KR100225689B1

KR100225689B1 - 프로스타글란딘 유도체(prostaglandin derivatives)

Info

Publication number: KR100225689B1
Application number: KR1019960033503A
Authority: KR
Inventors: 아키오 니시우라; 타쿠야 세코; 라이오지 마쯔모토; 신이치 하마노
Original assignee: 우에노 도시오; 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤
Priority date: 1995-08-16
Filing date: 1996-08-13
Publication date: 1999-10-15
Also published as: NO963408L; CN1058706C; ES2140032T3; NO963408D0; HU9602262D0; HUP9602262A3; MX9603452A; CA2183486C; CN1151398A; AU6210596A; DK0758645T3; CA2183486A1; US5690957A; KR970010742A; EP0758645B1; DE69604631T2; EP0758645A1; ATE185559T1; ZA966934B; NO309086B1

Abstract

본 발명은 하기 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물, 그들을 포함하는 리포좀 제제, 그들 제제의 제조방법 및 그들을 활성성분으로 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다 :

상기 식에서, R은 (ⅰ)-CH₂CH₂-O-CO-R¹또는 (ⅱ) -CH₂CH₂-O-CO-CH₂-O-R²이고, R¹및 R²는 각각 개별적으로 C10-20 알킬이다.

상기 화학식 1의 화합물은 혈류 증가 효과를 보유하며, 말초 순환 장애, 욕창 또는 피부 궤양의 예방 및/또는 치료, 또는 혈류(blood flow) 유지에 유용하다.

Description

프로스타글란딘 유도체

본 발명은 프로스타글란딘 E₁에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물, 그들을 포함하는 리포좀 제제, 그들 제제의 제조 방법 및 그들을 활성 성분으로 포함하는 약학 조성물을 제공하므로써 혈압 강화 활성을 최소화하면서 말초 순환 장애, 욕창 또는 피부 궤양을 예방 및/또는 치료하고, 혈관 복원 수술후 혈류 유지를 가능하게 하는 데 있다.

본 발명은 프로스타글란딘 E₁(이하, 'PGE₁'이라 칭한다)에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물, 그들을 포함하는 리포좀 제제, 그들 제제의 제조 방법 및 그들을 활성 성분으로 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

PGE₁의 구조는 하기 화학식으로 표현되며, 여러 가지 생리학적 특성을 갖는다 :

특히, PGE₁은 혈압 강하, 혈관 확장, 혈류 증가 및 혈관에 대한 항혈소판 효과를 나타낸다.

여러 가지 생리적 특성 때문에, PGE₁은 의약품에 사용되어 왔다. 이미, PGE₁은 말초 동맥 폐색 질병, 혈전증의 앙기나성 폐색증 등의 치료, 혈관 복원 수술 후 혈류의 유지, 외과 수술에서 저수준의 혈압 유지 등을 위해 사용되어 왔으며, 마취제로도 사용되어 왔다.

그러나, 말초 순환 장애를 개선하는데 상기 PGE₁을 사용하기 위해서는 다음과 같은 두 가지 문제점이 존재한다 :

(1) PGE₁은 많은 생리학적 특성을 갖는다. 따라서, PGE₁의 한 생리적 작용을 치료에 이용하는 경우, 나머지 효과들은 부작용이 된다.

(2) PGE₁은 생체 내에서 그의 대사 효소에 의해 신속하게 불활성화된다.

말초 순환 장애는 통증, 한랭감 등과 같은 여러 가지 빈혈 증상, 말초 혈관내에서 혈전 형성에 의해 유도된 폐색증 및 궤양 형성을 수반하는 질병이다. 이러한 장애를 치료하기 위해서는 말초 순환계에서의 혈류를 증가시켜 혈액 순환을 개선시키는 것이 필요하다.

그러나, 다량의 PGE₁이 혈관내로 한꺼번에 주입되는 경우, 이는 말초 순환계 뿐만 아니라 대동맥에도 작용하여 심한 저혈압 증상을 나타낸다. 이러한 문제점을 해결하기 위해서는, 말초 순환계에만 작용하고 대동맥에는 그 작용 정도가 감소되도록 PGE₁을 조절된 용량으로 투여하여야 한다.

