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KR100891734B1 - Cosmetic composition containing basin extract and fractions - Google Patents

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KR100891734B1
KR100891734B1 KR1020070082003A KR20070082003A KR100891734B1 KR 100891734 B1 KR100891734 B1 KR 100891734B1 KR 1020070082003 A KR1020070082003 A KR 1020070082003A KR 20070082003 A KR20070082003 A KR 20070082003A KR 100891734 B1 KR100891734 B1 KR 100891734B1
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Abstract

본 발명은 도인피 추출물 및 분획물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명의 추출물 및 분획물은 전자공여능, SOD 유사활성 및 아질산염 소거능 측정실험에서 항산화 효과를 나타내며, 타이로시나제 억제활성측정을 통한 미백효과, NO 저해활성 및 iNOS 발현저해로 확인한 항염효과 및 여드름 균인 프로피오니박테륨 아그네스에 대한 생육 저해활성을 나타내는 동시에 안정한 조성물로 확인된 바, 항산화, 미백, 항염 및 항균용 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a cosmetic composition containing a basin extract and fractions, specifically, the extracts and fractions of the present invention shows an antioxidant effect in the measurement of electron donating ability, SOD-like activity and nitrite scavenging activity, measurement of tyrosinase inhibitory activity Anti-inflammatory effect and anti-inflammatory effect confirmed by whitening effect, NO-inhibition activity and iNOS expression inhibition, and growth inhibitory activity against propionibacterium agne acne bacterium was confirmed as a stable composition, as a cosmetic composition for antioxidant, whitening, anti-inflammatory and antibacterial It can be usefully used.

도인피, 항산화, 미백, 항염, 항균, 화장료 조성물 Basin, antioxidant, whitening, anti-inflammatory, antibacterial, cosmetic composition

Description

도인피 추출물 및 분획물을 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising extract and fraction of Persicae semen shell}Cosmetic composition containing basin extract and fractions {Cosmetic composition comprising extract and fraction of Persicae semen shell}

본 발명은 도인피 추출물 및 분획물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 전자공여능, SOD 유사활성 및 아질산염 소거능 측정실험에서 항산화 효과를 나타내며, 타이로시나제 억제활성측정을 통한 미백효과, NO 저해활성 및 iNOS 발현저해로 확인한 항염효과 및 여드름 균인 프로피오니박테륨 아그네스에 대한 생육 저해활성을 나타내는 항산화, 미백, 항염 및 항균용 도인피 추출물 및 분획물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition containing a basin extract and fractions, more specifically, the antioxidant effect in the electron donating ability, SOD-like activity and nitrite scavenging activity measurement experiment, whitening effect through measurement of tyrosinase inhibitory activity, The present invention relates to a cosmetic composition containing an anti-inflammatory, whitening, anti-inflammatory and antibacterial phosphatidule extract and fractions showing anti-inflammatory effect and anti-inflammatory effect identified by NO inhibition and iNOS expression inhibition.

아름다움을 추구하는 인간의 욕구는 미용을 발달시켰으며, 피부를 보호하고 노화를 방지하기 위해 오래전부터 얼굴에 무엇인가를 바르기 시작하였다. 화장품의 시초는 문헌에 기록되지 않았으나, 기원전 3,000년경 고대 이집트 무덤에서 지방에 향기를 첨가한 화장연고와 화장도구 등이 발견되어 오래전부터 화장품을 이용하여 화장을 했던 것으로 짐작할 수 있다(황정원, 화장품학, 현문사, pp13-16, 1995). 이처럼, 화장품은 역사이전부터 세계 각지에서 사용되었으며, 인류의 문화와 경제가 발전함에 따라 인간의 미적 본능을 만족시키는 양식이 되고 있다. 예전에는 화 장품이 색조화장품, 기초 화장품, 두발용 향료 등으로 주로 피부보호와 메이크업을 위주로 생산되었다. 최근에는 피부 상태를 적극적으로 개선시키려는 목적을 가진 미백, 주름개선 등의 특정한 기능을 가진 기능성 화장품이 개발, 생산되고 있다. 또한 각 개인의 개성이 강조되고 다양성의 추구로 인해 화장품도 소품종 대량생산에서 다품종 소량생산으로, 박리다매의 형태에서 고부가가치를 가진 제품의 생산으로 그 형태가 바뀌고 있다(하병조, 기능성 화장품, 신광출판사, pp10-12, 2002).The human desire for beauty has developed beauty and has long since applied something to the face to protect the skin and prevent aging. Although the origin of cosmetics was not recorded in the literature, it was conceived that cosmetic ointments and toiletries with fragrance were added to ancient Egyptian tombs around 3,000 B.C.E. Hyeonmunsa, pp 13-16, 1995). Like this, cosmetics have been used all over the world since history, and as human culture and economy develop, it is becoming a style to satisfy human aesthetic instinct. In the past, cosmetics were mainly produced for skin care and makeup, such as color cosmetics, basic cosmetics, and hair fragrances. Recently, functional cosmetics having specific functions such as whitening and wrinkle improvement have been developed and produced with the purpose of actively improving skin condition. In addition, each individual's individuality is emphasized, and the pursuit of diversity is changing the form of cosmetics from mass production of small items to small quantities of multi-products, and production of high value-added products from peeled off-line products (Ha Byung-jo, functional cosmetics, Shin-gwang) Publisher, pp 10-12, 2002).

2001년 7월 식품의약품안전청에서는 기능성화장품 기준 및 시험방법 등을 고시하였다. 미백에 도움을 주는 물질로는 닥나무추출물, 유용성 감초추출물을 고시성분으로 등재하였고, 피부의 주름개선에 도움을 주는 물질로는 레티놀, 아데노신을 등재하였다(화장품 관련 정책 종합설명회, 식품의약안전청, pp243-250, 2003). 이외에도 녹차, 상백피, 빈랑자, 황금, 산삼 등의 천연물을 화장품의 성분으로 사용하고 있다(김영중, 천연물연구의 최근 동향, 대한화장품학회지, 29, pp1-15, 2003; 안덕균, 피부미용의 한의학적 이론, 대한화장품학회지, 29, pp79-87, 2003).In July 2001, the Korea Food and Drug Administration (KFDA) issued a list of functional cosmetic standards and test methods. The substances that help whitening are listed as a noticeable ingredient, and the extracts of oil-soluble licorice, and retinol and adenosine are listed as substances that help to improve wrinkles of skin (Cosmetics Policy, Food and Drug Administration, pp. 243). -250, 2003). In addition, natural products such as green tea, baekbaekpi, betel nut, golden, and wild ginseng are used as cosmetic ingredients (Kim Young-Joong, Recent Trends in Natural Products Research, Journal of Korean Cosmetic Society, 29, pp1-15, 2003; , Journal of the Korean Society of Cosmetic Scientists, 29, pp79-87, 2003).

이처럼 최근에 화장품 소재로 많은 천연물들이 연구되고 있으며, 특히 한의학에서 사용되는 한약재들을 응용한 한방화장품이 다양하게 연구, 생산되고 있다.Recently, many natural products have been studied as cosmetic materials, and in particular, various herbal cosmetics applying herbal medicines used in oriental medicine have been researched and produced.

한방재로 사용되고 있는 생약, 야채, 과일, 꽃 등의 식물 추출물 가운데 안정성이 뛰어난 화장품원료를 찾고자 하는 노력이 계속 이루어져 왔으며, 이중에서 도인이란 한방재는 한국, 중국, 일본 등에서 오래전부터 여성의 질환과 퇴행성질환 등에 사용되었으며(R. Y. Ge, C. H. Zhou, et al., J. Tra. Chinese. Med., 3, pp23-26, 1983; S. Sakamoto, H. Kudo, et al., J. Ethnophamacol., 23, pp151- 158, 1988; D. Wang, Z. Wang, et al., J. Trad. Chine. Med., 18, pp7-11, 1998), 최근 항암 프로모터, 항 어혈작용(T.Okuyama, M.Matsuda, et al., Natural Medicines, 49, pp261-265, 1995; T.Kosuge, H.Ishida, M.Ishii, Chem. Pharm. Bull., 33, pp1496-1498, 1985) 등이 보고되었다.Efforts have been made to find cosmetic ingredients with excellent stability among plant extracts such as herbal medicines, vegetables, fruits, and flowers, which are used as herbal medicines. Among them, Doin Oriental Medicine has long been a cause of disease and degeneration of women in Korea, China, and Japan. Disease, etc. (RY Ge, CH Zhou, et al., J. Tra. Chinese. Med., 3, pp 23-26, 1983; S. Sakamoto, H. Kudo, et al., J. Ethnophamacol., 23 , pp.151-158, 1988; D. Wang, Z. Wang, et al., J. Trad. Chine.Med ., 18, pp7-11, 1998), recent anticancer promoters, anti-blood activity (T.Okuyama, M Matsuda, et al., Natural Medicines, 49, pp261-265, 1995; T. Kosuge, H.Ishida, M. Ishii, Chem. Pharm. Bull., 33, pp1496-1498, 1985).

도인(Persicae semen)은 장미과(Rosaceae)에 속하는 낙엽, 활엽, 소교목인 복숭아나무(Prunus persica BATSCH), 개복숭아나무(Prunus persica BATSCH var. davidiana Maximowicz)의 씨로서, 진해, 거담, 구어혈의 목적으로 한방에서 많이 사용되는 생약이다. 성분으로는 아미그달린(amygdalin), 에스트론(estrone) 등이 보고되고 있다(생약학연구회, 현대생약학, 학창사, pp322, 1997). Persicae semen is a seed of deciduous, broad-leaved, arborescent, Prunus persica BATSCH, and Prunus persica BATSCH var. Davidiana Maximowicz, which belong to Rosaceae . As a herbal medicine that is used a lot in one shot. Amygdalin and estrone have been reported as ingredients (Korean Society for Pharmacognosy, Modern Biopharmaceuticals, Hakchangsa, pp322, 1997).

대한민국 특허등록 제358590호에는 시호 및 도인 추출물을 함유하는 항염 및 항알러지 효과가 있는 화장료 조성물이 개시되어 있고, 대한민국 특허공개 제2005-91473호에는 도인 추출물을 함유하는 항균효과를 갖는 조성물이 개시되어 있으며, 대한민국 특허등록 제378137호에는 도인 추출물 및 이를 유효성분으로 함유하는 간을 보호함과 동시에 간 섬유화를 억제할 수 있는 조성물이 개시되어 있다.Korean Patent Registration No. 358590 discloses a cosmetic composition having an anti-inflammatory and anti-allergic effect containing Shiho and Doin extract, and Korean Patent Publication No. 2005-91473 discloses a composition having an antimicrobial effect containing Doin extract. In addition, the Republic of Korea Patent Registration No. 378137 discloses a composition capable of inhibiting liver fibrosis and at the same time protect the liver and the liver containing it as an active ingredient.

이와 같이, 도인에 관한 선행연구는 많이 이루어져왔지만, 도인의 껍질인 도인피에 대한 연구는 시도된 바 없다.As described above, a lot of previous studies on indoin have been made, but no study on the indope, the skin of the indoin, has been attempted.

이에 본 발명에서는 도인피에 대해 연구한 결과 도인 추출물에 비해 도인피 추출물과 분획물에서 여러 가지 효능효과가 우수한 것을 확인하였고, 이를 이용하여 그 생리 활성능을 측정하고 이를 이용한 피부 저자극성 에멀젼을 제조하였으며, 또한 도인피를 응용한 피부 저자극성 에멀전의 물리화학적 특징을 파악하고 이의 안정성과 피부 안전성을 확인하여 기능성 화장품으로써 응용 가능성을 검토함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.Therefore, in the present invention, as a result of the study on the basin extract, it was confirmed that the various efficacy effects are excellent in the basin extract and fractions, compared to the doin extract, the physiological activity was measured using this to prepare a skin hypoallergenic emulsion using the same. In addition, the present invention was completed by grasping the physicochemical characteristics of skin hypoallergenic emulsion to which basin was applied, and confirming its stability and skin safety, and reviewing its applicability as a functional cosmetic.

따라서 본 발명의 목적은 도인 추출물에 비해 도인피 추출물에서 보다 우수한 항산화, 미백, 항염 및 항균 효과를 확인하고, 도인피 추출물 및 분획물을 함유하며 안정성에 문제가 없는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Therefore, it is an object of the present invention to check the superior antioxidant, whitening, anti-inflammatory and antibacterial effect in the derin extract compared to the extract of the indonesity, to provide a cosmetic composition containing the extracts and fractions and no problem on stability.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여, 항산화, 미백, 항염 및 항균효과를 갖는 도인피 추출물 또는 분획물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition containing a basin extract or fraction having an antioxidant, whitening, anti-inflammatory and antibacterial effect in order to achieve the above object.

본 발명에서 도인피 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매에 가용한 추출물을 포함한다.The bast extract in the present invention includes an extract available in a solvent selected from water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof.

