JPWO2020172332A5

JPWO2020172332A5 -

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Publication number: JPWO2020172332A5
Application number: JP2021548696A
Authority: JP
Publication date: 2023-02-28

Description

上記の詳細な説明に照らして、こうしたおよび他の変化を実施形態になすことができる。一般に、以下の特許請求の範囲では、使用される用語は、特許請求の範囲を、明細書および特許請求の範囲に開示されている特定の実施形態に限定するものとは解釈されるべきではなく、そのような特許請求の範囲の権利内にある均等物の完全な範囲と共にすべての考え得る実施形態を含むと解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は本開示により限定されない。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）α鎖可変（Ｖα）ドメインおよびＴＣＲβ鎖可変（Ｖβ）ドメインを含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、ペプチド：ＨＬＡ複合体に結合することが可能であり、前記ペプチドが、アミノ酸配列ＫＬＶＶＶＧＡＶＧＶ（配列番号１９８）を含むかまたはそれからなり、前記ＨＬＡが、ＨＬＡ－Ａ ^＊０２、必要に応じてＨＬＡ－Ａ ^＊０２：０１を含む、結合タンパク質。
（項目２）
ヒトＴ細胞によって異種性発現され得る、項目１に記載の結合タンパク質。
（項目３）
前記Ｖαドメインおよび／または前記Ｖβドメインが、各々独立して、ヒトであるか、ヒト化されているか、またはキメラであり、好ましくは各々ヒトである、項目１または２に記載の結合タンパク質。
（項目４）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるペプチドを発現するＨＬＡ－Ａ ^＊０２ ^＋腫瘍細胞を特異的に殺滅することが可能である、項目１～３のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目５）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるペプチドを発現するＨＬＡ－Ａ ^＊０２ ^＋腫瘍細胞の存在下にある場合、必要に応じて、外因性ＩＦＮ－γのさらなる存在下にある場合、ＣＤ１３７の上昇した発現を有し、前記ＣＤ１３７発現が、
（ｉ）前記結合タンパク質を発現しない参照ヒトＴ細胞によるＣＤ１３７発現であって、前記参照ヒトＴ細胞が、前記腫瘍細胞の存在下にある、ＣＤ１３７発現；ならびに／または
（ｉｉ）前記腫瘍細胞の存在下にない場合および／もしくはペプチド：ＨＬＡ複合体を発現する抗原提示細胞の存在下にない場合の、前記結合タンパク質を発現する前記ヒトＴ細胞によるＣＤ１３７発現であって、前記ペプチドが、配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなり、前記ＨＬＡが、必要に応じてＨＬＡ－Ａ ^＊０２：０１である、ＣＤ１３７発現
と比較して上昇する、項目１～４のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目６）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し、ここで、前記ペプチドは、少なくとも約１０ ^－１０Ｍ、少なくとも約１０ ^－９Ｍ、および／または少なくとも約１０ ^－８Ｍの濃度で存在する、項目１～５のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目７）
前記結合タンパク質を発現する複数のヒトＴ細胞のうち、前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、または少なくとも約２５％が、１０ ^－９Ｍのペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生する、項目１～６のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目８）
前記結合タンパク質を発現する複数のヒトＴ細胞のうち、前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、または少なくとも約３５％が、１０ ^－８Ｍのペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生する、項目６または７に記載の結合タンパク質。
（項目９）
前記ヒトＴ細胞または前記複数のヒトＴ細胞が、０．１ｎｇ／ｍＬまたはそれよりも多くのアミノ酸配列ＫＬＶＶＶＧＡＶＧＶ（配列番号１９８）を含むかまたはそれからなる前記ペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し、必要に応じて、前記ヒトＴ細胞または前記複数のヒトＴ細胞が、１０，０００ｎｇ／ｍＬの配列番号１のアミノ酸５～１４を含むかまたはそれからなるペプチドの存在下にある場合よりも、１ｎｇ／ｍＬのアミノ酸配列ＫＬＶＶＶＧＡＶＧＶ（配列番号１９８）を含むかまたはそれからなる前記ペプチドの存在下にある場合により多くのＩＦＮ－γを産生する、項目４～８のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１０）
－８．０未満、必要に応じて約－８．５またはそれ未満、さらに必要に応じて約－８．５、約－８．６、約－８．７、約－８．８、約－８．９、約－９、約－９．１、または約－９．２の、配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる前記ペプチドについてのｌｏｇ _１０ＥＣ５０を有する、項目１～９のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１１）
（ｉ）前記結合タンパク質が、前記ヒトＴ細胞にとって異種性のポリヌクレオチドによってコードされ；
（ｉｉ）前記ヒトＴ細胞が、ＣＤ８ ^＋Ｔ細胞、ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞、もしくはその両方を含み；
（ｉｉｉ）配列番号１９８に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドを発現する前記腫瘍細胞が、ＨＬＡ－Ａ ^＊０２：０１ ^＋であり；および／または
（ｉｖ）前記腫瘍細胞が、ＣＦＰＡＣ－１細胞を含む
項目４～１０のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１２）
ＣＤ８とは独立して、またはＣＤ８の非存在下で、前記ペプチド：ＨＬＡ複合体に結合することが可能である、項目１～１１のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１３）
（ｉ）前記Ｖαドメインが、配列番号３５１、３４３、３５９、３６７、３７５、３８３、３９１、３９９、４０７、４１５、４２３、４３１、４３９、４４７、４５５、４６３、４７１、もしくは４７９のいずれか１つに示されているＶαアミノ酸配列に従うＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、および／もしくはＣＤＲ３αアミノ酸配列を含み；ならびに／または
（ｉｉ）前記Ｖβドメインが、配列番号３５４、３４６、３６２、３７０、３７８、３８６、３９４、４０２、４１０、４１８、４２６、４３４、４４２、４５０、４５８、４６６、４７４、４８２、もしくは４９０のいずれか１つに示されているＶβアミノ酸配列に従うＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、および／もしくはＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む
項目１～１２のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１４）
（ｉ）それぞれ配列番号３５１および３５４；
（ｉｉ）それぞれ配列番号３４３および３４６；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号３５９および３６２；
（ｉｖ）それぞれ配列番号３６７および３７０；
（ｖ）それぞれ配列番号３７５および３７８；
（ｖｉ）それぞれ配列番号３８３および３８６；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号３９１および３９４；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号３９９および４０２；
（ｉｘ）それぞれ配列番号４０７および４１０；
（ｘ）それぞれ配列番号４１５および４１８；
（ｘｉ）それぞれ配列番号４２３および４２６；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号４３１および４３４；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号４３９および４４２；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号４４７および４５０；
（ｘｖ）それぞれ配列番号４５５および４５８；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号４６３および４６６；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号４７１および４７４；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号４７９および４８２；または
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号４８７および４９０
に示されているＶαおよびＶβアミノ酸配列に従うＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３αならびにＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む、項目１～１３のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１５）
（ｉ）配列番号２２８、２２２、２３４、２４０、２４６、２５２、２５８、２６４、２７０、２７６、２８２、２８８、２９４、３００、３０６、３１２、３１８、３２４、もしくは３４０のいずれか１つに示されているＣＤＲ３αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｉ）配列番号２２５、２１９、２３１、２３７、２４３、２４９、２５５、２６１、２６７、２７３、２７９、２８５、２９１、２９７、３０３、３０９、３１５、３２１、もしくは３２７のいずれか１つに示されているＣＤＲ３βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｉｉ）配列番号２２６、２２０、２３２、２３８、２４４、２５０、２５６、２６２、２６８、２７４、２８０、２８６、２９２、２９８、３０４、３１０、３１６、３２２、もしくは３２８のいずれか１つに示されているＣＤＲ１αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｖ）配列番号２２３、２１７、２２９、２３５、２４１、２４７、２５３、２５９、２６５、２７１、２７７、２８３、２８９、２９５、３０１、３０７、３１３、３１９、もしくは３２５のいずれか１つに示されているＣＤＲ１βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｖ）配列番号２２７、２２１、２３３、２３９、２４５、２５１、２５７、２６３、２６９、２７５、２８１、２８７、２９３、２９９、３０５、３１１、３１７、３２３、もしくは３２９のいずれか１つに示されているＣＤＲ２αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｖｉ）配列番号２２４、２１８、２３０、２３６、２４２、２４８、２５４、２６０、２６６、２７２、２７８、２８４、２９０、２９６、３０２、３０８、３１４、３２０、もしくは３２６のいずれか１つに示されているＣＤＲ２βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント
を含む、項目１～１４のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１６）
（ｉ）それぞれ配列番号２２６、２２７、２２８、２２３、２２４、および２２５；
（ｉｉ）それぞれ配列番号２２０、２２１、２２２、２１７、２１８、および２１９；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号２３２、２３３、２３４、２２９、２３０、および２３１；
（ｉｖ）それぞれ配列番号２３８、２３９、２４０、２３５、２３６、および２３７；
（ｖ）それぞれ配列番号２４４、２４５、２４６、２４１、２４２、および２４３；
（ｖｉ）それぞれ配列番号２５０、２５１、２５２、２４７、２４８、および２４９；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号２５６、２５７、２５８、２５３、２５４、および２５５；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号２６２、２６３、２６４、２５９、２６０、および２６１；
（ｉｘ）それぞれ配列番号２６８、２６９、２７０、２６５、２６６、および２６７；
（ｘ）それぞれ配列番号２７４、２７５、２７６、２７１、２７２、および２７３；
（ｘｉ）それぞれ配列番号２８０、２８１、２８２、２７７、２７８、および２７９；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号２８６、２８７、２８８、２８３、２８４、および２８５；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号２９２、２９３、２９４、２８９、２９０、および２９１；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号２９８、２９９、３００、２９５、２９６、および２９７；
（ｘｖ）それぞれ配列番号３０４、３０５、３０６、３０１、３０２、および３０３；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号３１０、３１１、３１２、３０７、３０８、および３０９；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号３１６、３１７、３１８、３１３、３１４、および３１５；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号３２２、３２３、３２４、３１９、３２０、および３２１；または
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号３２８、３２９、３３０、３２５、３２６、および３２７に示されているＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む、項目１～１５のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１７）
（ｉ）前記Ｖαドメインが、配列番号３５１、３４３、３５９、３６７、３７５、３８３、３９１、３９９、４０７、４１５、４２３、４３１、４３９、４４７、４５５、４６３、４７１、もしくは４７９のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかもしくはそれらからなり；および／または
（ｉｉ）前記Ｖβドメインが、配列番号３５４、３４６、３６２、３７０、３７８、３８６、３９４、４０２、４１０、４１８、４２６、４３４、４４２、４５０、４５８、４６６、４７４、４８２、もしくは４９０のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかもしくはそれらからなる
項目１～１６のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１８）
前記Ｖαドメインおよび前記Ｖβドメインが、
（ｉ）それぞれ配列番号３５１および３５４；
（ｉｉ）それぞれ配列番号３４３および３４６；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号３５９および３６２；
（ｉｖ）それぞれ配列番号３６７および３７０；
（ｖ）それぞれ配列番号３７５および３７８；
（ｖｉ）それぞれ配列番号３８３および３８６；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号３９１および３９４；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号３９９および４０２；
（ｉｘ）それぞれ配列番号４０７および４１０；
（ｘ）それぞれ配列番号４１５および４１８；
（ｘｉ）それぞれ配列番号４２３および４２６；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号４３１および４３４；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号４３９および４４２；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号４４７および４５０；
（ｘｖ）それぞれ配列番号４５５および４５８；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号４６３および４６６；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号４７１および４７４；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号４７９および４８２；または
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号４８７および４９０
に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目１～１７のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目１９）
ＴＣＲα鎖定常ドメイン（Ｃα）および／またはＴＣＲβ鎖定常ドメイン（Ｃβ）をさらに含む、項目１～１８のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目２０）
前記Ｃαが、配列番号８５または８６に示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなる、項目１９に記載の結合タンパク質。
（項目２１）
前記Ｃβが、配列番号８７～９９のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目１９または２０に記載の結合タンパク質。
（項目２２）
ＴＣＲα鎖およびＴＣＲβ鎖を含み、前記ＴＣＲα鎖およびＴＣＲβ鎖が、
（ｉ）それぞれ配列番号３５０および３５３；
（ｉｉ）それぞれ配列番号３４２および３４５；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号３５８および３６１；
（ｉｖ）それぞれ配列番号３６６および３６９；
（ｖ）それぞれ配列番号３７４および３７７；
（ｖｉ）それぞれ配列番号３８２および３８５；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号３９０および３９３；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号３９８および４０１；
（ｉｘ）それぞれ配列番号４０６および４０９；
（ｘ）それぞれ配列番号４１４および４１７；
（ｘｉ）それぞれ配列番号４２２および４２５；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号４３０および４３３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号４３８および４４１；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号４４６および４４９；
（ｘｖ）それぞれ配列番号４５４および４５７；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号４６２および４６５；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号４７０および４７３；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号４７８および４８１；または
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号４８６および４８９
に示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目１～２１のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目２３）
ＴＣＲ、単鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）、またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む、項目１～２２のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目２４）
ＴＣＲを含む、項目２３に記載の結合タンパク質。
（項目２５）
ｓｃＴＣＲを含む、項目２３に記載の結合タンパク質。
（項目２６）
ＣＡＲを含む、項目２３に記載の結合タンパク質。
（項目２７）
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）α鎖可変（Ｖα）ドメインおよびＴＣＲβ鎖可変（Ｖβ）ドメインを含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、
（ｉ）ペプチドがアミノ酸配列ＶＶＶＧＡＶＧＶＧＫ（配列番号２）を含むかもしくはそれからなる、ペプチド：ＨＬＡ複合体；
（ｉｉ）ペプチドがアミノ酸配列ＶＶＧＡＶＧＶＧＫ（配列番号３）を含むかもしくはそれからなる、ペプチド：ＨＬＡ複合体；
（ｉｉｉ）ペプチドがアミノ酸配列ＶＶＧＡＤＧＶＧＫ（配列番号４）を含むかもしくはそれからなる、ペプチド：ＨＬＡ複合体；または
（ｉｖ）ペプチドがアミノ酸配列ＶＶＶＧＡＤＧＶＧＫ（配列番号５）を含むかもしくはそれからなる、ペプチド：ＨＬＡ複合体
のいずれか１つまたは複数に結合することが可能であり、前記Ｖαドメインおよび／または前記Ｖβドメインが、各々独立して、ヒトであるか、ヒト化されているか、またはキメラであり、好ましくは各々ヒトであり、前記結合タンパク質が、ヒトＴ細胞によって異種性発現され得る、結合タンパク質。
（項目２８）
前記ＨＬＡが、ＨＬＡ－Ａ ^＊１１、必要に応じてＨＬＡ－Ａ ^＊１１：０１を含む、項目２７に記載の結合タンパク質。
（項目２９）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、配列番号２～５のいずれか１つまたは複数に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるペプチドをその細胞表面に発現または呈示するＨＬＡ－Ａ ^＊１１ ^＋腫瘍細胞を特異的に殺滅することが可能であり、必要に応じて、発現された前記結合タンパク質が、前記ヒトＴ細胞にとって異種性のポリヌクレオチドによってコードされる、項目２７または２８に記載の結合タンパク質。
（項目３０）
前記腫瘍細胞が、Ｐａｎｃ－１細胞、ＡｓＰｃ－１細胞、ＣＦＰＡＣ－１細胞、Ｃａｐａｎ－２細胞、ＴＨＰ－１細胞、ＧＡ－１０．４細胞、またはそれらの任意の組合せを含む、項目２９に記載の結合タンパク質。
（項目３１）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、
