KR20140130401A

KR20140130401A - 항산화능이 향상된 동아 추출물 제조방법

Info

Publication number: KR20140130401A
Application number: KR20140129612A
Authority: KR
Inventors: 마승진; 정재천; 고기봉; 윤병재; 강혜숙; 김후경
Original assignee: 주식회사 에이치씨바이오텍; 윤병재
Priority date: 2014-09-26
Filing date: 2014-09-26
Publication date: 2014-11-10
Also published as: KR101563230B1

Abstract

본 발명은 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 기능성 식품 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 상기 화장료 조성물은 주름개선용 화장료 조성물일 수 있다.
본 발명의 제조방법에 의해 제조된 동아 추출물은 항산화능이 현저히 개선되고, 피부노화 방지능, 구체적으로 주름개선능이 우수할 뿐만 아니라, 본 발명의 제조방법에 의해 제조법의 경우, 기존 추출법에 비하여 추출수율도 우수하며, 본 발명의 유효성분인 동아 추출물은 천연물질을 유효성분으로 하는 것으로 부작용의 문제가 발생되지 아니하여, 식품 및 화장품 산업분야에 널리 사용될 수 있다.

Description

항산화능이 향상된 동아 추출물 제조방법{A METHOD OF PREPARING EXTRACT IMPROVING ANTI-OXIDATIVE ACTIVITY}

본 발명은 항산화능과 항노화능을 향상시킨 동아 추출물 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부로부터 피부 안쪽의 다양한 기관을 보호하고 있는 인체를 구성하는 기관들 중 가장 큰 기관으로서, 내부의 수분 및 유용성 성분의 피부 밖으로의 유출을 막아주는 장벽기능, 온도조절기능, 배설기능, 호흡기능 등 다양한 생리적 역할을 감당하고 있다.

그러나, 나이가 들면 피부의 생리적 기능이 저하되고 피부의 두께가 얇아져 피부장벽으로서의 기능이 저하될 뿐만 아니라, 자외선, 대기오염, 냉난방 시설 등 외적 요인과 과도한 피로, 스트레스 및 연령에 따른 호르몬 변화 등 내적 요인에 의해 피부의 건성화가 이루어지게 되며, 이와 같은 피부 건성화는 역시 피부의 생리적 기능을 떨어뜨려 외부의 작은 자극원에 의해서도 피부자극 및 손상이 쉽게 일어나게 하는 원인이 된다.

통상적으로 성장기에는 내부 및 외부로부터의 노화 요인에 대하여 피부의 다양한 방어 시스템에 의해 쉽게 대응을 할 수 있으나, 연령이 높아짐에 따라 자외선 등의 원인으로 생성된 활성산소종에 의해 항산화 시스템이 파괴되고 이로 인해 방어능력이 현저하게 저하된다.

상기한 바와 같이, 방어능력의 저하된 경우, 피부에 산화적 스트레스가 가해지면, 지질과산화, 단백질 산화, 탄력섬유인 콜라겐과 엘라스틴의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합, 히아루론산 사슬의 절단, DNA 산화 등 생체 구성성분의 손상을 가져오게 된다. 상기한 생체 구성성분의 손상으로 인하여, 피부 주름의 초기증상인 피부의 처짐, 거칠어짐, 건조함 등이 유발되며, 결과적으로 피부 주름이 형성되게 된다. 따라서 외부의 자극으로부터 피부를 보호하여 활성산소종의 생성을 억제하고, 생성된 활성산소를 제거하여 피부 주름을 방지할 수 있는 항노화 시스템의 개발이 요구된다.

상기 활성산소종과 관련되어 최근에 주목을 받고 있는 것이 자유라디칼 이론이다. 상기 자유라디칼 이론은 1950년대 중반 디 하만(D. Harman)에 의해 제시되었으며, 최근 피부 노화를 포함한 다양한 인체 노화 현상 및 질병과 관련하여 학회와 관련업계에서 주목을 받고 있다.

상기 자유라디칼이 인체의 발생원인과 관련하여 현재까지 여러 원인이 제시되었으며, 구체적으로 백혈구의 식작용, 미토콘드리아에서의 ATP 생산과정 중 전자 전달계, 미엘로퍼 옥사이드(Myeloper Oxide, MPO)의 작용, 자외선, 흡연, 스트레스, 공해 물질 및 세균의 침투 등이 있다.

인체에는 상기 활성산소종 또는 자유라디칼을 제거하기 위한 기작으로 항산화 물질인 슈퍼옥사이드디스뮤타제(Super Oxide Dismutase, SOD), 카탈라아제, 비타민 E(Vitamin E), 비타민 C(Vitamin C) 및 유비퀴놀(Uviquinol) 등이 있다.