본 발명에서 도인피 분획물은 물, 메탄올, 에탄올 및 부탄올과 같은 저급알코올과 클로로포름, 헥산 등과 같은 비극성용매의 혼합용매, 바람직하게는 메탄올과 클로로포름 혼합용매로 클로로포름에 대한 메탄올의 비율을 점차 높인 용매를 이용하여 실리카겔 컬럼에 전개시켜 분리한 분획물, 바람직하게는 상기 크로마토그 래피의 전개용매 조건(클로로포름 : 메탄올 = 4 : 1 조건)에서 Rf치 0.4 내지 0.6을 갖는 분획물인 Fr 4 및 Fr 7을 의미한다.In the present invention, the basin fraction is a mixed solvent of lower alcohols such as water, methanol, ethanol and butanol, and a non-polar solvent such as chloroform and hexane, preferably a solvent that gradually increases the ratio of methanol to chloroform as a mixed solvent of methanol and chloroform. Fractions separated by developing on a silica gel column, preferably Fr 4 and Fr 7 which have fractions having an Rf value of 0.4 to 0.6 under developing solvent conditions of the chromatography (chloroform: methanol = 4: 1 condition). .

본 발명의 도인피 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 전자공여능 및 SOD 유사활성실험에서 항산화 효과를 나타내며, 탁월한 타이로시나아제 저해활성을 나타내고, NO 저해활성 및 iNOS 발현저해로 확인한 항염효과 및 여드름 균인 프로피오니박테륨 아그네스에 대한 생육 저해활성을 나타내는 동시에 안정한 조성물로 확인된 바, 항산화, 미백, 항염 및 항균용 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.Cosmetic composition containing the derin extract of the present invention exhibits an antioxidant effect in the electron donating ability and SOD-like activity experiments, exhibits excellent tyrosinase inhibitory activity, anti-inflammatory effect and acne bacterium propiety confirmed by NO inhibitory activity and iNOS expression inhibition The growth inhibitory activity on Onybacterium Agnes has been confirmed as a stable composition, it can be usefully used as a cosmetic composition for antioxidant, whitening, anti-inflammatory and antibacterial.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에서 도인피로부터 추출물 및 분획물을 분리하는 방법은 하기와 같다.In the present invention, the method of separating the extracts and fractions from basin is as follows.

도인피 추출물은 건조한 도인피를 세척한 후 추출 용매로서 물을 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피량으로, 30 내지 150℃, 바람직하게는 100℃에서, 0.5 내지 10시간, 바람직하게는 1 내지 5시간 동안, 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법으로, 바람직하게는 환류냉각추출법으로 추출하거나, 또는 추출 용매로서 에탄올과 물의 혼합용매를 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피량으로, 10 내지 50℃, 바람직하게는 20 내지 30℃의 추출 온도에서, 10 내지 60 시간, 바람직하게는 20 내지 30시간 동안, 침적, 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법으로, 바람직하게는 냉침 추출 한 후 추출액을 원심분리 및 여과, 농축하여 도인피 추출물을 수득한다.The bast extract is washed with dry bast and then, in an amount of 1 to 30 times, preferably 5 to 15 times, by volume of water, 30 to 150 ° C, preferably 100 ° C, for 0.5 to 10 hours, preferably as an extraction solvent. Preferably, for 1 to 5 hours, extraction methods such as cold sediment extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, etc., preferably by reflux cooling extraction, or 1 to 30 times the mixed solvent of ethanol and water as extraction solvent , Preferably 5 to 15 times by volume, at an extraction temperature of 10 to 50 ℃, preferably 20 to 30 ℃, 10 to 60 hours, preferably 20 to 30 hours, deposition, cold extraction, hot water extraction Extraction method, such as ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, preferably cold extraction, and then the extract is centrifuged, filtered and concentrated to obtain a bast extract.

도인피 유효성분이 정제된 정제 분획물은 상기 극성 용매 가용 추출물을 분획하고 농축한 후, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 및 박층 컬럼 크로마토그래피(TLC)를 이용하여 분리할 수 있다.Purified fractions purified in the basin active ingredient may be separated by fractionating and concentrating the polar solvent soluble extract, and then separated by silica gel column chromatography and thin layer column chromatography (TLC).

구체적으로 도인피 추출물 및 분획물의 분리 공정은Specifically, the separation process of the basin extract and fractions

도인피를 분쇄하고 물, 메탄올 또는 에탄올과 같은 극성 용매로 추출한 후에 감압 농축하여 극성용매에 가용한 조추출물을 얻는 제1단계;A first step of pulverizing the bast and extracting with a polar solvent such as water, methanol or ethanol and then concentrating under reduced pressure to obtain a crude extract soluble in a polar solvent;

상기 단계에서 얻은 조추출물을 증류수에 현탁하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하되, 상기 용해액을 실리카겔 컬럼에 클로로포름과 메탄올 혼합액(CHCl3 : MeOH = 100 : 1 내지 1 : 100) 전개용매에서 처음에는 클로로포름만 전개시키고 점차적으로 메탄올의 농도를 순차적으로 높여가는 농도구배 전개용매를 컬럼에 전개시켜 분획물을 얻는 제2단계;The crude extract obtained in the above step was suspended in distilled water to perform column chromatography, and the soluble solution was first mixed with chloroform and methanol in a silica gel column (CHCl 3 : MeOH = 100: 1 to 1: 100) in a developing solvent. A second step of obtaining a fraction by developing a concentration gradient developing solvent which develops and gradually increases the concentration of methanol in a column;

수득한 분획물을 박층 크로마토그래피를 수행하되, 상기 크로마토그래피의 전개용매 조건(클로로포름 : 메탄올 = 4 : 1 조건)에서 전개시키고, 각각의 분획물을 건조하여 정제된 형태의 정제 분획물을 얻는 제3단계를 포함한다.The obtained fractions were subjected to thin layer chromatography, and the third step was performed under developing solvent conditions (chloroform: methanol = 4: 1 condition) of the chromatography, and each fraction was dried to obtain a purified fraction in purified form. Include.

또한, 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있다(Harborne J.B., Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant analysis, 3rd Ed., pp6-7, 1998).In addition, conventional fractionation processes can also be carried out (Harborne J.B., Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant analysis, 3rd Ed., Pp 6-7, 1998).

상기 추출방법에 의해 얻어진 추출물 및 분획물의 전자공여능, SOD 유사활성 및 아질산염 소거작용으로 확인한 항산화효과, 타이로시나제 억제활성실험으로 확인한 미백효과, NO생성 저해 및 iNOS 발현저해로 확인한 항염효과 및 여드름 균인 프로티오니박테륨 아그네스에 대한 생육 저해활성을 측정한 결과, 항산화 효과, 항염효과 및 항균효과가 탁월하여 항산화, 미백, 항염 및 항균용 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.Antioxidant and acne effects identified by the electron donating ability, SOD-like activity and nitrite scavenging activity of the extracts and fractions obtained by the extraction method, whitening effect confirmed by tyrosinase inhibitory activity test, inhibition of NO production and inhibition of iNOS expression and acne As a result of measuring the growth inhibitory activity against the bacterium Prothionibacterium Agnes, the antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial effects are excellent and thus can be usefully used as a cosmetic composition for antioxidant, whitening, anti-inflammatory and antibacterial.

본 발명의 조성물은 피부의 노화방지, 암예방 및 항균 효과를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.The composition of the present invention can be used in a variety of cosmetics and cleansing agents for the anti-aging, cancer prevention and antibacterial effect of the skin. Examples of products to which the composition of the present invention can be added include cosmetics such as various creams, lotions, skins, and the like, and cleansing agents, face washes, soaps, treatments, and essences.

본 발명의 화장료 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 도인피 추출물 및 분획물을 0.01 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 8 중량%, 가장 바람직하게는 0.5 내지 5 중량%로 포함한다.The cosmetic composition of the present invention comprises 0.01 to 10% by weight, preferably 0.1 to 8% by weight, most preferably 0.5 to 5% by weight, based on the total weight of the composition.

본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스 등을 포함할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may include water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids and seaweed extracts.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 사용할 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환 법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.Any water-soluble vitamin can be used as long as it can be formulated in cosmetics, but preferably vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, pyridoxine, pyridoxine, vitamin B12, pantothenic acid, nicotinic acid, nicotinic acid amide, folic acid, vitamin C, vitamin H and the like. The salts (thiamine hydrochloride, sodium ascorbate salt, etc.) and derivatives thereof (ascorbic acid-2-sodium phosphate salt, ascorbic acid-2-magnesium phosphate salt, etc.) can also be used in the present invention. Included in The water-soluble vitamins can be obtained by conventional methods such as microbial transformation, purification from microorganism culture, enzyme or chemical synthesis.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 사용할 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.Any oil-soluble vitamin can be used as long as it can be formulated in cosmetics, but preferably vitamin A, carotene, vitamin D2, vitamin D3, vitamin E (d1-alpha tocopherol, d-alpha tocopherol, d-alpha tocopherol) and the like can be used. Derivatives thereof (ascorbic palmitate, ascorbic stearate, ascorbic acid dipalmitate, dl-alpha tocopherol acetate, dl-alpha tocopherolvitamin E, DL-pantothenyl alcohol, D-pantothenyl alcohol, pantothenyl) Ethyl ether) and the like are also included in the oil-soluble vitamins used in the present invention. Oil-soluble vitamins can be obtained by conventional methods such as microbial transformation, purification of microorganism culture, enzyme or chemical synthesis.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 사용할 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.As the polymer peptide, any compound can be used as long as it can be incorporated into cosmetics. Preferably, collagen, hydrolyzed collagen, gelatin, elastin, hydrolyzed elastin, keratin and the like can be used. Polymeric peptides can be purified and obtained by conventional methods such as purification from microbial cultures, enzymatic methods or chemical synthesis methods, or can be purified and used from natural products such as dermis and pig silk such as pigs and cattle.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 사용할 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.As the polymer polysaccharide, any compound can be used as long as it can be incorporated into cosmetics. Preferably, hydroxyethyl cellulose, xanthan gum, sodium hyaluronate, chondroitin sulfate or a salt thereof (sodium salt, etc.) can be used. For example, chondroitin sulfate or its salt, etc. can be normally purified from a mammal or fish.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 사용할 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.As the sphingolipid, any compound can be used in cosmetics, but ceramide, phytosphingosine, sphingosaccharide lipid and the like can be preferably used. Sphingo lipids can usually be purified from mammals, fish, shellfish, yeasts or plants by conventional methods or obtained by chemical synthesis.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 사용되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 사용할 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.The seaweed extract may be used as long as it can be formulated into cosmetics, but preferably brown algae extract, red algae extract, green algae extract and the like can be used. Further, calginine, arginic acid and sodium arginate purified from these seaweed extracts can be used. , Potassium arginate and the like are also included in the seaweed extract used in the present invention. Seaweed extract can be obtained by purification from seaweed by conventional methods.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다.The cosmetic of the present invention may be blended with the above essential components, if necessary, with other ingredients normally blended into the cosmetic.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 배합할 수 있다.Other components that may be added include fats and oils, moisturizers, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments, organic powders, ultraviolet absorbers, preservatives, fungicides, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, flavorings, A blood circulation accelerator, a cooling agent, a restriction | limiting agent, purified water, etc. can be mix | blended.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 사용할 수 있다.As the fat or oil component, an ester fat, a hydrocarbon fat, a silicone fat, a fluorine fat, an animal fat, a vegetable fat or the like can be used.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프 로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸 헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 사용할 수 있다.As ester fats and oils, glyceryl tri2-ethylhexanoate, cetyl 2-ethylhexanoate, isopropyl myristate, butyl mystinate, isopropyl palmitate, ethyl stearate, octyl palmitate, isocetyl isostearate, and stearic acid Butyl, ethyl linoleate, isopropyl linoleate, ethyl oleate, isocetyl acid isetyl, isostyl acid mystearyl, isostaryl palmitate, octylate acid octyldodecyl, isostearic acid isetyl, diethyl sebacinate, adidi Diisopropyl phosphate, isoalkyl neopentane, tri (capryl, capric acid) glyceryl, trimethyl ethyl trimethylolpropane, trimethyl stearate trimethylol propane, tetra 2-ethylhexanopentane Tol, cetyl caprylate, lauric acid decyl, lauric acid hexyl, myristic acid decyl, myristic acid myristyl, myristic acid cetyl, stearyl stearate, decyl oleate, lisinooleic acid Teyl, isostearyl laurate, isotridecyl myristin, isocetyl palmitate, octyl stearate, isocetyl stearate, isodecyl oleate, octyl dodecyl oleate, octyl dodecyl linoleate, isopropyl isopropyl acid, 2-ethylhexanoate cetostearyl, 2-ethylhexanoate stearyl, hexyl isostearate, ethylene glycol dioctanoate, ethylene glycol dioleate, propylene glycol dicapric acid, propylene glycol di (capryl, capric acid), Dicaprylic acid propylene glycol, dicapric acid neopentyl glycol, dioctanoate neopentyl glycol, tricaprylate glyceryl, triundecyl glyceryl, triisopalmitinate glyceryl, triisostearate glyceryl, octylate octadodode Sil, isostearyl octanoate, octyl isononanoate, hexyldecyl neodecanoate, octyldodecyl neodecanoate, isocetyl isostearate, isstearyl isostearate, Sothete octylate, polyglycerol oleate, polyglycerine isostearate, triisocetyl citrate, triisoalkyl citrate, triisoctyl citrate, lauryl lactate, myritic lactate, octyl lactate, octyl lactate, tricitric acid Ethyl, acetyl triethyl citrate, acetyl tributyl citrate, trioctyl citrate, diisostearyl malate, 2-ethylhexyl hydroxystearate, di2-ethyl hexyl succinate, diisobutyl adipic acid, diisopropyl sebacinate, Dioctyl sebacate, cholesteryl stearate, cholesteryl isostearate, cholesteryl hydroxystearate, cholesteryl oleate, dihydrocholesteryl oleate, physteryl isostearate, phytic oleate, 12-Steloylhydroxystearate isocetyl, 12-Steloylhydroxystearate stearyl, 12-steal One hydroxy stearic acid and the like can be used esters such as cetearyl source.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 사용할 수 있다.Hydrocarbon-based oils such as squalene, liquid paraffin, alpha-olefin oligomer, isoparaffin, ceresin, paraffin, liquid isoparaffin, polybutene, microcrystalline wax, and petrolatum can be used as hydrocarbon-based oils and fats.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산-메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산-메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 사용할 수 있다.Examples of the silicone-based oils and fats include polymethylsilicone, methylphenylsilicone, methylcyclopolysiloxane, octamethylpolysiloxane, decamethylpolysiloxane, dodecamethylcyclosiloxane, dimethylsiloxane-methylcetyloxysiloxane copolymer, dimethylsiloxane-methylsteoxysiloxane copolymer, and alkyl. Modified silicone oil, amino modified silicone oil, etc. can be used.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 사용할 수 있다.Perfluoropolyether etc. can be used as a fluorine-based fat or oil.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 사용할 수 있다.Animal or vegetable oils include avocado oil, almond oil, olive oil, sesame oil, rice bran oil, soybean oil, soybean oil, corn oil, rapeseed oil, almond oil, palm kernel oil, palm oil, castor oil, sunflower oil, grape seed oil. , Cottonseed oil, Palm oil, Cucumber nut oil, Wheat germ oil, Rice germ oil, Shea butter, Walnut colostrum oil, Marker demia nut oil, Meadow home oil, Egg yolk oil, Uji, Horse oil, Mink oil, Orange rape oil, Jojoba oil Animal or plant fats and oils such as candeler wax, carnava wax, liquid lanolin, and hardened castor oil may be used.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 사용할 수 있다.As the moisturizer, a water-soluble low molecular moisturizer, a fat-soluble molecular moisturizer, a water-soluble polymer, a fat-soluble polymer and the like can be used.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 사용할 수 있다.Water-soluble low molecular humectants include serine, glutamine, sorbitol, mannitol, pyrrolidone-sodium carboxylate, glycerin, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, ethylene glycol, polyethylene glycol B (polymerization degree n = 2 or more), polypropylene Glycol (polymerization degree n = 2 or more), polyglycerol B (polymerization degree n = 2 or more), lactic acid, lactic acid salt and the like can be used.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 사용할 수 있다.Cholesterol, cholesterol ester, etc. can be used as a fat-soluble low molecular humectant.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 사용할 수 있다.As the water-soluble polymer, carboxyvinyl polymer, polyasparaginate, tragacanth, xanthan gum, methyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, carboxymethyl cellulose, water soluble chitin, chitosan, dextrin, etc. may be used. Can be.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈-에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈-헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 사용할 수 있다.As the fat-soluble polymer, polyvinylpyrrolidone-eicosene copolymers, polyvinylpyrrolidone-hexadecene copolymers, nitrocellulose, dextrin fatty acid esters, polymer silicones and the like can be used.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 사용할 수 있다.As the emollient agent, long-chain acyl glutamic acid cholesteryl ester, hydroxystearic acid cholesterol, 12-hydroxystearic acid, stearic acid, rosin acid, lanolin fatty acid cholesteryl ester and the like can be used.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 사용할 수 있다.As the surfactant, nonionic surfactants, anionic surfactants, cationic surfactants, amphoteric surfactants, and the like can be used.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 사용할 수 있다.As the nonionic surfactant, self-emulsifying glycerin monostearate, propylene glycol fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, polyglycerol fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, POE (polyoxyethylene) sorbitan fatty acid ester, POE sorbitan fatty acid ester, POE Glycerin fatty acid ester, POE alkyl ether, POE fatty acid ester, POE hardened castor oil, POE castor oil, POE / POP (polyoxyethylene / polyoxypropylene) copolymer, POE / POP alkyl ether, polyether modified silicone, lauric acid Alkanolamide, alkylamine oxide, hydrogenated soybean phospholipid, etc. can be used.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 사용할 수 있다.Anionic surfactants include fatty acid soaps, alpha-acyl sulfonates, alkyl sulfonates, alkyl allyl sulfonates, alkyl naphthalene sulfonates, alkyl sulfates, POE alkyl ether sulfates, alkylamide sulfates, alkyl phosphates, POE alkyl phosphates, and alkylamide phosphates. , Alkyloylalkyl taurine salt, N-acylamino acid salt, POE alkyl ether carboxylate, alkyl sulfosuccinate, sodium alkyl sulfo acetate, acylated hydrolyzed collagen peptide salt, perfluoroalkyl phosphate ester and the like can be used. .

