변수는 하기 표 A-3에 나열되어 있다.
라. 편광현미경(PLM)
편광현미경 사진은 Zeiss Axio Scope.A1 현미경을 사용하여 실온에서 촬영하였다.
마. 액체 NMR(1H NMR)
Bruker 400M NMR 기기에서 액체 NMR 스펙트럼을 수집하였으며, DMSO-d 6 를 용매로 사용하였다.
바. 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)
시험에서 순도, 동적 용해도 및 안정성은 Agilent 1260 고성능 액체 크로마토그래프로 테스트하였고, 이온의 염 형성 몰비는 이온 크로마토그래피로 테스트하였으며, 분석 조건은 하기 표 A-4 및 A-5에 나타낸 바와 같다.
본 발명에서 사용된 시약은 하기 표 A-6에 나타낸 바와 같다.
실시예 1: 중간체 A-1의 합성
제1 단계: 3-브로모-2-플루오로-5-요오도벤조산의 합성
3-브로모-2-플루오로벤조산(10 g, 45.7 mmol)을 진한 황산(40 mL)에 용해시키고, 0℃에서 NIS(10.27 g, 45.7 mmol)를 나누어 첨가한 후, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 얼음물(200 mL)로 퀀칭한 후, 여과하고, 필터 케이크를 물(200 mL)로 5회 세척한 후, 진공 건조시켜 3-브로모-2-플루오로-5-요오도벤조산(10.9 g, 백색 고체, 수율: 69.2%)을 얻었다.
제2 단계: 3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조산의 합성
물(100 mL) 중의 3-브로모-2-플루오로-5-요오도벤조산(10.9 g, 31.6 mmol), 수산화나트륨(6.32 g, 158 mmol) 용액에 산화제일구리(0.656 g, 4.74 mmol)를 첨가하고, 100℃에서 밤새 반응시켰다. 실온으로 냉각시킨 후 여과하고, 여액을 2M 염산 용액으로 pH=1로 조절한 후, 에틸아세테이트(60 mL×3)로 추출하고, 유기상을 농축하여 3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조산(7.2 g, 황색 고체, 수율: 96.8%)을 얻었다.
제3 단계: 메틸 3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조에이트의 합성
3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조산(7.2 g, 30.6 mmol)의 메탄올(120 mL) 용액에 염화티오닐(10.9 g, 91.8 mmol)을 첨가하고, 55℃에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 감압 하에 용매를 제거하고, 농축하여 고체 화합물인 메틸 3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조에이트(3.1 g, 수율: 40.8%)를 얻었으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
제4 단계: 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보란-2-일)벤조에이트의 합성
메틸 3-브로모-2-플루오로-5-히드록시벤조에이트(3.1 g, 12.45 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(3.48 g, 13.69 mmol) 및 아세트산칼륨(3.67 g, 37.3 mmol)을 1,4-디옥산(50 mL)에 용해시키고, 용액을 질소 스트림으로 2분 동안 탈기시켰다. Pd(dppf)Cl2(0.455 g, 0.622 mmol)를 첨가하고, 얻은 용액을 질소 스트림으로 2분 동안 추가 탈기시킨 후, 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 진공 농축한 후, 잔류물을 실리카겔 컬럼으로 분리 및 정제하여 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보란-2-일)벤조에이트(3.4 g, 백색 고체, 수율: 92%)를 얻었다.
제5 단계: 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트(중간체 A-1)의 합성
실온에서, 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보란-2-일)벤조에이트(3.4 g, 11.48 mmol), 2-브로모-5-메틸티아졸(2.453 g, 13.78 mmol), 탄산칼륨(3.81 g, 27.6 mmol)의 THF(30 mL)와 물(10 mL)의 혼합 용액에 Pd(dppf)Cl2(1.260 g, 1.722 mmol)를 첨가하고, 진공을 질소로 3회 교체한 후 90℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 물(30 mL)을 첨가하여 희석하고, 에틸아세테이트(40 mL×3)로 추출한 후, 유기상을 농축 건조시키고, 잔류물을 실리카겔 컬럼으로 분리 및 정제하여 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트(중간체 A-1, 1.41 g, 황색 고체, 수율: 45.9%)를 얻었다.
LC-MS, M/Z: 268.2 [M+H]+.
실시예 2: 식 I 화합물의 제조
제1 단계: (4R,5R)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란-2-옥사이드의 합성
(2R,3R)-(-)-2,3-부탄디올(2 g, 22.19 mmol), 피리딘(3.86 g, 48.8 mmol)을 건조 테트라히드로푸란(20 mL)에 용해시키고, 반응 온도를 0~5℃로 조절한 후, 염화티오닐(2.9 g, 24.41 mmol)을 천천히 첨가하고, 실온으로 올려 16시간 동안 교반한 후, 물(30 mL)을 첨가하여 반응을 퀀칭하고, 20 mL의 에틸아세테이트를 첨가한 후, 분액하고, 유기상을 포화 염화암모늄(20 mL) 및 포화 염화나트륨 수용액(20 mL)으로 세척한 후, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에 농축하여 (4R,5R)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란-2-옥사이드(2.4 g, 무색 액체, 수율: 79%)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 4.63 (dq, J=9.0, 6.1 Hz, 1H), 4.07 (dq, J=9.0, 6.1 Hz, 1H), 1.52 (d, J=6.2 Hz, 3H), 1.43 (d, J=6.1 Hz, 3H).
제2 단계: 메틸 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트의 합성
질소 보호 하에, 메틸 2-플루오로-5-히드록시-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트(중간체 A-1, 500 mg, 1.871 mmol)의 N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 용액에 탄산세슘(1.22 g, 3.74 mmol)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. (4R,5R)-4,5-디메틸-1,3,2-디옥사티올란-2-옥사이드(382 mg, 2.81 mmol)를 첨가하고, 80℃로 올려 16시간 동안 반응시킨 후, 실온으로 냉각시켰다. 반응액을 감압 하에 농축 건조시키고, 클로로포름(20 mL) 및 4M의 황산 용액(20 mL)을 첨가한 후, 혼합 용액을 70℃에서 5시간 동안 교반하고, 분액한 후, 수상의 pH를 중탄산나트륨으로 7~8로 조절하고, 디클로로메탄(20 mL×3)으로 추출한 후, 유기상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:에틸아세테이트(V/V)=2:1)으로 정제하여 메틸 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트(380 mg, 백색 고체, 수율: 60%)를 얻었다.
LC-MS, M/Z: 340.1 [M+H]+.
제3 단계: 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조산의 합성
메틸 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조에이트(200 mg, 0.589 mmol)를 메탄올(4 mL)에 용해시킨 후, 수산화리튬 일수화물(70.7 mg, 1.765 mmol) 및 물(0.4 mL)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 계속 교반하여 반응시켰다. 반응액을 직접 농축 건조시키고, 물(5 mL)을 첨가한 후, 1M의 염산 수용액으로 pH를 2~3으로 조절하고, 수상을 디클로로메탄(5 mL×3)으로 추출한 후, 유기상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 농축하여 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조산(190 mg, 백색 고체, 수율: 99%)을 얻었다.
LC-MS, M/Z: 326.1 [M+H]+.
