KR20230099707A

KR20230099707A - 천연소재 추출물을 포함하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물

Info

Publication number: KR20230099707A
Application number: KR1020210187695A
Authority: KR
Inventors: 윤원갑; 김태하; 김기현; 윤경미
Original assignee: 재단법인 환동해산업연구원
Priority date: 2021-12-24
Filing date: 2021-12-24
Publication date: 2023-07-05

Abstract

본 명세서는 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는, 숙취 예방 또는 해소용 조성물을 제공하고, 구체적으로 상기 천연소재는 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자, 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상으로, 상기 조성물은 알코올 섭취 후 발생하는 숙취 현상 개선 효능, 알코올 탈수소효소 (ADH), 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH) 활성화 효능을 가진다.

Description

천연소재 추출물을 포함하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물{Composition for preventing or relieving hangovers containing extracts from natural materials}

본 명세서는 알코올 섭취 후 발생하는 숙취 현상 개선 효능, 알코올 탈수소효소 (ADH), 및/또는 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH) 활성화 효능을 갖는 천연소재 추출물을 포함하는 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 조성물에 관한 것이다.

우리나라 음주 문화의 특징인 잦은 음주와 과음으로 인해 많은 사람들이 숙취를 제거할 수 있는 약물 또는 음료에 높은 관심을 보이고 있다.

숙취는 술을 마신 후에 나타나는 두통, 설사, 식욕부진, 오심, 구토, 오한, 식은땀 등의 증상을 뜻하며, 객관적인 증상으로는 인식, 운동능력 저하, 혈액학적 변화 및 호르몬의 변화를 일컫는다. 숙취의 원인은 탈수, 알코올 및 알코올 대사물 (아세트알데히드, 포름알데히드, 아세톤 등)의 독성, 흡수 장애에 의한 영양소 결핍 (혈당, 비타민, 무기질 결핍) 등인 것으로 알려져 있다. 숙취 정도는 유전에 따른 개인의 편차, 환경상태 (영양 상태, 운동 상태, 탈수 정도, 건강상태)에 따라 정도의 차이가 매우 심하다.

음주 후 알코올은 3가지 경로를 통해 대사되는데, 에탄올의 농도가 낮을 때는 위장관 또는 간에 존재하는 알코올 탈수소효소 (Alcohol dehydrogenase)와 아세트알데히드 탈수소효소 (Acetaldehyde dehydrogenase)의 작용에 의해, 에탄올의 농도가 높을 때는 소포체에 존재하는 마이크로좀 에탄올 산화체계 (MEOS: Microsomal ethanol oxidizing system)에 의해 아세트알데히드와 아세트산으로 대사되며, 이후 퍼옥시좀 (peroxisome)에 존재하는 카탈라제 (catalase)의 작용 등을 거쳐 이산화탄소 (CO₂)와 물 (H₂O)로 최종 분해된다. 적당량의 알코올이 유입되면 상기 기술한 대사체계가 원활하게 작용하여 알코올 때문에 일어나는 제반 증상이 일어나지 않지만, 다량의 알코올 유입 시 대사체계의 균형이 파괴되어 생체 항상성을 유지하지 못하게 되어 단기적으로는 두통 또는 두중감, 집중력 감퇴, 속쓰림 및 소화불량 등이 초래되고 장기적으로는 간 기능 장애가 발생할 수 있다.

최근 부작용이 상대적으로 적은 천연소재에 대한 관심이 높아지면서, 천연소재를 이용한 숙취 해소용 조성물에 대한 연구가 필요한 실정이다.

이러한 배경 하에서, 본 발명자는 상기 천연소재를 이용한 숙취 해소제 개발을 위해, 천연소재 중 몇 가지를 선정하여, 해당 천연소재 추출물의 항산화 효과, 및 숙취 해소에 영향을 주는 것으로 알려진 알코올 탈수소효소 (ADH), 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH) 활성화 효능을 확인하여, 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 조성물을 개발하였다.

본 명세서의 일 예는 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는, 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학적 및/또는 식품 조성물을 제공한다.

본 명세서의 일 예는 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자, 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 1종, 2종, 3종, 4종, 5종, 6종, 7종, 8종, 9종 또는 10종)의 천연소재 추출물의 숙취 예방 및/또는 숙취 해소 용도를 제공한다.

