JP6884268B2

JP6884268B2 - 糖原病Ｉａ型治療薬

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Publication number: JP6884268B2
Application number: JP2020505066A
Authority: JP
Inventors: 小泉　誠; 誠小泉; 朗之大西; 剛益田; 充広岩本; 幸子関口; 伊藤　健太郎; 健太郎伊藤; 真之介辻; 雅文松尾
Original assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd; Kobe Gakuin Educational Foundation
Current assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd; Kobe Gakuin Educational Foundation
Priority date: 2018-03-09
Filing date: 2019-03-05
Publication date: 2021-06-09
Anticipated expiration: 2039-03-05
Also published as: CN115976028A; CN111511915A; WO2019172286A1; TW202202622A; TWI760600B; JP2021072800A; JP2023159397A; EP3763815A1; TW202003847A; US11958878B2; KR20210130854A; KR20200128513A; TW202417628A; KR102398295B1; US20200407394A1; EP3763815A4; JPWO2019172286A1

Description

本発明は、糖原病Ｉａ型治療薬に関し、より詳細には、糖原病Ｉａ型患者のうち、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子をmRNAレベルで修復し、正常なG6PCタンパク質を発現させることができるオリゴヌクレオチド及びそれを含む医薬に関する。

糖原病Ｉａ型はグルコース6リン酸脱リン酸化酵素（G6PC）を原因遺伝子とする常染色体劣性遺伝の代謝異常症であり、低血糖、肝腫大、腎腫大を主徴とする。食事療法による血糖コントロールにより生存予後は大幅に改善したが、コントロール良好であってもその過半数が肝腺腫、アルブミン尿を呈する（非特許文献１）。糖原病Ｉａ型患者の好発変異はいくつか報告されており、東アジアにおいてはスプライシング異常を引き起こすG6PC c.648G>T変異が好発変異として知られている（非特許文献２）。

アシアロ糖タンパク質受容体（ASGPR）に結合可能なリガンドとしてN-アセチル-D-ガラクトサミン（GalNAc）等を共有結合で結合した核酸医薬（アンチセンスやsiRNAなど）とのコンジュゲート体が、肝臓の肝実質細胞にオリゴヌクレオチドを送達させる方法として報告されている（非特許文献３及び特許文献１〜９）。１つのオリゴヌクレオチドに１乃至３個のGalNAcが結合している。また、GalNAcが２つ結合している例としては、非特許文献４に記載がある。

Eur J Pediatr. 2002年 161巻 Suppl 1:S20-34 Hum Mutat. 2008年、29巻、ｐ.921-930. Methods in Enzymology、1999年、313巻、２９７〜３２１頁 Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 26 (2016) 3690-3693

国際公開第２００９／０７３８０９国際公開第２０１４／０７６１９６国際公開第２０１４／１７９６２０国際公開第２０１５／００６７４０国際公開第２０１５／１０５０８３国際公開第２０１６／０５５６０１国際公開第２０１７／０２３８１７国際公開第２０１７／０８４９８７国際公開第２０１７／１３１２３６

本発明は、糖原病Ｉａ型の分子治療法を確立することを目的とする。

本発明者らは、G6PC c.648G>T変異を有する糖原病Ｉａ型患者に対し、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ASO）を投与することで、mRNAの異常スプライシングを修復し、正常なG6PCタンパク質の産生を誘導する治療法を確立した（図１）。G6PC c.648G>T変異ではmRNAの異常スプライシングが生じ、intron4とexon5のjunctionからexon5部分の91塩基が欠損し、frame shiftによる酵素の失活が起きる。mRNAの異常スプライシングが是正された場合、この翻訳されるアミノ酸配列は正常型と同じになることが期待できる（CUG(Leu)→CUU(Leu）)ため、G6PC c.648G>T変異を有する患者においては、このmRNAの異常スプライシングを修復する治療法により、活性を有する正常なG6PCタンパク質が産生され、糖原病Ｉａ型患者の低血糖発作のリスク軽減、臓器腫大の改善、肝腺腫リスクの軽減が可能になる。本研究は糖原病Ｉａ型に対する世界初の分子治療の開発研究となる。

本発明の要旨は以下の通りである。
（１）c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のcDNAに相補的なヌクレオチド配列からなる塩基数１５〜３０のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から82番目乃至92番目のいずれかの部位を含む領域に相補的な配列からなる前記オリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２）塩基数１５〜２１のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から86番目乃至92番目のいずれかの部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（３）塩基数１５〜２１のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（４）塩基数１５〜１８のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（５）塩基数１８のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（６）塩基数１７のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（７）塩基数１６のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（８）塩基数１５のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなる、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（９）配列番号１〜３２、４０〜４２、４４〜４８のいずれかの配列（但し、配列中のtはuであってもよく、uはtであってもよい）中の連続する少なくとも１５個のヌクレオチドの配列を含む、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１０）さらに、生体内で切断されうるオリゴヌクレオチドが5'末端及び／又は3'末端に付加された（１）〜（９）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１１）オリゴヌクレオチドを構成する糖及び／又はリン酸ジエステル結合の少なくとも１個が修飾されている、（１）〜（１０）のいずれか１項に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１２）オリゴヌクレオチドを構成する糖がD-リボフラノースであり、糖の修飾がD-リボフラノースの2'位の水酸基の修飾である、（１）〜（１０）のいずれか１項に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１３）オリゴヌクレオチドを構成する糖がD-リボフラノースであり、糖の修飾がD-リボフラノースの2’-O-アルキル化及び／又は2'-,4'-架橋化である、（１）〜（１０）のいずれか１項に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１４）オリゴヌクレオチドを構成する糖がD-リボフラノースであり、糖の修飾がD-リボフラノースの2’-O-アルキル化及び／又は2'-O,4'-C-アルキレン化である、（１）〜（１０）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１５）リン酸ジエステル結合の修飾がホスホロチオエートである、（１）〜（１４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１６）5'末端及び／又は3'末端にGalNAcユニットが結合した（１）〜（１５）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１７）5'末端にGalNAcユニットが結合した（１）〜（１５）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１８）GalNAcユニットが、式

［式中、Ｒａは式

で表される基を示し、Ｒｂは式

で表される基または水素原子を示し、XXは、式

で表される基を示し、Ｇは５−アセトアミド−２−ヒドロキシメチル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロピラン−６−イル基（GalNAc）を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、Ｌ^１及びＬ^２は、一方がメチレン基（ＣＨ_２）を示し、他方が原子を挟まないを示し、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ及びｕは互いに独立して０又は１を示し、ｎ及びｎ'は互いに独立して１〜１５の整数を示し、ｍ及びｍ'は互いに独立して０〜５の整数を示し、Rbが水素原子でないとき、vは１を示し、Rbが水素原子のとき、ｖは１〜７を示す。但し、ｎが１のときｍは０〜５の整数であり、ｎが２〜１５の整数のときｍは０であり、ｎ’が１のときｍ’は１〜５の整数であり、ｎ’が２〜１５の整数のときｍ’は０である。リン原子から遠い方の結合手には、水酸基、ＸＸ基、又はＯＧ基が結合してもよい。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（１９）GalNAcユニットが、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２０）GalNAcユニットが、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｑ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示し、Ｒａ’は、式

で表される基を示す。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２１）GalNAcユニットが、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｓ、ｎ、ｍ及びvは、前記と同意義を示し、Ｒｂ’は、式

（式中、ｎ’及びｍ’は前記と同意義を示す。）で表される基あるいは水素原子を示す。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２２）GalNAcユニットが、又は、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２３）GalNAcユニットが、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ、ｍ及びＲａ’は、前記と同意義を示す。］で表される基である、（１６）又は（１７）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２４）式

［式中、Ｒは水素原子、ＸＸ基、又はＧ基を示し、Ｔは５’末端に水酸基を持たないオリゴヌクレオチドを示し、ＸgはＸ¹〜Ｘ⁶及びＸ⁹〜Ｘ¹⁷からなる群から選ばれるGalNAcユニットを示し、又は、ＲＯ−ＸgはＸ⁷、Ｘ⁸、Ｘ¹⁸、Ｘ¹⁹、Ｘ²⁰、Ｘ²¹及びＸ²²からなる群から選ばれるGalNAcユニットを示し、Ｘa、Ｘb、Ｘc、Ｘd、Ｘe及びＸfは互いに独立してＸ¹〜Ｘ⁶及びＸ⁹〜Ｘ¹⁷またはそれらの光学異性体からなる群から選ばれるGalNAcユニット又は単結合を示す。］で表される、（１）に記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。

（２５）（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を含む、医薬。
（２６）（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を含む、糖原病Ｉａ型治療薬。
（２７）（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を医薬的に有効な量で被験者に投与することを含む、糖原病Ｉａ型の治療方法。
（２８）糖原病Ｉａ型の治療方法に使用するための、（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
（２９）（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を含む、経口又は非経口で投与するための配合物。
（３０）医薬として使用するための、（１）〜（２４）のいずれかに記載のオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物。

本発明により、糖原病Ｉａ型患者において、糖原病Ｉａ型患者のうち、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子をmRNAレベルで修復することができ、その結果、G6PCタンパク質を発現し、糖原病Ｉａ型患者の低血糖の正常化、肝肥大の正常化、肝癌への進行を抑制することが可能となる。
本明細書は、本願の優先権の基礎である日本国特許出願、特願2018-43524及び特願2018-128015の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。

（A）G6PC遺伝子からG6PCタンパク質が生成する過程を説明する図。（B）糖原病Ｉａ型患者のうち、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのスプライシングのパターンを示す図。本発明の糖原病Ｉａ型治療薬ASOによる治療原理を説明する模式図を示す。 ASO（21e_001〜21e_012）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。 ASO（21m_001〜21m_012）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。 ASOを用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。（A）ASO（21e_001〜21e_012）を用いた場合。（B）ASO（21m_001〜21m_012）を用いた場合。RQ: Relative Quantification ASOを用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドを産生する効果を示す図。（A）ASO（21e_001〜21e_012）を用いた場合。（B）ASO（21m_001〜21m_012）を用いた場合。 ASOを用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、G6PC酵素活性を示す図。（A）ASO（21e_001〜21e_012）を用いた場合。（B）ASO（21m_001〜21m_012）を用いた場合。 ASO（21e_001〜21e_006及び21e_013〜21e_022）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５上に結合しうる配列を示す図。 ASO（21e_001〜21e_006及び21e_013〜21e_022）を用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification ASO（21e_001〜21e_006及び21e_013〜21e_022）を用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドを産生する効果を示す図。 ASO（18e_001〜18e_017）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。 ASO（18m_001〜18m_017）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。（A）ASO（18e_001〜18e_017）を用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。（B）ASO（18m_001〜18m_017）を用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification （A）ASO（18e_001〜18e_017）を用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドを産生する効果を示す図。（B）ASO（18m_001〜18m_017）を用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドを産生する効果を示す図。 ASO（18e_018〜18e_031）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。（A）ASO（18e_018〜18e_031）を用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。（B）ASO（18e_018〜18e_031）を用いてG6PC mRNAの異常スプライシングを修復し、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドを産生する効果を示す図。RQ: Relative Quantification ASO（21e_002、18e_005、21m_002、18e_022、18m_005、15e_001、15ed_001、18e_008、18e_025、18m_008、15e_002及び15ed_002）が、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子のmRNAのエクソン５に結合しうる配列を示す図。 ASO（21e_002、18e_005、21m_002、18m_005, 18e_022, 15e_001, 15ed_001, 18e_008, 18e_025, 18m_008, 15e_002, 及び、15ed_002）を用いて、qRT-PCRによるG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン実施例91乃至95の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン；mpk: mg/kg 実施例91、及び、実施例96乃至103の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン；mpk: mg/kg 実施例83、実施例87乃至91、及び、実施例104乃至107の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン；mpk: mg/kg 実施例104、及び、実施108乃至115の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン；mpk: mg/kg 実施例105、113、及び、131乃至137の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification; Actn: β-アクチン；mpk: mg/kg 実施例１の化合物による培養細胞における異常スプライシング修復配列のフラグメント解析を示す図実施例133、及び、143乃至149の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification；mpk: mg/kg 実施例149、及び、152乃至160の化合物をヘテロノックインマウスへ投与した際の、qRT-PCRによる肝臓中のG6PC mRNAの異常スプライシングが是正される効果を示す図。RQ: Relative Quantification；mpk: mg/kg

以下、本発明の実施の形態についてより詳細に説明する。

本発明は、糖原病Ｉａ型患者のうち、c.648G>T変異を有したG6PC遺伝子をmRNAレベルで修復し、正常なG6PCタンパク質を発現させることができるオリゴヌクレオチド、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を提供する。本発明のオリゴヌクレオチドは、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のcDNAに相補的なヌクレオチド配列からなる塩基数１５〜３０のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5’末端から82番目乃至92番目のいずれかの部位を含む領域に相補的な配列からなる。

本発明において、糖原病Ｉａ型患者のうち、c.648G>T変異をする患者を対象にすることができる。c.648G>T変異のホモ接合の患者ののみならず、c.648G>T変異と他の変異の複合へテロ接合の患者も対象にすることができる。

G6PC遺伝子のc.648G>T変異は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへの変異である。エクソン５の5’末端から86番目に位置する。本発明のオリゴヌクレオチドは、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から86番目乃至92番目のいずれかの部位を含む領域に相補的な配列からなるとよく、92番目の部位を含む領域に相補的な配列からなることが好ましい。

c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のcDNAに相補的なヌクレオチド配列からなる塩基数１５〜３０のオリゴヌクレオチドであって、c.648G>T変異を有するG6PC遺伝子のエクソン５の5’末端から82番目乃至92番目のいずれかの部位を含む領域に相補的な配列からなる前記オリゴヌクレオチドとしては、配列番号１〜３２、４０〜４２、４４〜４８のいずれかの配列（但し、配列中のｔ又はＴは、ｕ又はＵであってもよく、ｕ又はＵは、ｔ又はＴであってもよい）の全部又は一部を含むものを例示することができる。本発明において「配列の一部」とは、通常、当該配列全体の８０％以上であり、好適には、８５％であり、さらに好適には、９０％であり、最も好適には、９４％である。本発明のオリゴヌクレオチドの塩基数は、１５〜３０が適当であり、１５〜２１が好ましく、１５〜１８がより好ましい。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）を構成するヌクレオチドは、天然型DNA、天然型RNA、DNA/RNAのキメラ、これらの修飾体のいずれであってもよいが、少なくとも１つが修飾ヌクレオチドであることが好ましい。

本発明における修飾ヌクレオチドとしては、糖が修飾されたもの（例えば、D-リボフラノースが2'-O-アルキル化されたもの、D-リボフラノースが2'-O, 4'-C-アルキレン化されたもの、D-リボフラノースが2'-,4'-架橋されたもの）、リン酸ジエステル結合が修飾（例えば、チオエート化）されたもの、塩基が修飾されたもの、それらを組み合わせたものなどを例示することができる。アンチセンスオリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１個のD-リボフラノースが2'-O-アルキル化されたものや2'-O,4'-C-アルキレン化されたものは、RNAに対する結合力が高いこと、ヌクレアーゼに対する耐性が高いことから、天然型のヌクレオチド（すなわち、オリゴDNA、オリゴRNA）より高い治療効果が期待できる。また、オリゴヌクレオチドを構成する少なくとも１個のリン酸ジエステル結合がチオエート化されたものも、ヌクレアーゼに対する耐性が高いことから、天然型のヌクレオチド（すなわち、オリゴDNA、オリゴRNA）より高い治療効果が期待できる。上記のような修飾された糖と修飾されたリン酸の両者を含むオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼに対する耐性がより高いことから、さらに高い治療効果が期待できる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）について、糖の修飾の例としては、D-リボフラノースの2'-O-アルキル化（例えば、2'-O-メチル化、2'-O-アミノエチル化、2'-O-プロピル化、2'-O-アリル化、2'-O-メトキシエチル化、2'-O-ブチル化、2'-O-ペンチル化、2'-O-プロパルギル化など）、D-リボフラノースの2'-O,4'-C-アルキレン化（例えば、2'-O,4'-C-エチレン化、2'-O,4'-C-メチレン化、2'-O,4'-C-プロピレン化、2'-O,4'-C-テトラメチレン化、2'-O,4'-C-ペンタメチレン化など）、D-リボフラノースの2'-デオキシ-2'-C,4’-C-メチレンオキシメチレン化、S-cEt（2',4'-constrained ethyl）、AmNA（Amide-bridged nucleic acid）、3'-デオキシ-3'-アミノ-2'-デオキシ-D-リボフラノース、3'-デオキシ-3'-アミノ-2'-デオキシ-2'-フルオロ-D-リボフラノースなどを挙げることができる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）について、糖の2'-,4'-架橋修飾の例としては、D-リボフラノースの2'-O,4'-C-アルキレン化（例えば、2'-O,4'-C-エチレン化、2'-O,4'-C-メチレン化、2'-O,4'-C-プロピレン化、2'-O,4'-C-テトラメチレン化、2'-O,4'-C-ペンタメチレン化など）、D-リボフラノースの2’-デオキシ-2’-C,4’-C-メチレンオキシメチレン化、S-cEt（2',4'-constrained ethyl）、AmNAなどを挙げることができる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）について、リン酸ジエステル結合の修飾の例としては、ホスホロチオエート結合、メチルホスホネート結合、メチルチオホスホネート結合、ホスホロジチオエート結合、ホスホロアミデート結合などを挙げることができる。

本発明において、塩基の修飾の例としては、シトシンの5-メチル化、5-フルオロ化、5-ブロモ化、5-ヨード化、N4-メチル化、チミンの5-デメチル化（ウラシル）、5-フルオロ化、5-ブロモ化、5-ヨード化、アデニンのN6-メチル化、8-ブロモ化、グアニンのN2-メチル化、8-ブロモ化などを挙げることができる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）は、市販の合成機（例えば、パーキンエルマー社のホスホロアミダイド法によるモデル３９２）などを用いて、文献（Nucleic Acids Research, 12, 4539 (1984))に記載の方法に準じて合成することができる。その際に用いられるホスホロアミダイト試薬は、天然型のヌクレオシド及び2'-O-メチルヌクレオシド（すなわち、2'-O-メチルグアノシン、2'-O-メチルアデノシン、2'-O-メチルシチジン、2'-O-メチルウリジン）については、市販の試薬を用いることができる。アルキル基の炭素数が２〜６個の2'-O-アルキルグアノシン、アデノシン、シチジンおよびウリジンについては、以下の通りである。

2'-O-アミノエチルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、文献（Blommers et al. Biochemistry (1998), 37, 17714-17725.）に従って合成できる。

2'-O-プロピルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、文献（Lesnik,E.A. et al. Biochemistry (1993), 32, 7832-7838.）に従って合成できる。

2'-O-アリルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、市販の試薬を用いることができる。

2'-O-メトキシエチルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、特許（US6261840）または、文献（Martin, P. Helv. Chim. Acta. (1995) 78, 486-504.に従って合成できる。

2'-O-ブチルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、文献（Lesnik,E.A. et al. Biochemistry (1993), 32, 7832-7838.）に従って合成できる。

2'-O-ペンチルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、文献（Lesnik,E.A. et al. Biochemistry (1993), 32, 7832-7838.）に従って合成できる。

2'-O-プロパルギルグアノシン、アデノシン、シチジン、ウリジンは、市販の試薬を用いることができる。

2'-O, 4'-C-メチレングアノシン、アデノシン、シチジン、5-メチルシチジンおよびチミジンについては、WO99/14226に記載の方法に従って、アルキレン基の炭素数が２〜５個の2'-O, 4'-C-アルキレングアノシン、アデノシン、シチジン、5-メチルシチジンおよびチミジンについては、WO00/47599に記載の方法に従って製造することができる。

D-リボフラノースの2'-デオキシ-2'-C,4'-C-メチレンオキシメチレン化されたヌクレオシドは、文献（Wang,G. et al. Tetrahedron (1999), 55, 7707-7724に従って合成できる。

S-cEt（constrained ethyl）は、文献（Seth,P.P. et al. J.Org.Chem (2010), 75, 1569-1581.）に従って合成できる。

AmNAは、文献（Yahara,A. et al. ChemBioChem (2012), 13, 2513-2516.）または、WO2014/109384に従って合成できる。

本発明において、核酸塩基配列は、アデニンを(A)又は(a)、グアニンを(G)又は(g)、シトシンを(C)又は(c)、チミンを(T)又は(t)、及び、ウラシルを(U)又は(u)とそれぞれ記載することができる。シトシンの代わりに、5-メチルシトシンを使うことができる。核酸塩基のうち、ウラシル(U)又は(u)とチミン(T)又は(t)は、互換性がある。ウラシル(U)又は(u)とチミン(T)又は(t)のどちらも、相補鎖のアデニン(A)又は(a)との塩基対形成に使うことができる。

ホスホロアミダイト試薬をカップリング後、硫黄、テトラエチルチウラムジスルフィド（TETD、アプライドバイオシステム社）、Beaucage試薬（Glen Research社）、または、キサンタンヒドリドなどの試薬を反応させることにより、ホスホロチオエート結合を有するアンチセンスオリゴヌクレオチドを合成することができる（Tetrahedron Letters, 32, 3005 (1991), J. Am. Chem. Soc. 112, 1253 (1990), PCT/WO98/54198）。

合成機で用いるコントロールドポアグラス（CPG）としては、2'-O-メチルヌクレオシドの結合したものは、市販のものを利用することができる。また、2'-O,4'-C-メチレングアノシン、アデノシン、5-メチルシチジンおよびチミジンについては、WO99/14226に記載の方法に従って、アルキレン基の炭素数が２〜５個の2'-O, 4'-C-アルキレングアノシン、アデノシン、5-メチルシチジンおよびチミジンについては、WO00/47599に記載の方法に従って製造したヌクレオシドを文献（Oligonucleotide Synthesis, Edited by M.J.Gait, Oxford University Press, 1984）に従って、CPGに結合することができる。修飾されたCPG（特開平７−８７９８２の実施例１２ｂに記載）を用いることにより、3'末端に2-ヒドロキシエチルリン酸基が結合したオリゴヌクレオチドを合成できる。また、3'-amino-Modifier C3 CPG, 3'-amino-Modifier C7 CPG, Glyceryl CPG, (Glen Research), 3'-specer C3 SynBase CPG 1000, 3'-specer C9 SynBase CPG 1000（link technologies）を使えば、3'末端にヒドロキシアルキルリン酸基、または、アミノアルキルリン酸基が結合したオリゴヌクレオチドを合成できる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）は、GalNAcがリンカー及びリン酸部を介して結合していてもよい。

本発明におけるGalNAcユニットとは、GalNAcが結合したリンカーが結合したリン酸基であり、更に、１個の結合手を有していてよい。GalNAcユニットのリン酸基は、オリゴヌクレオチドの5'末端及び／又は3'末端と結合することができ、好適には、オリゴヌクレオチドの5'末端に結合する。GalNAcユニットが結合手を有する場合、当該結合手は、水酸基、GalNAc、GalNAcが結合したリンカー、他のGalNAcユニットのリン酸基、又は、オリゴヌクレオチドの3'末端のリン酸基と結合することができる。１個のGalNAcユニットに結合しているGalNAcの数としては、好適には、１乃至７個であり、より好適には、１乃至５個であり、特に好適には、１乃至３個であり、最適個数は２個である。

本発明では、１個のGalNAcユニットがオリゴヌクレオチドに結合してもよく、複数のGalNAcユニットが連続して結合して、オリゴヌクレオチドに結合してもよい。１つのオリゴヌクレオチドに結合するGalNAcユニットの数としては、好適には、１乃至７個であり、より好適には、１乃至５個であり、特に好適には、１乃至３個であり、最適個数は１個である。

本発明では、GalNAcユニットと結合するオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）の5'末端及び／又は3'末端に、アンチセンスオリゴヌクレオチドとは異なる塩基配列であって、リン酸ジエステル結合からなり、生体内で切断されうるオリゴヌクレオチド配列を有していてよい。切断されうるオリゴヌクレオチドの鎖長としては、１乃至６ヌクレオチドが好適であり、さらに好適には、１乃至３ヌクレオチドである。切断されうるオリゴヌクレオチドは、切断されうるものであれば、特に限定はないが、すべてがDNAからなる天然型オリゴデオキシヌクレオチド、及び、すべてがRNAからなる天然型オリゴヌクレオチドなどをあげることができる。塩基配列としては、切断されうる配列であれば、特に限定はないが、5'−TCATCA-3'、5'−CATCA-3'、5'−ATCA-3'5'−TCA-3'、5'−CA-3'、5'−A-3'などを挙げることができる。

本発明のGalNAcユニットの例としては、例えば、一般式

［式中、Ｒａは式

で表される基を示し、Ｒｂは式

で表される基または水素原子を示し、XXは、式

で表される基を示し、Ｇは５−アセトアミド−２−ヒドロキシメチル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロピラン−６−イル基（GalNAc）を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、Ｌ^１及びＬ^２は、一方がメチレン基（ＣＨ_２）を示し、他方が原子を挟まないを示し、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ及びｕは互いに独立して０又は１を示し、ｎ及びｎ'は互いに独立して１〜１５の整数を示し、ｍ及びｍ'は互いに独立して０〜５の整数を示し、Rbが水素原子でないとき、vは１を示し、Rbが水素原子のとき、ｖは１〜７を示す。但し、ｎが１のときｍは０〜５の整数であり、ｎが２〜１５の整数のときｍは０であり、ｎ’が１のときｍ’は１〜５の整数であり、ｎ’が２〜１５の整数のときｍ’は０である。リン原子から遠い方の結合手には、水酸基、ＸＸ基、又はＯＧ基が結合してもよい。］で表される基であり、好適には、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。］で表される基、式

で表される基を示す。］で表される基、式

（式中、ｎ’及びｍ’は前記と同意義を示す。）で表される基あるいは水素原子を示す。］で表される基、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。］で表される基、又は、式

［式中、Ｇ、Ｚ、Ｌ^１、Ｌ^２、ｎ、ｍ及びＲａ’は、前記と同意義を示す。］で表される基である。

本発明において、GalNAcユニットが結合したオリゴヌクレオチドは、例えば、式

［式中、Ｒは水素原子、ＸＸ基、又はＧ基を示し、Ｔは５’末端に水酸基を持たないオリゴヌクレオチドを示し、Ｘgは結合手を有するGalNAcユニットを示し、Ｘa、Ｘb、Ｘc、Ｘd、Ｘe及びＸfは互いに独立して結合手を有するGalNAcユニット又は単結合を示す。］で表されるオリゴヌクレオチドである。

Ｘa、Ｘb、Ｘc、Ｘd、Ｘe、Ｘf及びＸgにおける「結合手を有するGalNAcユニット」としては、次のような基が挙げられる。

また、「結合手を有するGalNAcユニット」であるＸg、及び、ＲがＸＸ基又はＧ基からなるＲＯ−Ｘg−の「GalNAcユニット」としては、次のような基が挙げられる。

本発明のGalNAcユニットが結合したオリゴヌクレオチドは、GalNAcユニットを含有するアミダイトをヌクレオシドのアミダイト試薬と同様に用いることにより、市販の合成機（例えば、パーキンエルマー社のホスホロアミダイド法によるモデル３９２）などを用いて、文献（Nucleic Acids Research, 12, 4539 (1984))に記載の方法に準じて合成することができる。オリゴヌクレオチドの5'末端に結合する場合は、オリゴヌクレオチドの部分の鎖伸長を終了した後に、GalNAcユニットを含有するアミダイトをカップリングすることで合成することができる。また、オリゴヌクレオチドの3'末端に結合する場合は、修飾されたCPG（特開平７−８７９８２の実施例１２ｂに記載）、3'-amino-Modifier C3 CPG, 3'-amino-Modifier C7 CPG, Glyceryl CPG, (Glen Research), 3'-specer C3 SynBase CPG 1000, 3'-specer C9 SynBase CPG 1000（link technologies）などを使い、GalNAcユニットを含有するアミダイトをカップリングし、その後に、オリゴヌクレオチドの部分の鎖伸長することで、3'末端にヒドロキシアルキルリン酸基、または、アミノアルキルリン酸基を持ち、さらにGalNAcユニットが結合したオリゴヌクレオチドを合成できる。