그러나, 외부의 요인 또는 내부의 요인에 의해 활성산소종 또는 자유라디칼의 생성량이 증가하는 경우, 상기 인체의 항산화체계는 무력화되고, 인체의 항산화체계에 의해 처리되지 않은 활성산소종 또는 자유라디칼은 진피의 결합조직인 콜라겐(Collagen), 엘라스틴(Elastin) 또는 히아루론산(Hyaluronic acid) 등을 파괴하여 피부의 일정 부하 침하 현상 즉, 주름을 유발하게 되고, 세포막의 지질 부분을 산화시켜 세포의 파괴현상을 일으켜 피부염, 여드름 또는 피부암 등의 질병을 유도할 수 있게 되는 것으로 보고되어 있다.

상기 주름 또는 피부노화를 방지하기 위하여 다양한 물질이 화장료나 의약품에 배합되어 사용되었다. 일 예로, 아스코르브산, α-토코페롤, SOD 등이 여기에 해당되는데, 상기한 물질들은 고가일 뿐만 아니라 배합 시 안정성이 좋지 못하여 실질적인 효과를 얻기가 어려운 문제점이 있었다.

또한, 과거에는 여성들이 사용하는 제품이라고 생각되던 화장품은 오늘날에는 단순한 아름다움의 표현 도구만이 아닌 생활용품으로 남녀노소를 불문하고 사용하고 있으며, 산업의 발전에 따라 화장품에 대한 고급화와 다양화의 요구가 증대됨에 따라, 특별한 효과나 효능을 기대하는 기능성 제품에 대한 관심도가 높아지고 있는 실정이다.

우리나라에서 현재 인정되고 있는 기능성 화장품은 피부의 미백에 도움을 주는 미백제품, 피부의 주름개선에 도움을 주는 주름개선 제품 및 피부를 곱게 태워주거나 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 자외선 차단 제품이 있다.

일반적으로 이러한 기능성 화장품은 미용 효과뿐만 아니라 신체의 구조나 기능에 영향을 주고, 예방 및 치료 작용을 하는 화장품으로 해석되고 있다. 특히, 최근에는 화장품 전체 매출에서 기능성 화장품의 매출비중이 현저하게 증가하면서, 인체에 미치는 새로운 효능 성분을 모색하고, 이를 피부에 효율적으로 이용하고자 하는 연구가 활발히 이루어지고 있다.

특히, 최근 인구고령화 추세에 따른 노인 인구의 증가 현상 및 경제 발전에 따른 삶의 질의 향상에 따라, 노화에 자연스럽게 수반된다고 하였던 피부의 주름이나 피부 과색소 침작증 외에도 기미, 검버슴이나 잡티 등을 억제 또는 제어할 수 있는 제품에 대한 요구가 증가하고 있다. 특히, 노인 인구의 사회활동 기회의 증가로 인하여, 노령 인구의 미용에 대한 관심이 증대되는 한편, 자외선 등과 같은 피부에 대한 자극 및 노화 촉진의 요인이 증대되고 있고, 미백 및 주름예방과 관련된 기능성 화장품에 대한 수요 및 사용량이 현저하게 증가하고 있는 실정이다.

이런 기능성 화장품의 원료와 관련하여, 기능성 소재와 관련된 최근 연구는 친환경 열풍과 맞물려 주로 천연물로부터 유래한 천연물질 소재에 집중이 되고 있으며, 주로 허브(herb)류나 한방에서 약재로 사용되던 물질들에 관해 연구가 진행되고 있다.

따라서, 항산화 효과가 우수하여, 기존에 노화 및 피부노화, 일 예로 주름 또는 피부노화 방지를 위해 사용된 물질을 대체할 수 있고, 내성이나 안정성에 대한 문제가 대두되어지지 아니한 천연물질 유래의 주름 또는 피부노화 방지용 성분 및 이를 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 개발하는 것이 시급한 실정이다.

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본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 개선하기 위한 것으로, 천연물질의 항산화능을 개선하는 방법, 상기 항산화능이 개선된 천연물질을 유효성분으로 포함하는 항산화 음료 또는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 기능성 식품 조성물을 제공한다. 상기 식품 조성물은 음료일 수 있다.

또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 상기 화장료 조성물은 주름개선용 화장료 조성물일 수 있다.

본 발명자들은 내성이나 안전성에 대한 문제가 대두되어지지 아니한 천연물질 유래인 식물 추출물의 기능성에 대하여 연구하던 중, 종래부터 식용하여 온 안전성이 우수하고, 일부 기능성이 검증된 동아 추출물에 대해 연구하던 중, 상기 동아 추출물의 제조에 있어서, 특정 조건의 아임계 추출법을 이용하는 경우, 항산화 활성 및 주름개선 활성이 기존 용매 추출법은 물론 다른 조건의 아임계 추출법에 비해서도 현저하게 개선될 뿐만 아니라, 추출 수율도 우수하다는 것을 확인하여, 이로부터 본 발명을 완성하였다.