보다 구체적으로, 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹 및 오미자로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 1종, 2종, 3종, 4종, 5종, 또는 6종)의 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는, 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학적 및/또는 식품 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 1종, 2종, 3종, 또는 4종)의 천연소재 추출물을 추가로 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 조성물 및/또는 상기 천연소재 추출물은 항산화 효과가 있을 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 조성물 및/또는 상기 천연소재 추출물은 ADH 및 ALDH 활성 효과가 있을 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 조성물 및/또는 상기 천연소재 추출물의 상기 ADH 및 ALDH 활성을 위한 유전자 발현의 발현량은 상기 조성물의 농도에 비례하여 증가할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 천연소재 추출물은 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자, 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 (예컨대, 1종, 2종, 3종, 4종, 5종, 6종, 7종, 8종, 9종 또는 10종)의 천연소재의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 여과액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 천연소재 추출물은 각 식물의 전초 또는 일부 (예컨대, 열매, 뿌리, 잎, 꽃, 및/또는 줄기 등)를 추출 용매로 추출하여 얻어진 추출물일 수 있다. 상기 천연소재의 전초 또는 일부 (예컨대, 열매, 뿌리, 잎, 꽃, 및/또는 줄기 등)는 생약 그대로 또는 건조 및/또는 가열된 상태로 추출에 사용될 수 있다. 상기 추출용매는 물, 저급 알코올 (탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알코올, 예컨대, 에탄올), 또는 이들의 혼합물일 수 있으며, 예컨대, 30 내지 100 (v/v)%, 40 내지 100 (v/v)%, 50 내지 100 (v/v)%, 60 내지 100 (v/v)%, 65 내지 100 (v/v)%, 70 내지 100 (v/v)%, 30 내지 90 (v/v)%, 40 내지 90 (v/v)%, 50 내지 90 (v/v)%, 60 내지 90 (v/v)%, 65 내지 90 (v/v)%, 70 내지 90 (v/v)%, 30 내지 80 (v/v)%, 40 내지 80 (v/v)%, 50 내지 80 (v/v)%, 60 내지 80 (v/v)%, 65 내지 80 (v/v)%, 70 내지 80 (v/v)%, 30 내지 75 (v/v)%, 40 내지 75 (v/v)%, 50 내지 75 (v/v)%, 60 내지 75 (v/v)%, 65 내지 75 (v/v)%, 70 내지 75 (v/v)%, 30 내지 70 (v/v)%, 40 내지 70 (v/v)%, 50 내지 70 (v/v)%, 60 내지 70 (v/v)% 또는 65 내지 70 (v/v)%, 예컨대 70 (v/v)% 농도의 저급 알코올 또는 저급 알코올 수용액 (예컨대, 에탄올 또는 에탄올 수용액)일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 명세서에서 “추출물”은 추출물과 추출물을 건조한 건조물, 및 추출물을 농축한 농축물 중 어느 하나를 의미하기 위하여 사용될 수 있고, 해당 당업계에서 일반적으로 사용되는 의미로 사용될 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 명세서에서 “감태 (Ecklonia cava Kjellman)”는 갈조식물 다시마목 미역과의 해조를 의미한다.

본 명세서에서 “대황 (Eisenia bicyclis)”은 쌍떡잎식물 이판화군 마디풀목 마디풀과의 여러해살이풀을 의미한다.

본 명세서에서 “전복 (Haliotis discus hannai)”은 원시복족목 전복과에 딸린 연체동물의 총칭을 의미한다.

본 명세서에서 “톳 (Hizikia fusiforme)”은 갈조식물 모자반과의 바닷말. 조간대 하부에 서식하며 유성세대만 존재하는 다년생 해조류를 의미한다.

본 명세서에서 “해삼 (Apostichopus japonicus)”은 극피동물 해삼강에 속하는 해삼류의 총칭을 의미한다.

본 명세서에서 “모과 (Pseudocydonia Fruit)”는 모과나무의 열매를 의미하고, 나무에 달리는 참외 비슷한 열매라 하여 목과 또는 목과라 쓰기도 한다.

본 명세서에서 “미나리 (Oenanthe javanica DC.)”는 우리나라의 자생식물로 주로 봄, 가을에 들판이나 개울에 자라는 것을 채취해 이용하던 잎줄기채소를 의미한다.

본 명세서에서 “보리새싹 (Barley Sprout)”은 새싹보리 또는 보리순이라고도 하고, 보리 종자에서 발생한 싹을 키워 발아한지 일주일 정도 된 어린 싹을 의미한다.

본 명세서에서 “오미자 (Schisandra Fruit)”는 오미자나무의 열매를 의미하고, 지름 약 1cm의 짙은 붉은 빛깔로 단맛, 신맛, 쓴맛, 짠맛, 매운맛을 느낄 수 있어 오미자라고 불린다.

본 명세서에서 “갈근 (칡뿌리; Pueraria lobata Ohwi)”은 한국, 중국, 일본 모두 콩과의 덩굴식물 칡 (Pueraria montana var. lobata: Pueraria lobata 로도 표기)의 말린 뿌리 또는 주피를 제거하고 말린 뿌리를 의미한다)

본 명세서에서 “항산화” 효과는 세포 내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유 라디칼 (free radical) 또는 활성 산소종 (reactive oxygen species; ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 것을 의미하고, 자유 라디칼 또는 활성 산소종을 제거하여 이로 인한 세포의 손상이 감소되는 것을 포함한다.