GalNAcユニット含有アミダイトの合成法
本発明のGalNAcユニット含有アミダイトは、後述するＡ法からI法に従って製造することができる。Ａ法からI法において、各反応終了後、各反応の目的化合物は常法に従って、反応混合物から採取される。例えば、反応混合物を適宜中和し、また、不溶物が存在する場合にはろ過により除去した後、水と酢酸エチルのような混和しない有機溶媒を加え、目的物を含む有機層を分離し、水などで洗浄後、無水硫酸ナトリウムなどで乾燥後、溶剤を留去することによって得られる。得られた化合物は、必要ならば、常法、例えばシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離・精製することができる。あるいは、再沈殿、再結晶により精製することができる。

Ａ法
Ａ法は、化合物（８）を製造するための方法である。化合物（２）に逆の立体配置のものを用いると、化合物（８）において、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴が結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ¹は水酸基の一般的な保護基であり、Ｒ²は4,4'-ジメトキシトリチル基である。式中、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴は、［Ｒ³及びＲ⁴は、同一又は異なって、水酸基、保護された水酸基、メルカプト基、保護されたメルカプト基、アミノ基、炭素数１乃至４個のアルコキシ基、炭素数１乃至４個のアルキルチオ基、炭素数１乃至５個のシアノアルコキシ基又は炭素数１乃至４個のアルキル基で置換されたアミノ基を示す]を示す。式中Ｘは、炭素原子又は酸素原子である。式中ｎは１〜１５の整数であり、ｍは０〜５の整数である。ただし、ｎが１であるとき、ｍは０〜５の整数であり、ｎが２〜１５の整数であるとき、ｍは０である。

工程Ａ−１は、化合物（３）を製造する工程であり、不活性溶媒中、酸の存在下、化合物（１）と化合物（２）を反応させ、エポキシドの開環時にエーテル結合を生成する。

上記反応に使用される不活性溶媒としては、例えば、炭化水素類、芳香族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、アセトニトリルなどが挙げられ、好ましくは、ジクロロメタンである。

上記反応に使用される酸としては、例えば、有機酸類、ルイス酸などが挙げられる。有機酸としては、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸などが挙げられ、ルイス酸としては、例えば、三フッ化ホウ素‐ジエチルエーテル錯体などが挙げられる。好ましくは、トリフルオロメタンスルホン酸である。

反応温度は、化合物（１）および化合物（２）、酸、不活性溶媒などにより異なるが、通常、-20℃から還流温度である。好ましくは、30℃から45℃である。

反応時間は、化合物（１）および化合物（２）、酸、不活性溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、15分間から72時間、好ましくは2時間から24時間である。

工程Ａ−２は、化合物（５）を製造する工程であり、不活性溶媒中、酸の存在下、化合物（３）及び化合物（４）を反応させ、グリコシド結合を生成する。

上記反応に使用される酸としては、例えば、有機酸類、ルイス酸などが挙げられる。有機酸としては、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸などが挙げられ、ルイス酸としては、例えば、三フッ化ホウ素‐ジエチルエーテル錯体などが挙げられ、好ましくは、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体である。

反応温度は、化合物（３）、酸、不活性溶媒などにより異なるが、通常、-20℃から還流温度である。好ましくは、30℃から45℃である。

反応時間は、化合物（３）、酸、不活性溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、15分間から72時間、好ましくは2時間から24時間である。

工程Ａ−３は、化合物（６）を製造する工程であり、化合物（５）における水酸基の保護基であるＲ¹を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ａ−４は、化合物（７）を製造する工程であり、不活性溶媒中、4,4'-ジメトキシトリチルクロリドと塩基の存在下、化合物（６）の一級水酸基にＲ²を導入する。

上記反応に使用される不活性溶媒としては、例えば、炭化水素類、芳香族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類、アセトニトリルなどが挙げられ、好ましくは、ジクロロメタン又はピリジンである。

上記反応に使用される塩基としては、例えば、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、4-ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、好ましくは、N,N-ジイソプロピルエチルアミン又はピリジンである。

反応温度は、塩基、不活性溶媒などにより異なるが、通常、-20℃から還流温度である。好ましくは、10℃から30℃である。

反応時間は、塩基、不活性溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、15分間から24時間、好ましくは１時間から４時間である。

工程Ａ−５は、化合物（８）を製造する工程であり、不活性溶媒中、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジトと塩基の存在下、化合物（７）の二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する。

上記反応に使用される塩基としては、例えば、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、4-ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、好ましくは、N,N-ジイソプロピルエチルアミンである。

Ｂ法
Ｂ法は、化合物（１４）又は分岐型の化合物（１９）を製造するための方法である。化合物（２）に逆の立体配置のものを用いると、化合物（１４）又は分岐型の化合物（１９）において、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴が結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示し、Ｒ^５及びＲ^６はアミノ基の一般的な保護基である。

Ｂ−１工程は、化合物（１０）を製造する工程であり、不活性溶媒中、酸の存在下、化合物（９）と化合物（２）を反応させ、エポキシドの開環時にエーテル結合を生成する。前述の工程Ａ−１と同様に行うことができる。

工程Ｂ−２は、化合物（１１）を製造する工程であり、保護基であるＲ^５を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｂ−３は、化合物（１３）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（１１）及び化合物（１２）をアミド縮合する。

上記反応に使用される不活性溶媒は、使用する縮合剤の種類により適宜選ぶことができる。例えば、水、アルコール類、非プロトン性極性溶媒などが挙げられ、好ましくは、ジクロロメタン又はN,N-ジメチルホルムアミドである。

上記反応に使用される縮合剤としては、例えば、カルボジイミド系縮合剤のＷＳＣ（1-[3-(ジメチルアミノ)プロピル]-3-エチルカルボジイミド）、ＤＩＣ（N,N’-ジイソプロピルカルボジイミド）、イミダゾール系縮合剤のＣＤＩ（N,N’-カルボニルジイミダゾール）、トリアジン系縮合剤のＤＭＴ−ＭＭ（4-(4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2-イル)-4-メチルモルホリニウム＝クロリドｎ水和物）、ウロニウム系縮合剤のＨＡＴＵ（O-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’- テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩）、ＴＳＴＵ（O-(N-スクシンイミジル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムテトラフルオロほう酸塩）、ホスホニウム系縮合剤のＰｙＢＯＰ（1H-ベンゾトリアゾール-1-イルオキシトリピロリジノホスホ二ウムヘキサフルオロりん酸塩）などが挙げられ、好ましくは、ＷＳＣ又はＨＡＴＵである。また、必要に応じて、添加剤のＨＯＡｔ（1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール），ＨＯＢｔ（1-ヒドロキシベンゾトリアゾール）、Ｏｘｙｍａ（エチル（ヒドロキシイミノ）シアノアセタート）を加えてもよい。

反応温度は、縮合剤、塩基、溶媒などにより異なるが、通常、-20℃から還流温度である。好ましくは、10℃から30℃である。

反応時間は、縮合剤、塩基、溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、15分間から72時間、好ましくは1時間から24時間である。

化合物（１３）から化合物（１４）への変換は、前述のＡ法と同様に行える。

工程Ｂ−４は、保護基であるＲ¹を除去する工程で、工程Ａ−３と同様に行うことができる。

工程Ｂ−５は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ａ−４と同様に行うことができる。

工程Ｂ−６は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ａ−４と同様に行うことができる。

工程Ｂ−７は、化合物（１６）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（１１）と化合物（１５）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｂ−８は、化合物（１７）を製造する工程であり、保護基であるR^６を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｂ−９は、化合物（１８）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（１２）と化合物（１７）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

化合物（１８）から化合物（１９）への変換は、前述のＡ法と同様に行える。

工程Ｂ−１０は、保護基であるＲ¹を除去する工程で、工程Ａ−３と同様に行うことができる。

工程Ｂ−１１は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ａ−４と同様に行うことができる。

工程Ｂ−１２は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ａ−５と同様に行うことができる。

Ｃ法
Ｃ法は、化合物（２６）又は分岐型の化合物（３０）を合成する製造するための方法である。化合物（２３）の二級水酸基で逆の立体配置のものを用いると、化合物（２６）あるいは分岐型の化合物（３０）において、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴が結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示し、Ｒ^８は水酸基の一般的な保護基であり、Ｒ^７及びＲ^９は、同一又は異なって、アミノ基の一般的な保護基である。

Ｃ−１工程は、化合物（２１）を製造する工程であり、不活性溶媒中、酸の存在下、化合物（２０）と化合物（４）を反応ささせ、グリコシド結合を生成する。前述の工程Ａ−２と同様に行うことができる。

工程Ｃ−２は、化合物（２２）を製造する工程であり、化合物（２１）のアミノ基の保護基であるR^７を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｃ−３は、化合物（２４）を製造する工程であり、不活性溶媒中、活性化剤、塩基の存在下、化合物（２３）を活性エステルへと変換後、化合物（２２）と反応させ、カルバメート化する。

上記反応に使用される不活性溶媒としては、例えば、炭化水素類、芳香族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、エーテル類などが挙げられ、好ましくは、ジクロロメタンである。

上記反応に使用される活性化剤としては、活性化エステルを形成するものであれば特に限定されないが、例えば、炭酸ビス（ペンタフルオロフェニル）、炭酸ビス（４−ニトロフェニル）、４−ニトロフェニルクロロホルメートなどが挙げられる。、好ましくは、４−ニトロフェニルクロロホルメートである。

上記反応に使用される塩基としては、例えば、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、4-ジメチルアミノピリジンなどが挙げられ、好ましくは、活性エステルを調製する際はピリジンを用い、続いてアミンと反応させる際はN,N-ジイソプロピルエチルアミンを追加する。

反応温度は、活性化剤、塩基、不活性溶媒などにより異なるが、通常、-20℃から還流温度である。好ましくは、10℃から30℃である。

反応時間は、活性化剤、塩基、不活性溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、15分間から24時間、好ましくは1時間から4時間である。

工程Ｃ−４は、化合物（２５）を製造する工程であり、化合物（２４）の水酸基の保護基であるＲ^８を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

化合物（２５）から化合物（２６）への変換は、前述のＡ法と同様に行える。

工程Ｃ−５は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ａ−４と同様に行うことができる。

工程Ｃ−６は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ａ−５と同様に行うことができる。

工程Ｃ−７は、化合物（２８）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（２２）と化合物（２７）をアミド縮合する。前述のＢ法工程Ｂ−３と同様に行える。

化合物（２８）から化合物（２９）への変換は、前述の方法と同様に行える。

工程Ｃ−８は、化合物（２８）のアミノ基の保護基であるＲ^９を除去する工程であり、工程Ｃ−２と同様に行える。

工程Ｃ−９は、カルバメート化する工程であり、工程Ｃ−３と同様に行える。

工程Ｃ−１０は、保護基であるＲ^８を除去する工程で、工程Ｃ−４と同様に行える。

化合物（２９）から化合物（３０）への変換は、前述のＡ法と同様に行える。

工程Ｃ−１１は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ａ−４と同様に行うことができる。

工程Ｃ−１２は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ａ−５と同様に行うことができる。

Ｄ法
Ｄ法は、化合物（３５）を製造するための方法である。２回あるアミド縮合の順序を変えたり、各化合物の保護基の状態によって、適宜工程を選ぶことができる。化合物（２３）の二級水酸基で逆の立体配置のものを用いると、化合物（３５）において、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴が結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ^８、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示し、Ｒ^１０はアミノ基の一般的な保護基である。

工程Ｄ−１は、化合物（３２）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（３１）と化合物（１２）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｄ−２は、化合物（３３）を製造する工程であり、化合物（３２）のアミノ基の保護基であるＲ^１０を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｄ−３は、化合物（３４）を製造する工程であり、不活性溶媒中、活性化剤、塩基の存在下、化合物（２３）を活性エステルへと変換後、化合物（３３）と反応させ、カルバメート化する。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。

化合物（３４）から化合物（３５）への変換は、前述のＣ法と同様に行える。

工程Ｄ−４は、保護基であるＲ^８を除去する工程で、工程Ｃ−４と同様に行うことができる。

工程Ｄ−５は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ｃ−５と同様に行うことができる。

工程Ｄ−６は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ｃ−６と同様に行うことができる。

工程Ｄ−７は、化合物(３６)を製造する工程であり、不活性溶媒中、活性化剤、塩基の存在下、化合物（２３）を活性エステルへと変換後、化合物（３１）と反応させ、カルバメート化する。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。

工程Ｄ−８は、化合物（３６）のアミノ基の保護基であるＲ^１０のみを除去して化合物（３７）を製造するか、又は、水酸基の保護基であるＲ^８とアミノ基の保護基であるＲ^１０を同時に除去して化合物（３８）を製造する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｄ−９は、化合物（３４）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（３７）と化合物（１２）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｄ−１０は、化合物（３９）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（３８）と化合物（１２）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

化合物（３９）から化合物（３５）への変換は、工程Ｄ−５及びＤ−６により行うことができる。

Ｅ法
Ｅ法は、Ｄ法で使用した化合物（３１）や合成した中間体（３８）を利用して、分岐型の化合物（４４）を製造するための方法である。２回あるアミド縮合の順序を変えたり、各化合物の保護基の状態によって、適宜工程を選ぶことができる。化合物（２３）の二級水酸基で逆の立体配置のものを用いると、化合物（４４）において、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴が結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ^６、Ｒ^８、Ｒ^１０、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。

工程Ｅ−１は、化合物（４０）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（３１）と化合物（１５）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｅ−２は、化合物（４０）のアミノ基の保護基であるＲ^６のみを除去して化合物(４１)を製造する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｅ−３は、化合物（４２）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（４１）と化合物（１２）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

化合物（４２）から化合物（４３）への変換は、前述のＤ法と同様に行える。

工程Ｅ−４は、化合物（４２）のアミノ基の保護基であるＲ^１０を除去する工程で、前述の工程Ｄ−２と同様に行うことができる。

工程Ｅ−５は、カルバメート化する工程である。前述のＤ−３と同様に行うことができる。

化合物（４３）から化合物（４４）への変換は、前述のＣ法と同様に行える。

工程Ｅ−６は、化合物（４３）の水酸基の保護基であるＲ^８を除去する工程で、工程Ｃ−４と同様に行うことができる。

工程Ｅ−７は、一級水酸基にＲ²を導入する工程で、工程Ｃ−５と同様に行うことができる。

工程Ｅ−８は、二級水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する工程で、工程Ｃ−６と同様に行うことができる。

工程Ｅ−９は、化合物（４５）を製造する工程であり、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（３８）と化合物（１５）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

化合物（４５）から化合物（４６）への変換は、前述の工程Ｅ−２及びＥ−３と同様に行える。

工程Ｅ−１０は、化合物（４５）のアミノ基の保護基であるＲ^６を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｅ−１１は、化合物（１５）をアミド縮合で導入する工程である。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

化合物（４６）から化合物（４４）への変換は、工程Ｅ−７及びＥ−８により行うことができる。

Ｆ法
Ｆ法は、Ａ法で合成した中間体（３）を利用して、分岐型の化合物（４９）を製造するための方法である。化合物（３）の二級水酸基で逆の立体配置のものを用いると、化合物（４９）において、ＧａｌＮＡｃが結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ¹、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示す。

工程Ｆ−１は、化合物（４７）を製造する工程であり、不活性溶媒中、酸の存在下、化合物（３）と化合物（４）を反応させ、グリコシド結合を２つ生成する。前述の工程Ａ−２と同様に行うことができる。

工程Ｆ−２は、化合物（４８）を製造する工程であり、化合物（４７）の水酸基の保護基であるＲ¹を除去する。前述の工程Ａ−３と同様に行うことができる。

工程Ｆ−３は、化合物（４９）を製造する工程であり、水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する。前述の工程Ａ−５と同様に行うことができる。

Ｇ法
Ｇ法は、Ｃ法で使用した中間体（２２）を利用して、分岐型の化合物（５５）を製造するための方法である。化合物（５２）あるいは化合物（５６）の二級水酸基で逆の立体配置のものを用いると、化合物（５５）において、ＧａｌＮＡｃが結合した二級水酸基の立体配置も逆になる。

式中Ｒ^３、Ｒ^４、Ｘ、ｎ及びｍは、前記と同意義を示し、ｒは、０又は１を示し、Ｒ¹¹はアミノ基の一般的な保護基であり、Ｒ¹²及びＲ¹³は水酸基の一般的な保護基である。

工程Ｇ−１は、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物（２２）と化合物（５０）をアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｇ−２は、保護基であるＲ^１１を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｇ−３は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。ただし、ｒ＝０のときは化合物（２２）をカルバメート化し、ｒ＝１のときは化合物（５２）をカルバメート化する。

工程Ｇ−４は、保護基であるＲ^１２を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｇ−５は、化合物（５５）を製造する工程であり、水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する。前述の工程Ａ−５と同様に行うことができる。

工程Ｇ−６は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。ただし、ｒ＝０のときは化合物（２２）をカルバメート化し、ｒ＝１のときは化合物（５２）をカルバメート化する。

工程Ｇ−７は、保護基であるＲ^１３を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｇ−８は、カルバメート化する工程である。前述のＣ−３と同様に行うことができる。

Ｈ法
Ｈ法は、Ｃ法で使用した中間体（２２）あるいはG法で使用した中間体（５１）を利用して、分岐型の化合物（６１）を製造するための方法である。化合物（５２）あるいは化合物（５６）の立体配置は限定しない。

式中Ｒ³、Ｒ⁴、Ｘ、ｎ、ｍ、ｒ、Ｒ¹²及びＲ¹³は、前記と同意義を示す。

工程Ｈ−１は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。ただし、ｒ＝０のときは化合物（２２）をカルバメート化し、ｒ＝１のときは化合物（５１）をカルバメート化する。

工程Ｈ−２は、保護基であるＲ^１３を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｈ−３は、化合物（６１）を製造する工程であり、水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する。前述の工程Ａ−５と同様に行うことができる。

工程Ｈ−４は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。ただし、ｒ＝０のときは化合物（２２）をカルバメート化し、ｒ＝１のときは化合物（５２）をカルバメート化する。

工程Ｈ−５は、保護基であるＲ^１２を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｈ−６は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。

I法
I法は、分岐型の化合物（７３）、及び化合物（７４）を製造するための方法である。例えば、化合物（７０）を用いることで、GalNAc部分の6位水酸基の保護基を適宜選択できる。Ｒ¹⁴がアセチル基の場合、化合物（７０）として、C法で合成できる化合物（２２）を使用する。Ｒ¹⁴が4,4'-ジメトキシトリチル基の場合、化合物（７０）として、例えば後述する参考例に従って合成できる化合物を使用する。

（式中Ｒ¹²及びＲ¹³は水酸基の一般的な保護基であるが、望ましくはベンジル基である。式中Ｒ¹⁴は水酸基の一般的な保護基であるが、望ましくはアセチル基、4,4'-ジメトキシトリチル基である。式中Ｒ¹⁵はカルボニル基の一般的な保護基であるが、望ましくはベンジル基である。式中、−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴は、［Ｒ³及びＲ⁴は、同一又は異なって、水酸基、保護された水酸基、メルカプト基、保護されたメルカプト基、アミノ基、炭素数１乃至４個のアルコキシ基、炭素数１乃至４個のアルキルチオ基、炭素数１乃至５個のシアノアルコキシ基又は炭素数１乃至４個のアルキル基で置換されたアミノ基を示す]を示す。式中Xは、炭素あるいは酸素である。式中ｎは１〜１５の整数であり、ｍは０〜５の整数である。ただし、ｎが１であるとき、ｍは０〜５の整数であり、ｎが２〜１５の整数であるとき、ｍは０である。式中rは独立して、０か１である。式中vは、1〜7である。

工程Ｉ−１は、カルバメート化する工程である。前述の工程Ｃ−３と同様に行うことができる。

工程Ｉ−２は、保護基であるＲ^１２あるいはＲ^１３とＲ^１５を除去する。保護基の除去はその種類によって異なるが、一般に有機合成化学の技術において周知の方法、例えば、T.H.Greene, P.G.Wuts, Protective Groups in organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.などに記載された方法のような常法に従って行うことができる。

工程Ｉ−３は、不活性溶媒中、縮合剤、塩基の存在下、化合物(２２)とアミド縮合する。前述の工程Ｂ−３と同様に行うことができる。

工程Ｉ−４は、化合物（７３）あるいは化合物（７４）を製造する工程であり、水酸基に−Ｐ（Ｒ³）Ｒ⁴を導入する。前述の工程Ａ−５と同様に行うことができる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）は、医薬として、特に、糖原病Ｉａ型の治療に用いることができる。治療には予防および事後治療のいずれも含まれる。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）は、薬理上許容される塩の形態で用いてもよい。「薬理上許容される塩」とは、オリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）の塩をいい、そのような塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などの金属塩；アンモニウム塩のような無機塩、ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機塩などのアミン塩；弗化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩などの無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリールスルホン酸塩、酢酸塩、りんご酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩などの有機酸塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩などを挙げることができ、好ましくは、アルカリ金属塩であり、より好ましくは、ナトリウム塩である。これらの塩は、公知の方法で製造することができる。

また、オリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）及びその薬理上許容される塩は、溶媒和物（例えば、水和物）としても存在することがあり、そのような溶媒和物であってもよい。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を糖原病Ｉａの治療に使用する場合には、それ自体あるいは適宜の薬理上許容される賦形剤、希釈剤などと混合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤若しくはシロップ剤などにより経口的に、あるいは、注射剤、坐剤、貼付剤若しくは外用剤などにより非経口的に投与することができる。

これらの製剤は、賦形剤（例えば、乳糖、白糖、葡萄糖、マンニトール、ソルビトールのような糖誘導体；トウモロコシデンプン、バイレショデンプン、α澱粉、デキストリンのような澱粉誘導体；結晶セルロースのようなセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルランのような有機系賦形剤；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、珪酸カルシウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウムのような珪酸塩誘導体；燐酸水素カルシウムにような燐酸塩；炭酸カルシウムのような炭酸塩；硫酸カルシウムのような硫酸塩などの無機系賦形剤など）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金属塩；タルク；コロイドシリカ；ビーズワックス、ゲイ蝋のようなワックス類；硼酸；アジピン酸；硫酸ナトリウムのような硫酸塩；グリコール；フマル酸；安息香酸ナトリウム；ＤＬロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムのようなラウリル硫酸塩：無水珪酸、珪酸水和物のような珪酸類；上記澱粉誘導体など）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、前記賦形剤と同様の化合物など）、崩壊剤（例えば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体；カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾されたデンプン・セルロース類など）、乳化剤（例えば、ベントナイト、ビーガムのようなコロイド性粘土；水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウムのような金属水酸化物；ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウムのような陰イオン界面活性剤；塩化ベンザルコニウムのような陽イオン界面活性剤；ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルのような非イオン界面活性剤など）、安定剤（メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；ソルビン酸など）、矯味矯臭剤（例えば、通常使用される甘味料、酸味料、香料など）、希釈剤などの添加剤を用いて周知の方法で製造される。

本発明の治療薬は、０．１〜２５０μmoles／mLのオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）を含有するとよく、好ましくは、１〜５０μmoles／mLのオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）、その薬理上許容される塩又は溶媒和物、0.02〜10％w/vの炭水化物又は多価アルコール及び0.01〜0.4％w/vの薬理上許容される界面活性剤を含有させておいてもよい。

上記炭水化物としては、単糖類又は二糖類が特に好ましい。これら炭水化物及び多価アルコールの例としては、グルコース、ガラクトース、マンノース、ラクトース、マルトース、マンニトール及びソルビトールが挙げられる。これらは、単独で用いても、併用してもよい。

また、本発明における界面活性剤の好ましい例としては、ポリオキシエチレンソルビタンモノ〜トリ−エステル、アルキルフェニルポリオキシエチレン、ナトリウムタウロコラート、ナトリウムコラート、及び多価アルコールエステルが挙げられる。このうち特に好ましいのは、ポリオキシエチレンソルビタンモノ〜トリ−エステルであり、ここにおいてエステルとして特に好ましいのは、オレエート、ラウレート、ステアレート及びパルミテートである。これらは単独で用いても、併用してもよい。

また、本発明の治療薬は、更に好ましくは、0.03〜0.09Ｍの薬理上許容される中性塩、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム及び／又は塩化カルシウムを含有させておいてもよい。

また、本発明の治療薬は、更に好ましくは、0.002〜0.05Ｍの薬理上許容される緩衝剤を含有することができる。好ましい緩衝剤の例としては、クエン酸ナトリウム、ナトリウムグリシネート、リン酸ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンが挙げられる。これらの緩衝剤は、単独で用いても、併用してもよい。

さらに、上記の治療薬は、溶液状態で供給してもよい。しかし、ある期間保存する必要がある場合等のために、オリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）を安定化して治療効果の低下を防止する目的で通常は凍結乾燥しておくことが好ましく、その場合は用時に溶解液（注射用蒸留水など）で再構成（reconstruction）して、即ち投与される液体状態にして用いればよい。従って、本発明の治療薬は、各成分が所定の濃度範囲になるよう溶解液で再構成して使用するための、凍結乾燥された状態のものも包含する。凍結乾燥物の溶解性を促進する目的で、アルブミン、グリシン等のアミノ酸を更に含有させておいてもよい。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）は、国際公開第２０１５／００５２５３に記載されている脂質などを用いて封入し、国際公開第２０１５／００５２５３などに記載されているような核酸脂質ナノ粒子あるいはリポソームとして投与してもよい。

本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）、その薬理上許容される塩又は溶媒和物をヒトに投与する場合には、例えば、成人１日あたり約０．０１〜１００mg/kg（体重）、好ましくは０．１〜２０mg/kg（体重）の投与量で、１回または数回に分けて皮下注射、点滴静脈注射、または、静脈注射するとよいが、その投与量や投与回数は、疾患の種類、症状、年齢、投与方法などにより適宜変更しうる。

糖原病Ｉａ型患者への本発明のオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）、その薬理上許容される塩又は溶媒和物の投与は、例えば、以下のようにして行うことができる。すなわち、オリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を当業者に周知の方法で製造し、これを常法により滅菌処理し、例えば１２５mg/mLの注射用溶液を調製する。この溶液を、患者静脈内にオリゴヌクレオチド（アンチセンスオリゴヌクレオチド）の投与量が体重１kg当たり例えば１０mgとなるように、例えば輸液の形で点滴投与する。投与は、例えば１週間の間隔で行い、その後も、血糖値、血中乳酸値、CTによる肝腫大・肝グリコーゲン値などにより治療効果の確認をしながら、適宜この治療を繰り返す。

以下、本発明を実施例によって具体的に説明する。なお、これらの実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を限定するものではない。

（実施例１〜１１）
HO-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2-^sＡ^m1s-Ｇ^e2ｔ-H (21e_002)（配列番号１）
核酸自動合成機（「ABI 394 DNA/RNA Synthesizer」Applied Biosystems製）を用い、ホスホロアミダイト法（Nucleic Acids Research, 12, 4539 (1984)）を用いて合成を行った。試薬としては、アクチベーター溶液-3（0.25 mol/L 5-ベンジルチオ-1H-テトラゾール・アセトニトリル溶液、和光純薬工業製、product No. 013-20011）、CAP A for AKTA（1-メチルイミダゾール・アセトニトリル溶液、Sigma-Aldrich製、product No. L040050）、Cap B1 for AKTA（無水酢酸・アセトニトリル溶液、Sigma-Aldrich製、product No. L050050）、Cap B2 for AKTA（ピリジン・アセトニトリル溶液、Sigma-Aldrich製、product No. L050150）、DCA Deblock（ジクロロ酢酸・トルエン溶液、Sigma-Aldrich製、product No. L023050）を用いた。ホスホロチオエート結合を形成するためのチオ化試薬として、0.2Mになるようにフェニルアセチルジスルフィド（CARBOSYNTH製、product No. FP07495）を、アセトニトリル（脱水、関東化学製、product No. 01837-05）、ピリジン（脱水、関東化学製、product No. 11339-05）1:1(v/v)溶液を用いて溶解して用いた。アミダイト試薬としては、2'-O-Meヌクレオシドのホスホロアミダイト（アデノシン体product No. ANP-5751, シチジン体product No. ANP-5752,グアノシン体product No. ANP-5753, ウリジン体product No. ANP-5754）はChemGenes製のものを用いた。非天然型のホスホロアミダイトは特開２０００−２９７０９７の実施例14（5'-O-ジメトキシトリチル-2'-O,4'-C-エチレン-6-N-ベンゾイルアデノシン-3'-O-(2-シアノエチル N,N-ジイソプロピル)ホスホロアミダイト）、実施例27（5'-O-ジメトキシトリチル-2'-O,4'-C-エチレン-2-N-イソブチリルグアノシン-3'-O-(2-シアノエチル N,N-ジイソプロピル)ホスホロアミダイト）、実施例22（5'-O-ジメトキシトリチル-2'-O,4'-C-エチレン-4-N-ベンゾイル-5-メチルシチジン-3'-O-(2-シアノエチル N,N-ジイソプロピル)ホスホロアミダイト）、実施例9（5'-O-ジメトキシトリチル-2'-O,4'-C-エチレン-5-メチルウリジン-3'-O-(2-シアノエチル N,N-ジイソプロピル)ホスホロアミダイト）の化合物を用いた。固相担体としてGlen Unysupport 0.1μmol（GlenResearch製）を用い、表記の化合物を合成した。プログラムは、核酸自動合成機に付属している0.2μmolスケール用を用い、但し、アミダイト体の縮合に要する時間は、600秒とし、チオ化に要する時間は、150秒とした。

