KR100554162B1

KR100554162B1 - 올레아미드 또는 모노아세틸디글리세라이드가 함유된폴리(ｎ-비닐 카프로락탐) 스마트 나노 입자 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR100554162B1
Application number: KR1020020079182A
Authority: KR
Inventors: 정명애; 전길자; 이윤실
Original assignee: 한국전자통신연구원
Priority date: 2002-12-12
Filing date: 2002-12-12
Publication date: 2006-02-22
Also published as: KR20040051282A

Abstract

유화 중합에 의해 얻어진 폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어지는 미셀의 코어에 올레아미드(oleamide) 또는 모노아세틸디글리세라이드(MADG)와 같은 치료 약물이 포획된 스마트 나노 입자 및 그 제조 방법에 관하여 개시한다. 본 발명에 따른 스마트 나노 입자를 제조하기 위하여, 치료 약물과 N-비닐 카프로락탐 단량체를 계면활성제와 함께 교반하여 유화시킨다. 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시켜, 상기 치료 약물이 균일하게 함유된 코아를 가지는 미셀로 이루어지는 나노 입자를 형성한다.

비닐 카프로락탐, 올레아미드, MADG, 스마트 나노 입자

Description

올레아미드 또는 모노아세틸디글리세라이드가 함유된 폴리(Ｎ-비닐 카프로락탐) 스마트 나노 입자 및 그 제조 방법 {Poly(N-vinyl caprolactam) smart nanoparticles including oleamide/monoacetyldiglycerides and methods for manufacturing the same}

도 1은 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법을 설명하기 위한 플로차트이다.

도 2는 본 발명에 따른 방법에 의하여 제조된 스마트 나노 입자에서 코어에 포획된 치료 약물의 구조를 도식화한 것이다.

<도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명>

50: 나노 입자, 52: 코어, 54: 미셀.

본 발명은 약물 전달 시스템으로 사용하기 적합하도록 치료 약물을 함유하는 스마트 나노 입자 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 특히 올레아미드 또는 모노아세틸디글리세라이드가 함유된 폴리(N-비닐 카프로락탐) 스마트 나노 입자 및 그 제조 방법에 관한 것이다.

종래에는 리포좀, 약물성 미셀 등을 이용한 미세 불균일계의 유화제 약물 전달 시스템이 많이 사용되었다. 이와 같은 미세 불균일계의 유화제 약물 전달 시스템은 약물을 탑재하고 이를 방출하는 기능은 가지고 있었으나, 약물이 기관 선택성을 갖도록 하기 위해서는 치료 약물 자체의 화학적 구조를 변형시킴으로서 치료 대상 기관에 대한 선택성을 갖도록 디자인할 필요가 있었다. 이와 같이 화학적 구조 변형에 의하여 얻어진 약물 전달 시스템에서는 암세포 등과 같은 변형된 세포와 정상 세포를 구별하지 못하며, 약물 투여에 의하여 정상 세포 자체의 변형을 초래하는 문제가 있었다. 또한, 과량의 약물을 투여해야 하므로 투여된 약물의 과다 사용에 따른 부작용, 투여 물질 자체의 독성 등과 같은 문제점들을 초래하였다.

따라서, 종래의 화학적 구조 변형에 의한 치료에 비하여 정상 세포에 대한 부작용을 최소화할 수 있고, 암세포 등과 같이 치료를 요하는 표적 부위에 약물을 선택적으로 집중시킴으로써 치료 효과를 향상시킬 수 있는 새로운 구조의 스마트 나노 입자를 개발할 필요가 있다.

본 발명의 목적은 약물을 물리적으로 탑재 및 방출하는 기능 뿐 만 아니라, 정상 세포에 대한 부작용을 최소화 할 수 있고, 암세포 등과 같이 특정 기공 크기를 갖는 표적 부위까지 보다 안정적이고 선택적으로 약물을 전달할 수 있는 자체 제어 능력을 가지는 스마트 나노 입자를 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 약물을 물리적으로 탑재 및 방출하는 기능 뿐 만 아니라, 정상 세포에 대한 부작용을 최소화 할 수 있으며, 특정 기공 크기를 갖는 표적 부위까지 보다 안정적이고 선택적으로 약물을 전달할 수 있는 자체 제어 능력을 가지는 스마트 나노 입자의 제조 방법을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자는 치료 약물이 균일하게 함유되어 있는 코어와, 폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어지고 상기 코어를 포획하도록 형성된 미셀(micelle)로 구성된다.

