KR100994658B1 - 신규 마이크로스피어 및 이들의 제조 방법 - Google Patents

Abstract

분산성이 개선된 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 수중 건조 방법에 의한 마이크로스피어의 제조 도중 삼투압 조절제가 에멀젼의 외부 수상에 첨가되는 것을 특징으로 하는 방법

마이크로스피어, 삼투압 조절제

Description

신규 마이크로스피어 및 이들의 제조 방법 {NOVEL MICROSPHERE AND METHOD FOR PRODUCTION THEREOF}

본 발명은 분산성이 개선된 마이크로스피어 (microsphere), 상기물의 제조 방법, 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물 등에 관한 것이다.

예를 들어, 일본 특허 출원 공개 공보 (JP-A) 57-118512, 57-150609 및 6-145046 에는 생분해성 중합체를 사용한 W/O 유형 에멀젼으로부터의 서방성 마이크로스피어의 제조 방법이 개시되어 있다.

서방성 생분해성 중합체는, 예를 들어 생리 활성 물질 함유 마이크로스피어 등을 위한 기재로서 유용하다. 상기 생분해성 중합체의 공지된 예에는 폴리락트산 및 락트산과 글리콜산의 공중합체가 포함된다 (예컨대 JP-A 11-269094).

임의의 종래 합성 방법으로 제조된 후, 상기 생분해성 중합체는 그대로 사용되어 왔다. 그러나, 합성된 대로의 상기 비개질 제품은 적은 양의 말단 카르복실기를 가져서, 서방성 기재로서 덜 유용할 수 있음이 발견되었다. 따라서, 고분자량을 갖는 상기 비개질 생분해성 중합체를 가수분해하여 적절한 중량 평균 분자량을 갖는 제품을 형성한 후, 상기 제품을 서방성 제제를 위한 기재로서 사용하는 단계를 포함하는 공정에 대한 연구가 수행되어 왔다.

그러나, 가수분해 및 물로의 세척 후 수득되는 제품은 쉽게 초기 파열을 야기할 수 있어서, 이것이 적절한 중량 평균 분자량 및 적절한 양의 말단 카르복실기를 갖는다고 해도 서방성 기재로서 적합하지 않다. 따라서, 본 상황 하에서 그 개선을 위한 요구가 존재하여 왔다.

JP-A 7-97334 에는 서방성 제제 및 상기물의 제조 방법이 개시되어 있으며, 이 제제에는 생리 활성 펩티드 또는 이들의 염, 및 그 말단에 자유 카르복실기를 갖는 생분해성 중합체가 포함된다.

그러나, 상기 문헌은 마이크로스피어의 분산성 개선을 위한 임의 방법에 대해서는 언급하지 않고 있다.

따라서, 본 발명의 목적은 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어, 상기물의 제조 방법 등을 제공하는 것이다.

본 발명자들은 상기 목적을 염두에 두고 활발히 연구를 수행한 결과, 마이크로스피어 제조를 위한 수중 건조 공정에 있어서, 외부 수성상으로의 삼투압 조절제의 첨가가 마이크로스피어 제품의 분산성을 놀랍게 개선시킬 수 있음을 발견하였다. 상기 발견에 근거하여, 본 발명자들은 추가 연구를 수행하고, 최종적으로 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명은 하기를 제공한다:

(1) 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 수중 건조 방법에 의한 마이크로스피어의 제조에 있어서 외부 수성상으로 삼투압 조절제를 첨 가하는 것을 포함하는 방법;

(2) 상기 (1) 에 있어서, 약 400 내지 약 700 mg 의 마이크로스피어가 2 분 미만으로 1.5 ml 의 주사용 분산 매질 중에 분산될 수 있는 정도로 분산성이 개선되는 방법;

(3) 상기 (1) 에 있어서, W/O/W 유형 에멀젼이 수중 건조 방법에 사용되는 방법;

(4) 상기 (3) 에 있어서, 추가로 내부 수성상에 약물 담체를 첨가하는 것을 포함하는 방법;

(5) 상기 (1) 에 있어서, O/W 유형 에멀젼이 수중 건조 방법에 사용되는 방법;

(6) 상기 (1) 에 있어서, S/O/W 유형 에멀젼이 수중 건조 방법에 사용되는 방법;

(7) 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 삼투압 조절제를 포함하는 외부 수성상 중에, 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 포함하는 내부 수성상 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 인 락트산 중합체 또는 이들의 염을 포함하는 용액의 오일상으로 이루어진 W/O 유형 에멀젼을 분산시키고; 분산액을 수중 건조 방법으로 처리하는 것을 포함하는 방법;

(8) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 10 중량% 이하인 방법;

(9) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자 량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5 중량% 이하인 방법;

(10) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 3000 이하인 중합체의 함량이 약 1.5 중량% 이하인 방법;

(11) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 1000 이하인 중합체의 함량이 약 0.1 중량% 이하인 방법;

(12) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염의 중량 평균 분자량이 15000 내지 40000 인 방법;

(13) 상기 (7) 에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염의 중량 평균 분자량이 17000 내지 26000 인 방법;

(14) 상기 (1) 또는 (7) 에 있어서, 삼투압 조절제가 알콜, 당, 아미노산, 펩티드, 단백질, 수용성 아미노산의 염 또는 이들의 유도체 또는 이들의 혼합물인 방법;

(15) 상기 (1) 또는 (7) 에 있어서, 삼투압 조절제가 만니톨인 방법;

(16) 상기 (1) 또는 (7) 에 있어서, 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 농도가, 외부 수성상의 삼투압이 등장성 염화나트륨 용액의 삼투압의 약 1/50 내지 약 5 배인 농도인 방법;

(17) 상기 (7) 에 있어서, 생리 활성 물질이 수용성 생리 활성 물질인 방법;

(18) 상기 (7) 에 있어서, 생리 활성 물질이 생리 활성 펩티드인 방법;

(19) 상기 (7) 에 있어서, 생리 활성 물질이 LH-RH 유도체인 방법;

(20) 상기 (7) 에 있어서, LH-RH 유도체가 하기 식으로 나타내는 펩티드 또 는 이들의 염인 방법:

5-옥소-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z

(식 중, Y 는 DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal 또는 DHis(ImBzl) 을 나타내며, Z 는 NH-C₂H₅ 또는 Gly-NH₂ 를 나타낸다);

(21) 상기 (1) 또는 (7) 에 따른 방법에 의해 제조되는 마이크로스피어;

(22) 상기 (21) 에 따른 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물;

(23) 상기 (22) 에 있어서, 전립선암, 전립선 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 자궁섬유종, 성조숙증, 생리통, 또는 유방암의 예방 또는 치료를 위한, 또는 피임을 위한 서방성 조성물;

(24) 상기 (22) 에 있어서, 주사용인 서방성 조성물;

(25) 상기 (22) 에 있어서, 추가로 만니톨을 포함하는 서방성 조성물;

(26) 상기 (22) 에 있어서, 전체 조성물 중 약 70 중량% 이상의 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물;

(27) 전립선암, 전립선 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 자궁섬유종, 성조숙증, 생리통, 또는 유방암의 예방 또는 치료, 또는 피임 방법에 있어서, 상기 (22) 에 따른 유효량의 서방성 조성물을 포유류에 투여하는 것을 포함하는 방법;

(28) 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어를 제조하기 위해 에멀젼을 외부 수성상 중에 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조하는 것을 포함하는 방법에 있어서, 에멀젼에 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체가 포함되는 방법; 및

(29) 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어를 제조하기 위한, 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 에멀젼을 수중 건조하는데 있어서의 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 용도.

본 발명은 또한 하기를 제공한다:

(30) 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어에 있어서, 생리 활성 물질 또는 이들의 염; 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 의 락트산 중합체, 또는 이들의 염을 포함하며, 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5% 이하인 마이크로스피어;

(31) 상기 (30) 에 있어서, 상기 (30) 에 따른 마이크로스피어를 포함하는 약 400 내지 약 700 mg 의 서방성 조성물이 2 분 미만으로 1.5 ml 의 분산 매질 중에 분산될 수 있는 마이크로스피어;

(32) 상기 (30) 에 있어서, 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조 방법으로 제조될 수 있는 마이크로스피어;

(33) 상기 (32) 에 있어서, 수중 건조 방법이 W/O/W 유형인 마이크로스피어;

(34) 상기 (32) 에 있어서, 수중 건조 방법이 O/W 유형인 마이크로스피어;

(35) 상기 (32) 에 있어서, 수중 건조 방법이 S/O/W 유형인 마이크로스피어;

(36) 상기 (30) 에 있어서, 삼투압 조절제를 포함하는 수성상 중, 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 포함하는 내부 수성상, 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 의 락트산 중합체, 또는 이들의 염을 포함하는 용액의 오일상이 포함되고, 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5 중량% 이하인 W/O 유형 에멀 젼을 분산시키고, 분산액을 수중 건조 방법으로 처리하여 제조되는 마이크로스피어;

(37) 상기 (30) 에 있어서, 락트산 중합체 중 중량 평균 분자량 3000 이하인 중합체의 함량이 약 1.5 중량% 이하인 마이크로스피어;

(38) 상기 (30) 에 있어서, 락트산 중합체 중 중량 평균 분자량 1000 이하인 중합체의 함량이 약 0.1 중량% 이하인 마이크로스피어;

(39) 상기 (30) 에 있어서, 락트산 중합체가 중량 평균 분자량 15000 내지 40000 인 마이크로스피어;

(40) 상기 (30) 에 있어서, 락트산 중합체가 중량 평균 분자량 17000 내지 26000 인 마이크로스피어;

(41) 상기 (30) 에 있어서, 생리 활성 물질이 수용성 생리 활성 물질인 마이크로스피어;

(42) 상기 (41) 에 있어서, 생리 활성 물질이 생리 활성 펩티드인 마이크로스피어;

(43) 상기 (41) 에 있어서, 생리 활성 물질이 LH-RH 유도체인 마이크로스피어;

(44) 상기 (43) 에 있어서, LH-RH 유도체가 하기 식으로 나타내는 펩티드인 마이크로스피어:

5-옥소-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z

(식 중, Y 는 DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal 또는 DHis(ImBzl) 을 나 타내며, Z 는 NH-C₂H₅ 또는 Gly-NH₂ 를 나타낸다);

(45) 상기 (32) 내지 (36) 중 어느 하나에 있어서, 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 농도가, 외부 수성상의 삼투압이 등장성 염화나트륨 용액의 삼투압의 약 1/50 내지 약 5 배인 농도인 마이크로스피어;

(46) 상기 (32) 내지 (36) 중 어느 하나에 있어서, 삼투압 조절제가 알콜, 당, 아미노산, 펩티드, 단백질, 수용성 아미노산의 염 또는 이들의 유도체 또는 이들의 혼합물인 마이크로스피어;

(47) 상기 (43) 에 있어서, 알콜이 다가 알콜 또는 1 가 알콜인 마이크로스피어;

(48) 상기 (47) 에 있어서, 다가 알콜이 글리세린, 아라비톨, 자일리톨, 알도니톨, 만니톨, 소르비톨, 둘시톨 또는 이들의 혼합물인 마이크로스피어;

(49) 상기 (47) 에 있어서, 1 가 알콜이 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알콜 또는 이들의 혼합물인 마이크로스피어;

(50) 상기 (46) 에 있어서, 당이 단당류, 이당류, 올리고당류 또는 이들의 유도체 또는 이들의 혼합물인 마이크로스피어;

(51) 상기 (50) 에 있어서, 단당류가 아라비노오스, 자일로오스, 리보오스, 2-데옥시리보오스, 글루코오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 만노오스, 소르보오스, 람노오스 또는 푸코오스인 마이크로스피어;

(52) 상기 (50) 에 있어서, 이당류가 말토오스, 셀로바이오스, α,α-트레할 로오스, 락토오스 또는 수크로오스인 마이크로스피어;

(53) 상기 (50) 에 있어서, 올리고당류가 말토트리오스, 라피노오스 또는 스타치오스인 마이크로스피어;

(54) 상기 (50) 에 있어서, 단당류, 이당류 또는 올리고당류의 유도체가 글루코사민, 갈락토사민, 글루쿠론산 또는 갈락투론산인 마이크로스피어;

(55) 상기 (46) 에 있어서, 아미노산이 글리신, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 세린, 트레오닌, 프롤린, 히드록시프롤린, 시스테인, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 라이신, 아르기닌 또는 히스티딘인 마이크로스피어;

