JPS59169497A - Ｌ−リジンの製造法 - Google Patents
Ｌ−リジンの製造法Info
- Publication number
- JPS59169497A JPS59169497A JP58043742A JP4374283A JPS59169497A JP S59169497 A JPS59169497 A JP S59169497A JP 58043742 A JP58043742 A JP 58043742A JP 4374283 A JP4374283 A JP 4374283A JP S59169497 A JPS59169497 A JP S59169497A
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- JP
- Japan
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- producing
- cultured
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるＬ−リジンの製造法に関し、さら
に詳しくは、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属に属し、Ｌ−リジン生産能を有し、かつ、バチ
ルス属細菌の生産する抗菌性物質に対し抵抗性を有する
菌株を栄養培地に培養し、培養物中にこれを生成せしめ
生成蓄積したＬ−リジンを該培養物から採取することを
特徴とする発−法によるし一リジンの製造法に関する。
に詳しくは、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属に属し、Ｌ−リジン生産能を有し、かつ、バチ
ルス属細菌の生産する抗菌性物質に対し抵抗性を有する
菌株を栄養培地に培養し、培養物中にこれを生成せしめ
生成蓄積したＬ−リジンを該培養物から採取することを
特徴とする発−法によるし一リジンの製造法に関する。
その目的は、医薬品あるいは飼料や食品への添加剤とし
て需要の大きいし一リジンを工業的安価に製造する方法
を提供することにある。
て需要の大きいし一リジンを工業的安価に製造する方法
を提供することにある。
本発明におけるバチルス属細菌の生産する抗菌性物質と
はバチドラジン、チオシリン、リケニフォルミンス、バ
シリシン、コリスタチン、ポルシリン、セレキシン、グ
ラミシジン、チロシジン。
はバチドラジン、チオシリン、リケニフォルミンス、バ
シリシン、コリスタチン、ポルシリン、セレキシン、グ
ラミシジン、チロシジン。
チーフックチン。コリスチン、プレボリン、サーキュリ
ンもしくは抗菌性酵素を意味する。
ンもしくは抗菌性酵素を意味する。
又抗菌性６ゲ素としてはサーモライシン、ズブチリシン
、ホスホリパーゼＡ、ホスホリパーゼＣ。
、ホスホリパーゼＡ、ホスホリパーゼＣ。
ホスホリパーゼＤ等が例示される。
従来、コリネバクテリウム、ブレビバクテリウム属の細
菌がＬ−リジンを生産すること、は知られている。また
、抗生物質耐性菌を用いる方法も知られている（ Ｕ、
Ｓ、Ｐ３６８７８１０ ）。
菌がＬ−リジンを生産すること、は知られている。また
、抗生物質耐性菌を用いる方法も知られている（ Ｕ、
Ｓ、Ｐ３６８７８１０ ）。
リジン生産における雑菌汚染は大きな問題で特に、連続
発酵においては汚染による収率低下の解決が要望されて
いる。その原因について検討の結果、多くは耐熱性胞子
を有するバチルス属の細菌の混入によってリジン生産菌
の生育が阻害されるためであることがわかった。この対
策としてバチルス属の生産する抗菌性物質に対して抵抗
性を有する変異株を用いることにより被害を大幅に軽減
できることを見い出した。