본 명세서에서 “알코올 탈수소효소 (alcohol dehydrogenase; ADH)”는 알코올에서 수소를 이탈시켜 알데하이드 또는 케톤을 생성하는 반응을 가역적으로 촉매하는 효소를 의미하고, 7개의 탈수소효소로 이루어져 있다.

본 명세서에서 “아세트알데하이드 탈수소효소 (acetaldehyde dehydrogenase; ALDH)”는 아세트알데하이드를 아세트산으로 전환시키는 반응을 촉매하는 탈수소효소의 일종을 의미한다.

본 명세서에서 “숙취”는 술 등의 알코올 음료(에탄올)를 자신의 대사 능력 이상으로 섭취함으로써 발생하는 불쾌한 신체적 상태를 의미한다. 알코올 (에탄올)이 아세트알데하이드로 대사되어 체내에 남아 그것이 숙취 증상을 일으킨다. 숙취는 야간에 술을 마시고 다음날 아침 기상 후 현저하게 나타나는 현상일수 있다. 숙취는 급성 알코올 중독과는 달리, 생활에 직접적인 위험은 아니지만 종종 멀미와 두통 등의 현저한 불쾌감을 동반할 수 있다. 상기 ADH는 알코올을 분해하면서, 아세트알데하이드를 발생시키고, 이를 상기 ALDH 아세트산으로 전환시킬 수 있어, ADH 및 ALDH 발현이 촉진되면, 알코올이 빠르게 분해되면서, 숙취의 원인이 되는 아세트알데하이드도 ALDH에 의해 사라져 숙취를 예방 또는 해소할 수 있다.

본 명세서에서 제공하는 천연소재 추출물 추출에 사용되는 추출 용매의 양은 상기 천연소재의 전초 및/또는 일부 (예컨대, 열매, 뿌리, 잎, 꽃, 및/또는 줄기 등)의 중량, 예컨대, 상기 천연소재 및/또는 일부의 건조 중량 기준으로, 1 내지 40 부피배 (즉, 천연소재 건조중량 1g 당 용매 1 내지 40ml, 이하 동일), 1 내지 35 부피배, 1 내지 30 부피배, 1 내지 25 부피배, 1 내지 23 부피배, 10 내지 40 부피배, 10 내지 35 부피배, 10 내지 30 부피배, 10 내지 25 부피배, 10 내지 23 부피배, 15 내지 40 부피배, 15 내지 35 부피배, 15 내지 30 부피배, 15 내지 25 부피배, 15 내지 23 부피배, 17 내지 40 부피배, 17 내지 35 부피배, 17 내지 30 부피배, 17 내지 25 부피배, 또는 17 내지 23 부피배일 수 있고, 예컨대, 20 부피배일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 추출은 1회 수행되거나, 동일 또는 상이한 추출 용매 및/또는 조건으로 2회 이상 (예컨대, 2회, 3회, 4회, 또는 5회) 수행될 수 있다.

상기 추출 시 추출 시간은, 유효성분의 충분한 추출을 위하여 1시간 내지 60시간, 1시간 내지 48시간, 1시간 내지 42시간, 1시간 내지 36시간, 1시간 내지 30시간, 1시간 내지 27시간, 12시간 내지 60시간, 12시간 내지 48시간, 12시간 내지 42시간, 12시간 내지 36시간, 12시간 내지 30시간, 12시간 내지 27시간, 18시간 내지 60시간, 18시간 내지 48시간, 18시간 내지 42시간, 18시간 내지 36시간, 18시간 내지 30시간, 또는 18시간 내지 27시간일 수 있고, 예컨대 24시간일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 추출 시 추출 온도는, 유효성분의 충분한 추출을 위하여 20 내지 100℃, 20 내지 90℃, 20 내지 80℃, 20 내지 75℃, 20 내지 70℃, 20 내지 65℃, 30 내지 100℃, 30 내지 90℃, 30 내지 80℃, 30 내지 75℃, 30 내지 70℃, 30 내지 65℃, 40 내지 100℃, 40 내지 90℃, 40 내지 80℃, 40 내지 75℃, 40 내지 70℃, 40 내지 65℃, 50 내지 100℃, 50 내지 90℃, 50 내지 80℃, 50 내지 75℃, 50 내지 70℃, 50 내지 65℃, 55 내지 100℃, 55 내지 90℃, 55 내지 80℃, 55 내지 75℃, 55 내지 70℃, 또는 55 내지 65℃ 일 수 있고, 예컨대 60℃일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 추출물을 얻기 위한 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야의 통상적으로 사용되는 공지된 추출방법에 따라 제조될 수 있다. 구체적으로 환류추출법, 침지추출법, 가열 추출법, 냉침법, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 가압추출법, 초임계 추출법, 전기적 추출법 등 통상적으로 사용되는 추출법을 사용할 수 있다.

