JP6430082B1 - 低用量抗ｃｃｒ４抗体を用いたｈｔｌｖ−１関連脊髄症の予防または治療剤 - Google Patents

Abstract

本発明は、抗ヒトＣＣ−ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ４（ＣＣＲ４）抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片の用法用量を特徴とする新たなヒトＴ細胞白血病ウイルス−１関連脊髄症（ＨＡＭ）の治療または予防剤を提供することを目的とする。本発明は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするＨＡＭの治療または予防剤に関する。

Description

抗ヒトＣＣ−ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ４（ＣＣＲ４）抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするヒトＴ細胞白血病ウイルス−１（ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ−１；ＨＴＬＶ−１、以下ＨＴＬＶ−１と略記する）関連脊髄症（ＨＴＬＶ−１ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｙｅｌｏｐａｔｈｙ；ＨＡＭ、以下、ＨＡＭと略記する）の治療または予防剤および抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を低用量で投与することによるＨＡＭの治療または予防方法に関する。

ＨＴＬＶ−１は、ヒトＴ細胞に慢性的に感染するレトロウイルスである。ＨＴＬＶ−１感染患者のほとんどは、無症候性で健康に生活することができるが、感染者の約３−５％は、成人Ｔ細胞白血病（Ａｄｕｌｔ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ；ＡＴＬ、以下ＡＴＬと略記する）と呼ばれる進行性のＴ細胞性悪性腫瘍を発症し、一方、感染者の０．２５−３％はＨＡＭ／熱帯性痙性不全対麻痺症（ｔｒｏｐｉｃａｌ ｓｐａｓｔｉｃ ｐａｒａｐａｒｅｓｉｓ；ＴＳＰ、以下ＴＳＰと略記する）を発症することが知られている（非特許文献１−４）。

ＨＡＭ／ＴＳＰ（以下、単にＨＡＭとも記載する）の主症状として下肢の筋力低下や痙縮などの運動機能障害、感覚障害および排尿障害などが見られる（非特許文献５）。また、ＨＡＭ／ＴＳＰ患者の一部では、多臓器リンパ球浸潤によって特徴付けられる自己免疫疾患として、ブドウ膜炎、関節炎、多発性筋炎、シェーグレン症候群、感染性皮膚炎および肺胞炎などを発症する場合もある（非特許文献６）。

ＨＡＭ患者の末梢血液のＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞は、健常人と比べてｆｏｒｋｈｅａｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ（Ｆｏｘｐ３）発現量が低下しており、通常ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔ細胞（制御性Ｔ細胞、Ｔｒｅｇと略記する）が有するＴ細胞増殖を制御する機能が低下していること、およびＨＴＬＶ−１ Ｔａｘ遺伝子によってＴｒｅｇ機能の低下が引き起こされていることが報告されている（非特許文献７）。

ＡＴＬ患者の末梢血液中には、健常人と比べてＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｈｉｇｈのＴ細胞が増加している一方で、ＨＡＭ患者の末梢血液中には、健常人と比べてＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗのＴ細胞が増加していることが報告されている（特許文献１、非特許文献２）。末梢血中のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗのＴ細胞数とＨＡＭの臨床症状の重症度とが相関することが報告されている（特許文献１）。また、末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルス量の低下は、ＨＡＭの長期予後と相関することが知られている（非特許文献８）

また、ＨＡＭ患者から抗ヒトＣＣＲ４抗体を用いて分離したＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋細胞は、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４−細胞と比べてＨＴＬＶ−１のプロウイルスＤＮＡ量が増加していること、およびインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）＋ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞がＨＡＭの病因細胞（Ｔ_ＨＡＭ）であり、ＨＡＭ患者の末梢血液中に該細胞が増加していることが報告されている（特許文献２、非特許文献９、１０）。

ＨＡＭ患者では、ＨＴＬＶ−１感染細胞が中枢神経系において産生するＩＦＮ−γにより、星状細胞からケモカインＣＸＣＬ１０が産生され、ＣＸＣＬ１０の受容体であるＣＸＣＲ３を発現するＨＴＬＶ−１感染細胞が脳脊髄液（ＣＳＦ）中にリクルートされるというポジティブフィードバックにより、慢性炎症が起きているという仮説が提唱されている（非特許文献１１）。

臨床ＨＡＭ患者の治療においては、慢性炎症反応に対する治療として、プレドニゾロンなどのステロイド剤、抗ウイルス療法としてインターフェロンαを用いた治療が実施されている。

一方、ＣＣＲ４は、ＣＤ４＋Ｔ細胞に発現している７回膜貫通型の膜タンパク質であり、ｔｈｙｍｕｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ（ＴＡＲＣ）／ＣＣＬ１７とｍａｃｒｏｐｈａｇｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ（ＭＤＣ）／ＣＣＬ２２がリガンドとして知られている。ＣＣＲ４は、Ｔｈ２、Ｔｈ１７およびＴｒｅｇ細胞に発現していることが知られている。

抗ヒトＣＣＲ４抗体としては、抗ヒトＣＣＲ４キメラ抗体（非特許文献１２）、抗ヒトＣＣＲ４ヒト化抗体（非特許文献１３）が知られている。抗ヒトＣＣＲ４ヒト化抗体［一般名：Ｍｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂ、商品名：Ｐｏｔｅｌｉｇｅｏ（登録商標）］は、ＣＣＲ４陽性ＡＴＬ、再発または難治性のＣＣＲ４陽性の末梢性Ｔ細胞リンパ腫および再発または難治性のＣＣＲ４陽性の皮膚Ｔ細胞性リンパ腫に対して認可されており、１ｍｇ／ｋｇが１週間隔で８回点滴静注される。またＣＣＲ４陽性ＡＴＬに対し他の抗悪性腫瘍剤と併用する場合には１ｍｇ／ｋｇが２週間隔で８回点滴静注される（非特許文献１４）。

抗ヒトＣＣＲ４抗体を用いたＨＡＭ治療方法が知られている（特許文献３）。またＭｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂを用いた、ＨＡＭに対するフェーズ２ａ臨床治験が行われていることが知られている（非特許文献１１）。

日本国特開２０１０−１７１３０号公報 日本国特開２０１０−１００５７８号公報 国際公開第２０１４／００７３０３号

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前記したように、抗ヒトＣＣＲ４抗体を用いたＨＡＭ治療方法が知られているが、ヒトに投与されたときの臨床効果は検証されておらず、ＨＡＭ患者の治療にはどのような用法用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体を用いるべきか、またどのようなＨＡＭ治療効果が達成できるのか明らかではなかった。

従って、本発明は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片の用法用量を特徴とする新たなＨＡＭの治療または予防剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体をＨＡＭ患者に投与することにより、顕著なＨＡＭの治療効果があらわれることを見出し、本発明を完成させた。すなわち、本願発明は、以下の（１）〜（４２）に関する。

（１）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするＨＡＭの予防または治療剤。
（２）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が１ｍｇ／ｋｇ以下の投与量で４週間以上の投与間隔をおいて投与されることを特徴とする、（１）に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（３）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で１２週間の投与間隔をおいて投与されることを特徴とする、（１）または（２）に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（４）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、それぞれ配列番号１、２および３で表されるアミノ酸配列を含む相補性決定領域（以下、ＣＤＲと略記する）１、２および３を含む抗体重鎖可変領域（以下、ＶＨと略記する）およびそれぞれ配列番号４、５および６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、２および３を含む抗体軽鎖可変領域（以下、ＶＬと略記する）を含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（１）〜（３）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（５）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、配列番号７で表されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８で表されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（１）〜（４）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（６）抗ヒトＣＣＲ４抗体が、モガムリズマブである（１）〜（５）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（７）抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖまたはＣＤＲを含むペプチドである（１）〜（６）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（８）免疫抑制剤を併用することを特徴とする（１）〜（７）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（９）免疫抑制剤が低用量で投与されることを特徴とする、（８）に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（１０）免疫抑制剤がプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、アザチオプリン、シクロスポリン、タクロリムス、ＪＡＫ阻害剤およびＮＦκＢ阻害剤から選ばれるいずれか１つの免疫抑制剤である、（８）または（９）に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（１１）ＨＡＭ患者の末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量およびＣＳＦ中の細胞数から選ばれる少なくともいずれか１つのバイオマーカーを減少させることを特徴とする、（１）〜（１０）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（１２）ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させることを特徴とする（１）〜（１１）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（１３）ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止すること、または運動機能を改善させることを特徴とする、（１）〜（１２）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
（１４）運動機能が、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ Ｓｃａｌｅおよび納の運動障害重症度の少なくとも一方により評価される、（１３）に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。

（１５）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を低用量で投与することを特徴とするＨＡＭの予防または治療方法。
（１６）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を１ｍｇ／ｋｇ以下の投与量で４週間以上の投与間隔をおいて投与することを特徴とする、（１５）に記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（１７）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で１２週間の投与間隔をおいて投与することを特徴とする、（１５）または（１６）に記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（１８）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、それぞれ配列番号１、２および３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、２および３を含むＶＨおよびそれぞれ配列番号４、５および６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、２および３を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（１５）〜（１７）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（１９）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、配列番号７で表されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８で表されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（１５）〜（１８）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２０）抗ヒトＣＣＲ４抗体が、モガムリズマブである（１５）〜（１９）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２１）抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖまたはＣＤＲを含むペプチドである（１５）〜（２０）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２２）免疫抑制剤を併用することを特徴とする（１５）〜（２１）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２３）免疫抑制剤を低用量で投与することを特徴とする、（２２）に記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２４）免疫抑制剤がプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、アザチオプリン、シクロスポリン、タクロリムス、ＪＡＫ阻害剤およびＮＦκＢ阻害剤から選ばれるいずれか１つの免疫抑制剤である、（２２）または（２３）に記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２５）ＨＡＭ患者の末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量およびＣＳＦ中の細胞数から選ばれる少なくともいずれか１つのバイオマーカーを減少させることを特徴とする、（１５）〜（２４）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２６）ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させることを特徴とする（１５）〜（２５）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２７）ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止すること、または運動機能を改善させることを特徴とする、（１５）〜（２６）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。
（２８）運動機能が、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ Ｓｃａｌｅおよび納の運動障害重症度の少なくとも一方により評価される、（２７）に記載の、ＨＡＭの予防または治療方法。