発酵においては汚染による収率低下の解決が要望されて
いる。その原因について検討の結果、多くは耐熱性胞子
を有するバチルス属の細菌の混入によってリジン生産菌
の生育が阻害されるためであることがわかった。この対
策としてバチルス属の生産する抗菌性物質に対して抵抗
性を有する変異株を用いることにより被害を大幅に軽減
できることを見い出した。
以下１本発明の詳細な説明する。
本発明方法では、コリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属し、バチルス属細菌の生産する抗菌性
物質に対して抵抗性を有するし−リジン生産菌株であれ
ば、いかなる菌株をも用いることができる。
クテリウム属に属し、バチルス属細菌の生産する抗菌性
物質に対して抵抗性を有するし−リジン生産菌株であれ
ば、いかなる菌株をも用いることができる。
かかる変異株は、Ｌ−リジン生産線に前記性質を付与す
ることによって得ることもできるし、逆に前記性質を有
する菌にリジン生産性を付与することによって得られる
。本発明に用いる菌株は上記のごとき性質の他にＬ−リ
ジン生産に寄与するいかなる性質を備えていてもよい。
ることによって得ることもできるし、逆に前記性質を有
する菌にリジン生産性を付与することによって得られる
。本発明に用いる菌株は上記のごとき性質の他にＬ−リ
ジン生産に寄与するいかなる性質を備えていてもよい。
本発明に用いられる菌株の例が以下に示される。
コリネバクテリウム・グルタミクム Ｈ−３３３０ＦＥ
ＲＭ Ｐ−６８１９Ｈ−３３１１ＦＥＲＭ Ｐ−６８２
０ 〃Ｈ−３３８６ＦＥＲＭ Ｐ−６８２２ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタムＨ−３３３１ＦＥＲＭ Ｐ
−６８２１ こ五らのうち、 Ｈ−３３３０，Ｈ−３３７１，Ｈ−３
３８６の菌株は、リジン生産能を有するコリネバクテリ
ウム・グルタミクム ＦＥＲＭ−ＢＰ−１５８（チアリ
ジン、ストレフトマイシン、リファンピシン及び６−ア
ザウラシルに抵抗性〕の細胞を０．１規定トリス・マレ
イン酸緩衝液（ｐＨ６，０）中に１０ 日Ｃｅ１ｌｓ／
ｍ＋の濃度に懸濁し、ここにＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ
−Ｎ−ニトロングアニジンを最終濃度０．２ｍｇ／ｍｌ
になるように添加し、室温で３０分間静置した後。
ＲＭ Ｐ−６８１９Ｈ−３３１１ＦＥＲＭ Ｐ−６８２
０ 〃Ｈ−３３８６ＦＥＲＭ Ｐ−６８２２ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタムＨ−３３３１ＦＥＲＭ Ｐ
−６８２１ こ五らのうち、 Ｈ−３３３０，Ｈ−３３７１，Ｈ−３
３８６の菌株は、リジン生産能を有するコリネバクテリ
ウム・グルタミクム ＦＥＲＭ−ＢＰ−１５８（チアリ
ジン、ストレフトマイシン、リファンピシン及び６−ア
ザウラシルに抵抗性〕の細胞を０．１規定トリス・マレ
イン酸緩衝液（ｐＨ６，０）中に１０ 日Ｃｅ１ｌｓ／
ｍ＋の濃度に懸濁し、ここにＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ
−Ｎ−ニトロングアニジンを最終濃度０．２ｍｇ／ｍｌ
になるように添加し、室温で３０分間静置した後。
バチドラジン（ＢＣＴ）５μｇ／ｍｌまたは、グラミシ
ジン（ＧＲＭ）５０μｇ／ｍｌを含む下記のごとき組成
を有する最少寒天平板培地と、サーモライシン（ＴＬ）
、５００μｇ／ｍｌを含む同様の寒天平板培地にそれぞ
れ塗布し、生育するコロニー必中から選択された変異株
であり、それぞれ、ＢＣＴ、ＧＲＭあるいは、ＴＬ抵抗
性を有する点で。
ジン（ＧＲＭ）５０μｇ／ｍｌを含む下記のごとき組成