본 명세서에서 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.

본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다.

본 발명에 있어서, 화장료 조성물이란 인체를 청결 및 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부 및 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 조성물로 세정제(detergents) 및 화장제(cosmetics)를 포함하는 개념이다.

본 발명에 있어서, 유효성분이란 피부 상태에 적용하여 예방, 개선 또는 보완 효과를 제공하는 화장료 조성물의 성분을 의미한다.

본 발명에서 추출물이란 천연물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미하며, 상기 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출액을 분획한 것도 포함한다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법을 제공한다.

상기 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법은 동아(Benincasa hispida) 및 물을 1 MPa 내지 5 MPa 및 190℃ 내지 230℃의 조건에서 반응시켜 동아 아임계수 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 것일 수 있다.

상기 동아(Benincasa hispida)는 박과의 한해살이 덩굴성 식물로 동과 또는 동화라고도 불리운다. 상기 동아는 열대 아시아산으로 중국을 통하여 우리나라에 전래되어 재배대기 시작한 것으로 알려져 있고, 상기 동아의 줄기는 굵고 단면이 사각이며 갈색털이 있고,잎은 어긋나고 5개 내지 7개로 얕게 갈라지며 심장모양이며, 꽃은 여름에 노란종 모양으로 피고, 열매는 호박 비슷한 긴타원형이고 익으면흰가루가 앉는다. 상기 동아의 과육 및 종자는 식용 또는 약용하여 왔고, 이 외에 과거에는 동화선, 동화누르미, 동화적, 동화돈채 등 다양한 조리법으로 식용한 것으로 보고되고 있다. 상기 동아는 바람직하게는 열매, 더욱 바람직하게는 과육일 수 있다.

구체적으로, 상기 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법은 상기 동아(Benincasa hispida) 과육을 분쇄하여 동아 분쇄물을 제조하는 단계; 상기 동아 분쇄물에 물을 첨가하는 단계; 및 상기 동아 분쇄물 및 물을 3 MPa 및 190℃ 내지 230℃의 조건에서 반응시켜 동아 아임계수 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 것일 수 있다.

상기 동아 분쇄물을 제조하는 단계는 상기 동아, 구체적으로 동아 과육을 통상의 식물 분쇄기를 이용하여 수행할 수 있고, 상기 분쇄물 제조과정에 앞서 동아를 건조하는 과정을 추가로 수행할 수 있다. 이러한 측면에서, 상기 동아 분쇄물을 제조하는 단계는 상기 동아를 건조하는 과정 및 상기 건조된 동아를 분쇄하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있다.이러한 측면에서, 상기 동아 분쇄물은 동아 건조물의 분쇄물일 수 있다.

상기 동아의 건조는 통상의 식물, 구체적으로 과육의 건조방법, 일 예로 자연건조법, 열풍건조법, 냉동건조법 등의 방법으로 수행할 수 있으며, 상기 자연건조법은 20℃ 내지 30℃의 온도조건 및 통풍이 가능한 통기조건에서 수행할 수 있다.

상기 동아 분쇄물에 물을 첨가하는 단계에서, 첨가되는 물의 양은 동아 추출물 분쇄물 100 중량부를 기준으로 500 중량부 내지 1,500 중량부 또는 700 중량부 내지 1300 중량부 또는 900 중량부 내지 1100 중량부일 수 있다.

상기 물은 일반적인 물 또는 증류수일 수 있고, 상기 증류수는 1차 증류수 또는 2차 증류수 또는 3차 증류수일 수 있다.

상기 동아 아임계수 추출물을 제조하는 단계는 상기 동아 분쇄물 및 물을 일정 온도 및 일정 압력 조건에서 일정 시간 동안 반응시키는 방법으로 수행할 수 있다.

보다 구체적으로, 상기 압력 조건 구체적으로, 상기 아임계 추출의 압력 조건은 1 MPa 내지 5 MPa 또는 2 MPa 내지 4 MPa 또는 2.5 MPa 내지 3.5 MPa 또는 3 MPa일 수 있고, 상기 온도 조건 구체적으로, 상기 아임계 추출의 온도 조건은 190℃ 내지 230℃ 또는 200℃ 내지 220℃ 또는 210℃일 수 있다. 또한, 상기 반응시간, 구체적으로 상기 아임계수 추출물을 제조하기 위한 아임계 추출법을 수행하는 시간은 5초 내지 10분, 또는 10초 내지 5분, 또는 30초 내지 3분 또는 45초 내지 2분 또는 1분일 수 있다.

구체적으로, 상기 동아 추출물 아임계수 추출물을 제조하는 단계의 반응조건은 3 MPa 및 200℃ 내지 220℃ 또는 3 MPa 및 210℃의 조건에서 45초 내지 2분 또는 1분간 수행하는 것일 수 있다.