（２９）ＨＡＭの治療または予防に用いるための抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片であって、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とする抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片。
（３０）ＨＡＭの予防剤または治療剤の製造のための抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の使用であって、該予防剤または該治療剤が低用量で投与されることを特徴とする抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の使用。

（３１）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を低用量で投与することを特徴とする、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３２）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を１ｍｇ／ｋｇ以下の投与量で４週間以上の投与間隔をおいて投与することを特徴とする、（３１）に記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３３）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で１２週間の投与間隔をおいて投与することを特徴とする、（３１）または（３２）に記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３４）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、それぞれ配列番号１、２および３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、２および３を含むＶＨおよびそれぞれ配列番号４、５および６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、２および３を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（３１）〜（３３）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３５）抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、配列番号７で表されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８で表されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片である（３１）〜（３４）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３６）抗ヒトＣＣＲ４抗体が、モガムリズマブである（３１）〜（３５）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３７）抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖまたはＣＤＲを含むペプチドである（３１）〜（３６）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３８）免疫抑制剤を併用することを特徴とする（３１）〜（３７）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（３９）免疫抑制剤を低用量で投与することを特徴とする、（３８）に記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（４０）免疫抑制剤がプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、アザチオプリン、シクロスポリン、タクロリムス、ＪＡＫ阻害剤およびＮＦκＢ阻害剤から選ばれるいずれか１つの免疫抑制剤である、（３８）または（３９）に記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（４１）ＨＡＭ患者の末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量およびＣＳＦ中の細胞数から選ばれる少なくともいずれか１のバイオマーカーを減少させることを特徴とする、（３１）〜（４０）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。
（４２）ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させることを特徴とする（３１）〜（４１）のいずれか１つに記載の、ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、および／または運動機能の改善方法。

本発明によれば、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることにより顕著なＨＡＭの治療効果を奏する、ＨＡＭの治療または予防剤および治療または予防方法を提供することができる。

図１は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者の末梢血単核細胞（Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ Ｃｅｌｌｓ；以下ＰＢＭＣと略記する）中のＣＣＲ４陽性細胞の比率の変化を示す。縦軸に、抗ヒトＣＣＲ４ヒト化抗体モガムリズマブの投与前日（Ｄａｙ０）を基準値とする、ＰＢＭＣ中のＣＣＲ４陽性細胞の比率の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＰＢＭＣを患者から採取した日を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図２は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化を示す。縦軸に、Ｄａｙ０を基準値とする、ＰＢＭＣのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＰＢＭＣを患者から採取した日を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図３は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化を示す。縦軸に、フェーズ１のＤａｙ０を基準値とする、ＰＢＭＣのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化の割合（％）を、全患者の平均値で示し、横軸に、ＰＢＭＣを患者から採取した月を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図４は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中の細胞数の変化を示す。縦軸に、スクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ中の細胞数の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した日を示す。横軸の黒塗りの矢じりはモガムリズマブの投与日（Ｄａｙ１）を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図５は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化を示す。縦軸に、フェーズ１のスクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した日を示す。横軸の黒塗りの矢じりはモガムリズマブの投与日（Ｄａｙ１）を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図６は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化を示す。縦軸に、フェーズ１のスクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の変化の割合（％）を、全患者の平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した月を示す。「Ｓｃｒ」はスクリーニング時を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図７は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の濃度の変化を示す。縦軸に、スクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の濃度の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＣＳＦをＨＡＭ患者から採取した日を示す。横軸の黒塗りの矢じりはＤａｙ１を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図８は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の濃度の変化を示す。縦軸に、フェーズ１のスクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の濃度の変化の割合（％）を、全患者の平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した月を示す。「Ｓｃｒ」はスクリーニング時を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図９は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンの濃度の変化を示す。縦軸に、スクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ中のネオプテリンの濃度の変化の割合（％）を、投与量レベルごとの平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した日を示す。横軸の黒塗りの矢じりはＤａｙ１を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図１０は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンの濃度の変化を示す。縦軸に、フェーズ１のスクリーニング時を基準値とする、ＣＳＦ中のネオプテリンの濃度の変化の割合（％）を、全患者の平均値で示し、横軸に、ＣＳＦを患者から採取した月を示す。「Ｓｃｒ」はスクリーニング時を示す。エラーバーは標準偏差を示す。基準値との比較にはＰａｉｒｅｄ Ｔ−ｔｅｓｔを使用した。（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１） 図１１は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者のＭｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ Ｓｃａｌｅ（以下、ＭＡＳと略記することもある）のグレードの変化を示す。縦軸に、全患者数を１００％とした、各グレードの患者の比率（％）を示す。横軸に、評価を行った日を示す。「Ｓｃｒ」はスクリーニング時を示す。 図１２は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＭＡＳのグレードの変化を示す。縦軸に、全患者数を１００％とした、各グレードの患者の比率（％）を示す。横軸に、評価を行った月を示す。 図１３は、フェーズ１試験における、ＨＡＭ患者の、納の運動障害重症度のスコア（Ｏｓａｍｅ’ｓ ｍｏｔｏｒ ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ ｓｃｏｒｅ；以下ＯＭＤＳと略記することもある）のグレードの変化を示す。縦軸に、全患者数を１００％とした、各グレードの患者の比率（％）を示す。横軸に、評価を行った日を示す。「Ｓｃｒ」はスクリーニング時を示す。 図１４は、フェーズ２ａ試験における、ＨＡＭ患者のＯＭＤＳのグレードの変化を示す。縦軸に、全患者数を１００％とした、各グレードの患者の比率（％）を示す。横軸に、評価を行った月を示す。 図１５（Ａ）〜（Ｅ）は、フェーズ２ａ試験期間中、０．３ｍｇ／ｋｇのモガムリズマブを３カ月おきに投与されたＨＡＭ患者４人について、ＰＢＭＣのプロウイルスＤＮＡ量、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０濃度、ＣＳＦ中のネオプテリン濃度、ＭＡＳおよびＯＭＤＳの推移を、患者ごとに示す。図１５（Ａ）は、縦軸に、ＰＢＭＣ１００個あたりのプロウイルスＤＮＡコピー数を示し、横軸に、ＰＢＭＣの採取を行った月を示す。図１５（Ｂ）は、縦軸に、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０濃度（ｐｇ／ｍＬ）を示し、横軸に、ＣＳＦの採取を行った月を示す。図１５（Ｃ）は、縦軸に、ＣＳＦ中のネオプテリン濃度（ｐｍｏｌ／ｍＬ）を示し、横軸に、ＣＳＦの採取を行った月を示す。図１５（Ｄ）は、縦軸にＭＡＳのスコアを示し、横軸に、評価を行った月を示す。図１５（Ｅ）は、縦軸に、ＯＭＤＳのスコアを示し、横軸に、評価を行った月を示す。図１５（Ａ）〜（Ｅ）のそれぞれの図において、グラフ上部の黒塗りの矢じりはモガムリズマブの投与タイミングを示す。

本発明は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするＨＡＭの治療または予防剤および抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が低用量で投与されることによるＨＡＭの治療または予防方法に関する。

また本発明は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止する方法、ＨＡＭ患者の運動機能の改善方法、およびＨＡＭ患者のＨＡＭ重症度の改善方法に関する。ＨＡＭ重症度とは、後述するＨＡＭ患者の臨床症状（運動機能、排尿機能、神経症状など）や免疫学的症状（特定のマーカーを発現した細胞集団、サイトカイン量など）によって判定される病態の重症度である。

ＨＴＬＶ−１は、ヒトＴ細胞に慢性的に感染するレトロウイルスである。ＨＴＬＶ−１感染患者のほとんどは無症候性で健康に生活することができるが、感染者の０．２５−３％はＨＡＭ／ＴＳＰを発症することが知られている。

ＨＡＭとは、末梢血ＨＴＬＶ−１感染Ｔ細胞が脊髄中へ浸潤することによって惹起される慢性脊髄炎の病理像を呈する難治性神経疾患である。ＨＴＬＶ−１の感染ルートとしては、母子間の母子垂直感染、並びに輸血および性交渉による水平感染が知られている。ＨＡＭの症状としては、例えば、胸髄の側索を走行する錐体路が侵されることによる運動障害、排尿障害および神経障害などが挙げられる。

本発明において、ＨＡＭ患者および無症候性ＨＴＬＶ−１キャリアー（ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ｃａｒｒｉｅｒ；ＡＣ、以下ＡＣと略記することもある。また、ＨＴＬＶ−１不顕性感染者とも言う）は、ＨＴＬＶ−１ウイルスに感染しており、健康正常人（健常人）と比べて末梢血液またはＣＳＦ中に抗ＨＴＬＶ−１抗体が検出される。

本発明においてＨＡＭ患者は、ＡＣおよび健常人と比べて、末梢血液中またはＣＳＦ中の抗ＨＴＬＶ−１抗体価の上昇、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、ＨＴＬＶ−１ Ｔａｘ ｍＲＮＡ量の増加、活性化ＣＤ４＋細胞（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞）の増加および、脊髄領域の炎症所見に伴うＣＳＦ中のネオプテリン濃度の増加などが認められる。よって、ＨＡＭ患者はＡＣおよび健常人と区別される。

本発明においてＡＣとは、ＨＴＬＶ−１ウイルス感染は成立しているが、臨床症状を認めない患者をいう。ＨＴＬＶ−１ウイルス感染は、患者の末梢血液中の抗ＨＴＬＶ−１抗体価の有無により判定することができる。

本発明においてＨＡＭを治療するとは、ＨＡＭの症状の悪化を抑制し、またはＨＡＭの症状を改善することなどを意味する。ＨＡＭの症状の悪化を抑制することや、ＨＡＭの症状を改善することで、ＨＡＭ患者の長期予後を改善することができ、その結果車椅子状態や寝たきりなどの運動機能不全への移行を防止することができる。