を有する最少寒天平板培地と、サーモライシン（ＴＬ）
、５００μｇ／ｍｌを含む同様の寒天平板培地にそれぞ
れ塗布し、生育するコロニー必中から選択された変異株
であり、それぞれ、ＢＣＴ、ＧＲＭあるいは、ＴＬ抵抗
性を有する点で。
第１表に示すように親株と明らかに区別できる。
また、Ｈ−３３３１の菌株は、リジン生産能を有するブ
レビバクテリウム・ラクトファーメンタムＦＥＲＭ−Ｐ
６２０９ （チアリジン、ストレプトマイシン、リフ
ァンピシンに抵抗性、ロイシン要に区別できる。
レビバクテリウム・ラクトファーメンタムＦＥＲＭ−Ｐ
６２０９ （チアリジン、ストレプトマイシン、リフ
ァンピシンに抵抗性、ロイシン要に区別できる。
第 １ 表
上記最少寒天平板培地の組成ニゲルコース１０ｇ／β、
塩化アンモニウム４ ｇ ／ １ 、 Ｋ Ｈ２Ｐ
ＯａＩｇ／ｐ、に２ＨＰＯ４３ｇ／β、ＭｇＳＯ４７Ｈ
２００，４ｇ／Ｉ２．ＦｅＳＯ４７Ｈ２００，０１’ｇ
／ ｊ！、 ＭｎＳＯ４・４Ｈ２００，０１ｇ／β、尿
素２ ｇ／Ｉｔ、ビオチン５０μｇ／Ｃ寒天２０ｇ／Ｃ
Ｌ−ロイシン２００μｇ／ｍ１（ｐＨ７，２） 本発明に使用する培地組成としては使用菌株の利用しう
る炭素源窒素源無機物その他の必要な栄養素を程良く含
有するものであれば合成培地、天然培地のいずれも使用
できる。すなわち炭素源としてはグルコース、フラクト
ース、ソルビトール。
塩化アンモニウム４ ｇ ／ １ 、 Ｋ Ｈ２Ｐ
ＯａＩｇ／ｐ、に２ＨＰＯ４３ｇ／β、ＭｇＳＯ４７Ｈ
２００，４ｇ／Ｉ２．ＦｅＳＯ４７Ｈ２００，０１’ｇ
／ ｊ！、 ＭｎＳＯ４・４Ｈ２００，０１ｇ／β、尿
素２ ｇ／Ｉｔ、ビオチン５０μｇ／Ｃ寒天２０ｇ／Ｃ
Ｌ−ロイシン２００μｇ／ｍ１（ｐＨ７，２） 本発明に使用する培地組成としては使用菌株の利用しう
る炭素源窒素源無機物その他の必要な栄養素を程良く含
有するものであれば合成培地、天然培地のいずれも使用
できる。すなわち炭素源としてはグルコース、フラクト
ース、ソルビトール。
グリセロール、蔗糖、澱粉、澱粉加水分解物、糖蜜、果
汁などの各種炭水化物、酢酸、フマール酸。
汁などの各種炭水化物、酢酸、フマール酸。
乳酸、コハク酸などの有機酸、さらにエタノール。
メタノールなどのアルコール類も使用できる。窒素源と
しては、アンモニア、塩化アンモニウム。
しては、アンモニア、塩化アンモニウム。
硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニ
ウム等の各種無機酸のアンモニウム塩、尿素、アミン酸
、その他含窒素化合物、ならびにペプトン、肉エキス、
酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水
分解物、大豆粕酸加水゛分解物、各種発酵菌体およびそ
の消化物などが使用できる。さらに無機物としては、リ
ン酸第−カリウム、リン酸第二カリウム・リン酸マグネ
シウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一
鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウムなどが使用される。
ウム等の各種無機酸のアンモニウム塩、尿素、アミン酸
、その他含窒素化合物、ならびにペプトン、肉エキス、
酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水
分解物、大豆粕酸加水゛分解物、各種発酵菌体およびそ
の消化物などが使用できる。さらに無機物としては、リ
ン酸第−カリウム、リン酸第二カリウム・リン酸マグネ
シウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一
鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウムなどが使用される。
本発明に使用する微生物が生育のために特定の栄養素を
必要とする場合には、その栄養素を適当量培地中に存在
させなければならないが。
必要とする場合には、その栄養素を適当量培地中に存在
させなければならないが。
これらの物質は窒素源として例示した天然榔に含まれて
添加させる場合がある。また培地中に各種の添加物２例
えば各種抗生物質、α−アミノ酪酸。
添加させる場合がある。また培地中に各種の添加物２例
えば各種抗生物質、α−アミノ酪酸。
システィン、ロイシン、ロイシン発酵液あるいはアスパ
ラギン酸、グルタミン酸などを添加することによりＬ−
リジン生産量を増加させつる場合がある。培養は振盪培
養あるいは深部通気攪拌培養などの好気的条件下で行う
。培養温度は通常２０〜４０℃の範囲で、培地のｐＨは
３〜９の範囲で。
ラギン酸、グルタミン酸などを添加することによりＬ−
リジン生産量を増加させつる場合がある。培養は振盪培
養あるいは深部通気攪拌培養などの好気的条件下で行う
。培養温度は通常２０〜４０℃の範囲で、培地のｐＨは
３〜９の範囲で。
好ましくは中性付近に保持することが望ましいが。
これ以外の条件下でも使用菌株が生育すれば実施できる
。培地のｐＨ調節は炭酸カルシウム、酸あるいはアルカ
リ溶液、ｐＨ緩衝剤などによって行う。通常１〜６日間
で培養液中にＬ−リジンが生成蓄積する。
。培地のｐＨ調節は炭酸カルシウム、酸あるいはアルカ
リ溶液、ｐＨ緩衝剤などによって行う。通常１〜６日間
で培養液中にＬ−リジンが生成蓄積する。
培養終了後、培養液より菌体などの沈殿物を除去し、公
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法。
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法。
塩析法などを併用することにより、培養液からＬ−リジ
ンを回収するこ゛とができる。
ンを回収するこ゛とができる。
本発明を実施することによる効果としては雑菌汚染が発
生した場合の被害を大幅に軽減できることは言うまでも
なく、従来、雑菌汚染を防ぐため過剰な殺菌を行ってい
たのを最小限にすることができ、蒸気、エネルギーの大
幅な節約も可能となる。
生した場合の被害を大幅に軽減できることは言うまでも
なく、従来、雑菌汚染を防ぐため過剰な殺菌を行ってい
たのを最小限にすることができ、蒸気、エネルギーの大
幅な節約も可能となる。
以下、実施例をあげて本発明を具体的に示す。
実施例
種菌としてコリネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３
３０（ＢＣＴＲ）を用いる。
３０（ＢＣＴＲ）を用いる。
この菌株をグルコース４０ｇ／β、ＨＲ３ｇ／ｌ、ＫＨ
２’ＰＯ４１，５ｇ／ｊ！、に２ＨＰＯ４０、！５ ｇ
／β、 Ｍｇ５ｏ４・ｌＨ２Ｏ０，５ｇ／β。
２’ＰＯ４１，５ｇ／ｊ！、に２ＨＰＯ４０、！５ ｇ
／β、 Ｍｇ５ｏ４・ｌＨ２Ｏ０，５ｇ／β。
ビオチン５０μｇ／Ｃペプトン２０ ｇ／Ｌ酵母エキス
５ｇ／ｌからなる種培地（ｐ）Ｉ７．２）２０ｍｌを含
む３（１０ｍｌ容三角）“ヲースコに１２０℃、３０分
間オートクレーブ殺菌後接種し、３０℃２４時間培養す
る。
５ｇ／ｌからなる種培地（ｐ）Ｉ７．２）２０ｍｌを含
む３（１０ｍｌ容三角）“ヲースコに１２０℃、３０分
間オートクレーブ殺菌後接種し、３０℃２４時間培養す
る。
この培養液２ｍｌを廃糖蜜９０ｇ／β （グルコース換
算）、大豆粕酸加水分解物１０ｇ／ｊ！’（大豆粕重量
換算）、硫安２０ ｇ／Ｉｔ、尿素３ｇ／ρ。
算）、大豆粕酸加水分解物１０ｇ／ｊ！’（大豆粕重量
換算）、硫安２０ ｇ／Ｉｔ、尿素３ｇ／ρ。
