KR20150097336A

KR20150097336A - 개똥쑥으로부터 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법 및 그 방법으로 추출된 추출물과 그 추출물을 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물

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Publication number: KR20150097336A
Application number: KR1020140018728A
Authority: KR
Inventors: 정주임; 이민영
Original assignee: 광주대학교산학협력단
Priority date: 2014-02-18
Filing date: 2014-02-18
Publication date: 2015-08-26

Abstract

개똥쑥으로부터 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법 및 그 방법으로 추출된 추출물과 그 추출물을 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, a) 건조된 개똥쑥을 용매인 메탄올을 이용하여 개똥쑥에 함유된 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분을 추출하는 단계; b) 상기 a)의 추출물을 감압 농축한 후 그 농축물에 증류수를 넣고 공비 농축하여 상기 용매인 메탄올을 제거하는 단계; c) 상기 b)의 용매인 메탄올이 제거된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 증류수에 넣고 현탁하는 단계; d) 상기 c)의 현탁된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반 후 정체시켜 층 분리한 후 에틸아세테이트 분획물을 수득하는 단계; e) 상기 d)의 수득된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 3배의 0.5 - 2% NaCl 함유 증류수로 세척하는 단계; f) 상기 e)의 세척된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 5배의 노말헥산에 교반하면서 넣고 8-12시간 방치하는 단계; g) 상기 f)의 방치 후 발생 된 침전 분획물을 노말헥산으로 세척하며 여과하는 단계; h) 상기 g)의 세척 및 여과된 분획물을 진공건조한 후 그를 분말화 하는 단계; 로 추출된 추출물을 화장료에 적용시킨 것이다.

Description

개똥쑥으로부터 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법 및 그 방법으로 추출된 추출물과 그 추출물을 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물{Cosmetic Composition have Atopic cure and prevention efficacy}

본 발명은 개똥쑥으로부터 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출하고, 그 추출물을 아토피를 치료하고 진정시키는 화장료에 적용시키는 개똥쑥으로부터 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법 및 그 방법으로 추출된 추출물과 그 추출물을 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부의 가장 외층을 이루고 있는 각질층은 외부 환경에 대한 1차 방어 기능을 담당하고 있으며, 외부로부터의 물리 화학적 자극 및 미생물 등으로부터 생체를 보호하고 체액, 수분의 증발 등을 적절히 조절하여 생체의 항상성을 유지한다.

아토피 증후군은 항원에 대한 직접 접촉 없이 신체가 알레르기 반응을 유발하여 피부 자극을 형성하고 피부 스트레스 인자를 지속적으로 발생시켜 피부의 항상성을 무너뜨려 가려움과 염증을 유발하는 증상을 이른다.

통상 아토피 피부염(Atopic dermatitis)이라고 부르는 피부염증의 증상은 그 원인이 아직 정확히 밝혀지지 않아 그 치료제 및 치료에 대한 확실한 방법이 알려져 있지 않다.

크게 환경적인 요인과 유전적인 요인에 기인한다고 알려져 있으며, 증상의 완화를 위해서 알레르기 유발 물질에 대한 접촉을 차단하고 습도 및 청정한 공기의 공급 등의 방법을 사용하고 있다.

아토피 증상 완화의 방법으로서 피부 자극에 의해 염증이나 여타의 알레르기 증상이 나타난 경우 피부 외용제나 화장품을 도포해 증상을 완화하고 있다. 화장품의 기능은 다양한 효능 성을 지닌 첨가물의 발전으로 과거 매끄러운 피부를 위한 기능 이외에 미백, 주름예방 등으로 확대되고 있으나 가장 중요한 화장품의 기능은 피부 보습의 유지라고 할 수 있다.

따라서 아토피 증상으로 인해 가려움이나 피부 건조가 발생한 경우 피부 보습을 유지할 수 있는 화장품을 바름으로써 그 증상을 완화하는 제품들이 개발되고 판매 중에 있다.

현대의 화장품은 일반적으로 70여종의 화학합성물과 향료 등을 물리 화학적 공정을 통해 생산하는 것으로 공정 중 필수적으로 유화제나 방부제 등이 첨가되게 된다.

이러한 물질들은 이미 그 유해성이 증명되어 그 적용 함량에 대한 기준이 고시되어있다. 이러한 함량 고시는 일반인을 대상으로 한 것이어서 아토피 환자의 경우 이런 일반 기준의 화장품을 사용할 경우 증상의 발현 및 확대를 초래할 수 있다.

