JPH04504710A - 抗血栓組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 抗血栓組成物 本発明は血栓症状の予防、特に主要な外科手術につながる深部静脈血栓症の予防 に適した医薬組成物に関する。

ヘパリンは長年の間、血栓症の治療及び予防剤として用いられてきた。ヘパリン の抗凝固性活性のメカニズムは現在基本的に判っている。血液の凝固は、多数の 蛋白分解酵素が一定した順序で互いに活性化するカスケード様工程である。最終 段階でフィブリノーゲンは、蛋白分解酵素トロンビンの作用下、血塊中の基本構 造である不溶性のフィブリンに変化する。凝固工程はさらに少なくとも二つの血 漿蛋白、即ち、抗トロンビンＩＩＩ（ＡＴＩ）及びヘパリン補助因子■（ＨＣｎ ）の抑制活性によって調節される。ＡＴＩＩＩ及びＨＣＩＩはそれぞれが抑制す るプロテアーゼの範囲が異なる同種の蛋白である。ＢＣ■はトロンビンを抑制す るが因子ｘ３を抑制せず、一方、ＡＴＩ［Ｉはこれら両方及び凝固と線維素溶解 に含まれる他の幾つかのプロテアーゼを抑制する。

血液又は血漿に添加すると、ヘパリンは凝固工程の種々の段階で作用する。特に ＡＴｍ及びＨＣＩＩとのコンプレックス形成により、はとんどの抑制感受性酵素 への抑制作用を増強する。即ち、ヘパリンは非常に多くの血液凝固因子を同時に 抑制する能力があり、その抗血液凝固活性は特異的には現れず、全体的に現れる 。

しかしながら、ヘパリン活性の本質的局面は、ＡＴＩＩ［の活性化による因子Ｘ ａの抑制にある。凝固カスケードの最中で、因子Ｘａは中央の重要な地位を占め る。というのは、それがプロトロンビンのトロンビンへの変換に直接関連するか らである。トロンビン形成の抑制は、有効な血栓症予防効果を得るのに特に重要 であると考えられる。

全ヘパリン（ｗｈｏｌｅ　ｈｅｐａｒｉｎ）は組成及びそのオリゴ糖類鎖の長さ の両方に関して異種の多糖であることが知られている。全ヘパリンは、約１５Ｋ Ｄの平均分子量を有する、２から４０ＫＤの分子量の成分の混合物である。全ヘ パリンは、分子量により分別し得、各フラクションはヘパリン様活性を維持して いる。抗血栓剤としてのヘパリン（全ヘパリン又はヘパリン断片）の活性は、ジ ャーナル・オブ・ラボラトリイ・アンドクリニカル・メディシン（Ｊ、Ｌａｂ、 Ｃ１１ｍ、　Ｍｅｄ、　）（１９７３）８１．２９Ｂ−３１０に記載されるユイ ンーウエスラ−（Ｙ　１ｎ−Ｗｅｓｓｌｅｒ）試験でその特異的抗因子Ｘａ活性 として測定しうる。よく知られているように、ユインーウエスラー活性は、ＡＴ ＩＩ［による因子Ｘａの抑制を促進するため、ヘパリンの能力を表わす。因子Ｘ ａに対する全標準ヘパリンの特異的活性は、第三国際ヘパリン基準（ｔｈｅ　ｔ ｈｉｒｄ　Ｉ　ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｈｅｐａｒｉｎ　Ｓ　ｔａｎｄａｒ ｄ）によって定められるように約１５０１．０．／ｍｇである。

全体的抗血液凝固活性、即ち、血液又は血漿の血液凝固時間を延長する能力は、 トロンボシス・リサーチ（Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）（１９７ ６）９．５７５に記載されるように活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴ Ｔ）法によって便利に測定し得る。ＡＰＴＴ試験での全標準ヘパリンの特異的活 性は、定義により定められ、それゆえ抗因子Ｘａ及びＡＰＴＴの特異的活性の比 は１：１に等しい。即ち、それは又、約１５０　Ｉ　、　Ｕ、／ｍｇである。