本発明においてＨＡＭを予防するとは、ＡＣにおいてＨＡＭ発症のリスクを低下させることなどを意味する。

本発明において、ＨＡＭの症状とは、例えば、運動機能の悪化、排尿障害および感覚障害などが挙げられる。

運動機能の悪化とは、随意的な運動の機能に障害が生じることをいい、例えば、自力による歩行、走行などの移動が遅くなり、または移動できなくなることをいう。

本発明において、運動機能は、例えば、１０ｍ歩行時間、２分間歩行距離若しくは６分間歩行距離などの歩行テスト、下肢クローヌスの評価、機能的移動能力を評価するＴｉｍｅ ｕｐ ａｎｄ ｇｏテスト（Ｄ．Ｐｏｄｓｉａｄｌｏ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｇｅｒｉａｔｒｉｃｓ Ｓｏｃｉｅｔｙ：１９９１；３９，１４２−１４８）、痙縮のレベルを表すＭｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ ｓｃａｌｅ（以下ＭＡＳと略記することもある）［Ｒ．Ｗ．Ｂｏｈａｎｎｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｐｈｙｓｉｇｃａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ：１９８７；６７（２），２０６−２０７．］または総合的運動機能を表す納の運動障害重症度（Ｏｓａｍｅ’ｓ ｍｏｔｏｒ ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ ｓｃｏｒｅ；以下ＯＭＤＳと略記することもある）［Ｓ．Ｉｚｕｍｏ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ：１９９６；４６（４）：１０１６−１０２１．］によって評価することができる。

痙縮のためにリハビリをほとんど実施できなかった患者では、ＭＡＳが改善すると、リハビリを実施できるようになり、最終的には歩行状態の改善や日常生活動作の改善につながる。またＭＡＳスコアが増加することなく維持されることは、ＨＡＭ患者の長期予後を改善している。

ＯＭＤＳはＨＡＭの病勢の進行をよく反映することが知られている。すなわち、ＯＭＤＳのスコアが下がることは疾患の改善を反映する。また、ＯＭＤＳスコアが増加することなく維持されることは、ＨＡＭ患者の長期予後を改善している。

本発明において、運動機能の悪化を防止するとは、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により運動機能の経時的な悪化を防止し、投与開始前の運動機能の状態を維持することをいう。具体的には、例えば、一定距離を歩行するための時間の維持、一定時間での歩行距離の維持、ＭＡＳのスコアが増加しない状態の維持およびＯＭＤＳのスコアが増加しない状態の維持の少なくとも１が挙げられる。

また本発明において、運動機能を改善させるとは、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、投与開始前と比べ、運動機能の状態を改善させることをいう。具体的には、例えば、一定距離を歩行するための時間の短縮、一定時間での歩行距離の増加、ＭＡＳのスコアの減少およびＯＭＤＳのスコアの減少の少なくとも１が挙げられる。

本発明において、排尿障害とは蓄尿障害または尿の排出障害などをいい、これらが合併することも含む。具体的には、例えば、頻尿、切迫性尿失禁および排尿困難などが挙げられる。

本発明において、排尿障害は、例えば国際前立腺症状スコア（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ；Ｉ−ＰＳＳ）、過活動膀胱症状質問票（Ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ Ｂｌａｄｄｅｒ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ；ＯＡＢＳＳ）、尿失禁症状・ＱＯＬ評価質問票（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ Ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ−Ｓｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ）、夜間頻尿ＱＯＬ質問票（Ｎｏｃｔｕｒｉａ−Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｒｉｅ；Ｎ−ＱＯＬ）などにより評価することができる。

本発明において、感覚障害とは下肢のしびれ、下肢の疼痛などをいう。本発明において、感覚障害は、例えばＶｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇ Ｓｃａｌｅ（以下ＶＡＳと略記する）を用いて評価することができる。

ＨＡＭは運動障害や排尿障害のみでなく、様々な症状により日常生活に影響する。本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片をＨＡＭ患者に投与することにより、このような全般的状態を改善することを含むＨＡＭの治療または予防方法および治療または予防剤が挙げられる。本発明において、ＨＡＭの全般的状態は、例えばＶＡＳにより評価することができる。

本発明の一態様としてＨＡＭ患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１感染細胞を標的とすることを特徴とする治療または予防方法、および治療または予防剤が挙げられる。

本発明において、ＨＴＬＶ−１感染細胞としては、例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＩＦＮ−γ＋Ｔ細胞（Ｔ_ＨＡＭ）およびＣＤ８＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞などが挙げられる。

好ましくは、ＣＣＲ４＋Ｔ細胞であるＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞およびＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＩＦＮ−γ＋Ｔ細胞から選ばれるいずれか１つの細胞が挙げられ、より好ましくはＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＩＦＮ−γ＋Ｔ細胞（Ｔ_ＨＡＭ）が挙げられる。

ＨＡＭ患者末梢血液中には、無症候性ＨＴＬＶ−１キャリアーおよび健常人に比べて、ＨＴＬＶ−１の転写活性化タンパク質Ｔａｘ特異的な細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞が増加しており、その結果、ＨＴＬＶ−１感染組織の慢性的な炎症を引き起こしている（Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，２００２；９９：８８−９４）。このため、本発明の治療または予防方法および治療または予防剤の標的細胞としてＣＤ８＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞が挙げられる。

また、本発明の治療または予防方法および治療または予防剤が標的とするＨＴＬＶ−１感染細胞としては、ＨＡＭ患者末梢血液中のＨＴＬＶ−１感染細胞のうち、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞が挙げられる（Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２００４；１９９；１３６７−１３７７）。

ＨＴＬＶ−１感染者の末梢血細胞のうち、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞がＨＴＬＶ−１のリザーバー細胞であり、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞画分に含まれる、Ｆｏｘｐ３発現によって制御されている制御性Ｔ細胞（以下、Ｔｒｅｇと略記する）は、ＨＴＬＶ−１に感染するとＴａｘ依存的にＦｏｘｐ３の発現量が低下し、Ｔ細胞の制御機能が低下または欠損している（Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．，２００５；１１５：１３６１−１３６８）。従って、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞も本発明の治療または予防方法および治療または予防剤の標的細胞として含まれる。

本発明の治療または予防方法および治療または予防剤が標的とするＨＴＬＶ−１感染細胞としては、ＨＡＭ患者末梢血液中のＨＴＬＶ−１感染細胞のうち、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量が増加しているＣＣＲ４＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞が挙げられる。

また、ＨＴＬＶ−１が感染しているＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞特異的にＦｏｘｐ３の発現が低下し、インターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）の発現が増加し、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−４、ＩＬ−１０およびＩＬ−１７の発現が低下していることから（Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２００９；４；ｅ６５１７）、ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞も本発明の治療または予防方法および治療または予防剤の標的細胞として含まれる。

また、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣ中のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋ＩＦＮ−γ＋Ｔ細胞比率と、ＨＡＭ患者の脊髄領域の炎症所見と相関するネオプテリン量またはＨＡＭ重症度とが正の相関を示す。一方で、ＨＡＭ患者末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量とネオプテリン量またはＨＡＭ重症度との相関性が低いことから、患者末梢血液中のＨＴＬＶ−１感染Ｔ細胞の絶対量よりも、むしろＩＦＮ−γ産生量が増加する等の機能的に変化したＨＴＬＶ−１感染Ｔ細胞数の増加が、ＨＡＭ重症度とより関連する。

従って、本発明の治療または予防方法および治療または治療剤の標的細胞になり得るＨＴＬＶ−１感染細胞としては、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＩＦＮ−γ＋という特徴的な表現型を示すＴ細胞、即ちＨＡＭの病因細胞（以下、Ｔ_ＨＡＭと略記する場合もある）が挙げられる（Ａｒａｙａ ｅｔ ａｌ，Ｖｉｒｕｓｅｓ，２０１１；３：１５３２−１５４８．）。

本発明において、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ２５＋、ＣＣＲ４＋またはＩＦＮ−γ＋細胞とは、各分子に特異的に結合する抗体を用いたフローサイトメーター（以下、ＦＣＭと略記することもある）解析を行った場合に、ネガティブコントロール抗体による蛍光強度と比べて、実質的に高い蛍光強度を示す細胞集団をいう。

具体的には、細胞膜タンパク質の場合は、各抗原分子に特異的な抗体を用いて細胞を直接染色することができるし、分泌タンパク質の場合は、細胞を適当な界面活性剤等を用いて膜透過処理およびタンパク質固定化処理を行うことで染色することができる。

本発明において、Ｆｏｘｐ３ｌｏｗ細胞とは、Ｆｏｘｐ３発現が低下している細胞を示す。Ｆｏｘｐ３発現が低下している細胞とは、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤ４５ＲＯ−細胞におけるＦｏｘｐ３発現量と同程度のＦｏｘｐ３発現量のことを示し、該細胞集団のＦｏｘｐ３発現量と比較することで、選択することができる。また、Ｆｏｘｐ３ｌｏｗ細胞には、実質的にＦｏｘｐ３の発現が確認されない細胞も含まれる。

本発明において、上述の細胞集団は、以下の抗体を単独または組み合わせて用いることにより選択することができる。

抗ＣＤ４抗体（ＯＫＴ４；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製）、抗ＣＤ２５抗体（Ｍ−Ａ２５１；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）、抗ヒトＣＣＲ４抗体（１Ｇ１；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）、抗ヒトＣＣＲ４マウスモノクローナル抗体（ＫＭ２１６０、Ｎｉｗａ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００４；．６４：２１２７−２１３３）、抗Ｆｏｘｐ３抗体（ＰＣＨ１０１；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製）、抗ＩＦＮ−γ抗体（Ｂ２７；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）。

本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片をＨＡＭ患者に投与することにより、ＨＡＭ患者の末梢血液中またはＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させることを含むＨＡＭの治療または予防方法および治療または予防剤が挙げられる。

本発明において、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が低用量で投与されるとは、少量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が長い間隔をおいて投与されることをいう。少量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片とは、以下段階的に、好ましくは１ｍｇ／ｋｇ以下、０．３ｍｇ／ｋｇ以下、０．１ｍｇ／ｋｇ以下、０．０３ｍｇ／ｋｇ以下、０．０１ｍｇ／ｋｇ以下、より好ましくは０．３ｍｇ／ｋｇ以下、０．１ｍｇ／ｋｇ以下の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片をいう。

抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が長い間隔で投与されるとは、以下段階的に、好ましくは抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が４週間以上、５週間以上、６週間以上、７週間以上、８週間以上、９週間以上、１０週間以上、１１週間以上、１２週間以上、より好ましくは８週間以上、９週間以上、１０週間以上、１１週間以上、１２週間以上、さらに好ましくは１２週間以上の間隔で投与されることをいう。

本発明において、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片は１ｍｇ／ｋｇ以下の投与量で４週間以上の投与間隔をおいて投与されることが好ましく、０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で１２週間の投与間隔をおいて投与されることが最も好ましい。

本発明の一態様として、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＴ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＣＲ４＋Ｆｏｘｐ３ｌｏｗＩＦＮ−γ＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋ＣＣＲ４＋Ｔ細胞などの標的細胞を、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いて阻害または除去することにより、ＨＡＭ患者の末梢血液中またはＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させることを含む治療または予防方法および治療または予防剤が挙げられる。

本発明において、ＨＡＭ患者の末梢血液またはＣＳＦのＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させるとは、以下をいう。通常健常人ＰＢＭＣはｉｎ ｖｉｔｒｏ下で抗体、サイトカイン、化学物質等による刺激無しには自発的な増殖はほとんどしないが、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣは、特別な刺激無しに自発的に増殖する。従って、本発明において、ＨＡＭ患者の末梢血液中またＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させるとは、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いて該ＨＡＭ患者のＰＢＭＣの自発的増殖を阻害した結果、ＨＴＬＶ−１感染細胞数を減少させることも含まれる。

また、本発明の一態様として、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片によるＨＴＬＶ−１感染細胞特異的な細胞増殖阻害、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片のエフェクター活性によるＨＴＬＶ−１感染細胞の傷害および除去等によるＨＴＬＶ−１感染細胞数を減少させることを含む治療または予防方法および治療または予防剤も挙げられる。

また、本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いてＨＡＭ患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させることを含む治療または予防方法および治療または予防剤が挙げられる。

本発明において、ＨＡＭ患者の末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させるとは、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣに含まれるＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させることをいい、ＰＢＭＣ中のＨＴＬＶ−１感染細胞自体が減少すること、ＰＢＭＣ中の細胞の新たな感染が減少していること（感染率の減少）などを示す。

本発明において、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量が減少するとは、ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１感染細胞自体が減少すること、ＣＳＦ中の細胞の新たな感染が減少していること（感染率の減少）、末梢血液からＣＳＦへのＨＴＬＶ−１感染細胞の遊走が減少していることなどを示す。

ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量は、公知の方法［Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，２００２：９９（１）；８８−９４］に基づいて測定することができる。即ち、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣ由来ｃＤＮＡを鋳型として、ＨＴＬＶ−１ ｐＸ遺伝子の部分断片を特異的なプライマーで増幅することで、ＰＢＭＣまたはＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡのコピー数を測定することができる。

本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与によりＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させることを含む治療方法が挙げられる。

ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０はＨＡＭの慢性炎症に関与していると考えられており、またＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０量はＨＡＭ患者の脊髄における炎症のバイオマーカーとして知られている。従って、本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与によりＨＡＭ患者の脊髄の炎症を抑制することを特徴とする治療または予防方法および治療または予防剤が挙げられる。

ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリン量およびＣＸＣＬ１０の量は公知の方法［例えばＳａｔｏ ｅｔ ａｌ，ＰＬＯＳ Ｎｅｇｌｅｃｔｅｄ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ，２０１３；７（１０）：ｅ２４７９に記載の方法］によって測定することができる。すなわち、ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ ｂｅａｄ ａｒｒａｙ ｋｉｔ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）を用い、フローサイトメトリーによって、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の量を測定することができる。また、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用い、ＣＳＦ中のネオプテリン量を測定することができる。

本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与によりＨＡＭ患者のＣＳＦ中の細胞数を減少させることを特徴とする治療または予防剤および治療または予防方法が挙げられる。

ＨＡＭ患者のＣＳＦ中の細胞数は公知の方法［例えばＳａｔｏ ｅｔ ａｌ，ＰＬＯＳ Ｎｅｇｌｅｃｔｅｄ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，２０１３：７（１０）；ｅ２４７９．に記載の方法］により測定できる。すなわち、Ｆｕｃｈｓ−Ｒｏｓｅｎｔｈａｌタイプなどのセルカウンタープレートを用いてＣＳＦ中の細胞数を測定することができる。

本発明に用いられる抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片としては、ＣＣＲ４に特異的に結合すればいかなる抗ヒトＣＣＲ４抗体および該抗体断片であってもよいが、好ましくは、ＣＣＲ４の細胞外領域に特異的に結合する抗体または該抗体断片、ＴＡＲＣ／ＣＣＬ１７またはＭＤＣ／ＣＣＬ２２のＣＣＲ４への結合を阻害する抗体または該抗体断片、エフェクター活性を有する抗体、ＣＣＲ４の細胞外領域に結合しかつエフェクター活性を有する抗体または該抗体断片、ＣＣＲ４の細胞外領域に結合しかつ血小板に結合しない抗体または該抗体断片、ＣＣＲ４の細胞外領域に結合し、血小板に結合せずかつエフェクター活性を有する抗体または該抗体断片などが挙げられる。

ヒトＣＣＲ４は、ヒト未熟好塩基球細胞株ＫＵ−８１２からＫ５−５としてクローニングされた、Ｇ蛋白質共役型の７回膜貫通型受容体であり、配列番号９で示されるアミノ酸配列を有する。ＣＣＲ４の細胞外領域は、配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から１〜３９番目、９９〜１１１番目、１７６〜２０６番目および２６８〜２８４番目のアミノ酸配列であり、細胞内領域は配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から６８〜７７番目、１３４〜１５０番目、２２７〜２４２番目および３０９〜３６０番目のアミノ酸配列である（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ、ＩＤ：Ｐ５１６７９）。

また、胸腺細胞から産生されるＴＡＲＣ（ｔｈｙｍｕｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ）（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１，２１５１４、１９９６）およびマクロファージから単離されたＭＤＣ（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ）（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８５，１５９５、１９９７）、別名ＳＴＣＰ−１（ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−１）（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２，２５２２９、１９９７）がＣＣＲ４に特異的に結合することが知られている。

従って本発明に用いられる抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片としては、好ましくは配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から１〜３９番目、９９〜１１１番目、１７６〜２０６番目および２６８〜２８４番目のアミノ酸配列からなる細胞外領域に含まれるエピトープに結合する抗体または該抗体断片、より好ましくは配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から１〜３９番目のアミノ酸配列に含まれるエピトープに結合する抗体または該抗体断片、さらに好ましくは配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から２〜２９番目のアミノ酸配列に含まれるエピトープに結合する抗体または該抗体断片などが挙げられる。

本発明に用いられる抗ヒトＣＣＲ４抗体としては、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体のいずれであってもよいが、好ましくは単一のエピトープに結合するモノクローナル抗体が挙げられる。

モノクローナル抗体は、ハイブリドーマから生産されるモノクローナル抗体および遺伝子組換え技術によって作製された遺伝子組換え抗体のいずれのモノクローナル抗体でもよい。

ヒトにおいて免疫原性を低下させるために、ヒト型キメラ抗体（以下、単にキメラ抗体ともいう）、ヒト化抗体［ヒト型ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ；（ＣＤＲ）移植抗体ともいう］およびヒト抗体を用いることが好ましい。

キメラ抗体は、ヒト以外の動物の抗体の重鎖可変領域（以下、ＶＨと略記する）および軽鎖可変領域（以下、ＶＬと略記する）と、ヒト抗体の重鎖定常領域（以下、ＣＨと略記する）および軽鎖定常領域（以下、ＣＬと略記する）とからなる抗体である。可変領域についての動物の種類は、マウスやラット、ハムスター、ウサギなどのハイブリドーマを作製しうる動物であれば特に限定されない。

ヒト型キメラ抗体は、ヒトＣＣＲ４に特異的に結合するヒト以外の動物の抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、ヒト抗体のＣＨおよびＣＬをコードする遺伝子を有する発現ベクターにそれぞれ挿入してヒト型キメラ抗体発現ベクターを構築し、動物細胞へ導入して発現させることで作製できる。

ヒト型キメラ抗体のＣＨは、ヒトイムノグロブリン（以下、ｈＩｇと略記する）であれば特に限定されないが、ｈＩｇＧクラスのものが好ましい。ヒト型キメラ抗体のＣＬは、ｈＩｇＧに属すれば特に限定されない。

ヒト化抗体は、ヒト以外の動物の抗体のＶＨおよびＶＬのＣＤＲをヒト抗体のＶＨおよびＶＬの適切な位置に移植した抗体である。ヒト型ＣＤＲ移植抗体は、ＣＣＲ４に特異的に結合するヒト以外の動物の抗体のＶＨおよびＶＬのＣＤＲを任意のヒト抗体のＶＨおよびＶＬのフレームワーク（以下、ＦＲと略記する）に移植したＶ領域をコードするｃＤＮＡを構築し、ヒト抗体のＣＨおよびＣＬをコードするＤＮＡを有する発現ベクターにそれぞれ挿入してヒト化抗体発現ベクターを構築し、動物細胞へ導入して発現させることで、作製されうる。ヒト抗体のＶＨおよびＶＬのＦＲのアミノ酸配列は、ヒト抗体由来のアミノ酸配列であれば特に限定されない。

ヒト化抗体のＣＨは、ｈＩｇであれば特に限定されないが、ｈＩｇＧクラスのものが好ましい。ヒト化抗体のＣＬは、ｈＩｇに属すれば特に限定されない。

本発明に用いられる抗ヒトＣＣＲ４抗体断片としては、上記各抗体断片が含まれる。抗体断片の種類は特に限定されず、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖ、ｄｉａｂｏｄｙ、ｄｓＦｖおよびＣＤＲを含むペプチドなどが挙げられる。

Ｆａｂは、ＩｇＧをパパイン（タンパク質分解酵素）で処理して得られる断片のうち、分子量約５万の抗原結合活性を有する抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のＦａｂは、抗ヒトＣＣＲ４抗体をパパインで処理するか、前記抗体のＦａｂをコードするＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。

