KR101125460B1

KR101125460B1 - 에피루비신 염산염의 신규한 결정형

Info

Publication number: KR101125460B1
Application number: KR1020100026484A
Authority: KR
Inventors: 김문성; 김순회; 최준호; 성시영; 임홍규; 차대원; 손병화; 류기문
Original assignee: 동아제약주식회사
Priority date: 2010-03-24
Filing date: 2010-03-24
Publication date: 2012-03-28
Also published as: KR20110107237A; WO2011118929A2; TW201143777A; WO2011118929A3

Abstract

본 발명은 열 및 수분 안정성이 뛰어난 에피루비신 염산염 결정형 및 이들의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 신규의 결정형은 열 및 수분 안정성이 뛰어난 물리화학적 성질을 갖는 것으로서 이를 함유하는 제제에서 유연물질의 발생을 억제함으로써 매우 우수한 제제의 안정성을 확보할 수 있으며, 또한 본 발명의 에피루비신 염산염 결정형은 쉽게 결정형 형태로 제조될 수 있어 대량제조에 적합하다.

Description

에피루비신 염산염의 신규한 결정형{Novel Crystal Forms of Epirubicin hydrochloride}

본 발명은 안트라사이클린 항암제인 5,12-나프타세네디온, 10-[(3-아미노-2,3,6-트리데옥시-알파-L-아라비노-헥소피라노실)옥시]-7,8,9,10-테트라히드로-6,8,11-트리히드록시-8-(2-히드로아세틸)-1-메톡시 염산염(이하 ‘에피루비신 염산염’이라 한다)의 신규한 결정형 및 이들의 제조 방법에 관한 것이다.

일반적으로, 의약품은 항상 일정한 효과를 발휘시키기 위해서는 제품의 제조 직후뿐만 아니라 보관 기간 중 활성성분의 함유량 저하를 억제해야 하는 것은 물론, 동일 기간 중에 활성성분의 분해물 즉, 불순물 또는 유연물질의 증가를 최소한으로 억제시켜야만 한다. 따라서 의약품 중 불순물의 혼입을 방지하는 것은 의약품 품질관리에 있어 대단히 중요하다.

순도시험에 대한 각국 공정서의 규정을 살펴보면 대한약전은 순도시험항에 유연물질을 따로 설정하고 있으며, 미국약전은 ‘일반적 불순물’(Ordinary impurities)로 규정하여 따로 규정이 없는 한, 유연물질의 합이 2.0% 이하로 정하고 있거나, 의약품 각조에서 유연화합물(related compounds), 크로마토그래프상의 순도(chromatographic purity)로 각각의 유연물질의 양을 규제하고 있다. 유럽약전, 영국약전에서는 유연물질(related substances)로 규정하고 있으며 일본약전에서는 순도시험 중 유연물질로 규정하여 그 양을 규제하고 있다.

또한, 의약품에 대한 국제적 협의사항인 ICH 가이드라인 Q3A에서는 신약원료에 대해, Q3B에서는 신약제품 중 불순물의 규격설정에 대한 일반적인 사항을 설명하고 있다. 이 가운데 제품 중 불순물 규격은 더욱 세분되어, 보고역치(Reporting Thresholds), 구조규명역치(Identification Thresholds) 및 안전성(safety)검증역치(Qualification Thresholds)로 나뉘어 규정되어 있다.

따라서, 수치를 넘은 불순물은 그 물리화학적 구조 규명뿐만 아니라 독성학적 영향까지 평가하여 인체 투여 시 해당 불순물로 인한 인체 안전성 위해 여부를 판단할 수 있는 기초를 마련하도록 규제하고 있다. 즉, 극미량의 불순물 수치의 상승에 따라 구비해야만 하는 자료의 폭에 큰 차이가 발생할 뿐만 아니라 그 독성학적 위해 가능성이 크게 상승할 수 있음을 반증하는 것이라 할 수 있다.

이처럼, 의약품에 포함된 불순물의 관리는 개별 국가적으로뿐만 아니라 국제적으로도 공통된 협약을 제정할 정도로 매우 중요한 사안으로 다뤄지고 있다.