全ヘパリンは貴重な薬物であることが判るけれども、非常に高い量を与えた場合 、その使用は出血合併症の危険と関連する。ヘパリンの全体的抗血液凝固作用に 関連すると、特に血小板／コラーゲン相互作用による干渉に関連すると信じられ ている出血合併症は、ＡＰＴＴが極端に延長するヘパリンの濃度で見られる。問 題の重大な局面は、良好な血栓症予防が得られ、同時に出血合併症を避けるとい う状態用量が平衡していなければならないということである。一般的に実際は、 ヘパリン用量は、ＡＰＴＴ血液凝固時間用量が、どのような抗凝固剤も存在せず に測定した最初の血液凝固時間の３倍を越えないように調節すべきである。しか しながら、そのような用量は、異なる患者間に大きな個人差があるので、デリケ ートな操作工程である。

ごく最近、ヘパリンの低分子量（ＬＭＷ）フラクションが全ヘパリンよりもより 選択的作用を有することが認められた。用語「低分子量ヘパリン」は、例えば分 画により、又は以下に記載するような重合抑制により、全ヘパリン調製品に比べ て平均分子量の有意な減少を達成するように調製したヘパリンを意味する。ＬＭ Ｗヘパリンは、小数の血液凝固因子に関するＡＴＩ［Ｉの活性を増強し、又、異 なる程度の効果でこれらの因子の抑制を調節することが可能である。

特に、ＬＭＷヘパリンは、ヘパリンと類似の特異的抗因子Ｘａ活性を有し、一方 、全体的凝固に対するそれらの活性は有意に低く、例えばＡＰＴＴ試験で測定し て約５０１　、０．／ｍｇである。従って、これらの抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比は 約３−５である（従って、これらはＡＰＴＴＩと因子Ｘａの相互作用を、ＡＴＩ ［［及びＨＣＩＩとトロンビンとのそれよりも約３〜５倍活性化する）。

この部分効果は、低分子量ヘパリンが正常のヘパリンと同様に有効な抗血栓剤で あるか出血合併症を起こすことが少ないということである。

多くの硫酸化多糖か血液又は血漿の血液凝固時間を延長する性質を有することが 確認されてきており、これらはヘバリノイドの見出しの下に分類された。これら は抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴと共に１．５−３の比でＬＭｗヘパリンと類似の傾向が あるが、ヘパリンよりも約１０倍力価が低い。これらのヘパリン様活性はトロン ビンインヒビターＨＣＩＩ［の作用に主としてよると信じられる。ヘパリノイド は弱い抗菌子Ｘａ活性を有するけれども、これらは血小板に対する作用又は出血 副作用を示すことな（血液中に非常に高濃度に達するまで投与することができる ので、抗血栓処置においてヘバリノイドの代わりに用いられてきた。ヘバリノイ ドの例は、ヘパリン硫酸、デルマタン硫酸（コンドロイチン硫酸Ｂとも呼ばれる ）、ベントサンポリ硫酸、デキストラン硫酸並びにコンドロイチン硫酸Ｋ及びＨ を含む。

ＬＭＷヘパリン及びヘバリノイドの活性は、最善で厳密に付加的であると期待さ れた。しかしながら、今や、驚くべきことにＬＭＷヘパリンの抗菌子Ｘａ活性が ヘパリノイドの付加により相乗的に増強することが見出された。一方、わずかに 付加的効果が、少し残っているＡＰＴＴ活性に対して見られた。その結果、全体 の抗血栓作用及び抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比は共に、組合せが各成分単独よりも血 栓症の予防により有効であり、又、有効な抗血栓用量でＬＭＷヘパリン単独より も出血合併症を与えることが少ない。

従って、本発明は共同して有効量のＬＭＷヘパリン及びヘバリノイドの、同時に 又は相乗効果を示すに十分に短い時間間隔内での順列の投与を含む、かかる処置 を必要とする患者の深部静脈血栓症の予防方法を提供する。順列的投与が最初に ＬＭＷを、次いてヘパリン硫酸を投与することにより実施するか、又は逆の順番 で実施するかでありうることは当業者により認識される。

別法として、本発明は又、抗血栓剤として遊離又は固定した組合せで、ＬＭＷヘ パリン並びにヘパリノイドの用途を提供する。さらに別法として、又、ＬＭＷヘ パリンの抗血栓効果を増強するためのヘバリノイドの用途を提供する。

