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JP2025500886A - 大環状ｂｔｋ阻害剤 - Google Patents

大環状ｂｔｋ阻害剤 Download PDF

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JP2025500886A JP2024535767A JP2024535767A JP2025500886A JP 2025500886 A JP2025500886 A JP 2025500886A JP 2024535767 A JP2024535767 A JP 2024535767A JP 2024535767 A JP2024535767 A JP 2024535767A JP 2025500886 A JP2025500886 A JP 2025500886A
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マン， アドリアヌス ペトルス アントニウス デ
ロジェ クリスチャン ブイズマン，
ヤン ヘラルト スターレンバーグ，
ヴィット， ユーリ ヨハネス ペトルス デ
カウター， フレーク ファン
ゲメルト， サンダー ペトルス ヴィルヘルムス ファン
マルティーヌ ベレンディーナ ヴィルヘミナ プリンセン，
ヴィンフリート ロバート ムルダー，
ミシェル ミュラー，
ディープ ヴ‐ファム，
イボンヌ グロベン，
リエル， ヴィルヘルミナ エリザベート シモンズ‐ファン
ミル， イボンヌ ヘルトルーダ テオドラ ヘンドリカ ファン
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Abstract

Figure 2025500886000001
【課題】本発明は、大環状化合物、及びキナーゼ阻害剤として、特にＢＴＫ（ブルトンチロシンキナーゼ）の阻害剤として作用する当該化合物を含有する組成物に関する。さらに、本発明は、開示される化合物の調製のためのプロセス、ならびにそれらを使用する方法、例えば、医薬として、特に、癌などのブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害の治療のための方法を提供する。
【解決手段】式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、及び／又は溶媒和物。


【選択図】なし

Description

本発明は、化合物に関する。より具体的には、本発明は、キナーゼ阻害剤として使用するための大環状化合物及び組成物、ならびに該化合物を調製するためのプロセス及び該化合物の使用に関する。具体的には、本発明は、可逆的大環状ＢＴＫ阻害剤に関する。より具体的には、本発明は、長い標的滞留時間を有する可逆的大環状野生型及び変異型ＢＴＫ阻害剤に関する。
キナーゼは、ホスファターゼがタンパク質からリン酸基を除去する一方で、リン酸基をＡＴＰからタンパク質に移動する酵素である。まとめると、これら二つの酵素プロセスは、細胞増殖、細胞内移行、アポトーシス、炎症、及び代謝などの細胞機能を調節している（Ａｔｔｗｏｏｄ Ｍ．Ｍ． ｅｔ ａｌ （２０２１）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ）。ヒトのキノームは、５００を超えるキナーゼから構成される。多様なタイプの癌治療のための低分子キナーゼ阻害剤の最近の開発では、臨床療法において成功していることが証明されてきた。
ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）は、タンパク質キナーゼのＳｒｃ関連Ｔｅｃファミリーのメンバーであり、多種多様な細胞シグナル伝達プロセスの制御において中心的な役割を果たすキナーゼの大きなサブセットである。ＢＴＫは、Ｂ細胞受容体シグナル伝達において重要な役割を果たし、Ｂ系統細胞の生存、増殖、活性化、及び分化の調節において重要な役割を果たしている。ＦＤＡ承認済みの不可逆的なＢＴＫ阻害剤であるイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、及びチラブルチニブなどの小分子阻害剤を用いたＢＴＫの標的化は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）、及び小リンパ球性リンパ腫ＳＬＬを含むいくつかのＢ細胞悪性腫瘍において有効であることが証明されている。ＢＴＫ阻害剤と他の新規薬剤又はレジメンとの併用は、より重大な応答及びはるかに高い割合の最小残存疾患の陰性をもたらす。
いくつかの固形腫瘍においては、ＢＴＫも発現し、腫瘍形成促進の役割も果たす（Ｘｉａｎｈｕｉ Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ． ２０２１）。前立腺癌細胞では、イブルチニブまた又はアカラブルチニブによりＢＴＫを阻害することにより、細胞増殖が阻害された（Ｋｏｋａｂｅｅ ｅｔ ａｌ ２０１５）。また、イブルチニブにより、インビボ（異種移植片）乳癌細胞増殖が阻害されること（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２０１６）、及びイブルチニブが遮断した胃癌細胞増殖によるＢＴＫが阻害されることも示されている（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２０１６）。また、ＢＴＫ阻害剤により、細胞増殖及び遊走が阻害され、膠芽腫細胞株においてアポトーシス及びオートファジーが誘導された（Ｗｅｉ ｅｔ ａｌ．， ２０１６；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２０１７）。
ＢＣＲシグナル伝達におけるその役割に加えて、ＢＴＫは、炎症性及び全身自己免疫疾患を背景としたＢＴＫの標的化の根拠を提供する、多くの他の免疫学的経路にも関与している（Ｓｔｅｆａｎ Ｆ． Ｈ． Ｎｅｙｓ ｅｔ ａｌ． ２０２１）。
現在承認されている不可逆的な阻害剤の欠点は、ＢＴＫの触媒部位及びゲートキーパーにおけるＢＴＫの変異が、現在承認されているＢＴＫ阻害剤で治療されている患者における不可逆的な阻害剤に効率的に結合できない場合、悪性疾患における薬物耐性が発生する可能性があることである。これは、不可逆的な阻害剤で治療され、再発を経験する患者におけるかなり一般的な事象である。獲得耐性の主要な機序は、ＢＴＫシステイン４８１（Ｃ４８１）変異の出現である。これらの変異は、このアミノ酸との共有結合を形成する、イブルチニブ及びアカラブルチニブなどの不可逆的阻害剤の結合を妨げる。不可逆的な共有結合性及び可逆的な非共有結合性の両方のＢＴＫ阻害剤に対する獲得耐性をもたらすることができる他の変異は、ＢＴＫへのＢＴＫ阻害剤のアクセスを低減することができるＢＴＫゲートキーパー残基スレオニン４７４（Ｔ４７４）変異である（Ｒｕｌａ Ｚａｉｎ ｅｔ ａｌ． ２０２１， Ｓｈｅｎｑｉｕ Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ． ２０１９）。
第２世代のＢＴＫ阻害剤としては、より大きなＢＴＫ選択性を提供するアカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、及びチラブルチニブが挙げられる。これらの薬剤はオフターゲット毒性を制限する可能性があるが、イブルチニブ耐性の一般的な機構を克服しない。ベカブルチニブ、ＬＯＸＯ－３０５（ピルトブルチニブ）、及びＡＲＱ－５３１（ネムタブルチニブ）を含む可逆的ＢＴＫ阻害剤は、Ｃ４８１Ｓ変異の存在下でＢＴＫを阻害する。ベカブルチニブはＷＯ２０１３／１８５０８４に開示されており、ピルトブルチニブはＷＯ２０１７／１０３６１１に最初に開示されており、ＡＲＱ－５３１はＷＯ２０１７／１１１７８７に開示されている。
さらなる可逆的ＢＴＫ阻害剤は、ＷＯ２０１７／０４６６０４、ＷＯ２０２０／０１５７３５、ＷＯ２０２０／２３９１２４、ＷＯ２０２１／０９３８３９、ＷＯ２０２０／０４３６３８、ＷＯ２０１３／０６７２７４、ＷＯ２０１８０９７２３４、ＷＯ２０１３／０１０３８０、ＷＯ２０１６／１６１５７０、ＷＯ２０１６／１６１５７１、ＷＯ２０１６／１０６６２４、ＷＯ２０１６／１０６６２５、ＷＯ２０１６／１０６６２６、ＷＯ２０１６１０６６２３、ＷＯ２０１６／１０６６２８及びＷＯ２０１６／１０９２２２に開示されている。
キナーゼ活性は、キナーゼ酵素活性アッセイにおいて、又は表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して、半最大阻害効力（ＩＣ５０）又は結合親和性（ＫＤ）を測定することによって一般的に評価される（Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ－Ｓｅｅｇｅｒｓ Ｎ． ｅｔ ａｌ （２０１６）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ）。これらのアッセイの重要な態様は、ＩＣ５０又はＫＤが、固定濃度の阻害剤を含む系で測定されることである。生体系では、化合物及び酵素は、通常、細胞などの区画で、又は化合物が薬剤ポンプによって拡散して出入りするか、又は能動的に押し出され得る細胞表面で、互いに遭遇する。したがって、標的の濃度は一定のままであるが、化合物の濃度は継続的に変化している。こうした系では、化合物がその標的上に存在する時間、標的滞留時間タウ（τ）は、平衡で測定されるＩＣ５０又はＫＤよりも、その薬理活性のより重要な決定因子であることが提案されている（Ｃｏｐｅｌａｎｄ Ｒ．Ａ． ｅｔ ａｌ （２００６）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ）。さらに、薬剤がその標的上での滞留時間が長く、オフターゲットでの滞留時間が短い場合、選択性が強化され、薬剤の安全性に利点を提供する（Ｂａｒｆ Ｔ． ａｎｄ Ｋａｐｔｅｉｎ Ａ． （２０１２）Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ）。したがって、長い標的滞留性を有する薬剤の生物学的作用は、全身循環から除去された後、長く持続することができる。長い標的滞留時間を有する薬剤の極端な例は、不可逆的阻害剤であり、通常は標的への共有結合によって得られる。等力の親和性又は効力を有する化合物は、ＥＧＦＲ上のエルロチニブ、ゲフィチニブ、及びラパチニブによって実証されるように、標的タンパク質上で異なる滞留時間を有することができる（Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ－Ｓｅｅｇｅｒｓ Ｎ． ｅｔ ａｌ （２０１６）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ）。
したがって、本発明の目的は、薬理活性が改善されたＢＴＫ阻害剤を提供することである。さらに、本発明は、ＢＴＫ変異体の阻害に適した変異体ＢＴＫ阻害剤を提供することを目的とする。
本発明の特定の実施形態の目的は、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ変異体キナーゼを阻害する化合物を提供することである。
さらに、本発明の特定の実施形態の目的は、標的滞留時間が長い可逆的（変異体）ＢＴＫ阻害剤を提供することである。
本発明の特定の実施形態の別の目的は、癌治療を提供することである。特に、本発明の特定の実施形態の目的は、既存の癌治療と同等の（ＢＴＫ）活性を有するが、変異に対しても有効である化合物を提供することである。本発明の態様のうちの１つは、Ｃ４８１、Ｔ３１６又はＴ４７４変異に対して有効なＢＴＫ阻害剤を提供することに焦点を当てる。
本発明者らは、以下にさらに記載されるとおりである式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物：

又はその薬学的に許容可能な塩及び／若しくは溶媒和物が、改善されたＢＴＫ阻害をもたらすことを見出した。本発明者らは、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の骨格のうちのいずれか１つを有する大環状化合物であるこれらの化合物が、ＢＴＫ阻害の改善をもたらすことを見出した。
本発明の第一の態様では、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩及び／若しくは溶媒和物が提供され、化合物は、以下からなる群から選択され：

式中、Ｒ１は、

であり、式中；
Ｗは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
Ｕは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
式中、Ｒ２は、以下からなる群から選択され：

式中、Ｑは、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、式中、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２－、Ｏ、Ｎ及び直接結合から独立的に選択され、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル及びアルキル基のいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｒ３及びＲ４は、一緒になって、下記からなる群から選択される、式（ＩＩＩ－１）～（ＩＩＩ－４０）を有するリンカーを表し：