(56) 상기 (46) 에 있어서, 수용성 아미노산의 염이 글리신, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 세린, 트레오닌, 프롤린, 히드록시프롤린, 시스테인, 메티오닌, 아스파르트산, 글루탐산, 라이신, 아르기닌 또는 히스티딘의 산 또는 알칼리 금속염인 마이크로스피어;

(57) 상기 (32) 내지 (36) 중 어느 한 항에 있어서, 삼투압 조절제가 만니톨인 마이크로스피어;

(58) 상기 (30) 에 있어서, 추가로 약물 담체를 포함하는 마이크로스피어;

(59) 상기 (58) 에 있어서, 약물 담체가 알부민, 젤라틴, 살리실산, 시트르산 또는 나트륨 에틸렌디아민테트라아세테이트인 마이크로스피어;

(60) 상기 (31) 에 있어서, 분산 매질이 분산제, 방부제, 등장화제 또는 식물성 오일인 마이크로스피어;

(61) 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 생성 마이크로스피어의 분산성을 개선시키기 위해 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조 방법을 수행하는 것을 포함하는 방법;

(62) 생리 활성 물질 또는 이들의 염, 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 의 락트산 중합체, 또는 이들의 염을 포함하며, 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5 중량% 이하인 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조 방법을 수행하는 것을 포함하는 방법;

(63) 상기 (62) 에 있어서, 수중 건조 방법이 W/O/W 유형인 방법;

(64) 상기 (62) 에 있어서, 수중 건조 방법이 O/W 유형인 방법;

(65) 상기 (62) 에 있어서, 수중 건조 방법이 S/O/W 유형인 방법;

(66) 생리 활성 물질 또는 이들의 염, 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 의 락트산 중합체 또는 이들의 염을 포함하며, 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5 중량% 이하인 마이크로스피어의 제조 방법에 있어서, 삼투압 조절제를 포함하는 수성상 중, 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 포함하는 내부 수성상 및 중량 평균 분자량 15000 내지 50000 인 락트산 중합체 또는 이들의 염을 포함하는 용액의 오일상으로 이루어지고 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 약 5 중량% 이하인 W/O 유형 에멀젼을 분산시키고; 분산액을 수중 건조 방법으로 처리하는 것을 포함하는 방법;

(67) 상기 (66) 에 있어서, 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 농도가 외부 수 성상의 삼투압이 등장성 염화나트륨 용액의 삼투압의 약 1/50 내지 약 5 배인 농도인 방법;

(68) 상기 (66) 에 있어서, 내부 수성상이 추가로 약물 담체를 포함하는 방법;

(69) 상기 (30) 에 따른 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물;

(70) 상기 (43) 에 따른 마이크로스피어를 포함하는, 전립선암, 전립선 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 자궁섬유종, 성조숙증, 생리통, 또는 유방암의 예방 또는 치료를 위한, 또는 피임을 위한 서방성 조성물;

(71) 상기 (69) 또는 (70) 에 있어서, 주사용인 서방성 조성물;

(72) 상기 (69) 내지 (71) 중 어느 하나에 있어서, 추가로 만니톨을 포함하는 서방성 조성물;

(73) 상기 (69) 내지 (72) 중 어느 하나에 있어서, 전체 조성물 중 약 70 중량% 이상의 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물;

(74) 전립선암, 전립선 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 자궁섬유종, 성조숙증, 생리통, 또는 유방암의 예방 또는 치료, 또는 피임 방법에 있어서, 상기 (43) 에 따른 유효량의 마이크로스피어 또는 상기 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물을 포유류에 투여하는 것을 포함하는 방법;

(75) 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체 또는 이들의 염을 포함하고, 약 400 내지 700 mg 의 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물이 2 분 미만으로 1.5 ml 의 분산 매질 중에 분산될 수 있는 장기 서방성 마이크로스피어;

(76) 상기 (75) 에 있어서, 중합체 또는 이들의 염이 중량 평균 분자량 10000 내지 50000 인 락트산 중합체 또는 이들의 염인 마이크로스피어;

(77) 상기 (75) 또는 (76) 에 따른 마이크로스피어를 포함하는 서방성 조성물;

(78) 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 마이크로스피어의 분산성 개선 방법에 있어서, 마이크로스피어의 제조 시에 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조 방법을 수행하는 것을 포함하는 방법;

(79) 마이크로스피어를 포함하는 주사용 조성물 중에 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 마이크로스피어의 분산성 개선 방법에 있어서, 마이크로스피어의 제조 시에 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 존재 하에 수중 건조 방법을 수행하는 것을 포함하는 방법;

(80) 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하며 마이크로스피어를 포함하는 주사용 조성물 중에서 개선된 분산성을 가지는 마이크로스피어의 제조를 위한, 수중 건조 방법에서 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 이용 방법;

(81) 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하며 마이크로스피어를 포함하는 주사용 조성물 중에서 개선된 분산성을 가지는 마이크로스피어의 제조를 위한, 수중 건조 방법에서 외부 수성상 중 삼투압 조절제의 용도; 및

(82) 삼투압 조절제를 포함하는, 수중 건조 방법을 위한 외부 수성상 중에서의 사용을 위한 마이크로캡슐의 분산성 개선용 제제.

도면의 간단한 설명

도 1 은 비교예 1 의 마이크로스피어를 나타내는 전자 현미경 사진이다.

도 2 는 실시예 1 의 마이크로스피어를 나타내는 전자 현미경 사진이다.

본 발명을 수행하기 위한 최적 방식

본 발명에 사용하기 위한 생리 활성 물질은 고 친수성 및 저 n-옥탄올/물 (유/수) 분할비를 갖는다. 상기 저 유/수 분할비는 바람직하게는 1 이하, 보다 바람직하게는 0.1 이하의 n-옥탄올/물 용해도비를 의미한다.

유/수 분할비는 [Jitsusaburo Samejima, "Butsuri Kagaku Jikkenho (물리화학 실험 방법)", SHOKABO PUBLISHING Co., Ltd. 출판, 1961] 에 기재된 방법에 의해 결정될 수 있다. 구체적으로, 상기 방법은 하기와 같이 수행된다. 일차적으로, n-옥탄올 및 완충액 (pH 5.5, 1:1 혼합물) 을 시험 튜브 내에 넣는다. 예를 들어, 완충액은 Sφerensen 완충액 [Ergeb. Physiol., 12, 393 (1912)], Clark-Lubs 완충액 [J. Bact., 2(1), 109, 191 (1917)], Macllvaine 완충액 [J. Biol. Chem., 49, 183 (1921)], Michaelis 완충액 [Die Wasser-stoffionenkonzentration, p. 186 (1914)], Kolthoff 완충액 [Biochem. Z., 179, 410 (1926)] 등이다. 적절한 양의 약물을 시험 튜브 내에 넣는다. 이어서, 시험 튜브를 캡핑하고, 자주 강력 진탕하면서 항온조 (25℃) 중에 침지한다. 약물이 두 액체층 중에 용해되어 평형에 도달한 것으로 나타나면, 액체 혼합물을 방치하거나 원심분리한다. 이어서, 특정량의 액체를 각각의 상층 및 하층으로부터 피펫팅하고 분석하여, 각각의 층 내 약물의 농도를 결정한다. 유/수 분할비는 n-옥탄올층 내 약물의 농도 대 수층 내 약물의 농도비로 얻어진다.

생리 활성 물질의 예에는 하기가 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다: 생리 활성 물질, 항암제, 항생제, 해열제, 진통제, 소염제, 진해 거담제, 진정제, 근육이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 혈압강하성 이뇨제, 항당뇨병제, 항응고제, 지혈제, 항결핵제, 호르몬제, 마약 길항제, 골 재흡수 억제제 및 혈관신생 저해제.

임의의 약리학적으로 유용한 물질이 본 발명에서 생리 활성 물질로 사용될 수 있으며, 이는 비펩티드 화합물 또는 펩티드 화합물일 수 있다. 비펩티드 화합물은 효능제 (agonist), 길항제, 효소 저해 효과를 갖는 화합물 등일 수 있다. 예를 들어, 펩티드 화합물은 바람직하게는 약 300 내지 40,000, 바람직하게는 약 400 내지 30,000, 보다 바람직하게는 약 500 내지 20,000 의 분자량을 가질 수 있는 생리 활성 펩티드이다.

생리 활성 펩티드의 예에는 황체형성호르몬 분비호르몬 (LH-RH), 인슐린, 소마토스타틴, 성장호르몬, 성장호르몬 분비호르몬 (GH-RH), 프로락틴, 에리트로포이에틴, 부신피질호르몬, 멜라닌세포 자극호르몬, 갑상선호르몬 분비호르몬 (TRH), 갑상선 자극호르몬, 황체형성호르몬, 난포자극호르몬, 바소프레신, 옥시토신, 칼시토닌, 가스트린, 세크레틴, 판크레오자이민, 콜레시스토키닌, 안지오텐신, 인간태반유선 자극호르몬, 인간융모성 성선자극호르몬, 엔케팔린, 엔돌핀, 쿄토르핀, 터프트신, 타이모포이에틴, 타이모신, 타이모스티뮬린, 흉선 체액성 인자, 혈액 흉선 인자, 종양 괴사 인자, 집락 자극 인자, 모틸린, 다이노르핀, 봄베신, 뉴로텐신, 세룰레인, 브래디키닌, 심방성 나트륨 이뇨인자, 신경 성장 인자, 세포 성장 인자, 신경영양성 인자, 엔도텔린 길항성을 갖는 펩티드 및 이들의 유도체, 및 이들의 절편 및 상기 절편의 유도체가 포함된다.

생리활성 펩티드의 바람직한 예에는 호르몬 의존성 질환, 특히 성 호르몬 의존성 암 (예컨대 전립선암, 자궁암, 유방암, 뇌하수체 종양), 또는 성 호르몬 의존성 질환, 예컨대 전립성 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 성조숙증, 생리통, 무월경, 생리전 증후군, 및 다방성 난소 증후군에 대해 유효하거나, 피임을 위해 (또는 약물 중단 후의 반동 효과를 이용하는 경우, 불임에 대해) 유효한 LH-RH 유도체 또는 이들의 염이 포함된다. 부가적 예에는, 성 호르몬에 의존성이 아니지만, LH-RH 에 민감성인 음성 또는 악성 종양에 대해 유효한 LH-RH 유도체 또는 이들의 염이 포함된다.

LH-RH 유도체 또는 이들의 염의 구체예에는 [Treatment with GnRH analogs: Controversies and perspectives, The Parthenon Publishing Group Ltd., 1996], JP-A 3-503165, JP-A 3-101695, JP-A 7-97334 및 8-259460 에 개시된 바와 같은 펩티드가 포함된다.

LH-RH 유도체는 LH-RH 효능제 또는 LH-RH 길항제일 수 있고, LH-RH 길항제의 예에는 하기 화학식 Ⅰ 로 나타내는 생리 활성 펩티드 및 이들의 염이 포함된다:

X-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DAlaNH₂

(식 중, X 는 N(4H₂-푸로일)Gly 또는 NAc 를 나타내며, A 는 NMeTyr, Tyr, Aph(Atz) 및 NMeAph(Atz) 로부터 선택되는 잔기를 나타내고, B 는 DLys(Nic), DCit, DLys(AzaglyNic), DLys(AzaglyFur), DhArg(Et₂), DAph(Atz) 및 DhCi 로부터 선택되는 잔기를 나타내고, C 는 Lys(Nisp), Arg 또는 hArg(Et₂) 를 나타낸다).

LH-RH 효능제의 예에는 하기 화학식 Ⅱ 로 나타내는 생리 활성 펩티드 또는 이들의 염이 포함된다:

5-옥소-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z

(식 중, Y 는 DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal 및 DHis(ImBzl) 로부터 선택되는 잔기를 나타내며, Z 는 NH-C₂H₅ 또는 Gly-NH₂ 를 나타낸다). Y 가 DLeu 이고, Z 가 NH-C₂H₅ 인 펩티드 (즉, 식 5-옥소-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅ 로 나타내는 펩티드 A 인 류프로렐린) 또는 이들의 염 (예컨대 아세테이트) 이 특히 바람직하다.

상기 펩티드는 상기 문헌 또는 공보에 개시된 방법에 의해 또는 이에 근거하여 제조될 수 있다.

