KR100744947B1 - 천궁 추출물 및 프로테아제를 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천궁 추출물 및 프로테아제를 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 티로시나아제의 생성을 억제하는 효능을 갖는 천궁 추출물 및 단백질 분해 효소로써 각질박리 효능을 갖는 프로테아제를 유효성분으로 포함함으로써 피부 미백에 상호 보완적으로 작용하여 향상된 미백효과를 제공한다. 또한 본 발명의 천궁 추출물 및 프로테아제는 피부에 자극을 거의 주지 않으면서 탁월한 미백효과 및 제형의 안정성을 나타낸다.

화장료, 미백, 천궁 추출물, 프로테아제

Description

천궁 추출물 및 프로테아제를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물 {Cosmetic Composition for Skin Whitening Comprising Extract of Cnidium officinale and Protease as Active Ingredients}

본 발명은 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 본 발명은 유효 성분으로서 천궁 추출물 및 프로테아제를 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

화장품 분야에서 동아시아 여성들에게 가장 관심이 큰 분야 중에 하나는 피부 미백 (皮膚美白)이다. 피부미백이란 외부 자극에 의해 피부에서 멜라닌 색소의 생성이 과하게 일어나 발색하는 피부색의 변화를 정돈하여 주는 개념이다.

일반적으로 사람의 피부가 검게 변하게 되는 것은 피부에서 생성되는 멜라닌 색소에 의해 일어나는 현상으로 정상 상태에서는 멜라닌의 과다 생성이 일어나지 않지만 피부가 자외선, 환경오염, 스트레스와 같은 외부 자극이나 호르몬, 염증 반 응 매개 인자와 같은 내적 요인에 반응하게 되면 멜라닌 색소를 과다 생성하게 되고 이것이 피부 밖으로 배출되지 못하고 피부 속에 남아 있게 되면 색소 침착이 일어나게 된다.

표피층의 각질형성세포 (keratinocyte)가 자외선에 의해 자극되면 색소형성세포 (melanocyte)에서 멜라닌 생합성을 촉진시키도록 하는 매개인자를 생성하여 표피층으로 방출하게 된다. 이러한 매개인자에는 엔도세린-1 (endothelin-1, ET-1), 멜라노사이트 자극 호르몬 (α-melanocyte stimulating hormone, MSH) 등이 있다. ET-1이나 α-MSH는 색소형성세포에 특이적인 수용체에 결합하여 멜라닌 생합성을 유도하는 일련의 신호전달과정 (signal transduction)을 활성화시킨다.

티로시나아제는 멜라노솜에 위치하는 막에 삽입되어있는 효소로 활성 부위에 구리 이온을 가지며 일련의 멜라닌 합성에 있어서 주요한 속도 한계 효소 (rate limiting enzyme)이다. 따라서 기존의 멜라닌 생성 억제제는 멜라닌 생성의 주 효소인 티로시나아제 활성을 저해하는 억제제들이 미백제로서 활발히 개발되어 왔으며, 이러한 티로시나아제 활성 저해제의 예로, 코지산 (kojic acid), 알부틴 (arbutin), 하이드로퀴논 (hydroquinone), 비타민 C 및 이의 유도체, 감초 추출물 등이 있다. 그러나 이들은 피부 자극 및 제형내의 안정성에 문제가 있어 그 사용이 제한되고 있다.

최근의 미백 화장료들은 상기한 문제점을 개선하고자 멜라닌 생합성 과정에 영향을 주는 신호전달과정을 조절하는 미백 원료를 개발하여 적용하고 있는데, 그 예로 유효 성분으로 생큐노라이드 A를 함유한 천궁 (Cnidium officinale) 추출물을 함유한 미백 화장료가 있다 (대한민국 등록특허 제504408호).

건강한 피부에서 각질층의 최외각에 존재하는 세포들은 끊임없이 떨어져 나가고 표피의 기저층에서 새로이 생성된 세포들로 대체된다. 기저층으로부터 각질층의 최외각 층까지 새로이 생성된 세포가 이동하는데 소요되는 시간을 표피의 갱신 시간 (renewal time)이라 한다. 피부의 항상성에 변화가 오면, 죽은 세포들은 최외각 층에 축적되고, 갱신 속도는 느려지며 갱신 시간은 길어진다. 나이가 듦에 따라 피부가 갱신되는데 필요한 시간은 증가한다. 젊거나 중년인 성인의 경우 갱신 시간은 대략 20일인 반면, 50세 이상의 성인은 갱신 속도가 느려 갱신 속도가 30일 이상이다 (Aging and the skin, Raven Press, New York, 1989, 193-204).