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 사용할 수 있다.As cationic surfactant, alkyl trimethylammonium chloride, stearyl trimethyl ammonium chloride, stearyl trimethyl ammonium chloride, cetostearyl trimethyl ammonium chloride, distearyl dimethyl ammonium chloride, stearyl dimethyl benzyl ammonium bromide, behenyl trimethyl ammonium chloride, chloride Benzalkonium, diethylaminoethyl stearate, dimethylaminopropyl stearate, lanolin derivatives, quaternary ammonium salts and the like can be used.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염 형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 사용할 수 있다.Examples of amphoteric surfactants include carboxybetaine type, amidebetaine type, sulfobetaine type, hydroxysulfobetaine type, amide sulfobetaine type, phosphobetaine type, aminocarboxylate type, imidazoline derivative type and amideamine type. An amphoteric surfactant etc. can be used.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠-스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 사용할 수 있다.Organic and inorganic pigments include silicic acid, silicic anhydride, magnesium silicate, talc, sericite, mica, kaolin, bengala, clay, bentonite, titanium film mica, bismuth oxychloride, zirconium oxide, magnesium oxide, zinc oxide, titanium oxide, aluminum oxide Inorganic pigments such as calcium sulfate, barium sulfate, magnesium sulfate, calcium carbonate, magnesium carbonate, iron oxide, ultramarine blue, chromium oxide, chromium hydroxide, calamine and composites thereof; Polyamide, polyester, polypropylene, polystyrene, polyurethane, vinyl resin, urea resin, phenol resin, fluorine resin, silicon resin, acrylic resin, melamine resin, epoxy resin, polycarbonate resin, divinylbenzene-styrene copolymer, Organic pigments, such as a silk powder, cellulose, CI pigment yellow, and CI pigment orange, and the composite pigment of these inorganic pigments and organic pigment, etc. can be used.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에 틸렌 등을 사용할 수 있다.As organic powder, Metal soaps, such as a calcium stearate; Alkyl phosphate metal salts such as sodium cetylinate, zinc lauryl acid and calcium laurate; Acylamino acid polyvalent metal salts such as N-lauroyl-beta-alanine calcium, N-lauroyl-beta-alanine zinc, and N-lauroylglycine calcium; Amide sulfonic acid polyvalent metal salts, such as N-lauroyl-taurine calcium and N-palmitoyl-taurine calcium; N-epsilon-lauroyl-L-lysine, N-epsilon-palmitolyzine, N-alpha-paratoylol nitin, N-alpha-lauroyl arginine, N-alpha-cured fatty acid acyl arginine -Acyl basic amino acid; N-acyl polypeptides, such as N-lauroyl glycyl glycine; Alpha-amino fatty acids such as alpha-aminocaprylic acid and alpha-aminolauric acid; Polyethylene, polypropylene, nylon, polymethyl methacrylate, polystyrene, divinylbenzene-styrene copolymer, ethylene tetrafluoride and the like can be used.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4‘-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2’-에틸헥실-1‘-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 사용할 수 있다.Examples of the ultraviolet absorber include paraaminobenzoic acid, ethyl paraaminobenzoate, amyl paraaminobenzoic acid, octyl paraaminobenzoate, ethylene glycol salicylate, phenyl salicylate, octyl salicylate, benzyl salicylate, butylphenyl salicylate, homomentyl salicylic acid and benzyl cinnamic acid. , Paramethoxy cinnamic acid-2-ethoxyethyl, paramethoxy cinnamic acid octyl, diparamethoxy cinnamic acid mono-2-ethylhexaneglyceryl, paramethoxy cinnamic acid isopropyl, diisopropyl diisopropyl cinnamic acid ester mixture, wuro Canonic acid, ethyl urokanoate, hydroxymethoxybenzophenone, hydroxymethoxybenzophenonesulfonic acid and salts thereof, dihydroxymethoxybenzophenone, dihydroxymethoxybenzophenone sodium sulfonate, dihydroxybenzophenone , Tetrahydroxybenzophenone, 4- tert -butyl-4'-methoxydibenzoylmethane, 2,4,6-trianilino- p- (carbo-2'-ethylhexyl-1'-oxy) -1 , 3,5-triazine, 2- (2-hi Such as hydroxy-5-methylphenyl) benzotriazole may be used.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 사용할 수 있다.As fungicides, hinokithiol, trichloric acid, trichlorohydroxydiphenyl ether, chlorhexidine gluconate, phenoxyethanol, resorcin, isopropylmethylphenol, azulene, salicylic acid, ginxitlionone, benzalkonium chloride, photosensitive Sodium No. 301, mononitroguicol sodium, undecylenic acid and the like can be used.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 사용할 수 있다.As the antioxidant, butylhydroxyanisole, propyl gallic acid, ellisorbic acid and the like can be used.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 사용할 수 있다.As a pH adjuster, citric acid, sodium citrate, malic acid, sodium malate, fmaric acid, sodium pramate, succinic acid, sodium succinate, sodium hydroxide, sodium dihydrogen phosphate and the like can be used.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 사용할 수 있다.As the alcohol, higher alcohols such as cetyl alcohol can be used.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 3 중량%로 배합된다.In addition, the compounding component which may be added other than this is not limited to this, Moreover, Although all said components can be mix | blended within the range which does not impair the objective and effect of this invention, Preferably it is 0.01-5 weight% with respect to a total weight, More Preferably it is compounded at 0.01 to 3 weight%.

본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.The cosmetic of the present invention may take the form of a solution, an emulsion, a viscous mixture, or the like.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.Ingredients included in the cosmetic composition of the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract as an active ingredient, for example, conventional auxiliary agents such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings. And carriers.

본 발명의 항산화, 미백, 항암 및 항균용 기능성 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등으로 제조될 수 있다.Functional cosmetic composition for antioxidant, whitening, anticancer and antimicrobial of the present invention can be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, emulsion, cream, lotion, pack, foundation, lotion, essence, hair cosmetic Or the like.

구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.Specifically, the cosmetic composition of the present invention skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence, nutrition essence, Formulations of packs, soaps, cleansing foams, cleansing lotions, cleansing creams, body lotions and body cleansers.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal carriers, vegetable fibers, waxes, paraffins, starches, tracantes, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide, etc. may be used as carrier components. Can be.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solvating or emulsifying agent is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the dosage form of the present invention is a suspension, liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following Examples and Experimental Examples.

실시예 1. 도인피 추출물의 제조Example 1. Preparation of Brine Extract

본 실험에 사용된 도인(Persicae semen)은 경북 영천시 (주)동우당 제약에서 한국산을 구입하여 물로 세척하고 음건 후 사용하였다. Persicae semen used in this experiment was purchased from Dongwoodang Pharmaceutical of Yeongcheon-si, Gyeongbuk, Korea, washed with water and used after drying.

실험재료는 도인 전체(BPS), 도인피(SPS, Shell of Persicae semen), 도인 껍질을 제외한 알맹이(NPS, Nibs of Persicae semen)로 각각 나누어 실험하였다.Experimental materials were divided into whole BPS, Shell of Persicaemen (SPS), and Nibs of Persicae semen (NPS).

1-1. 물 추출물 제조1-1. Water extract manufacturer

물 추출물은 전체 중량의 10배의 증류수를 가하여 100℃에서 3시간 환류냉각 추출하여 상등액과 침전물을 분리하고 3회 반복 추출하여 물 추출물을 수득한 후, 원심분리, 여과 및 농축하여 동결건조 후 냉장실에 보관하며 본 실험의 시료로 사용하였다(이하 BPSW, SPSW, NPSW라 명명함).Water extract is extracted by reflux cooling for 3 hours at 100 ℃ by distilled water of 10 times the total weight to separate the supernatant and precipitate, and extracted three times to obtain a water extract, and then centrifuged, filtered and concentrated to freeze-drying room It was stored in and used as a sample of this experiment (hereinafter referred to as BPSW, SPSW, NPSW).

1-2. 에탄올 추출물 제조1-2. Ethanol extract manufacturer

에탄올 추출물은 전체 중량의 10배의 80% 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 침지하고 추출물을 원심 분리하여 상등액과 침전물을 분리, 상등액을 취하는 과정을 3회 반복 하여 에탄올 추출물을 수득한 후, 여과 및 농축하여 동결건조 후 냉장실에 보관하며 본 실험의 시료로 사용하였다(이하 BPSE, SPSE, NPSE라 명명함).Ethanol extract was added to 80% ethanol, 10 times the total weight, soaked at room temperature for 24 hours, the extract was centrifuged to separate the supernatant and the precipitate, and the supernatant was taken three times to obtain an ethanol extract, followed by filtration and concentration. After freeze-drying it was stored in the refrigerator and used as a sample of this experiment (hereinafter referred to as BPSE, SPSE, NPSE).

