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JP6814737B2 - 酵素重合ゲル化デキストラン - Google Patents

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JP6814737B2 JP2017543312A JP2017543312A JP6814737B2 JP 6814737 B2 JP6814737 B2 JP 6814737B2 JP 2017543312 A JP2017543312 A JP 2017543312A JP 2017543312 A JP2017543312 A JP 2017543312A JP 6814737 B2 JP6814737 B2 JP 6814737B2
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Description

本出願は、参照により本明細書に全体として組み込まれる米国仮特許出願第６２／０７５，４６０号明細書（２０１４年１１月５日出願）の利益を主張するものである。
本開示は、多糖類の分野に含まれる。例えば、本開示は、特定のデキストランポリマー、これらのポリマーを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応物および様々な用途におけるこれらのポリマーの使用に関する。
電子的に提出された配列表の参照
配列表の正式な写しは、１６４キロバイトのサイズを有して本明細書と同時に提出される、２０１５年１１月５日に作成された２０１５１１０５＿ＣＬ６２９４ＵＳＮＰ＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔのファイル名を備えるＡＳＣＩＩフォーマットの配列表としてＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出される。このＡＳＣＩＩフォーマット文献に含有される配列表は、本明細書の一部であり、これにより全体として参照により本明細書に組み込まれる。
微生物の酵素合成または遺伝子操作を使用して新規な構造の多糖類を見つけたいという要望に駆られて、研究者らは、生分解性であって再生可能な起源の供給原料から経済的に製造できる多糖類を見いだしてきた。そのような多糖類ファミリーの１つは、α−グリコシド結合によって連結されたグルコースモノマーを含むポリマーであるα−グルカンである。
デキストランは、α−１，３−結合によって直鎖に連結された周期的な側鎖（分岐鎖）を備えるα−１，６−結合グルコースモノマーの鎖を一般に含む、複雑な分岐状α−グルカンの１ファミリーを表す（非特許文献１）。デキストランの生成は、典型的には細菌（例えば、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種もしくはストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種）を用いるスクロースの発酵を通して実施されるが、このときスクロースはデキストラン重合のためのグルコース源として機能する（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。デキストランは水への溶解度が高いことを前提に数種の用途（例えば、アジュバント、安定剤）において使用されるが、この高い溶解度は親水コロイド用途における増粘剤としてのそれらの一般的有用性にマイナスの影響を及ぼす可能性がある。
したがって、高粘性用途のためにより適合する新規なより高粘性のデキストランポリマーを開発することへの関心が高い。さらに順に、そのようなデキストランポリマーを合成できるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を同定することにも関心が高い。
Ｉｏａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ３３：５７３０−５７３９ Ｎａｅｓｓｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８０：８４５−８６０ Ｓａｒｗａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．４：３７９−３８６ Ｏｎｉｌｕｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ．Ｊ．２０：１６４５−１６５１
１つの実施形態では、本開示は、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含むデキストランであって、
デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５，０００万〜２億Ｄａ（ダルトン）であり、デキストランのｚ平均慣性半径は約２００〜２８０ｎｍであり、デキストランは任意選択的にロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物ではないデキストランに関する。
また別の実施形態では、デキストランは、（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む。
また別の実施形態では、デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖（長鎖）を含み、ここで、前記鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む。鎖の平均長は、別の実施形態では、約１０〜５０モノマー単位である。
また別の実施形態では、デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である。
また別の実施形態では、本組成物は、少なくとも約２５ｃＰの粘度を有する水性組成物である。
また別の実施形態では、デキストランのＭｗは、約８，０００万〜１億２，０００万Ｄａである。
また別の実施形態では、デキストランのｚ平均慣性半径は、約２３０〜２５０ｎｍである。
また別の実施形態では、本組成物は、食品、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品または工業製品の形態にある。また別の実施形態では、本組成物は、菓子類の形態にある。
また別の実施形態では、本開示は、水性組成物の粘度を増加させるための方法に関する。本方法は、本明細書に開示した少なくとも１つのデキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程を含む。本方法における接触させる工程は、接触させる工程の前の水性組成物の粘度と比較して水性組成物の粘度を増加させる。
また別の実施形態では、本開示は、材料を処理する方法に関する。本方法は、材料を本明細書に開示した少なくとも１つのデキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む。
また別の実施形態では、本開示は、水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む酵素反応であって、グルコシルトランスフェラーゼ酵素が本明細書に開示したデキストラン化合物を合成する反応に関する。
また別の実施形態では、本開示は、少なくとも水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程を含むデキストランを生成する方法であって、それにより本明細書に開示したデキストランを生成する方法に関する。このデキストランは、任意選択的に単離することができる。
また別の実施形態では、本方法において生成されるデキストランの粘度は、工程（ａ）におけるスクロースの量を減少させることによって増加する。
１００ｇ／Ｌのスクロースおよび０７６８ｇｔｆ（配列番号１）を含むグルコシルトランスフェラーゼ反応によるスクロース消費のＨＰＬＣ分析を示す図である。実施例２を参照されたい。 枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９１９ｇｔｆ（配列番号５）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８３のマップを示す図である。実施例３を参照されたい。 枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９１８ｇｔｆ（配列番号９）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８２のマップを示す図である。実施例４を参照されたい。 枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８４のマップを示す図である。実施例５を参照されたい。 枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８５のマップを示す図である。実施例６を参照されたい。 市販で入手できるデキストラン分解酵素を含む反応によるスクロース消費のＨＰＬＣ分析を示す図である。実施例７を参照されたい。
Figure 0006814737
本明細書で言及した全ての特許文献および非特許文献の開示は、全体として参照により本明細書に組み込まれる。
他に特に開示しない限り、本明細書で使用する用語「１つの」は、参照した特徴の１つ以上（つまり、少なくとも１つ）を含むことが意図されている。
本明細書の用語「グルカン」は、グリコシド結合の１つのタイプであるグルコシド結合によって連結されているＤ−グルコースモノマーの多糖を意味する。本明細書の「α−グルカン」は、構成成分のＤ−グルコースモノマーがα−Ｄ−グルコースモノマーであるグルカンを意味する。
用語「デキストラン」、「デキストランポリマー」、「デキストラン化合物」などは、本明細書では互換的に使用され、主としてα−１，３−結合によって連結された側鎖（分岐鎖）を備える、実質的に（大部分が）α−１，６−結合グルコースモノマーの鎖を一般に含む複雑な分枝状α−グルカンを意味する。本明細書の用語「ゲル化デキストラン」は、本明細書に開示した１つ以上のデキストランが、（ｉ）酵素的デキストラン合成中、および任意選択的に、（ｉｉ）そのように合成されたデキストランが単離され（例えば、＞９０％純粋）、その後水性組成物中に配置されると、粘性溶液もしくはゲル様組成物を形成する能力に関する。
本明細書のデキストラン「長鎖」は、「実質的に［もしくは大部分が］α−１，６−グルコシド結合」を含むことができるが、これは一部の態様ではそれらが少なくとも約９８．０％のα−１，６−グルコシド結合を有し得ることを意味する。本明細書のデキストランは、一部の態様では、「分枝鎖構造」（分枝状構造）を含むことができる。この構造内では、長鎖は、おそらく反復方法で、他の長鎖から分岐する（例えば、長鎖は他の長鎖からの分岐鎖であってよく、これは順にその分岐鎖自体が他の長鎖からの分岐鎖であってよく、と続く）ことが企図されている。この構造内の長鎖は、分岐鎖構造内の全長鎖の少なくとも７０％の長さ（ＤＰ［重合度］）が分岐鎖構造の全長鎖の平均長の±３０％内であることを意味する「長さが類似」であってよいことは企図されている。
一部の実施形態におけるデキストランは、典型的には長さが１〜３つのグルコースモノマーであり、デキストランポリマーの全グルコースモノマーの約１０％未満を含む、長鎖から分岐している「短鎖」をさらに含むことができる。そのような短鎖は、典型的にはα−１，２−、α−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含む（一部の態様では、長鎖内に少ないパーセンテージのそのような非α−１，６結合もまた存在する可能性があると考えられる）。
用語「グリコシド結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」および「グリコシド結合（ｂｏｎｄ）」は、本明細書では互換的に使用され、１つの炭水化物分子を別の炭水化物分子に結合させる共有結合を意味する。用語「グルコシド結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」および「グルコシド結合（ｂｏｎｄ）」は、本明細書では互換的に使用され、２つのグルコース分子間のグリコシド結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，６−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および６を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，３−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および３を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，２−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および２を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，４−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および４を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書では、「α−Ｄ−グルコース」は、「グルコース」と呼ぶことになる。本明細書に開示した全グルコシド結合は、他に特に明記された場合を除いて、α−グルコシド結合である。
本明細書の「１位および６位で連結したグルコース（グルコースモノマー）」は、２つの隣接グルコースモノマーを備える各グルコシド結合にグルコースモノマーの炭素１および６だけが含まれているデキストランのグルコースモノマーを意味する。この定義は同様に、（ｉ）「１位および３位で連結した」、およびしたがって各結合内に含まれている異なる炭素位置を考慮に入れて、（ｉｉ）「１位および４位で連結した」グルコースに当てはまる。
本明細書の「１位、３位および６位で連結したグルコース（グルコースモノマー）」は、３つの隣接グルコースモノマーを備える各グルコシド結合にグルコースモノマーの炭素１、３および６が含まれているデキストランのグルコースモノマーを意味する。１位、３位および６位でのみ連結したグルコースは、分岐点である。この定義は同様に、（ｉ）「１位、２位および６位で連結した」、およびしたがって各結合内に含まれている異なる炭素位置を考慮に入れて、（ｉｉ）「１位、４位および６位で連結した」グルコースに当てはまる。
本明細書でのグルコースの位置（グルコース炭素位置）１、２、３、４および６は、当技術分野において公知である（下記の構造において描出されている）：
Figure 0006814737
本明細書のデキストランのグリコシド結合プロファイルは、当技術分野において公知の任意の方法を使用して決定できる。例えば、結合プロファイルは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（例えば、１３Ｃ ＮＭＲまたは１Ｈ ＮＭＲ）を使用する方法を用いて決定できる。使用できるこれらや他の方法は、参照により本明細書に組み込まれるＦｏｏｄ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ、Ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅｒ ３、Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ、Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ、Ｔａｙｌｏｒ ＆ Ｆｒａｎｃｉｓ Ｇｒｏｕｐ ＬＬＣ、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、ＦＬ、２００５）に開示されている。
本明細書の用語「スクロース」は、α−１，２−グリコシド結合によって連結されたα−Ｄ−グルコース分子およびβ−Ｄ−フルクトース分子から構成される非還元型二糖を意味する。スクロースは、グラニュー糖として一般に知られている。
本明細書のデキストランの「分子量」は、数平均分子量（Ｍｎ）または重量平均分子量（Ｍｗ）として表すことができ、それらの単位はＤａもしくはｇ／モルである。または、分子量は、ＤＰｗ（重量平均重合度）またはＤＰｎ（数平均重合度）として表すことができる。これらの分子量測定値を計算するためには、当技術分野では、例えば、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）またはゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用いるなどの様々な手段が知られている。
本明細書の用語「慣性半径」（Ｒｇ）は、デキストランの平均半径を意味し、分子の重心からデキストラン分子の成分（原子）の根二乗平均として計算される。Ｒｇは、例えば、オングストロームもしくはナノメートル（ｎｍ）単位で表示することができる。本明細書のデキストランの「ｚ平均慣性半径」は、光散乱法（例えば、ＭＡＬＳ）を使用して測定されるデキストランのＲｇを意味する。ｚ平均Ｒｇを測定するための方法は公知であり、したがって本明細書で使用できる。例えば、ｚ平均Ｒｇは、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７５３１０７３号明細書、米国特許出願公開第２０１０／０００３５１５号明細書および同第２００９／００４６２７４号明細書、Ｗｙａｔｔ（Ａｎａｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ２７２：１−４０）およびＭｏｒｉ ａｎｄ Ｂａｒｔｈ（Ｓｉｚｅ Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、１９９９）に開示されたように測定することができる。
用語「グルコシルトランスフェラーゼ酵素」、「ｇｔｆ酵素」、「ｇｔｆ酵素触媒」、「ｇｔｆ」、「グルカン分解酵素」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書のｇｔｆ酵素の活性は、生成物であるグルカンおよびフルクトースを作成するための基質スクロースの反応を触媒する。デキストラン（１つのタイプのグルカン）を生成するｇｔｆ酵素は、さらにデキストラン分解酵素を呼ぶこともできる。ｇｔｆ反応の他の生成物（副生成物）は、グルコース（このときグルコースはグルコシル−ｇｔｆ酵素中間複合体から加水分解される）および例えばロイクロースなどの様々な可溶性オリゴ糖（例えば、ＤＰ２−ＤＰ７）を含むことができ、グルコシルトランスフェラーゼ酵素の野生型形は、一般に（Ｎ末端からＣ末端方向に）シグナルペプチド、可変ドメイン、触媒ドメインおよびグルカン結合ドメインを含有する。本明細書のｇｔｆは、ＣＡＺｙ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−Ａｃｔｉｖｅ ＥｎＺｙｍｅｓ）データベース （Ｃａｎｔａｒｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．３７：Ｄ２３３−２３８、２００９）によると、グリコシドヒドロラーゼファミリー７０（ＧＨ７０）の下に分類される。
用語「グルコシルトランスフェラーゼ触媒ドメイン」および「触媒ドメイン」は、本明細書では互換的に使用され、グルコシルトランスフェラーゼ酵素にグルカン生成活性を提供するグルコシルトランスフェラーゼ酵素のドメインに関する。
用語「ｇｔｆ反応」、「ｇｔｆ反応溶液」、「グルコシルトランスフェラーゼ反応」、「酵素反応」、「デキストラン合成反応」、「デキストラン反応」などは、本明細書では互換的に使用され、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって実施される反応に関する。本明細書で使用される「ｇｔｆ反応」は、一般に、スクロースおよび水ならびに任意選択的に他の成分を含む溶液中に少なくとも１つの活性グルコシルトランスフェラーゼ酵素を最初に含む反応を意味する。ｇｔｆ反応中にそれが開始された後にあってよい他の成分には、フルクトース、グルコース、例えばロイクロースなどの可溶性オリゴ糖（例えば、ＤＰ２−ＤＰ７）およびデキストラン生成物が含まれる。それは、水、スクロースおよびグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程が実施されるｇｔｆ反応中にある。本明細書で使用する用語「好適なｇｔｆ反応条件下」は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素活性を介してスクロースからデキストランへの変換を支持するｇｔｆ反応条件を意味する。本明細書のｇｔｆ反応は、天然型ではない。
本明細書で使用する「コントロール」ｇｔｆ反応は、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含んでいないグルコシルトランスフェラーゼを使用する反応を意味することができる。コントロール反応溶液の他の特徴（例えば、スクロース濃度、温度、ｐＨ、時間）の全ては、それが比較される反応と同一であってよい。
ｇｔｆ反応の「乾燥固体率」は、ｇｔｆ反応中の糖全部に対する重量％を意味する。ｇｔｆ反応の乾燥固体率は、例えば、反応を調製するために使用されるスクロースの量に基づいて計算できる。
本明細書のｇｔｆ反応によるデキストランの「収率」は、反応において変換させられるスクロース基質の重量のパーセンテージとして表示されるデキストラン生成物の重量を表す。例えば、反応溶液中の１００ｇのスクロースが生成物に変換させられ、１０ｇの生成物がデキストランである場合、デキストランの収率は１０％となるであろう。この収率計算は、デキストランに向かう反応の選択性の尺度であると見なすことができる。
用語「体積によるパーセント」、「体積パーセント」、「体積％」、「ｖ／ｖ％」などは、本明細書では互換的に使用される。溶液中の溶質の体積によるパーセントは、式：［（溶質の体積）／（溶液の体積）］×１００％を使用して決定できる。
用語「重量によるパーセント」、「重量パーセンテージ（ｗｔ％）」、「重量−重量パーセンテージ（％ｗ／ｗ）」などは、本明細書では互換的に使用される。重量によるパーセントは、それが組成物中、混合物中もしくは溶液中に含まれるかのように質量ベースでの物質のパーセンテージを意味する。
本明細書で使用する用語「増加した」は、それに対して増加した量もしくは活性が比較されている量もしくは活性より少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、５０％、１００％、もしくは２００％上回る量もしくは活性に関する可能性がある。用語「増加した」、「上昇した」、「増強された」、「より多い」、「改良された」などは、本明細書では互換的に使用される。
用語「ポリヌクレオチド」、「ポリヌクレオチド配列」および「核酸配列」は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、ヌクレオチド配列などを包含する。ポリヌクレオチドは、一本鎖もしくは二本鎖であり、任意選択的に合成、非天然もしくは改変ヌクレオチド塩基を含有するＤＮＡもしくはＲＮＡのポリマーであっってよい。ポリヌクレオチドは、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成ＤＮＡまたはそれらの混合物の内の１つ以上のセグメントから構成されてよい。
本明細書で使用する用語「遺伝子」は、コーディング領域（コーディング配列）からＲＮＡ（ＲＮＡは、ＤＮＡポリヌクレオチド配列から転写される）を発現するＤＮＡポリヌクレオチド配列を意味するが、そのＲＮＡはメッセンジャーＲＮＡ（タンパク質をコードする）または非タンパク質コーディングＲＮＡであってよい。遺伝子は、コーディング領域単独を意味する場合がある、またはコーディング領域への上流および／または下流の調節配列（例えば、プロモーター、５’未翻訳領域、３’転写ターミネーター領域）を含む場合がある。またはタンパク質をコードするコーディング領域は、本明細書では「オープンリーディングフレーム」（ＯＲＦ）と呼ぶことができる。「天然」もしくは「内因性」である遺伝子は、固有の調節配列を備える自然界で見いだされる遺伝子を意味する；そのような遺伝子は、宿主細胞のゲノム内の自然な場所に所在する。「キメラ」遺伝子は、天然遺伝子ではない、自然には一緒に見いだされることのない調節配列およびコーディング配列を含む（すなわち、調節配列およびコーディング配列は相互に異種である）、あらゆる遺伝子を意味する。したがって、キメラ遺伝子は、異なる起源に由来する調節配列およびコーディング配列を含むことができる、または同一起源に由来するが、自然に見いだされるのとは異なる方法で配列された調節配列およびコーディング配列を含むことができる。「外来」もしくは「異種」遺伝子は、遺伝子導入によって宿主生体内に導入される遺伝子を意味する。外来遺伝子は非天然生体内に挿入された天然遺伝子、天然宿主内の新規な場所に導入された天然遺伝子またはキメラ遺伝子を含むことができる。本明細書に開示した所定の実施形態内のポリヌクレオチド配列は、異種である。「トランス遺伝子」は、形質転換手順によってゲノム内に導入されている遺伝子である。「コドン最適化」オープンリーディングフレームは、宿主細胞の好ましいコドン使用頻度を模擬するために設計されたそのコドン使用頻度を有する。
本明細書で使用する用語「組換え」もしくは「異種」は、化学合成によって、または遺伝子工学技術による核酸の単離セグメントの操作によって、２つのさもなければ分離している配列セグメントの人工的組み合わせを意味する。用語「組換え」、「トランスジェニック」、「形質転換（された）」、「遺伝子操作（された）」もしくは「外来遺伝子発現のために改質された」は、本明細書では互換的に使用される。
天然アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は天然型であり、他方非天然型アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は自然には発生しない。
本明細書で使用する「調節配列」は、遺伝子の転写開始部位（例えば、プロモーター）、５’未翻訳領域および３’非コーディング領域の上流に所在する、ならびにその遺伝子から転写されたＲＮＡの転写、プロセッシングもしくは安定性または翻訳に影響を及ぼす可能性があるヌクレオチド配列を意味する。本明細書の調節配列は、プロモーター、エンハンサー、サイレンサー、５’未翻訳リーダー配列、イントロン、ポリアデニル化認識配列、ＲＮＡプロセッシング部位、エフェクター結合部位、ステムループ構造および遺伝子発現の調節に関連する他の要素を含むことができる。本明細書の１つ以上の調節要素は、本明細書のコーディング領域に対して異種であってよい。
本明細書の組換え構築物／ベクターを調製するための方法は、Ｊ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｄ．Ｒｕｓｓｅｌｌ （Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ、２００１）；Ｔ．Ｊ．Ｓｉｌｈａｖｙ ｅｔ ａｌ．（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｇｅｎｅ Ｆｕｓｉｏｎｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ、１９８４）；およびＦ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．（Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、５ｔｈ Ｅｄ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．，ＮＹ，２００２）によって記載された標準組換えＤＮＡおよび分子クローニング技術に従うことができる。
ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド配列に関して本明細書で使用する用語「配列同一性」もしくは「同一性」は、特定の比較ウィンドウにわたって最高一致について整列させた場合に同一である、２つの配列内の核酸塩基もしくはアミノ酸残基に関する。したがって、「配列同一性のパーセンテージ」もしくは「同一性率（％）」は、比較ウィンドウにわたって２つの最適に整列された配列を比較することによって決定される数値を意味するが、このとき比較ウィンドウ内のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド配列の部分は、２つの配列の最適整列のための参照配列（付加もしくは欠失を含まない）と比較して付加もしくは欠失（すなわち、ギャップ）を含む可能性がある。パーセンテージは、マッチした位置の数を生じさせるために両方の配列内で同一の核酸塩基もしくはアミノ酸残基が発生する位置の数を決定し、マッチした位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割り、配列同一性のパーセンテージを得るためにその結果に１００を掛けることによって計算される。ＤＮＡ配列とＲＮＡ配列との間の配列同一性を計算する場合に、ＤＮＡ配列のＴ残基がＲＮＡ配列のＵ残基と整列すると「同一」であると見なせると理解されるであろう。第１および第２ポリヌクレオチドの相補率を決定するためには、例えば、（ｉ）第１ポリヌクレオチドと第２ポリヌクレオチドの相補配列（またはその逆）との同一性率、および／または（ｉｉ）正準ワトソン＆クリック塩基対を作り出すであろう第１および第２ポリヌクレオチド間の塩基のパーセンテージを決定することによってこれを得ることができる。
例えば、本明細書に開示したポリヌクレオチド配列（ＢＬＡＳＴＮアルゴリズム）またはポリペプチド配列（ＢＬＡＳＴＰアルゴリズム）の２つ以上または３つ以上の間の同一性率を測定するためには、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）ウェブサイトでオンラインで利用できるＢａｓｉｃ Ｌｏｃａｌ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ Ｓｅａｒｃｈ Ｔｏｏｌ（ＢＬＡＳＴ）アルゴリズムを使用することができる。または、配列間の同一性率は、Ｃｌｕｓｔａｌアルゴリズム（例えば、ＣｌｕｓｔａｌＷ、ＣｌｕｓｔａｌＶもしくはＣｌｕｓｔａｌ−Ｏｍｅｇａ）を使用して実施することができる。Ｃｌｕｓｔａｌアラインメント法を使用する複数のアラインメントのためには、デフォルト値はＧＡＰ ＰＥＮＡＬＴＹ＝１０およびＧＡＰ ＬＥＮＧＴＨ ＰＥＮＡＬＴＹ＝１０に対応する可能性がある。Ｃｌｕｓｔａｌ法を使用したタンパク質配列のペアワイズアラインメントおよび同一性率の計算のためのデフォルトパラメーターは、ＫＴＵＰＬＥ＝１、ＧＡＰ ＰＥＮＡＬＴＹ＝３、ＷＩＮＤＯＷ＝５およびＤＩＡＧＯＮＡＬＳ ＳＡＶＥＤ＝５であってよい。核酸については、これらのパラメーターは、ＫＴＵＰＬＥ＝２、ＧＡＰ ＰＥＮＡＬＴＹ＝５、ＷＩＮＤＯＷ＝４およびＤＩＡＧＯＮＡＬＳ ＳＡＶＥＤ＝４であってよい。または依然として、配列間の同一性率は、ＢＬＯＳＵＭマトリックス（例えば、ＢＬＯＳＵＭ６２）を使用して例えばＧＡＰ ＯＰＥＮ＝１０、ＧＡＰ ＥＸＴＥＮＤ＝０．５、ＥＮＤ ＧＡＰ ＰＥＮＡＬＴＹ＝ｆａｌｓｅ、ＥＮＤ ＧＡＰ ＯＰＥＮ＝１０、ＥＮＤ ＧＡＰ ＥＸＴＥＮＤ＝０．５などのパラメーターを用いるＥＭＢＯＳＳアルゴリズム（例えば、ニードル）を使用して実施することができる。
様々なポリペプチドアミノ酸配列およびポリヌクレオチド配列は、本明細書では所定の実施形態の特徴として開示されている。本明細書に開示した配列と少なくとも約７０〜８５％、８５〜９０％もしくは９０％〜９５％同一であるこれらの配列の変異体を使用できる。または、変異アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は、本明細書に開示した配列と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有することができる。変異アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は、本明細書に開示した配列と同一の機能／活性または本明細書に開示した配列の約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の機能／活性を有することができる。最初はメチオニンを備えていない本明細書に開示した任意のポリペプチドアミノ酸配列は、典型的には、アミノ酸配列のＮ末端で少なくとも１つの開始メチオニンをさらに含むことができる。最初にメチオニンを備えている本明細書に開示した任意のポリペプチドアミノ酸配列は、任意選択的に、この残基を備えていない場合があると見なすことができる（すなわち、ポリペプチド配列は、参考文献では、この配列のＣ末端残基に対して２位残基と呼ぶことができる）。
本明細書で使用する用語「単離（された）」は、天然起源から完全もしくは部分的に精製されている任意の細胞成分（例えば、単離ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド分子）に関する。一部の例では、単離ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド分子は、より大きな組成物、バッファー系または試薬ミックスの一部である。例えば、単離ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド分子は、異種方法で細胞内または生体内に含まれる可能性がある。また別の例は、単離グルコシルトランスフェラーゼ酵素もしくは反応である。本明細書の「単離（された）」は、さらにデキストラン化合物を特徴付けることができる。したがって、本開示のデキストラン化合物は、合成の人工化合物であってよい、および／または自然に発生するとは考えられない特性を示す。
本明細書の「水性組成物」は、例えば、少なくとも約１０重量％の水を含む液体成分を有する。水性組成物の例には、例えば、混合物、溶液、分散液（例えば、コロイド状分散液）、懸濁液およびエマルジョンが含まれる。所定の実施形態における水性組成物は、水性組成物（すなわち、溶液、および典型的には粘性を有する）中に溶解させられるデキストランを含む。
本明細書で使用する用語「コロイド状分散液」は、分散相および分散媒を有する異種系に関するが、すなわち、顕微鏡的に分散した不溶性粒子が、別の物質（例えば、水もしくは水溶液などの水性組成物）全体に懸濁させられる。本明細書のコロイド状分散液の例は、親水コロイドである。例えば親水コロイドなどのコロイド状分散液の粒子は、本開示の所定のデキストラン化合物を含むことができる。用語「溶剤」および「分散剤」は、分散液の形成および／または安定化を促進する物質を意味するために本明細書では互換的に使用される。
用語「親水コロイド」および「ヒドロゲル」は、本明細書では互換的に使用される。親水コロイドは、水が分散媒であるコロイド系を意味する。
本明細書の「水溶液」は、溶媒が水を含む溶液を意味する。水溶液は、本明細書の所定の態様では溶剤として機能することができる。所定の実施形態におけるデキストラン化合物は、水溶液中で溶解、分散または混合することができる。
用語「溶剤」、「分散剤」などは、１つの物質の別の物質中の分散液の形成および／または安定化を促進する物質を意味するために本明細書では互換的に使用される。本明細書の「分散液」は、水性組成物全体に散乱、または一様に散乱している１つ以上の粒子（例えば、本明細書に開示したパーソナルケア製品、医薬製品、食品、家庭用製品または工業製品のいずれかの成分）を含む水性組成物を意味する。
本明細書で使用する用語「粘度」は、それが流動するのを誘導する傾向を示す力に流体または例えば親水コロイドなどの水性組成物が抵抗する程度についての尺度を意味する。本明細書で使用できる粘度の様々な単位には、ｃＰ（センチポアズ）およびＰａ・ｓ（パスカル秒）が含まれる。センチポアズは、１ポアズの百分の１である；１ポアズは、０．１００ｋｇ／ｍ／ｓに等しい。したがって、本明細書で使用する用語「粘度改質剤」などは、流体もしくは水性組成物の粘度を改変／改質できる何らかの物質を意味する。
本明細書で使用する用語「剪断減粘性挙動」は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の低下を意味する。本明細書で使用する用語「剪断増粘性挙動」は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の増加を意味する。本明細書の「剪断速度」は、水性組成物に進行性剪断変形が適用される速度を意味する。剪断変形は、回転方向に適用することができる。
本明細書で使用する水性組成物の粘度を増加させる方法に関する用語「接触させる工程」は、結果として水性組成物をデキストランと一緒にさせる何らかの行動を意味する。接触させる工程は、例えば、溶解させる、混合する、振とうする、またはホモジナイゼーションなどの当技術分野において公知の任意の手段によって実施できる。
用語「菓子類」、「菓子」、「スイーツ」、「砂糖菓子」、「キャンディ」などは、本明細書では互換的に使用される。菓子類は、甘味を有する任意の香味が付けられた食品を意味しており、その稠度はハードもしくはソフトであってよく、典型的には口で吸うこと、および／または口腔内で噛むことによって消費される。菓子類は、砂糖を含有することができる、またはさもなければ無糖であってよい。
用語「織物」、「生地」、「布」などは、本明細書では、天然および／または人造繊維の網状組織を有する織布を意味するために互換的に使用される。そのような繊維は、例えば、撚り糸もしくは編み糸であってよい。
本明細書の「織物ケア組成物」は、何らかの方法で織物を処理するために好適な何らかの組成物である。そのような組成物の例には、洗濯用洗剤および織物柔軟剤が含まれる。