Ｆ（ａｂ’）_２は、ＩｇＧをペプシン（タンパク質分解酵素）で処理して得られる断片のうち、分子量約１０万の抗原結合活性を有する抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のＦ（ａｂ’）_２は、抗ヒトＣＣＲ４抗体をペプシンで処理するか、Ｆａｂ’（後述）をチオエーテル結合またはジスルフィド結合で結合させることで、作製されうる。

Ｆ（ａｂ’）は、Ｆ（ａｂ’）_２のヒンジ領域のジスルフィド結合を切断した分子量約５万の抗原結合活性を有する抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のＦａｂ’は、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＦ（ａｂ’）_２をジチオスレイトールで処理するか、前記抗体のＦａｂ’をコードするＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。

ｓｃＦｖは、１本のＶＨと１本のＶＬとを適当なペプチドリンカーを用いて連結した抗原結合活性を有する抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のｓｃＦｖは、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、ｓｃＦｖをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該発現ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。

ｄｉａｂｏｄｙは、ｓｃＦｖが二量体化した抗体断片で、二価の抗原結合活性を有する抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のｄｉａｂｏｄｙは、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、ｄｉａｂｏｄｙをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該発現ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。

ｄｓＦｖは、ＶＨおよびＶＬ中のそれぞれ１アミノ酸残基をシステイン残基に置換したポリペプチドを、システイン残基間のジスルフィド結合を介して結合させた抗体断片である。抗ヒトＣＣＲ４抗体のｄｓＦｖは、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、ｄｓＦｖをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該発現ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。

ＣＤＲを含むペプチドは、ＶＨまたはＶＬのＣＤＲの少なくとも１領域以上を含むペプチドである。抗ヒトＣＣＲ４抗体のＣＤＲを含むペプチドは、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＶＨおよびＶＬのＣＤＲをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを発現ベクターに挿入し、該発現ベクターを原核生物または真核生物へ導入して発現させることで、作製されうる。また、抗ヒトＣＣＲ４抗体のＣＤＲを含むペプチドは、Ｆｍｏｃ法（フルオレニルメチルオキシカルボニル法）、ｔ−ブチルオキシカルボニル法などの化学合成法によっても作製することができる。

本発明においてエフェクター活性とは、抗体のＦｃ領域を介して引き起こされる活性をいい、例えば、抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ活性）、補体依存性細胞傷害活性（ＣＤＣ活性）、およびマクロファージまたは樹状細胞などの食細胞による抗体依存性ファゴサイトーシス（Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ，ＡＤＰ活性）などが挙げられる。

エフェクター活性を制御する方法としては、例えば、抗体のＦｃ領域のＥＵインデックス（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔｓ，５^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９１）２９７番目のアスパラギン（Ａｓｎ）に結合するＮ結合複合型糖鎖の還元末端に存在するＮ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）にα１−６結合するフコース（コアフコースともいう）の量を制御する方法（国際公開第２００５／０３５５８６号、国際公開第２００２／３１１４０号、国際公開第００／６１７３９号）および抗体のＦｃ領域のアミノ酸残基を改変することで制御する方法などが挙げられる。

抗体のＦｃに結合しているＮ結合複合型糖鎖のコアフコースの含量を制御することで、抗体のエフェクター活性を増加または低下させることができる。抗体のＦｃに結合しているＮ結合複合型糖鎖に結合するフコースの含量を低下させる方法としては、α１，６−フコース転移酵素遺伝子（ｆｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ−８，ＦＵＴ８）が欠損したＣＨＯ細胞を用いて抗体を発現させることで、フコースが結合していない抗体を取得することができる。

フコースが結合していない抗体は高いＡＤＣＣ活性を有する。一方、抗体のＦｃに結合しているＮ結合複合型糖鎖に結合するフコースの含量を増加させる方法としては、α１，６−フコース転移酵素遺伝子を導入した宿主細胞を用いて抗体を発現させることで、フコースが結合している抗体を取得できる。フコースが結合している抗体は、フコースが結合していない抗体よりも低いＡＤＣＣ活性を有する。

また、抗体のＦｃ領域のアミノ酸残基を改変することでＡＤＣＣ活性若しくはＣＤＣ活性を増加または低下させることができる。Ｆｃ領域のアミノ酸残基改変を行うことで、ＦｃγＲへの結合活性を増加させるまたは低下させることによりＡＤＣＣ活性を制御することができるし、Ｆｃ領域のアミノ酸残基改変を行うことで、補体の結合活性を増加させるあるいは低下させることによりＣＤＣ活性を制御することができる。

例えば、米国特許出願公開第２００７／０１４８１６５号明細書に記載のＦｃ領域のアミノ酸配列を用いることで、抗体のＣＤＣ活性を増加させることができる。また、米国特許第６，７３７，０５６号明細書、米国特許第７，２９７，７７５号明細書、米国特許第７，３１７，０９１号明細書および国際公開第２００５／０７０９６３号に記載のアミノ酸残基改変を行うことで、ＡＤＣＣ活性またはＣＤＣ活性を、増加させることも低下させることもできる。

本発明に用いられる抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片としては、配列番号９で示されるアミノ酸配列のＮ末端から２〜２９番目のアミノ酸配列に含まれるエピトープに結合する抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片、該エピトープに結合してＡＤＣＣ活性を有する抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片、配列番号１〜３のそれぞれに表されるアミノ酸配列を含むＨ鎖ＣＤＲ１〜３および配列番号４〜６のそれぞれに表されるアミノ酸配列を含むＬ鎖ＣＤＲ１〜３を含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片、配列番号７で表されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８で表されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が挙げられる。また、上述の抗体のＦｃの２９７番目に結合するコアフコースが、低下または欠損している抗体が好ましい。更により具体的には、抗ヒトＣＣＲ４ヒト化抗体［Ｐｏｔｅｌｉｇｅｏ（登録商標）、一般名：Ｍｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂ（モガムリズマブ）］が挙げられる。

本発明の一態様として、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片とその他の治療剤を併用して治療する併用療法も含まれる。

本発明の併用療法としては、例えば低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と、免疫抑制剤とを併用することができる。本発明の併用療法は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と併用される薬剤が同時に投与されてもよいし、連続的に投与されてもよい。

免疫抑制剤としては、例えば、ＨＡＭの過剰な免疫反応を抑える薬剤であるプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメサゾンおよびベタメザソンなどの副腎皮質ステロイド剤、アザチオプリンなどの代謝拮抗剤、シクロスポリンおよびタクロリムス（ＦＫ−５０６）などのカルシニューリン阻害剤、トファソチニブおよびタソシチニブなどのＪａｎｕｓ ｋｉｎａｓｅ（ＪＡＫ）阻害剤、アバタセプトなどのｃｙｔｏｌｙｔｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ−４（ＣＴＬＡ−４）と抗体Ｆｃ領域を融合させたＣＴＬＡ４−Ｉｇ製剤並びにＮＦκＢ阻害剤などが挙げられる。また、各薬剤が標的とする分子に対して同様に作用する上述薬剤の誘導体も用いることができる。

ＨＡＭ患者の慢性的炎症症状に対して通常１０〜６０ｍｇのプレドニゾロンを使用するが、プレドニゾロンの長期投与は肥満、糖尿病、骨粗しょう症、緑内障、感染症などの有害事象を発現してしまうことから、ＨＡＭ患者の炎症症状に合わせた使用量の調節が必要になる。

本発明の併用療法は、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いることで、比較的低用量の副腎皮質ステロイドでより強力な抗炎症効果を発揮することができる。従って、本発明の併用療法としては、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と低用量の副腎皮質ステロイドとを、同時または連続的に併用する治療方法が挙げられる。また、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いることで、低用量の副腎皮質ステロイドを長期間使用する方法も含まれる。また、本発明の併用療法により長期の副腎皮質ステロイド剤の使用に伴う有害事象の発現を低下または予防することを特徴とする、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と低用量の副腎皮質ステロイドとを、同時または連続的に併用する治療方法も含まれる。本発明の併用療法は、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と副腎皮質ステロイドとが、同時に投与されてもよいし、連続的に投与されてもよい。

本発明において、低用量の副腎皮質ステロイドとは、例えばプレドニゾロンとして、１日あたり１〜１０ｍｇの投与量が、以下段階的に、好ましくは９．５ｍｇ、９ｍｇ、８．５ｍｇ、８ｍｇ、７．５ｍｇ、７ｍｇ、６．５ｍｇ、６ｍｇ、５．５ｍｇ、５ｍｇ、４．５ｍｇ、４ｍｇ、３．５ｍｇ、３ｍｇ、２．５ｍｇ、２ｍｇ、１．５ｍｇおよび１ｍｇであることが挙げられる。

本発明のＨＡＭの治療または予防剤としては、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、低用量で投与されることを特徴とする治療または予防剤であればいかなるものでもよいが、通常は薬理学的に許容される一つあるいはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られる任意の方法により製造した医薬製剤として提供するのが好ましい。

好ましくは水、または食塩、グリシン、グルコース若しくはヒトアルブミン等の水溶液等の水性担体に溶解した無菌的な溶液が用いられる。また、製剤溶液を生理的条件に近づけるための緩衝化剤や等張化剤のような、薬理学的に許容される添加剤、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化カリウムおよびクエン酸ナトリウム等を添加することもできる。また、凍結乾燥して貯蔵し、使用時に適当な溶媒に溶解させて用いることもできる。

本発明の治療または予防剤の投与経路は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが好ましく、経口投与、または口腔内、気道内、直腸内、皮下、筋肉内、髄腔内若しくは静脈内等の非経口投与を挙げることができるが、髄腔内投与または静脈内投与が好ましい。

経口投与に適当な製剤としては、例えば、乳剤、シロップ剤、カプセル剤、錠剤、散剤および顆粒剤等が挙げられる。例えば、乳剤およびシロップ剤のような液体調製物は、水、ショ糖、ソルビトールおよび果糖等の糖類、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、オリーブ油および大豆油などの油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤並びにストロベリーフレーバーおよびペパーミント等のフレーバー類等を添加剤として用いて製造できる。