상기 치료 약물은 올레아미드, 모노아세틸디글리세라이드(MADG) 및 이들의 유도체로 이루어지는 군에서 선택된다.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에서는 치료 약물과 N-비닐 카프로락탐 단량체를 계면활성제와 함께 교반하여 유화시킨다. 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시켜, 상기 치료 약물이 균일하게 함유된 코아를 포위하는 미셀로 이루어지는 나노 입자를 형성한다.

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키기 위하여 포타지움 퍼설페이트, 암모니움 퍼설페이트 및 포타지움 퍼옥사이드로 이루어지는 군에서 선택되는 중합개시제가 사용된다.

본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에서는 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 중합 온도를 40 ∼ 90℃의 범위 내에서 조절하는 단계를 더 포함할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에서는 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 중합시의 교반 속도를 500 ∼ 2000rpm의 범위 내에서 조절하는 단계를 더 포함할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에서는 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 상기 중합 개시제의 양을 조절하는 단계를 더 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 중합 개시제는 상기 N-비닐 카프로락탐 단량체의 총 중량을 기준으로 0.1 ∼ 1 중량%의 양으로 사용된다.

바람직하게는, 상기 나노 입자는 50 ∼ 300nm의 입경 사이즈를 가지도록 조절된다.

상기 계면활성제는 세틸트리메틸암모니움 브로마이드 및 소디움 도데실 설페이트 중에서 선택될 수 있다. 이 때, 상기 계면활성제는 그 1차 임계 미셀 농도(critical micelle concentration)와 2차 임계 미셀 농도 사이의 양으로 사용되는 것이 바람직하다.

본 발명에 의하면, 올레아미드 또는 MADG와 같은 치료 약물을 폴리(N-비닐 카프로락탐)에 탐재함으로써, 특정 기공 크기를 가지는 표적 부위에 보다 안정적이고 또한 선택적으로 약물을 전달하는 자체 제어 능력을 가지는 스마트 나노 입자를 제공할 수 있으며, 약물 전달 시스템 자체가 표적 기관 선택성을 가지고 있으므로 약물 투여량을 최소화할 수 있고, 정상 세포에 대한 부작용을 최소화시킬 수 있다.

다음에, 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 첨부 도면을 참조하여 상세히 설명한다.

본 발명자들은 스마트 폴리머인 폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어진 나노 입자가 천연물에서 추출된 올레아미드 또는 모노아세틸디글리세라이드(MADG)를 물리적으로 탑재 및 방출하는 기능 뿐 만 아니라 온도, pH의 변화, 외부 이온 농도 및 삼투압과 같은 외부 변화에 대하여 스스로 크기 변화를 일으킴으로써, 예를 들면 암세포 등과 같은 특정 기공 크기를 갖는 표적 부위까지 보다 안정적이고 선택적으로 약물을 전달하는 자체 제어 능력을 가지는 것을 발견하였다. 또한, 폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어진 나노 입자를 사용함으로써 정상 세포에 대한 부작용을 최소화 할 수 있고, 암세포 등의 치료에 있어서 같은 양의 올레아미드 또는 MADG를 사용하였을 때 종래 기술에 따른 경우보다 효율이 약 10 ∼ 100 배 증대됨을 확인하였다.

도 1을 참조하면, 먼저 치료 약물과 N-비닐 카프로락탐 단량체를 계면활성제와 함께 교반하여 유화시킨다 (단계 10).

상기 치료 약물은 영지에서 추출된 천연 약리 활성물인 올레아미드, 녹용에서 추출된 모노아세틸디글리세라이드(MADG) 및 이들의 유도체로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나로 구성된다. 상기 계면활성제로는 양이온 계면활성제인 세틸트리메틸암모니움 브로마이드 (이하, "CTAB"라 함), 또는 음이온 계면활성제인 소디움 도데실 설페이트 (이하, "SDS"라 함)를 사용할 수 있다. 상기 계면활성제는 임계 미셀 농도(critical micelle concentration: CMC) 이상의 양으로 사용되어야 한다. 바람직하게는, 상기 계면활성제는 그 1차 임계 미셀 농도와 2차 임계 미셀 농도 사이의 양으로 사용된다. CMC 이하의 농도에서는 미셀을 형성하지 못하기 때문에 합성이 용이하지 않아 바람직하지 않다. 예를 들면, 소디움 도데실 설페이트의 CMC는 25℃에서 8.3 mM이다.

그 후, 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시켜, 상기 치료 약물이 균일하게 함유된 코아를 포위하는 미셀(micelle)로 이루어지는 나노 입자를 형성한다 (단계 20).

