KR100806202B1 - 다중 형광동소보합 분석 장치 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 여러 시료의 세정/전처리와 보합결합(hybridization)이 동시에 가능하고, 시료 손실과 세정(세척) 과정을 최소화할 수 있으며, 분석 시간을 단축할 수 있고, 분석의 개인차를 최대한으로 줄일 수 있으며, 챔버내의 반응 온도를 적절히 제어할 수 있고, 챔버의 용이한 밀·개봉이 가능한 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization) 분석 장치에 관한 것이다.
본 발명은 복수의 개별 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석용 챔버(100), 가열판(17), 온도 조절 장치(18), 디지털 온도 표시창(19), 밸브(21), 진공 압력계(22), 배출액 트랩(23), 진공 펌프(24) 및 연결관(25)을 포함하는 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치로서, 상기 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는 상부 뚜껑(1)을 포함하는 상단 구역(A); 멤브레인 홀더(2)를 포함하는 중단 구역(B); 및 핀셋 홀(4), 멤브레인(6), 다공성 세라믹 판(7), 실리콘 와샤(8), 하부 드레인 영역(9), 유출구(15) 및 하부 밑통(3)을 포함하는 하단 구역(C)을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치를 제공한다. 본 발명에 따른 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치에 있어서, 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 상단, 중단 및 하단 구역에는 각각 오링(O-ring)(10, 11, 5)과 나사산(12)이 장착되어 있다.
형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH), 챔버(chamber), 상부 뚜껑, 멤브레인 홀더, 핀셋 홀, 멤브레인, 다공성 세라믹 판, 실리콘 와샤(silicon washer), 하부 드레인 영역, 유출구, 하부 밑통, 오링(O-ring), 나사산, 가열판, 온도 조절 장치, 디지털 온도 표시창, 밸브, 진공 압력계, 배출액 트랩, 진공 펌프, 및 연결관.
Description
도 1은 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치의 구성을 도시한 것이다.
도 2는 개별 형광동소보합 분석용 챔버의 구성을 도시한 것이다.
도 3은 핀셋 홀의 단면도이다.
도 4는 개별 형광동소보합 분석용 챔버의 삽입 밑통, 유출구 삽입구, 가열판, 온도 조절 장치 및 디지털 온도 표시창의 위치를 도시한 것이다.
<도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명>
100: 개별 형광동소보합 분석용 챔버
A: 상단 구역 B: 중단 구역 C: 하단 구역
1: 상부 뚜껑 2: 멤브레인 홀더 3: 하부 밑통 4: 핀셋 홀
5, 10, 11: 오링 6: 멤브레인 7: 다공성 세라믹 판
8: 실리콘 와샤 9: 하부 드레인 영역 12: 나사산
13: 분석 시약 14: 분석 시료(미생물) 15: 유출구
16: 개별 형광동소보합 분석용 챔버의 삽입 밑통
17: 가열판 18: 온도 조절 장치 19: 디지털 온도 표시창
20: 유출구 삽입구 21: 밸브 22: 진공 압력계
23: 배출액 트랩 24: 진공 펌프 25: 연결관
본 발명은 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치에 관한 것이다.
형광동소보합(FISH) 분석은 형광물질(예컨대, FAM, TAMRA 등)로 표지된 프로브(probe)를 이용하여 특정 미생물의 분리, 동정, 계수 등을 할 수 있는 분자생물학적 방법이다. FISH 분석은 수처리 공정이나 환경 생태에서 특정 기능을 하는 미생물의 동정 또는 미생물 그룹의 변화 양상을 분석하는 연구 등에서 많이 활용된다. 또한, 특정 유전자 또는 DNA에 대한 형광 표지된 프로브를 특정 질환이 의심되는 환자의 염색체나 분열 간기 또는 중기 세포나 조직 절편에 보합결합(hybridization)시켜 그 유전자의 결실, 중복, 재배열 등의 변이를 신속·정확하게 검출하여 유전질환 및 산전 진단, 종양의 예후 및 치료 효과 판정 등에 활용된다.