본 발명의 활성성분으로서 함유되는 유방암 등의 치료에 유용한 것으로 알려져 있는 에피루비신 염산염은 안트라사이클린 항암제들이 가지고 있는 간 독성을 낮춘 약물로 약물 작용기전이 이미 상세히 공지되어 있으며, 그 구조식은 하기 화학식 1과 같다.

<화학식 1>

그런데, 에피루비신 염산염은 열 및 수분에 대하여 불안정하기 때문에 취급에 주의를 필요로 하고, 제형화 할 때 안정성이 높은 제제가 요구된다. 이러한 에피루비신 염산염의 불안정성으로 인해 불순물이 쉽게 발생한다.

미국특허공보 제4,112,076, 제4,345,068, 제4,861,870, 및 제5,945,518호에 에피루비신 염산염의 제조방법이 공개되어 있다.

미국특허공보 제4,112,076호에는 유기 용매에 용해되어 있는 에피루비신 염기(base)에 염산염을 이온결합시켜 용해도 차이로 인한 고체상태의 에피루비신 염산염을 얻는 방법이 기재되어 있으며, 미국특허공보 제4,861,870호에는 수용액, 또는 수용액과 유기용매의 혼합용액 상태에 녹아 있는 에피루비신 염산염에 아세톤을 가하여 고체상태의 에피루비신 염산염을 얻는 방법이 기재되어 있으나, 상기 종래기술에 의해 제조되는 에피루비신 염산염은 비결정형의 에피루비신 염산염이다.

그런데, 비결정형의 에피루비신 염산염은 생성물 여과 및 건조와 관련하여 대량생산이 부적합하고, 물리화학적 성질상 열, 광, 산소 및 습기로부터 보호되어야만 하는 문제점이 있어, 이를 제제화 하는 경우에는 함습성이 높아 제제안정성이 크게 떨어지므로 포장 등의 노출되는 작업시 작업공간의 습도의 관리가 중요하며, 열안정성이 낮아 제조과정과 건조 과정에서 온도 설정에 세심한 주의를 필요로 한다.

한편, 미국특허공보 제7,485,707호에는 ‘에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ’이 공지되어 있는데, 상기 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ는 열 안정성이 좋은 것으로 알려져 있다.

그런데, 상기 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ는 본 발명과는 달리 수분에 대한 안정성이 확보되어 있지 않다.

상기 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ는 비결정형 에피루비신 염산염을 소량의 물과 에탄올로 용해시키고 다시 다량의 녹지 않는 불용성 용매인 1-프로판올을 가하여 결정을 얻는 것이나, 결정화 용매로 사용된 1-프로판올의 용매가 불용성이 아니라 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ가 약간 녹는 정도의 용해도를 가지는 용매로 결정화 중 최종 얻어지는 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ가 녹아서 수율을 낮게 하는 요인이 되기 때문에 이러한 용매는 결정화 용매로 적절하지 못하다. 따라서 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ의 수율이 매우 낮아 상업적으로 이용하기에는 제한이 따른다.

또한, 미국특허공보 제7,485,707호에 의한 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ의 제조방법은 물과 에탄올 용해 후 농축과정에서 불과 수십초 내지 수분내에 고형화 되기 때문에 겔 상태로 유지하기가 매우 까다롭고 어려운 문제점이 있다.

따라서, 에피루비신 염산염의 여러가지 결정형 형태에 대하여 보다 물리화학적으로 안정한 성질을 가지며, 제조가 용이한 결정형 형태가 당업계에 요구되고 있다.

그러므로 에피루비신 염산염 함유 제제를 보관 기간 중 불순물 발생률을 일정 수준 이하로 유지시킬 수 있다는 것은 해당 유연물질에 대한 추가적인 물리화학적 구조규명 및/또는 독성학적 연구 수행을 방지할 수 경제적 효과뿐만 아니라 해당 불순물로 인해 발생할 수 있는 독성학적 위험성을 크게 제거할 수 있다는 점에서 그 의의가 크다고 할 수 있다.