（ｉ）配列番号２に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；
（ｉｉ）配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；
（ｉｉｉ）配列番号４に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；
（ｉｖ）配列番号５に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；
（ｖ）配列番号２に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドおよび配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；ならびに／または
（ｖｉ）配列番号４に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドおよび配列番号５に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合、ＣＤ１３７の上昇した発現を有し、前記ＣＤ１３７発現が、前記結合タンパク質を発現しない参照ヒトＴ細胞が前記ペプチドの存在下にある場合の、前記参照ヒトＴ細胞によるＣＤ１３７発現と比較して、および／または配列番号２もしくは配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合の、前記結合タンパク質を発現する前記ヒトＴ細胞によるＣＤ１３７発現と比較して上昇し、（ｉ）～（ｖｉ）のいずれか１つのペプチドが、前記ヒトＴ細胞の存在下で腫瘍細胞によって必要に応じて発現される、項目２７～３０のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３２）
（ｉ）－６．５未満、必要に応じて、約－７．０、約－７．５もしくは約－８．０、または－８．０未満、必要に応じて約－８．０、約－８．１、約－８．２、約－８．３、約－８．４、約－８．５の、配列番号２または３に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる前記ペプチドについてのｌｏｇ _１０ＥＣ５０；および／あるいは
（ｉｉ）－７．０未満または－８．０未満、必要に応じて、約－７．５、約－７．６、約－７．７、約－７．８、約－８．０、約－８．１、約－８．２、約－８．３、約－８．４、約－８．５、約－８．６、約－８．７、約－８．８、または約－８．９の、配列番号４または５に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる前記ペプチドについてのｌｏｇ _１０ＥＣ５０
を有する、項目２７～３１のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３３）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、
（ｉ）配列番号２に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；および／または
（ｉｉ）配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；および／または
（ｉｉｉ）配列番号４に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチド；および／または
（ｖ）配列番号５に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し、ここで、前記ペプチドは、少なくとも約１０ ^－１１Ｍ、少なくとも約１０ ^－１０Ｍ、少なくとも約１０ ^－９Ｍ、および／または少なくとも約１０ ^－８Ｍの濃度で存在する、項目２７～３２のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３４）
前記結合タンパク質を発現する複数のヒトＴ細胞のうち、前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、またはそれよりも多くが、１０ ^－８Ｍのペプチド、１０ ^－７Ｍのペプチド、または１０ ^－６Ｍのペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生する、項目３３に記載の結合タンパク質。
（項目３５）
前記結合タンパク質を発現する複数のヒトＴ細胞のうち、
（ｉ）前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約１０％、１５％、２０％、もしくは２５％が、１０ｎｇ／ｍＬの配列番号４に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し；
（ｉｉ）前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約２５％が、１００ｎｇ／ｍＬの配列番号４に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し；
（ｉｉｉ）前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約１０％、１５％、２０％、もしくは２５％が、１０ｎｇ／ｍＬの配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生し；および／または
（ｉｉｉ）前記複数のヒトＴ細胞の少なくとも約５０％もしくは少なくとも約７５％が、１００ｎｇ／ｍＬの配列番号３に示されているアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを産生する、
項目３３または３４のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３６）
前記結合タンパク質がヒトＴ細胞によって発現される場合、前記ヒトＴ細胞が、配列番号１のアミノ酸７～１６または８～１６を含むかまたはそれからなるペプチドの存在下にある場合にＩＦＮ－γを実質的に産生しない、項目１～３５のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３７）
（ｉ）前記Ｖαドメインが、配列番号７６、６２、６４、６８、７０、７２、７４、７８、８０、８２、８４、５０２、５１２、５２２、５３２、５４２、５５２、５６２、５７２、５８２、５９２、６０２、もしくは６１２のいずれか１つに示されているＶαアミノ酸配列に従うＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、および／もしくはＣＤＲ３αアミノ酸配列を含み；ならびに／または
（ｉｉ）前記Ｖβドメインが、配列番号７５、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７７、７９、８１、８３、５０１、５１１、５２１、５３１、５４１、５５１、５６１、５７１、５８１、５９１、６０１、もしくは６１１のいずれか１つに示されているＶβアミノ酸配列に従うＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、および／もしくはＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む、
項目２７～３６のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３８）
（ｉ）それぞれ配列番号７６および７５；
（ｉｉ）それぞれ配列番号６２および６１；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号６４および６３；
（ｉｖ）それぞれ配列番号６６および６５；
（ｖ）それぞれ配列番号６８および６７；
（ｖｉ）それぞれ配列番号７０および６９；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号７２および７１；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号７４および７３；
（ｉｘ）それぞれ配列番号７８および７７；
（ｘ）それぞれ配列番号８０および７９；
（ｘｉ）それぞれ配列番号８２および８１；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号８４および８３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号５２２および５２１；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号５３２および５３１；
（ｘｖ）それぞれ配列番号５４２および５４１；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号５５２および５５１；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号５６２および５６１；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号５７２および５７１；
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号５８２および５８１；
（ｘｘ）それぞれ配列番号５９２および５９１；
（ｘｘｉ）それぞれ配列番号６０２および６０１；
（ｘｘｉｉ）それぞれ配列番号６１２および６１１；
（ｘｘｉｉｉ）それぞれ配列番号５０２および５０１；または
（ｘｘｉｖ）それぞれ配列番号５１２および５１１
に示されているＶαおよびＶβアミノ酸配列に従うＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３αならびにＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む、項目２７～３７のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目３９）
（ｉ）配列番号６６０、２７、１０、６１８、１２、６２４、１４、１５、６３０、１９、１７、６３６、２１、６４２、２３、６４８、２５、６５４、２９、６６６、３１、６７２、３３、６７８、３５、６８４、４９５、５０５、５１５、５２５、５３５、５４５、５５５、５６５、５７５、５８５、５９５、もしくは６０５のいずれか１つに示されているＣＤＲ３αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｉ）配列番号６５９、２６、９、６１７、１１、６２３、１３、６２９、１８、１６、６３５、２０、６４１、２２、６４７、２４、６５３、２６、６５９、２８、６６５、３０、６７１、３２、６７７、４９８、５０８、５１８、５２８、５３８、５４８、５５８、５６８、５７８、５８８、５９８、もしくは６０８のいずれか１つに示されているＣＤＲ３βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｉｉ）配列番号６５６、６１４、６２０、６２６、６３２、６３８、６４４、６５０、６５６、６６２、６６８、６７４、６８０、４９３、５０３、５１３、５２３、５３３、５４３、５５３、５６３、５７３、５８３、５９３、６０３のいずれか１つに示されているＣＤＲ１αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｉｖ）配列番号６５５、６１３、６１９、６２５、６３１、６３７、６４３、６４９、６６１、６６７、６７３、６７９、４９６、５０６、５１６、５２６、５３６、５４６、５５６、５６６、５７６、５８６、５９６、もしくは６０６のいずれか１つに示されているＣＤＲ１βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｖ）配列番号６５８、６１６、６２２、６２８、６３４、６４０、６４６、６５２、６６４、６７０、６７６、６８２、４９４、５０４、５１４、５２４、５３４、５４４、５５４、５６４、５７４、５８４、５９４、もしくは６０４のいずれか１つに示されているＣＤＲ２αアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント；および／あるいは
（ｖｉ）配列番号６５７、６１５、６２１、６２７、６３３、６３９、６４５、６５１、６５７、６６３、６６９、６７５、６８１、４９７、５０７、５１７、５２７、５３７、５４７、５５７、５６７、５８７、５９７、もしくは６０７のいずれか１つに示されているＣＤＲ２βアミノ酸配列、または１つ、２つもしくは３つのアミノ酸置換を含むそれらのバリアント
を含む、項目２７～３８のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４０）
（ｉ）それぞれ配列番号６５６、６５８、６６０または２７、６５５、６５７、および６５９または２６；
（ｉｉ）それぞれ配列番号６１４、６１６、６１８または１０、６１３、６１５、および６１７または９；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号６２０、６２２、６２４または１２、６１９、６２１、および６２９または１３；
（ｉｖ）それぞれ配列番号６２６、６２８、６３０または１４もしくは１５、６２５、６２７、および６２９または１３；
（ｖ）それぞれ配列番号６３２、６３４、６３６または１７もしくは１９、６３１、６３３、および６３５または１８もしくは１６；
（ｖｉ）それぞれ配列番号６３８、６４０、６４２または２１もしくは１７、６３７、６３９、および６４１または２０もしくは１６；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号６４４、６４６、６４８または２３、６４３、６４５、および６４７または２２；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号６５０、６５２、６５４または２５、６４９、６５１、および６５３または２４；
（ｉｘ）それぞれ配列番号６６２、６６４、６６６または２９、６６１、６６３、および６６５または２８；
（ｘ）それぞれ配列番号６６８、６７０、６７２または３１、６６７、６６９、および６７１または３０；
（ｘｉ）それぞれ配列番号６７４、６７６、６７８または３３、６７３、６７５、および６７７または３２；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号６８０、６８２、６８４または３５、６７９、６８１、および６８３または３４；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号４９３～４９８；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号５０３～５０８；
（ｘｖ）それぞれ配列番号５１３～５１８；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号５２３～５２８；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号５３３～５３８；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号５４３～５４８；
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号５５３～５５８；
（ｘｘ）それぞれ配列番号５６３～５６８；
（ｘｘｉ）それぞれ配列番号５７３～５７８；
（ｘｘｉｉ）それぞれ配列番号５８３～５８８；
（ｘｘｉｉｉ）それぞれ配列番号５９３～５９８；あるいは
（ｘｘｉｖ）それぞれ配列番号６０３～６０８
に示されているＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βアミノ酸配列を含む、項目２７～３９のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４１）
（ｉ）前記Ｖαドメインが、配列番号７６、６２、６４、６８、７０、７２、７４、７８、８０、８２、８４、５０２、５１２、５２２、５３２、５４２、５５２、５６２、５７２、５８２、５９２、６０２、もしくは６１２のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなり；および／または
（ｉｉ）前記Ｖβドメインが、配列番号７５、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７７、７９、８１、８３、５０１、５１１、５２１、５３１、５４１、５５１、５６１、５７１、５８１、５９１、６０１、もしくは６１１のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかもしくはそれからなる、
項目２７～４０のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４２）
前記Ｖαドメインおよび前記Ｖβドメインが、
（ｉ）それぞれ配列番号７６および７５；
（ｉｉ）それぞれ配列番号６２および６１；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号６４および６３；
（ｉｖ）それぞれ配列番号６６および６５；
（ｖ）それぞれ配列番号６８および６７；
（ｖｉ）それぞれ配列番号７０および６９；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号７２および７１；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号７４および７３；
（ｉｘ）それぞれ配列番号７８および７７；
（ｘ）それぞれ配列番号８０および７９；
（ｘｉ）それぞれ配列番号８２および８１；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号８４および８３；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号５２２および５２１；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号５３２および５３１；
（ｘｖ）それぞれ配列番号５４２および５４１；
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号５５２および５５１；
（ｘｖｉｉ）それぞれ配列番号５６２および５６１；
（ｘｖｉｉｉ）それぞれ配列番号５７２および５７１；
（ｘｉｘ）それぞれ配列番号５８２および５８１；
（ｘｘ）それぞれ配列番号５９２および５９１；
（ｘｘｉ）それぞれ配列番号６０２および６０１；
（ｘｘｉｉ）それぞれ配列番号６１２および６１１；
（ｘｘｉｉｉ）それぞれ配列番号５０２および５０１；
（ｘｘｉｖ）それぞれ配列番号５１２および５１１
に示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目２７～４１のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４３）
ＴＣＲα鎖定常ドメイン（Ｃα）および／またはＴＣＲβ鎖定常ドメイン（Ｃβ）をさらに含む、項目２７～４２のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４４）
前記Ｃαが、配列番号８５または８６に示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目４３に記載の結合タンパク質。
（項目４５）
前記Ｃβが、配列番号８７～９９のいずれか１つに示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなる、項目４３または４４に記載の結合タンパク質。
（項目４６）
ＴＣＲα鎖およびＴＣＲβ鎖を含み、前記ＴＣＲα鎖およびＴＣＲβ鎖が、
（ｉ）それぞれ配列番号１１５および１１４；
（ｉｉ）それぞれ配列番号１０１および１００；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号１０３および１０２；
（ｉｖ）それぞれ配列番号１０５および１０４；
（ｖ）それぞれ配列番号１０７および１０６；
（ｖｉ）それぞれ配列番号１０９および１０８；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号１１１および１１０；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号１１３および１１２；
（ｉｘ）それぞれ配列番号１１７および１１６；
（ｘ）それぞれ配列番号１１９および１１８；
（ｘｉ）それぞれ配列番号１２１および１２０；または
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号１２３および１２２
に示されているアミノ酸配列と少なくとも９０％同一性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、項目２７～４５のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４７）
ＴＣＲ、単鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）、またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む、項目２７～４６のいずれか一項に記載の結合タンパク質。
（項目４８）
ＴＣＲを含む、項目４７に記載の結合タンパク質。
（項目４９）
ｓｃＴＣＲを含む、項目４７に記載の結合タンパク質。
（項目５０）
ＣＡＲを含む、項目４７に記載の結合タンパク質。
（項目５１）
項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質をコードする単離されたポリヌクレオチド。
（項目５２）
配列番号３４９、３５２、３５５、３４１、３４４、３４７、３５７、３６０、３６３、３６４、３６８、３７１、３７３、３７６、３７９、３８１、３８４、３８７、３８９、３９２、３９６、３９７、４００、４０３、４０５、４０８、４１１、４１３、４１６、４１９、４２１、４２４、４２７、４２９、４３２、４３５、４３７、４４０、４４３、４４５、４４８、４５１、４５３、４５６、４５９、４６１、４６４、４６７、４６９、４７２、４７５、４７７、４８０、４８３、４８５、４８８、４９１、１３９、１６３、１３８、１６２、１９３、１２５、１４９、１２４、１４８、１８６、１２７、１５１、１２６、１５０、１８７、１２９、１５３、１２８、１５２、１８８、１３１、１５５、１３０、１５４、１８９、１３３、１５７、１３２、１５６、１９０、１３５、１５９、１３４、１５８、１９１、１３７、１６１、１３６、１６０、１９２、１４１、１６２、１４０、１６４、１９４、１４３、１６７、１４２、１６６、１９５、１４５、１６９、１４４、１６８、１９６、１４７、１７１、１４６、１７０、１９７、４９９、５０９、５１９、５２９、５３９、５４９、５５９、５６９、５７９、５８９、５９９、もしくは６０９のいずれか１つに示されているポリヌクレオチド配列、またはそれらの任意の組合せと少なくとも７５％同一性を有するポリヌクレオチドを含む、項目５１に記載のポリヌクレオチド。
（項目５３）
配列番号３５６、３４８、３６４、３７２、３８０、３８８、３９６、４０４、４１２、４２０、４２８、４３６、４４４、４５２、４６０、４６８、４７６、４８４、４９２、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、または６１０のいずれか１つに示されているアミノ酸配列をコードする単離されたポリヌクレオチド。
（項目５４）
配列番号３５５、３４７、３６３、３７１、３７９、３８７、３９５、４０３、４１１、４１９、４２７、４３５、４４３、４５１、４５９、４６７、４７５、４８３、４９１、１８６～１９７、４９９、５０９、５１９、５２９、５３９、５４９、５５９、５６９、５７９、５８９、５９９、または６０９のいずれか１つに示されているポリヌクレオチド配列と少なくとも７５％同一性を有するポリヌクレオチド配列を含む、項目５３に記載のポリヌクレオチド。
（項目５５）
（ｉ）ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、必要に応じて、コードされる前記ポリペプチドが、ＣＤ８共受容体α鎖であるかもしくはそれを含む、ポリヌクレオチド；
（ｉｉ）ＣＤ８共受容体β鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、必要に応じて、コードされる前記ポリペプチドが、ＣＤ８共受容体β鎖であるかもしくはそれを含む、ポリヌクレオチド；または