상기 아임계수 추출법에 의한 경우, 기존 추출법이 가지는 유기용매의 제거를 위한 과도한 비용 및 공정이 요구된다는 점과 환경문제를 유발할 수 있다는 문제점을 해결하였을 뿐만 아니라, 본 발명의 최적 조건에 의해 추출을 수행하는 경우, 특히 최적 조건인 3 MPa 및 210℃의 조건에서 수행하는 경우, 기존 추출법인 용매 추출법에 비하여 향상된 수율, 구체적으로 약 350% 내지 200%의 추출효율의 상승이 확인되어, 현저하게 향상된 수율을 얻을 수 있는 것으로 평가되었다.

또한, 상기 아임계수 추출법에 의할 경우, 기존 추출법인 용매 추출법에 비하여, DPPH 라디칼소거능 및 산화환원전위(ORP) 측정을 통해 확인한 결과, 항산화능이 현저히 개선, 구체적으로 DPPH 라디칼소거능의 경우 800% 내지 400% 정도, 산화환원전위(ORP)의 경우 400% 내지 200% 정도 개선되었을 뿐만 아니라 동일한 아임계수 추출법에 의할 경우에도 다른 조건에 비하여 우수한 항산화능 개선효과가 있는 것이 확인되었다. 뿐만 아니라, 상기 추출법에 의한 경우 주름개선활성도 현저하게 향상될 수 있는 것으로 확인되었다.

상기한 바와 같이, 본 발명의 아임계수를 이용하여 항산화능이 개선된 동아 추출물을 제조하는 방법은 기존 방법에 비하여, 안전성 및 친환경성이 인정되고, 비교적 간단한 공정으로 수행할 수 있을 뿐만 아니라, 항주름 활성도 개선되고, 수율도 현저하게 상승되는 장점이 있다.

이러한 측면에서, 본 발명은 상기 제조방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 기능성 식품 조성물일 수 있다. 상기 방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물은 다양한 방법으로 측정한 결과, 현저하게 우수한 항산화능이 있는 것으로 확인되었고, 식용되던 동아를 안전성이 인정된 물을 이용하여 제조한 것이므로, 기능성 식품 첨가물 조성물의 유효성분으로 제안되었다.

상기 식품이란 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다. 상기 식품은 음료 또는 기능성 음료일 수 있다.

상기 제조방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영아식, 유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실 음료,채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 상기 제조방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 20 중량부 범위에서 선택될 수 있다.

본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.

상기 기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 상기 제조방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g이다.

또한, 항산화능 개선 또는 보완을 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 제조방법에 의해 제조된 항산화능이 개선된 동아 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 중량% 내지 15 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 g 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 g 내지 1 g의 비율로 포함할 수 있다.

또한, 동아(Benincasa hispida) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 외용제에 관한 것이다. 상기 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 외용제는 피부노화 방지용 화장료 조성물일 수 있다. 상기 피부노화 방지용 화장료 조성물은 주름개선용 화장료 조성물일 수 있다.

상기 조성물의 유효성분인 동아 추출물은 주름개선, 구체적으로 엘라스타제 저해 효과를 가지며, 특히 상기 동아 추출물 중 동아 아임계수 추출물의 경우, 항산화활성 및 엘라스타제 저해 효과가 기존의 용매 추출물에 비하여 현저하게 우수한 것으로 확인되어, 피부 주름 및 탄력 개선의 유효성분으로 제안되었다.

본 발명에서 외용제란 일반적으로 외용에 사용하는 조성물 전반을 포괄하는 개념이고, 예를 들어, 기초 화장료, 메이크업 화장료, 모발용 화장료 등 각종 화장료를 포함하는 화장료 조성물이나 연고제 등의 다양한 의약품 내지 의약품외품 등으로 폭넓게 적용 가능한 것을 말하며, 바람직하게는 화장료 조성물을 의미한다.

상기 외용제에는 유효성분 외에 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 통상 외용제에 배합되고 있는 성분, 일 예로 보습제, 자외선 흡수제, 비타민류, 동식물 추출성분, 소화제, 미백제, 혈관확장제, 수렴제, 청량제, 호르몬제 등을 추가로 배합한 것일 수 있다.

상기 외용제의 제용은 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 적절한 형태를 취할 수 있으며, 일 예로 수용액계, 가용화계, 유화계, 유액계, 겔계, 페이스트계, 연고계, 에어졸계, 물-기름 2층계, 물-기름-분말 3층계일 수 있으며, 상기 제형에 의해 본 발명의 외용제의 제형 및 형태가 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기 외용제는 유효성분을 피부조직으로 침투 또는 이행시키기 위해서 필요한 기제를 추가로 포함할 수 있다.