제4 단계: 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)-N-((R)-1-(2-(트리플루오로메틸)피리미딘-5-일)에틸)벤즈아미드
식 I 화합물
질소 보호 하에, 반응 플라스크에 2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)벤조산(190 mg, 0.584 mmol), (R)-1-(2-(트리플루오로메틸)피리미딘-5-일)에탄-1-아민 염산염(160 mg, 0.701 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(226 mg, 1.752 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)를 순차적으로 넣고, 약 0℃로 냉각시킨 후, 1-프로필포스폰산 무수물의 N,N-디메틸포름아미드 용액(50%, 557 mg, 0.876 mmol)을 적가하고, 적가 완료 후 실온으로 회복시켜 16시간 동안 반응시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(5 mL)을 첨가하여 퀀칭한 후, 에틸아세테이트(10 mL×3)로 추출하고, 유기상을 합한 후, 유기상을 포화 식염수(30 mL×2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 플레이트(석유에테르:에틸아세테이트(V/V)=1:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체2-플루오로-5-(((2S,3R)-3-히드록시부트-2-일)옥시)-3-(5-메틸티아졸-2-일)-N-((R)-1-(2-(트리플루오로메틸)피리미딘-5-일)에틸)벤즈아미드(식 I 화합물, 110 mg, 수율: 37.8%)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.94 (s, 2H), 7.86 (dd, J=5.9, 3.3 Hz, 1H), 7.63-7.58 (m, 1H), 7.50 (dd, J=5.8, 3.4 Hz, 1H), 7.10 (dd, J=12.3, 6.5 Hz, 1H), 5.38 (ddd, J=7.7, 4.4, 1.5 Hz, 1H), 4.40 (qd, J=6.3, 3.3 Hz, 1H), 4.01 (ddd, J=6.5, 4.8, 3.3 Hz, 1H), 2.56 (d, J=1.2 Hz, 3H), 2.07 (d, J=4.9 Hz, 1H), 1.72 (d, J=7.1 Hz, 3H), 1.26 (d, J=6.3 Hz, 3H), 1.23 (d, J=6.5 Hz, 3H).
LC-MS, M/Z: 499.1 [M+H]+.
실시예 3: 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 제조
약 20 mg의 식 I 화합물 샘플을 HPLC 유리 바이알에 칭량하고, 0.5 mL의 톨루엔을 첨가한 후, 얻은 현탁액을 실온에서 약 4일 동안 자기 교반(1000 rpm)한 후, 원심분리(10000 rpm, 2min)하여 고체를 수집하고 XRPD 테스트를 수행하였으며, 도 1-1에 도시된 바와 같이, 테스트 결과에 따라 고체 생성물을 유리염기 결정형 A로 기록하였다. TGA/DSC 결과(도 1-2)는 샘플이 150℃로 가열될 때 1.28%의 중량 손실이 있고 175.6℃(시작 온도)에서 하나의 흡열 피크가 있음을 보여준다. 유리염기 결정형 A의 1H NMR 결과는 도 1-3에 도시된 바와 같다. PLM(도 1-4)은 샘플이 응집된 침상 결정 형태임을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 3-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 4: 식 I 화합물의 유리산 결정형 B의 제조
식 I 화합물의 유리염기 결정형 A를 1,4-디옥산에 용해시킨 후 n-헥산 분위기에서 기체-액체 확산을 수행하고, 고체를 실온에서 건조시켜 유리염기 결정형 B를 얻었다.
유리염기 결정형 B의 XRPD는 도 2-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과(도 2-2)는 샘플이 150℃로 가열될 때 2.36%의 중량 손실이 있고 177.0℃(시작 온도)에서 하나의 흡열 피크가 있음을 보여준다. 유리염기 결정형 B의 1H NMR 결과는 도 2-3에 도시된 바와 같다.
얻은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 4-1에 나타낸 바와 같다.
상이한 온도 조건에서 유리염기 무수 결정형 A 및 B의 열역학적 전환 관계를 확인하기 위해 실온 및 50℃에서 n-헵탄과 톨루엔의 현탁 경쟁 시험을 설정하였다. 구체적인 단계는 다음과 같다. 1) 먼저 해당 온도와 용매에서 출발 샘플인 유리염기 결정형 A의 포화 용액을 조제하고; 2) 혼합 결정 샘플을 적당량 칭량하여 여과된 포화 용액에 첨가하여 현탁액을 형성하며; 3) 각각 대응되는 온도 조건에서 현탁 및 교반한다. 결과는 표 4-2에 요약되어 있고, XRPD 결과는 도 2-4에 요약되어 있으며, 결과는 n-헵탄 시스템에서 50℃ 및 톨루엔 시스템의 실온/50℃ 조건에서 현탁 경쟁한 후 모두 유리염기 결정형 A로 전환되었고, n-헵탄 시스템의 실온 조건에서 현탁 경쟁 42일 후 유리염기 결정형 A로 전환되었음을 보여준다. 실험은 유리염기 결정형 A가 실온 및 50℃ 조건에서 열역학적으로 안정한 결정형임을 보여준다.
실시예 5: 식 I 화합물의 염 형태의 제조 및 스크리닝
약 20 mg의 식 I 화합물 및 등몰량의 상이한 염 형성 제제(즉, 유리염기와 염을 형성하는 산)를 HPLC 바이알에 칭량하고, 0.5 mL의 용매를 첨가하고 혼합하여 현탁액을 얻은 후, 염 형성 제제를 먼저 해당 용매로 희석한 후 출발 샘플과 혼합하였다. 실온에서 약 5일 동안 현탁 및 교반한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온에서 밤새 진공 건조시켰다. 실온 투명 시스템의 경우, 0.5~1.0 mL의 반용매 n-헵탄을 첨가하여 용액의 과포화도를 높이고 결정화를 가속화하였다. 얻은 고체의 XRPD 특성화 결과는 염 형태 스크리닝 시험에서 총 5가지 염 형태를 얻었음을 보여준다(표 5-1).
#: 산/염기 공급 몰비는 1:1이다.
*: 실온에서 3시간 동안 교반한 후 투명한 용액을 얻었으며, 0.5~1.0 mL의 n-헵탄을 첨가한 후 고체 석출이 관찰되었다.
실시예 6: 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 제조
식 I 화합물 샘플 및 등몰량의 염산을 MTBE에서 실온에서 5일 동안 슬러리화한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온에서 진공 건조시켜 염산염 결정형 A를 얻었다.
염산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 3-1에 도시된 바와 같다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 3-2에 도시된 바와 같이, 샘플에서는 MTBE 용매 잔류물이 관찰되지 않았다. HPLC/IC 결과는 염산 대 API(즉, 유리염기)의 몰비가 0.5:1임을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 염산염 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 6-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 7: 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 제조
식 I 화합물 샘플 및 등몰량의 말레산을 EtOAc에서 실온에서 ~3시간 동안 교반한 후, 얻은 투명한 용액에 0.5 mL의 n-헵탄을 첨가하고 실온에서 5일 동안 교반한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온 조건에서 진공 건조시켜 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A를 얻었다.
말레산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 4-1에 도시된 바와 같다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 4-2에 도시된 바와 같다. 결과는 말레산 대 API(즉, 유리염기)의 몰비가 0.5:1이고, EtOAc 및 n-헵탄의 용매 잔류물이 관찰되지 않았음을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 말레산염 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 7-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 8: 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 제조
식 I 화합물 샘플 및 등몰량의 p-톨루엔술폰산을 EtOAc에서 실온에서 5일 동안 교반한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온에서 진공 건조시켜 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A를 얻었다.
p-톨루엔술폰산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 5-1에 도시된 바와 같다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 5-2에 도시된 바와 같다. 결과는 p-톨루엔술폰산 대 API(즉, 유리염기)의 몰비가 1.0:1이고, EtOAc의 용매 잔류물이 관찰되지 않았음을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 8-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 9: 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A의 제조
식 I 화합물 샘플 및 등몰량의 벤젠술폰산을 MTBE에서 실온에서 5일 동안 교반한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온에서 진공 건조시켜 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A를 얻었다.
벤젠술폰산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼은 도 6-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과는 도 6-2에 도시된 바와 같다. TGA 결과는 샘플이 120℃로 가열될 때 1.35%의 중량 손실이 있음을 보여주고; DSC 결과는 샘플이 하나의 흡열 피크가 있고, 시작 온도가 159.6℃이며, 피크 온도가 160.9℃임을 보여준다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 6-3에 도시된 바와 같다. 결과는 벤젠술폰산 대 API(즉, 유리염기)의 몰비가 0.9:1이고, MTBE의 용매 잔류물이 관찰되지 않았음을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 벤젠술폰산염 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 9-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 10: 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 제조
식 I 화합물 및 등몰량의 말론산을 EtOAc에서 실온에서 ~3시간 동안 교반한 후, 얻은 투명한 용액에 0.5 mL의 n-헵탄을 첨가하고 실온에서 5일 동안 교반한 후, 원심분리에 의해 고체를 분리하고 실온에서 진공 건조시켜 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A를 얻었다.