用語「ヘビーデューティ洗剤」、「万能洗剤」などは、何らかの温度で白色および着色繊維製品の標準的洗濯のために有用な洗剤を意味するために互換的に使用される。用語「ローデューティ洗剤」もしくは「細繊維洗剤」は、例えばビスコース、ウール、シルク、マイクロファイバーまたは特別なケアを必要とする他の繊維などのデリケートな織物のケアのために有用な洗剤を意味するために本明細書では互換的に使用される。「特別なケア」は、例えば、過剰の水、低撹拌および／または漂白なしを使用する条件を含むことができる。
本明細書の「洗剤組成物」は、典型的には少なくとも１つの界面活性剤（洗剤化合物）および／または少なくとも１つのビルダーを含んでいる。本明細書の「界面活性剤」は、その中に物質が溶解させられた液体の表面張力を低下させる傾向を示す物質を意味する。界面活性剤は、例えば、洗剤、湿潤剤、乳化剤、発泡剤および／または分散剤として作用することができる。
本明細書の用語「抗再堆積剤」、「抗灰色化剤」などは、土壌が取り除かれた後にこれらの土壌が洗濯用洗浄水中の布地に再堆積しないように役立ち、このため洗濯物の灰色化／脱色を防止する物質を意味する。抗再堆積剤は、洗浄水中に分散した土壌をそのまま維持するのを助けることによって、および／または織物表面上への土壌の付着を遮断することによって機能できる。
本明細書の「口腔ケア組成物」は、歯（複数の歯）の表面および／または歯肉表面などの口腔内の軟質もしくは硬質表面を処理するために好適な任意の組成物である。
本明細書の用語「吸着」は、物質の表面への化合物（例えば、本明細書ではデキストラン）の接着を意味する。
用語「セルラーゼ」、「セルラーゼ酵素」などは、セルロース内のβ−１，４−Ｄ−グルコシド結合を加水分解し、それによりセルロースを部分的もしくは完全に分解させる酵素を意味するために互換的に使用される。または、セルロースは、例えば「β−１，４−グルカナーゼ」と呼ぶことができ、エンドセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．４）、エキソセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．９１）またはセロビアーゼ活性（ＥＣ３．２．１．２１）を有する可能性がある。「セルロース」は、β−１，４−結合Ｄ−グルコースモノマー単位の直鎖を有する不溶性多糖を意味する。
現在では、ゲル化用途により適合する、新規な高粘性デキストランポリマーの開発に関心が高まっている。さらに順に、そのようなデキストランポリマーを合成できるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を同定することにも関心が高い。
本開示の実施形態は、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコース
を含むデキストランを含む組成物に関する。
そのようなデキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）およびｚ平均慣性半径は、それぞれ約５，０００万〜２億Ｄａおよび２００〜２８０ｎｍである。さらに、そのようなデキストランは、任意選択的に、ロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物ではない。
この組成物の例は、上記の結合、重量およびサイズプロファイルを備えるデキストランが合成されるグルコシルトランスフェラーゼ反応である。重要なことに、このデキストランは、デキストランが相当に低濃度にある場合でさえ、水性組成物中で高粘性を示す。この高粘性プロファイルは以前に開示されたデキストランポリマーの粘度プロファイルと比較して独特であると考えられる。
本明細書のデキストランは、（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８７〜９３重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含むことができる。所定の実施形態では、デキストランは、（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含むことができる。
本開示の一部の態様におけるデキストランは、１位および６位でのみ連結した約８７、８７．５、８８、８８．５、８９、８９．５、９０、９０，５、９１、９１．５、９２、９２．５、もしくは９３重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および６位でのみ連結した約８７〜９２．５、８７〜９２、８７〜９１．５、８７〜９１、８７〜９０．５、８７〜９０、８７．５〜９２．５、８７．５〜９２、８７．５〜９１．５、８７．５〜９１、８７．５〜９０．５、８７．５〜９０、８８〜９２．５、８８〜９２、８８〜９１．５、８８〜９１、８８〜９０．５、８８〜９０、８８．５〜９２．５、８８．５〜９２、８８．５〜９１．５、８８．５〜９１、８８．５〜９０．５、８８．５〜９０、８９〜９２．５、８９〜９２、８９〜９１．５、８９〜９１、８９〜９０．５、８９〜９０、８９．５〜９２．５、８９．５〜９２、８９．５〜９１．５、８９．５〜９１、もしくは８９．５〜９０．５重量％のグルコースが存在してよい。
一部の態様におけるデキストランは、１位および３位でのみ連結した約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、もしくは１．２重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２、０．１〜１．０、０．１〜０．８、０．３〜１．２、０．３〜１．０、０．３〜０．８、０．４〜１．２、０．４〜１．０、０．４〜０．８、０．５〜１．２、０．５〜１．０、０．５〜０．８、０．６〜１．２、０．６〜１．０、もしくは０．６〜０．８重量％のグルコースが存在してよい。
一部の態様におけるデキストランは、１位および４位でのみ連結した約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、もしくは０．７重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７、０．１〜０．６、０．１〜０．５、０．１〜０．４、０．２〜０．７、０．２〜０．６、０．２〜０．５、０．２〜０．４、０．４〜０．７、０．４〜０．６、０．４〜０．５、もしくは約０．３〜０．４重量％のグルコースがあってよい。
一部の態様におけるデキストランは、１位、３位および６位でのみ連結した約７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、もしくは８．６重量％のグルコースであってよい。一部の例では、１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６、７．７〜８．５、７．７〜８．４、７．７〜８．３、７．７〜８．２、７．８〜８．６、７．８〜８．５、７．８〜８．４、７．８〜８．３、７．８〜８．２、７．９〜８．６、７．９〜８．５、７．９〜８．４、７．９〜８．３、７．９〜８．２、８．０〜８．６、８．０〜８．５、８．０〜８．４、８．０〜８．３、８．０〜８．２、８．１〜８．６、８．１〜８．５、８．１〜８．１、８．１〜８．３、もしくは８．１〜８．２重量％のグルコースであってよい。
一部の態様におけるデキストランは、（ａ）１位、２位および６位または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、もしくは１．７重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、（ａ）１位、２位および６位または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７、０．４〜１．６、０．４〜１．５、０．４〜１．４、０．４〜１．３、０．５〜１．７、０．５〜１．６、０．５〜１．５、０．５〜１．４、０．５〜１．３、０．６〜１．７、０．６〜１．６、０．６〜１．５、０．６〜１．４、０．６〜１．３、０．７〜１．７、０．７〜１．６、０．７〜１．５、０．７〜１．４、０．７〜１．３、０．８〜１．７、０．８〜１．６、０．８〜１．５、０．８〜１．４、０．８〜１．３重量％のグルコースが存在してよい。
デキストランのグルコシド結合プロファイルは、本明細書に開示した任意のプロトコルにしたがって生成されたデキストランを使用して決定できる。好適な結合決定プロトコルの例は、実施例９に開示したプロトコルに類似または同一であってよい：例えば、約５〜３０分間（例えば、１０分間）にわたり約７０〜９０℃（例えば、８０℃）で反応を加熱することによって非活性化されている０７６８ｇｔｆ酵素反応が１２〜１４ｋＤａ（キロダルトン）のＭＷＣＯを備える透析チュービング（例えば、再生セルロース製）（例えば、Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ（登録商標）４透析チュービング、製品番号１３２７０６、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）内に配置される。非活性化された反応は、次に約４〜１０日間（例えば、７日間）にわたり約２０〜２５℃（室温）で大量の水（例えば、３〜５Ｌ）に対して透析される；この水は、透析中は毎日交換することができる。デキストラン生成物は、次に（ｉ）透析した非活性化反応を反応体積の約１〜２倍（１．５倍）量の１００％メタノールと混合することにより沈降させ、（ｉｉ）同一体積の１００％メタノールを用いて少なくとも２回洗浄し、（ｉｉｉ）（任意選択的に真空下の）約４０〜５０℃（例えば、４５℃）で乾燥させる。無水デキストランの溶解可能量は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ）もしくはＤＭＳＯ／５％のＬｉＣｌ中に溶解させ、その後に全ての遊離ヒドロキシル基を（例えば、ＮａＯＨ／ＤＭＳＯスラリー、その後のヨードメタンの連続的添加によって）メチル化する。メチル化デキストランは次に（例えば、塩化メチレン中で）抽出し、約１００〜１２５℃（例えば、１２０℃）でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液を使用してモノマー単位に加水分解する。ＴＦＡはその後蒸発させ、重水素化ホウ素ナトリウムを使用して還元的開環を実施する。グリコシド結合を加水分解することにより作成されたヒドロキシルは、次に約４０〜６０℃（例えば、５０℃）の温度で塩化アセチルおよびＴＦＡを用いて処理することによってアセチル化する。次に、誘導体化試薬を蒸発させ、生じたメチル化／アセチル化モノマーをアセトニトリル中で復元させる；この調製物を適切なカラム（例えば、ビスシアノプロピルシアノプロピルフェニルポリシロキサン）を使用するＧＣ／ＭＳによって分析する。メチルおよびアセチル官能基の相対ポジショニングは、独特の保持時間を備える主に公表データベースと比較できる指数および質量スペクトルを提供する。この方法で、モノマー単位の誘導体は、各モノマーがデキストランポリマー内で最初にどのように連結されたのかを示す。
本明細書のデキストランは、相互から反復して分岐する長鎖（大多数または全部がα−１，６−結合を含有する）が存在する分枝状構造（例えば、長鎖は、順にそれ自体が他の長鎖から分岐することができ、さらにそれ自体が他の長鎖から分離できるなどの、他の長鎖からの分岐鎖であってよい）であってよいと考えられる。分岐鎖構造は、さらに長鎖からの短鎖を含むことができる；これらの短鎖は、大部分が例えばα−１，３および１，４−結合を含むと考えられる。デキストラン中の分岐点は、他の長鎖から分岐している長鎖からであろうと、または長鎖から分岐している短鎖からであろうと、α−１，６−結合内に含まれるグルコースからのα−１，３、−１，４または−１，２結合を含むと思われる。平均すると、一部の態様ではデキストラン分岐鎖の全分岐点の約２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、１５〜３５％、１５〜３０％、１５〜２５％、１５〜２０％、２０〜３５％、２０〜３０％、２０〜２５％、２５〜３５％、もしくは２５〜３０％が長鎖に分岐する。大多数（＞９８％もしくは９９％）または全部の他の分岐点が短鎖に分岐する。
デキストラン分岐鎖構造の長鎖は、一部の態様では長さが類似の場合がある。長さが類似であるとは、分岐鎖構造内の全長鎖の少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％もしくは９０％の長さ（ＤＰ）が分岐鎖構造の全長鎖の平均長の±１５％（または１０％、５％）の範囲内にあることを意味する。一部の態様では、長鎖の平均長（ｍｅａｎ ｌｅｎｇｔｈもしくはａｖｅｒａｇｅ ｌｅｎｇｔｈ）は、約１０〜５０ＤＰ（すなわち、１０〜５０グルコースモノマー）である。例えば、長鎖の平均個別長は、約１０、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、３５、４０、４５、５０、１０〜５０、１０〜４０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１５〜５０、１５〜４０、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜５０、２０〜４０、２０〜３０、もしくは２０〜２５ＤＰの可能性がある。
所定の実施形態におけるデキストラン長鎖は、実質的にα−１，６−グルコシド結合および少量（２．０％未満）のα−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含むことができる。例えば、デキストラン長鎖は、約または少なくとも約９８％、９８．２５％、９８．５％、９８．７５％、９９％、９９．２５％、９９．５％、９９．７５％、もしくは９９．９％のα−１，６−グルコシド結合を含むことができる。所定の実施形態におけるデキストラン長鎖は、α−１，４−グルコシド結合を含んでいない（すなわち、そのような長鎖は、大部分がα−１，６−結合および少量のα−１，３−結合を有する）。これとは逆に、一部の実施形態におけるデキストラン長鎖は、α−１，３−グルコシド結合を含んでいない（すなわち、そのような長鎖は、大部分がα−１，６−結合および少量のα−１，４−結合を有する）。上記の実施形態の任意のデキストラン長鎖は、例えば、さらにα−１，２−グルコシド結合を含まない場合がある。さらに一部の態様では、デキストラン長鎖は、１００％のα−１，６−グルコシド結合を含むことができる（他の鎖から分岐するためにそのような長鎖によって使用される結合を除く）。
一部の態様におけるデキストラン分子の短鎖は、長さが１〜３グルコースモノマーであり、デキストランポリマーの全グルコースモノマーの約５〜１０％未満を含んでいる。本明細書の短鎖の少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは全部は、長さが１〜３グルコースモノマーである。デキストランモノマーの短鎖は、例えば、デキストラン分子の全グルコースモノマーの約１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、もしくは１％未満を含むことができる。
一部の態様におけるデキストラン分子の短鎖は、α−１，２−、α−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含むことができる。短鎖は、全部を（個別的にではなく）一緒に検討した場合、（ｉ）これらの結合の全３つ、または（ｉｉ）例えば、α−１，３−およびα−１，４−グルコシド結合を含むことができる。本明細書のデキストラン分子の短鎖は、デキストランの他の短鎖に関して異種（すなわち、結合プロファイルにおける一部の変動を示す）または同種（すなわち、類似もしくは同一結合プロファイルを共有する）であってよい。
所定の実施形態におけるデキストランは、約または少なくとも約５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、もしくは２億（または５，０００万〜２億の間のいずれかの整数）（またはこれらの数値中の２つの数値間のいずれかの範囲）のＭｗを有することができる。デキストランのＭｗは、例えば、約５０〜２００、６０〜２００、７０〜２００、８０〜２００、９０〜２００、１００〜２００、１１０〜２００、１２０〜２００、５０〜１８０、６０〜１８０、７０〜１８０、８０〜１８０、９０〜１８０、１００〜１８０、１１０〜１８０、１２０〜１８０、５０〜１６０、６０〜１６０、７０〜１６０、８０〜１６０、９０〜１６０、１００〜１６０、１１０〜１６０、１２０〜１６０、５０〜１４０、６０〜１４０、７０〜１４０、８０〜１４０、９０〜１４０、１００〜１４０、１１０〜１４０、１２０〜１４０、５０〜１２０、６０〜１２０、７０〜１２０、８０〜１２０、９０〜１２０、１００〜１２０、１１０〜１２０、５０〜１１０、６０〜１１０、７０〜１１０、８０〜１１０、９０〜１１０、１００〜１１０、５０〜１００、６０〜１００、７０〜１００、８０〜１００、９０〜１００、もしくは９，５００万〜１億５００万であってよい。これらのＭｗのいずれも、所望であれば、Ｍｗを１６２．１４で割ることによってＤＰｗで表示することができる。
本明細書のデキストランのｚ平均旋回半径は、約２００〜２８０ｎｍであってよい。例えば、ｚ平均Ｒｇは、約２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、もしくは２８０ｎｍ（または２００〜２８０ｎｍの間の任意の整数）であってよい。他の例として、ｚ平均Ｒｇは、約２００〜２８０、２００〜２７０、２００〜２６０、２００〜２５０、２００〜２４０、２００〜２３０、２２０〜２８０、２２０〜２７０、２２０〜２６０、２２０〜２５０、２２０〜２４０、２２０〜２３０、２３０〜２８０、２３０〜２７０、２３０〜２６０、２３０〜２５０、２３０〜２４０、２４０〜２８０、２４０〜２７０、２４０〜２６０、２４０〜２５０、２５０〜２８０、２５０〜２７０、もしくは２５０〜２６０ｎｍであってよい。
一部の態様におけるデキストランのＭｗおよび／またはｚ平均Ｒｇは、実施例９に開示したプロトコルと類似または同一のプロトコルにしたがって測定できる。例えば、本明細書のＭｗおよび／またはｚ平均Ｒｇは、１５０〜２５０ｐｐｍ（例えば、約２００ｐｐｍ）のＮａＮ３を備える０．０５〜１．０Ｍ（例えば、約０．０７５Ｍ）のＴｒｉｓ（ヒドロキシメチル）アミノメタンバッファー中に０．４〜０．６ｍｇ／ｍＬ（例えば、約０．５ｍｇ／ｍＬ）で０７６８ｇｔｆによって生成されたデキストランを最初に溶解させることによって測定できる。無水デキストランの溶媒和は、４５〜５５℃（例えば、約５０℃）で１２〜１８時間振とうすることによって達成できる。生じたデキストラン溶液は、３基のオンライン検出器：示差屈折計（例えば、Ｗａｔｅｒｓ ２４１４屈折指数検出器）、準弾性光散乱（ＱＥＬＳ）検出器（例えば、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ製のＱＥＬＳ検出器）を装備したマルチアングル光散乱（ＭＡＬＳ）光度計（例えば、Ｈｅｌｅｏｓ（商標）−２ １８−角度 マルチアングルＭＡＬＳ光度計）および示差毛細管粘度計（例えば、Ｗｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ（商標）示差毛細管粘度計と結合された分離モジュール（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ製のＡｌｌｉａｎｃｅ（商標）２６９５分離モジュール）を含む好適なフローインジェクション・クロマトグラフィー装置内に入ることができた。インジェクションピークからデキストランポリマーピークを分離するためには、２基の好適なサイズ排除カラム（例えば、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ製のＡＱＵＡＧＥＬ−ＯＨ ＧＵＡＲＤカラム）を使用することができるが、このとき移動相はサンプル溶媒（上記）と同一であってよく、流量は約０．２ｍＬ／分であってよく、インジェクション量は約０．１ｍＬであってよく、カラム温度は約３０℃であってよい。データ収集のため（例えば、Ｗａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒ（商標）バージョン３ソフトウェア）およびマルチ検出器データ整理のため（Ｗｙａｔｔ製のＡｓｔｒａ（商標）バージョン６ソフトウェア）を好適なソフトウェアを使用できる。ＭＡＬＳデータは、重量平均分子量（Ｍｗ）およびｚ平均旋回半径（Ｒｇ）を提供することができ、ＷＥＬＳデータは、例えば、ｚ平均流体力学半径を提供できる。
本明細書のデキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７（およびｇｔｆ活性を有する）と１００％同一、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそのアミノ酸配列からなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物であってよい。配列番号１（もしくは関連配列）を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の非限定的例には、配列番号２（およびｇｔｆ活性を有する）と１００％同一である、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそのアミノ酸配列からなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素が含まれる。デキストランの生成は、例えば、本明細書に開示したｇｔｆ反応を用いて遂行できる。本発明の詳細な説明において開示したデキストラン（例えば、分子量、結合および分岐プロファイル）は、任意選択的に、配列番号１もしくは２（または少なくとも９０％同一［上記］である関連配列）を含む、またはそれからなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物と特徴付けることができる。一部の他の実施形態では、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、配列番号６、１０、１４もしくは１８によってコードされたアミノ酸配列の分泌部分（すなわち、除去されたシグナルペプチド）と１００％同一である、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそれらからなる。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば細菌もしくは真菌などの様々な微生物起源由来の可能性がある。細菌性グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種もしくはワイセラ（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）種由来の酵素である。ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種の例には、Ｓ．ソブリナス（ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、Ｓ．ダウネイ（Ｓ．ｄｏｗｎｅｉ）、Ｓ．サルバリウス（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｓ．デンチロウセッティ（Ｓ．ｄｅｎｔｉｒｏｕｓｅｔｔｉ）、Ｓ．ミュータンス（Ｓ．ｍｕｔａｎｓ）、Ｓ．オラリス（Ｓ．ｏｒａｌｉｓ）、Ｓ．ガロリティクス（Ｓ．ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）およびＳ．サングイニス（Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）が含まれる。ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種の例には、Ｌ．シュードメセンテロイデス（Ｌ．ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｌ．メセンテロイデス（Ｌ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｌ．アメリビオスム（Ｌ．ａｍｅｌｉｂｉｏｓｕｍ）、Ｌ．アルゲンチナム（Ｌ．ａｒｇｅｎｔｉｎｕｍ）、Ｌ．カルノスム（Ｌ．ｃａｒｎｏｓｕｍ）、Ｌ．シトレウム（Ｌ．ｃｉｔｒｅｕｍ）、Ｌ．クレモリス（Ｌ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｌ．デキストラニカム（Ｌ．ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）およびＬ．フルクトサム（Ｌ．ｆｒｕｃｔｏｓｕｍ）が含まれる。ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の例には、Ｌ．フェルメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．デルブレキィ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．ヘルベチカス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、Ｌ．サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｌ．カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、Ｌ．クルバタス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、Ｌ．プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、Ｌ．サケイ（Ｌ．ｓａｋｅｉ）、Ｌ．ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、Ｌ．ブフネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）およびＬ．ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）が含まれる。ワイセラ（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）種の例には、Ｗ．シバリア（Ｗ．ｃｉｂａｒｉａ）、Ｗ．コンフサ（Ｗ．ｃｏｎｆｕｓａ）、Ｗ．ハロトレランス（Ｗ．ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｗ．ヘレニカ（Ｗ．ｈｅｌｌｅｎｉｃａ）、Ｗ．カンドレリ（Ｗ．ｋａｎｄｌｅｒｉ）、Ｗ．キムチイ（Ｗ．ｋｉｍｃｈｉｉ）、Ｗ．コーリエンシス（Ｗ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｗ．マイナー（Ｗ．ｍｉｎｏｒ）、Ｗ．パラメセンテロイデス（Ｗ．ｐａｒａｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｗ．ソリ（Ｗ．ｓｏｌｉ）およびＷ．サイランデンシス（Ｗ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）が含まれる。一部の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、Ｌ．メセンテロイデス（Ｌ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来ではない。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、本明細書に開示した、およびさらにＮ末端および／またはＣ末端上の１〜３００個（または例えば［１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５もしくは５０］の間のいずれかの整数）のアミノ酸配列のいずれかであってよい。そのような追加の残基は、それにグルコシルトランスフェラーゼ酵素が由来する対応する野生型配列由来であってよい、または例えば、エピトープタグ（Ｎ末端もしくはＣ末端のいずれか）もしくは異種シグナルペプチド（Ｎ末端で）などの異種配列であってよい。
本明細書のデキストランを生成するために使用されるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、典型的にはＮ末端シグナルペプチドが欠如する成熟形にある。本明細書の成熟グルコシルトランスフェラーゼ酵素を生成するための発現系は、細胞外分泌を指令するようにＮ末端シグナルペプチドをコードする配列をさらに含むポリヌクレオチドをコードする酵素を使用することができる。そのような実施形態におけるシグナルペプチドは、分泌工程中に酵素から開裂される。シグナルペプチドは、グルコシルトランスフェラーゼに対して天然または異種のいずれであってもよい。本明細書において有用なシグナルペプチドの例は、細菌（例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）などのバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種）または真菌種由来のシグナルペプチドである。細菌性シグナルペプチドの例は、ａｐｒＥシグナルペプチド、例えばバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種（例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＶｏｇｔｅｎｔａｎｚ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．５５：４０−５２を参照されたい）。
配列番号１、配列番号５、配列番号９、配列番号１３および配列番号１７は、Ｎ末端シグナルペプチドが欠如している成熟グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例である。これらや関連アミノ酸配列はメチオニン残基からは始まらないので、シグナルペプチドを使用せずに（例えば酵素が細胞内で発現し、細胞溶解物から入手される発現系を用いて）これらの酵素のいずれかを発現する場合は、好ましくはＮ末端開始メチオニンが（直接的または例えばエピトープなどの介在異種アミノ酸配列を介して）付加されていると理解されるであろう。
所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、当技術分野において公知の任意の手段によって生成することができる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば微生物異種発現系などの異種発現系内で組換え技術により生成することができる。異種発現系の例には、細菌性（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、例えば、ＴＯＰ１０、ＭＧ１６５５もしくはＢＬ２１ ＤＥ３；バシラス種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）、例えば枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）および真核性（例えば、酵母、例えばピチア種（Ｐｉｃｈｉａ ｓｐ．）およびサッカロミセス種（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）発現系が含まれる。
本明細書に開示したグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、任意の精製状態（例えば、純粋もしくは非純粋）で使用することができる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、その使用前に精製および／または単離することができる。非純粋であるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例には、細胞溶解物の形態にある酵素が含まれる。細胞溶解物もしくは抽出物は、その酵素を異種発現させるために使用される細菌（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から調製することができる。例えば、細菌は、Ｆｒｅｎｃｈプレッシャーセルを使用して崩壊させることができる。また別の実施形態では、細菌は、ホモジナイザー（例えば、ＡＰＶ、Ｒａｎｎｉｅ、Ｇａｕｌｉｎ）を用いてホモジナイズすることができる。グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、典型的にはこれらのタイプの調製物中に可溶性である。本明細書の細菌性細胞溶解物、抽出物もしくはホモジネートは、スクロースからデキストランを精製するための反応中で約０．１５〜０．３（ｖ／ｖ）％で使用することができる。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素を発現させるための異種遺伝子発現系は、例えば、タンパク質分泌のために設計することができる。グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、典型的にはそのような実施形態においてシグナルペプチドを含む。一部の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、自然には発生しない；例えば、本明細書の酵素は（それから本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素が由来している可能性が高い）微生物から自然に分泌される（すなわち、成熟形）酵素であるとは考えられない。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の活性は、当技術分野において公知の任意の方法を使用して決定できる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素活性は、スクロース（約５０ｇ／Ｌ）、デキストランＴ１０（約１ｍｇ／ｍＬ）およびリン酸カリウムバッファー（約ｐＨ６．５、５０ｍＭ）を含有する反応中で、還元糖（フルクトースおよびグルコース）の生成を測定することによって決定できるが、このとき溶液は約２２〜２５℃で約２４〜３０時間保持される。還元糖は、約１ＮのＮａＯＨおよび約０．１％の塩化トリフェニルテトラゾリウムを含有する混合物に０．０１ｍＬの反応を加え、次に約５分間にわたりＯＤ４８０ｎｍでの吸光度の増加を監視することによって測定できる。さらに例えば、本明細書のｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）などの１単位の酵素は、１００ｇ／Ｌのスクロースを用いて、２６℃、ｐＨ６．５で１時間にわたり１ｇのスクロースを消費するために必要とされる酵素の量であると定義できる。
本明細書に開示したデキストランは、グルコシルトランスフェラーゼ反応に含まれるグルコシルトランスフェラーゼの生成物であり得る。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応の温度は、所望であれば、制御できる。所定の実施形態では、温度は、約５℃〜約５０℃である。所定の他の実施形態における温度は、約２０℃〜約４０℃である。または、温度は、約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、もしくは４０℃であってよい。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応の温度は、当技術分野において公知の様々な手段を使用して維持することができる。例えば、温度は、所望の温度に設定した空気浴もしくは水浴インキュベーター内に反応を含有する容器を配置することによって維持することができる。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応中のスクロースの初期濃度は、約２０ｇ／Ｌ〜９００ｇ／Ｌ、２０ｇ／Ｌ〜４００ｇ／Ｌ、７５ｇ／Ｌ〜１７５ｇ／Ｌもしくは５０ｇ／Ｌ〜１５０ｇ／Ｌであってよい。スクロースの初期濃度は、例えば、約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、５０〜１５０、７５〜１２５、９０〜１１０、５０〜５００、１００〜５００、２００〜５００、３００〜５００、４００〜５００、５０〜４００、１００〜４００、２００〜４００、３００〜４００、５０〜３００、１００〜３００、２００〜３００、５０〜２００、１００〜２００、もしくは５０〜１００ｇ／Ｌ（または２０〜９００ｇ／Ｌの間のいずれかの整数）であってよい。「スクロースの初期濃度」は、反応成分（少なくとも、水、スクロース、グルコシルトランスフェラーゼ酵素）の全部が加えられた直後のｇｔｆ反応中のスクロース濃度を意味する。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応に使用されたスクロースは、高度に純粋（≧９９．５％）またはいずれかの他の純度もしくはグレードであってよい。例えば、スクロースは、少なくとも９９．０％の純度を有する可能性がある、または試薬グレードのスクロースであってよい。また別の例として、精製が不完全なスクロースを使用できる。本明細書の精製が不完全なスクロースは、精白糖まで加工されていないスクロースを意味する。したがって、精製が不完全なスクロースは、完全に未精製であってよい、または部分精製されていてよい。未精製スクロースの例は、「粗スクロース」（「粗糖」）およびそれらの溶液である。部分精製スクロースの例は、１回、２回、３回以上の結晶化工程を受けていない。本明細書の不完全精製スクロースのＩＣＵＭＳＡ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｆｏｒ Ｕｎｉｆｏｒｍ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｓｕｇａｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ（国際砂糖分析法統一委員会））値は、例えば、１５０より大きい可能性がある。本明細書のスクロースは、例えば、サトウキビ、サトウダイコン、キャッサバ、サトウモロコシもしくはトウモロコシなどの任意の再生可能な砂糖源由来であってよい。本明細書で有用なスクロースの好適な形態は、例えば、結晶形または非結晶形（例えば、シロップ、サトウキビ汁、ビート汁）である。不完全精製スクロースの追加の好適な形態は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２７５２５６号明細書に開示されている。
