JP5729735B2

JP5729735B2 - ダルセトラピブのリポソーム製剤

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Publication number: JP5729735B2
Application number: JP2013542485A
Authority: JP
Inventors: グロス，ギュンター; タルディオ，ジョセフ
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2010-12-08
Filing date: 2011-12-05
Publication date: 2015-06-03
Anticipated expiration: 2031-12-05
Also published as: CN103237542A; US20120148662A1; KR101546171B1; KR20130113494A; CA2818018A1; JP2013544861A; WO2012076443A1; MX2013006031A; BR112013014291A2; EP2648698A1; RU2013129777A; CA2818018C

Description

本発明は、新規の安定なＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートリポソーム組成物、その調製のための方法及び疾患の処置におけるその使用に関する。

国際特許出願WO2004082593は、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが極めて低い水溶解度を有し、そして、従来法で投与した場合に低い経口バイオアベイラビリティを有することを認めている。本発明は、心血管障害の処置における使用及び方法のための、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートのバイオアベイラビリティの増加をもたらす医薬組成物を提供する。さらに、該薬物は、溶解度又は崩壊度律速（dissolution limited absorption）に起因する任意の障壁を回避する溶解形態で投与される。本発明のこれら及び他の利点ならびに追加の発明の特徴は、本明細書に提供される発明の説明から明らかであろう。

本発明は、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びリポソームを含む安定な組成物であって、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが、リポソーム膜中に実質的に封入されている、組成物に関する。具体的には、組成物中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの少なくとも約９５％が、リポソーム中に封入されている。

さらに具体的には、組成物中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの１００％が、リポソーム中に封入されている。

特定の実施態様においては、本発明は、リポソームが約２０〜約１０００nm、特に、約２５〜約２００nmのサイズを有する、上述したような組成物を含む。

特定の実施態様においては、本発明は、リポソームが９５％卵レシチン又は大豆レシチンである、上述したような組成物を含む。

特定の実施態様においては、本発明は、リポソームの約８０％、さらに具体的には、９５％が、約２５〜約２００nmのサイズを有する、上述したような組成物を含む。

特定の実施態様においては、本発明は、レシチンと少なくとも１つの安定剤がリポソームを形成する、組成物を提供する。

特定の実施態様においては、本発明は、少なくとも４０％の水を含む組成物をさらに提供する。

さらなる実施態様においては、本発明は、０．０１％〜０．５％、特に、０．１％〜０．３％、さらに具体的には、０．２５％（重量／体積）のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが存在する、組成物を提供する。

これらの医薬組成物のリポソーム成分は、脂質、特に、リン脂質である。特に、リン脂質は、レシチンである。レシチンは、植物、動物又は合成起源、例えば、大豆レシチン、卵レシチン又はＬ−β−オレオイル−２−パルミトイル−α−レシチンであり、さらに具体的には、卵レシチンであることができる。

本明細書において定義されるような本発明のある実施態様においては、組成物は、溶液の形態である。

本明細書において定義されるような本発明のある実施態様においては、組成物は、水溶液の形態である。

別の実施態様においては、本発明は、非経口投与される。

さらなる実施態様においては、本発明は、心血管障害を治療又は予防するための組成物を提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下：
− アルコール中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液；及び
− リポソーム、特にレシチン、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する溶液
を含むキットを提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下：
− アルコール中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液（特に、アルコールは、エタノール、グリコールフロール（glycolfurol）、プロピレングリコール又はそれらの混合物であり、さらに具体的には、エタノールである）；及び
− リポソームの溶液（特に、リポソームは、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞であり、さらに具体的には、リン脂質はレシチンであり、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する）
を含むキットを提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下：
− アルコール中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液（特に、アルコールは、エタノール、グリコールフロール、プロピレングリコール又はそれらの混合物であり、さらに具体的には、エタノールである）；及び
− リポソームの水溶液（特に、リポソームは、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞であり、さらに具体的には、リン脂質はレシチンであり、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する）
を含むキットを提供する。

