KR100477414B1 - How to increase crop yields using N- (phosphonomethyl) glycine and its derivatives - Google Patents
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Abstract
본 발명은 사탕무우, 사료 비트, 옥수수, 종유 평지 및 목화중에서 선택된, 글리포세이트에 대한 내성을 지닌 작물의 수확량 및/또는 품질을 증대시키기 위한 글리포세이트 또는 이의 유도체의 신규한 용도에 관한 것이다.The present invention relates to a novel use of glyphosate or derivatives thereof to increase the yield and / or quality of crops resistant to glyphosate, selected from beet, feed beet, corn, oilseed rape and cotton. .
Description
본 발명은 글리포세이트에 대해 내성이 있는 작물의 수확량을 증대시키기 위한 제제로서의 글리포세이트 또는 N-(포스포노메틸)글리신 및 이의 유도체(예: 염 및 에스테르)의 신규한 용도에 관한 것이다.The present invention relates to the novel use of glyphosate or N- (phosphonomethyl) glycine and its derivatives (e.g. salts and esters) as agents for increasing the yield of crops resistant to glyphosate.
글리포세이트는 효과적인 군엽 활성(발아 후) 비선택적 침투 제초제로서 익히 공지되어 있다. 글리포세이트는 다양한 효소 시스템에 작용하여, 처리된 식물에서 아미노산 및 기타 내생적 화합물이 형성되지 않도록 하는 것으로 공지되어 있다. 산 형태는 수용성이 비교적 낮기 때문에, 글리포세이트는 대부분 모노-이소프로필암모늄 염, 암모늄 염, 나트륨 염 등과 같은 염 형태로 시판되고 있다.Glyphosate is well known as an effective foliage activity (after germination) non-selective penetrating herbicide. Glyphosate is known to act on a variety of enzyme systems to prevent the formation of amino acids and other endogenous compounds in the treated plants. Since the acid form is relatively low in water solubility, glyphosate is mostly commercially available in the form of salts such as mono-isopropylammonium salts, ammonium salts, sodium salts and the like.
익히 공지된 제형화된 제품은 활성 성분, 계면활성제 또는 계면활성제 혼합물 및 기타 가능한 첨가제, 예를 들면, 소포제, 부동제, 염료 및 당업계에 공지된 기타 제제를 포함한다[참조: "The Herbicide Glyphosate", edited by E. Grossbard and D. Atkinson, Butterworth & Co, 1985].Well-known formulated products include active ingredients, surfactants or surfactant mixtures and other possible additives such as antifoams, antifreezes, dyes and other agents known in the art. See “The Herbicide Glyphosate. ", edited by E. Grossbard and D. Atkinson, Butterworth & Co, 1985].
미국 특허 제3,853,530호에는 식물의 자연 생장 및 발달을 변화시켜 고엽화하거나 영양 생장을 억제시키기 위한 N-(포스포노메틸)글리신 및 이의 유도체가 용도가 기재되어 있다. 특정 식물의 경우, 이러한 억제로 인해 원줄기가 짧아지고 곁가지가 증가하는 것으로 알려졌다. 이러한 자연 생장 또는 발달의 변화는 식물이 작고 무성하도록 하며, 이러한 식물은 종종 가뭄 및 해충 침입에 대한 내성이 증가된 것으로 입증되었다. 잔디의 경우, 또한, 영양 생장의 억제가 매우 바림직하므로, 뿌리 발달을 증강시켜 조밀하고 억센 잔디를 제공하고 잔디밭, 골프 코스 및 유사한 목초지의 풀 베는 간격을 증가시킨다. 여러 유형의 식물, 예를 들면, 사일리지 작물, 감자, 사탕수수, 비트, 포도, 메론 및 과실수의 경우, 글리포세이트에 의한 영양 생장의 억제로 인해 수확시 당해 식물의 탄수화물의 함량이 증가된다고 알려졌다. 분명히, 이러한 용도에서는 치사량 미만의 양이 요구되는데, 이는 그렇지 않은 경우 처리된 식물이 죽기 때문이다.U.S. Patent No. 3,853,530 describes the use of N- (phosphonomethyl) glycine and derivatives thereof to alter the natural growth and development of plants to defoliate or inhibit trophic growth. For certain plants, this inhibition is known to shorten the stem and increase the side branches. This change in natural growth or development causes plants to be small and lush, and these plants have often been proven to have increased resistance to drought and pest infestation. In the case of turf, the suppression of trophic growth is also highly desirable, thus enhancing root development to provide dense and tight turf and to increase the mowing intervals of lawns, golf courses and similar pastures. In the case of various types of plants, such as silage crops, potatoes, sugar cane, beets, grapes, melons and fruit trees, the suppression of nutrient growth by glyphosate increases the carbohydrate content of the plant at harvest. Became known. Obviously, less than lethal doses are required for such applications, because otherwise the treated plants die.
보다 특히, 미국 특허 제3,988,142호에는 사탕수수와 같은 식물에서 탄수화물의 축적을 증가시키기 위한 N-(포스포노메틸)글리신 및 이의 유도체의 용도가 기재되어 있다. 사용되는 양은 치사량 미만의 양이고 수확 직전에 적용된다.More particularly, US Pat. No. 3,988,142 describes the use of N- (phosphonomethyl) glycine and derivatives thereof to increase the accumulation of carbohydrates in plants such as sugar cane. The amount used is less than lethal and is applied immediately before harvest.
위에서 언급한 두가지 예에서, 비치사량, 즉 작물 분야에서 잡초군을 제거하는 데 통상적으로 사용되는 양보다 훨씬 적은 양의 글리포세이트 제초제는 영양 생장의 감소 또는 억제를 유발하고, 당해 활성 물질은 식물에서 이의 제초 활성을 발휘하는 경우에 따르는 통상적인 경로를 따른다. 미국 특허 제3,988,142호의 경우, 영양 생장을 억제하면, 식물의 이용가능한 많은 탄수화물이 계속되는 성장을 위한 식물의 영양물로 사용되기보다는 전분 또는 슈크로즈로 전화되는 것으로 여겨진다.In the two examples mentioned above, glyphosate herbicides lead to reduced or inhibited nutritional growth, which is much less than the amount of non-fatal use, i. Follow the usual route according to where it exerts its herbicidal activity. In the case of US Pat. No. 3,988,142, inhibiting trophic growth is believed that many of the available carbohydrates of the plant are converted to starch or sucrose rather than being used as a plant nutrient for continued growth.
독일 공개특허공보 제3 200 486호는 작물을 효과적인 비선택성 제초제인 포스피노트리신(글루포시네이트)의 치사량 미만의 양으로 처리하여 작물의 수확량을 향상시키는 것에 관한 것이다. 당해 문헌에서도, 치사량 미만의 양의 제초제로 영양 생장을 억제하면 식물 또는 이의 과실중의 탄수화물이 증가되는 것으로 여겨진다. 독일 공개특허공보 제3 200 486호에서는, 동일량인 경우 글리포세이트보다 글루포시네이트가 더 효과적임을 입증하고자 한는 비교 실시예(실시예 II)에서 글리포세이트를 언급하고 있다.German Patent Publication No. 3 200 486 relates to improving the yield of a crop by treating the crop with an amount less than the lethal amount of phosphinothricin (glufosinate), an effective non-selective herbicide. In this document, it is also believed that inhibiting nutrient growth with herbicides in amounts less than lethal amounts increases carbohydrates in plants or their fruits. German Patent Publication No. 3 200 486 refers to glyphosate in a comparative example (Example II), which is intended to demonstrate that glufosinate is more effective than glyphosate at the same amount.
유럽 공개특허공부 제0 401 407호는 유사한 내용에 관한 것이다. 이는 치사 량 미만의 양의 비선택성 제초제, 특히 글리포세이트 및 포스피노트레신을 물질 형성 단계로부터 식물의 성숙 단계에 이르는 전이 과정 동안에 사용하여, 사탕수수 이외에 당 또는 전분을 생성하는 식물, 예를 들면, 사탕무우, 감자 또는 옥수수에서 탄수화물 축적을 증가시키는 것에 관한 것이다.EP 0 401 407 relates to similar content. It uses less than lethal amounts of non-selective herbicides, in particular glyphosate and phosphinotresine, during the transition process from the material formation stage to the maturation stage of the plant, producing plants such as sugar or starch in addition to sugar cane, for example , Increasing carbohydrate accumulation in sugar beets, potatoes or corn.