일반적으로, 죽은 피부 세포를 제거하고 피부 갱신 속도를 증가시킴으로써 피부를 더 밝고 젊게 보이는 결과를 얻을 수 있다. 특히 피부 갱신 속도의 조절은 미백 효과를 증가시키는데 이용되기도 한다. 이러한 목적으로 글리콜산 (glycolic acid)과 락트산 (lactic acid)과 같은 박리 효과를 지닌 히드록시산 (hydroxy acids)이 이용되고 있다. 그러나, 히드록시산은 낮은 pH (3.5 내지 4.5)에서 효과가 크게 나타나고 자극이 높은 단점이 있어 상기의 문제점을 해결하고자 하는 당업계의 요구가 있었다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용은 괄호 내에 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허 문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준과 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

이에, 본 발명자들은 종래의 티로시나아제 활성 억제물질 및 피부 각질 박리제들에 나타난 높은 피부 자극, 제형의 안정성 및 불완전한 미백효과 등의 문제점을 해결하기 위해 노력한 결과, 티로시나아제의 생성을 억제하고 피부의 자극을 최소화하며 제형의 안정성을 확보 할 수 있는 천궁 추출물과 함께, 기존의 각질 박리제인 히드록시산에 비해 피부 자극이 거의 없으면서도 뛰어난 각질 박리 효능을 갖는 프로테아제를 화장료에 혼합 적용함으로써 티로시아닌 생성 억제 및 각질 박리 작용을 통해 우수한 미백 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 천궁 추출물 및 프로테아제를 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 천궁 추출물 및 프로테아제를 유효 성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 사용되는 천궁 (Cnidium officinale)은 다년생 초본으로 높이가 40-70 cm이고, 식물체에 향기가 나는 특징을 가지고 있다. 상기 천궁의 뿌리는 불규칙한 결절상의 덩어리로서 직경이 2-7 ㎝이며 표면은 황갈색으로 거친 주름이 있고 평행으로 융기한 윤절이 여러 개 있으며 정상부에는 오목한 원형의 줄기 흔적이 있다. 그 단면은 황백색 혹은 회황색인데 황갈색의 유실이 산재해 있고 형성층은 물결 모양의 황문을 이룬다. 천궁의 뿌리는 한방에서 보혈, 강장, 진정 및 진통 등을 목표로 냉증, 빈혈 및 월경 장애 등 각종 부인병 질환에 쓰이고 있다.

본 발명에서 이용되는 천궁 추출물은 천궁의 다양한 기관, 조직 (예: 뿌리, 잎, 꽃, 줄기, 과실 및 종자 등) 등을 이용하여 수득할 수 있으며, 가장 바람직하게는 천궁의 뿌리로부터 얻은 추출물이다.

본 발명의 천궁 추출물은 멜라노사이트 자극 호르몬의 활성을 저해하며, 이러한 특성은 결과적으로 티로시나아제의 생성을 억제하여 멜라닌 생성을 억제함으로써 색소 침착을 방지하며 미백 효과를 나타낸다.

또한 천궁 추출물은 멜라노사이트 자극 호르몬 활성 저해 효과가 뛰어난 식물 추출물로, 본 출원인의 특허(대한민국 특허출원 제 2002-25213호)에서 그 미백효과가 입증된 바 있다.

본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 이용되는 천궁 추출물은 당업게에 공지된 다양한 방법을 통해 얻어질 수 있고, 바람직하게는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름, (g) 1,3-부틸렌글리콜, (h)부틸 아세테이트를 추출 용매로 하여 천궁으로부터 얻을 수 있다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 천궁추출물은 함수 저급 알코올, 가장 바람직하게는 에탄올을 이용하여 얻어진 것이다. 상기 에탄올은 바람직하게는 60내지 80% 에탄올이고, 가장 바람직하게는 70% 에탄올이다. 한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 천궁추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

본 발명의 천궁 추출물은 다음의 단계를 포함하는 과정에 의해 제조 된다: (a) 천궁에 5-20배의 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 첨가하는 단계; (b) 단계 (a)의 용매 첨가된 천궁을 15-35℃에서 1 내지 10일간 추출하여 여과하는 단계; 및 (c) 단계 (b)의 여과물을 5-10℃에서 7-10일간 숙성시키고 건조하는 단계.