상기 약학적 조성물 내의 유효성분으로서 추출물의 함량은 사용 형태 및 목적, 사용 대상의 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 또는 0.1 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 약학적 조성물은 인간, 원숭이 등의 영장류, 마우스, 랫드 (rat), 토끼 등의 설치류, 이외의 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말, 염소 등을 포함하는 포유류, 닭, 오리, 거위 등을 포함하는 조류, 뱀, 도마뱀, 거북, 악어 등을 포함하는 파충류, 양서류, 및 어류 등의 척추동물에서 선택된 대상에 다양한 경로로 투여될 수 있다.

상기 약학적 조성물의 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구 투여, 또는 정맥투여, 근육투여, 피하투여, 복막내 투여, 병변 부위의 국소 투여 또는 복강 주사 같은 비경구 투여의 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 또는 비경구 투여 (복강내, 직장, 정맥, 근육 또는 피하 주사, 또는 경피 투여)에 의해 투여될 수 있다. 이때, 비경구 경로는 경피 투여가 바람직하며, 그 중에서도 국소 도포가 가장 바람직할 수 있다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해 서 본 발명에 따른 약학적 조성물은 0.1 ~ 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 약학적 조성물은 앞서 유효성분 이외에도, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행 (Standard pharmaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제, 및 희석제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 보조제와 혼합되어 투여될 수 있다. 예컨대, 상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 약제학 분야에서 통상적으로 사용되는 모든 담체일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 약학적 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 약학적 조성물의 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 간격, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 투여 용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.

예컨대, 약학적 조성물의 1회 또는 1일 투여량은 유효성분 (천연소재, 예컨대, 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자, 전복, 톳, 해삼 및 갈근)의 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 10000㎎/kg, 구체적으로, 0.01 내지 10000㎎/kg, 0.01 내지 5000㎎/kg, 0.01 내지 3000㎎/kg, 0.01 내지 2500㎎/kg, 0.01 내지 2000㎎/kg, 0.01 내지 1800㎎/kg, 0.1 내지 10000㎎/kg, 0.1 내지 5000㎎/kg, 0.1 내지 3000㎎/kg, 0.1 내지 2500㎎/kg, 0.1 내지 2000㎎/kg, 0.1 내지 1800㎎/kg, 1 내지 10000㎎/kg, 1 내지 5000㎎/kg, 1 내지 3000㎎/kg, 1 내지 2500㎎/kg, 1 내지 2000㎎/kg, 1 내지 1800㎎/kg, 10 내지 10000㎎/kg, 10 내지 5000㎎/kg, 10 내지 3000㎎/kg, 10 내지 2500㎎/kg, 10 내지 2000㎎/kg, 10 내지 1800㎎/kg, 100 내지 10000㎎/kg, 100 내지 5000㎎/kg, 100 내지 3000㎎/kg, 100 내지 2500㎎/kg, 100 내지 2000㎎/kg, 또는 100 내지 1800㎎/kg 범위일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 1회 또는 1일 투여량은 단위 용량 형태로 하나의 제제로 제제화되거나, 적절하게 분량하여 제제화되거나, 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 상기한 투여량은 평균적인 경우를 예시한 것으로서 개인적인 차이에 따라 그 투여량이 높거나 낮을 수 있다.

상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 희석제 및/또는 부형제는 약학 조성물의 적절한 제제화에 통상적으로 사용되는 모든 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 윤할제, 계면활성제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

예컨대, 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제 등의 경구투여를 위한 고형 제제의 경우, 상기 부형제는 이러한 고형 제제의 제제화를 위한 적어도 1종 이상의 물질, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose), 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 이외에도, 마그네슘 스티레이트 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 또한, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등의 경구투여를 위한 액상제제의 제제화의 경우, 통상적으로 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이 사용될 수 있고, 이외에, 통상적으로 사용되는 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 및/또는 보존제 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

예컨대, 상기 약학적 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 적절한 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강내 또는 혀밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제 (예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔 (Witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유 (Apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있다.

상기 식품 조성물에서, 용어 "식품"은 영양소를 한 가지 이상 함유하고 있는 식용의 천연물 또는 가공품을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 건강기능 식품, 음료, 식품 첨가제, 및 음료 첨가제 중 어느 하나를 의미하기 위하여 사용될 수 있으며, 용어 "식품 조성물"은 상기 식품을 제조하기 위한 재료의 조합을 의미할 수 있다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 캔디류, 차, 환, 기능성 식품 등이 있다. 일 예에서, 상기 식품은 숙취 해소 음료 또는 환 제형일 수 있다.