한편, PGE₁은 매우 신속하게 대사된다는 알려져 있다. 따라서, 그 효과를 유지하기 위해서는 PGE₁을 생체 내에서 연속적으로 투여해야 한다. 이러한 효과들을 종합해 본 결과, 투여후 생체 내에서 PGE₁으로 전환되고, 더욱이 전환 속도가 완만하여 상기 효과가 유지되는 화합물을 제조하는 것이 바람직하다는 결론에 이르렀다.

본 발명자들을 투여 후 생체 내에서 PGE₁으로 점진적으로 전환되는 화합물을 개발하기 위한 연구를 계속하였다. 그 결과, 상기 목적은 특정의 알콜에 의해 PGE₁의 1-위치에서 카르복실산 기가 에스테르화된 화합물에 의해 달성될 수 있음을 발견하였다.

또한, 본 발명자들은 상기 효과가 리포좀이라 불리는 인지질 이중층을 포함하는 폐쇄 소낭을 이용하여 본 발명의 화합물을 둘러싸므로써 개선될 수 있음을 발견하였다.

일본국 특허 공개 제59-206349호에는 하기 화학식 a의 화합물이 기술되어 있다.

상기 식에서, R^1a는 알킬이고, R^2a는 수소 또는 저급 알킬이며, X^a는또는이다. 상기 화합물은 혈압 강하 효과, 항혈소판 효과 등을 나타내며, 혈압 강하제 및 혈전증 치료제로서 사용되는데, 특히 지방 에멀젼으로 전환되는 화합물이 바람직하다.

상기 화학식 a에서, 메틸렌 사슬(-CH₂-) 또는 알킬기에 의해 치환된 메틸렌 사슬은 PGE₁의 카르복실 기와 X^a(-COO- 또는 -OCO-)로 나타낸 에스테르 결합 사이에 존재한다.

한편, 후술하는 본 발명의 화학식 1의 상응하는 부분에서, R이 (ⅰ) -CH₂-CH₂-O-CO-R¹-을 나타내는 경우, 이는 에틸렌 사슬(-CH₂-CH₂-)에 의해 결합되므로 화학식 1의 화합물과 화학식 a의 화합물은 서로 상이하다.

R이 (ⅱ) -CH₂CH₂-O-CO-CH₂-O-R²를 나타내는 경우, 이는 에틸렌에 의해 결합되고, 또는 에테르 결합(-CH₂-O-)에 의해 R²에 결합되므로 화학식 1의 화합물과 화학식 a의 화합물은 서로 상이하다.

본 발명의 화합물은 탁월한 선택성과 작용 유지 특성을 갖는다.

또한, 본 발명 화합물의 리포좀 제제는 활성 약물의 유지 및 방출 특성이 탁월하다.

따라서, 본 발명은 하기 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물을 제공한다 :

상기 식에서, R은 (ⅰ) -CH₂CH₂-O-CO-R¹또는 (ⅱ) -CH₂CH₂-O-CO-CH₂-O-R²이고, R¹및 R²는 각각 개별적으로 C10-20 알킬이다.

또한, 본 발명은 활성 성분으로서 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물을 포함하는 리포좀 제제; 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물을 제조하는 방법; 및 활성 성분으로서 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

본 명세서 전반적인 설명을 통해, 당업자라면 모든 이성질체가 본 발명에 포함됨을 이해할 것이다. 예를 들어, 알킬기는 직쇄는 물론 분지쇄도 포함하는 것이다.

상기 화학식 1에서, R¹또는 R²로 나타낸 C10-20 알킬기는 데실, 운데실, 도데실, 트리데실, 테트라데실, 펜타데실, 헥사데실, 헵타데실, 옥타데실, 노나데실, 에이코실 및 이의 이성질체를 의미한다.

바람직한 R¹은 C10-12 알킬이고, 바람직한 R²는 C11-17 알킬 및 이의 이성질체이다. 구체적으로 바람직한 R¹은 운데실이고, 바람직한 R²는 도데실 또는 헥사데실이다.