スクロースについてのＩＣＵＭＳＡ価を決定する方法は当技術分野において周知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＩＣＵＭＳＡ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｓｕｇａｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ：Ｏｆｆｉｃｉａｌ ａｎｄ Ｔｅｎｔａｔｉｖｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｆｏｒ Ｕｎｉｆｏｒｍ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｓｕｇａｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ（ＩＣＵＭＳＡ）（Ｅｄ．Ｈ．Ｃ．Ｓ．ｄｅ Ｗｈａｌｌｅｙ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，１９６４）において国際砂糖分析法統一委員会によって開示されている。ＩＣＵＭＳＡ値は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＲ．Ｊ．ＭｃＣｏｗａｇｅ、Ｒ．Ｍ．Ｕｒｑｕｈａｒｔ ａｎｄ Ｍ．Ｌ．Ｂｕｒｇｅ （Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｏｌｏｕｒ ｏｆ Ｒａｗ Ｓｕｇａｒｓ、Ｂｒｏｗｎ Ｓｕｇａｒｓ ａｎｄ Ｃｏｌｏｕｒｅｄ Ｓｙｒｕｐｓ ａｔ ｐＨ ７．０ - Ｏｆｆｉｃｉａｌ、Ｖｅｒｌａｇ Ｄｒ Ａｌｂｅｒｔ Ｂａｒｔｅｎｓ、２０１１ ｒｅｖｉｓｉｏｎ）によって記載されたＩＣＵＭＳＡ法ＧＳ１／３−７によって測定できる。
所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ反応のｐＨは、約４．０〜約８．０の間であってよい。または、ｐＨは、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５もしくは８．０であってよい。ｐＨは、リン酸塩、Ｔｒｉｓ、クエン酸塩もしくはそれらの組み合わせを含むがそれらに限定されない好適なバッファーの添加もしくは組み込みによって調整または制御することができる。ｇｔｆ反応中のバッファー濃度は、例えば、０ｍＭ〜約１００ｍＭまたは約１０、２０もしくは５０ｍＭであってよい。
グルコシルトランスフェラーゼ反応は、本明細書に開示した反応条件の１つ以上を適用するために好適な任意の容器内に含有することができる。例えば、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応は、ステンレス鋼、プラスチックもしくはガラス容器中、または特定反応を含有するために好適なサイズの容器内にあってよい。そのような容器には、任意選択的に撹拌装置を装備することができる。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応は、任意選択的に撹拌もしくは軌道振とうによってかき混ぜることができる。そのようなかき混ぜは、例えば、約５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、５０〜１５０、６０〜１４０、７０〜１３０、８０〜１２０、もしくは９０〜１１０ｒｐｍであってよい。
反応中のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の濃度は、例えば、少なくとも１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０Ｕ／Ｌであってよい。一部の実施形態では、１５〜３５、１５〜３０、１５〜２５、２０〜３５、２０〜３０、２０〜２５、２５〜３５、２５〜３０、もしくは３０〜３５Ｕ／Ｌのグルコシルトランスフェラーゼを使用することができる。
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応は、完了するために約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１８、２４、３０、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１８〜３０、２０〜２８、もしくは２２〜２６時間を要する可能性がある。反応時間は、例えば、反応において使用されるスクロールおよびグルコシルトランスフェラーゼ酵素の量などの特定のパラメーターに依存する可能性がある。
したがって、グルコシルトランスフェラーゼ反応を規定する本明細書の特徴の全部は結合することができる。単純に１つの例として、０７６８グルコシルトランスフェラーゼ（配列番号１もしくはその関連配列を含む）を使用する反応は、最初に９０〜１１０ｇ／Ｌ（例えば、約１００ｇ／Ｌ）のスクロース、ｐＨ６．０〜７．０（例えば、約ｐＨ６．５）で１０〜３０ｍＭ（例えば、約２０ｍＭ）のリン酸カリウムバッファーおよび２０〜３０Ｕ／Ｌ（例えば、約２５Ｕ／Ｌ）の酵素を含有することができる。そのような反応は、２４〜２８℃（例えば、約２６℃）で５０〜１５０ｒｐｍ（例えば、約１００ｒｐｍ）で振とうしながら約２０〜２８時間（例えば、約２４時間）にわたり保持することができる。
一部の実施形態では、ｇｔｆ０７６８酵素（配列番号１もしくは関連配列）および本明細書に開示したいずれかの量のスクロースを含むグルコシルトランスフェラーゼ反応は、反応を開始後約２４、２２、２０、１８もしくは１６時間未満で完了する（例えば、最初に用意されたスクロースの９５％以上が欠失している）可能性がある。そのような反応中のスクロースの欠失は、同一もしくは類似の反応の約または少なくとも約３、４、５、６、７、８、９もしくは１０分の１遅いが、例えば、ｇｔｆ０７６８酵素の代わりにロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）デキストラン分解酵素を含んでいる。
本明細書のデキストランを含む組成物は、非水性（例えば、無水組成物）であってよい。そのような実施形態の例には、粉末、顆粒、マイクロカプセル、フレークまたは粒状物質の任意の他の形態が含まれる。他の例には、例えば、ペレット、バー、穀粒、ビーズ、タブレット、スティックもしくは他の凝集体などのより大きな組成物が含まれる。本明細書の非水性もしくは無水組成物は、典型的にはその中に含まれた３、２、１、０．５もしくは０．１重量％未満の水を有する。非水性もしくは無水組成物中の本明細書のデキストランの量は、例えば、約または少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、もしくは９９．９重量％であってよい。本明細書の非水性組成物は、例えば、家庭用製品、パーソナルケア製品、医薬製品、工業製品もしくは食品の形態にあってよい。
本開示の所定の実施形態では、デキストランを含む組成物は、約または少なくとも約２５ｃＰの粘度を有する水性組成物であってよい。または、本明細書の水性組成物は、例えば、約または少なくとも約２５、５０、７５、１００、２５０、５００、７５０、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、１６０００、１７０００、１８０００、１９０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、４５０００、もしくは５，０００ｃＰ（または２５〜５０，０００ｃＰの間の任意の整数）の粘度を有することができる。水性組成物の例には、親水コロイドおよび水溶液が含まれる。
粘度は、約３℃〜約１１０℃（または３〜１１０℃の間のいずれかの整数）のいずれかの温度で本明細書の水性組成物を用いて測定できる。または、粘度は、例えば、約４℃〜３０℃または約２０℃〜２５℃の間の温度で測定できる。粘度は、大気圧（約７６０トル）または任意の他のより高い、もしくは低い圧力で測定できる。
本明細書に開示した水性組成物の粘度は、粘度計もしくは流動計を使用して、または当技術分野において公知の任意の他の手段を使用して測定できる。当業者であれば、粘度計もしくは流動計を使用すると流動学的挙動（すなわち、流動条件に伴って変動する粘度を有する）を示す本明細書の水性組成物の粘度を測定できることを理解できるであろう。そのような実施形態の粘度は、例えば、約０．１〜１，０００ｒｐｍ（毎分回転数）の回転剪断速度で測定できる。または、粘度は、約１０、６０、１５０、２５０もしくは６００ｒｐｍの回転剪断速度で測定できる。
所定の実施形態では、粘度はその中で構成成分のデキストランが合成された水性組成物を用いて測定できる。例えば、粘度は、完了もしくはほぼ完了している本明細書のｇｔｆ反応について測定できる。そこで粘度は、その中で構成成分のデキストランが精製されていない（例えば、組成物中の水以外の他の成分は１、５もしくは１０重量％超存在する）水性組成物を用いて測定できる；そのような組成物は、１つ以上の塩、バッファー、タンパク質（例えば、ｇｔｆ酵素）、糖類（例えば、フルクトース、グルコース、ロイクロース、オリゴ糖）を含有する可能性がある。
本明細書に開示した水性組成物のｐＨは、例えば、約２．０〜約１２．０の間であってよい。または、ｐＨは、例えば、約２．０、３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０、１１．０、１２．０；もしくは５．０〜約１２．０の間；または約４．０〜８．０の間；または約５．０〜８．０の間であってよい。
例えば親水コロイドもしくは水溶液などの本明細書の水性組成物は、約または少なくとも約１０重量％の水を有する溶媒を含むことができる。他の実施形態では、溶媒は、例えば、約または少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００重量％（または１０〜１００重量％の間のいずれかの整数）の水である。
本明細書のデキストランは、例えば、約または少なくとも約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９，重量％もしくは９０重量％で水性組成物中に存在することができる。下記の実施例８は、所定の態様におけるデキストランが、デキストランが相当に低濃度である場合に水溶液に高粘性を提供することを証明している。したがって、本開示の所定の実施形態は、約３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、もしくは０．５重量％未満のデキストランを備える水性組成物に導かれる。
本明細書の水性組成物は、デキストランに加えて他の成分を含むことができる。例えば、水性組成物は、例えばナトリウム塩（例えば、ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４）などの１つ以上の塩を含むことができる。塩の他の非限定的例には、（ｉ）アルミニウム、アンモニウム、バリウム、カルシウム、クロム（ＩＩもしくはＩＩＩ）、銅（ＩもしくはＩＩ）、鉄（ＩＩもしくはＩＩＩ）、水素、鉛（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩもしくはＩＩＩ）、水銀（ＩもしくはＩＩ）、カリウム、銀、ストロンチウムナトリウム、スズ（ＩＩもしくはＩＶ）または亜鉛カチオンおよび（ｉｉ）酢酸塩、ホウ酸塩、臭素酸塩、臭化物、炭酸塩、塩素酸塩、塩化物、亜塩素酸塩、クロム酸塩、シアナミド、シアン化物、重クロム酸塩、リン酸二水素、フェリシアン化物、フェロシアン化第二鉄、フッ化物、炭酸水素、リン酸水素、硫酸水素、硫化水素、亜硫酸水素、水素化物、水酸化物、次亜塩素酸塩、ヨウ素酸塩、ヨウ化物、硝酸塩、窒化物、亜硝酸塩、シュウ酸塩、酸化物、過塩素酸塩、過マンガン酸塩、過酸化物、リン酸塩、リン化物、亜リン酸塩、ケイ酸塩、スズ酸塩、亜スズ酸塩、硫酸塩、硫化物、亜硫酸塩、酒石酸塩もしくはチオシアン酸塩アニオンが含まれる。したがって、例えば、上記の（ｉ）からのカチオンおよび上記の（ｉｉ）からのアニオンを有する任意の塩が水性組成物中に存在してよい。塩は、例えば、約０．０１〜約１０．００（もしくは０．０１〜１０．００の間のいずれかの１００分の１増分）の重量％で本明細書の水性組成物中に存在してよい。
本明細書の組成物は、任意選択的に１つ以上の活性酵素を含有することができる。好適な酵素の非限定的例には、プロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、金属脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、メラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼおよびアミラーゼが含まれる。酵素が含まれる場合、酵素は、例えば、約０．０００１〜０．１重量％（例えば、０．０１〜０．０３重量％）の活性酵素（例えば、純粋酵素タンパク質として計算された）で本明細書の組成物中に含まれてよい。
本明細書のセルラーゼは、エンドセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．４）、エキソセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．９１）もしくはセロビアーゼ活性（ＥＣ３．２．１．２１）を有することができる。本明細書のセルラーゼは、セルラーゼ活性を維持するための好適な条件下で活性を有する「活性セルラーゼ」である；そのような好適な条件を決定することは、当技術分野の技術の範囲内に含まれる。
本明細書のセルラーゼは、例えば細菌もしくは真菌などの任意の微生物起源由来の可能性がある。化学修飾されたセルラーゼもしくはタンパク質組換え技術により作成された突然変異体セルラーゼが含まれる。好適なセルラーゼには、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属、フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、チエラビア（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）属およびアクレモニウム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）属が含まれるが、それらに限定されない。他の例として、セルラーゼは、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、マイセリオフソラ・サーモフィラもしくはフザリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）および参照により本明細書に全部が組み込まれる米国特許第４４３５３０７号明細書、同第５６４８２６３号明細書、同第５６９１１７８号明細書、同第５７７６７５７号明細書および同第７６０４９７４号明細書に開示されている他のセルラーゼに由来してよい。典型的なトリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）セルラーゼは、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４６８９２９７号明細書、同第５８１４５０１号明細書、同第５３２４６４９号明細書および国際公開第９２／０６２２１号パンフレットおよび国際公開第９２／０６１６５号パンフレットに開示されている。典型的なバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属セルラーゼは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６５６２６１２号明細書に開示されている。セルラーゼ、例えば上記のいずれかなどのセルラーゼは、好ましくはＮ末端シグナルペプチドが欠如する成熟形にある。本明細書において有用な市販で入手できるセルラーゼにはＣＥＬＬＵＺＹＭＥ（登録商標）および ＣＡＲＥＺＹＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）；ＣＬＡＺＩＮＡＳＥ（登録商標）および ＰＵＲＡＤＡＸ（登録商標）ＨＡ （ＤｕＰｏｎｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、および ＫＡＣ−５００（Ｂ）（登録商標）（Ｋａｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）が含まれる。
または、本明細書のセルラーゼは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４４３５３０７号明細書、同第５７７６７５７号明細書および同第７６０４９７４号明細書に記載されたような、当技術分野において公知の任意の手段によって生成することができる。例えば、セルラーゼは、異種発現系内で、例えば微生物もしくは心筋異種発現系内などで組換えにより生成することができる。異種発現系の例には、細菌（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種）系および真核細胞系が含まれる。真核細胞系は、酵母（例えば、ピチア（Ｐｉｃｈｉａ）種、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ種）または真菌（例えば、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）種、例えば、Ｔ．リーゼイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）種、例えばＡ．ニガー（Ａ．ｎｉｇｅｒ））発現系を使用することができる。
１つ以上のセルラーゼは、本明細書に開示した組成物を調製する場合に１つの成分として直接的に加えることができる。または、１つ以上のセルラーゼは、本明細書に開示した組成物中で間接的に（意図せずに）提供される可能性がある。例えば、セルラーゼは、組成物を調製するために使用される非セルラーゼ酵素調製物中に存在することによって本明細書の組成物中で提供することができる。その中でセルラーゼがそれに間接的に提供される組成物中のセルラーゼは、例えば、約０．１〜１０ｐｐｂ（例えば、１ｐｐｍ未満）で存在することができる。デキストラン化合物を使用することによって本明細書の組成物の企図された利点は、バックグラウンドセルラーゼ活性を有する可能性がある非セルラーゼ酵素調製物が、デキストランの所望の効果がそのバックグラウンドセルラーゼ活性によって無効化されるという懸念を持たずに使用できることにある。
所定の実施形態におけるセルラーゼは、熱安定性であってよい。セルラーゼ熱安定性は、ある時間（例えば、約３０〜６０分間）にわたり高温（例えば、約６０〜７０℃）へ曝露させた後にこの酵素が活性を保持する能力を意味する。セルラーゼの熱安定性は、その時間中に規定条件下でセルラーゼ活性の半分が失われる分間、時間もしくは日間で与えられるその半減期（ｔ１／２）によって測定できる。
所定の実施形態におけるセルラーゼは、広範囲のｐＨ値（例えば、約７．０〜約１１．０などの中性もしくはアルカリ性ｐＨ）まで安定性である可能性がある。そのような酵素は、そのようなｐＨ条件下で規定時間（例えば、少なくとも約１５分間、３０分間もしくは１時間）にわたり安定性を保持できる。
本組成物中には、少なくとも１つ、２つまたはそれ以上のセルラーゼを含むことができる。本明細書の組成物中のセルラーゼの総量は、典型的には、組成物中のセルラーゼを使用するために好適な量（「有効量」）である。例えば、セルロース含有織物の感触および／または外観を改善するために意図された組成物中のセルラーゼの有効量は、織物の感触の測定可能な改善（例えば、織物の滑らかさおよび／または外観を改善する、織物の外観の鮮明度を低下させる傾向を示す毛玉やフィブリルを取り除く）を作り出す量である。また別の例として、本明細書の織物ストーンウォッシュ加工組成物中のセルラーゼの有効量は、所望の（例えば、縫目内および織物はぎ布上のすり切れて色褪せた外観を作り出すための）効果を提供するであろう量である。本明細書の組成物中のセルラーゼの量は、例えばさらにその中で組成物が使用される加工パラメーター（例えば、装置、温度、時間など）およびセルラーゼ活性に左右される可能性がある。その中で織物が処理される水性組成物中のセルラーゼの有効濃度は、当業者であれば容易に決定できる。織物ケア加工では、セルラーゼはその中で織物が少なくとも約０．０１〜０．１ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質、または約０．１〜１０ｐｐｂの全セルラーゼタンパク質（例えば、１ｐｐｍ未満）〜最大約１００、２００、５００、１，０００、２，０００、３，０００、４，０００もしくは５，０００ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質の濃度で処理される水性組成物（例えば、洗浄液）中に存在してよい。
本明細書で提供されるデキストランポリマーは、セルラーゼによって分解されることにほとんどもしくは完全に安定性（耐性）であると考えられる。例えば、１つ以上のセルラーゼによる本明細書のデキストランの分解率は、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、もしくは１％未満、または０％であると考えられる。そのような分解率は、例えば、ある期間（例えば、約２４時間）にわたるセルラーゼを用いた処理の前後のデキストランポリマーの分子量を比較することによって決定することができる。
所定の実施形態における水性組成物は、剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動を有すると考えられる。剪断減粘性挙動は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の減少として観察され、他方剪断増粘性挙動は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の増加として観察される。本明細書の水性組成物の剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動は、水性組成物へのデキストランの混合に起因する可能性がある。したがって、その流動学的プロファイルを修飾するためには（すなわち、水性液、水溶液または混合物の流動特性が修飾される）、水性組成物に本開示の１つ以上のデキストラン化合物を加えることができる。さらに、その粘度を修飾するためには、水性組成物に１つ以上のデキストラン化合物を加えることができる。
本明細書の水性組成物の流動学的挙動は、回転剪断速度を（例えば、約０．１ｒｐｍ〜約１，０００ｒｐｍへ）増加させながら粘度を測定することによって観察できる。例えば、本明細書に開示した水性組成物の剪断減粘性挙動は、回転剪断速度が約１０ｒｐｍから６０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから２５０ｒｐｍもしくは１５０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ増加するにつれて、粘度における約または少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％（または５％〜９５％の間の任意の整数）の粘度（ｃＰ）の減少として観察できる。また別の例として、本明細書に開示した水性組成物の剪断増粘性挙動は、回転剪断速度が約１０ｒｐｍから６０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから２５０ｒｐｍもしくは１５０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ増加するにつれて、粘度における約または少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１２５％、１５０％、１７５％、もしくは２００％（または５％〜２００％の間の任意の整数）の粘度（ｃＰ）の増加として観察できる。
本明細書に開示した水性組成物は、例えば下記に記載した製品のいずれかなどの食品、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品もしくは工業製品の形態、および／またはそれらに含まれる形態にあってよい。本明細書のデキストラン化合物は、これらの製品それぞれにおいて増粘剤として使用できる。そのような増粘剤は、所望であれば、その開示が参照により本明細書に全体として組み込まれる米国特許第８５４１０４１号明細書に開示されている増粘剤などの１つ以上の他のタイプの増粘剤と結び付けて使用されてよい。
本明細書に開示したデキストラン化合物は、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品、工業製品もしくは食品に下記の物理的特性：増粘、冷凍／解凍安定性、潤滑性、保湿および水分放出、質感、稠度、保形性、乳化、結合、懸濁剤、分散剤、ゲル化、低下した鉱物硬さの内の１つ以上を提供するために有用であると考えられる。製品中のデキストランの濃度もしくは量は、例えば、本明細書に提供された重量％のいずれかであってよい。
本明細書のパーソナルケア製品には、特別には限定はされないが、例えば、スキンケア組成物、化粧品組成物、抗真菌組成物および抗菌組成物が含まれる。本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、ローション、クリーム、ペースト、鉱油、軟膏、ポマード、ジェル、リキッドこれらの組み合わせなどの形態にあってよい。本明細書に開示したパーソナルケア製品は、所望であれば、少なくとも１つの有効成分を含むことができる。有効成分は、一般に、意図された薬理学的効果を誘発する成分であると認識されている。
所定の実施形態では、スキンケア製品は、水分不足に関連する皮膚のダメージに対処するために皮膚に適用することができる。スキンケア製品は、さらに皮膚の視覚的外観に対処するため（例えば、鱗状、ひび割れ、および／または赤みがかった皮膚の外観を減らすため）および／または皮膚の触感（例えば、皮膚の滑らかさおよび繊細さを改善している間に皮膚の粗さおよび／または乾燥度を減らすため）にも使用できる。スキンケア製品は、典型的には、化粧効果を提供しながら、皮膚の病気を治療もしくは予防するため、または皮膚に保湿効果を提供するための少なくとも１つの有効成分、例えば、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコン、硬質脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリンもしくはコロイド状オートミールおよびこれらの組み合わせを含むことができる。スキンケア製品は、１つ以上の天然保湿要素、例えば、セラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクアラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、グリコスフィンゴ脂質、尿素、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウムもしくはピロリドンカルボン酸ナトリウムが含むことができる。スキンケア製品に含むことのできる他の成分には、制限なく、グリセリド、杏仁油、キャノーラ油、スクアラン、スクアレン、ココナツ油、コーン油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、ティーツリー油、シアバター、パーム油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸およびオレンジ油が含まれる。
本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、さらにメーキャップ、リップスティック、マスカラ、ルージュ、ファンデーション、ブラシ、アイライナー、リップライナー、リップグロス、他の化粧品、サンスクリーン、サンブロック、マニキュア液、ネイルコンディショナー、バスジェル、シャワージェル、ボディソープ、洗顔料、リップバーム、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディースプレー、石鹸、ボディスクラブ、スクラブ剤、収れん剤、スクラッフィングローション、脱毛剤、パーマネント液、ふけ防止製剤、制汗組成物、デオドラント、シェービング製品、プレシェーブ製品、アフターシェーブ製品、クレンジング剤、スキンジェル、リンス、歯磨き組成物、練り歯磨きもしくはマウスウォッシュの形態にあってもよい。パーソナルケア製品の例（例えば、クレンジング剤、石鹸、スクラブ、化粧品）は、担体もしくはスクラブ剤（例えば、ホホバビーズ［ホホバエステルビーズ］）（例えば、約１〜１０、３〜７、４〜６もしくは５重量％）を含む；そのような作用物質は、任意選択的に製品内に分散させることができる。
一部の態様におけるパーソナルケア製品は、ヘアケア製品であってよい。本明細書のヘアケア製品の例には、シャンプー、ヘアコンディショナー（リーブインもしくはリンスアウト）、クリームリンス、ヘアダイ、ヘアカラーリング製品、ヘアシャイン製品、ヘアセラム、毛髪縮れ防止製品、毛髪枝毛修復製品、ムース、ヘアスプレーおよびスタイリングジェルが含まれる。ヘアケア製品は、一部の実施形態では、リキッド、ペースト、ジェル、固体もしくはパウダーの形態にあってよい。本明細書に開示したヘアケア製品は、典型的には、ヘアケア製品を調製するために一般に使用される下記の成分；アニオン性界面活性剤、例えばポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム；カチオン性界面活性剤、例えば、塩化ステアリルトリメチルアンモニウムおよび／または塩化ジステアリルトリメチルアンモニウム；非イオン性界面活性剤、例えばグリセリルモノステレアレート、ソルビタンモノパルミテートおよび／またはポリオキシエチレンセチルエーテル；湿潤剤、例えばプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ソルビトール、ピログルタミン酸塩、アミノ酸および／またはトリメチルグリシン；炭化水素、例えば液体パラフィン、ペトロラタム、固形パラフィン、スクアランおよび／またはオレフィンオリゴマー；高級アルコール、例えばステアリルアルコールおよび／またはセチルアルコール；過脂肪剤；ふけ防止剤；消毒剤；抗炎症剤；生薬；（本明細書に開示した１つ以上のデキストランに加えて）水様性ポリマー、例えばメチルセルロース、ヒドロキシセルロースおよび／または部分脱アセチル化キチン；防腐剤、例えばパラベン；紫外線吸収剤；パール化剤；ｐＨ調整剤；香水および顔料の内の１つ以上を含む。
本明細書の医薬製品は、例えば、エマルジョン剤、リキッド剤、エリキシル剤、ジェル剤、懸濁剤、液剤、クリーム剤もしくは軟膏剤の形態にあってよい。さらに、本明細書の医薬製品は、本明細書に開示したパーソナルケア製品のいずれかの形態、例えば抗菌もしくは抗真菌組成物の形態にあってよい。医薬製品は、医薬上許容される担体、希釈剤および／または医薬上許容される塩の内の１つ以上をさらに含むことができる。本明細書に開示したデキストラン化合物は、さらにカプセル剤、カプセル材、錠剤コーティング中および医薬および薬剤用の賦形剤として使用することもできる。
本明細書の食品の非限定的例には、野菜パテ、肉パテおよび大豆パテ；再形成海産物；再形成チーズスティック；クリームスープ；グレービーおよびソース；サラダ用ドレッシング；マヨネーズ；オニオンリング；ジャム、ゼリーおよびシロップ；パイフィリング；ポテト製品、例えばフレンチフライおよび成形フライ；揚げ物、パンケーキ／ワッフルおよびケーキ用の生地；ペットフード；菓子類（キャンディ）；飲料；冷菓；アイスクリーム；培養乳製品、例えばカッテージチーズ、ヨーグルト、チーズ類およびサワークリーム；ケーキアイシングおよびグレーズ；ホイップ状トッピング；イースト菌使用および不使用の焼成製品などが含まれる。
所定の実施形態では、本明細書のデキストランは、食料品または任意の他の摂取可能な物質（例えば、経腸医薬製剤）中に所望の増粘度および／または分散度を提供する量で含まれてよい。例えば、製品中のデキストランの濃度もしくは量は、約０．１〜３重量％、０．１〜４重量％もしくは０．１〜１０重量％であってよい。
本明細書の家庭用および／または工業製品は、例えば、ドライウォールテープ接合化合物；モルタル；グラウト；セメントプラスター；スプレープラスター；セメントスタッコ；接着剤；ペースト；壁／天井結着剤；テープキャスティング、押出成形、射出成形および陶磁器用の結合剤および加工助剤；殺虫剤、除草剤および肥料用のスプレー接着剤および懸濁化／分散助剤；織物ケア剤、例えば織物柔軟剤および洗濯用洗剤；硬質表面洗浄剤；空気清浄剤；ポリマーエマルジョン；ゲル剤、例えば膵性ゲル；界面活性剤溶液；塗料、例えば水性塗料；保護コーティング；接着剤；シーラントおよびコーキング剤；インク類、例えば水性インク；金属工作液；または電気めっき、リン酸塩処理、亜鉛めっきおよび／または一般金属洗浄作業におけるエマルジョンベースの金属洗浄液の形態にあってよい。
本明細書に開示したデキストラン化合物は、例えば、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品もしくは工業製品中に、所望の増粘度および／または分散度を提供する量で含まれてよい。製品中のデキストラン化合物の濃度もしくは量の例は、例えば、上記に提供した重量％のいずれかであってよい。
一部の態様における水性組成物は、約０．５〜２．０重量％の本明細書のデキストラン（例えば、約１．０重量％）、約１５〜２５重量％（例えば、約２０重量％）の保湿剤、例えば油（例えば、鉱油）、約４〜６重量％（約５重量％）の界面活性剤／乳化剤（例えば、一方もしくは両方のソルビタンモノオレエートもしくはポリソルベート８０、例えば約２．６重量％のソルビタンモノオレエートおよび約２．４重量％のポリソルベート８０）、任意選択的に０．２５〜１．０重量％（例えば、０．５重量％）の保存料（例えば、プロピレングリコール、ジアゾリジニルウレア、メチルパラベンもしくはプロピルパラベンの内の１つ以上を含む保存料［例えば、Ｇｅｒｍａｂｅｎ（登録商標）ＩＩ］）および任意選択的に１つ以上の他の成分を含むことができる。そのような組成物は、例えば、エマルジョンの形態にあってよい。これらおよび一部の他の関連態様では、本明細書に開示したデキストランは、典型的には所定の消費製品、例えば、パーソナルケア製品（例えば、ローション）、食品および／または医薬製品に粘度を提供するために使用される化合物（例えば、キサンタンガム、架橋ポリアクリル酸ポリマー、例えばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ １０）として使用できる。さらに一部の態様では、ＡＳＴＭ Ｅ１４９０−３（参照により本明細書に組み込まれる「Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｆｏｒ Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｖｅ Ｓｋｉｎｆｅｅｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｃｒｅａｍｓ ａｎｄ Ｌｏｔｉｏｎｓ」、ＡＳＴＭ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｗｅｓｔ Ｃｏｎｓｈｏｈｏｃｋｅｎ、ＰＡ、２００３、ＤＯＩ：１０．１５２０／Ｅ１４９０−０３）によって測定される水性組成物（例えば、パーソナルケア製品、例えばローション）の感覚的経験採点は、約８、７もしくは６未満であってよいが、このとき粘液性抹消（ｒｕｂ−ｏｕｔ ｓｌｉｍｉｎｅｓｓ）、使用後感覚の粘性、糸引きのピックアップおよび粘性のピックアップが評価において測定される。
本明細書の食品は、例えば、菓子類の形態にあってよい。本明細書の菓子類は、甘くするために１つ以上の糖類（例えば、スクロース、フルクトース、デキストロース）を含有することができる、またはさもなければ無糖であってよい。
本明細書の菓子類の例には、ボイルドシュガー（ハードボイルドキャンディ［すなわち、ハードキャンディ］、ドラジェ、ジェリーキャンディ、ガム、カンゾウ、チューズ、キャラメル、タフィー、ファッジ、チューインガム、バブルガム、ヌガー、噛みでのあるペースト、ハラワ（ｈａｌａｗａ）、タブレット、ロゼンジ、アイシング、フロスティング、プディングおよびジェル（例えば、フルーツジェル、ゼラチンデサート）が含まれる。菓子類の他の例には、発泡菓子類、例えばマシュマロおよび焼成菓子類が含まれる。
本明細書の菓子類は、任意選択的に任意の形態（例えば、バー、キャンディ、ボンボン、トリュフ、レンズ豆）にあるチョコレートを用いて調製することができる。菓子類は、例えば、チョコレート、シュガーコート、砂糖煮コート、グレーズコートおよび／またはフィルムコートでコーティングすることができる。フィルムコーティング法は、典型的には、菓子類の表面に乾燥後には保護フィルムとなるフィルム形成液体組成物を塗布する工程を含む。このフィルムコーティングは、例えば、菓子類に含有される有効成分を保護する；菓子類自体を水分、衝撃および／または脆砕性から保護する；および／または菓子類に魅力的な視覚的特性（例えば、輝き、一様な色、滑らかな表面）を付与するために機能する。
所定の実施形態では、菓子類には、液体、ペースト状、固体状もしくは粉末状であるフィリングを充填することができる。本明細書のデキストランは、その場合にはデキストランが任意選択的に充填される菓子成分内に含まれるそのようなフィリング内に含まれてよい。
本明細書の菓子類は、任意選択的に、糖を含まず、典型的にはその代りに１つ以上の人工甘味料および／または非糖甘味料（任意選択的に、ノンカロリー）（例えば、アスパルテーム、サッカリン、ＳＴＥＶＩＡ、ＳＵＣＲＡＬＯＳＥ）を有する無糖である。所定の実施形態における無糖菓子類は、糖の代わりに１つ以上のポリオール（例えば、エリトリトール、グリセロール、ラクチトール、マンニトール、キシリトール）、可溶性繊維および／またはタンパク質を含むことができる。