目的配列を有する保護されたオリゴヌクレオチド類縁体を300μLの濃アンモニア水で処理することによってオリゴマーを支持体から切り出すとともに、リン原子上の保護基シアノエチル基と核酸塩基上の保護基をはずした。Clarity QSP（Phenomenex製）を用いて、添付されているプロトコールに従って精製した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit（G6PC）, transcript variant 1, mRNA（NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3）のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5’末端から92番目から112番目に相補的な配列である。

実施例2乃至11の化合物も実施例1と同様に合成した。実施例1のデータ、及び、実施例2乃至11について表１に記載する。

表１
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
1 21e_002 AgaTaaAauCcgAugGcgAaG 112 92 7544.86 １
2 21e_003 TaaAauCcgAugGcgAagCuG 109 89 7512.84 ２
3 21e_004 AauCcgAugGcgAagCugAaA 106 86 7520.89 ３
4 21e_005 CcgAugGcgAagCugAaaAgG 103 83 7575.87 ４
5 21e_006 AugGcgAagCugAaaAggAaG 100 80 7610.88 ５
6 21e_007 GcgAagCugAaaAggAagAaG 97 77 7633.90 ６
7 21e_008 AagCugAaaAggAagAagGuA 94 74 7618.89 ７
8 21e_009 CugAaaAggAagAagGuaAuG 91 71 7595.86 ８
9 21e_010 AaaAggAagAagGuaAugAgA 88 68 7628.89 ９
10 21e_011 AggAagAagGuaAugAgaAaA 85 65 7628.88 １０
11 21e_012 AagAagGuaAugAgaAaaTaT 82 62 7578.93 １１
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例１２〜２２）
HO-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-ＡＧ^m1ｔ-H (21m_002)（配列番号１）
核酸自動合成機（BioAutomation製MerMade 192X）を用い、実施例１と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から112番目に相補的な配列である。

実施例13乃至22の化合物も実施例12と同様に合成した。実施例12のデータ、及び、実施例13乃至22について表２に記載する。

表２
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
12 21m_002 agauaaaauccgauggcgaag 112 92 7416.86 １
13 21m_003 uaaaauccgauggcgaagcug 109 89 7369.80 ２
14 21m_004 aauccgauggcgaagcugaaa 106 86 7368.81 ３
15 21m_005 ccgauggcgaagcugaaaagg 103 83 7423.81 ４
16 21m_006 auggcgaagcugaaaaggaag 100 80 7475.89 ５
17 21m_007 gcgaagcugaaaaggaagaag 97 77 7494.86 ６
18 21m_008 aagcugaaaaggaagaaggua 94 74 7483.90 ７
19 21m_009 cugaaaaggaagaagguaaug 91 71 7456.82 ８
20 21m_010 aaaaggaagaagguaaugaga 88 68 7503.86 ９
21 21m_011 aggaagaagguaaugagaaaa 85 65 7527.88 １０
22 21m_012 aagaagguaaugagaaaauau 82 62 7453.87 １１
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において小文字は2'-OMe-RNAを示す。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例２３〜５０）
HO-Ｇ^e2s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2ｔ-H (21e_015)（配列番号１２）
実施例１２と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から91番目から111番目に相補的な配列である。

実施例24乃至50の化合物も実施例23と同様に合成した。実施例23のデータ、及び、実施例24乃至50について表３に記載する。

表３
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
23 21e_015 GauAaaAucCgaTggCgaAgC 111 91 7544.88 １２
24 21e_016 AuaAaaTccGauGgcGaaGcT 110 90 7477.80 １３
25 21e_017 AaaAucCgaTggCgaAgcTgA 108 88 7544.87 １４
26 21e_018 AaaTccGauGgcGaaGcuGaA 107 87 7506.86 １５
27 21e_019 AucCgaTggCgaAgcTgaAaA 105 85 7544.86 １６
28 21e_020 TccGauGgcGaaGcuGaaAaG 104 84 7518.81 １７
29 21e_021 CgaTggCgaAgcTgaAaaGgA 102 82 7623.82 １８
30 21e_022 GauGgcGaaGcuGaaAagGaA 101 81 7591.85 １９
31 21e_002m01 Agauaaaauccgauggcgaag 112 92 7432.84 １
32 21e_002m02 agauaaaauccgauggcgaaG 112 92 7432.84 １
33 21e_002m03 AgauaaaauccgauggcgaaG 112 92 7440.85 １
34 21e_002m04 AgauaaaauccgAuggcgaaG 112 92 7452.86 １
35 21e_002m05 AgauaaaauCcgauggcgaaG 112 92 7466.86 １
36 21e_002m06 AgaTaaaauccgauggcgAaG 112 92 7482.86 １
37 21e_002m07 AgauaaaauCcgAuggcgaaG 112 92 7478.83 １
38 21e_002m08 AgauaaaauCcgaugGcgaaG 112 92 7478.84 １
39 21e_002m09 AgaTaaAauccgAuggcgaaG 112 92 7490.83 １
40 21e_002m10 AgauaaAauccgaugGcgAaG 112 92 7476.81 １
41 21e_002m11 AgauaaAauccgAugGcgaaG 112 92 7481.84 １
42 21e_002m12 AgauaaAauCcgaugGcgaaG 112 92 7490.85 １
43 21e_002m13 AgaTaaAauccgAuggcgAaG 112 92 7502.82 １
44 21e_002m14 AgaTaaaauCcgAuggcgAaG 112 92 7516.85 １
45 21e_002m15 AgauaaAauCcgAugGcgaaG 112 92 7502.82 １
46 21e_002m16 AgaTaaAauCcgAuggcgAaG 112 92 7533.87 １
47 21e_002m17 AgaTaaaauCcgAugGcgAaG 112 92 7528.84 １
48 21e_002m18 AgaTaAaaTcCgaTgGcgAaG 112 92 7584.91 １
49 21e_002m19 AgAuaAaAuCcGaTgGcgAaG 112 92 7564.84 １
50 21e_002m20 AgAuAaAaTcCgAuGgCgAaG 112 92 7594.88 １
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例５１〜６９）
HO-Ｕ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H (18e_005)（配列番号２０）
実施例１２と同様に合成を行った。目的配列を有する保護されたオリゴヌクレオチド類縁体を450μLの濃アンモニア水で処理することによってオリゴマーを支持体から切り出すとともに、リン原子上の保護基シアノエチル基と核酸塩基上の保護基をはずした。オリゴマーの混合溶液を、Clarity QSP DNA Loading Buffer（Phenomenex製）300μLを混合し、Clarity SPE 96 well plate（Phenomenex製）上にチャージした。Clarity QSP DNA Loading Buffer:水=1:1溶液1mL、水3mL、3%ジクロロ酢酸(DCA)水溶液3mL、水6mLの順に添加した後、20mM Tris水溶液:アセトニトリル=9:1溶液にて抽出される成分を集めた。溶媒留去後、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から91番目から109番目に相補的な配列である。

実施例52乃至69の化合物も実施例51と同様に合成した。実施例51のデータ、及び、実施例52乃至69について表４に記載する。

表４
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
51 18e_005 uAaaAucCgaTggCgaAg 109 92 6437.79 ２０
52 18e_006 aAaaTccGauGgcGaaGc 108 91 6408.78 ２１
53 18e_007 aAauCcgAugGcgAagCu 107 90 6399.76 ２２
54 18e_008 aAucCgaTggCgaAgcTg 106 89 6443.80 ２３
55 18e_009 aTccGauGgcGaaGcuGa 105 88 6401.74 ２４
56 18e_010 uCcgAugGcgAagCugAa 104 87 6415.75 ２５
57 18e_011 cCgaTggCgaAgcTgaAa 103 86 6466.81 ２６
58 18e_012 cGauGgcGaaGcuGaaAa 102 85 6434.76 ２７
59 18e_013 gAugGcgAagCugAaaAg 101 84 6488.79 ２８
60 18e_014 aTggCgaAgcTgaAaaGg 100 83 6516.82 ２９
61 18e_015 uGgcGaaGcuGaaAagGa 99 82 6474.78 ３０
62 18e_016 gGcgAagCugAaaAggAa 98 81 6511.81 ３１
63 18e_017 gCgaAgcTgaAaaGgaAg 97 80 6525.84 ３２
64 18e_022 TaaaauCCgaTggCgaag 109 92 6453.82 ２０
65 18e_023 aaaauCCgaTggCgaagC 108 91 6452.84 ２１
66 18e_024 aaauCCgaTggCgaagCT 107 90 6455.83 ２２
67 18e_025 aauCCgaTggCgaagCTg 106 89 6471.82 ２３
68 18e_026 auCCgaTggCgaagCTga 105 88 6471.83 ２４
69 18e_031 TaAaaTccgauGgcGaag 109 92 6411.77 ２０
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例７０〜８２）
HO-Ｕ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1ｔ-H (18m_005)（配列番号２０）
核酸自動合成機（BioAutomation製MerMade 192X）を用い、実施例１２と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から109番目に相補的な配列である。

実施例71乃至82の化合物も実施例70と同様に合成した。実施例70のデータ、及び、実施例71乃至82について表５に記載する。

表５
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
70 18m_005 uaaaauccgauggcgaag 109 92 6323.74 ２０
71 18m_006 aaaauccgauggcgaagc 108 91 6322.76 ２１
72 18m_007 aaauccgauggcgaagcu 107 90 6299.74 ２２
73 18m_008 aauccgauggcgaagcug 106 89 6315.73 ２３
74 18m_009 auccgauggcgaagcuga 105 88 6315.73 ２４
75 18m_010 uccgauggcgaagcugaa 104 87 6315.73 ２５
76 18m_011 ccgauggcgaagcugaaa 103 86 6338.75 ２６
77 18m_012 cgauggcgaagcugaaaa 102 85 6362.76 ２７
78 18m_013 gauggcgaagcugaaaag 101 84 6402.77 ２８
79 18m_014 auggcgaagcugaaaagg 100 83 6402.77 ２９
80 18m_015 uggcgaagcugaaaagga 99 82 6402.77 ３０
81 18m_016 ggcgaagcugaaaaggaa 98 81 6425.79 ３１
82 18m_017 gcgaagcugaaaaggaag 97 80 6425.80 ３２
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において小文字は2'-OMe-RNAを示す。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（参考例１）
HO-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2-^sＡ^m1s-Ｇ^e2ｔ-H (21e_001)（配列番号３３）
実施例１と同様に合成、精製し、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から95番目から115番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7520.85）。

（参考例２〜３）
HO-Ｇ^e2s-Ｃ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^e2s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2ｔ-H (21e_013)（配列番号３４）
実施例１２と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から94番目から114番目に相補的な配列である。

参考例３の化合物も参考例２と同様に合成した。参考例２のデータ、及び、参考例３について表６に記載する。

表６
---------------------------------------------------------------------
参考例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号

---------------------------------------------------------------------
2 21e_013 GcaGauAaaAucCgaTggCgA 114 94 7530.86 ３４
3 21e_014 CagAuaAaaTccGauGgcGaA 113 93 7505.88 ３５
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（参考例４〜１５）
HO-Ｃ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^e2s-Ｃ^m1ｔ-H (18e_001)（配列番号３６）
実施例５１と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から96番目から113番目に相補的な配列である。

参考例5乃至15の化合物も参考例4と同様に合成した。参考例4のデータ、及び、参考例5乃至15について表７に記載する。

表７
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参考例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
4 18e_001 cAgaTaaAauCcgAugGc 113 96 6383.77 ３６
5 18e_002 aGauAaaAucCgaTggCg 112 95 6437.79 ３７
6 18e_003 gAuaAaaTccGauGgcGa 111 94 6409.76 ３８
7 18e_004 aTaaAauCcgAugGcgAa 110 93 6407.78 ３９
8 18e_018 CagaTaaaauCCgaTggC 113 96 6439.82 ３６
9 18e_019 agaTaaaauCCgaTggCg 112 95 6453.82 ３７
10 18e_020 gaTaaaauCCgaTggCga 111 94 6453.82 ３８
11 18e_021 aTaaaauCCgaTggCgaa 110 93 6437.83 ３９
12 18e_027 CaGauAaaaucCgaTggc 113 96 6385.78 ３６
13 18e_028 AgAuaAaauccGauGgcg 112 95 6383.74 ３７
14 18e_029 GaTaaAauccgAugGcga 111 94 6397.76 ３８
15 18e_030 AuAaaAuccgaTggCgaa 110 93 6395.78 ３９
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（参考例１６〜２０）
HO-Ｃ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1ｔ-H (18m_001)（配列番号３６）
実施例７０と同様に合成および精製を行い、目的化合物を得た。

参考例17乃至20の化合物も参考例16と同様に合成した。参考例16のデータ、及び、参考例17乃至20について表８に記載する。

表８
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参考例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
16 18m_001 cagauaaaauccgauggc 113 96 6283.74 ３６
17 18m_002 agauaaaauccgauggcg 112 95 6323.74 ３７
18 18m_003 gauaaaauccgauggcga 111 94 6323.75 ３８
19 18m_004 auaaaauccgauggcgaa 110 93 6307.75 ３９
20 21m_001 agcagauaaaauccgauggcg 115 95 7396.88 ３３
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において小文字は2'-OMe-RNAを示す。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例８３〜８６）
HO-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H (15e_001)（配列番号４０）
AKTA Oligopilotを用いて、固相担体としてPrimer Support 5G Unylinker 350, 100μmol（GE Healthcare製）を用い、実施例１と同様に合成を行った。目的配列を有する保護されたオリゴヌクレオチド類縁体を25mLの濃アンモニア水で処理することによってオリゴマーを支持体から切り出すとともに、リン原子上の保護基シアノエチル基と核酸塩基上の保護基をはずした。オリゴマーの混合溶液を、phenomenex Clarity QSP 5gを用いて、脱保護、精製を行い、溶媒留去後、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。

実施例84乃至86の化合物も実施例83と同様に合成した。実施例83のデータ、及び、実施例84乃至86について表９に記載する。

表９
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実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
83 15e_001 aAucCgaTggCgaAg 106 92 5371.68 ４０
84 15e_002 cCgaTggCgaAgcTg 103 89 5377.68 ４１
85 15ed_001 aAtcCgaTggCgaAg 106 92 5099.59 ４０
86 15ed_002 cCgaTggCgaAgcTg 103 89 5105.60 ４１
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNA、小文字に下線のものはDNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例８７〜９０）
HO-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H (15e_001.1)（配列番号４０）
実施例１と同様に合成を行った。但し、固相担体としてPrimer Support 5G Unylinker 350, 10μmol（GE Healthcare製）を用い、10μmolのプログラムを用いた。実施例８３と同様に精製を行い、目的化合物を得た。

実施例88乃至90の化合物も実施例87と同様に合成した。実施例87のデータ、及び、実施例88乃至90について表１０に記載する。

表１０
---------------------------------------------------------------------
実施例配列名称配列 (5'-3') 開始終了分子量配列番号
---------------------------------------------------------------------
87 15e_001.1 aAuCCgATggCgaAg 106 92 5409.71 ４０
88 15e_001.2 aAucCgATggCgAAg 106 92 5395.69 ４０
89 15e_001.3 aAuCCgaTggCgAAg 106 92 5409.71 ４０
90 15e_001.4 aAuCCgATggCgAAg 106 92 5421.70 ４０
---------------------------------------------------------------------
表中の配列において大文字は2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸、小文字は2'-OMe-RNAを示す。2’-O,4’-C-エチレン架橋核酸のＣは、5-メチルシトシンである。開始および終了については、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から番号を示す。化合物は負イオンESI質量分析により同定し、表中に実測値を示す。

（実施例９１）
HO-Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ａ^ｐ−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４２）
実施例１と同様に合成を行った。但し、固相担体としてPrimer Support 5G Unylinker 350, 10μmol（GE Healthcare製）を用い、10μmolのプログラムを用いた。X部分は、文献（Bioorg. Med. Chem. (2016) 24, 26-32）記載のGalNAc phosphoramidite unit 1を用いて3回縮合した。実施例８３と同様に精製を行い、目的化合物を得た。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から107番目に相補的な配列を有している。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7131.24）。

（実施例９２）
HO-Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例９１と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6818.18）。

（実施例９３）
HO-Ｘ−Ｘ−Ｘ−T^ｐ−C^ｐ−Ａ^ｐ−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４３）
実施例９１と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から107番目に相補的な配列を有している。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7738.35）。

（実施例９４）
HO-Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ａ^ｐ−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^e2s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^e2s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４２）
実施例９１と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から107番目に相補的な配列を有している。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7141.22）。

（実施例９５）
HO-Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ａ^ｐ−Ａ^e2s-Ａ^m1s-T^e2s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ｇ^e2ｔ-H（配列番号４２）
実施例９１と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から107番目に相補的な配列を有している。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7167.24）。

（参考例２１）
(２１Ａ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ａ）の合成

文献既知化合物のN-ベンジルオキシカルボニル-1-ヒドロキシペンチル-5-アミン(J. Am. Chem. Soc.,2006,128,4058-4073.)(8.05g, 33.9mmol)と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)(12.0g, 30.8mmol)とのジクロロメタン(200mL)懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（450μL, 5.23mmol）を加え、45℃で終夜攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮し、酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水/りん酸緩衝液(pH7.0)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２１Ａ（17.0g、収率94%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.37-7.32 (5H, m), 5.69 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.35 (1H, d, J = 2.4 Hz), 5.29 (1H, d, J = 11.5 Hz), 5.10 (2H, s), 4.94 (1H, br), 4.68 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.20-4.09 (2H, m), 3.97-3.86 (3H, m), 3.49-3.44 (1H, m), 3.20-3.17 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.93 (3H, s), 1.66-1.34 (6H, m).
Calcd for C₂₇H₃₈N₂O₁₁: [M+H]⁺ 567, Found 567.

(２１Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-(5-アミノペントキシ)テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ｂ）の合成

工程（２１Ａ）で合成した化合物２１Ａ(17.0 g, 30.0 mmol)をエタノール（200ml）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2g）を加え、水素雰囲気下、室温で激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物２１Ｂ(12.64g、収率97%)の粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.78 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.36-5.32 (2H, m), 4.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.21-4.09 (2H, m), 3.96-3.88 (3H, m), 3.52-3.47 (1H, m), 2.70 (2H, t, J = 6.7 Hz), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.75-1.36 (6H, m).
Calcd for C₁₉H₃₂N₂O₉: [M+H]⁺ 433, Found 433.

(２１Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(4S)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシカルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ｃ）の合成

(R)-(-)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノール（1.68g, 12.8mmol）、トリエチルアミン(3.22mL, 23.1mmol)をジクロロメタン(100mL)溶解させた。4-ニトロフェニルクロロホルメート（2.56g, 12.7mmol）を加え、室温で１時間攪拌した。続いて、トリエチルアミン（5mL, 36mmol）、工程（２１Ｂ）で合成した化合物２１Ｂ（5.0g, 11.56mmol)のジクロロメタン溶液(20mL)を加え、45℃で１時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２１Ｃ（3.46 g、収率51%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.75 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.36 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.30 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.97 (1H, br), 4.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.33-4.29 (1H, m), 4.23-3.88 (8H, m), 3.74-3.72 (1H, m), 3.49-3.46 (1H, m), 3.19-3.14 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.63-1.53 (6H, m), 1.44 (3H, s), 1.37 (3H, s).
Calcd for C₂₆H₄₂N₂O₁₃: [M+H]⁺ 591, Found 591.

(２１Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2S)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ｄ）の合成

工程（２１Ｃ）で合成した化合物２１Ｃ（4.38g, 7.42mmol)に純水(2mL)、トリフルオロ酢酸(6mL)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。更にトルエン共沸することで、水を除去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２１Ｄ（2.47g、収率61%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.75 (1H, d, J = 7.3 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.22 (1H, dd, J = 11.5, 3.0 Hz), 5.13 (1H, br s), 4.61 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.23-3.87 (7H, m), 3.67-3.60 (3H, m), 3.49-3.46 (1H, m), 3.22-3.16 (2H, m), 2.16 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.97 (3H, s), 1.61-1.50 (6H, m).
Calcd for C₂₃H₃₈N₂O₁₃: [M+H]⁺ 551, Found 551.

(２１Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ｅ）の合成

工程（２１Ｄ）で合成した化合物２１Ｄ（2.47g, 4.52mmol)をピリジン(15mL)に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（1.82g, 5.38mmol）を加え、室温で攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、その後、酢酸エチル：メタノール＝95:5,v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２１Ｅ（1.84g、収率48%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.43-7.42 (2H, m), 7.32-7.29 (6H, m), 7.24-7.19 (1H, m), 6.84-6.81 (4H, m), 5.74 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.26 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.94 (1H, br), 4.65 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.22-4.09 (4H, m), 3.97-3.91 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.47-3.43 (1H, m), 3.18-3.15 (4H, m), 3.00 (1H, d, J = 4.8 Hz), 2.14 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.99 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.65-1.34 (6H, m).
Calcd for C₄₄H₅₆N₂O₁₅: [M+Na]⁺ 875, Found 875.

(２１Ｆ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２１Ｆ）の合成

工程（２１Ｅ）で合成した化合物２１Ｅ(1.84g, 2.16mmol)を適量のピリジンを加え、減圧下共沸した後に、ジクロロメタン(21mL)に溶解させた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.25mL, 12.9mmol)、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト(0.96mL, 4.31mmol)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、1% トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２１Ｆ（1.87g、収率82%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.46-7.40 (2H, m), 7.35-7.17 (7H, m), 6.82-6.80 (4H, m), 5.73-5.63 (1H, m), 5.37-5.35 (1H, m), 5.30-5.26 (1H, m), 4.97-4.94 (0.5H, m), 4.72-4.68 (1H, m), 4.42-4.40 (0.5H, m), 4.22-4.10 (4H, m), 3.99-3.43 (14H, m), 3.18-3.12 (4H, m), 2.67-2.62 (1H, m), 2.46-2.44 (1H, m), 2.14 (3H, s), 2.01-1.96 (9H, m), 1.65-0.97 (18H, m).

（実施例９６）
HO-Ｘ^１−Ｘ^１−Ｘ^１−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１の部分は参考例２１で合成した化合物２１Ｆを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6830.15）。

（参考例２２）
(２２Ａ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(4R)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシカルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２２Ａ）の合成

(S)-(+)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノール（1.68g, 2.54mmol）、トリエチルアミン(3.22mL, 23.1mmol)をジクロロメタン(100mL)溶解させた。4-ニトロフェニルクロロホルメート（2.56g, 12.72mmol）を加え、室温で１時間攪拌した。続いて、トリエチルアミン（5mL, 36mmol）、工程（２１Ｂ）で合成した化合物２１Ｂ（5.2g, 13mmol)を加え、45℃で１時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２２Ａ（3.82g、収率54%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.36 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.31 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.97 (1H, br), 4.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.33-4.30 (1H, m), 4.22-3.99 (5H, m), 3.95-3.89 (3H, m), 3.74-3.71 (1H, m), 3.50-3.46 (1H, m), 3.19-3.14 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.69-1.47 (6H, m), 1.44 (3H, s), 1.37 (3H, s).
Calcd for C₂₆H₄₂N₂O₁₃: [M+H]⁺ 591, Found 591.

(２２Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２２Ｂ）の合成

工程（２２Ａ）で合成した化合物２２Ａ（3.82g, 6.47mmol)に純水(2mL)、トリフルオロ酢酸(6mL)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。更にトルエン共沸することで、水を除去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２２Ｂ（2.49g、収率70%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.98 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.37-5.20 (3H, m), 4.63 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.21-3.88 (7H, m), 3.69-3.57 (3H, m), 3.51-3.44 (1H, m), 3.21-3.14 (2H, m), 2.16 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.97 (3H, s), 1.66-1.34 (6H, m).
Calcd for C₂₃H₃₈N₂O₁₃: [M+H]⁺ 551, Found 551.

(２２Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２２Ｃ）の合成

工程（２２Ｂ）で合成した化合物２２Ｂ（2.49g, 4.52mmol)をピリジン(15mL)に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（1.84g, 5.43mmol）を加え、室温で攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、その後、酢酸エチル：メタノール＝95:5,v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２２Ｃ（2.1g、収率54%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.42 (2H, d, J = 7.9 Hz), 7.32-7.16 (6H, m), 6.83 (4H, d, J = 9.1 Hz), 5.74 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.27 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.93 (1H, br), 4.66 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.25-4.11 (4H, m), 4.01-3.89 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.50-3.43 (1H, m), 3.21-3.13 (4H, m), 2.98 (1H, br), 2.13 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.99 (3H, s), 1.94 (3H, s), 1.65-1.34 (6H, m).
Calcd for C₄₄H₅₆N₂O₁₅: [M+Na]⁺ 875, Found 875.

(２２Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[5-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２２Ｄ）の合成

工程（２２Ｃ）で合成した化合物２２Ｃ(2.10g, 2.50mmol)を適量のピリジンを加え、減圧下共沸した後に、ジクロロメタン(20mL)に溶解させた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.6mL, 15mmol)、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト(1.L1ml, 4.9mmol)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２２Ｄ（1.63g、収率63%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.46-7.40 (2H, m), 7.35-7.17 (7H, m), 6.85-6.78 (4H, m), 5.70-5.57 (1H, m), 5.38-5.34 (1H, m), 5.32-5.24 (1H, m), 4.96-4.91 (0.5H, m), 4.73-4.65 (1H, m), 4.44-4.38 (0.5H, m), 4.23-4.08 (4H, m), 4.00-3.41 (14H, m), 3.27-3.03 (4H, m), 2.68-2.60 (1H, m), 2.49-2.42 (1H, m), 2.14 (3H, s), 2.07-1.91 (9H, m), 1.65-0.97 (18H, m).

（実施例９７）
HO-Ｘ^２−Ｘ^２−Ｘ^２−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^２と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^２の部分は参考例２２で合成した化合物２２Ｄを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6830.14）。

（参考例２３）
(２３Ａ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[8-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)オクトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２３Ａ）の合成

文献既知化合物のベンジルN-(8-ヒドロキシオクチル)カーバメート(J. Med. Chem, 1993, 36, 3721-3726.)(6.5g, 23mmol)と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリオキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)(8.2g, 21mmol)とのジクロロメタン(150mL)懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（310μL, 3.6mmol）を加え、45℃で終夜攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮し、酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水/りん酸緩衝液(pH7.0)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２３Ａ（12.68g、収率99%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.29 (5H, m), 5.65 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.29 (1H, dd, J = 11.5, 3.0 Hz), 5.10 (2H, s), 4.83 (1H, br), 4.68 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.20-4.09 (2H, m), 3.99-3.85 (3H, m), 3.50-3.42 (1H, m), 3.22-3.15 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.62-1.27 (12H, m).
Calcd for C₃₀H₄₄N₂O₁₁: [M+H]⁺ 609, Found 609.

(２３Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-(8-アミノオクトキシ)テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２３Ｂ）の合成

工程（２３Ａ）で合成した化合物２３Ａ(12.68g, 20.83mmol)をエタノール（200mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2g）を加え、水素雰囲気下、室温で激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物２３Ｂ(10.1g)の粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₂₂H₃₈N₂O₉: [M+H]⁺ 475, Found 475.