「相乗効果」は、ヘバリノイド及びＬＭＷヘパリンを独立に投与したときの相加 効果から期待されるよりも大きな抗菌子Ｘａ活性を意味する。

本発明の用途にとって好ましいヘパリノイドは、イズロン酸及びガラクトサミン −４−硫酸の三糖単位の繰返しから成るムコ多糖であるデルマタン硫酸である。

他のグリコアミノグリカンとしてのデルマタン硫酸は鍵、皮膚、強膜、関節被膜 、大動脈及び線維性軟骨を含む線維性結合粗雑に広く分布する。それはこの分野 で既知の方法、例えばＥＰ９７６２５及びＥＰ２３８９９４に記載されたものに 従って本質的に純粋な形に調製しうる。デルマタン硫酸は、又、ブタの腸粘膜か ら商業的に入手可能である。

本発明での使用に適したＬＭＷヘパリンは、好ましくは１０ＫＤ又はそれ以下の 、さらに好ましくは８ＫＤ又はそれ以下の、最も好ましくは５ＫＤより小の平均 分子量を有する。ＬＭＷヘパリンは比較的均一な分子量の、例えば上に示した平 均分子量限界内の分子量を有するポリマー単位の少な（とも６０％、より好まし くは８０％を有することがさらに好ましい。

ＬＭＷヘパリンの適切な製薬上許容しうる塩は、例えばカルシウム及びカリウム 及び特にナトリウム塩である。

それ故、ＬＭＷヘパリン又は製薬上許容しうる塩は、この分野で既知の方法、例 えば全ヘパリン調製品から低分子フラクションの分離により、例えばドイツ公開 公報第２９４５５９１号に記載されるように、例えば分別沈澱及び濾過により、 又は、例えばベルギー特許第８８８．８８４号又はヨーロッパ特許公開第２７， ０８９号に記載されるように、例えば化学開裂により全ヘパリンを高分子量フラ クションの解重合により得られる。別法として、ＬＭＷヘパリンはかかる技術の 組合せにより、例えば全ヘパリン調製品がらＬＭＷヘパリンの分離により、次い で残留する高分子量ヘパリンフラクションの解重合により低分子量ヘパリンを生 成し、及び所望によりこうして得た二つのＬＭＷヘパリン調製品の組合せにより 得られうる。

ＬＭＷヘパリンを化学開裂により調製する場合、個々の鎖残渣は化学修飾、特に 脱硫酸の測定を受けつる。これが起きる場合、本発明の通りの用途に適したＬ’ ＭＷヘパリンは、要すれば、その後で既知の技術の通りに、例えばヘルギー特許 出願第８８８．８６４号に記載される技術と同様にして、再構成又は他の同様の 修飾を行ないうる。

化学開裂により得られるＬＭＷヘパリン調製品は、本発明の組成物に用いられ、 これらは好ましくは何も受けない、又は本質的に何の付加的化学修飾も受けない 調製品である。

患者への投与には、ヘバリノイド及びＬＭＷヘパリンは、別々に又は−緒に、製 薬上許容しうる液体担体、例えば無菌水又は無菌等張食塩水と共に投与され、好 ましくは静脈内ルートにより注射又は注入される。

組合せで投与される成分の好ましい比は、１：１並びに１＝１０ＬＭＷヘバリン ：ヘバリノイド重量比の間、より好ましくは１：３と１：１０の間にある。

好ましくは、患者はａ）へパリメイドのみをＡＰＴＴ試験でアツセ−したとき、 コントロール（ヘバリノイドのいかなる添加もない血漿）の血液凝固時間を約２ 倍増強するヘパリン量を含む単位用量及びｂ）患者の血漿に０．０５から０．６ の国際ヘパリン単位／ｍｌの抗因子Ｘａ活性を与えるのに十分な量のＬＭＷヘパ リンを含む単位用量を同時に受ける。この処置は、それか必要とされる長さの一 定間隔で繰り返しうる。

投与を容易にするため、ヘバリノイド及びＬＭＷヘパリンの混合物を単一注射で 投与するのが好ましい。本発明のその次の見地に従って、製薬的に許容しうる希 釈剤又は担体、例えば注射用無菌水又は無菌等張食塩水と一緒のヘパリノイド及 びＬＭＷヘパリンの混合物、或いは注射前に無菌水又は食塩水が添加された凍結 乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｓｅｄ）又は凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ　ｄｒｉｅｄ）固 体形のヘバリノイド及びＬＭＷヘパリンの混合物のいずれかを含む製薬組成物が 提供される。好ましくは、組成物は、おのおのがａ）ヘパリンのみをＡＰＴＴ試 験でアッセーしたとき、コントロールより血液凝固時間を約２倍増強する量のヘ パリン及びｂ）０．０５から０．６の国際単位／　ｍ　ｌの抗因子Ｘａ活性を単 位用量に与えるに十分な量のＬＭＷヘパリンをそれぞれ含む単位用量形、例えば 注射用バイアルに造る。