式中、

は、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、

は、式ＩＩ－ａ～ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
リンカーのいずれかは、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
本発明の第二の態様では、医薬として使用するための、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
本発明の別の態様では、治療で使用するための、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
本発明の別の態様では、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害の治療に使用するための、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
本発明の別の態様では、癌治療に使用するための、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
本発明の別の態様では、医薬の製造のための、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用が提供される。
本発明の別の態様では、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩、及び１種以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
本発明の別の態様では、治療を必要とする対象において癌を治療するための方法であって、癌を治療するのに有効な量で、本発明による化合物又はその薬学的に許容可能な塩を対象に投与することを含む、方法が提供される。
本発明の別の態様では、本発明の化合物を、ＢＴＫ媒介性障害を治療するのに有効な量で対象に投与することを含む、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害に罹患している対象を治療するための方法が提供され。
化合物の部分式１～２２６の各々は、本出願の好ましい実施形態である。
本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに例示される。
定義
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、その従来の意味を有し、薬学的に許容可能な組成物を指す。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な」という用語は、その従来的な意味を有し、化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指し、これらは、哺乳動物、特にヒトの組織との接触に適した健全な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／リスク比に見合った過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、及びその他の問題合併症がない。
本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、ＢＴＫ媒介性疾患又は障害に罹患している対象に投与されたときに所望の治療的、改善的、阻害的、又は予防的な効果を生じさせるのに有効な、本発明の化合物、及び／又は追加の治療剤、又はその組成物の量を指す。本発明の併用療法では、有効量は、個々の薬剤それぞれ又は全体としての組み合わせを指することができ、投与されるすべての薬剤の量は、一緒に有効であるが、組み合わせの成分薬剤は、有効量で個別に存在しなくてもよい。
「対象」は、ヒト又は非ヒト哺乳動物である。一実施形態では、対象はヒトである。
「制御」という用語は、哺乳動物に影響を及ぼす疾患及び状態の進行の減速、中断、停止、又は停止があり得るすべてのプロセスを指すことが意図される。しかしながら、「制御」は、必ずしもすべての疾患及び状態症状の完全な排除を示すものではなく、予防的治療を含むことが意図されている。
本明細書で使用される場合、「賦形剤」という用語は、その従来の意味を有し、薬学的に許容可能な成分を指し、これは、顆粒、固体、又は液体の経口投薬製剤を調製するための薬学的技術で一般的に使用される。
本明細書で使用される場合、「塩」という用語は、その従来の意味を有し、本発明の化合物の酸付加塩及び塩基塩を含む。
本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、その従来の意味を有する。本発明の１種以上の化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、水、エタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒と共に、非溶媒和形態及び溶媒和形態で存在することができる。「溶媒和物」は、本発明の化合物と１種以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合は、様々な程度のイオン結合及び共有結合を伴う。水素結合を含む。特定の例では、溶媒和物は、例えば、１種以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子に組み込まれる場合、単離することができる。「溶媒和物」は、溶液相及び単離可能な溶媒和物の両方を包含する。好適な溶媒和物の例としては、エタノラート、メタノラートなどが挙げられる。「水和物」は溶媒和物であり、溶媒分子はＨ２Ｏであり、当該化合物又は当該化合物の塩の任意の水和物を含む。
本明細書で使用される場合、「治療」という用語は、その従来の意味を有し、治癒的、緩和的、及び予防的治療を指す。
「単位剤形」という用語は、その従来的な意味を有し、有効である対象、好ましくはヒトに投与される能力を有し、治療剤、すなわち本発明の化合物を含む物理的及び化学的に安定な単位用量として残った容易に取り扱い、包装され得る剤形を指す。
本明細書で使用される場合、「ＢＴＫ」という用語は、その従来の意味を有し、ブルトンチロシンキナーゼを指す。ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）は、タンパク質キナーゼのＳｒｃ関連Ｔｅｃファミリーのメンバーであり、多種多様な細胞シグナル伝達プロセスの制御において中心的な役割を果たすキナーゼの大きなサブセットである。ＢＴＫは、Ｂ細胞受容体シグナル伝達において重要な役割を果たし、Ｂ系統細胞の生存、増殖、活性化、及び分化の調節において重要な役割を果たしている。ＦＤＡ承認済みの不可逆的なＢＴＫ阻害剤であるイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、及びチラブルチニブなどの小分子阻害剤を用いたＢＴＫの標的化は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）、及び小リンパ球性リンパ腫ＳＬＬを含むいくつかのＢ細胞悪性腫瘍において有効であることが証明されている。ＢＴＫ阻害剤と他の新規薬剤又はレジメンとの併用は、より重大な応答及びはるかに高い割合の最小残存疾患陰性をもたらす。
本明細書で使用される場合、「ＢＴＫ阻害剤」という用語は、その従来の意味を有し、ＢＴＫの阻害剤を指す。ＢＴＫ阻害剤は、小分子阻害剤であってもよい。阻害剤は、共有結合を形成することによってなど、不可逆的阻害剤であってもよく、ＢＴＫとの一時的な相互作用を形成することができる可逆的阻害剤であってもよい。
本明細書で使用される場合、「変異体ＢＴＫ」という用語は、その従来の意味を有し、ＢＴＫの変異を指す。ＢＴＫの変異は、ＢＴＫ構造（４８１など）の特定の位置で、改変アミノ酸標的（例えば、システインの単一文字データベースコードとしてのＣ）によって言及され得る。さらに、突然変異位置でのアミノ酸置換は、セリン置換のためのＣ４８１Ｓ及び４８１位置でのシステインのスレオニン置換のためのＣ４８１Ｔなどの追加のアミノ酸単一文字データベースコードによって言及され得る。
現在承認されている不可逆的な阻害剤の欠点は、ＢＴＫの触媒部位及びゲートキーパーにおけるＢＴＫの変種が、現在承認されているＢＴＫ阻害剤で治療されている患者における不可逆的な阻害剤に効率的に結合できない場合、悪性疾患における薬物耐性が発生する可能性があることである。これは、不可逆的な阻害剤で治療され、再発を経験する患者におけるかなり一般的な事象である。獲得耐性の主な機序は、ＢＴＫシステイン４８１（Ｃ４８１）変異の出現である。これらの変異は、このアミノ酸との共有結合を形成する、イブルチニブ及びアカラブルチニブなどの不可逆的阻害剤の結合を妨げる。不可逆的な共有結合性ＢＴＫ阻害剤及び可逆的な非共有結合性ＢＴＫ阻害剤の両方に対する獲得耐性をもたらすことができる他の変異は、ＢＴＫへのＢＴＫ阻害剤結合を低減することができる他ＢＴＫゲートキーパー残基スレオニン４７４（Ｔ４７４）の変異である。
本明細書で使用される場合、「ｗｔ－ＢＴＫ」又は「ＷＴ－ＢＴＫ」又は「ＢＴＫＷＴ」という用語は、その従来の意味を有し、野生型ブルトンチロシンキナーゼを指す。野生型ＢＴＫは、自然界で起こるＢＴＫの典型的な形態の表現型の標準的な意味を有する。元来、野生型は、非標準「変異」対立遺伝子によって産生される対立遺伝子とは対照的に、遺伝子座における標準的な「正常」対立遺伝子の産物として概念化された。
本明細書で使用される場合、「大環状」という用語は、その従来の意味を有し、当該環を形成する１２個以上の環原子からなる環を含有する分子の一部を指す。一実施例では、１２員環は、当該環を形成する１２個の原子からなる。
本明細書で使用される場合、「結合親和性（ＫＤ）」という用語は、その従来の意味を有し、平衡条件下でのタンパク質－リガンド（小分子）対の親和性の逆尺度である平衡解離定数を指す。ＫＤの値は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して測定されたｋｏｆｆ／ｋｏｎ（又はｋｄ／ｋａ）の比と数学的に同等である。
本明細書で使用される場合、「会合速度定数」又は「オンレート（ｋｏｎ又はｋａ）」という用語は、その従来の意味を有し、遊離リガンドと遊離タンパク質が（衝突遭遇することによって）結合して二成分タンパク質－リガンド複合体を形成する速度を定量化する二次速度定数を指す。
本明細書で使用される場合、「解離速度定数」という用語、又は「オフレート（ｋｏｆｆ又はｋｄ））」という用語は、その従来の意味を有し、二成分タンパク質－リガンド複合体が遊離リガンド及び遊離タンパク質に解離する速度を定量化する一次速度定数を指す。
本明細書で使用される場合、「標的滞留時間タウ（τ）」という用語は、その従来の意味を有し、化合物がその標的上に存在する時間を指す。標的滞留時間（τ）は、実験セクションで以下に記載される方法に従って決定することができる。
本明細書で使用される場合、「ＩＣ５０」という用語は、その従来の意味を有し、生化学的機能又は物質－標的結合相互作用のいくつかの尺度に５０％の効果をもたらす物質の濃度を指す。
二環式環系は、本明細書で使用される場合、複素環式（ヘテロシクリル）基、炭素基のみを有する環式基、すなわち、複素原子を有しない環状基、及び複素環式（ヘテロシクリル）基と、環内に炭素基のみを有する、すなわち、複素原子を有しない環状基の組み合わせを指す。
単環式環系は、本明細書で使用される場合、複素環式（ヘテロシクリル）基、及び環内に炭素基のみを有する、すなわち、ヘテロ原子を有しない環状基の両方を指す。
複素環式（ヘテロシクリル）基は、本明細書で使用される場合、ヘテロアリール基及びヘテロシクロアルキル基の両方を指す。
ヘテロ二環式基は、本明細書で使用される場合、飽和、部分不飽和、又は不飽和である１個以上のヘテロ原子を有する二環式基を指す。
本明細書で使用される場合、芳香族基（又はアリール基）は、芳香族炭素環式環系（例えば、フェニル）及び縮合多環式芳香族環系（例えば、ナフチル及び１，２，３，４－テトラヒドロナフチル）を含む。
本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、指定された数の炭素原子を有する結合で置換されたその水素原子のうちの一個を有する脂肪族炭化水素基を指す。種々の実施形態では、アルキル基は、例えば、１～６個の炭素原子（１～６Ｃ）アルキル、又は１～３個の炭素原子（１～３Ｃ）アルキルを含有する。アルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ネオペンチル、イソペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシル、及びネオヘキシルが挙げられる。一実施形態では、アルキル基は直鎖状である。別の実施形態では、アルキル基は分岐している。
別段の指定がない限り、アルキルは、指定された数の炭素原子を有するすべての異性体を含む、分岐鎖及び直鎖の飽和脂肪族炭化水素基の両方を含み、例えば、（１－６Ｃ）アルキルは、ヘキシルアルキル及びペンチルアルキル異性体のすべて、ならびにｎ－、イソ－、ｓｅｃ－及びｔ－ブチル、ｎ－及びイソプロピル、エチル及びメチルを含む。「アルキレン」は、全ての異性体を含み、指定された数の炭素を有し、二つの末端鎖結合を有する、分岐鎖及び直鎖飽和脂肪族炭化水素基の両方を指し、例えば、「Ａ－Ｃ４アルキレン－Ｂ」という用語は、例えば、Ａ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｂ、Ａ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ３）－ＣＨ２－Ｂ、Ａ－ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）－Ｂ、Ａ－ＣＨ２－Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ３）－Ｂなどを表す。
本明細書で使用される場合、「アルキルカルボニル」という用語は、カルボニル基に結合した結合で置換されたその水素原子のうちの一つを有する脂肪族炭化水素基を指し、脂肪族炭化水素基は、指定された数の炭素原子を有する。種々の実施形態では、アルキル基又は脂肪族炭化水素基は、例えば、１～６個の炭素原子（１～６Ｃ）アルキル又は１～３個の炭素原子（１～３Ｃ）アルキルを含有する。アルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ネオペンチル、イソペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシル、及びネオヘキシルが挙げられる。一実施形態では、アルキル基は直鎖状である。別の実施形態では、アルキル基は分岐している。
シクロアルキルとは、シクロプロピル、シクロブチル、又はシクロペンチルなど、以前に定義されたものと同じ意味を有する、列挙された数の炭素原子を有するシクロアルキル基を意味する。「シクロアルキル」は、示される数の炭素原子によって表されるシクロアルキル基を指し、例えば、「（３－６Ｃ）シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルを含む。
ヘテロシクロアルキルとは、列挙された数の炭素原子、ならびにＮ、Ｏ、及び／又はＳから選択される１～３個のヘテロ原子を有するシクロアルキル基を意味し、前述のものと同じ意味を有する。
ハロアルキルは、列挙された数の炭素原子を有する分岐又は非分岐アルキル基を意味し、ここで、１個及び最大全ての水素原子がハロゲンによって置換され、ハロゲンは本明細書に定義されるとおりである。本発明に有用なこのような分岐又は直鎖ハロアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、及び１個以上のハロゲン、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードで独立的に置換されたｎ－ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。
例えば、ハロ（１－３Ｃ）アルキルは、１、２、又は３個の炭素原子を有する分岐又は非分岐アルキル基を意味し、ここで、少なくとも１個の水素原子はハロゲンによって置換されている。「ハロアルキル」の例としては、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１－フルオロエチル、２－フルオロエチル、２，２－ジフルオロエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、及びペルフルオロ－ｎ－プロピルが挙げられるが、これらに限定されない。
アルコキシとは、列挙された数の炭素原子を有するアルコキシ基を意味し、アルキル部分は、以前に定義されたものと同じ意味を有し、例えば、「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合された炭素原子の示された数の直鎖状又は分岐状アルキル基によって表されるアルキル－Ｏ基を指し、例えば、「（１－６Ｃ）アルコキシ」は、－ＯＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２ＣＨ３、－ＯＣＨ（ＣＨ３）２、－Ｏ（ＣＨ２）５ＣＨ３などを含む。
シクロアルコキシとは、環炭素原子を介してシクロプロポキシル、シクロブトキシル、又はシクロペントキシルなどの環外酸素原子に結合する、前述したのと同じ意味を有する、列挙された数の炭素原子を有するシクロアルキル基を意味する。「シクロアルコキシ」は、酸素架橋を介して結合する、示された炭素原子の数のシクロアルキル基によって表されるシクロアルキル－Ｏ基を指し、例えば、「（３－６Ｃ）シクロアルコキシ」は、シクロプロピル－Ｏ－、シクロブチル－Ｏ－、シクロペンチル－Ｏ－、又はシクロヘキシル－Ｏ－を含む。
ヘテロシクロアルコキシとは、列挙された数の炭素原子、ならびにＮ、Ｏ、及び／又はＳから選択される１～３個のヘテロ原子を有するシクロアルキル基を意味し、上記で定義されたのと同じ意味を有し、環炭素原子を介して環外酸素原子に結合される。
特に「非置換」のみ又は「置換」のみとして記載されない限り、アルキル基は、非置換であるか、又は各炭素原子上の１～３個の置換基で置換される。
本明細書のテキスト、スキーム、実施例、及び表において価数が不十分である任意の炭素ならびにヘテロ原子は、価数を満たすのに十分な数の水素原子を有すると仮定されることに留意されたい。
本明細書及び特許請求の範囲における第一、第二、第三などの用語は、例えば、同様の要素、組成物、組成物中の成分、又は別個の方法ステップを区別するために使用され、連続的又は時系列を記述するために必ずしも使用されなくてもよい。用語は、適切な状況下で交換可能であり、本発明の実施形態は、別段の指定がない限り、本明細書に説明又は図示される他の配列で動作することができる。
さらに、様々な実施形態は、「好ましい」又は「例えば」、又は「例えば」又は「特に」などと言及されているが、本発明の範囲を限定するのではなく、本発明を実施することができる例示的な方法として解釈されるべきである。
特許請求の範囲で使用される「含む」という用語は、例えば、後述に列挙される組成物の要素若しくは方法ステップ、又は成分に限定されるものとして解釈されるべきではなく、特定の組成物中の他の要素若しくは方法ステップ、又は成分を除外するものではない。言及される、記載された特徴、整数、（方法）ステップ又は構成要素の存在を指定するものとして解釈される必要があるが、１以上の他の特徴、整数、ステップ又は構成要素、又はそれらの群の存在又は追加を妨げない。したがって、表現の範囲「ステップＡ及びＢを含む方法」は、本発明に関してではなく、ステップＡ及びＢのみからなる方法に限定されるべきではなく、方法の唯一の列挙されたステップはＡ及びＢであり、さらに特許請求の範囲は、それらの方法ステップの等価物を含むと解釈されるべきである。したがって、「成分Ａ及びＢを含む組成物」の発現の範囲は、本発明に関してではなく、成分Ａ及びＢのみからなる組成物に限定されるべきではなく、組成物の唯一の列挙された成分はＡ及びＢであり、さらに特許請求の範囲は、それらの成分の等価物を含むと解釈されるべきである。
さらに、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」による要素又は構成要素への言及は、文脈が、要素又は構成要素のうちの１個のみが存在することを明確に要求しない限り、２個以上の要素又は構成要素が存在する可能性を除外しない。したがって、無期限の記事「ａ」又は「ａｎ」は、通常、「少なくとも１」を意味する。
（Ａ）１％ペニシリン／ストレプトマイシン、１０％ウシ胎児血清、１×ＭＥＭ非必須アミノ酸、５０μｇ／ｍｌジェネテシン、及びブラストサイジンを補充したＤＭＥＭ／Ｆ－１２，ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）中に培養した２９３細胞をトランスフェクトした野生型ＢＴＫ又は変異体ＢＴＫ（ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ；ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ；ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉ）における（変異体）ＢＴＫ及びホスホ－（Ｔｙｒ２２３）ＢＴＫタンパク質発現の安定性。 （Ｂ）（非ＩｇＭ処置）ＲＡＭＯＳ細胞と比較した、野生型２９３（ＧｒｉｐＴｉｔｅ ２９３ ＭＳＲ）細胞におけるＢＴＫ及びホスホ－ＢＴＫタンパク質発現。 （Ａ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例４６とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｂ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例２５とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｃ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭ（＋／－）のＬｏｘｏ－３０５とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｄ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例２６とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｅ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例８３とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｆ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例６８とインキュベートされた２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 （Ｇ）０、０．１、１．０、１０、１００、及び１０００ｎＭの実施例２５、実施例２６、実施例４５、実施例４６、及びＬｏｘｏ－３０５とインキュベートされた２９３細胞を発現する二重変異ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉのウエスタンブロットタンパク質発現結果。 ２９３細胞を発現する ｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉのウォッシュアウトウエスタンブロットの結果。細胞を、ブラストサイジンを含まない細胞培養培地中で、１０００ｎＭの実施例４６の化合物、又は１０００ｎＭの実施例１８４の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０１の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０４の化合物、又は１０００ｎＭの化合物（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５とインキュベートした。化合物含有培地を２時間後に除去し、細胞を２回洗浄した後、化合物を含まない培地で置き換えた。培地交換の０、０．５、１、２、４、６、及び２４時間後に細胞を採取した。対照細胞（化合物なし）を０．０１％ ＤＭＳＯ（Ｄ）と２時間インキュベートし、ウォッシュアウト開始時である０時間（０ｈ）及び２４時間（２４ｈ）で採取した。リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、図３Ａに示す実施例４６の化合物について、図３Ｂに示す化合物（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５について、図３Ｃに示す実施例２０１の化合物について、図３Ｄに示す実施例１８４の化合物について、及び図３Ｅに示す実施例２０４の化合物についてウエスタンブロットで決定した。図３Ｆは、１０００ｎＭの実施例１８４の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０１の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０４の化合物、又は１０００ｎＭのピルトブルチニブの化合物（ｌｏｘｏ－３０５）とインキュベートされた２９３細胞を発現する二重変異体ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉのウォッシュアウトのウエスタンブロットタンパク質発現結果を示す。リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉについて図３Ｇに示されるように、実施例４５の化合物のウエスタンブロットで決定した。リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、２９３細胞を発現するＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉについて図３Ｈに示されるように、実施例４５の化合物及び実施例４６の化合物のウエスタンブロットで決定した。ベータ－アクチン（ＡＣＴＢ）及びＢＴＫ（総ＢＴＫ）レベルを、ローディング対照及びＢＴＫ発現対照として決定した。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、図３Ｂに示す化合物（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５について、ウエスタンブロットで決定した。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、図３Ｃに示す実施例２０１の化合物について、ウエスタンブロットで決定した。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、図３Ｄに示す実施例１８４の化合物について、ウエスタンブロットで決定した。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、図３Ｅに示す実施例２０４の化合物について、ウエスタンブロットで決定した。 図３Ｆは、１０００ｎＭの実施例１８４の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０１の化合物、又は１０００ｎＭの実施例２０４の化合物、又は１０００ｎＭのピルトブルチニブの化合物（ｌｏｘｏ－３０５）とインキュベートされた２９３細胞を発現する二重変異体ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉのウォッシュアウトのウエスタンブロットタンパク質発現結果を示す。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、２９３細胞を発現するｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｉについて図３Ｇに示されるように、実施例４５の化合物のウエスタンブロットで決定した。 リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、２９３細胞を発現するＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉについて図３Ｈに示されるように、実施例４５の化合物及び実施例４６の化合物のウエスタンブロットで決定した。ベータ－アクチン（ＡＣＴＢ）及びＢＴＫ（総ＢＴＫ）レベルを、ローディング対照及びＢＴＫ発現対照として決定した。
驚くべきことに、発明者らは、本発明による化合物が、野生型ＢＴＫ及び／又はＢＴＫ変異体に対して改善された可逆的結合活性をもたらすことを見出した。本発明による化合物は、ＢＴＫ特異的ファーマコフォア（例えば、ＢＴＫに結合するためのリガンドに基づく）と組み合わせて、改善された可逆的結合を介して野生型ＢＴＫ及び／又はＢＴＫ変異体に対する結合活性を提供する、大環状部分を含有する式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のいずれか１つを有する。特に、本化合物は、可逆的ＢＴＫ阻害剤で典型的に得られるものよりもかなり長い滞留時間を提供することが見出された。
本発明者らは、可逆的阻害剤のピルトブルチニブ、ベカブルチニブ、及びフェネブルチニブのすべてが、野生型ＢＴＫならびにＢＴＫ Ｃ４８１、Ｔ３１６、又はＴ４７４変異体上で短い標的滞留時間を示したことを確立した。
さらに、発明者らは驚くべきことに、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの大環状化合物が、ＢＴＫ変異体に対する強化された結合活性を提供することを見出した。例示的な実施形態では、本発明者らは、ＢＴＫ変異体ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｓに対する強化された結合活性を証明した。これらの所見に基づき、本発明の（ＢＴＫ標的化）化合物に対する大環状部分効果に基づき、他のＢＴＫ変異体への結合活性も増強されることが予想される。
大環状天然産物は、多数の生化学的機能を達成するよう進歩しており、それらの薬理学的特性は、薬物としての開発をもたらしてきた。大環状分子は、１２個以上の原子からなる環系として定義されている（Ｄｒｉｇｇｅｒｓ Ｅ．Ｍ． （２００８）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ）。大環状分子は、立体構造的に予め組織化された環構造において多様な機能性及び立体化学的複雑さを提供し、これは非常に優れた物理化学的及び薬理学的特性をもたらすことができる。非結合分子に利用可能な（生物活性）立体配置の数を制限することによって、分子がその標的タンパク質と相互作用する場合、非大環状化合物と比較してエントロピーコストが低いと考えられる。大環状リガンドは、非大環状阻害剤によって占められていない結合部位から順序付けられた水分子をバルク溶媒に置換するように選択され得る。これは、第二の好ましいエントロピー寄与（古典的疎水性効果）を提供すると仮定され得る（Ｍａｌｌｉｎｓｏｎ Ｊ．Ｍ． ａｎｄ Ｃｏｌｌｉｎｓ Ｉ． （２０１２）Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ）。これらの阻害剤の標的タンパク質に対する効力の強化につながる。
ここで、発明者らは、活性結合部分に加えて大環状部分を含む本発明による化合物が、結合活性を提供するが大環状化合物を含有しない類似の化合物と比較して、ＢＴＫ及び／又はＢＴＫ変異体に対する改善された結合活性をもたらすことを見出した。
実施形態
本発明の化合物
本発明の化合物は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）：
以下にさらに記載される当該化合物、又はその薬学的に許容可能な塩及び／若しくは溶媒和物によるものである。
本発明の第一の態様では、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩及び／若しくは溶媒和物が提供され、化合物は、以下からなる群から選択され：