이에 본 발명자들은 에피루비신 염산염 결정형의 형태를 연구하던 중에 열 및 수분 안정성이 뛰어나 이를 함유하는 제제에서 유연물질의 발생을 억제함으로써 에피루비신 염산염 제제의 안정성을 크게 개선할 수 있으며, 쉽게 결정형 형태로 제조될 수 있는 에피루비신 염산염 결정형을 제조함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 물리화학적으로 열 및 수분에 대하여 안정성이 뛰어난 성질을 가지는 에피루비신 염산염 결정형을 제공하며, 이를 함유하는 제제에서 유연물질의 발생을 억제함으로써 에피루비신 염산염 제제의 안정성을 크게 개선할 수 있도록 하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 신규한 결정형이 쉽게 결정형 형태로 제조될 수 있을 뿐만 아니라, 높은 수율과 고순도로 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 에피루비신 염산염의 신규한 결정형 A 형, B 형, C 형 및 D형, 그리고 이들의 제조방법을 제공한다.

본 발명은 에피루비신 염산염 결정형 A 형 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에서 에피루비신 염산염 결정형 A 형은 하기 표 1과 같은 회절각(diffraction angle) 2θ 및 10% 초과의 상대강도(relative intensity) 값을 갖는다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 A 형은 하기 표 1에서 열거된 X선 분말 회절피크 이외에 첨부된 도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 약한(weak) 강도로 5.15, 17.61, 20.51, 24.42, 25.12, 30.78, 31.95, 33.07, 38.75, 41.06, 42.03 및 42.58° 2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 가질 수 있다. 이 때, “약한강도”란 하기 표 1에서 나타난 상대강도 10% 미만의 피크를 나타낸다. 본 발명의 X-선 분말 회절 패턴 이론에 관한 내용은 해당분야의 문헌 X-ray diffraction procedures, H.P. Klug and L.E. Alexander, J. Wiley, New York(1974) 등에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 A 형은 DSC를 통한 시차주사열량법의 결과 녹는점은 183.40 ℃의 값을 나타낸다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A 형은 에피루비신 염산염 비결정형을 N,N-디메틸포름아미드에 용해시킨 다음 알코올에 현탁시키고, 60~100℃ 정도에서 용해시키고 서서히 온도를 상온으로 낮추어 결정화시킴으로써 제조된다.

상기 에피루비신 염산염 결정형 A 형의 제조방법에 사용되는 알코올은 탄소수 1 내지 6인 저급 알코올이 바람직하며, 1-부탄올이 가장 바람직하다. 또한, N,N-디메틸 포름 아미드과 알코올의 부피의 비율은 1:15 ~ 1:50배로 혼합할 수 있다.

또한, 에피루비신 염산염 결정형 B 형 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에서 에피루비신 염산염 결정형 B 형은 하기 표 2와 같은 회절각(diffraction angle) 2θ 및 10% 초과의 상대강도(relative intensity) 값을 갖는다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 B 형은 하기 표 2에서 열거된 X선 분말 회절피크 이외에 첨부된 도 2에서 알 수 있는 바와 같이, 약한강도로 37.55, 38.58 및 40.38° 2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 가질 수 있다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 B 형은 DSC를 통한 시차주사열량법의 결과 녹는점은 183.43 ℃의 값을 나타낸다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 B 형은 에피루비신 염산염 비결정형을 알코올 용매에 현탁시킨 다음 소량의 물을 가하여 60~100℃ 정도에서 용해시키고 서서히 온도를 상온으로 낮추어 결정화시킴으로써 제조된다.

상기 에피루비신 염산염 결정형 B 형의 제조방법에 사용되는 알코올은 탄소수 1 내지 6인 저급 알코올이 바람직하며, 1-부탄올이 가장 바람직하다.

또한, 본 발명은 에피루비신 염산염 결정형 C 형 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에서 에피루비신 염산염 결정형 C 형은 하기 표 3과 같은 회절각(diffraction angle) 2θ 및 10% 초과의 상대강도(relative intensity) 값을 갖는다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 C 형은 하기 표 3에서 열거된 X선 분말 회절피크 이외에 첨부된 도 3에서 알 수 있는 바와 같이, 약한강도로 39.41, 45.61 및 50.40° 2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 가질 수 있다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 C 형은 DSC를 통한 시차주사열량법의 결과 녹는점은 190.42 ℃의 값을 나타낸다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 C 형은 에피루비신 염산염 결정형 A 형 또는 B 형 화합물을 아세톤, 이소프로필 에테르 및 아세토 니트릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매에 현탁, 교반하여 결정화시킴으로써 제조된다.