さらなる実施態様においては、本発明は、以下：
− 薬学的に許容しうる溶媒中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液を含有するバイアル；及び
− リポソーム、特にレシチン、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する溶液を含有するバイアル
を含むキットを提供する。

さらなる実施態様においては、本発明は、以下：
− 薬学的に許容しうる溶媒中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液を含有するバイアル（特に、薬学的に許容しうる溶媒は、エタノール、グリコールフロール、プロピレングリコール又はそれらの混合物であり、さらに具体的には、エタノールである）；及び
− リポソームの溶液を含有するバイアル（特に、リポソームは、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞であり、さらに具体的には、リン脂質はレシチンであり、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する）
を含むキットを提供する。

さらなる実施態様においては、本発明は、以下：
− 薬学的に許容しうる溶媒中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの溶液を含有するバイアル（特に、薬学的に許容しうる溶媒は、エタノール、グリコールフロール、プロピレングリコール又はそれらの混合物であり、さらに具体的には、エタノールである）；及び
− 水中のリポソームの溶液を含有するバイアル（特に、リポソームは、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞であり、さらに具体的には、リン脂質はレシチンであり、場合により、少なくとも１つの安定剤を含有する）
を含むキットを提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下の工程：
ａ）薬学的に許容しうる溶媒中にＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びレシチンを含む油溶性組成物を調製する工程；
ｂ）安定剤及び水を含む水溶性組成物を調製する工程；
ｃ）それぞれ、工程ｂ）及びａ）により得られた水溶性組成物と油溶性組成物を混合する工程；
ｄ）磁気撹拌器を用いて、特に、例えば２００〜５００rpmで撹拌する工程；
ｅ）高圧、特に、２００〜１５００atm（５０〜８０MPa）、さらに具体的には、５００〜８００atm（５０〜８０MPa）でホモジナイズする工程
を含むリポソーム組成物を調製する方法を提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下の工程：
ａ）薬学的に許容しうる溶媒中にＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びレシチンを含む油溶性組成物を調製する工程；
ｂ）マンニトール及び水を含む水溶性組成物を調製する工程；
ｃ）それぞれ、工程ｂ）及びａ）により得られた水溶性組成物と油溶性組成物を混合する工程；
ｄ）磁気撹拌器を用いて、特に、例えば５００rpmで撹拌する工程；
ｅ）圧力５００〜８００atm（５０〜８０MPa）でホモジナイズする工程；及び
ｆ）リポソーム溶液を濾過する工程
を含むリポソーム組成物を調製する方法を提供する。

別の実施態様においては、本発明は、以下の工程：
ａ）薬学的に許容しうる溶媒中に１％〜１０％のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びレシチンを含む油溶性組成物を調製する工程；
ｂ）マンニトール及び水を含む水溶性組成物を調製する工程；
ｃ）それぞれ、工程ｂ）及びａ）により得られた水溶性組成物と油溶性組成物を混合する工程；
ｄ）磁気撹拌器を用いて、特に、例えば５００rpmで撹拌する工程；
ｅ）高圧、特に、２００〜１５００atm（２０MPa〜１５０MPa）、さらに具体的には、５００〜８００atm（５０MPa〜８０MPa）でホモジナイズする工程
を含むリポソーム組成物を調製する方法を提供する。

別の実施態様においては、本発明は、滅菌、噴霧乾燥及び／又は凍結乾燥することができる。特定の実施態様においては、本発明は、蒸気滅菌することができる。

特に明記しない限り、本明細書及び特許請求の範囲において使用される下記の用語は、以下に提供する意味を有する。

本明細書において使用される用語「リポソーム」は、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞に関する。本明細書において使用される脂質という用語は、炭化水素含有有機化合物の両親媒性クラスに関する。