국제공개공보 제WO 95/05082호에는 작물 분야에서 잡초를 제거하는 데 사용되는 양의 제초제로 작물을 처리함으로써, 포스피노트리신과 같은 글루타민 신테타제 억제제에 대해 내성을 지닌 작물의 수확량을 증가시키는 방법이 기술되어 있다. 또한, 당해 문헌은 작용 방식이 상이한 제초제가 상기 효과를 나타내지 못하거나 종종 작물 수확량에 악영향을 주는 것으로 기재하고 있다.WO 95/05082 describes a method for increasing the yield of crops resistant to glutamine synthetase inhibitors, such as phosphinothricin, by treating the crop with an amount of herbicide used to remove weeds in the crop sector. This is described. In addition, the document states that herbicides with different modes of action do not exhibit this effect or often adversely affect crop yields.
최근 유전자 기술의 개발에 따라, 식물, 특히 작물을 유전학적으로 형질전환시키는 것이 가능해져서 이들에 글리포세이트 또는 이의 유도체에 대한 내성을 부여할 수 있게 되었다. 예를 들면, 유럽 공개특허공부 제0 218 571호는, 식물 세포에서 발현되는 경우, 당해 세포로부터 재생된 식물에 글리포세이트 내성을 부여하는 ESPSP 폴리펩티드를 암호화하는 유전자를 포함하는 클로닝 벡터 또는 발현 벡터에 관한 것이다. 또한, 유럽 공개특허공보 제0 293 358호는 촉매적 활성을 유지하면서도 글리포세이트에 대해 낮은 친화성을 나타내는 돌연변이 EPSP 신타아제 효소를 생성함으로써 글리포세이트 내성 식물의 효과을 증강시키는 것에 관한 것이다. 국제공개공보 제WO 92/00377호에는 글리포세이트 옥시도리덕타제 효소를 암호화하는 유전자가 기재되어 있다. 당해 유전자는 글리포세이트 제초제를 분해하고 글리포세이트 제초제에 대해 내성을 지닌 형질전환된 식물을 생산하는 데 있어서 유용하다. 국제공개공보 제WO 92/04449호에는 글리포세이트 제초제에 대한 내성이 있는 형질전환된 식물을 생산하는 데 있어서 유용한 제II형 EPSPS 효소를 암호화하는 유전자가 기재되어 있다. 작물이 발아한 후 글리포세이트 제초제를 적용하여 상기 작물을 실질적으로 잡초가 없는 상태로 유지할 수 있다. 문헌[참조: Chemical Abstracts, vol. 124, N. 8, 1996]은 문헌[참조: "Weeds" (1995), B.H. Wells, "Development of Glyphosate Tolerant Crops into the Market"]을 참고하고 있다. 저자는 두가지 방법을 사용하여 여러 작물에서 상업적 수준으로 글리포세이트에 대한 내성을 부여할 수 있음을 확인하였다.Recent developments in genetic technology have made it possible to genetically transform plants, especially crops, to confer resistance to glyphosate or derivatives thereof. For example, EP 0 218 571 describes a cloning vector or expression vector comprising a gene encoding an ESPSP polypeptide that, when expressed in a plant cell, confers glyphosate resistance to the plant regenerated from that cell. It is about. EP 0 293 358 also relates to enhancing the effect of glyphosate resistant plants by producing mutant EPSP synthase enzymes that retain catalytic activity while exhibiting low affinity for glyphosate. WO 92/00377 describes genes encoding glyphosate oxidoreductase enzymes. The genes are useful in breaking down glyphosate herbicides and producing transformed plants that are resistant to glyphosate herbicides. WO 92/04449 describes genes encoding a type II EPSPS enzyme useful for producing transformed plants resistant to glyphosate herbicides. After the germination of the crop, glyphosate herbicides can be applied to keep the crop substantially free of weeds. See, Chemical Abstracts, vol. 124, N. 8, 1996, see "Weeds" (1995), B.H. Wells, "Development of Glyphosate Tolerant Crops into the Market". The authors found that two methods can be used to confer resistance to glyphosate at commercial levels in several crops.
1995년 4월 3일에서 6일까지 개최된 심포지움["Proceedings Of The International Symposium On Weed and Crop Resistance to Herbicides"]중에 발표되어 1996년 초에 발행된 문헌[참조: "Roundup ReadyTM Sugar Beet", I. Brants et al.]에는 상업적인 라운드업(RoundupR) 제품의 내성 수준이 유전학적으로 변형된 사탕무우 식물에서 수득됨을 보여주고 있다."Roundup Ready TM Sugar Beet," published in early 1996, published in the Proceedings Of The International Symposium On Weed and Crop Resistance to Herbicides, held April 3-6, 1995, I. Brants et al. Show that the resistance levels of commercial Roundup R products are obtained from genetically modified beet plants.
본 발명에 이르러, 예기치 않게도 글리포세이트 제초제에 대한 내성을 갖도록 한 작물, 예를 들면, 비트 작물, 종유 평지(oilseed rape) 또는 옥수수를 재배하는 경작지를 통상적으로는 치명적인 양의 글리포세이트 제초제로 처리하거나, 잡초를 제거하는 데 통상적으로 사용되는 양의 글리포세이트 제초제로 처리하는 경우, 작물의 수확량이 증가되는 것으로 밝혀졌다. 이러한 예기치 않은 효과는 종래의 기술로부터는 기대할 수 없었는데, 이는 내성이 없는 작물의 경우 작물이 죽기 때문이고, 포스피노트리신 제초제는 작용 방식이 글리포세이트 제초제와는 완전히 상이하기 때문이다.In accordance with the present invention, crops that are unexpectedly resistant to glyphosate herbicides, such as beet crops, oilseed rape, or arable lands for growing corn, typically have a lethal amount of glyphosate herbicide. It has been found that the yield of crops is increased when treated with or with glyphosate herbicides in amounts commonly used to remove weeds. This unexpected effect was not expected from the prior art because crops die in non-resistant crops, and phosphinothricin herbicides work completely different from glyphosate herbicides.
문헌[참조: Chemical Abstracts, Vol 123, n°21, 1995]에는 글리포세이트로 처리한 후의 글리포세이트 내성 대두주의 수확량 평가를 다룬 델란네이(Delannay X,) 등의 문헌의 요약서[참조: Abstract N. 281158c]가 기재되어 있다. 당해 문헌의 저자는, 데이터의 경향은 일반적으로 실제 상이한 점이 존재하지 않음을 제시해주며, 글리포세이트를 표준 제초제와 비교하는 경우 좋지 않은 날씨 및/또는 토양 상태로 인한 것으로 이해되는 정도의 변화만이 나타날 뿐 전체적인 수확량은 일정하다는 결론을 갖게 되었다.Chemical Abstracts, Vol 123, n ° 21, 1995, a summary of the literature by Delannay X, et al., Which assesses the yield of glyphosate resistant soybeans after treatment with glyphosate. N. 281158c. The authors of this document suggest that the trends of the data generally do not actually differ, and only changes to the extent that glyphosate is understood to be due to bad weather and / or soil conditions when compared to standard herbicides It appears that the overall yield is constant.
앞서 언급한 문헌[참조: Weeds (1995), B.H. Wells]에는 글리포세이트를 다양한 작물 단계에 1회 또는 연속적으로 살포 적용한 경우에 상당한 수확량 감소가 전혀 관찰되지 않았음이 기재되어 있다. 글리포세이트 내성 목화의 선도(lead line)는 글리포세이트 적용 후에도 수확량 감소가 나타나지 않은 것으로 알려져 있다. 이러한 평가를 수행하여, 관련 제초제에 대한 내성이 관계되는 한, 관련 작물의 유전적 변형의 성과를 확인하였다. 글리포세이트 적용 후 가능한 작물의 수확량 증가에 대한 어떠한 데이타도 위의 문헌에 포함되지 않았으며, 어떠한 교시 또는 제안도 발견할 수 없었다.The aforementioned references [Weeds (1995), B.H. Wells describes that no significant yield reduction was observed when glyphosate was applied once or continuously in various crop stages. The lead line of glyphosate resistant cotton is known to show no yield reduction after glyphosate application. These assessments have been conducted to ascertain the outcome of genetic modification of related crops as long as resistance to the relevant herbicides is involved. No data on the possible increase in crop yield after glyphosate application was included in the above literature, and no teaching or suggestion could be found.