본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, 상술한 추출 과정은 다음과 같이 실시된다: 우선, 원료가 되는 천궁의 뿌리를 세척, 건조 및 작은 조각으로 파쇄한 다음 70% 에틸 알코올을 천궁 건조중량의 10배 부피비로 첨가하여 15-35℃에서 5일간 추출한 후 여과하여, 5-10℃에서 7-10일간 숙성시키고 여과하여 감압증발기로 건조하여 천궁 추출물을 얻는다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 천궁 추출물에 포함되는 것이다. 또한, 천궁 추출물의 범위에는 천궁으로부터 추출되어 가공된 “생큐노라이드 A” 및 기타 천궁의 가공물이 포함된다.

본 발명의 천궁추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 이용되는 “프로테아제”는 한국산 무당 거미의 장내 미생물이 생산하는 단백질 분해 효소로서, 케라틴, 젤라틴, 엘라스틴등의 다양한 기질 단백질을 분해하는 특징을 가지고 있으며, 분자량은 51.5킬로 달톤(51.5 kDa)이다 미생물의 발효로 생산되는 단백질 분해 효소는 미황색의 가루로서 약간의 특이취가 있다.

본 발명에 사용한 프로테아제는 넓은 pH 범위(pH 5.0 - 8.0)에서 활성을 나타내며, 특히 저온 및 높은 염분 농도에서도 단백질 분해 능력을 유지 한다. 또한 다양한 단백질 기질에 대한 분해 능력을 가지고 있기 때문에 피부의 노화 각질을 구성하는 성분인 케라틴, 각질과 각질을 결합시켜주는 단백질인 데스모좀 (desmosome)을 분해하여 피부의 갱신시간을 빠르게 해준다. 상기의 성질로 인해 프로테아제는 피부에 대해 탁월한 각질 박리효과가 있는 것으로 나타난다.

본 발명의 화장료 조성물에 유효성분으로 포함되는 프로테아제는 상술한 바와 같은 미생물로부터 분리할 수도 있으나, 상업적으로 시판되는 제품을 사용하여도 동일한 효과를 나타낼 수 있다.

또한 상기 프로테아제는 피부에 대해 저 자극성으로, 프로테아제를 피부에 사용하는 경우 가벼운 홍반 등을 수반할 수 있으나, 피부에 대한 자극성의 정도를 평가하는 기준인 (i) 경계가 뚜렷하나 약한 홍반, (ii) 부종 및 구진, (iii) 뚜렷한 홍반, (iv) 구진 및 소수포, (v) 심한 홍반 및 소포형성, (vi) 대수포 형성 등은 나타나지 않는바 피부에 대한 자극이 거의 없는 물질이다.(참조: 표 4)

본 발명의 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 천궁 추출물 및 프로테아제 이외에 다른 미백 유효 성분을 포함할 수 있다. 그러나, 본 발명의 화장료 조성물은 천궁 추출물 및 프로테아제만으로 구성된 유효 성분으로도 매우 우수한 미백 효과를 나타낸다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 천궁 추출물 및 프로테아제의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 각각 0.01-10.0 중량% 및 0.01-10.0 중량%이며, 더욱 바람직하게는 각각 0.1-5.0 중량% 및 0.05-5.0 중량%이다.

이때, 천궁 추출물과 프로테아제의 함량이 0.01 중량% 미만일 때에는 그 효 과가 나타나기 어렵고, 상기 성분 모두의 함량이 10.0 중량% 이상일 때에는 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며, 제형의 안정화에도 큰 영향을 미칠 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 천궁 추출물 및 프로테아제 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카 본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 천궁 추출물과 프로테아제를 유효성분으로 함께 사용함으로써 천궁 추출물의 티로시나아제 생성 억제 효과와 프로테아제의 각질 박 리효과가 복합적으로 나타나 상기 성분 각각을 단독으로 사용하는 경우에 비해 보다 상승적 (synergic)인 미백효과를 달성할 수 있다(참조: 실험예 1). 또한, 각질 박리제로 프로테아제를 사용함으로써 종전의 히드록시산의 사용으로 인해 피부 자극이 발생되었던 문제점을 개선하였다(참조: 실험예 2). 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예 1 : 천궁 추출물의 제조

본 발명의 화장료 조성물의 유효성분인 천궁 추출물을 다음과 같이 제조하였다: 먼저 정제수로 세척하고 건조한 후 작은 조각으로 파쇄한 천궁 뿌리 파우더를 10배의 70% 에탄올에 넣고, 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과한 다음, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시키고, 와트만 여과지로 여과하였다. 이어 이 추출물을 65℃에서 회전 감압 증발기로 건조시켜 천궁 추출 분말을 수득하였다. 상기 천궁 추출 분말을 물과 1,3-부틸렌글리콜이 동량으로 혼합된 용액에 용해시켜서 본 발명의 천궁 추출물을 수득하였다.

