JPS58175487A - 改質微生物レンネツト及びその製法 - Google Patents
改質微生物レンネツト及びその製法Info
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- JPS58175487A JPS58175487A JP57057211A JP5721182A JPS58175487A JP S58175487 A JPS58175487 A JP S58175487A JP 57057211 A JP57057211 A JP 57057211A JP 5721182 A JP5721182 A JP 5721182A JP S58175487 A JPS58175487 A JP S58175487A
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- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
- A23C19/0326—Rennet produced by fermentation, e.g. microbial rennet; Rennet produced by genetic engineering
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/58—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from fungi
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、優れた改善性質金有する改質微生物レンネッ
ト及びこのようなレンネットを製造するための方法に関
し、とくに従来公知の微生物レンネット或はその改質処
理物とは区別される特性として低ＰＡ ／Ｍ ＣＡ比で
且つむしろＭＣＡが活性化された高ＭＣＡ＊性を有する
改質微生物レンネット及びその製法に関する。
ト及びこのようなレンネットを製造するための方法に関
し、とくに従来公知の微生物レンネット或はその改質処
理物とは区別される特性として低ＰＡ ／Ｍ ＣＡ比で
且つむしろＭＣＡが活性化された高ＭＣＡ＊性を有する
改質微生物レンネット及びその製法に関する。
ψに詳しくは、本発明は、未処理微生物レンネットのＰ
Ａ（蛋白分解活性）／ＭＣＡ（＃乳活性）比を１００と
した時のＰＡ／ＭＣＡの指数が５０〜８０であって且つ
該未処理微生物レンネットのＭ（：Ａｌｋｌｏｏとした
時のＭＣＡの指数が少なくとも１００である低ＰＡ／Ｍ
ＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化し九高ＭＣＡ改質微生
物レンネットに関する。又更に、本発明は上記の如き改
質微生物レンネットを、容易に提供できる方法、とくに
、微生物レンネットをジカルボン酸無水物でアシル化処
理すること全特徴とするＰＡ／ＭＣＡ比の低下された改
質微生物レンネットの製法にも関する。
Ａ（蛋白分解活性）／ＭＣＡ（＃乳活性）比を１００と
した時のＰＡ／ＭＣＡの指数が５０〜８０であって且つ
該未処理微生物レンネットのＭ（：Ａｌｋｌｏｏとした
時のＭＣＡの指数が少なくとも１００である低ＰＡ／Ｍ
ＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化し九高ＭＣＡ改質微生
物レンネットに関する。又更に、本発明は上記の如き改
質微生物レンネットを、容易に提供できる方法、とくに
、微生物レンネットをジカルボン酸無水物でアシル化処
理すること全特徴とするＰＡ／ＭＣＡ比の低下された改
質微生物レンネットの製法にも関する。
チーズの製造には、仔牛の第四−からのレンネット（＃
乳啼素）が古くから実用に供されてきたが、近年、チー
ズ消費の増大及び食肉消費増大のため、量的にも価格的
にも、仔牛レンネットに代わる凝乳酵素の開発が切望さ
れ、所謂１微生物レンネツト”（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｒｅｎｎｅｔ）が注目され且つ実用に供されている。
乳啼素）が古くから実用に供されてきたが、近年、チー
ズ消費の増大及び食肉消費増大のため、量的にも価格的
にも、仔牛レンネットに代わる凝乳酵素の開発が切望さ
れ、所謂１微生物レンネツト”（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｒｅｎｎｅｔ）が注目され且つ実用に供されている。
このような微生物レンネットの例として、ムコール（Ｍ
ｕｃｏｒ） Ｈに属する凝乳蝉素生産菌たとえばムコー
ル・プシルス（Ｍｕｃｏｒ ｐｕｓｉ目ｕｓ）が生産す
るムコール・プシルス微生物レンネットやムコール・ミ
ーヘイ（Ｍｕｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）が生産するムコー
ル・ミーヘイ微生物レンネット等が知られてをり且つ実
用に供されている。
ｕｃｏｒ） Ｈに属する凝乳蝉素生産菌たとえばムコー
ル・プシルス（Ｍｕｃｏｒ ｐｕｓｉ目ｕｓ）が生産す
るムコール・プシルス微生物レンネットやムコール・ミ
ーヘイ（Ｍｕｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）が生産するムコー
ル・ミーヘイ微生物レンネット等が知られてをり且つ実
用に供されている。
レンネットは蛋白分解酵素の一種であるが、その特徴的
な性質として、Ｋ−カゼインの特定部位を切断して凝乳
現象を惹き起す凝乳活性（Ｍｉｌｋｃｌｏｔｔｉｎｇ
ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＭＣＡ）で示される特異的蛋白分解
活性と、非特異的な蛋白分解活性（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔ
ｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＰＡ）との両者の活性を有す
る。チーズ製造に用いるレンネットの最も重要な性質は
、ＭＣＡが高く且つＰＡが低いこと、すなわち、ＰＡ／
ＭＣＡ比が低いことであって、ＰＡ／ＭＣＡ比が高い場
合には、カード収率の低下、形成されるチーズに不都合
な苦味発生、テキスチャー（組織→悪化などの品質上の
トラブルを生ずる等の欠陥がある。
な性質として、Ｋ−カゼインの特定部位を切断して凝乳
現象を惹き起す凝乳活性（Ｍｉｌｋｃｌｏｔｔｉｎｇ
ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＭＣＡ）で示される特異的蛋白分解
活性と、非特異的な蛋白分解活性（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔ
ｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＰＡ）との両者の活性を有す
る。チーズ製造に用いるレンネットの最も重要な性質は
、ＭＣＡが高く且つＰＡが低いこと、すなわち、ＰＡ／
ＭＣＡ比が低いことであって、ＰＡ／ＭＣＡ比が高い場
合には、カード収率の低下、形成されるチーズに不都合
な苦味発生、テキスチャー（組織→悪化などの品質上の
トラブルを生ずる等の欠陥がある。
（１ｍレンネットの開発は、仔牛レンネットの供給の屯
路を克服し得るものとして画期的な開発であったが、そ
の実用化に際して、仔牛レンネットに比べてＰＡ／ＭＣ
Ａ比が比較的高いという難点がある。そして、従来、よ
りＰＡ／ＭＣＡ比の低い微生物レンネツ）ｔ−生産し得
る微生物のスクリーニングに努力が払われてきた。しか
しながら、このような努力の結果、実用に供されるよう
になったムコール・プシルス微生物レンネットやムコー
ル・ミーヘイ微生物レンネットに於て本、仔牛レンネッ
トに比してなおＰ Ａ／Ｍ ＣＡ比は高く、より低いＰ
Ａ／ＭＣＡ比の微生物レンネットの開発が望まれている
。
路を克服し得るものとして画期的な開発であったが、そ
の実用化に際して、仔牛レンネットに比べてＰＡ／ＭＣ
Ａ比が比較的高いという難点がある。そして、従来、よ
りＰＡ／ＭＣＡ比の低い微生物レンネツ）ｔ−生産し得
る微生物のスクリーニングに努力が払われてきた。しか
しながら、このような努力の結果、実用に供されるよう
になったムコール・プシルス微生物レンネットやムコー
ル・ミーヘイ微生物レンネットに於て本、仔牛レンネッ
トに比してなおＰ Ａ／Ｍ ＣＡ比は高く、より低いＰ
Ａ／ＭＣＡ比の微生物レンネットの開発が望まれている
。
このような要望にこたえる微生物レンネット生産１１１
１に探索する努力も続けられているが、未だ満足し得る
結果は得られていないのが実情である。
１に探索する努力も続けられているが、未だ満足し得る
結果は得られていないのが実情である。
一方、微生物レンネット技術分野における他の技術課題
として、微生物レンネットを用い九凝乳処理物のチーズ
製造に用いるカード（ｃａｒｄ）部分から分離されたホ
エー（ｗｈｅｙ）部分は、加熱殺菌処理したのち、例え
ば乳菓子類その他の各種の加工食品類などに有用な添加
物として利用されるが、微生物レンネット例えばムコー