カプセル剤、錠剤、散剤または顆粒剤等は、乳糖、ブドウ糖、ショ糖若しくはマンニトール等の賦形剤、デンプン若しくはアルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース若しくはゼラチン等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、またはグリセリン等の可塑剤等を添加剤として用いて製造できる。

非経口投与に適当な製剤としては、例えば、注射剤、座剤および噴霧剤等が挙げられる。例えば、注射剤は、塩溶液、ブドウ糖溶液、あるいは両者の混合物からなる担体等を用いて調製する。座剤はカカオ脂、水素化脂肪またはカルボン酸等の担体を用いて調製される。また、噴霧剤は該抗体そのもの、ないしは受容者の口腔および気道粘膜を刺激せず、かつ該抗体を微細な粒子として分散させ吸収を容易にさせる担体等を用いて調製する。

担体として具体的には乳糖、グリセリン等が例示される。該抗体および用いる担体の性質により、エアロゾルまたはドライパウダー等の製剤が可能である。また、これらの非経口剤においても経口剤で添加剤として例示した成分を添加することもできる。

更に本発明のＨＡＭの治療または予防剤としては、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と低用量の副腎皮質ステロイドとを含むＨＡＭの治療剤、低用量の副腎皮質ステロイドと併用することを特徴とする、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と副腎皮質ステロイドとを含むＨＡＭの治療剤、低用量の副腎皮質ステロイドと同時または逐次的に併用することを特徴とする、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と副腎皮質ステロイドとを含むＨＡＭの治療剤、低用量の副腎皮質ステロイドを長期間使用することを特徴とする、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と低用量の副腎皮質ステロイドとを含む治療剤および低用量の副腎皮質ステロイドを同時または逐次的に長期間使用することを特徴とする、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片と低用量の副腎皮質ステロイドとを含む治療剤が挙げられる。

本発明の、ＨＡＭの治療または予防方法およびＨＡＭの治療または予防剤は、無症候性ＨＴＬＶ−１キャリアーまたは非活動期のＨＡＭ患者の積極的治療にも応用できる。ＡＣの積極的治療は、慢性的な炎症症状の発症前に治療できるため、神経障害、組織障害の発生を抑えることができる。

また、非活動期のＨＡＭ患者の積極的治療は、慢性的な炎症反応を抑えることで、ＨＡＭ活動期に生じた神経障害や組織障害の修復期間を患者へもたらすことができるため、症状およびＱｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ（ＱＯＬ）改善においても重要である。

即ち、末梢血液中またはＣＳＦ中に、抗ＨＴＬＶ−１抗体、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量などが確認されるが無症候状態であるＨＡＭハイリスクＨＴＬＶ−１キャリアーにおいて、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を投与することで患者の末梢血液中およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させることによってＨＡＭ発症のリスクを低下させる方法、患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させることによってＨＡＭ発症のリスクを低下させる方法、および患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１感染細胞由来サイトカインの産生を抑制することによってＨＡＭ発症のリスクを低下させる方法も本発明に含まれる。

また、無症候状態であるＨＡＭハイリスクＨＴＬＶ−１キャリアーにおいて、患者末梢血液中およびＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させることによってＨＡＭ発症のリスクを低下させることを特徴とする、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を含むＨＡＭの予防剤も本発明に含まれる。

ＨＡＭ発症のハイリスクＨＴＬＶ−１キャリアーは、末梢血液中またはＣＳＦ中の抗ＨＴＬＶ−１抗体価、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、ＨＴＬＶ−１ Ｔａｘ ｍＲＮＡ量、ＨＴＬＶ−１ Ｔａｘ ｍＲＮＡ／ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量比、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞数、ＣＳＦ中のネオプテリン濃度、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量 ＣＳＦ／ＰＢＭＣ比、可溶性ＩＬ−２受容体（ｓＩＬ−２Ｒ）、ＣＸＣＬ１０濃度およびＨＡＭ／ＡＴＬの家族歴などから選ばれる診断マーカーにより、判別することができる。

ＨＡＭ患者において、具体的には末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量高値、血清ｓＩＬ−２Ｒ濃度高値、血清ＣＸＣＬ１０濃度高値、ＨＡＭ／ＡＴＬの家族歴有り、ＣＳＦ中のウイルス量高値、ＨＴＬＶ−１抗体価の増加、ネオプテリン濃度、およびＣＸＣＬ１０濃度高値から選ばれる少なくとも１つのリスクファクターが認められるＨＡＭ患者が、積極的治療の対象となり得る。各診断マーカーの値が高値であるとは、ＨＡＭ患者間において相対的に高い値を示すことを意味する。

また、ＡＣにおいては、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量高値、血清ｓＩＬ−２Ｒ濃度高値、血清ＣＸＣＬ１０濃度高値およびＨＡＭ／ＡＴＬの家族歴有りから選ばれる少なくとも１つのリスクファクターが認められるＡＣが、ハイリスクＡＣとなり得る。

一方、ＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量低値、血清ｓＩＬ−２Ｒ濃度低値、血清ＣＸＣＬ１０濃度低値およびＨＡＭ／ＡＴＬの家族歴無しなどが、ローリスクＡＣになり得る。各診断マーカーの値が高値であるとは、ＡＣ間において相対的に高い値を示すことを意味しており、ＨＡＭ診断値より高い場合も含まれる。

また、運動障害度が高くない非活動期のＨＡＭ患者において、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を投与することでＨＡＭ患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１感染細胞を減少させることによってＨＡＭ重症度を低下させる方法、ＨＡＭ患者のＣＳＦ中の細胞数を減少させることによってＨＡＭ重症度を低下させる方法、ＨＡＭ患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させることによってＨＡＭ重症度を低下させる方法、およびＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の産生を抑制することによってＨＡＭ重症度を低下させる方法も本発明に含まれる。

また、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いてＨＡＭ患者の末梢血液およびＣＳＦの少なくとも一方におけるＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させる方法、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いてＨＡＭ患者のＣＳＦ中の細胞数を減少させる方法、並びにＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させる方法も本発明に含まれる。

本発明の、ＨＡＭの治療または予防方法およびＨＡＭの治療または予防剤は、ＨＡＭ患者またはＡＣがＡＴＬを発症することの予防にも応用できる。低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片を用いて、ＨＡＭ患者またはＡＣの末梢血液中のＣＡＤＭ１^＋ＣＤ７^{−／ｄｉｍ}ＣＤ４^＋細胞［Ｋｏｂａｙａｓｈｉ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１４：２０（１１）；２８５１−６１．］を減少させることによる、ＡＴＬの発症の予防方法も本発明に含まれる。

以下に本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれら実施例によって限定されない。

ＨＡＭ患者を対象とする抗ヒトＣＣＲ４抗体モガムリズマブを用いた臨床試験
臨床試験はオープンラベルのフェーズ１−２ａ試験として、ＨＡＭ患者を対象とし、抗ヒトＣＣＲ４ヒト化抗体モガムリズマブを用いて行われた。

［患者選択基準］
以下の基準で選択された患者が臨床試験に組み入れられた。

＜適格基準＞
ＨＡＭ／ＴＳＰ診断指針（Ｏｓａｍｅ Ｍ． Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ＷＨＯ Ｋａｇｏｓｈｉｍａ Ｍｅｅｔｉｎｇ ａｎｄ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ＨＡＭ／ＴＳＰ．Ｉｎ：Ｂｌａｔｔｎｅｒ ＷＡ，ｅｄ．Ｈｕｍａｎ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｏｌｏｇｙ：Ｈｔｌｖ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｔｄ．；１９９０：１９１−７）を参考にＨＡＭと診断されている患者で、かつ以下の条件を満たす患者

（１）血清およびＣＳＦの抗ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ−１）抗体が陽性であることが確認された患者
（２）ＨＡＭを発症してから１年以上経過している患者
（３）ステロイドによる維持療法中で、かつ下記に該当する患者
・ブレドニゾロン換算で１０ｍｇ／ｄａｙ以下を３カ月以上継続投与していること。
・ＣＳＦ中ネオプテリン濃度が５ｐｍｏｌ／ｍＬ以下に改善されていない。
・登録３カ月以上前のＣＳＦ中ネオプテリン濃度と比較して、登録前直近のＣＳＦ中ネオプテリン濃度の増減が６０％の範囲内であった患者。ただし、比較するネオプテリン濃度はステ口イド維持療法中のものであること。
ただし、下記の患者は除外する。
登録日前３カ月以内にステロイドパルス療法を受けた。
登録日前３カ月以内にステロイド内服量の変更をした。
（４）同意取得時の年齢が２０歳以上の患者
（５）末梢血のＨＴＬＶ−１プロウイルス定量が検出可能な患者
（６）登録日前３カ月以上、納の運動障害重症度（ＯＭＤＳ）のグレードに変化がない患者
（７）同意取得時に歩行補助具の要否に関係なく１０メートル以上歩行可能な患者
（８）モガムリズマブ投与終了１週間後まで入院可能な患者
（９）主たる臓器機能が保持されている患者（登録日前２８日以内の直近検査値で下記の基準を満たしている患者〉
・好中球数１，５００／ｍｍ^３以上
・血小板数１００，０００／ｍｍ^３以上
・ヘモグロビン９．０ｇ／ｄＬ以上
・ＡＳＴ（ＧＯＴ）：施設基準値上限の１．５倍以下
・ＡＬＴ（ＧＰＴ）：施設基準値上限の１．５倍以下
・総ビリルビン：施設基準値上限の１．５倍以下
・血清クレアチニン：施設基準値上限の１．５倍以下
・心電図：治療を要する異常所見を認めないこと
・心エコーによる左室駆出率（ＬＶＥＦ）：５０％以上
・血中酸素飽和度（Ｓｐ０_２）：９０％以上
（１０）本治験への参加について、本人から自由意思による文書同意が得られている患者