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키기 위하여 포타지움 퍼설페이트, 암모니움 퍼설페이트 및 포타지움 퍼옥사이드로 이루어지는 군에서 선택되는 중합개시제가 사용될 수 있다. 상기 중합 개시제는 상기 N-비닐 카프로락탐 단량체의 총 중량을 기준으로 0.1 ∼ 1 중량%의 양으로 사용되는 것이 바람직하다.

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 중합 반응 조건을 제어함으로써 상기 나노 입자의 사이즈를 제어할 수 있다. 보다 구체적으로 설명하면, 상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 유화 중합 온도를 약 40 ∼ 90℃의 범위 내에서 조절하거나, 또는 교반 속도를 약 500 ∼ 2000rpm의 범위 내에서 조절함으로써 스마트 나노 입자를 약 50 ∼ 300nm의 입경 사이즈를 가지도록 할 수 있다.

또한, 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 중합시 첨가되는 중합 개시제의 양을 조절할 수도 있다. 이미 설명한 바와 같이, 상기 중합 개시제는 상기 N-비닐 카프로락탐 단량체의 총 중량을 기준으로 0.1 ∼ 1 중량%의 양으로 사용되는 것 이 바람직하다. 상기 중합 개시제의 양이 1 중량%를 초과하는 경우에는 많은 라디칼의 형성으로 인해서 나노 입자의 수가 증가되고, 그로 인해서 입자의 직경은 작아지게 되지만 이러한 효과는 미미하고, 합성 후의 제거가 용이하지 않기 때문에 중합 개시제는 적은 양으로 사용하는 것이 좋다. 그러나, 상기 중합 개시제를 0.1 중량% 미만의 너무 적은 양으로 사용하는 경우에는 반응 속도가 현저히 떨어지고 입자의 직경도 커지는 결과를 초래하여 바람직하지 않다.

상기 나노 입자의 사이즈를 제어할 수 있는 다른 조건으로서 계면활성제의 종류 및 농도를 조절하는 방법을 이용할 수도 있다.

본 발명에 따른 스마트 나노 입자 제조 방법에 의하면, 유화 중합법으로 비닐 카프로락탐 스마트 나노 입자를 제조하는 것으로, 그 입자 사이즈를 용이하게 제어할 수 있고, 또한 용해도 차이에 의해 나노 입자 내에 치료 약물, 예를 들면 올레아미드 또는 MADG를 포획하여 표적 기관 선택성을 개선시켜 약물을 효율적으로 전달할 수 있다.

본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에 있어서, 대표적인 폴리머 유화 중합 반응은 반응식 1로 표현될 수 있다.

반응식 1에서, R은 -OSO₃ ^-K⁺ 또는 -OH/-Ot-Bu이고, MBAA는 가교제로서 N,N-메틸렌비스아크릴아미드이고, SDS는 계면활성제로서 소디움 도데실설페이트이고, KPS는 중합개시제로서 포타지움 퍼설페이트이다.

여기서, 이미 설명한 바와 같이, 얻어지는 나노 입자의 사이즈는 폴리머 종류를 선정하고, 유화 중합 조건을 조절하는 것으로 제어가 가능하며, 약 50nm에서 300nm까지 다양한 사이즈로 합성할 수 있다.

도 2는 본 발명에 따른 방법에 의하여 제조된 스마트 나노 입자(50)에서 코어(52)에 포획(encapsulation)된 치료 약물의 구조를 도식화한 것이다. 도 2에서, 상기 나노 입자(50)의 코어(52)에는 치료 약물로서 올레아미드 또는 MADG가 포획되어 있고, N-비닐 카프로락탐 단량체의 유화 중합 생성물인 폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어지는 미셀(micelle)(54)이 상기 코어(52)를 포획하도록 형성되어 있다.

다음에, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에서 나노 입자에 치료 약물인 올레아미드 또는 MADG를 포획시키는 원리에 대하여 설명한다.