말론산염 결정형 A의 XRPD 스펙트럼은 도 7-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과는 도 7-2에 도시된 바와 같다. TGA 결과는 샘플이 120℃로 가열될 때 2.99%의 중량 손실이 있고, 샘플이 120℃에서 200℃로 가열될 때 11.02%의 중량 손실이 있음을 보여주고; DSC 결과는 샘플이 156.4℃(피크 온도)에서 흡열 피크가 있음을 보여준다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 7-3에 도시된 바와 같다. 결과는 말론산 대 API(즉, 유리염기)의 몰비가 0.7:1이고, EtOAc의 용매 잔류물이 관찰되지 않았음을 보여준다.
VT-XRPD(도 7-4)를 통해 말론산염 결정형 A에 대해 결정형 검정을 수행하였으며, 결과는, 샘플을 N2 하에서 20분 동안 퍼징하고, 120℃로 가열한 후 실온으로 낮추었을 때, 결정형 변화가 관찰되지 않았음을 보여준다.
얻은 식 I 화합물의 말론산염 결정형 A의 XRPD 분석 데이터는 하기 표 10-1에 나타낸 바와 같다.
실시예 11: 식 I 화합물의 다형체의 반복 제조
(가) 유리염기 결정형 B의 반복 제조
표 11-1에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A는 TFE에서 유리염기 결정형 B가 얻어지지 않았고 여전히 유리염기 결정형 A(샘플 1 및 2의 XRPD 스펙트럼은 도 8-1에 도시됨)였으며; 1,4-디옥산에서는 유리염기 결정형 A+B의 혼합 결정(샘플 3, 4, 5, 6의 XRPD 스펙트럼은 도 8-2에 도시됨)이 얻어졌다.
(나) 염 형태의 반복 제조
염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A 및 p-톨루엔술폰산염 결정형 A를 선택하여 300 mg 반복 제조를 수행하였다. 결과는 3가지 염 형태 모두 성공적으로 반복적으로 제조되었음을 보여주고, 염 형태 샘플의 반복 제조 단계는 표 11-2에 요약되어 있다.
1. 염산염 결정형 A
반복적으로 제조된 염산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 9-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과는 도 9-2에 도시된 바와 같고, TGA 결과는 샘플이 100℃로 가열될 때 2.2%의 중량 손실이 있고, 100℃에서 160℃로 가열될 때 3.9%의 중량 손실이 있음을 보여주고; DSC 결과는 샘플이 157.4℃ 및 179.0℃(피크 온도)에서 흡열 피크가 있음을 보여준다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 9-3에 도시된 바와 같이, MTBE 용매 잔류물이 관찰되지 않았다. HPLC/IC 결과는 염산염 결정형 A 샘플의 몰비가 0.5:1(염산:API)임을 보여준다. PLM(도 9-5)은 염산염 결정형 A가 불규칙한 입자 형태임을 보여준다. VT-XRPD(도 9-4)를 통해 염산염 결정형 A에 대해 결정형 검정을 수행하였으며, 결과는 샘플을 N2 하에서 20분 동안 퍼징하고, 100℃로 가열한 후 실온으로 낮추었을 때, 결정형 변화가 관찰되지 않았음을 보여준다.
2. 말레산염 결정형 A
반복적으로 제조된 말레산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 10-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과는 도 10-2에 도시된 바와 같다. TGA 결과는 샘플이 110℃로 가열될 때 1.65%의 중량 손실이 있고, 110℃에서 220℃로 가열될 때 11.88%의 중량 손실이 있음을 보여주고; DSC 결과는 샘플이 144.1℃(피크 온도)에서 흡열 피크가 있음을 보여준다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 10-3에 도시된 바와 같다. 결과는 해당 샘플에서 말레산 대 API의 몰비가 0.5:1이고, 0.3 wt%의 EtOAc 용매 잔류물이 관찰되었음을 보여준다. PLM(도 10-5)은 말레산염 결정형 A가 불규칙한 입자 형태이고 부분적으로 응집되어 있음을 보여준다. VT-XRPD(도 10-4)를 통해 말레산염 결정형 A에 대해 결정형 검정을 수행하였으며, 결과는 샘플을 N2 하에서 20분 동안 퍼징하고, 120℃로 가열한 후 실온으로 낮추었을 때, 결정형 변화가 관찰되지 않았음을 보여준다.
3. p-톨루엔술폰산염 결정형 A
반복적으로 제조된 p-톨루엔술폰산염 결정형 A 샘플의 XRPD 스펙트럼은 도 11-1에 도시된 바와 같다. TGA/DSC 결과는 도 11-2에 도시된 바와 같다. TGA 결과는 샘플이 150℃로 가열될 때 0.73%의 중량 손실이 있음을 보여주고; DSC 결과는 샘플이 하나의 흡열 피크가 있고, 시작 온도가 157.1℃이며, 피크 온도가 159.2℃임을 보여준다. 1H NMR은 DMSO-d 6 에서 측정되었으며, 결과는 도 11-3에 도시된 바와 같다. 결과는 해당 샘플에서 p-톨루엔술폰산 대 API의 몰비가 1.0:1이고, EtOAc 용매 잔류물이 관찰되지 않았음을 보여준다. PLM(도 11-4)은 p-톨루엔술폰산염 결정형 A가 불규칙한 입자 형태임을 보여준다.
실시예 12: 동적 용해도 실험
10 mg/mL(유리염기 기준)의 고체 공급 농도로 37℃에서 회전시켜 혼합하고, 상이한 시점(1, 4 및 24시간)에서 물, SGF, FaSSIF 및 FeSSIF1인 4가지 시스템에서 각 샘플의 용해도를 측정하였다. 각 시점별로 샘플링한 후 원심분리(10000rpm) 및 여과(0.45 μm PTFE 필터 헤드)한 후 여액의 HPLC 농도와 pH 값을 측정하였다. 용해도 시험 결과는 표 12-1에 요약되어 있고, 용해도 곡선은 도 12에 도시된 바와 같으며, 결과는 H2O에서 말레산염 결정형 A의 용해도가 가장 높고, H2O를 제외한 3가지 생물학적 용매에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 1시간 동안의 용해도가 가장 높음을 보여준다. 도 13-28은 각각 H2O, SGF, FaSSIF, FeSSIF에서 유리염기 결정형 A, 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 용해도 샘플의 XRPD 오버레이를 보여주며, 결정형 변화는 표 12-1에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A는 동적 용해도 테스트 동안 결정형 변화가 없어 매우 높은 안정성을 나타냈다.
S: 용해도(mg/mL); a : 유리염기 결정형 A로 전환; b : 유리염기 결정형 B로 전환;
a' : 유리염기 결정형 A로 전환 + 추가 회절 피크; b' : 유리염기 결정형 B로 전환 + 추가 회절 피크;
a+b' : 유리염기 결정형 A + 유리염기 결정형 B로 전환 + 추가 회절 피크.
생물학적 용매의 조제 설명:
모의 위액의 조제(SGF):
100.2 mg의 NaCl 및 50.3 mg의 Triton X-100을 50 mL 메스 플라스크에 칭량하고, 정제수를 첨가하여 용해시켰다. 816 μL의 1M 염산을 첨가하고, 1M의 염산 또는 1M의 NaOH 용액으로 pH를 1.8로 조절하였다. 정제수를 첨가하여 정적하였다.
모의 금식 상태 장액의 조제(FaSSIF):
170.5 mg의 무수 NaH2PO4, 22.2 mg의 NaOH 및 310.9 mg의 NaCl을 50 mL 메스 플라스크에 칭량하였다. 정제수를 첨가하여 용해시키고, 1M의 염산 또는 1M의 NaOH 용액으로 pH를 6.5로 조절하였다. 정제수를 첨가하여 정적하였다. 그런 다음 55.1 mg의 SIF 분말을 25 mL 메스 플라스크에 칭량하고, 상기 용액으로 용해시킨 후 정적하였다.