式中、Ｒ１は、

であり、ここで、
Ｗは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基は、独立して、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
Ｕは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｒ２は、以下からなる群から選択される、式（ＩＩ－ａ）～（ＩＩ－ｆ）のものであり、

式中、Ｑは、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、式中、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２－、Ｏ、Ｎ及び直接結合から独立的に選択され、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル及びアルキル基のいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｒ３及びＲ４は、一緒になって、以下からなる群から選択される式；（ＩＩＩ－１）～（ＩＩＩ－４０）を有するリンカーを表し：

式中、

は、式Ｉ－ａ～式Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、

は、式ＩＩ－ａ～式ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
リンカーのいずれかは、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
好ましい実施形態では、本発明は、以下に記載される部分式１～２２６の化合物を提供する。部分式１～２２６の化合物の好ましい群における置換基の値を以下に示す。
（Ｒ１）
本発明の一態様では、本発明の化合物のＲ１は、式：

（式中、
Ｗは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
Ｕは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される）を有する。
一実施形態では、Ｒ１は、以下からなる群から選択され、

式中、Ｒ１ｗ及びＲ２ｗは、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
Ｕは、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、当該アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
一実施形態では、Ｒ１は、以下のいずれかであり、

式中、Ｒ１ｗ及びＲ２ｗは、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
Ｒ１ｕ及びＲ２ｕは、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから独立的に選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｘｕは、ＣＨ及びＮから選択される。
複数の実施形態では、Ｖは、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか一つであり、Ｒ１ｖは、水素又は（１－２Ｃ）アルキルである。
一実施形態では、Ｒ１は、以下のいずれかの１つであり、

式中、Ｒ１ｗ及びＲ２ｗは、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、当該アルキル又はアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｒ１ｕ及びＲ２ｕは、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから独立的に選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｘｕは、ＣＨ及びＮから選択される。
一実施形態では、Ｒ１は、以下のいずれか１つであり、

式中、Ｒ２ｗは、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択され、当該アルキル基又はアルコキシ基は、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
Ｒ３ｕは、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換される。
一実施形態では、Ｒ１は、以下のいずれか１つであり、

式中、Ｒ２ｗは、水素、フルオロ、メチル、又はメトキシから選択され、
Ｒ３ｕは、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換される。
（Ｒ２）
本発明の一態様では、本発明の化合物のＲ２は、以下のからなる群から選択される式（ＩＩ－ａ）～（ＩＩ－ｆ）によるものであり、
式中、Ｑは、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は独立して、ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２－、Ｏ、Ｎ、及び直接結合から選択される。
複数の実施形態では、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル、又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換される。特定の実施形態では、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
一実施形態では、Ｒ２は、 以下からなる群から選択され：
式中、Ｑは、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、Ｏ、Ｎ、及び直接結合から独立的に選択され、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル、又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
好ましい実施形態では、Ｒ２は、以下からなる群から選択され：

式中、Ｑは、（３－７）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、
式中、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は独立して、ＣＨ２、Ｏ、Ｎ、及び直接結合から選択され、
式中、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかは、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル、又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
好ましい実施形態では、Ｒ２は、以下からなる群から選択され：
式中、当該シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかは、ヒドロキシ、メチル、アセチル、又はメトキシで任意選択的かつ独立的に置換される。
好ましい実施形態では、Ｒ２のＸ１、Ｘ２、及びＸ３のうちの少なくとも１つは、二級アミン基を形成する窒素原子であり、アミン基は、（１－４Ｃ）アルキルカルボニルによって、好ましくはメチルカルボニル又はエチルカルボニルによって置換されている。好ましい実施例では、単環式環の式（ＩＩ－ｂ４）の二級アミン基は、メチルカルボニル又はエチルカルボニルなどの（１－４Ｃ）アルキルカルボニルによって置換されてもよい。
（Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカー）
本発明の化合物の各々は、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーを含む。リンカーは、本発明の化合物の各々の大環状分子の一部である。
式（ＩＩＩ－１）～（ＩＩＩ－４０）を有するリンカーの所与の式では、

（すなわち、星印を有する波状）は、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つにおけるＲ３の位置を示し、

（すなわち、星印を有しない波状）は、式ＩＩ－ａ～ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つにおけるＲ４の位置を示す。
したがって、リンカーは、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つの骨格（

すなわち、星状の波状）の位置で直接結合される。
大環状は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のリンカーＲ２と骨格との間の接続によって形成される。Ｒ２は、Ｒ４の位置でリンカーに直接結合される。式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の骨格は、リンカーの別の末端で、Ｒ３の位置でリンカーに結合される。骨格は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｆ）の化合物に示される二環であるか、又は骨格は、式（Ｉ－ｇ）～（Ｉ－ｈ）の化合物に示される単環である。
複数の実施形態では、大環状は、前述の大環状を形成する少なくとも１２個の原子を含んでもよく、前述の大環状を形成する１２～１８個の任意の数の原子を含んでもよく、好ましくは前述の大環状を形成する１３～１５個の原子を含んでもよい。
一実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーは、以下からなる群から選択される：

式中、

は、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、

は、式ＩＩ－ａ～ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
リンカーのいずれかは、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
一実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーは、以下からなる群から選択される：

式中、

は、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、

は、式ＩＩ－ａ～ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
リンカーのいずれかは、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
一実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーは、以下からなる群から選択される：

式中、

は、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、

は、式ＩＩ－ａ～ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
リンカーのいずれかは、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、当該アルキル基及びアルコキシ基のいずれかは、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される。
好ましい実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーの二級アミン基は、（１－６Ｃ）アルキルカルボニルによって、好ましくはメチルカルボニル又はエチルカルボニルによって置換されている。実施例では、式（ＩＩＩ－１９）～（ＩＩＩ－３３）又は（ＩＩＩ－３８）のうちのいずれか１つの二級アミン基は、メチルカルボニル又はエチルカルボニルなどの（１－４Ｃ）アルキルカルボニルによって置換され得る。
好ましい実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって表されるリンカーの炭素基は、（１－４）アルキルによって、好ましくはメチル又はエチルによって置換され、それによって三級炭素基を提供する。
（骨格）
本発明の化合物は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を有する。
大環状を含有しないＢＴＫ阻害剤は、先行技術から一般的に公知であり、前述の既知のＢＴＫ阻害剤は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を有する：
式（Ｉ－ａ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１３／０１０３８０、ＷＯ２０１６／２１０１６５を参照。
式（Ｉ－ｂ）の骨格を有する化合物については：Ｂｏｇａ Ｓ Ｂ ｅｔ ａｌ （２０１７）Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ， ２７， ３９３９－３９４３、Ｌｉｕ Ｊ ｅｔ ａｌ （２０１６）ＡＣＳ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ， ６ １９８－２０３を参照。
式（Ｉ－ｃ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１３／０１０３８０を参照。
式（Ｉ－ｄ）の骨格を有する化合物については：ＢＢＡ － Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ １８６４ （２０２０）１２９５３１を参照。
式（Ｉ－ｅ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１５／０５８０８４、ＷＯ２０１５／０９５０９９、ＷＯ２０１５／０９５１０２を参照。
式（Ｉ－ｆ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１３０／８１０１６を参照。
式（Ｉ－ｇ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１７／１０６４２９、ＷＯ２０１９／０９１４４１、ＷＯ２０１７／１０３６１１を参照。
式（Ｉ－ｈ）の骨格を有する化合物については：ＷＯ２０１４／０８２５９８、ＷＯ２０１４／０２５９７６を参照。
さらに、様々な骨格がＢＴＫ阻害剤化合物で使用されていることを示すレビューが：Ｙｉｆａｎ Ｆｅｎｇ， Ｗｅｉｍｉｎｇ Ｄｕａｎ， Ｘｉａｏｃｈｕａｎ Ｃｕ， Ｃｈｅｎｇｙｕａｎ Ｌｉａｎｇ ＆ Ｍｉｎｈａｎｇ Ｘｉｎ （２０１９）Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ （ＢＴＫ）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ： ａ ｐａｔｅｎｔ ｒｅｖｉｅｗ （２０１０－２０１８）， Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ， ２９：４， ２１７－２４１に提供される。
これらの先行技術の全ての文書は、ＢＴＫ阻害をもたらす化合物が、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格の各々について見出されることを示している。
本発明は、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）のいずれか１つによる骨格を有し、本発明の実施形態により定義される大環状をさらに有する新規化合物に関する。
一実施形態では、化合物は、以下からなる群から選択される式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｆ）による二環式骨格を含む：
好ましい実施形態では、化合物は、以下から選択される二環式骨格を含む：
一実施形態では、化合物は、以下からなる群から選択される式（Ｉ－ｇ）～（Ｉ－ｈ）による二環式骨格を含む：
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ａ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
代替的な実施形態では、化合物は、式（Ｉ－ｂ）、式（Ｉ－ｃ）、式（Ｉ－ｄ）、式（Ｉ－ｅ）、式（Ｉ－ｆ）、式（Ｉ－ｇ）、式（Ｉ－ｈ）のうちのいずれか１つによる骨格を含む。
（特定の化合物）
一実施形態では、化合物は、以下からなる群から選択される、部分式（１～２２６）を有する：




















さらに、以下の点に注意のこと。
部分式１～２２６の化合物のうちのいくつかは、特定の部分式に示されるシス異性体又はトランス異性体である。さらに、シス又はトランス異性体を有する部分式１～２２６の当該化合物のいずれかはまた、代替的な（トランス又はシス）異性体形態で提供されてもよく、又はシス及びトランス異性体の混合物として提供されてもよい。
部分式１１の化合物は異性体１であり、部分式１２の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１３の化合物は異性体１であり、部分式１４の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式５７の化合物は異性体１であり、部分式５８の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１４３の化合物は異性体１であり、部分式１４４の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１４５の化合物は異性体１であり、部分式１４６の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１５６の化合物は異性体１であり、部分式１５７の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１５８の化合物は異性体１であり、部分式１５９の化合物は同じ構造の異性体２である。部分式１６１の化合物は異性体１であり、部分式１６２の化合物は同じ構造の異性体２である。
部分式１～２２６の化合物は、薬学的に許容可能な酸を有する塩として存在することができる。本発明はこうした塩を含む。こうした塩の例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩〔例えば、（＋）－酒石酸塩、（－）－酒石酸塩、又はラセミ混合物を含むそれらの混合物］、コハク酸塩、安息香酸塩、及びグルタミン酸などのアミノ酸を有する塩が挙げられる。これらの塩は、当業者に公知の方法によって調製されてもよい。
酸性置換基を有する部分式１～２２６の特定の化合物は、薬学的に許容可能な塩基を有する塩として存在することができる。本発明はこうした塩を含む。こうした塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リジン塩、及びアルギニン塩が挙げられる。これらの塩は、当業者に公知の方法によって調製されてもよい。
部分式１～２２６の特定の化合物及びそれらの塩は、二つ以上の結晶形態で存在してもよく、本発明は、各結晶形態及びそれらの混合物を含む。
部分式１～２２６の特定の化合物及びそれらの塩はまた、溶媒和物、例えば水和物の形態で存在してもよく、本発明は、各溶媒和物及びそれらの混合物を含む。
本発明の化合物は、チロシンキナーゼの阻害剤として有用であり、特にＢＴＫの阻害剤として有用である。特に、本発明の化合物は、特に癌及び血管新生のプロセスにおいて、増殖性の高い疾患において重要なチロシンキナーゼの阻害剤として有用である。
好ましい実施形態では、化合物は、１～５７、５９～６４、６８～８６、８７ｂ～９０、９２～９４ｂ、９７ｂ～９８ｂ、９９ｂ、１００ｂ～１０３ｂ、１０４ｂ、１０８～１０９ａ、１１０、１１２、１１４～１１５、１１７～１３３ｂ、１３７～１３９、１４１～１４３、１４６～１５３、１５５～１７０、１７２～１８８、１９１～２０７、２０９～２１９及び２２２～２２５からなる群から選択される部分式（上に示される）を有する。
より好ましい実施形態では、 前記化合物は、１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０～１５３、１５５～１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８９、１９２、１９３、１９５、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６からなる群から選択される部分式（上に示される）を有する。
最も好ましい実施形態では、化合物は、以下からなる群から選択される：