또한, 본 발명은 에피루비신 염산염 결정형 D 형 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에서 에피루비신 염산염 결정형 D 형은 하기 표 4와 같은 회절각(diffraction angle) 2θ 및 10% 초과의 상대강도(relative intensity) 값을 갖는다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 D 형은 하기 표 4에서 열거된 X선 분말 회절피크 첨부된 도 3에서 알 수 있는 바와 같이, 이외에 약한강도로 10.21, 31.05, 31.80, 36.34, 38.24 및 40.19° 2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 가질 수 있다.

본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 D 형은 DSC를 통한 시차주사열량법의 결과 녹는점은 192.98℃의 값을 나타낸다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 D형은 에피루비신 염산염 비결정형을 녹일 수 있는 최소량의 물에 용해 후 아세톤, 에틸아세테이트, 아세토니트릴, 및 메틸에틸케톤으로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매에 분산하여 현탁시키고, 60~100℃ 정도에서 용해시킨 다음 서서히 온도를 상온으로 낮추어 냉각하여 결정화시킴으로써 제조된다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A 형, B 형, C 형 및 D 형은 상기 표 1 내지 표 4의 X-선 분말 회절, 시차주사열량법 및 현미경을 이용하여 확인한 결과, 공지된 에피루비신 염산염의 비결정형 뿐만 아니라 미국특허공보 제7,485,707호 기재된 에피루비신 염산염 결정형 Ⅱ를 포함한 다른 결정 형태와는 다른 신규한 결정 형태로 밝혀졌다.

본 발명의 X-선 분말 회절값은 Panalytical 사의 X'Pert PRO X-선 회절 시스템을 사용하여 측정한 것이며, 시차주사열량법은 TA instrument 사의 DSC-2010분광계를 사용하여 측정하였고, 현미경은 Keynence사의 VHX-600E를 사용하였다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형들은 미국특허공보 제4,112,076호, 제4,345,068호, 제4,861,870호, 제5,945,518호 등에서 기재되어 있거나, 현재 시판중인 비결정형 보다 물리화학적으로 열 및 수분에 대하여 안정성이 뛰어난 성질을 가짐으로써 제제화에 있어서 매우 유리하다.

즉, 종래 에피루비신 염산염 비결정형은 함습성이 높은 특성을 나타내므로 포장 등의 노출되는 작업시 작업공간의 습도의 관리가 중요하며, 열안정성이 낮아 제조과정과 건조 과정에서 온도 설정에 세심한 주의를 필요로 한다.

그러나, 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A 형, B 형, C 형 및 D 형은 열 안정성이 뛰어나 포장 및 건조과정에서 실내온도를 포함한 넓은 온도 범위에서 실시할 수 있어 작업이 편리하고, 작업 시간도 단축할 수 있다. 또한, 본 발명의 A 형, B 형, C 형 및 D 형은 수분 안정성이 높아 작업장의 수분에 대한 세심한 주의가 불필요하다. 예를 들어, 에피루비신 염산염 비결정형을 제조할 때에는 결정화 후 여과 및 포장의 단계에서 상대습도 20% 이하의 조건에서의 작업이 요구되지만, 본 발명의 에피루비신 염산염 결정형 A 형, B 형, C 형 및 D 형의 경우는 상대습도 60% 의 실내온도에서 제조될 수 있어 제조공정이 편리하고 안전하다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 형태(A 형, B 형, C 형 및 D 형)는 약학적으로 이용 가능한 화합물로서 이미 다른 문헌에서 언급된 바와 같이 비 경구용 제제로서 활용 가능하다. 비 경구용 제제는 바람직하게 정맥투여와 동맥투여 그리고 방광내 투여 가능한 제제로서 예로 멸균된 수용액에 용해시키고 동결건조하여 바이알에 포장된 주사제를 포함하며 필요에 따라 부형제가 조합될 수도 있다.

