JPS60178815A - 制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、カルコン（ｃｈａＩｃｏｎｅ　）　、ジヒド
ロカルコｙ　（ｄｌｈｙｄｒｏｃｈａｌｃｏｎｏ　）　
ｓ　フラ′ゞツノ（ｆｌａｖａｎｏｎｅ　）、インフラ
ノ寸ノ：ｙ　（１ｓｏｆｌａｖａｎｏｎｅ）。

ロチノイド（ｒｏｔｅｎｏｌｄ　）、インフラノぐン（
１ｓｏ−イ１ａｖａｎ　）、インフラペン（１ｓｏｆｌ
ａｖｅｎｅ　）、ゾテロカルｚｚ：ｙ　（ｐｔｅｒｏｃ
ａｒｐａｎ　）、クメスタｙ（Ｃｏｕｍｅｓｔ１３ｎ　
）、３−アリールクマリン（３−ａｒｙｌｃｏｕｍａｒ
ｌｎ）の誘導体及びジメチルメラネイン（ｄｌｍｅｔｈ
ｙｌｍｅｌａｎｎｅｌｎ　）より選ばれる化合物を有効
成分として含有することを特徴とする１６（１癌剤に関
するものである。

従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナイトロゾ
エンマスタード類、エチレンイミン類。

スルホン酸エステル類）、代謝拮抗物質（葉酸拮抗剤、
プリン拮抗剤、ピリミジン拮抗剤）、植物性核分裂毒（
コルセミド、ビンブラスチン等）、抗生物質（ザルコマ
イシン、カルチノフイリン、マイトマイシン等）、ホル
モン類（副腎ステロイド、男性ホルモン、女性ホルモン
）及びボルフイリン鉛酸（マーフィリン、ｃｏｐｐ　）
　等が用いられている。しかしながら、その殆んどは、
細胞毒塊の物質であり、重大な副作用を呈するため、低
毒性で優れた制癌活性を有する制癌剤の開発が強く望ま
れている。

そこで、本発明者らは、上記の趣旨に鑑み、低毒性で１
５１１癌活性を一有する物質について探索、鋭意研究の
結果、前記化合物が動物の腫瘍細胞に利して分化誘導活
性を有することを新たに見出し、且つ該物質が著しく低
毒性で、優れた制癌活性金有することの新たな知見を得
て、本発明の制癌剤を完成するに至った。本発明の制癌
剤の有効成分は。

人、家畜、犬、猫等の部面動物に対する優れた癌化学療
法剤となり得るものである。

本発明の有効成分である化合物としては、例えば、次の
化合物を挙げることができる。

カルコン系化合物として。

（ａ）　リキリテイジエ＝ン（ｌｌｑｕｌｒｌｔｉｇｅ
ｎｉｎ　）（ｂ）　イソリキリテイゾｘ　二ン（ｌｓｏ
ｌ　Ｉｑｕｌｒｌｔｌｇｅｎｌｎ）ヅヒドロカルコン系
化合物として、 （ｃ）７ｏレテイｙ　（ｐｈｌｏｒｅｔｌｎ　）フラバ
ノン系化合物として、 （ｄ）　リコフラパノン（ＩＩｃＯイ１ａｖａｎｏｎｅ
　）イソフラバノン系化合物として、 （ｅ）３，４，６．７−チトラメトキシフラバノン（３
，４，６，７−ｔｅｔｒａｍａｔｈｏｘｙｆｌａｖａｎ
ｏｎｅ　）（１＞　ダイズイ７　（ｄａｌｄｚｌｎ　）
（ｇ）　リコインフラボンＡ　（１ｌｃｏｌｓｏｆｌａ
ｖｏｎｅ　Ａ）（ｈ）　リコインフラｌＩｅン日トリア
セテート（口ｃｏ−ｌｓｏｆｌａｖｏｎｓ　Ｂ　ｔｒｉ
ａｃｅｔａｔｅ　）ロチノイド系化合物として、 （＋）　ロチノン（ｒｏｔｅｎｏｎｅ　）イソフラバン
未化合物として、 中　ベステイトー／ｌ／　（ｖｅｓｔｌｔｏｌ　）（ｋ
）　リコリサイノン（１ｌｃｏｒｌｃｌｄｉｎ　）（１
）　グラブリソ７　（ｇｌａｂｒｉｄｉｎ　）イソフラ
ベン系化合物として、 （ｍ）　５ｙｎ−イソフジヘ：ｙ　（５ｙｎ−１ｓｏｆ
ｌａｖｓｎｅ　）（ｎ）　グラゾレｙ　（ｇｌａｂｒｅ
ｎｅ　）７’　テｏカルノ９ン系化合物として、（０）
　デメチルホモブチロ力ルビｙ　（ｄｅｍｅｔｈｙｌｈ
ｏｍｏｐｔｅｒｏｃａｒｐｉｎ　） （ｐ）？−キアイｙ　（ｍａａｃｋｌａｌｎ　）クメス
タン系化合物として。