本明細書の食品は、例えば、ペットフードの形態にあってよい。本明細書のペットフードは、例えば、イヌもしくはネコ（または任意の他の伴侶動物）などの飼育動物のための食品であってよい。所定の実施形態におけるペットフードは、飼育動物に以下の：必要栄養量、トリート（例えば、ドッグビスケット）、栄養補助食品の内の１つ以上を提供する。ペットフードの例には、ドライペットフード（例えば、穀粒、粗挽き穀粒）、セミモイスト組成物、ウェットペットフード（例えば、缶入りペットフード）またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。ウェットペットフードは、典型的には６５％を超える水分含量を有する。セミモイストペットフードは、典型的には、２０〜６５％の水分含量を有し、例えば、プロピレングリコール、ソルビン酸カリウムおよび微生物増殖（細菌およびカビ）を防止する成分などの保湿剤を含むことができる。ドライペットフードは、典型的には、２０％未満の水分含量を有し、その加工処理は、通常は押出、乾燥および／または焼成を含む。ペットフードは、任意選択的に、グレービー、ヨーグルト、パウダー、懸濁液、チューもしくはトリート（例えば、ビスケット）の形態にあってよい；これらの組成物は全部、所望であれば、さらにペットフードサプリメントとして使用することができる。ペットトリートは、例えば、セミモイストのチュワブルトリート；ドライトリート；チュワブルボーン；焼成、押出もしくは型抜トリート；またはコンフェクショントリートであってよい。その中に本明細書のデキストランを添加できるペットフード組成物／調製物の例には、参照により本明細書に全部が組み込まれる米国特許出願公開第２０１０／０２８０３５２号明細書および同第２０１０／０１５９１０３号明細書ならびに米国特許第６９７７０８４号明細書の中に開示されているものが含まれる。
本明細書に開示した組成物は、織物ケア組成物の形態にあってよい。本明細書の織物ケア組成物は、手洗い、洗濯機洗浄および／または他の目的、例えば織物の浸漬および／または前処理などの他の目的のために使用できる。織物ケア組成物は、例えば、洗濯用洗剤；織物コンディショナー、任意の洗濯用製品、リンス用製品もしくは乾燥機添加製品；単位投与もしくはスプレーの形態を取ることができる。液体形にある織物ケア組成物は、本明細書に開示した水性組成物の形態にあってよい。他の態様では、織物ケア組成物は、乾燥形、例えば顆粒状洗剤もしくは乾燥機点火用織物柔軟剤シートなどの乾燥形であってよい。本明細書の織物ケア組成物の他の非限定的例には；顆粒状もしくは粉末状の万能もしくは強力洗浄剤；液体形、ジェル形もしくはペースト形の万能もしくは強力洗浄剤；液体もしくは乾燥の細（例えば、繊細）繊維用洗剤；例えば漂白用添加物、「ステイン・スティック」もしくは前処理剤などのクリーニング補助剤；基質積載製品、例えばドライワイプもしくはウェットワイプ、パッドもしくはスポンジ；スプレー剤およびミスト剤が含まれる。
本明細書の洗剤組成物は、例えば、粉末、顆粒、ペースト、バー、単位用量もしくは液体などの任意の有用な形態にあってよい。液体洗剤は、典型的には、約７０重量％までの水および０重量％〜約３０重量％の有機溶媒を含有する水性であってよい。液体洗剤は、さらにまた水を約３０重量％しか含有していないコンパクトジェルの形態にあってよい。
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の界面活性剤を含み、ここで、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、両性イオン性界面活性剤、半極性非イオン性界面活性剤およびそれらの混合物から選択される。一部の実施形態では、界面活性剤は、洗剤組成物の重量で約０．１重量％〜約６０重量％の濃度で存在するが、また別の実施形態では濃度は約１重量％〜約５０重量％であり、さらにまた別の実施形態では、濃度は約５重量％〜約４０重量％である。洗剤は、通常は０重量％〜約５０重量％のアニオン性界面活性剤、例えば直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、アルキル硫酸塩（高級アルコール硫酸エステル苑）（ＡＳ）、アルコールエトキシサルフェート（ＡＥＯＳもしくはＡＥＳ）、第二級アルカンスルホネート（ＳＡＳ）、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキル−もしくはアルケニルコハク酸または石鹸を含有するであろう。さらに、洗剤組成物は、任意選択的に０重量％〜約４０重量％の非イオン性界面活性剤、例えば、（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第９２／０６１５４号パンフレットに記載されている）アルコールエトキシレート（ＡＥＯもしくはＡＥ）、カルボキシル化アルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミン、脂肪酸モノエタノールアミドもしくはポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミドを含有することができる。
本明細書の洗剤組成物は、典型的には、１つ以上の洗剤ビルダーもしくはビルダー系を含む。例えば、ビルダーとして１つ以上の酸化ポリα−１，３−グルカン化合物を含むことができる。一部の態様では、その中で例えば本明細書に開示したいずれかなどの１つ以上の追加のビルダーと一緒に使用されるコビルダーとして酸化ポリα−１，３−グルカンを含むことができる。本明細書で使用するための酸化ポリα−１，３−グルカン化合物は、米国特許出願公開第２０１５／０２５９４３９号明細書に開示されている。少なくとも１つのビルダーを組み込んでいる一部の態様では、クリーニング組成物は、本組成物の重量で少なくとも約１重量％、約３重量％〜約６０重量％もしくはいっそう約５重量％〜約４０重量％のビルダーを含んでいる。ビルダーには、（酸化ポリα−１，３−グルカンに加えて）アルカリ金属、ポリリン酸のアンモニウム塩およびアルカノールアンモニウム塩、アルカリ金属ケイ酸塩、アルカリ土類およびアルカリ金属炭酸塩、アルミノケイ酸塩、ポリカルボキシレート化合物、エーテルヒドロキシポリカルボキシレート、マレイン酸無水物とエチレンもしくはビニルメチルエーテルとのコポリマー、１，３，５−トリヒドロキシベンゼン−２，４，６−トリスルホン酸およびカルボキシメチルオキシコハク酸、ポリ酢酸の様々なアルカリ金属、アンモニウムおよび置換アンモニウム塩、例えばエチレンジアミン四酢酸およびニトリロ三酢酸ならびにポリカルボキシレート、例えばメリット酸、コハク酸、クエン酸、オキシジコハク酸、ポリマレイン酸、ベンゼン１，３，５−トリカルボン酸、カルボキシメチルオキシコハク酸およびそれらの可溶塩が含まれるがそれらに限定されない。実際に、任意の好適なビルダーが本開示の様々な実施形態において利用されることが企図されている。洗剤ビルダーもしくは錯化剤の追加の例には、ゼオライト、二リン酸塩、三リン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＭＰＡ）、アルキルコハク酸もしくはアルケニルコハク酸、可溶ケイ酸塩もしくは層状ケイ酸塩（例えば、ＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ−６）が含まれる。
一部の実施形態では、ビルダーは、水溶性硬質イオン錯体（例えば、金属イオン封鎖ビルダー）、例えばクエン酸塩およびポリリン酸塩（例えば、トリポリリン酸ナトリウムおよびトリポリリン酸ナトリウム六水和物、トリポリリン酸カリウムならびに混合トリポリリン酸ナトリウムおよびカリウムなど）を形成する。任意の好適なビルダーは、当技術分野において公知のビルダーも含めて本開示において利用されることが企図されている（例えば、欧州特許第２１００９４９号明細書を参照されたい）。
一部の実施形態では、好適なビルダーは、リン酸塩ビルダーおよび非リン酸塩ビルダーを含むことができる。一部の実施形態では、ビルダーはリン酸塩ビルダーである。一部の実施形態では、ビルダーは、非リン酸塩ビルダーである。ビルダーは、本組成物の重量で０．１重量％〜８０重量％、もしくは５重量％〜６０重量％または１０重量％〜５０重量％の濃度で使用できる。一部の実施形態では、本生成物は、リン酸塩ビルダーおよび非リン酸塩ビルダーの混合物を含む。好適なリン酸塩ビルダーには、ナトリウム塩を含むこれらの化合物のアルカリ金属塩を含む、一リン酸塩、二リン酸塩、トリポリリン酸塩もしくオリゴマーポリリン酸塩が含まれる。一部の実施形態では、ビルダーは、トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）であってよい。さらに、本組成物は、炭酸塩および／またはクエン酸塩、好ましくは中性ｐＨ組成物を達成するのに役立つクエン酸塩を含むことができる。他の好適な非リン酸ビルダーには、ポリカルボン酸のホモポリマーおよびコポリマーならびにそれらの部分もしくは完全中和塩、モノマーポリカルボン酸およびヒドロキシカルボン酸およびそれらの塩が含まれる。一部の実施形態では、上記の化合物の塩には、アンモニウムおよび／またはアルカリ金属塩、すなわち、ナトリウム塩を含むリチウム、ナトリウムおよびカリウム塩が含まれる。好適なポリカルボン酸には、非環式、脂環式、複素環式および芳香族カルボン酸が含まれるが、このとき一部の実施形態では、それらはそれぞれの場合に相互から、一部の例では２個以下の炭素原子によって相互から分離できる少なくとも２つのカルボキシル基を含有することができる。
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つのキレート剤を含むことができる。好適なキレート剤には、銅、鉄および／またはマンガンキレート剤およびそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。少なくとも１つのキレート剤が使用される実施形態では、本組成物は、本組成物の重量で約０．１重量％〜約１５重量％またはいっそう約３．０重量％〜約１０重量％のキレート剤を含む。
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つの沈着助剤を含むことができる。好適な沈着助剤には、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリカルボキシレート、防汚ポリマー、例えばポリテレフタル酸、例えばカオリナイト、モンモリロナイト、アタパルジャイト、イライト、ベントナイト、ハロイサイトなどの粘土およびそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の染料移動阻害剤を含むことができる。好適なポリマー染料移動阻害剤には、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールまたはそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。追加の染料移動阻害剤には、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールおよび／またはそれらの混合物が含まれる；そのキレート剤の例には、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）；ジエチレントリアミンペンタメチレンリン酸（ＤＴＰＭＰ）；ヒドロキシエタン二リン酸（ＨＥＤＰ）；エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）；メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）；２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）；またはメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）；ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）；４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸；クエン酸およびそれらの任意の塩；Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）および単独または上記のいずれかと組み合わせて使用できるそれらの誘導体が含まれる。少なくとも１つの染料移動阻害剤が使用される実施形態では、本明細書の組成物は、本組成物の重量で約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．０１重量％〜約５重量またはいっそう約０．１重量％〜約３重量％を含むことができる。
本明細書の洗剤組成物は、ケイ酸塩を含むことができる。これらの実施形態の一部では、ケイ酸ナトリウム（例えば、二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウムおよび／または結晶性フィロケイ酸塩）が利用される。一部の実施形態では、ケイ酸塩は、本組成物の重量で約１重量％〜約２０重量％の濃度で存在する。一部の実施形態では、ケイ酸塩は、本組成物の重量で約５重量％〜約１５重量％の濃度で存在する。
本明細書の洗剤組成物は、分散剤を含むことができる。好適な水溶性有機材料には、その中でポリカルボン酸が２個以下の炭素原子で相互から分離された少なくとも２個のカルボキシル基を含む、ホモポリマー酸もしくはコポリマー酸またはそれらの塩が含まれるがそれらに限定されない。
本明細書の洗剤組成物は、追加して１つ以上の酵素を含むことができる。酵素の例には、任意の組み合わせにあるプロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、金属脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、ガラクトシダーゼ、ガラクタナーゼ、カタラーゼ、カラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ、ケラチナーゼ、ラクターゼ、リグニナーゼ、ペルオキシダーゼ、ホスファターゼ、ポリガラクツロナーゼ、プルラナーゼ、ラムノガラクトウロナーゼ、タンナーゼ、トランスグルタミナーゼ、キシログルカナーゼ、キシロシダーゼ、メタロプロテアーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼおよび／またはアミラーゼが含まれる。
上記に開示した任意のセルラーゼは、本明細書に開示した洗剤組成物において使用するために企図されている。好適なセルラーゼには、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）セルラーゼ（例えば、米国特許第４４３５３０７号明細書を参照されたい）が含まれるがそれには限定されない。本明細書で使用するために企図された代表的なセルラーゼは、布地にとってカラーケア利点を有するセルラーゼである。カラーケア利点を提供するセルラーゼの例は、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる欧州特許第０４９５２５７号明細書、欧州特許第０５３１３７２号明細書、欧州特許第５３１３１５号明細書、国際公開第９６／１１２６２号パンフレット、国際公開第９６／２９３９７号パンフレット、国際公開第９４／０７９９８；国際公開第９８／１２３０７；国際公開第９５／２４４７１号パンフレット、国際公開第９８／０８９４０および米国特許第５４５７０４６号明細書、同第５６８６５９３号明細書および同第５７６３２５４号明細書に開示されている。洗剤中で有用な市販で入手できるセルラーゼの例には、ＣＥＬＬＵＳＯＦＴ（登録商標）、ＣＥＬＬＵＣＬＥＡＮ（登録商標）、ＣＥＬＬＵＺＹＭＥ（登録商標）、およびＣＡＲＥＺＹＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／ＳおよびＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）；ＣＬＡＺＩＮＡＳＥ（登録商標）、ＰＵＲＡＤＡＸ ＨＡ（登録商標）、および ＲＥＶＩＴＡＬＥＮＺ（商標）（ＤｕＰｏｎｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＢＩＯＴＯＵＣＨ（登録商標）（ＡＢ Ｅｎｚｙｍｅｓ）；および ＫＡＣ−５００（Ｂ）（商標）（Ｋａｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）が含まれる。追加のセルラーゼは、例えば、米国特許第７５９５１８２号明細書、米国特許第８５６９０３３号明細書、米国特許第７１３８２６３号明細書、米国特許第３８４４８９０号明細書、米国特許第４４３５３０７号明細書、米国特許第４４３５３０７号明細書、およびＧＢ２０９５２７５号明細書の中で開示されている。
一部の実施形態では、洗剤組成物は、それぞれが本組成物の重量で約０．００００１重量％〜約１０重量％の濃度にある１つ以上の酵素（例えば、本明細書で開示したいずれか）および残余のクリーニング補助材料を含むことができる。一部の他の実施形態では、洗剤組成物は、さらに各酵素を本組成物の重量で約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．００１重量％〜約５重量％、約０．００１重量％〜約２重量％または約０．００５重量％〜約０．５重量％の濃度で含むことができる。
好適なプロテアーゼには、動物起源、植物起源または微生物起源のプロテアーゼが含まれる。一部の実施形態では、微生物プロテアーゼが使用される。一部の実施形態では、化学修飾もしくは遺伝子組換え突然変異体が含まれる。一部の実施形態では、プロテアーゼは、セリンプロテアーゼ、好ましくはアルカリ性微生物プロテアーゼもしくはトリプシン様プロテアーゼである。アルカリホスファターゼの例には、スブチリシン、特別にはバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属由来のスブチリシン（例えば、スブチリシン、レンツス、アミロリケファシエンス、スブチリシンカールスバーグ、スブチリシン３０９、スブチリシン１４７およびスブチリシン１６８）が含まれる。追加の例には、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第ＲＥ３４６０６号明細書、同第５９５５３４０号明細書、同第５７００６７６号明細書、同第６３１２９３６号明細書および同第６４８２６２８号明細書に記載されたそれらの突然変異体プロテアーゼが含まれる。追加のプロテアーゼの例には、トリプシン（例えば、ブタもしくはウシ起源）および国際公開第８９／０６２７０号パンフレットに記載されたフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）プロテアーゼが含まれるがそれらには限定されない。一部の実施形態では、市販で入手可能なプロテアーゼ酵素の例には、ＭＡＸＡＴＡＳＥ（登録商標）、ＭＡＸＡＣＡＬ（商標）、ＭＡＸＡＰＥＭ（商標）、ＯＰＴＩＣＬＥＡＮ（登録商標）、ＯＰＴＩＭＡＳＥ（登録商標）、ＰＲＯＰＥＲＡＳＥ（登録商標）、ＰＵＲＡＦＥＣＴ（登録商標）、ＰＵＲＡＦＥＣＴ（登録商標）ＯＸＰ、ＰＵＲＡＭＡＸ（商標）、ＥＸＣＥＬＬＡＳＥ（商標）、ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ（商標）プロテアーゼ（例えば、Ｐ１００，Ｐ１１０、Ｐ２８０）、ＥＦＦＥＣＴＥＮＺ（商標）プロテアーゼ（例えば、Ｐ１０００、Ｐ１０５０、Ｐ２０００）、ＥＸＣＥＬＬＥＮＺ（商標）プロテアーゼ（例えば、Ｐ１０００）、ＵＬＴＩＭＡＳＥ（登録商標），およびＰＵＲＡＦＡＳＴ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）；ＡＬＣＡＬＡＳＥ（登録商標）、ＳＡＶＩＮＡＳＥ（登録商標）、ＰＲＩＭＡＳＥ（登録商標）、ＤＵＲＡＺＹＭ（商標）、ＰＯＬＡＲＺＹＭＥ（登録商標）、ＯＶＯＺＹＭＥ（登録商標）、ＫＡＮＮＡＳＥ（登録商標）、ＬＩＱＵＡＮＡＳＥ（登録商標）、ＮＥＵＴＲＡＳＥ（登録商標）、ＲＥＬＡＳＥ（登録商標）および ＥＳＰＥＲＡＳＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）；ＢＬＡＰ（商標）およびＢＬＡＰ（商標）変異体（Ｈｅｎｋｅｌ Ｋｏｍｍａｎｄｉｔｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ａｕｆ Ａｋｔｉｅｎ，Ｄｕｅｓｓｅｌｄｏｒｆ，Ｇｅｒｍａｎｙ）ならびにＫＡＰ（Ｂ．アルカロフィルス（Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）スブチリシン；Ｋａｏ Ｃｏｒｐ、日本国東京）が含まれるがそれらには限定されない。様々なプロテアーゼは、国際公開第９５／２３２２１号パンフレット、国際公開第９２／２１７６０号パンフレット、国際公開第０９／１４９２００号パンフレット、国際公開第０９／１４９１４４号パンフレット、国際公開第０９／１４９１４５号パンフレット、国際公開第１１／０７２０９９号パンフレット、国際公開第１０／０５６６４０号パンフレット、国際公開第１０／０５６６５３号パンフレット、国際公開第１１／１４０３６４号パンフレット、国際公開第１２／１５１５３４，米国特許出願公開第２００８／００９０４０７号明細書および米国特許第５８０１０３９号明細書、５３４０７３５号明細書、５５００３６４号明細書、５８５５６２５号明細書、ＲＥ３４６０６号明細書、５９５５３４０号明細書、５７００６７６号明細書、６３１２９３６号明細書、６４８２６２８号明細書、８５３０２１９号明細書ならびに様々な他の特許に記載されている。一部のまた別の実施形態では、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第１９９９０１４３４１号パンフレット、国際公開第１９９９０３３９６０号パンフレット、国際公開第１９９９０１４３４２号パンフレット、国際公開第１９９９０３４００３号パンフレット、国際公開第２００７０４４９９３号パンフレット、国際公開第２００９０５８３０３および国際公開第２００９０５８６６１に記載された中性金属プロテアーゼを含むがそれらに限定されない中性金属プロテアーゼが本開示で利用される。代表的な金属プロテアーゼには、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）（例えば、国際公開第０７／０４４９９３号パンフレットを参照されたい）中で発現する中性金属プロテアーゼの組換え形であるｎｐｒＥおよびバシラス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来の精製中性金属プロテアーゼであるＰＭＮが含まれる。
好適なマンナナーゼには、細菌もしくは真菌起源のマンナナーゼが含まれるがそれらには限定されない。一部の実施形態では、化学修飾もしくは遺伝子組換え突然変異体が含まれる。本開示において利用される様々なマンナナーゼは、公知である（例えば、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６５６６１１４号明細書、同第６６０２８４２号明細書および同第６４４０９９１号明細書を参照されたい）。本開示において利用される市販で入手できるマンナーゼには、ＭＡＮＮＡＳＴＡＲ（登録商標）、ＰＵＲＡＢＲＩＴＥ（商標）、および ＭＡＮＮＡＷＡＹ（登録商標）が含まれるがそれらに限定されない。
好適なリパーゼには、細菌もしくは真菌起源のリパーゼが含まれる。化学修飾変異体、タンパク質分解組換え突然変異体もしくはタンパク質操作変異体が含まれる。有用なリパーゼの例には、フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属（例えば、Ｈ．ラヌギノサ（Ｈ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）、欧州特許第２５８０６８号明細書および欧州特許第３０５２１６号明細書；Ｈ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、国際公開第９６／１３５８０パンフレット）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属（例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）もしくはＰ．シュードアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、欧州特許第２１８２７２号明細書；Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）、欧州特許第３３１３７６号明細書；Ｐ．スツッツェリ（Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、英国特許第１３７２０３４号明細書；Ｐ．フルオレセンス（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）およびシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種ＳＤ７０５菌株、国際公開第９５／０６７２０号パンフレットおよび国際公開第９６／２７００２号パンフレット；Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）、国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）；ならびにバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属（例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｄａｒｔｏｉｓ ｅｔ ａｌ．、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ １１３１：２５３−３６０；Ｂ．ステアロサーモフィリス（Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、特開昭６４／７４４９９２号公報；Ｂ．パミラス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）、国際公開第９１／１６４２２号パンフレット）由来のリパーゼが含まれる。さらに、本開示の一部の実施形態では、ペニシリウム・カマンベルティ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｃａｍｅｍｂｅｒｔｉｉ）由来リパーゼ（例えば、Ｙａｍａｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ １０３：６１−６７ ［１９９１］を参照されたい）、ゲオトリクム・キャンディダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）由来リパーゼ（例えば、Ｓｃｈｉｍａｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０６：３８３−３８８ ［１９８９］を参照されたい）ならびに様々なリゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属リパーゼ、例えばＲ．デレマー（Ｒ．ｄｅｌｅｍａｒ）由来リパーゼ（例えば、Ｈａｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ １０９：１１７−１１３ ［１９９１］を参照されたい）、Ｒ．ニヴェウス（Ｒ．ｎｉｖｅｕｓ）由来リパーゼ（Ｋｕｇｉｍｉｙａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５６：７１６−７１９ ［１９９２］）およびＲ．オリザエ（Ｒ．ｏｒｙｚａｅ）由来リパーゼを含む多数のクローン化リパーゼが利用される。本明細書において有用な追加のリパーゼには、例えば、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレット、国際公開第９７／０７２０２号パンフレット、欧州特許第４０７２２５号明細書および欧州特許第２６０１０５号明細書に開示されたリパーゼが含まれる。さらに、本開示の一部の実施形態では、シュードモナス・メンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）（例えば、国際公開第８８／０９３６７号パンフレットを参照されたい）およびフザリウム・ソラニ・ピシ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ ｐｉｓｉ）由来のクチナーゼ（例えば、国際公開第９０／０９４４６号パンフレットを参照されたい）を含むがそれらに限定されないクチナーゼなどの他のタイプのリパーゼポリペプチド酵素が利用される。本明細書において有用な所定の市販で入手できるリパーゼ酵素の例には、Ｍ１ ＬＩＰＡＳＥ（商
標）、ＬＵＭＡ ＦＡＳＴ（商標）、および ＬＩＰＯＭＡＸ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）；ＬＩＰＥＸ（登録商標）、ＬＩＰＯＬＡＳＥ（登録商標）および ＬＩＰＯＬＡＳＥ（登録商標）ＵＬＴＲＡ （Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）；およびＬＩＰＡＳＥ Ｐ（商標）「Ａｍａｎｏ」（Ａｍａｎｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．Ｌｔｄ、日本）が含まれる。
好適なポリエステラーゼには、例えば、国際公開第０１／３４８９９号パンフレット、同第０１／１４６２９号パンフレットおよび米国特許第６９３３１４０号明細書に開示されたポリエステラーゼが含まれる。
本明細書の洗剤組成物は、さらに家庭用および／または工業用布地／洗濯物上に存在する所定のバイオフィルムを除去／洗浄するために有効である２，６−β−Ｄ−フルクタンヒドロラーゼを含むことができる。
好適なアミラーゼには、細菌もしくは真菌起源のアミラーゼが含まれるがそれらには限定されない。一部の実施形態では、化学修飾もしくは遺伝子組換え突然変異体が含まれる。本開示において利用されるアミラーゼには、Ｂ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）（例えば、英国特許第１２９６８３９号明細書を参照されたい）から得られるα−アミラーゼが含まれるがそれには限定されない。追加の好適なアミラーゼには、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第９５１０６０３号パンフレット、国際公開第９５２６３９７号パンフレット、国際公開第９６２３８７４号パンフレット、国際公開第９６２３８７３号パンフレット、国際公開第９７４１２１３号パンフレット、国際公開第９９１９４６７号パンフレット、国際公開第００６００６０号パンフレット、国際公開第００２９５６０号パンフレット、国際公開第９９２３２１１号パンフレット、国際公開第９９４６３９９号パンフレット、国際公開第００６００５８号パンフレット、国際公開第００６００５９号パンフレット、国際公開第９９４２５６７号パンフレット、国際公開第０１１４５３２号パンフレット、国際公開第０２０９２７９７号パンフレット、国際公開第０１６６７１２号パンフレット、国際公開第０１８８１０７号パンフレット、国際公開第０１９６５３７号パンフレット、国際公開第０２１０３５５号パンフレット、国際公開第９４０２５９７号パンフレット、国際公開第０２３１１２４号パンフレット、国際公開第９９４３７９３号パンフレット、国際公開第９９４３７９４号パンフレット、国際公開第２００４１１３５５１号パンフレット、国際公開第２００５００１０６４号パンフレット、国際公開第２００５００３３１１号パンフレット、国際公開第０１６４８５２号パンフレット、国際公開第２００６０６３５９４号パンフレット、国際公開第２００６０６６５９４号パンフレット、国際公開第２００６０６６５９６号パンフレット、国際公開第２００６０１２８９９号パンフレット、国際公開第２００８０９２９１９号パンフレット、国際公開第２００８０００８２５号パンフレット、国際公開第２００５０１８３３６号パンフレット、国際公開第２００５０６６３３８号パンフレット、国際公開第２００９１４０５０４号パンフレット、国際公開第２００５０１９４４３号パンフレット、国際公開第２０１００９１２２１号パンフレット、国際公開第２０１００８８４４７号パンフレット、国際公開第０１３４７８４号パンフレット、国際公開第２００６０１２９０２号パンフレット、国際公開第２００６０３１５５４号パンフレット、国際公開第２００６１３６１６１号パンフレット、国際公開第２００８１０１８９４号パンフレット、国際公開第２０１００５９４１３号パンフレット、国際公開第２０１１０９８５３１号パンフレット、国際公開第２０１１０８０３５２号パンフレット、国際公開第２０１１０８０３５３号パンフレット、国際公開第２０１１０８０３５４号パンフレット、国際公開第２０１１０８２４２５号パンフレット、国際公開第２０１１０８２４２９号パンフレット、国際公開第２０１１０７６１２３号パンフレット、国際公開第２０１１０８７８３６号パンフレット、国際公開第２０１１０７６８９７号パンフレット、国際公開第９４１８３３１４号パンフレット、国際公開第９５３５３８２号パンフレット、国際公開第９９０９１８３号パンフレット、国際公開第９８２６０７８号パンフレット、国際公開第９９０２７０２号パンフレット、国際公開第９７４３４２４号パンフレット、国際公開第９９２９８７６号パンフレット、国際公開第９１００３５３号パンフレット、国際公開第９６０５２９５号パンフレット、国際公開第９６３０４８１号パンフレット、国際公開第９７１０３４２号パンフレット、国際公開第２００８０８８４９３号パンフレット、国際公開第２００９１４９４１９号パンフレット、国際公開第２００９０６１３８１号パンフレット、国際公開第２００９１００１０２号パンフレット、国際公開第２０１０１０４６７５号パンフレット、国際公開第２０１０１１７５１１号パンフレット、および 国際公開第２０１０１１５０２１号パンフレットに開示されたアミラーゼが含まれる。
好適なアミラーゼには、例えば、市販で入手できるアミラーゼ、例えばＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＮＡＴＡＬＡＳＥ（登録商標）、ＤＵＲＡＭＹＬ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ ＵＬＴＲＡ（登録商標）、ＦＵＮＧＡＭＹＬ（登録商標）および ＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／ＳおよびＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）；ＲＡＰＩＤＡＳＥ（登録商標）、ＰＯＷＥＲＡＳＥ（登録商標）、ＰＵＲＡＳＴＡＲ（登録商標）および ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ（商標）（ＤｕＰｏｎｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）が含まれる。
本組成物中で使用するために企図される好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼには、植物起源、細菌起源もしくは真菌起源のものが含まれる。化学修飾突然変異体もしくはタンパク質操作突然変異体が含まれる。本明細書において有用なペルオキシダーゼの例には、コプリヌス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）属（例えば、Ｃ．シネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）、国際公開第９３／２４６１８号パンフレット、国際公開第９５／１０６０２号パンフレット、および 国際公開第９８／１５２５７）由来のペルオキシダーゼならびに国際公開第２００５０５６７８２号パンフレット、国際公開第２００７１０６２９３号パンフレット、国際公開第２００８０６３４００号パンフレット、国際公開第２００８１０６２１４号パンフレット、および 国際公開第２００８１０６２１５号パンフレットに参照されたペルオキシダーゼが含まれる。本明細書で有用な市販で入手できるペルオキシダーゼには、例えば、ＧＵＡＲＤＺＹＭＥ（商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／ＳおよびＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）が含まれる。
一部の実施形態では、ペルオキシダーゼは、本開示の組成物中で過酸化水素もしくはその起源（例えば、過炭酸塩、過ホウ酸塩もしくは過硫酸塩）と組み合わせて使用される。一部の代替実施形態では、オキシダーゼは、酸素と組み合わせて使用される。どちらのタイプの酵素も、好ましくは増強剤と一緒に、「溶液漂白」（すなわち、織物が洗浄液中で一緒に洗浄された場合に染色布から他の織物への織物染料の移動を防止すること）のために使用される（例えば、国際公開第９４／１２６２１号パンフレットおよび同第９５／０１４２６号パンフレットを参照されたい）。好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼには、植物、細菌もしくは真菌起源のペルオキシダーゼ／オキシダーゼが含まれるがそれらには限定されない。一部の実施形態では、化学修飾もしくは遺伝子組換え突然変異体が含まれる。
本明細書の洗剤組成物中に含めることのできる酵素は、従来型の安定化剤、例えば、プロピレングリコールもしくはグリセロールなどのポリオール；糖もしくは糖アルコール；乳酸；ホウ酸もしくはホウ酸誘導体（例えば、芳香族ホウ酸エステル）を使用して安定化することができる。