본원에 사용된 약어는 각각 하기 의미를 갖는다:

약어	명칭
N(4H2-푸로일)Gly	N-테트라히드로푸로일글리신 잔기
NAc	N-아세틸기
D2Nal	D-3-(2-나프틸)알라닌 잔기
D4ClPhe	D-3-(4-클로로)페닐알라닌 잔기
D3Pal	D-3-(3-피리딜)알라닌 잔기
NMeTyr	N-메틸티로신 잔기
Aph(Atz)	N-[5'-(3'-아미노-1'H-1',2',4'-트리아졸릴)]-페닐알라닌 잔기
NMeAph(Atz)	N-메틸-[5'-(3'-아미노-1'H-1',2',4'-트리아졸릴)]페닐알라닌 잔기
DLys(Nic)	D-(e-N-니코티노일)라이신 잔기
Dcit	D-시트룰린 잔기
DLys(AzaglyNic)	D-(아자글리실니코티노일)라이신 잔기
DLys(AzaglyFur)	D-(아자글리실푸라닐)라이신 잔기
DhArg(Et2)	D-(N,N'-디에틸)호모아르기닌 잔기
DAph(Atz)	D-N-[5'-(3'-아미노-1'H-1',2',4'-트리아졸릴)]페닐알라닌 잔기
DhCi	D-호모시트룰린 잔기
Lys(Nisp)	(e-N-이소프로필)라이신 잔기
hArg(Et2)	(N,N'-디에틸)호모아르기닌 잔기

다른 아미노산에 대한 약어는 [IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature] 에 정의된, 또는 [European Journal of Biochemistry, Vol. 138, 페이지 9 - 37 (1984)] 에 정의된 것에 따르거나, 당 분야의 종래 약어에 따른다. 달리 언급되지 않는다면, 아미노산은 이들이 광학 이성질체를 가질 수 있더라도 L-배치이다.

생리 활성 펩티드의 예에는 또한 LH-RH 길항제 (미국 특허 4,086,219, 4,124,577, 4,253,997 및 4,317,815 참조) 가 포함된다.

생리 활성 펩티드의 추가예에는 인슐린, 소마토스타틴, 소마토스타틴 유도체 (미국 특허 4,087,390, 4,093,574, 4,100,117 및 4,253,998 참조), 성장 호르몬, 프로락틴, 부신피질 자극호르몬 (ACTH), 멜라닌세포 자극호르몬 (MSH), 갑상성호르몬 분비호르몬 (구조식 (Pyr)Glu-His-ProNH2 로 나타내며, 이후 또한 TRH 로 불림) 및 이들의 염 또는 유도체 (JP-A 50-121273 및 JP-A 52-116465 참조), 갑상선 자극 호르몬 (TSH), 황체형성호르몬 (LH), 난포자극호르몬 (FSH), 바소프레신, 바소프레신 유도체 [데스모프레신, Endocrine Journal, The Japan Endocrine Society, Vol. 54, No. 5, pp. 676-691 (1978) 참조], 옥시토신, 칼시토닌, 부갑상선 호르몬, 글루카곤, 가스트린, 시크레틴, 판크레오자이민, 콜레시스토키닌, 안지오텐신, 인간태반유선 자극호르몬, 인간융모성 성선자극호르몬 (HCG), 엔케팔린, 엔케팔린 유도체 (미국 특허 4,277,394 및 유럽 특허 출원 공개 31567 참조), 엔돌핀, 쿄토르핀, 인터페론 (예컨대 α-, β- 및 γ-인터페론), 인터류킨 (예컨대 I, II 및 III), 터프트신, 타이모포이에틴, 타이모신, 타이모스티뮬린, 흉선 체액성 인자 (THF), 혈액 흉선 인자 (FTS) 및 이들의 유도체 (미국 특허 4,229,438 참조), 다른 흉선 인자 [Igaku no Ayumi, Vol. 125, No. 10, pp. 835-843 (1983)], 종양 괴사 인자 (TNF), 집락 자극 인자 (CSF), 모틸린, 디노르핀, 봄베신, 뉴로텐신, 세룰레인, 브래디키닌, 유로키나아제, 아스파라기나아제, 칼리크레인, 물질 P, 신경 성장 인자, 세포 성장 인자, 신경영양성 인자, 혈액 응고 인자 VIII 및 IX, 리소자임 클로라이드, 폴리믹신 B, 콜리스틴, 그라미시딘, 바시트라신, 에리트로포이에틴 (EPO) 및 엔도텔린 길항성 펩티드 (유럽 특허 출원 공개 436189, 457195 및 496452 및 JP-A 3-94692 및 3-130299 참조) 가 포함된다.

항암제의 예에는 블레오마이신, 메토트렉세이트, 악티노마이신 D, 미토마이신 C, 빈블라스틴 술페이트, 빈크리스틴 술페이트, 다우노루비신, 아드리아마이신, 네오카르티노스타틴, 시토신 아라비노시드, 플루오로우라실, 테트라히드로푸릴-5-플루오로우라실, 크레스틴, 피시바닐, 렌티난, 레바미솔, 베스타틴, 아지멕손, 글 리시리진, 폴리 I:C, 폴리 A:U 및 폴리 ICLC 가 포함된다.

항생제의 예에는 젠타마이신, 디베카신, 카네도마이신, 리비도마이신, 토브라마이신, 아미카신, 프라디오마이신, 시소마이신, 테트라사이클린 히드로클로라이드, 옥시테트라사이클린 히드로클로라이드, 롤리테트라사이클린, 독시사이클린 히드로클로라이드, 암피실린, 피페라실린, 티카르실린, 세팔로틴, 세팔로리딘, 세포티암, 세프술로딘, 세프메녹심, 세프메타졸, 세파졸린, 세포탁심, 세포페라존, 세프티족심, 목사락탐, 티에나마이신, 술파제신 및 아즈트레오남이 포함된다.

해열제, 진통제 및 소염제의 예에는 살리실산, 술피린, 플루페남산, 디클로페낙, 인도메타신, 모르핀, 페티딘 히드로클로라이드, 레보르판올 타르트레이트 및 옥시모르폰이 포함된다.

진해 거담제의 예에는 에페드린 히드로클로라이드, 메틸에페드린 히드로클로라이드, 노스카핀 히드로클로라이드, 코데인 포스페이트, 디히드로코데인 포스페이트, 알로클라미드 히드로클로라이드, 클로페단올 히드로클로라이드, 피코페리다민 히드로클로라이드, 클로페라스틴, 프로토킬올 히드로클로라이드, 이소프로테렌올 히드로클로라이드, 술부탐올 술페이트, 및 테르부탈린 술페이트가 포함된다.

진정제의 예에는 클로르프로마진, 프로클로르페라진, 트리플루오페라진, 아트로핀 술페이트 및 메틸스코폴아민 브로마이드가 포함된다.

근육 이완제의 예에는 프리딘올 메탄술포네이트, 투보쿠라린 클로라이드 및 판쿠로늄 브로마이드가 포함된다.

항간질제의 예에는 페니토인, 에토숙시미드, 아세타졸아미드 나트륨 및 클로 르디아제폭시드가 포함된다.

항궤양제의 예에는 메토클로프라미드 및 히스티딘 히드로클로라이드가 포함된다.

항우울제의 예에는 이미프라민, 클로미프라민, 녹시프틸린 및 페넬진 술페이트가 포함된다.

항알러지제의 예에는 디펜히드라민 히드로클로라이드, 클로르페니라민 말레에이트, 트리펠렌나민 히드로클로라이드, 메토딜라진 히드로클로라이드, 클레미졸 히드로클로라이드, 디페닐피랄린 히드로클로라이드 및 메톡시펜아민 히드로클로라이드가 포함된다.

강심제의 예에는 트랜스-π-옥소캄포르, 테오필올, 아미노필린 및 에틸레프린 히드로클로라이드가 포함된다.

항부정맥제의 예에는 프로프란올, 알프레놀올, 부페톨올, 및 옥스프레놀올이 포함된다.

혈관확장제의 예에는 옥시페드린 히드로클로라이드, 딜티아젬, 톨라졸린 히드로클로라이드, 헥소벤딘 및 바메탄 술페이트가 포함된다.

혈압강하성 이뇨제의 예에는 헥사메토늄 브로마이드, 펜톨리늄, 메카밀아민 히드로클로라이드, 에카라진 히드로클로라이드 및 클로니딘이 포함된다.

항당뇨제의 예에는 글리미딘 나트륨, 글리피지드, 펜포르민 히드로클로라이드, 부포르민 히드로클로라이드 및 메트포르민이 포함된다.

항응고제의 예에는 헤파린 나트륨 및 나트륨 시트레이트가 포함된다.

지혈제의 예에는 트롬보플라스틴, 트롬빈, 메나디온 아황산수소나트륨, 아세토메나프톤, ε-아미노카프로산, 트라넥삼산, 카르바조크롬 나트륨 술포네이트 및 아드레노크롬 모노아미노구아니딘 메탄술포네이트가 포함된다.

항결핵제의 예에는 이소니아지드, 에탐부톨 및 파라-아미노살리실산이 포함된다.

호르몬제의 예에는 프레도니솔론, 프레도니솔론 인산나트륨, 덱사메타손 황산나트륨, 베타메타손 인산나트륨, 헥세스트롤 포스페이트, 헥세스트롤 아세테이트 및 메티마졸이 포함된다.

마약 길항제의 예에는 레발로르판 타르트레이트, 날로르핀 히드로클로라이드 및 날록손 히드로클로라이드가 포함된다.

골 재흡수 억제제의 예에는 (황 포함 알킬) 아미노메틸렌비스포스폰산이 포함된다.

혈관신생 저해제의 예에는 혈관신생 저해 스테로이드 [Science, Vol. 221, p. 719 (1983) 참조], 푸마길린 (유럽 특허 출원 공개 325199 참조) 및 푸라길올 유도체 (유럽 특허 출원 공개 357061, 359036, 386667 및 415294 참조) 가 포함된다.

임의의 생리 활성 물질 자체 또는 이들의 임의의 약리학적으로 허용가능한 염이 본 발명에서 사용될 수 있다.

생리 활성 물질이 아미노기와 같은 염기성기를 갖는 경우, 상기 염은 무기산 (또는 자유 무기산) (예컨대 탄산, 중탄산, 염산, 황산, 질산, 및 붕산) 의 염 또 는 유기산 (또는 자유 유기산) (예컨대 숙신산, 아세트산, 프로피온산, 및 트리플루오로아세트산) 의 염일 수 있다.

생리 활성 물질이 카르복실기와 같은 산성기를 갖는 경우, 상기 염은 무기 염기 (또는 자유 무기 염기) (예컨대 나트륨 및 칼륨과 같은 알칼리 금속, 및 칼슘 및 마그네슘과 같은 알칼리 토금속) 의 염 또는 유기 염기 (또는 자유 유기 염기) (예컨대 트리에틸아민과 같은 유기 아민, 및 아르기닌과 같은 염기성 아미노산) 의 염일 수 있다. 생리 활성 펩티드는 또한 금속 착화합물 (예컨대 구리 착물, 및 아연 착물) 을 형성할 수 있다.

본 발명에 사용하기 위한 중합체는 수중에서 덜 가용성이거나 불용성이며 생체적합성 (생분해성) 이다. "수중에서 덜 가용성인" 이라는 용어는 중합체가 수중에서 0 이상 약 3% (w/w) 이하의 용해도를, 바람직하게는 수중에서 0 이상 약 1% (w/w) 이하의 용해도를 갖는다는 것을 의미한다.

사용될 생분해성 중합체는 약 10000 내지 50000, 바람직하게는 약 15000 내지 50000, 보다 바람직하게는 약 15000 내지 40000, 특히 바람직하게는 약 17000 내지 26000 의 중량 평균 분자량을 가질 수 있다. 생분해성 중합체는 약 1.2 내지 4.0, 특히 바람직하게는 약 1.5 내지 3.5 의 분산성을 가질 수 있다.

본원에서 사용되는, 중량 평균 분자량 및 분산성은 각각 겔 투과 크로마토그래피 (GPC) 로 결정되는 값을 의미한다.

사용될 중합체의 양은 약리학적 활성 및 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 방출 속도 및 기간 등에 의존한다. 예를 들어, 중합체는 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 양의 약 0.5 내지 10,000 배 (중량), 바람직하게는 약 1 내지 100 배 (중량) 의 양으로 마이크로스피어 기재 물질로서 사용될 수 있다.