최근 아토피 환자의 증가로 아토피 대응 화장품의 수요가 급증하고 있으며, 피부 자극이 없는 천연성분 유래 화장품의 개발이 요구되고 있는바, 이에 따른 아토피 치료 및 예방 능이 우수한 성분이 함유된 개똥쑥 추출물을 활용하는 기술들이 제공되고 있으며, 그 예로써 개똥쑥 추출물을 이용한 화장료 조성물의 특허는 아래와 같다

대한민국 등록특허 제10-1332214호 "연꽃, 쌀, 개똥쑥 복합발효추출물을 포함하는 피부 스트레스 완화용 화장료 조성물"에는 연꽃, 쌀 및 개똥쑥의 발효 추출물을 제조하여 외부 자극으로부터 오는 피부 스트레스를 완화하고 진정시키는 화장료 조성물이 개시되어 있다.

대한민국 공개특허 제10-2013-0095010호 "천연 항포진 바이러스제 및 이를 포함하는 조성물"에는 선학초, 산부추, 백복령, 산청목, 목단피, 황금 또는 개똥쑥으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 추출물을 유효 성분으로 포함하는 항포진 바이러스제가 개시되어 있다.

개똥쑥은 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium)과 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella enteritidis) 내성균에 대한 강한 항균 효과를 나타내며, 이러한 항균, 항염 효능으로 인해 UN에서는 개발도산국의 말라리아 치료제로 그 재배를 권장하는 식물이다.

개똥쑥은 상기와 같이 강한 항균 및 항염 효능이 있기 때문에 아토피 피부 적용 시 신속한 피부 진정 효능을 나타내게 되며, 천연물질로서 피부자극을 초래하지 않아 효능의 지속성과 안전성을 지닌다.

상기와 같은 효능을 누리기 위한 종래 개똥쑥을 이용한 화장료는, 선학초, 산부추, 백복령, 산청목, 목단피, 황금 또는 개똥쑥으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물이 특허공개번호 10-2013-0095010호가 있으며,

또 특허등록번호 10-1332214의 연꽃, 쌀, 개똥쑥 복합발효추출물을 포함하는 피부 스트레스 완화용 화장료 조성물도 제공되어 있다.

특허공개번호 10-2013-0095010(공개일 2013. 08. 27) 특허등록번호 10-1332214(공고일 2013. 11. 22)

본 발명의 목적은, 아토피 치료 및 예방에 효능이 있는 유효성분을 개똥쑥으로부터 추출하는 방법을 제공하고, 그 방법으로 추출된 상기 아토피 치료 및 예방에 효능이 있는 추출물을 화장료에 함유하도록 하여 사람의 피부질환 즉 아토피를 치료함은 물론, 예방할 수 있도록 함에 있다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 과제 해결 수단 구성은, a) 건조된 개똥쑥을 용매인 메탄올을 이용하여 개똥쑥에 함유된 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분을 추출하는 단계; b) 상기 a)의 추출물을 감압 농축한 후 그 농축물에 증류수를 넣고 공비 농축하여 상기 용매인 메탄올을 제거하는 단계; c) 상기 b)의 용매인 메탄올이 제거된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 증류수에 넣고 현탁하는 단계; d) 상기 c)의 현탁된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반 후 정체시켜 층 분리한 후 에틸아세테이트 분획물을 수득하는 단계; e) 상기 d)의 수득된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 3배의 0.5 - 2% NaCl 함유 증류수로 세척하는 단계; f) 상기 e)의 세척된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 5배의 노말헥산에 교반하면서 넣고 8-12시간 방치하는 단계; g) 상기 f)의 방치 후 발생 된 침전 분획물을 노말헥산으로 세척하며 여과하는 단계; h) 상기 g)의 세척 및 여과된 분획물을 진공건조한 후 그를 분말화 하는 단계; 로 추출된 추출물을 화장료에 포함시켜 된 것이다.

상기와 같은 구성을 갖는 본 발명의 개똥쑥 추출물을 함유한 아토피 치료 및 예방 효능을 화장료 조성물은 항균작용 및 살균작용이 뛰어나고 피부 진정효과와 피부 보습 효과가 우수하여 아토피 피부염 완화 및 치료에 탁월한 효과가 있다.

도 1은 개똥쑥 추출물의 화학성분 분석 결과,
도 2는 군주 생장 정도를 나타낸 그래프.

개똥쑥은, 항균작용 및 살균작용이 탁월한 국화과 쑥속의 한해살이 풀로서, 한방에서는 발열 감기, 학질, 소아경기, 소화불량 및 이질 등의 치료에 사용한다.

개똥쑥의 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B), 스코폴레틴(Scopoletin) 및 쿠마린(Coumarin) 성분 등이 있으며, 이러한 성분들이 항암 및 항균작용과 관계가 깊다. 이에 항말라리아 효과를 가지는 아르테미시닌(Artemisinin)의 원료 생약으로도 알려져 있다.

상기 개똥쑥의 주요성분인 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B), 스코폴레틴(Scopoletin) 및 쿠마린(Coumarin) 중 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B) 등이 아토피 예방 및 치료에 유효함을 확인하였다.