ル・ミーヘイレンネットの熱安定性が高いために、該加
熱殺菌処理によって充分な失活を生ぜず、その結果、乳
凝固を生じて、該ホエ一部分の利用に不都合な制約を受
けるという技術課題がある。
として、微生物レンネットを用い九凝乳処理物のチーズ
製造に用いるカード（ｃａｒｄ）部分から分離されたホ
エー（ｗｈｅｙ）部分は、加熱殺菌処理したのち、例え
ば乳菓子類その他の各種の加工食品類などに有用な添加
物として利用されるが、微生物レンネット例えばムコー
ル・ミーヘイレンネットの熱安定性が高いために、該加
熱殺菌処理によって充分な失活を生ぜず、その結果、乳
凝固を生じて、該ホエ一部分の利用に不都合な制約を受
けるという技術課題がある。
上記他の技術課題であるホエ一部分の利用に際して微生
物レンネットの熱安定性が高すぎる点を改善する目的で
、微生物レンネットの熱安定性を低下させる幾つかの提
案が知られている。
物レンネットの熱安定性が高すぎる点を改善する目的で
、微生物レンネットの熱安定性を低下させる幾つかの提
案が知られている。
このような微生物レンネットの熱安定性低下方法の提案
として、過酸化水素もしくは過酸化水素発生物質で処理
する提案（特開昭５５−７０９２号）、たとえば過塩素
酸、過ホウ素酸、過臭素酸、過ヨウ素酸、過酸化物、過
酢酸、次亜塩素酸塩などで酸化処理する提案（特開昭５
６−８５２８６号、特開昭５６−５００５２０号など）
、更には、光増感剤の存在下に光酸化処理する提案（特
開昭５６−４５１９２号）などの提案が知られている。
として、過酸化水素もしくは過酸化水素発生物質で処理
する提案（特開昭５５−７０９２号）、たとえば過塩素
酸、過ホウ素酸、過臭素酸、過ヨウ素酸、過酸化物、過
酢酸、次亜塩素酸塩などで酸化処理する提案（特開昭５
６−８５２８６号、特開昭５６−５００５２０号など）
、更には、光増感剤の存在下に光酸化処理する提案（特
開昭５６−４５１９２号）などの提案が知られている。
父更に、微生物レンネットの熱安定性低下方法の他の提
案として、英国特許出願公開ＧＢＺＯ３８，３３９Ａ
（）”イツｌＮ０ＬＳ４２，９５１．７９３ ；対応米
国出願Ｓｅｒ、４９７３９３７ ：Ｃｈｅｍ。
案として、英国特許出願公開ＧＢＺＯ３８，３３９Ａ
（）”イツｌＮ０ＬＳ４２，９５１．７９３ ；対応米
国出願Ｓｅｒ、４９７３９３７ ：Ｃｈｅｍ。
Ａｂｓｔ、、 Ｖｏｌ、 ９３、Ｐ、２７７．１２７９
９２ａ）には、ＣＴＣｓモノカルボン酸無水物で微生物
レンネツ）ｋアシル化処理して熱安定性を低下させる方
法が提案されている。
９２ａ）には、ＣＴＣｓモノカルボン酸無水物で微生物
レンネツ）ｋアシル化処理して熱安定性を低下させる方
法が提案されている。
上記熱安定性低下の諸提案に於ては、未処理微生物レン
ネットのＭＣＡｔ−維持し、すなわち高いＭ ＣＡ活性
回収率をもって、ＰＡ／ＭＣＡ比の低下された改質微生
物レンネットを提供しようという意図については勿論の
こと、ＰＡ／ＭＣＡ比を低下させようという企図は全く
開示されていない。
ネットのＭＣＡｔ−維持し、すなわち高いＭ ＣＡ活性
回収率をもって、ＰＡ／ＭＣＡ比の低下された改質微生
物レンネットを提供しようという意図については勿論の
こと、ＰＡ／ＭＣＡ比を低下させようという企図は全く
開示されていない。
本発明者等は、微生物レンネットの使用に際して、この
ようなホエ一部分の利用に於ける熱安定性が高すぎると
いう技術課題とは別異の技術課題、すなわち、前述した
ように、微生物レンネットを用いてチーズの製造する場
合のカード収率の低下、苦味発生、テキスチャー悪化な
どのチーズの収量及び品質上の技術課題を解決すべく研
究を行ってきた。
ようなホエ一部分の利用に於ける熱安定性が高すぎると
いう技術課題とは別異の技術課題、すなわち、前述した
ように、微生物レンネットを用いてチーズの製造する場
合のカード収率の低下、苦味発生、テキスチャー悪化な
どのチーズの収量及び品質上の技術課題を解決すべく研
究を行ってきた。
その結果、微生物レンネットヲ、ジカルボン酸無水物と
くには炭素数４のジカルボン酸無水物でアシル化処理す
ることによって、未処理微生物レンネットのＭＣＡを維
持し、それどころか、むしろＭＣＡ７向上させ且つチー
ズ製造における微生物レンネット利用のトラブルとなる
ＦＡ／ＭＣＡ比が仔牛レンネットのそれに比して高すぎ
るという欠陥が有利に克服された改善特性を示すという
従来未知の低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化
された高ＭＣＡの改質微生物レンネットが提供できるこ
とを発見した。
くには炭素数４のジカルボン酸無水物でアシル化処理す
ることによって、未処理微生物レンネットのＭＣＡを維
持し、それどころか、むしろＭＣＡ７向上させ且つチー
ズ製造における微生物レンネット利用のトラブルとなる
ＦＡ／ＭＣＡ比が仔牛レンネットのそれに比して高すぎ
るという欠陥が有利に克服された改善特性を示すという
従来未知の低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化
された高ＭＣＡの改質微生物レンネットが提供できるこ
とを発見した。
本発明者等の研究によれば、上記ジカルボン酸無水物に
よるアシル化処理によって、前記の微生物レンネットの
熱不安定化のために、微生物レンネットｔｃ＋ Ｃｍ
モノカルボン酸無水物でアシル化処理する英国特許出願
公開（３Ｂ ２，０３８，３３９Ａの提案に於ては、全
く意図されて奢らず且つ全く言及されていないＰＡ／Ｍ
ＣＡ比の顕著な低下が達成できるという予想外且つ驚く
べき優れた改善と共に、該提案に於ては、その全実施例
に示されているＭＣＡ、すなわち未処理微生物レンネッ
トのＭ（：Ａ（（１００としたときのＭＣＡの指数（活
性収率％と表わされている）が、１１（Ｅｘａｍｐｌｅ
、 ３の３番目の例）乃至７４（Ｅｘａｍｐｌｅ ７の
１ａ目の例）と顕著に低下している事実からは、全く予
想外且つ篤くべきことに、未処理微生物レンネットのＭ
ＣＡの実質的な低下を伴わず、それどころか、ｔ、ｔＬ
ろＭＣＡの増大を伴うという事実が発見され九。
よるアシル化処理によって、前記の微生物レンネットの
熱不安定化のために、微生物レンネットｔｃ＋ Ｃｍ
モノカルボン酸無水物でアシル化処理する英国特許出願
公開（３Ｂ ２，０３８，３３９Ａの提案に於ては、全
く意図されて奢らず且つ全く言及されていないＰＡ／Ｍ
ＣＡ比の顕著な低下が達成できるという予想外且つ驚く
べき優れた改善と共に、該提案に於ては、その全実施例
に示されているＭＣＡ、すなわち未処理微生物レンネッ
トのＭ（：Ａ（（１００としたときのＭＣＡの指数（活
性収率％と表わされている）が、１１（Ｅｘａｍｐｌｅ
、 ３の３番目の例）乃至７４（Ｅｘａｍｐｌｅ ７の
１ａ目の例）と顕著に低下している事実からは、全く予
想外且つ篤くべきことに、未処理微生物レンネットのＭ
ＣＡの実質的な低下を伴わず、それどころか、ｔ、ｔＬ
ろＭＣＡの増大を伴うという事実が発見され九。
よく知られているように、仔牛レンネットに於ては、非
特異的蛋白分解活性ＰＡが小さく、特異的蛋白分解活性
（ｌｉ！乳活性）ＭＣＡが大で、ＰＡ／−ＭＣＡが好都
合に小さい利点があるのく対して、微生物レンネットに
於てはＰＡもＭＣＡも大きく、仔牛レンネットに比して
ＰＡ／ＭＣＡが大きいため、前述したような技術的トラ
ブルがあったが、本発明者等の研究によって、上述のと
おり、ジカルボン酸無水物によるアシル化処理という容
易な手段によって、ＭＣＡの低下を伴うことなしに、む
しろＭＣＡの増大を伴ってＰＡｔ−選択的に低下させる
ことができるという全く予轡外且っ驚くべき事実が発見
された。
特異的蛋白分解活性ＰＡが小さく、特異的蛋白分解活性
（ｌｉ！乳活性）ＭＣＡが大で、ＰＡ／−ＭＣＡが好都
合に小さい利点があるのく対して、微生物レンネットに
於てはＰＡもＭＣＡも大きく、仔牛レンネットに比して
ＰＡ／ＭＣＡが大きいため、前述したような技術的トラ
ブルがあったが、本発明者等の研究によって、上述のと
おり、ジカルボン酸無水物によるアシル化処理という容
易な手段によって、ＭＣＡの低下を伴うことなしに、む
しろＭＣＡの増大を伴ってＰＡｔ−選択的に低下させる
ことができるという全く予轡外且っ驚くべき事実が発見
された。
従って、本発明の目的は従来未知の特性を示す低ＰＡ／
ＭＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化された高ＭＣＡ改質
微生物しンネ゛ットを提供するにある。
ＭＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化された高ＭＣＡ改質
微生物しンネ゛ットを提供するにある。
本発明の他の目的は、このような改質微生物レンネット
ヲ提供できる方法を提供するにある。
ヲ提供できる方法を提供するにある。
本発明の上記目的及び更に多くの他の目的ならびに利点
は、以下の記載から−Ｈ＠明らかとなるであろう。
は、以下の記載から−Ｈ＠明らかとなるであろう。
本発明の従来公知文献未記載の低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむ
しろＩＶＩＣＡの活性化された高ＭＣＡ改質微生物レン
ネットは、未処理微生物レンネットのＰＡ／ＭＣＡ比ｔ
−１００（撃）とした時のＰＡ／ＭＣＡの指数が５０〜
８ｏ（％を付して示すことがある）であって且つ該未処
理微生物レンネットのＭＣＡを１００とし九時のＭＣＡ
の指数が少なくとも１００（％會付して示すことがある
）である特性を有する。
しろＩＶＩＣＡの活性化された高ＭＣＡ改質微生物レン
ネットは、未処理微生物レンネットのＰＡ／ＭＣＡ比ｔ
−１００（撃）とした時のＰＡ／ＭＣＡの指数が５０〜
８ｏ（％を付して示すことがある）であって且つ該未処
理微生物レンネットのＭＣＡを１００とし九時のＭＣＡ
の指数が少なくとも１００（％會付して示すことがある
）である特性を有する。
このような改質微生物レンネットは、微生物レンネット
ラジカルボン酸無水物でアシル化処理することによって
製造することができる。原料微生物レンネットとしては
、微生物レンネット生竜醒ムコール・ブシルス（Ｍｕｃ
ｏｒ ｐｕｓｉｌｌｕｓ）、ムコール・ミーヘイ（Ｍｕ
ｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）、エンドチア・・パラシチカ（
ｇｎｄｏｔｈｉａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）などの生産
した公知微生物レンネツ）Ｑ例示でき、これに微生物レ
ンネットは商業的に入手することができる。これら微生
物レンネットの中でも、ムコール属微生物レンネットの
利用が好ましく、ムコール・ブシルス微生物しンネット
及ヒムコール・ミーヘイ微生物レンネットを好ましく例
示できる。
ラジカルボン酸無水物でアシル化処理することによって
製造することができる。原料微生物レンネットとしては
、微生物レンネット生竜醒ムコール・ブシルス（Ｍｕｃ
ｏｒ ｐｕｓｉｌｌｕｓ）、ムコール・ミーヘイ（Ｍｕ
ｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）、エンドチア・・パラシチカ（
ｇｎｄｏｔｈｉａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）などの生産
した公知微生物レンネツ）Ｑ例示でき、これに微生物レ
ンネットは商業的に入手することができる。これら微生
物レンネットの中でも、ムコール属微生物レンネットの
利用が好ましく、ムコール・ブシルス微生物しンネット
及ヒムコール・ミーヘイ微生物レンネットを好ましく例
示できる。
父、アシル化処理に用いるジカルボン酸無水物としては
、無水マレイン酸、無水コハク酸、無水フタル酸などを
例示できるが、無水マレイン酸及び／又は無水コハク酸
の如き炭素数４のジカルボン酸無水物の利用が好ましい
。
、無水マレイン酸、無水コハク酸、無水フタル酸などを
例示できるが、無水マレイン酸及び／又は無水コハク酸
の如き炭素数４のジカルボン酸無水物の利用が好ましい
。
アシル化処理は、水性媒体中で、上記例示の如き微生物
レンネットと上記例示の如きジカルボン酸無水物とを接
触させることにより行うことができる。遼当な緩衝剤（
バッファー）の共存下で行うのが好オしい。
レンネットと上記例示の如きジカルボン酸無水物とを接
触させることにより行うことができる。遼当な緩衝剤（
バッファー）の共存下で行うのが好オしい。
アシル化処理の実施に際して、アシル化剤の種類及び添
加条件、緩衝剤の種類及び濃度、原料微生物レンネット
の種類及び濃度、ｐＨ１温度などは適宜に選択でき、所
望のＰＡ／ＭＣＡ比の低下率〔未処理微生物レンネット
のＦＡ／ＭＣＡ比會１００とした時の改質微生物レンネ
ットのＰＡ／ＭＣＡの指数を１００から差引いた残り（
％を付して表わす）〕などに応じて、実験的に容易に選
択設定することができる。
加条件、緩衝剤の種類及び濃度、原料微生物レンネット
の種類及び濃度、ｐＨ１温度などは適宜に選択でき、所
望のＰＡ／ＭＣＡ比の低下率〔未処理微生物レンネット
のＦＡ／ＭＣＡ比會１００とした時の改質微生物レンネ
ットのＰＡ／ＭＣＡの指数を１００から差引いた残り（
％を付して表わす）〕などに応じて、実験的に容易に選
択設定することができる。
ｐＨ条件としては、例えばｐＨ約４〜約ｌＯより好まし
くは約７〜９程度の９Ｈ条件金例示できる。父、ｐＨ調
節剤としては、例えば、０．１〜４Ｎ塩酸、５〜５０Ｖ
／Ｙ％酢酸、０．１〜４Ｎ水酸化ナトリウム、０．１〜
２Ｍ炭酸ナトリウムなどの如き、アルカリもしくは酸を
例示することができる。父、アシル化処理温度としては
、室温であってよく、例えば約００〜約４０℃、より好
ましくは約０６〜約２５℃の如き温度条件を例示するこ
とができる。費に、原料微生物し／ネットの濃度として
は、蛋白質濃度として、例えば約０．１〜約１０Ｗ／Ｖ
９（、！ Ｃ好ｔ ｔ、＜は約０．５〜約３Ｗ／Ｖにの
如き濃度を例示することができる。父更に、アシル化剤
の添加条件としては、攪拌条件下に少量づつ連続的もし
くは回分式分割添加で行う態様を例示することができ、
その添加量としては、例えば蛋白質に対して約０．１〜
約２．９Ｗ／Ｗの如き添加量を例示することができる。
くは約７〜９程度の９Ｈ条件金例示できる。父、ｐＨ調
節剤としては、例えば、０．１〜４Ｎ塩酸、５〜５０Ｖ
／Ｙ％酢酸、０．１〜４Ｎ水酸化ナトリウム、０．１〜
２Ｍ炭酸ナトリウムなどの如き、アルカリもしくは酸を
例示することができる。父、アシル化処理温度としては
、室温であってよく、例えば約００〜約４０℃、より好
ましくは約０６〜約２５℃の如き温度条件を例示するこ
とができる。費に、原料微生物し／ネットの濃度として
は、蛋白質濃度として、例えば約０．１〜約１０Ｗ／Ｖ
９（、！ Ｃ好ｔ ｔ、＜は約０．５〜約３Ｗ／Ｖにの
如き濃度を例示することができる。父更に、アシル化剤
の添加条件としては、攪拌条件下に少量づつ連続的もし
くは回分式分割添加で行う態様を例示することができ、
その添加量としては、例えば蛋白質に対して約０．１〜
約２．９Ｗ／Ｗの如き添加量を例示することができる。
又、緩衝剤の例としては、例えば０．０５〜０．２ Ｍ
酢酸ナトリウム緩衝液、０．０５〜０．２Ｍリン酸二ナ
トリウム／クエン酸緩衝液、０．０５〜０．２ Ｍ ＋
７ン酸緩衝液、０．１〜０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム／
水酸化ナトリウム緩衝液、０．１〜０．５Ｍ炭酸水素ナ
トリウム／炭酸ナトリウム緩衝液、ピロリン酸ナトリウ
ム緩衝液などを例示することができる。
酢酸ナトリウム緩衝液、０．０５〜０．２Ｍリン酸二ナ
トリウム／クエン酸緩衝液、０．０５〜０．２ Ｍ ＋
７ン酸緩衝液、０．１〜０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム／
水酸化ナトリウム緩衝液、０．１〜０．５Ｍ炭酸水素ナ
トリウム／炭酸ナトリウム緩衝液、ピロリン酸ナトリウ
ム緩衝液などを例示することができる。
所望のアシル化処理後、例えば、０．１〜４Ｎ水酸化ナ
トリウム、０．１〜２Ｍ炭酸ナトリウム、０．１〜４Ｎ
塩酸、５〜５ｏ■／ｖ％酢酸などの如き中和剤を用いて
、処理系ＯｐＨを改質微生物レンネットの安定ｐＨ例え
ば約５．０〜約５．５ｓ度に中和してアシル化反応を停
止し、所望により、脱塩処理、例えば、透析、限外濾過
、ゲル濾過などの如き処理を施して、改質微生物レンネ
ットを得ることができる。
トリウム、０．１〜２Ｍ炭酸ナトリウム、０．１〜４Ｎ
塩酸、５〜５ｏ■／ｖ％酢酸などの如き中和剤を用いて
、処理系ＯｐＨを改質微生物レンネットの安定ｐＨ例え
ば約５．０〜約５．５ｓ度に中和してアシル化反応を停
止し、所望により、脱塩処理、例えば、透析、限外濾過
、ゲル濾過などの如き処理を施して、改質微生物レンネ
ットを得ることができる。
上述のようにして得ることのできる本発明の改質微生物
レンネットは、未処理微生物レンネットのＰＡ／ＭＣＡ
比ｔｌｏｏとし走時のＰ Ａ ／ＭＣＡの指数が例えば
８０以下、好ましくは５０〜８゜であって且つ該未処理
微生物レンネットのＭＣＡを１００とし走時のＭＣＡの
指数が例えば少なくとも１００、好ましくは１００〜１
５０という新し、い特性を示す低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむ
しろＭＣＡの活性化された高ＭＣＡの改質微生物レンネ
ットである。
レンネットは、未処理微生物レンネットのＰＡ／ＭＣＡ
比ｔｌｏｏとし走時のＰ Ａ ／ＭＣＡの指数が例えば
８０以下、好ましくは５０〜８゜であって且つ該未処理
微生物レンネットのＭＣＡを１００とし走時のＭＣＡの
指数が例えば少なくとも１００、好ましくは１００〜１
５０という新し、い特性を示す低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむ
しろＭＣＡの活性化された高ＭＣＡの改質微生物レンネ
ットである。
本発明の低ＰＡ／ＭＣＡ比且つむしろＭＣＡの活性化さ
れた高ＭＣＡ改質微生物レンネットは、通常、該レンネ
ット１モル当り少なくとも４モルのジカルボン酸アシル
基を有するのが普通である。
れた高ＭＣＡ改質微生物レンネットは、通常、該レンネ
ット１モル当り少なくとも４モルのジカルボン酸アシル