제조예 2 : 천궁 추출물 및 프로테아제를 포함하는 크림제형의 화장료 조성물의 제조

천궁 추출물과 프로테아제를 함유하는 조성물의 미백 효과, 자극 시험을 위하여 천궁 추출물 4.0중량% 및 프로테아제 0.5중량%를 함유하는 크림제형의 화장료 조성물(실시예)을 하기 표 1과 같은 조성비로 사용하여 통상의 화장료 제조방법으로 제조하였다. 조성물의 제조에 사용한 천궁 추출물은 상기 제조예 1에서 제조한 추출물이며, 프로테아제는 (주)인섹트바이오텍사(한국)의 Arazyme 제품이다.

구분	함량 (중량%)
성분	실시예	비교예1	비교예2	비교예3	비교예4	비교예5
천궁 추출물	4.0	-	4.0	-	-	-
프로테아제	0.5	-	-	0.5	-	-
락트산	-	-	-	-	1.0	-
글리콜산	-	-	-	-	-	1.0
부틸렌글리콜	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
프로필렌글리콜	6.0	6.0	6.0	6.0	6.0	6.0
카르복시비닐폴리머	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
밀납	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
바셀린	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0
폴리솔베이트 60	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5
스쿠알란	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
유동파라핀	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
트리에탄올아민	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
토코페릴아세테이트	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
향료, 방부제	미량	미량	미량	미량	미량	미량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
합계	100	100	100	100	100	100

제조예 3: 천궁 추출물 및 프로테아제를 포함하지 않는 화장료 조성물(비교예 1 내지 5)의 제조

천궁 추출물 및 프로테아제를 포함하지 않는 것만 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 상기 표 1의 조성으로 화장료 조성물(비교예 1)을 제조하였다. 상기 표 1의 조성대로, 비교예 1의 조성에 천궁 추출물만 4.0중량%(비교예 2), 프로테아제만 0.5 중량%(비교예 3), 기존의 각질 박리제의 주성분인 락트산 1.0중량%(비교예 4), 글리콜산 1.0 중량%(비교예 5)를 첨가하여 비교예의 화장료 조성물을 제조하였다.

실험예 1 : 미백효과 측정

34-45세의 여성 20명을 대상으로, 제조예 2 및 3에서 제조한 실시예 및 비교예 1 내지 3의 화장료 조성물 각각의 미백 효과를 측정하였다. 피검자의 팔의 7군데를 가로 × 세로 1cm씩 표시하고, 자외선 UV-A를 15J/㎠의 광량으로 조사하여 흑화를 일으킨 후, 실시예 및 비교예 1 내지 3의 화장료 각각을 1 달 동안 하루에 2회 적용하였다. 피부색 측정 장비인 Minolta CR 300을 사용하여 1 개월 경과 후 피부색 (L value)을 측정하여 하기 수학식 1의 계산식에 따라 피부색의 변화도를 계산했으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

ΔL 값 = 화장료 적용 전의 L 값 - 1 개월 경과 후 L 값

미백 임상시험 결과

구분	실시예	비교예 1	비교예 2	비교예 3
ΔL 값	4.78	0.41	1.56	1.74

상기 표 2의 결과에 따르면, 천궁 추출물과 프로테아제를 함께 함유하는 실시예의 제형은 천궁 추출물만을 함유한 크림 (비교예 2)에 비해 약 3.06배, 프로테아제만을 함유한 크림 (비교예 3)에 비해 약 2.7배 높은 미백효과가 나타났다. 따라서, 본 발명의 조성물과 같이 천궁 추출물과 프로테아제를 동시에 함유하는 경우 미백효과를 상승적으로 크게 증가시킬 수 있음을 알 수 있었다.

실험예 2 : 피부 자극 시험

상기 제조예 2에서 제조된 각 화장료의 피부 자극성을 시험하기 위해, 건강한 성인 남녀 20명을 대상으로 첩포 시험 (patch test)을 헤이즈 테스트 쳄버 (Haye's Test Chamber)를 이용하여 실시하였다. 시험부위를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 다음, 준비된 시험물질 (제조예 2 및 3의 화장료 각각) 15 ㎍ 또는 15 ㎕를 적하한 쳄버 (Finn chamber, 100x10, EPITEST, 핀란드국)를 시험 대상자의 전박 (forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험 부위를 표시하였다. 각각 1시간 그리고 24시간 후(첩포 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 24시간, 48시간)에 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다. 피부 반응은 국제접촉피부염연구회 (ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group)의 규정(표 3)에 따라 판정하였으며, 하기 수학식 2에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하고 그 결과를 표 4에 나타내었다.