따라서 본 발명은 상기의 아토피 예방 및 치료에 효능인 있는 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B)을 화장료에 0.001 ~ 10.0 중량%를 사용함으로써 아토피 예방 및 치료에 탁월함을 확인하였다.

이때, 상기 0.001 중량% 미만일 경우에는 치료 효과가 미약한 문제점이 있고, 10 중량% 초과하면 제형화의 어려움과 피부 부작용의 문제가 있어 적합하지 않다.

◎ 개똥쑥 유효성분 추출방법

a) 건조된 개똥쑥을 용매인 메탄올을 이용하여 개똥쑥에 함유된 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분을 추출하는 단계;

b) 상기 a)의 추출물을 감압 농축한 후 그 농축물에 증류수를 넣고 공비 농축하여 상기 용매인 메탄올을 제거하는 단계;

c) 상기 b)의 용매인 메탄올이 제거된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 증류수에 넣고 현탁하는 단계;

d) 상기 c)의 현탁된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반 후 정체시켜 층 분리한 후 에틸아세테이트 분획물을 수득하는 단계;

e) 상기 d)의 수득된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 3배의 0.5 - 2% NaCl 함유 증류수로 세척하는 단계;

f) 상기 e)의 세척된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 5배의 노말헥산에 교반하면서 넣고 8-12시간 방치하는 단계;

g) 상기 f)의 방치 후 발생 된 침전 분획물을 노말헥산으로 세척하며 여과하는 단계;

h) 상기 g)의 세척 및 여과된 분획물을 진공건조한 후 그를 분말화 하는 단계; 로 이루어진다.

그리고 상기 d) 단계에서의 교반은, 30 - 80rpm으로 20 - 60분 동안 하며, 상기 에틸아세테이트 분획물은, 현탁된 추출물을 에틸아세테이트로 복수 회 분획실시하고 그 복수 회 분획하여 수득 된 분획물을 합하여 된 것이다.

또한 상기 최종 분말화 된 개똥쑥 수출물의 유효성분은, 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B)이다.

이하 본 발명의 개똥쑥 유효성분 추출방법의 실시 예를 설명하면 다음과 같다.

상기 a) 단계 및 b) 단계는 천연 식물의 유효성분을 추출하는 일반적인 방법으로써 그에 대한 설명은 생략하고, c) 단계부터는 개똥쑥의 추출물로부터 유효성분 함량을 높이기 위한 과정으로써 그에 대하여 간략하게 설명하면 다음과 같다.

상기 c)단계는 상기 b)의 단계에서 수득된 공비농축 물을 현탁하는 단계로써, 그 구체적인 방법은, 상기 b) 단계의 용매가 제거된 공비농축 물을 중량% 대비 2 - 3배의 증류수에 넣고 현탁시키는데, 그 현탁시키는 이유는, 공비농축 물의 입자를 증류수에 분사시키기 위함이다.

상기 공비농축 물을 현탁시키기 위하여 사용되는 증류수의 양을 중량% 대비 공비농축 물보다 2 - 3배로 하는데 이유는, 공비농축 물의 입자가 충분히 분산되도록 하기 위함이다.

상기 d)단계는 c)단계에서 수득된 현탁물을 교반하는 단계로써, 그 구체적인 방법은, 상기 c)단계의 현탁물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반 후 정체시켜 층 분리(상등액과 침전물)한 후 에틸아세테이트 분획물을 수득하는데, 이때, 상기 에틸아세테이트 분획물의 수득은, 현탁물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반하는 방법을 복수 회 수행하되, 교반방법은 20- 60분 동안 30 - 80rpm으로 교반하는 방법으로 한다. 한편 상기 반복 수행되면서 수득된 분획물은 모두 합한다.

상기 현탁물을 에틸아세테이트에 넣고 30 - 80rpm으로 교반하는 이유는, 침전물이 용기 하부에 침전되거나 또는 눌어붙는 것을 방지하도록 하기 위함이다.

상기 e)의 단계는 상기 d)의 단계에서 수득된 에틸아세테이트 분획물을 세척하는 단계로써, 그 구체적인 방법은, 상기 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 0.5 - 2% NaCl 함유 증류수로 복수 회 세척하는 것이다.

상기 f)의 단계는 상기 e)의 단계에서 세척된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 5배의 노말헥산에 교반하면서 넣고 8-12시간 방치하는 것이며,

상기 g)의 단계는 상기 f)의 방치 후 침전물을 노말헥산으로 세척하고 여과하는 것으로 상기 노말헥산으로 세척하고 여과하는 이유는 에틸아세테이트를 제거하고 필요로 하는 개똥쑥 추출물 중 아토피 치료 및 에방에 효능이 좋은 유효성분인 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B)을 얻기 위함이다.