ＭｇＳＯ４・７ Ｈ’２０ ０．５ ｇ ／ ｊ２ 、
Ｋ ２ ＨＰ Ｏ４Ｑ、 ７ ｇ ／ Ａ 、 Ｃａ
ＣＯ３’ ３０ ｇ ／ ｊ！からなる発酵培地（
ｐＨ７，２）２０ｎ＋］を含む３００ｍ１容三角フラス
コ （１２０℃、３０分間オートクレーブ殺菌）に接種
し、３０℃で３日間振盪培養する。培養液中にＬ−リジ
ン（塩酸塩として、以下同様）が４１．５ｇ／ｊ！生成
蓄積する。対照としてＦＥＲＭ−ＢＰ−１５８を用いる
他は上記と同様に実施して４１ｇ／βのリジンを得る。
Ｋ ２ ＨＰ Ｏ４Ｑ、 ７ ｇ ／ Ａ 、 Ｃａ
ＣＯ３’ ３０ ｇ ／ ｊ！からなる発酵培地（
ｐＨ７，２）２０ｎ＋］を含む３００ｍ１容三角フラス
コ （１２０℃、３０分間オートクレーブ殺菌）に接種
し、３０℃で３日間振盪培養する。培養液中にＬ−リジ
ン（塩酸塩として、以下同様）が４１．５ｇ／ｊ！生成
蓄積する。対照としてＦＥＲＭ−ＢＰ−１５８を用いる
他は上記と同様に実施して４１ｇ／βのリジンを得る。
一方、バチドラジン生産能を有するバチルス・ズブチリ
スＡＴＣＣ１４５９３を上記種培地で同様に培養し、５
００倍希釈しその１ｍｌを上記リジン生産菌の植菌時に
同時に植菌して同様に培養を行い、培養液中にＬ−リジ
ンが３３ｇ／Ｉｌ蓄積し。
スＡＴＣＣ１４５９３を上記種培地で同様に培養し、５
００倍希釈しその１ｍｌを上記リジン生産菌の植菌時に
同時に植菌して同様に培養を行い、培養液中にＬ−リジ
ンが３３ｇ／Ｉｌ蓄積し。
ＦＥＲＭ−Ｂ Ｐ１５８を培養すると１３．５ｇ／β
であった。
であった。
培養終了後、Ｈ−３３３０の汚染された培養液１βを遠
心分離して得た上清液を硫酸でｐＨ１〜５に調整した後
ダイヤイオン５Ｋ−ＩＢ（Ｈ＋型。
心分離して得た上清液を硫酸でｐＨ１〜５に調整した後
ダイヤイオン５Ｋ−ＩＢ（Ｈ＋型。
強酸性イオン交換樹脂の商品名、三菱化成社製）のカラ
ムクロマトに通塔してＬ−リジンを吸着させ、カラムを
水洗後、稀アンモニア水で溶出してＬ−リジンを含む両
分を集めて濃縮する。濃縮液を塩酸でｐＨ２に調整した
後、エタノールを添加しながら冷却することによりＬ−
リジンを晶出させ、Ｌ〜リジン塩酸塩の結晶２６．５
ｇを得た。
ムクロマトに通塔してＬ−リジンを吸着させ、カラムを
水洗後、稀アンモニア水で溶出してＬ−リジンを含む両
分を集めて濃縮する。濃縮液を塩酸でｐＨ２に調整した
後、エタノールを添加しながら冷却することによりＬ−
リジンを晶出させ、Ｌ〜リジン塩酸塩の結晶２６．５
ｇを得た。
実施例２゜
第２表に示す菌株を実施例１に示した種培地にそれぞれ
接種し３０℃で２４時間培養し、この培養液２ｍｌをグ
ルコース９０ｇ／Ｃ大豆粕酸加水分解物２０ｇ／７！
（大豆粕重量換算）、硫安２０ｇ／ｊ！、尿素３ ｇ
／ ７！、 Ｍ ｇ Ｓ Ｏａ ・７ Ｈ２００，５ｇ
／β、 Ｋ、Ｈ２Ｐ Ｏａ １ ｇ／ Ｉ！、
ビオチン５０、ｌｊｇ／ｌ）、”ｊイアミン・ＨＣｎ
２００ｐｇ／ｍｌ−、Ｆ ６ＳＯ４・７Ｈ２０１０ｍ
ｇ／ｌｌ、 Ｍｎ５Ｏａ ・４Ｈ２０１０■／１２．Ｃ
ａＣＯ２２０ｇ／ｉｔからなる発酵培地（ｐＨ７，２）
２０ｍｌを含む３’００ｍ１容三角フラスコ （１２０
℃、２０分オートクレーブ殺菌）に接種し、３０°Ｃで
３日間振盪培養を行って第２表に示す結果を得る。実施
例１と同様に培養したグラミシジン生産能を有するバチ
ルス・プレビスＡＴＣＣ８１８５を、 生ＪＩ菌に対し
て１／ｌ０００の比率植菌した時の結果を第２表に示す
。
接種し３０℃で２４時間培養し、この培養液２ｍｌをグ
ルコース９０ｇ／Ｃ大豆粕酸加水分解物２０ｇ／７！
（大豆粕重量換算）、硫安２０ｇ／ｊ！、尿素３ ｇ
／ ７！、 Ｍ ｇ Ｓ Ｏａ ・７ Ｈ２００，５ｇ
／β、 Ｋ、Ｈ２Ｐ Ｏａ １ ｇ／ Ｉ！、
ビオチン５０、ｌｊｇ／ｌ）、”ｊイアミン・ＨＣｎ