피부 반응의 평가 기준 및 점수

기호	점수	평가기준
-	0	무반응, 정상 피부
±	0.5	희미한 또는 가벼운 홍반
＋	1.0	경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진
＋＋	2.0	뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포
＋＋＋	3.0	심한 홍반 및 소포형성
＋＋＋＋	6.0	대수포 형성

시험 물질	24 시간	48 시간	평균 피부 반응도 (n=20)
	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋
실시예	2 - -	1 - -	0.63
비교예 1	1 - -	1 - -	0.42
비교예 2	2 - -	- - -	0.42
비교예 3	3 - -	- - -	0.63
비교예 4	4 3 -	2 2 -	3.33
비교예 5	3 5 -	3 1 -	3.75

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 기존에 각질박리제로 사용되던 락트산이나 글리콜산을 함유한 제형 (비교예 4 및 5)에서 높은 피부자극이 나타난 결과와는 대조적으로, 천궁 추출물을 함유한 제형(비교예 2) 및 프로테아제를 함유한 제형 (비교예 3)에서는 피부 반응도가 매우 낮았고, 본 발명에서 사용한 천궁 추출물과 프로테아제를 모두 함유한 크림 제형에서도 또한 피부 자극이 거의 없어, 천궁 추출물과 프로테아제는 피부자극을 거의 유발하지 않는 성분임을 알 수 있었다.

이하 상기한 시험예들의 결과를 근거로 하여 천궁 추출물 및 프로테아제를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.

제형예 1: 유연화장수 (스킨로션)

하기 표 5에 나타난 바와 같이 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
천궁 추출물	4.0
프로테아제	0.5
1,3-부틸렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
올레일알콜	0.1
폴리솔베이트 20	0.5
에탄올	15.0
벤조페논-9	0.05
향, 방부제	미량
정제수	잔량

제형예 2: 영양화장수(밀크로션)

하기 표 6에 나타난 바와 같이 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
천궁 추출물	4.0
프로테아제	0.5
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	1.2
토코페릴아세테이트	3.0
유동 파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다미아너트오일	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.0
카르복시비닐 폴리머	1.0
향, 방부제	미량
정제수	잔량

제형예 3: 영양크림

하기 표 7에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
천궁 추출물	4.0
프로테아제	0.5
바셀린	7.0
유동파라핀	10.0
밀납	2.0
폴리솔베이트 60	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
스쿠알란	3.0
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
카르복시비닐폴리머	0.5
토코페릴아세테이트	0.1
향, 방부제	미량
정제수	잔량

제형예 4: 마사지크림

하기 표 8에 나타난 바와 같이 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
천궁 추출물	4.0
프로테아제	0.5
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
밀납	2.0
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	3.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
세테아릴알콜	2.0
유동파라핀	30.0
카르복시비닐폴리머	0.5
향, 방부제	미량
정제수	잔량

제형예 5: 팩

하기 표 9에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
천궁 추출물	4.0
프로테아제	0.5
프로필렌글리콜	2.0
글리세린	4.0
카르복시비닐폴리머	0.3
에탄올	7.0
피이지-40 히드로게비이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올아민	0.3
향, 방부제	미량
정제수	잔량

이상에서 상세히 설명하였듯이, 본 발명은 천궁 추출물과 프로테아제를 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 천궁 추출물과 프로테아제를 유효성분으로 함께 사용함으로써 천궁 추출물의 멜라노사이트 자극 호르몬 활성 저해 효과와 프로테아제의 각질 박리효과가 복합적으로 나타나 상기 유효성분 각각을 단독으로 사용하는 경우에 비해 보다 상승적 (synergic)인 미백효과를 달성할 수 있으며, 피부 자극이 거의 없어 안전성이 우수한 피부 미백용 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (7)

1. 천궁(Cnidium officinale) 추출물 및 한국산 무당 거미의 장내 미생물이 생산하는 단백질 분해효소인 프로테아제(protease)를 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 천궁 추출물의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 10.0 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
3. 제 1 항에 있어서, 상기 프로테아제의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 10.0 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
4. 제 1 항에 있어서, 상기 천궁 추출물은 천궁의 뿌리 추출물인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
5. 제 1 항에 있어서, 상기 천궁 추출물은 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름, (g) 1,3-부틸렌글리콜, (h) 부틸아세테이트로 구성된 군으로부터 선택되는 추출 용매를 사용하여 추출되는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
6. 제 5 항에 있어서, 상기 추출 용매는 에탄올인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
7. 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.