FISH 분석은 통상 하기 5단계로 실행된다:
1) 고정액(예컨대, 4% 파라포름알데히드)을 사용하여 분석 대상 시료(샘플)을 고정시킨 후, 세정(세척)액[예컨대, 1 × SSC(0.15M 염화나트륨, 0.015M 시트르산나트륨, pH 7.0), 1% (w/v) SDS]을 사용하여 수 회 세정(세척)하는 단계; 2) 50%, 80% 및 96% 에탄올을 연속적으로 사용하여 분석 대상 시료(샘플)을 탈 수(dehydration)시키는 단계; 3) 시료 내의 표적(target) 유전 영역에 상보적인 형광 프로브를 완충액(buffer)(예컨대, 0.9M NaCl, 20 mM 트리스-HCl, 5 mM EDTA, 6.9 mM SDS, pH 7.4)과 함께 넣어 수 시간 동안 일정 온도에서 보합결합(hybridization)시키는 단계; 4) 세정(세척)액을 수 회 사용하여, 시료 내의 표적 유전 영역에 보합결합되지 않은 형광 프로브를 제거하는 단계; 및 5) 형광 현미경, 유세포 분석기(flow cytometry) 또는 공초점 레이저 주사 현미경(CLSM) 등을 이용하여 관찰하는 단계.
종래의 형광동소보합(FISH) 분석 장치는 챔버(chamber) 형태가 아니라 슬라이드 글라스(slide glass) 위에 시료(샘플)와 소정의 시약을 올리고 커버 글라스(cover glass)를 덮는 방식이 이용된다. 슬라이드 글라스 위에 시약을 올리고 커버 글라스를 덮으면 시약이 커버 글라스의 가장자리로 밀리는 현상이 자주 발생하는데, 이러한 현상은 시약을 이루는 성분의 농도 불균형과 시약의 손실을 초래하여 FISH 분석의 효울을 떨어뜨린다. 또한, 슬라이드를 사용하면 세정(세척)액 내에 슬라이드가 완전히 잠기어 있는 형태로 세정(세척)할 수 밖에 없는데, 이로 인하여 완충액(buffer)과 세정(세척)액 등의 시약 손실이 크다. 또한, 종래의 형광동소보합(FISH) 분석 장치는 주로 슬라이드를 별도의 세정(세척)액 통에 담궜다 뺏다 하는 과정을 반복하는 방식을 이용하기 때문에, 분석 대상 미생물이 유실될 확률이 높고, 반복 조작에 소요되는 시간이 막대할 뿐만 아니라, 시약을 여러 차례 바꿔주고 세정(세척)하는 것은 실험자의 개인차에 따른 상이한 분석 결과를 초래할 수 있다. 또한, 예컨대 환경 분야에서 특정 미생물의 동향이나 출현의 모니터링을 위해 서는 여러 시료(샘플)의 동시 분석이 요구되는데, 종래의 형광동소보합(FISH) 분석 장치는 슬라이드 글라스 위에 시료를 얹은 후에 보합결합(hybridization)시키는 방식을 이용하기 때문에 여러 시료의 동시 처리가 곤란할 뿐만 아니라, 전체 형광동소보합(FISH) 분석 과정의 대부분을 차지하는 세정(세척) 과정에 막대한 시간이 소요된다. 또한, 종래의 형광동소보합(FISH) 분석 장치는 각각의 시료를 슬라이드 글라스 위에 올려서 작업하기 때문에 최종 보합결합(hybridization)을 위해서는 별도의 항온 수조나 오븐에 넣어서 반응을 시켜야 하는 번거로움이 있다. 더욱이, 보합결합(hybridization) 동안 항습 유지가 매우 중요한데, 슬라이드를 이용하는 경우에는 반응 도중에 보합결합(hybridization) 혼합물이 말라서 정확한 결과를 얻기가 어렵다.