본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형은 물리화학적으로 열 및 수분에 대하여 안정성이 뛰어난 성질을 가지므로 이를 함유하는 제제에서 유연물질의 발생을 억제함으로써 에피루비신 염산염 제제의 안정성을 크게 개선할 수 있어 매우 우수한 항암용 제제의 제조에 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형은 쉽게 결정형 형태로 제조될 수 있고, 또한, 높은 수율과 고순도로 제조될 수 있어, 대량생산에 적합하여 상업적으로 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A형의 X-선 분말 회절도를 나타낸 것이며,
도 2는 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 B형의 X-선 분말 회절도를 나타낸 것이고,
도 3은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 C형의 X-선 분말 회절도를 나타낸 것이고,
도 4는 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 D형의 X-선 분말 회절도를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A형의 시차주사열량법 분광기 그래프이며,
도 6은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 B형의 시차주사열량법 분광기 그래프이고,
도 7은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 C형의 시차주사열량법 분광기 그래프이고.
도 8은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 D형의 시차주사열량법 분광기 그래프이다.
도 9는 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A형의 현미경 사진이며,
도 10은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 B형의 현미경 사진이고,
도 11은 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 C형의 현미경 사진이고,
도 12는 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 D형의 현미경 사진이다.

하기의 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 에피루비신 염산염 결정형 A 형의 제조

미국특허공보 제4,861,870호 방법으로 제조하여 수득한 에피루비신 염산염의 비결정형 화합물 1g을 20 ml의 N,N-디메틸포름아미드에 용해시키고 1-부탄올 200ml에 분산하여 현탁 시킨 뒤, 완전히 용해 될 때 까지 온도를 올려(이때 온도는 약 60~100℃ 이다) 교반한 후 서서히 상온으로 냉각시키고 여과하였다. 여과하여 얻어진 결정을 50℃에서 12시간 진공 건조하여 에피루비신 염산염 결정형을 수득하였다(수율 80%).

상기 에피루비신 염산염 결정형을 X-선 분말 회절값(M18HF-SRA 회절계(Mac Science사) 상에서 CuKa방사를 사용하여 측정)을 측정하여 표 1 및 도 1에 나타내었으며, 이를 에피루비신 염산염 결정형 A형이라 하였다.

융점(시차주사열량법 TA instrument 사의 DSC-2010분광계 측정):183.40 ℃

<실시예 2> 에피루비신 염산염 결정형 B 형의 제조

미국특허공보 제4,861,870호 방법으로 제조하여 수득한 에피루비신 염산염의 비결정형 화합물 1 g을 1-부탄올 200ml에 현탁시키고, 물을 2ml 가하고 교반을 하면서 맑게 녹을 때 까지 온도를 올려(이때 온도는 약 60~100℃ 이다) 용해한다. 서서히 상온으로 냉각시키고 생성된 결정을 여과하였다. 여과하여 얻어진 결정을 50℃에서 12시간 진공 건조하여, 에피루비신 염산염 결정형을 수득하였다(수율 91%).

상기 에피루비신 염산염 결정형을 X-선 분말 회절값(M18HF-SRA 회절계(Mac Science사) 상에서 CuKa방사를 사용하여 측정)을 측정하여 표 2 및 도 2에 나타내었으며, 이를 에피루비신 염산염 결정형 B 형이라 하였다.

융점 (시차주사열량법 TA instrument 사의 DSC-2010분광계 측정):183.43 ℃

< 실시예 3> 에피루비신 염산염 결정형 C 형의 제조

실시예 1에서 얻은 에피루비신 염산염 결정형 A 형 1 g을 50 ml의 아세톤에 현탁시키고, 상온에서 1시간 동안 교반한 후 여과하였다. 여과하여 얻어진 결정을 25℃에서 12시간 진공 건조하여, 에피루비신 염산염 결정형을 수득하였다(수율 95%).

상기 에피루비신 염산염 결정형을 X-선 분말 회절값(M18HF-SRA 회절계(Mac Science사) 상에서 CuKa방사를 사용하여 측정)을 측정하여 표 3 및 도 3에 나타내었으며, 이를 에피루비신 염산염 결정형 C 형이라 하였다.