（ｉｉｉ）（ｉ）のポリヌクレオチドおよび（ｉｉ）のポリヌクレオチド
をさらに含む、項目５１～５４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目５６）
（ａ）ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチド；
（ｂ）ＣＤ８共受容体β鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチド；および
（ｃ）（ａ）のポリヌクレオチドと（ｂ）のポリヌクレオチドとの間に配置された、自己切断性ペプチドをコードするポリヌクレオチド
を含む、項目５５に記載のポリヌクレオチド。
（項目５７）
自己切断性ペプチドをコードする、
（１）結合タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドとＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドとの間；および／または
（２）結合タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドとＣＤ８共受容体β鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドとの間
に配置されたポリヌクレオチドをさらに含む、項目５５または５６に記載のポリヌクレオチド。
（項目５８）
インフレームで作動可能に連結した、
（ｉ）（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＢＰ）；
（ｉｉ）（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＢＰ）；
（ｉｉｉ）（ｐｎＢＰ）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８β）；
（ｉｖ）（ｐｎＢＰ）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８α）；
（ｖ）（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＢＰ）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８β）；または
（ｖｉ）（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＢＰ）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８α）
を含み、
ｐｎＣＤ８αが、ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＣＤ８βが、ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＢＰが、結合タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＳＣＰ _１およびｐｎＳＣＰ _２が各々独立して、自己切断性ペプチドをコードするポリヌクレオチドであり、前記ポリヌクレオチドおよび／またはコードされる前記自己切断性ペプチドが、必要に応じて、同じまたは異なる、項目５５～５７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目５９）
コードされる前記結合タンパク質が、ＴＣＲα鎖およびＴＣＲβ鎖を含み、前記ポリヌクレオチドが、ＴＣＲα鎖をコードするポリヌクレオチドとＴＣＲβ鎖をコードするポリヌクレオチドとの間に配置された、自己切断性ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、項目５１～５８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目６０）
インフレームで作動可能に連結した
（ｉ）（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＴＣＲα）；
（ｉｉ）（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＴＣＲα）；
（ｉｉｉ）（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＴＣＲβ）；
（ｉｖ）（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＴＣＲβ）；
（ｖ）（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＣＤ８β）；
（ｖｉ）（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＣＤ８α）；
（ｖｉｉ）（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８α）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＣＤ８β）；
（ｖｉｉｉ）（ｐｎＴＣＲα）－（ｐｎＳＣＰ _１）－（ｐｎＴＣＲβ）－（ｐｎＳＣＰ _２）－（ｐｎＣＤ８β）－（ｐｎＳＣＰ _３）－（ｐｎＣＤ８α）
を含み、
ｐｎＣＤ８αが、ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＣＤ８βが、ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＴＣＲαが、ＴＣＲα鎖をコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＴＣＲβが、ＴＣＲβ鎖をコードする前記ポリヌクレオチドであり、
ｐｎＳＣＰ _１、ｐｎＳＣＰ _２、およびｐｎＳＣＰ _３が各々独立して、自己切断性ペプチドをコードするポリヌクレオチドであり、前記ポリヌクレオチドおよび／またはコードされる前記自己切断性ペプチドが、必要に応じて、同じまたは異なる、項目５９に記載のポリヌクレオチド。
（項目６１）
宿主細胞における発現のためにコドン最適化されているポリヌクレオチド配列であるかまたはそれを含み、必要に応じて、前記宿主細胞がヒト免疫系細胞であり、さらに必要に応じて、Ｔ細胞である、項目５１～６０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目６２）
発現制御配列に作動可能に連結した項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
（項目６３）
前記ポリヌクレオチドを宿主細胞に送達することが可能である、項目６２に記載の発現ベクター。
（項目６４）
前記宿主細胞が、造血前駆細胞またはヒト免疫系細胞である、項目６３に記載の発現ベクター。
（項目６５）
前記ヒト免疫系細胞が、ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞、ＣＤ８ ^＋Ｔ細胞、ＣＤ４ ^－ＣＤ８ ^－二重陰性Ｔ細胞、γδＴ細胞、ナチュラルキラー細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、またはそれらの任意の組合せである、項目６４に記載の発現ベクター。
（項目６６）
前記Ｔ細胞が、ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、またはそれらの任意の組合せである、項目６５に記載の発現ベクター。
（項目６７）
ウイルスベクターである、項目６２～６６のいずれか一項に記載の発現ベクター。
（項目６８）
前記ウイルスベクターが、レンチウイルスベクターまたはγ－レトロウイルスベクターである、項目６７に記載の発現ベクター。
（項目６９）
項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドおよび／もしくは項目６２～６８のいずれか一項に記載の発現ベクターを含むように、ならびに／または項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質を発現するように修飾された宿主細胞。
（項目７０）
造血前駆細胞および／またはヒト免疫細胞を含む、項目６９に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７１）
前記免疫細胞が、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫ－Ｔ細胞、樹状細胞、マクロファージ、単球、またはそれらの任意の組合せを含む、項目７０に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７２）
前記免疫細胞が、ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞、ＣＤ８ ^＋Ｔ細胞、ＣＤ４ ^－ＣＤ８ ^－二重陰性Ｔ細胞、γδＴ細胞、またはそれらの任意の組合せを含み、
必要に応じて、前記免疫細胞が、ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞およびＣＤ８ ^＋Ｔ細胞を含み、さらに必要に応じて、前記ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞、前記ＣＤ８ ^＋Ｔ細胞、またはその両方が、（ｉ）ＣＤ８共受容体α鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、必要に応じて、コードされる前記ポリペプチドが、ＣＤ８共受容体α鎖であるかもしくはそれを含む、ポリヌクレオチド；（ｉｉ）ＣＤ８共受容体β鎖の細胞外部分を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、必要に応じて、コードされる前記ポリペプチドが、ＣＤ８共受容体β鎖であるかもしくはそれを含む、ポリヌクレオチド；または（ｉｉｉ）（ｉ）のポリヌクレオチドおよび（ｉｉ）のポリヌクレオチドを含む、項目７１に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７３）
ＰＤ－１遺伝子；ＬＡＧ３遺伝子；ＴＩＭ３遺伝子；ＣＴＬＡ４遺伝子；ＨＬＡ成分遺伝子；ＴＩＧＩＴ遺伝子；ＴＣＲ成分遺伝子、ＦａｓＬ遺伝子、またはそれらの任意の組合せの染色体遺伝子ノックアウトを含む、項目６９～７２のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７４）
前記染色体遺伝子ノックアウトが、α１マクログロブリン遺伝子、α２マクログロブリン遺伝子、α３マクログロブリン遺伝子、β１ミクログロブリン遺伝子、またはβ２ミクログロブリン遺伝子から選択されるＨＬＡ成分遺伝子のノックアウトを含む、項目７３に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７５）
前記染色体遺伝子ノックアウトが、ＴＣＲα可変領域遺伝子、ＴＣＲβ可変領域遺伝子、ＴＣＲ定常領域遺伝子、またはそれらの組合せから選択されるＴＣＲ成分遺伝子のノックアウトを含む、項目７３または７４に記載の修飾された宿主細胞。
（項目７６）
項目６９～７５のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞、および薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む組成物。
（項目７７）
少なくとも約３０％の修飾ＣＤ４ ^＋Ｔ細胞と、（ｉｉ）少なくとも約３０％の修飾ＣＤ８ ^＋Ｔ細胞を含む組成物とを、約１：１比の組合せで含む、項目７６に記載の組成物用量。
（項目７８）
ナイーブＴ細胞を実質的に含有しない、項目７６または７７に記載の組成物。
（項目７９）
配列番号１９８～２０１のいずれか１つに示されているアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる免疫原性ポリペプチド。
（項目８０）
（ｉ）項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質；
（ｉｉ）項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド；
（ｉｉｉ）項目６２～６８のいずれか一項に記載の発現ベクター；
（ｉｖ）項目６９～７５のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞；および／または
（ｖ）項目７９に記載の免疫原性ポリペプチド
ならびに薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を含む組成物。
（項目８１）
対象におけるＫＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＫＲＡＳＧ１２ＶまたはＮＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＮＲＡＳＧ１２Ｖ変異またはＨＲＡＳＧ１２Ｖ変異もしくはＨＲＡＳＧ１２Ｄ変異に関連する疾患または障害を処置するための方法であって、有効量の
（ｉ）項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質；
（ｉｉ）項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド；
（ｉｉｉ）項目６２～６８のいずれか一項に記載の発現ベクター；
（ｉｖ）項目６９～７５のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞であって、必要に応じて、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、もしくはその両方を含み、必要に応じて、前記対象に対して自己性、同種異系、もしくは同系である、修飾された宿主細胞；
（ｖ）項目７６～７８のいずれか一項に記載の組成物；および／または
（ｖｉ）項目７９に記載の免疫原性ポリペプチド
を前記対象に投与することを含む、方法。
（項目８２）
前記疾患または障害ががんを含み、前記がんが、必要に応じて、固形がんまたは血液学的悪性腫瘍である、項目８１に記載の方法。
（項目８３）
前記疾患または障害が、膵がんもしくは癌、必要に応じて、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）；結腸直腸がんもしくは癌；肺がん、必要に応じて、非小細胞肺癌；胆道がん；子宮内膜がんもしくは癌；子宮頸がん；卵巣がん；膀胱がん；肝臓がん；骨髄性白血病、必要に応じて、急性骨髄性白血病などの骨髄性白血病；骨髄異形成症候群；非ホジキンリンパ腫などのリンパ腫；慢性骨髄単球性白血病；急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）；尿路のがん；小腸のがん；乳がんもしくは癌；黒色腫（必要に応じて、皮膚黒色腫、肛門黒色腫、もしくは粘膜黒色腫）；神経膠腫；低分化甲状腺癌；神経芽細胞腫；組織球性および樹状細胞新生物；神経線維腫症１型；横紋筋肉腫；軟部組織肉腫；膀胱癌；肉腫；膠芽腫；肺扁平上皮癌；退形成性星細胞腫；慢性骨髄性白血病；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；ダブルヒットリンパ腫；頭頸部癌；頭頸部扁平上皮癌；肝細胞癌；悪性末梢神経鞘腫瘍；マントル細胞リンパ腫；骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、分類不能；末梢性Ｔ細胞リンパ腫；前立腺癌；芽球増加を伴う不応性貧血－２；腎細胞癌；ラブドイド腫瘍；シュワン細胞腫；二次性ＡＭＬ；小細胞肺癌；療法関連ＡＭＬ；胸腺癌；甲状腺濾胞癌；悪性甲状腺新生物；甲状腺癌；甲状腺腺癌；尿路上皮癌；または甲状腺乳頭癌から選択される、項目８１または８２に記載の方法。
（項目８４）
前記組成物が、前記対象に、非経口的に、または静脈内に投与される、項目８１～８３のいずれか一項に記載の方法。
（項目８５）
（ｉ）～（ｖｉ）のいずれか１つまたは複数の複数の用量を前記対象に投与することを含む、項目８１～８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８６）
前記複数の用量が、約２～約４週間の投与間隔で投与される、項目８５に記載の方法。
（項目８７）
前記組成物が、前記修飾された宿主細胞を含み、前記方法が、前記修飾された宿主細胞を、約１０ ^４細胞／ｋｇ～約１０ ^１１細胞／ｋｇの用量で前記対象に投与することを含む、項目８１～８６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８８）
（ｉ）前記対象がＨＬＡ－Ａ ^＊０２：０１を発現する場合には、項目１～２６のいずれか一項に記載の結合タンパク質をコードする異種性ポリヌクレオチドを含む修飾ＣＤ８＋および／もしくは修飾ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む組成物；ならびに／または
（ｉｉ）前記対象がＨＬＡ－Ａ ^＊１１：０１を発現する場合には、項目２７～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質をコードする異種性ポリヌクレオチドを含む修飾ＣＤ８＋および／もしくは修飾ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む組成物
を投与することを含み、（ｉ）の組成物および（ｉｉ）の組成物の両方が投与される場合、（ｉ）の組成物および（ｉｉ）の組成物は、同じ組成物中に含まれる、または別々の組成物として投与される、項目８１～８７のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
サイトカインを前記対象に投与することをさらに含む、項目８１～８８のいずれか一項に記載の方法。
（項目９０）
前記サイトカインが、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、またはＩＬ－２１を含む、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記対象が、免疫チェックポイント阻害剤および／または刺激性免疫チェックポイント作用物質のアゴニストを受けたことがあるかまたは受けている、項目８１～９０のいずれか一項に記載の方法。
（項目９２）
対象におけるＫＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＫＲＡＳＧ１２ＶまたはＮＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＮＲＡＳＧ１２Ｖ変異またはＨＲＡＳＧ１２Ｖ変異もしくはＨＲＡＳＧ１２Ｄ変異に関連する疾患または障害であって、必要に応じて、前記疾患または障害が、がんを含み、さらに必要に応じて、前記がんが、固形がんまたは血液学的悪性腫瘍であり、必要に応じて、前記疾患または障害が、膵がんもしくは癌、必要に応じて、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）；結腸直腸がんもしくは癌；肺がん、必要に応じて、非小細胞肺癌；胆道がん；子宮内膜がんもしくは癌；子宮頸がん；卵巣がん；膀胱がん；肝臓がん；骨髄性白血病、必要に応じて、急性骨髄性白血病などの骨髄性白血病；骨髄異形成症候群；非ホジキンリンパ腫などのリンパ腫；慢性骨髄単球性白血病；急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）；尿路のがん；小腸のがん；乳がんもしくは癌；黒色腫（必要に応じて、皮膚黒色腫、肛門黒色腫、もしくは粘膜黒色腫）；神経膠腫；低分化甲状腺癌；神経芽細胞腫；組織球性および樹状細胞新生物；神経線維腫症１型；横紋筋肉腫；軟部組織肉腫；膀胱癌；肉腫；膠芽腫；肺扁平上皮癌；退形成性星細胞腫；慢性骨髄性白血病；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；ダブルヒットリンパ腫；頭頸部癌；頭頸部扁平上皮癌；肝細胞癌；悪性末梢神経鞘腫瘍；マントル細胞リンパ腫；骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、分類不能；末梢性Ｔ細胞リンパ腫；前立腺癌；芽球増加を伴う不応性貧血－２；腎細胞癌；ラブドイド腫瘍；シュワン細胞腫；二次性ＡＭＬ；小細胞肺癌；療法関連ＡＭＬ；胸腺癌；甲状腺濾胞癌；悪性甲状腺新生物；甲状腺癌；甲状腺腺癌；尿路上皮癌；または甲状腺乳頭癌から選択される、疾患または障害を処置するための方法における使用のための、項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質、項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、項目６２～６８のいずれか一項に記載の発現ベクター、項目６９～７５のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞であって、必要に応じて、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、もしくはその両方を含む、修飾された宿主細胞、項目７６～７８のいずれか一項に記載の組成物；および／または項目７９に記載の免疫原性ポリペプチド。
（項目９３）
対象におけるＫＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＫＲＡＳＧ１２ＶまたはＮＲＡＳＧ１２Ｄ変異もしくはＮＲＡＳＧ１２Ｖ変異またはＨＲＡＳＧ１２Ｖ変異もしくはＨＲＡＳＧ１２Ｄ変異に関連する疾患または障害であって、必要に応じて、前記疾患または障害が、がんを含み、さらに必要に応じて、前記がんが、固形がんまたは血液学的悪性腫瘍であり、必要に応じて、前記疾患または障害が、膵がんもしくは癌、必要に応じて、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）；結腸直腸がんもしくは癌；肺がん、必要に応じて、非小細胞肺癌；胆道がん；子宮内膜がんもしくは癌；子宮頸がん；卵巣がん；膀胱がん；肝臓がん；骨髄性白血病、必要に応じて、急性骨髄性白血病などの骨髄性白血病；骨髄異形成症候群；非ホジキンリンパ腫などのリンパ腫；慢性骨髄単球性白血病；急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）；尿路のがん；小腸のがん；乳がんもしくは癌；黒色腫（必要に応じて、皮膚黒色腫、肛門黒色腫、もしくは粘膜黒色腫）；神経膠腫；低分化甲状腺癌；神経芽細胞腫；組織球性および樹状細胞新生物；神経線維腫症１型；横紋筋肉腫；軟部組織肉腫；膀胱癌；肉腫；膠芽腫；肺扁平上皮癌；退形成性星細胞腫；慢性骨髄性白血病；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；ダブルヒットリンパ腫；頭頸部癌；頭頸部扁平上皮癌；肝細胞癌；悪性末梢神経鞘腫瘍；マントル細胞リンパ腫；骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、分類不能；末梢性Ｔ細胞リンパ腫；前立腺癌；芽球増加を伴う不応性貧血－２；腎細胞癌；ラブドイド腫瘍；シュワン細胞腫；二次性ＡＭＬ；小細胞肺癌；療法関連ＡＭＬ；胸腺癌；甲状腺濾胞癌；悪性甲状腺新生物；甲状腺癌；甲状腺腺癌；尿路上皮癌；または甲状腺乳頭癌から選択される、疾患または障害を処置するための医薬品の製造における使用のための、項目１～５０のいずれか一項に記載の結合タンパク質、項目５１～６１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、項目６２～６８のいずれか一項に記載の発現ベクター、項目６９～７５のいずれか一項に記載の修飾された宿主細胞であって、必要に応じて、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、もしくはその両方を含む、修飾された宿主細胞、項目７６～７８のいずれか一項に記載の組成物；および／または項目７９に記載の免疫原性ポリペプチド。 These and other changes can be made to the embodiments in light of the above detailed description. In general, in the following claims, the terms used should not be construed as limiting the claims to the specific embodiments disclosed in the specification and claims. , is to be construed to include all possible embodiments along with the full scope of equivalents that are within the rights of such claims. Accordingly, the claims are not limited by the disclosure.