앞서 언급된 브랜츠 아이.(I. Brants) 등의 문헌에는 표준물과 비교하여 글리포세이트로 수회 처리한 경우, 3가지의 상이한 형질전환을 특징으로 하는 3가지의 상이한 글리포세이트 내성 사탕무우 주에 대한 평균 뿌리 중량(%) 데이타가 제시되어 있지만, 당업자는 제시된 데이타로부터 사탕무우 수확량 증가를 유추할 수 없다. 당해 데이터는 내성 시험 데이타로서 적절히 제시되었다. 내성 평가가, 잡초가 없는 조건에서 수행되지 않아 표준 구역(plot)에서 잡초 경쟁이 허용되기 때문에, 제시된 데이타가 사탕수수의 수확량 증가를 나타내는 것은 아니다. 또한, 당업자에 의해 인식될 수 있는 바와 같이, 제시된 데이터는 종자 이용가능성 때문에 한 장소에서 반복하지 않고 소구역에서 산출된 초기의 데이타이다. 또한, 이러한 초기 종자는 여전히 차별적인 종자 물질을 포함하므로, 표준물에 비해 불규칙적으로 작물이 자라게 되며; 결과적으로, 식물당(단위 면적당이 아님) 평균 뿌리 중량을 계산하고, 상이한 조건하에 성장한 표준물과 비교한다. 위의 문헌으로부터 당업자가 유추할 수 있는 유일한 결론은 상업적으로 개발될 수 있는 내성 수준을 나타내는 3가지의 사탕무우 주를 밝혀냈다는 것이다.I. Brants et al., Cited above, describe three different glyphosate resistant beets characterized by three different transformations when treated several times with glyphosate compared to a standard. Average root weight (%) data for the week is shown, but one skilled in the art cannot infer an increase in beet yield from the data presented. This data is appropriately presented as resistance test data. The data presented do not represent an increase in the yield of sugarcane because tolerance assessments are not performed in the absence of weeds to allow weed competition in the standard plot. In addition, as will be appreciated by those skilled in the art, the data presented are the initial data produced in a subregion rather than repeating in one place due to seed availability. In addition, these early seeds still contain differential seed material, resulting in irregular crop growth compared to the standard; As a result, the average root weight per plant (not per unit area) is calculated and compared with standards grown under different conditions. The only conclusion that can be inferred by those skilled in the art from the above literature is that three beet strains have been identified that exhibit a level of tolerance that can be developed commercially.
본 발명에 따라서, 글리포세이트 내성 작물, 예를 들면, 비트 작물, 종유 평지, 옥수수 또는 목화를 약 50% 이하의 글리포세이트 제초제로 처리하는 경우, 동일한 작물을 글리포세이트 제초제로 처리하지 않은 경우보다 수확량(단위 표면적당 수확량)이 증가된다는 것이 시험을 통해 입증되었다. 수확량의 증가가 글리포세이트 제초제 적용의 결과로서 단지 잡초와 작물간의 경쟁이 감소되기 때문인 것으로는 여겨지지 않는데, 이는 실질적으로 잡초가 없는 조건하에서 성장한 작물에서도 상기 결과가 나타나기 때문이다. 또한 기록된 종래의 기술에서 이해된 바와 같은 생장 조절 효과가 전혀 관찰되지 않았다: 생장의 일시적 억제 또는 작물의 자연 생장 또는 발달의 기타 일시적 변화가 전혀 관찰되지 않았다.According to the invention, when glyphosate resistant crops such as beet crops, oilseed rape, corn or cotton are treated with up to about 50% glyphosate herbicide, the same crop is not treated with glyphosate herbicide. Tests have demonstrated that yields (ie yields per unit surface area) are increased more than if. The increase in yield is not believed to be due to the reduced competition between weeds and crops as a result of the application of glyphosate herbicides, as this result also occurs in crops grown under substantially weed-free conditions. In addition, no growth control effect was observed as understood in the recorded prior art: no transient inhibition of growth or other transient changes in the natural growth or development of the crop were observed.
따라서, 본 발명은 글리포세이트 내성 작물의 수확량을 증가시키기 위한 글리포세이트 또는 이의 유도체의 용도에 관한 것이다.Accordingly, the present invention relates to the use of glyphosate or derivatives thereof for increasing the yield of glyphosate resistant crops.
바람직하게는, 잡초를 동시에 제거하기 위해서, 글리포세이트를 잡초군을 조절하는 데 통상적인 치사량으로 적용한다. 글리포세이트 제초제는 1호 적용되거나수회 연속 처리될 수 있다. 일반적으로, 적용되는 양은 기후 조건, 계절, 잡초의 만연정도, 잡초의 생육 단계는 물론 작물 및 기타 당업자에게 공지된 파라미터에 따라서, 산 등가물 0.2 내지 6.0kg/ha에 포함된다.Preferably, glyphosate is applied in the usual lethal dose to control the weed group to remove the weeds simultaneously. Glyphosate herbicides may be applied to No. 1 or may be treated several times in succession. Generally, the amount applied is included in the acid equivalent of 0.2 to 6.0 kg / ha, depending on climatic conditions, season, degree of weed spread, weed growth stage as well as crops and other parameters known to those skilled in the art.
글리포세이트 제초제를 이의 산 형태 또는 이의 유도체, 바람직하게는 모노이소프로필암모늄 염, 나트륨 염 또는 암모늄 염과 같은 염, 또는 이들의 혼합물로서 적용할 수 있다. 양이온 자체가 제초적으로 활성이거나 식물독성이 아닌 글리포세이트의 기타 염도 사용될 수 있다.Glyphosate herbicides can be applied in their acid form or derivatives thereof, preferably as salts such as monoisopropylammonium salts, sodium salts or ammonium salts, or mixtures thereof. Other salts of glyphosate may also be used in which the cation itself is herbicidally active or not phytotoxic.
글리포세이트 제초제 처리의 수확량 증대 효과가, 글리포세이트 내성을 유발하는 데 사용되는 기술과는 무관하게, 사탕무우 또는 사료 비트와 같은 비트, 옥수수, 종유 평지 및 목화로부터 선택된 글리포세이트 내성 작물에서 관찰되었다.The yield-boosting effect of glyphosate herbicide treatment is independent of glyphosate-resistant crops selected from beets, corn, oilseed rape and cotton, such as beet or feed beet, regardless of the technique used to induce glyphosate resistance. Was observed.
당해 효과는 글리포세이트 내성 사탕무우 및 사료 비트에서 특히 현저하다.This effect is particularly pronounced in glyphosate resistant beets and feed beets.
글리포세이트 제초제를, 예를 들면, 이의 산 형태 또는 이의 유도체 형태로, 수용성 또는 분산성 과립, 살포수(spray water)중의 희석된 수용성 농축액, 또는 유제, 캡슐화된 활성 성분 등과 같은 기타 유형의 제형으로서 적용할 수 있다.Glyphosate herbicides are, for example, in the form of their acids or derivatives thereof, of water-soluble or dispersible granules, diluted water-soluble concentrates in spray water, or other types of formulations such as emulsions, encapsulated active ingredients, and the like. It can be applied as.
글리포세이트 제초제를 상이한 식물 생장 단계에 1회 또는 연속적으로 적용할 수 있다. 글리포세이트 내성 작물에 대한 글리포세이트 제초제 처리의 효과는 관련 식물의 생장 단계에 처리하는 경우에 가장 현저하다.Glyphosate herbicides may be applied once or continuously to different plant growth stages. The effect of glyphosate herbicide treatment on glyphosate resistant crops is most pronounced when treated at the growth stage of the relevant plant.