융점 (시차주사열량법 TA instrument 사의 DSC-2010분광계 측정):190.42 ℃

< 실시예 4> 에피루비신 염산염 결정형 C 형의 제조

실시예 2에서 얻은 에피루비신 염산염 결정형 B 형을 실시예 3과 동일한 방법을 이용하여 결정형을 제조하였다(수율 93%). 상기 결정형은 실시예 3에서 제조된 에피루비신 염산염 결정형 C 형과 동일한 결정형임을 X-선 분말 회절값(M18HF-SRA 회절계(Mac Science사) 상에서 CuKa방사를 사용하여 측정)을 측정하여 확인하였다.

< 실시예 5> 에피루비신 염산염 결정형 D 형의 제조

미국특허공보 제4,861,870호 방법으로 제조하여 수득한 에피루비신 염산염의 비결정형 화합물 1 g을 10 ml의 물에 용해 후 아세톤 400ml에 현탁시키고, 교반을 하면서 맑게 녹을 때 까지 온도를 올려(이때 온도는 약 60~100℃ 이다) 용해시킨다. 서서히 상온으로 냉각시키고 여과하였다. 여과하여 얻어진 결정을 40℃에서 6시간 진공 건조하여, 에피루비신 염산염 결정형을 수득하였다(수율 85%).

상기 에피루비신 염산염 결정형을 X-선 분말 회절값(M18HF-SRA 회절계(Mac Science사) 상에서 CuKa방사를 사용하여 측정)을 측정하여 표 4 및 도 4에 나타내었으며, 이를 에피루비신 염산염 결정형 D 형이라 하였다.

융점 (시차주사열량법 TA instrument 사의 DSC-2010분광계 측정):192.98 ℃

상기 본 발명에 따른 실시예 1 내지 5에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명은 에피루비신 염산염의 신규한 결정형을 제조할 수 있으며, 이들은 각각 쉽게 결정형 형태로 제조될 수 있을 뿐만 아니라, 수율 80% ~ 95%의 높은 수율과 고순도로 제조된다.

< 실험예 1> 안정성 확인시험

상기 실시예 1, 2, 3 및 실시예 5에서 각각 제조된 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형 A 형, B 형, C 형 및 D 형과 기존 미국특허공보 제4,861,870호 방법으로 제조된 에피루비신 염산염 비결정형을 각각 유리 바이알에 100mg 씩을 담고 고무마개와 알루미늄 캡으로 밀봉하여 25± 2℃, 상대습도 60%의 항온 항습조에 넣고 가속 실험을 실시하였다.

이 때, 가속 조건에서 2개월, 4개월 및 6개월에 걸쳐 그 함량 변화와 유연물질의 변화를 HPLC법으로 측정하여 평가하고 그 결과를 각각 하기 표 5, 6, 7, 8, 9 에 나타내었다.

* 각 단위 : %

* 함량 : 잔류 용매를 제거한 무수물로서 계산

* 유연물질 A : Doxorubicinone

* 각 단위 : %

* 함량 : 잔류 용매를 제거한 무수물로서 계산

* 유연물질 A : Doxorubicinone

* 각 단위 : %

* 함량 : 잔류 용매를 제거한 무수물로서 계산

* 유연물질 A : Doxorubicinone

* 각 단위 : %

* 함량 : 잔류 용매를 제거한 무수물로서 계산

* 유연물질 A : Doxorubicinone

* 각 단위 : %

* 함량 : 잔류 용매를 제거한 무수물로서 계산

* 유연물질 A : Doxorubicinone

<함량 및 유연물질 분석조건>

-컬럼 : Zorbax TMS 컬럼 (4.6mmX250mm, 5㎛) 또는 이와 유사한 컬럼

-이동상 : 메탄올 17 : 아세토니트릴 29 : 완충액 54 의 비율로 혼합

완충액 : 2.8% 의 묽은인산이 포함된3.7g/L 의 라우릴황산나트륨

(sodium laurilsulfate) 수용액

-검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 254nm)

-유속 : 2.5mL/분

-컬럼온도: 35℃± 2℃

이상의 결과에서와 같이, 본 발명에 따른 에피루비신 염산염 결정형들은 25± 2℃ 상대습도 60% 가속 실험에서 함량이 유지되었으며, 가속 조건 및 가혹 조건에서도 함량 기준 98% ~ 100.2% 이내로서 적합한 안정성을 유지함을 알 수 있었다. 또한, 열 분해물로 알려진 유연물질A(doxorubicinone)의 낮은 증가를 보여 열안정성이 뛰어난 것을 확인할 수 있다. 따라서 본 발명의 결정형은 우수한 안정성을 나타낸다.