상기 화학식 1의 PGE₁유도체의 시클로덱스트린 포접 화합물은 알파-, 베타- 및 감마-시클로덱스트린 또는 이의 혼합물을 사용하는 미국 특허 제3816393호 또는 제4054736에 개시된 방법으로 제조할 수 있다. 구체적으로, 시클로덱스트린을 물 및/또는 물과 혼화성인 유기용매에 용해시키고, 그 용액을 물과 혼화성인 유기 용매, 예를 들면 에탄올에 용해시킨 프로스타글란딘에 첨가한다. 그 혼합물을 가열한 후, 혼합물을 감압하에 농축시키거나 방치 냉각시키면 포접 화합물을 얻을 수 있다.

시클로덱스트린 포접 화합물로 전환시키면 상기 화학식 1의 PGE₁유도체의 안정성 및 수용성이 증가되며, 약제로서 투여하기가 용이하기 때문에 유용하다.

상기 화학식 1의 화합물은 하기 화학식 2 화합물의 R³기를 제거하므로써 제조할 수 있다 :

상기 식에서, R³은 산성 조건 하에서 제거될 수 있는 히드록실 보호기, 예를 들어 테트라히드로피란-2-일, 메톡시메틸 또는 2-에톡시에틸이고, R은 앞에서 정의한 바와 같다. R³기의 제거 반응은 수혼화성 용매(예를 들어, 메탄올 또는 에탄올 같은 저급 알칸올, 또는 디옥산 또는 테트라히드로푸란 같은 에테르)의 존재 하에서 실온 내지 75℃에서 유기산(예를 들어, 아세트산 또는 p-톨루엔설폰산) 또는 무기산(예를 들어, 염산 또는 황산)의 수용액 중에서 수행할 수 있다. 상기 반응은 40 내지 50℃의 온도에서, 아세트산, 물, 그리고 테트라히드로푸란의 혼합 용매 중에서 수행하는 것이 바람직할 수 있다.

상기 화학식 2의 화합물은 0℃ 내지 실온의 온도에서 트리페닐포스핀 또는 디에틸아조디카르복실레이트(이하, DEAD라 약칭함)의 존재 하에서 하기 화학식 3의 화합물 또는 하기 화학식 4의 화합물과 상기 화학식 2에 상응하는 유리 카르복실산을 불활성 유기 용매(예를 들어, 테트라히드로푸란 또는 디옥산 같은 에테르)중에서 반응시켜 제조할 수 있다 :

상기 식에서, 각 기호들은 앞에서 정의한 바와 같다.

상기 화학식 2의 화합물에 상응하는 출발 물질로 사용된 유리 카르복실산, 예를 들어 (13E)-(11α,15S)-9-옥소-11,15-비스(테트라히드로피란-2-일옥시)프로스트-13-엔산은 문헌[참조 : J. Am. Chem. Soc., 92, 2586(1970)]에 기재되어 있는 공지 화합물이다.

상기 화학식 2의 화합물에 상응하는 기타 유리 카르복실산, 및 상기 화학식 3 및 4의 화합물은 그 자체로 공지되어 있거나, 공지된 화합물로부터 공지된 방법으로 용이하게 제조할 수 있다.

예를 들어, 상기 화학식 3 및 4의 화합물은 하기 반응식 a 및 반응식 b에 기술된 방법으로 제조할 수 있다.

상기 반응식에서, 각 약자는 다음과 같은 의미를 가지며, R¹및 R²는 앞에서 정의한 바와 같다.

Py : 피리딘,

DMF : 디메틸포름아미드,

^tBu : 3차-부틸,

DME : 디메틸포름에탄,

iPr : 이소프로필,

Et : 에틸,

THF : 테트라히드로푸란,

Ph : 페닐,

EtOH : 에탄올.

강력하고 지속적인 혈류 증가 효과를 갖고 있음에도 불구하고, 상기 일반식 1의 PGE₁에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물은 단지 미약한 혈압 강하 활성을 나타내며, 따라서 말초 순환 장애(예를 들어, 말초 동맥 폐색 질병 또는 혈전증의 앙기나성 폐색증), 욕창, 피부 궤양(예를 들어, 화상, 당뇨병성 궤양, 대퇴부 동맥 및 수술 스트레스의 협착증으로 인한 궤양)의 예방 및/또는 치료, 혈관 복원 수술 후 혈류의 유지를 위한 제제로서 사용할 수 있다.

본 발명 화합물의 혈류 증가 효과 및 혈압 강하 효과는 예를 들어 하기 실험에 의해 측정하였다.