（ｑ）　グライソロール（ｇｌｙｃｙｒｏｌ　）３−ア
リルクマリン系化合物として、 （ｒ）　ｓｙｎ　−３−アリルクマリｙ　（５ｙｎ−３
−ａｒｙｌ　−ｃｏｕｍａｒｉｎ　） （ｓ）　ブライシリン（ｇｌｙｃｙｒｉｎ　）その他の
化合物として、 （ｔ）　７ｙ−ホモイソ７うｇ　ン（ｓｙｎ−ｈｏｍｏ
ｉｓｏ−ｆｌａｖｏｎｅ　） （ｕ）　ジメチルメラネイン（ｄｌｍｅｔｈｙｌｍｅｌ
ａｎｎｅｌｎ　）これらの化合物は、いずれも公知化合
物であり、その構造式は、第１表の如くである。

第　１　表 化合物番号　構　造　式 （） （） ％式％ ０　μツ座几ζユくヂヵ 本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいずれも使用
可能であり、経口投与する場合は、軟・硬カブ七ル剤又
は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤と（ して投与され、非経口投与する場合は、水溶性懸濁液、
油性製剤などの皮下或いは静脈注射剤、点滴剤及び固体
状又は懸濁粘稠液状として持続的な粘膜吸収が維持でき
るように生薬のような剤型で投与され得る。

本発ツ１の有効成分の製剤化は一界面活性剤、賦形剤、
滑沢剤、佐剤、及び必要に応じて腸溶性製剤とするため
に医薬的に許容し得る皮膜形成物質、コーティング助剤
＠を用いて適宜行うことができ、その具体例を挙げれば
、次のとおりである・本発明の組成物の崩壊、溶出を良
好ならしめるために、界面活性剤、例えばアルコール、
エステル類、シＪ？リエチレングリコール誘導体、ソル
ビタンの脂肪酸エステル類、硫酸化脂肪アルコール類等
の１神父は２神以上を添加することができるＯまた、賦
形剤として、例えばｓｊａ、乳糖、デンノン、結晶セル
ロース、マンニット、軽質無水珪酸、アルミン酸マグネ
シウム、メタ［１アルミン酸マグネシウム、合成珪酸ア
ルミニウム、炭ｍカルシウム、炭酸水素ナトリウム、リ
ン酸水素カルシウム、カルボキシメチルセルロースカル
シウム等の１種又は２４ｊｕ以上を場合せて添加するこ
とができる。

滑沢剤としては、例えばステアリン剤マグネシウム、タ
ルク、硬化油等を１独又は２種以上添加することができ
、また矯味剤及び矯臭剤として、食塩、サッカリン、糖
、マンニット、オレンジ油カンゾウエキス、クエン酸、
ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、リンゴ酸等の甘味
剤、香料、着色料、保存料？４ｊを含有させてもよい・
懸濁剤、？！＃Ｊ剤の如き佐剤としては、例えばココナ
ツト油、オリーブ油、ゴマ油、洛花生油、乳酸カルシウ
ム、ベニバナ油、大豆リン脂質等を官有させることがで
きる。

また皮膜形成物質としては、セルロース、糖類等の炭水
化物誘導体として酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）、
またアクリル酸系共重合体、二塩基酸モノエステル類等
のポリビニル誘導体としてアクリル酸メチル・メタアク
リル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・メタアクリル
酸共重合体が挙げられる。

また、上記皮膜形成物質をコーティングするに際し、通
常使用されるコーティング助剤、例えば可塑剤の他、コ
ーティング操作時の薬剤相互の付着防止のための各柿恭
加剤ｔ−添加することによって皮Ｈ形成剤の性１９を改
良したり、コーティング操作をよ勺容易ならしめること
ができる。なお、有効成分を皮膜形成物質を用りてマイ
クロカプセル化してから賦形剤等と混合しまた剤型とし
ても良い。

特に代表的な剤型における配合比は下記のｊｌｆｌりで
ある。

特に好ましＩｔｓ範囲 有効成分　０．１〜９ＯＮ分％　０．３〜１５Ｍ景％賦
形剤１０〜９９．８　＃　８５〜９９，４　＃滑沢剤　
ｏ〜５ｏＩｏ〜２ｏｌ 界面活性剤　０〜５ｏ　ｌ　ｏ〜２ｏ　ｌ皮膜形成物質
　０．１〜５０　＃　０．５〜２０　＃特に好オしい賦
形剤は、乳糖、結晶セルローズ、カルボキシメチルセル
ロースカルシウムである。