用語「薬学的に許容しうる水混和性溶媒」又は「薬学的に許容しうる溶媒」は、エタノール、グリコールフロール、プロピレングリコール又はそれらの混合物、特に、エタノールを含む。

本明細書において使用される用語「小胞」は、コンパートメントを封入する少なくとも１つの膜を含む、小さな封入コンパートメントに関する。用語「コンパートメント」は、小胞の核に関する。膜は、小胞の外部環境から核の内容物を分離する。本明細書において使用される膜という用語は、コンパートメントを封入する脂質二重層を指す。

本明細書において上述した小胞は、上記成分をそれぞれ含む多層をさらに含んでもよい。これらのリポソームは、また、オリゴ層（oligolamellar）又は多重層小胞として知られている。Anderson等は、タンパク質薬物が封入されているこれらの小胞を記載した（1994, CYTOKINE 6, p92-101）。本明細書において使用される多重層リポソームという用語は、層が水性媒体により分離されている多層構造を有するリポソームに関する。

小胞は、リン脂質二重層を含んでもよい。

前記リン脂質は、卵ホスファチジルエタノールアミン、卵レシチン、ジパルミトイルレシチン、レシチン、卵ホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン及び／又は長鎖もしくは中間鎖ホスファチジルコリン、特に、卵又は大豆レシチンを含む１つ以上のリン脂質の群から選択される。さらに具体的には、リン脂質は、卵レシチンである。

本発明の医薬組成物の別の成分は、保護コロイドとして機能し、そして、組成物に長期安定性をもたらす安定剤、特に、糖質である。糖成分は、通常の単糖及び二糖であるか、又は糖様ポリオールであることができる。好適な糖成分の例としては、グルコース、フルクトース、スクロース、ソルビトール、マンニトール及びキシリトールが挙げられる。特に、糖は、スクロース又はソルビトールである。特に、糖は、マンニトールである。安定剤は、１％〜２５％の糖質（例えば、マンニトール、ソルビトール、スクロース、セルロース誘導体）及び／又は０．５％〜３％の荷電リン脂質（例えば、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリン）及び／又はコレステロールを含む。特に、安定剤は、１％〜２５％（重量／体積）の糖質（例えば、マンニトール、ソルビトール、スクロース、セルロース誘導体）及び／又は０．５％〜３％（重量／体積）の荷電リン脂質（例えば、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリン）及び／又はコレステロールを含む。

本発明のリポソーム組成物は、また、薬学的佐剤を含有することができる。そのような任意の薬学的佐剤の例としては、少量の他の脂質、例えば、コレステロール、抗酸化物質、共力剤、保存剤、安定化剤、所望のｐＨ値に調整するための緩衝液又は浸透圧を調整するための薬剤などの、組成物において常用される物質が挙げられる。これらの薬学的佐剤の必要な及び最適な量は、個別の組成物に応じて変化しうる。

小胞は、追加的に、中性脂肪を含んでもよい。前記中性脂肪は、モノグリセリドであってもよい。そのようなモノグリセリドは、中間鎖モノグリセリドであってもよい。

さらに、上述した小胞の全ての実施態様は、代わりにペグ化レシチンから構成されていてもよい。

溶液中のリポソーム成分の濃度は、一般的に、約１％〜約２５％（重量／体積）、好ましくは、約５％〜約１５％（重量／体積）の範囲にある。

リポソームが多層を含む場合、糖質濃度に依存して、最外層が第一に、場合により、続く次の層も不安定になるだろう。多層リポソームの貯蓄機能はよく知られている（Katre et al., Am J Drug Deliv 2004, 2 (4), p 213-227）。

Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、チオイソ酪酸Ｓ−（２−｛［１−（２−エチル−ブチル）−シクロヘキサンカルボニル］−アミノ｝−フェニル）エステル、ダルセトラピブ（dalcetrapib）、ＪＴＴ−７０５又は式Ｉ：