상기 식품 조성물 내의 유효성분으로서의 상기 추출물의 함량은 식품사용 형태, 목적 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 예컨대, 고형분 중량 기준으로 0.00001 내지 99.9 중량%, 또는 0.001 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 식품 조성물은 인간, 원숭이 등의 영장류, 마우스, 랫드, 토끼 등의 설치류, 이외의 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말, 염소 등을 포함하는 포유류, 닭, 오리, 거위 등을 포함하는 조류, 뱀, 도마뱀, 거북, 악어 등을 포함하는 파충류, 양서류, 및 어류 등의 척추동물에서 선택된 대상에 적용하기 위한 것일 수 있다.

본 발명은 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 조성물에 관한 것으로, 알코올 섭취 후 발생하는 숙취 현상 개선 효능, 알코올 탈수소효소 (ADH), 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH) 활성화 효과를 가진다.

도 1은 천연소재 추출물의 측정된 추출 수율을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 천연소재 추출물 내 폴리페놀 함량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 천연소재 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다. Vit.C는 대조군으로 사용된 비타민 C 100ppm을 의미한다.
도 4는 천연소재 추출물의 ABTS 라디칼 소거능을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다. Vit.C는 대조군으로 사용된 비타민 C 100ppm을 의미한다.
도 5 내지 7은 천연소재 추출물을 처리하였을 때, 세포 재생율을 측정한 결과이다. Con은 상기 추출물을 처리하지 않은 대조군, EtOH는 에탄올을 처리한 경우, SM은 실리마린 (silymarin)을 처리한 양성대조군을 의미한다.
도 8 내지 12는 천연소재 추출물을 처리하였을 때, ADH 발현 및 ALDH 발현양을 측정한 결과이다. Con은 상기 추출물을 처리하지 않은 대조군, EtOH는 에탄올을 처리한 경우, SM은 실리마린 (silymarin)을 처리한 양성대조군을 의미한다.

이하, 본 발명을 실시예를 통해 보다 상세히 설명한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 권리범위를 제한하지 않는다.

실시예 1. 해양소재 및 약용소재 추출물 제조

감태 (Ecklonia cava Kjellman), 대황 (Eisenia bicyclis), 전복 (Haliotis discus hannai), 톳 (Hizikia fusiforme), 해삼 (Apostichopus japonicus), 모과 (Pseudocydonia Fruit), 미나리 (Oenanthe javanica DC.), 보리새싹 (Barley Sprout), 오미자 (Schisandra Fruit) 및 갈근 (칡뿌리, Pueraria lobata Ohwi)의 해양소재 및 약용소재 40g을 준비하였고, 상기 각 소재의 무게의 20배가 되는 부피 (800ml)로으로 70 (v/v)% 에탄올을 가한 뒤, 60℃에서 24시간 동안 120rpm으로 교반 추출하여 추출물을 제조하였고, 진공농축기를 이용하여 농축하고 -80℃에서 동결시켰다. 그 후, 동결건조기를 이용하여 건조하여 분말화하여 각 소재의 70% 에탄올 추출물을 제조하였다.

상기 제조한 추출물의 추출 수율을 각 시료를 동결건조 하여 분말화 된 무게를 측정하고, 추출물 제조 시 사용된 최초 소재의 무게로 나누어 백분율로 구하였고 (예: 감태 - (동결건조한 무게 10.7 / 추출 시료량 40g) X 100 = 26.74), 그 결과를 하기 표 1과 도 1에 나타내었다.

시료명	추출 시료량(g)	70% EtOH 용매량 (ml)	건조 후 무게(g)	추출 수율(%)
감태	40	800	10.70	26.74
대황			6.14	15.34
전복			4.44	11.09
톳			14.35	35.88
해삼			7.97	19.93
모과			13.45	33.63
미나리			10.50	26.25
새싹보리			9.12	22.81
오미자			17.60	44
갈근(칡뿌리)			12.03	30.07

상기 분말화시킨 추출물은 70 (v/v)% 에탄올에 용해시켜 500ug/ml의 농도의 추출물을 제조하여 하기 실시예 3 및 4의 DPPH 및 ABTS 측정 실험을 실시하였다.

실시예 2. 해양소재 및 약용소재 추출물의 항산화 효과 실험 1 (폴리페놀)

상기 실시예 1에서 동결 건조를 진행하지 않고 교반 추출하여 준비한 추출물의 항산화 효과를 Folin-Denis법을 일부 변형하여 체 내 활성산소 (유해산소)를 해가 없는 물질로 바꿔지는 항산화물질 중 하나인 폴리페놀의 함량을 측정하여 확인하였다.