(２３Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[8-[[(4S)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシカルボニルアミノ]オクトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(化合物２３Ｃ）の合成

(R)-(-)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノール（1.6g, 12mmol）、トリエチルアミン(3.1mL, 22mmol)をジクロロエタン(30mL)溶解させた。4-ニトロフェニルクロロホルメート（2.2g, 12mmol）を加え、室温で1.5時間攪拌した。続いて、トリエチルアミン（4.5mL, 32mmol）、工程（２３Ｂ）で合成した化合物２３Ｂ（5.1g, 11mmol)を加え、45℃で４時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２３Ｃ（2.45g、収率36%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.64 (1H, d, J = 7.9 Hz), 5.36 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.29 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.85 (1H, br), 4.69 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.35-3.86 (9H, m), 3.76-3.70 (1H, m), 3.50-3.43 (1H, m), 3.20-3.12 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.65-1.28 (12H, m), 1.44 (3H, s), 1.37 (3H, s).
Calcd for C₂₉H₄₈N₂O₁₃: [M+H]⁺ 633, Found 633.

(２３Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[8-[[(2S)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]オクトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(化合物２３Ｄ）の合成

工程（２３Ｃ）で合成した化合物２３Ｃ（2.45g, 3.87mmol)に純水(2mL)、トリフルオロ酢酸(6mL)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。更にトルエン共沸することで、水を除去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２３Ｄ（1.18g、収率51%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.87 (1H, d, J = 7.9 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.27 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 5.07 (1H, br), 4.66 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.27-3.86 (7H, m), 3.70-3.57 (2H, m), 3.50-3.43 (2H, m), 3.24-3.13 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.67-1.24 (12H, m).
Calcd for C₂₆H₄₄N₂O₁₃: [M+H]⁺ 593, Found 593.

(２３Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[8-[[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]オクトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(化合物２３Ｅ）の合成

工程（２３Ｄ）で合成した化合物２３Ｄ（1.18g, 1.99mmol)をピリジン(20mL)に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（0.81g, 2.39mmol）を加え、室温で攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、その後、酢酸エチル：メタノール＝95:5,v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２３Ｅ（0.6 g、収率34%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.44-7.40 (2H, m), 7.33-7.19 (7H, m), 6.85-6.81 (4H, m), 5.61 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.29 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.79 (1H, br), 4.69 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.24-4.09 (4H, m), 4.00-3.86 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.50-3.43 (1H, m), 3.21-3.12 (4H, m), 2.14 (3H, s), 2.04 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.63-1.26 (12H, m).
Calcd for C₄₇H₆₂N₂O₁₅: [M+Na]⁺ 917, Found 917.

(２３Ｆ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[8-[[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]カルボニルアミノ]オクトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(化合物２３Ｆ）の合成

工程（２３Ｅ）で合成した化合物２３Ｅ(0.60g, 0.67mmol)を適量のピリジンを加え、減圧下共沸した後に、ジクロロエタン(5mL)に溶解させた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.70ml, 4.0mmol)、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト (0.30mL, 1.3mmol)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、1% トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２３Ｆ（0.51g、収率69%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.46-7.40 (2H, m), 7.34-7.17 (7H, m), 6.84-6.78 (4H, m), 5.56-5.48 (1H, m), 5.37-5.34 (1H, m), 5.32-5.28 (1H, m), 4.87-4.80 (0.5H, m), 4.73-4.68 (1H, m), 4.43-4.37 (0.5H, m), 4.23-4.08 (4H, m), 3.97-3.43 (14H, m), 3.26-3.06 (4H, m), 2.66-2.61 (1H, m), 2.47-2.41 (1H, m), 2.14 (3H, s), 2.06-1.93 (9H, m), 1.64-1.23 (12H, m), 1.21-0.98 (12H, m).

（実施例９８）
HO-X^３−X^３−X^３−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^３と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^３の部分は参考例２３で合成した化合物２３Ｆを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6957.27）。

（参考例２４）
(２４Ａ)
7-[(2S)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシプロポキシ]ヘプタン-1-オール（化合物２４Ａ）の合成

ベンジル (S)-(+)-グリシジルエーテル（5.0g, 30mmol）をジクロロメタン（150mL）に溶解した。1,7-ヘプタンジオール（6.0g, 45mmol）、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（0.76mL, 6.1mmol）を加え、室温で２日間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50, v/v）で精製し、無色油状の目的物２４Ａ（3.3 g、収率37%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.28 (5H, m), 4.57 (2H, s), 4.02-3.96 (1H, m), 3.67-3.61 (2H, m), 3.59-3.43 (6H, m), 2.48 (1H, d, J = 4.2 Hz), 1.61-1.52 (4H, m), 1.37-1.30 (6H, m).
Calcd for C₁₇H₂₈O₄: [M+Na]⁺ 319, Found 319.

(２４Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2S)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２４Ｂ−１）の合成

及び、酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2S)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-ベンジルオキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２４Ｂ−２）の合成

工程（２４Ａ）で合成した化合物１５Ａ（3.3g, 11mmol）と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)（4.0g, 10mmol）とのジクロロメタン（200mL）懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.15mL, 1.7mmol）を加え、45℃で３日間攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮し、酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水/りん酸緩衝液(pH7.0)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２４Ｂ−１（4.5 g、収率70%）及び２４Ｂ−２（1.9g、収率20%）を得た。
（化合物２４Ｂ−１）
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.28 (5H, m), 5.51 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.37-5.29 (2H, m), 4.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.56 (2H, s), 4.20-4.09 (2H, m), 4.03-3.85 (4H, m), 3.58-3.41 (7H, m), 2.58 (1H, d, J = 4.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.63-1.52 (4H, m), 1.36-1.29 (6H, m).
Calcd for C₃₁H₄₇NO₁₂: [M+H]⁺ 626, Found 626.
（化合物２４Ｂ−２）
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.41-7.28 (5H, m), 5.65 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.48 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.42-5.23 (4H, m), 4.84 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.59-4.49 (2H, m), 4.20-3.38 (17H, m), 2.19-1.92 (24H, m), 1.61-1.47 (4H, m), 1.38-1.26 (6H, m).
Calcd for C₄₅H₆₆N₂O₂₀: [M+H]⁺ 955, Found 955.

(２４Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２４Ｃ）の合成

工程（２４Ｂ）で合成した化合物２４Ｂ−１（4.5g, 7.2mmol）をエタノール（100mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で５時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸後、適量のピリジンを加えて共沸し目的物２４Ｃの粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.55 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.37-5.27 (2H, m), 4.69 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.21-4.09 (2H, m), 3.99-3.42 (11H, m), 2.69 (1H, d, J = 5.4 Hz), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.65-1.52 (4H, m), 1.40-1.29 (6H, m).
Calcd for C₂₄H₄₁NO₁₂: [M+H]⁺ 536, Found 536.

(２４Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２４Ｄ）の合成

工程（２４Ｃ）で合成した化合物２４Ｃの粗生成物をピリジン（30mL）に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（2.7g, 7.9mmol）を加え、室温で13時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。トルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２４Ｄ（3.0g、収率2steps 49%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.45-7.41 (2H, m), 7.34-7.20 (7H, m), 6.85-6.80 (4H, m), 5.50 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.37-5.29 (2H, m), 4.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.20-4.09 (2H, m), 3.98-3.85 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.55-3.40 (5H, m), 3.22-3.13 (2H, m),2.51 (1H, d, J = 4.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.93 (3H, s), 1.60-1.52 (4H, m), 1.35-1.27 (6H, m).
Calcd for C₄₅H₅₉NO₁₄: [M+Na]⁺ 860, Found 860.

(２４Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエチル-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２４Ｅ）の合成

工程（２４Ｄ）で合成した化合物２４Ｄ（3.0g, 3.6mmol）を適量のピリジンで共沸した後に、ジクロロメタン（50mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（2.5mL, 14mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.88mL, 3.9mmol）を加え、室温で1.5時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２４Ｅ（3.0g、収率82%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.48-7.41 (2H, m), 7.36-7.15 (7H, m), 6.85-6.77 (4H, m), 5.59-5.41 (1H, m), 5.38-5.26 (2H, m), 4.75-4.68 (1H, m), 4.20-4.07 (2H, m), 3.97-3.06 (21H, m), 2.67-2.40 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.04 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.92 (3H, s), 1.64-1.46 (4H, m), 1.37-1.22 (6H, m), 1.22-0.97 (12H, m).

（実施例９９）
HO-Ｘ^４−Ｘ^４−Ｘ^４−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^４と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^４の部分は参考例２４で合成した化合物２４Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6785.22）

（参考例２５）
(２５Ａ)
7-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシプロポキシ]ヘプタン-1-オール（化合物２５Ａ）の合成

ベンジル(R)-(-)-グリシジルエーテル（5.0g, 30mmol）をジクロロメタン（150mL）に溶解した。1,7-ヘプタンジオール（6.0g, 45mmol）、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（0.76mL, 6.1mmol）を加え、室温で２日間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50, v/v）で精製し、無色油状の目的物２５Ａ（4.0 g、収率44%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.27 (5H, m), 4.56 (2H, s), 4.04-3.94 (1H, m), 3.67-3.59 (2H, m), 3.58-3.40 (6H, m), 2.51 (1H, d, J = 4.2 Hz), 1.63-1.49 (4H, m), 1.41-1.30 (6H, m).
Calcd for C₁₇H₂₈O₄: [M+Na]⁺ 319, Found 319.

(２５Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２５Ｂ−１）の合成

酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2R)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-ベンジルオキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２５Ｂ−２）の合成

工程（２５Ａ）で合成した化合物２５Ａ（4.0g, 14mmol）と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル (WO2011053614)（4.8g, 12mmol）とのジクロロメタン（200mL）懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.18mL, 2.1mmol）を加え、45℃で３日間攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮し、酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水/りん酸緩衝液(pH7.0)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２５Ｂ−１（4.8g、収率62%）及び２５Ｂ−２（1.9g、収率16%）を得た。
（化合物２５Ｂ−１）
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.27 (5H, m), 5.50 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.37-5.28 (2H, m), 4.70 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.57 (2H, s), 4.20-4.08 (2H, m), 4.03-3.85 (4H, m), 3.58-3.42 (7H, m), 2.58 (1H, d, J = 4.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.64-1.50 (4H, m), 1.38-1.29 (6H, m).
Calcd for C₃₁H₄₇NO₁₂: [M+H]⁺ 626, Found 626.
（化合物２５Ｂ−２）
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.28 (5H, m), 5.85-5.21 (6H, m), 4.90-4.73 (2H, m), 4.53 (2H, s), 4.22-3.38 (17H, m), 2.20-1.91 (24H, m), 1.63-1.51 (4H, m), 1.41-1.30 (6H, m).
Calcd for C₄₅H₆₆N₂O₂₀: [M+H]⁺ 955, Found 955.

(２５Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2S)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２５Ｃ）の合成

工程（２５Ｂ）で合成した化合物２５Ｂ−１（4.8g, 7.7mmol）をエタノール（100mL）に溶解した。10% パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で５時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸後、適量のピリジンを加えて共沸し目的物２５Ｃの粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.62 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.38-5.26 (2H, m), 4.69 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.21-4.09 (2H, m), 4.00-3.43 (11H, m), 2.74 (1H, br s), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.68-1.50 (4H, m), 1.41-1.29 (6H, m).
Calcd for C₂₄H₄₁NO₁₂: [M+H]⁺ 536, Found 536.

(２５Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２５Ｄ）の合成

工程（２５Ｃ）で合成した化合物２５Ｃの粗生成物をピリジン（30mL）に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（2.7g, 8.0mmol）を加え、室温で1.5時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。トルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２５Ｄ（4.5g、収率2steps 70%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.46-7.40 (2H, m), 7.34-7.18 (7H, m), 6.86-6.79 (4H, m), 5.50 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.37-5.28 (2H, m), 4.70 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.20-4.08 (2H, m), 3.98-3.84 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.55-3.39 (5H, m), 3.21-3.14 (2H, m),2.51 (1H, d, J = 4.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.04 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.94 (3H, s), 1.65-1.47 (4H, m), 1.36-1.27 (6H, m).
Calcd for C₄₅H₅₉NO₁₄: [M+Na]⁺ 860, Found 860.

(２５Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[7-[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエチル-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]ヘプトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２５Ｅ）の合成

工程（２５Ｄ）で合成した化合物２５Ｄ（4.5g, 5.4mmol）を適量のピリジンで共沸した後に、ジクロロメタン（50mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（3.7mL, 21mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（1.3ml, 5.9mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２５Ｅ（4.5g、収率81%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.48-7.40 (2H, m), 7.36-7.16 (7H, m), 6.84-6.77 (4H, m), 5.58-5.42 (1H, m), 5.37-5.27 (2H, m), 4.74-4.68 (1H, m), 4.20-4.07 (2H, m), 3.97-3.06 (21H, m), 2.67-2.39 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.92 (3H, s), 1.63-1.45 (4H, m), 1.36-1.23 (6H, m), 1.21-0.98 (12H, m).

（実施例１００）
HO-Ｘ^５−Ｘ^５−Ｘ^５−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^５と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^５の部分は参考例１６で合成した化合物２５Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6785.21）。

（参考例２６）
(２６Ａ)
13-[(2S)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシプロポキシ]トリデカン-1-オール（化合物２６Ａ）の合成

ベンジル(S)-(+)- グリシジルエーテル（4.0g, 24mmol）をジクロロメタン（150mL）に溶解した。トリデカン-1,13-ジオール（7.6g, 35mmol）、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（0.61mL, 4.9mmol）を加え、室温で２日間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50, v/v）で精製し、無色油状の目的物２６Ａ（3.8g、収率41%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.27 (5H, m), 4.56 (2H, s), 4.02-3.94 (1H, m), 3.69-3.39 (8H, m), 2.49 (1H, d, J = 4.2 Hz), 1.61-1.50 (4H, m), 1.39-1.21 (18H, m).
Calcd for C₂₃H₄₀O₄: [M+H]⁺ 381, Found 381.

(２６Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[13-[(2S)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]トリデコキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２６Ｂ）の合成

工程（２６Ａ）で合成した化合物２６Ａ（3.8g, 9.9mmol）と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル (WO2011053614)（3.5g, 9.0mmol）とのジクロロメタン（60mL）懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.13mL, 1.5mmol）を加え、45℃で17時間攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮し、酢酸エチル/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水/りん酸緩衝液(pH7.0)で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２６Ｂ（3.7g、収率58%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.27 (5H, m), 5.39-5.30 (3H, m), 4.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.57 (2H, s), 4.20-4.09 (2H, m), 4.02-3.85 (4H, m), 3.58-3.40 (7H, m), 2.48 (1H, d, J = 4.2 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.63-1.51 (4H, m), 1.37-1.21 (18H, m).
Calcd for C₃₇H₅₉NO₁₂: [M+H]⁺ 710, Found 710.

(２６Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[13-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]トリデコキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２６Ｃ）の合成

工程（２６Ｂ）で合成した化合物２６Ｂ（3.7g, 5.2mmol）をエタノール（100mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で５時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐90：10, v/v）で精製し、無色油状の目的物２６Ｃ（1.4g、収率43%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.42-5.29 (3H, m), 4.57 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.21-4.09 (2H, m), 3.95-3.44 (11H, m), 2.60 (1H, d, J = 4.8 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.64-1.51 (4H, m), 1.37-1.22 (18H, m).
Calcd for C₃₀H₅₃NO₁₂: [M+Na]⁺ 642, Found 642.

(２６Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[13-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]トリデコキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２６Ｄ）の合成

工程（２６Ｃ）で合成した化合物２６Ｃ（1.4g, 2.3mmol）をピリジン（10mL）に溶解した。4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（0.84g, 2.5mmol）を加え、室温で15時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。トルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐20：80, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２６Ｄ（1.9g、収率91%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.45-7.41 (2H, m), 7.34-7.18 (7H, m), 6.85-6.80 (4H, m), 5.40-5.30 (3H, m), 4.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.20-4.09 (2H, m), 3.97-3.84 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.56-3.40 (5H, m), 3.22-3.13 (2H, m),2.43 (1H, d, J = 4.8 Hz), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.63-1.50 (4H, m), 1.35-1.21 (18H, m).
Calcd for C₅₁H₇₁NO₁₄: [M+Na]⁺ 944, Found 944.

(２６Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[13-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-[2-シアノエチル-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]トリデコキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２６Ｅ）の合成

工程（２６Ｄ）で合成した化合物２６Ｄ（1.9g, 2.1mmol）を適量のピリジンで共沸した後に、ジクロロメタン（50mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.4mL, 8.0mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.49mL, 2.2mmol）を加え、室温で1.5時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐50：50, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２６Ｅ（1.7g、収率75%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.48-7.41 (2H, m), 7.36-7.16 (7H, m), 6.84-6.78 (4H, m), 5.41-5.30 (3H, m), 4.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.20-4.09 (2H, m), 3.95-3.07 (21H, m), 2.66-2.40 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.63-1.45 (4H, m), 1.35-1.21 (18H, m), 1.21-0.99 (12H, m).

（実施例１０１）
HO-Ｘ^６−Ｘ^６−Ｘ^６−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^６と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^６の部分は参考例２６で合成した化合物２６Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7037.48）。

（参考例２７）
(２７Ａ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2R)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２７Ａ）の合成

工程（２４Ｂ）で合成した化合物２４Ｂ−２（1.9g, 2.0mmol）をエタノール（60mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸後、適量のピリジンを加えて共沸し目的物２７Ａの粗生成物（1.3g）を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.84 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.69 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.41-5.14 (4H, m), 4.85 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.70 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.22-3.40 (17H, m), 2.86-2.81 (1H, m), 2.20-1.93 (24H, m), 1.65-1.49 (4H, m), 1.39-1.23 (6H, m).
Calcd for C₃₈H₆₀N₂O₂₀: [M+H]⁺ 865, Found 865.

(２７Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2S)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２７Ｂ）の合成

工程（２７Ａ）で合成した化合物２７Ａの粗生成物（1.3g）をジクロロメタン（50mL）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（1.0mL, 5.8mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.36mL, 1.6mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。さらに、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.36mL, 1.6mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：アセトニトリル＝100： 0‐90：10, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２７Ｂ（0.56g、収率 2steps 26%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.04-5.69 (2H, m), 5.39-5.06 (4H, m), 4.86-4.69 (2H, m), 4.25-3.40 (21H, m), 2.80-2.67 (2H, m), 2.21-1.92 (24H, m), 1.66-1.48 (4H, m), 1.38-1.15 (18H, m).

（実施例１０２）
HO-Ｘ^７−Ｘ^４−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^４とＸ^７と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ⁴の部分は参考例１５で合成した化合物２４Ｅを用い、１回縮合した。Ｘ^７の部分は参考例２７で合成した化合物２７Ｂを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6517.17）。

（参考例２８）
(２８Ａ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2S)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-ヒドロキシ-プロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２８Ａ）の合成

工程（２５Ｂ）で合成した化合物２５Ｂ−２（1.9g, 2.0mmol）をエタノール（60mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で５時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸後、適量のピリジンを加えて共沸し目的物２８Ａの粗生成物（1.8g）を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.93 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.71 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.42-5.22 (4H, m), 4.82-4.73 (2H, m), 4.23-3.35 (17H, m), 2.98-2.92 (1H, m), 2.21-1.92 (24H, m), 1.66-1.48 (4H, m), 1.42-1.23 (6H, m).
Calcd for C₃₈H₆₀N₂O₂₀: [M+H]⁺ 865, Found 865.

(２８Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[7-[(2R)-2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-3-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]ヘプトキシ]-3,4-ジアセトキシテトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２８Ｂ）の合成

工程（２８Ａ）で合成した化合物２８Ａの粗生成物（1.8g）をジクロロメタン（50mL）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（1.5mL, 8.4mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.51mL, 2.3mmol）を加え、室温で5.5時間撹拌した。さらに、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.51mL, 2.3mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：アセトニトリル＝100： 0‐90：10, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物２８Ｂ（1.5g、収率 2steps 71%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.91-5.67 (2H, m), 5.41-5.18 (4H, m), 4.91-4.72 (2H, m), 4.26-3.35 (21H, m), 2.79-2.63 (2H, m), 2.20-1.92 (24H, m), 1.67-1.50 (4H, m), 1.40-1.13 (18H, m).

（実施例１０３）
HO-Ｘ^８−Ｘ^５−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^５とＸ^８と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^５の部分は参考例２５で合成した化合物２５Ｅを用い、１回縮合した。Ｘ^８の部分は参考例２８で合成した化合物２８Ｂを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6517.10）。

（参考例２９）
(２９Ａ)
(2R)-1-ベンジルオキシ-3-[2-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ]エトキシ]プロパン-2-オール（化合物２９Ａ）の合成

トリエチレングリコール（6.9g, 46mmol）、ベンジル(S)-(+)-グリシジルエーテル（5.0g, 30mmol）をジクロロメタン（75mL）に溶解させ、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（0.77mL, 6.1mmol）を加え、室温で16時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和食塩水、飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、油状の目的物２９Ａ（5.6g、収率58%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.37-7.25 (5H, m), 4.55 (2H, s), 4.05-3.97 (1H, m), 3.65-3.56 (16H, m).
Calcd for C₁₆H₂₆O₆: [M+H]⁺ 315, Found 315.

(２９Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２９Ｂ）の合成

工程（２９Ａ）で合成した化合物２９Ａ（5.6g, 18mmol）と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)（6.3g, 16mmol）とのジクロロメタン（100mL）懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.24mL, 2.8mmol）を加え、45℃で16時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物を酢酸エチルに溶解させ、有機層を飽和食塩水、飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、アモルファス状の目的物２９Ｂ（4.9g、収率47%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.27 (5H, m), 6.69 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.28 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.02 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.77 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.56 (2H, s), 4.29-3.47 (21H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.97 (3H, s), 1.96 (3H, s).
Calcd for C₃₀H₄₅NO₁₄: [M+H]⁺ 644, Found 644.

(２９Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２９Ｃ）の合成

工程（２９Ｂ）で合成した化合物２９Ｂ（4.9g, 7.6mmol）をエタノール（100mL）に溶解した。10% パラジウム/炭素(wet)（4.0g）を加え、水素雰囲気下、室温で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸し、油状の目的物２９Ｃ（4.0g、収率95%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.83-6.76 (1H, m), 5.32 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.11 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.79 (1H, d, J = 9.1 Hz), 4.27-4.08 (3H, m), 3.97-3.53 (18H, m), 2.16 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.97 (3H, s).
Calcd for C₂₃H₃₉NO₁₄: [M+H]⁺ 554, Found 554.

(２９Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス (4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２９Ｄ）の合成

工程（２９Ｃ）で合成した化合物２９Ｃ（4.0g, 7.2mmol）に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン（30mL）に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（2.7g , 8.0mmol）を加え、室温で3時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２９Ｄ（3.5g、収率57%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.44-7.40 (2H, m), 7.33-7.18 (7H, m), 6.85-6.80 (4H, m), 6.59 (1H, d, J = 9.7 Hz), 5.29 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.00 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.77 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.27-4.07 (3H, m), 4.00-3.82 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.71-3.49 (12H, m), 3.20-3.10 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.93 (6H, s).
Calcd for C₄₄H₅₇NO₁₆: [M+Na]⁺ 878, Found 878.

(２９Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物２９Ｅ）の合成

工程（２９Ｄ）で合成した化合物２９Ｄ（3.5g, 4.1mmol）を適量のピリジンで共沸した後に、ジクロロメタン（40mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（2.8mL, 16mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（1.1mL, 4.9mmol）を加え、室温で3時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物２９Ｅ（2.2g、収率51%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.40 (2H, m), 7.35-7.16 (7H, m), 6.85-6.77 (4H, m), 6.40 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.33-5.28 (1H, m), 5.03-4.93 (1H, m), 4.81-4.74 (1H, m), 4.28-4.08 (3H, m), 3.96-3.46 (26H, m), 3.27-3.04 (2H, m), 2.69-2.41 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.97-1.90 (6H, m), 1.30-0.98 (12H, m).

（実施例１０４）
HO-Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^９と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^９の部分は参考例２９で合成した化合物２９Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6839.16）。

（参考例３０）
(３０Ａ)
(2R)-1-ベンジルオキシ-3-[2-[2-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ]エトキシ]エトキシ]プロパン-2-オール（化合物３０Ａの合成）

テトラエチレングリコール(8.87g, 45.7mmol)、ベンジル(S)-(+)-グリシジルエーテル(4.66mL, 30.5mmol)をジクロロメタン(75mL)に溶解させ、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体(0.76mL, 6.1mmol)を加え、室温で終夜攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、油状の目的物３０Ａ（5.3g、収率49%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.37-7.23 (5H, m), 4.56 (2H, s), 4.01 (1H, br), 3.75-3.41 (20H, m).
Calcd for C₁₈H₃₀O₇: [M+H]⁺ 359, Found 359.

(３０Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３０Ｂの合成）

工程３０Ａで合成した化合物(5.3g, 15mmol)と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)(5.2g, 13mmol)とのジクロロメタン(100mL)懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.2mL, 2.3mmol）を加え、45℃で22時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去して濃縮し、酢酸エチルを加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、アモルファス状の目的物３０Ｂ（4.5 g、収率49%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.24 (5H, m), 6.72 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.29 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.00 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.76 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.56 (2H, s), 4.31-4.21 (1H, m), 4.18-3.46 (24H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.97 (6H, s).
Calcd for C₃₂H₄₉NO₁₅: [M+H]⁺ 688, Found 688.

(３０Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[2-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（３０Ｃの合成）

工程（３０Ｂ）で合成した化合物３０Ｂ(4.5g, 6.5mmol)をエタノール（80mL）に溶解した。10% パラジウム/炭素(wet)（4g）を加え、水素雰囲気下、室温で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物３０Ｃ(3.9g、収率quant.)の粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.85 (1H, d, J = 9.7 Hz), 5.32 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.10 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.74 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.32-4.09 (2H, m), 3.99-3.56 (23H, m), 2.16 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.99 (3H, s).
Calcd for C₂₅H₄₃NO₁₅: [M+H]⁺ 598, Found 598.

(３０Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス (4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３０Ｄの合成）

工程（３０Ｃ）で合成した化合物３０Ｃ(3.9g, 6.5mmol)に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン(22mL)に溶解させ、4,4'-Dimethoxytrityl Chloride（2.4g, 7.2mmol）を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３０Ｄ（3.12g、収率53%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.44-7.40 (2H, m), 7.33-7.18 (7H, m), 6.85-6.79 (4H, m), 6.63 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.29 (1H, d, J = 3.0 Hz), 4.96 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.75 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.29-4.21 (1H, m), 4.17-4.07 (2H, m), 4.00-3.81 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.71-3.58 (14H, m), 3.53-3.43 (2H, m), 3.21-3.10 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.02 (3H, s), 1.95 (6H, s).
Calcd for C₄₆H₆₁NO₁₇: [M+Na]⁺ 922, Found 922.

(３０Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３０Ｅの合成）

工程（３０Ｄ）で合成した化合物３０Ｄ(3.12g, 3.47mmol)に適量のピリジンを加え、減圧下共沸した後にジクロロメタン(35mL)に溶解させた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.42mL, 13.9mmol)、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト(0.93mL, 4.16mmol)を加え、室温で1時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え、減圧下共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３０Ｅ（2.98g、収率78%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.46-7.40 (2H, m), 7.35-7.17 (7H, m), 6.84-6.78 (4H, m), 6.43 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.31 (1H, br), 5.00-4.93 (1H, m), 4.78 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.29-4.08 (3H, m), 3.91-3.48 (30H, m), 3.27-3.04 (2H, m), 2.67-2.62 (1H, m), 2.46-2.41 (1H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s),1.97-1.94 (6H, m), 1.30-0.99 (12H, m).

（実施例１０５）
HO-Ｘ^１０−Ｘ^１０−Ｘ^１０−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１０と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１０の部分は参考例３０で合成した化合物３０Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6971.21）。

（参考例３１）
(３１Ａ)
(2R)-1-ベンジルオキシ-3-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ]プロパン-2-オール（化合物３１Ａの合成）

ジエチレングリコール(5.0g, 30.5mmol)、ベンジル(S)-(+)-グリシジルエーテル(6.5, 60.9mmol)をジクロロメタン(75mL)に溶解させ、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体(0.76mL, 6.1mmol)を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、油状の目的物３１Ａ（5.3g、収率64%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.27 (5H, m), 4.56 (2H, s), 4.05-3.97 (1H, m), 3.77-3.48 (12H, m), 2.85-2.82 (1H, m), 2.47-2.42 (1H, m).
Calcd for C₁₄H₂₂O₅: [M+ Na]⁺ 293, Found 293.