한편, 한국 공개특허공보 제2006-135673호(마이크로어레이 하이브리드화 장치), 한국 등록특허공보 제590471호(마이크로어레이 칩용 DNA 혼성화 챔버), 한국 등록특허공보 제490285호(생물학적 시료의 혼성화 반응 장치) 등에는 하이브리드화(또는 혼성화) 챔버를 이용하는 방식에 대하여 기재되어 있으나, 여러 시료에 대한 형광동소보합결합(FISH) 분석을 동시에 하는 것에 대한 언급이나 시사하는 바가 전혀 없을 뿐만 아니라 반응 온도의 제어와 챔버의 용이한 밀·개봉에 대한 언급이나 시사하는 바가 전혀 없다.
본 발명은 위와 같은 종래 기술의 문제점을 극복하여, 여러 시료의 세정/전처리와 보합결합(hybridization)이 동시에 가능하고, 시료 손실과 세정(세척) 과정 을 최소화할 수 있으며, 분석 시간을 단축할 수 있고, 분석의 개인차를 최대한으로 줄일 수 있으며, 챔버내의 반응 온도를 적절히 제어할 수 있고, 챔버의 용이한 밀·개봉이 가능한 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 복수의 개별 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석용 챔버(100), 가열판(17), 온도 조절 장치(18), 디지털 온도 표시창(19), 밸브(21), 진공 압력계(22), 배출액 트랩(23), 진공 펌프(24) 및 연결관(25)을 포함하는 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치로서, 상기 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는 상부 뚜껑(1)을 포함하는 상단 구역(A); 멤브레인 홀더(2)를 포함하는 중단 구역(B); 및 핀셋 홀(4), 멤브레인(6), 다공성 세라믹 판(7), 실리콘 와샤(8), 하부 드레인 영역(9), 유출구(15) 및 하부 밑통(3)을 포함하는 하단 구역(C)을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치를 제공한다. 본 발명에 따른 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치에 있어서, 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 상단 구역(A), 중단 구역(B) 및 하단 구역(C)에는 각각 오링(O-ring)(10, 11, 5)과 나사산(12)이 장착되어 있으며, 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 갯수는 5개 내지 20개인 것이 바람직하다.
가열판(17)은 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버의 고정 기능을 할 뿐만 아니라, 온도 조절 장치(18)와 함께 반응에 필요한 온도 유지 기능을 한다. 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 내부 온도는 가열판(17)과 온도 조절 장치(18)에 의해 4℃ 내지 100℃의 범위내에서 조절된다. 디지털 온도 표시창(18)은 온도가 디지털로 표시되기 때문에 최적의 온도 범위 조절을 가능하게 한다. 밸브(21)의 개폐에 의해 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는 독립적으로 제어되며, 연결관(25)은 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)들의 결합 장치로서의 기능을 한다. 진공 펌프(24)는 사용된 세정(세척)액 등의 시약을 동시에 배출시키는 역할을 하며, 진공 펌프(24)의 전단에는 각 개별 챔버내에서 멤브레인이 찢기지 않는 범위내에서 조작되는지 알 수 있도록 하는 진공 압력계(22)와, 진공 펌프(24)에 의해 외부로 빠져 나올 세정(세척)액 등의 시약을 모으는 배출액 트랩(23)이 설치되어 있다.