나노 입자 내에 치료 약물을 포획하는 원리는 치료 약물인 올레아미드가 비닐 카프로락탐 연속상과 미셀 내부의 코아 성분에 대한 용해도 차이에 의하여 올레 아미드가 미셀의 내부에 포획되도록 하는 것이다. 보다 구체적 설명하면, 계면활성제를 단량체와 함께 연속상인 물에 넣고 교반하게 되면, 대부분의 단량체는 방울을 형성하고 일부는 계면활성제에 의해서 형성된 미셀의 내부로 녹아 들어가며, 대부 분의 올레아미드도 용해도 차이에 의해 미셀의 내부에 녹아 있게 된다. 반응계의 온도를 상승시키면 중합 개시제가 분해되어 생성된 라디칼이 미셀과 충돌하여 미셀 내부로 들어가서 중합이 개시된다. 중합이 계속되는 동안 단량체는 미셀 주변으로부터 유입되고 만약 제2의 라디칼이 침입해 오면 중합 반응은 중지되고 또 다시 새로운 라다칼이 들어오면 중합 반응이 개시된다. 반응 시간이 경과하면 중합체로 전환되는 미셀의 수와 크기는 증가하므로 중합체 입자 표면에 흡착되는 계면활성제의 분자수도 증대된다. 따라서, 물층에 있는 계면활성제의 농도가 CMC 이하로 저하되어 미셀이 파괴된다. 그 후의 중합은 기존 생성된 중합체 입자 내부에서 진행된다. 이 전 과정에서 미셀 내부에 존재하던 치료 약물인 올레아미드를 중합에 의해 형성된 고분자가 실뭉치처럼 포획하게 되어 올레아미드 또는 MADG를 포함한 고분자 나노 입자가 만들어진다.

다음에, 본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에 대하여 구체적인 실험예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 다음의 구체적인 실험예는 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것이 아니며, 이 기술 분야에 숙련된 자이면 다양한 변형 및 변경이 가능하다.

실험예 1

반응기 속에 일정량의 증류수를 넣고 교반기를 이용하여 1000rpm으로 교반하면서 온도 70℃를 올리고 질소를 이용하여 물속의 용존 산소를 제거하면서, 가교제인 N,N-메틸렌비스아크릴아미드(MBAA) 0.12g과, 계면활성제인 소디움 도데실 설페이트(SDS) 0.375g를 첨가하였다. 단량체인 N-비닐카프로락탐 4 ml에 올레익 아미 드 또는 MADG를 0.010g 녹여서 반응기 속에 넣고, 중합개시제인 포타지움 퍼설페이트(KPS) 0.0375g를 넣어 반응을 시작하였다. 이 때, KPS를 넣기 전에 충분히 산소를 제거해야 수율이 높다. 반응은 일정한 교반 속도 1000rpm을 유지하면서 24시간동안 유지하여 치료 약물이 함유된 스마트 나노 입자를 제조하였다. 이렇게 제조된 N-비닐 카프로락탐 고분자 입자는 가교제로 사용된 MBAA와 계면활성제의 독성을 제거하기 위하여 수용액상에서 투석법(dialysis)에 의해 4일 정도 정제 후 실제 실험에 사용되었다.

실험예 2

계면활성제인 소디움 도데실 설페이트(SDS) 0.500g를 첨가하는 것만 제외하고 실험예 1에서와 동일한 방법으로 치료 약물이 함유된 스마트 나노 입자를 제조하였다.

실험예 3

실험예 1 및 실험예 2에서 얻어진 각 나노 입자의 항암 작용 및 면역 활성 작용을 알아보기 위하여 인-비보(in-vivo), 인-비트로(in-vitro) 실험 등을 병행하였다. 실험 결과, 조혈 작용이 있다고 알려진 MADG의 비장 세포에 대한 증식능을 확인하였고, Jurkat T cell에서 NFkB, IL-2에 대한 프로모터(promotor) 활성이 있음을 확인하였다. 따라서, MADG는 센터 면역 시스템 (central immune system) 뿐 만 아니라 주변 면역 시스템 (peripheral immune system)에서도 면역 증강 효과가 있음을 확인하였다. MADG의 유도체인 DAMG에 의해서도 면역 세포의 증식능 및 Jurkat T cell에서의 NFkB, IL-2 에 대한 프로모터(promotor) 활성이 있음을 확인 하였다.

실험예 4

스마트 나노 입자를 탑재함으로써 소수성 물질인 MADG의 용해도를 개선할 수 있었다. 이로 인하여 동일한 활성을 유도하는데 있어서 기존 시료의 사용 용량에 비해 1/100이 적은 용량에서 스마트 나노 입자 탑재시에도 면역 세포 증식능을 유도할 수 있었으므로 시스템의 효율을 높일 수 있었다. 따라서, 스마트 나노 입자가 소수성 물질에 적용 할 수 있는 약물 전달계 (DDS, Drug Delivery System)의 적절한 물질임을 확인하였다.