(３１Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３１Ｂの合成）

工程３１Ａで合成した化合物(4.0g, 15mmol)と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル(WO2011053614)(5.2g, 13mmol)とのジクロロメタン(100mL)懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.2mL, 2.3mmol）を加え、45℃で22時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去して濃縮し、酢酸エチルを加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、アモルファス状の目的物３１Ｂ（4.15g、収率52%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.37-7.28 (5H, m), 6.71 (1H, d, J = 9.7 Hz), 5.30 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.12 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.77 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.57 (2H, s), 4.27-4.05 (1H, m), 3.93-3.45 (16H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 1.98 (3H, s), 1.95 (3H, s).
Calcd for C₂₈H₄₁NO₁₃: [M+ Na]⁺ 622, Found 622.

(３１Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル (化合物３１Ｃの合成）

工程（３１Ｂ）で合成した化合物３１Ｂ(4.15g, 6.9mmol)をエタノール（80mL）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（4g）を加え、水素雰囲気下、室温で８時間激しく攪拌した。さらに10%パラジウム/炭素(wet)（1g）を加え、水素雰囲気下、50℃で４時間激しく攪拌した。さらに、10%パラジウム/炭素(wet)（1g）を加え、水素雰囲気下、50℃で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物３１Ｃ(3.0g、収率86%)の粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.58 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.32-5.30 (1H, m), 5.16 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.78 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.26-4.09 (2H, m), 3.95-3.58 (15H, m), 2.16 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.98 (3H, s).
Calcd for C₂₁H₃₅NO₁₃: [M+H]⁺ 510, Found 510.

(３１Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３１Ｄ）の合成

工程（３１Ｃ）で合成した化合物３１Ｃ（3.0g, 5.9mmol）に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン（25mL）に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（2.2 g , 6.5 mmol）を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３１Ｄ（1.7g、収率36%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.42 (2H, m), 7.35-7.18 (7H, m), 6.86-6.80 (4H, m), 6.73 (1H, d, J = 9.7 Hz), 5.31 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.14 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.76 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.28-4.09 (3H, m), 4.07-3.83 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.72-3.49 (8H, m), 3.26 (1H, d, J = 3.6 Hz), 3.18-3.13 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.94 (3H, s), 1.90 (3H, s).
Calcd for C₄₂H₅₃NO₁₅: [M+Na]⁺ 834, Found 834.

(３１Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３１Ｅ）の合成

工程（３１Ｄ）で合成した化合物３１Ｄ（1.7g, 2.1mmol）を適量のピリジンで共沸した後に、ジクロロメタン（20mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.5mL, 8.4mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.56mL, 2.5mmol）を加え、室温で3時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後に、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３１Ｅ（1.5g、収率71%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.40 (2H, m), 7.37-7.17 (7H, m), 6.86-6.77 (4H, m), 6.08-5.95 (1H, m), 5.34-5.29 (1H, m), 5.16-5.06 (1H, m), 4.76-4.69 (1H, m), 4.20-4.02 (3H, m), 3.95-3.47 (22H, m), 3.31-3.08 (2H, m), 2.69-2.40 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.04-2.02 (3H, m), 1.97-1.94 (3H, m), 1.91-1.88 (3H, m), 1.21-1.01 (12H, m).

（実施例１０６）
HO-Ｘ^１１−Ｘ^１１−Ｘ^１１−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１１と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１１の部分は参考例３１で合成した化合物３１Ｅを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6708.09）。

（参考例３２）
(３２Ａ)
(2S)-1-ベンジルオキシ-3-[2-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ]エトキシ]プロパン-2-オール（化合物３２Ａ）の合成

トリエチレングリコール（9.2g, 61mmol）、ベンジル(R)-(-)-グリシジルエーテル（5.0g, 30mmol）をジクロロメタン（75mL）に溶解させ、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体（0.77mL, 6.1mmol）を加え、室温で４時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物をジクロロメタンに溶解させ、有機層を飽和食塩水、飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、油状の目的物３２Ａ（6.4g、収率67%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.25 (5H, m), 4.56 (2H, s), 4.19-3.45 (17H, m).
Calcd for C₁₆H₂₆O₆: [M+H]⁺ 315, Found 315.

(３２Ｂ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３２Ｂ）の合成

工程（３２Ａ）で合成した化合物３２Ａ（6.4g, 20mmol）と文献既知化合物の酢酸[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル (WO2011053614)（7.2g, 18mmol）とのジクロロメタン（200mL）懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（0.28mL, 3.1mmol）を加え、45℃で20時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。目的物を酢酸エチルに溶解させ、有機層を飽和食塩水、飽和食塩水/飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して、アモルファス状の目的物３２Ｂ（5.6 g、収率47%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.25 (5H, m), 6.68 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.33-5.27 (1H, m), 5.07-4.95 (1H, m), 4.78 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.55 (2H, s), 4.25-3.24 (21H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.97 (3H, s), 1.96 (3H, s).
Calcd for C₃₀H₄₅NO₁₄: [M+H]⁺ 644, Found 644.

(３２Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３２Ｃ）の合成

工程（３２Ｂ）で合成した化合物３２Ｂ（5.6g, 8.7mmol）をエタノール（100mL）に溶解した。20% 水酸化パラジウム/炭素(wet)（1.5g）を加え、水素雰囲気下、50℃で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のトルエンを加えて共沸し、油状の目的物３２Ｃ（4.1g、収率85%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.80 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.34-5.30 (1H, m), 5.15-5.03 (1H, m), 4.81 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.33-4.08 (3H, m), 3.99-3.48 (18H, m), 2.16 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.00 (3H, s), 1.98 (3H, s).
Calcd for C₂₃H₃₉NO₁₄: [M+H]⁺ 554, Found 554.

(３２Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３２Ｄ）の合成

工程（３２Ｃ）で合成した化合物３２Ｃ（4.1g, 7.4mmol）に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン（30mL）に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（2.8g , 8.2mmol）を加え、室温で3時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３２Ｄ（1.9g、収率30%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.44-7.40 (2H, m), 7.35-7.18 (7H, m), 6.86-6.79 (4H, m), 6.67 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.29 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.03 (1H, dd, J = 11.2, 3.0 Hz), 4.77 (1H, d, J = 9.1 Hz), 4.26-4.06 (3H, m), 4.00-3.81 (4H, m), 3.79 (6H, s), 3.75-3.50 (12H, m), 3.23-3.11 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.94 (6H, s).
Calcd for C₄₄H₅₇NO₁₆: [M+Na]⁺ 878, Found 878.

(３２Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルメトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシプロポキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３２Ｅ）の合成

工程（３２Ｄ）で合成した化合物３２Ｄ（1.9g, 2.2mmol）を適量のトルエンで共沸した後に、ジクロロメタン（22mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.6mL, 9.0mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.59mL, 2.7mmol）を加え、室温で1時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝50：50‐0：100, v/v, 1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３２Ｅ（1.5 g、収率64%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.40 (2H, m), 7.36-7.16 (7H, m), 6.85-6.78 (4H, m), 6.45-6.38 (1H, m), 5.33-5.28 (1H, m), 5.03-4.94 (1H, m), 4.80-4.75 (1H, m), 4.27-4.08 (3H, m), 3.93-3.45 (26H, m), 3.28-3.04 (2H, m), 2.69-2.40 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.97-1.92 (6H, m), 1.21-1.01 (12H, m).

（実施例１０７）
HO-Ｘ^１２−Ｘ^１２−Ｘ^１２−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１２と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１２の部分は参考例３２で合成した化合物３２Ｅを用い、３回縮合した。

（実施例１０８）
HO-Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^９と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^９の部分は参考例２９で合成した化合物２９Ｅを用い、５回縮合した。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7817.33）。

（実施例１０９）
HO-Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ｘ^９−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^９と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^９の部分は参考例２９で合成した化合物２９Ｅを用い、７回縮合した。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：8796.73）。

（参考例３３）
(３３Ａ)
9H-フルオレン-9-イルメチル N-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチル]カーバメート（化合物３３Ａ）の合成

文献既知化合物の9H-フルオレン-9-イルメチル N-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチル]カーバメート(Bioconjugate Chemistry,2000,11,755-761)(3.11g, 10mmol)とベンジル(S)-(+)-グリシジルエーテル(0.8g, 5mmol)をジクロロメタン(30mL)に溶解させ、三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体(0.1mL, 1mmol)を加え、室温で16時間攪拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝80：20‐0：100, v/v）で精製し、油状の目的物３３Ａ（0.74g、収率30%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.76 (2H, d, J = 7.9 Hz), 7.60 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.42-7.37 (2H, m), 7.35-7.27 (7H, m), 5.40 (1H, s), 4.53 (2H, s), 4.39 (2H, d, J = 6.7 Hz), 4.25-4.19 (1H, m), 4.04-3.97 (1H, m), 3.69-3.35 (12H, m).
Calcd for C₂₉H₃₃NO₆: [M+H]⁺ 492, Found 492.

(３３Ｂ)
(2R)-1-[2-(2-アミノエトキシ)エトキシ]-3-ベンジルオキシ-プロパン-2-オール、トリフルオロ酢酸塩（化合物３３Ｂ）の合成

工程（３３Ａ）で合成した化合物３３Ａ(13.8g, 28.1mmol)をエタノール/テトラヒドロフラン(50mL/50mL)に溶解し、１N水酸化ナトリウム水溶液(100mL)を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、有機溶媒を減圧留去し、１N塩酸(100mL)を加えた。生じた固形物をろ過により除去した。通過液である水層に含まれる副生成物を酢酸エチルで抽出し、減圧留去した後に得られる残渣にアセトニトリルを加え、ろ過した。通過液を減圧留去して粗生成物を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去し、油状の目的物３３Ｂ（7.1g、収率66%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.27 (5H, m), 4.55 (2H, s), 4.07-3.99 (1H, m), 3.77-3.48 (10H, m), 2.96-2.88 (2H, m).

(３３Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトレヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３３Ｃ）の合成

文献既知化合物の2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ酢酸(WO2012037254)(6g, 14.8mmol)、1-(-3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(3.4g, 17.8mmol)、3H-1,2,3-トリアゾール[4,5-b]ピリジン-3-オール(2.0g, 14.8mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（9.0mL, 51.8mmol）、工程（３３Ｂ）で合成した化合物３３Ｂ(6.7g, 17.5mmol)をジクロロメタン（130mL）に溶解し、室温で４時間撹拌した。反応終了後、有機層を1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐90：10, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物３３Ｃ（7.9g、収率81%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.28 (5H, m), 7.00-6.93 (1H, m), 6.50-6.44 (1H, m), 5.33-5.29 (1H, m), 5.16 (1H, dd, J = 11.5, 3.6 Hz), 4.63-4.53 (3H, m), 4.34 (1H, d, J = 15.1 Hz), 4.22-3.83 (5H, m), 3.73-3.26 (13H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 1.99 (6H, s).
Calcd for C₃₀H₄₄N₂O₁₄: [M+H]⁺ 657, Found 657.

(３３Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３３Ｄ）の合成

工程（３３Ｃ）で合成した化合物３３Ｃ（7.9g, 12mmol）をエタノール（80mL）に溶解した。20%水酸化パラジウム/炭素(wet)（2.0g）を加え、水素雰囲気下、50℃で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。アモルファス状の目的物３３Ｄ（6.7g、収率98%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.03-6.98 (1H, m), 6.43 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.35 (1H, d, J = 3.3 Hz), 5.15 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.58 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.35 (1H, d, J = 15.7 Hz), 4.28-3.82 (5H, m), 3.77-3.34 (13H, m), 2.18 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.01 (3H, s).
Calcd for C₂₃H₃₈N₂O₁₄: [M+H]⁺ 568, Found 568.

(３３Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３３Ｅ）の合成

工程（３３Ｄ）で合成した化合物３３Ｄ（6.8g, 12mmol）に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン（40mL）に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（4.5g, 13mmol）を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。適量のトルエンを加え共沸した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３３Ｅ（6.9g、収率66%）を得た。

¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.42 (2H, d, J = 7.9 Hz), 7.33-7.19 (7H, m), 7.01-6.94 (1H, m), 6.83 (4H, d, J = 9.1 Hz), 6.37 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.33 (1H, d, J = 3.3 Hz), 5.15 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.58 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.32 (1H, d, J = 15.7 Hz), 4.22-3.86 (5H, m), 3.79 (6H, s), 3.66-3.12 (13H, m), 2.13 (3H, s), 2.03 (3H, s), 1.97 (3H, s), 1.95 (3H, s).
Calcd for C₄₄H₅₆N₂O₁₆: [M+Na]⁺ 893, Found 892.

(３３Ｆ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３３Ｆ）の合成

工程（３３Ｅ）で合成した化合物３３Ｅ（6.9g, 7.9mmol）を適量のトルエンで共沸した後に、ジクロロメタン（80mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（5.5mL, 32mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（2.1mL, 9.5mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３３Ｆ（6.6g、収率78%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.40 (2H, m), 7.35-7.17 (7H, m), 6.98-6.91 (1H, m), 6.85-6.78 (4H, m), 6.05-5.89 (1H, m), 5.37-5.33 (1H, m), 5.17-5.07 (1H, m), 4.59-4.49 (1H, m), 4.37-4.30 (1H, m), 4.23-3.06 (28H, m), 2.69-2.42 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.02-1.98 (3H, m), 1.97-1.94 (3H, m), 1.30-1.00 (12H, m).

（実施例１１０）
HO-Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１３と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１３の部分は参考例３３で合成した化合物３３Ｆを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6878.11）。

（実施例１１１）
HO-Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１３と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１３の部分は参考例３３で合成した化合物３３Ｆを用い、５回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7882.43）。

（実施例１１２）
HO-Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ｘ^１３−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１３と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１３の部分は参考例３３で合成した化合物３３Ｆを用い、７回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は、次のHPLC条件で分析した。分析カラムはClarity Oligo-MS C18 (Phenomenex製) (2.6μm、50 x 2.1mm)、移動相Aは100mMヘキサフルオロイソプロパノール、8mMトリエチルアミン水溶液、移動相Bはメタノールを使用し、移動相Bが4分間で10%から25%に変化するグラジェント、流速0.5mL/min、60℃で分析した。化合物のHPLC保持時間は3.0分であった。

（参考例３４）
(３４Ａ)
tert-ブチル N-[(5S)-6-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-5-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-6-オキソ-ヘキシル]カーバメート（化合物３４Ａ）の合成

(2S)-2,6-ビス(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)ヘキサン酸(1.7g, 4.9mmol)、1-(-3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(1.3g, 6.9mmol)、3H-1,2,3-トリアゾール[4,5-b]ピリジン-3-オール(0.67g, 4.9mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（3.0mL, 17mmol）、工程（３３Ｂ）で合成した化合物３３Ｂ(2.1g, 5.4mmol)をジクロロメタン（40mL）に溶解し、室温で４時間撹拌した。さらに、1-(-3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジアミド塩酸塩(1.3g, 6.9mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.0ml, 5.7mmol）を加え、終夜攪拌した。反応終了後、有機層を1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去し、化合物３４Ａを含む粗生成物(3.1g)を得た。これ以上精製せず、全量を次の反応に用いた。
Calcd for C₃₀H₅₁N₃O₉: [M+H]⁺ 599, Found 599.

(３４Ｂ)
(2S)-2,6-ジアミノ-N-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチル]ヘキサンアミドＴＦＡ塩（化合物３４Ｂ）の合成

工程（３４Ａ）で合成した化合物３４Ａを含む粗生成物(3.1g)をジクロロメタン（24mL）/トリフルオロ酢酸(6mL)に溶解させ、室温で90分間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、適量のジクロロメタンを加え、再び溶媒を減圧留去した。続いて、適量のアセトニトリル/蒸留水(4/1)を加え、再び溶媒を減圧留去した。過剰のトリフルオロ酢酸が除去できるまで、上記操作を繰り返した。化合物３４Ｂを含む粗生成物(3.8g)を得た。これ以上精製せず、全量を次の反応に用いた。
Calcd for C₂₀H₃₅N₃O₅: [M+H]⁺ 399, Found 398.

(３４Ｃ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[2-[(2R)-3-ベンジルオキシ-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３４Ｃ）の合成

文献既知化合物の2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ酢酸(WO2012037254)(3.5g, 8.6mmol)、1-(-3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(2.3g, 12mmol)、3H-1,2,3-トリアゾール[4,5-b]ピリジン-3-オール(1.3g, 9.6mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（10mL, 59mmol）、工程（３４Ｂ）で合成した化合物３４Ｂを含む粗生成物をジクロロメタン（80mL）に溶解し、室温で終夜撹拌した。反応終了後、有機層を1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐70：30, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物３４Ｃ（3.5g、収率62%(3工程)）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.50-7.44 (1H, m), 7.39-7.28 (5H, m), 7.17-7.11 (2H, m), 6.94-6.88 (1H, m), 6.30-6.26 (1H, m), 5.37-5.32 (2H, m), 5.09-4.99 (2H, m), 4.57 (2H, s), 4.56-3.11 (30H, m), 2.18 (3H, s), 2.16 (3H, s), 2.07-1.99 (15H, m), 1.97 (3H, s), 1.96-1.34 (6H, m).
Calcd for C₅₂H₇₇N₅O₂₅: [M+H]⁺ 1172, Found 1173.

(３４Ｄ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[2-[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３４Ｄ）の合成

工程（３４Ｃ）で合成した化合物３４Ｃ（3.5g, 3.0mmol）をエタノール（40mL）に溶解した。20%水酸化パラジウム/炭素(wet)（1.2g）を加え、水素雰囲気下、50℃で８時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。アモルファス状の目的物３４Ｄ（3.14g、収率97%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.72-7.67 (1H, m), 7.16 (2H, d, J = 9.1 Hz), 7.04-6.98 (1H, m), 6.27 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.36 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.10-4.99 (2H, m), 4.67-3.07 (30H, m), 2.18 (3H, s), 2.17 (3H, s), 2.08-2.00 (15H, m), 1.98 (3H, s), 1.93-1.33 (6H, m).
Calcd for C₄₅H₇₁N₅O₂₅: [M+H]⁺ 1082, Found 1083.

(３４Ｅ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３４Ｅ）の合成

工程（３４Ｄ）で合成した化合物３４Ｄ（3.14g, 2.9mmol）に適量のピリジンを加え、減圧下、共沸した。ピリジン（10 ml）に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（1.1g, 3.2mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応終了後、トルエン(20mL)、エタノール(1mL)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(1mL)を加え、溶媒を減圧留去した後、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３４Ｅ（2.5g、収率62%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.60-7.55 (1H, m), 7.43 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.35-7.20 (7H, m), 7.17-7.10 (2H, m), 6.92-6.87 (1H, m), 6.83 (4H, d, J = 9.1 Hz), 6.30 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.36-5.30 (2H, m), 5.09-4.95 (2H, m), 4.60-3.07 (36H, m), 2.19-2.14 (6H, m), 2.06-1.99 (15H, m), 1.97 (3H, s), 1.70-1.34 (6H, m).
Calcd for C₆₆H₈₉N₅O₂₇: [M+Na]⁺ 1407, Found 1407.

(３４Ｆ)
酢酸[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[2-[(2S)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]エトキシ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチル（化合物３４Ｆ）の合成

工程（３４Ｅ）で合成した化合物３４Ｅ（2.5g, 1.8mmol）を適量のトルエン/ジクロロメタン(3/1)で共沸した後に、ジクロロメタン（18mL）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.3mL, 7.2mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.48mL, 2.2mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３４Ｆ（2.1g、収率73%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.41 (2H, m), 7.35-7.05 (10H, m), 6.89-6.78 (5H, m), 6.35-6.25 (1H, m), 5.37-5.34 (2H, m), 5.11-4.98 (2H, m), 4.55-3.08 (40H, m), 2.70-2.45 (2H, m), 2.18 (3H, s), 2.17 (3H, s), 2.07-1.99 (15H, m), 1.98-1.94 (3H, m), 1.91-1.31 (6H, m), 1.21-1.02 (12H, m).

（実施例１１３）
HO-Ｘ^１４−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１４と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１４の部分は参考例３４で合成した化合物３４Ｆを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6263.04）。

（実施例１１４）
HO-Ｘ^１４−Ｘ^１４−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１４と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１４の部分は参考例３４で合成した化合物３４Ｆを用い、２回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7154.36）。

（実施例１１５）
HO-Ｘ^１４−Ｘ^１４−Ｘ^１４−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４０）
Ｘの部分をＸ^１４と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１４の部分は参考例３４で合成した化合物３４Ｆを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：8046.64）。

（実施例１１６〜１２７）オリゴヌクレオチドを封入した核酸脂質粒子の調製
ジステアロイルホスファチジルコリン（1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine：以下DSPCと表記，NOF CORPORATION）、コレステロール（Cholesterol：以下Cholと表記，Sigma-Aldrich,Inc.）、国際公開第２０１５／００５２５３に記載されている実施例８の化合物（LPとする）、及びＮ−［メトキシポリ（エチレングリコール）２０００］カルバモイル］−１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−アミン（以下PEG-C-DMAと表記，NOF CORPORATION））を、DSPC:Chol:LP:PEG-C-DMA=10:48:40:2のモル比にてエタノール中、総脂質濃度5mMになるように脂質溶液を調製した。

オリゴヌクレオチド（21e_002, 18e_005, 21m_002, 18e_005, 18m_022, 15e_001, 15ed_001, 18e_008, 18e_025, 18m_008, 15e_002,及び、15ed_002）を、それぞれクエン酸緩衝液（20mM、Citrate Buffer、pH4.0）に溶解し、オリゴヌクレオチド溶液を調製した。

上記の脂質溶液とオリゴヌクレオチド溶液を、LP由来の窒素原子（Ｎ）とオリゴヌクレオチド由来のリン原子（Ｐ）の比率（Ｎ／Ｐ）が３となるように、NanoAssemblr Benchtop（登録商標。Precision Nanosystems）を用いて、付属のマイクロ流路カートリッジ内で混合し（流速：12mL/min，混合体積比率：脂質溶液：オリゴヌクレオチド溶液＝１：３，温度：室温）、核酸脂質粒子の分散液を得た。続いて、核酸脂質粒子の分散液を約２Ｌのリン酸緩衝液（pH7.4）にて１２−１８時間透析（Float-A-Lyzer G2, MWCO:1000kD, Spectra/Por）することにより、エタノール除去及び中和を行い、オリゴヌクレオチドを封入した核酸脂質粒子の精製された分散液を得た。適宜、濃度調整のため、限外濾過（Amicon-Ultra, MWCO:100kD, MILLIPORE）によって核酸脂質粒子の分散液を濃縮した。

実施例１１６〜１２７のオリゴヌクレオチド封入核酸脂質粒子の特性評価を行った。それぞれの特性評価の方法について以下に説明する。

（１）オリゴヌクレオチドの封入率
オリゴヌクレオチドの封入率は、Quant-iT RiboGreen RNA Assay kit（Invitrogen）を用い、添付文書に準じて測定した。すなわち、0.015%Triton X-100界面活性剤存在下及び非存在下において、核酸脂質粒子の分散液中のオリゴヌクレオチドを定量し、次式により封入率を算出した。
｛［界面活性剤存在下におけるオリゴヌクレオチド量］−［界面活性剤非存在下におけるオリゴヌクレオチド量］｝／［界面活性剤存在下におけるオリゴヌクレオチド量］｝ｘ１００（％）
（２）オリゴヌクレオチドと脂質の比率
核酸脂質粒子の分散液中のリン脂質量をリン脂質Ｃ−テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用い、添付文書に準じて測定した。すなわち、1%Triton X-100界面活性剤存在下において、試料中のリン脂質を定量した。
核酸脂質粒子の分散液中のコレステロール及びＬＰ量を逆相クロマトグラフィーにて測定した（System：Agilent 1100series，Column：Chromolith Performance RP-18 endcapped 100-3 monolithic HPLC-column(Merck)，Buffer A：0.01%トリフルオロ酢酸，Buffer B：0.01%トリフルオロ酢酸，メタノール，Gradient（B%）：８２−９７％（０−１７ｍｉｎ），Flow Rate：2mL/min，Temperature：５０℃，Detection：２０５ｎｍ）。
リン脂質量、コレステロール量、及びＬＰ量とリポソームを構成する脂質成分の組成比から総脂質量を算出し、上述（１）の「界面活性剤存在下におけるオリゴヌクレオチド量」から、次式によりオリゴヌクレオチドと脂質の比率を算出した。
［界面活性剤存在下におけるオリゴヌクレオチド濃度］／［総脂質濃度］ (wt/wt)
（３）平均粒子径
リポソームの粒子径は、Zeta Potential/Particle Sizer NICOMPTM 380ZLS（PARTICLE SIZING SYSTEMS）にて測定した。表中の平均粒子径は体積平均粒子径を表し、±以下は、偏差を表す。

結果を表１１に示した。

（表１１）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
核酸脂質粒子 ASO 封入率 ASO/lipid 粒子径
(%) (wt/wt)* (nm)
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
実施例１１６ 21e_002 98 12 60±35
実施例１１７ 18e_005 98 12 69±36
実施例１１８ 21m_002 98 13 67±33
実施例１１９ 18e_005 98 12 61±31
実施例１２０ 18m_022 98 13 59±21
実施例１２１ 15e_001 98 13 57±20
実施例１２２ 15ed_001 99 15 58±19
実施例１２３ 18e_008 97 14 62±36
実施例１２４ 18e_025 98 14 58±25
実施例１２５ 18m_008 98 13 62±28
実施例１２６ 15e_002 98 13 62±33
実施例１２７ 15ed_002 98 14 54±21
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
* ASO/lipid(wt/wt)：オリゴヌクレオチドと脂質の重量比。

以上の結果より、オリゴヌクレオチドが脂質粒子内に封入されており、それらの核酸脂質粒子は、約５０ｎｍから約７０ｎｍの平均粒子径を有していることが明らかとなった。

（実施例１２８）
HO-X^１４−Ａ^m1s-T^e2s-C^m1s-Ｃ^m1s-G^e2s-A^m1s-Ｕ^m1s-G^e2s-Ｇ^m1s-C^m1s-G^e2s-A^m1s-Ａ^m1s-G^e2s-C^m1ｔ-H （配列番号４４）
実施例１１３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005を用い、実施例１１３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6210.94）。

（実施例１２９）
HO-X^１４−Ｕ^m1s-Ｃ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^e2s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1ｔ-H （配列番号４５）
実施例１１３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_006を用い、実施例１１３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から90番目から104番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6201.95）。

（実施例１３０）
HO-X^１４−Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H （配列番号４１）
実施例１１３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_002を用い、実施例１１３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のＧからＴへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン５の5'末端から89番目から103番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6268.98）。

(参考例３５)
（３５A）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[3-(tert-ブトキシアルボニルアミノ)プロピルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３５A）の合成

文献既知化合物の2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ酢酸(WO2012037254)(10g, 24.7mmol)、N-(3-アミノプロピル)カルバミン酸tert-ブチルエステル(4.7ml, 27.1mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(70ml)溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(11.3g, 29.6mmol)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（8.6mL, 49.3mmol）を加え、室温で４０分撹拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、有機層を15%食塩水、0.5N塩酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。溶媒を減圧留去し、表記目的物を含む粗生成物を約14g得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。

（３５B）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-(3-アミノプロピルアミノ)-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート TFA塩（化合物３５B）の合成

工程（３５A）で合成した粗生成物（14g）をジクロロメタン(40ml)に溶解させ、反応が終了するまで、トリフルオロ酢酸を計16ml加えた。反応終了後、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。適量のジエチルエーテルを加えて、デカンテーションした。適量のアセトニトリルを加え、減圧留去した。更に、適量のジクロロメタンを加え、減圧留去した。表記目的物を含む粗生成物を約15.9g得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₁₉H₃₁N₃O₁₀: [M+H]+ 462, Found 462.