중합체는 바람직하게는 생분해성이며, 상기 중합체의 예에는 지방족 폴리에스테르 [예컨대 2 개 이상의 α-히드록시산 (예컨대 글리콜산, 락트산, 2-히드록시부티르산, 2-히드록시발레르산, 2-히드록시-3-메틸부티르산, 2-히드록시카프로산, 2-히드록시이소카프로산 및 2-히드록시카프릴산), α-히드록시산의 시클릭 이량체 (예컨대 글리콜리드 및 락티드), 히드록시디카르복실산 (예컨대 말산) 또는 히드록시트리카르복실산 (예컨대 시트르산) 의 단독중합체 (예컨대 락트산 중합체) 또는 공중합체 (예컨대 락트산/글리콜산 공중합체 및 2-히드록시부티르산/글리콜산 공중합체), 또는 단독중합체(들) 및/또는 공중합체(들)의 임의 혼합물 (예컨대 락트산 중합체 및 2-히드록시부티르산/글리콜산 공중합체의 혼합물) ]; 폴리-α-시아노아크릴레이트 에스테르, 폴리아미노산 (예컨대 폴리-γ-벤질-L-글루탐산, 폴리-L-알라닌 및 폴리-γ-메틸-L-글루탐산) 및 말레산 무수물 공중합체 (예컨대 스티렌/말레산 공중합체) 가 포함된다. 지방족 폴리에스테르 및 폴리-α-시아노아크릴레이트 에스테르가 바람직하다. 지방족 폴리에스테르가 특히 바람직하다.

지방족 폴리에스테르의 바람직한 예에는 α-히드록시산 또는 α-히드록시산의 시클릭 이량체의 단독중합체, 이들의 2 이상의 공중합체, 및 단독중합체(들) 및/또는 공중합체(들)의 혼합물이 포함된다. α-히드록시산의 단독중합체 또는 공중합체, 또는 단독중합체(들) 및/또는 공중합체(들)의 혼합물이 특히 바람직하다.

α-히드록시산, α-히드록시산의 시클릭 이량체, 히드록시디카르복실산 또는 히드록시트리카르복실산이 그 분자 내에 임의의 광학 활성 중심을 갖는 경우, 이는 임의의 D-, L- 및 DL-배치일 수 있다.

지방족 폴리에스테르는 어려움 없이 임의의 공지된 방법 (예를 들어 JP-A 61-28521 참조) 에 의해 제조될 수 있다. 중합은 무작위, 블록, 및 그래프트 유형 중 임의일 수 있다.

지방족 폴리에스테르는 약 10000 내지 50000, 바람직하게는 약 15000 내지 50000, 보다 바람직하게는 약 15000 내지 40000, 특히 바람직하게는 약 17000 내지 26000 의 중량 평균 분자량을 가질 수 있다. 지방족 폴리에스테르는 바람직하게는 약 1.2 내지 4.0, 특히 바람직하게는 약 1.5 내지 3.5 의 분산성을 갖는다.

지방족 폴리에스테르가 락트산/글리콜산 공중합체인 경우, 조성비는 바람직하게는 약 100/0 내지 약 50/50 (중량) 이다. 지방족 폴리에스테르는 2-히드록시부티르산/글리콜산 공중합체이며, 조성비는 바람직하게는 약 100/0 내지 약 25/75 (중량) 이다.

락트산 중합체, 락트산/글리콜산 공중합체 또는 2-히드록시부티르산/글리콜산 공중합체는 바람직하게는 약 15000 내지 50000, 특히 바람직하게는 약 15000 내지 40000 의 중량 평균 분자량을 갖는다.

지방족 폴리에스테르가 락트산 중합체 (A) 및 글리콜산/2-히드록시부티르산 공중합체 (B) 의 혼합물인 경우, 예를 들어 (A)/(B) 로 나타내는 혼합비는 약 10/90 내지 약 90/10 (중량), 바람직하게는 약 25/75 내지 약 75/25 (중량) 일 수 있다.

락트산 중합체는 바람직하게는 약 15000 내지 50000, 특히 바람직하게는 약 15000 내지 40000 의 중량 평균 분자량을 갖는다.

글리콜산/2-히드록시부티르산 공중합체는 바람직하게는 40 내지 70 몰의 글리콜산 및 나머지 (60 내지 30 몰) 의 2-히드록시부티르산으로 이루어진다. 글리콜산/2-히드록시부티르산 공중합체는 바람직하게는 약 15000 내지 50000, 특히 바람직하게는 약 15000 내지 40000 의 중량 평균 분자량을 갖는다.

특히, 본 발명에 사용될 중합체는 바람직하게는 락트산 중합체이다 (이후, 상기 락트산 중합체는 또한 간단히 본 발명의 락트산 중합체로 불린다). 락트산 중합체의 예에는 락트산으로만 이루어진 중합체 및 락트산과 임의의 다른 단량체 (예컨대 글리콜산) 의 공중합체가 포함된다. 상기 중합체에 있어서, 중량 평균 분자량 5000 이하의 중합체 함량은 일반적으로 약 10 중량% 이하이며, 바람직하게는 중량 평균 분자량 5000 이하의 중합체 함량은 일반적으로 약 5 중량% 이하이고; 보다 바람직하게는 중량 평균 분자량 3000 이하의 중합체 함량은 약 1.5 중량% 이하이고; 더욱 바람직하게는 중량 평균 분자량 1000 이하의 중합체 함량은 약 0.1 중량% 이하이고; 더욱 더 바람직하게는 중량 평균 분자량 5000 이하의 중합체 함량은 약 5 중량% 이하이고, 중량 평균 분자량 3000 이하의 중합체 함량은 약 1.5 중량% 이하이고; 가장 바람직하게는 중량 평균 분자량 5000 이하의 중합체 함량은 약 5 중량% 이하이고, 중량 평균 분자량 3000 이하의 중합체 함량은 약 1.5 중량% 이하이고, 중량 평균 분자량 1000 이하의 중합체 함량은 약 0.1 중량% 이하이다.

본 발명의 락트산 중합체는 일반적으로 15000 내지 50000, 바람직하게는 15000 내지 40000, 보다 바람직하게는 17000 내지 26000, 특히 바람직하게는 17500 내지 25500 의 중량 평균 분자량을 갖는다.

본 발명의 락트산 중합체용 물질로서 사용하기 위한 고분자량 락트산 중합체는 시판되거나 임의의 공지된 중합 방법에 의해 제조될 수 있으며, 일반적으로 15000 내지 500000, 바람직하게는 20000 내지 100000 의 중량 평균 분자량을 갖는다. 공지된 중합 방법의 예에는 락트산 및 임의로 글리콜산의 축합 중합, 예를 들어 락티드 및 임의로 글리콜리드와 루이스산, 예컨대 디에틸 아연, 트리에틸알루미늄 및 주석 옥틸레이트 또는 촉매, 예컨대 금속염의 개환 중합, 상술된 개환 중합의 조건에 부가하여 보호 카르보닐기를 갖는 히드록시카르복실산 유도체의 존재 하 락티드의 개환 중합 (예를 들어 국제 특허 공보 WO00/35990), 가열 하 락티드와 촉매의 개환 중합 (예를 들어 J. Med. Chem., 16, 897 (1973)) 및 락티드 및 글리콜리드의 공중합이 포함된다.

중합 유형은 락티드 등이 용융되어 중합 반응을 거치는 벌크 중합 또는 락티드 등이 적합한 용매 중에 용해되어 중합 반응을 거치는 용액 중합일 수 있다. 용액 중합에 의해 생성된 중합체가 본 발명의 락트산 중합체용 물질로 사용하기 위해 산업적으로 바람직하다.

용액 중합 도중 락티드를 용해시키기 위한 용매의 예에는 방향족 탄화수소, 예컨대 벤젠, 톨루엔 및 자일렌, 데칼린 및 디메틸포름아미드가 포함된다.

고분자량을 갖는 생성 락트산 중합체는 임의의 공지된 가수분해 방법에 의해 가수분해될 수 있다. 예를 들어, 고분자량 락트산 중합체는 적합한 용매 중에 용해된 후 물 및 임의로 산이 여기에 첨가되어 가수분해가 야기된다.

고분자량 락트산 중합체를 용해시키기 위한 용매는, 락트산 중합체가 상기 용매 중에 중합체 양의 10 배 (중량) 이하의 양으로 용해될 수 있는 한 임의 용매일 수 있다. 상기 용매의 구체예에는 할로겐화 탄화수소, 예컨대 클로로포름 및 디클로로메탄; 방향족 탄화수소, 예컨대 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌 및 p-자일렌; 시클릭 에테르, 예컨대 테트라히드로푸란; 아세톤; 및 N,N-디메틸포름아미드가 포함된다. 고분자량 락트산 중합체 제조에 사용되는 용매가 또한 중합체의 가수분해에 적용가능하며, 중합 및 가수분해는 고분자량 락트산 중합체의 단리 없이 연속 수행될 수 있다.

고분자량 락트산 중합체를 용해시키기 위해 사용될 용매의 양은 일반적으로 용질인 락트산 중합체 양의 0.1 내지 100 배, 바람직하게는 1 내지 10 배이다.

첨가될 물의 양은 일반적으로 고분자량 락트산 중합체 양의 0.001 내지 1 배 (중량), 바람직하게는 0.01 내지 0.1 배 (중량) 이다.

임의 첨가될 산의 예에는 무기산, 예컨대 염산, 황산 및 질산; 및 유기산, 예컨대 락트산, 아세트산 및 트리플루오로아세트산이 포함되며, 락트산이 바람직하다.

첨가될 상기 산의 양은 일반적으로 고분자량 락트산 중합체 양의 0 내지 10 배 (중량), 바람직하게는 0.1 내지 1 배 (중량) 이다.

가수분해의 반응 온도는 일반적으로 0 내지 150℃, 바람직하게는 20 내지 80 ℃ 이다.

가수분해의 반응 시간은 고분자량 락트산 중합체의 중량 평균 분자량 및 반응 온도에 따라 변할 수 있으며, 일반적으로 10 분 내지 100 시간, 바람직하게는 1 내지 20 시간이다.

가수분해 공정의 중지 시점은 가수분해 산물의 중량 평균 분자량에 근거하여 결정될 수 있다. 구체적으로, 표본은 가수분해 공정 도중 임의의 적절한 시점에서 취해지며, 표본 중 가수분해 산물의 중량 평균 분자량은 겔 투과 크로마토그래피 (GPC) 에 의해 결정된 후, 분자량이 약 15000 내지 50000, 바람직하게는 약 15000 내지 30000, 보다 바람직하게는 약 17000 내지 26000, 특히 바람직하게는 17500 내지 25500 으로 결정되면 가수분해가 중지된다.

상술된 고분자량 락트산 중합체의 가수분해 후, 목적 락트산 중합체는 가수분해 산물을 포함하는 생성 용액으로부터 침전될 수 있다. 예를 들어, 가수분해 산물 포함 용액은 목적 락트산 중합체의 침전을 유도할 수 있는 용매와 접촉된다.

바람직한 측면에 있어서, 가수분해 산물 포함 용액은 고분자량 락트산 중합체를 용해시킬 수 있는 용매, 예를 들어 할로겐화 탄화수소, 예컨대 클로로포름 및 디클로로메탄; 방향족 탄화수소, 예컨대 톨루엔, o-자일렌, m-자일렌 및 p-자일렌; 시클릭 에테르, 예컨대 테트라히드로푸란; 아세톤; N,N-디메틸포름아미드; 디클로로메탄; 또는 자일렌 중 15000 내지 50000, 바람직하게는 15000 내지 30000, 보다 바람직하게는 17000 내지 26000, 특히 바람직하게는 17500 내지 25500 의 중량 평 균 분자량을 갖는 락트산 중합체의 10 내지 50 중량% 용액이다.

목적 락트산 중합체가 가수분해 산물 포함 용액으로부터 침전될 수 있는 용매의 예에는 알콜, 예컨대 메탄올 및 에탄올, 사슬 에테르, 예컨대 이소프로필 에테르, 지방족 탄화수소, 예컨대 헥산 및 물이 포함된다.

목적 락트산 중합체를 침전시키기 위해 사용될 용매의 양은 일반적으로 가수분해 산물 포함 용액의 용매량의 0.1 내지 100 배 (중량), 바람직하게는 1 내지 10 배 (중량) 이다.