＜除外基準＞
被験者の保護および治験薬の評価上問題となることから、下記のいずれかに該当する患者は本臨床試験から除外された。

（１）急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変の既往がある患者
（２）結核の既往、もしくは活動性の結核を有している患者
（３）登録日前１２カ月以内に心筋梗塞を発症した患者
（４）過去に抗体製剤投与によりアレルギー症状を発症した患者
（５）登録日前６カ月以内に免疫抑制剤、インターフェロンαの投与を受けた患者
（６）登録日前４週以内に生ワクチンまたは弱毒性ワクチン・不活化ワクチンを接種した、または、治験期間中に接種する予定のある患者
（７）重篤な合併症（心不全、肺疾患、腎不全、肝不全、コントロール困難な糖尿病等〉を有する患者
（８）その他、モガムリズマブの投与によりその症状が悪化すると思われる疾患を有する患者（褥瘡、感染症、自己免疫疾患）
（９）癌の既往、合併している患者
ただし、根本的切除を施行し、登録前の少なくとも５年間に再発が認められていない固形癌については登録可能とする。また、皮膚の基底細胞癌や扁平上皮癌（悪性黒色腫は隙く）、非浸潤型の子宮頸部癌、消化管の上皮内癌及び子宮体の上皮内癌に関しては、根治していると判断されている場合には５年以内であっても登録可能とする。
（１０）ＡＴＬを合併している患者
（１１）妊娠中、授乳中および妊娠している可能性のある患者、または挙児希望のある患者
（１２）登録日前２週以内にビタミン製剤（アリナミン、ビタミンＣ等）、及び以下のサプリメント（フコイダン、カテキン、ポリ硫酸ペントサン）の投与を受けた患者
（１３）治験参加同意取得前４力月以内に、他の治験薬の投与を受けたことがある患者
（１４）頸椎疾患、椎間板ヘルニア、黄色靭帯骨化症などの骨髄圧迫病変を合併している患者
（１５）精神障害、てんかん発作、認知症を有する患者
（１６）ＨＢｓ抗原、またはＨＢｃ抗体、またはＨＢＶ−ＤＮＡ（リアルタイムＰＣＲ法）が陽性の患者
（１７）ＨＣＶ抗体が陽性の患者
（１８）ＨＩＶ抗体が陽性の患者
（１９）その他、治験責任医師または治験分担医師により本治験への参加が不適切と判断された患者

上記基準に基づきフェーズ１試験に組み入れられた患者は２１人（女性：１７人、男性：４人）であり、年齢の中央値は６４歳（範囲：３６〜７３歳）、罹病期間の中央値は９．２年（範囲：２．２〜３５．１年）、ＯＭＤＳスコアの中央値は５（範囲：２〜６）であった。登録時点で患者に投与されていた経口プレドニゾロンの投与量の中央値は５ｍｇ／ｄａｙ（範囲：２．５〜１０ｍｇ／ｄａｙ）であり、本試験が開始されるまでの経口プレドニゾロンによる治療期間の中央値は３．５年（範囲：０．５〜７．８年）であった。

［研究治療］
フェーズ１試験は用量増加試験として行われた。投与日（以下、Ｄａｙ１とも記載する）において、患者はモガムリズマブを経静脈的に投与され、Ｄａｙ８５（投与日を基準とする８５日目。以下同様にして日を表す）まで観察された。最大耐用量（ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓａｇｅ：ＭＴＤ）の決定は３＋３デザインに従い、０．００３〜０．３ｍｇ／ｋｇの５段階の投与量レベルで行われた。各投与量レベルとモガムリズマブの投与量との関係を表１に示す。

用量制限毒性（ｄｏｓｅ ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｔｏｘｉｃｉｔｙ、以下ＤＬＴと略記する）の対象はモガムリズマブの投与後１週間までに発現したＧｒａｄｅ３以上の血液毒性（白血球減少、好中球減少、リンパ球減少はＧｒａｄｅ４以上のみ）またはＧｒａｄｅ３以上の非血液毒性（インフュージョンリアクション／サイトカイン放出症候群はＧｒａｄｅ４のみ）とした。各投与量レベルにおける検討症例は３例（最大６例）とした。投与量レベル１から患者の登録が行われ、以下の規則で段階的に高い投与量レベルへ移行することとした。

（１）ＤＬＴ事象の発生が３例中０例であった場合、１段階高い投与量レベルに移行する。
（２）ＤＬＴ事象の発生が３例中１例もしくは２例であった場合、同一投与量レベルに３例追加し、６例とする。
（２−１）ＤＬＴ事象の発生が６例中１例または２例であった場合は、１段階高い投与量レベルへ移行する。
（２−２）ＤＬＴ事象の発生が６例中３例以上であった場合、その投与量レベルをＭＴＤとする。
（３）ＤＬＴ事象の発生が３例中３例であった場合、その投与量レベルをＭＴＤとする。

ＭＴＤが決定された場合、それより１段階低い投与量レベルを最大投与量とすることとした。また、投与量レベル５においてもＤＬＴ事象の発生が３例中２例以下だった場合、投与量レベル５を最大投与量とすることとした。最大投与量として決定された投与量レベルでは、検討症例が３例追加されることとした。

Ｄａｙ８５に、フェーズ２ａへ移行する患者選択を行った。フェーズ２ａにおける初回投与は、それぞれの患者のフェーズ１における投与量レベルと同じ投与量レベルで行った。その後、０．００３、０．０１もしくは０．０３ｍｇ／ｋｇを２カ月（１カ月は２８日、４週間に相当）間隔で、または０．１もしくは０．３ｍｇ／ｋｇを３カ月間隔で投与した。ただし、患者が下記の再投与基準を満たさなかった場合は、投与は延期された。

＜再投与基準＞
以下の基準を全て満たす患者が、再投与基準を満たしている者として再投与を受けた。
（１）投与日前直近の検査（初回の場合は登録時）の末梢血のＨＴＬＶ―１プロウイルスが検出された患者
（２）血漿中の抗モガムリズマブ中和抗体が陰性の患者
（３）投与目前日または当日の血液検査の値が下記を満たしている患者
（ｉ）好中球数１，５００／ｍｍ^３以上
（ｉｉ）血小板数１００，０００／ｍｍ^３以上
（ｉｉｉ）ヘモグロビン９．０ｇ／ｄＬ以上
（ｉｖ）ＡＳＴ（ＧＯＴ）：施設基準値上限の１．５倍以下
（ｖ）ＡＬＴ（ＧＰＴ）：施設基準値上限の１．５倍以下
（ｖｉ）総ビリルビン：施設基準値上限の１．５倍以下
（ｖｉｉ）血清クレアチニン：施設基準値上限の１．５倍以下
（４）治験責任医師および治験分担医師により、投与の安全性に問題ないと判断された患者

投与後のプロウイルスレベルが、フェーズ１の投与前日（Ｄａｙ０）ベースライン値の４０％以下に下がらなかった場合、１段階上の投与量レベルで投与された。なお、臨床試験参加以前より内服していたステロイド剤は、試験期間中に用量変更を行わず、併用された。また、モガムリズマブの各投与の前に、抗ヒスタミン剤（３０〜５０ｍｇのジフェンヒドラミンまたは２ｍｇのｄ−マレイン酸クロルフェニラミン）および解熱鎮痛剤（３００〜５００ｍｇのアセトアミノフェン）が経口投与された。

上記試験計画に基づき実際に投与が行われたタイミングと投与量レベルを患者ごとに表２に示す。

［薬効評価］
Ｉ．ＰＢＭＣの評価
（１）ＰＢＭＣの採取
末梢血液の採取は、フェーズ１のスクリーニング時、モガムリズマブ投与前日（Ｄａｙ０）、Ｄａｙ２、７、１５、２９、５７および８５、ならびにフェーズ２ａ期間中、４週間ごとに行った。エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）入り採血管に、患者から血液を採取し、その後すみやかに転倒混和を行い、検体回収時まで室温保存した。ＰＢＭＣは末梢血液からＦｉｃｏｌｌ密度勾配遠心法により分離され、分析に使用されるまで凍結保存された。

（２）ＣＣＲ４＋細胞の分析
蛍光標識された抗ＣＣＲ４抗体 １Ｇ１（ＢＤバイオサイエンシズ）を用い、暗所にて、それぞれの抗体を飽和濃度でＰＢＭＣと４℃、２０分間反応させた。その後、ＰＢＭＣを２回洗浄し、ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤバイオサイエンシズ）を用いて分析した。

Ｄａｙ０を基準とする、ＰＢＭＣ中のＣＣＲ４陽性細胞の比率の変化を図１に示す。図１に示すように、ＰＢＭＣ中のＣＣＲ４陽性細胞は、モガムリズマブの単回投与により、いずれの投与量レベルにおいても速やかに減少した。

（３）ＰＢＭＣのプロウイルスＤＮＡ量の評価
ＰＢＭＣのプロウイルスＤＮＡ量はＹａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，２００２：９９（１）；８８−９４に記載の方法に従い下記の通り評価された。

５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、２０ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１Ｍ ＮａＣｌおよび１％ＳＤＳを含むバッファー（以下、ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒと記す）に懸濁後、１５０μｇ／ｍＬ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｋ（Ｗａｋｏ純薬社製）を加えて、５５℃で一晩振盪し、フェノール／クロロホルムを用いてＨＡＭ患者のＰＢＭＣのゲノムＤＮＡを抽出した。

抽出したゲノムＤＮＡを鋳型にＨＴＬＶ−１のｐＸ領域およびヒトβ−ａｃｔｉｎに対するＴａｑＭａｎプローブおよび各遺伝子のプライマーセットを用いて、ｒｅａｌ ｔｉｍｅ−ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（以下、ＰＣＲと略記する）を行った。

ＨＴＬＶ−１ ｐＸの標準検体として、ＨＴＬＶ−１ ｐＸ領域が１ ｃｏｐｙ／ｃｅｌｌ でインテグレートしているＨＴＬＶ−１感染ラットＴＡＲＬ２細胞株由来ゲノムＤＮＡ、およびβ−ａｃｔｉｎの標準検体として、健常者ＰＢＭＣ由来ゲノムＤＮＡを用いて、同時にＰＣＲを行い検量線を作成した。作成した検量線から各検体のｐＸおよびβ−ａｃｔｉｎのコピー数を算出し、下記式により１００ ＰＢＭＣ ｃｅｌｌｓあたりのＨＴＬＶ−１のプロウイルスＤＮＡ量を決定した。結果を図２および図３に示す。

１００ ＰＢＭＣ ｃｅｌｌｓあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量＝（ＨＴＬＶ−１（ｐＸ）コピー数）／（β−ａｃｔｉｎコピー数／２）×１００