모의 급식 상태 장액의 조제(FeSSIF):
0.21 mL의 빙초산, 101.6 mg의 NaOH 및 295.4 mg의 NaCl을 25 mL 메스 플라스크에 칭량하였다. 약 20 mL의 정제수를 첨가하여 용해시키고, 1M의 염산 또는 1M의 NaOH 용액으로 pH를 5.0으로 조절하였다. 정제수를 첨가하여 정적하고, 280.8 mg의 SIF 분말을 칭량하여 용해시켰다.
실시예 13: 흡습성
동적 수분 흡착 분석기(DVS)를 통해 실시예 3에서 제조된 유리염기 결정형 A, 및 실시예 11에서 반복적으로 제조된 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A 및 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 흡습성을 평가하였다. 0%RH부터 시작하여 테스트하고 25℃의 일정한 온도 조건에서 습도 변화(0%RH-95%RH-0%RH)에 따른 샘플의 질량 변화 비율을 수집하였다. DVS 테스트 결과 및 DVS 테스트 전후 샘플의 XRPD 결과는 도 29-36에 도시된 바와 같다. 결과에 따르면, 25℃/80%RH에서 유리염기 결정형 A의 수분 흡착은 ~0.91%이며, 이는 약간 흡습성이 있음을 나타내고; 25℃/80%RH에서 염산염 결정형 A의 수분 흡착은 ~0.49%이며, 이는 약간 흡습성이 있음을 나타내고; 25℃/80%RH에서 말레산염 결정형 A의 수분 흡착은 ~0.41%이며, 이는 약간 흡습성이 있음을 나타내고, 습도>80%RH일 때 말레산염 결정형 A가 수분을 빠르게 흡수하는 것으로 관찰되었으며; 25℃/80%RH에서 p-톨루엔술폰산염 결정형 A 샘플의 수분 흡착은 ~0.12%이며, 이는 흡습성이 거의 없음을 나타낸다. 유리염기 결정형 A, 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A 및 p-톨루엔술폰산염 결정형 A 샘플은 DVS 테스트 후에도 결정형이 모두 변하지 않았다.
실시예 14: 고체 상태 안정성
실시예 3에서 제조된 유리염기 결정형 A, 및 실시예 11에서 반복적으로 제조된 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A 및 p-톨루엔술폰산염 결정형 A를 각각 60℃에서 입구가 폐쇄된 상태로 1일 동안 방치하고, 25℃/60%RH 및 40℃/75%RH 조건에서 입구가 개방된 상태로 1주 및 1개월 동안 방치한 후(그 중 염산염 결정형 A 및 말레산염 결정형 A는 1주 동안만 방치함), XRPD 및 HPLC를 통해 샘플의 물리적, 화학적 안정성을 검출하였다. 순도 데이터는 표 14-1에 나열되어 있으며, XRPD 결과는 도 37 내지 도 40에 도시된 바와 같다. 결과는 유리염기 결정형 A, 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A 및 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 HPLC 순도가 대응되는 조건 하에 놓인 후에 크게 변하지 않는다는 것을 보여준다.
실시예 15: 식 I 화합물의 유리염기 결정형의 다양한 제조 공정
실시예 2의 공정 방법에 따라 식 I 화합물을 제조하였으며, 다음과 같은 방법에 따라 유리염기 결정형 A 또는 유리염기 결정형 B(XRPD에 의해 검정)를 제조할 수 있다.
방법 1. 느린 휘발
상이한 용매 시스템을 사용하여 총 6개의 느린 휘발 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 5 mL 바이알에 각각 칭량한 후, 표 15-1의 용매 0.4~0.6 mL를 각각 첨가하고, 용해시킨 후 여과하고, 밀봉 필름으로 바이알을 밀봉하고 2개의 바늘 구멍을 뚫은 후, 실온에 방치하여 천천히 휘발시켰다. 얻은 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-1에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A/B를 얻었다.
방법 2. 기체-고체 침투
상이한 용매를 사용하여 총 8개의 기체-고체 침투 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 3 mL 바이알에 칭량한 후, 약 3 mL의 용매를 20 mL 바이알에 넣고, 3 mL 바이알을 입구가 개방된 상태로 20 mL 바이알에 넣은 후, 20 mL 바이알을 밀봉하였다. 실온에 1~8일 동안 방치한 후 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-2에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A 및 유리염기 결정형 A+B를 얻었다.
*: 투명해진 후 실온으로 옮겨 휘발시켜 얻음.
방법 3. 기체-액체 침투
상이한 용매를 사용하여 총 8개의 기체-액체 침투 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 3 mL 바이알에 칭량하고, 0.4~2.2 mL의 용매를 첨가하여 용해시킨 후(0.45 μm PTFE 필터 헤드를 사용하여 여과), 약 3 mL의 반용매를 20 mL 바이알에 넣고, 투명한 용액이 들어 있는 3 mL 바이알을 입구가 개방된 상태로 20 mL 바이알에 넣은 후, 20 mL 바이알을 밀봉하여 실온에 방치하였다. 얻은 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-3에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A/B 및 저결정도를 얻었다.
*:실온으로 옮겨 휘발시켜 얻음.
방법 4. 폴리머 유도
2가지 혼합 폴리머를 사용하여 상이한 용매에서 총 8개의 폴리머 유도 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 3 mL 바이알에 칭량한 후, 0.4~1.0 mL의 용매를 첨가하여 용해시키고, 용해시킨 후 여과하고, ~2 mg의 혼합 중합체를 첨가한 후, 밀봉 필름으로 바이알을 밀봉하고 2개의 작은 구멍을 뚫은 후, 실온에 방치하여 천천히 휘발시켰다. 시험 결과는 표 15-4에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A 및 유리염기 결정형 A+B를 얻었다.
혼합 폴리머A: 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올, 폴리염화비닐, 폴리비닐아세테이트, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 및 메틸셀룰로오스(등질량 혼합)
혼합 폴리머B: 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌글리콜, 폴리메틸메타크릴레이트, 알긴산나트륨 및 히드록시에틸셀룰로오스(등질량 혼합)
방법 5. 습도 유도
상이한 용매를 사용하여 총 5개의 습도 유도 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 3 mL 바이알에 각각 칭량한 후, 실온에서 20 mL 바이알에 포화염 용액을 조제하고, 3 mL 바이알을 입구가 개방된 상태로 20 mL 바이알에 넣은 후, 20 mL 바이알을 밀봉하였다. 실온에 8일 동안 방치한 후 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-5에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A를 얻었다.
방법 6. 승온/감온 순환
상이한 용매를 사용하여 총 9개의 승온/감온 순환 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 HPLC 유리 바이알에 칭량한 후, 표 15-6에 나열된 용매 0.5 mL를 각각 첨가하고, 얻은 현탁액을 온도 순환(50℃~5℃, 0.1℃/min, 2회 순환) 하에 자기 교반(1000 rpm)하고, 원심분리(10000 rpm, 2min) 후 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-6에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A를 얻었다.
방법 7. 반용매 첨가
상이한 용매를 사용하여 총 12개의 반용매 첨가 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 20 mL 바이알에 각각 칭량한 후, 0.4~0.6 mL의 용매(표 15-7)를 사용하여 고체를 완전히 용해시켰다. 고체가 석출될 때까지 이 투명한 용액에 표 15-7의 반용매를 교반(1000 rpm)하면서 적가하거나, 또는 반용매의 전체 부피가 5 mL가 될 때까지 첨가한 후, 고체가 석출되지 않은 샘플을 5℃에서 현탁 및 교반하고, 여전히 고체가 석출되지 않으면, -20℃에서 현탁 및 교반하고, 최종 투명한 샘플을 실온에서 휘발시켰다. 석출된 고체를 분리하여 XRPD 테스트를 수행하였으며, 결과는 표 15-7에 나타낸 바와 같이, 반용매 첨가 시험에서 유리염기 결정형 A 및 투명한 용액을 얻었다.
*: 반용매 첨가 후 투명한 용액을 얻어 5℃로 옮겨 교반하였다.