医薬組成物
本発明による医薬組成物は、活性成分（ＡＰＩ’）として、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、水和物、若しくは溶媒和物を含む。
本明細書で使用される場合、薬学的に許容可能な塩は、活性剤（複数可）の活性を保持し、かつ薬学的使用に許容される任意の塩を含む。薬学的に許容可能な塩はまた、酸、別の塩、又は酸若しくは塩に変換されるプロドラッグの投与の結果としてインビボで形成され得る任意の塩を指す。薬学的に許容可能な塩は、本発明の化合物のＨＣｌ塩であることが好ましい。開示された化合物の薬学的に許容可能な塩は、当業者に周知の薬学的方法によって調製されてもよい。
さらに、組成物は、水（水和物）、エタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒を含む、溶媒和物の形態の本発明による化合物を含み得る。概して、溶媒和形態は、本発明の目的のために、非溶媒和形態と同等であるとみなされる。
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、本発明による化合物又はその塩若しくは溶媒和物、及び場合によっては、１種以上の追加の非毒性成分を含む組成物を指し、組成物は、任意の投与経路を通した（ヒト）対象への投与に好適な形態であり、組成物は、かかる投与に対して生理学的に許容される。
したがって、本発明の組成物は、１種以上の追加の成分を含み得る。好ましい実施形態では、組成物は、１種以上の担体及び／又は賦形剤を含む。当業者によって知られているように、賦形剤の適切な選択は、ＡＰＩの物理化学的特性、好ましい医薬形態、好ましい投与経路、所望の放出速度などを含む、複数の因子に依存する。本発明の組成物は、様々な投与経路用に製剤化することができ、経口投与が特に好ましい。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （Ｍｅａｄｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．， ２０．ｓｕｐ．ｔｈ Ｅｄ．， ２０００）などの教科書に反映される共通の一般知識に依存して、適切な製剤を考案及び開発することは、当業者にとっての理解の範囲内であり、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明の様々な態様によれば、組成物は単位剤形で提供されることが好ましい。単位剤形という用語は、ヒト対象に対する単位用量として好適な物理的に別個の単位を指し、各単位は、任意の好適な医薬担体及び／又は賦形剤に関連して所望の治療効果をもたらすように計算された所定の量の活性物質を含有する。例示的な非限定的な単位剤形としては、錠剤（例えば、チュアブル錠剤）、カプレット、カプセル（例えば、硬カプセル又は軟カプセル）、トローチ、フィルム、細片、ゲルキャップ、ならびに任意の計量された体積の溶液、懸濁液、シロップ、又はエリキシルなどが挙げられ、これらは、例えば、バイアル、シリンジ、アプリケータ装置、小袋、スプレー、マイクロポンプなどに含まれ得る。本発明の特に好ましい実施形態によれば、単位剤形は、経口投与に適した単位剤形である。最も好ましくは、錠剤などの固体単位剤形である。
このような本発明による化合物に加えて、その薬学的に許容可能な塩も使用することができる。本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩としては、酸付加塩及びその塩基塩、例えば好ましくはカルシウム塩、カリウム塩、又はナトリウム塩が挙げられる。適切な塩に関するレビューについては、“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ： Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ， Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ， ａｎｄ Ｕｓｅ” ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ （Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ， Ｗｅｉｎｈｅｉｍ， Ｇｅｒｍａｎｙ， ２００２）を参照。
本発明による化合物の薬学的に許容可能な塩は、本発明による化合物の溶液と、必要に応じて所望の酸又は塩基とを一緒に混合することによって容易に調製され得る。塩は、溶液から沈殿してもよく、濾過によって収集されてもよく、又は溶媒の蒸発によって回収されてもよい。塩中のイオン化の程度は、完全にイオン化されたものからほぼイオン化されていないものまで変化し得る。
医療用途
本発明の化合物及び医薬組成物は、チロシンキナーゼ、特にＢＴＫの阻害剤として有用である。特に、本発明の化合物は、特に癌及び血管新生のプロセスにおいて、増殖性の高い疾患において重要なチロシンキナーゼの阻害剤として有用である。
本発明の化合物はまた、固形腫瘍、肉腫（特にユーイング肉腫及び骨肉腫）、網膜芽腫、横紋筋肉腫、神経芽細胞腫、白血病及びリンパ腫を含む造血悪性腫瘍、腫瘍誘発性胸膜液又は心膜液貯留、ならびに悪性腹水などの癌関連適応症の治療にも有用である。
式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）を有する本発明による化合物及びその医薬組成物を使用して、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）によって媒介される様々な状態、疾患、又は障害を治療又は予防することができる。
こうした条件、 疾患又は障害としては、以下が挙げられる： （１）関節リウマチ、若年性関節炎、乾癬性関節炎及び変形性関節炎を含む関節炎；（２）喘息、ならびに慢性喘息、晩期喘息、気道過敏性喘息、気管支炎、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、粉塵喘息、成人呼吸窮迫症候群、再発性気道閉塞症、及び肺気腫を含む慢性閉塞性肺疾患を含むその他の閉塞性気道疾患；（３）自己免疫疾患又は障害、単一器官又は単一細胞型自己免疫障害として指定されるものを含む、例えば、橋本甲状腺炎、自己免疫性溶血性貧血、持続性貧血の自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性眼窩炎、グッドパスチャー病特発性血栓開放性紫斑病を含む自己免疫性血小板減少症、交感神経性眼科重症筋無力症、グレーブス病、原発性胆管肝硬変、慢性侵攻性肝炎、潰瘍性大腸炎及び膜性糸球体症、全身性自己免疫障害を伴うと指定されるもの、例えば全身性エリテマトーデス、免疫性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、シェーグレン症候群、レイター症候群多発性筋炎－皮膚筋炎、全身性硬化症、結節性多動脈炎、多発性硬化症及び水疱性類天疱瘡、ならびにＢ細胞（体液性）ベース又はＴ細胞ベースの自己免疫疾患（コーガン症候群、強直性脊椎炎、ウェゲナー肉芽腫症、自己免疫性脱毛症、Ｉ型又は若年発症糖尿病、甲状腺炎など）；
（４）消化管癌、結腸癌、肝癌、肥満細胞腫瘍及び扁平上皮癌を含む皮膚癌、乳癌及び乳腺癌、卵巣癌、前立腺癌、リンパ腫及び白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、マントル細胞リンパ腫、ＮＨＬ Ｂ細胞リンパ腫（例えば、前駆体Ｂ－ＡＬＬ、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を含むが、これらに限定されない）ホジキンリンパ腫、ＮＫ細胞リンパ腫及びＴ細胞リンパ腫、ＴＥＬ－Ｓｙｋ及びＩＴＫ－Ｓｙｋ融合駆動腫瘍、多発性骨髄腫を含む骨髄腫、骨髄増殖性障害腎臓癌、肺癌、筋癌、骨癌、膀胱癌、脳癌、経口及び転移性黒色腫を含む黒色腫、カポジ肉腫、増殖性糖尿病性網膜症、及び固形腫瘍を含む血管新生関連障害、ならびに膵癌を含む、癌又は腫瘍；
（５）Ｉ型糖尿病及び糖尿病による合併症を含む糖尿病；（６）眼の自己免疫疾患、角結膜炎、春期カタル性結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎及びレンズ誘発性ブドウ膜炎を含むブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜炎、角膜上皮ジストロフィー、角質核腫、眼前駆細胞、モーレン潰瘍、動脈炎、グレーブ眼疾患、フォークト－小柳－原田症候群症候群、烏口角結膜炎（ドライアイ）、小水疱、虹彩環化炎、サルコイドーシス、内分泌眼疾患、交感性眼炎、アレルギー性結膜炎、及び眼新生血管形成を含む、眼の疾患、障害又は状態；（７）腸炎症、クローン病及び／又は潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、 セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、及び肥満細胞症を含む、腸の炎症、アレルギー又は疾患；（８）運動ニューロン疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脳虚血又は外傷性損傷によって引き起こされる神経変性疾患、脳卒中、グルタミン酸神経毒性又は低酸素症、脳卒中、心筋虚血、腎虚血、心臓発作、心臓肥大、アテローム性動脈硬化症及び動脈硬化症、器官低酸素症における虚血／再灌流損傷を含む、含む神経変性疾患；（９）血小板の凝集及び血小板活性化に関連するか、又は血小板活性化によって引き起こされる疾患、動脈硬化症などの血栓症、血管損傷後の内膜過形成及び再狭窄；（１０）心血管疾患に関連する状態。
好ましい実施形態では、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）を有する本発明による化合物及びその医薬組成物を使用して、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害を治療又は予防することができ、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害は、アレルギー性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、血栓塞栓性疾患、骨関連疾患、及び癌からなる群から選択される。
好ましい実施形態では、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）を有する本発明による化合物及びその医薬組成物は、癌、リンパ腫、又は白血病の治療に使用され得る。
好ましい実施形態では、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）を有する本発明による化合物及びその医薬組成物は、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害を治療又は予防するために使用することができ、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害は、Ｂ細胞悪性腫瘍、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、非ホジキンリンパ腫、例えばＡＢＣ－ＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリー細胞白血病Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、リフター変換、多発性骨髄腫、骨癌、骨転移、慢性リンパ性リンパ腫、Ｂ細胞プロリンパ球白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、形質細胞リンパ腫、形質細胞腫、結節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、結節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、バーキットリンパ腫／白血病、及びリンパ腫様肉芽腫症からなる群から選択される。
好ましい実施形態では、 式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）を有する本発明による化合物及びその医薬組成物は、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害を治療又は予防するために使用され得、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害は、関節リウマチ、乾癬性関節炎、感染性関節炎、進行性慢性関節炎、変形性関節炎、骨関節炎、外傷性関節炎、痛風性関節炎、レイター症候群、多発性軟骨炎、急性滑膜炎及び脊椎炎、糸球体腎炎（ネフローゼ症候群を伴うか、又は伴わない）、自己免疫性血液疾患、溶血性貧血、無形成性貧血、特発性血小板減少症及び好中球減少、自己免疫性胃炎、自己免疫性炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、宿主対移植片疾患、同種移植片拒絶反応慢性甲状腺炎、グレーブス病、強皮症、糖尿病（Ｉ型及びＩＩ型）、活動性肝炎（急性及び慢性）、膵炎、原発性胆道肝硬変、重症筋無力症多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹、皮膚の日焼け、血管炎（例えば、ベーチェット病）、慢性腎不全、スティーブンス・ジョンソン症候群、炎症性疼痛、特発性スプルー、悪液質、サルコイド症、ギラン・バレー症候群、ブドウ膜炎、角結膜炎、角化結膜炎、中耳炎、歯周病、肺間質性線維症、喘息、気管支炎、鼻炎、副鼻腔炎、肺炎肺不全症候群、肺気腫、肺線維症、けい皮症、慢性炎症性肺疾患、慢性閉塞性肺疾患からなる群から選択される。
癌治療のために、本発明の化合物は、１種以上の抗癌剤と組み合わせることができる。このような薬剤の例は、Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ｂｙ Ｖ．Ｔ． Ｄｅｖｉｔａ ａｎｄ Ｓ．Ｈｅｉｌｍａｎ （ｅｄｉｔｏｒｓ）， ６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ （Ｆｅｂｒｕａｒｙ １５， ２００１）， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓに見出すことができる。当業者であれば、薬剤及び関与する癌の特定の特徴に基づいて、どの薬剤の組み合わせが有用であるかを識別することができるであろう。
ＲＥＣ－１マントル細胞リンパ腫細胞における増殖の阻害
一実施形態では、本発明の化合物のサブセットは、部分式１～５７、５９～６４、６８～８６、８７ｂ～９０、９２～９４ｂ、９７ｂ～９８ｂ、９９ｂ、１００ｂ～１０３ｂ、１０４ｂ、１０８～１０９ａ、１１０、１１２、１１４～１１５、１１７～１３３ｂ、１３７～１３９、１４１～１４３、１４６～１５３、１５５～１７０、１７２～１８８、１９１～２０７、２０９～２１９及び２２２～２２５のうちのいずれか１つ以上を有するように選択される。
これらの式の化合物のサブセットは、ＲＥＣ－１マントル細胞リンパ腫細胞の増殖を、１μＭ未満のＩＣ５０で阻害する。
ｗｔ－ＢＴＫへの結合及び変異体－ＢＴＫへの結合
本発明の化合物は、野生型ＢＴＫに強化された、かつ延長された結合活性をもたらすことが見出された。ｗｔ－ＢＴＫ結合及び結合動態は、結合親和性（ＫＤ）を測定することによって、及び標的滞留時間（tｈ）を測定することによって決定された。
一実施形態では、 本発明の化合物のサブセットは、部分式１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８７、１８９、１９２、１９３、１９５、１９８～２０１、２０３～２０５、２０７、２１０、２１１、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６のいずれか１種以上を有するように選択される。
これらの式の化合物のサブセットは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用した結合親和性（ＫＤ）によって決定されるように、野生型ＢＴＫに対して強化された結合活性を提供する。部分式１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８７、１８９、１９２、１９３、１９５、１９８～２０１、２０３～２０５、２０７、２１０、２１１、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ｗｔ－ＢＴＫ）値を示した。
本発明の化合物はまた、ＢＴＫの変異型に対しても結合活性をもたらすことが見出されている。変異体－ＢＴＫ結合及び結合動態は、結合親和性（ＫＤ）を測定することによって、及び特定のＢＴＫ変異体に対する標的滞留時間（tｈ））を測定することによって決定された。
一実施形態では、本発明の化合物のサブセットは、部分式１、６、７、８、９、１０、１７、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４、１７５、１７９、１８３、１８４、１９８～２０２、２０４及び２０７のいずれか１種以上を有するものが選択される。
これらの部分式の化合物のサブセットは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用した結合親和性（ＫＤ）によって決定されるように、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ変異体に対して強化された結合活性を提供する。部分式１、６、７、８、９、１０、１７、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４、１７５、１７９、１８３、１８４、１９８～２０２、２０４及び２０７の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ）値を示した。
一実施形態では、本発明の化合物は、部分式１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２及び１７４～１７６のうちのいずれか１つ以上を有するように選択される。
これらの式の化合物のサブセットは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用した結合親和性（ＫＤ）によって決定されるように、ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ変異体に対して強化された結合活性を提供する。部分式１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２ａｎｄ１７４～１７６の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ）値を示した。
一実施形態では、本発明の化合物のサブセットは、部分式１、２、６、７、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５７、６１、６８、７１、７９、８３、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１４１、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９、１８０、１８２～１８９、１９２、１９３、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７ａｎｄ２２２～２２６ａｎｄｓｕｂ－ｆｏｒｍｕｌａ８、９、５０、５１、５２、５３、５６、５９、７６、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３９、１４６、１５６及び２１１のいずれか１つ以上を有するように選択される。特定の実施形態では、化合物のサブセットは、部分式１、２、６、７、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５４、５７、６１、６８、７１、７９、８３、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１４１、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９、１８０、１８２～１８９、１９２、１９３、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６のいずれか１つ以上を含む。
これらの式の化合物のサブセットは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用した結合親和性（ＫＤ）によって決定されるように、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ変異体に対して強化された結合活性を提供する。実施例８、９、５０、５１、５２、５３、５６、５９、７６、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３９、１４６、１５６及び２１１は、１０ｎＭ超５０ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ）値を示し、部分式１、２、６、７、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５４、５７、６１、６８、７１、７９、８３、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１４１、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９、１８０、１８２～１８９、１９２、１９３、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６の化合物は、１０ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ）値を示した。
一実施形態では、本発明の化合物のサブセットは、部分式６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５６、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８１、１８３及び１８７のいずれか１つ以上を有するように選択される。
これらの式の化合物のサブセットは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用した結合親和性（ＫＤ）によって決定されるように、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｓ変異体に対して強化された結合活性を提供する。部分式６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５６、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８１、１８３及び１８７の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｓ）値を示した。
これらの化合物を上記に例示する。
ｗｔ－ＢＴＫ及び変異体－ＢＴＫに対する活性
好ましい実施形態では、本発明の化合物のサブセットは、部分式１０、１１、２５、２６、３３、３４、４０、４４、４５、４６、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６８、１６９、１７０、１７４、１７９、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１９２、１９３、１９６、１９８、１９９、２００、２０１、２０４、２０５、２１０、２１３、２１６、２１７、２２２及び２２４のうちのいずれか１つ以上を有するように選択される。
これらの式の化合物のサブセットは、ｗｔ－ＢＴＫ及び変異体ＢＴＫに対して強化された結合活性を提供し、ｗｔ－ＢＴＫ及び変異体ＢＴＫに対する長い標的滞留時間を提供する。
投与経路
好適な投与経路は、例えば、経口、点眼、直腸、経粘膜、局所、又は腸投与、筋肉内、皮下、髄内注射を含む非経口送達、ならびにくも膜下腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内、又は眼内注射を含み得る。
あるいは、例えば、多くの場合、デポ又は徐放性製剤中の浮腫部位への化合物の直接注射を介して、全身的様式ではなく局所的に化合物を投与してもよい。
さらに、例えば内皮細胞特異的抗体で被覆されたリポソームにおいて、標的薬剤送達系で薬剤を投与してもよい。
組成物／製剤
本発明の医薬組成物は、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、昇華、乳化、カプセル化、封入、又は凍結乾燥プロセスによって、それ自体が公知の様式で製造され得る。
したがって、本発明に従って使用するための医薬組成物は、活性化合物の薬学的に使用され得る製剤への加工を容易にする賦形剤及び補助剤を含む１種以上の生理学的に許容可能な担体を使用して、従来の様式で製剤化され得る。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。
注射のために、本発明の薬剤は、水溶液中で、好ましくはハンクス溶液、リンゲル溶液、又は生理食塩水緩衝液などの生理学的に適合した緩衝液中で製剤化されてもよい。経粘膜投与については、浸透されるバリアに適切な浸透剤が製剤に使用される。こうした浸透剤は、当該技術分野で一般的に公知である。
経口投与については、化合物は、活性化合物を当該技術分野で周知の薬学的に許容可能な担体と組み合わせることによって容易に製剤化することができる。こうした担体は、本発明の化合物を、治療される患者による経口摂取のために、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして製剤化することを可能にする。
経口使用のための医薬調製物は、活性化合物を固体賦形剤と組み合わせ、場合により、得られた混合物を粉砕し、顆粒の混合物を、所望であれば適切な補助剤を添加した後に処理して、錠剤又は糖衣剤コアを得ることによって得ることができる。適切な賦形剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトール、又はソルビトールを含む糖などの充填剤、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのセルロース調製物である。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、若しくはアルギン酸、又はアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を添加してもよい。
糖衣錠コアには適切なコーティングが提供される。この目的のために、濃縮糖溶液が使用されてもよく、これは場合によりに、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、及び／又は二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適切な有機溶媒又は溶媒混合物を含有してもよい。染料又は顔料を錠剤又は糖衣錠コーティングに添加して、活性化合物用量の異なる組み合わせを識別又は特徴付けてもよい。
経口的に使用することができる医薬調製物は、ゼラチンで作製されたプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンで作製された軟質の密封カプセル、及びグリセロール又はソルビトールなどの可塑剤を含む。プッシュフィットカプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤、及び／又はタルク若しくはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、及び場合により安定剤と混合して活性成分を含有することができる。軟カプセルでは、活性化合物は、脂肪油、液体パラフィン、又は液体ポリエチレングリコールなどの適切な液体中に溶解又は懸濁されてもよい。加えて、安定剤を添加してもよい。経口投与のためのすべての製剤は、かかる投与に適した用量であるべきである。
頬側投与については、組成物は、従来の様式で製剤化された錠剤又はトローチの形態を取ってもよい。
吸入による投与のために、本発明による使用のための化合物は、好適な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、又は他の好適なガスの使用により、加圧パック又はネブライザーからのエアロゾル噴霧提示の形態で好都合に送達される。加圧エアロゾルの場合、投与ユニットは、計量された量を送達するための弁を提供することによって決定されてもよい。吸入器又は送気装置で使用するための例えばゼラチンのカプセル及びカートリッジは、化合物とラクトース又はデンプンなどの適切な粉末塩基との粉末混合物を含有するように製剤化されてもよい。
化合物は、注射による非経口投与、例えば、ボーラス注射又は連続注入のために製剤化され得る。注射用製剤は、例えば、アンプル又は複数回投与容器など、防腐剤を添加した単位剤形て提供されてもよい。組成物は、油性ビヒクル又は水性ビヒクル中の懸濁液、溶液、又はエマルションなどの形態をとり得、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤などの製剤剤を含有することができる。
非経口投与用の医薬製剤には、水溶性形態の活性化合物の水溶液が含まれる。さらに、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製されてもよい。好適な親油性溶媒又はビヒクルとしては、ゴマ油などの脂肪油、又はオレイン酸エチル若しくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、又はリポソームが挙げられる。水性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、又はデキストランなどの懸濁液の粘度を増加させる物質を含有してもよい。場合により、懸濁液はまた、高濃縮溶液の調製を可能にするために、化合物の溶解性を増加させる適切な安定剤又は薬剤を含有してもよい。
あるいは、活性成分は、使用前に、好適なビヒクル、例えば、滅菌された発熱物質を含まない水と構成するための粉末形態であってもよい。
化合物はまた、例えば、カカオバター又は他のグリセリドなどの従来の座薬塩基を含有する、座薬又は保持浣腸などの直腸組成物中に製剤化されてもよい。
前述した製剤に加えて、化合物はまた、デポ調製物として製剤化されてもよい。こうした長時間作用型製剤は、移植（例えば、皮下若しくは筋肉内、又は筋肉内注射）によって投与されてもよい。したがって、例えば、化合物は、好適なポリマー若しくは疎水性材料（例えば、許容可能な油中のエマルションとして）若しくはイオン交換樹脂で、又は難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として製剤化されてもよい。
本発明の疎水性化合物のための医薬担体の例は、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマー、及び水相を含む共溶媒系である。共溶媒系は、ＶＰＤ共溶媒系であってもよい。ＶＰＤは、３％ｗ／ｖのベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性剤ポリソルベート８０、及び６５％ｗ／ｖのポリエチレングリコール３００の溶液であり、絶対エタノールで容量まで溶解した溶液である。ＶＰＤ共溶媒系（ＶＰＤ：５Ｗ）は、水溶液中の５％デキストロースで１：１に希釈されたＶＰＤからなる。この共溶媒系は、疎水性化合物を良好に溶解し、それ自体が全身投与時に毒性が低い。当然のことながら、共溶媒系の割合は、その溶解性及び毒性特性を破壊することなく、かなり変化することができる。さらに、共溶媒成分の同一性は変化してもよく、例えば、ポリソルベート８０の代わりに他の低毒性非極性界面活性剤が使用されてもよく、ポリエチレングリコールの画分サイズは変化してもよく、ポリエチレングリコール、例えばポリビニルピロリドンの代わりに他の生体適合性ポリマーと置き換えてもよく、デキストロース代わりに他の糖又は多糖類と置き換えてもよい。
あるいは、疎水性医薬化合物のための他の送達システムを採用してもよい。リポソーム及びエマルションは、疎水性薬剤の送達ビヒクル又は担体の周知の例である。ジメチルスルホキシドなどの特定の有機溶媒も使用され得るが、通常、毒性がより大きいという犠牲を負う。さらに、化合物は、治療剤を含有する固体疎水性ポリマーの半透過性マトリクスなどの徐放性システムを使用して送達されてもよい。様々な徐放性材料が確立されており、当業者に周知である。徐放性カプセルは、その化学的性質に応じて、化合物を数週間、最大１００日間放出することができる。治療試薬の化学的性質及び生物学的安定性に応じて、タンパク質安定化のための追加の戦略が採用され得る。
医薬組成物はまた、好適な固体若しくはゲル相担体又は賦形剤を含んでもよい。こうした担体又は賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、及びポリエチレングリコールなどのポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の化合物の多くは、薬学的に適合した対イオンを有する塩として提供することができる。薬学的に適合する塩は、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸などを含むがこれらに限定されない多くの酸で形成され得る。塩は、水性溶媒又は他のプロトン性溶媒に、対応する遊離塩基形態よりも可溶性である傾向がある。
化合物の合成
本発明の化合物は、有機化学の技術分野で周知の方法によって調製することができる。例えば、Ｊ． Ｍａｒｃｈ， ‘Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ’ ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓを参照。合成課程の間、関連する分子のいずれかの感受性基又は反応性基を保護することが必要であり、及び／又は望ましい場合がある。これは、Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｔｓ ‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’ ３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９９９に記載されるものなどの従来の保護基によって達成される。保護基は、当技術分野で周知の方法を使用して、便利な後続の段階で任意選択的に除去される。
反応の生成物は、必要に応じて、濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィーなどを含むがこれらに限定されない従来の技術を使用して、任意に単離及び精製される。こうした材料は、必要に応じて、物理的定数及びスペクトルデータを含む従来的な手段を使用して特徴付けられる。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが、以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのいずれか１種の化合物は、スキームＩ～ＸＩＩのいずれか１つに示される一般的な合成経路によって調製することができる。特定の実施例では、式Ｉ－ａ及びＩ－ｂのうちのいずれか１種の化合物は、スキームＩ－ＸＩＩのうちのいずれか１つに示される一般的な合成経路によって調製される。
スキームＩ及びＩＩは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