図２に示すように、ＰＢＭＣのプロウイルスＤＮＡ量は、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与により、いずれの投与量レベルにおいても速やかに減少した。また、図３に示すように、フェーズ２ａ試験におけるモガムリズマブの反復投与により、ＰＢＭＣのプロウイルス量の減少は維持された。

末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルス量は、ＨＡＭの長期予後と相関することが知られている（Ｏｌｉｎｄ ｅｔ ａｌ，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．２００６；６３：１５６０−１５６６）ことから、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量を減少させ、ＨＡＭを治療できることが示された。

ＩＩ．ＣＳＦの評価
（１）ＣＳＦの採取
ＣＳＦの採取は、フェーズ１のスクリーニング時、モガムリズマブ投与前日（Ｄａｙ０）、Ｄａｙ２、７、１５、２９、５７および８５、ならびにフェーズ２ａの初回投与時およびそれ以降の再投与時毎に行った。

（２）ＣＳＦ中の細胞数の測定
ＣＳＦ中の細胞数は、Ｆｕｃｈｓ−Ｒｏｓｅｎｔａｌタイプのセルカウンタープレートを使用し、添付の説明書に従って計測した。結果を図４に示す。

図４に示すように、ＣＳＦ中の細胞数は、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与により、いずれの投与量レベルにおいても速やかに減少した。ＣＳＦ中の細胞の９０％以上がＣＸＣＬ１０のレセプターであるＣＸＣＲ３を発現しており、炎症のループに関与していると考えられている（Ｙａｍａｎｏ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１５：６；３９５−４０１．）。

従って、上記の結果から、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、ＨＡＭ患者の慢性炎症を抑制できることが示された

（３）ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量の測定
ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量は、患者から採取されたＣＳＦを１０００ｇで１０分間遠心分離することにより得られた細胞を用い、Ｉ−（３）に記載の方法に準じて測定した。ＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量は下記式により算出した。結果を図５および図６に示す。

ＣＳＦ １ｍＬあたりのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量（コピー数／ｍＬ）＝（ｐＸコピー数）／（β−ａｃｔｉｎコピー数／２）×（１μＬ ＣＳＦ中の細胞数）×１０００

図５および図６に示すように、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与、およびフェーズ２ａ試験におけるモガムリズマブの反復投与により、ＣＳＦ中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量は減少した。

（４）ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０およびネオプテリン濃度の測定
ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０およびネオプテリン濃度の測定には、患者から採取されたＣＳＦを１０００ｇで１０分間遠心分離することにより得られた上清を使用した。ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０の濃度の測定はサイトメトリックビーズアレイ（ＢＤバイオサイエンシズ）を用い、説明書に従って行った。またＣＳＦ中のネオプテリン濃度は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて測定した。結果を図７〜図１０に示す。

図７〜図１０に示すように、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与、およびフェーズ２ａ試験におけるモガムリズマブの反復投与により、ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０およびネオプテリン濃度は減少した。

ＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０はＨＡＭの慢性炎症に関与していると考えられており、またＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０濃度はＨＡＭ患者の脊髄における炎症のバイオマーカーであり、疾患の進行の速さと強く相関することが知られている［Ｓａｔｏ ｅｔ ａｌ，ＰＬＯＳ Ｎｅｇｌｅｃｔｅｄ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，２０１３：７（１０）；ｅ２４７９．］。

従って、上記の結果から、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、ＨＡＭ患者の慢性炎症を抑制できることが示された。

ＩＩＩ．運動機能評価
Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ ｓｃａｌｅ（ＭＡＳ）および納の運動障害重症度（ＯＭＤＳ）の評価
ＭＡＳおよびＯＭＤＳの評価はフェーズ１スクリーニング時、Ｄａｙ０、７、１５、２９、５７および８５に、またフェーズ２ａ期間中は４週間ごと、およびモガムリズマブの投与日ごとに実施した。

ＭＡＳは以下の表３に従い患者の状態を判断し、点数化した。結果を図１１および図１２に示す。

図１１に示すように、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与により、投与量レベルに関係なく、Ｄａｙ７ではグレード２以上の患者はいなくなった。そしてＤａｙ８５でも、グレード２以上の患者の割合は１０％を維持していた。また、図１２に示すように、フェーズ２ａ試験におけるモガムリズマブの反復投与により、３カ月以降、グレード２以上の患者の割合は１０％以下であった。

従って、上記の結果から、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、痙縮による運動障害を改善し、ＨＡＭが治療できることが示された。

ＯＭＤＳは以下の表４に従い患者の状態を判断し、点数化した。結果を図１３および図１４に示す。

図１３に示すように、試験開始前にはグレード５以上の患者が７０％だったが、フェーズ１試験におけるモガムリズマブの単回投与により、Ｄａｙ７〜Ｄａｙ１５ではグレード５以上の患者は、６０％以下に減少し、Ｄａｙ２９では約５０％に減少した。また、グレード２の患者が抗体投与前と比べて増加した。また、図１４に示すようにフェーズ２ａ試験におけるモガムリズマブの反復投与により、ＯＭＤＳの改善傾向は維持され、さらにグレード１まで改善する患者が１０．５％確認された。

従って、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、運動障害を改善し、ＨＡＭが治療できることが示された。

以上の結果をまとめると、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、ＨＡＭ患者のＰＢＭＣのウイルス量を低下させ、脊髄炎症が抑制される結果、運動障害が改善され、ＨＡＭを治療できることが示された。

ＩＶ．投与量レベル５のモガムリズマブの投与を受けた患者の評価結果
フェーズ２ａ試験に参加した１９人の患者の内、投与量レベル５の抗ＣＣＲ４抗体の投与を３カ月（１２週）間隔で投与された４人の患者（Ｎｏ．１７、１８、２０および２１）の評価結果を図１５（Ａ）〜図１５（Ｅ）に示す。

図１５（Ａ）〜図１５（Ｅ）に示すように、これらの患者では、効果に個人差はあるものの、ＰＢＭＣのＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量ならびにＣＳＦ中のＣＸＣＬ１０およびネオプテリン濃度が減少し、さらに、ＭＡＳおよびＯＭＤＳの維持または改善が見られた。

従って、０．３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＣＲ４抗体または該抗体断片を３カ月（１２週）間隔で投与することにより、ＨＡＭが治療できることが示された。

Ｖ．安全性
本試験中に確認された有害事象を表５に示す。

表５に示すように、モガムリズマブは良好な安全性プロファイルを示した。ＡＴＬ患者に対し１．０ｍｇ／ｋｇのモガムリズマブが毎週投与された際には、インフュージョンリアクションが約９割の患者に発生し、またグレード３以上の重篤な皮疹も高頻度で発生したことが知られている［Ｉｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２０１２：３０（８）；８３７−８４２．］。一方、本試験において、インフュージョンリアクションは１例のみに、グレード１の軽度なものが一過性に認められたのみだった。また、グレード３以上の皮疹は認められなかった。

従って、低用量の抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片の投与により、有効でかつ安全性の高いＨＡＭ治療が可能であることが示された。

配列番号１：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＨ鎖のＣＤＲ１のアミノ酸配列
配列番号２：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＨ鎖のＣＤＲ２のアミノ酸配列
配列番号３：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＨ鎖のＣＤＲ３のアミノ酸配列
配列番号４：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＬ鎖のＣＤＲ１のアミノ酸配列
配列番号５：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＬ鎖のＣＤＲ２のアミノ酸配列
配列番号６：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＬ鎖のＣＤＲ３のアミノ酸配列
配列番号７：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＨ鎖の可変領域のアミノ酸配列
配列番号８：人工配列の記載；抗ヒトＣＣＲ４抗体のＬ鎖の可変領域のアミノ酸配列

本発明を特定の態様を用いて詳細に説明したが、本発明の意図と範囲を離れることなく様々な変更および変形が可能であることは、当業者にとって明らかである。なお、本出願は、２０１７年３月２日付で出願された日本特許出願（特願２０１７−０３９５０６）に基づいており、その全体が引用により援用される。

Claims (10)

1. 抗ヒトＣＣ−ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ４（ＣＣＲ４）抗体または該抗体断片を有効成分として含有し、該抗体または該抗体断片が低用量で投与されることを特徴とするヒトＴ細胞白血病ウイルス−１（ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ−１；以下ＨＴＬＶ−１と略記する）関連脊髄症（ＨＴＬＶ−１ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｙｅｌｏｐａｔｈｙ；以下、ＨＡＭと略記する）の予防または治療剤であって、抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が、配列番号７で表されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８で表されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片であり、該抗ヒトＣＣＲ４抗体または該抗体断片が０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で１２週間の投与間隔をおいて投与されることを特徴とする、ＨＡＭの予防または治療剤。
2. 抗ヒトＣＣＲ４抗体が、モガムリズマブである請求項１に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
3. 抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２またはｓｃＦｖである請求項１または２に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
4. 免疫抑制剤を併用することを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
5. 免疫抑制剤が低用量で投与されることを特徴とする、請求項４に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
6. 免疫抑制剤がプレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、アザチオプリン、シクロスポリン、タクロリムス、ＪＡＫ阻害剤およびＮＦκＢ阻害剤から選ばれるいずれか１つの免疫抑制剤である、請求項４または５に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
7. ＨＡＭ患者の末梢血液中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量、脳脊髄液（以下ＣＳＦと略記する）中のＨＴＬＶ−１プロウイルスＤＮＡ量およびＣＳＦ中の細胞数から選ばれる少なくともいずれか１つのバイオマーカーを減少させることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
8. ＨＡＭ患者のＣＳＦ中のネオプテリンおよびＣＸＣＬ１０の少なくとも一方の量を減少させることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
9. ＨＡＭ患者の運動機能の悪化を防止し、または運動機能を改善させることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。
10. 運動機能が、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ Ｓｃａｌｅ（以下ＭＡＳと略記する）および納の運動障害重症度（Ｏｓａｍｅ’ｓ ｍｏｔｏｒ ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ ｓｃｏｒｅ；以下ＯＭＤＳと略記する）の少なくとも一方により評価される、請求項９に記載の、ＨＡＭの予防または治療剤。

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