所定の実施形態における洗剤組成物は、本明細書に開示したデキストランに加えて１つ以上の他のタイプのポリマーを含むことができる。本明細書において有用なポリマーの他のタイプの例には、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、例えば、ポリアクリレート、マレイン酸／アクリル酸コポリマーおよびラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーが含まれる。
本明細書の洗剤組成物は、漂白系を含有していてよい。例えば、漂白系は、Ｈ２Ｏ２起源、例えば過酸形成漂白活性化剤、例えばテトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）もしくはナノニルオキシベンゼンスルホネート（ＮＯＢＳ）と結合することのできる、過ホウ酸塩もしくは過炭酸塩を含むことができる。または、漂白系は、ペルオキシ酸（例えば、アミド、イミドもしくはスルホンタイプのペルオキシ酸）を含むことができる。またはそれでも、漂白系は、例えば国際公開第２００５／０５６７８３号パンフレットに記載された系などのペルヒドロラーゼを含む酵素的漂白系であってよい。
本明細書の洗剤組成物は、さらに、従来型の洗剤成分、例えば、織物コンディショナー、粘土、発泡増強剤、石鹸泡抑制剤、防錆剤、土壌懸濁化剤、再付着防止剤、染料、殺菌剤、曇り防止剤、蛍光増白剤もしくは香料も含むことができる。本明細書の洗剤組成物の（使用濃度にある水溶液中で測定した）ｐＨは、通常は中性もしくはアルカリ性（例えば、約７．０〜約１１．０のｐＨ）である。
本明細書のデキストランは、所望であれば、例えば織物ケア組成物などの洗剤組成物中の再付着防止剤および／または粘土質土壌除去剤として含むことができる（そのような作用物質は、任意選択的に所定の態様における白色維持剤であると特徴付けることができる）。本明細書の他の好適な再付着防止剤および／または粘土質土壌除去剤の例には、ポリエトキシ両性イオン性界面活性剤、アクリル酸もしくはメタクリル酸とアクリル酸もしくはメタクリル酸−酸化エチレン凝縮体との水溶性コポリマー（例えば、米国特許第３７１９６４７号明細書）、セルロース誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロース（例えば、米国特許第３５９７４１６号明細書および同第３５２３０８８号明細書）ならびに非イオン性アルキルポリエトキシ界面活性剤、ポリエトキシアルキル第４級カチオン性界面活性剤および脂肪酸アミド界面活性剤（例えば、米国特許第４２２８０４４号明細書）が含まれる。他の好適な再付着防止剤および／または粘土質土壌除去剤の非限定的例は、それらが全部参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４５９７８９８号明細書および同第４８９１１６０号明細書ならびに国際公開第９５／３２２７２号パンフレットに開示されている。
本明細書に開示した目的に適合させることのできる洗剤組成物の特定の形態は、例えば、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第２００９０２０９４４５Ａ１号明細書、米国特許第２０１０００８１５９８Ａ１号明細書、米国特許第７００１８７８Ｂ２号明細書、欧州特許第１５０４９９４Ｂ１号明細書、国際公開第２００１０８５８８８Ａ２号パンフレット、国際公開第２００３０８９５６２Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９０９８６５９Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９０９８６６０Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９１１２９９２Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９１２４１６０Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９１５２０３１Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１００５９４８３Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１００８８１１２Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１００９０９１５Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１０１３５２３８Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１１０９４６８７Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１１０９４６９０Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１１１２７１０２Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１１１６３４２８Ａ１号パンフレット、国際公開第２００８０００５６７Ａ１号パンフレット、国際公開第２００６０４５３９１Ａ１号パンフレット、国際公開第２００６００７９１１Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１２０２７４０４Ａ１号パンフレット、欧州特許第１７４０６９０Ｂ１号明細
書、国際公開第２０１２０５９３３６Ａ１号パンフレット、米国特許第６７３０６４６Ｂ１、国際公開第２００８０８７４２６Ａ１号パンフレット、国際公開第２０１０１１６１３９Ａ１号パンフレット、および 国際公開第２０１２１０４６１３Ａ１号パンフレットに開示されている。
本明細書の洗濯用洗剤組成物は、任意選択的に強力（万能）洗濯用洗剤組成物であってよい。典型的な強力洗濯用洗剤組成物は、アニオン性洗浄性界面活性剤（１群の直鎖もしくは分岐鎖もしくはランダム鎖の置換もしくは未置換アルキルスルフェート、アルキルスルホネート、アルコキシル化アルキルスルフェート、アルキルホスフェート、アルキルホスホネート、アルキルカルボキシレートおよび／またはそれらの混合物から選択される）および任意選択的に非イオン性界面活性剤（１群の直鎖もしくは分岐鎖もしくはランダム鎖の置換もしくは未置換アルコキシル化アルコールアルキル、例えば、Ｃ８〜Ｃ１８エトキシル化アルキルアルコールおよび／またはＣ６〜Ｃ１２アルキルフェノールアルコキシレートから選択される）洗浄性界面活性剤（１０重量／重量％〜４０重量／重量％）を含み、ここで、アニオン性洗浄性界面活性剤（６．０〜９の親水性指数（ＨＩｃ）を備えるＩ対非イオン性洗浄性界面活性剤の重量比は１：１より大きい。好適な洗浄性界面活性剤にはさらに、カチオン性洗浄性界面活性剤（１群のアルキルピリジニウム化合物、アルキル第４級アンモニウム化合物、アルキル第４級ホスホニウム化合物、アルキル三元スルホニウム化合物および／またはそれらの混合物から選択される）；両性イオン性および／または両性洗浄性界面活性剤（１群のアルカノールアミンスルホ−ベタイン）；両性界面活性剤；半極性非イオン性界面活性剤ならびにそれらの混合物が含まれる。
本明細書の洗剤、例えば強力洗濯用洗剤組成物には、任意選択的に、両親媒性アルコキシル化グリース洗浄ポリマー（１群の分岐鎖親水性および疎水性を有するアルコキシル化ポリマー、例えば０．０５重量％〜１０重量％の範囲内にあるアルコキシル化ポリアルキレンイミンから選択される）および／またはランダムグラフトポリマー（典型的には不飽和Ｃ１〜Ｃ６カルボン酸、エーテル、アルコール、アルデヒド、ケトン、エステル、糖単位、アルコキシ単位、マレイン酸無水物、飽和ポリアルコール、例えばグリセロールならびにそれらの混合物からなる群から選択されるモノマーを含む親水性骨格）；ならびにＣ４〜Ｃ２５アルキル基、ポリプロピレン、ポリブチレン、飽和Ｃ１〜Ｃ６モノ−カルボン酸のビニルエステル、アクリル酸もしくはメタクリル酸のＣ１〜Ｃ６アルキルエステルおよびそれらの混合物からなる群から選択される水性側鎖からなる界面活性増強性ポリマーが含まれる。
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、ランダムもしくはブロック構造にある追加のポリマー、例えば防汚ポリマー（例えばＳＲＰ１などの非イオン性で末端キャップされたポリエステル、サッカライド、ジカルボン酸、ポリオールおよびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのモノマー単位を含むポリマー、ランダムもしくはブロック構造にあるエチレンテレフタレートをベースとするポリマーおよびそれらのコポリマー、例えばＲＥＰＥＬ−Ｏ−ＴＥＸ ＳＦ、ＳＦ−２およびＳＲＰ６、ＴＥＸＣＡＲＥ ＳＲＡ１００、ＳＲＡ３００、ＳＲＮ１００、ＳＲＮ１７０、ＳＲＮ２４０、ＳＲＮ３００およびＳＲＮ３２５、ＭＡＲＬＯＱＵＥＳＴ ＳＬを含む）、本明細書の再付着防止剤（０．１重量％〜１０重量％）（カルボキシレートポリマー、例えばアクリル酸、マレイン酸（もしくはマレイン酸無水物）、フマル酸、イタコン酸、アコニット酸、メサコン酸、シトラコン酸、メチレンマロン酸およびそれらの任意の混合物、ビニルピロリドン、ビニルピロリドンホモポリマーおよび／またはポリエチレングリコール（５００〜１００，０００Ｄａの範囲内の分子量）；ならびにポリマーカルボキシレート（例えば、マレエート／アクリレートランダムコポリマーもしくはポリアクリレートホモポリマー））を含むことができる。
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの洗剤は、任意選択的に、さらに飽和もしくは非飽和脂肪酸、好ましくは飽和もしくは非飽和Ｃ１２〜Ｃ２４脂肪酸（０重量％〜１０重量％）；本明細書に開示したデキストラン化合物に加えた沈着助剤（それに含まれる例には、多糖類、セルロースポリマー、ポリジアリルジメチルアンモニウムハロゲン化物（ＤＡＤＭＡＣ）およびランダムもしくはブロック構造にあるＤＡＤ ＭＡＣとビニルピロリドン、アクリルアミド、イミダゾール、イミダゾリウムハロゲン化物およびそれらの混合物、カチオン性グアールガム、カチオン性デンプン、カチオン性ポリアクリルアミドおよびそれらの混合物が含まれる。
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤はさらに、任意選択的に、その例には、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾール、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールのコポリマーおよび／またはそれらの混合物が含まれる染料移動阻害剤、その例にはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸（ＤＴＰＭＰ）、ヒドロキシ−エタンジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）、２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）もしくはメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸、クエン酸および任意の塩のいずれかの酸、Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＥＩＤＡ）、ジヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）およびそれらの誘導体が含まれるキレート剤を含むことができる。
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、シリコンもしくは脂肪酸をベースとする石鹸泡抑制剤；ぼかし染料（ｈｕｅｉｎｇ ｄｙｅｓ）、カルシウムおよびマグネシウムカチオン、視覚信号化成分、消泡剤（０．００１重量％〜約４．０重量％）および／またはジグリセリドおよびトリグリセリド、エチレングリコールジステアレート、微結晶セルロース、マイクロファイバーセルロース、バイオポリマー、キサンタンガム、ゲランガムおよびそれらの混合物からなる群から選択される構造物質／増粘剤（０．０１重量％〜約５重量％）を含むことができる。そのような構造物質／増粘剤は、所定の実施形態では、洗剤に含まれる１つ以上のデキストラン化合物に追加されるであろう。構造物質は、構造剤とも呼ぶことができる。
本明細書の洗剤は、例えば、強力乾燥／固体洗濯用洗剤組成物の形態にあってよい。そのような洗剤は、（ｉ）洗浄性界面活性剤、例えば本明細書に開示した任意のアニオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意の非イオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意のカチオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意の両性イオン性および／または両性洗浄性界面活性剤およびそれらの混合物；（ｉｉ）ビルダー、例えば任意の無リンビルダー（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のゼオライトビルダー）、任意のリン酸塩ビルダー（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のナトリウムトリポリリン酸塩、クエン酸、クエン酸塩およびニトリロ三酢酸、任意のケイ酸塩（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のケイ酸ナトリウムもしくはカリウムまたはメタケイ酸ナトリウム；任意の炭酸塩（例えば、０重量％〜８０重量％未満の範囲内の炭酸ナトリウムおよび／または重炭酸ナトリウム）およびそれらの混合物；（ｉｉｉ）漂白剤、例えば光漂白剤（例えば、スルホン化亜鉛フタロシアニン、スルホン化アルミニウムフタロシアニン、キサンテン染料およびそれらの混合物）、任意の疎水性もしくは親水性漂白活性化剤（例えば、ドデカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノルオキシ安息香酸もしくはそれらの塩、３，５，５−トリメチルヘキサノイルオキシベンゼンスルホネート、テトラセチルエチレンジアミン−ＴＡＥＤ、ノナノイルオキシベンゼンスルホネート−ＮＯＢＳ、ニトリルクアットおよびそれらの混合物）、過酸化水素の任意の起源（例えば、その例には過ホウ酸塩、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩もしくは過ケイ酸塩のモノもしくはテトラハイドレートナトリウム塩が含まれる無機ペルハイドレート塩）、任意の予備形成親水性および／または疎水性過酸（例えば、過カルボン酸および塩、過炭酸および塩、過イミド酸および塩、ペルオキソ一硫酸および塩ならびにそれらの混合物）；および／または（ｉｖ）任意の他の成分、例えば漂白触媒（例えば、その例にはイミニウムカチオンおよびポリイオン、イミニウム両性イオン、改質アミン、改質アミンオキシド、Ｎ−スルホニルイミン、Ｎ−ホスホニルイミン、Ｎ−アシルイミン、チアジアゾールジオキシド、ペルフルオロイミン、環状糖ケトンおよびそれらの混合物が含まれるイミン系漂白増強剤）ならびに金属含有漂白触媒（例えば亜鉛もしくはアルミニウムなどの補助金属カチオンおよび例えばＥＤＴＡ、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）などの金属イオン封鎖剤と一緒に、銅、鉄、チタン、ルテニウム、タングステン、モリブデンもしくはマンガンカチオン）を含むことができる。
本明細書に開示した組成物は、例えば、食器用洗剤組成物の形態にあってよい。食器用洗剤の例には、自動食器洗い用洗剤（典型的には、食器洗い機で使用される）および手洗い食器用洗剤が含まれる。食器洗い機用洗剤組成物は、例えば、本明細書に開示した任意の乾燥もしくは液体／水性形にあってよい。食器洗い用洗剤の所定の実施形態に含むことのできる成分には、例えば、リン酸塩；酸素系若しくは塩素系漂白剤；非イオン性界面活性剤；アルカリ塩（例えば、メタケイ酸塩；アルカリ金属水酸化物、炭酸ナトリウム）；本明細書に開示した任意の活性酵素；防錆剤（例えば、ケイ酸ナトリウム）；消泡剤；陶磁器からの艶や文様の除去を緩徐化するための添加物；香料；凝固防止剤（顆粒状洗剤中）；デンプン（錠剤ベースの洗剤中）；ゲル化剤（液体／ジェルベースの洗剤中）；および／または砂（粉末状洗剤）の内の１つ以上が含まれる。
例えば自動食器洗い機用洗剤もしくは液体食器洗い用洗剤などの食器洗い用洗剤は、（ｉ）０〜１０重量％の範囲内で任意のエトキシル化非イオン性界面活性剤、アルコキシル化アルコール界面活性剤、エポキシキャップされたポリ（オキシアルキル化）アルコールもしくはアミンオキシド界面活性剤を含む非イオン性界面活性剤；（ｉｉ）任意のリン酸塩ビルダー（例えば、一リン酸塩、二リン酸塩、トリポリリン酸塩、他のオリゴマーポリリン酸塩、ナトリウムトリポリリン酸塩−ＳＴＰＰ）、任意の無リンビルダー（例えば、メチル−グリシン二酢酸［ＭＧＤＡ］およびそれらの塩もしくは誘導体、グルタミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸［ＧＬＤＡ］およびそれらの塩もしくは誘導体、イミノ二酢酸（ＩＤＳ）およびそれらの塩もしくは誘導体、カルボキシメチルイヌリンおよびそれらの塩もしくは誘導体、ニトリロ三酢酸［ＮＴＡ］、ジエチレントリアミン五酢酸［ＤＴＰＡ］、Ｂ−アラニン二酢酸［Ｂ−ＡＤＡ］およびそれらの塩を含むアミノ酸ベースの化合物）、ポリカルボン酸およびそれらの部分もしくは完全中和塩のホモポリマーおよびコポリマー、０．５重量％〜５０重量％の範囲内のモノマーポリカルボン酸およびヒドロキシカルボン酸およびそれらの塩または０．１重量％〜約５０重量％の範囲内のスルホン化／カルボキシル化ポリマーを含む約５〜６０重量％の範囲内のビルダー；（ｉｉｉ）０．１重量％〜約１０重量％の範囲内の乾燥助剤（例えば、任意選択的にまた別の３〜６つの官能基−典型的には重縮合を誘導する酸、アルコールもしくはエステル官能基を備えるモノマーと一緒にポリエステル、特にアニオン性ポリエステル、ポリカーボネート−、ポリウレタン−および／またはポリウレア−ポリオルガノシロキサン化合物もしくはそれらの前駆体化合物、特に反応性環状炭酸塩およびウレアタイプの）；（ｉｖ）約１重量％〜約２０重量％の範囲内のケイ酸塩（例えば、ケイ酸ナトリウムもしくはカリウム、例えば二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウムおよび結晶性フィロケイ酸塩）；（ｖ）無機漂白剤（例えば、過ホウ酸塩、過炭酸塩、過リン酸塩、過硫酸塩および過ケイ酸塩などのペルハイドレート塩および／または有機漂白剤（例えば、ジアシル−およびテトラアシルペルオキシド、特にジペルオキシドデカン二酸およびジペルオキシヘキサデカン二酸などの有機ペルオキシ酸）；（ｖｉ）漂白活性化剤（例えば、０．１重量％〜約１０重量％の範囲内の有機過酸前駆体）および／または漂白触媒（例えば、マンガントリアザシクロノナンおよび関連錯体；Ｃｏ、Ｃｕ、ＭｎおよびＦｅビスピリジルアミンおよび関連錯体；およびペンタミンコバルト（ＩＩＩ）酢酸塩および関連錯体）；（ｖｉｉ）０．１重量％〜５重量％の範囲内の金属ケア剤（例えば、ベンザトリアゾール、金属塩および錯体および／またはケイ酸塩）；および／または（ｖｉｉｉ）自動食器洗い機用洗剤組成物１グラム当たり約０．０１〜５．０ｍｇの範囲内の活性酵素の本明細書に開示した任意の活性酵素、および酵素安定化剤（例えば、オリゴ糖、多糖および無機二価金属塩）を含むことができる。
少なくとも１つの本明細書のデキストランを含む洗剤調製物の様々な例（１〜１９）を下記に開示する：
１）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約７〜１２重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約１〜４重量％のアルコールエトキシスルフェート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、１〜２エチレンオキシド［ＥＯ］）もしくはアルキルスルフェート（例えば、Ｃ１６〜１８）；約５〜９重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１４〜１５アルコール）；約１４〜２０重量％の炭酸ナトリウム；約２〜６重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約１５〜２２重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約０〜６重量％の硫酸ナトリウム；約０〜１５重量％のクエン酸ナトリウム／クエン酸；約１１〜１８重量％の過ホウ酸ナトリウム；約２〜６重量％のＴＡＥＤ；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、石鹸泡抑制剤、香料、蛍光増白剤、光漂白剤）を含む洗剤組成物。
２）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約６〜１１重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約１〜３重量％のアルコールエトキシスルフェート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、１〜２エチレンオキシド［ＥＯ］）もしくはアルキルスルフェート（例えば、Ｃ１６〜１８）；約５〜９重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１４〜１５アルコール）；約１５〜２１重量％の炭酸ナトリウム；約１〜４重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約２４〜３４重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約４〜１０重量％の硫酸ナトリウム；約０〜１５重量％のクエン酸ナトリウム／クエン酸；約１１〜１８重量％の過ホウ酸ナトリウム；約２〜６重量％のＴＡＥＤ；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜６重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、石鹸泡抑制剤、香料、蛍光増白剤、光漂白剤）を含む洗剤組成物。
３）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約５〜９重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約７〜１４重量％のアルコールエトキシスルフェート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、７ＥＯ）；約１〜３重量％の脂肪酸（例えば、Ｃ１６〜２２脂肪酸）としての石鹸；約１０〜１７重量％の炭酸ナトリウム；約３〜９重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約２３〜３３重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約０〜４重量％の硫酸ナトリウム；約８〜１６重量％の過ホウ酸ナトリウム；約２〜８重量％のＴＡＥＤ；約０〜１重量％のホスホン酸塩（例えば、ＥＤＴＭＰＡ）；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、石鹸泡抑制剤、香料、蛍光増白剤）を含む洗剤組成物。
４）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約８〜１２重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約１０〜２５重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、７ＥＯ）；約１４〜２２重量％の炭酸ナトリウム；約１〜５重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約２５〜３５重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約０〜１０重量％の硫酸ナトリウム；約８〜１６重量％の過ホウ酸ナトリウム；約２〜８重量％のＴＡＥＤ；約０〜１重量％のホスホン酸塩（例えば、ＥＤＴＭＰＡ）；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜３重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、石鹸泡抑制剤、香料）を含む洗剤組成物。
５）水性液体洗剤組成物であって、約１５〜２１重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約１２〜１８重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、７ＥＯ；もしくはＣ１２〜１５アルコール、５ＥＯ）；約３〜１３重量％の脂肪酸（例えば、オレイン酸）としての石鹸；約０〜１３重量％のアルケニルコハク酸（Ｃ１２〜１４）；約８〜１８重量％のアミノエタノール；約２〜８重量％のクエン酸；約０〜３重量％のホスホン酸塩；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；約０〜２重量％のホウ酸塩約０〜３重量％のエタノール；約８〜１４重量％のプロピレングリコール；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、分散剤、石鹸泡抑制剤、香料、蛍光増白剤）を含む水性液体洗剤組成物。
６）水性構造化液体洗剤組成物であって、約１５〜２１重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約３〜９重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１２〜１８アルコール、７ＥＯ；もしくはＣ１２〜１５アルコール、５ＥＯ）；約３〜１０重量％の脂肪酸（例えば、オレイン酸）としての石鹸；約１４〜２２重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約９〜１８重量％のクエン酸カリウム；約０〜２重量％のホウ酸塩；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、ＰＶＰ、ＰＥＧ）；約０〜３重量％のエタノール；固定化ポリマー（例えば、ラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマー、モル比２５：１、ＭＷ３８００）；約０〜５重量％のグリセロール；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、分散剤、石鹸泡抑制剤、香料、蛍光増白剤）を含む水性構造化液体洗剤組成物。
７）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約５〜１０重量％の高級アルコール硫酸エステル塩；約３〜９重量％のエトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド；約０〜３重量％の脂肪酸としての石鹸；約５〜１０重量％の炭酸ナトリウム；約１〜４重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約２０〜４０重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約２〜８重量％の硫酸ナトリウム；約１２〜１８重量％の過ホウ酸ナトリウム；約２〜７重量％のＴＡＥＤ；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜５重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、蛍光増白剤、石鹸泡抑制剤、香料）を含む洗剤組成物。
８）顆粒として調製された洗剤組成物であって、約８〜１４重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約５〜１１重量％のエトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド；約０〜３重量％の脂肪酸としての石鹸；約４〜１０重量％の炭酸ナトリウム；約１〜４重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約３０〜５０重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約３〜１１重量％の硫酸ナトリウム；約５〜１２重量％のクエン酸ナトリウム；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜５重量％の他のポリマー（例えば、ＰＶＰ、マレイン酸／アクリル酸コポリマー、ＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、石鹸泡抑制剤、香料）を含む洗剤組成物。
９）顆粒として調製された洗剤組成物であって、約６〜１２重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約１〜４重量％の非イオン性界面活性剤；約２〜６重量％の脂肪酸としての石鹸；約１４〜２２重量％の炭酸ナトリウム；約１８〜３２重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約５〜２０重量％の硫酸ナトリウム；約３〜８重量％のクエン酸ナトリウム；約４〜９重量％の過ホウ酸ナトリウム；約１〜５重量％の漂白活性化剤（例えば、ＮＯＢＳもしくはＴＡＥＤ）；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜５重量％の他のポリマー（例えば、ポリカルボキシレートもしくはＰＥＧ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、蛍光増白剤、香料）を含む洗剤組成物。
１０）水性液体洗剤組成物であって、約１５〜２３重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約８〜１５重量％のアルコールエトキシスルフェート（例えば、Ｃ１２〜１５アルコール、２〜３ＥＯ）；約３〜９重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１２〜１５アルコール、７ＥＯ；もしくはＣ１２〜１５アルコール、５ＥＯ）；約０〜３重量％の脂肪酸（例えば、ラウリン酸）としての石鹸；約１〜５重量％のアミノエタノール；約５〜１０重量％のクエン酸ナトリウム；約２〜６重量％のヒドロトロープ（例えば、トルエンスルホン酸ナトリウム）；約０〜２重量％のホウ酸塩；約１重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜３重量％のエタノール；約２〜５重量％のプロピレングリコール；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、分散剤、香料、蛍光増白剤）を含む水性液体洗剤組成物。
１１）水性液体洗剤組成物であって、約２０〜３２重量％の直鎖アルキルベンゼンスルホネート（酸として計算された）；約６〜１２重量％のアルコールエトキシレート（例えば、Ｃ１２〜１５アルコール、７ＥＯ；もしくはＣ１２〜１５アルコール、５ＥＯ）；約２〜６重量％のアミノエタノール；約８〜１４重量％のクエン酸；約１〜３重量％のホウ酸塩；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約１〜３重量％のエタノール；約２〜５重量％のプロピレングリコール；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、マレイン酸／アクリル酸コポリマー；約０〜３重量％のエタノール；固定化ポリマー、例えばラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマー）；約３〜８重量のグリセロール；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、ヒドロトープ、分散剤、香料、蛍光増白剤）を含む水性液体洗剤組成物。
１２）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約２５〜４０重量％のアニオン性界面活性剤（例えば、直鎖アルキルベンゼンスルホネート、アルキルスルフェート、α−オレフィンスルホン酸、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、アルカンスルホン酸塩、石鹸）；約１〜１０重量％の非イオン性界面活性剤（アルコールエトキシレート；約８〜２５重量％の炭酸ナトリウム；約５〜１５重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約１５〜２８重量％のゼオライト（ＮａＡｌＳｉＯ４）；約０〜２０重量％の過ホウ酸ナトリウム；約０〜５重量％の漂白活性化剤（例えば、ＴＡＥＤもしくはＮＯＢＳ）；約２重量％までの本明細書のデキストラン；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、香料、蛍光増白剤）を含む洗剤組成物。
１３）上記の（１）〜（１２）に記載されているが、直鎖アルキルベンゼンスルホネートの全部もしくは一部がＣ１２〜Ｃ１８アルキルスルフェートで置換されている洗剤組成物。
１４）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約９〜１５重量％のＣ１２〜Ｃ１８アルキルスルフェート；約３〜６重量％のアルコールエトキシレート；約１〜５重量％のポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド；約１０〜２０重量％のゼオライト（例えば、ＮａＡｌＳｉＯ４）；約１０〜２０重量％の層状二ケイ酸塩（例えば、Ｈｏｅｃｈｓｔ社製のＳＫ５６）；約３〜１２重量％の炭酸ナトリウム；約０〜６重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約４〜８重量％のクエン酸ナトリウム；約１３〜２２重量％の過炭酸ナトリウム；約３〜８重量％のＴＡＥＤ；約２重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜５重量％の他のポリマー（例えば、ポリカルボキシレートおよびＰＶＰ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜５重量％の微量の成分（例えば、蛍光増白剤、光漂白剤、香料、石鹸泡抑制剤）を含む洗剤組成物。
１５）少なくとも６００ｇ／Ｌのバルク密度を有する顆粒として調製された洗剤組成物であって、約４〜８重量％のＣ１２〜Ｃ１８アルキルスルフェート；約１１〜１５重量％のアルコールエトキシレート；約１〜４重量％の石鹸；約３５〜４５重量％のゼオライトＭＡＰもしくはゼオライトＡ；約２〜８重量％の炭酸ナトリウム；約０〜４重量％の可溶性ケイ酸塩（例えば、Ｎａ２Ｏ ２ＳｉＯ２）；約１３〜２２重量％の過炭酸ナトリウム；約１〜８重量％のＴＡＥＤ；約３重量％までの本明細書のデキストラン；約０〜３重量％の他のポリマー（例えば、ポリカルボキシレートおよびＰＶＰ）；任意選択的に約０．０００１〜０．１重量％の酵素（純粋酵素タンパク質として計算された）；および約０〜３重量％の微量の成分（例えば、蛍光増白剤、ホスホン酸塩、香料）を含む洗剤組成物。１６）上記の（１）〜（１５）に記載した洗剤調製物であって、追加の成分または既に特定した漂白系の代替物のいずれかとして安定化もしくはカプセル封入過酸を含有する洗剤調製物。
１７）上記の（１）、（３）、（７）、（９）および（１２）に記載した洗剤組成物であって、過ホウ酸塩が過炭酸塩と置換されている洗剤組成物。
（１８）上記の（１）、（３）、（７）、（９）、（１２）、（１４）および（１５）に記載した洗剤組成物であって、追加してマンガン系触媒を含有する洗剤組成物。マンガン系触媒は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＨａｇｅ ｅｔ ａｌ．（１９９４，Ｎａｔｕｒｅ ３６９：６３７−６３９）によって記載された化合物の１つである。１９）非水性洗剤液体として調製された洗剤組成物であって、液体非イオン性界面活性剤（例えば、直鎖アルコキシル化第一級アルコール）、ビルダー系（ＴＡＥＤ、ホスホン酸塩）、本明細書のデキストラン、任意選択的に酵素およびアルカリを含む洗剤組成物。洗剤は、さらにアニオン性界面活性剤および／または漂白剤系を含むことができる。
極めて多数の市販で入手できる洗剤調製物は、本明細書に開示したデキストラン化合物を含むために適応させることができると考えられる。例には、ＰＵＲＥＸ（登録商標）ＵＬＴＲＡＰＡＣＫＳ （Ｈｅｎｋｅｌ）、ＦＩＮＩＳＨ（登録商標）ＱＵＡＮＴＵＭ （Ｒｅｃｋｉｔｔ Ｂｅｎｃｋｉｓｅｒ）、ＣＬＯＲＯＸ（商標）２ ＰＡＣＫＳ （Ｃｌｏｒｏｘ）、ＯＸＩＣＬＥＡＮ ＭＡＸ ＦＯＲＣＥ ＰＯＷＥＲ ＰＡＫＳ （Ｃｈｕｒｃｈ ＆ Ｄｗｉｇｈｔ）、ＴＩＤＥ（登録商標）ＳＴＡＩＮ ＲＥＬＥＡＳＥ、ＣＡＳＣＡＤＥ（登録商標）ＡＣＴＩＯＮＰＡＣＳ、および ＴＩＤＥ（登録商標）ＰＯＤＳ（商標）（Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ）が含まれる。
本明細書に開示した組成物は、例えば、口腔ケア組成物の形態にあってよい。口腔ケア組成物の例には、何らかの形の口腔ケア（例えば、虫歯［う食］、歯肉炎、歯垢、歯石および／または歯周疾患の治療または予防）を提供する歯磨き剤、練り歯磨き、洗口液、口内洗浄剤、チューインガムおよび可食ストリップが含まれる。口腔ケア組成物はさらに、舌の表面、硬口蓋および軟口蓋、頬粘膜、歯茎および歯の表面を含む口腔内のあらゆる軟質もしくは硬質表面を含む「口腔面」を治療するためであってもよい。本明細書の「歯の表面」は、例えば、天然歯の表面または、歯冠、キャップ、充填物、ブリッジ、義歯もしくは歯科インプラントを含む人工歯列の硬質表面である。