상기 h)의 단계는 상기 g)의 여과물을 진공건조한 후 그를 분말화 하는 것이다.

이때, 상기 유기용매 중 극성 유기용매로는 디클로로메탄, 클로로포름, 1-부탄올, 1-펜탄올, 1-헥산올, 시클로헥산올, 1-도데칸올, 디에틸에테르, 테트라하이드로퓨란, 에틸 아세테이트, 에틸 아세토아세테이트, 에틸 벤조에이트 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다.

그리고 상기 비극성 유기용매로는 n-헥산, 시클로헥산, n-펜탄, n-옥탄, 석유에테르, 톨루엔 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다.

또한, 추출물의 정제 과정에서 비극성 비 유효성분을 제거하기 위하여 비극성 용매로 세척하는 과정을 추가할 수도 있다.

상기에서 설명한 방법으로 제조한 추출물을 혼합하여 사용할 때에는 본 발명에 따른 상기 추출물 이외에도 개똥쑥으로부터 얻어진 정유(Essential Oil)와 개똥쑥하이드로졸(Hydrosol) 외에 다른 천연소재의 추출물 및 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 사용하여 연고제, 첩부제 등의 의약품과 에멀젼, 겔, 팩, 화장수, 비누 등 화장료의 피부외용제로 사용할 수 있으며 이들의 제조방법은 공지방법을 따른다.

◎ 개똥쑥 추출물의 성분 분석 데이터

개똥쑥 추출물의 화학성분 분석을 위하여 GC/MS분석을 하였고, 분석기기는 SHIMATZU의 GC-17A와 MS-QP-5000, EI-mass를 사용하였고, columm은 CBP5(길이 2.5m, 직경 0.25mm, 내경 0.22mm)를 사용하였다.

oven의 온도는 80±2℃에서 시작하고, column의 초기온도는 100℃±2℃, 주입 온도는 250±2℃, 중간온도 250±2℃로 하였다.

이때 설정온도는 5분 동안 10~200℃, 20분 동안 10~250℃로 설정하고 유속은 10kpa로하였다. 그리고 검출된 각 성분의 확인은 표준시약의 retention time과 mass spectra를 가지고 비교하여 이루어졌으며 그 결과는 도 1과 같다.

oven의 온도는 80℃에서 시작하고 column의 초기온도는 100℃,주입 온도는 250℃, 중간온도 250℃로 하였다. 이때 설정온도는 5분 동안 10~200℃, 20분 동안 10~250℃로 설정하고 유속은 10kpa로 하였다. 그리고 검출된 각 성분의 확인은 표준시약의 retention time과 mass spectra를 가지고 비교하여 이루어졌다.

개똥쑥 추출물의 성분 분석을 통해 화학물질을 GC/MS로 분석한 결과 개똥쑥 전체에서 17종의 성분들이 확인되었으며, 확인된 성분은 2,4-hexadienal, -pinene, cineole, thujone, camphor, citronellal (-)-menthone, terpineol, (1R)-(-)myrtenol, mytenol, (s)-(-)-perillaldehyde, perill alcohol, 4-tert-buthylaniline, eugenol, isosafrole, isoeugenol, -humulene 이었다.

◎ 추출물의 항균 실험

각 균주에 사용된 배지와 배양 조건은 아래 표 1과 같다.

The culture condition of each strain

Strain	Culture medium	Cult. temp(℃)
Aspergillus nidulans	CM(complete medium)	37
Fusarium oxysporum	CM(complete medium)	30
Alternaria mali	PD(potato dextrose medium)	24

배지에 수용성 추출액 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2g/를 실험구로 하고, 대조구는 물을 추출액과 같은 분량을 가하고, 추출액은 배지를 petri dish에 붓기 전에 100㎖당 100㎕, 80㎕, 60㎕, 40㎕, 20㎕을 넣고 대조구에는 추출물질을 첨가하지 않았다. 배지가 식은 후 균주를 배지의 가운데에 picking을 한 후 5일 동안 colony di- aeter를 측정하여 균주의 생장 정도를 확인하였다.(도 2 참조)

개똥쑥 수용성 추출물로 3종류의 곰팡이 성장 실험을 실시한 바 항곰팡이성 활성이 있음이 확인되었다.(도 2 참조) 곰팡이 배지에 개똥쑥의 추출물을 첨가한 후 실시한 곰팡이의 생장 결과는 대조구에 비하여 실험구 값이 저조했으며, A. mali의 생장은 A. nidulans와 F. oxysporum보다 덜 억제되었다. 이들 3종류 모두 추출물의 농도가 높아짐에 따라 생장은 점점 더 억제되었다.