실시예 2. 도인피 분획물 제조Example 2. Preparation of Brine Fraction

도인을 BPS, SPS, NPS로 각각 나누어 98% 메탄올로 추출하여 수득된 조추출물을 현탁하여 실리카 겔 컬럼에 로딩하였다. 전개용매로 클로로포름과 메탄올 혼합액(CHCl3 : MeOH = 100 : 1 내지 1 : 100)을 이용하여 클로로포름에 대한 메탄올의 비율을 점차 높여 유출하는 방법으로 각각 크로마토그래피를 실시하였다. SPS의 소분획은 F14까지 분획하였고, BPS의 소분획은 F16까지 분획하였으며, NPS의 소분획은 F15까지 분획을 나누어 시료로 사용하였으며, 미백활성이 강하게 나타난 SPS의 소분획은 F14까지 분획하였고, 이를 각각 감압농축하여 전개용매 조건 클로로포름 : 메탄올= 4 : 1 조건의 비율을 가지는 혼합용매를 전개용매로 사용하여 TLC를 실시하였다. 이중 가장 효과가 뛰어난 SPS의 분획별 전개양상을 도 1에 나타내었다.The crude extract obtained by dividing the phosphorus into BPS, SPS and NPS, respectively, extracted with 98% methanol was suspended and loaded on a silica gel column. Chromatography was performed by using a mixture of chloroform and methanol (CHCl 3 : MeOH = 100: 1 to 1: 100) as a developing solvent to gradually increase the ratio of methanol to chloroform and distilling them out. The small fraction of SPS was fractionated to F14, the small fraction of BPS was fractionated to F16, and the small fraction of NPS was fractionated to F15 as a sample. The small fraction of SPS with strong whitening activity was fractionated to F14. The solvents were concentrated under reduced pressure, and TLC was performed using a mixed solvent having a ratio of developing solvent conditions chloroform: methanol = 4: 1 as a developing solvent. The development pattern of each fraction of the most excellent SPS is shown in FIG.

실시예 3. 스킨로션의 제조Example 3. Preparation of Skin Lotion

3-1. 피부 저자극성 에멀젼 제조3-1. Skin hypoallergenic emulsion preparation

도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 첨가한 피부 저자극성 에멀젼을 조제하였다.The skin hypoallergenic emulsion was prepared by adding ethanol extracts of whole cabbage, skin and kernel.

하기 표 1 내지 4에 기재된 성분으로 A상, B상, C상 및 D상을 준비하였다. A상과 B상은 각각 80℃ 이상에서 가열, 용해시킨 후, 4,000rpm에서 3분간 유화하였다. 여기에 C상을 넣고 4,000rpm에서 8분간 유화하고 미리 유화시킨 D상과 각 도인 에탄올 추출물을 0.01%, 0.1%, 1%의 농도별로 넣어 4,000rpm으로 3분간 더 유화하였다. 이를 냉각, 교반하여 탈포하였다.A phase, B phase, C phase, and D phase were prepared by the components shown in Tables 1 to 4 below. Phase A and phase B were heated and dissolved at 80 ° C. or higher, respectively, and then emulsified at 4,000 rpm for 3 minutes. Phase C was added thereto, emulsified at 4,000 rpm for 8 minutes, and pre-emulsified phase D and each ethanol extract were added in 0.01%, 0.1%, and 1% concentrations, and further emulsified at 4,000 rpm for 3 minutes. It was degassed by cooling and stirring.

A상의 구성성분Component of Phase A 번호number 원료Raw material 중량(%)weight(%) 1One 스테아르 산Stearic acid 1.01.0 22 세탄올Cetanol 2.02.0 33 글리세릴 스테아레이트Glyceryl Stearate 0.50.5 44 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트Polyoxyethylene Sorbitan Monostearate 0.40.4 55 소르비 모노스테아레이트Sorbitan monostearate 0.30.3 66 소르비탄 에스테르 및 수크로스 에스테르Sorbitan esters and sucrose esters 22 77 글리세린glycerin 77 88 글리세린 트리옥타노에이트Glycerin Trioctanoate 1.51.5 99 액상 바세린Liquid petrolatum 44 1010 메틸 폴리시록산Methyl polysiloxane 0.30.3 1111 페녹시에탄올 메틸파라벤 부틸파라벤 에틸파라벤 프로필파라벤Phenoxyethanol Methylparaben Butylparaben Ethylparaben Propylparaben 0.30.3

B상의 구성성분Component of phase B 번호number 원료Raw material 중량(%)weight(%) 1One water 60.060.0 22 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 33 메틸 파라하이드록시벤조에이트Methyl parahydroxybenzoate 0.20.2

C상의 구성성분Component of C phase 번호number 원료Raw material 중량(%)weight(%) 1One water 19.6519.65 22 카르복시비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.150.15

D상의 구성성분Component of D phase 번호number 원료Raw material 중량(%)weight(%) 1One 바이오사카라이드 검-1Biosaccharide Gum-1 0.50.5

참고예 1. 기기 및 기구Reference Example 1. Equipment and Instruments

본 실험에 사용된 기기 및 기구는 다음과 같다. 분광 측정 시 UV/vis 분광광도계(Hitachi 200-10, Japan), ELISA 판독기(Bio rad, Co., Japan)를 사용하였으며, 웨스턴 블럿 실험에는 Mini-PROTEAN 3 Cell(Bio rad, Co., Japan), Mini Trans-Biot Electrophoretic Transfer Cell(Bio rad, Co., Japan) 등을 사용하였다.The equipment and apparatus used in this experiment are as follows. UV / vis spectrophotometer (Hitachi 200-10, Japan) and ELISA reader (Bio rad, Co., Japan) were used for the spectroscopic measurement, and Mini-PROTEAN 3 Cell (Bio rad, Co., Japan) was used for the Western blot experiment. , Mini Trans-Biot Electrophoretic Transfer Cell (Bio rad, Co., Japan) was used.

화장품의 피부 안전성 실험에는 Finn chamber on scanpor(Epitest Ltd., Finland)를 사용하였으며, 에멀전 안정성 실험에서는 점도측정기는Brookfield(USA)의 제품을 사용하였으며, 입자 크기 분석기는 Malvern(UK)사의 제품을 사용하였다.Finn chamber on scanpor (Epitest Ltd., Finland) was used for cosmetic safety test. Viscometer was used by Brookfield (USA) for emulsion stability test. Malvern (UK) was used for particle size analyzer. It was.

참고예 2. 실험시약Reference Example 2 Experimental Reagent

항산화 관련 실험에는 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl; Sigma chemical Co., USA), 피로갈롤(Pyrogallol; Sigma chemical Co., USA), 잔틴(Xanthine; Sigma chemical Co., USA), 잔틴옥시다아제(Xanthine oxidase; Sigma chemical Co., USA), BHA(Butylated hydroxyanisole; Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였으며, 미백활성실험에는 버섯유래 타이로시나아제(Mushroom tyrosinase; Sigma chemical Co., USA), L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenyl-alanine; Sigma chemical Co., USA), 코지 산(Kojic acid; Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였다. 컬럼 크로마토그래피(Column chromatography)에는 실리카겔(Silica gel; Merck Co., Germany), Sea send(Samchun pure chemical Co. Korea) 등을 사용하였다. 아질산염 소거 측정실험에서는 소디움 니트리트(Sodium nitrite; Junsei Chemical Co., Japan), 그리에스 시약(Griess reagent; Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였다. 항균실험에서는 GAM 반고체 배지(semisolid medium; Nissui Co., Japan), 혐기반응조( Anaerobic system envelopes; BD BBL., USA), DMEM(Gibco BRL Co., USA)를 사용하였다. Raw 264.7과 B16F10 배양 및 성장억제 측정에는 소태아혈청(Gibco BRL Co., USA), 페니실린/스트렙토마이신(Penicillin/Streptomycin; Gibco BRL Co., USA), 트립신(Trypsin; Gibco BRL Co., USA), PBS(Gibco BRL Co., USA), 트리판 블루 염색약(Trypan blue stain; Gibco BRL Co., USA), MMT(Thiazolyl Blue Tetrazolium; Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였다.Antioxidant experiments include DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl; Sigma chemical Co., USA), Pyrogallol; Sigma chemical Co., USA, Xanthine (Sigma chemical Co., USA), Xanthine Oxidase (Xanthine oxidase; Sigma chemical Co., USA), BHA (Butylated hydroxyanisole; Sigma chemical Co., USA) and the like were used for the whitening activity, mushroom-based tyrosinase (Sushma chemical Co., USA) ), L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenyl-alanine; Sigma chemical Co., USA), Koji acid (Sojma chemical Co., USA) and the like were used. For column chromatography, silica gel (Merck Co., Germany), Sea send (Samchun pure chemical Co. Korea) and the like were used. In the nitrite scavenging measurement experiment, sodium nitrite (Junsei Chemical Co., Japan), Griess reagent (Sigma chemical Co., USA) and the like were used. In the antimicrobial experiment, GAM semisolid medium (Nissui Co., Japan), anaerobic system envelopes (BD BBL., USA) and DMEM (Gibco BRL Co., USA) were used. Incubation of fetal bovine serum (Gibco BRL Co., USA), penicillin / Streptomycin (Gibco BRL Co., USA), trypsin; Gibco BRL Co., USA , PBS (Gibco BRL Co., USA), Trypan blue stain (Gibco BRL Co., USA), MMT (Thiazolyl Blue Tetrazolium; Sigma chemical Co., USA) and the like were used.

웨스턴 블럿에는 아크릴 아마이드(Acrylamide; Sigma chemical Co., USA), N,N‘-bis-methylene-acrylamide(Sigma chemical Co., USA), 글리신(Glysine; Junsei Chemical Co., Japan), SDS(Sodium dodecyl sulfate; Q biogene Co., USA), 베타-메캅토에탄올(β-mercaptoethanol; Sigma chemical Co., USA), 브롬페놀 블루(Bromphenol blue; Sigma chemical Co., USA), 쿠마시 블루(Coomassie blue; Sigma chemical Co., USA), 글리세롤(Glycerol; Junsei Chemical Co., Japan), 바이오차드 프로테인 어세이(Biorad protein assay ;Bio rad, Co., Japan), 나프톨 블루 블랙 용액(Naphthol blue black solution; Sigma chemical Co., USA), 폰슈S(Ponceau S ; Bio basic INC., USA), TEMED(Bio rad, Co., Japan), 암모니엄 퍼설패이트(Ammonium persulfate; Bio rad, Co., Japan), 탈지유(DIFCO Co., USA) 트윈 20(Tween 20 ; Sigma chemical Co., USA), ECL Advance detection kit(Amersham bioscience., USA) Amido black(Sigma chemical Co., USA), NC 페이퍼(Protran, USA), 3M 페이퍼(Whatman, USA), Fixer(부흥산업사, Korea), Developer(부흥산업사, Korea), Marker(Fermentas, USA) 등을 사용하였으며, 그 외의 시약들은 일등급 시약을 사용하였다.Western blots include acrylamide (Sigma chemical Co., USA), N, N'-bis-methylene-acrylamide (Sigma chemical Co., USA), glycine (Glysine; Junsei Chemical Co., Japan), SDS (Sodium dodecyl sulfate; Q biogene Co., USA), beta-mercaptoethanol (Sigma chemical Co., USA), bromphenol blue (Sigma chemical Co., USA), Coomassie blue Sigma chemical Co., USA), glycerol (Glycerol; Junsei Chemical Co., Japan), Biorad protein assay (Biorad, Co., Japan), Naphthol blue black solution; Sigma chemical Co., USA), Ponceau S; Bio basic INC., USA, TEMED (Bio rad, Co., Japan), Ammonium persulfate (Bio rad, Co., Japan) , Skim milk (DIFCO Co., USA) Tween 20 (Sigma chemical Co., USA), ECL Advance detection kit (Amersham bioscience., USA) Amido black (Sigma chemical Co., USA), NC paper (Protran, USA), 3M Pay (Whatman, USA), Fixer (revival Ind, Korea), Developer was used and the like (Ind revival, Korea), Marker (Fermentas, USA), and other reagents were used as first-class reagent.

실험예 1. 도인피 추출물의 항산화효과측정Experimental Example 1. Determination of antioxidant effect

1-1. 전자공여능 확인시험1-1. Electronic donation ability confirmation test

도인피 추출물의 전자공여능(electron donating ability: EDA)은 Blois의 방법을 변형하여 실시하였다(Blois MS, Nature, 26, pp1199-1120, 1958).Electron donating ability (EDA) of the basin extract was performed by modifying the method of Blois (Blois MS, Nature , 26 , pp1199-1120, 1958).

시료용액 2.0㎖에 0.2mM의 DPPH(α-α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 1.0㎖를 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 실험구와 대조구의 흡광도 감소율을 측정하여 확인하였다.1.0 mL of 0.2 mM DPPH (α-α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) was added to 2.0 mL of the sample solution, stirred for 30 minutes, and then absorbance was measured at 517 nm. The electron donating ability was confirmed by measuring the absorbance reduction rate of the experimental and control groups of the sample solution.