각각의 용매의 유형 및 양의 바람직한 조합은 용질의 양의 1 내지 5 배 (중량) 인 양의 디클로로메탄이 사용되고, 용해도를 감소시키기 위한 용매로서 이소프로필 에테르가 디클로로메탄 양의 2 내지 10 배 (중량) 인 양으로 사용되는 가수분해 산물 포함 용액의 조합일 수 있다.

가수분해 산물 포함 용액이 목적 락트산 중합체를 침전시키기 위한 용매와 접촉되는 경우, 용매의 온도는 일반적으로 -20 내지 60℃, 바람직하게는 0 내지 40℃ 로 설정되며, 가수분해 산물 포함 용액의 온도는 일반적으로 0 내지 40℃, 바람직하게는 10 내지 30℃ 로 설정된다.

용매와 가수분해 산물 포함 용액을 접촉시키기 위한 방법의 예에는 가수분해 산물 포함 용액을 한 번에 용매에 첨가하는 방법, 가수분해 산물 포함 용액을 용매에 적가하는 방법, 용매를 가수분해 산물 포함 용액에 한번에 첨가하는 방법 및 용매를 가수분해 산물 포함 용액에 적가하는 방법이 포함된다.

상술된 바와 같이 수득되는 본 발명의 락트산 중합체는, 그 말단 카르복실기 의 양이 서방성 제제용 기재 물질을 위해 바람직한 범위 내에 있으므로 상기 기재 물질로서 바람직하게 사용된다.

또한, 생체적합성 중합체의 예에는 폴리스티렌, 폴리메타크릴산, 아크릴산 및 메타크릴산의 공중합체, 폴리아미노산, 덱스트란 스테아레이트, 에틸 셀룰로오스, 아세틸 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 말레산 무수물 기재 공중합체, 에틸렌 비닐아세테이트 기재 공중합체, 폴리비닐 아세테이트 및 폴리아크릴아미드가 포함된다.

상기 중합체 중 하나를 단독 사용하거나, 이들 중 둘 이상을 공중합체 또는 단순 혼합물의 형태로 사용할 수 있고, 또는 이들의 임의 염이 사용될 수 있다.

오일상 중 중합체의 농도는 약 0.5 내지 약 90% (w/w), 바람직하게는 약 2 내지 약 60% (w/w) 일 수 있다.

본 발명에 사용될 약물 담체의 예에는 알부민, 젤라틴, 시트르산, 살리실산, 나트륨 에틸렌디아민테트라아세테이트, 덱스트린, 아황산수소나트륨, 폴리올 화합물, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 아가, 알긴산, 폴리비닐 알콜 및 염기성 아미노산이 포함된다.

본 발명의 마이크로스피어는 수중 건조 방법으로, 바람직하게는 (W/O)/W 유형, O/W 유형 또는 S/O/W 유형 수중 건조 방법으로 제조될 수 있다.

(W/O)/W 유형 수중 건조 방법은 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 포함하는 액체의 내부 수성상 및 중합체를 포함하는 용액의 오일상으로 이루어진 W/O 유형 에멀젼을 제조하고; 에멀젼을 삼투압 조절제를 포함하는 수성상 내로 분산시켜 (W/O)/W 유형 에멀젼을 제조하고; 에멀젼으로 수중 건조 방법을 거쳐 오일상으로부터 용매를 제거하여 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 마이크로스피어를 제조하는 것을 포함할 수 있다.

O/W 유형 수중 건조 방법은 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 오일상을 삼투압 조절제를 포함하는 수성상 내로 분산시켜 O/W 유형 에멀젼을 제조하고; 에멀젼으로 수중 건조 방법을 거쳐 오일상으로부터 용매를 제거하여 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 마이크로스피어를 제조하는 것을 포함할 수 있다.

S/O/W 유형 수중 건조 방법은 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 중합체를 포함하는 용액의 오일상 내로 분산시키고; 분산액을 삼투압 조절제를 포함하는 수성상 내로 분산시켜 S/O/W 유형 에멀젼을 제조하고; 에멀젼으로 수중 건조 방법을 거쳐 오일상으로부터 용매를 제거하여 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 마이크로스피어를 제조하는 것을 포함할 수 있다.

본 발명에 사용될 삼투압 조절제는 수용액에 삼투압을 생성시킬 수 있는 임의 물질일 수 있다.

삼투압 조절제의 예에는 알콜, 예컨대 다가 알콜 및 1 가 알콜; 당, 예컨대 단당류, 이당류 및 올리고당류; 수용성 아미노산, 펩티드 또는 단백질; 수용성 아미노산의 염; 및 이들의 유도체가 포함된다.

다가 알콜의 예에는 글리세린과 같은 3 가 알콜; 아라비톨, 자일리톨 및 아도니톨과 같은 5 가 알콜; 및 만니톨, 소르비톨 및 둘시톨과 같은 6 가 알콜이 포 함된다. 6 가 알콜이 바람직하며, 만니톨이 특히 바람직하다.

1 가 알콜의 예에는 메탄올, 에탄올 및 이소프로필 알콜이 포함되며, 에탄올이 바람직하다.

단당류의 예에는 아라비노오스, 자일로오스, 리보오스 및 2-데옥시리보오스와 같은 5 탄당; 글루코오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 만노오스, 소르보오스, 람노오스 및 푸코오스와 같은 6 탄당이 포함된다. 6 탄당이 특히 바람직하다.

이당류의 예에는 말토오스, 셀로바이오스, α,α-트레할로오스, 락토오스 및 수크로오스가 포함된다. 특히, 락토오스 및 수크로오스가 바람직하다.

올리고당류의 예에는 말토트리오스 및 라피노오스와 같은 3 당류; 및 스타치오스와 같은 4 당류가 포함된다. 3 당류가 특히 바람직하다.

단당류, 이당류 또는 올리고당류 유도체의 예에는 글루코사민, 갈락토사민, 글루쿠론산 및 갈락투론산이 포함된다.

상기 아미노산은 임의의 L-형 아미노산일 수 있다. 상기 아미노산의 예에는 중성 아미노산, 예컨대 글리신, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 세린, 트레오닌, 프롤린, 히드록시프롤린, 시스테인 및 메티오닌; 산성 아미노산, 예컨대 아스파르트산 및 글루탐산; 및 염기성 아미노산, 예컨대 라이신, 아르기닌 및 히스티딘이 포함된다. 글리신, 류신 또는 아르기닌이 바람직하게 사용되며, L-아르기닌이 특히 바람직하다. 수용성 아미노산의 염, 예컨대 수용성 아미노산의 산염 (예컨대 염산, 황산, 인산 등의 염) 및 수용성 아미노산의 알칼리염 (예컨대 나트륨 및 칼륨 등과 같은 알칼리 금속의 염) 이 또한 적용가능하다.

수용성 펩티드, 단백질 또는 이들의 유도체의 예에는 카제인, 글로불린, 프롤라민, 알부민 및 젤라틴이 포함된다.

하나 이상의 상기 삼투압 조절제가 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있다.

사용될 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 양은 약물의 유형, 목적 약리 효과, 목적 효과 기간 등에 따라 변할 수 있다. 예를 들어, 내부 수성상 중 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 농도는 약 0.001% 내지 약 90% (w/w), 보다 바람직하게는 약 0.01% 내지 약 80% (w/w), 특히 바람직하게는 약 0.01% 내지 약 70% (w/w) 이다.

삼투압 조절제는 외부상이 등장성 염화나트륨 용액의 삼투압의 약 1/50 내지 약 5 배, 바람직하게는 약 1/25 내지 약 3 배, 보다 바람직하게는 약 1/12 내지 약 2 배의 삼투압을 갖도록 하는 농도로 사용될 수 있다.

구체적으로, 삼투압 조절제가 비이온성 물질인 경우, 외부 수성상 중 농도는 약 0.01% 내지 약 60% (w/w), 바람직하게는 약 0.01% 내지 약 40% (w/w), 보다 바람직하게는 약 0.05% 내지 약 30% (w/w), 특히 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1.5% (w/w) 이다. 삼투압 조절제가 이온성 물질인 경우, 그 농도는 상기 농도를 그 총 이온가로 나누어서 계산될 수 있다. 첨가된 삼투압 조절제의 농도는 그 용해도 이하일 필요는 없으며, 부분적으로 분산 상태일 수 있다.

본 발명에 따르면, 외부 수성상으로의 삼투압 조절제의 첨가는 마이크로스피어 산물의 개선된 분산성을 제공할 수 있다. 상기 개선의 정도는 특별히 제한 되지는 않지만, 예를 들어 약 400 내지 700 mg 의 마이크로스피어가 2 분 미만으로 1.5 ml 의 주사용 분산 매질 중에 분산될 수 있는 정도가 바람직하다.

이후, 본 발명에 따른 (W/O)/W 유형 수중 건조 방법에 의해 마이크로스피어를 제조하는 방법을 설명한다.

후술되는 공정에 있어서, 하기 성분은 필요한 만큼 내부 수성상에 첨가될 수 있다:

(1) 약물 담체: 알부민, 젤라틴, 시트르산, 살리실산, 나트륨 에틸렌디아민테트라아세테이트, 덱스트린, 아황산수소나트륨, 폴리올 화합물, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 아가, 알긴산, 폴리비닐 알콜, 염기성 아미노산 등;

(2) 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 안정성 및 용해도를 유지하기 위한 pH 조절제: 카르본산, 아세트산, 옥살산, 시트르산, 인산, 염산, 수산화나트륨, 아르기닌, 라이신, 이들의 염 등;

(3) 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 안정화제: 알부민, 젤라틴, 시트르산, 나트륨 에틸렌디아민테트라아세테이트, 덱스트린, 아황산수소나트륨, 폴리올 화합물, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 등;

(4) 방부제: 파라-히드록시벤조에이트 에스테르 (예컨대 메틸 파라벤 및 프로필 파라벤), 벤질 알콜, 클로로부탄올, 티메로살 등.

(I) O/W 방법

상기 방법을 위해, 일차적으로 유기 용매 중 중합체의 용액이 제조된다. 본 발명의 마이크로스피어 제조에 사용하기 위한 유기 용매는 바람직하게는 120℃ 이하의 용융점을 갖는다.

상기 유기 용매의 예에는 할로겐화 탄화수소 (예컨대 디클로로메탄, 클로로포름, 디클로로에탄, 트리클로로에탄, 사염화탄소), 에테르 (예컨대 에틸 에테르, 및 이소프로필 에테르), 지방산 에스테르 (예컨대 에틸 아세테이트, 및 부틸 아세테이트), 방향족 탄화수소 (예컨대 벤젠, 톨루엔, 및 자일렌), 알콜 (예컨대 에탄올, 및 메탄올) 및 아세토니트릴이 포함된다. 할로겐화 탄화수소가 바람직하며, 디클로로메탄이 보다 바람직하다. 유기 용매는 적절한 비의 상술된 용매의 임의 혼합물일 수 있다. 이러한 경우, 할로겐화 탄화수소 및 알콜의 혼합물이 바람직하며, 디클로로메탄 및 에탄올의 혼합물이 보다 바람직하다.

유기 용매 용액 중 중합체의 농도는 중합체의 분자량 또는 유기 용매의 유형에 따라 변할 수 있다. 디클로로메탄이 유기 용매로서 사용되는 경우, 상기 농도는 일반적으로 약 0.5 내지 약 70 중량%, 보다 바람직하게는 약 1 내지 약 60 중량%, 특히 바람직하게는 약 2 내지 약 50 중량% 범위에서 선택된다.

유기 용매로서 디클로로메탄 및 에탄올의 혼합물을 사용하는 경우, 혼합 용매 중 에탄올의 함량은 일반적으로 약 0.01 내지 약 50% (v/v), 보다 바람직하게는 약 0.05 내지 약 40% (v/v), 특히 바람직하게는 약 0.1 내지 약 30% (v/v) 범위에서 선택된다.

이렇게 수득되는 유기 용매 중 중합체의 용액에, 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 첨가한 후 용해 또는 분산시킨다. 상기 공정에 있어서, 생리 활성 물질 또는 이들의 염은 생리 활성 물질 또는 이들의 염 대 중합체의 중량비가 약 1:1, 바람직하게는 약 1:2 이하인 양으로 첨가된다.

이어서, 유기 용매 중에 생리 활성 물질 또는 이들의 염, 및 중합체를 포함하는 생성 조성물 용액을 수성상에 첨가하여, O (오일상)/W (수성상) 유형 에멀젼을 형성한다. 이후, 오일상으로부터 용매를 증발시켜 마이크로스피어를 제조한다. 상기 공정에 있어서, 수성상의 부피는 일반적으로 오일상의 부피의 약 1 내지 약 10,000 배, 보다 바람직하게는 약 5 내지 약 50,000 배, 특히 바람직하게는 약 10 내지 약 2,000 배 범위로부터 선택된다.