◎ 개똥쑥 추출물 함유 아토피 대응 화장품 조성물 제조

화장품 제조 공정에서 아토피 대응 세럼과 크림의 무향 레시피는

[처방 1: 무첨가]로 하였고,

[처방 2]는 향료첨가 단계에서 합성 향료 대신 아토피 대응 기능성 조합향(인삼, 당귀, 개똥쑥, 산국 천연향 조제)을 전체 총량의 0.1중량% 사용하였다. 그리고 증류수 대신 (개똥쑥하이드로졸 50% + 인삼하이드로졸15% + 당귀하이드로졸10% + 산국하이드로졸25%)를 혼합하여 복합 수상 원료로 사용하였다.

[처방 3]은 향료첨가 단계에서 합성 향료 대신 아토피 대응 기능성 조합향(인삼, 당귀, 개똥쑥, 산국 천연향 조제)을 전체 총량의 0.2중량% 사용하였다. 그리고 증류수 대신 (개똥쑥하이드로졸 50% + 인삼하이드로졸15% + 당귀하이드로졸10% + 산국하이드로졸 25%)를 혼합하여 복합 수상 원료로 사용하였다.

개똥쑥 추출물은 아토피 기능성이 있는 산국추출물, 인삼추출물과 함께 복합 추출물로 MF처리(고압균질기를 통한 나노화 공정)을 통해 가공하여 원료화 하였으며, 하기 레시피 상 G 공정 원료 가공 전 공정이 MF 처리 과정을 거쳐 제작 하여 민감한 피부에 기능성 유효 성분의 침투와 속효성을 가지도록 제작하였다. 크림 제품의 개똥쑥 추출물 첨가량은 2개 첨가 처리군 모두 5%로 하였다.

처리별 모두 C공정과정에서 처방 1, 처방 2, 처방 3순으로 피부의 유연성을 나타내는 Argan oil과 Shea Better의 첨가를 1, 2, 3(L)로 보존제를 1.6, 1.8, 2.0(L)로 첨가하여 제조하였는데 이것은 처방 1인 무처리를 기준으로 세럼 희석배수가 1배, 2배로 증가하여 그에 비례하여 첨가한 것이며 그 결과는 표 2와 같다.

[개똥쑥 추출물을 이용한 아토피 대응 화장품 조성 및 사용감 평가]

구분	원료명				처방 1 (무처리)		처방2		처방 3
A	Glycerin		Glycerin
	1,3 BG		1,3-Butylen glycol
	CA214		Cara Alba
	MSM		Methyl Sulfonyl Methane
	Aminocoa		BETAINE
	용 량				12		12		12
	HC Water/DI-Water		Hydrosol Complex (인삼15+당귀10+산국25+개똥쑥50),/ Distillation water			DI-Water 100		HC Water 50		HC Water 100
	용 량				100		100		100
B	Carbopol		CARBOMER
	DI-Water		Distillation WATER			DI-Water 100		HC Water 50		HC Water 100
	용 량				16		8		16
C	1.2Hexandiol		1.2Hexandiol
	Lecithin		Lecithin
	Bisabolol		Bisabolol
	Hyaluronic Acid		Hyaluronic Acid
	Argan oil		Argan oil
	Shea Better		Shea Better
	용 량				8		12		16
D	DG 14		Dipotassium Glycyrrhizate
	용 량				1.5		1.5		1.5
E	PEG		PEG-100 Stearate
	Squalane		Squalane
	BC2		Beta-Carotene
	HC Water/ DI-Water		Hydrosol Complex (인삼15+당귀10+산국25+개똥쑥50), /Distillation Water			DI-Water 100		HC Water 50		HC Water 100
	용 량				2		2.5		3.0
F	PC		PERFUME COMPLEX (인삼정유10+당귀정유10+산국정유 10+ 개똥쑥정유 25+LINALOOL향 45)			0.0		0.1		0.2
GMF 처리	Extract		Aloe Extract, Portulaca Extract, Asiatic Pennywokt Extract, Rese Extract, Pearl Extract, Mulberry Root Extract, Centella Asiatica Extract, Greentea Extract, Lemon Extract
	Ceramide B		Ceramide B
	Extract Complex		Angelica Extract, Jinseng Extract, Artemisia Extract			0		5		5
	Biocare HSG		Butyrospermum Parkii, Cyclopentasiloxane, Glyceryl Stearate, Cyclopentasiloxane, Dimethicone Crosspolymer, Dimethicone, Laureth-23, Laureth-4
	용 량				16		16		16
	Adenosine(%)		Adenosine			0.04		0.04		0.04
	HC Water		Hydrosol Complex (인삼15+당귀10+산국25+개똥쑥50)			0.0		100		200
	총 량					155.54		255.64		369.74
사 용 감
항 목		확인결과						비 고
		처방 1		처방 2		처방 3
<물성 Test>
pH		5.8(23)		5.45(23)		5.5(23)			액 상
<관능 Test>		결과	평점	결과	평점	결과			평점
외관확인		유백색의 액상	5	유백색의 액상	5	유백색의 액상		5		액상
유 분 감		적음	5	적음	4	적당		3		액상
흡 수 력		느림	2	빠름	5	보통(물기가 많음)		3		액상
전 연 성		미흡(뻑뻑함)	2	적당	4	우수		5		액상
보 습 력		적다	2	좋다	5	적당		3		액상
끈 적 임		매우 많음	2	적당	5	적음		3		액상
유 연 성		미흡	2	적당	4	좋음		5		액상
향 취		나쁨(비누냄새)	1	적당	5	강함		3		전제품
비 고(기타)		액상이 되직함	1	액상이 적당	5	액상이 묽다		3
총 점		약간의 비누냄새가 남	22	약한 한약재 냄새가 있는 쑥 냄새	42	강한 한약재 냄새가 있는 쑥 냄새		27