基を有するのが普通である。
核アシル基の量は、使用したジカルボン酸無水物の１類
やアシル化条件などによっても変化するが、例えば、４
〜２０モル程度である。
やアシル化条件などによっても変化するが、例えば、４
〜２０モル程度である。
−例を示すと、マレイル化の場合、ｎ製改質微生物レン
ネットについて、Ｍ、 Ｈ，Ｆｒｅｅｄｍａｎら；Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ７． １９４ ＩＮ（１９
６８）に記載の方法で測定して、し／ネット１モル当り
マレイル基４モル以上、タトえば４〜２０モル、好まし
くＩＩ′ｉ４〜１７モル程度のマレイン基が栓用される
。父、他の一例を示する、スクシニル化の場曾、精製改
質微生物レンネットについて、Ｍ。
ネットについて、Ｍ、 Ｈ，Ｆｒｅｅｄｍａｎら；Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ７． １９４ ＩＮ（１９
６８）に記載の方法で測定して、し／ネット１モル当り
マレイル基４モル以上、タトえば４〜２０モル、好まし
くＩＩ′ｉ４〜１７モル程度のマレイン基が栓用される
。父、他の一例を示する、スクシニル化の場曾、精製改
質微生物レンネットについて、Ｍ。
Ｈ，Ｋｌａｐｐｅｒら； Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎ
ｚｙｍｏｌｏｇｙ。
ｚｙｍｏｌｏｇｙ。
ＶＯｌ、２５．５３１負、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓ
ｓ 。
ｓ 。
Ｎ２ｗ Ｙｏｒｋ、 １９７２年に記載の方法でスク
シニル基を脱離させ、形成された遊離コハク酸’ｉ、］
。
シニル基を脱離させ、形成された遊離コハク酸’ｉ、］
。
Ｒ，′ｖｖｉｌｌｉａｍｓｏｎ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ
ＥｎｚｙｍａｔｉｃＡｎａｌｙｓｉｓＳＶｏｌ、 ３
．１６１６頁、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ 、 ２ｎｄ ＥｎｇｌｉｓｈＥｄｉｔｉｏｎ
、 １９７４年に記載の方法で測定して、レンネット
１モル当抄スクシニル基８モル以上、たとえば８〜１５
モル、好ましくは８〜１２モル程度のスクシニル基が検
出される。
ＥｎｚｙｍａｔｉｃＡｎａｌｙｓｉｓＳＶｏｌ、 ３
．１６１６頁、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ 、 ２ｎｄ ＥｎｇｌｉｓｈＥｄｉｔｉｏｎ
、 １９７４年に記載の方法で測定して、レンネット
１モル当抄スクシニル基８モル以上、たとえば８〜１５
モル、好ましくは８〜１２モル程度のスクシニル基が検
出される。
本発明の改質微生物レンネットは、その低ＰＡ／ＭＣＡ
比且つ高ＭＣＡの特性のために、従来の微生物レンネッ
トによるチーズ１造に於けるカード収率の低下、苦味発
生、テキスチャー悪化などのトラブルを克服できるユニ
ークな改質微生物レン・嘴ネットとして啄めて有用であ
る。
比且つ高ＭＣＡの特性のために、従来の微生物レンネッ
トによるチーズ１造に於けるカード収率の低下、苦味発
生、テキスチャー悪化などのトラブルを克服できるユニ
ークな改質微生物レン・嘴ネットとして啄めて有用であ
る。
以下、実施例により、本発明改質微生物レンネット及び
その製造の数態様について、更に詳しく説明する。
その製造の数態様について、更に詳しく説明する。
同、本発明に於て、ＰＡ（非特異的蛋白分解活性）及び
ＭＣＡ （凝乳活性；特異的蛋白分解活性）の測定決定
は、下記測定法による。
ＭＣＡ （凝乳活性；特異的蛋白分解活性）の測定決定
は、下記測定法による。
ＭＣＡニー
岩崎慎二部ら；Ａｇｒ、、 Ｂｉｏｌ、、 Ｃｈｅｍ、
。
。
３１．５４６．１９６７年に記載の方法による。
ＰＡニー
プロテアーゼによって蛋白質が切断されて遊離するアミ
ノ基をＴＮＢＳ（２，４，６−ドリニトロベンゼンサル
フエート・ＮａＪｆＬ）を用いて定量する。Ｒ，Ｆｉｅ
ｌｄｓ ；Ｂｉｏｃ−ｈｅｍ、、 Ｊ、、 １２４ 、
５８１ 。
ノ基をＴＮＢＳ（２，４，６−ドリニトロベンゼンサル
フエート・ＮａＪｆＬ）を用いて定量する。Ｒ，Ｆｉｅ
ｌｄｓ ；Ｂｉｏｃ−ｈｅｍ、、 Ｊ、、 １２４ 、
５８１ 。
１９７１年に記載の方法の下記変法による。
３５℃に予熱したカゼイン基質（ｐＨ５，５の５０ｍＭ
リン酸二ナトリウム／クエン酸緩衝液中、０、１２５
Ｗ／ ＶｔＤカセイ７を含ｈ ） ０．４ ｍＫ被検液
０．１ｄをカロえる。３５℃、６０分反応後、０．ＩＭ
四ホウ酸ナトリウム／水酸化ナトリウム（ｐＨ９，５）
２ｍを加える。次いでＴＮＢＳ試薬（０，１０Ｗ／Ｖ％
ＴＮＢＳ溶液と１０ｍＭ重亜研酸ナトリウムと全等容量
混合したもの）ｌｌＩｊを加え、４０℃、６０分発色俊
、電機を対照として４２０ｎｍの吸光度（Ａａｔｏ）を
測定する。
リン酸二ナトリウム／クエン酸緩衝液中、０、１２５
Ｗ／ ＶｔＤカセイ７を含ｈ ） ０．４ ｍＫ被検液
０．１ｄをカロえる。３５℃、６０分反応後、０．ＩＭ
四ホウ酸ナトリウム／水酸化ナトリウム（ｐＨ９，５）
２ｍを加える。次いでＴＮＢＳ試薬（０，１０Ｗ／Ｖ％
ＴＮＢＳ溶液と１０ｍＭ重亜研酸ナトリウムと全等容量
混合したもの）ｌｌＩｊを加え、４０℃、６０分発色俊
、電機を対照として４２０ｎｍの吸光度（Ａａｔｏ）を
測定する。
盲検は、基質０．４−に０．１Ｍ四ホウ酸ナトリウム／
水酸化ナトリウム（ｐＨ９，５） ２−を加えた後に被
検液Ｑ、１ｗＪを加え、以下同様に操作する。
水酸化ナトリウム（ｐＨ９，５） ２−を加えた後に被
検液Ｑ、１ｗＪを加え、以下同様に操作する。
測定されたＡ４！・は、蛋白分解活性（ＰＡ） によ
って蛋白質が切断されて遊離したアミン基の量に比例す
る。
って蛋白質が切断されて遊離したアミン基の量に比例す
る。
犠検液の凝乳活性（ＭＣＡ）は、正確に１００単位／−
となるように稀釈して供試する。上記のＡ ４ ｔ６は
ＰＡ／ＭＣＡ比を示すことになる。
となるように稀釈して供試する。上記のＡ ４ ｔ６は
ＰＡ／ＭＣＡ比を示すことになる。
実施例１゜
この例ハ、ムコール・プシルス微生物レンネットのマレ
イン酸無水物によるアシル化処理（マレイル化）の−例
である。その際、ｐＨ条件を変轡して、未処理微生物レ
ンネットのＰＡ／ＭＣＡ比を１００とした時の処理物の
ＰＡ／ＭＣＡの指数及び核未処理微生物レンネットのＭ
ＣＡを１００とした時の処理物のＭＣＡの指数（活性回
収庫）に及ぼす影響を検討した一例で示しである。
イン酸無水物によるアシル化処理（マレイル化）の−例
である。その際、ｐＨ条件を変轡して、未処理微生物レ
ンネットのＰＡ／ＭＣＡ比を１００とした時の処理物の
ＰＡ／ＭＣＡの指数及び核未処理微生物レンネットのＭ
ＣＡを１００とした時の処理物のＭＣＡの指数（活性回
収庫）に及ぼす影響を検討した一例で示しである。
ムコール・クシルスレンネットの水溶液１０ｍ（２９０
Ｍ９の蛋白質を含み、９．６５Ｘ１０’単位のＭＣＡ全
有する）に、緩衝液］Ｑａ（を加えた（蛋白質濃度は１
．４５Ｗ／Ｖにとなる）。ｐＨ６，０以下でマレイル化
する場合には後掲表１に示した夫々のｐＨに調整したＯ
、］ＭｆｆＥ酸ナトリウム／酢酸緩衝液を用いた。ｐＨ
７，０以上でマレイル化する場合には０．４Ｍ炭酸水素
す） ＩＪウム用いた。
Ｍ９の蛋白質を含み、９．６５Ｘ１０’単位のＭＣＡ全
有する）に、緩衝液］Ｑａ（を加えた（蛋白質濃度は１
．４５Ｗ／Ｖにとなる）。ｐＨ６，０以下でマレイル化
する場合には後掲表１に示した夫々のｐＨに調整したＯ
、］ＭｆｆＥ酸ナトリウム／酢酸緩衝液を用いた。ｐＨ
７，０以上でマレイル化する場合には０．４Ｍ炭酸水素
す） ＩＪウム用いた。
２Ｎ水酸化す） ＩＪウムまたに５０Ｖ／Ｖ９（酢酸で
所定のｐＨＫ１＃！整し、１５℃で激しく攪拌しながら
無水マレイン酸２１８ｊ１９（蛋白質に対して０．７５
Ｗ／Ｗ）を８回に分割し５分間隔で添加した。最終添加
後さらに５分間反応を縫続した。この間、ｐＨスタット
を用いＩＮ水酸化ナトリウムで所定のｐＨ１に保持した
。反応後、５０Ｖ／■％酢酸またはＩＮ水酸化ナトリウ
ムでｐＨ５，５に調整した。
所定のｐＨＫ１＃！整し、１５℃で激しく攪拌しながら
無水マレイン酸２１８ｊ１９（蛋白質に対して０．７５
Ｗ／Ｗ）を８回に分割し５分間隔で添加した。最終添加
後さらに５分間反応を縫続した。この間、ｐＨスタット
を用いＩＮ水酸化ナトリウムで所定のｐＨ１に保持した
。反応後、５０Ｖ／■％酢酸またはＩＮ水酸化ナトリウ
ムでｐＨ５，５に調整した。
これを蒸留水でＭＣＡが約１３０単位／―になるように
稀釈してＭＣＡを測定した。次いでＭＣＡが正確に１０
０率位／ＩＩｊになるように蒸留水で稀釈しＰＡを測定
した。その結果會、下掲表１に示し九。
稀釈してＭＣＡを測定した。次いでＭＣＡが正確に１０
０率位／ＩＩｊになるように蒸留水で稀釈しＰＡを測定
した。その結果會、下掲表１に示し九。
表 １
マレイル化条件：温度＝１５℃
無水マレイン酸／蛋白質＝０．７５Ｗ／Ｖｖ蛋白質初濃
度＝約１．４Ｗ／ＶＸ 実施例２゜ この例は、ムコール・プシルス微生物レンネットのマレ