で表される化合物としても知られている。

Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）シクロヘキシル］カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、ヒト（de Grooth et al., Circulation, 105, 2159-2165 (2002))及びウサギ（Shinkai et al., J. Alfed. Chez., 43, 3566-3572 (2000); Kobayashi et al., Atherosclerosis, 162, 131-135 (2002); and Okamoto et al., Nature, 406 (13), 203-207 (2000)）のＣＥＴＰ活性の阻害剤として知られている。Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）シクロヘキシル］カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、ヒト（de Grooth et al., 上記参照）及びウサギ（Shinkai et al., 上記参照 ; Kobayashi et al., 上記参照 ; Okamoto et al., 上記参照）の血漿ＨＤＬコレステロールを増加させることが知られている。さらに、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）シクロヘキシル］カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、ヒト（de Grooth et al., 上記参照）及びウサギ（Okamoto et al., 上記参照）のＬＤＬコレステロールを低下させることが知られている。また、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）シクロヘキシル］カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、ウサギのアテローム性動脈硬化症の進行を抑制する（Okamoto et al., 上記参照）。Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）シクロヘキシル］カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートならびにその化合物を製造及び使用する方法は、欧州特許EP1020439, Shinkai et al., J. Med. Chem. 43:3566-3572 (2000)又はWO 2007/051714もしくはWO 2008/074677に記載されている。

医薬組成物は、哺乳動物、特に、ヒト（すなわち、男性又は女性のヒト）における、アテローム性動脈硬化症、末梢血管疾患、脂質異常症（例えば、高脂血症）、高βリポタンパク質血症（hyperbetalipoproteinemia）、低αリポタンパク質血症（hypoalphalipoproteinemia）、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、家族性高コレステロール血症、狭心症、虚血、心虚血、卒中、心筋梗塞、再かん流傷害、血管形成再狭窄、高血圧、心臓血管疾患、冠動脈性心疾患、冠動脈疾患、高リポタンパク質血症（hyperlipidoproteinemia）、糖尿病の血管合併症、肥満又は内毒素血症を非限定的に含む、心血管障害を治療又は予防するために使用することができる。

従って、本発明は、哺乳動物における心血管障害の治療又は予防のための方法であって、哺乳動物（好ましくは、それを必要とする哺乳動物）に、治療有効量の医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。哺乳動物は、好ましくは、ヒト（すなわち、男性又は女性のヒト）である。ヒトは、任意の人種（例えば、白人又は東洋人）であることができる。心血管障害は、好ましくは、哺乳動物における、アテローム性動脈硬化症、末梢血管疾患、脂質異常症、高βリポタンパク質血症、低αリポタンパク質血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、家族性高コレステロール血症、狭心症、虚血、心虚血、卒中、心筋梗塞、再かん流傷害、血管形成再狭窄、高血圧及び糖尿病の血管合併症、肥満又は内毒素血症からなる群より選択される。さらに好ましくは、心血管障害は、心臓血管疾患、冠動脈性心疾患、冠動脈疾患、低αリポタンパク質血症、高βリポタンパク質血症、高コレステロール血症、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、高血圧、高トリグリセリド血症、高リポタンパク質血症、末梢血管疾患、狭心症、虚血及び心筋梗塞からなる群より選択される。

本発明のある実施態様においては、組成物は、医薬組成物である。

医薬組成物は、例えば、丸剤、カプセル剤又は錠剤の形態であることができ、これは、それぞれ、所定量のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含有し、特に、飲み込み易くするために粉剤又は顆粒剤の形態でコーティングされる。特に、医薬組成物は、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートならびに本明細書において利用及び記載される錠剤の成分を含む錠剤の形態である。経口投与のために、微粉末剤又は顆粒剤は、希釈剤、分散剤及び／又は界面活性剤を含有してもよく、そして、例えば、カプセル又はサッシェ中に乾燥状態で存在するか、又は結合剤及び潤滑剤を含有しうる錠剤中に存在してもよい。甘味料、香味剤、保存料、懸濁化剤、増粘剤及び／又は乳化剤などの成分も、医薬組成物中に存在してもよい。