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、約０．０１〜１５．０重量％（例えば、約０．１〜１０重量％もしくは約０．１〜５．０重量％、約０．１〜２．０重量％）の本明細書に開示した１つ以上のデキストランエーテル化合物を含むことができる。口腔ケア組成物中に含まれる１つ以上のデキストランエーテル化合物は、時には、その中で組成物に所望の稠度および／または口当たりを付与するために有用な可能性がある増粘剤および／または分散剤として用意することができる。本明細書の口腔ケア組成物中には、例えばカルボキシビニルポリマー、カラゲナン（例えば、Ｌ−カラゲナン）、天然ゴム（例えば、カラヤゴム、キサンタンゴム、アラビアゴム、トラガントゴム）、コロイド状ケイ酸アルミニウムマグネシウムもしくはコロイド状シリカなどの１つ以上の他の増粘剤もしくは分散剤もまた用意することができる。
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、練り歯磨きもしくは他の歯磨き剤であってよい。本明細書のそのような組成物ならびに任意の他の口腔ケア組成物は、追加して、制限なく、う食予防薬、抗微生物剤もしくは抗菌剤、抗結石剤もしくは歯石防止剤、界面活性剤、研磨剤、ｐＨ修飾剤、発泡調節剤、保湿剤、フレーバラント、甘味料、顔料／着色剤、ホワイトニング剤および／または他の好適な成分の内の１つ以上を含むことができる。１つ以上のデキストラン化合物を加えることのできる口腔ケア組成物の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００６／０１３４０２５号明細書、同第２００２／００２２００６号明細書および同第２００８／００５７００７号明細書に開示されている。
本明細書のう食予防薬は、経口的に許容できるフッ化物イオンの起源であってよい。フッ化物イオンの好適な起源には、例えば、フッ化物、モノフルオロリン酸塩およびフルオロケイ酸塩ならびにオラフルール（Ｎ’−オクタデシルトリメチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’−トリス（２−エタノール）−ジヒドロフルオリド）を含むアミンフッ化物が含まれる。う食予防薬は、例えば、組成物に総計約１００〜２０，０００ｐｐｍ、約２００〜５，０００ｐｐｍもしくは約５００〜２，５００ｐｐｍのフッ化物イオンを提供する量で存在することができる。その中でフッ化ナトリウムがフッ化物イオンの唯一の起源である口腔ケア組成物中では、約０．０１〜５．０重量％、約０．０５〜１．０重量％もしくは約０．１〜０．５重量％のフッ化ナトリウムが組成物中に存在することができる。
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な抗微生物剤もしくは抗菌剤には、例えば、フェノール化合物（例えば、４−アリルカテコール；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、例えばベンジルパラベン、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベンおよびプロピルパラベン；２−ベンジルフェノール；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；カプサイシン；カルバクロール；クレゾール；オイゲノール；グアイアコール；ハロゲン化ビスフェノール系、例えば、ヘキサクロロフェンおよびブロモクロロフェン；４−ヘキシルレゾルシノール；８−ヒドロキシキノリンおよびそれらの塩；サリチル酸エステル、例えば、サリチル酸メンチル、サリチル酸メチルおよびサリチル酸フェニル；フェノール；ピロカテコール；サリチルアニリド；チモール；ハロゲン化ジフェニルエーテル化合物、例えば、トリクロサンおよびトリクロサン一リン酸）、銅（ＩＩ）化合物（例えば、塩化銅（ＩＩ）、フッ化（ＩＩ）、硫酸（ＩＩ）および水酸化（ＩＩ））、亜鉛イオン起源（例えば、酢酸亜鉛、クエン酸亜鉛、グルコン酸亜鉛、グリシン酸亜鉛、酸化亜鉛および硫酸亜鉛）、フタル酸およびそれらの塩（例えば、フタル酸マグネシウム一カリウム）、ヘキセチジン、オクテニジン、サンギナリン、塩化ベンズアルコニウム、臭化ドミフェン、塩化アルキルピリジニウム（例えば、塩化セチルピリジニウム、塩化テトラデシルピリジウム、Ｎ−テトラデシル−４−エチルピリジウムクロリド）、ヨウ素、スルホンアミド、ビスビグアニド（例えば、アレキシジン、クロルヘキシジン、ジグルコン酸クロルヘキシジン）、ピペリジノ誘導体（例えば、デルモピノール、オクタピノール）、マグノリア抽出物、グレープシード抽出物、ローズマリー抽出物、メントール、グラニオール、シトラール、オイカプリトール、抗生物質（例えば、オウグメンチン、アモキシリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、メトロニダゾール、ネオマイシン、カナマイシン、クリンダマイシン）および／または本明細書の参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５７７６４３５号明細書に開示された任意の抗菌剤が含まれる。１つ以上の抗微生物剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に例えば、約０．０１〜１０重量％（例えば、０．１〜３重量％）で存在することができる。
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な抗結石剤もしくは歯石防止剤には、例えば、リン酸塩およびポリリン酸塩（例えば、ピロリン酸塩）、ポリアミノプロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）、クエン酸亜鉛三水和物、ポリペプチド（例えば、ポリアスパラギン酸およびポリグルタミン酸）、ポリオレフィンスルホネート、ポリオレフィンホスフェート、ジホスホネート（例えば、アザシクロアルカン−２，２−ジホスホネート、例えばアザシクロヘプタン−２，２−ジホスホン酸）、Ｎ−メチルアザシクロペンタン−２，３−ジホスホン酸、エタン−１−ヒドロキシ−１，１−ジホスホン酸（ＥＨＤＰ）、エタン−１−アミノ−１，１−ジホスホネートおよび／またはホスホノアルカンカルボン酸およびそれらの塩（例えば、それらのアルカリ金属塩およびアンモニウム塩）が含まれる。有用な無機リン酸塩およびポリリン酸塩には、例えば、一塩基性、二塩基性および三塩基性リン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム、テトラポリリン酸、モノ−、ジ−、トリ−およびテトラ−ナトリウムピロリン酸、ピロリン酸二水素二ナトリウム、トリメタリン酸ナトリウム、ヘキサメタリン酸ナトリウムまたはそのナトリウムがカリウムもしくはアンモニウムで置換されているこれらのいずれかが含まれる。所定の実施形態における他の有用な抗結石剤には、アニオン性ポリカルボキシレートポリマー（例えば、アクリル酸、メタクリル酸およびマレイン酸無水物のポリマーもしくはコポリマー、例えばポリビニルメチルエーテル／マレイン酸無水物コポリマー）が含まれる。さらに他の有用な抗結石剤には、金属イオン封鎖剤、例えばヒドロキシカルボン酸（例えば、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸およびシュウ酸ならびにそれらの塩）およびアミノポリカルボン酸（例えば、ＥＤＴＡ）が含まれる。１つ以上の抗結石剤もしくは歯石防止剤は、任意選択的に、本明細書に口腔ケア組成物中で、例えば、約０．０１〜５０重量％（例えば、約０．０５〜２５重量％もしくは約０．１〜１５重量％）で存在してよい。
本明細書の口腔ケア組成物において使用するために好適な界面活性剤は、例えば、アニオン性、非イオン性もしくは両性であってよい。好適なアニオン性界面活性剤には、制限なく、Ｃ８〜２０アルキル硫酸塩、Ｃ８〜２０脂肪酸のスルホン化モノグリセリド、サルコシン酸塩およびタウリン酸塩の水溶性塩が含まれる。アニオン性界面活性剤の例には、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホン酸ココナッツモノグリセリドナトリウム、ラウリルサルコシン酸ナトリウム、ラウリルイソエチオン酸ナトリウム、ラウレスカルボン酸ナトリウムおよびドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムが含まれる。好適な非イオン性界面活性剤の例には、制限なく、ポロキサマー、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート、第３級アミン酸化物、第３級ホスフィン酸化物およびジアルキルスルホキシドが含まれる。好適な両性界面活性剤には、制限なく、アミノ基を有するＣ８〜２０脂肪族第２級および第３級アミンの誘導体、例えば、カルボン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩もしくはホスホン酸塩が含まれる。好適な両性界面活性剤の１つの例は、ココアミドプロピルベタインである。１つ以上の界面活性剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．０１〜１０重量％（例えば、約０．０５〜５．０重量％もしくは約０．１〜２．０重量％）の総量で存在してよい。
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な研磨剤は、例えば、シリカ（例えば、シリカゲル、ケイ酸、沈降シリカ）、アルミナ、不溶性リン酸塩、炭酸カルシウムおよび樹脂製研磨剤（例えば、ユリアホルムアルデヒド縮合生成物）を含むことができる。本明細書の研磨剤として有用な不溶性リン酸塩の例は、オルトリン酸塩、ポリメタリン酸塩およびピロリン酸塩であり、オルトリン酸二カルシウム二水和物、ピロリン酸カルシウム、β−カルシウムピロリン酸塩、リン酸三カルシウム、ポリメタリン酸カルシウムおよび不溶性ポリメタリン酸ナトリウムが含まれる。１つ以上の研磨剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約５〜７０重量％（例えば、約１０〜５６重量％もしくは約１５〜３０重量％）の総量で存在する。所定の実施形態における研磨剤の平均粒径は、約０．１〜３０μ（ミクロン）（例えば、約１〜２０μもしくは約５〜１５μ）である。
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つのｐＨ修飾剤を含むことができる。そのような作用物質は、組成物のｐＨを約２〜１０（例えば、約２〜８、３〜９、４〜８、５〜７、６〜１０もしくは７〜９）のｐＨ範囲へ酸性化する、より塩基性にする、または緩衝するために選択できる。本明細書で有用なｐＨ修飾剤の例には、制限なく、カルボン酸、リン酸およびスルホン酸；酸性塩（例えば、クエン酸一ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、マレイン酸一ナトリウム）；アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム、炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム、重炭酸塩、セスキ炭酸塩）；ホウ酸塩；ケイ酸塩；リン酸塩（例えば、リン酸一ナトリウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸塩）；およびイミダゾールが含まれる。
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な発泡調節剤は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であってよい。約２００，０００〜７，０００，０００（例えば、約５００，０００〜５，０００，０００もしくは約１，０００，０００〜２，５００，０００）の平均分子量を有するＰＥＧを含む高分子量ＰＥＧは好適である。１つ以上のＰＥＧは、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．１〜１０重量％（例えば、約０．２〜５．０重量％もしくは約０．２５〜２．０重量％）の総量で存在する。
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの保湿剤を含むことができる。所定の実施形態における保湿剤は、多価アルコール、例えば、グリセリン、ソルビトール、キシリトールまたは低分子量ＰＥＧであってよい。最も好適な保湿剤は、さらにまた本明細書の甘味料として機能することができる。１つ以上の保湿剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約１．０〜７０重量％（例えば、約１．０〜５０重量％、約２〜２５重量％もしくは約５〜１５重量％）の総量で存在する。
天然もしくは人工甘味料は、本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含むことができる。好適な甘味料の例には、デキストロース、スクロース、マルトース、デキストリン、転化糖、マンノース、キシロース、リボース、フルクトース、レブロース、ガラクトース、コーンシロップ（例えば、高果糖コーンシロップもしくはコーンシロップ固体）、部分的に加水分解されたデンプン、加水分解デンプン加水分解物、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、イソマルト、アスパルテーム、ネオテーム、サッカリンおよびそれらの塩、ジペプチドをベースとする強力甘味料およびシクラミン酸塩が含まれる。１つ以上の甘味料は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．００５〜５．０重量％の総量で存在する。
天然もしくは人工フレーバラントは、本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含むことができる。好適なフレーバラントの例には、バニリン；セージ；マヨラマ；オランダセリ油；スペアミント油；シナモン油；ウィンターグリーンの油（サリチル酸メチル）；ペパーミント油；チョウジ油；ベイ油；アニス油；ユーカリ油；カンキツ油；果実油；精油、例えば、レモン、オレンジ、ライム、グレープフルーツ、アプリコット、バナナ、グレープ、リンゴ、ストロベリー、チェリーもしくはパイナップル由来の精油；マメもしくはナッツ由来のフレーバー、例えば、コーヒー、ココア、コーラ、ピーナッツもしくはアーモンド；ならびに吸着およびカプセル封入フレーバラントが含まれる。本明細書のフレーバラントにさらに含まれるのは、口腔内に芳香および／または冷却もしくは加温効果を含む他の感覚効果を提供する成分である。そのような成分には、制限なく、メントール、酢酸メンチル、乳酸メンチル、ショウノウ、ユーカリ油、オイカプリトール、アネトール、オイゲノール、カッシア、オキサノン、Ｉｒｉｓｏｎｅ（登録商標）、プロペニルグアイエトール、チモール、リナロール、ベンズアルデヒド、シンナムアルデヒド、Ｎ−エチル−ｐ−メンタン−３−カルボキサミド、Ｎ，２，３−トリメチル−２−イソプロピルブタンアミド、３−（１−メントキシ）−プロパン−１，２−ジオール、シンナムアルデヒドグリセロールアセタール（ＣＧＡ）およびメトングリセロールアセタール（ＭＧＡ）が含まれる。１つ以上のフレーバラントは、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．０１〜５．０重量％（例えば、約０．１〜２．５重量％）の総量で存在する。
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの重炭酸塩を含むことができる。アルカリ金属重炭酸塩、例えば、重炭酸ナトリウムもしくはカリウムおよび重炭酸アンモニウムなどを含む任意の経口的に許容される重炭酸塩を使用できる。１つ以上の重炭酸塩は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．１〜５０重量％（例えば、約１〜２０重量％）の総量で存在する。
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つのホワイトニング剤を含むことができる。好適なホワイトニング剤は、参照により本明細書に久美子舞える米国特許第８５４０９７１号明細書に開示されたいずれかなどのペルオキシド化合物である。本明細書の好適な着色剤には、顔料、染料、レーキおよび例えばパール化剤などの特定の光沢もしくは反射性を付与する作用物質が含まれる。本明細書で有用な着色剤の特定の例には、タルク；マイカ；炭酸マグネシウム；炭酸カルシウム；ケイ酸マグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；シリカ；二酸化チタン；酸化亜鉛；赤色、黄色、褐色および黒色酸化鉄；フェロシアン化鉄ナトリウム；マンガンバイオレット；ウルトラマリン；チタン化マイカ；およびオキシ塩化ビスマスが含まれる。１つ以上の着色剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約０．００１〜２０重量％（例えば、約０．０１〜１０重量％もしくは約０．１〜５．０重量％）の総量で存在する。
本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含めることのできる追加の成分には、例えば、１つ以上の（上記の）酵素、ビタミン類および抗接着剤を含むことができる。本明細書で有用なビタミン類の例には、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ５および葉酸が含まれる。好適な抗接着剤の例には、ソルブロール、フィシンおよびクオラムセンシング阻害剤が含まれる。
本開示は、さらに水性組成物の粘度を増加させるための方法に関する。本方法は、本明細書に開示した少なくとも１つのデキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程を含む。本方法における接触させる工程は、接触させる工程の前の水性組成物の粘度と比較して水性組成物の粘度を増加させる。
本明細書の水性組成物は、例えば、水（脱イオン水）、水溶液もしくは親水コロイドであってよい。接触させる工程の前の水性組成物の粘度は、例えば、約２０〜２５℃で測定して、約０〜１０，０００ｃＰ（または０〜１０，０００ｃＰの間の任意の整数）であってよい。所定の実施形態では水性組成物は親水コロイドなどであってよいので、本方法が既に粘性である水性組成物の粘度を増加させるために使用できることは明白なはずである。
本明細書のデキストランを水性組成物と接触させる工程は、所定の実施形態における水性組成物の粘度を増加させる。粘度におけるこの増加は、接触させる工程の前の水性組成物の粘度と比較して、例えば、少なくとも約１％、１０％、１００％、１，０００％、１００，０００％もしくは１，０００，０００％（または１％〜１，０００，０００％の間の任意の整数）の増加であってよい。粘度における極めて大きな増加率（％）は、接触させる工程の前に水性組成物が粘度をほとんどから全く有していない場合に本明細書に開示した方法を用いると入手できることは明白なはずである。粘度の増加は、例えば、本方法を用いて得られた水性組成物の粘度を本方法の前（すなわち、接触させる工程の前）に存在していたような水性組成物の粘度と比較することによって決定できる。
本明細書のデキストランを水性組成物と接触させる工程は、所定の実施形態における水性組成物の剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動を増加させる。したがって、デキストランはこれらの実施形態において水性組成物を流動学的に修飾する。剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動におけるこの増加は、接触させる工程の前の水性組成物の剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動と比較して、例えば、少なくとも約１％、１０％、１００％、１，０００％、１００，０００％もしくは１，０００，０００％（または１％〜１，０００，０００％の間の任意の整数）の増加であってよい。流動学的修飾における極めて大きな増加率（％）は、接触させる工程の前に水性組成物は流動学的修飾をほとんどから全く有していない場合に本明細書に開示した方法を用いると入手できることは明白なはずである。
水性組成物の粘度を増加させるための方法における接触させる工程は、当技術分野において公知の任意の手段によって水性組成物中で本明細書に開示したいずれかのデキストランを混合もしくは溶解させることによって実施できる。例えば、混合もしくは溶解させる工程は、手動で、または機械（例えば、工業用ミキサーもしくはブレンダー、オービタルシェーカー、撹拌板、ホモジナイザー、超音波処理器、ビーズミル）を用いて実施できる。混合もしくは溶解させる工程は、所定の実施形態では、ホモジナイゼーション工程を含むことができる。ホモジナイゼーション（ならびに任意の他のタイプの混合する工程）は、デキストランを水性組成物と混合する必要に応じて、約５〜６０、５〜３０、１０〜６０、１０〜３０、５〜１５もしくは１０〜１５秒間（または５〜６０秒間の間の任意の整数）以上の時間にわたって実施することができる。ホモジナイザーは、例えば、約５，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１０，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１５，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１５，０００〜２５，０００ｒｐｍもしくは２０，０００ｒｐｍ（または５，０００〜３０，０００ｒｐｍの間の任意の整数）で使用することができる。
本明細書のデキストランを水性組成物と混合または水性組成物中に溶解させた後、生じた水性組成物は濾過されてもよい、または濾過されなくてもよい。例えば、ホモジナイゼーション工程を用いて調製した水性組成物は、濾過されても濾過されなくてもよい。
上述の方法の所定の実施形態は、本明細書に開示した水性組成物、例えば、食品（例えば、菓子類、例えばキャンディフィリング）、医薬製品（例えば、賦形剤）、家庭用製品（例えば、洗濯用洗剤、織物柔軟剤、洗濯機用洗剤）、パーソナルケア製品（例えば、水分含有歯磨き剤、例えば練り歯磨き）または工業用製品などを調製するために使用できる。
本開示は、さらに材料を処理する方法に関する。本方法は、材料を本明細書に開示した少なくとも１つのデキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む。
本明細書の接触させる方法において水性組成物と接触させられる材料は、所定の実施形態では、織物を含むことができる。本明細書の織物は、天然繊維、合成繊維、半合成繊維またはそれらの任意の組み合わせを含むことができる。本明細書の半合成繊維は、その１つの例はレーヨンである、化学的に誘導体化されている天然型材料を使用して製造される。本明細書の織物タイプの非限定的例には、（ｉ）セルロース繊維、例えば綿（例えば、ブロードクロス、キャンバス、シャンブレー、シェニール、チンツ、コーデュロイ、クレトン、ダマスク、デニム、フランネル、ギンガム、ジャガード、ニット、マテラーゼ、オックスフォード、パーケール、ポプリン、プリッス、サテン、シャーサッカー、シアー、テリークロス、ツイル、ベルベット）、レーヨン（例えば、ビスコース、モーダル、リオセル）、リネンおよびＴｅｎｃｅｌ（登録商標）；（ｉｉ）タンパク質性繊維、例えばシルク、ウールおよび関連哺乳動物繊維；（ｉｉｉ）合成繊維、例えばポリエステル、アクリル、ナイロンなど；（ｉｖ）ジュート、亜麻、ラミー、コイア、カポック、サイザル、ヘネケ、アバカ、ヘンプおよびサンヘンプ由来の植物性長繊維；ならびに（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の織物の任意の組み合わせから生成された織物が含まれる。織物タイプ（例えば、天然および合成）の組み合わせを含む織物には、例えば、綿繊維およびポリエステルの両方を備える織物が含まれる。本明細書の１つ以上の織物を含有する材料／製品には、例えば、衣類、カーテン、厚手のカーテン、掛け布、カーペット、ベッド用リネン、バス用リネン、テーブルクロス、スリーピングバッグ、テント、車内インテリアなどが含まれる。天然および／または合成繊維を含む他の材料には、例えば、不織布、詰め物、紙および発泡体が含まれる。
織物と接触させられる水性組成物は、例えば、織物ケア組成物（例えば、洗濯用洗剤、織物柔軟剤）であってよい。したがって、所定の実施形態における処理方法は、その中で織物ケア組成物を使用する場合は織物ケア法もしくは洗濯法であると見なすことができる。本明細書の織物ケア組成物は、下記の織物ケア利点（すなわち、表面直接作用）：しわ除去、しわ取り、防しわ性、織物摩耗減少、織物摩耗抵抗、織物ビリング減少、織物寿命延長、織物のカラー維持、織物退色減少、染料移動の減少、織物カラー復元、織物汚損減少、織物防汚、織物形状保持、織物平滑性増強、織物上の汚損の再付着防止、洗濯物の抗灰色化、織物の風合／手触りの向上および／または縮み減少のうちの１つ以上を達成することが企図されている。
本明細書の織物ケア法もしくは洗濯法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄／すすぎ量）の例は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第１９９７／００３１６１号パンフレットおよび米国特許第４７９４６６１号明細書、同第４５８０４２１号明細書および同第５９４５３９４号明細書に開示されている。他の例では、織物を含む材料は、本明細書の水性組成物と：（ｉ）少なくとも約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、もしくは１２０分間にわたり；（ｉｉ）少なくとも約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、もしくは９５℃（例えば、洗濯洗浄もしくはすすぎのために；約１５〜３０℃の「低」温、約３０〜５０℃の「中」温、約５０〜９５℃の「高」温）で；（ｉｉｉ）約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２のｐＨ（例えば、約２〜１２もしくは約３〜１１のｐＨ）で；（ｉｖ）少なくとも約０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、もしくは４．０重量％の塩（例えば、ＮａＣｌ）濃度で；または（ｉ）〜（ｉｖ）の任意の組み合わせで接触させることができる。
織物ケア法もしくは洗濯法における接触させる工程は、例えば、洗浄工程、浸漬工程および／またはすすぎ洗い工程のいずれかを含むことができる。さらにまた別の実施形態における材料もしくは織物を接触させる工程は、当技術分野において公知の任意の手段、例えば、溶解する、混合する、振とうする、スプレーする、処理する、浸漬する、フラッシュ洗浄する、上もしくは中に注入する、結合する、塗装する、コーティングする、塗布する、添加する、および／または有効量の本明細書のデキストラン化合物を織物もしくは材料と通じさせる工程によって実施できる。さらにまた別の実施形態では、接触させる工程は、表面直接作用を提供するために織物を処理するために使用できる。本明細書で使用する用語「織物の風合」もしくは「手触り」は、物理的、生理学的、心理学的、社会的もしくはそれらの任意の組み合わせであってよい織物に対する個人の触角感覚反応を意味する。１つの実施形態では、織物の風合は、相対風合値を測定するためのＰｈａｂｒＯｍｅｔｅｒ（登録商標）システム（Ｎｕ Ｃｙｂｅｒｔｅｋ，Ｉｎｃ．Ｄａｖｉｓ，ＣＡから入手できる）（ＡＡＴＣＣ（米国繊維化学者・色彩技術者協会））（ＡＡＴＣＣ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ，“２０２−２０１２，Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｈａｎｄ Ｖａｌｕｅ ｏｆ Ｔｅｘｔｉｌｅｓ：Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ｍｅｔｈｏｄ”））。
織物を含む材料を処理する所定の実施形態では、水性組成物のデキストラン化合物成分は、織物に吸着する。この特徴は、本明細書のデキストラン化合物を本明細書に開示した織物ケア組成物中の（それらの粘度修飾効果に加えて）再付着防止剤および／または抗灰色化剤として有用にさせると考えられる。本明細書の再付着防止剤もしくは抗灰色化剤は、汚れが取り除かれた後に洗浄水中の衣類に汚れが再付着しないようにするのに役立つ。さらに、本明細書の１つ以上のデキストラン化合物の織物への吸着は、その織物の機械的特性を強化することも企図されている。
本明細書の織物へのデキストラン化合物の吸着は、比色定量技術（例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれるＤｕｂｏｉｓ ｅｔ ａｌ．，１９５６、Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２８：３５０−３５６；Ｚｅｍｌｊｉｃ ｅｔ ａｌ．，２００６、Ｌｅｎｚｉｎｇｅｒ Ｂｅｒｉｃｈｔｅ ８５：６８−７６）または当技術分野において公知の任意の他の方法を使用して測定できる。
上記の処理法において接触させることのできる他の材料には、食器洗い用洗剤（例えば、自動食器洗い機用洗剤もしくは手洗い食器洗い用洗剤）を用いて処理できる表面が含まれる。そのような材料の例には、食器、眼鏡、ポット、鍋、グラタン皿、調理器具および陶磁器材料、陶器、金属、ガラス、プラスチック（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレンなど）および木材から製造された平皿類（本明細書では集合的に「食卓用食器類」と呼ぶ）の表面が含まれる。したがって、所定の実施形態における処理方法は、例えば、食器洗い法もしくは食卓用食器類洗浄法であると見なすことができる。本明細書の食器洗い法もしくは食卓用食器類洗浄法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄量）の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８５７５０８３号明細書に開示されている。他の例では、食卓用食器類製品は、本明細書の水性組成物と，例えば織物を含む材料と接触させることに関して上記に開示した条件のいずれかなどの好適な条件セット下で接触させることができる。
上記の処理法において接触させることができる他の材料には、口腔表面、例えば舌、硬口蓋および軟口蓋、頬粘膜、歯肉および歯の表面（例えば、天然歯もしくは歯冠、キャップ、充填物、ブリッジ、義歯もしくは歯科インプラントなどの義歯の硬質表面）を含む口腔内の任意の軟質もしくは硬質表面などの口腔表面が含まれる。したがって、所定の実施形態における処理方法は、例えば、口腔ケア法もしくは歯科治療法であると見なすことができる。口腔表面を本明細書の水性組成物と接触させるための条件（例えば、時間、温度）は、そのような接触を行う意図された目的のために好適なはずである。処理法において接触させることのできる他の表面には、さらに、例えば皮膚、毛髪もしくは爪などの外皮系の表面が含まれる。
したがって、本開示の所定の実施形態は、本明細書のデキストラン化合物を含む材料（例えば、織物）に関する。そのような材料は、例えば、本明細書に開示した材料処理方法にしたがって製造することができる。材料は、化合物が材料の表面に吸着される、さもなければ接触させられる場合には、所定の実施形態ではデキストラン化合物を含むことができる。
本明細書の材料を処理する方法の所定の実施形態は、さらに、材料が水性組成物と接触させられた後に乾燥させられる乾燥させる工程を含んでいる。乾燥させる工程は、接触させる工程の直後に、または接触させる工程に続く可能性がある１つ以上の追加の工程（例えば、本明細書の水性組成物中での洗浄後に、水中で、すすぎ洗いされた後に織物を乾燥させる工程）に続いて実施することができる。乾燥させる工程は、例えば風乾させる工程（例えば、約２０〜２５℃）または、例えば、少なくとも約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１７０、１７５、１８０、もしくは２００℃などの温度で、当技術分野において公知の数種の手段のいずれかによって実施できる。本明細書の乾燥させられている材料は、典型的にはその中に含まれた３、２、１、０．５もしくは０．１重量％未満の水を有する。織物は、任意選択的に乾燥させる工程を実施するために好ましい材料である。
本明細書の処理法において使用される水性組成物は、例えば上記の実施形態もしくは下記の実施例におけるように、本明細書に開示した任意の水性組成物であってよい。したがって、水性組成物のデキストラン成分は、本明細書に開示したいずれかであってよい。水性組成物の例には、洗剤（例えば、洗濯用洗剤もしくは食器洗い用洗剤）および例えば練り歯磨きなどの歯磨き剤が含まれる。
本開示はさらに、水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、もしくはそれらからなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む酵素反応に関する。グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、本明細書に開示したデキストランを合成する。重要なことに、このｇｔｆ反応で合成されたデキストランは、デキストランが相当に低濃度にある場合でさえ、水性組成物中で高粘性を示す。この高粘性プロファイルは以前に開示されたデキストランポリマーの粘度プロファイルと比較して独特であると考えられる。
本明細書の酵素反応において合成されたデキストランは、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって生成されたデキストランに関する上記の開示において（例えば、分子量、結合および分岐プロファイルを）特徴付けることができる。本明細書の酵素反応におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって製造されたデキストランに関する上記の開示において特徴付けることができる。
本明細書の酵素反応において、１つ以上の異なるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を使用することができる。一部の場合には、複数の酵素が存在する状況（例えば、細菌もしくは酵母発酵）とは対照的に、単一グルコシルトランスフェラーゼ酵素（例えば、ｇｔｆ０７６８）が使用される。酵素反応は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって精製されたデキストランに関する上記の開示において特徴付けることができる（例えば、初期スクロース濃度およびスクロースのタイプ、ｐＨ、温度、時間）。さらに、デキストランを生成する方法の本明細書に開示した任意の特徴は、グルコシルトランスフェラーゼ反応に適用することができる。
本開示は、少なくとも水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程を含む、デキストランを生成する方法に関する。この接触させる工程は、本明細書に開示したデキストランの生成を生じさせる。接触させる工程において生成されたデキストランは、任意選択的に単離することができる。
本明細書の合成方法において合成されたデキストランは、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって生成されたデキストランに関する上記の開示において（例えば、分子量、結合および分岐プロファイルを）特徴付けることができる。本明細書の合成方法におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって生成されたデキストランに関する上記の開示において特徴付けることができる。上記に開示した酵素反応の任意の特徴は、本合成方法に適用することができる。
デキストランを生成する本明細書の方法における接触させる工程は、水、スクロースおよび本明細書に開示した任意のグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む酵素反応を提供する工程を含む。本明細書に開示した方法の接触させる工程は、任意の数のやり方で実施できる。例えば、所望の量のスクロースを最初に水に溶解させ（任意選択的に、他の成分、例えばバッファー成分もまたこの調製段階で加えることもできる）、その後に１つ以上のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の添加を行うことができる。溶液は、静止状態に維持できる、または例えば撹拌する工程もしくは軌道振動によってかき混ぜることができる。
この反応は、無細胞であってよい、および典型的には無細胞である。したがって、本明細書のデキストランは、一部の態様では、例えば細菌（例えば、Ｌ．メセンテロイデス（Ｌ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）などの細胞から単離されない。
所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ反応の完了は、例えば、反応粘度がもはや増加しないかどうかを決定することによって、および／または反応に残されたスクロース（残留スクロース）の量を測定することによって計測することができるが、このとき約９０％を超えるスクロース消費率は反応完了を指摘することができる。典型的には、本明細書に開示した方法の反応は、完了するために約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１８、２４、３０、３６、４８、６０、７２、８４もしくは９６時間を要する可能性がある。反応時間は、例えば、反応において使用されるスクロールおよびグルコシルトランスフェラーゼ酵素の量などの特定のパラメーターに依存する可能性がある。