イン酸無水物によるアシル化処理の他の一例である。そ
の際、温度条件を変更して、処理物のＰＡ／ＭＣＡ及び
ＭＣＡに及ぼす影響を検討１７た一例で示しである。
度＝約１．４Ｗ／ＶＸ 実施例２゜ この例は、ムコール・プシルス微生物レンネットのマレ
イン酸無水物によるアシル化処理の他の一例である。そ
の際、温度条件を変更して、処理物のＰＡ／ＭＣＡ及び
ＭＣＡに及ぼす影響を検討１７た一例で示しである。
実施例１で用いたと同様のムコール・プシルスレンネッ
トの水溶液１０−に、０．４Ｍ炭酸水素ナトリウム／水
酸化ナトリウム（ｐＨ’？、１ ） １ｏ＊？加えた。
トの水溶液１０−に、０．４Ｍ炭酸水素ナトリウム／水
酸化ナトリウム（ｐＨ’？、１ ） １ｏ＊？加えた。
ｐ ＨＦｉ８．５となり、蛋白質濃度は１．４５Ｗ／Ｖ
にとなる。後掲表２に示した夫々の温度で激しく攪拌し
ながら無水マレイン酸１４５１ｑ（蛋白質に対してＱ、
５Ｗ／Ｗ）を５回に分割し５分間隔で添加した。最終添
加後さらに５分間反応管継続した。この間、ｐＨスタツ
）？用い、ＩＮ水酸化ナトリウムでｐＨ８，５に保持し
た。反応後、実施例１と同様にして中和後稀釈してＭＣ
ＡおよびＰＡを測定した。その結果を下掲表２に示した
。
にとなる。後掲表２に示した夫々の温度で激しく攪拌し
ながら無水マレイン酸１４５１ｑ（蛋白質に対してＱ、
５Ｗ／Ｗ）を５回に分割し５分間隔で添加した。最終添
加後さらに５分間反応管継続した。この間、ｐＨスタツ
）？用い、ＩＮ水酸化ナトリウムでｐＨ８，５に保持し
た。反応後、実施例１と同様にして中和後稀釈してＭＣ
ＡおよびＰＡを測定した。その結果を下掲表２に示した
。
マレイル化条件：ｐＨ＝８．５
無水マレイン酸／ＩＦ白質＝０．５Ｗ／Ｗ蛋白質初濃度
＝１．４５Ｗ／Ｖ％ 実施例３ 実施例２のＲｕｎ＆３の例に於て、蛋白質初１１１度を
後掲衣３に示したように種々変更したほかは該Ｒｕｎｌ
１ａと同様に行った。その結果を下掲表３に示した。
＝１．４５Ｗ／Ｖ％ 実施例３ 実施例２のＲｕｎ＆３の例に於て、蛋白質初１１１度を
後掲衣３に示したように種々変更したほかは該Ｒｕｎｌ
１ａと同様に行った。その結果を下掲表３に示した。
表 ３
卆−■１■■−−−■□
マレモル化東件：ｐＨ＝ｓ、ｓ
温度＝１５℃
無水マレイン酸／蛋白質−０，５Ｗ／Ｗ実施例４及び比
較例１．２ 実施例１で用いたと同様のムコール・プシルスレンネッ
トの水溶ＩＩ！１０−を用い、ｐ Ｈ９−０、温度Ｏ℃
、蛋白質初濃度１．４５Ｗ／Ｖ％のマレイル化条件下で
、アシル化剤としての無水マレイン酸の蛋白質に対する
使用量アシル化剤／蛋白質（Ｗ／Ｗ）を、後掲衣４に示
したように種々変更するほかは、実施例１と同様に行っ
た。尚、比較のためモノカルボン酸無水物に属する無水
酢酸及び無水プロピオン酸を、夫々用いてアシル化剤／
蛋白質（Ｖ／Ｗ）で示す使用量金１後掲表４に示したよ
うに種々変更したほかは実施例４と同様に行った。但し
、無水マレイン酸は約３０Ｔｑ宛を５分間隔で添加し、
無水酢酸及び無水プロピオン酸は約１０μｌ宛′１に２
分間隔で夫々添加した。また無水酢酸及び無水プロピオ
ン酸では敞終添加後さらに３０分間反応を継続した。そ
の結果を該実施例４の結果と共に下掲表４に示した。
較例１．２ 実施例１で用いたと同様のムコール・プシルスレンネッ
トの水溶ＩＩ！１０−を用い、ｐ Ｈ９−０、温度Ｏ℃
、蛋白質初濃度１．４５Ｗ／Ｖ％のマレイル化条件下で
、アシル化剤としての無水マレイン酸の蛋白質に対する
使用量アシル化剤／蛋白質（Ｗ／Ｗ）を、後掲衣４に示
したように種々変更するほかは、実施例１と同様に行っ
た。尚、比較のためモノカルボン酸無水物に属する無水
酢酸及び無水プロピオン酸を、夫々用いてアシル化剤／
蛋白質（Ｖ／Ｗ）で示す使用量金１後掲表４に示したよ
うに種々変更したほかは実施例４と同様に行った。但し
、無水マレイン酸は約３０Ｔｑ宛を５分間隔で添加し、
無水酢酸及び無水プロピオン酸は約１０μｌ宛′１に２
分間隔で夫々添加した。また無水酢酸及び無水プロピオ
ン酸では敞終添加後さらに３０分間反応を継続した。そ
の結果を該実施例４の結果と共に下掲表４に示した。
上掲表４に示されるように、従来未知の事実であるが、
モノカルボ／酸無水物によるアシル化に於てもＰＡ／Ｍ
ＣＡ比が低下することがわかつ九。
モノカルボ／酸無水物によるアシル化に於てもＰＡ／Ｍ
ＣＡ比が低下することがわかつ九。
しかしながら上記結果に明らかなとおり、凝乳活性ＭＣ
Ａも急激に低下してしまう。これに対して本発明に於て
はＰＡ／ＭＣＡ比が選択的に低下する一方、意外なこと
にＭＣＡは低下するどころか逆に増大することがわかる
。
Ａも急激に低下してしまう。これに対して本発明に於て
はＰＡ／ＭＣＡ比が選択的に低下する一方、意外なこと
にＭＣＡは低下するどころか逆に増大することがわかる
。
実施例５及び比較例３．４
・実施例４及び比較例１．２に於て、アシル化条件をｐ
Ｈ８，５、温度１５℃に変更し九ほかは同様に行った。
Ｈ８，５、温度１５℃に変更し九ほかは同様に行った。
但し無水コハク酸を用いたアシル化も行った。無水コハ
ク酸は約３０ｑ宛を５分間隔で添加し、最終添加後さら
に３０分間反応を継続した。その結果を下掲表５に示し
た。
ク酸は約３０ｑ宛を５分間隔で添加し、最終添加後さら
に３０分間反応を継続した。その結果を下掲表５に示し
た。
上掲表５からも、前掲表４について述べたと同様のこと
がわかる。
がわかる。
実施例６及び比較例５
実施例５及び比較例３に於て、後掲衣６に示したアシル
化剤／蛋白質で示すアシル化剤添加量でｐＨ７，０、温
度２５℃に変更したほかは同様に行った。その結果を下
掲表６に示した。
化剤／蛋白質で示すアシル化剤添加量でｐＨ７，０、温
度２５℃に変更したほかは同様に行った。その結果を下
掲表６に示した。
上掲表６からも、前掲表４について述べたと同様のこと
がわかる。
がわかる。
実施例７及び比較例６．７
ムコール・プシルスレンネットの（ｌｖｃ、ムコール・
ミーヘイのレンネット水溶液１０ｓｄ（１２６岬の蛋白
質を含み、３．５１Ｘ１０’単位のＭＣＡｔ［”する）
を用い、前記実施例４及び比較例１．２に於て、アシル
化条件ｔ ｐＨ８，５、温度１５℃、蛋白質初濃度０．
６３％に変更したほかは同様に行った。その結果を下掲
表７に示した。
ミーヘイのレンネット水溶液１０ｓｄ（１２６岬の蛋白
質を含み、３．５１Ｘ１０’単位のＭＣＡｔ［”する）
を用い、前記実施例４及び比較例１．２に於て、アシル
化条件ｔ ｐＨ８，５、温度１５℃、蛋白質初濃度０．
６３％に変更したほかは同様に行った。その結果を下掲
表７に示した。
上掲表７に示されるように、ムコール・ミーヘイレンネ
ットの場合には、モノカルボン酸無水物によるアシル化
ではＦＡ／ＭＣＡ比の実質的な低下も認められず、その
上ＭＣＡが急激に低下してしまうのに対し、本発明によ
れば、ＰＡ／ＭＣＡ比が選択的に低下する一方、ＭＣＡ
は実質的に維持され、むしろ向上することがわかる。
ットの場合には、モノカルボン酸無水物によるアシル化
ではＦＡ／ＭＣＡ比の実質的な低下も認められず、その
上ＭＣＡが急激に低下してしまうのに対し、本発明によ
れば、ＰＡ／ＭＣＡ比が選択的に低下する一方、ＭＣＡ
は実質的に維持され、むしろ向上することがわかる。
実施例８及び比較例８
実施例７及び比較例６に於て、後掲Ｉ！８に示したアシ
ル化剤／蛋白質で示すアシル化剤添加量でｐＨ７，０、
温度２５℃に変更し九ほかは同様に行つ九。その結果を
下掲表８に示した。
ル化剤／蛋白質で示すアシル化剤添加量でｐＨ７，０、
温度２５℃に変更し九ほかは同様に行つ九。その結果を
下掲表８に示した。
表 ８
アシル化条件：ｐＨ＝７．０
温度＝２５℃
蛋白質初濃度＝０．６３Ｗ／Ｖ％
上掲表８からも、前掲表７について述べたと同様のこと
がわかる。
がわかる。
実施例９及び比較例９
この例は、精製したムコール・プシルスレンネットをア
シル化処理した一例である。精製は岩崎慎二部ら； Ａ
ｇｒ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 ３１ 、１４２１゜
１９６７年に記載の方法によって行った。この精製した
レンネット１に０．４ Ｍ炭酸水素ナトリウム／水酸化
ナトリウム中、１．０Ｗ／Ｖ％、ｐＨ８，５になるよう
に溶解した。この溶液５−（精製レンネット５０ＩＩＦ
を含み、２．７８Ｘ１０″単位のＭＣＡを有する）ずつ
金用い、１５℃、ｐＨ８，５で夫々マレイル化、スクシ
ニル化、アセチル化を行った。
シル化処理した一例である。精製は岩崎慎二部ら； Ａ
ｇｒ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 ３１ 、１４２１゜
１９６７年に記載の方法によって行った。この精製した
レンネット１に０．４ Ｍ炭酸水素ナトリウム／水酸化
ナトリウム中、１．０Ｗ／Ｖ％、ｐＨ８，５になるよう
に溶解した。この溶液５−（精製レンネット５０ＩＩＦ
を含み、２．７８Ｘ１０″単位のＭＣＡを有する）ずつ
金用い、１５℃、ｐＨ８，５で夫々マレイル化、スクシ
ニル化、アセチル化を行った。
マレイル化は無水マレイン酸を、スクシニル化は無水コ
ハク酸を夫々用い、５１ｑずつ１ｆｒＳ分間隔で添加し
て行い、最終添加後さらに３０分反応を続けた。比較例