本発明の相乗作用混合物の成分はツインパック形で、即ち、付随した投与のため の指示と共にヘバリノイドとＬＭＷヘパリンの別々の用量を含む単一ハンゲージ として存在しうる。注射用の単位用量形は、純水中又は生理食塩水中、ヘバリノ イド又はＬＭＷヘパリンの無菌溶液、或いは注射前に無菌水又は食塩水を加える 凍結乾燥又は凍結乾燥固体形でありうる。注射用単位用単位用量中のヘパリノイ ド及びＬＭＷヘパリンの量は上記したと同様のものである。

注射用溶液、即ち組成物又は分離単位用量は他の成分、例えば緩衝塩、例えばＮ ａ＝ＨＰＯ４／ＮａＨｔＰＯ，及び保存剤、例えばマンニトール及びヒトアルブ ミンを含みうる。これらの成分は又、凍結乾燥又は凍結乾燥形で存在しうる。

各化合物の量は、明細書において重量（ｍｇ）により、又はハープイスティ・ア ール・エム及びイングラム・ジー・アイ・シー（１９６５）、ブリーディング・ ディスオーダーズ、ブラックウェル・サイエンティフィック・パブリケーシジン 、オックスフｔ−ドによりアッセーされた第三国際標準ヘパリンを基にした国際 単位（１，Ｕ、）で表わす。

実施例１ ヘパリン４（分子量＝４ＫＤ）の溶液を血漿中、コントロール（血漿のみ）以上 の血液凝固時間のドウシング（ｄｏｕｔｈｉｎｇ）が抗因子Ｘａ試験（ヘプテス ト）に観察される濃度で調製した。２５μｇ／ｍｌデルマタン硫酸（抗Ｘａ／Ａ ＰＴＴ比＝１−１．５）を調製品のアリコツトに加えた。このアリフットは、ヘ パリン４のみを含む血漿溶液のアリコツトと共に、抗血栓及び抗血液凝固活性を 試験した。

ＡＰＴＴ活性をアンダーソン等、トロンボシス・リサーチ、９．５７５−８３（ １９７６）に記載される通りに測定した。０．１ｍｌのヘパリン希釈液を０．１ ｍｌ血漿に加え、次いで食塩水中カオリン（５＠ｇ／ｌｌ１ｌＢ、　Ｄ、　Ｈ） の懸濁液０．１ｍｌを３７℃で加えた。９７５分後、０．１＋１のベル及びアル ドン試薬を加え、そして１０分で０．１ｍｌ、０、０２５Ｍ　ＣａＣｌ２．を加 えた。次いで、血液凝固時間を自動コアギュロメーター（Ｃｏａｇｕｌｏｍｅｔ ｅｒ）を用いて測定した。デルマタン硫酸の存在下に観察される血液凝固時間は 、デルマタン硫酸の不存在で測定したものと類似であった。このことは、特に、 デルマタン硫酸がヘパリンの抗血液凝固活性に有意に作用しないことを示唆する 。

抗因子Ｘａ活性を、商業上のキット（ヘプテスト（商標）・ヘマヶム・インク、 セント・ルイス、ミズウリ６３１４４、ニーニスエイ）を用いるユイン及びウニ スラー法によって測定した。上記のように調製した血漿アリコツト０．１ｍｌに ０．１ｍｌの因子Ｘａを３７°Ｃで加えた。１２０秒後、血液凝固を０．１ｍｌ のＣａＣ１ｔ／リン脂質混合物脂質力ルミノクス（商標））を加えて開始した。

次いで血液凝固時間を記録し、表Ｉに報告したように標準検量線を用いて単位ヘ パリン／ｍｌに変換した。

デルマタン硫酸の添加により抗因子Ｘａ活性が１６倍増強されるので、デルマタ ン硫酸とヘパリン４の間の相乗的相互作用が抗因子Ｘａ（抗血栓）活性に見られ るが、血液凝固活性は有意に修飾されないことを結論付けうる。即ち、組合せの 抗因子Ｘ　ａ／　Ａ　Ｐ　Ｔ　Ｔ比は、ヘパリン４のみに相当する比の１６倍増 強されると計算しうる。この有意な増加は、組合せがデルマタン硫酸又はヘパリ ン４単独よりも抗血栓用途が良好であること、出血副作用がより少ないようであ ることを明らかにする。