（３５C）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[3-[[(4R)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシカルボニルアミノ]プロピルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３５C）の合成

(S)-(+)-1,2-イソプロピリデングリセロール(6.53g, 49.4mmol)、クロロぎ酸4-ニトロフェニル(9.96g, 49.4mmol) をジクロロメタン(200ml)に溶解させ、ピリジン(7.95ml,98.8mmol)を加え、室温で３０分攪拌した。この反応液に、工程（３５B）で合成した粗生成物（15.9g）のジクロロメタン(100ml)溶液、トリエチルアミン(20.5ml,148mmol)を加え、室温で、終夜攪拌した。反応終了後、有機層を0.5N塩酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐65：35, v/v）で精製し、目的物３５Ｃ（9.0g、収率59%(3工程)）を固体として得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.09-7.01 (1H, m), 6.16 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.53-5.46 (1H, m), 5.37 (1H, d, J = 3.6 Hz), 5.22-5.14 (1H, m), 4.53 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.41-3.99 (9H, m), 3.96-3.89 (1H, m), 3.79-3.71 (1H, m), 3.44-3.15 (4H, m), 2.17 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.98 (3H, s), 1.80-1.58 (2H, m), 1.43 (3H, s), 1.37 (3H, s).
Calcd for C₂₆H₄₁N₃O₁₄: [M+Na]+ 642, Found 642.

（３５D）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[3-[[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]プロピルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３５D）の合成

工程（３５C）で合成した化合物(7.87g, 12.7mmol)のメタノール溶液(160ml)にp-トルエンスルホン酸(0.242g, 1.27mmol)を加え、終夜攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去して、表記目的物を含む粗生成物を7.36g得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₂₃H₃₇N₃O₁₄: [M+H]+ 580, Found 580, [M+Na]+ 602, Found 602.

（３５E）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[3-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロピルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３５E）の合成

工程（３５D）で合成した粗生成物(7.36g)にジクロロメタン(150ml)、ピリジン(10ml)を加え、溶媒を減圧留去した。その後、ピリジン(60ml)に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（5.59 g , 16.5 mmol）を加え、室温で30分攪拌した。反応終了後、メタノール(1.03ml,25.4mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（4.42mL, 25.4mmol）溶媒を減圧留去した。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、目的物３５Ｅ（4.51 g、収率40%）を固体として得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.45-7.39 (2H, m), 7.34-7.28 (6H, m), 7.24-7.18 (1H, m), 7.07-6.99 (1H, m), 6.86-6.80 (4H, m), 6.21 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.48-5.41 (1H, m), 5.36 (1H, d, J = 3.6 Hz), 5.19-5.13 (1H, m), 4.52 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.39-3.88 (9H, m), 3.79 (6H, s), 3.50-3.12 (6H, m), 2.92 (1H, d, J = 4.8 Hz), 2.16 (3H, s), 2.05 (3H, s), 1.99 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.80-1.54 (2H, m).
Calcd for C₄₄H₅₅N₃O₁₆: [M+Na]+ 904, Found 904.

（３５F）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[2-[3-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロピルアミノ]-2-オキソ-エトキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３５F）の合成

工程（３５Ｅ）で合成した化合物３５Ｅ（4.51 g, 5.11 mmol）を適量の酢酸エチル/トルエン(1/4)で共沸した後に、ジクロロメタン（90ml）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（3.56 ml, 20.5 mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（1.57 ml, 5.63 mmol）を加え、室温で1時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐50：50, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、目的物３５Ｆ（3.97 g、収率72%）を固体として得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.38 (2H, m), 7.35-7.16 (7H, m), 7.12-7.04 (1H, m), 6.86-6.76 (4H, m), 6.25-6.12 (1H, m), 5.58-5.18 (3H, m), 4.61-4.53 (1H, m), 4.46-3.42 (19H, m), 3.39-3.02 (6H, m), 2.68-2.41 (2H, m), 2.19-2.13 (3H, m), 2.08-2.02 (3H, m), 2.01-1.91 (6H, m), 1.78-1.54 (2H, m), 1.31-0.94 (12H, m).

(参考例３６)
（３６A）[(4R)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メチル N-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)エチル]カルバメート（化合物３６A）の合成

(S)-(+)-1,2-イソプロピリデングリセロール(5.0g, 37.5mmol)、クロロぎ酸4-ニトロフェニル(7.55g, 37.5mmol) をジクロロメタン(150ml)に溶解させ、ピリジン(5.0ml,61.8mmol)を加え、室温で1時間攪拌した。この反応液に、N-(2-アミノエチル)カルバミン酸 tert-ブチル(6g,37.5mmol)のジクロロメタン溶液(40ml)、トリエチルアミン(8.8ml,63.7mmol)を加え、室温で1時間攪拌した。反応終了後、反応終了後、有機層を0.5N塩酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して目的物を含む粗生成物(10.6g)を固体として得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。

（３６B）[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル] N-(2-アミノエチル)カルバメート TFA塩（化合物３６B）の合成

工程（３６Ａ）で合成した粗生成物(10.6g)に、トリフルオロ酢酸(16.6ml)、純水(5.55ml)を加え、室温で1時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。続いて、アセトニトリルを加え、溶媒を減圧留去した。更に、アセトニトリル/純水(4/1)を加え、溶媒を減圧留去した後に、減圧下乾燥した。目的物を含むオイル状の粗生成物(14.3g)を得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。

（３６C）ベンジル N-[(5S)-5-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-6-[2-[[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]カルバメート（化合物３６Ｃ）の合成

N,N′-Di-Cbz-L-lysine(13.7g)のN,N-ジメチルホルムアミド(100ml)溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(15.0g, 40mmol)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（12mL, 66mmol）を加えた。更に、工程（３６Ｂ）で合成した粗生成物(9.7g)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（12mL, 66mmol）のN,N-ジメチルホルムアミド(20ml)溶液を加え、室温で40分攪拌した。反応終了後、酢酸エチルを加え、有機層を15%食塩水、0.5N塩酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して固形物を得た。この固形物を1N塩酸、純水で洗浄後、ジクロロメタン、ジエチルエーテルで洗浄した後に、減圧下乾燥し、目的物を含む粗生成物(10.5g)を得た。
Calcd for C₂₈H₃₈N₄O₉: [M+H]+ 575, Found 575.

（３６D）[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロピル] N-[2-[[(2S)-2,6-ジアミノヘキサノイル]アミノ]エチル]カルバメート塩酸塩（化合物３６D）の合成

工程（３６C）で合成した粗生成物(9.5g)をテトラヒドロフラン/1規定塩酸(36ml)に溶解させ、10%パラジウム炭素(2.0g)を加え、水素雰囲気下、室温で2.5時間攪拌した。反応終了後、ろ過をした。溶媒を減圧留去した後に、高速濃縮装置V-10（バイオタージ）で減圧下乾燥した。表記目的化合物の粗生成物(6.4g)を得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。

（３６E）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３６E）の合成

文献既知化合物の2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシ酢酸(WO2012037254)(2.64g, 6.5mmol)、工程（３６D）で合成した粗生成物(1.37g, 3.6mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(30ml)溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(3.0g, 8.0mmol)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（3.8mL, 21.7mmol）を加え、室温で４０分撹拌した。反応終了後、ジエチルエーテル(500ml)を加え、沈殿した残渣を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。アモルファス状の目的物（2.23 g、収率57%）を得た。
¹H-NMR (DMSO-D₆) δ: 8.14-8.08 (1H, m), 8.03-7.91 (2H, m), 7.33-7.22 (2H, m), 7.16-7.10 (1H, m), 5.27-5.23 (2H, m), 5.01-4.93 (2H, m), 4.59-4.52 (2H, m), 4.26-3.55 (17H, m), 3.36-3.30 (2H, m), 3.18-2.86 (7H, m), 2.14-2.06 (6H, m), 2.04-1.98 (6H, m), 1.94-1.89 (6H, m), 1.88-1.79 (6H, m), 1.71-1.48 (2H, m), 1.47-1.35 (2H, m), 1.32-1.15 (2H, m).
Calcd for C₄₄H₆₈N₆O₂₅: [M+H]+ 1081, Found 1081.

（３６F）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３６F）の合成

工程（３６E）で合成した化合物(7.36g,2.1mmol)にピリジン(10ml)を加え、溶媒を減圧留去した。この操作を3回繰り返した。その後、ピリジン(10ml)に溶解させ、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（0.77 g , 2.3mmol）を加え、室温で30分攪拌した。反応終了後、エタノール(1.0ml)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.0mL）を加え、溶媒を減圧留去した。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物（1.17 g、収率41%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.38 (2H, m), 7.36-6.95 (10H, m), 6.86-6.79 (4H, m), 6.33-6.27 (1H, m), 5.53-4.99 (4H, m), 4.57-3.07 (30H, m), 2.21-2.14 (6H, m), 2.08-1.94 (18H, m), 1.92-1.07 (6H, m).
Calcd for C₆₅H₈₆N₆O₂₇: [M+Na]+ 1406, Found 1406.

（３６G）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[2-[[(5S)-5-[[2-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシアセチル]アミノ]-6-[2-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエチル-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]エチルアミノ]-6-オキソ-ヘキシル]アミノ]-2-オキソ-エトキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３６G）の合成

工程（３６Ｆ）で合成した化合物３６Ｆ（1.17 g, 0.85 mmol）を適量のジクロロメタン/トルエン(1/4)で共沸した後に、ジクロロメタン（8ml）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（0.59 ml, 3.4 mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（0.23 ml, 1.0 mmol）を加え、室温で1時間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：酢酸エチル/メタノール(5/1)＝100：0‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３６Ｇ（0.81 g、収率61%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.47-7.40 (2H, m), 7.36-7.10 (11H, m), 6.95-6.86 (1H, m), 6.85-6.78 (4H, m), 6.34-6.28 (1H, m), 5.56-5.33 (2H, m), 5.12-4.98 (2H, m), 4.52-3.04 (36H, m), 2.72-2.46 (2H, m), 2.20-2.15 (6H, m), 2.08-1.94 (18H, m), 1.93-1.81 (2H, m), 1.67-1.52 (2H, m), 1.46-1.34 (2H, m), 1.22-0.98 (12H, m).

(参考例３７)
（３７A）[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-[3-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)プロポキシ]テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７A）の合成

N-(3-ヒドロキシプロピル)カルバミン酸ベンジル(6.4g, 30.8mmol)と、文献既知化合物の[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4,6-トリアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート (WO2011053614)(10 g, 25.7 mmol)とのジクロロメタン(200ml)懸濁溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸（450 μl, 5.1 mmol）を加え、45度で４時間攪拌した。反応終了後、溶媒を半分ほど減圧留去して濃縮した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。イソプロピルエーテル(100m)を加え、3時間攪拌した。得られた固形物をろ過し、目的物３７A（11.9 g）を得た。これ以上、精製せずに次の反応に用いた。

1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.43-7.29 (5H, m), 6.26 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.36-5.29 (1H, m), 5.12 (1H, d, J = 12.1 Hz), 5.08 (1H, d, J = 12.1 Hz), 5.03-4.95 (2H, m), 4.33 (1H, d, J = 9.1 Hz), 4.21-4.06 (3H, m), 4.01-3.93 (1H, m), 3.80-3.73 (1H, m), 3.62-3.49 (1H, m), 3.44-3.35 (1H, m), 3.14-3.04 (1H, m), 2.15 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.95 (3H, s), 1.88-1.75 (1H, m), 1.69-1.56 (1H, m).
Calcd for C₂₅H₃₄N₂O₁₁: [M+H]+ 539, Found 539.

（３７B）[(2R,3R,4R,5R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-(3-アミノプロポキシ)テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート塩酸塩（化合物３７B）の合成

工程（３７Ａ）で合成した化合物３７Ａ(10 g, 18.6 mmol)をテトラヒドロフラン（200ml）/1N塩酸(20ml)に溶解した。10% パラジウム/炭素(wet)（1g）を加え、水素雰囲気下、室温で１時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物３７Ｂを含む粗生成物(8.97g)を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₁₇H₂₈N₂O₉: [M+H]+ 405, Found 405.

（３７C）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミド]-3-(9H-フルオレン-9-イルメトキシカルボニルアミノ)-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７C）の合成

N-[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]-L-アスパラギン酸 (1.7g, 4.78mmol)、工程（３７B）で合成した化合物(5.48g, 12.4mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(15ml)溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(4.7g, 12.4mmol)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（5.8mL, 33.5mmol）を加え、室温で１時間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を15%食塩水、0.5N塩酸、飽和食塩水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去して固形物を得た。この固形物をイソプロピルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥し、目的物３７Ｃを含む粗生成物(5.4g)を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₅₃H₆₉N₅O₂₂: [M+H]+ 1128, Found 1129, [M+Na]+ 1151, Found 1151.

（３７D）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-アミノ-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート TFA塩（化合物３７D）の合成

工程（３７C）で合成した化合物(5.4g, 4.8mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(25ml)溶液に、ピペリジン(0.57ml,5.7mmol)を加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、トリフルオロ酢酸(0.31ml)を加えた。反応液を適量のジエチルエーテルに添加し、沈殿した残渣を得た。0.1%トリフルオロ酢酸水溶液と0.1%トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液を溶離液とした逆相HPLC（GLサイエンス、Inertsil ODS-3）にて分離精製を行い、目的物が含まれるフラクションをまとめ、溶媒を減圧留去した。アモルファス状の目的物（2.７ g、収率55%）を得た。
¹H-NMR (DMSO-D₆) δ: 8.34-8.26 (1H, m), 8.14-8.05 (4H, m), 7.90-7.82 (2H, m), 5.25-5.21 (2H, m), 5.00-4.92 (2H, m), 4.50-4.45 (2H, m), 4.08-3.82 (5H, m), 3.80-3.63 (3H, m), 3.51-3.39 (3H, m), 3.19-3.02 (4H, m), 2.70-2.53 (2H, m), 2.14-2.05 (6H, m), 2.04-1.96 (6H, m), 1.93-1.86 (6H, m), 1.84-1.75 (6H, m), 1.69-1.57 (4H, m).
Calcd for C₃₈H₅₉N₅O₂₀: [M+H]+ 905, Found 906.

（３７E）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-[[(4R)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イル]メトキシカルボニルアミノ]-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７E）の合成

工程（３７D）で合成した化合物(2.7g, 2.6mmol)を用い、工程（３５C）と同様にして、アモルファス状の目的物0.77 g、収率27%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.19-7.12 (1H, m), 6.96-6.85 (2H, m), 6.83-6.75 (1H, m), 6.16 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.41-5.34 (2H, m), 5.25-5.08 (2H, m), 4.66 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.51-3.87 (16H, m), 3.79-3.72 (1H, m), 3.64-3.14 (6H, m), 3.01-2.91 (1H, m), 2.68-2.57 (1H, m), 2.22-2.14 (6H, m), 2.10-1.93 (18H, m), 1.90-1.63 (4H, m), 1.42 (3H, s), 1.35 (3H, s).
Calcd for C₄₅H₆₉N₅O₂₄: [M+Na]+ 1086, Found 1086.

（３７F）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-[[(2R)-2,3-ジヒドロキシプロポキシ]カルボニルアミノ]-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７F）の合成

工程（３７Ｅ）で合成した化合物(0.77g, 0.72mmol)を用い、工程（３５Ｄ）と同様にして、目的物３７Fを含む粗生成物(0.74g)を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₄₂H₆₅N₅O₂₄: [M+H]+ 1024, Found 1024.

（３７G）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７G）の合成

工程（３７Ｆ）で合成した化合物(0.74g)を用い、工程（３５Ｅ）と同様にして、アモルファス状の目的物(0.63 g、収率66%(2工程)）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.44-7.38 (2H, m), 7.33-7.09 (9H, m), 6.86-6.69 (6H, m), 6.22 (1H, d, J = 7.9 Hz), 5.38-5.33 (2H, m), 5.23-5.09 (2H, m), 4.66 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.54-4.42 (2H, m), 4.24-3.87 (16H, m), 3.79 (6H, s), 3.57-3.14 (8H, m), 2.97-2.87 (1H, m), 2.66-2.50 (1H, m), 2.19-2.13 (6H, m), 2.08-1.91 (10H, m), 1.87-1.65 (4H, m).
Calcd for C₆₃H₈₃N₅O₂₆: [M+Na]+ 1349, Found 1349.

（３７H）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[(3S)-4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-[[(2R)-3-[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]-4-オキソ-ブタノイル]アミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物３７H）の合成

工程（３７G）で合成した化合物(0.63g, 0.48mmol)を用い、工程（３５Ｆ）と同様にして、アモルファス状の目的物(0.52 g、収率71%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.45-7.38 (2H, m), 7.34-6.95 (9H, m), 6.88-6.62 (6H, m), 6.18-6.10 (1H, m), 5.39-5.32 (2H, m), 5.24-5.05 (2H, m), 4.69-4.60 (1H, m), 4.52-4.41 (2H, m), 4.34-2.90 (32H, m), 2.68-2.42 (3H, m), 2.20-2.14 (6H, m), 2.09-1.91 (18H, m), 1.87-1.66 (4H, m), 1.21-0.97 (12H, m).

(参考例３８)
（３８A）ベンジル N-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピル]カルバメート（化合物３８A）の合成

工程（３７A）で合成した化合物(12.4g, 23mmol) のエチルアルコール(200ml)懸濁溶液に、28%ナトリウムメトキシドメタノール溶液(0.85ml)加え、室温で攪拌した。反応の進行に伴い、一度、クリアな溶液になる。60分間放置すると沈殿物が得られた。沈殿物をろ過し、エチルアルコール、ジイソプロピルエーテルで洗浄した後に、減圧下乾燥した。目的物３８Ａを含む粗生成物 (10g)を固体として得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
1H-NMR (DMSO-D₆) δ: 7.60 (1H, d, J = 9.1 Hz), 7.40-7.17 (5H, m), 5.01 (2H, s), 4.62-4.55 (2H, m), 4.49 (1H, d, J = 4.2 Hz), 4.20 (1H, d, J = 8.5 Hz), 3.76-3.27 (6H, m), 3.08-2.99 (2H, m), 1.81 (3H, s), 1.66-1.56 (2H, m).
Calcd for C₁₉H₂₈N₂O₈: [M+Na]+ 435, Found 435.

（３８B）N-[(2R,3R,4R,5R,6R)-2-(3-アミノプロポキシ)-4,5-ジヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロピラン-3-イル]アセトアミド塩酸塩（化合物３８B）の合成

工程（３８A）で合成した化合物(22.8g, 55.3mmol)をテトラヒドロフラン（280ml）/1N塩酸(61ml)に溶解した。10% パラジウム/炭素(wet)（5.56g）を加え、水素雰囲気下、室温で3.5時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去した。適量のエチルアルコールを加えて生じた固形物をろ過し、エチルアルコール、ジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥した。目的物３８Ｂを含む粗生成物(17g)を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
1H-NMR (D₂O) δ: 4.27 (1H, d, J = 8.5 Hz), 3.90-3.50 (8H, m), 2.93 (2H, t, J = 7.0 Hz), 1.89 (3H, s), 1.82-1.75 (2H, m).

（３８C）9H-フルオレン-9-イルメチル N-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピル]カルバメート（化合物３８C）の合成

工程（３８B）で合成した化合物(16.4g, 52.1mmol) をテトラヒドロフラン（200ml）/純水(50ml)に溶解し、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（12.7mL, 72.9mmol）を加えた。氷冷下、N-[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニルオキシ]スクシンイミド(21.1g, 62.5mmol)加え、室温で1.5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。ジエチルエーテル(100ml)を加え、１時間攪拌した。固形物をエチルアルコール、酢酸エチル、ジエチルエーテルで順次洗浄した後に、減圧下乾燥し、目的物３８Ｃを含む粗生成物(22.9g)を得た。
1H-NMR (DMSO-D₆) δ: 7.89 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.69 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.61 (1H, d, J = 9.1 Hz), 7.42 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.33 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.24 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.60-4.57 (2H, m), 4.49 (1H, d, J = 4.2 Hz), 4.31-4.18 (4H, m), 3.76-3.28 (8H, m), 3.05-2.97 (2H, m), 1.81 (3H, s), 1.62-1.57 (2H, m).
Calcd for C26H32N2O8: [M+Na]+ 523, Found 523.

（３８Ｄ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]-6-[3-(9H-フルオレン-9-イルメトキシカルボニルアミノ)プロポキシ]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物３８Ｄ）の合成

工程（３８Ｃ）で合成した化合物(1.56g, 3.1mmol) のピリジン(20ml)懸濁液に、4,4'-ジメトキシトリチルクロリド（1.27 g , 3.7mmol）を加え、室温で30分攪拌した。続いて、無水酢酸(1.18ml, 12.5mmol)を加え、室温で20時間攪拌した。反応終了後、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.1mL, 6.2mmol）、エチルアルコール(2ml)を加え、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝75：25‐0：100, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３８Ｄ（2.8 g、quant.）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.77 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.62 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.43-7.18 (13H, m), 6.83-6.79 (4H, m), 6.03 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.55 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.14-5.03 (2H, m), 4.46-4.43 (3H, m), 4.24-4.04 (2H, m), 3.97-3.91 (1H, m), 3.85-3.82 (1H, m), 3.77 (6H, s), 3.72-3.71 (1H, m),3.54-3.33 (3H, m), 3.09-3.04 (2H, m), 2.03 (3H, s), 1.89 (6H, s), 1.65-1.56 (2H, m).
Calcd for C₅₂H₅₅NO₁₂: [M+Na]+ 908, Found 909.

（３８Ｅ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-4-アセトキシ-6-(3-アミノプロポキシ)-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物３８Ｄ）の合成

工程（３８Ｄ）で合成した化合物(2.49g, 2.8mmol) のジクロロメタン（8ml）溶液に、ピペリジン(0.45ml,4.5mmol)を加え、室温で攪拌した。反応が完了しない場合は、適宜ピペリジンを追加した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝100：0‐85：15, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物３８Ｅ（1.48 g、収率79%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.18 (9H, m), 6.83-6.80 (4H, m), 5.55 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.51 (1H, d, J = 9.1 Hz), 5.27 (1H, dd, J = 11.2, 3.3 Hz), 4.64 (1H, d, J = 8.5 Hz), 3.98-3.90 (2H, m), 3.84-3.82 (1H, m), 3.79 (6H, s), 3.75-3.74 (1H, m), 3.58-3.56 (1H, m), 3.35 (1H, dd, J = 9.1, 5.4 Hz), 3.07 (1H, t, J = 8.5 Hz), 2.82-2.74 (4H, m), 2.01 (3H, s), 1.96 (3H, s), 1.89 (3H, s), 1.74-1.69 (2H, m).
Calcd for C₃₇H₄₅NO₁₀: [M+Na]+ 687, Found 687.

(参考例３９)
（３９Ａ）ベンジル 2-[[2-ベンジルオキシ-3-[(2-ベンジルオキシ-2-オキソ-エチル)カルバモイルオキシ]プロポキシ]カルボニルアミノ]アセテート（化合物３９Ａ）の合成

2-ベンジルオキシ-1,3-プロパンジオール(2.5g,14mmol)、クロロぎ酸4-ニトロフェニル(5.8g, 29mmol) をテトラヒドロフラン(100ml)に溶解させ、ピリジン(5.0ml,61.8mmol)を加え、室温で20分攪拌した。析出した固体をろ過した後に、テトラヒドロフラン(70ml)加えた。続いて、グリシンベンジルエステル TFA塩(9.2g,33mmol)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（9.6mL, 55mmol）を加え、室温で終夜攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝100：0‐40：60, v/v）で精製し、ガム状の目的物３９Ａ（6.5 g、収率84%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.37-7.33 (15H, m), 5.48 (2H, t, J = 5.4 Hz), 5.18 (4H, s), 4.64 (2H, s), 4.23 (4H, d, J = 5.4 Hz), 3.99 (4H, d, J = 5.4 Hz), 3.84 (1H, t, J = 5.4 Hz).
Calcd for C₃₀H₃₂N₂O₉: [M+H]+ 565, Found 565, [M+Na]+ 587, Found 587

（３９Ｂ）2-[[3-(カルボキシメチルカルバモイルオキシ)-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]酢酸（化合物３９Ｂ）の合成

工程（３９Ａ）で合成した化合物３９Ａ(7.3g, 2.8mmol) のテトラヒドロフラン（200ml）/純水(50ml)に溶解した。20%水酸化パラジウム-活性炭素 (約50%含水)（3g）を加え、水素雰囲気下、室温で５時間激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物３９Ｂを含む粗生成物(3.2g)を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
1H-NMR (D₂O) δ: 4.21-4.14 (5H, m), 3.86 (4H, s).

（３９C）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[2-[[3-[[2-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルl-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-2-オキソ-エチル]カルバモイルオキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]アセチル]アミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物３９Ｃ）の合成

工程（３９Ｂ）で合成した化合物３９Ｂ(0.31g,1.05mmol)、工程（３８Ｅ）で合成した化合物３８Ｅ(1.47g,2.21mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（0.91mL, 5.27mmol）のN,N-ジメチルホルムアミド(9ml)溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(11.3g, 29.6mmol)を加え、室温で3時間撹拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテル(計185ml)に滴下した。上澄みの溶媒を除去した後に得られたゼリー状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝100：0‐15：85, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、目的物３９C（1.05 g、収率63%）を固体として得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.17 (18H, m), 6.83-6.80 (8H, m), 6.70-6.27 (2H, m), 5.56-5.54 (2H, m), 5.10 (2H, d, J = 10.9 Hz), 4.49-3.02 (44H, m), 2.01 (6H, s), 1.96 (6H, s), 1.90 (6H, s), 1.80-1.63 (4H, m).
Calcd for C₈₁H₉₈N₆O₂₇: [M+Na]+ 1611, Found 1611

（３９Ｄ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[2-[[3-[[2-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-2-オキソ-エチル]カルバモイルオキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]アセチル]アミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物３９Ｄ）の合成

工程（３９Ｃ）で合成した化合物３９Ｃ（0.47g, 0.30 mmol）を適量の酢酸エチル/トルエン(1/1)で共沸した後に、ジクロロメタン（3ml）に溶解した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン（210μl, 1.18 mmol）、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（79μl, 0.36mmol）を加え、室温で1時間撹拌した。更に、2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホロアミジト（20μl, 0.09mmol）を加え、室温で15分間撹拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐85：15, v/v、1%トリエチルアミン含有）で精製し、アモルファス状の目的物３９Ｄ（0.34g、収率64%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.17 (18H, m), 6.87-6.70 (8H, m), 6.29-6.06 (2H, m), 5.55 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.11 (2H, d, J = 10.9 Hz), 4.47-3.02 (47H, m), 2.63 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.02 (6H, s), 1.96 (6H, s), 1.90 (6H, s), 1.80-1.64 (4H, m), 1.17 (12H, d, J = 6.7 Hz).

（４０Ａ）ベンジル 2-[[3-ベンジルオキシ-2-[(2-ベンジルオキシ-2-オキソ-エチル)カルバモイルオキシ]プロポキシ]カルボニルアミノ]アセテート（化合物４０Ａ）の合成

2-ベンジルオキシ-1,3-プロパンジオールの代わりに、(+/-)-3-ベンジルオキシ-1,2-プロパンジオール(1.0g,5.5mmol)を用い、工程（３９Ａ）と同様にして、目的物４０Ａ（2.8 g、収率90%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.30 (15H, m), 5.37-5.35 (2H, m), 5.17-5.12 (5H, m), 4.56-4.51 (2H, m), 4.33-4.30 (2H, m), 4.03-3.94 (4H, m), 3.61 (2H, d, J = 5.4 Hz).
Calcd for C₃₀H₃₂N₂O₉: [M+Na]+ 587, Found 587

（４０Ｂ）2-[[2-(カルボキシメチルカルバモイルオキシ)-3-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]酢酸（化合物４０Ｂ）の合成

化合物３９Ａの代わりに、化合物４０Ａ(2.8g,5.0mmol)を用い、工程（３９Ｂ）と同様にして、目的物４０Ｂを含む粗生成物（1.2g）を得た。
1H-NMR (D₂O) δ: 4.32-4.19 (3H, m), 3.94-3.87 (4H, m), 3.81-3.71 (2H, m).