としてのアセチル化は無水酢酸を用い、５μｌずつを３
分間隔で添加して行い、最終添加後さらに３０分反応を
続けた。反応中はｐＨスタットを用い、０．ＩＮ水酸化
ナトリウムでｐＨ８，５を保持した。反応後、１０■／
■％酢酸でｐＨ５，５に中和し、次いでセファデックス
（Ｓｅｐｈａｄｅｘ） Ｇ −２５を用いて脱塩した。
ハク酸を夫々用い、５１ｑずつ１ｆｒＳ分間隔で添加し
て行い、最終添加後さらに３０分反応を続けた。比較例
としてのアセチル化は無水酢酸を用い、５μｌずつを３
分間隔で添加して行い、最終添加後さらに３０分反応を
続けた。反応中はｐＨスタットを用い、０．ＩＮ水酸化
ナトリウムでｐＨ８，５を保持した。反応後、１０■／
■％酢酸でｐＨ５，５に中和し、次いでセファデックス
（Ｓｅｐｈａｄｅｘ） Ｇ −２５を用いて脱塩した。
ＭＣＡ、ＰＡのほか、遊離アミノ基、アシル基及び等電
点（１ｐ）を測定した。遊離アミノ基は、Ｒ，Ｆｉｅｌ
ｄｓ ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇ
ｙ。
点（１ｐ）を測定した。遊離アミノ基は、Ｒ，Ｆｉｅｌ
ｄｓ ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇ
ｙ。
Ｖｏｌ、 ２５． Ｐ４６４． Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐ
ｒｅｓｓ、 ＮｅｗＹｏｒｋ、 １９７２年に記載の
方法によって測定し次。マレイル基は、ＰｖＬ Ｈ，ｌ
ｉ’ｒｅｅｄｍａｎら ；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、
７． １９４１． １９６８年に記載の方法によって
測定した。但し、Ｎ−マレイル基以外の〇−及びＳ−マ
レイル基をとくに切断せず、全マレイル基′ｔ２５０ｎ
ｍと２８０ ｎｍの吸光度から測定した。スクシニル基
は、Ｍ、Ｈ。
ｒｅｓｓ、 ＮｅｗＹｏｒｋ、 １９７２年に記載の
方法によって測定し次。マレイル基は、ＰｖＬ Ｈ，ｌ
ｉ’ｒｅｅｄｍａｎら ；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、
７． １９４１． １９６８年に記載の方法によって
測定した。但し、Ｎ−マレイル基以外の〇−及びＳ−マ
レイル基をとくに切断せず、全マレイル基′ｔ２５０ｎ
ｍと２８０ ｎｍの吸光度から測定した。スクシニル基
は、Ｍ、Ｈ。
Ｋｌａｐｐｅｒら：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌｏｇｙ。
ｍｏｌｏｇｙ。
Ｖｎｌ、 ２５． ｐ ５３１． Ａｃａｄｅｍｉｃ
ＰｒｅｓｓＪＪｅｗＹｏｒｋ、 １９７２年に記載
の方法によってスクシニル基を脱離し、遊離したコハク
酸をＪ、Ｒ。
ＰｒｅｓｓＪＪｅｗＹｏｒｋ、 １９７２年に記載
の方法によってスクシニル基を脱離し、遊離したコハク
酸をＪ、Ｒ。
Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｇｎｚ
ｙｍａｔｉｃＡｎａｌｙｓｉｓ、 Ｖｏｌ、 ３．
ｐ １６１６． ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、 Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ 、 ２ｒｄＥｎｇｌｉｓｈ Ｅｄｉｔｉ
ｏｎ。
ｙｍａｔｉｃＡｎａｌｙｓｉｓ、 Ｖｏｌ、 ３．
ｐ １６１６． ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、 Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ 、 ２ｒｄＥｎｇｌｉｓｈ Ｅｄｉｔｉ
ｏｎ。
１９７４年に記載の方法によって測定した。等電点（１
ｐ）ｕ７ムホライン（Ａｍｐｈｏｌｉｎｅ）を用いて測
定した。その結果を比較例と共に下掲表９に示した。
ｐ）ｕ７ムホライン（Ａｍｐｈｏｌｉｎｅ）を用いて測
定した。その結果を比較例と共に下掲表９に示した。
上掲表９に示されるように、ＭＣＡ活性回収及びＰＡ／
ＭＣＡ比については、表４で前記したと同様のことがわ
かる。また、マレイル化、スクシニル化によって、夫々
マレイル基の導入、スクシニル基の導入が示され、さら
にマレイル基、スクシニル基の導入による負電荷の増大
に起因するＩｐの酸性側への移行がわかる。ジカルボン
酸無水物でアシル化した場合は、モノカルボン酸無水物
でアシル化した場合に比べて、負電荷の増大が大きいの
でＩｐはより酸性側に移行する。
ＭＣＡ比については、表４で前記したと同様のことがわ
かる。また、マレイル化、スクシニル化によって、夫々
マレイル基の導入、スクシニル基の導入が示され、さら
にマレイル基、スクシニル基の導入による負電荷の増大
に起因するＩｐの酸性側への移行がわかる。ジカルボン
酸無水物でアシル化した場合は、モノカルボン酸無水物
でアシル化した場合に比べて、負電荷の増大が大きいの
でＩｐはより酸性側に移行する。
尚、アシル化シたムコール・ブシルスレンネットのＵｖ
スペクトルを後掲第１図に示し九。図は、前掲表９に於
て、アシル化剤の添加量をアシル化剤／蛋白質＝０．５
でアシル化したムコール・プシルスレンネットの、０．
１Ｍ酢酸ナトリウム／酢酸（ｐＨ５，５）中でのＵｖス
ペクトルを対照と共に示した図である。
スペクトルを後掲第１図に示し九。図は、前掲表９に於
て、アシル化剤の添加量をアシル化剤／蛋白質＝０．５
でアシル化したムコール・プシルスレンネットの、０．
１Ｍ酢酸ナトリウム／酢酸（ｐＨ５，５）中でのＵｖス
ペクトルを対照と共に示した図である。
図中、ｌは対照（無処理）、■はマレイル化、■はスク
シニル化、■はアセチル化を夫々したものである。第１
図に示されるように、マレイル化によって２５０１ｍの
吸収増大がわかる。
シニル化、■はアセチル化を夫々したものである。第１
図に示されるように、マレイル化によって２５０１ｍの
吸収増大がわかる。
添付Ｗｃ１図は、アシル化したムコール・プシルスレン
ネットのＵＶスペクトル図である。 代 理 人 弁理士 小田島 平 吉 、１ヒ一二 外１名 第１図 ミＬ長 （ｎｍ） 手続補正書 特許庁１７１（将 杉 ａＬｌ 大 殿ｌ事件の表
示 −９ん濾４５７−５７２１１号・ ２、発明の名称 改Ｎ悼士勿レンネット及びすのｃＪ法 ３ 補止をする渚 事件との関係 特許出願人 住 所 名１１１１全山四区事（〕塚田」２丁目４１
汀ｆ地４代 埋 人〒１０７ （ほか１名） 載を、以下のとおり訂正する。 １．未処理微生物レンネットのＰＡ（蛋白分解ｆｆ５性
）７Ｍ ＣＡ （凝乳活性）比を１００とした時のＰＡ
／ＭＣＡの指数が５０〜８０でおって且つ該未処理微生
物レンネットのＭＣＡを１００とした時のＭＣＡの指数
が少なくとも１００でめる低Ｐ、ｑ／ＭＣＡ比且つ高Ｍ
ＣＡ改質微生物レンネット。 ｚ 該微生物レンネットがムコール（Ｍｗｃｏｒ）属微
生物レンネットでめる％許請求の範囲第１項記載の改質
微生物レンネット。 フ該ムコール属微生物レンネットが、ムコール・グシル
ス微生物レンネット及びムコール・ミーヘイ微生物レン
ネット裏りえらばれた微生物レンネットである特許請求
の範囲第２項記載の改質做生号勿レンネット。 ４ 微生物レンネットをジカルざン酸無水吻でアシル化
処理することを特徴とするＰＡ１ＭＣＡ比の低下された
改質微生物レンネットの製法。 ５、該ゾカルゲン酸無水物が炭素数４のジカルメン酸の
無水物である特許請求の範囲第４項記載の製法。 ６、該アシル化処理が得られる改質微生物レンネットの
ＰＡ１ＭＣＡ比の低下率が少なくとも約２０チとなる条
件下Ｖこ行われる特許請求の範囲第４項もしくＦ′ｉ第
５墳記載の製法。 ７、 処理される該微生物レンネットがムコール＠微生
物レンネットである特許請求の範囲第４項もしくは第５
項記載の製法。 ８、該ムコール礪微生物レンネットが、ムコール・デシ
ルス微生物レンネット及びムコール・ミーヘイ微生物レ
ンネット裏りえらばれた微生物レンネットである特許請
求の範囲第７項記載の製法。刃〔口〕 明細帯の″発
明の詳細な説明１の嘴の記載を、以下のとおり訂正する
。 （１） 明細書第４員６行に、「低下」とあるを、「
低下」 と訂正する。 （２）明細書第５貞３行ｖｃ、 「知られてをり」と
のるを、 「知られており」 と訂正する。 （３）明細４／Ｉ第５両６行に、「Ｋ−カゼインコとあ
るを、 「に−カゼイン」 とｄ１正する。 （４）明細書第１Ｏ貞下から７行に、「意図されをらず
」とあるを、 「意図されておらず」 と４１正する。 （５） 明細書第１８頁８行に、「マレイン基」とり
るを、 「マレイル基」 とげ１正する。 イ６）明細書第１８頁９行に、「示する、」とあるを、 「示すと、」 と訂正する。 （７） 明細書、ｙ２ｏｇ７行ＶＣ１［サルフェート
１とあるを、 「スルホネートｊ と訂正する。 （８） 明細書表１中、見出しの左端の欄ンこ「Ｒｕ
ｍＪとあるを、 ｒ Ｒｕｎ Ｊ と訂正する。 （９） 明細書第３９酊６行にｒｉｐ）、！とろろを
、ｒ（Ｐｔ）Ｊ と訂正する。 ａ・ 明細書第４０頁１行に、［ｍｌ載の方法ｒｃよっ