방법 8. 반-반용매 첨가
상이한 용매를 사용하여 총 8개의 반-반용매 첨가 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 20 mL 바이알에 각각 칭량한 후, 0.4~0.6 mL의 용매(표 15-8)를 사용하여 고체를 완전히 용해시켰다. 이 투명한 용액을 교반(1000 rpm)하면서 표 15-8의 반용매 5 mL에 적가한 후, 고체가 석출되지 않은 샘플을 5℃에서 현탁 및 교반하고, 여전히 고체가 석출되지 않으면, -20℃에서 현탁 및 교반하고, 최종 투명한 샘플을 실온에서 휘발시켰다. 석출된 고체를 분리하여 XRPD 테스트를 수행하였으며, 결과는 표 15-8에 나타낸 바와 같이, 반용매 첨가 시험에서 유리염기 결정형 A를 얻었다.
*: 샘플은 5℃에서 교반하여 얻어졌고; #: 샘플은 -20℃에서 교반하여 얻어졌다.
방법 9. 실온 현탁 및 교반
상이한 용매를 사용하여 총 15개의 실온 현탁 및 교반 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20~40 mg을 HPLC 유리 바이알에 칭량한 후, 표 15-9에 나열된 용매 0.5 mL를 각각 첨가하고, 얻은 혼탁액을 실온에서 약 4 동안 자기 교반(1000 rpm)한 후, 원심분리(10000 rpm, 2min)하여 고체를 수집하고 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-9에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A를 얻었다.
방법 10. 느린 감온
상이한 용매 시스템을 사용하여 총 5개의 느린 감온 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20 mg을 HPLC 바이알에 칭량한 후, 표 15-10의 용매 1.0 mL를 첨가하고, 50℃에서 약 2시간 동안 교반하여 평형을 이룬 후 여과(0.45 μm PTFE 필터 헤드를 사용하여 여과)하여 상청액을 취하였다. 얻은 상청액을 생물학적 인큐베이터에 넣고 0.05℃/분으로 50℃에서 5℃로 낮춘 후 5℃에서 항온을 유지하고, 투명한 용액을 -20℃로 옮겨 항온을 유지하였다. 석출된 고체를 수집하여 XRPD 테스트를 수행하였으며, 고체가 석출되지 않은 샘플을 실온으로 옮겨 휘발시켰다. 시험 결과는 표 15-10에 나타낸 바와 같이, 느린 감온 시험에서 유리염기 결정형 A 및 유리염기 결정형 B + 다중 피크를 얻었다.
*: 샘플은 실온에서 휘발시켜 얻어졌다.
방법 11. 50℃ 현탁 및 교반
상이한 용매를 사용하여 총 16개의 50℃ 현탁 및 교반 시험을 설정하였다. 각 식 I 화합물 샘플 약 20~40 mg을 HPLC 유리 바이알에 칭량한 후, 표 15-11에 나열된 용매 0.5 mL를 각각 첨가하고, 얻은 현탁액을 50℃에서 약 3일 동안 자기 교반(1000 rpm)한 후, 원심분리(10000 rpm, 2min)하여 고체를 수집하고 XRPD 테스트를 수행하였다. 시험 결과는 표 15-11에 나타낸 바와 같이, 유리염기 결정형 A를 얻었다.
*: 샘플은 50℃에서 투명해졌으며, 실온으로 옮겨 교반하여 얻어졌다.
실시예 16
대조 화합물 1 및 대조 화합물 2는 특허 출원 WO 2016/091776A1을 참조하여 합성하였다.
대조 화합물 1 대조 화합물 2
가. FLIPR 방법에 의한 hP2X3에 대한 hP2X3 길항제의 길항 활성 측정
hP2X3에 대한 인간 P2X3 수용체(hP2X3) 길항제의 길항 활성을 평가하기 위해, FLIPR Calcium 4 Assay Kit(Molecular Devices, R8141) 및 FLIPR TETRA instrument(Molecular Devices, 0296)를 사용하여 칼슘 흐름 신호를 검출하였다. 실험 24시간 전, hP2X3 수용체로 안정적으로 형질감염된 인간 세포를 384웰 플레이트에 2×105개 세포/mL의 밀도로 플레이팅하고, 각 웰에 50 μL의 세포 현탁액을 넣은 후, 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 16~24시간 동안 배양하였다. DMSO를 사용하여 필요한 농도의 180배의 테스트 화합물(20~50mM DMSO 저장 용액)을 조제하고, 각 웰에서 500 nL를 취하여 384웰 플레이트에 첨가한 후, 30 μL의 FLIPR Assay buffer(1.26mM Ca2+를 함유한 1×HBSS+2mM CaCl2 20mM HEPES)을 보충하고, 20~40분 동안 흔들어 균일하게 혼합하였다. FLIPR Assay buffer를 사용하여 필요한 농도의 3배의 작용제(α,β-meATP)(필요한 최종 농도는 400 nM)를 조제하고, 각 웰에 45 μL의 작용제를 다른 384웰 플레이트에 첨가하였다. 하루 전에 플레이팅한 세포 배양 플레이트를 꺼내 세포 상청액을 버리고, 각 웰에 Dye(FLIPR® Calcium 4 Assay Kit, FLIPR buffer 희석) 30 μL를 첨가하고 1시간 동안 배양하였다. 각 웰의 세포에 15 μL의 화합물을 첨가하고((FLIPR 기기로 첨가), 15분 후, 각 웰에 22.5 μL의 작용제를 첨가하고, 형광 신호(여기 파장 470nm~495nm, 방출 파장 515nm~575nm)를 검출하였다. 신호의 피크값과 밸리값의 차이를 기본 데이터로 사용하고, 양성 약물의 최고 농도 데이터를 100% 억제율로 사용하며, DMSO 데이터를 0% 억제율로 사용하고, 소프트웨어 GraphpadPrism6에서 화합물의 억제 효과 곡선을 피팅하고 IC50 값을 계산하였다.
나. 마우스 약동학 시험
마우스 약동학 시험을 위해 수컷 ICR 마우스(20~25 g)를 밤새 금식시켰다. 3마리의 마우스를 취하고 10 mg/kg을 경구 위내 투여하고, 투여 전과 투여 후 15, 30분 및 1, 2, 4, 8, 24시간에 혈액을 채취하였다. 혈액 샘플을 2~8℃에서 6800g으로 6분 동안 원심분리하고 혈장을 수집하여 -80℃에서 보관하였다. 각 시점의 혈장을 취하여 내부 표준 물질이 함유된 아세토니트릴 용액의 3~5배의 양을 첨가하고, 1분 동안 볼텍싱하여 혼합한 후, 4℃에서 13000 rpm/분으로 10분 동안 원심분리하고, 상청액을 취하여 3배의 양의 물을 첨가하여 혼합한 후, 정당량의 혼합액을 취하여 LC-MS/MS 분석을 수행하였다. 주요 약동학적 매개변수는 WinNonlin 7.0 소프트웨어 비구획 모델을 사용하여 분석되었다.
시험 결과는 마우스 모델에서 대조 화합물 1 및 2와 비교하여 본 발명의 식 I 화합물의 약동학적 특성이 어느 정도 개선되었음을 보여준다.
다. 랫트 미각 시험
SD 랫트에게 3일 동안 밤새 금수 훈련을 실시한 후 약물을 투여하고, 투여 30분 후 각 동물에게 물 1병과 0.3 mM 퀴닌 수용액 1병을 공급하고, 물 공급 15분 후 물병을 제거한 후, 랫트의 물 섭취량과 0.3 mM 퀴닌 워터 섭취량을 각각 측정하였으며, 물 섭취량과 퀴닌 워터 섭취량의 차이(도 41)에 따라 SD 랫트의 미각에 대한 화합물의 영향을 평가하였다.
라. 기니피그에 대한 히스타민/구연산 기침 효능 시험
그룹에 들어가기 전 동물을 3~7일 동안 적응적으로 사육하여 목표 체중(300~400 g)에 도달한 후 번호를 매기고 무작위로 그룹화하였다.