実施例２ 実施例１を、２．６．８及び１５ＫＤの分子量のＬＭＷヘパリンの溶液で繰り返 す。ＡＰＴＴ試験で、各ＬＭＷヘパリンの血液凝固時間とデルマタン硫酸との組 合せのものが類似であることが判った。

各組合せの抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比は実施例１に記載したように計算した。ヘパ リン２．６．８及び１５に関し、組合せの比は、それぞれ４２．１．１１，６・ １．８．５：１及び４：１である。

実施例３ ３５０ｍｇのデルマタン硫酸及び４ＫＤの平均分子量を有するＬＭＷヘパリン２ ００１．Ｕ、を２ｍｌの無菌等張バイアル食塩水に溶解し、注射用にバイアル内 にパッケージする。

このような組成物は、５０００１．Ｕ、のＬＭＷヘパリンを与えたときに観察さ れるものと同様の治療効果を達成できる。

実施例４ 手術後、男性患者は１０日間にわたって、毎日、ヘパリン４及びデルマタン硫酸 の混合物１ｍｌの注射を受け、抗因子Ｘａ活性血漿患者についてヘパテストで測 定して５０００１．Ｕ、であった。

表■ ＬＭＷヘパリン　ヘパリン４（４ＫＤ）ＬＭＷヘパリンの　３：１ 抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比 ＬＭＷヘパリンのみノ０．０５１．Ｕ、／ｍｌ抗因子Ｘａ活性 ２５μｇ／＋＋＋１デルマタン硫酸　０１８１．Ｕ、／ｍｌの存在下、ＬＭＷヘ パソンの 抗因子Ｘａ活性 ２５μｇ／ｍｌデルマタン硫酸　４８：１の存在下、ＬＭＷヘパリン の抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比 補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） １、特許出願の表示 ＰＣＴ／ＥＰ８９１０１３４１ 、発明の名称 抗血栓組成物 ３、特許出願人 名称トロンボシス・リサーチ・インスティテユート住所　〒５４０　大阪府大阪 市中央区域見２丁目１番６１号（１）補正書の翻訳文　１　通 を達成するように調製したヘパリンを意味する。ＬＭＷヘパリンは、小数の血液 凝固因子に関するＡＴＩ［［の活性を増強し、又、異なる程度の効果でこれらの 因子の抑制を調節することが可能である。

特に、ＬＭＷヘパリンは、ヘパリンと類似の特異的抗因子Ｘａ活性を有し、一方 、全体的凝固に対するそれらの活性は有意に低く、例えばＡＰＴＴ試験で測定し て約５０１　、　Ｕ、／ｍｇである。従って、これらの抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比 は約３−５であるく従って、これらはＡＰＴＴＩＩＩと因子Ｘａの相互作用を、 ＡＴＩＩ［及びＨＣＩＩとトロンビンとのそれよりも約３〜５倍活性化する）。

この部分効果は、低分子量ヘパリンが正常のヘパリンと同様に有効な抗血栓剤で あるが出血合併症を起こすことが少ないということである。

多くの硫酸化多糖が血液又は血漿の血液凝固時間を延長する性質を有することか 確認されてきており、これらはヘバリノイドの見出しの下に分類された。これら は抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴと共に１．５−３の比でＬＭＷヘパリンと類似の傾同が あるが、ヘパリンよりも約１０倍力価が低い。これらのヘパリン様活性はトロン ビンインヒビターＨＣＩＩＩの作用に主としてよると信じられる。ヘパリノイド は弱い抗因子Ｘａ活性を有するけれども、これらは血小板に対する作用又は出血 副作用を示すことな（血液中に非常に高濃度に達するまで投与することかできる ので、抗血栓処置においてヘバリノイドの代わりに用いられてきた。ヘバリメイ ドの例は、ヘパリン硫酸、デルマタン硫酸（コンドロイチン硫酸Ｂとも呼ばれる ）、ヘントサンボリ硫酸、デキストラン硫酸並ひにコンドロイチン硫酸Ｋ及びＨ を含む。