また、投与貸は、対象腫瘍を有効に治療するに十分なぁ
−であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型などによって左
右されるが、一般に、経口投与の場合、大人では１日当
シ、約ｏ、ｏｉ　〜１［］Ｏｍ９／Ｋｇ体別（小人でＬ
ｒ、Ｅ、　０　、０１〜６０ｍ９７ｋｇ体重）ノ範囲で
、その上限は好ましくけ約５Ω〜／　ｋｇ休体、更に好
ましくは約１ｏη／　ｋｇ体重程度であシ、非経口投与
の場合、その上限は約１　ｏ　ｍｙ　／　＋ｒｐ体ル体
皮程度シ、好ましくは°５〜９　／　＆ｃ＠体点、更に
好ましくは２〜／ＣＰ体重が適当である。

次に、本発明の化合物の？ｌｆｔ１癌活性を確認した制
Ｓｋ性試験につめて述べる。

〔１〕フレンド白血病細胞（ｍｏｕｓｅ　ｅｒｙｔｈｒ
ｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌ　＋　、　８８６５１
ｔｉｑ　）に対する試験ＧＩＢＣＯ製ＨＡＭのＦ−１２
培地に、１５％の牛胎児血清及び６０ｍｆ／／ｌのカナ
マイシンを加えたものに、２５　Ｘ　１０’　ｃｅｌｌ
／ａｗｌ！　となるようにＢ８細Ｑｉ！！を接椋し、こ
れに所定量の被験化合物を加える（最終容量５ｍ）。

７．５％ＣＯ２中、５７℃７日間培養した後、オルキン
（０ｒｋｉｎ　）のベンゾノア染色法により染色し、染
色された６’ｌ［ｌ胞数、すなわち、赤血球への分化に
よシヘモグロビンを生成するようになった細胞数を測定
し、分化綿導率をめる。

〔２〕マウス骨髄性白血病細１１ｆ（（ｍｏｕｓｅ　ｍ
ｙｅｌｏｌｄｌｅｕｋｅｍｉａ　ｃｅｌｌ、Ｍ　１　）
に対する試験Ｇ　Ｉ　８ＣＯ泄イ一グルＭＥＭ培地に、
１０％の馬廂ＹＨ及び６０ｍシ／ノのカナマイシンを加
えたものに、５　、　ＯＸ　１０’　ｃｅｌｌ　／ｍｅ
となるよう［Ｍ１細＠を接揚し、これにｎ［定量の被験
化合物を加える（最終容量５ｔＲｔ）。

７．５％ＣＯ２中、５７℃７日間培養した後、貧食細胞
、ある１ｎＦｉ顆粒球への分化により誘導されたリゾチ
ーム活性を調べる。なお、リゾチーム活性の１ＮＬ位（
ｕｎｉｔ’）　とは、ミクロコツカス・リソデイクテイ
カス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　Ｉｙｓｏｄｅｉｋｔｉ
ｃｕｓ）菌体の懸濁液を基質として、リゾチームを作用
させ、りＨ６，２４、温度２５℃で測定し、ｔｔｓｏｍ
μの波長の吸光度を毎分０．００１減少させるようなり
ゾチームの量をいう。

〔３〕マウス奇形腫細１１１　（ｍｏｕｓｅ　ｔｅｒａ
ｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）に対する試＠：テラトーマ細
胞をマウスの腹腔から腹腔へ移植後、１ケ月経過したも
のを用いた。

テラトーマ細胞は、腹腔中では初期圧に似た胚様体（ｅ
ｍｂｒｏｌｄ　ｂｏｄｙ）　という細胞塊として存在し
、それらをトリグシン処理などを行うことなく用いた。

採取した腹水中で自然沈下させて得られる胚様体をダル
ベコ−変法培地、あるいはＩ・ンクス液で３度洗汐後、
１０％牛脂児崩清を含む培地に接種し、所定、ｔオの被
験化合物を加え、３７℃でＣＯ２７，５〜８％を含む水
蒸気を飽和して、空毎中で１週間培養する。遠心分離（
２０００ｒ、ｐ、ｍ、１０分）シ、て得た胚郁体を０．
８６％ＮａＣｊ　溶液で洗浄俊、ナフトールＡＳ−ＭＸ
ホスフェートとジアゾ試薬（Ｆａｓｔ　Ｖｉｏｌｅｔ　
Ｂ　５ａｌｔ）　を加えて１時間室温で放１ηする。こ
れを遠心分離（２０００ｒ、ｐ、ｍ。

１０分）して胚様体を分離し、エタノールを加えて１時
間室温で放１ｒ４′する。

（未分化の細胞は、赤く着色する）。

これを、５５５０ｍ　の吸収を測定し、アルカリホスフ
ァターゼ活性（分化誘導の程度）をめるＯヘキサメチレ
ンビスアセトアミド（ＨＭＢＡ）５ｍＭ　を加えｌｃ　
８’４合（アルカリホスファターゼ活性を全く示さない
。）ｉｒ＋＋Ｊとし、ＨＭＢＡ全加えない場合（アルカ
リホスファターゼ活性を極めて強く示す。）を「−一」
とし、分化誘導の程度を次の段階で示した。