이러한 제형의 보조제는 문헌[참조: McCutcheon's Emulsifiers and Detergent]에 기재되어 있으며, 유리하게는 다음 화합물로부터 선택할 수 있다:Adjuvants of such formulations are described in McCutcheon's Emulsifiers and Detergent, which can advantageously be selected from the following compounds:
- 아민, 예를 들면, 에톡실화 알킬 아민, 특히 탤로우 아민, 코코아민, 상품명 에토민(Ethomeen)으로 시판되는 계면활성제, 및 아민 옥사이드, 예를 들면, 상품명 엠피겐 오비(Empigen 0B)로 시판되는 계면활성제;Amines, for example ethoxylated alkyl amines, in particular tallow amines, cocoamines, surfactants sold under the trade name Ethomeen, and amine oxides, for example under the trade name Empigen 0B. Surfactants;
- 4급 암모늄 염, 예를 들면, 에톡실화되고/되거나 프로폭시화된 4급 암모늄 염, 보다 특히 상품명 에토콰드(Ethoquad), 엠콜 씨씨(Emcol CC) 및 도디겐(Dodigen)으로 시판되는 계면활성제;Quaternary ammonium salts, for example surfactants marketed under the ethoxylated and / or propoxylated quaternary ammonium salts, more particularly under the trade names Ethoquad, Emcol CC and Dodigen ;
- 알킬폴리글리코사이드 또는 알킬글리코사이드, 글루코즈-에스테르 및 수크로즈- 에스테르.Alkylpolyglycosides or alkylglycosides, glucose-esters and sucrose-esters.
습윤제, 가장 바람직하게는 알콕시화 소르비탄 에스테르와 혼합된, 유럽 공개특허공보 제0 441 764호에서 정의된 바와 같은 4급 암모늄 염이 가장 바람직하다. 이러한 유형의 계면활성제 또는 계면활성제 혼합물은 작물에 대해 현저한 식물독성 효과를 나타내지 않으며, 이들의 환경친화적 특성 때문에 바람직하다.Most preferred are quaternary ammonium salts as defined in EP 0 441 764, mixed with wetting agents, most preferably alkoxylated sorbitan esters. Surfactants or surfactant mixtures of this type do not exhibit significant phytotoxic effects on crops and are preferred because of their environmentally friendly properties.
특히 유리한 4급 암모늄 염은 트리메틸 에톡시폴리옥시프로필 암모늄 클로라이드이다. Particularly advantageous quaternary ammonium salts are trimethyl ethoxypolyoxypropyl ammonium chloride.
실시예 1Example 1
유럽 공개특허공보 제0 218 571호에 기재되어 있는 기술에 따라 유전학적으로 변형되어 글리포세이트에 대한 내성이 부여된 사탕무우 식물을 우수한 농경법으로 한 줄에 식물간 4.5cm 간격으로 심고 손으로 솎아내어, 임의의 구획 설계(randomized block design)(구역 크기: 2.7×6m; 구역당 6줄, 줄 간격 0.45m)에 따라 작물이 정상적으로 자라도록 한다. 각각의 시험을 4회 반복한다.Beet plants genetically modified according to the technique described in EP 0 218 571, which are endowed with glyphosate resistance, are planted and hand-sewn at 4.5 cm intervals between plants in a single line by excellent farming methods. Allow crops to grow normally according to any randomized block design (zone size: 2.7 x 6 m; 6 rows per zone, 0.45 m line spacing). Repeat each test four times.
필요하고 명시된 경우에는 발아 전 제초제 적용에 의해, 그리고 다음에 상세히 기술된 바와 같이 발아 후 글리포세이트 처리 또는 공식적으로 허용된 표준 비트 처리(비교용)에 의해 시험 구역을 실질적으로 잡초 부재 상태로 유지한다.Where necessary and specified, the test zone remains substantially weed free by pre-germination herbicide application and by post-germination glyphosate treatment or officially accepted standard bit treatment (comparative) as detailed below. do.
다음과 같이 처리한다:Do the following:
1. 표준 사탕무우 제초제1. Standard Beet Herbicide
2, 2배의 표준 사탕무우 제초제2, 2 times the standard beet herbicide
3. 제형화된 글리포세이트 3×720g a.e/ha3. Formulated glyphosate 3 × 720g a.e / ha
4. 제형화된 글리포세이트 3×1080g a.e/ha4. Formulated Glyphosate 3 × 1080g a.e / ha
5. 제형화된 글리포세이트 3×1440g a.e/ha5. Formulated Glyphosate 3 × 1440g a.e / ha
6. 제형화된 글리포세이트 2×2160g a.e/ha.6. Formulated glyphosate 2 × 2160 g a.e / ha.
글리포세이트 제초제를 3회 연속 적용하는 경우, 첫 번째에는 작물의 잎이 2 내지 4개인 단계에서 적용하고, 두 번째는 작물의 잎이 6 내지 8개인 단계에서 적용하고, 세 번째는 수관이 닫히기 전 작물의 잎이 10 내지 12개인 단계에서 적용한다.In the case of three consecutive application of glyphosate herbicides, the first is applied in the stage of 2 to 4 leaves of the crop, the second is in the stage of 6 to 8 leaves of the crop, and the third is the closing of the canal Apply at the stage of 10-12 leaves of the whole crop.
2회 연속 적용하는 경우, 첫 번째에는 작물의 잎이 2 내지 4개인 단계에서 적용하고, 두 번째는 작물의 잎이 10 내지 12개인 단계에서 수행한다.In the case of two consecutive applications, the first one is applied in the stage of 2 to 4 leaves of the crop, the second is performed in the stage of 10 to 12 leaves of the crop.
글리포세이트 제초제 제형은 이소프로필암모늄 염으로서 글리포세이트 360g a.e./l, 및 트리메틸 에톡시폴리옥시프로필(8)암모늄 클로라이드와 에톡시화 (20) 소르비탄 에스테르(80:20)로 이루어진 계면활성제 180g/l을 포함한다. 글리포세이트 제형을 2bar의 압력에서 200ℓ/ha의 수 용량으로 적용한다.The glyphosate herbicide formulation consists of 360 g ae / l of glyphosate as isopropylammonium salt and 180 g of surfactant consisting of trimethyl ethoxypolyoxypropyl (8) ammonium chloride and ethoxylated (20) sorbitan ester (80:20) Include / l The glyphosate formulation is applied at a water volume of 200 l / ha at a pressure of 2 bar.
수확시 새로운 뿌리 중량을 측정한다. 1번 표준 처리 후의 새로운 뿌리 중량을 100% 수확량으로 간주하고, 측정된 새로운 뿌리 중량을 1번 표준 처리 결과와 비교한다.Measure new root weight at harvest. The new root weight after standard treatment 1 is considered 100% yield and the measured new root weight is compared with the result of standard treatment 1.
[표 Ia]TABLE Ia
* 표준 처리는 다음과 같은 3회 적용을 포함한다:* Standard treatment includes three applications as follows:
[표 Ib]TABLE Ib
* 표준 처리는 다음과 같은 3회 적용을 포함한다:* Standard treatment includes three applications as follows:
[표 Ic]TABLE Ic
* 표준 처리는 다음과 같은 공식적으로 허용된 사탕무우 제초제의 발아 전 적용 및 2회의 발아 후 적용을 포함한다:* Standard treatments include pre-emergence application and two post-emergence applications of officially accepted beet herbicides:
실시예 2Example 2
동일한 시험을 글리포세이트 내성 사료 비트(동일한 기술에 따라 유전학적으로 형질전환됨)를 사용하여 반복한다.The same test is repeated using glyphosate resistant feed bits (genetically transformed according to the same technique).
당해 시험의 표준 처리(*)는 다음과 같은 3회 적용을 포함한다:The standard treatment (*) of this test involves three applications as follows:
동일한 시험을 골틱스(상품명) 1kg/ha 및 베타날 E(상품명) 3ℓ/ha로 이루어진 발아 전 제초제 처리를 전 구역에 걸쳐 적용하는 점을 제외하고는 위에서와 동일한 방식으로 반복한다.The same test is repeated in the same manner as above, except that the pre-germination herbicide treatment consisting of 1 kg / ha of Goltics® and 3 l / ha of betanal E (trade name) is applied throughout.
[표 IIb]TABLE IIb
* 당해 시험의 표준 처리는 다음과 같은 1회의 적용을 포함한다:* The standard treatment of the test includes one application as follows:
실시예 3Example 3
본 실험을 위해, 실시예 1 및 실시예 2와 실질적으로 동일한 프로토콜을 사용한다. For this experiment, substantially the same protocol as in Example 1 and Example 2 is used.