アルッナイミノテルーフォルシュング、第１５巻１１号、１１月１９６５．１３ ２０−１３２３は、ヘパリンとの組合せによるヘバリノイドの用途を記載する。

ＬＭＷヘパリン及びヘバリノイドの活性は、最善で厳密に付加的であると期待さ れた。しかしながら、今や、驚くべきことにＬＭＷヘパリンの抗因子Ｘａ活性が ヘパリフイドの付加により相乗的に増強するごとか見出された。一方、わずかに 付加的効果が、少し残っているＡＰＴＴ活性に対して見られた。その結果、全体 の抗血栓作用及び抗因子Ｘａ／ＡＰＴＴ比は共に、組合せが各成分単独よりも血 栓症の予防により有効であり、又、有効な抗血栓用量でＬＭＷヘパリン単独より も出血合併症を与えることが少ない。

従って、本発明は共同して有効量のＬＭＷヘパリン及びヘパリノイドの、同時に 又は相乗効果を示すに十分に短い時間間隔内での順列の投与を含む、かかる処置 を必要とする患者の深部静脈血栓症の予防方法を提供する。順列的投与が最初に ＬＭＷを、次いでヘバリノイドを投与することにより実施するか、又は逆の順番 で実施するかでありうることは当業者により認識される。

別法として、本発明は又、抗血栓剤として遊離又は固定した組合せで、ＬＭＷヘ パリン並びにヘバリノイドの用途を提供する。さらに別法として、又、ＬＭＷヘ パリンの抗血栓効果を増強するためのヘパリノイドの用途を提供する。

「相乗効果」は、ヘパリノイド及びＬＭＷヘパリンを独立に投与したときの相加 効果から期待されるよりも大きな抗因子Ｘａ活性を意味する。

本発明の用途にとって好ましいヘバリメイドは、イズロン酸及びガラクトサミン −４−硫酸の三糖単位の繰返しから成るムコ多糖で１０、ＬＭＷヘパリンが５Ｋ Ｄより小の平均分子量を有する請求項６ないし９のいずれか一つの組成物。

１１、ａ）ＡＰＴＴ試験でヘパリノイドのみをアッセーした場合、コントロール より血液凝固時間が約２倍増強する量のヘパリノイド及びｂ）０．０５から０． ６の国際ヘパリン単位／ｍｌの抗因子Ｘａ活性を単位用量形に与えるのに十分な 量のＬＭＷヘパリンを含む組成物の単位用量形。

１２、付随した又は連続的な投与の指示と共にヘパリノイド及びＬＭＷヘパリン の分離単位用量を含むツインパックキット。

１３、ヘパリノイドがデルマタン硫酸である請求項１２又は１３のキット。

１４、ＬＭＷヘパリンが５ＫＤより小の平均分子量を有する請求項１２ないし１ ６のいずれか一つのキット。

Ｓ＾　３２２９３

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．低分子量ヘパリンと共にヘパリノイドの、遊離又は固定した組合せでの、抗 血栓剤としての用途。
2. ２．ヘパリノイドの用量が、ヘパリノイドのみをＡＰＴＴ試験でアッセーした場 合、血液凝固時間がコントロールより約２倍増強するものであり、ＬＭＷヘパリ ンの用量が、０．０５から０．６の国際ヘパリン単位／ｍｌの抗因子Ｘａ活性を 組合せに与えるのに十分である請求項１の用途。
3. ３．ヘパリノイドがデルマタン硫酸である請求項１又は２の用途。
4. ４．ＬＭＷヘパリンが５ＫＤより小の平均分子量を有する先行する請求項のいず れか一つの用途。
5. ５．ＬＭＷヘパリンの抗血栓効果の促進作用のためのヘパリノイドの用途。
6. ６．製薬上許容しうる希釈液又は担体と一緒の、ＬＭＷヘパリン及びヘパリノイ ドの混合物又は凍結乾燥、又は凍結乾燥形のＬＭＷヘパリン及びヘパリノイドの 混合物のいずれかを含む、製薬組成物。
7. ７．ＬＭＷヘパリン対ヘパリノイドの重量比が１：１から１：１０である請求項 ６の組成物。
8. ８．ＬＭＷヘパリン対へパリノイドの重量比が１：３から１：１０である請求項 ７の組成物。
9. ９．ヘパリノイドがデルマタン硫酸である請求項６ないし８のいずれか一つの組 成物。