本発明のある実施態様においては、組成物は、１００mg〜６００mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。特に、組成物は、１５０mg〜４５０mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。さらに具体的には、組成物は、２５０mg〜３５０mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。最も具体的には、組成物は、２５０mg〜３５０mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。

本発明の別の実施態様においては、組成物は、小児科用として、２５mg〜３００mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。特に、小児科用組成物は、７５mg〜１５０mgのＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを含む。

Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートは、哺乳動物に、任意の好適な投薬量で投与することができる（例えば、治療有効量を達成するために）。例えば、患者に投与するための治療有効量の化合物Ｉの好適な用量は、１日当たり約１００mg〜約１８００mgであろう。所望の用量は、好ましくは、１日当たり約３００mg〜約９００mgである。好ましい用量は、１日当たり約６００mgである。

別の実施態様においては、本発明は、治療有効量のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びリポソームを含む医薬組成物、「説明書」としても知られる処方情報、ブリスター包装又はボトル（ＨＤＰＥ又はガラス）ならびに容器を含むキットを提供する。処方情報は、特に、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートのバイオアベイラビリティを改善するために、好ましくは、Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートを食物と共に服薬することについての患者への指示を含む。

特に明記しない限り、全てのパーセントは、組成物の総重量の重量パーセントで与えられる。

下記の実施例は、本発明のリポソームＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート組成物の調製方法及び特性を説明する。本発明の他の特徴及び実施態様は、本発明の意図する範囲を限定するよりむしろ本発明を説明するために提供される、下記の実施例から明らかとなるであろう。

実施例１：経口適用のためのリポソーム中のダルセトラピブの調製
溶液Ａ：蒸留水中のマンニトール溶液
Ｄ−マンニトール７．５ｇを、磁気撹拌子を含有する２００mLガラスフラスコに量り入れる。蒸留水１２０mLを加え、完全に溶解するまで混合物を室温で撹拌する。

溶液Ｂ：エタノール中の薬物−レシチン溶液
ダルセトラピブ３７５mgを、磁気撹拌子を含有する２００mLガラスフラスコに導入する。エタノール７．５mLを加え、薬物が溶解するまで混合物を撹拌する。精製卵レシチン（最小９５％のホスファチジルコリン含有量）［Lipoid E100 (Lipoid AG)］１５．０ｇを加え、透明な溶液が得られるまで撹拌を続ける。

約５００rpmで激しく撹拌しながら溶液Ａを溶液Ｂに移し、均質な乳白色の溶液を得る。得られた溶液を、高圧ホモジナイザー（Emulsiflex-C5, Avestin Inc.）中、約８００atmの圧力下で処理する。

合計５サイクルの後、リポソームのサイズは１２８nm（ＳＤ１９、ｎ＝３）であり、最終ｐＨは６．３である。得られたオパール色の溶液を０．２２μmの無菌フィルターに通して濾過する。

実施例２：経口適用のためのリポソーム中のダルセトラピブの調製
ダルセトラピブ２５０mgを、エタノール２．５mLを含有する５０mLフラスコ中で溶解する。精製卵レシチン［Lipoid E100 (Lipoid AG)］５．０ｇを加え、完全に溶解するまで約２０rpm、室温で混合物を撹拌する。

リン酸緩衝液（ｐＨ７）４２．５mLを約４００rpmで撹拌しながら加え、均質な乳白色のコロイド状溶液を得る。

溶液をリサイクルすることによって、高圧ホモジナイザー（Emulsiflex-C5, Avestin Inc.）中、約８００atmの圧力下で１０分間、得られた溶液を処理する。