실험결과 도 2에 나타낸 바와 같이, 같은 조건하에서 1,000ppm의 BHA 처리군에서는 94%의 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타내었으며, 도인 껍질 열수 추출물(SPSW)은 89%, 에탄올 추출물(SPSE)은 87%의 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타내었다. 이를 통해 SPSW가 표준물질인 BHA와 유사한 전자 공여능을 보이는 것을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 2, under the same conditions, in the 1000 ppm BHA treatment group, 94% of DPPH radical scavenging activity was observed, and 89% of ethanol extract (SPSW) and 87% of ethanol extract (SPSE) were treated. DPPH radical scavenging activity was shown. Through this, the SPSW showed an electron donating ability similar to that of the BHA standard.

1-2. SOD 유사활성 검증 시험1-2. SOD-like activity verification test

도인의 산소종(O2 -) 산화억제작용을 알아보기 위해 산소종과 반응하여 갈변물질을 나타내는 피로갈롤 자동산화반응을 측정하여 SOD유사활성을 측정하였다(C. Kiug, J. Rabani and I. Fridovich, J. Bioi. Chem., 247, pp4839-4842, 1972).Oxygen species degrees (O 2 -) and the oxygen species react with substances showing a browning pyrogallol SOD-like activity by measuring the auto-oxidation reaction to determine their inhibitory oxidation was measured (Kiug C., J. and I. Rabani Fridovich, J. Bioi. Chem., 247 , pp 4839-4842, 1972).

각 시료용액 0.2㎖에 Tris-HCl의 완충용액(50mM Tris+10mM EDTA, pH 8.5) 2.6㎖와 7.2mM 피로갈롤(pyrogallol) 0.2㎖ 가하여 25℃에서 10분간 반응시킨 후 1.0N HCl 0.1㎖를 가하여 반응을 정지시키고 반응액 중 산화된 피로갈롤(pyrogallol)의 양을 420nm에서 측정하였다. SOD 유사활성은 시료용액의 실험구와 대조구의 흡광도 감소율로 나타내었다.To 0.2 ml of each sample solution, 2.6 ml of Tris-HCl buffer solution (50 mM Tris + 10 mM EDTA, pH 8.5) and 0.2 ml of 7.2 mM pyrogallol were added and reacted at 25 ° C. for 10 minutes, and then 0.1 N 1.0N HCl was added thereto. The reaction was stopped and the amount of oxidized pyrogallol in the reaction solution was measured at 420 nm. SOD-like activity was expressed by the decrease in absorbance of the experimental and control groups of the sample solution.

도 3에서 보이는 바와 같이, 같은 실험 조건하에서 1,000ppm의 BHA는 80%의 SOD유사활성을 나타내었고, SPSW에서는 32%, SPSE에서는 13%의 SOD유사활성을 나타내어 BHA에 비해 낮은 활성을 나타내었다. 그러나 10,000ppm에서는 BHA가 89%의 활성을 나타내는데 비해 SPSW은 93%, SPSE은 91%의 활성을 나타내어 도인 껍질 추출물은 고농도에서 높은 SOD유사활성을 나타내는 것을 알 수 있었다.As shown in FIG. 3, under the same experimental conditions, 1,000 ppm of BHA showed 80% SOD-like activity, 32% in SPSW, and 13% in SPSE, showing lower activity than BHA. However, at 10,000 ppm, BHA showed 89% activity, while SPSW showed 93% activity and SPSE showed 91% activity.

1-3. 잔틴옥시다아제(xanthine oxidase)저해 활성 측정1-3. Determination of xanthine oxidase inhibitory activity

잔틴 옥시다아제 저해는 유리라디칼의 생성억제를 통해 생물학적으로 중요한 의미를 가진다(S. Marklund, G. Marklund, Eur. J. Biochem. 47, pp468-474, 1974). 도인 추출물의 잔틴옥시다아제 저해활성정도를 확인하기 위하여 하기와 같은 실험을 실시하였다.Xanthine oxidase inhibition has a biological significance through the inhibition of free radical production (S. Marklund, G. Marklund, Eur. J. Biochem. 47, pp468-474, 1974). In order to determine the degree of xanthine oxidase inhibitory activity of the extracts was performed as follows.

0.1M 포스패이트 버퍼(pH 7.5) 0.6mL에 도인 추출물 0.1mL과 1mM의 잔틴 0.2mL를 넣었다. 0.2Unit/mL의 잔틴옥시다아제를 0.2mL를 넣어 37℃에서 5분간 반응시킨 후, 20% TCA를 넣어 반응을 종료하였다. 이를 원심분리하여 단백질을 제거한 후, 반응액 중에 생성된 요산을 292 nm에서 흡광도로 측정하였다. 잔틴 옥시다아제(Xanthine oxidase) 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율인 하기의 수학식 1을 이용하여 계산하였다.In 0.6 mL of 0.1 M phosphate buffer (pH 7.5), 0.1 mL of phosphine extract and 0.2 mL of 1 mM xanthine were added. 0.2 mL of 0.2 Unit / mL xanthine oxidase was added and reacted at 37 ° C. for 5 minutes, and then 20% TCA was added to terminate the reaction. After centrifugation to remove the protein, the uric acid generated in the reaction solution was measured by absorbance at 292 nm. Xanthine oxidase inhibitory activity was calculated using the following equation (1) which is the absorbance decrease rate of the addition and no addition of the sample solution.

잔틴 옥시다아제 저해율(%) = {(대조군 OD292 - 시료 OD292) / 대조군 OD292} × 100Xanthine oxidase inhibition rate (%) = {(control OD 292 -sample OD 292 ) / control OD 292 } × 100

실험결과 도 4에 나타낸 바와 같이, 도인 추출물의 잔틴 옥시다아제 저해활성은 BPSW의 경우는 저해활성을 전혀 나타내지 않았으나, 1,000ppm에서 BPSE은 50%, SPSW은 46%, SPSE은 62%, NPSW은 9%, NPSE은 18%의 잔틴 옥시다아제 저해활성을 나타내었다. 같은 조건하에서 BHA 1,000ppm은 27%의 효과를 나타내었으므로 도인 추출물이 BHA에 비하여 우수한 잔틴 옥시다아제 저해활성을 나타냄을 알 수 있었다.As shown in FIG. 4, the xanthine oxidase inhibitory activity of the cabbage extract did not show any inhibitory activity in the case of BPSW, but at 1000 ppm, BPSE 50%, SPSW 46%, SPSE 62%, and NPSW 9%. , NPSE showed 18% xanthine oxidase inhibitory activity. Under the same conditions, 1,000 ppm of BHA exhibited 27% of effect, indicating that the extract of Jain showed superior xanthine oxidase inhibitory activity compared to BHA.

1-4. 아질산염 소거능 측정1-4. Nitrite Scavenging Activity

아질산염 소거능 측정은 Gray와 Dugan(J. Grayand, Jr. L. R. Dugan, J. Food. Sci., 40, pp981-985, 1975)의 방법으로 측정하였다. 시료 1mL과 1mM NaNO2 1mL에 0.1N HCl로 pH 1.2로 보정하여 반응용액의 부피를 10mL로 하였다. 이 반응용액을 37℃에서 1시간 반응한 다음 각 반응액 1mL을 취하여 2% 초산용액 5mL로 반응정지 시킨 후, 그리에스 시약 0.4mL을 첨가하였다. 이를 교반 후, 실온에서 15분간 방치하고 520 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염양을 측정하였다. 대조군는 그리에스 시약대신 증류수를 첨가하여 측정하였으며, 아질산염 소거능은 대조구에 대한 시료구의 흡광도의 감소율로 나타내었다.Nitrite scavenging activity was measured by Gray and Dugan (J. Grayand, Jr. LR Dugan, J. Food. Sci., 40, pp981-985, 1975). 1 mL of the sample and 1 mL of 1 mM NaNO 2 were calibrated to pH 1.2 with 0.1 N HCl to adjust the volume of the reaction solution to 10 mL. After the reaction solution was reacted at 37 ° C. for 1 hour, 1 mL of each reaction solution was taken and the reaction was stopped with 5 mL of 2% acetic acid solution, and 0.4 mL of Gries reagent was added thereto. After stirring, the mixture was left at room temperature for 15 minutes and the absorbance was measured at 520 nm to determine the amount of remaining nitrite. The control group was measured by adding distilled water instead of the Gries reagent, and the nitrite scavenging ability was expressed as a decrease in the absorbance of the sample sphere relative to the control.

실험결과 도 5에 보이는 바와 같이, 양성대조군인 BHA의 1,000ppm 처리군은 76%의 아질산염 소거능을 보였다. 같은 조건하에서 BPSW는 27%, SPSW는 92%, SPSE는 96%, NPSW는 15%, NPSE는 8%의 아질산염 소거능을 나타내어 도인 껍질 추출물이 다른 추출물에 비해 아질산염 소거능이 우수함을 알 수 있었으며, 표준물질인 BHA에 비해 아질산염소거능이 우수하였다.As shown in FIG. 5, the 1,000 ppm treated group of BHA, a positive control group, showed 76% nitrite scavenging ability. Under the same conditions, the nitrite scavenging ability was 27% in BPSW, 92% in SPSW, 96% in SPSE, 15% in NPSW, and 8% in NPSE. Nitrite scavenging ability was superior to BHA.

상기의 1-1 내지 1-4에 기재된 실험결과에 나타난 바와 같이, 도인 추출물, 특히 도인껍질(SPS) 추출물은 다른 추출물에 비하여 우수한 항산화능을 가지고 있었으며, 현재 표준물질로 사용되는 BHA와 비슷한 항산화능을 가지고 있어 안전하고 효과적인 항산화용 조성물로 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.As shown in the experimental results described in the above 1-1 to 1-4, the extracts of Doin, in particular, the extract of Doin bark (SPS) had an excellent antioxidant capacity compared to other extracts, and similar to the BHA currently used as a standard antioxidant It has been confirmed that it can be used as a safe and effective antioxidant composition.

실험예 2. 미백활성 측정Experimental Example 2 Measurement of Whitening Activity

미백활성을 측정하기 위해, 멜라닌 생합성에 관여하는 타이로시나제의 억제정도를 아로카 등의 문헌(Aroca et al., J. Biol. Chem., 268(34), p25650-25655, 1993) 및 토미타 등의 문헌(Tomita et al., J. Antibiot., 43(12), pp1601-1604, 1990)에 기재된 활성실험법을 참조하여 실험을 실시하였다.In order to determine the whitening activity, the degree of inhibition of tyrosinase involved in melanin biosynthesis is described by Aroca et al., J. Biol. Chem ., 268 (34) , p25650-25655, 1993; The experiment was carried out with reference to the activity test described in Tomita et al. (Tomita et al., J. Antibiot., 43 (12) , pp1601-1604, 1990).

본 실험예에서는 실시예 1의 도인 추출물 및 실시예 2의 도인 분획물의 미백 활성을 확인하기 위하여 멜라닌 생성 유발과 연관된 효소인 타이로시나제에 대한 억제효과를 알아보았다. 10 mM L-도파 0.2㎖(67 mM 인산 완충액 pH 6.8에 녹임)와 시료용액 0.1 ㎖의 혼합액을 96-웰 마이크로플레이트에 넣고 타이로시나제(110 U/㎖) 0.2 ㎖를 첨가하였다. 25℃에서 2분간 배양한 후, 생성된 도파 크롬의 양을 분광광도계(precision microplate reader; Molecular Devices E09090)를 이용하여 492 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 타이로시나제 저해효과는 마쯔다 등의 문헌(Matsuda, et al., Biol. Pharm. Bull., 19(1), pp153-153, 1996)을 참고하여 하기 수학식 2를 사용하였고, 시료를 가하지 않는 대조군을 기준으로 하였다.In this experimental example, the inhibitory effect on tyrosinase, an enzyme associated with melanogenesis induction, was examined in order to confirm the whitening activity of the extract of Doin and the Doin fraction of Example 2. A mixture of 0.2 ml of 10 mM L-dopa (dissolved in 67 mM phosphate buffer pH 6.8) and 0.1 ml of sample solution was placed in a 96-well microplate and 0.2 ml of tyrosinase (110 U / ml) was added. After 2 minutes of incubation at 25 ° C., the absorbance at 492 nm was measured using a precision microplate reader (Molecular Devices E09090). Tyrosinase inhibitory effect was used in reference to Matsuda et al. (Matsuda, et al., Biol. Pharm. Bull. , 19 (1) , pp153-153, 1996), and the following equation 2 was used. Based on the control group.

타이로시나제 저해활성(%) = {(대조군 OD492 - 시료 OD492) / 대조군 OD492} × 100Tyrosinase Inhibitory Activity (%) = {(Control OD 492 -Sample OD 492 ) / Control OD 492 } × 100

실험결과, 도 6에 보이는 바와 같이 실시예 1의 SPSW 및 NPSW의 10,000ppm에서 60% 이상의 저해활성을 나타내었다. 또한 SPSE 및 NPSE의 10,000ppm에서 98% 이상의 타이로시나제 저해활성을 나타내어 탁월한 미백효과를 나타냄을 알 수 있었다. 같은 실험조건하에서 표준물질로 사용한 코직산은 1,000ppm에서 99%의 타이로시나제 저해활성을 나타내었으며, 이를 통해서 도인이 코직산과 근접한 미백효과를 나타냄을 알 수 있었다.As a result, as shown in Figure 6, the SPSW and NPSW of Example 1 showed an inhibitory activity of 60% or more at 10,000ppm. In addition, the tyrosinase inhibitory activity was 98% or more at 10,000 ppm of SPSE and NPSE, indicating an excellent whitening effect. Under the same experimental conditions, kojic acid used as a standard showed 99% tyrosinase inhibitory activity at 1,000 ppm, indicating that white phosphorus showed a whitening effect close to kojic acid.