In certain embodiments, for example, the following are provided:
(Item 1)
A binding protein comprising a T-cell receptor (TCR) α chain variable (Vα) domain and a TCR β chain variable (Vβ) domain, said binding protein capable of binding a peptide:HLA complex, said the peptide comprises or consists of the amino acid sequence KLVVVGAVGV (SEQ ID NO: 198) and said HLA is HLA-A ^* 02, HLA-A as needed ^* Binding proteins, including 02:01.
(Item 2)
A binding protein according to item 1, which can be heterologously expressed by human T-cells.
(Item 3)
Binding protein according to items 1 or 2, wherein said Vα domain and/or said Vβ domain are each independently human, humanized or chimeric, preferably each human.
(Item 4)
HLA-A wherein said human T cells express a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198 when said binding protein is expressed by human T cells ^* 02 ⁺ A binding protein according to any one of items 1 to 3, which is capable of specifically killing tumor cells.
(Item 5)
HLA-A wherein said human T cells express a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198 when said binding protein is expressed by human T cells ^* 02 ⁺ having elevated expression of CD137 when in the presence of tumor cells, optionally in the further presence of exogenous IFN-γ, said CD137 expression comprising
(i) CD137 expression by a reference human T cell that does not express said binding protein, said reference human T cell being in the presence of said tumor cell; and/or
(ii) CD137 expression by said human T cells expressing said binding protein in the absence of said tumor cells and/or in the absence of antigen presenting cells expressing peptide:HLA complexes, , said peptide comprises or consists of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198, and said HLA optionally comprises HLA-A ^* 02:01 CD137 expression
5. The binding protein of any one of items 1-4, which is elevated compared to the.
(Item 6)
when said binding protein is expressed by a human T cell, said human T cell produces IFN-γ when in the presence of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198; wherein said peptide is at least about 10 ^-10 M, at least about 10 ^-9 M, and/or at least about 10 ^-8 6. The binding protein of any one of items 1-5, present at a concentration of M.
(Item 7)
Of the plurality of human T cells expressing said binding protein, at least about 10%, at least about 15%, at least about 20%, or at least about 25% of said plurality of human T cells are 10 ^-9 7. A binding protein according to any one of items 1 to 6, which produces IFN-γ when in the presence of the M peptide.
(Item 8)
Of the plurality of human T cells expressing said binding protein, at least about 25%, at least about 30%, or at least about 35% of said plurality of human T cells are 10 ^-8 8. A binding protein according to items 6 or 7, which produces IFN-γ when in the presence of the M peptide.
(Item 9)
IFN-γ when said human T cell or said plurality of human T cells are in the presence of said peptide comprising or consisting of 0.1 ng/mL or more of the amino acid sequence KLVVVGAVGV (SEQ ID NO: 198) and optionally wherein said human T cell or said plurality of human T cells are in the presence of 10,000 ng/mL of a peptide comprising or consisting of amino acids 5-14 of SEQ ID NO:1 also produces more IFN-γ when in the presence of said peptide comprising or consisting of the amino acid sequence KLVVVGAVGV (SEQ ID NO: 198) at 1 ng/mL. binding protein.
(Item 10)
less than -8.0, optionally about -8.5 or less, further optionally about -8.5, about -8.6, about -8.7, about -8.8, about - log for said peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198 of 8.9, about -9, about -9.1, or about -9.2 ₁₀ 10. Binding protein according to any one of items 1-9, having an EC50.
(Item 11)
(i) said binding protein is encoded by a polynucleotide heterologous to said human T cell;
(ii) said human T cells are CD8 ⁺ T cells, CD4 ⁺ comprising T cells, or both;
(iii) said tumor cell expressing a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 198 is HLA-A ^* 02:01 ⁺ and/or
(iv) said tumor cells comprise CFPAC-1 cells
A binding protein according to any one of items 4-10.
(Item 12)
12. A binding protein according to any one of items 1 to 11, capable of binding said peptide:HLA complex independently of CD8 or in the absence of CD8.
(Item 13)
(i) the Va domain is any one of SEQ ID NOs: 351, 343, 359, 367, 375, 383, 391, 399, 407, 415, 423, 431, 439, 447, 455, 463, 471, or 479 comprising a CDR1α, CDR2α, and/or CDR3α amino acid sequence according to the Vα amino acid sequence shown in 1; and/or
(ii) the Vβ domain is any of SEQ ID NOs: 354, 346, 362, 370, 378, 386, 394, 402, 410, 418, 426, 434, 442, 450, 458, 466, 474, 482, or 490 or a CDR1β, CDR2β, and/or CDR3β amino acid sequence according to the Vβ amino acid sequence shown in one
13. A binding protein according to any one of items 1-12.
(Item 14)
(i) SEQ ID NOS: 351 and 354, respectively;
(ii) SEQ ID NOS: 343 and 346, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 359 and 362, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 367 and 370, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 375 and 378, respectively;
(vi) SEQ ID NOS: 383 and 386, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 391 and 394, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 399 and 402, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 407 and 410, respectively;
(x) SEQ ID NOS: 415 and 418, respectively;
(xi) SEQ ID NOS: 423 and 426, respectively;
(xii) SEQ ID NOS: 431 and 434, respectively;
(xiii) SEQ ID NOS: 439 and 442, respectively;
(xiv) SEQ ID NOS: 447 and 450, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 455 and 458, respectively;
(xvi) SEQ ID NOS: 463 and 466, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 471 and 474, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 479 and 482, respectively; or
(xix) SEQ ID NOs: 487 and 490, respectively
14. The binding protein of any one of items 1-13, comprising the CDR1α, CDR2α, CDR3α and CDR1β, CDR2β and CDR3β amino acid sequences according to the Vα and Vβ amino acid sequences shown in .
(Item 15)
(i) set forth in any one of SEQ ID NOS: 228, 222, 234, 240, 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, or 340 or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(ii) set forth in any one of SEQ ID NOs: 225, 219, 231, 237, 243, 249, 255, 261, 267, 273, 279, 285, 291, 297, 303, 309, 315, 321, or 327 or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(iii) set forth in any one of SEQ ID NOs: 226, 220, 232, 238, 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280, 286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, or 328 or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(iv) set forth in any one of SEQ ID NOS: 223, 217, 229, 235, 241, 247, 253, 259, 265, 271, 277, 283, 289, 295, 301, 307, 313, 319, or 325 or a variant thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(v) any one of SEQ ID NOs: 227, 221, 233, 239, 245, 251, 257, 263, 269, 275, 281, 287, 293, 299, 305, 311, 317, 323, or 329 or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(vi) set forth in any one of SEQ ID NOs: 224, 218, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, or 326 or a variant thereof containing one, two or three amino acid substitutions
15. The binding protein of any one of items 1-14, comprising a
(Item 16)
(i) SEQ ID NOs: 226, 227, 228, 223, 224, and 225, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 220, 221, 222, 217, 218, and 219, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 232, 233, 234, 229, 230, and 231, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 238, 239, 240, 235, 236, and 237, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 244, 245, 246, 241, 242, and 243, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 250, 251, 252, 247, 248, and 249, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 256, 257, 258, 253, 254, and 255, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 262, 263, 264, 259, 260, and 261, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 268, 269, 270, 265, 266, and 267, respectively;
(x) SEQ ID NOs: 274, 275, 276, 271, 272, and 273, respectively;
(xi) SEQ ID NOs: 280, 281, 282, 277, 278, and 279, respectively;
(xii) SEQ ID NOs: 286, 287, 288, 283, 284, and 285, respectively;
(xiii) SEQ ID NOs: 292, 293, 294, 289, 290, and 291, respectively;
(xiv) SEQ ID NOs: 298, 299, 300, 295, 296, and 297, respectively;
(xv) SEQ ID NOs: 304, 305, 306, 301, 302, and 303, respectively;
(xvi) SEQ ID NOs: 310, 311, 312, 307, 308, and 309, respectively;
(xvii) SEQ ID NOs: 316, 317, 318, 313, 314, and 315, respectively;
(xviii) SEQ ID NOs: 322, 323, 324, 319, 320, and 321, respectively; or
(xix) any one of items 1-15, comprising the CDR1α, CDR2α, CDR3α, CDR1β, CDR2β, and CDR3β amino acid sequences set forth in SEQ ID NOs: 328, 329, 330, 325, 326, and 327, respectively; Binding protein as described.
(Item 17)
(i) the Va domain is any one of SEQ ID NOs: 351, 343, 359, 367, 375, 383, 391, 399, 407, 415, 423, 431, 439, 447, 455, 463, 471, or 479 comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence shown in the first; and/or
(ii) said Vβ domain is any of SEQ ID NOs: 354, 346, 362, 370, 378, 386, 394, 402, 410, 418, 426, 434, 442, 450, 458, 466, 474, 482, or 490 or comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence set forth in one
17. Binding protein according to any one of items 1-16.
(Item 18)
wherein the Vα domain and the Vβ domain are
(i) SEQ ID NOS: 351 and 354, respectively;
(ii) SEQ ID NOS: 343 and 346, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 359 and 362, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 367 and 370, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 375 and 378, respectively;
(vi) SEQ ID NOS: 383 and 386, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 391 and 394, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 399 and 402, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 407 and 410, respectively;
(x) SEQ ID NOS: 415 and 418, respectively;
(xi) SEQ ID NOS: 423 and 426, respectively;
(xii) SEQ ID NOS: 431 and 434, respectively;
(xiii) SEQ ID NOS: 439 and 442, respectively;
(xiv) SEQ ID NOs: 447 and 450, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 455 and 458, respectively;
(xvi) SEQ ID NOS: 463 and 466, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 471 and 474, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 479 and 482, respectively; or
(xix) SEQ ID NOs: 487 and 490, respectively
18. A binding protein according to any one of items 1 to 17, comprising or consisting of the amino acid sequence shown in .
(Item 19)