＋＋：アルカリホスファターゼ活性を全く示さないＯ ＋：アルカリホスファターゼ活性をほとんど示さない。

士：アルカリホスファターゼ活性を若干示す。

−二アルカリホスファターゼ活性を強く示す。

−−：アルカリホスファターゼ活性を極めて強く示す。

なお、後述の試験例では、分化誘導作用をもって、制癌
活性を示した。

以下に、本発明′ｆ：製剤例及び試験例によって具体的
に説明する。

製剤例１（注射・点滴剤） 化合物（ａ）　１０１ｎｇを含有するように粉末ぶどう
糖５ｆを加えてバイアルに無菌的に分配し、密封した上
、窒素、ヘリウム等の不活性がスを封入して冷暗所に保
存する。使用前にエタノールに溶解し、０．８５％生理
的食塩水１００ａ／ｌ−添加して静脈内注射剤とし、１
日、１０〜１０ロゴを症状に応じて静脈内注射又は点滴
で投与する・ 製剤例２（注射・点滴剤） 化合物（ｇ）　２　ｍｇを用いて、製剤例１と同様の方
法により軽症用静脈内注射剤とし、１日、１０〜１００
　ｍｌを症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与する。

製剤例５（腸溶性カプセル剤） 化合物い）５２、乳ｍ２．４６を及びヒドロキシゾロビ
ルセルロース０．０４１Ｐｅ各々とり、ｘ＜混合した徒
、常法に従って粒状に成形し、これをよく乾燥して虫１
１別Ｅ〜てビン、ヒートシール包装などに適した顆粒剤
を製造する。次に、酢酸フタル醪セルロース０．５Ｆ及
びヒドロギシグロビルメチルセルロースフタレート０．
５２を溶解シて被伊基利となし１、前記顆粒を浮遊流動
させつ＼この基材ｆ！：被覆して腸溶性の顆粒剤とする
。この耕酸物をカプセルに充填して腸溶性カプセル製剤
１００個を製造する。

試験例 第１表の化合物を用い、前記試験法［：１］　、　（２
）及び〔３〕より、それぞれフレンド白血病細胞（ＥＬ
Ｃ）の分化誘導率、マウス骨髄性白血病細胞（Ｍ　Ｌ　
Ｃ）の分化誘導によるリゾチーム活性及びマウス奇形腫
細１伺（Ｔ　Ｅ　Ｒ）の分化誘導程度を調べたところ、
それぞれ、第２表、第３表及び第４岩に示す結果が得ら
れた。

第　２　表 第　３　表 第　４　表 上記試験例の結果から明らかなように、本発明の有効成
分の各抽有効成分化合物は、癌細１１包に対して、止常
細１１包への分化誘導作用を示すことから、毒性の少な
い優れた制癌活性を示すことが立証きれた。

特許出願人　理化学研究所 第１頁の続き ■Ｉｎｔ、Ｃ１，４識別記号庁Ｍ 手続補正書（方式） 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示　昭和５９年特許願第３３７５６号２発
明の名称　制　癌　剤 ３、補正をする者 事件との関係　出願人 名称　（６７９）理化学研究所 ４、代理人

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）　力ｐｙ　コア　（ｃｈａｌｃｏｎｅ　）、ジヒ
   ドロカルコン（ｄｉｈｙｄｒｏｃｈａｌｃｏｎｅ　）　
   、　７ラバノン（イＩａｖａ−ｎｏｎｏ　）、イノフラ
   バノｙ　（ｌ５ｏｆｌａｖａｎｏｎｅ　）、ロテノトド
   （ｒｏｔｅｎｏｌｄ　）、インフラパン（Ｉｓｏ−ｆｌ
   ａｖａｎ　）、インフラペン（１ｓｏｆｌａｖｅｎｓ　
   ）、ゾテロ力ルパン（ｏｔｅｒｏｃａｒｐａｎ　）　＊
   　クメスタン（ｃｏｕｍｅｓｔａｎ　）　、　３−アリ
   ールクマリン（６−ａｒｙｌｃｏｕｍａｒｌｎ　）　の
   誘導体及びジメチルメラネイｙ　（ｄｌｍｅｔｈｙｌｍ
   ｅｌａｎｎｅｌｎ　）より選ばれる化合物を有効成分と
   して含有することを特徴とする制癌剤。
2. （２）非経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載
   の制癌剤。
3. （３）　経口投与形態による特許請求の範囲４４１項記
   載の制癌剤。