구체적으로, 상기 실시예 1에서 준비한 추출물 10μl에 2% Na₂CO₃ 용액 200μl를 가하고 Folin & Ciocalteu's phenol reagents 10μl를 혼합한 다음 실온에서 30분간 반응시킨 후 분광광도계 (마이크로플레이트리더 (TECAN/SPARK))를 사용하여 760nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로는 Galic acid (Sigma co., USA)를 사용하였고, 상기 추출물과 실질적으로 동일한 방법으로 분석하여 작성한 검량선으로 총 폴리페놀 함량을 계산하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

그 결과, 감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹, 오미자 및 칡뿌리의 폴리페놀 함량이 높게 측정되었다.

실시예 3. 해양소재 및 약용소재 추출물의 항산화 효과 실험 2 (DPPH)

상기 실시예 1에서 준비한 추출물의 항산화 효과를 Blois의 방법(1958)을 변형하여 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 자유 라디칼에 대한 소거능을 근거로 평가하여 확인하였다.

구체적으로, 상기 실시예 1에서 준비한 추출물 20μl와 200μM의 DPPH 용액 180μl을 혼합하여, 37℃, 암소에서 30분동안 반응시킨 후, 분광광도계 (마이크로플레이트리더 (TECAN/SPARK))를 사용하여 흡광도의 변화를 517nm에서 측정하였고, DPPH 항산화능을 하기 수학식 1에 의해 구하였고, 그 결과를 하기 표 2 및 도 3에 나타내었다. 대조군으로는 상기 추출물 대신 JUNSEI Chemical 제조사의 L-ascorbic acid 1mg을 증류수 10ml에 녹여서 제조한 비타민 C 100ppm을 사용하였다.

시료	감태	대황	모과	Vit C
농도	500ug/ml			100ug/ml
활성(%)	67.41	67.52	46.88	67.05
표준편차(%)	1.70	1.21	1.51	0.79

[수학식 1]

DPPH 라디칼 소거능 (%) = [1-(A₅₁₇(sample)/A₅₁₇(blank))]×100%

(A₅₁₇(sample)은 상기 시료 용액 첨가군의 517nm 흡광도를, A₅₁₇(blank)은 DPPH 용액에 추출물을 혼합하지 않은 무첨가군의 517nm 흡광도를 의미한다)

그 결과, 감태 추출물 및 대황 추출물의 DPPH 라디칼 소거능은 비타민 C 100ppm의 소거능과 유사하거나 높아, 높은 항산화 효과를 보이는 것을 확인하였다.

실시예 3. 해양소재 및 약용소재 추출물의 항산화 효과 실험 3 (ABTS)

상기 실시예 1에서 준비한 추출물의 항산화 효과를 Blois의 방법 (1958)을 변형하여 ABTS (2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) 자유 라디칼에 대한 소거활성을 측정하였다.

구체적으로, ABTS를 7.4mM의 농도로 증류수에 용해한 다음 2.6mM potassium persulfate를 1:1 혼합하여 실온의 암소에서 24시간 반응시키고 혼합한 ABTS 용액을 PBS 용액으로 희석하여 732nm에서 0.7 (±0.02)가 되도록 조정하였다. 상기 조정을 완료한 ABTS 용액 180μl와 상기 실시예 1에서 준비한 추출물 20μl 를 혼합하여 5분간 반응시킨 후 분광광도계 (마이크로플레이트리더 (TECAN/SPARK))를 사용하여 732nm의 흡광도를 측정하였고, 대조군으로 상기 실시예 2의 Vitamin C를 사용하였고, 상기 측정한 흡광도를 기반으로, ABTS의 항산화능은 하기 수학식 2에 의해 구하였고, 그 결과를 하기 표 3 및 도 4에 나타내었다.

시료	감태	대황	모과	칡뿌리	Vit C
농도	500ug/ml				25ug/ml
활성(%)	99.29	99.47	99.44	97.04	63.09
표준편차(%)	0.20	0.03	0.84	0.11	0.70

[수학식 2]

ABTS 라디칼 소거능(%) = [1-(A₇₃₂(sample)/A₇₃₂(blank))]×100%

(A₇₃₂(sample)는 상기 시료 용액 첨가군의 732nm 흡광도를, A₇₃₂(blank)는 ABTS 용액에 추출물을 혼합하지 않은 무첨가군의 732nm 흡광도를 의미한다)

그 결과, 감태, 대황, 모과 및 칡뿌리 추출물의 ABTS 라디칼 소거능은 비타민 C 100ppm의 소거능보다 높아, 높은 항상화 효과를 보이는 것을 확인하였다.