체중이 200-350g인 쥐(수컷)를 우레탄(25% 우레탄, 6㎖/㎏, 피하 투여)으로 마취하였다. 혈압 측정과 약물 투여를 위해 경동맥과 경정맥에 폴리우레탄튜브 캐뉼라를 삽입하였다. 혈압은 일회용 압력 상호 변화 키트(스펙트라메트 리미티드)로 측정하여, 렉티코더(니혼, 코덴 리미티드사의 모델 RJG-4128)로 기록하였다. 혈류는 접촉형 레이저 도플러 혈류량계(어드밴스, 리미티드의 모델 ALF21)를 이용하여 발등의 피부 혈류량으로 모니터하였다. 약물 투여 전에 관찰된 수준으로 수치가 회복될 때까지 측정을 계속하였다. 투여 시간은 약 10초였다. 혈압 강하 효과 및 혈류 증가 효과는 최대 혈압 강화 활성(mmHg) 및 약물 투여 후 곡선 하부면적(AUC)으로서 각각 측정하였다.

결과는 혈류 증가 효과(주 효과)를 얻는데 필요한 투여량과, 동일 투여량에서의 혈압 강하 효과(부작용)에 의해 표현하였다.

본 발명의 화합물은 리포좀 제제 형태(실시예 4에서 제조함)로 투여하였다. 비교 화합물로서, 일본 특허 공개 제59-206349호 명세서의 실시예 10에 기술된 PGE₁1-데카노일옥시에틸 에스테르는 지질 에멀젼의 형태(본 명세서의 참고예 8에서 제조함)로 투여하였다.

혈류 증가의 유효성은 하기 방법으로 결정하였다. 즉, PGE₁지질 에멀젼(시판되고 있음)은 쥐 질병 모델에서 5㎍/㎏을 정맥내 주사하므로써 효과를 나타내는 것으로 공지되어 있다. [참조 : Drug Exp. Clin. Res., 12,917(1986)]. 상기한 본 발명의 화합물에 대한 실험적 평가 시스템에서, PGE₁지질 에멀젼(5㎍/㎏을 정맥내 주사)에 대한 AUC는 혈류 증가 효과에 대해 771이었으며, 이 값을 혈류증가를 위해 유효한 값으로 사용하였다.

[표 1]

상기 표 1로부터 하기 사실을 확인할 수 있다 :

(1) 본 발명 화합물의 혈류 증가 효과(주 효과)는 비교 화합물의 효과보다 약 2 내지 15배 양호하다.

(2) 한편, 유효 투여량에서 본 발명 화합물의 혈압 강하 효과(부작용)는 비교 화합물의 효과의 1/10 내지 1/15이다.

본 발명의 화합물들은, 말초 순환 장애, 욕창, 피부 궤양의 예방 및/또는 치료, 또는 혈관 복원 수술 후의 혈류의 유지를 위해 사용하는 경우, 비교 화합물보다 현저히 양호하다고 생각된다.

본 발명 화합물의 독성은 매우 낮으며, 따라서 본 발명의 화합물은 의약품으로 사용하기에 적합할 수 있다.

전술한 목적을 위해, 본 발명의 상기 화학식 1의 화합물 및 그들의 시클로덱스트린 포접 화합물은 전신적으로, 또는 부분적으로 투여할 수 있으며, 통상 비경구 투여에 의한다.

투여량은, 예를 들어 연령, 체중, 증상, 목적하는 치료 효과, 투여 경로 및 치료 기간에 따라 결정된다. 성인의 경우, 1인당 투여량은 일반적으로 비경구(정맥내 투여가 바람직함)투여에 의해 0.1㎍ 내지 500㎍이며, 이는 1일동안 수회로 나누어서 투여하거나 1 내지 24시간 동안 연속으로 정맥내 투여할 수 있다.

전술한 바와 같이, 투여량은 여러 조건에 따라 변동하므로, 상기 투여량보다 적거나 많은 양을 사용할 수 있는 경우도 있다.

본 발명의 화합물은 예를 들어, 비경구 투여를 위한 주사액, 바르는 약 또는 좌약의 형태로 투여할 수 있다.