기침 평가 0.25~24시간 전에 화합물 또는 부형제를 비강 점적을 통해 기니피그에 투여하였다. 시험 제품의 투여량 범위는 0.17mg/kg~1.5mg/kg이다. 기침 평가 동안 동물을 전신 용적 스캐닝 상자에 넣어 적응시킨 후 히스타민으로 분무한 다음 구연산으로 분무하였다. 히스타민 분무 시작부터 관찰 기간 종료까지 22분 이내에 동물의 기침 횟수와 기침 잠복기를 기록하였다.
실험 데이터 통계는 일원 배치 분산 분석 방법(one-way ANOVA)을 사용하여 각 그룹의 데이터를 분석하고 비교함으로써 수행하였다. 통계 분석 결과는 p<0.05일 때 유의한 차이가 있는 것으로 간주하였다. 차이를 비교하기 위해 t-test 방법을 사용하여 쌍별 비교를 수행하였다.
데이터에 따르면, 대조 화합물 1과 비교하여, 본 발명의 화합물은 구연산/히스타민 자극 기니피그 기침 모델에서 동물의 기침 횟수를 유의하게 감소시키고, 기침 잠복기를 연장시키며, 우수한 진해 효과를 나타냄을 보여준다(도 42) .
마. 기니피그에 대한 ATP/구연산 기침 효능 시험
그룹에 들어가기 전 동물을 3~7일 동안 적응적으로 사육하여 목표 체중(300~400 g)에 도달한 후 번호를 매기고 무작위로 그룹화하였다. 기침 평가 0.25~24시간 전에 화합물 또는 부형제를 비강 점적을 통해 기니피그에 투여하였다. 시험 제품의 투여량 범위는 0.17mg/kg~1.5mg/kg이다. 기침 평가 동안 동물을 전신 용적 스캐닝 상자에 넣어 적응시킨 후 ATP로 분무하고 몇 분간 기다린 다음 구연산으로 분무하였다. 구연산 분무 시작으로 15분 이내에 동물의 기침 횟수와 기침 잠복기를 기록하였다.
일원 배치 분산 분석 방법(one-way ANOVA)을 사용하여 각 그룹의 데이터를 분석하고 비교하였다. 통계 분석 결과는 p<0.05일 때 유의한 차이가 있는 것으로 간주하였다. 차이를 비교하기 위해 t-test 방법을 사용하여 쌍별 비교를 수행하였다.
데이터에 따르면, 대조 화합물 1과 비교하여, 본 발명의 화합물은 구연산/ATP 자극 기니피그 기침 모델에서 동물의 기침 횟수를 유의하게 감소시키고, 기침 잠복기를 연장시키며, 우수한 진해 효과를 나타냄을 보여준다(도 43).
이상, 본 발명의 실시형태를 설명하였다. 그러나, 본 발명은 상기 실시형태에 한정되지 않는다. 본 발명의 사상과 원칙을 벗어나지 않는 범위에서 이루어지는 임의의 수정, 등가적 대체, 개선 등은 모두 본 발명의 보호 범위에 포함되어야 한다.

Claims (18)

  1. 하기와 같은 구조를 갖는 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형:

    식 I.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 결정형은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A이고, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.44°, 14.87°, 15.77°, 17.81°, 18.61°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.44°, 11.14°, 11.36°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 7.44°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 22.36°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 5.99°, 7.44°, 9.01°, 9.93°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 13.88°, 14.20°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 22.36°, 24.07°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 3.75°, 5.99°, 7.44°, 9.01°, 9.93°, 11.14°, 11.36°, 11.98°, 12.25°, 13.88°, 14.20°, 14.87°, 15.77°, 16.97°, 17.81°, 18.61°, 19.39°, 20.26°, 21.14°, 22.36°, 23.34°, 24.07°, 26.33°, 26.78°, 27.18°, 28.17°, 30.20°, 33.88°, 34.35°, 37.23°, 37.70°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A는 기본적으로 도 1-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A는,
    (1) 유리염기 결정형 A의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 1.28±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 유리염기 결정형 A의 DSC 곡선은 175.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
    (3) 유리염기 결정형 A의 DSC 곡선은 176.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 TGA/DSC 스펙트럼은 도 1-2에 도시된 바와 같고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 A의 1H NMR 스펙트럼은 도 1-3에 도시된 바와 같은, 결정형.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 결정형은 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B이고, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 19.09°, 19.56°, 22.09°, 26.49°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 16.72°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 22.09°, 26.49°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 8.35°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 15.05°, 16.72°, 17.80°, 18.39°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 21.67°, 22.09°, 22.97°, 25.16°, 26.49°, 27.49°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 B의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.21°, 8.35°, 12.48°, 13.17°, 14.41°, 15.05°, 16.72°, 17.80°, 18.39°, 19.09°, 19.56°, 20.90°, 21.67°, 22.09°, 22.97°, 25.16°, 25.45°, 26.49°, 27.49°, 28.66°, 29.10°, 29.35°, 31.71°, 32.00°, 32.85°, 33.70°, 34.23°, 36.78°, 38.26°, 38.70°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 B는 기본적으로 도 2-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 유리염기 결정형 B는,
    (1) 유리염기 결정형 B의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 2.36±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 유리염기 결정형 B의 DSC 곡선은 177.0±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
    (3) 유리염기 결정형 B의 DSC 곡선은 179.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는, 결정형.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물과 무기산 또는 유기산으로 형성된 염을 포함하고;
    상기 무기산은 염산, 황산, 인산, 질산, 브롬화수소산을 포함하며;
    상기 유기산은 말레산, L-아스파르트산, 푸마르산, L-타르타르산, 구연산, D-글루쿠론산, L-말산, 히푸르산, D-글루콘산, DL-락트산, 숙신산, L-아스코르브산, 아디프산, 아세트산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 옥살산, 2-히드록시에탄술폰산, 말론산, 겐티스산, 벤조산을 포함하고;
    바람직하게는, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물의 염산염, 말레산염, p-톨루엔술폰산염, 벤젠술폰산염, 말론산염인, 결정형.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형은 식 I 화합물의 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A, 벤젠술폰산염 결정형 A, 말론산염 결정형 A인, 결정형.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 19.24°, 24.49°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 18.01°, 19.24°, 20.05°, 21.28°, 23.38°, 23.79°, 24.49°, 26.07°, 28.33°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 7.77°, 9.01°, 10.10°, 15.54°, 17.51°, 18.01°, 19.24°, 20.05°, 21.28°, 21.59°, 22.67°, 23.38°, 23.79°, 24.49°, 26.07°, 27.17°, 28.33°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A는 기본적으로 도 3-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 염산의 몰비는 2:1이고;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A는 기본적으로 도 9-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 염산염 결정형 A는,
    (1) 염산염 결정형 A의 TGA 곡선은 100.0±3℃에서 약 2.19±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 염산염 결정형 A의 TGA 곡선은 100.0±3℃ 내지 160.0±3℃의 온도 구간에서 약 3.90±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (3) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 143.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
    (4) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 157.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징;
    (5) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 176.0±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징; 및
    (6) 염산염 결정형 A의 DSC 곡선은 179.0±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개를 갖는, 결정형.
  7. 제5항에 있어서,
    상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 6.73°, 10.84°, 14.68°, 16.26°, 18.23°, 18.44°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.43°, 6.73°, 10.84°, 14.68°, 16.26°, 16.82°, 18.23°, 18.44°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.43°, 6.73°, 9.95°, 10.84°, 11.75°, 13.50°, 14.68°, 16.26°, 16.82°, 18.23°, 18.44°, 20.17°, 22.79°, 23.22°, 24.00°, 26.07°, 27.72°, 28.86°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A는 기본적으로 도 4-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 말레산의 몰비는 2:1이고;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A는 기본적으로 도 10-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 말레산염 결정형 A는,
    (1) 말레산염 결정형 A의 TGA 곡선은 110.0±3℃에서 약 1.65±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 말레산염 결정형 A의 TGA 곡선은 110.0±3℃ 내지 220.0±3℃의 온도 구간에서 약 11.88±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (3) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 107.8±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징;
    (4) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 143.4±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
    (5) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 144.1±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징; 및
    (6) 말레산염 결정형 A의 DSC 곡선은 160.2±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개 또는 그 이상을 갖는, 결정형.