또한 실시예 2의 도인 분획물의 타이로시나제 저해활성을 통해 미백효과를 측정한 결과, 도 7에 보이는 바와 같이 BPS의 1,000ppm의 농도에서 분획 2번에서 60% 이상의 타이로시나제 저해활성을 나타내었으며, 도 8에 보이는 바와 같이 SPS의 분획 4번과 7번에서 90% 이상의 타이로시나제 저해활성을 나타내었고, 도 9에 보이는 바와 같이 NPS의 분획 3번과 5번에서 60% 이상의 타이로시나제 저해활성을 나타내었다. 따라서 도인껍질의 분획물이 탁월한 미백효과를 나타냄을 확인하였고, 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.In addition, as a result of measuring the whitening effect through the tyrosinase inhibitory activity of the deceased fraction of Example 2, as shown in Figure 7 at 60ppm or more tyrosinase inhibitory activity in fraction 2 at a concentration of 1,000 ppm of BPS As shown in FIG. 8, tyrosinase inhibitory activity of 90% or more was observed in fractions 4 and 7 of SPS, and as shown in FIG. 9, 60% or more tyrosinase in fractions 3 and 5 of NPS. Lossinase inhibitory activity was shown. Therefore, it was confirmed that the fraction of the phosphorus peel exhibits an excellent whitening effect, and can be usefully used as a cosmetic composition.

실험예 3. 항염 효과 측정Experimental Example 3. Anti-inflammatory effect measurement

3-1. NO(Nitric oxide) 저해활성 측정3-1. Measurement of NO (Nitric oxide) Inhibitory Activity

NO 저해활성은 Ding(A. J. Ding, C. F. Nathan, and D. J. Stuehr, J. Immunol., 144, pp2407-2413, 1988) 등의 방법을 통하여 다음과 같이 실험하였다. 쥐의 대식세포인 Raw 264.7 세포주에 LPS(lipopolysaccharide)와 도인 추출물을 각각 처리하고, 12시간마다 NO양을 측정하였다. 세포 배양액 중에 존재하는 NO2-를 그리에스 시약을 이용하여 측정하였다. 세포배양 상등액 100㎕와 그리에스 시약 100㎕을 혼합하여 반응하여 10분 동안 반응시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. NO2-의 양은 NaNO2의 표준곡선을 이용하여 정량하였다.NO inhibitory activity was tested as follows by Ding (AJ Ding, CF Nathan, and DJ Stuehr, J. Immunol., 144, pp2407-2413, 1988). Rat macrophage Raw 264.7 cell line was treated with LPS (lipopolysaccharide) and Doin extract, respectively, and the amount of NO was measured every 12 hours. NO 2- present in the cell culture was measured using a Gries reagent. 100 μl of the cell culture supernatant and 100 μl of the Gries reagent were mixed and reacted for 10 minutes, and the absorbance was measured at 540 nm. The amount of NO 2 -was quantified using a standard curve of NaNO 2 .

실험 결과 도 10 내지 15에 나타낸 바와 같이, LPS 처리시 대조군에 비교하여 NO 생성량이 증가하였다. BPSE의 경우 모든 농도에서 24시간과 36시간 처리시 NO의 생성을 저해하였고, SPSE 추출물의 경우 5,000ppm과 10,000ppm의 농도에서 24시간과 36시간에서 NO의 생성을 저해하였다. 그러나 BPSW과 SPSW, NPSE 및 NPSW에서는 유의한 NO의 생성저해가 나타나지 않았다. 이를 통해 도인 전체와 껍질 에탄올 추출물이 NO생성을 저해함을 확인할 수 있었다.Experimental results As shown in Figures 10 to 15, the amount of NO production increased compared to the control when LPS treatment. BPSE inhibited NO production at 24 and 36 hours of treatment at all concentrations, and SPSE extract inhibited NO production at 24 and 36 hours at 5,000 and 10,000 ppm concentrations. However, there was no significant NO inhibition in BPSW, SPSW, NPSE and NPSW. Through this, it was confirmed that the whole cabbage and the bark ethanol extract inhibited NO production.

3-2. 세포 생존률 측정3-2. Cell viability measurement

BPSE 및 SPSE의 처리시 LPS로 유도된 NO의 생성 감소가 추출물의 세포독성으로 인한 세포농도의 저하에서 기인하는 것인지 관찰하기 위해 MTT 어세이를 통해 세포의 생존율을 Carmichael(J. Carmichael, W. G. Degraff et al.., Cancer Res., 47, pp936, 1987) 등의 MTT 어세이를 통해 평가하였다. 96 웰 플래이트에 5×104 세포/웰로 분주한 후 도인 추출물을 농도별로 처치하였다. 배양 후 생존세포에 MTT(5 mg/mL)을 4시간 처리한 후 배지를 제거하고 생성된 포르마잔 결정을 DMSO에 녹여 그 흡광도를 540 nm에서 측정하였다. 대조군에 대한 백분율로 대식세포의 생존률을 나타내었다.In order to observe whether the decrease in production of LPS-induced NO in the treatment of BPSE and SPSE was due to a decrease in cell concentration due to the cytotoxicity of the extract, the MTT assay was used to determine the viability of cells by Carmichael (J. Carmichael, WG Degraff et. al .., Cancer Res. , 47 , pp936, 1987). Doin extracts were treated at different concentrations after dispensing 5 × 10 4 cells / well into 96 well plates. After culturing, the living cells were treated with MTT (5 mg / mL) for 4 hours, the medium was removed, and the resulting formazan crystal was dissolved in DMSO, and its absorbance was measured at 540 nm. The survival rate of macrophages was expressed as a percentage of the control group.

실험결과 도 16과 같이 BPSE의 경우 세포독성이 나타나 NO 생성 저해활성은 세포독성으로 인한 것임을 확인할 수 있었다. 그러나 도 17에 보이는 바와 같이, SPSE의 경우 대조군에 비해 세포독성이 나타나지 않아 NO 생성자체를 저해한 것을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment as shown in Figure 16 BPSE cytotoxicity was shown that the NO production inhibitory activity was due to cytotoxicity. However, as shown in FIG. 17, the SPSE was found to inhibit cytotoxicity as compared to the control group, thus inhibiting NO production.

3-3. iNOS 발현 측정3-3. iNOS expression measurement

염증 관련된 NO 생성 저해기작에 대한 iNOS 단백질의 관련성을 조사하기 위해 Towbin(J. Towbin, T. Staehlin and J. Gordon, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76, pp4350, 1979) 등의 웨스턴 블럿(Western blot)을 이용하여 세포질 내에서의 iNOS 단백질의 발현량을 조사하였다.Western blots such as Towbin (J. Towbin, T. Staehlin and J. Gordon, Proc. Natl. Acad. Sci . USA, 76, pp4350, 1979) to investigate the relevance of iNOS proteins to inflammation-related NO production inhibition mechanisms . Western blot was used to investigate the expression level of iNOS protein in the cytoplasm.

Raw 264.7 세포에 LPS와 각 농도의 도인 추출물을 처리한 후 용해 버퍼를 이용하여 세포를 용해하여 15,000 rpm으로 15분간 원심 분리하여 단백질을 얻었다. 단백질의 농도는 Bradford 방법(Bradford M. Anal. Biochem., 72, pp248-254, 1976)으로 정량하였다. 얻어진 단백질은 SDS-폴리아크릴아마이드 겔을 이용하여 전기영동 시킨 후, 니트로셀룰로오스 막으로 트랜스 블롯팅하였다. iNOS 다클론항체를 이용하여 막에 처리한 후 홀스라디쉬 퍼옥사이드(horseradish peroxide)가 부착되어 있는 항-토끼 IgG를 가하여 ECL 법(Enhanced chemiluminescence detection)을 이용하여 iNOS의 발현을 측정하였다.After processing LPS and extracts of each concentration in Raw 264.7 cells, the cells were lysed using lysis buffer and centrifuged at 15,000 rpm for 15 minutes to obtain proteins. Protein concentrations were quantified by Bradford method (Bradford M. Anal. Biochem., 72, pp248-254, 1976). The obtained protein was electrophoresed using SDS-polyacrylamide gel, and then blotted to nitrocellulose membrane. After treating the membrane with iNOS polyclonal antibody, anti-rabbit IgG attached with horseradish peroxide was added, and the expression of iNOS was measured by ECL method (Enhanced chemiluminescence detection).

실험결과 도 18에 나타낸 바와 같이 LPS 단독 처리 시에는 iNOS 다량의 단백 질이 유도되었으나, SPSE를 5,000ppm과 10,000ppm을 처치한 실험군에서는 iNOS의 발현양이 현저히 줄어들었다. 이를 통해 도인 껍질 에탄올 추출물이 세포독성 없이 NO 생성을 억제하는 동시에, iNOS의 발현량을 감소하였음을 확인함으로써 탁월한 항염 효과를 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 18, a large amount of iNOS protein was induced when LPS alone was treated, but the expression level of iNOS was significantly decreased in the experimental group treated with 5,000 ppm and 10,000 ppm of SPSE. This resulted in an excellent anti-inflammatory effect by confirming that the ethanol extract of cabbage bark inhibited NO production without cytotoxicity and decreased the expression level of iNOS.

실험예 4. 생육 저해환(Clear zone) 측정 방법에 의한 항균력 측정Experimental Example 4. Measurement of antimicrobial activity by the growth zone measurement method (Clear zone)

4-1. 생육 저해활성 측정4-1. Growth inhibitory activity measurement

생육저해활성은 페이퍼 디스크(paper disc)법으로 측정하였다. 우선 평판 배지에 배양된 각 균주를 접종 루프로 한번(1 백금이량) 취해서 액체 배지 10 ㎖에서 18 내지 24시간 배양하여 활성화시킨 후, 다시 액체 배지 10 ㎖에 상기 액체 배지에서 배양된 균액을 0.1 ㎖ 접종하여 3 내지 6시간 본 배양한 후, 평판배지 1개당 균액을 약 1×107 세포/배지가 되게 접종하여 멸균 면봉으로 균일하게 도말하였다. 멸균된 필터 페이퍼 디스크(filter paper disc; Φ 8 mm)를 고체 평판배지에 올려놓은 다음 0.05 ㎖/디스크가 되도록 시료를 농도별로 흡수시켜 35℃에서 18 내지 24시간 배양하여 디스크(disc) 주위의 투명환(cm)의 직경을 측정하였다.Growth inhibition activity was measured by a paper disc method. First, each strain cultured in a plate medium was taken once (in one platinum equivalent) into an inoculation loop, and activated by incubating for 18 to 24 hours in 10 mL of liquid medium, and then the bacteria cultured in the above liquid medium in 10 mL of liquid medium were added. After incubation with inoculation for 3 to 6 hours, the bacteria were inoculated to approximately 1 × 10 7 cells / medium per plate medium and evenly plated with a sterile swab. Place the sterilized filter paper disc (Φ 8 mm) on a solid plate medium, absorb the sample by concentration to 0.05 ㎖ / disc and incubate at 35 ℃ for 18 to 24 hours to clear around the disc (disc) The diameter of the ring (cm) was measured.

실험결과, 도인 껍질 에탄올 추출물을 제외한 다른 추출물에서는 항균력이 나타나지 않았으며, 도 19에 보이는 바와 같이, 도인 껍질 에탄올 추출물 5mg/disc 처리군에서 생육저해환(clear zone)을 확인할 수 있었다.As a result, other extracts except for the extract of ethanol bark did not show antimicrobial activity, and as shown in FIG. 19, the inhibition of growth (clear zone) was confirmed in the ethanol extract 5mg / disc treated group.

4-2. 생육 저해도 측정4-2. Growth inhibition measurement

생육 저해환 실험을 통해 항균력을 확인한 도인 추출물의 생육저해도를 확인 하기 위해 도인 추출물을 액체 GAM 배지에 5mg/mL로 첨가하여 준비하여 균 현탁액을 각각 0.1mL씩 접종하고 37℃의 혐기성상태에서 48시간까지 배양하였다. 이를 12시간 간격으로 600nm에서 흡광도를 측정하여 균 증식을 여부를 확인하였다.In order to check the growth inhibition of Doin extract, which confirmed antibacterial activity through growth inhibition test, prepared Doin extract was added to the liquid GAM medium at 5mg / mL, inoculated with 0.1mL each of the bacterial suspension, and incubated at anaerobic condition at 37 ° C. Incubate until time. This was measured by absorbance at 600nm every 12 hours to determine whether the bacteria growth.

실험결과, 도 20에 보이는 바와 같이, 5mg/mL의 BPSW의 경우 24시간부터 생육 저해도가 나타났으며, SPSE의 경우 처리 초기부터 생육저해활성을 확인하여, 다른 추출물에 비해 프로피오니박테륨 아그네스에 대해 우수한 항균력을 나타내었다.As shown in FIG. 20, 5 mg / mL BPSW showed growth inhibition from 24 hours, and SPSE confirmed growth inhibition activity from the beginning of treatment, compared to other extracts of propionibacterium agnes. It showed excellent antimicrobial activity against.