글리포세이트 내성 사탕무우 초목을 우수한 농경법에 따라 1995년 5월 초에 심었다. 손으로 벌초(제초제 비처리)하거나, 필요한 경우, 글리포세이트 제초제를 적용하여 구역을 실질적으로 잡초 부재 상태로 유지시킨다. 글리포세이트를 산 등가물 360g/l 및 계면활성제[트리메틸에톡시폴리옥시프로필(8) 암모늄 클로라이드(80)과 에톡시화 (20) 소르비탄 에스테르(20)로 구성] 180g/l을 포함하는 글리포세이트의 이소프로필암모늄 염의 제형으로서 적용한다.Glyphosate-resistant beet plants were planted in early May 1995 under good farming practices. Weeds (untreated herbicides) by hand, or if necessary, glyphosate herbicides are applied to keep the zone substantially free of weeds. Glyphosate comprising glyphosate comprising 360 g / l of acid equivalent and 180 g / l of surfactant [composed of trimethylethoxypolyoxypropyl (8) ammonium chloride (80) and ethoxylated (20) sorbitan ester (20)] It is applied as a formulation of the isopropylammonium salt of cement.
T1= 잎이 2 내지 4개인 단계(약 30 DAP(Days After Planting: 심은 후 경과 일수))T1 = 2-4 leaf stage (about 30 DAPs (Days After Planting)
T2= 잎이 8 내지 10개인 단계(약 50 DAP)T2 = steps 8 to 10 leaves (about 50 DAP)
T3= 잎이 14 내지 18개인 단계(약 65 DAP)T3 = 14-18 leaves stage (about 65 DAP)
다음 표 IV는 위에서와 같은 글리포세이트 제형을 여러 용량으로 적용하는 경우 180 DAP의 식물당 새로운 뿌리 중량(g)의 평균 측정치를 기재한다.Table IV below lists the average measurements of the new root weight in grams per plant of 180 DAP when the glyphosate formulations as described above were applied in multiple doses.
[표 III]TABLE III
본 실험은 글리포세이트를 수회 적용한 후 수확시에 새로운 뿌리의 중량이 증가함을 분명하게 보여준다. 또한, 적용된 글리포세이트 용량의 함수로서 수확량이 증가하는 경향이 있다.This experiment clearly shows that after several applications of glyphosate, the weight of the new roots increases at harvest. In addition, yields tend to increase as a function of applied glyphosate capacity.
또한, 수확량이 증가됨은 수확시 식물의 건조 중량이 상응하게 증가되는 것으로 해석된다.In addition, the increase in yield translates to a correspondingly increased dry weight of the plant at harvest.
실시예 4Example 4
본 실험의 목적은 글리포세이트 제초제의 제형을 살포한 유전자 도입된(transgenic) 사탕무우와 이러한 제초제 제형으로 처리하지 않은 유전자 도입된 사탕무우를 비트의 품질(뿌리의 당, 전화 당(invert sugar), 칼륨, 나트륨, 아미노-질소의 함량; 비트 뿌리와 상부 샘플의 영양분[건조물(%)], 조 섬유 및 독소 함량)의 관점에서 비교하는 것이다.The objectives of this experiment were to determine the quality of beet (transgenic sugar, invert sugar, sugar) and transgenic beets that were sprayed with glyphosate herbicide formulations. Comparisons are made in terms of the content of potassium, sodium, amino-nitrogen, nutrients (dry matter (%)), crude fiber and toxin content of beet root and upper samples).
사탕무우는 백당, 펄프 및 당밀을 제조하는 슈가 산업에서 주로 사용된다. 이러한 목적을 위한 비트의 기술적 가치는 일반적으로 이들의 당, 칼륨, 나트륨 및 아미노-질소의 함량을 분석함으로써 평가된다. 비트 중의 독성 물질에 관해서는, 사포닌을 모니터링한다.Beet is mainly used in sugar industry to produce white sugar, pulp and molasses. The technical value of beets for this purpose is generally assessed by analyzing their content of sugars, potassium, sodium and amino-nitrogen. As for the toxic substances in the beet, saponins are monitored.
샘플의 제조Manufacture of samples
수확 후, 뿌리를 0℃ 내지 10℃에서 보관하고, 상부 샘플을 -20℃ 미만에서 동결시킨다.After harvesting, the roots are stored at 0 ° C. to 10 ° C. and the top sample is frozen below −20 ° C.
비트를 브라이(brei)로 제조하는 공정은 비트를 비트 톱으로 썰어 브레이를 제조하는 반 자동 처리로 수행된다. 브라이를 균질화한 후, 1개의 아샘플을 사용하여 추출 후 편광, 전화 당, Na, K 및 아미노-N을 분석하고, 또 다른 아샘플을 건조시켜 영양분을 분석한다. 동일한 브라이 샘플의 제3 부분을 동결시켜 독성물질을 분석한다. 투명화하기 위해 황산알루미늄 정제를 가한 탈염수를 사용하여 비트 브라이를 추출하고, 자동 베네마(Venema) 분해 및 여과 플랜트로 옮긴다. 이들을 동일한 아샘플로 수평 분할하여 커다란 비트 상부를 제조한다.The process of making bits into a brie is carried out by a semi-automatic process of cutting the bits into bit saws to make a brae. After homogenizing the bristle, one sample is used to analyze post-extraction polarization, invert sugar, Na, K and amino-N, and another sample to dry to analyze nutrients. A third portion of the same Bry sample is frozen to analyze the toxin. The debris is extracted using demineralized water with aluminum sulfate purification for clarification and transferred to an automatic Venema digestion and filtration plant. They are divided horizontally into identical samples to produce large bit tops.
분석 방법:Analysis method:
건조물- 오븐 방법(EF 71/393/E0F; L279/7 p. 858-61 20/12-71):Dry-Oven Method (EF 71/393 / E0F; L279 / 7 p. 858-61 20 / 12-71):
뿌리:Root:
뿌리를 브라이로 가공한 후, 브라이 샘플을 95℃의 오븐 속에 넣어 24시간 동안 건조시킨다(일정한 중량으로 수득).After the roots are processed into bris, the bris samples are placed in an oven at 95 ° C. and dried for 24 hours (obtained to constant weight).
상부:Top:
샘플의 크기에 따라, 샘플을 95℃의 오븐 속에 최대 72시간 동안 일정한 중량으로 건조시킨다.Depending on the size of the sample, the sample is dried to constant weight for up to 72 hours in an oven at 95 ° C.
뿌리와 상부 모두에 대해 중량의 손실을 정량화하고 건조물(%)로서 계산한다.Loss of weight is quantified for both root and top and calculated as% dry matter.
조 섬유 - 웬데(Weende) 방법(EF L 344/36-37 26/11-92 변형법):Crude fiber-Wende method (EF L 344 / 36-37 26 / 11-92 variant):
샘플을 특정 농도의 황산 및 수산화칼륨의 비등 용액으로 연속적으로 처리한다. 잔사를 유리솜을 가진 고슈(Gosch) 도가니상에서 여과하여 분리하고, 세척한 후, 건조시키고, 중량을 측정하고, 550℃의 머플 오븐 속에서 3시간 동안 소각한다. 소각에 따른 중량 손실을 중량 분석으로 정량하고 샘플의 조 섬유의 비율(%)을 계산한다.Samples are continuously treated with boiling solutions of sulfuric acid and potassium hydroxide at specific concentrations. The residue is separated by filtration on a Gosch crucible with glass wool, washed, dried, weighed and incinerated for 3 hours in a muffle oven at 550 ° C. The weight loss due to incineration is quantified by gravimetric analysis and the percentage of crude fibers in the sample is calculated.
독소: 사포닌 - HPLC 방법(Hilmer Sorensen, KVL 1991, DC에 의한 변형법):Toxin: Saponin-HPLC method (Hilmer Sorensen, KVL 1991, modified by DC):
당해 방법은 비트 사포닌의 산 가수분해를 기초로 한다. 유리된 올레아놀산을 디클로로메탄으로 추출한다. 샘플로부터 물을 증발시킨 후, 잔류물 메탄올로 용해시킨다. 올레아놀산을 아세토니트릴/물을 용출제로서 사용하여 역상 HPLC로 산정하고 UV 검출기로 210nm에서 측정한다.The method is based on acid hydrolysis of beet saponin. The free oleanolic acid is extracted with dichloromethane. Water is evaporated from the sample and then dissolved in the residue methanol. Oleanoic acid is calculated by reverse phase HPLC using acetonitrile / water as eluent and measured at 210 nm with a UV detector.