２００ｐｇ／ｍｌ−、Ｆ ６ＳＯ４・７Ｈ２０１０ｍ
ｇ／ｌｌ、 Ｍｎ５Ｏａ ・４Ｈ２０１０■／１２．Ｃ
ａＣＯ２２０ｇ／ｉｔからなる発酵培地（ｐＨ７，２）
２０ｍｌを含む３’００ｍ１容三角フラスコ （１２０
℃、２０分オートクレーブ殺菌）に接種し、３０°Ｃで
３日間振盪培養を行って第２表に示す結果を得る。実施
例１と同様に培養したグラミシジン生産能を有するバチ
ルス・プレビスＡＴＣＣ８１８５を、 生ＪＩ菌に対し
て１／ｌ０００の比率植菌した時の結果を第２表に示す
。
第 ２ 表
実施例３゜
第３表に示す菌株を用いる他は、実施例１と同様に培養
を行い、第３表に示す結果を得る。生産培地のオートク
レーブ殺菌を１００ ’ｃ ２０分にして同様に培養し
たときの結果も第３表に併せ、て示す。
を行い、第３表に示す結果を得る。生産培地のオートク
レーブ殺菌を１００ ’ｃ ２０分にして同様に培養し
たときの結果も第３表に併せ、て示す。
第 ３ 表
実施例４゜
種菌としてＨ，−３３３０および、ＦＥＲＭＢＰ−１５
８を用い、実施例１に示し九種培地１００ｍ１を含む２
１容パンフル付三角フラスコに接種し３０℃で２４時間
振盪培養する。この培養液１００ｍ１を、廃糖蜜１００
ｇ／Ａ！（グルコース換算）コーン・ステイープ・リカ
ー１０ｇ／Ｌ 硫安２０ｇ／ｉｌ！、に２ ＨＰＯ４，
１ｇ／ｊ！、Ｍｇ５Ｏａ ・７Ｈ２００，Ｓｇ／ｌ、Ｆ
ｅ５Ｏａ・７Ｈ２０５■／１からなる発酵培地（’ｐＨ
６，８） ６００ｒｌを含む２Ａ’容ジャーファーメン
タ−で３２℃、攪拌数９０Ｏｒｐｍ、通気ｔ １ ！ｌ
／ ｍｉｎで培養し。
８を用い、実施例１に示し九種培地１００ｍ１を含む２
１容パンフル付三角フラスコに接種し３０℃で２４時間
振盪培養する。この培養液１００ｍ１を、廃糖蜜１００
ｇ／Ａ！（グルコース換算）コーン・ステイープ・リカ
ー１０ｇ／Ｌ 硫安２０ｇ／ｉｌ！、に２ ＨＰＯ４，
１ｇ／ｊ！、Ｍｇ５Ｏａ ・７Ｈ２００，Ｓｇ／ｌ、Ｆ
ｅ５Ｏａ・７Ｈ２０５■／１からなる発酵培地（’ｐＨ
６，８） ６００ｒｌを含む２Ａ’容ジャーファーメン
タ−で３２℃、攪拌数９０Ｏｒｐｍ、通気ｔ １ ！ｌ
／ ｍｉｎで培養し。
培養中゛ｐＨを除菌したアンモニア水で６．８に制御す
る。初発の糖を消費した後は９次の組成のフィード液（
廃糖蜜２００ｇ／７！＜グルコース換算〉。
る。初発の糖を消費した後は９次の組成のフィード液（
廃糖蜜２００ｇ／７！＜グルコース換算〉。
硫安３０ｇ／β、ＫＨ２ＰＯ４０，５ｇ／Ｃｌ２Ｏ℃２
０分殺菌）を３０ ｍｌ／ ｈｒの速度で加える。発酵
槽の中の液量が１２００ｍ１を超えた時点から連続的に
３０ ｍｌ／ ｈｒの速度で無菌的に抜きとり、槽内の
液量を一定にする。いずれの菌株を用いても培養開始後
、５０時間目からし一リジンの蓄積量が８０ ｇ／７！
に達する。無菌度を維持できればＬ−リジン蓄積量８０
ｇ／ｎ以上を３６０時間以上持続が可能である。
０分殺菌）を３０ ｍｌ／ ｈｒの速度で加える。発酵
槽の中の液量が１２００ｍ１を超えた時点から連続的に
３０ ｍｌ／ ｈｒの速度で無菌的に抜きとり、槽内の
液量を一定にする。いずれの菌株を用いても培養開始後
、５０時間目からし一リジンの蓄積量が８０ ｇ／７！
に達する。無菌度を維持できればＬ−リジン蓄積量８０
ｇ／ｎ以上を３６０時間以上持続が可能である。
しかし、フィード液の殺菌条件を１００℃２０分にした
場合、ＦＥＲＭ ＢＰ−１５８株は、８０時間目です
でに１０ｇ／１．以下のリジン蓄積量になるが、、Ｈ−
３３３０株では１５０時間目まで７０ｇ／βを維持でき
る。
場合、ＦＥＲＭ ＢＰ−１５８株は、８０時間目です
でに１０ｇ／１．以下のリジン蓄積量になるが、、Ｈ−
３３３０株では１５０時間目まで７０ｇ／βを維持でき
る。