◎ 개발 화장품의 피부효능 검증

측정 전 / 세안 후 / 처방1(무첨가) / 처방2 / 처방3 / 크림으로 나누어 측정, 남, 녀 공히 전박 부위에 각각 5시간 동안 측정(피부 측정장비 사양/Multi Probe Adaptor systems - MPA Basic System Devices) 무첨가 처방에 개똥쑥 가공물을 첨가한 경우와 비교를 통해 개똥쑥 첨가물의 효능에 대한 기대를 충분히 입증할 정도의 유의미한 효능 성과를 거두었다고 사료 된다.

[아토피 대응 개똥쑥 화장품 피부효능 검증 ( 측정정부위 : 전박 )]

측정	시료	성별	세정직후 A ( 측정전 )	측정시간 B				평균차 (B-A)	효능
측정	시료	성별	세정직후 A ( 측정전 )	1시간 후	3시간 후	5시간 후	평균값	평균차 (B-A)	효능
보습	처방1 (무처리)	남	46.50	55.00	61.25	69.50	61.92		약간 좋음
		여	37.10	49.50	56.75	66.55	57.60
		평균	41.80	52.25	59.00	68.03	59.76	17.96
	처방2 (세럼2)	남	45.70	68.30	76.45	86.20	76.98		우수
		여	42.25	62.45	70.50	86.20	73.05
		평균	43.98	65.38	73.47	86.20	75.02	31.04
	처방3 (세럼3)	남	46.20	65.20	72.45	80.05	72.57		좋음
		여	41.05	59.35	67.45	76.90	67.90
		평균	43.63	62.27	69.95	78.47	70.23	26.61
	크림	남	46.20	80.25	89.40	92.35	87.33		우수
		여	38.11	76.30	79.50	85.85	80.55
		평균	42.16	78.28	84.45	89.10	83.94	41.78
멜 라닌	처방1 (무처리)	남	193.00	198.00	221.00	226.30	215.10		증가
		여	135.00	128.00	128.00	124.00	126.67
		평균	164.00	163.00	174.50	175.15	170.88	6.89
	처방2 (세럼2)	남	193.00	195.50	189.00	179.00	187.83		감소
		여	139.50	137.50	128.50	130.50	132.17
		평균	166.25	166.50	158.75	154.75	160.00	- 6.25
	처방3 (세럼3)	남	193.00	195.50	193.50	189.00	192.67		감소
		여	144.00	137.00	139.00	138.50	138.17
		평균	168.50	166.25	166.25	163.75	165.42	-3.08
	크림	남	178.00	165.00	166.50	167.00	166.17		감소
		여	125.50	120.00	118.50	117.00	118.50
		평균	151.75	142.50	142.50	142.00	142.34	-9.41
홍반	처방1 (무처리)	남	411.00	362.00	381.00	369.00	370.67		감소 (매우 우수)
		여	190.50	187.50	157.50	165.50	170.17
		평균	300.75	274.75	269.25	267.25	270.42	-30.3
	처방2 (세럼2)	남	328.00	275.50	256.00	235.00	255.50		감소 (매우 우수)
		여	180.00	171.00	164.50	158.00	164.50
		평균	254.00	223.25	210.25	196.50	210.00	-44
	처방3 (세럼3)	남	342.00	305.00	296.00	281.50	294.17		감소 (매우 우수)
		여	205.50	182.00	176.50	169.00	175.83
		평균	273.75	243.50	236.25	225.25	235.00	-38.75
	크림	남	325.00	271.00	264.50	241.00	258.83		감소 (매우 우수)
		여	200.50	164.00	152.50	148.00	154.83
		평균	262.75	217.50	208.50	194.50	206.83	-55.92