비트 추출물의 당 함량-편광(Pol) (ICUMSA, Sugar Analysis 1979, Proc. 1900):Sugar content of polar beet extract (Pol) (ICUMSA, Sugar Analysis 1979, Proc. 1900):
황산알루미늄으로 투명화한 비트 추출물을, 광회전 비의 측정을 기초로 하는 편광계 유형 프로폴(PROPOL) 측정한다. 광회전을 길이가 70mm인 튜브내에서 546nm에서 측정하고 °Z(POL%) 또는 g/100g 뿌리로 전환시킨다.The beet extract cleared with aluminum sulfate is measured with a polarimeter type PROPOL based on the measurement of the optical rotation ratio. Light rotation is measured at 546 nm in a 70 mm long tube and converted to ° Z (POL%) or g / 100g roots.
비트 추출물의 아미노-질소 - SMAIIC 분석기 (ICUMSA, 당 분석 1979 변형법):Amino-nitrogen-SMAIIC Analyzer of Beet Extract (ICUMSA, Sugar Analysis 1979 Modifications):
황산알루미늄으로 투명화한 비트 추출물을 닌하드린과의 발색 반응 후, 570nm에서 비색계로 측정한다.The beet extract cleared with aluminum sulfate was measured with a colorimeter at 570 nm after the color reaction with ninhardin.
비트 추출물의 칼륨 및 나트륨 - SMAIIC 분석기(Technicon, Tech. Publ. THO-0160-10):Potassium and sodium in beet extracts-SMAIIC analyzer (Technicon, Tech. Publ. THO-0160-10):
황산알루미늄으로 투명화한 비트 추출물을 섬광 광도계 IV로 측정하면, 섬광중의 칼륨 및 나트륨에 의해 방출된 광에너지의 세기가 각각 589nm 및 768nm에서 측정된다. 샘플을 황산리튬으로 희석하는데, 여기서 리륨은 섬광 광도계로부터의 시그날을 평형화하는 내부 표준으로서 사용된다.When the beet extract cleared with aluminum sulfate was measured with flash photometer IV, the intensity of light energy emitted by potassium and sodium in the flash was measured at 589 nm and 768 nm, respectively. The sample is diluted with lithium sulfate, where lithium is used as an internal standard to balance the signal from the scintillation photometer.
비트 추출물의 전화 당 - SMAIIC 분석기 (Technicon, Tech. Publ. THO-0160-10):Per call of beet extract-SMAIIC Analyzer (Technicon, Tech. Publ. THO-0160-10):
황산알루미늄으로 투명화한 비트 추출물을 황산구리 네오쿠프로인 하이드로클로라이드 시약과 반응시킨 후, 560nm에서 비색계로 측정한다.The beet extract cleared with aluminum sulfate was reacted with a copper sulfate neokuproin hydrochloride reagent, and then measured by colorimetry at 560 nm.
글리포세이트 제초제에 대한 내성에 대한 유럽 공개특허공보 제0 218 571호에 기재되어 있는 기술에 따라 유전학적으로 형질전환된 글리포세이트 내성 사탕무우 식물을 상이한 장소(아탈리아, 스페인, 벨기에, 덴마크, 프랑스, 영국)에서 생장시킨다.Genetically transformed glyphosate resistant beet plants according to the technique described in European Patent Publication No. 0 218 571 for resistance to glyphosate herbicides (Atalia, Spain, Belgium, Denmark) , France, United Kingdom).
생장한 품종의 유형은 지역적 요건에 따른다. 당해 대상은 많은 특징에 있어서 다양한데, 한가지 중요한 특징은 편광(Pol)으로 산정된 당 함량이다. 사탕무우는 아그룹(E형, N형 및 Z형)으로 나눌 수 있다. E형은 Pol이 낮고, Z형은 Pol이 높고, N형은 E와 Z의 중간이다. 북유럽에서 성장한 변종은 E-N, N 또는 N-Z형과 같은 특징을 갖는다. 당해 실험에서 사용된 물질은 N 그룹에 속한다.The type of growing variety depends on local requirements. The subject matter varies in many features, one important feature being the sugar content calculated by polarization (Pol). Beet can be divided into subgroups (E type, N type and Z type). E type is low Pol, Z type is high Pol, N type is between E and Z. Variants grown in northern Europe have features such as E-N, N or N-Z type. The material used in this experiment belongs to the N group.
사탕무우를, 우수한 국소 농경법에 따라 심고 손으로 솎아내어 작물이 정상적으로 자라도록 한다. 시험당 1회 이상 반복한다.Beetroot is planted according to good local farming methods and chopped by hand to allow crops to grow normally. Repeat at least once per test.
구역을 다음과 같이 처리하여 실질적으로 잡초 부재 상태를 유지한다:The zone is treated as follows to remain substantially weed free:
- 시험 구역에 대한 글리포세이트 제초제 적용-Glyphosate herbicide application to test zones
- 대조군 구역에 표준 비트 선택성 제초제 처리(지역에 따라); 단 예외적으로 덴마크 및 이탈리아에서는 글리포세이트 이외에 다른 제초제가 잡초 부재 상태를 유지하는 데 필요한 것으로 여겨지지 않는다).Standard beet selective herbicide treatment (depending on region) in the control zone; The exception is that in Denmark and Italy, other herbicides besides glyphosate are not considered necessary to maintain weed freeness).
글리포세이트 제초제 제형은 실시예 1에서 사용된 제형과 동일하다. 제초제글리포세이트 제형은 다음과 같이 적용된다:The glyphosate herbicide formulation is the same formulation used in Example 1. Herbicide glyphosate formulations are applied as follows:
- 발아 전 2.5ℓ /ha-2.5ℓ / ha before germination
- 비트의 참잎(true leaf)이 2 내지 4개인 단계 2ℓ /haStep 2 l / ha with 2 to 4 true leaves of beet
- 비트의 참잎이 6 내지 8개인 단계 2ℓ /haStep 2 l / ha with 6 to 8 true leaves of beet
- 비트의 참잎이 12 내지 14개인 단계(수관 닫힘) 2ℓ /ha2 to 14 liters of beetle with 12 to 14 true leaves (water canal closed)
적용된 선택성 제초제 비율은 다음과 같다:The selective herbicide ratio applied is as follows:
스페인:Spain:
3.55kg/ha 골틱스 WG (메타미트론) 발아 전3.55kg / ha Goltics WG (Metatron) before germination
벨기에: Belgi:
2ℓ /ha 그라모손(파라콰트 200) 이식 전2ℓ / ha Gramoson (Paraquat 200) before implantation
3ℓ /ha 피라민 FL(클로리다존 430) 이식 후 1주1 week after implantation of 3ℓ / ha pyramine FL (Chloridazone 430)
0.5ℓ /ha 베타날(펜메디팜 150) 이식 후 3주3 weeks after transplantation of 0.5ℓ / ha betanal (Penmedipal 150)
0.5ℓ /ha 골틱스(메타미트론 70% WP) 이식 후 3주0.5 l / ha 3 weeks after bone tics (metamitron 70% WP) implantation
0.5ℓ /ha 트라마트(에토푸메세이트 200) 이식 후 3주3 weeks after transplantation of 0.5ℓ / ha tramat (Etofumesate 200)
0.75ℓ /ha 골틱스 이식 후 5주0.75ℓ / ha 5 weeks after graftics
0.75ℓ /ha 베겔룩스(미네랄 오일 40) 이식 후 5주0.75ℓ / ha 5 weeks after Begellux (mineral oil 40) implantation
0.75ℓ /ha 트라마트 이식 후 5주5 weeks after 0.75ℓ / ha tramat implantation
0.75ℓ /ha 골틱스 이식 후 6주0.75ℓ / ha 6 weeks after graftics
0.75ℓ /ha 베겔룩스 이식 후 6주0.75ℓ / ha 6 weeks after Begellux implantation
0.17ℓ /ha 푸실라데 이식 후 6주0.17ℓ / ha 6 weeks after fusilade implantation
0.75ℓ /ha 베타날 이식 후 6주6 weeks after 0.75ℓ / ha beta blade implantation
0.75ℓ /ha 트라마트 이식 후 9주9 weeks after 0.75ℓ / ha tramat implantation
0.75ℓ /ha 베타날 이식 후 9주9 weeks after 0.75ℓ / ha beta blade implantation
0.75 ℓ/ha 골틱스 이식 후 9주9 weeks after 0.75 ℓ / ha goltics implantation
0.75ℓ /ha 베겔룩스 이식 후 9주0.75ℓ / ha 9 weeks after Begellux implantation
프랑스:France:
0.75ℓ /ha 골틱스 WP(메타미트론) 이식 후 1일0.75ℓ / ha 1 day post-Goltics WP (Metamitron) implantation
0.75ℓ /ha 골틱스 WP 이식 후 2주0.75ℓ / ha 2 weeks after Goltics WP implantation
0.75ℓ /ha 베타날(펜메디팜 150) 이식 후 2주2 weeks after implantation of 0.75ℓ / ha betanal (Penmedipal 150)
0.75ℓ /ha 트라마트(에토푸메세이트 200) 이식 후 2주0.75ℓ / ha 2 weeks after tramat (Etofumesate 200) transplantation
영국:England:
1.0ℓ /ha 라세르(사이클록시딤) 이식 후 5주5 weeks after implantation of 1.0ℓ / ha Laser (cycloxydim)
분석 결과를 수집하여 다음 표에 평균치를 기록하였고, 모든 국가는 평균을 계산하는 데 있어서 동일한 중량을 사용한다.The results of the analysis were collected and averaged in the following table, and all countries use the same weight to calculate the average.