所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ反応において生成されたデキストランの収率は、反応において使用されたスクロースの重量に基づいて、約または少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、もしくは４５％であってよい。
本明細書に開示した方法で生成されたデキストランは、任意選択的に単離することができる。例えば、デキストランは、アルコール（例えば、９０〜１００重量％のメタノール、エタノールもしくはイソプロパノール）を用いて沈降させることができ、次に水、フルクトールおよび任意選択的に１つ以上の残留スクロースおよび副生成物（例えば、グルコース；ロイクロースおよび他の可溶性オリゴ糖）を含む可能性がある上清から単離することができる。そのような分離は、例えば、遠心分離もしくは濾過であってよい。沈降したデキストランは、任意選択的に、１回以上（例えば、２〜４回；２、３、４回以上）にわたりアルコール（例えば、７０〜１００％、または７０％、８０％、９０％、９５％もしくは１００％のメタノール、エタノールもしくはイソプロパノール）を用いて洗浄することができる。他の例では、デキストランの単離は、例えば、本明細書に参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１４／０１４２２９４号明細書および米国特許第６９７７２４９号明細書に開示された限外濾過および／または透析技術（すなわち、分子量カットオフ技術）を使用することを含むことができる。本明細書の所定のデキストランの特徴（例えば、結合プロファイル、分子量）の測定は、所望であれば、上述のように単離されたデキストランを用いて行うことができる。
本明細書のデキストラン合成方法は、本方法において使用されたスクロースの量に依存して、増加もしくは減少した粘度を備えるデキストランを生成するために有用であると考えられる。一般に、グルコシルトランスフェラーゼ反応において使用されたスクロース濃度が低いほどデキストラン生成物の粘度が高くなり、またその逆も同様である。グルコシルトランスフェラーゼ反応において本明細書に開示した任意のスクロース濃度を使用できるが、このとき反応のデキストラン生成物は高いスクロース濃度を含む反応において生成されたデキストラン生成物の粘度より高い粘度を有し、またその逆も同様である。所定の態様では、本明細書に開示した任意の粘度を使用すると、本方法の実施形態を特徴付けることができ、粘度の増加は、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、１５０倍、２００倍、もしくは２５０倍であってよい。本方法の所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、ｇｔｆ０７６８（配列番号１もしくは関連配列を含む）であってよい。
本明細書に開示された組成物および方法の非限定的例には：
１．デキストランを含む組成物であって、デキストランが：
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５，０００万〜２億Ｄａであり、デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍであり、デキストランは任意選択的にロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物ではないデキストランを含む組成物。
２．デキストランは：
（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む、実施形態１の組成物。
３．デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖（長鎖）を含み、ここで、その鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む、実施形態１または２の組成物。
４．鎖の平均長は、約１０〜５０モノマー単位である、実施形態１、２または３の組成物。
５．デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である、実施形態１、２、３または４の組成物。
６．本組成物は、少なくとも約２５ｃＰの粘度を有する水性組成物である、実施形態１、２、３、４または５の組成物。
７．デキストランのＭｗは、約８，０００万〜１億２，０００万Ｄａである実施形態１、２、３、４、５または６の組成物。
８．デキストランのｚ平均旋回半径は、約２３０〜２５０ｎｍである実施形態１、２、３、４、５、６または７の組成物。
９．本組成物は、食品、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品または工業製品の形態にある、実施形態１、２、３、４、５、６、７または８の組成物。
１０．本組成物は、菓子類の形態にある、実施形態９の組成物。
１１．水性組成物の粘度を増加させるための方法であって：実施形態１〜８のいずれかに記載のデキストランを水性組成物と接触させる工程を含み、水性組成物の粘度は接触させる工程の前の水性組成物の粘度と比較してデキストランによって増加させられる方法。
１２．材料を処理する方法であって、材料を実施形態１〜８のいずれかに記載のデキストランを含む水性組成物と接触させる工程を含む方法。
１３．水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む酵素反応であって、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、実施形態１〜８のいずれかに記載のデキストランを合成する酵素反応。
１４．デキストランを生成するための方法であって、
ａ）少なくとも水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を接触させる工程であって、実施形態１〜８のいずれかに記載のデキストランが合成される接触させる工程；およびと少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を接触させる工程であって、実施形態１〜８のいずれかに記載のデキストランが合成される接触させる工程；および
ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたデキストランを単離する工程を含む方法。１５．本方法において生成されるデキストランの粘度は、工程（ａ）におけるスクロースの量を減少させることによって増加する、実施形態１４の方法。
本開示を実施例１〜６および８〜１１においてより詳細に規定する。これらの実施例は、本開示の好ましい実施形態を示しているが、例示するためにだけ提供されていると理解すべきである。上記の考察およびこれらの実施例から、当業者であれば、本発明の本質的な特徴を確証することができ、本開示の精神および範囲から逸脱することなく、様々な使用および条件に適応させるために本開示を様々に変化させて、修飾を加えることができる。
一般方法
枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中のグルコシルトランスフェラーゼ酵素のクローニングおよび発現
実施例３〜６において使用した各グルコシルトランスフェラーゼは、以下のように調製した。
ｇｔｆ酵素をコードするプラスミド（ｇｔｆ発現および枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｓｔｉｌｉｓ）からの分泌を許容するｐＺＺＨＢ５８２、ｐＺＺＨＢ５８３、ｐＺＺＨＢ５８４もしくはｐＺＺＨＢ５８５；例えば、図２Ａ〜Ｄを参照されたい）は、Ｉｌｌｕｓｔｒａ ＴｅｍｐｌｉＰｈｉ（登録商標）１００増幅キット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＮＪ）を使用して増幅させた。コンピテント枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞（ΔｓｐｏＩＩＥ、ΔａｐｒＥ、ΔｎｐｒＥ、ｄｅｇＵＨｙ３２、ΔｓｃｏＣ、ΔｎｐｒＢ、Δｖｐｒ、Δｅｐｒ、ΔｗｐｒＡ、Δｍｐｒ、ΔｉｓｐＡ、Δｂｐｒ）は、増幅産物を用いて形質転換させた。細胞は、５ｐｐｍのクロラムフェニコールを補給したルリア（Ｌｕｒｉａ）寒天プレート上で平板培養した。形質転換プレートからのコロニーは、５ｍＬのＬＢ培地中に接種して３７℃で一晩インキュベートした。次に各培養からのアリコート（２５〜５０μＬ）は、５ｐｐｍのクロラムフェニコールを補給した３０ｍＬのＧｒａｎｔ’ｓ ＩＩ培地を含有する２５０ｍＬの振とうフラスコに移し、２４時間にわたり振とう（２８０ｒｐｍ）しながら３０℃でインキュベートした。細胞は、１時間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離することによって採取した。上清は、分泌されたｇｔｆ生成物についてＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析し、次に計２０時間にわたり２０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）を含有する溶液に対して３回透析した。５０ｍＬの円錐形遠心管１本に付き２５ｍＬで等分し、遠心管を約１時間にわたり−８０℃である角度に配置した。サンプルをいったん冷凍したら、遠心管の蓋を取り外し、高ゲージ針を用いて５〜１０回穿刺したＰＡＲＡＦＩＬＭに取り替えた。ＰＡＲＡＦＩＬＭで被覆した冷凍サンプルをＦｒｅｅＺｏｎｅ（登録商標）Ｆｒｅｅｚｅ Ｄｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｌａｂｃｏｎｃｏ Ｃｏｒｐ．，Ｋａｎｓａｓ Ｃｉｔｙ，ＭＯ）内で製造業者の取扱説明書にしたがって凍結乾燥した。
グルコシルトランスフェラーゼ酵素のストック液
酵素ストック液は、各ｇｔｆのために１０ｍＬの分子グレードのＨ２Ｏを凍結乾燥酵素粉末を含有する各５０ｍＬの円錐形遠心管内に加えることによって作成した。
実施例１
大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中でのグルコシルトランスフェラーゼ（０７６８）の発現および粗活性酵素溶解物の生成
本実施例は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中での成熟グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）発現菌株の粗細胞溶解物を生成すると、スクロースの存在下でゲル生成物形成活性を証明した。
１，４８４個のアミノ酸を有する推定上のＹＧリピート含有ヒドロラーゼ（ＧＥＮＢＡＮＫ内でＧＩ番号３３９４８０７６８下に分類されたが、現在はＧＩ番号４９７９６４６５９を有する）は、全ゲノムショットガンシーケンシングによってロイコノストック・シュードメセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）菌株ＫＣＴＣ３６５２から同定された。この推定グルコシルトランスフェラーゼ（本明細書ではｇｔｆ０７６８と称する）は、グルカン結合ドメインを含有するグリコシルヒドロラーゼのＧＨ７０ファミリーに属する。ｇｔｆ０７６８のＮ末端３７アミノ酸セグメントは、ＳＩＧＮＡＬＰ ４．０プログラム（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ ８：７８５−７８６）によって酵素のシグナルペプチドであると推定された。ｇｔｆ０７６８の成熟形は、配列番号１によって表される。
ｇｔｆ０７６８の細菌発現のためのプラスミドを構築するために、シグナルペプチドを使用せずにｇｔｆの成熟形をコードするＤＮＡ配列は、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ ＵＳＡ Ｉｎｃ．（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）によって構築した。合成配列は、ｐＥＴ２３Ｄ＋ベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ（登録商標）；Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のＮｈｅＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ部位内にサブクローニングした。この構築物によってコードされた０７６８ｇｔｆ（配列番号２）は、ｇｔｆ０７６８の野生型成熟（予測）形（配列番号１）（すなわち、配列番号１は配列番号２の中に含まれる）は、Ｎ末端で開始メチオニンおよび３個の追加アミノ酸（Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ）およびＣ末端で６個のヒスチジン残基を含んでいた。プラスミド構築物を配列確認し、アンピシリン選択を行って大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１ ＤＥ３宿主細胞内に形質転換すると、発現菌株ＥＣ００５２が生じた。
ＥＣ００５２の細胞および空のｐＥＴ２３Ｄ＋ベクターだけを含有するコントロール菌株は１００μｇ／ｍＬのアンピシリンを加えたＬＢ培地中で約０．５のＯＤ６００へ増殖させ、次に３時間にわたり３７℃で１ｍＭのＩＰＴＧで誘導した、または２３℃で一晩誘導した。この誘導期間後、細胞を１０分間にわたり４，０００×ｇでの遠心分離によって収集し、ＰＢＳバッファー（ｐＨ６．８）中に再懸濁させた。細胞は次に１４，０００ｐｓｉ（約９６．５３ＭＰａ）でフレンチプレスを２回通過させることによって溶解させ、その後に細胞残屑を２０分間にわたり１５，０００×ｇでの遠心分離によってペレット化した。各粗細胞溶解物の上清を等分して約８０℃で冷凍した。
ＥＣ００５２細胞由来の粗細胞溶解物の活性は、スクロースとの反応によってチェックした。コントロール反応は、空ベクターを含有する細胞から調製された細胞溶解物を用いて同様にセットアップした。各スクロース反応は、１００ｇ／Ｌのスクロース、１０ｍＭのクエン酸ナトリウム（ｐＨ５）および１ｍＭのＣａＣｌ２を備える１０％（ｖ／ｖ）の細胞溶解物を使用して構成した。２、３時間にわたる３７℃での反応物のインキュベーション後、デキストランであると考えられるゲル様生成物が、そのなかにＥＣ００５２細胞溶解物が加えられていた試験管内で形成された。コントロール反応中では、ゲル様生成物は形成されなかった。ＨＰＬＣ分析は、ＥＣ００５２細胞溶解物を含有する反応中ではスクロースが消費されるが、コントロール反応中では消費されないことを確証した。この結果は、ＥＣ００５２粗細胞溶解物が活性ｇｔｆ０７６８酵素を発現すること、およびこのｇｔｆが高粘性を有するデキストラン生成物を生成することを示唆した。
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応物はデキストランであると考えられるゲル化生成物を合成した。この結果は、ｇｔｆ０７６８がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有することを証明した。
実施例２
スクロースとＧｔｆ０７６８との反応およびゲル化デキストラン反応生成物の分析
本実施例では、実施例１に提供した結果を補足する、水、スクロースおよびｇｔｆ０７６８を含む追加の反応物について記載する。さらに、本実施例は、ｇｔｆ０７６８によって合成されたゲル化生成物のグリコシド結合分析を提供し、この生成物がデキストランの１つのタイプであることを証明している。
ｇｔｆ反応物を調製するための試薬：
− スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。
− リン酸ナトリウムバッファーストック（２００ｍＭ）（ｐＨ５．５）：したがって、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９６３８）およびリン酸ナトリウムに塩基性七水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９３９０）を使用して２５０ｍＬの水溶液を調製する。
− Ｇｔｆ０７６８酵素溶液（実施例１において調製した細胞溶解物）。
３種のｇｔｆ反応物の条件：
２．７２ｇのリン酸ナトリウムバッファーストック（ｐＨ５．５）、１００ｇ／Ｌのスクロースおよび２ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する１，０００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、１０分間にわたり８０℃で反応を加熱することによって脱活性化した。次に粘性生成物を沈降させるために、脱活性化粘性反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下で室温で乾燥させた。
１．９７ｇのリン酸ナトリウムバッファー、３００ｇ／Ｌのスクロースおよび１．４５ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する７２５ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって脱活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に脱活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下で室温で乾燥させた。
０．５４４ｇのリン酸ナトリウムバッファー、４００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．４ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する２００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって脱活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に脱活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下で室温で乾燥させた。
０．５４４ｇのリン酸ナトリウムバッファー、８００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．４ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する２００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって脱活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に脱活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下で室温で乾燥させた。
各反応のサンプル（１００μＬ）をそれぞれ０、２、４および１８時間後に取り出した。ｇｔｆ酵素は、１０分間にわたり８０℃で加熱することによって各サンプル中で脱活性化した。次に各サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離し、その後に反応中のスクロース消費を測定するためにＨＰＬＣ分析のために２００μＬの上清を使用した。各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応中の実施的なスクロース消費を示した（図１、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応）（このスクロース消費は、市販起源から得られたデキストラン分解酵素を使用して反応中で観察されたスクロース消費より有意に速く発生した−実施例７を参照されたい）。
さらにＨＰＬＣを使用して、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応の他の生成物を分析した。ポリマー収率は、反応中に残留した全部の他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、粘性生成物乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、ＨＰＸ−８７Ｃカラムを備えるＨＰＬＣ（上述したＨＰＬＣ条件）によって定量した。ＤＰ２−７二糖類は、次のＨＰＬＣ条件を用いて定量した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−４２Ａ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９７）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。これらのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応のグルコシル含有糖生成物が９１％のポリマー生成物、１％のグルコース、６．５％のロイクロースおよび１．５％のＤＰ２−７オリゴ糖から構成されることを指摘した。
１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のゲル化ポリマー生成物のグリコシド結合プロファイルは、１３Ｃ ＮＭＲによって決定した。上記のように調製した乾燥ポリマー（２５〜３０ｍｇ）は、５０℃で攪拌しながら３重量％のＬｉＣｌを含有する１ｍＬの重水素化ＤＭＳＯ中に溶解させた。ガラスピペットを使用して、０．８ｍＬの調製物を５ｍｍのＮＭＲチューブ内に移した。定量的１３Ｃ ＮＭＲスペクトルは、２６０４１．７Ｈｚのスペクトル窓を使用して、１２５．７６ＭＨｚのスペクトル周波数で、クリオプローブを装備したＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）５００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計を使用して獲得した。ｗａｌｔｚデカップリングを使用する逆ゲーテッドデカップリングパルス配列は、０．６２９秒間の捕捉時間、５秒間のパルス間遅延時間および６，０００パルスとともに使用した。タイムドメインデータは、２．０Ｈｚの指数的乗法を使用して変換させた。
ＮＭＲの結果は、ゲル化ポリマー生成物が約９０％のα−１，６−グルコシド結合、約４〜５％のα−１，３−グルコシド結合および約５〜６％のα−１，４およびα−１，２グルコシド結合を含むことを指摘した。ポリマー生成物の主鎖は、大部分はα−１，６−グルコシド結合を含み、さらに極めて少量のα−１，３およびα−１，４グルコシド結合も含むと思われた。他のα−１，３およびα−１，４グルコシド結合、ならびにα−１，２−グルコシド結合の全部は主鎖ではない分岐鎖内にあると思われた。そこでゲル化生成物は、ゲル化デキストランであると思われる。
現在は、ｇｔｆ０７６８によって生成されたデキストランの結合プロファイルを本明細書で決定するために、異なるプロトコル（上記の１３Ｃ ＮＭＲ手法ではない）が推奨されている。このプロトコルについて、本実施例に開示した結合プロファイルに類似する結合プロファイルを示している下記の実施例９において開示する。
１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のゲル化デキストラン生成物の数平均分子量（Ｍｎ）および重量平均分子量（Ｍｗ）は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定した。上記で調製した乾燥ポリマーは、１００℃で一晩振とうしながらＤＭＡｃおよび５％のＬｉＣｌ（０．５ｍｇ／ｍＬ）中に溶解させた。使用したクロマトグラフィーシステムは、３基のオンライン検出器：Ｗａｔｅｒｓ製の示差屈折計２４１０、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製のＨｅｌｅｏｓ ８＋マルチアングル光散乱測光計およびＷｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ示差毛細管式粘度計と結合したＷａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）製のＡｌｌｉａｎｃｅ ２６９５モジュールであった。ＳＥＣのために使用したカラムは、Ｓｈｏｄｅｘ（日本国）製の４基のスチレン−ジビニルベンゼンカラムおよびポリマー分散の低分子量領域での解像度を改良するための２基の線形ＫＤ−８０６ＭであるＫＤ−８０２およびＫＤ−８０１カラムであった。移動相は０．１１％のＬｉＣｌを含むＤＭＡｃであった。使用したクロマトグラフィー条件は、カラムおよび検出器区画内で５０℃、サンプルおよびインジェクター区画内で４０℃、０．５ｍＬ／分の流量および１００μＬのインジェクション量であった。データ整理のために使用したソフトウェアパッケージは、Ｗａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒバージョン３（広域グルカンポリマー標準物質を用いた較正）およびＷｙａｔｔ製のＡｓｔｒａ（登録商標）バージョン６（カラム較正を用いる三重検出法）であった。この手法から、ゲル化デキストラン生成物が２，２２９，４００のＭｎおよび５，３６５，７００のＭｗを有すると決定された。
現在は、ｇｔｆ０７６８によって生成されたデキストランの分子量を本明細書で決定するために異なるプロトコル（上記のＳＥＣ手法ではない）が推奨されている。このプロトコルは、本実施例で開示した分子量より２桁以上大きな分子量を示している、下記の実施例９において開示する。
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応物は、生成物の優勢α−１，６−グルコシド結合プロファイルによって決定されるように、ゲル化デキストラン生成物を合成した。下記の実施例８は、この生成物の粘度対所定の市販で入手できるデキストランの粘度の比較について開示している。さらに実施例９は、配列番号１を含むｇｔｆ酵素を用いたデキストランのまた別の生成について、収率、分子量およびこのデキストランの結合分析とともに開示している。
実施例３
グルコシルトランスフェラーゼ（２９１９）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での成熟ワイセラ・シバリア（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ ｃｉｂａｒｉａ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明している。
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＷｃｉＧｔｆ１は、ワイセラ・シバリア（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ ｃｉｂａｒｉａ）ＫＡＣＣ １１８６２から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＮＺ＿ＡＥＫＴ０１００００３５．１の２３３１５〜２７６６１位）は配列番号３に規定されており、配列番号４のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＺＰ＿０８４１７４３２）をコードする。ＷｃｉＧｔｆ１タンパク質（配列番号４）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ ４．０プログラムによって予測されるように２６個のアミノ酸のシグナルペプチドがある（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ ８：７８５−７８６）。これは、ＷｃｉＧｔｆ１（配列番号４）が分泌タンパク質であることを指摘している。ＷｃｉＧｔｆ１タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９１９ｇｔｆと呼ばれ、配列番号５に規定されている。
２９１９ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号６）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成し、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入すると（Ｖｏｇｔｅｎｔａｎｚ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．５５：４０−５２）、プラスミドｐＺＺＨＢ５８３が生じた（図２Ａ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８３は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での異種タンパク質（この場合には２９１９ｇｔｆ）を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９１９ｇｔｆ（配列番号５）（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する。
プラスミドｐＺＺＨＢ５８３は、２９１９ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
２９１９ｇｔｆ（配列番号５）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で測定した。反応は、４８時間にわたり室温で振とうしながら（１５０ｒｐｍ）実施した。
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４および４８時間後に反応から取り出した。酵素は、１０分間にわたり８０℃で各サンプルを加熱することによって脱活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を実施した。
ｇｔｆ反応中のロイクロース、グルコースおよびフルクトースの濃度は、８５℃でサーモスタット調節されたカラム区画内に配置されたＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−８７Ｃカラム（３００×７．８ｍｍ）および屈折率検出器を装備したＡｇｉｌｅｎｔ １２６０クロマトグラフィーシステムを用いて実施したＨＰＬＣを用いて決定した。ＨＰＬＣ溶出は、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水を０．６ｍＬ／分で用いて実施した。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、対応する標準物質との比較によって同定した。それらの濃度は、ピーク面積標準曲線に基づいて計算した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９１９ｇｔｆ（配列番号５）は、主にフルクトース（約５０％）ならびに少量のロイクロース（約５％）およびグルコース（約１％）を生成した。
ｇｔｆ反応中のオリゴ糖（ＤＰ２−ＤＰ７）の濃度は、８５℃でサーモスタット調節されたカラム区画内に配置されたＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−４２Ａカラム（３００×７．８ｍｍ）および屈折率検出器を装備したＡｇｉｌｅｎｔ １２６０クロマトグラフィーシステムを用いて実施したＨＰＬＣを用いて決定した。ＨＰＬＣ溶出は、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水を０．６ｍＬ／分で用いて実施した。オリゴ糖の形成は、対応する標準物質との比較によって同定した。オリゴ糖の濃度は、標準曲線に基づいてピーク面積から計算した。２９１９ｇｔｆ（配列番号５）は、反応の終了時までに少量のＤＰ２−ＤＰ７オリゴ糖（約３％）を生成した。
したがって、水、スクロースおよび配列番号５を含む酵素を含む反応物は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。実験結果は、ｇｔｆ２９１９がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
実施例４
グルコシルトランスフェラーゼ（２９１８）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での成熟ラクトバシラス ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明している。
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＬｆｅＧｔｆ１は、ラクトバシラス ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＳＹ６９７４３３．１の６１８〜５００９位）は配列番号７に規定されており、配列番号８のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＡＵ０８００８）をコードする。ＬｆｅＧｔｆ１タンパク質（配列番号８）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ ４．０プログラムによって予測されるように３７個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＬｆｅＧｔｆ１（配列番号８）が分泌タンパク質であることを指摘している。ＬｆｅＧｔｆ１タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９１８ｇｔｆと呼ばれ、配列番号９に規定されている。
２９１８ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１０）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成し、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入すると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８２が生じた（図２Ｂ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８２は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での異種タンパク質（この場合には２９１８ｇｔｆ）を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９１８ｇｔｆ（配列番号９）（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する。
プラスミドｐＺＺＨＢ５８２は、２９１８ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
２９１８ｇｔｆ（配列番号９）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で測定した。反応は、６日間にわたり室温で振とうしながら（１５０ｒｐｍ）実施した。
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４、４８および１４４時間後に反応から取り出した。酵素は、１０分間にわたり８０℃で各サンプルを加熱することによって脱活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を実施した。
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２−ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手順を用いて決定した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９１８ｇｔｆ（配列番号９）は、主にフルクトース（約５０％）および少量のロイクロース（約５％）およびグルコース（約１％）を生成した。２９１８ｇｔｆ（配列番号９）は、少量のＤＰ２−ＤＰ７オリゴ糖（約１％）を生成した。
したがって、水、スクロースおよび配列番号９を含む酵素を含む反応物は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。実験結果は、ｇｔｆ２９２０がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
実施例５
グルコシルトランスフェラーゼ（２９２０）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での成熟ストレプトコッカス・ソブリヌス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明している。
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＳｓｏＧｒｆ４は、ストレプトコッカス・ソブリヌス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ）Ｂ１３Ｎから同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＹ９６６４９０の１９８〜４７１８位）は配列番号１１に規定されており、配列番号１２のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＡＸ７６９８６）をコードする。ＳｓｏＧｔｆ４タンパク質（配列番号１２）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ ４．０プログラムによって予測されるように４１個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＳｓｏＧｒｆ４（配列番号１２）が分泌タンパク質であることを指摘している。ＳｓｏＧｒｆ４タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９２０ｇｔｆと呼ばれ、配列番号１３に規定されている。