비경구 투여용 주사액은 멸균 수성 또는 비수성 용액, 현탁액 및 유탁액을 포함한다. 수성 용액 및 현탁액은 주사용 증류수 또는 생리적 염 용액을 포함할 수 있다. 비수성 용액 및 현탁액은 예를 들어, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유 같은 식물성 오일, 에탄올 또는 폴리소르베이트80(등록 상표)같은 알콜을 포함할 수 있다.

주사액은 불활성 희석제 이외의 추가 성분, 예를 들어 보존제, 습윤제, 유화제, 분산제, 안정제 및 용해를 보조하는 제제 같은 보조제(예를 들어, 글루탐산 또는 아스파르트산)을 포함할 수 있다.

이들은 박테리아 유지 필터를 통한 여과, 조성물 내로의 안정제의 혼입 또는 조사에 의해 멸균 처리할 수 있다. 또한, 이들은 멸균 고체 조성물의 형태로 제조할 수 있으며, 사용 직전에 멸균수 또는 몇몇 주사용 멸균 희석제(들)에 용해시킬 수 있다.

비경구 투여를 위한 기타 조성물은 하나 이상의 활성 성분(들)을 포함하는 외용 액제, 피부 도포제, 연고, 직장 투여를 위한 좌약, 질내 투여를 위한 페사리를 포함하며 이들은 공지된 방법으로 제조할 수 있다.

또한, 본 발명은 활성 성분으로서 상기 화학식 1의 PGE₁에스테르 유도체 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물을 함유하는 리포좀 제제를 포함한다.

리포좀 제제는 리포좀 막 재료로서 포스파티딜콜린(예를 들어, 계란 노른자 또는 대두유로부터 유도된 천연 인지질, 및 디미리스토일포스파티딜콜린, 디스테아로일포스파티딜콜린 및 디팔미토일포스파티딜콜린같은 합성 인지질)을 포함하는 단일 또는 다중라멜라 미세 구형 소낭이다. 리포좀 내로 상기 약물을 캡슐화하므로써 상기 약물을 표적 장기에 전달하고, 약물의 방출을 지속시키는 것이 가능해 진다.

활성 성분 이외의 첨가제, 예를 들어 당(락토오즈 또는 만니톨), 중성 인지질(예를 들어, 콜레스테롤 또는 트리글리세라이드), 또는 하전된 지질(예를 들어, 포스파티드산 또는 스테아릴아민)을 리포좀 제제 내로 혼합시킬 수 있다.

리포좀 제제는 공지된 방법으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 적합한 방법은 문헌[참조 : Liposome Technology Vol.1, 2 및 3, Gregoriadis., G편집(1993 발행)]에 상세히 기술되어 있다. 상기 화학식 1의 PGE₁에스테르 유도체 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물과 리포좀 막 재료의 성분비는 1:1 내지 1:400이다. 바람직한 비는 1:10 내지 1:200이며, 특히 바람직한 비는 1:10 내지 1:50이다.

하기 참고예 및 실시예를 참조하여 본 발명을 예시하고자 하나, 본 발명이 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.

괄호내의 용매는 크로마토그래피 분리시의 전개 용매 또는 용출 용매를 나타내며, 사용된 용매의 비는 부피비를 나타내는 것이다.

NMR에서 괄호내의 용매는 측정을 위해 사용한 용매를 나타낸다.

[참고예 1]

라우르산 2-히드록시에틸 에스테르

빙냉하에, 에틸렌 글리콜(434㎎)을 아세톤(20㎖)에 용해시키고, 그 용액에 피리딘(632㎎)을 첨가한 후, 라우로일 클로라이드(1532㎎)를 적가하였다. 용액의 온도를 실온으로 가온하고, 2 시간 동안 교반하였다. 그 혼합물을 증발시켰다. 잔류물에 물을 첨가하고, 그 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 물로 세척하고(3회), 황산 마그네슘으로 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(1.63g)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.38 (n-헥산:에틸 아세테이트 = 4:1)

[참고예 2]