得られたリポソーム溶液はオパール色であり、粒子サイズは１５５nm（ＳＤ１４）である。

実施例３：経口適用のためのリポソーム中のダルセトラピブの調製
溶液Ａ：蒸留水中のマンニトール溶液
Ｄ−マンニトール２．５ｇを、磁気撹拌子を含有する５０mLガラスフラスコに量り入れる。蒸留水４０mLを加え、完全に溶解するまで室温で撹拌する。

溶液Ｂ：エタノール中の薬物−レシチン溶液
ダルセトラピブ１２５mgを、磁気撹拌子を含有する５０mLガラスフラスコに導入し、エタノール２．５mLを加え、薬物が溶解するまで撹拌する。精製卵レシチン（最小９５％のホスファチジルコリン含有量）［Lipoid E100 (Lipoid AG)］５．０ｇを加え、透明な溶液が得られるまで撹拌を続ける。

約４００rpmで激しく撹拌しながら溶液Ａを溶液Ｂに移し、均質な乳白色の溶液を得る。

得られた溶液を、高圧ホモジナイザー（Emulsiflex-C5, Avestin Inc.）中、約８００atmの圧力下で処理する。１０分後、粒子サイズは動的光散乱（NanoSizer, Malvern）により１２０nm（ＳＤ９、ｎ＝４）と測定され、最終ｐＨは６．１である。

得られたオパール色の溶液を０．２２μmの無菌フィルターに通して濾過する。

実施例４：１００mg/mLリポソーム溶液中の異なる濃度のダルセトラピブ
溶液Ａ：水中のレシチン及びスクロースを含有するリポソーム溶液
精製大豆レシチン（最小９５％のホスファチジルコリン含有量）［Lipoid S100 (Lipoid AG）］１．０ｇ及びＤ（＋）−スクロース１．５ｇを、２０mLガラスボトルに投入し、蒸留水７．５ｇを加える。均質な乳白色の多重層リポソーム溶液が得られるまで、溶液を磁気撹拌子で、３００rpm、室温で約２時間撹拌する。

１/２”プローブ及び約２５℃の冷却水浴を有する超音波洗浄器Ｗ−３７５（Heat Systems Ultrasonics Inc.）で溶液を２５分間ホモジナイズする。得られたオパール色のリポソーム溶液を０．４５μmのフィルターに通して濾過し、最終粒子サイズは５７nmである。

溶液Ｂ：エタノール中のダルセトラピブ
ダルセトラピブ１４０mgを、エタノール１．４１mLに溶解する。

リポソーム溶液への可変量の薬物の取り込み
可変量の薬物溶液Ｂをピペットで溶液Ａに注入し、薬物が全て溶解するまで約１０秒間振とうする。

実施例５：１００mg/mLリポソーム凍結乾燥物（lyophilisate）中の３mg/mLダルセトラピブ
ダルセトラピブ９mgをエタノール１５０μLに溶解する。実施例４からのリポソーム溶液Ａ２．８５mLを加え、混合物を約１０秒間振とうする。ドライアイスとエタノールの混合物中に溶液を含有する容器を浸漬することにより、得られたオパール色の溶液を凍結する。

凍結した溶液を、Christ Beta 2-16凍結乾燥機（lyophilisator）中、所定の凍結乾燥サイクルを用いて２２時間凍結乾燥する。

粒子サイズは、乾燥前の５７nm（ＳＤ６、ｎ＝３）〜凍結乾燥物を蒸留水で再構成した後の９３nm（ＳＤ１６、ｎ＝３）に変化した。

実施例６：カニクイザルでのＰＫ研究
下記の実施例は、カニクイザル（ｎ＝４）における製剤スクリーニング研究の薬物動態評価を提供する。WO2004082593に開示される実施例１に従って調製した錠剤製剤を使用した。この調査は、規定の製剤スクリーニング研究において、リポソームを用いた強制経口（２．５mg/mL）（群１）又は錠剤（群２）による経口投薬後の、雄のサルにおけるダルセトラピブの単回用量（１０mg/kg）薬物動態を評価した。