따라서, 본 발명은 물리화학적으로 열 및 수분에 대하여 안정성이 뛰어난 성질을 가지는 에피루비신 염산염 결정형을 제공함으로써, 이를 함유하는 제제에서 유연물질의 발생을 억제함으로써 에피루비신 염산염 제제의 안정성을 크게 개선할 수 있으며, 에피루비신 염산염 함유 제제를 보관 기간 중 불순물 발생률을 일정 수준 이하로 유지시킬 수 있어 해당 불순물로 인해 발생할 수 있는 독성학적 위험성을 크게 제거할 수 있다는 점에서 그 의의가 크다고 할 수 있다.

Claims

하기와 같은 X선 분말 회절피크를 갖는 에피루비신 염산염의 결정형 A 형.
제 1 항에 있어서, 약한(weak) 강도로 5.15, 17.61, 20.51, 24.42, 25.12, 30.78, 31.95, 33.07, 38.75, 41.06, 42.03 및 42.58° 2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 갖는 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염의 결정형 A 형.
하기와 같은 X선 분말 회절피크를 갖는 에피루비신 염산염의 결정형 B 형.
제 3 항에 있어서, 약한(weak) 강도로 37.55, 38.58 및 40.38°2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 갖는 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염의 결정형 B 형.
하기와 같은 X선 분말 회절피크를 갖는 에피루비신 염산염의 결정형 C 형.
제 5 항에 있어서, 약한(weak) 강도로 39.41, 45.61 및 50.40°2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 갖는 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염의 결정형 C 형.
하기와 같은 X선 분말 회절피크를 갖는 에피루비신 염산염의 결정형 D 형.
제 7 항에 있어서, 약한(weak) 강도로 10.21, 31.05, 31.80, 36.34, 38.24 및 40.19°2θ에서 X선 분말 회절피크를 추가로 갖는 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염의 결정형 D형.
비결정형의 에피루비신 염산염을 N,N-디메틸포름아미드로 용해시킨 다음 탄소수 1 내지 6인 저급 알코올에 현탁시키는 단계; 및
상기 현택액을 60~100℃에서 교반하여 용해시키고, 상온에서 냉각하는 단계;
를 포함하는 에피루비신 염산염 결정형 A 형의 제조방법.
제 9 항에 있어서, 저급 알코올은 1-부탄올인 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염 결정형 A형의 제조방법.
비결정형의 에피루비신 염산염을 탄소수 1 내지 6인 저급 알코올 용매에 현탁시키는 단계; 및
상기 현탁액에 물을 가하고 60~100℃에서 교반하여 용해시키고 상온에서 냉각하는 단계;
를 포함하는 에피루비신 염산염 결정형 B 형의 제조방법.
제 11 항에 있어서, 탄소수 1 내지 6인 저급 알코올은 1-부탄올인 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염 결정형 B형의 제조방법.
에피루비신 염산염 결정형 A 형 또는 B 형을 아세톤, 이소프로필에테르 및 아세토니트릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매에 현탁시키는 단계; 및
상기 현택액을 상온에서 교반한 후 냉각하는 단계;
를 포함하는 에피루비신 염산염 결정형 C 형의 제조방법.
제 13 항에 있어서, 용매는 아세톤인 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염 결정형 C형의 제조방법.
비결정형의 에피루비신 염산염을 물에 용해 후 아세톤, 에틸아세테이트, 아세토니트릴 및 메틸에틸케톤으로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매에 현탁시키는 단계; 및
상기 현탁액을 60~100℃에서 교반하여 용해시키고 상온에서 냉각하는 단계;
를 포함하는 에피루비신 염산염 결정형 D형의 제조방법.
제 15 항에 있어서, 용매는 아세톤인 것을 특징으로 하는 에피루비신 염산염 결정형 D형의 제조방법.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 따른 결정형을 유효성분으로 하며 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 항암용 약학조성물.