(13E)-(11α,15S)-9-옥소-11,15-비스(테트라히드로피란-2-일옥시)프로스트-13-엔산 2-(도데카노일옥시)에틸 에스테르

빙냉하에, (13E)-(11a,15S)-9-옥소-11, 15-비스(테트라히드로피란-2-일옥시)프로스트-13-엔산(365.4㎎)을 테트라히드로푸란(이하, THF로 약칭함)(5㎖)에 용해시키고, 트리페닐포스핀(366.5㎎) 및 알콜 유도체(참고예 1에서 제조함; 341.6㎎)를 첨가하였다. THF(1㎖)에 디에틸아조디카르복실레이트(이하 DEAD로 약칭함)(243.6㎎)를 용해시켜 제조한 용액을 반응 용액에 적가한 후, 반응 용액의 온도를 실온으로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 그 반응 용액에 물을 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(2회). 유기 층을 염화나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산 : 에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(466㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.42(n-헥산:에틸 아세테이트=4:1).

[참고예 3]

헥사데실옥시아세트산 3차-부틸 에스테르

DMF (15㎖)에 수화나트륨(532.5㎎)를 현탁시키고, 그 현탁액에 DMF(10㎖)에 헥사데칸올(4.0g)을 용해시켜 제조한 용액을 적가한 후, 요오드화 나트륨(15㎎)를 첨가하였다. 80℃에서 1시간 동안 교반한 후, 점성이 매우 큰 유백색 용액을 얻었다. 용액의 온도를 실온으로 냉각하고, α-브로모아세트산 3차-부틸 에스테르(2.6g)을 첨가하였다. 반응 용액을 1시간 동안 교반하고, 물을 첨가하여 반응을 정지시켰다. 그 혼합물을 혼합 용매(n-헥산:에틸 아세테이트=1:1)를 이용하여 추출하였다(3회). 유기 층을 염화 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트=20:1)로 정제하여 표제의 화합물과 헥사데실옥시아세트산 헥사데실 에스테르(부산물)의 혼합물(2.53g)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.45(n-헥산:에틸 아세테이트=10:1),

[참고예 4]

헥사데실옥시아세트산

HOOCCH₂O─C₁₆H₃₃

3차-부틸 에스테르 유도체와 헥사데실 에스테르 유도체(참고예 3에서 제조;1.45g)의 혼합물을 디메톡시에탄(5㎖)에 용해시키고, 그 용액에 수산화나트륨 1N 수용액(2㎖)을 첨가한 후, 환류시켰다. 그 혼합물을 에테르로 추출하여 불순물을 제거하였다. 1N 염산을 첨가하여 수성층을 산성화시키고, 혼합 용매(n-헥산:에틸 아세테이트=1:1)를 이용하여 추출(3회)한 후, 염화 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨 다음, 증발시켰다. 잔류뮬을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트=1:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(698㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.25(n-헥산:에틸 아세테이트=1:1),

[참고예 5]

헥사데실옥시아세트산 2-(벤질옥시)에틸 에스테르

디클로로메탄(10㎖)에 카르복실산 유도체(참고예 4에서 제조; 698 ㎎) 및 2-(벤질옥시)에탄올(710㎎)을 용해시켜 제조한 용액에 디이소프로필에틸아민(2.2㎖) 및 2-클로로-1-메틸피리디늄 요오다이드(891㎎)을 연속적으로 첨가하고, 그 반응 용액을 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 물을 첨가하고, 용액을 디클로로메탄으로 추출하였다(2회). 유기 층을 희석 염산 및 염화 나트륨 포화 수용액으로 연속적으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트=10:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(425㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.63(n-헥산:에틸 에스테이트=3:1),

[참고예 6]

헥사데실옥시아세트산 2-히드록시에틸 에스테르

10% 팔라듐-탄소(110㎎)를 에틸 아세테이트에 현탁시킨 후, 수소 기체를 충전시켰다. 에틸 아세테이트(5㎖)에 벤질 유도체(참고예 5에서 제조; 365㎎)를 용해시켜 제조한 용액을 상기 반응 용액에 첨가하고, 수소 기체 대기하에서 1시간 동안 교반하였다. TLC 상에서 출발 물질의 흔적이 소멸되었음을 확인한 후, 수소 기체를 제거하고, 셀라이트(등록상표)를 이용하여 팔라듐-탄소를 제거하였다. 용매를 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(275㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.32(n-헥산:에틸 아세테이트=2:1),

[참고예 7]

(13E)-(11α,15S)-9-옥소-11,15-비스(테트라히드로피란-2-일)프로스트-13-엔산 2-(헥사데실옥시아세톡시)에틸 에스테르

참고예 2와 동일한 방법으로(라우르산 2-히드록시에틸 에스테르 대신에 참고예 6에서 제조한 알콜 유도체(258㎎)를 사용함), 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(268㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.45(n-헥산:에틸 아세테이트=5:2).