て」とめるを、 「記載の方法、但し６ＮＨＣ１，１００’、４８４デの
氷解によってｊ と訂正する。 ａＤ 明、１ｔＢｌ第４０ 頁５ 行ＩＣ１ｒ２”Ｊ
と４るを、２ｎｄＪ とｆｌｉＥする。 Ｑ３ ＢＡ細細筒第４０頁７行、ｒ（Ｉｐ）Ｊとある
をｒ（Ｐｔ）Ｊ と訂正する。 ０ 明細書箱４１の表９中、アシル化剤とＲｕｎｌ６の
、ぢ３．４４及びＡ５の間の線引き と訂正する。 ＋１４ 明細書第４１頁の表９中、Ｒｕｎ１ｌｘ６の
“アシル基導入量“の欄に、ｒｌｌ、９Ｊとろるを、「
１表９１ と訂正する。 ａ９ 明細書第４１頁の表９中、左端欄末行に、ｒ
Ｉｐ Ｊとめるを、 ＰｔＪ と訂正する。 鱈 明細誉第４２頁６行及び１０行の夫々ＶＣ。 「Ｉｐ」とめるを、 ＰｔＪ と訂正する。
ネットのＵＶスペクトル図である。 代 理 人 弁理士 小田島 平 吉 、１ヒ一二 外１名 第１図 ミＬ長 （ｎｍ） 手続補正書 特許庁１７１（将 杉 ａＬｌ 大 殿ｌ事件の表
示 −９ん濾４５７−５７２１１号・ ２、発明の名称 改Ｎ悼士勿レンネット及びすのｃＪ法 ３ 補止をする渚 事件との関係 特許出願人 住 所 名１１１１全山四区事（〕塚田」２丁目４１
汀ｆ地４代 埋 人〒１０７ （ほか１名） 載を、以下のとおり訂正する。 １．未処理微生物レンネットのＰＡ（蛋白分解ｆｆ５性
）７Ｍ ＣＡ （凝乳活性）比を１００とした時のＰＡ
／ＭＣＡの指数が５０〜８０でおって且つ該未処理微生
物レンネットのＭＣＡを１００とした時のＭＣＡの指数
が少なくとも１００でめる低Ｐ、ｑ／ＭＣＡ比且つ高Ｍ
ＣＡ改質微生物レンネット。 ｚ 該微生物レンネットがムコール（Ｍｗｃｏｒ）属微
生物レンネットでめる％許請求の範囲第１項記載の改質
微生物レンネット。 フ該ムコール属微生物レンネットが、ムコール・グシル
ス微生物レンネット及びムコール・ミーヘイ微生物レン
ネット裏りえらばれた微生物レンネットである特許請求
の範囲第２項記載の改質做生号勿レンネット。 ４ 微生物レンネットをジカルざン酸無水吻でアシル化
処理することを特徴とするＰＡ１ＭＣＡ比の低下された
改質微生物レンネットの製法。 ５、該ゾカルゲン酸無水物が炭素数４のジカルメン酸の
無水物である特許請求の範囲第４項記載の製法。 ６、該アシル化処理が得られる改質微生物レンネットの
ＰＡ１ＭＣＡ比の低下率が少なくとも約２０チとなる条
件下Ｖこ行われる特許請求の範囲第４項もしくＦ′ｉ第
５墳記載の製法。 ７、 処理される該微生物レンネットがムコール＠微生
物レンネットである特許請求の範囲第４項もしくは第５
項記載の製法。 ８、該ムコール礪微生物レンネットが、ムコール・デシ
ルス微生物レンネット及びムコール・ミーヘイ微生物レ
ンネット裏りえらばれた微生物レンネットである特許請
求の範囲第７項記載の製法。刃〔口〕 明細帯の″発
明の詳細な説明１の嘴の記載を、以下のとおり訂正する
。 （１） 明細書第４員６行に、「低下」とあるを、「
低下」 と訂正する。 （２）明細書第５貞３行ｖｃ、 「知られてをり」と
のるを、 「知られており」 と訂正する。 （３）明細４／Ｉ第５両６行に、「Ｋ−カゼインコとあ
るを、 「に−カゼイン」 とｄ１正する。 （４）明細書第１Ｏ貞下から７行に、「意図されをらず
」とあるを、 「意図されておらず」 と４１正する。 （５） 明細書第１８頁８行に、「マレイン基」とり
るを、 「マレイル基」 とげ１正する。 イ６）明細書第１８頁９行に、「示する、」とあるを、 「示すと、」 と訂正する。 （７） 明細書、ｙ２ｏｇ７行ＶＣ１［サルフェート
１とあるを、 「スルホネートｊ と訂正する。 （８） 明細書表１中、見出しの左端の欄ンこ「Ｒｕ
ｍＪとあるを、 ｒ Ｒｕｎ Ｊ と訂正する。 （９） 明細書第３９酊６行にｒｉｐ）、！とろろを
、ｒ（Ｐｔ）Ｊ と訂正する。 ａ・ 明細書第４０頁１行に、［ｍｌ載の方法ｒｃよっ
て」とめるを、 「記載の方法、但し６ＮＨＣ１，１００’、４８４デの
氷解によってｊ と訂正する。 ａＤ 明、１ｔＢｌ第４０ 頁５ 行ＩＣ１ｒ２”Ｊ
と４るを、２ｎｄＪ とｆｌｉＥする。 Ｑ３ ＢＡ細細筒第４０頁７行、ｒ（Ｉｐ）Ｊとある
をｒ（Ｐｔ）Ｊ と訂正する。 ０ 明細書箱４１の表９中、アシル化剤とＲｕｎｌ６の
、ぢ３．４４及びＡ５の間の線引き と訂正する。 ＋１４ 明細書第４１頁の表９中、Ｒｕｎ１ｌｘ６の
“アシル基導入量“の欄に、ｒｌｌ、９Ｊとろるを、「
１表９１ と訂正する。 ａ９ 明細書第４１頁の表９中、左端欄末行に、ｒ
Ｉｐ Ｊとめるを、 ＰｔＪ と訂正する。 鱈 明細誉第４２頁６行及び１０行の夫々ＶＣ。 「Ｉｐ」とめるを、 ＰｔＪ と訂正する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、未処理微生物レンネットのＰＡ（蛋白分解活性）／
ＭＣＡ（凝乳活性）比を１００とした時のＰＡ／ＭＣＡ
の指数が５０〜８０であって且つ該未処理微生物レンネ
ット′のＭＣＡ−ｉｌｏｏとした時のＭＣＡの指数が少
なくとも１００である軟ＰＡ／ＭＣＡ比且つ高ＭＣＡ改
質微生物レンネット、 ２、該微生物レンネットがムコール（Ｍｕｃｏｒ）Ｍ微
生物レンネットである特許請求の範囲第１項記載の改質
微生物レンネット。 ３、核ムコール属微生物レンネットが、ムコール・ブシ
ルス微生物レンネット及びムコール・ミーヘイ微生物レ
ンネットよりえらばれた微生物レンネットである特許請
求の範囲第２項記載の改質微生物レンネット。 ４、微生物レンネットをジカルボン酸無水物でアシル化
処理することを特徴とするＰＡ／ＭＣＡ比の低下された
改質微生物レンネットの製法。 ５、ｊｇ、ジカルボン酸無水物が炭素数４のジカルボン
酸の無水物である特許請求の範囲第４項記載の製法。 ６、咳アシル化処理が得られる改質微生物レンネットの
ＰＡ／ＭＣＡ比の低下率が少なくとも約２０％となる条
件下に行われる特許請求の範囲第４項もしくは第５項記
載の製法。 ７、処理される該微生物レンネットがムコール属僚生物
レンネットである特許請求の範囲第４項もしくは第５項
記載の製法。 ８、該ムコール属微生物レンネットが、ムコール・ブシ
ルス微生物しンネット及ヒムコール・ミーヘイ微生物レ
ンネットよりえらばれた微生物レンネットである特許請
求の範囲第７１’ｊｉｌ記載の製法。
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57057211A JPS58175487A (ja) | 1982-04-08 | 1982-04-08 | 改質微生物レンネツト及びその製法 |
| CA000425017A CA1201325A (en) | 1982-04-08 | 1983-03-31 | Microbial rennet having increased milk coagulating activity and method for production thereof |
| US06/482,171 US4530906A (en) | 1982-04-08 | 1983-04-05 | Microbial rennet having increased milk coagulating activity and method and method for production thereof |
| DE8383103406T DE3375158D1 (en) | 1982-04-08 | 1983-04-07 | Process for producing microbial rennet having increased milk coagulating activity |
| DK154883A DK163526C (da) | 1982-04-08 | 1983-04-07 | Fremgangsmaade til foroegelse af den maelkekoagulerende aktivitet af mikrobiel loebe fra mucor pusillus-mikroorganismer |
| EP83103406A EP0091664B1 (en) | 1982-04-08 | 1983-04-07 | Process for producing microbial rennet having increased milk coagulating activity |
| AR292660A AR231547A1 (es) | 1982-04-08 | 1983-04-08 | Un metodo para incrementar la actividad de coagulacion de la leche de un cuajo microbiano obtenido de microorganismos mucor pusillus y un cuajo microbiano obtenido de acuerdo de acuerdo con dicho metodo |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57057211A JPS58175487A (ja) | 1982-04-08 | 1982-04-08 | 改質微生物レンネツト及びその製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58175487A true JPS58175487A (ja) | 1983-10-14 |