４－クロロ－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジンＩＩは、高温でＤＭＦなどの溶媒中でＮ－ヨードスクシンイミドを使用して、市販の４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジンから調製することができる。次いで、得られた生成物を、ｎ－ブタノール、イソプロパノール、又は２－ペンタノールなどの適切な溶媒中で高温で２，４－ジメトキシベンジルアミンと反応させて、Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミンＩＩＩを得ることができる。続いて、化合物ＩＶは、光延条件、例えば、０℃でＴＨＦ中のＤＩＡＤ／トリフェニルホスフィンを使用して、化合物ＩＩＩ及びベンジル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレートから調製することができる。化合物ＶＩは、例えば、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、好適なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して化合物ＩＶから調製することができる。ベンジルエステルの二重結合の低減及び脱保護は、好適な触媒系及び溶媒、例えば、酢酸エチル及びメタノール中の木炭上のパラジウムの存在下での触媒水素化によって達成されて、式ＶＩＩの化合物を得ることができる。
式ＶＩＩＩの化合物は、トルエン又はＴＨＦ中のジフェニルホスホリルアジド、並びにトリメチルシリルエタノール、ベンジルアルコール、又はｔｅｒｔ－ブタノールなどの好適なアルコールを使用して、誘導体ＶＩＩから調製することができる。その後のハロゲン化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中でＮ－ブロモスクシンイミド又はＮ－ヨードスクシンイミドを使用して実施され、式ＩＸの化合物を得ることができる。式Ｘの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＩＸから調製することができる。式ＸＩの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡなどの強酸によるアミノ機能の脱保護、及びその後のカルボキシル酸脱保護の後に、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムなどの適切な無機塩基を使用して、式Ｘの誘導体から調製することができる。式ＸＩＩの化合物への大環状化は、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中のＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。最後に、式ＸＩＩの化合物から式Ｉ－ａの化合物への変換は、水の存在下でＨＣｌ又はＴＦＡなどの強酸、及び適切な温度でトリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）などの好適なカチオンスカベンジャーを使用して達成することができる。
あるいは、Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが以前に定義された意味を有する式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物は、スキームＩＩＩに示される一般的な合成経路によって調製することができる。スキームＩＩＩは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
式ＶＩＩの化合物のハロゲン化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中でＮ－ブロモスクシンイミド又はＮ－ヨードスクシンイミドを使用して実施され、式ＸＩＩＩの化合物を得ることができる。式ＸＩＶの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＸＩＩＩから調製することができる。式ＸＶの誘導体は、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムなどの好適な無機塩基を使用して、カルボキシル酸脱保護後に式ＸＩＶの誘導体から調製することができる。式ＸＶの化合物への大環状化は、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中でＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。最後に、式ＸＶの化合物から式Ｉ－ａの化合物への変換は、適切な温度で水及びＴＩＳの存在下でＨＣｌ又はＴＦＡなどの強酸を使用して達成することができる。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ、及びＵが以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るための別の経路が、スキームＩＶに示される一般的な合成経路に示される。スキームＩＶは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
式ＸＶＩＩの化合物は、光延条件、例えば、０℃のＴＨＦ中のＤＩＡＤ／トリフェニルホスフィンを使用して、化合物ＩＩＩ及びアミノ保護（キラル）アミノアルコール（ＸＶＩ）から調製することができる。あるいは、式ＸＶＩＩの化合物は、例えば、トシルクロリド又はメシルクロリドとのアルコールの活性化後に得られ、炭酸セシウム又は炭酸カリウムなどの無機塩基の存在下でＤＭＦなどの適切な溶媒中で置換反応を行うことができる。式ＸＶＩＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、好適なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して化合物ＸＶＩＩから調製することができる。式ＸＶＩＩＩの化合物の後続のハロゲン化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中のＮ－ブロモスクシンイミド又はＮ－ヨードスクシンイミドを使用して実施され、式ＸＩＸの化合物を得ることができる。式ＸＸの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、適切なパラジウム触媒系、例えばで、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＸＩＸから調製することができる。式ＸＸＩの誘導体は、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムなどの適切な無機塩基を使用したカルボキシル酸脱保護後に式ＸＸの誘導体から調製することができ、その後、式ＸＸＩの化合物への大環状化は、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中のＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者に公知の方法を使用したＤＭＢ基のその後の除去により、式Ｉ－ａの化合物を提供する。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが、以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るためのさらに別の経路が、スキームＶに示される一般的な合成経路に示される。スキームＶは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
式ＸＸＩＩＩの化合物は、光延条件、例えば、０℃のＴＨＦ中のＤＩＡＤ／トリフェニルホスフィンを使用して、化合物ＩＩＩ及びアミノ保護（キラル）アミノアルコール（ＸＸＩＩ）から調製することができる。あるいは、式ＸＸＩＩＩの化合物は、例えば、トシルクロリド又はメシルクロリドを用いたアルコールの活性化後に得られ、炭酸セシウム又は炭酸カリウムなどの無機塩基の存在下でＤＭＦなどの適切な溶媒中で置換反応を行うことができる。式ＸＸＩＶの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、適切なパラジウム触媒系、例えば、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）で、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して化合物ＸＸＩＩＩから調製することができる。式ＸＸＩＶの化合物の後続のハロゲン化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中のＮ－ブロモスクシンイミド又はＮ－ヨードスクシンイミドを使用して実施され、式ＸＸＶの化合物を得ることができる。式ＸＸＶＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、適切なパラジウム触媒系、例えば炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、適切なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＸＸＶから調製することができる。式ＸＸＶＩＩの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡのような強酸によるアミン基の脱保護、及び水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムのような好適な無機塩基を使用したその後のカルボキシル酸脱保護の後に、式ＸＸＶＩの誘導体から調製することができ、式ＸＸＶＩＩの化合物への大環状化は、適切な温度でＤＭＦなどの好適な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。ＴＦＡ含有ＴＩＳなどの当業者の有機化学者に既知の方法を使用したＤＭＢ基のその後の除去により、式Ｉ－ａの化合物が提供される。
あるいは、Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが以前に定義された意味を有する式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物は、スキームＶＩに示される一般的な合成経路に示される。スキームＶＩは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
式ＸＸＶＩＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、好適なパラジウム触媒系、例えば、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、適切なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン又はトリフルオロホウ酸カリウムを使用して、化合物ＸＩＸから調製することができる。式ＸＸＶＩＩＩの誘導体の脱保護は、ＴＦＡのような強酸のＴＢＡＦなどの当業者に公知の方法を使用して達成することができる。その後、式ＸＸＩＸの化合物は、適切な温度でＤＭＦ、ＴＨＦ、又はＤＣＭなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を使用して、酸官能基を含有する末端アルケンを用いて得ることができる。式ＸＸＸの化合物に対する閉環メタセシスは、適切な温度でＤＣＭ又はトルエンなどの適切な溶媒中で、適切なグラブス触媒、モリブデン又はルテニウム触媒を用いて達成することができる。トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者の有機化学者に公知の方法を使用したＤＭＢ基のその後の除去により、式Ｉ－ａの化合物の異性体混合物が提供される。式Ｉ－ａのシス／トランス異性体のこのようにして得られた混合物を、ＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術を使用して分離して、式Ｉ－ａの化合物を得ることができる。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ、及びＵが以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るための別の経路が、スキームＶＩＩに示される一般的な合成経路に示される。スキームＶＩＩは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
式ＸＸＸＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、例えば、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン又はアリルトリフルオロホウ酸カリウムを使用して、化合物ＸＩＩＩから調製することができる。その後、式ＸＸＸＩＩの化合物は、適切な温度でＤＭＦ、ＴＨＦ、又はＤＣＭなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬であるアミン官能基を含有する末端アルケンから得ることができる。式ＸＸＸＩＩＩの化合物に対する閉環メタセシスは、適切な温度で、ＤＣＭ又はトルエンなどの適切な溶媒中で、適切なグラブス触媒、モリブデン又はルテニウム触媒を用いて達成することができる。トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者の有機化学者に公知の方法を使用したＤＭＢ基のその後の除去により、式Ｉ－ａの化合物の異性体混合物が提供される。式Ｉ－ａのシス／トランス異性体のこのようにして得られた混合物を、ＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術を使用して分離して、式Ｉ－ａの化合物を得ることができる。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが、以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るためのさらに別の経路が、スキームＶＩＩＩに示される一般的な合成経路に示される。スキームＶＩＩＩは、式Ｉ－ｂの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
（３－クロロピラジン－２－イル）メタンアミン．塩酸塩（ＸＸＸＩＶ）の反応は、ＤＩＰＥＡ、Ｎ－メチルモルホリン、４－ＤＭＡＰ、又はトリエチルアミンなどの塩基の存在下、及びＰｙＢＯＰ、ＴＢＴＵ、ＥＤＣＩ、又はＨＡＴＵなどのカップリング試薬の存在下で、ＤＭＦ、ＴＨＦ、又はＤＣＭなどの溶媒中で適切にアミン保護アミノ酸（ＸＸＸＶ）を用いて実施されて、式ＸＸＸＶＩの化合物を形成することができる。式ＸＸＸＶＩを用いたクロロピラジンの環化は、加熱条件下でオキシ塩化リンなどの縮合試薬を使用して実施されて、式ＸＸＸＶＩＩの化合物を提供することができる。その後の臭素化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中で、臭素又はＮ－ブロモスクシンイミドを使用して達成されて、式ＸＸＸＶＩＩＩの化合物を得ることができる。８－アミノイミダゾ［１，５ａ］ピラジン誘導体ＸＸＸＩＸは、圧力容器又はマイクロ波（４ａｔｍ超）中で高温でイソプロパノール中のアンモニア（ガス）を使用して、式ＸＸＸＶＩＩＩの化合物から調製することができる。式ＸＬの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、適切なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して、化合物ＸＸＸＩＸから調製することができる。式ＸＬの化合物の後続のハロゲン化は、適切な温度で酢酸などの適切な溶媒中で、Ｎ－クロロスクシンイミドを使用して実施されて、式ＸＬＩの化合物を得ることができる。式ＸＬＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、適切なパラジウム触媒系、例えばＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド複合体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＸＬＩから調製することができる。式Ｉの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡのような強酸によるアミン基の脱保護、及びその後の水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムのような適切な無機塩基を使用したカルボキシル酸脱保護の後に、式ＸＬＩＩの誘導体から調製することができる。式Ｉ－ｂの化合物への大環状化後、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。式Ｉ－ｂの化合物を得るために、トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者の有機化学者に公知の方法を使用して、ＤＭＢ基をその後除去する。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが、以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るためのさらに別の経路が、スキームＩＸに示される一般的な合成経路に示される。スキームＩＸは、式Ｉ－ｂの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
（３－クロロピラジン－２－イル）メタンアミン．塩酸塩（ＸＸＸＩＶ）の反応は、ＤＭＦ、ＴＨＦ又はＤＣＭなどの溶媒中で、ＤＩＰＥＡ、Ｎ－メチルモルホリン、４－ＤＭＡＰ又はトリエチルアミンなどの塩基の存在下、及びＰｙＢＯＰ、ＴＢＴＵ、ＥＤＣＩ又はＨＡＴＵなどのカップリング試薬の存在下で、適切にアミン保護アミノ酸（ＸＬＩＩＩ）を用いて実施されて、式ＸＬＩＶの化合物を形成することができる。式ＸＬＩＶのクロロピラジンの環化は、式ＸＬＶの化合物を提供するために、加熱条件下でオキシ塩化リンなどの縮合試薬を使用して実施することができる。その後の臭素化は、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中で、臭素又はＮ－ブロモスクシンイミドを使用して達成されて、式ＸＬＶＩの化合物を得ることができる。８－アミノイミダゾ［１，５ａ］ピラジン誘導体ＸＬＶＩＩは、圧力容器又はマイクロ波（４ａｔｍ超）中で高温でイソプロパノール中のアンモニア（ガス）を使用して、式ＸＬＶＩの化合物から調製することができる。式ＸＬＶＩＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、適切なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）塩化物錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）で、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して化合物ＸＬＶＩＩから調製することができる。式ＸＬＶＩＩＩの化合物の後続のハロゲン化は、適切な温度で酢酸などの適切な溶媒中で、Ｎ－クロロスクシンイミドを使用して実施されて、式ＸＬＩＸの化合物を得ることができる。式Ｌの化合物は、ジオキサンと水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、例えば炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、適切なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＸＬＩＸから調製することができる。式Ｉの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡなどの強酸によるアミン基の脱保護、及びその後のカルボキシル酸脱保護の後に、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムなどの適切な無機塩基を使用して、式Ｌの誘導体から調製することができる。式Ｉ－ｂの化合物への大環状化後、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。式Ｉ－ｂの化合物を得るために、トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者の有機化学者に公知の方法を使用して、ＤＭＢ基をその後除去する。
Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ、及びＵが以前に定義された意味を有する、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物を得るためのさらに別の経路が、スキームＸに示される一般的な合成経路に示される。スキームＸは、式Ｉ－ｂの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
３－アミノ－６－ブロモ－ピラジン－２－カルボニトリル（ＬＩＩ）は、高温でＤＭＦ中のシアン化銅及びシアン化ナトリウムを使用して、市販の２－アミノ－３，５－ジブロモピラジン（ＬＩ）から調製することができる。次いで、得られた生成物を、加熱下でアセトニトリルなどの適切な溶媒中で、塩化銅、ｔｅｒｔ－ブチル亜硝酸塩を用いたＳａｎｄｍｅｙｅｒ条件下で、６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－カルボニトリル（ＬＩＩＩ）に変換することができる。誘導体ＬＩＩＩの還元により、好適な触媒系及び溶媒、例えば、ラネーニッケルの存在下での高圧下での水素化によって達成されて、（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン（ＬＩＶ）が提供され得る。次いで、これを、ＤＭＦ、ＴＨＦ又はＤＣＭなどの溶媒中で、ＤＩＰＥＡ、Ｎ－メチルモルホリン、４－ＤＭＡＰ又はトリエチルアミンなどの塩基の存在下、及びＰｙＢＯＰ、ＴＢＴＵ、ＥＤＣＩ又はＨＡＴＵなどのカップリング試薬の存在下で、適切にアミン保護アミノ酸（ＸＸＸＶ）と反応させて、式ＬＶの化合物を形成することができる。式ＬＶＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン又はアリルトリフルオロホウ酸カリウムを使用して化合物ＬＶから調製することができる。式ＬＶＩのクロロピラジンの環化により、式ＬＶＩＩの化合物を提供するために、加熱条件下でオキシ塩化リンなどの縮合試薬を使用して実施することができる。その後の臭素化は、適切な温度で、ＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中で、臭素又はＮ－ブロモスクシンイミドを使用して達成されて、式ＬＶＩＩＩの化合物を得ることができる。８－アミノイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン誘導体ＬＩＸは、圧力容器又はマイクロ波（４ａｔｍ超）中で高温でイソプロパノール中のアンモニア（ガス）を使用して、式ＬＶＩＩＩの化合物から調製することができる。式ＬＸの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、例えば、好適なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して、化合物ＬＩＸから調製することができる。式ＬＸの誘導体の脱保護は、ＴＦＡのような強酸のＴＢＡＦなどの当業者に公知の方法を使用して達成することができる。その後、式ＬＸＩの化合物は、酸官能基を含む末端アルケン、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵのような適切なカップリング試薬を用い、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ＤＣＭのような適切な溶媒中、適切な温度で得ることができる。式Ｉ－ｂの化合物に対する閉環メタセシスは、適切な温度でＤＣＭ又はトルエンなどの適切な溶媒中で、適切なグラブス触媒、モリブデン又はルテニウム触媒を用いて達成することができる。トリエチルシランを含有するＴＦＡなどの当業者の有機化学者に公知の方法を使用したＤＭＢ基のその後の除去により、式Ｉ－ｂの化合物の異性体混合物が提供される。このようにして得られた式Ｉ－ｂのシス／トランス異性体の混合物を、ＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術を使用して分離して、式Ｉ－ｂの化合物を得ることができる。
あるいは、Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが以前に定義された意味を有する式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物は、スキームＸＩに示される一般的な合成経路によって調製することができる。スキームＸＩは、式Ｉ－ａの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
４－クロロ－３－ブロモ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジンＬＸＩＩは、高温でアセトニトリル又はＤＭＦなどの溶媒中で、Ｎ－ブロモスクシンイミドを使用して、市販の４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジンから調製することができる。式ＬＸＩＩＩの化合物は、続いて、光延条件、例えば、０℃のＴＨＦ中のＤＩＡＤ／トリフェニルホスフィンを使用して、化合物ＬＸＩＩ及び化合物ＸＶＩから調製することができる。１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン誘導体ＬＸＩＶは、イソプロパノール中のアンモニア（ガス）又は圧力容器又はマイクロ波（４ａｔｍ超）中、高温での２５％アンモニア水溶液を使用して、式ＬＸＩＩＩの化合物から調製することができる。式ＬＸＶの化合物は、室温でアセトニトリル又はＤＭＦなどの溶媒中で、Ｎ－ヨードスクシンイミドを使用して、化合物ＬＸＩＶから調製することができる。例えば、Ｂｏｃ２Ｏ又はＺ－ＯＮＳｕを使用した化合物ＬＸＶのその後のアミン保護により、式ＬＸＶＩの化合物が提供される。式ＬＸＶＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＬＸＶＩから調製することができる。式ＬＸＶＩＩＩの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡのような強酸によるアミノ基の脱保護、及びその後のカルボキシル酸脱保護の後に、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムのような好適な無機塩基を使用して、式ＬＸＶＩＩの誘導体から調製することができる。式ＬＸＶＩＩＩの化合物への大環状化は、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。最後に、式ＬＸＶＩＩＩの化合物から式Ｉ－ａの化合物への変換は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、好適なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して達成することができる。
あるいは、Ｒ１～Ｒ４及びＷ、Ｖ及びＵが以前に定義された意味を有する式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈの化合物は、スキームＸＩＩに示される一般的な合成経路によって調製することができる。スキームＸＩＩは、式Ｉ－ｂの例示的な化合物に関する一般的な合成経路を示す。
３－アミノ－６－ブロモ－ピラジン－２－カルボニトリル（ＬＩＩ）は、高温でＤＭＦ中のシアン化銅及びシアン化ナトリウムを使用して、市販の２－アミノ－３，５－ジブロモピラジン（ＬＩ）から調製することができる。次いで、得られた生成物を、加熱下でアセトニトリルなどの適切な溶媒中で、塩化銅、ｔｅｒｔ－ブチル亜硝酸塩を用いたＳａｎｄｍｅｙｅｒ条件下で、６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－カルボニトリル（ＬＩＩＩ）に変換することができる。誘導体ＬＩＩＩの還元により、好適な触媒系及び溶媒、例えば、ラネーニッケルの存在下での高圧下での水素化によって達成されて、（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン（ＬＩＶ）が提供され得る。次いで、これを、ＤＭＦ、ＴＨＦ又はＤＣＭなどの溶媒中で、ＤＩＰＥＡ、Ｎ－メチルモルホリン、４－ＤＭＡＰ又はトリエチルアミンなどの塩基の存在下、及びＰｙＢＯＰ、ＴＢＴＵ、ＥＤＣＩ又はＨＡＴＵなどのカップリング試薬の存在下で、適切にアミン保護アミノ酸（ＸＸＸＶ）と反応させて、式ＬＶの化合物を形成することができる。式ＬＸＩＸの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの好適な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下、好適なパラジウム触媒系、例えば、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３又はビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体の存在下で、適切なボロン酸又はピナコレステルを使用して化合物ＬＶから調製することができる。式ＬＸＩＸの環化クロロピラジンは、式ＬＸＸの化合物を提供するために、加熱条件下でオキシ塩化リンなどの縮合試薬を使用して実施することができる。その後の臭素化により、適切な温度でＤＣＭ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中で、臭素又はＮ－ブロモスクシンイミドを使用して達成されて、式ＬＸＸＩの化合物を得ることができる。８－アミノイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン誘導体ＬＸＸＩＩは、圧力容器又はマイクロ波（４ａｔｍ超）中で高温でイソプロパノール中のアンモニア（ガス）を使用して、式ＬＸＸＩの化合物から調製することができる。式ＬＸＸＩＩＩの化合物は、ジオキサン及び水の組み合わせなどの適切な溶媒系中で、炭酸カリウム、炭酸セシウム、又はリン酸カリウムなどの無機塩基の存在下で、適切なパラジウム触媒系、例えば、ビス（ジフェニルホスフィン）パラジウム（０）パラジウム（ＩＩ）クロリド錯体又はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）の存在下、適切なボロン酸又はピナコレステル（Ｖ）を使用して、化合物ＬＸＸＩＩから調製することができる。式Ｉの誘導体は、ＴＢＡＦ又はＴＦＡのような強酸によるアミン基の脱保護、及びその後のカルボキシル酸脱保護の後に、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムのような好適な無機塩基を使用して、式ＬＸＸＩＩＩの誘導体から調製することができる。式Ｉ－ｂの化合物への大環状化後、適切な温度でＤＭＦなどの適切な溶媒中で、ＥＤＣＩ．ＨＣｌのＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬を用いて達成することができる。ＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術を使用して精製した後、式Ｉ－ｂの化合物を得ることができる。
本発明は、以下の実施例によって例示される。
以下の実施例は、本発明の例示的な実施形態であり、本発明の範囲をいかなる方法でも限定するものではない。試薬は市販されているか、又は文献に公知の手順に従って調製される。
方法ＬＣＭＳ（Ａ）
試料分析には、Ｗａｔｅｒｓ ２９９８フォトダイオードアレイ検出器、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＱＤａ検出器、Ｗａｔｅｒｓ ２７６７オートサンプラー、及びＷａｔｅｒｓ ２５４５二成分勾配モジュールを備えたＬＣ－ＭＳシステムを使用し、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ Ｃ１８カラム（２．５μｍ、４．６×５０ｍｍ）を用いて１０分間の測定を行った。
このシステムに使用される溶離液は、Ａ（９５／５ｖ／ｖ％のＭｉｌｌｉ－Ｑ水／アセトニトリル＋０．１％のギ酸）及びＢ（アセトニトリル＋０．１％のギ酸）である。
方法ＬＣＭＳ（Ａ）：７分で９５％Ａ～９５％Ｂ、次いで９５％Ａ。
方法ＬＣＭＳ（Ｂ）
試料分析には、Ｗａｔｅｒｓ ２９９８フォトダイオードアレイ検出器、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＱＤａ検出器、Ｗａｔｅｒｓ ２７６７オートサンプラー、及びＷａｔｅｒｓ ２５４５二成分勾配モジュールを備えたＬＣ－ＭＳシステムを使用し、ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）ＭＳ Ｃ１８カラム（５μｍ、４．６×５０ｍｍ）を用いて３０分の測定を行った。
このシステムに使用される溶離液は、Ａ（９５／５ｖ／ｖ％のＭｉｌｌｉ－Ｑ水／アセトニトリル＋０．１％のギ酸）及びＢ（アセトニトリル＋０．１％のギ酸）である。
方法ＬＣＭＳ（Ｂ）：２２分で９５％Ａ～９５％Ｂ、次いで９５％Ａに切り替えた。
方法分取ＨＰＬＣ
Ｗａｔｅｒｓ ２９９８フォトダイオードアレイ検出器、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＱＤａ検出器、Ｗａｔｅｒｓ ２７６７オートサンプラー、及びＷａｔｅｒｓ ２５４５二成分勾配モジュールを備えたＬＣ－ＭＳシステムを、Ｌｕｎａ（登録商標）５μｍ Ｃ１８（２）１００Å（１５０×２１ｍｍ）を用いた分取逆相クロマトグラフィーに使用した。
このシステムに使用される溶離液は、Ａ（９５／５ｖ／ｖ％のＭｉｌｌｉ－Ｑ水／アセトニトリル＋０．１％のギ酸）及びＢ（アセトニトリル＋０．１％のギ酸）である。
以下の略語は、化学用語に関して本出願全体を通して使用される。
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＨＡＴＵ Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＴＭＳ－Ｃｌ クロロトリメチルシラン
ＤｉＰＥＡ Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ 質量分析検出を備えた液体クロマトグラフィー
－ＤＭＡＰ －ジメチルアミノピリジン
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル
Ｃｂｚ ベンジルオキシカルボニル
ＬｉＨＭＤＳ リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＤＢＵ ，－ジアザビシクロ［．．］ウンデカ－－エン
ＤＥＡＤ ジエチルアゾジカルボキシレート
ｏ／ｎ 一晩
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ ，’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）クロリド
ＡＩＢＮ アゾビスイソブチロニトリル
ＺｒＣｐ（Ｈ）Ｃｌ ジルコノセン塩酸塩（シュワルツ試薬）
１Ｈ－ＮＭＲ プロトン核磁気共鳴
ＢＯＣ２Ｏ ジ－ｔｅｒｔ－ブチル脱炭酸塩
ＤＰＰＡ ジフェニルホスホリルアジド
Ｔ３Ｐ プロピルホスホン酸無水物
ＮＩＳ Ｎ－ヨードスクシンイミド
ＰｙＢＯＰ ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＢＴＵ ２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート
ＥＤＣＩ １－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
２ＭｅＴＨＦ ２－メチルテトラヒドロフラン
Ｚ－ＯＮＳｕ Ｎ－（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド
ｏ／ｗ １週間
ＴＣＥＰ トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン
トリス ２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）プロパン－１，３－ジオール
中間体及び実施例中の最終生成物の名称は、Ｂｉｏｖｉａ Ｄｒａｗ（バージョン１６．１）を使用して生成される。Ｂｉｏｖｉａ Ｄｒａｗが名前を生成できなかった場合、分子構造が与えられる。
骨格Ａ

Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン
（ａ）４－クロロ－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン
４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン（５０ｇ、３２５．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５００ｍＬ）溶液に、Ｎ－ヨードスクシンイミド（８０．６ｇ、３５３．１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、５％チオ硫酸ナトリウム／重炭酸ナトリウム溶液／水（１Ｌ／５００ｍＬ／５００ｍＬ）の混合物に緩徐に添加した。混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチル（合計３．５Ｌ）で抽出した。酢酸エチル層を分離し、水（７５０ｍＬ）及びブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した（依然として２５ｍＬ超のＤＭＦを含有する）。得られた懸濁液に、１００ｍＬの酢酸エチルを添加し、２５０ｍＬのヘキサンを撹拌しながら添加した。溶媒をデカントし、得られた懸濁液を再び酢酸エチル（５０ｍＬ）及びヘキサン２５０ｍＬで処理した。沈殿物を濾過し、真空下で乾燥させて、６７．７ｇの表題化合物をわずかに褐色の粉末（収率７４．４％）として得た。
（ｂ）Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン（骨格Ａ）
室温で４－クロロ－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン（６７．７ｇ、２４２．２ｍｍｏｌ）の１－ブタノール（６７５ｍＬ）中懸濁液に、２，４－ジメトキシベンジルアミン（１２１．５ｇ、７２６．６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１２０℃で加熱し、一晩撹拌した。室温まで冷却した後、反応溶液を減圧下で濃縮した。沈殿物を水中に懸濁し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗表題化合物を得た。粗製物をジクロロメタン（３５０ｍＬ）中に懸濁／溶解し、５０℃で還流させた。ヘキサン（３５０ｍＬ）を還流下で滴下し、１時間撹拌した。冷却後、形成された沈殿物を濾過し、ジクロロメタン／ヘキサン＝１／１ｖ／ｖ％で洗浄し、４０℃、真空下で乾燥させて、灰白色の粉末として７５．８２ｇの表題化合物を得た（収率７６．３％）。
骨格Ｂ