개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는 예컨대 직경이 36 mm이고, 높이가 64 mm인 원통형의 스테인레스강 재질인 것이 바람직하다. 이로써, 열전달과 개별 챔버의 안정적인 고정이 가능하다. 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 상단 구역(A), 중단 구역(B) 및 하단 구역(C)에는 오링(O-ring)(10, 11, 5)과 나사산(12)이 장착되어 있기 때문에 챔버의 개봉 및 밀봉이 용이하다. 상부 뚜껑(1)은 예컨대 외부 직경이 36 mm, 높이가 15 mm이고, 멤브레인 홀더(2)는 예컨대 외부 직경이 36 mm, 높이가 20 mm이며, 하부 밑통(3)은 외부 직경이 36 mm, 내부 직경이 26 mm, 높이가 40 mm이다. 챔버 내부에는 분석대상 시료의 거치와 보합결합(hybridization)을 위한 멤브레인(6)이 삽입되고, 멤브레인(6) 아래에는 원형의 다공성 세라믹판(7)이 설치되어 멤브레인(6)이 안정적으로 거치되도록 함과 동 시에 진공 펌프(24)에 의한 세정액 등의 원활한 배출이 가능하게 한다. 멤브레인(6)과 다공성 세라믹 판(7)의 직경은 예컨대 26 mm이고, 예컨대 0.45 ㎛의 기공을 갖는다. 진공 펌프(24) 가동시에는 멤브레인(6) 위에 올려진 시약이 기공을 통해 배출되나 보합결합(hybridization) 반응 중에는 진공 펌프(24)가 가동되지 않기 때문에 멤브레인(6)에 올려진 소량의 시약만으로도 보합결합(hybridization) 반응이 가능하다. 멤브레인(6) 위에는 오링(5)을 얹고 멤브레인 홀더(2)를 조임으로써 오링(5)을 압착하여 세정(세척) 과정이나 분석 과정 중의 시약 증발을 방지한다. 보합결합(hybridization)이 끝난 멤브레인(6)의 탈착시 찢김이나 손상을 방지하기 위해 하부 밑통(3)의 안쪽 외곽에는 핀셋 홀(4)이 대칭으로 부착되어 안정적인 멤브레인 제거가 가능하다.
세정(세척)용 시약과 보합결합(hybridization)용 시약(13)은 기본적으로 오링(5)의 높이 만큼만 채우면 되고, 필요에 따라서는 멤브레인 홀더(2)까지 채울 수 있어 시료량의 가변적 제어가 가능하다. 따라서, 과도한 세정(세척)액의 손실을 방지할 수 있을 뿐만 아니라, 반복 세정(세척)에 소요되는 시간을 최소화할 수 있다. 하부 드레인 영역(9)은 40°∼50° 경사의 깔때기 형상이고, 유출구(15)와 연결된다. 유출구(15)의 내부 직경은 예컨대 4∼6 mm이다.
개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는 가열판(17)과 온도 조절 장치(18)에 의해 적정 온도(예컨대, 40∼60℃)를 유지하고 약 3시간 동안 반응이 일어나도록 한다. 이 때, 시약의 증발 및 내부 온도의 항상성을 유지하기 위해 오링이 부착된 멤브레인 홀더와 상부 뚜껑이 모두 체결되어 기밀성을 유지한다. 따라 서, 보합결합(hybridization) 반응 동안 기밀성 유지에 의한 항온 및 항습 유지가 매우 완벽하고, 암반응 조건을 효과적으로 제공한다.
본 발명에 따르면, 5개 내지 20개의 챔버에서의 여러 시료의 세정(세척)/전처리와 보합결합(hybridization)이 동시에 진행될 수 있으며, 실험자가 완충액(buffer)와 세정(세척)액 등 여러 시약을 챔버 안에 넣어 주고 일정 시간 반응 후 시약을 제거해야 할 때 진공 펌프로 시약을 빼냄으로써 실험자의 손이 최대한 덜 가도록 한다.
한편, 필요에 따라 형광동소보합 분석 대상 시료의 개수를 제외한 나머지 챔버는 챔버에 부착된 밸브(21)를 단순히 잠금으로써 운영의 효율성을 높일 수 있다.