19. Binding protein according to any one of items 1 to 18, further comprising a TCR α chain constant domain (Cα) and/or a TCR β chain constant domain (Cβ).
(Item 20)
20. The binding protein of item 19, wherein said Cα comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:85 or 86.
(Item 21)
21. The binding protein of items 19 or 20, wherein said Cβ comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOs:87-99.
(Item 22)
comprising a TCRα chain and a TCRβ chain, wherein said TCRα chain and TCRβ chain are
(i) SEQ ID NOs: 350 and 353, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 342 and 345, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 358 and 361, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 366 and 369, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 374 and 377, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 382 and 385, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 390 and 393, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 398 and 401, respectively;
(ix) SEQ ID NOS: 406 and 409, respectively;
(x) SEQ ID NOS: 414 and 417, respectively;
(xi) SEQ ID NOS: 422 and 425, respectively;
(xii) SEQ ID NOS: 430 and 433, respectively;
(xiii) SEQ ID NOS: 438 and 441, respectively;
(xiv) SEQ ID NOS: 446 and 449, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 454 and 457, respectively;
(xvi) SEQ ID NOS: 462 and 465, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 470 and 473, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 478 and 481, respectively; or
(xix) SEQ ID NOs: 486 and 489, respectively
22. A binding protein according to any one of items 1 to 21, comprising or consisting of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence shown in .
(Item 23)
23. The binding protein of any one of items 1-22, comprising a TCR, a single chain TCR (scTCR) or a chimeric antigen receptor (CAR).
(Item 24)
24. The binding protein of item 23, comprising a TCR.
(Item 25)
24. A binding protein according to item 23, comprising an scTCR.
(Item 26)
24. The binding protein of item 23, comprising a CAR.
(Item 27)
A binding protein comprising a T-cell receptor (TCR) α chain variable (Vα) domain and a TCR β chain variable (Vβ) domain, said binding protein comprising
(i) a peptide:HLA complex, wherein the peptide comprises or consists of the amino acid sequence VVVGAVGVGK (SEQ ID NO:2);
(ii) a peptide:HLA complex, wherein the peptide comprises or consists of the amino acid sequence VVGAVGVGK (SEQ ID NO:3);
(iii) a peptide:HLA complex, wherein the peptide comprises or consists of the amino acid sequence VVGADGVGK (SEQ ID NO: 4); or
(iv) a peptide:HLA complex, wherein the peptide comprises or consists of the amino acid sequence VVVGADGVGK (SEQ ID NO:5)
wherein said Vα domain and/or said Vβ domain are each independently human, humanized or chimeric, preferably Binding proteins, each human, wherein said binding proteins can be heterologously expressed by human T-cells.
(Item 28)
The HLA is HLA-A ^* 11, HLA-A as needed ^* 28. The binding protein of item 27, comprising 11:01.
(Item 29)
When said binding protein is expressed by human T cells, said human T cells express a peptide comprising or consisting of an amino acid sequence set forth in any one or more of SEQ ID NOs: 2-5 on its cell surface. HLA-A expressed or presented ^* 11 ⁺ 29. Item 27 or 28, wherein said binding protein is capable of specifically killing tumor cells and optionally said expressed binding protein is encoded by a polynucleotide heterologous to said human T cell. binding protein.
(Item 30)
30. The method of item 29, wherein said tumor cells comprise Panc-1 cells, AsPc-1 cells, CFPAC-1 cells, Capan-2 cells, THP-1 cells, GA-10.4 cells, or any combination thereof. binding protein.
(Item 31)
When said binding protein is expressed by human T cells, said human T cells are
(i) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:2;
(ii) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:3;
(iii) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:4;
(iv) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:5;
(v) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:2 and a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:3; and/or
(vi) elevated expression of CD137 when in the presence of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:4 and a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:5; wherein said CD137 expression is compared to CD137 expression by said reference human T cells when said reference human T cells not expressing said binding protein are in the presence of said peptide; increased relative to CD137 expression by said human T cells expressing said binding protein when in the presence of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 3, (i)-( 31. Binding protein according to any one of items 27-30, wherein the peptide of any one of vi) is optionally expressed by tumor cells in the presence of said human T cells.
(Item 32)
(i) less than -6.5, optionally about -7.0, about -7.5 or about -8.0, or less than -8.0, optionally about -8.0, about -8.1, about -8.2, about -8.3, about -8.4, about -8.5, said peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2 or 3 log about ₁₀ EC50; and/or
(ii) less than -7.0 or less than -8.0, optionally about -7.5, about -7.6, about -7.7, about -7.8, about -8.0; about -8.1, about -8.2, about -8.3, about -8.4, about -8.5, about -8.6, about -8.7, about -8.8, or about -8.9, log for said peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 4 or 5 ₁₀ EC50
32. The binding protein of any one of items 27-31, having a
(Item 33)
When said binding protein is expressed by human T cells, said human T cells are
(i) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:2; and/or
(ii) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:3; and/or
(iii) a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 4; and/or
(v) producing IFN-γ when in the presence of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:5, wherein said peptide comprises at least about 10 ^-11 M, at least about 10 ^-10 M, at least about 10 ^-9 M, and/or at least about 10 ^-8 33. The binding protein of any one of items 27-32, present at a concentration of M.
(Item 34)
of the plurality of human T cells expressing the binding protein, at least about 50%, at least about 55%, at least about 60% or more of the plurality of human T cells are ^-8 peptide of M, 10 ^-7 M peptides, or 10 ^-6 34. The binding protein of item 33, which produces IFN-γ when in the presence of the M peptide.
(Item 35)
Among a plurality of human T cells expressing the binding protein,
(i) at least about 10%, 15%, 20%, or 25% of said plurality of human T cells in the presence of 10 ng/mL of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:4; producing IFN-γ when in;
(ii) at least about 25% of said plurality of human T cells produce IFN-γ when in the presence of 100 ng/mL of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:4; ;
(iii) at least about 10%, 15%, 20%, or 25% of said plurality of human T cells in the presence of 10 ng/mL of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:3 produce IFN-γ when in; and/or
(iii) IFN when at least about 50% or at least about 75% of said plurality of human T cells are in the presence of 100 ng/mL of a peptide comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:3 - producing γ,
35. The binding protein of any one of items 33 or 34.
(Item 36)
When said binding protein is expressed by human T cells, said human T cells substantially produce IFN-γ when in the presence of a peptide comprising or consisting of amino acids 7-16 or 8-16 of SEQ ID NO:1. 36. The binding protein according to any one of items 1 to 35, which is not produced spontaneously.
(Item 37)
(i) the Va domain is SEQ ID NOs: 76, 62, 64, 68, 70, 72, 74, 78, 80, 82, 84, 502, 512, 522, 532, 542, 552, 562, 572, 582; comprising a CDR1α, CDR2α, and/or CDR3α amino acid sequence according to the Vα amino acid sequence set forth in any one of 592, 602, or 612; and/or
(ii) the Vβ domain is SEQ ID NOs: 75, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 77, 79, 81, 83, 501, 511, 521, 531, 541, 551, 561, 571, a CDR1β, CDR2β, and/or CDR3β amino acid sequence according to the Vβ amino acid sequence set forth in any one of 581, 591, 601, or 611;
A binding protein according to any one of items 27-36.
(Item 38)
(i) SEQ ID NOs: 76 and 75, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 62 and 61, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 64 and 63, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 66 and 65, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 68 and 67, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 70 and 69, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 72 and 71, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 74 and 73, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 78 and 77, respectively;
(x) SEQ ID NOs: 80 and 79, respectively;
(xi) SEQ ID NOs: 82 and 81, respectively;
(xii) SEQ ID NOs: 84 and 83, respectively;
(xiii) SEQ ID NOs: 522 and 521, respectively;
(xiv) SEQ ID NOS: 532 and 531, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 542 and 541, respectively;
(xvi) SEQ ID NOs: 552 and 551, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 562 and 561, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 572 and 571, respectively;
(xix) SEQ ID NOs: 582 and 581, respectively;
(xx) SEQ ID NOS: 592 and 591, respectively;
(xxi) SEQ ID NOs: 602 and 601, respectively;
(xxii) SEQ ID NOs: 612 and 611, respectively;
(xxiii) SEQ ID NOs: 502 and 501, respectively; or
(xxiv) SEQ ID NOS: 512 and 511, respectively
38. The binding protein of any one of items 27-37, comprising the CDR1α, CDR2α, CDR3α and CDR1β, CDR2β and CDR3β amino acid sequences according to the Vα and Vβ amino acid sequences shown in .
(Item 39)
(i) SEQ. , 678, 35, 684, 495, 505, 515, 525, 535, 545, 555, 565, 575, 585, 595, or 605, or one, two variants thereof containing one or three amino acid substitutions; and/or
(ii) SEQ. , 32, 677, 498, 508, 518, 528, 538, 548, 558, 568, 578, 588, 598, or 608, or one, two or variants thereof containing three amino acid substitutions; and/or
(iii) SEQ. , 593, 603, or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(iv) SEQ. , or the CDR1β amino acid sequence shown in any one of 606, or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(v) SEQ. , or the CDR2α amino acid sequence shown in any one of 604, or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions; and/or
(vi) SEQ. , or the CDR2β amino acid sequence shown in any one of 607, or variants thereof containing one, two or three amino acid substitutions
39. The binding protein of any one of items 27-38, comprising a
(Item 40)