삼투압 조절제 이외에, 유화제를 또한 외부 수성상에 첨가할 수 있다. 상기 유화제는 안정한 O/W 유형 에멀젼을 형성할 수 있는 임의 유화제일 수 있다. 상기 유화제의 구체예에는 음이온성 계면활성제 (예컨대 나트륨 올레에이트, 나트륨 스테아레이트 및 나트륨 라우릴 술페이트), 비이온성 계면활성제 [예컨대 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 (예컨대 Tween 80 및 Tween 60, Atlas Powder Company) 및 폴리옥시에틸렌 피마자유 유도체 (예컨대 HCO-60 및 HCO-50, Nikko Chemicals)], 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알콜, 카르복시메틸 셀룰로오스, 레시틴, 젤라틴 및 히알루론산이 포함된다. 하나 이상의 상기 언급된 유화제가 단독으로 또는 조합되어 사용될 수 있다. 바람직하게는 약 0.01 내지 10 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.05 내지 약 5 중량% 의 농도로 사용된다.

유기 용매는 공지된 방법, 또는 공지된 방법에 근거한 변형 방법에 의해 제거될 수 있다. 상기 방법의 예에는 프로펠러 교반기, 자기 교반기 등으로 교반하면서 일반 대기압 또는 점차 감소되는 압력 하에 유기 용매를 증발시키는 것을 포함하는 방법, 및 회전 증발기로 조절되는 진공 하에 유기 용매를 증발시키는 것을 포함하는 방법 등이 포함된다.

이렇게 수득된 마이크로스피어를 원심분리 또는 여과에 의해 수집하고 여러번 증류수로 세척하여, 마이크로스피어의 표면 상에 부착한 자유 생리 활성 물질, 유화제 등을 제거하고, 증류수 등에 다시 분산시킨 후 동결건조한다.

마이크로스피어의 제조 공정 도중, 입자의 응집을 예방하기 위해 항응집제가 첨가될 수 있다. 상기 항응집제의 예에는 만니톨, 락토오스, 글루코오스, 전분 (예컨대 옥수수 전분) 과 같은 수용성 다당류, 글리신과 같은 아미노산, 및 피브린 및 콜라겐과 같은 단백질이 포함된다. 특히, 만니톨이 바람직하다.

만니톨과 같은 항응집제는 일반적으로 마이크로스피어 총량을 기준으로 0 내지 약 24 중량% 의 양으로 첨가된다.

동결건조 후 필요하다면, 물 및 유기 용매는 감압 하에서, 마이크로스피어가 서로 융합되지 않는 조건 하에 가열하여 마이크로스피어로부터 제거될 수 있다. 바람직하게는, 마이크로스피어는 분 당 10℃ 내지 20℃ 의 온도 상승 속도 조건 하에 시차 주사 열량계에 의해 결정되는 중합체의 중간 유리 전이 온도 근처에서, 또는 중간 유리 전이 온도보다 약간 더 높은 온도에서 가열된다. 보다 바람직하게는, 마이크로스피어는 중합체의 중간 유리 전이 온도 근처 내지 이 유리 전이 온도보다 약 30℃ 더 높은 온도에서 가열된다. 특히 중합체가 락트산-글리콜산 중합체인 경우, 마이크로스피어는 바람직하게는 그 중간 유리 전이 온도 근처 내지 이 중간 유리 전이 온도보다 약 10℃ 더 높은 온도에서, 보다 바람직하게는 그 중 간 유리 전이 온도 근처 내지 이 중간 유리 전이 온도보다 약 5℃ 더 높은 온도에서 가열된다.

가열 시간은 마이크로스피어의 양 등에 따라 변할 수 있다. 일반적으로는 마이크로스피어가 목적 온도에 도달한 후, 약 12 시간 내지 약 168 시간, 바람직하게는 약 24 시간 내지 약 120 시간, 특히 바람직하게는 약 48 시간 내지 약 96 시간이다.

마이크로스피어의 가열 방법은, 마이크로스피어 군을 균일하게 가열할 수 있는 임의 방법일 수 있고, 특별히 제한되지 않는다.

가열 건조 방법의 예에는 항온조, 유동층조, 이동조 또는 가마 (kiln) 내에서의 가열 건조 방법, 및 마이크로웨이브로의 가열 건조 방법이 포함된다. 항온조에서의 가열 건조 방법이 바람직하다.

(II) W/O/W 방법

일차적으로, 유기 용매 중 중합체 용액이 제조된다.

유기 용매의 예에는 할로겐화 탄화수소 (예컨대 디클로로메탄, 클로로포름, 디클로로에탄, 트리클로로에탄, 및 사염화탄소), 에테르 (예컨대 에틸 에테르 및 이소프로필 에테르), 지방산 에스테르 (예컨대 에틸 아세테이트 및 부틸 아세테이트), 방향족 탄화수소 (예컨대 벤젠, 톨루엔 및 자일렌), 알콜 (예컨대 에탄올 및 메탄올) 및 아세토니트릴이 포함된다. 할로겐화 탄화수소가 바람직하며, 디클로로메탄이 보다 바람직하다. 유기 용매는 적절한 비의 상술된 용매의 임의 혼합물일 수 있다. 이런 경우, 할로겐화 탄화수소 및 알콜의 혼합물이 바람직하 며, 디클로로메탄 및 에탄올의 혼합물이 보다 바람직하다.

유기 용매 용액 중 중합체의 농도는 중합체의 분자량 또는 유기 용매의 유형에 따라 변할 수 있다. 디클로로메탄이 유기 용매로서 사용되는 경우, 예를 들어 상기 농도는 일반적으로 약 0.5 내지 약 70 중량%, 보다 바람직하게는 약 1 내지 약 60 중량%, 특히 바람직하게는 약 2 내지 약 50 중량% 범위로부터 선택된다.

이어서 유기 용매 중 중합체 용액 (오일상) 에, 생리 활성 물질, 이들의 염 또는 염 용액 [여기서, 용매는 물 또는 물 및 알콜 (예컨대 메탄올 또는 에탄올) 의 혼합물이다] 을 첨가한다. 생성 혼합물을 임의의 공지된 방법, 예컨대 균질화기 또는 초음파처리로 유화시켜, W/O 유형 에멀젼을 형성한다.

이어서, 생리 활성 물질 또는 이들의 염, 및 중합체를 포함하는 생성 W/O 유형 에멀젼을 수성상에 첨가하여, W (내부 수성상)/O (오일상)/W (외부 수성상) 유형 에멀젼을 형성한다. 이후, 용매를 오일상으로부터 증발시켜, 마이크로스피어를 제조한다. 상기 공정에 있어서, 외부 수성상의 부피는 일반적으로 오일상 부피의 약 1 배 내지 약 10,000 배, 보다 바람직하게는 약 5 배 내지 약 50,000 배, 특히 바람직하게는 약 10 배 내지 약 2,000 배 범위로부터 선택된다.

외부 수성상 및 후속 제조 방법에 임의 첨가될 수 있는 삼투압 조절제 및 유화제는 상기 (I) 부분에 기재된 것과 동일할 수 있다.

유화제는 외부 수성상에 첨가될 수 있다. 상기 유화제는 안정한 O/W 유형 에멀젼을 형성할 수 있는 임의 유화제일 수 있다. 상기 유화제의 구체예에는 음이온성 계면활성제 (예컨대 나트륨 올레에이트, 나트륨 스테아레이트 및 나트 륨 라우릴 술페이트), 비이온성 계면활성제 [예컨대 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 (예컨대 Tween 80 및 Tween 60, Atlas Powder Company) 및 폴리옥시에틸렌 피마자유 유도체 (예컨대 HCO-60 및 HCO-50, Nikko Chemicals)], 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알콜, 카르복시메틸 셀룰로오스, 레시틴, 젤라틴 및 히알루론산이 포함된다. 하나 이상의 상술된 유화제를 단독으로 또는 조합으로 사용할 수 있다. 바람직하게는 약 0.01 내지 10 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.05 내지 약 5 중량% 의 농도로 사용된다.

유기 용매는 공지된 공지된 방법, 또는 공지된 방법에 근거한 변형 방법에 의해 제거될 수 있다. 상기 방법의 예에는 프로펠러 교반기, 자기 교반기, 초음파 생성기 등으로 교반하면서 일반 대기압 또는 점차 감소되는 압력 하에 유기 용매를 증발시키는 것을 포함하는 방법, 회전 증발기 등으로 조절되는 진공 하에 유기 용매를 증발시키는 것을 포함하는 방법, 및 투석막을 이용하여 유기 용매를 점차적으로 제거하는 것을 포함하는 방법이 포함된다.

이렇게 수득된 마이크로스피어를 원심분리 또는 여과에 의해 수집하고 여러번 증류수로 세척하여, 마이크로스피어의 표면 상에 부착한 자유 생리 활성 물질 또는 이들의 염, 약물 담체, 유화제 등을 제거하고, 증류수 등에 다시 분산시킨 후 동결건조한다.

마이크로스피어의 제조 공정 도중, 입자의 응집을 예방하기 위해 항응집제가 첨가될 수 있다. 상기 항응집제의 예에는 만니톨, 락토오스, 글루코오스, 전분 (예컨대 옥수수 전분) 과 같은 수용성 다당류, 글리신과 같은 아미노산, 및 피브린 및 콜라겐과 같은 단백질이 포함된다. 특히, 만니톨이 바람직하다.

만니톨과 같은 항응집제는 일반적으로 마이크로스피어 총량을 기준으로 0 내지 약 24 중량% 의 양으로 첨가된다.

동결건조 후 필요하다면, 물 및 유기 용매는 감압 하에서, 마이크로스피어가 서로 융합되지 않는 조건 하에 가열하여 마이크로스피어로부터 제거될 수 있다. 바람직하게는, 마이크로스피어는 분 당 10℃ 내지 20℃ 의 온도 상승 속도 조건 하에 시차 주사 열량계에 의해 결정되는 중합체의 중간 유리 전이 온도 근처에서, 또는 중간 유리 전이 온도보다 약간 더 높은 온도에서 가열된다. 보다 바람직하게는, 마이크로스피어는 중합체의 중간 유리 전이 온도 근처 내지 이 유리 전이 온도보다 약 30℃ 더 높은 온도에서 가열된다. 특히 중합체가 락트산-글리콜산 중합체인 경우, 마이크로스피어는 바람직하게는 그 중간 유리 전이 온도 근처 내지 이 중간 유리 전이 온도보다 약 10℃ 더 높은 온도에서, 보다 바람직하게는 그 중간 유리 전이 온도 근처 내지 이 중간 유리 전이 온도보다 약 5℃ 더 높은 온도에서 가열된다.

가열 시간은 마이크로스피어의 양 등에 따라 변할 수 있다. 일반적으로는 마이크로스피어가 목적 온도에 도달한 후, 약 12 시간 내지 약 168 시간, 바람직하게는 약 24 시간 내지 약 120 시간, 특히 바람직하게는 약 48 시간 내지 약 96 시간이다.

마이크로스피어의 가열 방법은, 마이크로스피어 군을 균일하게 가열할 수 있는 임의 방법일 수 있고, 특별히 제한되지 않는다.

가열 건조 방법의 예에는 항온조, 유동층조, 이동조 또는 가마 (kiln) 내에서의 가열 건조 방법, 및 마이크로웨이브로의 가열 건조 방법이 포함된다. 항온조에서의 가열 건조 방법이 바람직하다.

본 발명의 방법에 의해 제조되는 본 발명의 마이크로스피어는 용액 중에 분산될 수 있는 주사가능 구형 미립자를 나타낸다. 예를 들어, 그 모양 및 형태는 주사 전자 현미경으로 관찰하여 결정될 수 있다. 마이크로스피어는 마이크로캡슐 또는 마이크로입자의 형태일 수 있으며, 마이크로캡슐이 바람직하다.