실시예 4. 해양소재 및 약용소재 추출물의 숙취 개선 효과 확인 실험

실시예 4-1. 세포배양 및 세포 재생율 계산

He La[Chang Liver] Cell (American Type Culture Collection (ATCC)에서 구입)을 1×10⁵Cells/mL 농도로 10% FBS (Fetal Bovine Serum) 및 1% Penicillin/streptomycin이 포함된 DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium) 배지 24 Well에 500μL씩 분주한 후, 37℃, 5% CO₂ 조건에서 24시간동안 배양하였다.

이후 세포 배양액을 제거하고 Serum Free DMEM media와 함께 10 (v/v)% EtOH로 1시간동안 배양하여 50%의 세포사멸을 유도하였다. 이후 PBS (phosphate buffered saline)으로 세척한 후, 각 세포에 상기 실시예 1에서 준비한 추출물 중 감태, 톳, 오미자 및 칡 추출물을 25μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL의 농도로 각각 처리하였고, 전복, 모과, 미나리, 및 보리새싹 추출물을 3.125μg/mL, 6.25μg/mL, 12.5μg/mL의 농도로 각각 처리하였고, 대황 추출물을 6.25μg/mL, 12.5μg/mL, 25μg/mL의 농도로 처리하였고, 해삼 추출물을 12.5μg/mL, 25μg/mL, 50μg/mL의 농도로 처리하였고, 24시간 후 배양 후 각 well에 5mg/mL의 MTT 용액을 20μL씩 분주한 후 3시간동안 환원반응을 유도하였다. 상등액을 제거하고 100μL의 dimethyl sulfoxide (DMSO) 용액을 첨가하여 보라색의 formazan 결정을 완전히 용해하여 발색정도를 분광광도계 (마이크로플레이트리더 (TECAN/SPARK))를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였으며, 세포 재생율을 하기 수학식 3으로 계산하였고, 그 결과를 도 5 내지 7에 나타내었다. 비교를 위해 상기 추출물을 처리하지 않고 세포 배양 등을 진행한 대조군 (Con), 음성대조군으로 에탄올을 처리한 경우 (EtOH), 에탄올 처리 후 실리마린 (silymarin)을 처리하고 세포 배양 등을 진행한 양성대조군을 준비하였다.

[수학식 3]

세포 재생율 (%) = (A₅₇₀(sample)/A₅₇₀(Con)) ×100%

(A₅₇₀(sample)는 상기 시료 용액 첨가군의 570nm 흡광도를, A₅₇₀(Con)는 시료를 처리하지 않은 무첨가군의 570nm 흡광도를 의미한다)

그 결과, 감태 추출물은 100μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며, 25μg/mL에서부터 유의적인 차이를 보이며 간세포를 재생시켰고, 대황 추출물은 25μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며 12.5μg/mL에서부터 유의적인 차이를 보이며 세포를 재생시켰고, 모과 추출물은 12.5μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며, 6.25μg/mL에서부터 유의적인 차이를 나타내며 간세포를 재생시켰고, 미나리 추출물은 12.5μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며, 6.25μg/mL에서부터 유의적인 차이를 확인하였고, 보리새싹 추출물은 12.5μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며 6.25μg/mL의 농도에서부터 유의적인 차이를 보이며 간세포의 재생을 확인하였고, 오미자 추출물은 100μg/mL 이하에서 알코올에 의한 세포사멸을 억제하였으며, 유의적인 차이를 보이며 간세포를 재생하였다.

그래프 상에서 각 시료 처리에 따른 증가 경향을 확인하였으며, 유의적인 차이는 *로 표시하였습니다. 실험 결과 해석 내용과 그래프 간의 상이한 점이 없는 것으로 판단됩니다.

실시예 4-2. ADH 및 ALDH 유전자 발현 확인

상기 실시예 4-1에서 DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium) 배지 24 Well에 분주한 후, 24시간동안 배양을 한 세포의 상등액을 제거하고 trizol 시약을 1mL씩 분주하고 10분간 반응시켰다. 반응 후 회수하여 Chloroform을 200μL씩 분주하고 가볍게 진탕하였다. 이후 4℃, 12,000rpm으로 15분간 원심분리 하였다. 원심분리 후 맑은 상등액만을 취하여 동량의 isopropyl alcohol을 분주한 후 10분간 방치하고 다시 4℃, 12,000rpm으로 15분동안 원심 분리하였다. 상층액 제거 후 75% DEPC (25% (0.1% Diethyl pyrocarbonate (GENERAY, RD054) treatment water in Ethanol) 에탄올을 이용하여 2회 세척하였고, 세척 후 상등액은 완전히 제거하고 남은 RNA가 투명해질 때까지 건조 후 DEPC water 10~30μL 분주하여 용해시켰다. 이 후, 정량하여 TaKaRa kit를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 합성한 cDNA와 primer를 이용하여 95℃에서 3분 실행을 하고, 95℃ 15초, 60℃ 15초, 72℃ 20초로 40회 실행하여, ADH 및 ALDH 유전자 발현량을 확인하였다. 상기 합성한 cDNA 및 primer 정보는 하기 표 2에, 상기 유전자 발현량 확인 결과를 도 8 내지 12에 나타내었다.