(i) SEQ ID NOs: 656, 658, 660 or 27, 655, 657, and 659 or 26, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 614, 616, 618 or 10, 613, 615, and 617 or 9, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 620, 622, 624 or 12, 619, 621, and 629 or 13, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 626, 628, 630 or 14 or 15, 625, 627, and 629 or 13, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 632, 634, 636 or 17 or 19, 631, 633, and 635 or 18 or 16, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 638, 640, 642 or 21 or 17, 637, 639, and 641 or 20 or 16, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 644, 646, 648 or 23, 643, 645, and 647 or 22, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 650, 652, 654 or 25, 649, 651, and 653 or 24, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 662, 664, 666 or 29, 661, 663, and 665 or 28, respectively;
(x) SEQ ID NOs: 668, 670, 672 or 31, 667, 669, and 671 or 30, respectively;
(xi) SEQ ID NOs: 674, 676, 678 or 33, 673, 675, and 677 or 32, respectively;
(xii) SEQ ID NOs: 680, 682, 684 or 35, 679, 681, and 683 or 34, respectively;
(xii) SEQ ID NOS: 493-498, respectively;
(xiv) SEQ ID NOS: 503-508, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 513-518, respectively;
(xvi) SEQ ID NOS: 523-528, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 533-538, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 543-548, respectively;
(xix) SEQ ID NOS: 553-558, respectively;
(xx) SEQ ID NOS: 563-568, respectively;
(xxi) SEQ ID NOS: 573-578, respectively;
(xxii) SEQ ID NOS: 583-588, respectively;
(xxiii) SEQ ID NOS: 593-598, respectively; or
(xxiv) SEQ ID NOs: 603-608, respectively
40. The binding protein of any one of items 27-39, comprising the CDR1α, CDR2α, CDR3α, CDR1β, CDR2β, and CDR3β amino acid sequences shown in .
(Item 41)
(i) the Va domain is SEQ ID NOs: 76, 62, 64, 68, 70, 72, 74, 78, 80, 82, 84, 502, 512, 522, 532, 542, 552, 562, 572, 582; comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in any one of 592, 602, or 612; and/or
(ii) the Vβ domain is SEQ ID NOs: 75, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 77, 79, 81, 83, 501, 511, 521, 531, 541, 551, 561, 571, comprising or consisting of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in any one of 581, 591, 601, or 611;
A binding protein according to any one of items 27-40.
(Item 42)
wherein the Vα domain and the Vβ domain are
(i) SEQ ID NOs: 76 and 75, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 62 and 61, respectively;
(iii) SEQ ID NOs: 64 and 63, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 66 and 65, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 68 and 67, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 70 and 69, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 72 and 71, respectively;
(viii) SEQ ID NOS: 74 and 73, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 78 and 77, respectively;
(x) SEQ ID NOs: 80 and 79, respectively;
(xi) SEQ ID NOs: 82 and 81, respectively;
(xii) SEQ ID NOs: 84 and 83, respectively;
(xiii) SEQ ID NOs: 522 and 521, respectively;
(xiv) SEQ ID NOS: 532 and 531, respectively;
(xv) SEQ ID NOS: 542 and 541, respectively;
(xvi) SEQ ID NOs: 552 and 551, respectively;
(xvii) SEQ ID NOS: 562 and 561, respectively;
(xviii) SEQ ID NOS: 572 and 571, respectively;
(xix) SEQ ID NOs: 582 and 581, respectively;
(xx) SEQ ID NOS: 592 and 591, respectively;
(xxi) SEQ ID NOs: 602 and 601, respectively;
(xxii) SEQ ID NOs: 612 and 611, respectively;
(xxiii) SEQ ID NOS: 502 and 501, respectively;
(xxiv) SEQ ID NOS: 512 and 511, respectively
42. The binding protein of any one of items 27-41, comprising or consisting of the amino acid sequence shown in .
(Item 43)
43. The binding protein of any one of items 27-42, further comprising a TCRα chain constant domain (Cα) and/or a TCRβ chain constant domain (Cβ).
(Item 44)
44. The binding protein of item 43, wherein said C[alpha] comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO:85 or 86.
(Item 45)
45. The binding protein of items 43 or 44, wherein said Cβ comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOs:87-99.
(Item 46)
comprising a TCRα chain and a TCRβ chain, wherein said TCRα chain and TCRβ chain are
(i) SEQ ID NOs: 115 and 114, respectively;
(ii) SEQ ID NOs: 101 and 100, respectively;
(iii) SEQ ID NOS: 103 and 102, respectively;
(iv) SEQ ID NOs: 105 and 104, respectively;
(v) SEQ ID NOs: 107 and 106, respectively;
(vi) SEQ ID NOs: 109 and 108, respectively;
(vii) SEQ ID NOs: 111 and 110, respectively;
(viii) SEQ ID NOs: 113 and 112, respectively;
(ix) SEQ ID NOs: 117 and 116, respectively;
(x) SEQ ID NOS: 119 and 118, respectively;
(xi) SEQ ID NOS: 121 and 120, respectively; or
(xii) SEQ ID NOs: 123 and 122, respectively
46. A binding protein according to any one of items 27 to 45, comprising or consisting of an amino acid sequence having at least 90% identity with the amino acid sequence shown in .
(Item 47)
47. The binding protein of any one of items 27-46, comprising a TCR, a single chain TCR (scTCR) or a chimeric antigen receptor (CAR).
(Item 48)
48. The binding protein of item 47, comprising a TCR.
(Item 49)
48. The binding protein of item 47, comprising an scTCR.
(Item 50)
48. The binding protein of item 47, comprising a CAR.
(Item 51)
An isolated polynucleotide encoding the binding protein of any one of items 1-50.
(Item 52)
SEQ. 405, 408, 411, 413, 416, 419, 421, 424, 427, 429, 432, 435, 437, 440, 443, 445, 448, 451, 453, 456, 459, 461, 464, 467, 469, 472, 475, 477, 480, 483, 485, 488, 491, 139, 163, 138, 162, 193, 125, 149, 124, 148, 186, 127, 151, 126, 150, 187, 129, 153, 128, 152, 188, 131, 155, 130, 154, 189, 133, 157, 132, 156, 190, 135, 159, 134, 158, 191, 137, 161, 136, 160, 192, 141, 162, 140, 164, 194, 143, 167, 142, 166, 195, 145, 169, 144, 168, 196, 147, 171, 146, 170, 197, 499, 509, 519, 529, 539, 549, 559, 52. The polynucleotide of item 51, comprising a polynucleotide having at least 75% identity to the polynucleotide sequence set forth in any one of 569, 579, 589, 599, or 609, or any combination thereof. .
(Item 53)
SEQ. An isolated polynucleotide encoding the amino acid sequence shown in any one of 550, 560, 570, 580, 590, 600, or 610.
(Item 54)
SEQ. 54. The method of item 53, comprising a polynucleotide sequence having at least 75% identity to the polynucleotide sequence set forth in any one of 529, 539, 549, 559, 569, 579, 589, 599, or 609 Polynucleotide.
(Item 55)
(i) a polynucleotide encoding a polypeptide comprising an extracellular portion of a CD8 co-receptor alpha chain, optionally wherein said encoded polypeptide is or is the CD8 co-receptor alpha chain; a polynucleotide comprising;
(ii) a polynucleotide encoding a polypeptide comprising an extracellular portion of a CD8 co-receptor beta chain, optionally wherein said encoded polypeptide is the CD8 co-receptor beta chain or a polynucleotide comprising; or
(iii) the polynucleotide of (i) and the polynucleotide of (ii)
55. The polynucleotide of any one of items 51-54, further comprising:
(Item 56)
(a) said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor alpha chain;
(b) said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor beta chain; and
(c) a polynucleotide encoding a self-cleaving peptide, located between the polynucleotide of (a) and the polynucleotide of (b);
56. The polynucleotide of item 55, comprising:
(Item 57)
encoding a self-cleaving peptide;
(1) between said polynucleotide encoding a binding protein and said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor alpha chain; and/or
(2) between said polynucleotide encoding the binding protein and said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor β chain;
57. The polynucleotide of item 55 or 56, further comprising the polynucleotide arranged in a .
(Item 58)
operatively connected to the inframe,
(i) (pnCD8α)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₂ )-(pnBP);
(ii) (pnCD8β)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₂ )-(pnBP);
(iii) (pnBP)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8β);
(iv) (pnBP)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8α);
(v) (pnCD8α)-(pnSCP ₁ )-(pnBP)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8β); or
(vi) (pnCD8β)-(pnSCP ₁ )-(pnBP)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8α)
including
pnCD8α is said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor α chain;
pnCD8β is said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor α chain;
pnBP is said polynucleotide encoding a binding protein;
pnSCP ₁ and pnSCP ₂ are each independently a polynucleotide encoding a self-cleavable peptide, and wherein said polynucleotides and/or said self-cleavable peptides encoded are optionally the same or different. 1. Polynucleotide according to item 1.
(Item 59)
wherein the encoded binding protein comprises a TCRα chain and a TCRβ chain, and wherein the polynucleotide encodes a self-cleaving peptide positioned between the polynucleotide encoding the TCRα chain and the polynucleotide encoding the TCRβ chain. 59. The polynucleotide of any one of items 51-58, comprising a polynucleotide that
(Item 60)
operably linked in-frame
(i) (pnCD8α)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₂ )-(pnTCRβ)-(pnSCP ₃ )-(pnTCRα);
(ii) (pnCD8β)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₂ )-(pnTCRβ)-(pnSCP ₃ )-(pnTCRα);
(iii) (pnCD8α)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₂ )-(pnTCRα)-(pnSCP ₃ )-(pnTCRβ);
(iv) (pnCD8β)-(pnSCP ₁ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₂ )-(pnTCRα)-(pnSCP ₃ )-(pnTCRβ);
(v) (pnTCRβ)-(pnSCP ₁ )-(pnTCRα)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₃ )-(pnCD8β);
(vi) (pnTCRβ)-(pnSCP ₁ )-(pnTCRα)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₃ )-(pnCD8α);
(vii) (pnTCRα)-(pnSCP ₁ )-(pnTCRβ)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8α)-(pnSCP ₃ )-(pnCD8β);
(viii) (pnTCRα)-(pnSCP ₁ )-(pnTCRβ)-(pnSCP ₂ )-(pnCD8β)-(pnSCP ₃ )-(pnCD8α)
including
pnCD8α is said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor α chain;
pnCD8β is said polynucleotide encoding a polypeptide comprising the extracellular portion of the CD8 co-receptor α chain;
pnTCRa is said polynucleotide encoding a TCRα chain;
pnTCRβ is said polynucleotide encoding a TCRβ chain;
pnSCP ₁ , pnSCP ₂ , and pnSCP ₃ are each independently a polynucleotide encoding a self-cleavable peptide, and wherein said polynucleotides and/or said self-cleavable peptides encoded are optionally the same or different .
(Item 61)
is or comprises a polynucleotide sequence that is codon-optimized for expression in a host cell, optionally wherein said host cell is a human immune system cell, and optionally a T cell , items 51-60.
(Item 62)
An expression vector comprising the polynucleotide of any one of items 51-61 operably linked to an expression control sequence.
(Item 63)
63. The expression vector of item 62, capable of delivering said polynucleotide to a host cell.
(Item 64)
64. The expression vector of item 63, wherein said host cell is a hematopoietic progenitor cell or a human immune system cell.
(Item 65)
said human immune system cells are CD4 ⁺ T cells, CD8 ⁺ T cells, CD4 ^- CD8 ^- 65. The expression vector of item 64, which is a double negative T cell, a γδ T cell, a natural killer cell, a natural killer T cell, a macrophage, a monocyte, a dendritic cell, or any combination thereof.