처리: 글리포세이트 제초제 살포Treatment: Glyphosate Herbicide Spray
비처리: 글리포세이트 제초제를 살포하지 않음Untreated: Do not spray glyphosate herbicide
DM: 건조물DM: dry matter
위의 데이타는 글리포세이트 제초제로 처리한 사탕무우의 경우, 뿌리에서 상당히 높은 당 함량을 보이면서, 나트륨, 칼륨, 아미노-질소 및 전화 당은 감소됨을 입증한다. 뿌리 및 상부의 건조물도 또한 증가한다. 보다 상세한 데이타는 글리포세이트로 처리한 사탕무우 잎의 섬유 함량이 높음을 제시한다.The above data demonstrate that for beets treated with glyphosate herbicides, sodium, potassium, amino-nitrogen and invert sugars are reduced while exhibiting significantly higher sugar content in the roots. Dry matter at the root and top also increases. More detailed data suggests that the fiber content of beet leaves treated with glyphosate is high.
선행 실시예의 결과와 당해 실시예의 결과를 상관시키면, 앞서 평가된 수확량 증가(중량/ha)는 수확 물질중의 건조물, 섬유 및 당 함량의 증가를 반영하는 것임을 알 수 있다.Correlating the results of the previous example with the results of this example, it can be seen that the yield increase (weight / ha) previously evaluated reflects the increase in dry matter, fiber and sugar content in the harvest material.
실시예 5Example 5
유럽 공개특허공보 제0 218 571호에 기재되어 있는 기술에 따라 유전학적으로 변형되어 글리포세이트에 대한 내성이 부여된 사탕무우 및 사료 비트 식물을 우수한 농경법으로 한 줄에 식물간 4.5cm의 간격으로 심고 손으로 솎아내어, 임의 구획 설계(구역 크기: 2.7×7m; 구역당 6줄, 줄 간격 0.45m)에 따라 정상적으로 작물이 자라도록 한다. 각각의 시험을 위해 4회 반복한다.Beet and feed beet plants genetically modified according to the technique described in EP 0 218 571, which are endowed with glyphosate resistance, with excellent agronomics at 4.5 cm intervals between plants. Plant and chop by hand, allowing crops to grow normally according to any compartment design (zone size: 2.7 × 7m; 6 rows per zone, 0.45m of line spacing). Repeat four times for each test.
전역에 걸쳐 발아 전에 표준 제초제를 적용한 다음, 손으로 제초하고, 적합한 경우, 다음에 구체화된 바와 같이 발아 후에 글리포세이트 처리하여 시험 구역 을 실질적으로 잡초 부재 상태로 유지한다.Standard herbicides are applied before germination throughout, followed by hand weeding and, where appropriate, glyphosate treatment after germination, as specified below, to keep the test zone substantially free of weeds.
다음과 같이 처리한다:Do the following:
손으로만 제초Weeding only by hand
제형화된 글리포세이트 3×720g a.e/haFormulated Glyphosate 3 × 720 g a.e / ha
제형화된 글리포세이트 3×1080g a.e/haFormulated Glyphosate 3 × 1080 g a.e / ha
제형화된 글리포세이트 3×1440g a.e/haFormulated Glyphosate 3 × 1440g a.e / ha
제형화된 글리포세이트 2×2160g a.e/ha.Formulated glyphosate 2 × 2160 g a.e / ha.
글리포세이트 제초제를 3회 연속 적용하는 경우, 첫 번째는 작물의 잎이 2 내지 4개인 단계에서 수행하고, 두 번째는 작물의 잎이 6 내지 8개인 딘계에서 수행하고, 세 번째는 수관이 닫히기 전 작물의 잎이 10 내지 12개인 단계에서 수행한다.In the case of three consecutive application of glyphosate herbicides, the first is carried out at the stage of 2 to 4 leaves of the crop, the second at a din system of 6 to 8 leaves of the crop, and the third to close the water canal It is carried out in a step of 10-12 leaves of the entire crop.
2회 연속 적용하는 경우, 첫 번째는 작물의 잎이 2 내지 4개인 단계에서 수행하고, 두 번째는 작물의 잎이 10 내지 12개인 딘계에서 수행한다.In the case of two consecutive applications, the first is carried out in a stage of 2 to 4 leaves of the crop, and the second is performed in a din system with 10 to 12 leaves of the crop.
글리포세이트 제초제 제형은 이소프로필암모늄 염으로서 글리포세이트 360g a.e./ℓ, 및 트리메틸 에톡시폴리옥시프로필(8)암모늄 클로라이드와 에톡시화 (20) 소르비탄 에스테르(80:20)로 구성된 계면활성제 180g/ℓ을 포함한다. 글리포세이트 제형을 2bar의 압력에서 200ℓ/ha의 수 용량으로 적용한다.The glyphosate herbicide formulation comprises 360 g ae / l of glyphosate as isopropylammonium salt and 180 g of surfactant consisting of trimethyl ethoxypolyoxypropyl (8) ammonium chloride and ethoxylated (20) sorbitan ester (80:20) / l. The glyphosate formulation is applied at a water volume of 200 l / ha at a pressure of 2 bar.
수확시 새로운 뿌리 중량을 측정한다. 단지 손으로 제초한 구역의 새로운 뿌리 중량을 100% 수확량으로 보고, 글리포세이트 처리후에 측정된 새로운 뿌리 중량을 손으로 제초한 구역의 결과와 비교한다.Measure new root weight at harvest. The new root weight of the only handed weeded area is reported as 100% yield and the new root weight measured after glyphosate treatment is compared with the result of the handed weeded area.
[표 V]TABLE V
수확량(%)(새로운 뿌리 중량)Yield (%) (new root weight)
실시예 6Example 6
야외 실지 시용을 위해, 글리포세이트 제초제 내성을 타나내도록 유전학적으로 변형된(EPSPS 발현 및 글리포세이트 옥시도리덕타제 발현의 조합된 기술에 따름) 유전학적 배경을 갖는 겨울철 종유 평지 식물을, 우수한 농경법으로 m2당 약 100개의 식물에 상당하는 종자 4kg/ha(정상적 작물 재배)로 임의 구획 설계(구역 크기: 3×7m, 줄 간격 0.14m)에 따라 1995년 9월 중순에 심었다; 시험당 4회 반복한다.For field field applications, winter seedling rape plants with a genetic background modified genetically (according to the combined technique of EPSPS expression and glyphosate oxidoreductase expression) to exhibit glyphosate herbicide tolerance, Agronomically planted in mid-September 1995 with random compartment design (zone size: 3 × 7m, line spacing 0.14m) with 4 kg / ha of seed (normal crop cultivation) equivalent to about 100 plants per m 2 ; Repeat 4 times per test.