（４０Ｃ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[2-[[2-[[2-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-2-オキソ-エチル]カルバモイルオキシ]-3-ヒロドキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]アセチル]アミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニルl-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物４０Ｃ）の合成

化合物３９Ｂの代わりに、化合物４０Ｂ(0.31g,1.05mmol)を用い、工程（３９Ｃ）と同様にして、目的物４０Ｃ（0.74 g、収率44%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.40-7.18 (18H, m), 6.81 (8H, dd, J = 9.1, 3.0 Hz), 6.70-6.50 (1H, m), 6.16-6.02 (1H, m), 5.56-5.54 (2H, br), 5.11-5.00 (2H, m), 4.53-2.99 (44H, m), 2.01 (6H, s), 1.95 (6H, s), 1.88 (6H, s), 1.77-1.68 (4H, m).
Calcd for C₈₁H₉₈N₆O₂₇: [M+Na]+ 1611, Found 1611

（４０Ｄ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[[2-[[2-[[2-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-2-オキソ-エチル]カルバモイルオキシ]-3-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]アセチル]アミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物４０Ｄ）の合成

化合物３９Ｃの代わりに、化合物４０Ｃ(0.31g,1.05mmol)を用い、工程（３９Ｄ）と同様にして、目的物４０Ｄ（0.60g、収率72%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.38-7.18 (18H, m), 7.13-6.97 (1H, m), 6.83-6.81 (8H, m), 6.58-6.36 (1H, m), 5.56-5.52 (2H, m), 5.10-5.04 (2H, m), 4.46-2.97 (47H, m), 2.65-2.63 (2H, m), 2.02 (6H, s), 1.95 (3H, s), 1.94 (3H, s), 1.90 (3H, s), 1.89 (3H, s), 1.77-1.67 (4H, m), 1.20-1.16 (12H, m).

（実施例１３１）
HO-X^１６−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H)（配列番号４０）
Xの部分をＸ^１６と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１６の部分は参考例３６で合成した化合物３６Ｇを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6261.97）

（実施例１３２）
HO-X^１５−X^１５−X^１５−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Xの部分をＸ^１５と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１５の部分は参考例３５で合成した化合物３５Ｆを用い、３回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6917.09）

（実施例１３３）
X^１８−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Xの部分をＸ^１８と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１８の部分は参考例３９で合成した化合物３９Ｄを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6247.96）

（実施例１３４）
HO-X^１５−X^１５−X^１５-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１３２で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.1を用い、実施例１３２と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6919.09）

（実施例１３５）
HO-X^１５−X^１５−X^１５-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t -H（配列番号４５）
実施例１３２で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_006.1を用い、実施例１３２と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から90番目から104番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6884.07）

（実施例１３６）
HO-X^１５−X^１５−X^１５−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４２）
実施例１３２で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_001を用い、実施例１３２と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から107番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7276.10）

（実施例１３７）
HO-X^１５−X^１５−X^１５−Ａ^m1s−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４６）
実施例１３２で使用した配列の代わりに上記の配列である17e_001を用い、実施例１３２と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から108番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：7636.19）

（実施例１３８）
X^１8−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.1を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6250.00）

（実施例１３９）
X^１8-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４５）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_006.1を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から90番目から104番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6214.96）

（実施例１４０）
X^１8−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_001を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から107番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6607.02）

（実施例１４１）
X^１8−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_002を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6609.03）

（実施例１４２）
X^１8-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４８）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_003を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から90番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6586.00）

（実施例１４３）
X^１８−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_001.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6233.97）

（実施例１４４）
X^１8−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6235.97）

（実施例１４５）
X^１8-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４５）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_006.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から90番目から104番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6200.94）

（実施例１４６）
X^１8−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_001.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から107番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6593.02）

（実施例１４７）
X^１8−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_002.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6595.01）

（実施例１４８）
X^１8-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４８）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である16e_003.5を用い、実施例１３３と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から90番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6571.98）

（実施例１４９）
HO-X^１６−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例１３１で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_001.5を用い、実施例１３１と同様に合成を行った。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6247.99）

（実施例１５０）
X^１９−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Xの部分をＸ^１９と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１９の部分は参考例４０で合成した化合物４０Ｄを用い、１回縮合した。

（実施例１５１）
X^１７−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Xの部分をＸ^１７と置き換えて、実施例９１と同様に合成を行った。Ｘ^１７の部分は参考例３７で合成した化合物３７Ｈを用い、１回縮合した。

本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6204.97）

(参考例４１)
（４１Ａ）3-[[2-ベンジルオキシ-3-[(3-ベンジルオキシ-3-オキソ-プロピル)カルバモイルオキシ]プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパン酸ベンジルエステル（化合物４１Ａ）の合成

工程(３９Ａ)で使用したグリシンベンジルエステル TFA塩のかわりに、3-アミノプロパン酸ベンジルエステルTFA塩(2.4g,8.17mmol)を用い、工程(３９Ａ)と同様にして、目的物４１A（1.62g、収率80%）を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 7.39-7.27 (15H, m), 5.21 (2H, br s), 5.14 (4H, s), 4.63 (2H, s), 4.24-4.10 (4H, m), 3.79-3.74 (1H, m), 3.48-3.44 (4H, m), 2.59 (4H, t, J = 6.0 Hz).Calcd for C₃₂H₃₆N₂O₉: [M+H]+ 593, Found 593, [M+Na]+ 615, Found 615

（４１Ｂ）3-[[3-(2-カルボキシエチルカルバモイルオキシ)-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパン酸（化合物４１Ｂ）の合成

工程(３９Ｂ)で使用した化合物３９Ａのかわりに、化合物４１Ａ(1.62g,2.73mmol)を用い、工程(３９Ｂ)と同様にして、目的物４１Ｂ（0.89g、quant）を得た。
1H-NMR (D2O) δ: 4.22-4.04 (5H, m), 3.46-3.32 (4H, m), 2.57 (4H, t, J = 6.7 Hz).

（４１C）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[3-[[3-[[3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-オキソ-プロピル]カルバモイルオキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパノイルアミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル]アセテート（化合物４１C）の合成

工程(３９Ｃ)で使用した化合物３９Ｂのかわりに、化合物４１Ｂ(300mg,0.93mmol)を用い、工程(３９Ｃ)と同様にして、目的物４１Ｃ（950mg、収率63%）を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 7.32-7.24 (18H, m), 6.82-6.80 (8H, m), 6.64-6.61 (1H, br), 6.27-6.24 (1H, br), 5.91-5.88 (1H, br), 5.56 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.10 (2H, d, J = 11.5 Hz), 4.46-3.05 (43H, m), 2.47-2.37 (4H, m), 2.02 (6H, s), 1.98 (6H, s), 1.90 (6H, s), 1.78-1.67 (4H, m).
Calcd for C₈₃H₁₀₂N₆O₂₇: [M+Na]+ 1638, Found 1638

（４１D）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[3-[[3-[[3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-オキソ-プロピル]カルバモイルオキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ) ホスファニルl]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパノイルアミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物４１D）の合成

工程(３９Ｄ)で使用した化合物３９Ｃのかわりに、化合物４１Ｃ(945mg,0.58mmol)を用い、工程(３９Ｄ)と同様にして、目的物４１Ｄ（638mg、収率60%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.39-7.18 (18H, m), 6.85-6.78 (8H, m), 6.73-6.64 (1H, m), 6.40-6.23 (1H, m), 5.83-5.72 (1H, m), 5.56 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.13-5.04 (2H, m), 4.45-4.35 (2H, m), 4.22-3.30 (40H, m), 3.22-3.03 (4H, m), 2.64 (2H, t, J = 6.0 Hz), 2.54-2.32 (4H, m), 2.02 (6H, s), 2.00-1.95 (6H, m), 1.90 (6H, s), 1.83-1.59 (4H, m), 1.20-1.10 (12H, m).

(参考例４２)
（４２Ａ）4-[[2-ベンジルオキシ-3-[(4-ベンジルオキシ-4-オキソ-ブチル)カルバモイルオキシ]プロポキシ]カルボニルアミノ]ブタン酸ベンジルエステル（化合物４２Ａ）の合成

工程(３９Ａ)で使用したグリシンベンジルエステル TFA塩のかわりに、4-アミノブタン酸ベンジルエステルTFA塩(1.30g,4.21mmol)を用い、工程(３９Ａ)と同様にして、目的物４２A（0.85g、収率78%）を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 7.38-7.27 (15H, m), 5.11 (4H, s), 4.80 (2H, br s), 4.63 (2H, s), 4.19-4.15 (4H, m), 3.77-3.75 (1H, m), 3.23-3.18 (4H, m), 2.40 (4H, t, J = 7.3 Hz), 1.88-1.81 (4H, m).
Calcd for C₃₄H₄₀N₂O₉: [M+H]+ 621, Found 622, [M+Na]+ 643, Found 644

（４２Ｂ）4-[[3-(3-カルボキシプロピルカルバモイルオキシ)-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ブタン酸（化合物４２Ｂ）の合成

工程(３９Ｂ)で使用した化合物３９Ａのかわりに、化合物４２Ａ(0.85g,1.4mmol)を用い、工程(３９Ｂ)と同様にして、目的物４２Ｂ（0.49g、quant）を得た。
1H-NMR (D2O) δ: 4.19-4.05 (5H, m), 3.19-3.12 (4H, m), 2.36-2.27 (4H, m), 1.83-1.73 (4H, m).
（４２C）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[4-[[3-[[4-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル] テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-4-オキソ-ブチル] カルバモイルオキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ブタノイルアミノ] プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル]アセテート（化合物４２C）の合成

工程(３９Ｃ)で使用した化合物３９Ｂのかわりに、化合物４２Ｂ(300mg,0.86mmol)を用い、工程(３９Ｃ)と同様にして、目的物４２Ｃ（1.16g、収率82%）を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 7.31-7.24 (18H, m), 6.82-6.80 (8H, m), 6.68-6.65 (3H, m), 5.91-5.84 (1H, m), 5.56 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.10 (2H, d, J = 10.9 Hz), 4.45 (2H, d, J = 8.5 Hz), 4.23-3.12 (40H, m), 2.31-2.22 (4H, m), 2.01 (6H, s), 1.98 (6H, s), 1.90 (6H, s), 1.81-1.68 (8H, m).
Calcd for C₈₅H₁₀₆N₆O₂₇: [M+Na]+ 1666, Found 1667

（４２D）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[3-[[3-[[3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-4-オキソ-ブチル]カルバモイルオキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ) ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ブタノイルアミノ]プロポキシ]-4-アセトキシ-2-[[ビス(4-メトキシフェニル)-フェニル-メトキシ]メチル]テトラヒドロピラン-3-イル] アセテート（化合物４２D）の合成

工程(３９Ｄ)で使用した化合物３９Ｃのかわりに、化合物４２Ｃ(1.16g,0.71mmol)を用い、工程(３９Ｄ)と同様にして、目的物４２Ｄ（795mg、収率61%）を得た。
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.40-7.17 (18H, m), 6.85-6.77 (8H, m), 6.72-5.65 (5H, m), 5.56 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.11-5.03 (2H, m), 4.46-4.35 (2H, m), 4.25-3.02 (42H, m), 2.65 (2H, t, J = 6.0 Hz), 2.39-2.16 (4H, m), 2.02 (6H, s), 1.99-1.94 (6H, m), 1.90 (6H, s), 1.87-1.59 (8H, m), 1.18 (12H, d, J = 6.7 Hz).

(参考例４３)
（４３Ａ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-3,4-ジアセトキシ-6-(5-アミノペントキシ)テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート塩酸塩（化合物４３Ａ）の合成

工程（２１Ａ）で合成した化合物２１Ａ(3.87 g, 6.83 mmol)をテトラヒドロピラン（32ml）/ 1Ｎ塩酸（8ml）に溶解した。10%パラジウム/炭素(wet)（2g）を加え、水素雰囲気下、室温で激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して目的物４３Ａ(3.1g、収率97%)の粗生成物を得た。これ以上精製せずに次の反応に用いた。
Calcd for C₁₉H₃₂N₂O₉: [M+H]⁺ 433, Found 433.

（４３Ｂ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[5-[[3-[5-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシペンチルカルバモイルオキシ]-2-ベンジルオキシ-プロポキシ]カルバモイルアミノ]ペントキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物４３Ｂ）の合成

2-ベンジルオキシ-1,3-プロパンジオール(600mg,3.29mmol)、クロロぎ酸4-ニトロフェニル(1.39g, 6.91mmol) をテトラヒドロフラン(22ml)に溶解させ、ピリジン(1.1ml,13.2mmol)を加え、室温で15分攪拌した。析出した固体をろ過した後に、テトラヒドロフラン(16ml)加えた。続いて、工程（４３Ａ）で合成した化合物（４３Ａ） (3.09g,6.59mmol)のテトラヒドロフラン(15ml)/ジクロロメタン(5ml)溶液とN,N-ジイソプロピルエチルアミン（3.4mL, 19.8mmol）を加え、４０℃で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧留去した。ジクロロメタンを加え、有機層を0.5N塩酸、飽和食塩水、0.2N水酸化ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、溶媒を減圧留去し、粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝100：0‐90：10, v/v）で精製し、目的物４３Ｂをメインに含む混合物（2.1 g）を得た。

Calcd for C₅₀H₇₄N₄O₂₃ : [M+H]⁺ 1099, Found 1099. [M+Na]⁺ 1121, Found 1121.

（４３Ｃ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[5-[[3-[5-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシペンチルカルバモイルオキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]ペントキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物４３Ｃ）の合成

工程（４３Ｂ）で得られた４３Ｂを含む混合物(2.1 g)をテトラヒドロピラン（20ml）/純水（1ml）に溶解した。1Ｎ塩酸（0.38ml）、10%パラジウム/炭素(wet)（1g）を加え、水素雰囲気下、室温で激しく攪拌した。反応終了後、ろ過し、得られた通過液を減圧留去して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール＝100：0‐90：15, v/v）で精製し、目的物４３Ｃ（1.38 g,収率72%）を固体として得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.10-5.96 (1H, m), 5.38-4.94 (6H, m), 4.70-4.64 (2H, m), 4.23-3.44 (19H, m), 3.20-3.15 (4H, m), 2.15 (6H, s), 2.05 (6H, s), 2.01 (6H, s), 1.97 (6H, s), 1.67-1.38 (12H, m).
Calcd for C₄₃H₆₈N₄O₂₃ : [M+H]⁺ 1009, Found 1009. [M+Na]⁺ 1031, Found 1031.

（４３D）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[5-[[3-[5-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシペンチルカルバモイルオキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ) ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルバモイルアミノ]ペントキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物４３D）の合成

工程(３９Ｄ)で使用した化合物３９Ｃのかわりに、化合物４３Ｃ(1.38g,1.37mmol)を用い、工程(３９Ｄ)と同様にして、目的物４３Ｄ（850mg、収率51%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5.95-5.89 (1H, m), 5.38-5.26 (4H, m), 5.20-5.16 (1H, m), 5.00-4.95 (1H, m), 4.71-4.68 (2H, m), 4.36-3.44 (22H, m), 3.15 (4H, q, J = 6.4 Hz), 2.67 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.15 (6H, s), 2.05 (6H, s), 2.01 (6H, s), 1.96 (6H, s), 1.67-1.33 (12H, m), 1.18 (12H, d, J = 6.7 Hz).

(参考例４４)
（４４Ａ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[3-[[3-[[3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-オキソ-プロピル]カルバモイルオキシ]-2-ヒドロキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパノイルアミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物４４Ａ）の合成

工程（４１Ｂ）で合成した化合物４１Ｂ(200mg,0.62mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(2ml)溶液に、O-(N-スクシンイミジル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロほう酸塩(411mg,1.37mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.32ml,1.86mmol)を加え、室温で20分攪拌した。この反応液を工程（３７Ｂ）で合成した化合物３７Ｂ(657mg,1.49mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(2ml)溶液に加えた後に、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.32ml,1.86mmol)を加え、室温で60分攪拌した。反応終了後、反応液をジエチルエーテル(計80ml)に滴下した。上澄みの溶媒を除去した後に得られたゼリー状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝100：0‐75：25, v/v）で精製し、アモルファス状の目的物４４Ａ（408mg、収率60%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.76 (2H, br), 6.69-6.63 (2H, m), 5.96 (1H, br), 5.36 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.13-5.08 (2H, m), 4.53 (2H, d, J = 8.5 Hz), 4.25-3.07 (27H, m), 2.51-2.44 (4H, m), 2.17 (6H, s), 2.06 (6H, s), 2.02 (6H, s), 2.00 (6H, s), 1.86-1.73 (4H, m).
Calcd for C₄₅H₇₀N₆O₂₅: [M+H]⁺ 1095, Found 1096. [M+Na]⁺ 1117, Found 1117.

（４４Ｂ）[(2R,3R,4R,5R,6R)-5-アセトアミド-6-[3-[3-[[3-[[3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6R)-3-アセトアミド-4,5-ジアセトキシ-6-(アセトキシメチル)テトラヒドロピラン-2-イル]オキシプロピルアミノ]-3-オキソ-プロピル]カルバモイルオキシ]-2-[2-シアノエトキシ-(ジイソプロピルアミノ)ホスファニル]オキシ-プロポキシ]カルボニルアミノ]プロパノイルアミノ]プロポキシ]-3,4-ジアセトキシ-テトラヒドロピラン-2-イル]メチルアセテート（化合物４４Ｂ）の合成

工程(３９Ｄ)で使用した化合物３９Ｃのかわりに、化合物４４Ａ(1.53g,1.40mmol)を用い、工程(３９Ｄ)と同様にして、目的物４４Ｂ（510mg、収率28%）を得た。
¹H-NMR (CDCl₃) δ: 6.60-6.44 (4H, m), 5.76-5.68 (1H, m), 5.36 (2H, d, J = 3.0 Hz), 5.09-5.05 (2H, m), 4.50-4.45 (2H, m), 4.26-3.37 (28H, m), 3.17 (2H, br), 2.67 (2H, t, J = 6.3 Hz), 2.52-2.42 (4H, m), 2.17 (6H, s), 2.05 (6H, s), 2.02 (6H, s), 1.99 (6H, s), 1.81-1.70 (4H, m), 1.18 (12H, d, J = 6.7 Hz).

（実施例１５２）
X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１４３と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_001.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6261.98）

（実施例１５３）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１４４と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_005.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6264.00）

（実施例１５４）
X²⁰−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１４６と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列16e_001.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から107番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6621.04）

（実施例１５５）
X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１４７と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列16e_002.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6623.05）

（実施例１５６）
X²¹−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Ｘ^１８の部分をＸ^２１と置き換えて、実施例１４３と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_001.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6290.02）

（実施例１５７）
X²²−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
Ｘ^１８の部分をＸ^２２と置き換えて、実施例１４３と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_001.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6175.96）

（実施例１５８）
X²²−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
Ｘ^１８の部分をＸ^２２と置き換えて、実施例１４４と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_005.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6177.98）

（実施例１５９）
X²²−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
Ｘ^１８の部分をＸ^２２と置き換えて、実施例１４６と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列16e_001.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から107番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6535.03）

（実施例１６０）
X²²−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
Ｘ^１８の部分をＸ^２２と置き換えて、実施例１４７と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列16e_002.5である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6537.05）

（試験例１）培養細胞を用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価
293A細胞（ヒト胎児腎細胞）の培養
以下のようにして、293A細胞（R705-07 invitrogen）の培養を行った。
293A細胞を維持培地（DMEM、10%FBS）にて維持培養した。実験では6 well plateに2x10⁵ cells/well 12 well plateに1x10⁵ cells/wellの密度で細胞を播種し、翌日、後述のように実施例の化合物、及び、プラスミドベクターを同時に導入し、評価に用いた。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター作製
以下のようにして、ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC,pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を作製した。
Human Multiple Tissue cDNA Panelを鋳型とし、下記G6PC cDNA Amplified primerを用いてG6PC cDNAを増幅後、さらにG6PC cDNA IF primerで増幅した。増幅した断片をInFusion SystemによりpcDNA3.1のBamHI siteに挿入した（pcDNA hG6PC）。

G6PC cDNA Amplified primer：
フォワードプライマー 5'-ATAGCAGAGCAATCACCACCAAGCC-3' (配列番号４９)
リバースプライマー 5'-ATTCCACGACGGCAGAATGGATGGC-3' (配列番号５０)
G6PC IF primer：
フォワードプライマー 5'-TACCGAGCTCGGATCCACCACCAAGCCTGGAATAACTGC-3'(配列番号５１)、
リバースプライマー 5'-CTGGACTAGTGGATCCTGGCATGGTTGTTGACTTTAAAC-3'(配列番号５２)

Human Genome DNAを鋳型とし、下記G6PC Int4 Amplified primerを用いてG6PC Intron4とExon5を一部含む領域を増幅し、さらにG6PC Intron4をG6PC Int4 IF primerで増幅した。また、STEP1-1作成のpcDNA hG6PCを下記hG6PC vector IF primerを用いて増幅した。なお、InFusion primerにはExon5内のc.648G>T変異を導入した。両断片をInFusion Systemにより連結し、pcDNA hG6PC内にG6PC Intron4配列を挿入した (pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4)。

G6PC Int4 Amplified primer:
フォワードプライマー 5'-TCTGGGCTGTGCAGCTGAATGTCTG-3' (配列番号５３)
リバースプライマー 5'-GTAGGGGATGACACTGACGGATGCC-3' (配列番号５４)

G6PC Int4 IF primer:
フォワードプライマー 5'-CTGGAGTCCTGTCAGGTATGGGC-3' (配列番号５５)
リバースプライマー 5'-AGCTGAAAAGGAAGAAGGTAATGAG-3' (配列番号５６)

hG6PC vector IF primer:
フォワードプライマー 5'-TCTTCCTTTTCAGCTTCGCCATCGG-3' (配列番号５７)
リバースプライマー 5'-CTGACAGGACTCCAGCAACAAC-3' (配列番号５８)

実施例の化合物、及び、プラスミドベクターのコトランスフェクション
以下のようにして、実施例の化合物、及び、プラスミドベクターをコトランスフェクションした。
下記A液とB液を作製後、混合した。
6 well plateで実施の場合、1 wellあたり、A液として250μL Opti-MEM Medium(gibco)、0.50μLプラスミドベクター（1mg/mL）、4.0μL（final: 20nM）実施例で製造した化合物（12.5μM）を準備し、B液として250 μL Opti-MEM Medium(gibco)、6.0μL Lipofectamine2000 (Invitrogen)を準備し、A液とB液を混合した。12 well plateで実施の場合、1 wellあたり、A液として125 μL Opti-MEM Medium(gibco)、0.25 μLプラスミドベクター（1mg/mL）、2.0μL（final: 20nM）実施例で製造した化合物（12.5μM）B液として125μL Opti-MEM Medium(gibco)、3.0μL Lipofectamine 2000(Invitrogen)を準備し、A液とB液を混合した。
上記の混合液を20分間室温でインキュベーション後、継代翌日の細胞に添加した（コトランスフェクション）。添加６時間後に新鮮な維持培地と交換し、上記混合液添加から24時間CO₂インキュベーターでインキュベーションした。

RNA抽出 (in vitro)
以下のようにしてRNAの抽出を行った。

コトランスフェクション後24時間インキュベーションした細胞を、cold PBSにて１回洗浄した。RNeasy mini kit もしくはRNeasy 96 kit（Qiagen）の細胞溶解液を、1 wellにつき300μLずつ加え、室温で5分間インキュベーション後回収した。回収液について、DNase処理を含むキットのプロトコールに従いRNA精製を行った。DNase処理にはRNase-Free DNase set (Qiagen 89254)を用いた。精製・溶出したRNAは後述の逆転写反応を行った。

逆転写反応
以下のようにして逆転写反応を行った。

抽出RNAを25〜100mg/mLに調整後、High Capacity RNA-to-cDNA kit（Applied biosystems）を用い、1sampleあたり10μL Buffer mix、1μL Enzyme mix、9μL精製水、＋抽出RNAとなるよう混合し逆転写反応を行った（37℃ 60min、95℃ 5min、4℃ Hold）。
逆転写反応産物20μLに対し精製水80μLで5倍稀釈し-30℃にて保存した。

qRT-PCR（SYBR Green）
下記のようにqRT PCR Primer（SYBR Green）を設計した。

Repaired hG6PC primer（SYBR）：
フォワードプライマー 5'-TTGTGGTTGGGATTCTGGGC-3' (配列番号５９)
リバースプライマー 5'-ATGCTGTGGATGTGGCTGAA-3' (配列番号６０)
hActin primer（SYBR）：
フォワードプライマー 5'-TGGCACCCAGCACAATGAA-3' (配列番号６１)
リバースプライマー 5'-CTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCA-3' (配列番号６２)

またPCR反応液を1 wellあたり, 5μL 2x FAST SYBR Green Master Mix（Applied Biosystems）、2μL 精製水、1μL Primer mix (10μM)、2μLcDNA(5倍稀釈済)を懸濁し、viia7（Applied Biosystems）でPCR反応を行った（プログラム：SYBR Green Regents, FAST, include Melt curve））。

ｑRT-PCR（Taqman assay）
下記のようにRepaired hG6PC primer set、Total hG6PC primer set を設計し、20x primer probe mix（primer濃度: 1000nM probe濃度: 250nM）を調整した。hActin primer set、mActin primer setはは原液のままを使用した。
Repaired hG6PC primer set (Taqman）:
フォワードプライマー 5'-GCTGCTCATTTTCCTCATCAAGTT-3' (配列番号６３)
リバースプライマー 5'-TGGATGTGGCTGAAAGTTTCTGTA-3' (配列番号６４)
プローブ 5'-TCCTGTCAGGCATTGC-3' FAM (配列番号６５)

hActin primer set（Taqman）：ABI Hs01060665_g1 FAM
mActin primer set（Taqman）: ABI Mm02619580_g1 FAM
18s primer set（Taqman）: ABI Hs99999901_s1 FAM

また1ウェル辺りに5μL 2x Taqman Fast Advanced Master Mix（Applied Biosystems）、2.5μL精製水、0.5μL 20x Primer probe mix (10μM)、2μL cDNA (5倍稀釈済)を懸濁しPCR反応液を調整(1 tubeあたり)し、viia7またはQuantstadio7（Applied Biosystems社）にてPCR反応を行った（プログラム：Taqman regents, FAST）。

LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドの定量
以下のようにしてタンパク質の抽出ならびに正常ヒトG6PC特異的ペプチドのLC-MS/MS定量を行った。

タンパク質ライセートの抽出、調整
コトランスフェクション後24時間インキュベーションした細胞を、cold PBSにて１回洗浄した。RIPA buffer（ナカライテスク）を1 wellにつき100μLずつ加え、氷上でインキュベーション後回収した。回収液について、氷上で20分間インキュベート後、10000g、10分、4℃で遠心し上清を回収した。上清について総タンパク質量を測定し、0.4mg/mLになるように調整しタンパク質ライセートとした。

試薬の調整
DS264_100u: 安定同位体標識ペプチドGLGVD(L*)LWT(L*)EK（Scrum、L*: L-Leucine- ¹³C₆,¹⁵N）を50%cn (精製水/acetonitrile)で100μMに調整した。
DS266_100u: 安定同位体標識ペプチドWCEQPEW(V*)HIDTTPFAS(L*)LK（L*: L-Leucine- ¹³C₆,¹⁵N, V*:L-Valine-¹³C₅,¹⁵N）を50%cn (精製水/acetonitrile)で100μMに調整した。
DS268_100u: 安定同位体標識ペプチドNLGTLFG(L*)GLA(L*)NSSMYR（Scrum、L*: L-Leucine- ¹³C₆,¹⁵N）を50%cn (精製水/acetonitrile)で100μMに調整した。
IS solution-1: 50mL acetonitrile、0.5mL Trifuoroacetic acid(ナカライ)、20μL DS264_100u、20μL DS266_100u、20μL DS268_100uを懸濁した。
IS solution-2: 50mL acetonitrile、50mL 精製水、 0.5mL Trifuoroacetic acid(ナカライ)、20μL DS264_100u、20μL DS266_100u、20μL DS268_100uを懸濁した。