측정	시료	성별	세정직후 A ( 측정전 )	측정시간 B				평균차 (B-A)	효능
측정	시료	성별	세정직후 A ( 측정전 )	1시간 후	3시간 후	5시간 후	평균값	평균차 (B-A)	효능
피부 pH	처방1 (무처리)	남	5.60	5.79	5.65	5.78	5.74		변화 없음
		여	6.06	5.71	6.03	6.02	5.92
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0
	처방2 (세럼2)	남	5.25	5.45	5.45	5.36	5.42		약간 증가
		여	5.82	5.66	5.80	5.92	5.79
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.07
	처방3 (세럼3)	남	5.02	5.40	5.45	5.38	5.41		약간 증가
		여	5.70	5.60	5.68	5.79	5.69
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.19
	크림	남	4.80	4.94	5.00	5.07	5.00		약간 증가
		여	5.43	5.50	5.65	5.87	5.67
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.22
탄 력도	처방1 (무처리)	남	0.8762	0.9054	0.9062	0.9120	0.91		약간 증가
		여	0.8920	0.9105	0.9190	0.9277	0.92
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.03
	처방2 (세럼2)	남	0.8720	0.9830	1.0020	1.0320	1.01		증가
		여	0.9130	1.0010	1.0340	1.0610	1.03
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.13
	처방3 (세럼3)	남	0.8895	0.9010	0.9240	0.9640	0.93		약간 증가
		여	0.8950	0.9245	0.9625	0.9668	0.95
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.05
	크림	남	0.8765	0.9810	1.0420	1.0820	1.03		증가
		여	0.8802	0.9940	1.0650	1.1120	1.06
		평균	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.17

◎ 아토피 환자에 대한 아토피 억제 효과 측정

상기 사용감 평가에서 가장 우수한 결과를 나타내었던 피부 도포용 크림을 아토피성 피부질환을 갖고 있는 7 ~ 54세의 환자 14인에게 1일 2 ~ 5회씩 4주 동안 환부에 바르도록 하였다. 각 평가 지표를 0 (없음) ~ 7 (매우 심함) 단계로 나누어 자신이 느끼는 예방 정도를 표시하였고, 병변의 종합 평가는 총 9 단계로 구분하여 평가하여 다음 표 5로 나타내었다.

피험자	연령	가려움 예방	염증 부종 예방	모공성구진예방	태선화 예방	소파흔 예방	색소침착예방	불면증 예방	종합 병볍
피험자1	5	3→3	3→2	3→3	2→2	2→2	2→2	1→1	3→3
피험자2	6	6→6	6→5	6→6	5→5	6→5	1→1	0	6→6
피험자3	7	5→3	5→2	5→2	5→3	5→2	4→2	4→1	4→1
피험자4	12	7→4	7→3	7→4	7→2	6→2	6→4	5→2	8→5
피험자5	13	6→2	5→3	6→4	4→2	5→3	4→2	3→2	6→4
피험자6	16	3→1	0	4→2	0	2→2	4→3	0	4→3
피험자7	18	3→1	2→1	2→1	1→1	3→2	1→1	0	3→1
피험자8	21	3→1	2→0	2→0	2→0	3→1	0	1→0	2→0
피험자9	23	3→1	0	0	0	0	0	0	4→1
피험자10	31	6→3	7→3	6→2	0	6→2	6→1	0	7→2
피험자11	32	4→2	4→2	3→2	3→2	3→2	5→4	4→2	4→2
피험자12	35	4→3	4→3	4→4	4→3	4→4	4→4	0	4→4
피험자13	37	6→2	3→1	0	0	3→1	3→1	0	5→2
피험자14	55	6→2	5→2	5→2	0	0	4→1	0	8→4

그 결과를 살펴보면, 긍정적인 효과를 보인 정도는 14명 중 11명으로 78% 이상의 환자에서 증세가 매우 호전되었음을 알 수 있었으며, 이들 환자들 모두 부작용을 나타내지 않았다.

◎ 인체 피부 자극시험

아토피 예방 및 치료에 효과가 있는 1종 이상의 추출물을 1,3-부틸렌글리콜 베이스에 녹여 용액으로 적용하였을 경우 피부 안전성 여부를 확인하기 위해 인체피부자극시험(인체 첩포시험)을 행하였다.

20 ~ 30대의 건강한 남녀 30명을 대상으로 핀 챔버(Finn Chamber)에 준비된 시험물질(10% Patch Base) 20 를 적하시킨 후 70% 에탄올로 세척 건조 후 시험부위인 윗팔뚝 안쪽부위에 얹어 미소공테이프로 고정시켰다.

첩포는 24시간 동안 도포하여 제거한 후 유성팬으로 시험부위를 표시하며30분, 24시간 후에 각 시험 부위의 피부반응을 관찰하여 다음과 같이 등급별로 평가하였다.