본 발명의 마이크로스피어 중 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 함량 (중량) 은 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 유형, 목적하는 약리 효과, 목적 효과 기간 등에 따라 변할 수 있다. 예를 들어, 생리 활성 물질 또는 이들의 염이 생리 활성 펩티드 또는 이들의 염인 경우, 함량은 마이크로스피어의 총 중량을 기준으로 약 0.001 내지 약 50 중량%, 바람직하게는 약 0.02 내지 약 40 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1 내지 약 30 중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 약 24 중량%, 가장 바람직하게는 약 3 내지 약 24 중량% 일 수 있다. 생리 활성 물질 또는 이들의 염이 비펩티드성 생리 활성 물질 또는 이들의 염인 경우, 함량은 약 0.01 내지 약 80 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 50 중량% 일 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어 중 중합체의 함량 (중량) 은 마이크로스피어의 총 중량을 기준으로 약 50 내지 약 100 중량%, 바람직하게는 약 70 내지 약 100 중량%, 보다 바람직하게는 약 85 내지 약 95 중량% 일 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어 중 약물 담체의 함량 (중량) 은 마이크로스피어의 총 중량을 기준으로 약 0.01 내지 약 50 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 30 중량%, 보다 바람직하게는 약 5 내지 약 15 중량% 일 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어는 표면에 작은 구멍을 거의 갖지 않으며, 주사용 현탁액 중에 우수한 분산성을 갖는다.

본 발명의 마이크로스피어가 이러한 우수한 분산성을 가지므로, 다량의 마이크로스피어가 주사용 현탁액 중에 현탁될 수 있다. 따라서, 주사용 현탁액은 결국 마이크로스피어가 히드록시나프토산과 같은 약물 담체를 포함하지 않는 경우에도 다량의 생리 활성 물질 또는 이들의 염을 포함할 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어는 그대로, 또는 근육, 피하, 기관 등을 위한 주사제 또는 임플란트, 비강, 직장, 자궁 등을 위한 점막통과제, 또는 경구제 (예컨대 캡슐 (예컨대 경질 캡슐 및 연질 캡슐), 고형 제제, 예컨대 과립 및 분말, 및 액체 제제, 예컨대 시럽, 에멀젼 및 현탁액) 등과 같은 다양한 투여형으로의 제형화 후에 투여될 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 마이크로스피어는 분산 매질, 예컨대 분산제 (예컨대 Tween 80 및 HCO-60 과 같은 계면활성제; 및 나트륨 히알루론산, 카르복시메틸셀룰로오스 및 나트륨 알기네이트와 같은 다당류), 방부제 (예컨대 메틸 파라벤 및 프로필 파라벤) 및 등장화제 (예컨대 염화나트륨, 만니톨, 소르비톨, 글루코오스 및 프롤린) 와 혼합되어 수성 현탁액을 제조하거나, 실용적 서방성 주사제가 제조될 수 있도록 분산 매질, 예컨대 참기름 및 옥수수 오일과 같은 식물성 오일과 혼합되어 오일성 현탁액을 제조할 수 있다.

현탁액 주사제에 사용하기 위한 본 발명의 마이크로스피어의 입자 직경은 이들이 만족스러운 분산성 및 만족스러운 바늘을 통과력을 갖는 범위 내여야 한다. 예를 들어, 마이크로스피어는 약 0.1 내지 300 ㎛, 바람직하게는 약 0.5 내지 150 ㎛, 보다 바람직하게는 약 1 내지 100 ㎛ 의 평균 입자 직경을 갖는다.

본 발명의 마이크로스피어는 모든 제조 단계 도중 멸균 조건, 감마선 조사로의 멸균 및 살균제의 첨가를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는 임의 방법에 의해 멸균 제제로 제형화될 수 있다.

상기 서방성 마이크로스피어 주사제를 위해, 부형제 (예컨대 만니톨, 소르비톨, 락토오스 및 글루코오스) 가 상기 현탁액 성분에 첨가될 수 있고, 현탁액은 재분산된 후 동결건조 또는 분무건조되어 고체를 수득할 수 있다. 투여 시, 주사용 증류수 또는 임의의 적절한 분산 매질이 고체에 첨가되어, 보다 안정한 서방성 주사제가 제조될 수 있다.

만니톨과 같은 부형제가 서방성 마이크로스피어 주사제에 첨가되는 경우, 부형제의 함량은 주사제의 총량을 기준으로 약 0 내지 50 중량%, 바람직하게는 약 1 내지 20 중량% 일 수 있다.

서방성 마이크로스피어 주사제가 투여 시 주사용 증류수 또는 임의의 적절한 분산 매질 중에 분산되는 경우, 마이크로스피어의 함량은 분산 매질 및 마이크로스피어의 총량을 기준으로 약 1 내지 80 중량%, 바람직하게는 약 10 내지 60 중량% 일 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어는 임의의 공지된 방법에 따라 경구 제제로 제형화 될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 마이크로스피어는 부형제 (예컨대 락토오스, 백당 및 전분), 붕해제 (예컨대 전분 및 탄산칼슘), 결합제 (예컨대 전분, 아라비아 고무, 카르복시메틸 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈 및 히드록시프로필 셀룰로오스), 윤활제 (예컨대 활석, 마그네슘 스테아레이트 및 폴리에틸렌 글리콜 6000) 등과 혼합되어 압축 성형된 후, 필요하다면 향미를 차폐시키거나 장용성 또는 서방성을 부여하기 위한 목적으로 임의의 공지된 방법에 의해 코팅되어 경구 제제가 수득된다. 상기 코팅제의 예에는 히드록시프로필메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 히드록시메틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 셀룰로오스, 폴리옥시에틸렌 글리콜, Tween 80, Pluronic F68, 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스 프탈레이트, 히드록시메틸 셀룰로오스 아세테이트 숙시네이트, Eudragit (Rohm Company (Germany) 제조, 메타크릴산-아크릴산 공중합체) 및 안료, 예컨대 산화티타늄 및 철단이 포함된다.

본 발명의 방법에 따라 제조되는 마이크로스피어는 임의의 공지된 방법에 의해 고체, 반고체 또는 액체 형태의 비강 제제로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 고체 비강 제제는 그대로 마이크로스피어로 제조되거나, 또는 부형제 (예컨대 글루코오스, 만니톨, 전분 및 마이크로결정성 셀룰로오스), 증점제 (예컨대 천연 고무, 셀룰로오스 유도체 및 아크릴산 중합체) 등을 첨가 및 혼합하여 분말 조성물을 형성하여 제조될 수 있다. 액체 비강 제제는 상기 주사제와 유사한 방식으로 오일성 또는 수성 현탁액으로 제조될 수 있다. 반고체 제제는 바람직하게는 수성 또는 오일성 겔 또는 연고 형태로 제조된다. 상기 비강 제제는 pH 조절제 (예 컨대 카르본산, 인산, 시트르산, 염산 및 수산화나트륨), 살균제 (예컨대 파라-히드록시벤조에이트 에스테르, 클로로부탄올 및 벤잘코늄 클로라이드) 등을 포함할 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어는 임의의 공지된 방법에 따라 오일성 또는 수성 고체 또는 반고체 또는 액체 형태로 좌약으로 제형화될 수 있다. 상기 좌약을 위해 사용되는 오일성 기재는 마이크로스피어가 용해되지 않는 임의의 오일성 기재일 수 있다. 상기 오일성 기재의 예에는 고급 지방산 [예컨대 카카오 버터 및 Witepsol 시리즈 제품 (Dynamite Nobel)], 중급 지방산 [예컨대 Miglyol 시리즈 제품 (Dynamite Nobel)] 및 식물성 오일 (예컨대 참기름, 대두유 및 면실유) 의 글리세리드가 포함된다. 수성 기재의 예에는 폴리에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜이 포함된다. 수성 겔 기재의 예에는 천연 고무, 셀룰로오스 유도체, 비닐 중합체 및 아크릴산 중합체가 포함된다.

본 발명의 마이크로스피어는 바람직하게는 주사제로서 사용된다.

본 발명의 서방성 조성물 중 본 발명의 마이크로스피어의 함량은 바람직하게는 약 70 중량% 이상이지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 마이크로스피어는 독성이 적으므로, 포유류 (예컨대, 인간, 소, 돼지, 개, 고양이, 마우스, 래트, 및 토끼) 를 위해 안전한 약품 등으로서 사용될 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어 또는 이들의 서방성 조성물의 용량은 주요 약물로서의 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 유형 및 함량, 투여 형태, 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 방출 기간, 표적 질환, 표적 동물 등에 따라 변할 수 있지만, 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 유효량을 제공하도록 설정될 수 있다. 서방성 조성물이 6 개월 제제인 경우, 예를 들어 주요 약물로서의 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 용량은 성인 체중 당 약 0.01 mg 내지 10 mg/kg, 보다 바람직하게는 약 0.05 mg 내지 5 mg/kg 범위로부터 선택될 수 있다.

마이크로스피어의 용량은 성인 체중 당 약 0.05 mg 내지 50 mg/kg, 보다 바람직하게는 약 0.1 mg 내지 30 mg/kg 범위로부터 선택될 수 있다.

투여 빈도는 수주일에 1 회, 한 달에 1 회, 여러 달 (예컨대, 3, 4 또는 6 개월) 에 1 회 등일 수 있으며, 주요 약물로서의 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 유형 및 함량, 투여 형태, 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 방출 기간, 표적 질환, 표적 동물 등에 따라 적절히 선택될 수 있다.

본 발명의 마이크로스피어 또는 이들의 서방성 조성물은, 이에 함유되는 생리 활성 물질 또는 이들의 염의 유형에 따라 다양한 질환의 예방제 및 치료제로서 사용될 수 있다. 생리 활성 물질 또는 이들의 염이 LH-RH 유도체인 경우, 본 발명의 마이크로스피어 또는 이들의 서방성 조성물은 예를 들어 호르몬 의존성 질환, 특히 호르몬 의존성 암 (예컨대 전립선암, 자궁암, 유방암, 및 뇌하수체암); 전립성 비대증, 자궁내막증식증, 자궁내막증, 성조숙증, 생리통, 무월경, 생리전 증후군, 및 다방성 난소 증후군과 같은 성 호르몬 의존성 질환; 또는 알츠하이머 질환 및 면역결핍과 같은 질환에 대한 예방제 또는 치료제로서 사용될 수 있고; 또는 피임제로서 (또는 약물 중단 후의 반동 효과를 이용하는 경우, 불임의 예방제 또는 치료제로서) 사용될 수 있다. 본 발명의 마이크로스피어 또는 이들의 서방성 조성물은 또한, 성 호르몬에 의존성이 아니지만, LH-RH 에 민감성인 음성 또는 악성 종양의 예방제 또는 치료제로서 사용될 수 있다.

본 발명에 따라 개선된 분산성을 갖는 마이크로스피어를 제조하기 위해, 생리 활성 물질 또는 이들의 염 및 중합체를 포함하는 에멀젼이 수중 건조되는 경우, 삼투압 조절제를 외부 수성상에 사용할 수 있다.

본 발명은 하기 참고예 및 실시예로 보다 구체적으로 설명되지만, 이는 본 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다.

하기 참고예 및 실시예에 있어서, 중량 평균 분자량은 참고 물질로 단일분산성 폴리스티렌을 이용한 겔 투과 크로마토그래피 (GPC) 로 폴리스티렌 분자량의 관점에서 결정되었으며, 각 중합체의 함량은 각각의 중량 평균 분자량으로부터 계산되었다. 각각의 측정은 SuperH4000 ×2 및 SuperH2000 칼럼 (각각 Tosoh Corporation 제조) 및 0.6 ml/분의 유속에서 테트라히드로푸란 이동상으로 고성능 GPC 시스템 (HLC-8120GPC, Tosoh Corporation 제조) 에서 수행되었다. 검출은 굴절률 차이에 근거하였다.

참고예 1: 고분자량 락트산 중합체의 합성

230 ml 의 탈수 자일렌에 4.1 ml 의 1.0 mol/l 디에틸아연 헥산 용액, 1.35 g 의 tert-부틸 락테이트 및 230 g 의 DL-락티드를 첨가하고, 약 2 시간 동안 120 내지 130℃ 에서 중합 반응을 수행하였다. 반응이 완료된 후, 120 ml 의 디클 로로메탄을 반응액 내로 붓고, 230 ml 의 트리플루오로아세트산을 첨가하여 탈보호 반응을 야기하였다. 반응이 완료된 후, 300 ml 의 디클로로메탄을 반응액에 첨가한 후, 이를 2800 ml 의 이소프로필 에테르 내로 부어서 목적 산물을 침전시켰다. 디클로로메탄/이소프로필 에테르로 재침전을 반복하여, 중량 평균 분자량 약 40000 의 락트산 중합체를 수득하였다.