[실시예 1]

PGE₁(도데카노일옥시)에틸 에스테르

THF(2㎖)에 비스(테트라히드로피란-2-일옥시)유도체(참고예 2에서 제조; 460㎎)을 용해시켜 제조한 용액에 65% 아세트산(20㎖)을 첨가하고, 그 반응용액을 45℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 반응 용액의 온도를 실온으로 냉각하고, 그 반응 용액에 물을 첨가한 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다(3회). 유기 층을 물, 중탄산 나트륨 포화 수용액 및 염화 나트륨 포화 수용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨 후, 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:에틸 아세테이트=1:1)로 정제하여 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(178㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.60(에틸 아세테이트),

[실시예 2]

PGE₁2-(헥사데실옥시아세톡시)에틸 에스테르

실시예 1과 동일한 방법으로[실시예 1에서 제조한 비스(테트라히드로피란-2-일옥시) 대신에 참고예 7에서 제조한 비스(테트라히드로피란-2-일옥시) 유도체(260㎎)를 사용함], 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물(145.5㎎)을 얻었다.

TLC : Rf : 0.45(n-헥산:에틸 아세테이트=1:3).

[실시예 3]

PGE₁2-(도데실옥시아세톡시)에틸 에스테르

참고예 3, 4, 5, 6 및 7과 실시예 2와 동일한 방법으로(출발 물질로 헥사데칸올 대신에 테트라데칸올을 사용함), 하기 물성치를 갖는 표제의 화합물을 얻었다.

[실시예 4]

리포좀 제제의 제조

디미리스토일포스파티딜콜린(이하, DMPC로 약칭함, 6㎎) 및 본 발명의 여러 가지 PGE₁에스테르 유도체(3∼90㎍)를 클로로포름에 용해시키고, 클로로포름을 제거하고 감압하에 1시간 동안 정치시켜서 상기 물질들로 이루어진 건조 지질 필름을 제조하였다.

상기 건조 지질 필름을 볼텍스 혼합기(타입 S-100, 타이요카가쿠 인코오포레이티드)를 이용하여 10% 말토오즈 용액(3㎖)에 분산시켜서, 수성 현탁액(약물농도:1, 3, 10, 30㎍/㎖)을 얻었다. 작은 단일라멜라 리포좀은 하기 방법을 이용하여 상기 다중라멜라 리포좀으로부터 제조하였다.

(1) 초음파 분해법

상기 방법으로 제조한 다중라멜라 리포좀 용액(3㎖)을 플라스틱 튜브로 옮기고, 탐침 초음파 분해기(브란손의 SONIFIER 셀 디스럽터 200)를 이용하여 50% 펄스 작동 상태에서 15분 동안 초음파 분해 처리하였다. 얻은 용액을 기공 직경이 0.2㎛인 막 여과기를 통해 통과시켜 티타늄 입자를 제거하고, 평균 직경이 40∼70㎚ 리포좀 제제를 형성시켰다.

(2) 압출법

압출 장치(THE EXTRUDER, 리펙스바이오멤브레인스 인코오포레이티드)내에 기공 직경이 0.1㎛인 폴리카르보네이트 막 여과기 2매를 적층하고, 상기 방법으로 제조한 다중라멜라 리포좀 용액(3㎖)을 첨가하였다. 압출 장치는 온도가 40∼50℃로 유지된 수조내에 위치시켰다. 다중라멜라 리포좀 용액은 2매의 적층된 막 여과기를 통해 3회 통과시킨 후, 얻은 작은 단일라멜라 리포좀을 기공 직경을 0.1㎛에서 0.05㎛로 대체한 막 여과기를 통해 3회 통과시켰다. 최종적으로 얻은 리포좀의 평균 직경은 50∼60㎛였다.

[실시예 5]

리포좀 제제의 제조

실시예 4와 동일한 방법으로(디미리스토일포스파티딜콜린 대신에 에그 레시틴(6㎎)과 본 발명의 PGE₁에스테르 유도체(30∼600㎍)을 사용함), 리포좀 제제를 형성시켰다.