본 발명에 따른 스마트 나노 입자는 유화 중합에 의해 합성된 스마트 고분자인 폴리(N-비닐 카프로락탐) 나노 입자에 영지에서 추출된 천연 약리 활성물인 올레아미드 또는 녹용에서 추출된 MADG를 균일하게 포함시켜 얻어진 것으로, 치료가 요구되는 기관에 대해 우수한 선택성으로 약물을 전달함으로써 표적 기관 선택성에 의하여 정상 세포에 대한 부작용을 최소화하고, 치료 효과를 10 ∼100 배 향상시킬 수 있다.

본 발명에 따른 스마트 나노 입자의 제조 방법에 의하면, 중합 조건의 변경, 예를 들면, 계면활성제의 종류 및 사용량의 변경, 유화 중합시 교반 속도, 유화 중합 온도의 변경, 및 중합 개시제의 종류 및 사용량의 변경 등에 따라 다양한 크기의 스마트 나노 입자를 제조할 수 있다. 그리고, 본 발명에 따라 유화 중합에 의하여 제조된 치료 약물 함유 스마트 나노 입자를 약물 전달 시스템으로 이용하는 경 우, 향상된 침투 및 지속 효과 (EPR: enhanced permeation and retention effect)에 의해서 암세포 등의 치료를 요하는 부위에 약물을 선택적으로 집중시킴으로서 상기한 종래의 화학 구조 변형에 의한 치료의 경우보다 효율적으로 치료를 할 수 있다. 이는 나노 입자의 유화 중합시 그 반응계에 치료 약물을 함께 투입하고 중합시킴으로서 치료 약물이 나노 입자 내부에 균일하게 분포함으로 인해 표적 세포에 나노 입자가 집중되기 때문이다.

상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 나노 입자는 올레아미드 또는 MADG와 같은 치료 약물을 폴리(N-비닐 카프로락탐)에 탐재하여 얻은 것으로서, 온도 pH의 변화, 외부 이온 농도 및 삼투압과 같은 외부 변화에 대하여 스스로 크기 변화를 일으킴으로써 암세포 등과 같이 특정 기공 크기를 가지는 표적 부위에 보다 안정적이고 또한 선택적으로 약물을 전달하는 자체 제어 능력을 가진다. 또한, 약물 전달 시스템 자체가 표적 기관 선택성을 가지고 있으므로 약물 투여량을 최소화할 수 있고, 정상 세포에 대한 부작용을 최소화시킬 수 있다.

이상, 본 발명을 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되지 않고, 본 발명의 기술적 사상의 범위 내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러가지 변형이 가능하다.

Claims

올레아미드, 모노아세틸디글리세라이드(MADG) 및 이들의 유도체로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나로 구성되는 치료 약물이 균일하게 함유되어 있는 코어와,

폴리(N-비닐 카프로락탐)으로 이루어지고 상기 코어를 포획하도록 형성된 미셀(micelle)로 구성되는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자.
삭제
치료 약물과 N-비닐 카프로락탐 단량체를 계면활성제와 함께 교반하여 유화시키는 단계와,

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시켜, 상기 치료 약물이 균일하게 함유된 코아를 포위하는 미셀로 이루어지는 나노 입자를 형성하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제3항에 있어서,

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키기 위하여 포타지움 퍼설페이트, 암모니움 퍼설페이트 및 포타지움 퍼옥사이드로 이루어지는 군에서 선택되는 중합개시제가 사용되는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제3항에 있어서,

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 중합 온도를 40 ∼ 90℃의 범위 내에서 조절하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제3항에 있어서,

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 중합시의 교반 속도를 500 ∼ 2000rpm의 범위 내에서 조절하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제4항에 있어서,

상기 유화된 N-비닐 카프로락탐 단량체를 중합시키는 동안 상기 나노 입자의 사이즈를 제어하기 위하여 상기 중합 개시제의 양을 조절하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제4항 또는 제7항에 있어서,

상기 중합 개시제는 상기 N-비닐 카프로락탐 단량체의 총 중량을 기준으로 0.1 ∼ 1 중량%의 양으로 사용되는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제5항 내지 제7항중 어느 한 항에 있어서,

상기 나노 입자는 50 ∼ 300nm의 입경 사이즈를 가지는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제3항에 있어서,

상기 계면활성제는 세틸트리메틸암모니움 브로마이드 및 소디움 도데실 설페이트 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.
제10항에 있어서,

상기 계면활성제는 그 1차 임계 미셀 농도(critical micelle concentration)와 2차 임계 미셀 농도 사이의 양으로 사용되는 것을 특징으로 하는 스마트 나노 입자의 제조 방법.