Gene	primer 염기서열 (5’ → 3’)	Tm (℃)	각 유전자 cDNA의 Accession No.	서열번호
GAPDH_For	acccagaagactgtggatgg	59.3	NM_001357943	1
GAPDH_Rev	ttctagacggcaggtcaggt	59.3	NM_001357943	2
ADH_For	ccttcaccatcgaggacatagaag	62.7	NM_000673	3
ADH_Rev	gccaccatcttaatgcgaactt	58.4	NM_000673	4
ALDH_For	cgcaccatggatgcttca	56.0	NM_000689	5
ALDH_Rev	cgcgatctctctccattaagtca	60.6	NM_000689	6

(상기 표 2에서 Tm은 melting temperature, 즉 double strand가 single strand로 분리되는 최저 온도를 의미한다)비교를 위해 상기 추출물을 처리하지 않고 세포 배양 등을 진행한 대조군 (Con), 음성대조군으로 에탄올을 처리한 경우 (EtOH), 에탄올 처리 후 실리마린 (silymarin)을 처리하고 세포 배양 등을 진행한 양성대조군을 준비하였다.

그 결과, 추출물을 처리한 모든 경우에 ADH, ALDH 발현율이 모두 농도의존적으로 증가하는 경향을 확인하여 모든 추출물이 숙취 개선 효능을 갖는 것을 확인하였고, 특히 감태 추출물의 경우 ADH 발현율이 높게 측정되었고, 대황 추출물의 경우 ALDH 발현율이 높게 측정되었고, 오미자 추출물의 경우 ALDH 발현율이 높게 측정된 것을 확인하였다.

상기 추출물 중 우수한 세포 재생율, ADH/ALDH 발현율을 가지는 추출물은 대황, 오미자, 감태, 모과, 미나리 및 보리새싹 추출물이고, 그 중 대황 및 오미자 추출물의 경우 양성대조군으로 사용된 실리마린 (silymarin)보다 높게 측정되어, 숙취 해소에 효과적인 것을 확인하였다.

<110> Marine Industry Research institute for East sea rim (MIRE) <120> Composition for preventing or relieving hangovers containing extracts from natural materials <130> DPP20215877KR <160> 6 <170> koPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> GAPDH_For? <400> 1 acccagaaga ctgtggatgg 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> GAPDH_Rev <400> 2 ttctagacgg caggtcaggt 20 <210> 3 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ADH_For <400> 3 ccttcaccat cgaggacata gaag 24 <210> 4 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ADH_Rev <400> 4 gccaccatct taatgcgaac tt 22 <210> 5 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ALDH_For <400> 5 cgcaccatgg atgcttca 18 <210> 6 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> ALDH_Rev <400> 6 cgcgatctct ctccattaag tca 23

Claims

감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹 및 오미자로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 천연소재 추출물을 추가로 포함하는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 항산화 효과가 있는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 ADH 및 ALDH 활성 효과가 있는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제4항에 있어서, 상기 ADH 및 ALDH 활성을 위한 유전자 발현의 발현량은 상기 조성물의 농도에 비례하여 증가하는 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 천연소재 추출물은 상기 천연소재를 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알코올, 또는 이들의 혼합물로 추출한 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
제6항에 있어서, 상기 천연소재 추출물은 상기 천연소재를 50 내지 100 (v/v)% 에탄올로 추출한 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학적 조성물.
감태, 대황, 모과, 미나리, 보리새싹 및 오미자로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 천연소재 추출물을 유효성분으로 포함하는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제8항에 있어서, 전복, 톳, 해삼 및 갈근으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 천연소재 추출물을 추가로 포함하는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제8항에 있어서, 항산화 효과가 있는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제8항에 있어서, 상기 조성물은 ADH 및 ALDH 발현 촉진 효과가 있는, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제11항에 있어서, 상기 ADH 및 ALDH 발현은 상기 조성물의 농도에 비례하여 증가하는 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제8항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 천연소재 추출물은 상기 천연소재를 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알코올, 또는 이들의 혼합물로 추출한 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제13항에 있어서, 상기 천연소재 추출물은 상기 천연소재를 50 내지 100 (v/v)% 에탄올로 추출한 것인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
제8항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 음료 또는 환 제형인, 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.