[제제예 1]

PGE₁데카노일옥시에틸 에스테르의 리포좀 제제(실시예 4에서 제조)를 1㎖ 유리병에 분할 주입한 후 동결 건조시켜서, 목적하는 주사제를 얻었다.

[참고예 8]

PGE₁1-데카노일옥시에틸 에스테르의 지질 에멀젼

정제한 계란 노른자 인지질(48㎎), PGE₁1-데카노일옥시에틸 에스테르(15∼450㎍), 올레산나트륨(1㎖) 및 포스파티드산(1㎎)을 정제한 대두유(200㎎)에 첨가하고, 40∼70℃에서 용해시켰다. 증류수(2㎖)를 첨가하고, 상기 혼합물을 고속 균질화기를 이용하여 30분 동안 천연 그대로 유화시켰다. 또한, 얻은 에멀젼에 글리세린(10㎎) 및 주사용 증류수(800㎕, 20∼40℃)를 연속적으로 첨가하였다. 탐침 초음파 분해기를 사용하여 30분 동안 유화시키고, 균질한 미세 지질에멀젼(평균 직경 : 200∼400㎚)를 형성시켰다.

본 발명에 의하면, 리포좀 내에 PGE₁에스테르 유도체를 캡슐화하여 상기 유도체의 안정성 및 수용성을 증가시키므로써, 표적 장기에 대해 높은 선택성으로 상기 유도체를 전달할 수 있어 혈압 강하 등의 부작용을 최소화하면서 말초 순환장애 등의 예방 및/또는 치료, 혈관 복원 수술후 혈류의 유지 등이 가능하다.

Claims

하기 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁에스테르 유도체 및 이의 시클로덱스트린 포접 화합물;

상기 식에서, R은 (ⅰ) -CH₂CH₂-O-CO-R¹또는 (ⅱ) -CH₂CH₂-O-CO-CH₂-O-R²이고, R¹및 R²는 각각 개별적으로 C10-20 알킬이다.
제1항에 있어서, R이 (ⅰ) -CH₂CH₂-O-CO-R¹이고, R¹이 C10-12 알킬인 화합물.
제1항에 있어서, R이 (ⅱ) -CH₂CH₂-O-CO-CH₂-O-R²이고, R²가 C11-17 알킬인 화합물.
제2항에 있어서, 상기 화합물이 PGE₁2-(도데카노일옥시)에틸 에스테르인 화합물.
제3항에 있어서, 상기 화합물이 PGE₁2-(도데실옥시아세톡시)에틸 에스테르 또는 PGE₁2-(헥사데실옥시아세톡시)에틸 에스테르인 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에서 정의한 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁유도체와 리포좀 막 재료를 1:1 내지 1:400의 비로 함유하는 리포좀 제제.
제6항에 있어서, 상기 리포좀 막 재료가 디미리스토일포스파티딜콜린을 함유하는 것인 리포좀 제제.
제6항에 있어서, 상기 리포좀 막 재료가 에그 레시틴을 함유하는 것인 리포좀 제제.
제6항 내지 제8항 중 어느 하나의 항에 있어서, 동결 건조에 의해 얻을 수 있는 것인 리포좀 제제.
하기 화학식 2 화합물의 R³기를 제거하여 하기 화학식 1 화합물을 제조하고, 필요에 따라 이렇게 얻은 화학식 1의 화합물을 이의 시클로덱스트린 포접 화합물로 전환시키는 단계를 포함하는 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물의 제조 방법 :

상기 식에서, R은 제1항에서 정의한 바와 동일하며, R³은 산성 조건하에서 제거될 수 있는 히드록실 보호기이다.
활성 성분으로 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁유도체 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물과 약학적으로 허용 가능한 담체를 함유하는 말초 순환 장애, 욕창 또는 피부 궤양을 예방 및/또는 치료하기 위한 약물 조성물.
활성 성분으로 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 프로스타글란딘 E₁유도체 또는 이의 시클로덱스트린 포접 화합물과 약학적으로 허용 가능한 담체를 함유하는 혈관 복원 수술후 혈류 유지를 위한 약학 조성물.