다음 평균반응도는, ±는 1점, +는 2점, ++는 3점, +++는 4점으로 정하고, 판정기준은 1 등급(무자극 범위)은 1미만, 2등급(경자극 범위)은 3미만, 3등급(중자극범위)은 5 미만, 4 등급(강자극 범위)은 5 이상을 기준으로 하였다.

구 분	24시간				48시간				평균반응도(n=30)	판정 등급
구 분	±	+	++	+++	±	+	++	+++	평균반응도(n=30)	판정 등급
1,3-Butylen glycol Base	4	-	-	-	-	-	-	-	2.00	2
Base+개똥쑥추출물 0.2중량%	2	-	-	-	-	-	-	-	1.00	1
Base+산국추출물 0.2중량%	2	-	-	-	-	-	-	-	1.00	1
Base+개똥쑥추출물 0.1중량%	4	-	-	-	-	-	-	-	2.00	2
Base+산국추출물 0.1중량%	4	-	-	-	-	-	-	-	2.00	2

상기 표 6에서 개똥쑥과 산국추출물이 각각 0.2중량% 함유된 베이스(1등급)는 안전범위의 자극 값을 나타냈고, 나머지 2종 산국추출물과 개똥쑥 0.1중량% 함유한 베이스에서는 2등급 이상의 자극을 나타내었다.

◎ 랫트에 대한 경구투여 급성 독성실험

6주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성 독성실험을 다음과 같이 실시하였다. 군당 2 마리씩의 동물에 개똥쑥 추출물을 각각 용해시켜 1g/kg/의 용량으로 단회 경구 투여하였다. 시험물질을 각각 투여 후 동물의 폐사 여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상 여부를 관찰하였다. 그 결과, 시험 물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 진교, 용담, 은행잎 및 황금 추출물 각각은 모든 랫트에서 2,000 mg/kg까지 독성변화를 나타내지 않으며 경구 투여 최소 치사량(LD50)은 2,000 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.

이상과 같은 본 발명은 상기 목적에서 설명한 바와 같이 아토피 치료 및 예방에 효능이 있는 유효성분을 개똥쑥으로부터 추출하고, 그 추출물을 상기 아토피 치료 및 예방에 효능이 있는 화장료에 함유하도록 하여 사람의 피부질환 즉 아토피를 치료함은 물론, 예방할 수 있는 것이다.

Claims

a) 건조된 개똥쑥을 용매인 메탄올을 이용하여 개똥쑥에 함유된 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분을 추출하는 단계;
b) 상기 a)의 추출물을 감압 농축한 후 그 농축물에 증류수를 넣고 공비 농축하여 상기 용매인 메탄올을 제거하는 단계;
c) 상기 b)의 용매인 메탄올이 제거된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 증류수에 넣고 현탁하는 단계;
d) 상기 c)의 현탁된 추출물을 중량% 대비 2 - 3배의 에틸아세테이트에 넣고 교반 후 정체시켜 층 분리한 후 에틸아세테이트 분획물을 수득하는 단계;
e) 상기 d)의 수득된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 3배의 0.5 - 2% NaCl 함유 증류수로 세척하는 단계;
f) 상기 e)의 세척된 에틸아세테이트 분획물을 중량% 대비 2 - 5배의 노말헥산에 교반하면서 넣고 8-12시간 방치하는 단계;
g) 상기 f)의 방치 후 발생 된 침전 분획물을 노말헥산으로 세척하며 여과하는 단계;
h) 상기 g)의 세척 및 여과된 분획물을 진공건조한 후 그를 분말화 하는 단계; 로 이루어지는 개똥쑥으로부터의 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법.
제1항에 있어서,
상기 d) 단계에서의 교반은, 30 - 80rpm으로 20 - 60분 동안 하는 것을 특징으로 하는 개똥쑥으로부터의 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 d) 단계에서의 에틸아세테이트 분획물은, 현탁된 추출물을 에틸아세테이트로 복수 회 분획실시하고 그 복수 회 분획하여 수득 된 분획물을 합하여 된 것임을 특징으로 하는 개똥쑥으로부터의 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법.
제1항에 있어서,
상기 h) 단계를 거친 최종 분말화 된 개똥쑥 수출물의 유효성분은, 아르테아누인(Arteannuin), 아르테아누인 B(Arteannuin B)인 것을 특징으로 하는 개똥쑥으로부터의 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출방법.
상기 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법으로 추출된 개똥쑥으로부터의 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 유효성분 추출물.
상기 제1항의 방법으로 추출된 추출물을 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물.
상기 제6항에 있어서,
상기 추출물의 유효성분이 0.001 - 10.0 중량% 함유하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물.
상기 제6항에 있어서,
상기 화장료 조성물은, 비누, 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패치, 및 분무제 중 하나인 것을 특징으로 하는 아토피 치료 및 예방 능을 갖는 화장료 조성물.