(Item 66)
66. The expression vector of item 65, wherein said T cells are naive T cells, central memory T cells, effector memory T cells, or any combination thereof.
(Item 67)
The expression vector according to any one of items 62-66, which is a viral vector.
(Item 68)
The expression vector of item 67, wherein said viral vector is a lentiviral vector or a γ-retroviral vector.
(Item 69)
comprising a polynucleotide according to any one of items 51-61 and/or an expression vector according to any one of items 62-68 and/or according to any one of items 1-50 A host cell modified to express the binding protein of
(Item 70)
Modified host cells according to item 69, comprising hematopoietic progenitor cells and/or human immune cells.
(Item 71)
71. The modified host cell of item 70, wherein said immune cells comprise T cells, NK cells, NK-T cells, dendritic cells, macrophages, monocytes, or any combination thereof.
(Item 72)
said immune cells are CD4 ⁺ T cells, CD8 ⁺ T cells, CD4 ^- CD8 ^- double negative T cells, γδ T cells, or any combination thereof;
Optionally, said immune cells are CD4 ⁺ T cells and CD8 ⁺ T cells, and optionally said CD4 ⁺ T cells, said CD8 ⁺ The T cell, or both, is (i) a polynucleotide encoding a polypeptide comprising an extracellular portion of a CD8 co-receptor alpha chain, optionally wherein said encoded polypeptide is a CD8 co-receptor (ii) a polynucleotide encoding a polypeptide comprising an extracellular portion of a CD8 co-receptor β chain, optionally encoding said polynucleotide; or (iii) the polynucleotide of (i) and the polynucleotide of (ii), wherein the peptide is or comprises a CD8 co-receptor beta chain; .
(Item 73)
CTLA4 gene; HLA component gene; TIGIT gene; TCR component gene, FasL gene, or chromosomal gene knockout of any combination thereof. A modified host cell as described in .
(Item 74)
74. The modified embodiment of item 73, wherein said chromosomal gene knockout comprises a knockout of an HLA component gene selected from alpha1 macroglobulin gene, alpha2 macroglobulin gene, alpha3 macroglobulin gene, beta1 microglobulin gene, or beta2 microglobulin gene. host cells.
(Item 75)
75. The modified host cell of item 73 or 74, wherein said chromosomal gene knockout comprises a knockout of a TCR component gene selected from a TCRα variable region gene, a TCRβ variable region gene, a TCR constant region gene, or a combination thereof.
(Item 76)
A composition comprising the modified host cell of any one of items 69-75 and a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient.
(Item 77)
at least about 30% modified CD4 ⁺ T cells and (ii) at least about 30% modified CD8 ⁺ 77. The composition dose of item 76, comprising the composition comprising T cells in combination in about a 1:1 ratio.
(Item 78)
78. The composition of items 76 or 77, which is substantially free of naive T cells.
(Item 79)
An immunogenic polypeptide comprising or consisting of an amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOS: 198-201.
(Item 80)
(i) the binding protein of any one of items 1-50;
(ii) the polynucleotide of any one of items 51-61;
(iii) an expression vector according to any one of items 62-68;
(iv) a modified host cell according to any one of items 69-75; and/or
(v) an immunogenic polypeptide of item 79;
and a composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier, excipient, or diluent.
(Item 81)
A method for treating a disease or disorder associated with a KRAS G12D or KRAS G12V or NRAS G12D or NRAS G12V or HRAS G12V or HRAS G12D mutation in a subject, comprising an effective amount of
(i) the binding protein of any one of items 1-50;
(ii) the polynucleotide of any one of items 51-61;
(iii) an expression vector according to any one of items 62-68;
(iv) the modified host cell of any one of items 69-75, optionally comprising CD8+ T cells, CD4+ T cells, or both; modified host cells that are autologous, allogeneic, or syngeneic;
(v) a composition according to any one of items 76-78; and/or
(vi) the immunogenic polypeptide of item 79;
to said subject.
(Item 82)
82. The method of item 81, wherein said disease or disorder comprises cancer, said cancer optionally being a solid tumor or a hematological malignancy.
(Item 83)
said disease or disorder is pancreatic cancer or cancer, optionally pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC); colorectal cancer or cancer; lung cancer, optionally non-small cell lung cancer; biliary tract cancer; cancer or cancer; cervical cancer; ovarian cancer; bladder cancer; liver cancer; chronic myelomonocytic leukemia; acute lymphocytic leukemia (ALL); cancer of the urinary tract; cancer of the small intestine; mucosal melanoma); glioma; poorly differentiated thyroid carcinoma; neuroblastoma; histiocytic and dendritic cell neoplasms; anaplastic astrocytoma; chronic myelogenous leukemia; diffuse large B-cell lymphoma; double-hit lymphoma; head and neck cancer; head and neck squamous cell carcinoma; hepatocellular carcinoma; Nerve sheath tumor; mantle cell lymphoma; myelodysplastic/myeloproliferative neoplasm, unclassifiable; peripheral T-cell lymphoma; prostate cancer; small cell lung cancer; therapy-related AML; thymic carcinoma; follicular thyroid carcinoma; malignant thyroid neoplasm; thyroid carcinoma; Or the method according to 82.
(Item 84)
84. The method of any one of items 81-83, wherein said composition is administered to said subject parenterally or intravenously.
(Item 85)
85. The method of any one of items 81-84, comprising administering to said subject multiple doses of any one or more of (i)-(vi).
(Item 86)
86. The method of item 85, wherein said multiple doses are administered at dosing intervals of about 2 to about 4 weeks.
(Item 87)
The composition comprises the modified host cell, and the method comprises adding the modified host cell to about 10 ⁴ cells/kg to about 10 ¹¹ 87. The method of any one of items 81-86, comprising administering to said subject at a dose of cells/kg.
(Item 88)
(i) the subject is HLA-A ^* a composition comprising modified CD8+ and/or modified CD4+ T cells comprising a heterologous polynucleotide encoding a binding protein according to any one of items 1 to 26 when expressing 02:01; and/or
(ii) the subject is HLA-A ^* 11:01, a composition comprising modified CD8+ and/or modified CD4+ T cells comprising a heterologous polynucleotide encoding a binding protein according to any one of items 27-50
and when both the composition of (i) and the composition of (ii) are administered, the composition of (i) and the composition of (ii) are contained in the same composition , or as a separate composition.
(Item 89)
89. The method of any one of items 81-88, further comprising administering a cytokine to said subject.
(Item 90)
90. The method of item 89, wherein said cytokine comprises IL-2, IL-15, or IL-21.
(Item 91)
91. The method of any one of items 81-90, wherein said subject has received or is receiving an immune checkpoint inhibitor and/or an agonist of a stimulatory immune checkpoint agent.
(Item 92)
A disease or disorder associated with a KRAS G12D or KRAS G12V or NRAS G12D or NRAS G12V or HRAS G12V or HRAS G12D mutation in a subject, optionally wherein said disease or disorder comprises cancer; Further optionally, the cancer is solid cancer or hematological malignancy, and optionally the disease or disorder is pancreatic cancer or cancer, optionally pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC). ); colorectal cancer or cancer; lung cancer, optionally non-small cell lung cancer; biliary tract cancer; endometrial cancer or cancer; Myelogenous leukemia, optionally myelogenous leukemia such as acute myelogenous leukemia; myelodysplastic syndrome; lymphomas such as non-Hodgkin's lymphoma; chronic myelomonocytic leukemia; acute lymphocytic leukemia (ALL); cancer of the small intestine; breast cancer or carcinoma; melanoma (cutaneous melanoma, anal melanoma, or mucosal melanoma, as appropriate); glioma; poorly differentiated thyroid carcinoma; and dendritic cell neoplasm; neurofibromatosis type 1; rhabdomyosarcoma; soft tissue sarcoma; bladder cancer; head and neck cancer; head and neck squamous cell carcinoma; hepatocellular carcinoma; malignant peripheral nerve sheath tumor; mantle cell lymphoma; refractory anemia-2 with increased blasts; renal cell carcinoma; rhabdoid tumor; Schwann cell tumor; secondary AML; any one of items 1-50 for use in a method for treating a disease or disorder selected from malignant thyroid neoplasm; thyroid cancer; thyroid adenocarcinoma; urothelial carcinoma; or papillary thyroid carcinoma a binding protein according to any one of items 51-61, a polynucleotide according to any one of items 51-61, an expression vector according to any one of items 62-68, a modified according to any one of items 69-75 modified host cells, optionally comprising CD8+ T cells, CD4+ T cells, or both, the composition of any one of items 76-78; and/or item 79. 3. An immunogenic polypeptide as described in .
(Item 93)
A disease or disorder associated with a KRAS G12D or KRAS G12V or NRAS G12D or NRAS G12V or HRAS G12V or HRAS G12D mutation in a subject, optionally wherein said disease or disorder comprises cancer; Further optionally, the cancer is solid cancer or hematological malignancy, and optionally the disease or disorder is pancreatic cancer or cancer, optionally pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC). ); colorectal cancer or cancer; lung cancer, optionally non-small cell lung cancer; biliary tract cancer; endometrial cancer or cancer; Myelogenous leukemia, optionally myelogenous leukemia such as acute myelogenous leukemia; myelodysplastic syndrome; lymphomas such as non-Hodgkin's lymphoma; chronic myelomonocytic leukemia; acute lymphocytic leukemia (ALL); cancer of the small intestine; breast cancer or carcinoma; melanoma (cutaneous melanoma, anal melanoma, or mucosal melanoma, as appropriate); glioma; poorly differentiated thyroid carcinoma; and dendritic cell neoplasm; neurofibromatosis type 1; rhabdomyosarcoma; soft tissue sarcoma; bladder cancer; head and neck cancer; head and neck squamous cell carcinoma; hepatocellular carcinoma; malignant peripheral nerve sheath tumor; mantle cell lymphoma; refractory anemia-2 with increased blasts; renal cell carcinoma; rhabdoid tumor; Schwann cell tumor; secondary AML; any of items 1 to 50 for use in the manufacture of a medicament for treating a disease or disorder selected from malignant thyroid neoplasm; thyroid cancer; thyroid adenocarcinoma; urothelial carcinoma; A binding protein according to any one of items 51-61, a polynucleotide according to any one of items 51-61, an expression vector according to any one of items 62-68, any one of items 69-75. a modified host cell, optionally comprising CD8+ T cells, CD4+ T cells, or both, a composition according to any one of items 76-78; and/or An immunogenic polypeptide according to item 79.