상기 조성물의 유효성분인 동아 추출물은 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 중량%내지 30 중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하기로는 0.05 중량%내지 20 중량%일 수 있으나, 함량은 제형 또는 외용제에 함유되는 유효성분 외의 성분의 함량에 따라 적절히 조절할 수 있다

상기 동아 추출물은 동아 또는 동아 분쇄물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미하며, 아임계 추출물 또는 용매 추출물일 수 있다.

상기 동아 아임계수 추출물은 180℃ 내지 240℃의 아임계수로 추출한 동아(Benincasa hispida) 아임계수 추출물일 수 있다.

또한, 상기 동아 아임계수 추출물은 1 MPa 내지 5 MPa 및 180℃ 내지 240℃ 또는 2 MPa 내지 4 MPa 및 200℃ 내지 220℃ 또는 3 MPa 및 200℃ 내지 210℃의 아임계 조건 또는 3 MPa 및 200℃ 내지 210℃의 조건에서 1분간 추출한 동아 아임계수 추출물일 수 있다.

또한, 상기 동아 아임계수 추출물은 동아 분쇄물에 물을 첨가하고 3 MPa 및 180℃ 내지 240℃의 조건에서 추출하는 것을 특징으로 동아 아임계수 추출물일 수 있다.

상기 아임계수 추출물을 제조하기 위한 아임계 추출법의 조건은 상기 아임계 수의 압력이 1 MPa 내지 5 MPa 또는 2 MPa 내지 4 MPa 또는 2.5 MPa 내지 3.5 MPa 또는 3 MPa일 수 있고, 상기 아임계수의 온도는 180℃ 내지 240℃ 또는 190℃ 내지 230℃ 또는 200℃ 내지 220℃ 또는 210℃일 수 있다.

이러한 측면에서, 상기 동아 아임계수 추출물은 3 MPa 및 200℃ 내지 220℃의 아임계수로 추출한 것, 또는 3 MPa 및 210℃의 아임계수로 추출한 것일 수 있다.

상기 아임계수 추출물을 제조하기 위한 아임계 추출법은 5초 내지 10분, 또는10초 내지 5분, 또는 30초 내지 3분 또는 45초 내지 2분 또는 1분 동안 수행할 수 있다.

상기 아임계수 추출물은 용매 추출물에 비하여 엘라스타제(elastase) 저해활성 및 항산화 활성이 현저하게 우수하고, 특히 3 MPa의 압력 조건 및 210℃에서는 90℃ 또는 150℃에 비하여 우수한 엘라스타제 저해활성 및 항산화 활성이 확인되었다.

상기 아임계수 추출물은 상기 아임계 추출 후에 여과공정, 농축공정 또는 건조공정을 선택적으로 추가할 수 있으며, 상기 여과공정은 여과지를 이용하여 수행할 수 있고, 상기 농축공정은 감압농축 등을 통하여 수행할 수 있으며, 상기 건조공정은 열풍건조 또는 냉동건조 등의 방법으로 수행할 수 있다.

상기 용매 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다. 구체적으로는 상기 동아 건조물을 분쇄하는 공정; 및 용매로 추출하는 공정을 포함하는 방법으로 제조되며, 상기 추출공정에 의해 얻어진 추출액을 여과하는 공정이나 상기 여과공정에 의해 얻어진 여과액을 농축하는 공정을 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 제조방법은 농축된 여과액을 건조시키는 공정을 추가로 포함할 수 있다.또한, 상기 추출물은 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획과정은 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 용매로 실시할 수 있으며, 상기 분획시 용매는 2종 이상 사용할 수 있다. 상기 분획은 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하여 각 용매 추출물을 제조할 수 있다.

상기 용매 추출물에 사용되는 용매는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있고, 상기 용매 추출물은 용매 추출 과정에 의해 제조된 추출액, 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다. 또한, 상기 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출액을 분획한 것도 포함된다.

상기 용매 추출물의 용매는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며, 구체적으로는 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 저급알콜, 에틸아세테이트 등의 극성 유기용매 또는헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매와 같은 비극성 유기용매일 수 있다.

상기한 바와 같이, 동아 추출물, 바람직하게는 동아 아임계수 추출물은 엘라스타제를 저해하고 항산화 활성을 가지므로, 주름 예방 또는 개선 효과가 우수할 뿐만 아니라, 실험을 통하여 확인한 결과, 천연물질인 식물 즉, 동아 및 물에 의해 제조된 물질이 유효성분이므로 부작용도 문제되지 않고, 안전하다는 점에서, 본 발명의 화장료 조성물은 주름 개선 활성이 요구되는 피부에 적용될 수 있다