材料及び方法
研究設計は下記のとおりである：

薬物動態パラメーターを、以下のように、薬物動態評価プログラムToxkin（商標）［１］を使用して、非コンパートメント解析により推定した：
− Ｃｍａｘ及びｔｍａｘを血漿濃度−時間プロファイルから直接決定した。
− ＡＵＣ（０〜２４時間）値を、投薬後０時間〜２４時間の線形台形公式により計算した。
− ＡＵＣ（０〜５６時間）値を、投薬後０時間〜５６時間の線形台形公式により計算した。０時間の濃度を０に外挿した（Ｃ（０）＝０）。
− 見掛けの終末相半減期（ｔ１／２）を式：ｔ１／２＝ｌｎ２／λｚから誘導した。
− λｚを血漿濃度−時間曲線の終末相のｌｏｇ−線形回帰により得た。

平均濃度データの計算のために、定量限界未満の値及びピークなしを０に数値設定した。試料の有効データの値も無効データの値も、平均の計算において空白セルとして処理しなかった（ＮＯＲ）。

四捨五入していない薬物動態パラメーターから計算した平均値からの報告平均値の予想される小さな偏差は、個々の値の四捨五入手順による。分析データは、有効数字３桁で報告される。薬物動態パラメーターは、ToxKin（商標）（Version 3. 1. 2, Unilog IT Services Ltd., 2004）により提供されたものを報告した。

総全身暴露（ＡＵＣ（０〜５６時間）、Ｃｍａｘ）は、錠剤製剤の群よりリポソーム製剤の群で５倍より高かった。

Claims

Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアート及びリポソームを含む組成物であって、
Ｓ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが、リポソーム膜中に実質的に封入されており、
組成物中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの少なくとも９５％が、リポソーム中に封入されており、
リポソームの９５％が、２５〜２００nmのサイズを有し、そして
０．０１％〜０．５％（重量／体積）のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが、存在する、
組成物。
組成物中のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートの１００％が、リポソーム中に封入されている、請求項１に記載の組成物。
リポソームが、リン脂質二重層を含む膜を有する小胞である、請求項１又は２に記載の組成物。
リポソームが、リン脂質二重層を含む膜を有する球形小胞である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
リポソームが、リン脂質である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
リン脂質が、卵ホスファチジルエタノールアミン、卵レシチン、ジパルミトイルレシチン、レシチン、卵ホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン及び／又は長鎖もしくは中間鎖ホスファチジルコリンを含む１つ以上のリン脂質の群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
リン脂質が、レシチンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
レシチンが、植物、動物又は合成起源である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
レシチンが、大豆レシチン、卵レシチン又はＬ−β−オレオイル−２−パルミトイル−α−レシチンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
レシチンが、卵レシチンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
レシチンと少なくとも１つの安定剤が、リポソームを形成する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
組成物が、少なくとも４０％（重量）の水を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
０．１％〜０．３％（重量／体積）のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
０．２５％（重量／体積）のＳ−［２−（［［１−（２−エチルブチル）−シクロヘキシル］−カルボニル］アミノ）フェニル］２−メチルプロパンチオアートが存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
溶液中のリポソーム成分の濃度が、１％〜２５％（重量／体積）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
溶液中のリポソーム成分の濃度が、５％〜１５％（重量／体積）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
組成物が、溶液の形態である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
安定剤が、糖質である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
安定剤が、単糖及び二糖であるか、又は糖様ポリオールであることができる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
安定剤が、グルコース、フルクトース、スクロース、ソルビトール、マンニトール又はキシリトールである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
安定剤が、スクロース又はソルビトールである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
安定剤が、１％〜２５％（重量／体積）の糖質及び／又は０．５％〜３％（重量／体積当）の荷電リン脂質及び／又はコレステロールを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。