Claims

A recombinant polynucleotide comprising a coding sequence encoding a binding protein comprising a T-cell receptor (TCR) α chain variable (Vα) domain and a TCR β chain variable (Vβ) domain, wherein said encoded binding protein is mutated capable of binding to a type KRAS peptide/HLA complex, wherein said mutant KRAS peptide comprises the amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 2-5, and said HLA is HLA-A ^＊* 11, and said Vα or said Vβ domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOs: 72, 75, 521, and 561. Polynucleotide.

(i) said Vα domain comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:72; and
(ii) said Vβ domain comprises or consists of an amino acid sequence having at least 92% identity to the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOS: 75, 521, and 561; of recombinant polynucleotides.

3. The recombinant polynucleotide of claim 1 or 2, further comprising a heterologous expression control element operably linked to said coding sequence.

4. The recombinant polynucleotide of claim 3, wherein said expression control element is not a human expression control element.

5. The recombinant polynucleotide of claim 3 or 4, wherein said expression control element comprises a promoter, said promoter being heterologous to the binding protein-encoding sequence.

6. The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-5, wherein the amino acid sequence of said Vβ domain has at least 90% identity with the amino acid sequence according to any one of SEQ ID NOs:521, 75 and 561. .

wherein the encoded binding protein is
(a) a CDR1α amino acid sequence according to SEQ ID NO:513 and a CDR2α amino acid sequence according to SEQ ID NO:514; or
(b) a CDR1β amino acid sequence according to SEQ ID NO:516 and a CDR2β amino acid sequence according to SEQ ID NO:517
The recombinant polynucleotide according to any one of claims 1 to 6, comprising

8. The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-7, wherein said Vβ domain has at least 92% identity with an amino acid sequence according to any one of SEQ ID NOs:521, 75 and 561.

The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-8, wherein said encoded binding protein further comprises a TCR α chain constant (Cα) domain and/or a TCR β chain constant (Cβ) domain.

(a) said Cα domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity with an amino acid sequence according to SEQ ID NO: 85 or 86; and/or
(b) said Cβ domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity to an amino acid sequence according to SEQ ID NO:87 or 99;
A recombinant polynucleotide according to claim 9 .

The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-10, wherein said encoded binding protein comprises a TCR.

The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-10, wherein said encoded binding protein comprises a chimeric antigen receptor (CAR).

wherein said encoded binding protein comprises a TCRα chain and a TCRβ chain, said polynucleotide encoding a self-cleaving peptide positioned between the polynucleotide encoding the TCRα chain and the polynucleotide encoding the TCRβ chain A recombinant polynucleotide according to any one of claims 1 to 11, comprising a polynucleotide that

14. The recombinant polynucleotide of any one of claims 1-13, which is a polynucleotide sequence codon-optimized for expression in a host cell, said host cell being a human T-cell.

A recombinant expression vector comprising a polynucleotide encoding a binding protein comprising a T-cell receptor (TCR) α chain variable (Vα) domain and a TCR β chain variable (Vβ) domain, wherein said encoded binding protein is mutated is capable of binding to a type KRAS peptide/HLA complex, wherein said mutant KRAS peptide comprises the amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 2-5, and said HLA is HLA-A ^＊* 11 and:
A recombinant expression vector, wherein said Vα or said Vβ domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOs:72, 75, 521, and 561.

(i) said Vα domain comprises or consists of an amino acid sequence having at least 90% identity to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:72; and
16. The claim 15, wherein (ii) said Vβ domain comprises or consists of an amino acid sequence having at least 92% identity to the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NOS: 75, 521 and 561. recombinant expression vector.

17. The recombinant expression vector of claim 15 or 16, wherein the amino acid sequence of said V[beta] domain has at least 90% identity with any one of SEQ ID NOs:521, 75 and 561.

18. The recombinant expression vector of any one of claims 15-17, wherein said Vβ domain has at least 92% identity with an amino acid sequence according to any one of SEQ ID NOs:521, 75 and 561.

wherein the encoded binding protein is
(a) a CDR1α amino acid sequence according to SEQ ID NO:513 and a CDR2α amino acid sequence according to SEQ ID NO:514; or
(b) a CDR1β amino acid sequence according to SEQ ID NO:516 and a CDR2β amino acid sequence according to SEQ ID NO:517
The recombinant expression vector according to any one of claims 15 to 18, comprising

The recombinant expression vector of any one of claims 15-19, wherein said encoded binding protein further comprises a TCR α chain constant (Cα) domain and/or a TCR β chain constant (Cβ) domain.

(a) said Cα domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity to an amino acid sequence according to SEQ ID NO: 85 or 86; or
(b) said Cβ domain comprises an amino acid sequence having at least 90% identity to an amino acid sequence according to SEQ ID NO:87 or 99;
21. The recombinant expression vector of claim 20.

The recombinant expression vector of any one of claims 15-21, wherein said encoded binding protein comprises a TCR or chimeric antigen receptor (CAR).

23. The recombinant expression vector of any one of claims 15-22, wherein said vector comprises a viral vector.

24. The recombinant expression vector of claim 23, wherein said viral vector comprises a γ-retroviral vector or a lentiviral vector.

25. The recombinant expression vector of any one of claims 15-24, wherein said vector is capable of delivering said polynucleotide to a host cell.

26. The recombinant expression vector of claim 25, wherein said host cells are hematopoietic progenitor cells or human immune system cells.

said human immune system cells are CD4 ^＋+ T cells, CD8 ^＋+ T cells, CD4 ^－- CD8 ^－- 27. The recombinant expression vector of claim 26, which is a double negative T cell, γδ T cell, natural killer cell, natural killer T cell, macrophage, monocyte, dendritic cell, or any combination thereof.