참고예 2

참고예 1 에서 수득한 중합체를 600 ml 의 디클로로메탄 중에 용해시켰다. 생성 용액이 중성이 될 때까지 물로 세척한 후, 70 g 의 90% 락트산 수용액을 첨가하여 40℃ 에서 반응하도록 방치하였다. 반응액 중에 용해된 중합체의 중량 평균 분자량이 약 20,000 이 되면, 반응액을 실온으로 냉각하고, 600 ml 의 디클로로메탄을 부어 반응을 중단시켰다. 이어서, 반응액이 중성이 될 때까지 물로 세척하였다. 물로 세척한 후, 반응액을 농축 건조하여 락트산 중합체를 얻었다. 생성 락트산 중합체 내에, 말단 카르복실기의 양은 중합체 1 g 당 약 80 μmol 이었고, 중량 평균 분자량 5000 이하의 중합체 함량은 7.29 중량% 였다.

참고예 3 (1)

참고예 1 에서 수득한 중합체를 600 ml 의 디클로로메탄 중에 용해시켰다. 생성 용액이 중성이 될 때까지 물로 세척한 후, 70 g 의 90% 락트산 수용액을 첨가하여 40℃ 에서 반응하도록 방치하였다. 반응액 중에 용해된 중합체의 중량 평균 분자량이 약 20,000 이 되면, 반응액을 실온으로 냉각하고, 600 ml 의 디클로로메탄을 부어 반응을 중단시켰다. 반응액이 중성이 될 때까지 물로 세척한 후, 반응액을 2800 ml 의 이소프로필 에테르에 적가하여, 목적 락트산 중합체를 침전시켰다. 경사분리로 수집한 침전물을 600 ml 의 디클로로메탄 중에 용해시켰다. 생성 용액을 농축 건조하여 160 g 의 락트산 중합체를 얻었다. 생성 락트산 중합체 내에, 말단 카르복실기의 양은 중합체 1 g 당 약 70 μmol 이었다. 표 1 에 사용된 고분자량 락트산 중합체의 중량 평균 분자량, 가수분해에 의해 생성된 락트산 중합체의 중량 평균 분자량 및 수득한 표적 락트산 중합체의 중량 평균 분자량 및 분자량 분포를 나타내었다.

참고예 3 (2) 내지 (6)

참고예 3 (1) 에서와 유사한 방식으로 본 발명에 따른 락트산 중합체를 수득하였다. 표 1 에 사용된 고분자량 락트산 중합체의 중량 평균 분자량, 가수분해에 의해 생성된 락트산 중합체의 중량 평균 분자량 및 수득한 표적 락트산 중합체의 중량 평균 분자량 및 분자량 분포를 나타내었다.

		참고예 3
		(1)	(2)	(3)	(4)	(5)	(6)
고분자량 락트산 중합체의 Mw		40500	43600	40400	43300	38600	55000
가수분해 산물의 Mw		22200	22200	22700	22200	18600	27200
수득한 락트산 중합체의 Mw		22900	22200	21900	22300	19400	28200
분자량 분포 (%)	1-1000	0.03	0.07	0.00	0.01	0.08	0.04
	1-3000	0.95	1.12	0.87	0.09	1.45	0.62
	1-5000	3.86	4.17	3.89	3.92	4.89	2.50

표 1 은 본 발명에 따른 방법으로 제조된 각각의 락트산 중합체에서, 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 최대 약 5 중량% 이며; 중량 평균 분자량 3000 이하인 중합체의 함량이 최대 약 1.5 중량% 이고; 중량 평균 분자량 1000 이하인 중합체의 함량이 최대 약 0.1 중량% 임을 나타낸다.

비교예 1

354.3 g 의 디클로로메탄 중에 참고예 3 (1) 에서와 유사한 방식으로 수득한 205.5 g 의 DL-락트산 중합체 (중량 평균 분자량 21,400 및 정량적 결정기를 표지하여 결정되는 카르복실량 76.1 μmol/g) 를 용해시켰다. 생성 용액을 0.2 ㎛ 필터 (DFA4201FRP, EMFLOW) 로 가압 하에 여과하고 28.8℃ 로 조정하였다. 380.4 g 의 생성 유기 용매 용액을 칭량한 후, 이를 미리 55.4℃ 로 가열한 16.22 g 의 증류수 중 16.11 g 의 펩티드 A 아세테이트 수용액과 혼합하였다. 혼합물을 1 분 동안 교반하여 대략적으로 유화시킨 후, 2 분 동안 미니 혼합기로 10,150 rpm 에서 유화시켜 W/O 에멀젼을 형성하였다. 18℃ 로 냉각한 후, W/O 에멀젼을 미리 18.7℃ 로 조정한 25 리터의 0.1% (w/w) 폴리비닐 알콜 (EG-40, The Nippon Synthetic 제조) 수용액 중에 3 분 10 초에 걸쳐 부은 후, Homomic Line Flow (Tokushu Kika Kogyo Co., Ltd. 제조) 로 7,001 rpm 에서 교반하여 W/O/W 에멀젼을 형성하였다. W/O/W 에멀젼의 온도를 30 분 동안 약 18.5℃ 로 조정한 후, 온도 조정 없이 2 시간 30 분 동안 교반하여, 디클로로메탄 및 에탄올을 휘발시키거나 외부 수성상 내로 확산시키고, 오일상을 고화시켰다. 75 ㎛ 메시 체를 통해 통과시킨 후, 마이크로스피어를 연속 침전시키고, 원심분리기 (H-600S, Kokusan Corporation 제조) 로 2,000 rpm 에서 수집하였다. 수집한 마이크로스피어를 소량의 증류수 내에 다시 분산시킨 후, 90 ㎛ 메시 체를 통해 통과시켰다. 여기에, 18.85 g 의 만니톨을 첨가하여 용해시켰다. 혼합물을 동결 건조하여, 마이크로스피어 분말을 수득하였다. 생성 마이크로스피어 분말의 질량 및 수율 은 각각 117.6 g 및 68.54% 였다. 펩티드 A 의 함량은 7.76% 였다. 생성 마이크로스피어의 전자 현미경 사진을 도 1 에 나타내었다.

실시예 1

354.4 g 의 디클로로메탄 중에 참고예 3 (1) 에서와 유사한 방식으로 수득한 205.4 g 의 DL-락트산 중합체 (중량 평균 분자량 21,400 및 정량적 결정기를 표지하여 결정되는 카르복실량 76.1 μmol/g) 를 용해시켰다. 생성 용액의 온도를 30℃ 로 조정하였다. 380.5 g 의 생성 용액을 칭량한 후, 이를 미리 55℃ 로 가열한 16.2 g 의 증류수 중 16.1 g 의 류프로렐린 아세테이트 수용액과 혼합하였다. 혼합물을 미니 혼합기 (Tokushu Kika Kogyo Co., Ltd.) 로 유화시켜 W/O 에멀젼을 형성하였다 (약 10,000 rpm 의 회전 속도에서). 약 18℃ 로 냉각한 후, W/O 에멀젼을 미리 약 18℃ 로 조정한 25 리터의 0.1% (w/w) 폴리비닐 알콜 (EG-40, The Nippon Synthetic 제조) + 1% 만니톨 수용액 중에 부은 후, 이차적으로 Homomic Line Flow (Tokushu Kika Kogyo Co., Ltd. 제조) 로 유화시켜 W/O/W 에멀젼을 형성하였다 (약 7,000 rpm 의 터빈 회전 속도 및 약 2000 rpm 의 순환 펌프 회전 속도에서). W/O/W 에멀젼을 약 3 시간 동안 수중 건조한 후, 표준 75 ㎛ 체를 통해 통과시키고, 이어서 원심분리하여 (H-600S, Kokusan Corporation 제조) 연속 침전시키고 마이크로스피어를 수집하였다 (약 2,000 rpm 의 회전 속도 및 약 600 ml/분의 유속에서). 수집한 마이크로스피어를 소량의 증류수 중에 다시 분산시킨 후, 표준 90 ㎛ 체를 통해 통과시켰다. 여기에, 18.9 g 의 만니톨을 첨가하였다. 혼합물을 동결건조기 (Triomaster, Kyowa Vacuum Engineering 제조) 로 동결 건조하여, 분말 (마이크로스피어 분말) 을 수득하였다. 생성 마이크로스피어의 전자 현미경 사진을 도 2 에 나타내었다.

실험예 1

비교예 1 또는 실시예 1 에서 제조된 약 660 mg 의 마이크로스피어 분말을 코트 9P 바이알 중에서 칭량한 후, 고무 마개로 플러그하고 스크류 캡으로 밀봉하였다. 바이알에 1.5 ml 의 류프로렐린 아세테이트용 분산 매질 (5% 만니톨, 1% 카르멜로오스 나트륨 및 0.1% 폴리소르베이트 80 의 혼합물) 을 첨가하고, 균일한 분산액을 수득하는데 필요한 시간을 측정하였다.

각각의 마이크로스피어 분말을 류프로렐린 아세테이트 바이알 제제에 부착된 지시에 따라 약 30 회/10 초의 진탕 속도로 약 7 cm 의 진탕폭으로 진탕하여 분산시켰다. 결과를 표 2 에 나타내었다.

	비교예 1	실시예 1
분산 시간	약 2 내지 4 분	8 내지 23 초

실험예 2

비교예 1 또는 실시예 1 에서 제조된 약 660 mg 의 마이크로스피어 C 분말을 류프로렐린 아세테이트용 분산 매질 (분산액의 양: 1.5 ml) 이 충전된 14φ유형 DPS (이중 챔버 사전충전 주사기) 내로 넣어서 현탁하였다. 균일한 분산액을 수득하는데 필요한 시간을 측정하였다.

각각의 마이크로스피어 분말을 류프로렐린 아세테이트 DPS 제제에 부착된 지시에 따라 약 50 회/10 초의 진탕 속도로 약 3 cm 의 진탕폭으로 손바닥 상에서 주 사기를 탭핑하여 분산시켰다. 결과를 표 3 에 나타내었다.

	비교예 1	실시예 1
분산 시간	약 2 내지 6 분	20 내지 46 초

본 발명의 마이크로스피어는 개선된 분산성을 가지므로, 주사용 증류수와 같은 분산 매질 중에 고농도로 분산될 수 있다.

Claims (48)

1. 삭제
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 삭제
11. 삭제
12. 삭제
13. 삭제
14. 삭제
15. 삭제
16. 삭제
17. 삭제
18. 삭제
19. 삭제
20. 삭제
21. 삭제
22. 삭제
23. 삭제
24. 삭제
25. 삭제
26. 삭제
27. 삭제
28. 0.5% 내지 1.5% (w/w)의 농도에서 마이크로스피어를 제조하기 위해 W/O (내부수성상/오일상) 유형 에멀젼을 외부 수성상 중에 만니톨의 존재 하에 수중 건조하는 것을 포함하는, 마이크로스피어의 분산성을 개선하는 방법으로,

    상기 W/O (내부수성상/오일상) 유형 에멀젼이

    1) 하기 식:

    5-옥소-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅

    의 펩티드 또는 그의 염을 함유하는 내부수성상, 및

    2) 유기 용매 중 중량 평균 분자량이 17000 내지 26000인 락트산 중합체 또는 그의 염으로 이루어진 오일상 용액

    으로 이루어지는 것인, 마이크로스피어의 분산성을 개선하는 방법.
29. 삭제
30. 제 28 항에 있어서, 400 내지 700 mg 의 마이크로스피어가 2 분 미만으로 1.5 ml 의 주사용 분산 매질 중에 분산될 수 있는 정도로 분산성을 개선하는 방법.
31. 삭제
32. 제 28 항에 있어서, 추가로 내부 수성상에 약물 담체를 첨가하는 것을 포함하는 방법.
33. 삭제
34. 삭제
35. 삭제
36. 제 28 항에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 10 중량% 이하인 방법.
37. 제 28 항에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 5000 이하인 중합체의 함량이 5 중량% 이하인 방법.
38. 제 28 항에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 3000 이하인 중합체의 함량이 1.5 중량% 이하인 방법.
39. 제 28 항에 있어서, 락트산 중합체 또는 이들의 염 중 중량 평균 분자량 1000 이하인 중합체의 함량이 0.1 중량% 이하인 방법.
40. 삭제
41. 삭제
42. 삭제
43. 삭제
44. 삭제
45. 삭제
46. 삭제
47. 삭제
48. 삭제

Images