２９２０ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１４）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成し、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入すると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８４が生じた（図２Ｃ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８４は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での異種タンパク質（この場合には２９２０ｇｔｆ）を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する。
プラスミドｐＺＺＨＢ５８４は、２９２０ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で測定した。反応は、６日間にわたり室温で振とうしながら（１５０ｒｐｍ）実施した。
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４、４８、７２および１４４時間後に反応から取り出した。酵素は、１０分間にわたり８０℃で各サンプルを加熱することによって脱活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２−ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手順を用いて決定した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）は、主にフルクトース（約５０％）、ロイクロース（約２０％）および少量のグルコース（約３％）を生成した。２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）は、少量のＤＰ２−ＤＰ７オリゴ糖（約１％）を生成した。
したがって、水、スクロースおよび配列番号１３を含む酵素を含む反応物は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。実験結果は、ｇｔｆ２９２０がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
実施例６
グルコシルトランスフェラーゼ（２９２１）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での成熟ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｏｗｎｅｉ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明している。
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＳｄｏＧｔｆ７は、ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｏｗｎｅｉ）ＭＦｅ２８から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＢ４７６７４６の１６〜２３７５位）は配列番号１５に規定されており、配列番号１６のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＺＰ＿０８５４９９８７．１）をコードする。ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質（配列番号１６）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ ４．０プログラムによって予測されるように４４個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質（配列番号１６）が分泌タンパク質であることを指摘している。ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９２１ｇｔｆと呼ばれ、配列番号１７に規定されている。
２９２１ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１８）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成し、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入すると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８５が生じた（図２Ｄ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８５は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中での異種タンパク質（この場合には２９２１ｇｔｆ）を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する。
プラスミドｐＺＺＨＢ５８５は、２９２１ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質変換された（一般方法を参照されたい）。
２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で測定した。反応は、８日間にわたり室温で振とうしながら（１５０ｒｐｍ）実施した。
サンプル（１００μＬ）は、反応開始時ならびにそれぞれ１、２、３、６、７および８日間後に反応から取り出した。酵素は、１０分間にわたり８０℃で各サンプルを加熱することによって脱活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２−ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手順を用いて決定した。第８日に反応中に約４３％のスクロースが残留した。粘性デキストラン生成物とは別に、２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）は、主にフルクトース（約３１％）、ロイクロース（約６％）およびグルコース（約３％）を生成した。ＤＰ２−ＤＰ７オリゴ糖の明白な生成は観察されなかった。
したがって、水、スクロースおよび配列番号１７を含む酵素を含む反応物は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。実験結果は、ｇｔｆ２９２１がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
実施例７（比較例）
市販で入手できるデキストラン分解酵素を使用したデキストランの生成
本実施例は、水およびスクロースを含む反応物中で市販で入手できるデキストラン分解酵素を使用したデキストランの合成について記載する。これで生成されたデキストランは、実施例８において、実施例１〜６で合成されたゲル化デキストラン生成物に比較して分析した。
デキストラン分解酵素反応を調製するための試薬：
− スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。４００ｇ／Ｌのストック液を調製した。
− リン酸ナトリウムバッファーストック（２００ｍＭ）（ｐＨ５．５）：したがって、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９６３８）およびリン酸ナトリウムに塩基性七水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９３９０）を使用して２５０ｍＬの水溶液を調製する。
− ロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のデキストラン分解酵素、凍結乾燥粉末、≧１００単位／ｍｇのタンパク質（Ｓｉｇｍａ社製品番号Ｄ９９０９）。
２０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ５．５）、１１０ｇ／ＬのスクロースおよびＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製の１０単位のデキストラン分解酵素を含有する５０ｍＬの反応を調製した。反応を調製した最後にデキストラン分解酵素を加えた。反応は、１２５ｍＬのキャップ付き振とうフラスコ内で７日間にわたり２６℃で振とうしながら（１００ｒｐｍ）実施した。反応のサンプル（１００μＬ）をそれぞれ０、３、６、２４、４８および１６８時間後に取り出した。デキストラン分解酵素は、１０分間にわたり８０℃で加熱することによって各サンプル中で脱活性化した。次に各サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離し、その後に反応中のスクロース消費を測定するためにＨＰＬＣ分析のために２００μＬの上清を使用した。
各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、デキストラン分解酵素反応中のスクロース消費を指摘した（図３）。市販のデキストラン分解酵素によるスクロース消費率がｇｔｆ０７６８のスクロース消費率と比較してはるかに緩徐であったことは注目に値する（実施例２）。詳細には、ｇｔｆ０７６８は反応時間の約１７〜１８時間後に大部分のスクロースを消耗したが（図１）、市販のデキストラン分解酵素は同一期間内には約２０％のスクロースしか消耗せず、全部もしくは大部分のスクロースを消耗するのに約１６８時間を要した。
さらにＨＰＬＣを使用して、反応の他の生成物を分析した。デキストラン収率は、反応中に残留した全部の他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、デキストラン乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびＤＰ２−７二糖類は、実施例２に記載したＨＰＬＣによって定量した。これらのＨＰＬＣ分析は、市販のデキストラン分解酵素反応の糖生成物が４９％のデキストラン、０．３％のスクロース、４４％のフルクトース、１％のグルコース、５％のロイクロースおよび１％のＤＰ２−７オリゴ糖から構成されることを指摘した。
本実施例で生成されたデキストランは、実施例８において、実施例１〜６で合成されたゲル化デキストラン生成物に比較して分析した。
実施例８
デキストランサンプルの粘度
本実施例では、実施例１〜７で生成されたデキストランポリマーの粘度、ならびに市販起源から得られたデキストランの粘度を測定することについて記載する。粘度測定は、様々な剪断速度で実施した。
デキストランポリマーサンプルは、実施例１〜７に記載したように調製した。詳細には、酵素反応を実施し、その後にポリマーをメタノール沈降させ、メタノール（１００％）で４回洗浄し、その後に乾燥させた。各サンプルの溶液（２重量％および／または３重量％）は、適切な量のポリマーを脱イオン（ＤＩ）水に加えることによって調製した。各調製物は、次にポリマーが十分に溶液中にあるまで卓上型ボルテックスミキサーを使用して混合した。これらのサンプルのそれぞれは、（下記の）表２および表３において「ＰＰＴ後」（沈降後）と呼ぶ。ＴＣＩ Ａｍｅｒｉｃａから得られたデキストラン（Ｍｗ＝９５６９７８）（Ｐｏｒｔｌａｎｄ，ＯＲ；カタログ番号Ｄ００６１）の２重量％溶液は同様に調製した；このデキストランは、下記では「市販デキストラン」と呼ぶ。
様々な剪断速度での各ポリマー溶液の粘度を決定するために、各溶液は、温度を２０℃で一定に保持している間に粘度計を使用して様々な剪断速度を受けさせた。さらに、実施例１〜７に記載した酵素反応のそれぞれから沈降させずに直接的に得られたポリマーサンプルに様々な剪断速度を受けさせた（表２および３において「ＰＰＴ前」と呼ぶ）。剪断速度は、０〜１０ｒｐｍに増加する勾配プログラムを用いて増加させ、剪断速度は３０秒間毎に０．１７（１／秒）ずつ増加させた。この実験の結果は、表２に列挙した。
Figure 0006814737
ポリマーサンプルは、さらに温度を２０℃で一定に保持している間に粘度計を使用して様々なより高い剪断速度も受けさせた。剪断速度は、１０〜２５０ｒｐｍに増加する勾配プログラムを用いて増加させ、剪断速度は２０秒間毎に７．３６（１／秒）ずつ増加させた。この実験の結果は、表３に列挙した。
Figure 0006814737
これらのデータは、配列番号１を含むグルコシルトランスフェラーゼのデキストラン生成物の溶液が、市販で得られたデキストランおよび市販で得られたデキストラン分解酵素のデキストラン生成物の粘度に比較して、大多数の場合に沈降および再溶媒和後にさえ増加した粘度を示すことができることを証明している。この観察所見はさらに、配列番号５、９、１３もしくは１７を含むグルコシルトランスフェラーゼの各ポリマー生成物に当てはまると思われる。
さらに、表２〜３に基づくと、ｇｔｆ０７６８反応におけるスクロースの量が８００ｇ／Ｌ〜１００ｇ／Ｌに減少するにつれてデキストラン生成物の粘度は増加すると思われることも注目に値する。詳細には、表３は、それぞれ８００および４００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のデキストラン生成物について（１４．１１ｒｐｍ／２重量％の負荷で）５．４４ｃＰおよび４９．８９ｃＰの粘度を指摘し、表２は、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のデキストラン生成物について（ｇｔｆ０７６８、２重量％の負荷）約９５７ｃＰ（１４．１１ｒｐｍの回転で指数的に外挿した）の粘度を指摘する可能性がある。この結果は、デキストラン生成物の粘度が反応に最初に提供されるスクロースの濃度を修飾することによって制御できることを示唆している。
実施例９
ｇｔｆ０７６８により合成されたデキストランのまた別の生成および分析
本実施例は、実施例２に加えて、水、スクロースの量およびｇｔｆ０７６８を含むまた別の反応について記載する。さらに、本実施例は、ｇｔｆ０７６８によって合成されたゲル化生成物の追加の結合分析および分子量分析を提供し、この生成物がデキストランの１つのタイプであることを証明している。
ｇｔｆ反応を調製するための試薬：
− スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。
− リン酸ナトリウムバッファーストック（１Ｍ、ｐＨ６．５、Ｔｅｋｎｏｖａカタログ番号Ｓ０２７６）。
− Ｇｔｆ０７６８酵素溶液（実施例１において調製した細胞溶解物）。
Ｇｔｆ反応条件：
２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（バッファーは１Ｍストック（ｐＨ６．５）からのｄｄＨ２Ｏを用いて希釈した）、１００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．１ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する５０ｍＬの反応を調製した。この反応を１００ｒｐｍで２６℃のインキュベーターシェーカー内（Ｉｎｎｏｖａ，Ｍｏｄｅｌ ４０００）で４３時間にわたり振とうした；反応は、約２４時間後に粘性になった。
ｇｔｆ酵素は、１０分間にわたり８０℃で反応を加熱することによって脱活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に脱活性化粘性反応を７５ｍＬの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成された。上清を注意深くデカントした後に、白色沈降物は７５ｍＬの１００％メタノールを用いて２回洗浄した。固体生成物を４８時間にわたりオーブン内の真空下で４５℃で乾燥させた。
反応のサンプル（１ｍＬ）をそれぞれ０、０．５、１、２および２４時間後に取り出した。ｇｔｆ酵素は、１０分間にわたり８０℃で加熱することによって各サンプル中で脱活性化した。各サンプルは次に、無菌水を用いて１０倍に希釈した。５００μＬの希釈サンプルを遠心管フィルター（ＳＰＩＮ−Ｘ、０．４５μｍのナイロン、２．０ｍＬのポリプロピレンチューブ、Ｃｏｓｔａｒ ＃８１７０）中に移し、卓上遠心分離機内で１２，０００ｒｐｍで６０分間遠心し、その後にＨＰＬＣ分析のために２００μＬの貫流量を使用して反応中のスクロース消費率を測定した。各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応中の実質的なスクロース消費を指摘した。
さらにＨＰＬＣを使用して、反応の他の生成物を分析した。ポリマー収率は、反応中に残留した全部の他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、粘性生成物乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、ＨＰＸ−８７Ｃカラムを備えるＨＰＬＣ（上述したＨＰＬＣ条件）によって定量した。ＤＰ２−７二糖類は、次の条件を用いてＨＰＬＣによって定量した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ ＨＰＸ−４２Ａ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９７）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。これらのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応のグルコシル含有糖生成物が９２．３％のポリマー生成物、１．３％のグルコース、５．０％のロイクロースおよび１．４％のＤＰ２−７オリゴ糖から構成されることを指摘した。
上記の反応の乾燥デキストラン粉末生成物のサンプル（約０．２ｇ）を分子量分析のために使用した。分子量は、３基のオンライン検出器：Ｗａｔｅｒｓ製の示差屈折計２４１４、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製の準弾性光散乱（ＷＥＬＳ）検出器を備えるＷｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製のＨｅｌｅｏｓ（商標）２ １８−アングルマルチアングル光散乱（ＭＡＬＳ）測光計およびＷｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ（商標）示差毛細管式粘度計と結合したＷａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）製のＡｌｌｉａｎｃｅ（商標）２６９５分離モジュールを使用するフローインジェクションクロマトグラフィー法によって決定した。乾燥デキストラン粉末は、２００ｐｐｍのＮａＮ３を含有する水性Ｔｒｉｓ（Ｔｒｉｓ［ヒドロキシメチル］アミノエタン）バッファー（０．０７５Ｍ）中に０．５ｍｇ／ｍＬで溶解させた。デキストランの溶解は、５０℃で一晩振とうすることによって達成した。Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ）からの２基のＡＱＵＡＧＥＬ−ＯＨ ＧＵＡＲＤカラムを使用してインジェクションピークからデキストランポリマーのピークを分離した。この手法についての移動ベースはデキストラン溶媒と同一であり、流量は０．２ｍＬ／分であり、インジェクション量は０．１ｍＬであり、カラム温度は３０℃であった。データ収集のためにはＷａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒ（商標）バージョン３ソフトウェアを使用し、マルチ検出器データ整理のためにはＡｓｔｒａ（商標）バージョン６ソフトウェアを使用した。この研究から、デキストランポリマー生成物が１．０２２（±０．０２５）×１０８ｇ／モル（すなわち、大まかに１億Ｄａ）の重量平均分子量（ＭＡＬＳ分析から）、２４３．３３（±０．４２）ｎｍのｚ平均旋回半径（ＭＡＬＳ分析から）および２１５ｎｍのｚ平均流体力学半径（ＱＥＬＳ分析から）を有することが決定された。さらにＱＥＬＳ分析から、デキストランが約０．２５９の粒径分布（ＰＳＤ）の標準偏差を有することも決定されたが、これはデキストランが流体力学的サイズに関して多分散性である可能性が高いことを示している。
グリコシド結合分析のためには、反応時間が２４時間（反応が粘性になった）であったことを除いて、本実施例において上述したように５０ｍＬのｇｔｆ反応を調製した。
ｇｔｆ酵素は、１０分間にわたり８０℃で反応を加熱することによって脱活性化した。次に脱活性化粘性反応を再生セルロース製の１２〜１４ｋＤａの分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）を備える頑丈な透析チュービング（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ（登録商標）４透析チュービング、製品番号１３２７０６、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）中に配置し、室温で１週間にわたり４Ｌのフィルター水に対して透析した。透析中、水は毎日交換した。次に透析粘性反応を沈降させ、本実施例で上述したように乾燥させた。ＧＣ／ＭＳ結合分析のために約０．２ｇの乾燥粉末を提出した。
結合分析は、本明細書に参照により組み込まれるＰｅｔｔｏｌｉｎｏ ｅｔ ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ７：１５９０−１６０７）によって記載された方法にしたがって実施した。手短には、乾燥デキストランサンプルをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）もしくはＤＭＳＯ中の５％の塩化リチウム中に溶解させ、次に全遊離ヒドロキシル基を水酸化ナトリウム／ＤＭＳＯスラリー、その後にヨードメタンの連続的添加によってメチル化した。メチル化ポリマーは次に塩化メチレン中で抽出し、１２０℃でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液を使用してモノマー単位に加水分解した。ＴＦＡは次にサンプルから蒸発させ、還元的開環は重水素化ホウ素ナトリウムを使用して実施し、これはさらに重水素原子を用いて還元末端を標識化した。グリコシド結合を加水分解することにより作成されたヒドロキシルは、次に５０℃の温度で塩化アセチルおよびＴＦＡを用いて処理することによってアセチル化した。最後に、誘導体化試薬を蒸発させ、生じたメチル化／アセチル化モノマーをアセトニトリル中で再構成し、ビスシアノプロピルシアノプロピルフェニルポリシロキサンカラムを使用する質量分析法を用いるガスクロマトグラフィー（ＧＣ／ＭＳ）によって分析した。メチルおよびアセチル官能基の相対ポジショニングは、重水素標識とともに、独特の保持時間指数および公表データベースと比較できる質量スペクトルを備える種を生み出した。この方法で、モノマー単位の誘導体は、各モノマーがデキストランポリマー内で最初にどのように連結されたのかおよびモノマーが分岐点であるかどうかを指摘した。これらのサンプルを分析した結果（デキストランは最初にＤＭＳＯもしくはＤＭＳＯ／５％のＬｉＣｌ中に溶解させた）は、表４に提供した。
Figure 0006814737
一般に、表４の結果は、上記で分析したデキストラン生成物が：
（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７重量％のグルコース
を含むことを指摘している。
この情報および一部の他の研究（データは示していない）に基づくと、この生成物は、相互から反復して分岐する（平均）長さが約２０ＤＰの長鎖（大多数または全部のα−１，６−結合を含有する）（例えば、長鎖は、順にそれ自体が他の長鎖から分岐することができ、さらにそれ自体が他の長鎖から分離できるなどの、他の長鎖からの分岐鎖であってよい）が存在する分岐鎖構造であることが企図されている。分岐鎖構造は、さらに長鎖からの短鎖を含むことができる；これらの短鎖は、長さが１〜３ＤＰおよび大部分が例えばα−１，３およびα−１，４−結合を含むと考えられる。デキストラン中の分岐点は、他の長鎖から分岐している長鎖からであろうと、または長鎖から分岐している短鎖からであろうと、α−１，６−結合内に含まれるグルコースからのα−１，３、−１，４または−１，２結合を含むと思われる。デキストランの全分岐点の大まかに２５％は、長鎖に分岐した。
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応物は、生成物の高Ｍｗおよび優勢α−１，６−グルコシド結合プロファイルによって決定されるように、極めて大きなゲル化デキストラン生成物を合成した。
実施例１０
ｇｔｆ０７６８によって合成されたデキストランを含む製剤
本実施例は、ｇｔｆ０７６８のデキストラン生成物を含む製剤について開示する。この製剤は、所定の消費者製品（例えば、ローションなどのパーソナルケア組成物）に粘度を提供するために一般に使用される所定の化合物（キサンタンゴム、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））を含む製剤と比較して優れた感覚的特徴（もしくは「感触」）を有することが証明された。
３種の異なるエマルジョンを調製し、以下のように皮膚感触試験において相互に対して比較した。
デキストランベースのエマルジョン：デキストランは、実施例９に開示した反応に類似する反応中でｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）を使用して生成した。室温で、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエートおよび鉱油（Ｂ相、表５）を小さな容器内で結合し、均質になるまで手作業で混合した。Ｂ相は、中等度のプロペラ混合下で緩徐に水（Ａ相、表５）に加えた。混合物は、およそ５〜１０分間にわたり５，０００〜９，０００ｒｐｍで均質化した。デキストラン（Ｃ相、表５）を次に中等度のプロペラ混合下で加えた。Ｇｅｒｍａｂｅｎ（登録商標）ＩＩ（Ｄ相、表５）を次に保存料として中等度のプロペラ混合下で加えた。デキストランは、任意選択的に、Ａ相からの一部分の水を使用して前加水分解されている。
Figure 0006814737
キサンタンゴムをベースとするエマルジョン（コントロール１）：室温で、キサンタンゴムおよび水（Ａ相、表６）を均質になるまで中等度のプロペラ混合下で結合した。ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエートおよび鉱油（Ｂ相、表６）を小さな容器内で結合し、均質になるまで手作業で混合した。Ｂ相は、中等度のプロペラ混合下で緩徐にＡ相に加えた。混合物は、およそ５〜１０分間にわたり５，０００〜９，０００ｒｐｍで均質化した。Ｇｅｒｍａｂｅｎ（登録商標）ＩＩ（Ｃ相、表６）を次に保存料として中等度のプロペラ混合下で加えた。
Figure 0006814737
Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ １０をベースとするエマルジョン（コントロール２）：室温で、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ １０および水（Ａ相、表７）を均質になるまで中等度のプロペラ混合下で結合した。ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエートおよび鉱油（Ｂ相、表７）を小さな容器内で結合し、均質になるまで手作業で混合した。Ｂ相は、中等度のプロペラ混合下で緩徐にＡ相に加えた。混合物は、およそ５〜１０分間にわたり５，０００〜９，０００ｒｐｍで均質化した。次にＧｅｒｍａｂｅｎ（登録商標）ＩＩ（Ｃ相、表７）を保存料として中等度のプロペラ混合下で加えた。２０重量％の水酸化ナトリウムを使用してエマルジョンをｐＨ５．５に中和した。
Figure 0006814737
皮膚感触の分析および結果：二重盲験皮膚感触分析は、上記のエマルジョンのそれぞれを比較するために、ＡＳＴＭ Ｅ１４９０−３（参照により本明細書に組み込まれる“Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｆｏｒ Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｖｅ Ｓｋｉｎｆｅｅｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｃｒｅａｍｓ ａｎｄ Ｌｏｔｉｏｎｓ”，ＡＳＴＭ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｗｅｓｔ Ｃｏｎｓｈｏｈｏｃｋｅｎ，ＰＡ，２００３，ＤＯＩ：１０．１５２０／Ｅ１４９０−０３）にしたがって実施した。本試験で評価した主要な特性は、粘液性抹消、使用後の感覚の粘性、糸引きのピックアップおよび粘性のピックアップであった。パネラーが１〜５のスケール上で特性を評価したが、このとき１は特性の最小値を示し、５は特性の最高値を示す。結果は、各特性に対するパネラーの平均評価値として下記の表８に報告した。これらの数値の平均合計値（Σ、表８）は、本明細書に開示したデキストランを用いて生成したエマルジョン（例えば、ローション）についての全感覚経験がキサンタンゴムもしくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ １０いずれかを用いて生成された類似のエマルジョンの結果を超えている。
Figure 0006814737
デキストラン含有エマルジョンが、特にコントロールエマルジョン中のキサンタンゴム（０．５重量％）もしくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）Ｕｌｔｒｅｚ １０（０．５重量％）の量と比較したエマルジョン中のデキストランの量（１重量％）が２倍であるので皮膚感触分析におけるコントロールエマルジョンよりも優れた評価が付けられたことは注目に値する。
したがって、ｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）によって生成されたデキストランは、例えばパーソナルケア製品および食品中などの強化された感覚的特性が所望である組成物中で使用するために好適な可能性がある。
実施例１１
懸濁粒子を備えるデキストランを含むクレンジング剤
本実施例は、ｇｔｆ０７６８のデキストラン生成物を含むクレンジング剤について開示する。ホホバエステルビーズはこの組成物中に懸濁させることができたが、これはデキストランが分散剤として機能できることを指摘した。
デキストランは、実施例９に開示した反応に類似する反応中でｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）を使用して生成した。室温で、水、デキストラン、グリセリン、ポリソルベート２０、コカミドプロピルベタイン、ＰＰＧ−２ヒドロキシエチルコカミドおよびＥＤＴＡ二ナトリウは、表９における調製法にしたがって結合し、均質になるまで手作業で混合した。次にホホバビーズを添加し、ビーズを均質に分散するまで混合を継続した。デキストランは、任意選択的に、一部分の水成分を使用して前加水分解することができた。
Figure 0006814737
 したがって、ｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）によって生成されたデキストランは、例えば所定のパーソナルケア製品などの水性組成物中で分散剤として使用することができる。
以上、本発明を要約すると下記のとおりである。
１．デキストランを含む組成物であって、前記デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、
前記デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５，０００万〜２億Ｄａであり、前記デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍであり、前記デキストランは任意選択的にロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物ではないデキストランを含む組成物。
２．前記デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む上記１に記載の組成物。
３．前記デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖を含み、ここで、前記鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む、上記１に記載の組成物。４．前記鎖の平均長は、約１０〜５０モノマー単位である、上記３に記載の組成物。
５．前記デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である、上記１に記載の組成物。
６．前記組成物は、少なくとも約２５ｃＰの粘度を有する水性組成物である、上記１に記載の組成物。
７．前記デキストランのＭｗは、約８，０００万〜１億２，０００万Ｄａである上記１に記載の組成物。
８．前記デキストランのｚ平均旋回半径は、約２３０〜２５０ｎｍである上記１に記載の組成物。
９．前記組成物は、食品、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品または工業製品の形態にある、上記１に記載の組成物。
１０．前記組成物は、菓子類の形態にある、上記１に記載の組成物。
１１．水性組成物の粘度を増加させるための方法であって、
上記１に記載のデキストランを前記水性組成物と接触させる工程を含み、前記水性組成物の粘度は前記接触させる工程の前の前記水性組成物の粘度と比較して前記デキストランによって増加させられる方法。
１２．材料を処理する方法であって、材料を上記１に記載のデキストランを含む水性組成物と接触させる工程を含む方法。
１３．水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、もしくはそれらからなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む酵素反応であって、
前記グルコシルトランスフェラーゼ酵素は上記１に記載のデキストランを合成する酵素反応。
１４．デキストランを生成するための方法であって、
ａ）水、スクロースおよび配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３、または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む、もしくはそれらからなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程であって、それにより上記１に記載のデキストランが生成される工程；および
ｂ）任意選択的に、工程（ａ）で生成されたデキストランを単離する工程を含む方法。１５．前記方法において製造されるデキストランの粘度は、工程（ａ）におけるスクロースの量を減少させることによって増加する、上記１４に記載の方法。

Claims (7)

  1. デキストランを含む組成物であって、前記デキストランは、
    （ｉ）１位および６位で連結した８７〜９１．５重量％のグルコース；
    （ｉｉ）１位および３位で連結した０．１〜１．２重量％のグルコース；
    （ｉｉｉ）１位および４位で連結した０．１〜０．７重量％のグルコース；
    （ｉｖ）１位、３位および６位で連結した７．７〜８．６重量％のグルコース；および
    （ｖ）
    （ａ）１位、２位および６位、または
    （ｂ）１位、４位および６位で連結した０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、
    前記デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は５，０００万〜２億Ｄａであり、前記デキストランのｚ平均旋回半径は２００〜２８０ｎｍである組成物。
  2. 前記デキストランは、
    （ｉ）１位および６位で連結した８９．５〜９０．５重量％のグルコース；
    （ｉｉ）１位および３位で連結した０．４〜０．９重量％のグルコース；
    （ｉｉｉ）１位および４位で連結した０．３〜０．５重量％のグルコース；
    （ｉｖ）１位、３位および６位で連結した８．０〜８．３重量％のグルコース；および
    （ｖ）
    （ａ）１位、２位および６位、または
    （ｂ）１位、４位および６位で連結した０．７〜１．４重量％のグルコースを含む、請求項１に記載の組成物。
  3. 請前記組成物は、少なくとも２５ｃＰの粘度を有する水性組成物である、請求項１に記載の組成物。
  4. 前記デキストランのＭｗは、８，０００万〜１億２，０００万Ｄａであり、ｚ平均旋回半径は、２３０〜２５０ｎｍである請求項１に記載の組成物。
  5. 前記組成物は、食品、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品または工業製品の形態にある、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
  6. 水性組成物の粘度を増加させるための方法であって、前記方法は、
    請求項１、２または４のいずれか１項に記載のデキストランを前記水性組成物と接触させる工程を含み、前記水性組成物の粘度は前記接触させる工程の前の前記水性組成物の粘度と比較して前記デキストランによって増加させられる方法。
  7. 材料を処理する方法であって、材料を請求項１、２または４のいずれか１項に記載のデキストランを含む水性組成物と接触させる工程を含む方法。
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