본 발명에 따른 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치를 사용하면, 『시료를 개별 형광동소보합 분석용 챔버의 멤브레인 위에 얹고, 고정액 시약을 주입하고, 세정(세척)액 시약을 투입하고, 진공 펌프 가동 및 세정(세척)액 배출 과정을 반복한 후, 보합결합(hybridization)용 시액을 주입하고, 밸브를 닫고, 가열판 및 온도 조절 장치를 이용하여 반응 온도를 설정하고, 보합결합 반응을 시킨 후, 밸브를 열고, 미반응 시료(샘플)을 세정(세척)하고, 세정(세척)액을 배출한 후, 형광 현미경 등을 이용하여 관찰하는 과정』이 하나의 챔버에서 가능하며, 예컨대 5개 내지 20개의 챔버를 블록화하여 동시 분석이 가능하다.
본 발명에 따른 다중 FISH 분석 장치는 여러 시료의 세정/전처리와 보합결 합(hybridization)이 동시에 가능하고, 시료 손실과 세정(세척) 과정을 최소화할 수 있으며, 분석 시간을 단축할 수 있고, 분석의 개인차를 최대한으로 줄일 수 있으며, 챔버내의 반응 온도를 적절히 제어할 수 있고, 챔버의 용이한 밀·개봉이 가능하다는 장점이 있다. 따라서, 환경 분야에서 특정 미생물(특히, 박테리아)의 분리, 동정 및 계수 등에 유용하게 활용될 수 있을 뿐만 아니라, 유전자의 결실, 중복, 재배열 등의 변이를 신속·정확하게 검출하여 유전질환 및 산전 진단, 종양의 예후 및 치료 효과 판정 등을 위한 임상 분야에 폭넓게 활용될 수 있다.
Claims (4)
- 복수의 개별 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석용 챔버(100), 가열판(17), 온도 조절 장치(18), 디지털 온도 표시창(19), 밸브(21), 진공 압력계(22), 배출액 트랩(23), 진공 펌프(24) 및 연결관(25)을 포함하는 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치로서,상기 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)는상부 뚜껑(1)을 포함하는 상단 구역(A);멤브레인 홀더(2)를 포함하는 중단 구역(B); 및핀셋 홀(4), 멤브레인(6), 다공성 세라믹 판(7), 실리콘 와샤(8), 하부 드레인 영역(9), 유출구(15) 및 하부 밑통(3)을 포함하는 하단 구역(C)을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치.
- 제 1 항에 있어서,상기 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 상단 구역(A), 중단 구역(B) 및 하단 구역(C)에는 각각 오링(O-ring)(10, 11, 5)과 나사산(12)이 장착되어 있는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(fluorescence in situ hybridization, FISH) 분석 장치.
- 제 1 항에 있어서,상기 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)의 내부 온도는 가열판(17)과 온도 조절 장치(18)에 의해 4℃ 내지 100℃의 범위내에서 조절되는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치.
- 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 하나의 항에 있어서,상기 복수의 개별 형광동소보합(FISH) 분석용 챔버(100)에서는 각각 독립적으로 동시에 형광동소보합(FISH) 분석이 수행될 수 있는 것을 특징으로 하는 다중 형광동소보합(FISH) 분석 장치.
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| JP2005221473A (ja) | 2004-02-09 | 2005-08-18 | Olympus Corp | 生体物質検出デバイス及びその製造方法及びその生体物質検出デバイスを用いる反応装置 |
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2007
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6706473B1 (en) | 1996-12-06 | 2004-03-16 | Nanogen, Inc. | Systems and devices for photoelectrophoretic transport and hybridization of oligonucleotides |
| US6303389B1 (en) | 1997-06-27 | 2001-10-16 | Immunetics | Rapid flow-through binding assay apparatus and method therefor |
| JP2004101361A (ja) | 2002-09-09 | 2004-04-02 | Tadashi Matsunaga | クリプトスポリジウムの検出方法及び検出装置 |
| JP2005221473A (ja) | 2004-02-09 | 2005-08-18 | Olympus Corp | 生体物質検出デバイス及びその製造方法及びその生体物質検出デバイスを用いる反応装置 |
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