실험예 5. 피부안정성 측정Experimental Example 5. Measurement of Skin Stability

화장품은 매일 사용하는 제품으로 피부에 대한 자극이 생기지 않아야한다. 본 발명에 따른 도인 추출물에 대하여 피부 자극 정도를 알아보기 위하여, 도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 실시예 3의 에멀전의 안전성 실험을 위해 패취 테스트를 실시하였다.Cosmetics are products used daily and should not cause irritation to the skin. In order to determine the degree of skin irritation with respect to the extract of the cabbage in accordance with the present invention, a patch test was conducted for the safety experiment of the emulsion of Example 3 containing each of the cabbage, ethanol extract of the cabbage.

피부 첩포시험을 실시하였다. 피검자는 20 내지 50세의 시험 부위에 피부 질환이 없는 사람으로 선정하였으며 총 20명에게 실시하였다. 첩포 부위인 상박부를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 후, 핀챔버(fin chamber)를 사용하여 바셀린을 블랭크로, 실시예 3의 에멀젼을 0.02 g씩 가하여 인체 상박부에 24시간 첩포하고, 첩포 제거 후 1시간 이내에 피부반응을 검사하고, 다음날(48시간 후) 다시 검사하였다. 피부 반응 판정은 하기 표 5의 국제 접촉피부염 연구위원회(International Contact Dermatitis Research Group: ICDRG)의 기준으로 판정하여 표 6에 결과를 나타내었으며, 실시예 3에 따른 화장료에 대한 피부 첩포시험 결과사진을 하기 도 21에 나타내었다.A skin patch test was performed. The subject was selected as a person without skin disease at the test site of 20 to 50 years old and was performed on a total of 20 people. After wiping the upper arm of the patch area with 70% ethanol and drying, petroleum jelly was added to the human upper arm for 24 hours by adding petroleum jelly to the blank using a fin chamber, and the emulsion of Example 3 by 0.02 g. The skin reaction was examined within 1 hour and again the next day (after 48 hours). The skin reaction was determined based on the criteria of the International Contact Dermatitis Research Group (ICDRG) of Table 5, and the results are shown in Table 6. The skin patch test results of the cosmetics according to Example 3 were taken. It is shown in FIG.

피부반응Skin reaction 점수score 반응의 정도Degree of reaction ?? 1One 미약한 양성 반응 (홍반)Weak positive reaction (erythema) ++ 22 양성 반응 (홍반)Positive reaction (erythema) ++++ 33 강한 양성 반응 (홍반, 부종)Strong positive reaction (erythema, edema) ++++++ 44 심한 양성 반응 (홍반, 부종, 수포)Severe positive reactions (erythema, edema, blisters) -- 00 반응없음no response

시료sample control (0%)control (0%) BPSE 0.01BPSE 0.01 BPSE 0.1BPSE 0.1 BPSE 1BPSE 1 SPSE 0.01SPSE 0.01 SPSE 0.1SPSE 0.1 SPSE 1SPSE 1 NPSE 0.01NPSE 0.01 NPSE 0.1NPSE 0.1 NPSE 1NPSE 1 피부반응Skin reaction -*-* -- -- -- -- -- -- -- -- --

실험결과, 도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 실시예 3의 에멀젼은 상기 표 6과 같이 건강한 20명의 사람피부에서 자극성이 나타나지 않았으며, 도 21에 보이는 바와 같이 패취를 붙인 등 부위의 사진에서도 자극이 나타나지 않아 피부에 자극이 없는 안전한 화장료 조성물로 판단되었다.As a result, the emulsion of Example 3 containing the ethanol extract of the whole cabbage, skin, and kernels did not show irritation in 20 healthy human skin as shown in Table 6 above, and the dorsal part with patch as shown in FIG. 21. The irritation did not appear in the photo of the skin was judged to be a safe cosmetic composition without irritation.

실험예 6. 일반적 보존실험Experimental Example 6. General Preservation Experiment

화장품의 안정성은 화장품의 기능을 발휘하기 위하여 화학적, 물리적 변화가 일어나지 않아야 함을 말하며, 다음과 같은 다양한 안정성 실험을 통해 검증할 수 있다. 변색, 퇴색, 변취, 오염, 결정 석출 등의 화학적 변화와 분리, 침전, 응집, 발분, 발한, 겔화, 줄 얼룩, 증발, 고화, 연화 등의 물리적 변화를 일으키지 않아야 한다. 위와 같은 현상은 사용성에 큰 영향을 줄 뿐만 아니라 화장품이 갖는 미적외관, 이미지의 손실에도 영향을 준다(J.Y.Yoo, S.H.Park, et al., Kor. J. Dermatol. 41(9), pp1136-1141, 2003). 이에 도인 에탄올 추출물을 에멀젼에 응용하여 그 안정성과 안전성을 관찰하여 추후 화장품 산업에 적용가능성을 살펴보았다.The stability of cosmetics means that chemical and physical changes should not occur in order to function cosmetics, and can be verified through various stability experiments as follows. No chemical changes such as discoloration, discoloration, odor, contamination, crystal precipitation, and physical changes such as separation, precipitation, flocculation, powdering, sweating, gelling, streaking, evaporation, solidification and softening should occur. This phenomenon not only greatly affects usability but also affects aesthetics and loss of image of cosmetics (JYYoo, SHPark, et al., Kor. J. Dermatol. 41 (9), pp1136-1141, 2003 ). In this regard, the ethanol extract was applied to the emulsion to observe its stability and safety to see if it can be applied to the cosmetic industry in the future.

6-1. 온도안정성 측정6-1. Temperature stability measurement

온도 안정성실험은 화장품을 일정한 온도조건에 방치하여 시간에 따른 상태변화에 대해 관찰하는 것이다. 도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼을 일정한 온도 조건에 방치하여 시간에 따른 변화를 관찰하였다. 설정온도는 0℃, 25℃, 40℃로 하였고, 제조 직후부터 일주일 간격으로 8주 동안 관찰하였다.Temperature stability test is to observe the state change over time by leaving the cosmetics in a certain temperature condition. The whole, skin and kernels of the cabbage, each emulsion containing ethanol extract was left at a constant temperature conditions to observe the change over time. The set temperatures were 0 ° C., 25 ° C. and 40 ° C., and were observed for 8 weeks at a weekly interval immediately after preparation.

실험 결과 하기 표 7에 보이는 바와 같이 도인 전체, 껍질, 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼 모두 0℃, 25℃, 40℃ 온도 조건에서 변색, 변취, 퇴색, 오염 등의 화학적 변화나 분리, 침전, 응집, 겔화 균열 등의 물리적 변화가 나타나지 않아 안정한 조성물임을 확인할 수 있었다.Experimental results As shown in Table 7 below, all of the humus, shells, and emulsions containing ethanol extracts were subjected to chemical changes such as discoloration, discoloration, discoloration, and contamination at 0 ° C, 25 ° C, and 40 ° C. Physical changes such as gelation cracks did not appear to confirm that it is a stable composition.

1주1 week 2주2 weeks 3주3 weeks 4주4 Weeks 5주5 Weeks 6주6 Weeks 7주Week 7 8주8 Weeks 0℃0 ℃ 25℃25 ℃ 40℃40 ℃ * ○ : 안정함 × : 불안정함* ○: Stable ×: Unstable

6-2. 광안정성 측정6-2. Light stability measurement

화장품은 주로 가정, 상점 등의 각종 광(光)이 존재하는 경우에 보관 및 사용되고 있다. 또한 대부분 용기가 없는 상태로 보관되므로 광안정성은 화장품의 안정성에 중요한 부분을 차지한다 할 수 있다. 현재 대부분의 화장품의 광안정성 시험은 옥외(일광)노출시험과 실내(인공광)노출시험을 실행하고 있다. 본 실험예에서는 도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼을 옥외(일광)노출 실험을 통해 광안정성을 확인하였다.Cosmetics are mainly stored and used when there are various lights such as homes and shops. In addition, since most of the containers are stored without the light stability may be an important part of the stability of the cosmetics. At present, most of the cosmetics have been tested for outdoor light stability and indoor (artificial light) exposure tests. In the present experimental example, the light stability was confirmed through the outdoor (daylight) exposure experiment of the emulsion containing the ethanol extract of each of the whole cabbage, skin, and kernels.

제조 직후부터 일주일 간격으로 8주 동안 옥외에 방치하여 그 변화를 관찰하였다. 실험 결과 표 8에 보이는 바와 같이, 도인 전체, 껍질, 알맹이 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼 모두, 제조 후 한달이 지난 후 까지도 백색, 변취, 상의 분리, 침전 등의 이상이 발견되지 않았다.Immediately after the preparation, they were kept outdoors for 8 weeks at weekly intervals to observe the change. Experimental results As shown in Table 8, all of the phosphorus, the skin, the emulsion containing the kernel ethanol extract, no abnormality such as white, odor, phase separation, precipitation, even after one month after manufacture.

시간(주) Time (week) 1One 22 33 44 55 66 77 88 결과 result * ○ : 안정함 × : 불안정함* ○: Stable ×: Unstable

실험예 7. 특수-가혹 보존실험Experimental Example 7. Special-Severe Conservation Experiment

7-1. 사이클 온도 실험7-1. Cycle temperature experiment

연간이나 일간의 온도변화를 고려한 상태를 인공적으로 만들어 다양한 온도를 정하여 이를 반복하는 cycle 온도 실험을 실시하였다. -15℃, -10℃, -5℃, 0℃, 5℃, 10℃, 15℃, 20℃, 37.5℃, 40℃의 온도로 각각 하루씩 10일 동안을 1 사이클로 하여 같은 조건을 6회 반복하였다.A cycle temperature experiment was conducted by artificially creating a state considering the annual or daily temperature change and setting various temperatures. The same conditions were repeated six times for one day for 10 days at -15 ° C, -10 ° C, -5 ° C, 0 ° C, 5 ° C, 10 ° C, 15 ° C, 20 ° C, 37.5 ° C, and 40 ° C. Repeated.

실험 결과 하기 표 9에 나타낸 바와 같이, 도인 전체, 껍질, 알맹이 에탄올 추출물을 함유한 에멀전 모두 6회 반복 실험까지도 백색, 변취, 상의 분리, 침전 등의 이상이 발견되지 않았다.Experimental Results As shown in Table 9 below, no abnormalities such as white, odor, separation of phases, and precipitation were found even after six repeated experiments of the whole cabbage, skin, and emulsion containing ethanol extract.

사이클cycle 1One 22 33 44 55 66 측정결과 Measurement result * ○ : 안정함 × : 불안정함* ○: Stable ×: Unstable

7-2. pH 측정7-2. pH measurement

일반적인 에멀젼의 pH는 피부표면의 pH 영역인 약산성과 중성에 맞추어져 있다. 피부가 알카리성이 되면 저항력이 약해지고 세균의 번식에 의해 피부병이 생기기 쉽다. 그러므로 피부에는 중성 또는 약산성의 화장품을 사용하는 것이 좋다(광정무부, 신화장품학, 동화기술, 1997). 또한 pH의 변화가 크지 않고 안정화해야 한다.The general pH of the emulsion is tailored to the weak acidity and neutrality, the pH region of the skin surface. When the skin becomes alkaline, the resistance is weakened, and the skin disease is easily caused by the propagation of bacteria. Therefore, it is recommended to use neutral or weakly acidic cosmetics on the skin (Ministry of Gwangju, Ministry of New Cosmetics, assimilation technology, 1997). In addition, the pH change is not significant and must be stabilized.

도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 pH의 변화를 살펴보기 위해 pH 측정기를 이용하여 측정하였다. 에멀젼 2g을 증류수 30mL에 넣어 충분히 교반한 다음 pH 측정기를 이용하여 3회 반복하여 그 평균값을 구하였다.The cabbage was measured using a pH meter to examine the change in pH of the emulsion containing the ethanol extract of the whole, skin, kernels. 2 g of the emulsion was added to 30 mL of distilled water, and the mixture was sufficiently stirred. The average value of the emulsion was repeated three times using a pH meter.

실험결과 도 22 내지 24에 보이는 바와 같이, 25℃에 보관한 각각의 도인 추출물, 도인피 추출물, 도인 알맹이 추출물을 함유한 에멀전은 제조 4주후까지 큰 pH의 변화를 나타내지 않아 안정화된 조성물임을 확인하였다.Experimental results, as shown in Figures 22 to 24, the emulsion containing each of the extract of Doin, Indopi extract, Doin kernel extract stored at 25 ℃ did not show a large pH change until after 4 weeks of manufacture confirmed that the composition is stabilized .

7-3. 점도 측정7-3. Viscosity measurement

액체가 일정한 방향으로 흐를 때, 그 흐름에 대한 물질의 저항이 생기는데, 이 성질을 점성이라고 한다. 점도는 Brookfield 점도계를 이용한 점도 측정법과 우베로오데형 모세관 점도계를 이용한 점도측정법이 있다(하병조, 미용생화학, 형설출판사, 1999).When a liquid flows in a certain direction, there is a resistance of the material to its flow, which is called viscosity. Viscosity is measured using a Brookfield viscometer and a viscosity measurement using a Uberode-type capillary viscometer (Ha Byung-jo, Cosmetic Biochemistry, Hyungseol Publisher, 1999).