  8. 제5항에 있어서,
    상기 p-벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 15.40°, 17.73°, 21.01°, 24.13°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 15.20°, 15.40°, 16.68°, 17.73°, 19.71°, 21.01°, 24.13°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 14.45°, 14.88°, 15.20°, 15.40°, 16.41°, 16.68°, 17.45°, 17.73°, 19.16°, 19.71°, 20.66°, 21.01°, 21.76°, 22.41°, 24.13°, 25.76°, 26.18°, 27.25°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 4.99°, 7.26°, 8.70°, 8.87°, 14.45°, 14.88°, 15.20°, 15.40°, 16.41°, 16.68°, 17.45°, 17.73°, 19.16°, 19.71°, 20.66°, 21.01°, 21.76°, 22.41°, 24.13°, 25.76°, 26.18°, 27.25°, 27.95°, 29.23°, 30.69°, 31.00°, 31.78°, 38.41°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는 기본적으로 도 5-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖고;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 p-톨루엔술폰산의 몰비는 1:1이며;
    바람직하게는, 상기 p-톨루엔술폰산염 결정형 A는,
    (1) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 TGA 곡선은 150.0±3℃에서 약 0.73±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 157.1±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
    (3) p-톨루엔술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 159.2±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는, 결정형.
  9. 제5항에 있어서,
    상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 16.20°, 18.55°, 21.49°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 16.20°, 18.55°, 19.28°, 21.49°, 21.81°, 23.21°, 25.05°, 25.74°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.36°, 7.28°, 8.34°, 9.64°, 10.66°, 14.55°, 15.00°, 16.20°, 16.93°, 17.85°, 18.55°, 19.28°, 19.74°, 20.80°, 21.49°, 21.81°, 23.21°, 23.68°, 23.98°, 25.05°, 25.74°, 26.65°, 27.82°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A는 기본적으로 도 6-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 가지며;
    바람직하게는, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 벤젠술폰산의 몰비는 1:1이고;
    바람직하게는, 상기 벤젠술폰산염 결정형 A는,
    (1) 벤젠술폰산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃에서 약 1.35±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 벤젠술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 159.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징; 및
    (3) 벤젠술폰산염 결정형 A의 DSC 곡선은 160.9±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개 또는 3개를 갖는, 결정형.
  10. 제5항에 있어서,
    상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 6.75°, 9.96°, 10.67°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 18.04°, 18.29°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 27.38°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 20.27°, 22.57°, 22.95°, 27.38°, 28.83°에서 회절 피크를 갖고;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A의 X선 분말 회절 스펙트럼은 2θ±0.2° 회절 각도로 표시되는 5.34°, 6.75°, 9.96°, 10.67°, 11.83°, 13.49°, 14.48°, 16.04°, 16.88°, 17.04°, 18.04°, 18.29°, 18.63°, 20.27°, 21.57°, 22.57°, 22.95°, 24.11°, 24.83°, 26.02°, 27.38°, 28.83°에서 회절 피크를 가지며;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A는 기본적으로 도 7-1에 도시된 XRPD 스펙트럼을 갖고;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A에서 식 I 화합물 대 말론산의 몰비는 2:1이며;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A는 기본적으로 도 7-4에 도시된 VT-XRPD 스펙트럼을 갖고;
    바람직하게는, 상기 말론산염 결정형 A는,
    (1) 말론산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃에서 약 2.99±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (2) 말론산염 결정형 A의 TGA 곡선은 120.0±3℃ 내지 200.0±3℃의 온도 구간에서 약 11.02±1%의 중량 손실을 갖는 특징;
    (3) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 155.6±3℃에서 하나의 흡열 피크의 시작점을 갖는 특징;
    (4) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 156.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징; 및
    (5) 말론산염 결정형 A의 DSC 곡선은 172.4±3℃에서 하나의 흡열 피크를 갖는 특징 중 1개, 2개, 3개 또는 4개를 갖는, 결정형.
  11. 식 I 화합물의 염으로서,
    상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물과 무기산 또는 유기산으로 형성된 염을 포함하고; 식 I 화합물은 하기와 같은 구조를 가지며,

    식 I
    상기 무기산은 염산, 황산, 인산, 질산, 브롬화수소산을 포함하고;
    상기 유기산은 말레산, L-아스파르트산, 푸마르산, L-타르타르산, 구연산, D-글루쿠론산, L-말산, 히푸르산, D-글루콘산, DL-락트산, 숙신산, L-아스코르브산, 아디프산, 아세트산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, 옥살산, 2-히드록시에탄술폰산, 말론산, 겐티스산, 벤조산을 포함하며;
    바람직하게는, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물의 염산염, 말레산염, p-톨루엔술폰산염, 벤젠술폰산염, 말론산염이고;
    바람직하게는, 상기 식 I 화합물 대 산의 몰비는 5:1~1:5, 예를 들어 3:1, 2:1, 1:1, 1:1.5, 1:2, 1:2.5, 1:3이며, 바람직하게는, 상기 식 I 화합물 대 산의 몰비는 1:1 또는 2:1인, 식 I 화합물의 염.
  12. 제2항에 따른 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A의 제조 방법으로서,
    하기 방법 1 내지 방법 11 중 어느 하나로부터 선택되되,
    방법 1: 식 I 화합물을 유기 용매 I에 첨가하여 용해시킨 후 여과하고, 실온에서 휘발시키며;
    바람직하게는, 상기 유기 용매 I는 아세톤, 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, 아세토니트릴, 에틸아세테이트 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    방법 2: 식 I 화합물을 유기 용매 II에 완전히 용해시키고, 고체가 석출될 때까지 교반 조건 하에 투명한 용액에 반용매를 적가하며; 고체가 석출되지 않으면, 현탁 및 교반하고; 여전히 고체가 석출되지 않으면, 온도를 낮추고 현탁 및 교반한 후, 투명한 용액을 실온에서 휘발시키며;
    상기 유기 용매 II는 메탄올, 아세톤, 에틸아세테이트, 테트라히드로푸란, 클로로포름, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    상기 반용매는 물, m-자일렌, n-헥산, 큐멘, 톨루엔, 시클로헥산, n-헵탄, n-펜탄, p-시멘 중 하나 이상으로부터 선택되며;
    방법 3: 식 I 화합물이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 용매가 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 상기 용매에 잠기지 않으며;
    상기 용매는 에탄올, 디클로로메탄, 아세토니트릴, 아세톤, 톨루엔, N,N-디메틸아세트아미드, n-헥산 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    방법 4: 식 I 화합물 용액이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 반용매가 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 상기 반용매에 잠기지 않으며;