당해 구역을, 표준으로 전역에 걸쳐 발아 전에 제초제를 적용하고, 즉 파종 후 1일째에 부티산(메타자클로르) 1.5ℓ를 적용하며, 표준 구역에 대해서는 1ℓ를 추가로 적용하고; 다음에 구체화된 바와 같이 발아 후 글리포세이트 처리로 당해 구역을 실질적으로 잡초 부재 상태로 유지시킨다.The zone is applied with herbicides before germination throughout the standard, ie 1 day after sowing, 1.5 l of butyric acid (metazachlor), an additional 1 l for the standard zone; Post-germination glyphosate treatment then maintains the zone substantially free of weeds, as specified.
글리포세이트 처리는 식물 성장 단계 B4-B5에서 가을에 적용된다; 실시예 1에 사용된 것과 동일한 제형이 사용된다.Glyphosate treatment is applied in the fall in plant growth stages B4-B5; The same formulation as used in Example 1 is used.
8월 초에 수확하여 수확량을 평가하여 곡류 톤/ha(습도 9%)로 나타낸다. 표 VI는 측정된 표준 구역의 수확량(%)을 보여준다.Harvested in early August, yields are estimated and expressed as tonnes / ha of grain (9% humidity). Table VI shows the yield (%) of the measured standard zones.
[표 VI]Table VI
수확량purchase
실시예 7Example 7
당해 야외 실지 시험을 선행 실시예의 시험과 유사하게 수행하나, 단 당해 실시예에서는 봄철 종유 평지를 파종하였다(1996년 4월 중순). 유전학적 배경이 공지된 당해 식물을 실시예 6에서 언급된 조합 기술을 사용하여 글리포세이트 제초제에 대해 내성을 갖도록 한다.The field field test was carried out similarly to the test of the previous example, except that the spring seedling rapeseed was sown (mid April 1996). The plants of known genetic background are made tolerant to glyphosate herbicides using the combination technique mentioned in Example 6.
전역에 걸쳐 부티산 1.5ℓ/ha를 적용하고, 표준 구역을 손으로 제초하고, 나머지 구역을 글리포세이트 제초제를 적용하여, 당해 구역을 잡초 부재 상태로 유지시킨다. 동일한 글리포세이트 제형을 이식 후 1개월째, 즉 식물 성장 단계 B3 - B4에 적용한다. 8월 중순에 수확한다.1.5 liters / ha of butyric acid is applied throughout, the standard zone is handed, and the remaining zone is applied with glyphosate herbicide to keep the zone free of weeds. The same glyphosate formulation is applied one month after transplantation, ie, plant growth stages B3-B4. Harvest in mid-August.
표 VII은 수확량 데이타(실시예 6에서와 같이 측정되고 기재함)를 표준 구역의 수확량(%)로 보여준다.Table VII shows the yield data (measured and described as in Example 6) as the percent yield of the standard zone.
[표 VII]TABLE VII
수확량purchase
실시예 8Example 8
추가로, 야외 실지 시험을 이탈리아에서 수행하여, 글리포세이트 제초제 적용 후 글리포세이트 내성 옥수수 작물의 수확량 증가를 평가한다. EPSPS 발현 및 글리포세이트 옥시도리덕타제 발현의 조합 기술에 따라 글리포세이트 내성이 유전학적으로 변형된 공지되어 있는 옥수수 식물을, 식물 약 62,000개/ha(약 종자 4.7 개/m)로 완전한 임의 구획 설계에 따라 3×9m의 구역에 각각 9m씩 네줄로 이식하고 생장시킨 후, 손으로 솎아내어 작물이 전 구역에서 동일한 수로 정상적으로 생장할 수 있도록 한다. 표준 구역과 시험 구역을 포함하는 전 지역을 6ℓ/ha의 비율로 발아 전 제초제(Lasso Micromix)(즉, 알라클로르 2016g 및 테르부틸라진 864g)로 처리한다. 표준 구역을 필요한 경우 손으로 제초하여 잡초 부재 상태를 유지하고, 시험 구역을 다양한 용량으로 다양한 성장 단계에서 실시예 1에서와 동일한 글리포세이트 제형으로 처리한다. 모든 중앙 두 줄의 중간 길이 7m에 대해 수확한다. 수확량[곡물 톤/ha(15% 습도)]을 측정하고, 표준물의 수확량(%)(STD)으로 표에 나타냈다.In addition, field field tests are performed in Italy to assess the increase in yield of glyphosate resistant corn crops after glyphosate herbicide application. Known corn plants genetically modified in glyphosate resistance according to a combination technique of EPSPS expression and glyphosate oxidoreductase expression are completely random to about 62,000 plants / ha (about 4.7 plants / m). According to the design of the compartment, four rows of 9m each are transplanted and grown in a 3 × 9m area, and then chopped by hand so that crops can grow normally in the same number throughout the entire area. The entire area, including the standard and test zones, is treated with Lasso Micromix (ie Alachlor 2016g and Terbutylazine 864g) at a rate of 6 l / ha. The standard zone is weeded by hand to remain weed free if necessary, and the test zone is treated with the same glyphosate formulation as in Example 1 at various stages of growth at various doses. Harvest is carried out for the middle length of 7 m of every two rows. Yield [grain tons / ha (15% humidity)] was measured and shown in the table as% yield (STD) of the standard.
[표 XIIIa]TABLE XIIIa
잎이 3 내지 4개인 단계에서의 글리포세이트 처리당 수확량(%)% Yield per glyphosate treatment at 3 to 4 leaf stages
[표 XIIIb]TABLE XIIIb
잎이 5 내지 6개인 단계에서의 글리포세이트 처리당 수확량(%)% Yield per glyphosate treatment at 5 to 6 leaf stages
실시예 9Example 9
추가로, 야외 실지 시험을 실시예 1에서와 동일한 프로토콜에 따라 수행하여, 상이한 제형의 글리포세이트 제초제가 수확량 증가에 미치는 효과를 평가한다. 유전자 도입된 작물을 각각 720g a.e./ha 및 1080g a.e./ha의 글리포세이트 제초제로 3회 처리한다.In addition, field field tests were performed according to the same protocol as in Example 1 to evaluate the effect of different formulations of glyphosate herbicide on yield increase. The transgenic crops are treated three times with glyphosate herbicides of 720 g a.e./ha and 1080 g a.e./ha, respectively.
[표 IX]TABLE IX
수확량(%) - 새로운 뿌리 중량Yield (%)-new root weight
라운드업R :Roundup R :
- 글리포세이트 이소프로필암모늄 염 360g a.e./ℓGlyphosate isopropylammonium salt 360 g a.e./l
- 에톡시하 탤로우 아민 게면활성제 180g/l-180 g / l tallowamine amine surfactant
고체 제형:Solid Formulations:
- 글리포세이트 나트륨 430g a.e./kgGlyphosate sodium 430 g a.e./kg
- 트리메틸 에톡시폴리옥시프로필 (8) 암모늄 클로라이드 160g/kgTrimethyl ethoxypolyoxypropyl (8) ammonium chloride 160 g / kg
- 황산암모늄 330g/kg330 g / kg ammonium sulfate
액체 제형: 실시예 1에서 사용된 것과 동일.Liquid Formulation: Same as used in Example 1.
본 실시예는 규정된 바와 같은 환경 친화적인 계면활성제를 포함하는 제형의 기능이 개선되는 경향을 보여준다.This example shows a tendency to improve the function of formulations comprising environmentally friendly surfactants as defined.
실시예 10 Example 10
실시예 7에 기재되어 있는 바와 유사한 방법(봄철 종유 평지)에 따라 당해 실시예를 수행하여, 상이한 제형의 글리포세이트 제초제의 효과를 평가한다. 당해 시험에서의 시험 구역은 1.5×10m이다. This example is carried out according to a similar method as described in Example 7 (spring oilseed rape) to assess the effect of glyphosate herbicides of different formulations. The test zone in this test is 1.5 × 10 m.
[표 X]TABLE X
수확량[곡물 톤/ha(습도 9%)]Yield [grain tons / ha (9% humidity)]
라운드업으로 처리한 후 수득된 수확량을 100%로 간주한다.The yield obtained after treatment with roundup is considered 100%.
또한, 본 실시예는 실시예 7에 사용된 제형의 우수성을 확인해준다.This example also confirms the superiority of the formulation used in Example 7.
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