상기 본 발명의 바람직한 예인, 상기 제조방법에 의해 제조된 주름개선용 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에, 통상의 화장품에 사용가능한 모든 종류의 성분, 예컨대 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 부형제, 희석제, 무기염류 및 합성 고분자 물질 등을 추가로 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은, 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품, 두발용 화장품, 두피용 화장품, 면도용 화장품 또는 구강용 화장품의 용도로 제공될 수 있다. 상기 기초화장품의 예로는 크림, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있으며, 상기 메이크업 화장품으로는 파운데이션, 메이크업 베이스, 립스틱, 아이새도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬 등이 있으며, 바디 화장품으로는, 비누, 액체 세정제, 입욕제, 선스크린 크림, 선 오일 등이 있으며, 두발용 화장품으로는 샴푸, 린스, 헤어 트리트먼트, 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드, 헤어 칼라제, 헤어 블릿치제, 칼라 린스가 있으며, 두피용 화장품으로는 헤어 토닉, 스칼프 트리트먼트가 있으며, 면도용 화장품으로는 애프터셰이브로션, 셰이빙 크림 등이 있으며, 구강용 화장품으로는 치약, 마우스 워셔 등이 있다.

상기 화장료 조성물은 피부에 상기 동아 추출물이 전체 조성물에 대하여 0.0001중량% 내지 50중량%, 바람직하게는 0.001 중량% 내지 30중량% 포함될 수 있다. 즉, 동아 추출물의 함량은 피부 관련 기능성, 구체적으로 주름 방지 효과의 달성을 위하여 최소치 이상의 함량이어야 하나, 피부자극 여부 및 과량 첨가에 따른 사용감 저하 및 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여, 상기 범위 이내에서 자유롭게 조절될 수 있다. 이때, 유효성분의 함량 및 추가 성분의 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 외용연고, 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품 또는 면도용 화장품 등의 용도로 제공될 수 있으며, 상기 기초화장품의 예로는 에센스, 로션, 크림, 젤, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있을 수 있고, 상기 메이크업 화장품의 예로는 파운데이션, 립스틱, 아이새도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬, 메이크업 베이스 등이 있을 수 있으며, 바디 화장품으로는 비누, 액체 세정제, 입욕제, 썬 스크린 크림, 썬 오일 등이 있을 수 있고, 면도용 화장품으로는 애프터셰이브로션, 셰이빙 크림 등이 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 유효성분으로 동아 추출물을 포함하는 것 외에, 추가로 주름개선 효과 또는 이에 추가로 미백 효과나 보습효과가 있는 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 부형제, 희석제 등의 물질이 추가로 포함될 수 있다.

일 예로, 상기 화장료 조성물에는 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류 또는 합성 고분자 물질 등이 추가로 첨가될 수 있다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로 유지 성분, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 안료, 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, pH 조정제, 알콜, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제 또는 정제수 등일 수 있다.

또한, 상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩타이드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 더욱 포함할 수 있다.

상기 유효성분 이외의 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되지 않으며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형 일 예로 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등의 제형일 수 있다.

보다 구체적으로 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트리젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함할 수 있다.

일 예로, 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 본 발명의 제형이 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제, 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤지방족에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌소르비톨에스테르 및 폴리옥시에틸렌소르비탄에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

상기한 바와 같이, 3 MPa 및 210℃의 조건에서 반응시켜 제조된 동아 아임계수 추출물은 용매 추출물 또는 다른 조건에서 제조된 동아 아임계수 추출물에 비하여 엘라스타제 저해 활성 및 항산화 활성이 우수하며, 천연물질 유래의 물질이어서 부작용이 문제되지 않고, 안전할 수 있으므로, 화장품의 유효성분으로 사용될 수 있다.

본 발명의 제조방법에 의해 제조된 동아 추출물은 항산화능이 현저히 우수할 뿐만 아니라, 본 발명의 제조방법에 의해 제조법의 경우, 기존 추출법에 비하여 추출수율도 우수하며, 상기 동아 추출물은 주름개선능을 가질 뿐만 아니라 본 발명의 제조방법에 의할 경우 주름개선능도 현저하게 개선되고, 본 발명의 유효성분인 동아 추출물은 천연물질을 유효성분으로 하는 것으로 부작용의 문제가 발생되지 아니하여, 본 발명은 식품 산업 및 화장품 산업 분야에서 산업적 효과가 매우 크다 할 것이다.

이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 동아 추출물의 제조

동아 시료는 전라남도 장흥군에 재배하여 입수된 동아의 과육을 55 ℃ 내지 60 ℃의 온도조건 및 통풍이 가능한 조건에서 1일간 자연건조시킨 동아를 분쇄기로 분쇄하여 제조하였다.