0.1M Tris-HCl：5mL 1M Tris-HCl Buffer Solution (pH 8.0)を45mLの精製水に添加懸濁した。
Urea/EDTA solution：2.4g Urea(ナカライ)、100μL 0.5M EDTA(sigma-aldorich)を4.9mL 0.1M Tris-HClに添加、懸濁した。
DTT solution (20mg/mL)：20mg DTT (dithiothreitol)(Wako)を1mLの精製水に添加懸濁した。
IAA solution (50mg/mL)：50mg IAA (iodoacetamide)(sigma-aldorich)を1mL精製水に添加懸濁した。
Trypsin /LysC Mix solution (200μg/mL)：20μg Trypsin/Lys-C Mix (1 vial)（Promega）を100μL Resuspension buffer（Promega）に添加懸濁した。

消化処理
下記に従い酵素消化反応を実施し、LC-MSインジェクションサンプルを調整した（1 sampleあたり）。

20μL Urea/EDTA solution、10μLタンパク質ライセート、10μL DTT solutionを懸濁し60分間室温で静置した後、2.5μL IAA solutionを添加懸濁し60分間室温で静置した。その後、懸濁液に対し、112.5μL 0.1M Tris-HClと2.5μL Trypsin /LysC Mix solutionを添加懸濁し、37℃で一晩インキュベーションした後、150μL IS solution-1、300μL IS solution-2を添加しLC-MSインジェクションサンプルとした。

LC-MS分析、試料中濃度測定
Ultimate 3000(Thermo Fisher), Q Exactive plus(Thermo Fisher)を用いてLC-MSインジェクションサンプルのLC-MS分析を実施した。内部標準法を用いてMass range 820.0632-820.0782 (m/z)より下記ペプチド（DS265）の試料中濃度を算出した
DS265：WCEQPEWVHIDTTPFASLLK（配列番号６６）

G6PC酵素活性の測定
下記のように抽出した各検体のミクロソーム画分のG6PCの活性測定を実施した。

(1) 試薬の調製
BufferA: 100mM BIS-TRIS Buffer, pH 6.5 37℃
180mL精製水に4.2g BIS-TRIS (Sigma-Aldrich)を添加.塩酸、精製水を用いてpH 6.5、37℃、200mLに調整。
BufferB: HEPES 20mM, EDTA 1mM, Sucrose 250mM (4℃保存)
180mL精製水に4.0mL 1.0M HEPES (Gibco), 0.4mL 0.5M EDTA (USB), 17g Sucrose (Wako)を添加。精製水を200mLに調整後、0.22μmフィルターの透過処理。
Substarate: 200mM Glucose 6-Phosphate（4℃保存）
88.65 mL 精製水に 5mg D-Glucose 6-Phosphate Sodium Salt (Sigma-Aldrich)を添加。
TCA： 20% Trichloroacetic Acid （室温、遮光保存）
40 mL 精製水に 10 ｍL Trichloroacetic Acid Solution (Sigma-Aldrich)を添加。
Standard： Phosphorus Standard Solution, 20 μg/ml (Sigma-Aldrich)（4℃保存）
5M Sulfuric Acid Solution（室温、遮光保存）
67mL 精製水に25 mL Sulfuric Acid（Aldrich 258105）を添加。
TSCR: Taussky-Shorr Color Reagent (用時調製)
5M Sulfuric Acid Solution 20ｍL に2.4mg Ammonium Molybdate Tetrahydrate (Sigma-Aldrich)添加、溶解液を 140mLの精製水に添加。さらに10 g Ferrous Sulfate Heptahydrate (Sigma-Aldrich)を添加し、溶解するまで撹拌後、精製水で200ｍLまでメスアップ。

(2) ミクロソーム画分の精製
下記手順に従いミクロソーム画分を精製、調整した。
実施例化合物、及び、プラスミドベクターのコトランスフェクションを行った293A細胞(in 6 well plate)をice cold PBSでwash後、ice cold BufferBを各wellに添加、セルスクレーパーで回収した。回収した細胞をOn iceにてダウンスホモジナイザーを用いて十分にホモジナイズした後、1000g 10min 4℃にて遠心し上清を回収した。その上清を13000g 60min 4℃で遠心し、上清を除去、ペレットをBufferBで懸濁した。懸濁液の蛋白濃度が一定になるように（0.3〜1.0 mg/mL）になるようにBufferBで調整を行った。

(3) G6PC 酵素活性測定
蛋白濃度を調整したミクロソーム画分（sample）のG6PC酵素活性を下記の方法にて測定した。試薬の呼称は(1)に準じた。
各sampleにつきTestとBlankを作製した。Testでは150μL BufferA、50uL substrateを懸濁し、5分間37℃でインキュベートした。そこに5μLのsampleを添加、懸濁し、正確に5分間、37℃でインキュベートした後、45μL TCAを添加した。よく懸濁した後、5分間、25℃でインキュベートした。Blankでは150μL BufferA、50uL substrateを懸濁し、5分間37℃でインキュベートした。そこに5μLのsample、45μL TCAを懸濁し25℃でインキュベートしたものを添加した。各sampleのTestとBlankを4000g、10分間、室温で遠心し、その上清を別チューブに分注した。各上清100μLに対し、100μLのTSCRを添加、室温で5分間インキュベートした後、660nｍの吸光度をプレートリーダー（Spectra Max M4 Molecular Devices）で測定した。 Standardの希釈系列を用いて算出した検量線、各sampleのTestとBlankの吸光度、sampleの蛋白濃度からG6PC酵素活性（U/mg:sample中の総タンパク質1mgが1分間に分解するG6P量（μmol））を算出した。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（１）
ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（21e_001〜012、及び、21m_001〜012）のコトランスフェクションを行い、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかをqRT-PCR(SYBR Green)にて評価した。図５Ａ及び５Ｂに示したように、21e_002〜012、及び、21m_002〜012の化合物でG6PC mRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。また、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生を調べたところ、図６Ａ及び６Ｂに示したように、21e_002〜012、及び、21m_002〜012の化合物において、正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生が認められた。さらに、G6PC 酵素活性測定したところ、図７Ａ及び７Ｂに示したように、21e_002〜012、及び、21m_002〜012の化合物において、G6PC 酵素活性が認められた。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（２）
ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（21e_001〜006、及び、21e_013〜022）のコトランスフェクションを行い、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかをqRT-PCR(SYBR Green)にて評価した。図９に示したように、21e_002〜006、及び、21e_015〜022の化合物でG6PC mRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。また、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生を調べたところ、図１０に示したように、21e_002〜006、及び、21e_015〜022の化合物において、正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生が認められた。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（３）
ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（18e_001〜017、及び、18m_001〜017）のコトランスフェクションを行い、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかをqRT-PCR(SYBR Green)にて評価した。図１３Ａ及び１３Ｂに示したように、18e_005〜017、及び、18m_005〜017の化合物でG6PC mRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。また、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生を調べたところ、図１４Ａ及び１４Ｂに示したように、18e_005〜017、及び、18m_005〜017の化合物において、正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生が認められた。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（４）
ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（18e_018〜031）のコトランスフェクションを行い、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかをqRT-PCR(SYBR Green)にて評価した。図１６Ａに示したように、18e_022〜026、及び、18e_031の化合物でG6PC mRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。また、LC-MS/MSによる正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生を調べたところ、図１６Ｂに示したように、18e_022〜026、及び、18e_031の化合物において、正常ヒトG6PC特異的ペプチドの産生が認められた。

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（５）
ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（21e_002, 18e_005, 21m_002, 18e_005, 18m_022, 15e_001, 15ed_001, 18e_008, 18e_025, 18m_008, 15e_002, 15ed_002、及び、コントロールとして国際公開第２００４／０４８５７０の実施例９３の化合物）のコトランスフェクションを行い、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかをqRT-PCR(SYBR Green)にて評価した。図１８に示したように、21e_002, 18e_005, 21m_002, 18e_005, 18m_022, 15e_001, 15ed_001, 18e_008, 18e_025, 18m_008, 15e_002, 及び、15ed_002の化合物でG6PC mRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

（試験例２）モデルマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価

マウスの作出
ベクターの作成
下記手順に従い、G6PC KI vetorを作製した。
Mouse Genome DNAを鋳型に、下記mG6PC 5' arm Amplified primerを用いて、G6PC 5' arm領域を増幅した。さらにmG6PC 5' arm IF primerで増幅後、pBluescriptII(+/-)のXhoI siteに挿入した（G6PC 5' arm vector）。
mG6PC 5' arm Amplified primer：
フォワードプライマー 5'-GGGAAACATGCATGAAGCCCTGGGC-3' (配列番号６７)
リバースプライマー 5'-TCCCTTGGTACCTCAGGAAGCTGCC-3' (配列番号６８)
mG6PC 5' arm IF primer:
フォワードプライマー 5'-CGGGCCCCCCCTCGAAAACTAGGCCTGAAGAGATGGC-3' (配列番号６９)
リバースプライマー 5'-TACCGTCGACCTCGAGGGTTGGCCTTGATCCCTCTGCTA-3' (配列番号７０)
次にMouse Genome DNAを鋳型に、下記mG6PC 3' arm Amplified primerを用いて、G6PC 3' arm領域を増幅した。さらにmG6PC 3' arm IF primerで増幅後、G6PC 5' arm vectorのNotI saiteに挿入した（G6PC 5'+3' arm vector）。
mG6PC 3' arm Amplified primer：
フォワードプライマー 5'-GGTTGAGTTGATCTTCTACATCTTG-3' (配列番号７１)
リバースプライマー 5'-GCAAGAGAGCCTTCAGGTAGATCCC-3' (配列番号７２)
mG6PC 3' arm IF primer:
フォワードプライマー 5'-AGTTCTAGAGCGGCCGCCCATGCAAAGGACTAGGAACAAC-3' (配列番号７３)
リバースプライマー 5'-ACCGCGGTGGCGGCCAATGTTGCCTGTCTTCCTCAATC-3' (配列番号７４)

先述のpcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4を鋳型とし、下記hG6PC + Int4 IF primerを用いてhG6PC (c.648G>T)+Intron4 を増幅した。また、G6PC 5'+3' arm vectorを鋳型とし、下記Arm vector IF Primerを用いて増幅した。両断片をInFusion Systemを用いて連結しG6PC KI vetorを作成した。
hG6PC + Int4 IF primer：
フォワードプライマー 5'-GGCCAACCCTGGAATAACTGCAAGGGCTCTG-3' (配列番号７５)
リバースプライマー 5'-TTGCATGGTTGTTGACTTTAAACACCGAAGA-3' (配列番号７６)
Arm vector IF Primer：
フォワードプライマー 5'-TCAACAACCATGCAAAGGACTAGGAACAAC-3' (配列番号７７)
リバースプライマー 5'-ATTCCAGGGTTGGCCTTGATCCCTCTGCTA-3' (配列番号７８)
pSPgRNA（addgene）のgRNA配列導入領域に、下記KI 5’ gRNA、KI 3' gRNA配列を導入しpSPgRNA(KI 5')、pSPgRNA(KI 3')を作製した。
KI 5' gRNA：5'-GGGATCAAGGCCAACCGGCTGG-3' (配列番号７９)
KI 3' gRNA：5'-TAAAGTCAACCGCCATGCAAAGG-3' (配列番号８０)

マイクロインジェクション
各種ベクターを滅菌蒸留水を用いて、最終濃度がG6PC KI vetor 10ng/μL、pSPgRNA(KI 5') 5ng/μL、pSPgRNA(KI 3') 5ng/μL、pSPCas9（addgene）5ng/μLとなるように調整した後、MILLEX-GVシリンジフィルター（ミリポア）を通したものをC57BL/6Jマウス受精卵の前核十分膨らむ程度まで（約2pL）インジェクションした。その受精卵をレシピエントC57BL/6Jマウスの卵管に移植し、F0マウスを取得した。

Genotyping、F1系統化
以下の手順でGenotypingを実施、F1系統化を行った。
F0マウスの尾組織より核酸自動抽出装置（PI-200 クラボウ）及び専用キットを用いてゲノムDNAを抽出した。抽出DNAをAmplitaq Gold Master mix (Thermo fisher)を用いて及び下記KI screening primerを用いて増幅した（95℃ 10 min、(95℃ 30 sec、60℃ 30 sec、72℃ 30 sec) 35 cycles、72 ℃ 2 min、4℃ Hold）。
KI screening primer：
フォワードプライマー 5'-TACGTCCTCTTCCCCATCTG-3' (配列番号８１)、
リバースプライマー 5'-CTGACAGGACTCCAGCAACA-3' (配列番号８２)
上記PCR産物についてゲル電気泳動を実施し、433bp付近にバンドを認めた個体のゲノムDNAをテンプレートとし、PrimeSTAR GXL（takara）および下記KI genotyping primerを用いて増幅した（98℃ 2 min、(95℃ 15 sec、68℃ 5 min) 38 cycles、68 ℃ 7 min、15℃ Hold）。
KI genotyping primer (5')：
フォワードプライマー 5'-TTCCTTCCAAAGCAGGGACTCTCTATGT-3' (配列番号８３)同じ(1))
リバースプライマー 5'-CTTGCAGAAGGACAAGACGTAGAAGACC-3' (配列番号８４同じ(2))
KI genotyping primer (3')：
フォワードプライマー 5'-GAGTCTATATTGAGGGCAGGCTGGAGTC-3' (配列番号８５)、
リバースプライマー 5'-TAGTCTGCCTGCTCACTCAACCTCTCCT-3' (配列番号８６)
上記PCR産物についてゲル電気泳動を実施した。KI genotyping primer (5')をおよびKI genotyping primer (3')のいずれでも期待された配列長（4705bp、4026bp）に増幅を認めた個体のゲノムDNAのKI genotyping primer (5')を用いたPCR産物をGentetic analyzer（Lifetechnology）および下記KI sequence primerを用いてダイレクトシークエンスを行った。期待した配列のKIが確認できたものをKI陽性F0とした。
KI sequence primer (5')： 5'-GAGTCTATATTGAGGGCAGGCTGGAGTC-3' (配列番号８７)
KI陽性F0とC57BL/6Jを交配しF1を取得した。F1の耳介組織よりDNeasy 96 Blood & Tissue Kit(Qiagen)を用いてゲノムDNAを抽出し、PrimeSTAR GXL（takara）および先述KI genotyping primer (5')を用いて増幅した（98℃ 2 min、(95℃ 15 sec、68℃ 5 min) 38 cycles、68 ℃ 7 min、15℃ Hold）。
上記PCR産物についてゲル電気泳動を実施し、期待された配列長（4705b）に増幅を認めた個体をKI陽性F1とした。KI陽性F1の中から選別した1ラインを繁殖しhG6PC (c.648G>T) + Int4 KI系統とした。

hG6PC (c.648G>T) + Int4系統のgenotyping
耳介組織よりDNeasy 96 Blood & Tissue Kit(Qiagen)を用いてゲノムDNAを抽出し、KOD FX（TOYOBO）および下記KI genotyping primer、mG6PC WT primer を用いてmultiprex増幅した（98℃ 2 min、(95℃ 15 sec、68℃ 5.5 min) 32 cycles、68 ℃ 5 min、4℃ Hold）。
KI genotyping primer (5')：
フォワードプライマー 5'-TTCCTTCCAAAGCAGGGACTCTCTATGT-3' (配列番号８３同じ(1))
リバースプライマー 5'-CTTGCAGAAGGACAAGACGTAGAAGACC-3' (配列番号８４同じ(2))
mG6PC WT primer :
フォワードプライマー 5'-TAAATTTGACCAATGAGCACTGGAGGTC-3' (配列番号８８)
リバースプライマー 5'-AAAATCATGTGTATGCGTGCCTTTCCTA-3' (配列番号８９)’

上記PCR産物についてゲル電気泳動を実施し、4705b 近傍の増幅をKI アレル、2536 bp近傍の増幅をmG6PC WT アレルとし、産子のgenotyping（WT、Ht、Homo）を判別した。

マウスの採材
以下のようにしてマウスの採材を行った。
採材の前日の夕方に糞食を避けるための床網を設置した上で、絶食を開始した。翌日、麻酔導入下で開腹し、十分に脱血後、肝臓、腎臓を摘出した。各臓器はice cold PBSで洗浄後、適切な大きさにトリミングし、予めホモジナイズビーズ（ニッカトー）を入れたチューブに保存した。各臓器は液体窒素にて瞬間冷却した後-80℃で保管した。

RNA抽出（in vivo）
以下のようにしてRNAの抽出を行った。

組織保存チューブあたり、RNeasy mini kit もしくはQiacube system（Qiagen）の細胞溶解液を600 μLずつ加え、tissue lyserII (Qiagen)にて25kHz 2minでホモジナイズをした。氷冷下で10分間インキュベーション後、8000G、10分間、室温で遠心し上清を回収した。上清について、DNase処理を含む各キットのプロトコールに従いRNA精製を行った。DNase処理にはRNase-Free DNase set (Qiagen)を用いた。精製・溶出したRNAは先述の逆転写反応を行い、先述のｑRT-PCR（Taqman assay）に従い修復G6PC mRNA の定量を行った。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（１）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例１１６乃至１２７の化合物をPBSに溶解し、3mg/kgとなるように尾静脈投与を実施することができる。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取しG6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価することできる。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（２）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例91乃至95の化合物を大塚生食注に溶解し、25mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取しG6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図１９に示したように、実施例91乃至95の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（３）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例91、92、及び、96乃至103の化合物を大塚生食注に溶解し、25mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２０に示したように、実施例91、92、及び、96乃至103の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（４）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例83乃至91、及び、104乃至107の化合物を大塚生食注に溶解し、30mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２１に示したように、実施例83乃至91、及び、104乃至107の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（５）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例104、及び、108乃至115の化合物を大塚生食注に溶解し、30mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２２に示したように、実施例83乃至91、及び、104乃至107の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（６）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例105、113、及び、131乃至137の化合物を大塚生食注に溶解し、30mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２３に示したように、実施例105、113、及び、131乃至137の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

（試験例3）異常スプライシング修復配列のフラグメント解析

PCR反応とフラグメント配列解析
以下のようにしてPCR反応とフラグメント配列解析を行った。

下記のようにhG6PC splicing validation primerを設計した。

hG6PC splicing validation primer：
フォワードプライマー 5'-TTGTGGTTGGGATTCTGGGC-3' (配列番号９０)
リバースプライマー 5'-TCCAGAGTCCACAGGAGGTC -3' (配列番号９１)

以下のようにPCR反応液を調整し、PCR反応を行った。
23μL Platinum^TM PCR SuperMix High Fidelity (thermo fisher)、2μL Primer mix (10μM)、１μLcDNA(5倍稀釈済)を懸濁し、PCR反応を行った（95℃ 5min, (95℃ 30sec, 62℃ 30sec, 68℃ 30sec ) 36 cycles, 68℃ 4min, 4℃ Hold）。
PCR産物はE-Gel（登録商標）アガロースゲル電気泳動システムを用い、E-gel Ex 2％ agarose (Invitrogen)にて電気泳動し、解析した。各フラグメントは、NucleoSpin（登録商標） Gel and PCR Clean-up (MACHEREY-NAGEL)にてゲルから抽出し、G6PC sequence primer を添加の上、BigDye v3.1を用いてシークエンス反応を行った。Applied Biosystems 3730xl DNA Analyzer(Life technologies）をもちいて塩基配列を確認した（図２４）。
G6PC sequence primer 5'-GCTGTGCAGCTGAATGTCTG-3' (配列番号９２)

実施例１の化合物（21e_002）による培養細胞における異常スプライシング修復配列のフラグメント解析

ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）を用いた実施例化合物によるG6PC mRNAの異常スプライシングの修復評価（１）において作成したヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）のみをトランスフェクションした検体、ヒトG6PC全長プラスミドベクター（pcDNA hG6PC (c.648G>T) + Int4）とオリゴヌクレオチド（21e_002）をコトランスフェクションした検体から作成したcDNAをテンプレートとして用いてPCR反応とフラグメント配列解析を行った。図２４に示したように実施例１の化合物（21e_002）によって９１塩基が欠損する異常スプライシングの正常化が認められた。

（試験例4）モデルマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価
試験例２と同様に実施例化合物について、モデルマウスを用いて評価をした。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（7）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例133及び、143乃至149の化合物を大塚生食注に溶解し、30mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２５に示したように、実施例133及び、143乃至149の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスを用いた実施例化合物による異常スプライシングの修復評価（8）
hG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスに対して実施例149及び、152乃至160の化合物を大塚生食注に溶解し、30mg/kgとなるように皮下投与を実施した。投与７日後に一晩絶食条件下でマウスの肝臓組織の採取し、G6PC (c.648G>T)による異常スプライシングが修復されるかqRT-PCR(Taqman)にて評価したところ、図２６に示したように、実施例149及び、152乃至160の化合物でhG6PC (c.648G>T) + Int4 Ht KIマウスの肝臓においてmRNAの異常スプライシングの正常化が認められた。

（実施例１６１）
X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号９３）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_001.6を用い、Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6278.03）

（実施例１６２）
X²⁰−Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９４）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.6を用い、Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6280.03）

（実施例１６３）
X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｃ^e2s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号９３）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_001.7を用い、Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から92番目から106番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6304.04）

（実施例１６４）
X²⁰−Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｃ^e2s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９４）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.7を用い、Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6306.03）

（実施例１６５）
X²⁰−Ａ^m1s-U^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-U^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^m1t-H（配列番号９５）
実施例１３３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.8を用い、Ｘ^１８の部分をＸ^２０と置き換えて、実施例１３３と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6149.93）

（実施例１６６）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）

実施例１５３で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.01を用い、実施例１５３と同様に合成を行った。ただし、核酸自動合成機で使用する試薬のうち、表記配列合成に必要な部分の酸化剤として、OXDIZER 0.05M(Sigma-Aldrich製、product No. L560250-04)、あるいは、0.02 Mになるようにヨウ素（関東化学製、product No. 20035-00）を、テトラヒドロフラン (脱水、関東化学製、product No. 40993-05)、ピリジン (脱水、関東化学製、product No. 11339-05)、蒸留水78:20：2(v/v/v)溶液を用いて溶解し、適宜使用した。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１６７）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.02を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１６８）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.03を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6247.99）

（実施例１６９）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.04を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１７０）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.05を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例１７１）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.06を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例１７２）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.07を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例１７３）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.08を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例１７４）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.09を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.01）

（実施例１７５）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.10を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。使用した配列は上記配列15e_005.5.10である。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.01）

（実施例１７６）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.11を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.00）

（実施例１７７）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.12を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.03）

（実施例１７８）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.13を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.02）

（実施例１７９）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.14を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.03）

（実施例１８０）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1p-Ｇ^m1p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.15を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6200.06）

（実施例１８１）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.16を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6247.99）

（実施例１８２）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1p-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.17を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.01）

（実施例１８３）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.18を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１８４）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1p-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.19を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.01）

（実施例１８５）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.20を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１８６）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1p-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.21を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.01）

（実施例１８７）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.22を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１８８）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1p-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.23を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１８９）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.24を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１９０）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1p-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.25を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6248.00）

（実施例１９１）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.26を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.01）

（実施例１９２）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.27を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.03）

（実施例１９３）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.28を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.03）

（実施例１９４）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.29を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6200.06）

（実施例１９５）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.30を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6200.06）

（実施例１９６）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.31を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6184.11）

（実施例１９７）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1p-Ｃ^m1p-Ｃ^e2p-Ｇ^m1p-Ａ^e2p-Ｕ^m1p-Ｇ^m1p-Ｇ^m1p-Ｃ^e2p-Ｇ^m1p-Ａ^m1p-Ａ^e2p-Ｇ^m1p-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.32を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6040.30）

（実施例１９８）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.33を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）
（実施例１９９）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.34を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.01）

（実施例２００）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.35を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.04）

（実施例２０１）
X²⁰−Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.36を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.03）

（実施例２０２）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.37を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例２０３）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.38を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.01）

（実施例２０４）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.39を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例２０５）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2p-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.40を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例２０６）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.41を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6232.02）

（実施例２０７）
X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2p-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2p-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号９５）
実施例１６６で使用した配列の代わりに上記の配列である15e_005.5.42を用い、実施例１６６と同様に合成を行った。
本化合物の塩基配列は、Homo sapiens glucose-6-phosphatase catalytic subunit (G6PC), transcript variant 1, mRNA (NCBI-GenBank accession No. NM_000151.3)のヌクレオチド番号728のGからTへ変異している、c.648G>T変異G6PC遺伝子のエクソン5の5’末端から91番目から105番目に相補的な配列である。化合物は負イオンESI質量分析により同定した（実測値：6216.00）

なお、本明細書において、A^t、G^t、5meC^t、C^t、T^t、U^t、A^p、G^p、5meC^p、C^p、T^p、U^p、A^s、G^s、5meC^s、C^s、T^s、U^s、A^m1t、G^m1t、C^m1t、5meC^m1t、U^m1t、A^m1p、G^m1p、C^m1p、5meC^m1p、U^m1p、A^m1s、G^m1s、C^m1s、5meC^m1s、U^m1s、A ^e2t 、G ^e2t 、C ^e2t 、T ^e2t、A^e2p、G^e2p、C^e2p、T^e2p、A^e2s、G^e2s、C^e2s、T^e2s、A^1t、G^1t、C^1t、T^1t、A^e1p、G^e1p、C^e1p、T^e1p、A^e1s、G^e1s、C^e1s、T^e1s、A^m2t、G^m2t、5meC^m2t、T^m2t、A^m2p、G^m2p、5meC^m2p、T^m2p、A^m2s、G^m2s、5meC^m2s、T^m2s、X、X^１、X^２、X^３、X⁴、X^５、X^６、X^７、X^８、X^９、X^１０、X^１１、X^１２、X^１３、X^１４、X^１５、X^１６、X^１７、X^１８、X^１９、X^２０、X^２１、X^２２は、下記に示す構造を有する基である。

本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。

本発明は、糖原病Ｉａ型の治療に利用できる。

＜配列番号１〜４８、９３〜９５＞アンチセンスオリゴヌクレオチドの配列を示す。アンチセンスオリゴヌクレオチドを構成するヌクレオチドは、天然型DNA、天然型RNA、DNA/RNAのキメラ、これらの修飾体のいずれであってもよいが、少なくとも１つが修飾ヌクレオチドであることが好ましい。
＜配列番号４９〜６５、６７〜９２＞プライマーの配列を示す。
＜配列番号６６＞ペプチドの配列を示す。

Claims

以下の実施例１３３、１３８〜１４８及び１５２〜１５５の式のいずれか一つで表されるオリゴヌクレオチドとGalNAcユニットのコンジュゲート、
実施例１３３： X^１８−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例１３８： X^１8−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１３９： X^１8-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４５）
実施例１４０： X^１8−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
実施例１４１： X^１8−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
実施例１４２： X^１8-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ｔ^e2s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４８）
実施例１４３： X^１８−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例１４４： X^１8−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１４５：X^１8-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４５）
実施例１４６： X^１8−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
実施例１４７：X^１8−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
実施例１４８： X^１8-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｕ^m1t-H（配列番号４８）
実施例１５２： X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1ｔ-H（配列番号４０）
実施例１５３： X²⁰−Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４４）
実施例１５４： X²⁰−Ａ^m1s−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1t-H（配列番号４２）
実施例１５５： X²⁰−Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｃ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^e2s-Ｕ^m1s-Ｇ^m1s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2s-Ｇ^m1s-Ａ^m1s-Ａ^e2s-Ｇ^m1s-Ｃ^e2t-H（配列番号４７）
［上記式において、左側が5'末端、右側が3’末端を表し、A^m1t、G^m1t、C^m1t、5meC^m1t、U^m1t、A^m1p、G^m1p、C^m1p、5meC^m1p、U^m1p、A^m1s、G^m1s、C^m1s、5meC^m1s、U^m1s、A ^e2t、G ^e2t、C ^e2t、T ^e2t、A^e2p、G^e2p、C^e2p、T^e2p、A^e2s、G^e2s、C^e2s、T^e2s、X^１８、X^２０は、下記に示す構造を有する基である。Ｘ^１８およびＸ^２０において、リン酸基に結合した結合手はオリゴヌクレオチドの5'末端の炭素原子に結合して、リン酸ジエステル結合を形成することを表す。］

その薬理上許容される塩又は溶媒和物。
G６PC遺伝子にc.648G>T変異を有する糖原病1a型患者に投与されることを特徴とする、請求項１に記載のコンジュゲート、その薬理上許容される塩又は溶媒和物を含有する糖原病1a型治療剤。