    상기 식 I 화합물 용액 중의 용매는 이소프로필알코올, 메틸이소부틸케톤, 1,4-디옥산, 디메틸술폭시드 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    상기 반용매는 n-펜탄, 메틸부틸에테르, 물, m-자일렌 중 하나 이상으로부터 선택되며;
    방법 5: 식 I 화합물 용액에 중합체를 첨가하고, 실온에서 방치하여 휘발시키며;
    상기 식 I 화합물 용액 중의 용매는 메탄올, 2-부타논, 메틸아세테이트, 이소프로필아세테이트, 에탄올, 디클로로메탄, 2-메틸테트라히드로푸란 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    상기 중합체는 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올, 폴리염화비닐, 폴리비닐아세테이트, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌글리콜, 폴리메틸메타크릴레이트, 알긴산나트륨 및 히드록시에틸셀룰로오스 중 하나 이상으로부터 선택되며;
    방법 6: 식 I 화합물이 들어 있는 제1 샘플 병을 입구가 개방된 상태로 포화염 용액 또는 물이 들어 있는 제2 샘플 병에 넣고, 제2 샘플 병을 밀봉한 후 실온에서 방치하되, 제1 샘플 병의 입구는 상기 용매에 잠기지 않으며;
    바람직하게는, 상기 포화염 용액은 무기염 포화 용액이고;
    바람직하게는, 상기 무기염 포화 용액은 포화 아세트산칼륨 용액, 포화 탄산칼륨 용액, 포화 브롬화나트륨 용액, 포화 브롬화칼륨 용액이며;
    바람직하게는, 시스템의 습도는 15~100% RH이고;
    방법 7: 식 I 화합물의 현탁액을 온도 순환 하에 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
    상기 현탁액 중의 용매는 n-헵탄, 메틸부틸에테르, 아니솔, 디시클로헥실아민, 아세톤, 에탄올, 에틸아세테이트, 메틸시클로헥산, 클로로포름, 2-부타논, m-자일렌, 물 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    바람직하게는, 상기 온도 순환의 조건은 50℃~5℃, 0.1~0.5℃/min, 최소 2회 순환을 포함하며;
    방법 8: 식 I 화합물을 일반 용매에 완전히 용해시키고, 고체가 석출될 때까지 교반 조건 하에 투명한 용액에 반용매를 적가하며; 고체가 석출되지 않으면, 현탁 및 교반하고; 여전히 고체가 석출되지 않으면, 온도를 낮추고 현탁 및 교반한 후, 투명한 용액을 실온에서 휘발시키며;
    상기 일반 용매는 에탄올, 에틸아세테이트, 2-메틸테트라히드로푸란, 2-부타논, 아세토니트릴, 디클로로메탄, 1,4-디옥산 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    상기 반용매는 n-헵탄, 테트라히드로푸란 및 물 중 하나 이상으로부터 선택되며;
    방법 9: 식 I 화합물의 혼탁액을 실온에서 자기 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
    상기 혼탁액의 용매는 이소부틸알코올, 메틸 tert-부틸 에테르, 시클로헥산, 톨루엔, 이소프로필아세테이트, 물, 메틸시클로헥산, 테트라히드로푸란, n-펜탄, 아세톤, 이소프로필알코올, 시클로펜틸메틸에테르, 메탄올, p-시멘, 디클로로메탄, n-헵탄, 아세토니트릴, 1,4-디옥산, N-메틸피롤리돈 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    방법 10: 식 I 화합물을 HPLC 병에 칭량하고, HPLC 병에 용매를 첨가한 후, 가열하고 교반하여 평형을 이룬 후 여과하여 상청액을 취하고; 상기 상청액을 생물학적 인큐베이터에 넣고 0.05℃/분으로 50℃에서 5℃로 낮춘 후 5℃에서 항온을 유지하고, 투명한 용액을 -20℃로 옮겨 항온을 유지하며, 석출된 고체를 수집하고, 고체가 석출되지 않은 샘플을 실온으로 옮겨 휘발시키며;
    상기 용매는 이소프로필알코올, 아니솔, 이소프로필아세테이트, 테트라히드로푸란 및 물 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    바람직하게는, 45~55℃, 바람직하게는 50℃까지 가열하며;
    방법 11: 식 I 화합물의 현탁액을 교반하고, 원심분리한 후, 고체를 수집하며;
    상기 현탁액 중의 용매는 n-부탄올, 톨루엔, 디이소프로필에테르, 메틸시클로헥산, 큐멘, 아니솔, 물, 석유에테르, 디시클로헥실아민, 2-메틸테트라히드로푸란, n-헥산, 2-부타논, 이소프로필아세테이트, 클로로포름, m-자일렌, 테트라히드로푸란, 메틸이소부틸케톤, 시클로펜틸메틸에테르 및 벤질알코올 중 하나 이상으로부터 선택되고;
    바람직하게는, 상기 현탁액을 45~55℃에서 교반하는, 방법.
  13. 제3항에 따른 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B의 제조 방법으로서,
    식 I 화합물의 유리산 결정형 A를 1,4-디옥산에 용해시킨 후 n-헥산 분위기에서 기체-액체 확산을 수행하여 상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 B를 얻는 단계를 포함하는, 방법.
  14. 제11항에 따른 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법으로서,
    적합한 용매에서 식 I 화합물 또는 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A를 염 형성 시약과 혼합하여 혼합액을 얻는 단계를 포함하고;
    바람직하게는, 상기 염 형성 시약은 제4항에 따른 무기산 또는 유기산이며;
    상기 식 I 화합물의 유리염기 결정형 A는 제2항에 따른 결정형 중의 유리염기 결정형 A인, 방법.
  15. 약학적 조성물로서,
    약학적 조성물은 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형, 제11항에 따른 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염 중 하나 이상을 포함하고;
    바람직하게는, 상기 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 식 I 화합물의 염산염, 말레산염, p-톨루엔술폰산염, 벤젠술폰산염, 말론산염이며;
    바람직하게는, 상기 염의 결정형은 식 I 화합물의 염산염 결정형 A, 말레산염 결정형 A, p-톨루엔술폰산염 결정형 A, 벤젠술폰산염 결정형 A, 말론산염 결정형 A인, 약학적 조성물.
  16. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형, 제11항에 따른 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제15항에 따른 약학적 조성물의 용도로서,
    상기 용도는 치료 약물의 제조에 적용되고;
    바람직하게는, 상기 용도는 P2X3 관련 질환의 치료 및/또는 예방에 적용되며;
    바람직하게는, 상기 P2X3 관련 질환은 통증, 비뇨생식기계 질환 또는 호흡기계 질환을 포함하고;
    바람직하게는, 상기 통증은 염증성 통증, 수술 통증, 내장 통증, 치통, 월경전 통증, 중추 통증, 화상으로 인한 통증, 편두통 또는 군발성 두통을 포함하며; 바람직하게는, 상기 비뇨생식기계 질환은 요실금, 과민성 방광, 배뇨곤란, 방광염, 자궁내막증, 자궁내막증 관련 통증을 포함하고; 바람직하게는, 상기 호흡기계 질환은 기침, 특발성 폐섬유화증, 만성 폐쇄성 폐질환을 포함하며;
    바람직하게는, 상기 기침은 아급성 또는 만성 기침, 치료 저항성 기침, 특발성 만성 기침, 바이러스 감염 후 기침, 의원성 기침, 호흡기계 질환과 관련된 기침을 포함하는, 용도.
  17. P2X3 관련 질환의 치료 및/또는 예방 방법으로서,
    상기 방법은 환자에게 치료적 유효량의 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 결정형, 제11항에 따른 식 I 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제15항에 따른 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  18. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 결정형의 품질 검출 방법으로서,
    고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 상기 결정형의 함량을 검출하는 단계를 포함하고;
    상기 고성능 액체 크로마토그래피에 사용되는 이동상은 이동상 A 및 이동상 B를 포함하며;
    상기 이동상 A는 포름산(FA) 및 아세토니트릴(ACN)의 수용액이고; 상기 이동상 B는 아세토니트릴이며;
    바람직하게는, 상기 이동상 A는 0.05~0.15% 포름산 및 2~7% 아세토니트릴의 수용액, 예시적으로 0.1% 포름산 및 5% 아세토니트릴의 수용액이고;
    바람직하게는, 상기 품질 검출 방법은 순도 검출 방법, 용해도 검출 방법, 안정성 검출 방법을 포함하며;
    바람직하게는, 상기 고성능 액체 크로마토그래피는 구배 용리를 사용하고;
    바람직하게는, 상기 이동상의 유속은 1±0.2mL/min이고; 상기 구배 용리의 시간은 5~60min, 보다 바람직하게는 10~30min이며;
    바람직하게는, 상기 구배 용리에서 이동상 A 대 이동상 B의 부피비는 1:9~9:1인, 방법.
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MA50674B1 (fr) * 2014-12-09 2022-11-30 Bayer Ag Benzamides substitués 1,3-thiazol-2-yl
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EP3757103A1 (en) * 2019-06-27 2020-12-30 Bayer AG Analogues of 3-(5-methyl-1,3-thiazol-2-yl)-n-{(1r)-1-[2-(trifluoro-methyl)pyrimidin-5-yl]ethyl}benzamide for the treatment of neurogenic diseases
MX2022014901A (es) * 2020-06-02 2023-01-18 Nerre Therapeutics Ltd Antagonistas del receptor de neuroquinina (nk)-1 para su uso en el tratamiento de condiciones de fibrosis pulmonar promovidas por lesion mecanica a los pulmones.
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