동아 아임계 추출물은 상기 동아 분쇄물 20 g과 3차 증류수 200 mL를 아임계 추출장치에 넣은 후, 3 MPa의 압력 조건에서 온도를 각각 90℃, 150℃ 및 210℃로 조절하고, 상기 각각의 압력 및 온도 조건에서 1분간 반응시켜 추출하는 방법으로 제조하였다. 상기 제조된 추출액을 종이여과지(Whatman, No.2)를 이용하여 감압여과 하였으며, 상기 여과 후 회전식 감압농축기(Rotary Vacuum Evaporator)를 이용하여 농축하였으며, 상기 농축 후 동결건조기를 이용하여 건조시켜 분말화시켜 추출물을 제조하였다. 최종 제조된 추출물은 -20℃ 보관하며 실험에 사용하였다.

동아 용매 추출물은 물, 메탄올 및 에탄올을 이용하여 용매 추출법으로 제조하였다. 구체적으로, 동아 열수 추출물은 상기 동아 분쇄물 20 g을 3차 증류수 200 mL에 침지시킨 후, 100℃에서 15분 동안 추출하는 방법으로 제조하였다. 상기 제조된 추출액을 종이여과지(Whatman, No.2)를 이용하여 감압여과 하였으며, 상기 여과 후 회전식 감압농축기(Rotary Vacuum Evaporator)를 이용하여 농축하였으며, 상기 농축 후 동결건조기를 이용하여 건조시켜 분말화시켜 추출물을 제조하였다. 최종 제조된 추출물은 -20℃ 보관하며 실험에 사용하였다.

유기용매를 이용한 동아 용매 추출물은 상기 동아 분쇄물 20 g을 메탄올(Methanol) 또는 에탄올(Ethanol)을 각각 200 mL에 침지하여 24시간 동안 추출하는 방법으로 제조하였다. 상기 제조된 추출액을 종이여과지(Whatman, No.2)를 이용하여 감압여과 하였으며, 상기 여과 후 회전식 감압농축기(Rotary Vacuum Evaporator)를 이용하여 농축하였으며, 상기 농축 후 동결건조기를 이용하여 건조시켜 분말화시켜 추출물을 제조하였다. 최종 제조된 추출물은 -20℃ 보관하며 실험에 사용하였다.

상기 각 방법에 의해 제조된 추출물의 추출수율은 처음 사용된 동아 시료 대비 최종 수득한 추출물의 중량을 비교하여 확인하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

추출물 종류	아임계 추출(3M Pa)			용매 추출
추출물 종류	90℃	150℃	210℃	열수	메탄올	에탄올
추출수율(%)	12.3	17.4	24.1	7.3	12.1	9.2

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 아임계 추출법에 의할 경우 용매 추출법에 비하여 비교적 추출수율이 높은 것으로 확인되었다. 아임계 추출법에서는 210℃에서 추출한 경우, 다른 조건에 비하여 약 200% 내지 약 140%에 달하는 우수한 추출수율이 확인되었다. 특히, 용매 추출법에서 가장 추출수율이 좋은 메탄올 추출법에 비하여 210℃의 아임계 추출이 약 200% 이상 수율이 개선되었고, 열수 추출법에 비해서는 약 350% 수율이 개선된 것으로 확인되었다.

따라서, 추출수율 면에서 상기 3 MPa 및 210℃의 조건에서 아임계 추출을 수행하여 추출물을 제조하는 것이 가장 바람직한 것으로 확인되었다.

< 실시예 2> 각 추출방법에 따른 항산화능 확인

상기 실시예 1에서 제조된 동아 추출물의 추출법 및 추출조건에 따른 항산화능을 확인하기 위하여, DPPH 라디칼 소거능과, 산화환원전위를 측정하였다.

우선, DPPH 라디칼 소거능(DPPH radical scavenging ability) 측정은 Abe와 Yamacuchi 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 구체적으로, 상기 실시예 1에서 제조된 각 추출물 시료 100μL에 100mMTris-HCl buffer(pH 7.4)를 400 μL 가한 후, 200mM 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH, Sigma, USA)와 메탄올 용액 500μL를 첨가하였다. 상기 혼합용액을 볼텍싱 혼합기(Vortex mixer)로 혼합한 후, 암소에서 10분간 반응시키고, 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 소거능과 관련된 결과는 하기 계산식 1에 의해 계산하여 하기 표 2에 나타내었다. 하기 계산식 1에서 A는각 시료의 흡광도 값을 의미하고, B는 증류수의 흡광도 값을 의미한다.

[계산식 1]

DPPH radical scavenging activity (%) = (1-A/B) × 100

추출물 종류	아임계 추출(3M Pa)			용매 추출
추출물 종류	90℃	150℃	210℃	열수	메탄올	에탄올
소거능(IC₅₀, mg/mL)	3.62	2.47	1.79	16.25	8.7	12.4

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 아임계 추출법에 의할 경우 용매 추출법에 비하여 항산화능이 우수한 것으로 확인되었다. 아임계 추출법에서는 210℃에서 추출한 경우, 다른 조건에 비하여 약 200% 내지 약 150%에 달하는 우수한 항산화능을 가지는 것으로 확인되었다. 특히, 용매 추출법에서 가장 항산화능이 좋은 메탄올 추출법에 비하여 210℃의 아임계 추출이 약 500% 이상 항산화능이 개선되었고, 열수 추출법에 비해서는 약 900% 항산화능이 개선된 것으로 확인되었다.