도인 전체, 껍질, 알맹이 각각의 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 점도는 Brookfied LV-Ⅱ 디지털 점도측정기를 이용하여 측정하였으며 Spindle은 No. 4를 사용하였다. 1회 측정 후 3분 간격을 두었으며 100rpm에서 2분간 3회 반복 측정하여 그 평균값을 구하였고, 단위는 cP를 사용하였다.Viscosity of the emulsion containing the ethanol extracts of the whole, skin and kernels was measured using a Brookfied LV-II digital viscometer. 4 was used. After measuring once, the interval was 3 minutes and the average value was obtained by repeating the measurement three times for 2 minutes at 100rpm, the unit was used cP.

실험결과, 하기 도 25 내지 27에 보이는 바와 같이, 도인 추출물을 함유한 에멀전은 농도가 높아질수록 점도가 낮아지는 경향을 확인할 수 있었다. 특히 도인 껍질 에탄올 추출물 1%를 함유한 에멀젼은 다른 추출물을 함유한 에멀젼에 비해 낮은 점도를 나타내어 안전한 조성물임을 확인할 수 있었다.As a result of the experiment, as shown in Figures 25 to 27, the emulsion containing the phosphorus extract was confirmed that the viscosity tends to decrease as the concentration increases. In particular, the emulsion containing 1% of the ethanol extract of cabbage bark showed a low viscosity compared to the emulsion containing other extracts was confirmed to be a safe composition.

7-4. 입자크기 측정7-4. Particle Size Measurement

화장품, 특히 에멀젼에서 입자의 크기는 안정성, 사용감 등에 많은 영향을 미칠 수 있다. 입자의 크기를 측정하는 방법은 측정 원리는 묽게 희석된 상태의 시료를 레이저 빔에 노출시켜 입자가 빛을 산란시킴으로 발생되는 파장 신호 변화를 통해 입자의 크기를 분석하는 Scattering 방법을 사용하였다(안봉전, 이진태 외 J. Korean Oil Chem. Soc. 21(1), pp31-36, 2004).In cosmetics, especially emulsions, the size of the particles can have a great effect on stability, usability, and the like. The measuring principle of the particle size is a scattering method that analyzes the particle size by changing the wavelength signal generated by the particle scattered light by exposing a thin diluted sample to the laser beam (Anbongjeon, Jin-Tae Lee et al. J. Korean Oil Chem. Soc. 21 (1), pp31-36, 2004).

에멀젼 2g을 증류수 30ml에 충분히 교반시킨 후, 입도 분석기(Autosizer Loc, MALVERN Instruments, Worcestershire, UK)를 이용하여 에멀젼의 입자크기를 살펴보았다.After 2 g of the emulsion was sufficiently stirred in 30 ml of distilled water, the particle size of the emulsion was examined using a particle size analyzer (Autosizer Loc, MALVERN Instruments, Worcestershire, UK).

도인 껍질 에탄올 추출물 1%를 함유한 에멀젼의 경우 도 28과 같이 0.05㎛의 작은 입자를 확인할 수 있었다. 이를 통해 도인 껍질 에탄올 추출물을 고농도로 함유한 에멀젼의 경우 더 작은 입자를 생성할 수 있을 것으로 기대된다.In the case of the emulsion containing 1% of the peeled ethanol extract, small particles having a diameter of 0.05 μm could be confirmed as shown in FIG. 28. This is expected to be able to produce smaller particles in the case of emulsion containing a high concentration of ethanol extract of cabbage bark.

도 1은 도인피의 추출물을 실리카겔 컬럼 수행하여 20개의 분획을 얻고, 전개용매 조건(클로로포름 : 메탄올= 4 : 1 조건)에서 각 분획물의 전개양상을 나타낸 도이다.1 is a diagram showing the development pattern of each fraction under a developing solvent conditions (chloroform: methanol = 4: 1 condition) by performing a silica gel column extract of the basin.

도 2는 도인 전체, 도인피, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the measurement of DPPH radical scavenging activity of the hot water extract and ethanol extract of the whole of the cabbage, cabbage, cabbage.

도 3은 도인 전체, 도인피, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 SOD 유사 활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 3 is a graph showing the measurement of SOD-like activity of the hot water extract and ethanol extract of the whole of the cabbage, cabbage, cabbage.

도 4는 도인 전체, 도인피, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 잔틴 옥시다아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 4 is a graph showing the measurement of the xanthine oxidase inhibitory activity of the hot water extract and ethanol extract of the whole of the cabbage, cabbage, cabbage.

도 5는 도인 전체, 도인피, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 아질산염 소거능을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 5 is a graph showing the measurement of the nitrite scavenging ability of the hot water extract and ethanol extract of the whole of the cabbage, cabbage, cabbage.

도 6은 도인 전체, 도인피, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 타이로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 6 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of the hot water extract and ethanol extracts of the whole of the cabbage, cabbage, cabbage.

도 7은 도인 전체 분획물의 타이로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 7 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of the whole fractions.

도 8은 도인피 분획물의 타이로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.8 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of basin basin fraction.

도 9는 도인 알맹이 분획물의 타이로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 9 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of the phosphata kernel.

도 10은 도인 전체 에탄올 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 10 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of the whole ethanol extract by concentration and time.

도 11은 도인 전체 열수 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 11 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of the whole hot water extract of Doin by concentration and time.

도 12는 도인피 에탄올 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.12 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of basin ethanol extract by concentration and time.

도 13은 도인피 열수 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 13 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of basin hot water extract by concentration and time.

도 14는 도인 알맹이 에탄올 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 14 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of linoleum ethanol extract by concentration and time.

도 15는 도인 알맹이 열수 추출물의 NO 생성 억제율을 농도 및 시간별로 측정하여 나타낸 그래프이다.Figure 15 is a graph showing the measurement of the NO production inhibition rate of the linch hot water extract by concentration and time.

도 16은 도인 전체 에탄올 추출물의 세포독성을 MTT 어세이를 통해 나타낸 그래프이다.Figure 16 is a graph showing the cytotoxicity of Doin whole ethanol extract through MTT assay.

도 17은 도인피 에탄올 추출물의 세포독성을 MTT 어세이를 통해 나타낸 그래프이다.Figure 17 is a graph showing the cytotoxicity of the basin ethanol extract through MTT assay.

도 18은 도인피의 에탄올 추출물을 농도별로 처리시 iNOS의 발현량을 측정한 사진이다.18 is a photograph measuring the expression level of iNOS when the ethanol extract of basin is treated by concentration.

도 19는 도인피의 에탄올 추출물을 a: 0 ㎎/disc, b: 0.5 ㎎/disc, c: 1 ㎎/disc, d: 5 ㎎/disc의 농도별 처리시 프로피오니박테륨 아그네스에 대한 항균활성 을 생육저해환 측정법으로 확인한 사진이다.19 shows antibacterial activity against propionibacterium agnes when ethanol extracts of basin were treated with concentrations of a: 0 mg / disc, b: 0.5 mg / disc, c: 1 mg / disc, and d: 5 mg / disc. It is a photograph confirmed by the measurement of growth inhibition.

도 20은 도인 전체, 도인 껍질, 도인 알맹이의 열수 추출물과 에탄올 추출물의 프로피오니박테륨 아그네스에 대한 생육저해도를 측정한 그래프이다.FIG. 20 is a graph measuring growth inhibition of propionibacterium agnes of whole cabbage, cabbage skin, cabbage hot water extract and ethanol extract.

도 21은 실시예 3에 따른 에멀젼의 피부 첩포시험 결과(1: 음성대조군, 2: 도인 전체 에탄올 추출물 0.01% 처리군, 3: 도인 전체 에탄올 추출물 0.1% 처리군, 4: 도인 전체 에탄올 추출물 1% 처리군, 5: 도인 껍질 에탄올 추출물 0.01% 처리군, 6: 도인 껍질 에탄올 추출물 0.1% 처리군, 7: 도인 껍질 에탄올 추출물 1% 처리군, 8: 도인 알맹이 에탄올 추출물 0.01% 처리군, 9: 도인 알맹이 에탄올 추출물 0.1% 처리군, 10: 도인 알맹이 에탄올 추출물 1% 처리군) 사진이다.21 is a skin patch test results of the emulsion according to Example 3 (1: negative control group, 2: Doin ethanol extract 0.01% treatment group, 3: Doin ethanol extract 0.1% treatment group, 4: Doin all ethanol extract 1% Treatment group, 5: cabbage bark ethanol extract 0.01% treatment group, 6: cabbage bark ethanol extract 0.1% treatment group, 7: cabbage bark ethanol extract 1% treatment group, 8: cabbage kernel ethanol extract 0.01% treatment group, 9: cabbage Kernel ethanol extract 0.1% treatment group, 10: Indo kernels ethanol extract 1% treatment group) picture.

도 22는 도인 전체 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 pH의 변화를 pH 측정기를 이용하여 측정한 결과이다.22 is a result of measuring the pH change of the emulsion containing the whole ethanol extract of cabbage using a pH meter.

도 23은 도인피 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 pH의 변화를 pH 측정기를 이용하여 측정한 결과이다.23 is a result of measuring the pH change of the emulsion containing the basin ethanol extract using a pH meter.

도 24는 도인 알맹이 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 pH의 변화를 pH 측정기를 이용하여 측정한 결과이다.24 is a result of measuring the pH change of the emulsion containing the ethanol extract of cabbage kernel using a pH meter.

도 25는 도인 전체 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 점도변화를 측정한 결과이다.25 is a result of measuring the viscosity change of the emulsion containing the whole ethanol extract.

도 26은 도인피 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 점도변화를 측정한 결과이다.Figure 26 is the result of measuring the viscosity change of the emulsion containing the basin ethanol extract.

도 27은 도인 알맹이 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 점도변화를 측정한 결과이다.Figure 27 is the result of measuring the viscosity change of the emulsion containing the ethanol extract of cabbage.

도 28은 도인피의 에탄올 추출물을 함유한 에멀젼의 입자크기를 측정한 결과이다.28 is a result of measuring the particle size of the emulsion containing ethanol extract of basin.

Claims (5)

삭제delete 삭제delete 삭제delete (a) 도인피를 분쇄하고 물, 메탄올, 에탄올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 극성 용매로 추출한 후에 감압 농축하여 극성용매에 가용한 조추출물을 얻는 제1단계;(a) a first step of pulverizing the bast and extracting with water, methanol, ethanol or a mixed solvent thereof and then concentrating under reduced pressure to obtain a crude extract soluble in a polar solvent; (b) 상기 단계에서 얻은 조추출물을 증류수에 현탁하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하되, 상기 용해액을 실리카겔 컬럼에 클로로포름과 메탄올 혼합액(CHCl3 : MeOH = 100 : 1 내지 1 : 100) 전개용매에서 처음에는 클로로포름만 전개시키고 점차적으로 메탄올의 농도를 순차적으로 높여가는 농도구배 전개용매를 컬럼에 전개시켜 분획물을 얻는 제2단계;(b) Performing column chromatography by suspending the crude extract obtained in the above step in distilled water, wherein the solution was first mixed with a chloroform and methanol mixture (CHCl 3 : MeOH = 100: 1 to 1: 100) in a developing solvent on a silica gel column. The second step of obtaining a fraction by developing only a chloroform and a concentration gradient developing solvent to gradually increase the concentration of methanol in a column; (c) 수득한 분획물을 박층 크로마토그래피를 수행하되, 상기 크로마토그래피의 전개용매 조건(클로로포름 : 메탄올 = 4 : 1 조건)에서 Rf치 0.4 내지 0.6을 갖는 분획물을 건조하는 3단계;(c) performing a thin layer chromatography on the obtained fractions, and drying the fractions having an Rf value of 0.4 to 0.6 under developing solvent conditions of the chromatography (chloroform: methanol = 4: 1 condition); 를 포함하여 이루어지는 분리공정으로부터 얻은 도인피 추출물 또는 분획물을 포함하는 화장료 조성물.Cosmetic composition comprising a bast extract or fraction obtained from a separation process comprising a. 제4항에 있어서, 조성물이 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성되는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The composition of claim 4 wherein the composition is a skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence, nutrition essence, pack Cosmetic composition, characterized in that any one selected from the group consisting of soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body cleanser.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101289811B1 (en) * 2011-08-29 2013-07-26 (주) 젠셀 Composition for anti-wrinkle comprising an extract of Prunus persica var. davidiana
KR102171924B1 (en) * 2019-09-16 2020-10-30 주식회사 무무코스메틱 External skin preparation for relaxing allergy comprising extract of wild-peach and method of producing the same

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050091473A (en) * 2004-03-12 2005-09-15 주식회사 엘지생활건강 Anti-bacterial composition containing extract of persicae semen

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050091473A (en) * 2004-03-12 2005-09-15 주식회사 엘지생활건강 Anti-bacterial composition containing extract of persicae semen

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
대한본초학회지 2006, 21(2), 87-93*
한국응용생명화학회지 2006, 49(2), 135-9*

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101289811B1 (en) * 2011-08-29 2013-07-26 (주) 젠셀 Composition for anti-wrinkle comprising an extract of Prunus persica var. davidiana
KR102171924B1 (en) * 2019-09-16 2020-10-30 주식회사 무무코스메틱 External skin preparation for relaxing allergy comprising extract of wild-peach and method of producing the same

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