一方、フィード液の殺菌条件を１２０℃２０分として、
培養１００時間目に、実施例１と同様に培養したバチル
ス・ズブチリスＡＴＣＣ１４５９３を０．Ｌ＋＋＋１添
加した場合、ＦＥＲＭ ＢＰ、１５８株は、１２０時
間目で７０ｇ／ｊ！以下になるが。
培養１００時間目に、実施例１と同様に培養したバチル
ス・ズブチリスＡＴＣＣ１４５９３を０．Ｌ＋＋＋１添
加した場合、ＦＥＲＭ ＢＰ、１５８株は、１２０時
間目で７０ｇ／ｊ！以下になるが。
Ｈ−３３３０株は１９０時間まで７０ｇ／β以上を維持
することができる。
することができる。
特許出願人（１０２）協和醗酵工業株式会社代表者 木
下祝部
下祝部
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｆｉ＋ コリネバクテリウムまたはブレビバクテリウ
ムに属し、バチルス属細菌の生産する抗菌性物質に耐性
を有するし一リジン生産菌を栄養培地に培養し、培養液
中にＬ−リジンを生成せしめ。 培養液からし一リジンを採取することを特徴とするし一
リジンの製法 （２） 該抗菌性物質がｖ！累である特許請求の範囲
第１項記載の製法 （３）該抗菌酵素がサーモライシン、ズブチリシン。 ホスホリパーゼＡ、ホスホリパーゼＣ又はホスホリパー
ゼＤ′？′ある特許請求の範囲第２項記載の製法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58043742A JPS59169497A (ja) | 1983-03-16 | 1983-03-16 | Ｌ−リジンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58043742A JPS59169497A (ja) | 1983-03-16 | 1983-03-16 | Ｌ−リジンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59169497A true JPS59169497A (ja) | 1984-09-25 |
| JPH0458316B2 JPH0458316B2 (ja) | 1992-09-17 |
Family
ID=12672216
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58043742A Granted JPS59169497A (ja) | 1983-03-16 | 1983-03-16 | Ｌ−リジンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59169497A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5544597B1 (ja) * | 1969-06-09 | 1980-11-13 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IN153057B (ja) * | 1978-09-21 | 1984-05-26 | British Petroleum Co |
-
1983
- 1983-03-16 JP JP58043742A patent/JPS59169497A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5544597B1 (ja) * | 1969-06-09 | 1980-11-13 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0458316B2 (ja) | 1992-09-17 |
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