또한, 산화환원전위(Oxidation and Reduction Power, ORP)는 ORP meter RM-20P(DKK-TOA corporation, 일본)를 이용하여 상기 실시예 1에서 제조된 시료 100mL을 취한 후 상온(25±3℃)에서 정치시킨 다음 combination electrode로 추출액의 산화환원전위 값을 구하는 방법으로 측정하였다. 상기 측정 결과는 하기 표 3에 나타내었다.

추출물 종류	아임계 추출(3M Pa)			용매 추출
추출물 종류	90℃	150℃	210℃	열수	메탄올	에탄올
산화환원전위(mV)	124	81	37	123	54	68

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 산화환원전위의 경우 각 용매 추출법의 용매 종류 또는 아임계 추출법의 아임계 조건의 차이에 의하여 동일한 방법에 의해서도 편차가 큰 것으로 확인되었다. 아임계 추출법에서는 210℃에서 추출한 경우, 다른 조건에 비하여 약 250% 내지 약 370%에 달하는 우수한 항산화능을 가지는 것으로 확인되었다. 특히, 용매 추출법에서 가장 항산화능이 좋은 메탄올 추출법에 비하여 210℃의 아임계 추출이 약 140% 이상 항산화능이 개선되었고, 열수 추출법에 비해서는 약 330% 항산화능이 개선된 것으로 확인되었다.

따라서, 항산화능의 개선면에서 상기 3MPa 및 210℃의 조건에서 아임계 추출을 수행하여 추출물을 제조하는 것이 가장 바람직한 것으로 확인되었다.

< 실시예 3> 각 추출방법에 따른 주름개선효과확인

피부 주름의 생성 원인 중 하나로 알려진 엘라스타제에 대한 저해활성을 통하여 동아 추출물의 항주름활성을 측정하기 위해, 상기 실시예 1에서 제조된 제조된 동아 추출물에 대하여 추출방법 및 추출조건에 따른 엘라스타제 저해활성을 측정하였다.

보다 구체적으로, 돼지에서 유래한 엘라스타제 및 기질인 N-succinyl-l-(Ala)3-ρ-nitroanilide를 사용하여 실험을 수행하였다. 우선, 96 well plate의 각 well에 50 mM Tri-HCl buffer(pH 8.0) 60μL를 첨가한 후, 10 mM의 N-succinyl-l-(Ala)3-ρ-nitroanilide 10 μL 및 각 추출조건 및 추출방법 별로 조절된 동아 추출물원액 10 μL 및 증류수 10 μL를 첨가한 후, 37℃에서 5분간 정치반응(pre-incubation) 시켰고, 이후, 1 unit/mL의 농도로 조제한 엘라스타제를 각 well에 10μL씩 첨가한 후, 5분 동안 37℃에서 반응시켰다.

반응 후, 415 nm에서 흡광도를 측정하여 검량성에 대입시켜 저해활성을 측정하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다. 엘라스타제 저해활성의 계산은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다. 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다.

추출물 종류	아임계 추출(3M Pa)			용매 추출
추출물 종류	90℃	150℃	210℃	열수	메탄올	에탄올
엘라스타제저해능(IC₅₀, mg/mL)	3.98	3.79	2.64	4.10	2.70	3.57

상기 표 4에 나타낸 바와 같이,아임계 추출물 및 용매 추출물 모두 엘라스타제 저해능을 나타내어, 동아 추출물의 경우 엘라스타제 저해능을 통한 피부주름 개선능을 가지는 것으로 확인되었다.

구체적으로, 엘라스타제 저해능의 경우 각 용매 추출법의 용매 종류 또는 아임계 추출법의 아임계 조건의 차이에 의하여 동일한 방법에 의해서도 편차가 큰 것으로 확인되었다. 아임계 추출법에서는 210℃에서 추출한 경우, 다른 조건에 비하여 약 150% 내지 약 130%에 달하는 우수한 항산화능을 가지는 것으로 확인되었다.

Claims

동아(Benincasa hispida) 과육을 분쇄하여 동아 분쇄물을 제조하는 단계; 상기 동아 분쇄물에 물을 첨가하는 단계; 및 상기 동아 분쇄물 및 물을 3 MPa 및 190℃ 내지 230℃의 조건에서 반응시켜 동아 아임계수 추출물을 제조하는 단계
를 포함하는 피부주름 개선능 및 항산화능이 개선된 동아 추출물의 제조방법.
제1항의 제조방법에 의해 제조된 동아 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 화장료 조성물.