| JPH0218834B2 JPH0218834B2 (ja) | 1990-04-26 |
Family
ID=13049177
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57057211A Granted JPS58175487A (ja) | 1982-04-08 | 1982-04-08 | 改質微生物レンネツト及びその製法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4530906A (ja) |
| EP (1) | EP0091664B1 (ja) |
| JP (1) | JPS58175487A (ja) |
| AR (1) | AR231547A1 (ja) |
| CA (1) | CA1201325A (ja) |
| DE (1) | DE3375158D1 (ja) |
| DK (1) | DK163526C (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61185186A (ja) * | 1985-02-09 | 1986-08-18 | Meito Sangyo Kk | 熱安定性の低下改善された改質微生物レンネツト及びその製法 |
| US8609389B2 (en) | 2009-03-24 | 2013-12-17 | Meito Sangyo Co., Ltd. | Milk-clotting protease derived from a microorganism |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4722900A (en) * | 1986-01-17 | 1988-02-02 | Miles Laboratories, Inc. | Method for increasing the milk clotting activity of thermolabile rhizomucor pusillus rennet |
| US4766074A (en) * | 1986-01-17 | 1988-08-23 | Miles Inc. | Thermostable Rhizomucor rennet having increased milk clotting activity |
| DK0758380T3 (da) * | 1994-05-03 | 2005-05-30 | Hansens Lab | Proces til separering af mælkekoagulationsenzymer |
| EP1342467A1 (en) * | 2002-03-04 | 2003-09-10 | Société des Produits Nestlé S.A. | Stabilizing cGMP in aqueous formulations |
| KR101111020B1 (ko) * | 2006-07-04 | 2012-03-13 | 주식회사 알엔에스 | 신규한 사이클릭 화합물의 유도체 및 그의 용도 |
| US20180199583A1 (en) * | 2015-07-06 | 2018-07-19 | Godo Shusei Co., Ltd. | Dairy product |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4136201A (en) * | 1967-12-06 | 1979-01-23 | Gb Fermentation Industries, Inc. | Microbial rennin |
| US4348482A (en) * | 1978-05-22 | 1982-09-07 | Miles Laboratories, Inc. | Process for decreasing the thermal stability of microbial rennet |
| US4169202A (en) * | 1978-06-05 | 1979-09-25 | American Home Products Corporation | Process for preparing 4,5-dihydro-4-oxofuran-2-carboxylic acid derivatives |
| US4255454A (en) * | 1978-12-28 | 1981-03-10 | Sven Branner-Jorgensen | Thermal destabilization of microbial rennet |
| DK145679A (da) * | 1979-04-09 | 1980-10-10 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til termisk destabilisering af mikrobiel osteloebe |
| EP0027834A1 (en) * | 1979-10-24 | 1981-05-06 | Rapidase B.V. | Thermally sensitive microbial rennet, a process for its preparation and its application for cheese preparation |
| DK267480A (da) * | 1980-06-23 | 1981-12-24 | Novo Industri As | Proteolytisk middel til proteinhydrolyse samt proteinhydrolyseproces |
| US4362818A (en) * | 1981-02-17 | 1982-12-07 | Miles Laboratories, Inc. | Acylation of Mucor pusillus microbial rennet enzyme |
-
1982
- 1982-04-08 JP JP57057211A patent/JPS58175487A/ja active Granted
-
1983
- 1983-03-31 CA CA000425017A patent/CA1201325A/en not_active Expired
- 1983-04-05 US US06/482,171 patent/US4530906A/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-04-07 EP EP83103406A patent/EP0091664B1/en not_active Expired
- 1983-04-07 DE DE8383103406T patent/DE3375158D1/de not_active Expired
- 1983-04-07 DK DK154883A patent/DK163526C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-04-08 AR AR292660A patent/AR231547A1/es active
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61185186A (ja) * | 1985-02-09 | 1986-08-18 | Meito Sangyo Kk | 熱安定性の低下改善された改質微生物レンネツト及びその製法 |
| US8609389B2 (en) | 2009-03-24 | 2013-12-17 | Meito Sangyo Co., Ltd. | Milk-clotting protease derived from a microorganism |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK163526C (da) | 1992-08-10 |
| DK154883D0 (da) | 1983-04-07 |
| US4530906A (en) | 1985-07-23 |
| AR231547A1 (es) | 1984-12-28 |
| EP0091664A2 (en) | 1983-10-19 |
| JPH0218834B2 (ja) | 1990-04-26 |
| DK154883A (da) | 1983-10-09 |
| DK163526B (da) | 1992-03-09 |
| EP0091664B1 (en) | 1988-01-07 |
| EP0091664A3 (en) | 1985-05-15 |
| DE3375158D1 (en) | 1988-02-11 |
| CA1201325A (en) | 1986-03-04 |
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