ベンジル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（骨格Ｂ）
Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン（骨格Ａ）（４１．０２ｇ、１００ｍｍｏｌ）、ベンジル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ１）（２５．５４ｇ、１１０ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（３０．１４ｇ、１１５ｍｍｏｌ）のトルエン（４００ｍＬ）中の冷（４℃）懸濁液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２４．０７ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を４℃で３０分間撹拌し、次いで、室温で２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びＤＣＭ／アセトン＝９７／３～９５／５ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、５０ｇのベンジル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（骨格Ｂ（収率８０％）を得た。
骨格Ｃ
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｃ）
（ａ）ベンジル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
ベンジル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（１５．８８ｇ、２５．４３ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（１２５ｍＬ）中に溶解し、炭酸カリウム（１０．５４ｇ、７６．２９ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、ｔｅｒｔ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（１０．９６ｇ、２７．９７ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（１．０３ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及び酢酸エチル／ヘプタン＝１／４～３／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１８．５ｇ（収率９５．０％）を得た。
（ｂ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｃ）
ベンジル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（１８．０ｇ、２３．５４ｍｍｏｌ）の酢酸エチル／メタノール＝４／１ｖ／ｖ％（３５０ｍＬ）中の溶液に１．８ｇの１０％ Ｐｄ／Ｃを添加した。触媒水素化を室温で１６時間行った。反応は完了しなかった。ベンジルエステルを完全に還元したが、約３１％の二重結合含有生成物が残留した。パラジウム触媒を濾過し、濾液を１０％ Ｐｄ／Ｃ（１．８ｇ）で再充填し、触媒水素化を２４時間続けた。パラジウム触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、１４．７４ｇの表題化合物を得た（収率８５．０％）。
中間体ＲＰ１
ベンジル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
（ａ）（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン
（Ｒ）－（＋）－３－シクロヘキセンカルボン酸（５０．７ｇ、４０２ｍｍｏｌ）を窒素下でＨ２Ｏ（４００ｍＬ）中に懸濁した。混合物を４℃に冷却し、重炭酸ナトリウム（１０１．３ｇ、１．２１ｍｏｌ）を添加し、続いてヨウ化カリウム（３３３ｇ、２．０１ｍｏｌ）及びヨウ素（１０７ｇ、４２２ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（４００ｍＬ）溶液を添加した。反応物を室温にし、一晩撹拌し、次いでジクロロメタン（４×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、飽和ＮａＨＳＯ３溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を光から保護し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して（２０ｍｂａｒ）、灰白色の固体として（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（９０．１ｇ、８９．０％）を得た。
（ｂ）（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクト－３－エン－７－オン
（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（９０．１ｇ、３５８ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（６５０ｍＬ）中に溶解した。次いで、ＤＢＵ（７７ｍＬ、５１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６時間還流した。室温まで冷却した後、懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（商標）を通して濾過し、真空中で約２５０ｍＬまで濃縮した。これを次のステップで直接使用した。
（ｃ）ベンジル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ１）
メタノール（３００ｍＬ）中の（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタ－３－エン－７－オン（０．４ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、２Ｍ ＮａＯＨ溶液（３００ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１５分間撹拌した。３Ｍ ＨＣｌ溶液（３００ｍＬ）を添加して反応をクエンチし、塩化ナトリウムを添加して水層を飽和させた。混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去した。残渣をＤＭＦ（８００ｍｌ）中に溶解し、炭酸セシウム（１２９ｇ、０．４ｍｏｌ）を添加し、続いて臭化ベンジル（５７ｍＬ、０．４８ｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。形成された沈殿物を濾過し、沈殿物をジエチルエーテルで洗浄した。濾液を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させた。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～４５／５５ｖ／ｖ％）によって精製して、ベンジル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（３ステップにわたって５７．１ｇ、６１．５％）をクリーム色の油として得た。
中間体ＲＰ２
エチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
（ａ）（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン
（Ｒ）－（＋）－３－シクロヘキセンカルボン酸（５０．７ｇ、０．４ｍｏｌ）を窒素下でＨ２Ｏ（４００ｍＬ）中に懸濁した。反応混合物を４℃に冷却し、重炭酸ナトリウム（１０１ｇ、１．２ｍｏｌ）を添加し、続いてヨウ化カリウム（３３３ｇ、２ｍｏｌ）及びヨウ素（１０７ｇ、０．４２ｍｏｌ）のＨ２Ｏ（４００ｍＬ）溶液を添加した。反応物を室温にし、一晩撹拌し、次いでＤＣＭ（４×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２Ｓ２Ｏ３（１２０ｇ）のＨ２Ｏ（６００ｍＬ）溶液で洗浄した。水層をＤＣＭ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を光から保護し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して（２０ｍｂａｒ）、灰白色の固体として（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（９５．２２ｇ、９４．５％）を得た。
（ｂ）（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクト－３－エン－７－オン
（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（９５．２２ｇ、３７７．９ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（７００ｍＬ）中に溶解させた。次いで、ＤＢＵ（８６．３ｇ、５６６．９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩還流した。反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）で希釈し、飽和ＨＣｌ水溶液（１Ｌ、１Ｍ）及びブライン（２５０ｍＬ）で抽出した。水層をジエチルエーテル（２×４８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して（３５０ｍｂａｒ）、黄色がかった油として、（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクト－３－エン－７－オンを定量的に得て、これを次のステップで直接使用した。
（ｃ）エチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ２）
（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタ－３－エン－７－オン（３７７．９ｍｍｏｌ、理論）のエタノール（７５０ｍＬ）中の撹拌溶液に、炭酸カリウム（１０．４５ｇ、７５．６ｍｍｏｌ）を室温で添加し、混合物を一晩撹拌した。反応混合物をセライトパッドを通して濾過した。エタノールを減圧下で除去して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィープラグ濾過（溶出液４０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製して、黄色液体として表題化合物（４１．３８ｇ、３ステップ及びカラムにわたって６０．８％）を得た。
中間体ＲＰ３
メチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
（ａ）（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン
（Ｒ）－（＋）－３－シクロヘキセンカルボン酸（２０．２ｇ、１６０ｍｍｏｌ）を窒素下でＨ２Ｏ（４３０ｍＬ）中に懸濁した。反応混合物を０℃まで冷却し、重炭酸ナトリウム（４０．３ｇ、４８０．３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ヨウ化カリウム（１５９．５ｇ、９６１ｍｍｏｌ）及びヨウ素（３９．６ｇ、１６８ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３６０ｍＬ）溶液を添加した。反応物を室温にし、一晩撹拌し、次いでＤＣＭ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２Ｓ２Ｏ３（１２０ｇ）のＨ２Ｏ（６００ｍＬ）溶液で洗浄した。水層をＤＣＭ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を光から保護し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して（２０ｍｂａｒ）、灰白色の固体として（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（３７．８８ｇ、９３．９％）を得た。
（ｂ）（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクト－３－エン－７－オン
（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－ヨード－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタン－７－オン（３７．８８ｇ、１５０．３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（７５０ｍＬ）中に溶解した。次いで、ＤＢＵ（３４．３ｇ、２２５．２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩還流した。反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテル（４８０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ水溶液（１Ｌ、０．５Ｍ）及びブライン（１Ｌ）で抽出した。水層をジエチルエーテル（２×４８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して（３５０ｍｂａｒ）、黄色がかった油として、（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクト－３－エン－７－オンを定量的に得て、これを次のステップで直接使用した。
（ｃ）メチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ３）
重炭酸ナトリウム（３７．８８ｇ、０．４５１ｍｏｌ）を（１Ｒ，５Ｒ）－６－オキサビシクロ［３．２．１］オクタ－３－エン－７－オン（１５０．３ｍｍｏｌの理論）の無水ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）溶液に添加した。室温で１週間撹拌した後、溶媒を真空（４０℃／３００ｍｂａｒ）中で除去した。残渣を水（５００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、わずかに色のついた液体として表題化合物を得た（２１．２ｇ、９０．３％）。
中間体ＲＰ４
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート
（ａ）２－シクロヘキサ－２－エン－１－イルイソインドリン－１，３－ジオン
フタルイミドカリウム（６９．８８ｇ、３７７．２ｍｍｏｌ）及び３－ブロモシクロヘキセン（６０．７５ｇ、３７７．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５００ｍＬ）中の混合物を、３０℃で撹拌し、徐々に１００℃まで６時間加温し、次いで室温によって一晩温めた。反応混合物を水（２Ｌ）で希釈し、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×５００ｍＬ）、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン）により精製して、６３．２９ｇの表題化合物を得た（収率７３．８％）。
（ｂ）（±）１３－ブロモ－１２ｂ－エトキシ－２，６－メタノ［１，３］オキサゾシノ［２，３ａ］イソ－インドール－８－オン
Ｎ－ブロモスクシンイミド（６１．９５ｇ、３４８ｍｍｏｌ）を、２－シクロヘキサ－２－エン－１－イルイソインドリン－１，３－ジオン（６３．２９ｇ、２７８．４ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０００ｍＬ）及びエタノール（６５ｍＬ）中の撹拌溶液に添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１Ｍチオ硫酸ナトリウム溶液（１．５Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝７／３ｖ／ｖ％）により精製して、表題化合物（９７．０ｇ、９８．９％）を得た。
（ｃ）１，２－トランス－２，３－トランス－２－ブロモ－３－Ｎ－フタルイミドシクロヘキサノール
２Ｍ ＨＣｌ溶液（１５０ｍＬ）を、オルトアミド（８６．４４ｇ、２４５．４ｍｍｏｌ）のメタノール（６００ｍＬ）中の撹拌溶液に添加し、溶液を室温で３０分間撹拌した。溶媒の大部分を除去し、ジクロロメタン（３００ｍＬ）を残渣に添加した。その後、この溶液を水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。結晶性残渣を酢酸エチル／ヘキサン（２００／５００ｍＬ、７５℃で）から再結晶化して、表題化合物を得た（７０．０４ｇ、８８．０％）。
（ｄ）シス－３－フタルイミドシクロヘキサノール
トリ－ｎ－ブチルスズヒドリド（８４ｇ、２８８．７ｍｍｏｌ）を、１，２－トランス－２，３－トランス－２－ブロモ－３－Ｎ－フタルイミドシクロヘキサノール（７８ｇ、２４０．６ｍｍｏｌ）及びＡＩＢＮ（トルエン中０．２Ｍ、６０ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）のトルエン（７００ｍＬ）及びメタノール（７０ｍＬ）中の撹拌溶液に添加し、混合物を還流で一晩撹拌した。追加のＡＩＢＮ（２×５ｍＬ）及びトリ－ｎ－ブチルスズヒドリド（２×１０ｍＬ）を添加し、反応混合物を還流で一晩撹拌した。反応はゆっくりと進行し、追加のＡＩＢＮ（２０ｍＬ）及びトリ－ｎ－ブチルスズヒドリドを添加し、反応混合物を還流で３時間撹拌した。ＴＬＣで進行を追った。その後、混合物を窒素下に置き、追加のＡＩＢＮ（２０ｍＬ）及びトリブチルスズヒドリド（２０ｇ）を続いて添加し、還流で４時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を７５０ｍＬのヘプタン（２×）で粉砕した。ヘプタン層を減圧下で吸引によって除去した。再び、１００ｍＬの酢酸エチル及び６５０ｍＬのヘプタンを添加した。沈殿物を濾過し、ヘキサンで洗浄し、４０℃で一晩真空下で乾燥させて、４９．０７ｇの表題化合物を得た（収率８３．１％）。
（ｅ）２－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］イソインドリン－１，３－ジオン＋［（１Ｒ，３Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキシル］アセテート
シス－３－フタルイミドシクロヘキサノール（４９ｇ、２００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６００ｍＬ）溶液に、リパーゼノボザイム４３５（２５ｇ）及び酢酸ビニル（５５．３ｍＬ、６００ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温にて、２５０ｒｐｍで一晩で振盪した。反応の進行をＬＣ－ＭＳによって監視した。一晩反応させた後、酵素を濾過し、ＴＨＦで洗浄し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣を、ＳｉＯ２及び酢酸エチル／ヘプタン＝１／１～１０／０、ならびに酢酸エチル／ジクロロメタン＝３／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、２１．２１ｇの２－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］イソインドリン－１，３－ジオン（収率４３．３％）及び３１ｇの［（１Ｒ，３Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキシル］アセテート（収率５４．０％）を得た。
（ｆ）（１Ｓ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサノール
２－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］イソイドリン－１，３－ジオン（２１．２ｇ、８６．４ｍｍｏｌ）のエタノール（２８０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン水和物（４．２８ｍＬ）を添加し、反応混合物を１００℃で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮して、黄色の固体として９．８７ｇの表題化合物を得た（収率５９．９％）。粗沈殿物１３．７４ｇは、依然として多くの２，３－ジヒドロフタラジン－１，４－ジオン及び生成物（収率：３９．４％）を含有する。
（ｇ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（中間体ＲＰ４）
（１Ｓ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサノール（９．８７ｇ、５１．７４ｍｍｏｌ）のジオキサン（２００ｍＬ）溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボレート（１１．８６ｇ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジオキサンを一部蒸発させ、酢酸エチル（５００ｍＬ）を懸濁液に添加した。懸濁液をＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ中４ｇ）、水、及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１２．５ｇの表題化合物を得た。
第２バッチ：（１Ｓ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサノール（１３．７４ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）のジオキサン（２００ｍＬ）溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボネート（７．８ｇ）を添加し、反応混合物を室温で１週間撹拌した。ジオキサンを一部蒸発させ、酢酸エチル（５００ｍＬ）を懸濁液に添加した。懸濁液をＮａＯＨ溶液（２００ｍＬ中４ｇ）、水、及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、７．５４ｇの表題化合物を得た。
両方のバッチを組み合わせ、酢酸エチル中に懸濁させた。ヘキサンを添加し、形成された沈殿物を濾過し、ヘキサンで洗浄し、４０℃で高真空下で乾燥させて、１６．３ｇのｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（中間体ＲＰ４）（収率８７．６％）を得た。
（ｈ）［（１Ｓ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］（２Ｓ）－３，３，３－トリフルオロ－２－メトキシ－２－フェニル－プロパノエート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（３５．６μＬ、０．２６ｍｍｏｌ）及び４－ジメチルアミノピリジン（３ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５分間撹拌した。（Ｒ）－（－）－α－メトキシ－α－トリフルオロメチルフェニルアセチルクロリド（６１．６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタンを減圧下で蒸留し、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝８／２ｖ／ｖ％）により精製して、７１．４ｍｇの表題化合物を得た（収率７２．０％）。プロトン及びフルオルＮＭＲがいずれも、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（中間体ＲＰ４）のｄ．ｅ．が ９９．０％超であることを示した。
中間体ＲＰ５（経路Ａ）
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸
（ａ）メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
ジ－ｔｅｒｔ－ブチルイミノジカルボキシレート（４．６ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）、メチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ３）（３．３１ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（６．６７ｇ、２５．４ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（１８０ ｍＬ）中の氷冷（４℃）溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（６．２６ｍＬ、３１．８ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を４℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで加温し、３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝３／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、５．６８ｇのメチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（収率７５．４％）を得た。
（ｂ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート
メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（２．４８ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）のエタノール（１４０ｍＬ）溶液に、２４８ｍｇの１０％ Ｐｄ／Ｃを添加した。触媒水素化を室温で１６時間行った。パラジウム触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、２．６ｇの表題化合物を得た（収率：定量的）。
（ｃ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート塩酸塩
メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート（２．６ｇ、７．２ｍｍｏｌ）に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン溶液（１８ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を真空中で濃縮して、１．０６ｇの表題化合物（収率７６％）を得た。
（ｄ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート
メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート塩酸塩（１．０６ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの水中に懸濁した。重炭酸ナトリウム（１．３８ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）の１０ｍＬの水溶液を添加し、続いて、Ｎ－（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（１．５０ｇ、６．０１ｍｍｏｌ）のジオキサン（３０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈し、二相系を室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、水（５０ｍＬ）、０．５Ｎ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、及びブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、１．７８ｇの表題化合物を得た（収率：定量的、粗製）。
（ｅ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸（中間体ＲＰ５）
粗生成物のメチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート（１．４５ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／ジオキサン／水＝４／１／１ｖ／ｖ％（７４ｍＬ）中に溶解し、続いて水酸化リチウム（３５８ｍｇ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（を添加し）混合物のｐＨを、２Ｍ ＨＣｌ溶液を添加することによってｐＨ＜３に調整した。有機相を分離し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８００ｍｇの（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸（中間体ＲＰ５）を得た（収率５７．９％）。
中間体ＲＰ５（経路Ｂ）
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－（４－ニトロフェニル）スルホニルカルバメート
トリエチルアミン（１０．４ｍＬ、７４．６２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（６０５ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ）、及びジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（１３．５ｇ、６１．８６ｍｍｏｌ）を、４－ニトロベンゼンスルホンアミド（１０ｇ、４９．４６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に順次添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物に、酸性になるまで塩酸（１Ｎ水溶液）を添加した。有機層を分離し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン中に溶解し、シリカ（ヘプタン－酢酸エチル＝１０／０～０／１０）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、１３．０９ｇの表題化合物を得た（収率８７．５％）。
（ｂ）メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］－シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
メチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（１５ｇ、９６．０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－（４－ニトロフェニル）スルホニルカルバメート（２９．０ｇ、９６．０ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（２７．７ｇ、１０５．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）中の冷（－２０℃）溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２０．８ｍＬ、１０５．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を減圧下で濃縮して、残渣を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝８５／１５ｖ／ｖ％）により精製して、３６ｇの表題化合物を得た（収率８５．１％）。
（ｃ）メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］－シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（３５．１５ｇ、７９．８ｍｍｏｌ）のアセトン（３００ｍＬ）の攪拌溶液に、ＤＢＵ（２３．８５ｍＬ、１５９．６ｍｍｏｌ）及び２－メルカプトエタノール（１１．２３ｍＬ、１５９．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。アセトンを減圧下で除去し、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０～８８／１２ｖ／ｖ％）により精製して、結晶性白色固体として１４．１ｇの表題化合物を得た（収率６９．２％）。
（ｄ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート
メチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（１４．９ｇ、５８．３６ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍＬ）溶液に、１．５ｇの１０％ Ｐｄ／Ｃを添加した。触媒水素化を室温で３時間行った。パラジウム触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、定量的粗収率で表題化合物を得た。
（ｅ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート塩酸塩
メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロ－ヘキサンカルボキシレート（１５．２ｇ、５８．３６ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍＬ）中の冷却（４℃）溶液に、塩化アセチル（４２ｍＬ、５８３．６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を１時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、真空中で乾燥させて、定量的粗収率で表題化合物を得た。
（ｆ）メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート
メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート塩酸塩（５８．３６ｍｍｏｌ）のジオキサン／水＝１／１ｖ／ｖ％（２００ｍＬ）中の冷却（４℃）溶液に、重炭酸ナトリウム（１４．７ｇ、１７５ｍｍｏｌ）を分割して添加した。得られた懸濁液に、Ｎ－（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（１４．８ｇ、５９．０２ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５０ｍＬ）溶液を滴下し、得られた混合物を室温で１週間撹拌した。ＬＣ－ＭＳにより、いくらかの出発物質が存在することが示された。さらに、ジオキサン中の溶液として１．５ｇのＺ－ＯＮＳｕを添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。酢酸エチルを添加し、得られた混合物を０．５Ｍ ＨＣｌ溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、真空中で乾燥させて、定量的粗収率で表題化合物を得た。
（ｇ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸（中間体ＲＰ５）
メチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート（５８．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／水＝４／１ｖ／ｖ％（３７５ｍＬ）中の溶液に、水酸化リチウム（４．２１ｇ、１７５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。酢酸エチル（３００ｍＬ）及び水（３００ｍＬ）を混合物に添加し、水相を分離した。酢酸エチル層を洗浄し、水（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた水相をジクロロメタン（１００ｍＬ）で洗浄し、２Ｍ ＨＣｌ溶液（９０ｍＬ）を添加することによって酸性化した（ｐＨ＜２）。水層を酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、真空中で乾燥させて、１５．７２ｇの表題化合物を得た（収率：４工程にわたって９６．７％）。
中間体ＲＰ５ｂ（経路Ｃ）
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸
（ａ）エチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート
エチル（１Ｒ，５Ｒ）－５－ヒドロキシシクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（中間体ＲＰ２、１５．０ｇ、８８．１３ｍｍｏｌ）、フタルイミド（１４．２６ｇ、９６．９４ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（３４．６７ｇ、１３２．２ｍｍｏｌ）のトルエン（２６４ｍＬ）中の氷冷（０℃）溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボ－キシレート（２６．０２ｍＬ、１３２．２ｍｍｏｌ）を１０分間で滴下した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、その後、室温に戻し、３時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させて、黄色の油を得た。ヘプタン／酢酸エチル＝７／３ｖ／ｖ％（５００ｍＬ）を添加し、混合物を７０℃に加熱した。冷却後、混合物を室温で７２時間撹拌した。固体を濾過し、ヘプタン／酢酸エチル＝９／１ｖ／ｖ％（２×５０ｍＬ）で洗浄し、濾液を減圧下で蒸発させた。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝９／１～６／４ｖ／ｖ％）により精製して、灰白色の固体として２１．９６ｇの表題化合物を得た（収率８３．０％）。
（ｂ）エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキサンカルボキシレート
エチル（１Ｒ，５Ｓ）－５－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキサ－３－エン－１－カルボキシレート（２７．７３ｇ、９７．１９ｍｍｏｌ）のメタノール（９７５ｍＬ）溶液に、２．７ｇの１０％ Ｐｄ／Ｃを添加した。触媒水素化を室温で３時間行った。パラジウム触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、２７．５２ｇの表題化合物を得た（収率９４％）。
（ｃ）エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート
エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）シクロヘキサンカルボキシレート（２６．５ｇ、８７．９５ｍｍｏｌ）のエタノール（４４０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン水和物（水中６４％、４．６８ｍＬ、９６．７４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、その後、３時間還流させた。追加のヒドラジン水和物（４２５μＬ）を添加し、還流下で２時間撹拌し続けた。混合物を減圧下で濃縮し、真空中で乾燥させて、定量的粗収率で表題化合物を得た。
（ｄ）エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート
エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキサンカルボキシレート（９１．２７ｍｍｏｌ、理論上）のジクロロメタン（４５６ｍｌ）中の冷（０℃）撹拌懸濁液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２１．９１ｇ、１００．４ｍｍｏｌ）を分割して添加した。反応混合物を、０℃で１５分間撹拌し、次いで、室温にした。混合物を、冷０．５Ｎ ＮａＯＨ溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝８／２～６／４ｖ／ｖ％）により精製して、灰白色の固体として２０．５ｇの表題化合物を得た（収率：２工程にわたって８３．０％）。
（ｅ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸
エチル（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボキシレート（２０．５ｇ、７５．５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム（１．８ｇ、７５．５６ｍｍｏｌ）の水溶液（１５０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。追加の水酸化リチウム（０．９ｇ）を添加し、室温で２４時間撹拌し続けた。１Ｍ ＨＣｌ溶液（１３１ｍＬ）を添加することによって、混合物を酸性化した（ｐＨ＜２）。水層を分離し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、真空中で乾燥させて、１６．８１ｇ（９１％）の（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロ－ヘキサンカルボン酸（中間体ＲＰ５ｂ）を得た。
中間体ＲＰ６
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－ブチル］カルバメート
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［メトキシ（メチル）アミノ］－１－メチル－３－オキソ－プロピル］カルバメート
ＤｉＰＥＡ（２２．３ｍＬ、１３２ｍｍｏｌ）、続いて、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中５０重量％、３４ｍＬ、５７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン（６．４３ｇ、６６ｍｍｏｌ）を、（Ｒ）－Ｎ－Ｂｏｃ－３－アミノ酪酸（８．９４ｇ、４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９０ｍＬ）溶液に順次添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。水（５０ｍＬ）を添加し、水性混合物を１時間撹拌し、次いで、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせ、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、１０．８４ｇ（１００％）の表題化合物を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－１－メチル－３－オキソ－ブチル］カルバメート
臭化メチルマグネシウム（Ｅｔ２Ｏ中３Ｍ、３２．３ｍＬ、９６．８ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［メトキシ（メチル）アミノ］－１－メチル－３－オキソ－プロピル］カルバメート（１０．８４ｇ、４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１３２ｍＬ）溶液に窒素下で－１５℃で滴下した。この温度で１５分間撹拌した後、混合物を室温にし、１時間撹拌し続けた。混合物を０℃に冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（４０ｍＬ）を慎重に添加した。水性混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、３．３ｇのｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－１－メチル－３－オキソ－ブチル］カルバメート（収率３７％）を得た。
（ｃ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－ブチル］カルバメート（中間体ＲＰ６）
水素化ホウ素ナトリウム（７４４ｍｇ、１９．６８ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－１－メチル－３－オキソ－ブチル］カルバメート（３．３ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）のエタノール（８２ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に窒素下で添加した。この温度で５分間撹拌した後、混合物を室温にし、１時間撹拌し続けた。混合物を０℃に冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を慎重に添加した。水性混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びジクロロメタン／ＴＢＭＥ＝１０／０～６／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．９３ｇ（５０％）のｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－ブチル］カルバメート（中間体ＲＰ６）及び１．８２ｇ（４７％）のｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－ブチル］カルバメートを得た。
中間体ＲＰ７
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸
表題化合物を、（１Ｓ）－（＋）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ－５－エン－３－オン（１０ｇ）から開始するＷＯ２０１９／２３６６３１に記載される手順に従って調製して、７．７９ｇ（４ステップにわたって３７．１％）の（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸（中間体ＲＰ７）を得た。
中間体ＲＰ８
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（３Ｓ，５Ｒ）－５－ヒドロキシテトラヒドロピラン－３－イル］カルバメート
（ａ）１－アリルオキシブタ－３－エン－２－オール
２－ビニルオキシラン（２ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）及びプロパ－２－エン－１－オール（３．４ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中６０％、２ｇ、５０ｍｍｏｌ）を慎重に少量ずつ添加した。０℃で３０分間撹拌した後、混合物を５０℃で一晩撹拌した。混合物を０℃に冷却し、１Ｎ ＨＣｌ溶液（１００ｍＬ）を添加するにより反応をクエンチし、１時間撹拌し、温度を室温にした。混合物をジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、１０％ｗ／ｗのＬｉＣｌ溶液（１００ｍＬ）及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した（浴温度３５℃、６００ｍｂａｒ）。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ペンタン／ジエチルエーテル＝９５／５～１／１ｖ／ｖ％）により精製して、無色の油として１．３８ｇの表題化合物を得た（収率４３．０％）。
（ｂ）３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－オール
１－アリルオキシブタ－３－エン－２－オール（１．３８ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に、グラブス触媒第１世代（１７８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩で撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した（浴温度３５℃、６００ｍｂａｒ）。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ペンタン／ジエチルエーテル＝９５／５～１／１ｖ／ｖ％）により精製して、無色の油として５６６ｍｇの表題化合物を得た（収率５２．０％）。
（ｃ）２－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル）イソインドリン－１，３－ジオン
３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－オール（３８０ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ）、フタルイミド（３７３ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（７９８ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルアゾジカルボキシレート（６９８ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、その後、室温に戻し、３時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させて、黄色の油を得た。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル＝１０／０～１／９ｖ／ｖ％）により精製して、４５６ｍｇの表題化合物を得た（収率７９％）。
（ｄ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（３Ｓ，５Ｒ）－５－ヒドロキシテトラヒドロピラン－３－イル］カルバメート（中間体ＲＰ８）
この化合物を、２－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル）イソインドリン－１，３－ジオンを使用して、中間体ＲＰ４のステップｂ～ｈに記載されるのと同様の様式で調製して、２２０ｍｇの表題化合物を得た（約９０％ｅｅ）。
中間体ＢＰ１
４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）
（ａ）４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾイルクロリド
４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸（２４．８ｇ、１００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３００ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、触媒量のＤＭＦを添加した。塩化オキサリル（１２．９ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。０℃で６０分間撹拌した後、反応混合物を室温まで加温させ、混合物を一晩撹拌した。反応混合物を濃縮して、２６．３３ｇの粗４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾイルクロリドを得た（収率９９％）。
（ｂ）４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）
その後、４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾイルクロリド（２６．３３ｇ、１００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３００ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、４－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－アミン（１９．４５ｇ、１２０ｍｍｏｌ）及び４－ＤＭＡＰ（１４．６６ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を窒素雰囲気下０℃で撹拌し、室温まで一晩加温した。反応混合物を真空中で濃縮した。次いで、粗油性固体をジクロロメタン（３００ｍＬ）中に溶解し、５％クエン酸（３×、３００ｍＬ）、５％ ＮａＨＣＯ３（２×３００ｍＬ）、及びブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を還流ヘプタン（３００ｍＬ）中で１～２時間粉砕した。混合物を濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣を、６Ｎ ＮａＯＨ（１４０ｍＬ）及びＴＨＦ（１４０ｍＬ）中で室温で４時間撹拌した。次いで、２５０ｍＬのＥｔＯＡｃを添加し、層を分離した。有機層を、水、５％クエン酸、及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮して、灰白色の固体として２４．４ｇの４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）（収率６２％）を得た。
中間体ＢＰ２
３－フルオロ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ２）
この化合物を、４－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－アミン及び３－フルオロ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５．０１ｇ、６９，７％）を得た。
中間体ＢＰ３
２－メトキシ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ３）
（ａ）４－ブロモ－２－メトキシベンゾイルクロリド
この化合物を、４－ブロモ－２－メトキシ安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１のステップａに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５．７５ｇ、定量的に粗製）を得た。
（ｂ）４－ブロモ－２－メトキシ－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド
この化合物を、４－ブロモ－２－メトキシベンゾイルクロリド及び４－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－アミンから開始して、中間体ＢＰ１のステップｂに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（６．６ｇ、８１％）を得た。
（ｃ）２－メトキシ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ３）
４－ブロモ－２－メトキシ－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（６．１５ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）のジオキサン（１００ｍＬ）溶液に、ビス（ピナコラート）ジボロン（５．４ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）及び酢酸カリウム（３．２２ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を窒素で脱気した。その後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２錯体（６７０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で８時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、水を添加した後、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及び酢酸エチル／ヘプタン＝１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、６．１３ｇの２－メトキシ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ３）（収率８８％）を得た。
中間体ＢＰ４
［４－（２－ピリジルカルバモイル）フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ４）
４－カルボキシフェニルボロン酸（１５．０ｇ、９０．４ｍｍｏｌ）をトルエン（１８０ｍＬ）中に懸濁させ、ＤＭＦ（２７７μＬ、３．６１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５０℃に加熱し、この時点で塩化チオニル（１９．６３ｍＬ、２７１ｍｍｏｌ）を緩徐に添加した（＜５分）。反応混合物を６０℃に加熱し、８時間撹拌した。室温まで冷却した後、白色の懸濁液が発生した。次いで、混合物を真空下で濃縮して、溶媒を除去した。トルエンを添加し、混合物を濃縮して、過剰な塩化チオニルを除去した。ピリジン（７５ｍＬ）を添加し、スラリーを５℃に冷却した。２－アミノピリジン（１７．０ｇ、１８０．８ｍｍｏｌ）のピリジン（３０ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を６５℃～７０℃に緩徐に加熱し、８時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、溶媒を除去した。残渣を７０℃に加熱し、水（１０ｍＬ）を添加した。１．５時間後、トルエン（２０ｍＬ）、続いて、水（８０ｍＬ）を添加した。反応混合物を２０℃に冷却し、室温で７２時間撹拌した。形成された懸濁液を濾過し、水（５０ｍＬ）で洗浄した。固体を水（５０ｍＬ）中に再懸濁し、撹拌した。固体を濾過し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン中で４０℃で乾燥させて、白色固体として１２．７ｇの［４－（２－ピリジルカルバモイル）フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ４）を得た（収率５８％）。
中間体ＢＰ５
［４－［［（５－フルオロ－２－メトキシ－ベンゾイル）アミノ］メチル］フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ５）
窒素雰囲気下で、４－アミノメチルフェニルボロン酸塩酸塩（４．４１ｇ、２３．５ｍｍｏｌ）及び５－フルオロ－２－メトキシ安息香酸（４ｇ、２３．５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の懸濁液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１９．４ｍＬ、１１８ｍｍｏｌ）及び１－プロパンホスホン酸環状無水物（ＥｔＯＡｃ中５０重量％、２３ｍＬ、３５．３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を、還流下で７０℃で一晩加熱した。混合物を水及びジクロロメタンで希釈し、次いで分配した。水層をＤＣＭ（２×）で抽出した。合わせた有機抽出物をＰＥフィルターで濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びジクロロメタン／メタノール＝９９／１～９５／５ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、５．０７ｇの［４－［［（５－フルオロ－２－メトキシ－ベンゾイル）アミノ］メチル］フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ５）を得た（収率７１％）。
中間体ＢＰ６
［４－［（４－シアノ－２－ピリジル）カルバモイル］フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ６）
この化合物を、２－アミノピリジン－４－カルボニトリル及び４－カルボキシフェニルボロン酸から開始して、中間体ＢＰ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４．８ｇ、３９％）を得た。
中間体ＢＰ７
Ｎ－（４－フルオロ－２－ピリジル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ７）
この化合物を、４－フルオロピリジン－２－アミン及び４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３．４８ｇ、３３％）を得た。
中間体ＢＰ８
Ｎ－［４－（ジフルオロメチル）－２－ピリジル］－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ８）
この化合物を、４－（ジフルオロメチル）ピリジン－２－アミン及び４－ブロモ安息香酸から開始して、中間体ＢＰ３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４５ｍｇ、５９％）を得た。
中間体ＢＰ９
Ｎ－（４－メチル－２－ピリジル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ９）
この化合物を、２－アミノ－４－メチルピリジン及び４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（８２２ｍｇ、４９％）を得た。
中間体ＢＰ１０
Ｎ－［４－（ジフルオロメトキシ）－２－ピリジル］－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ１０）
この化合物を、４－（ジフルオロメトキシ）ピリジン－２－アミン及び４－ブロモ安息香酸から開始して、中間体ＢＰ３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１４４ｍｇ、１００％）を得た。
中間体ＢＰ１１
Ｎ－（４－シクロプロピル－２－ピリジル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ１１）
この化合物を、４－シクロプロピルピリジン－２－アミン及び４－ブロモ安息香酸から開始して、中間体ＢＰ３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（６９ｍｇ、１００％）を得た。
中間体ＢＰ１２
Ｎ－（４－メトキシ－２－ピリジル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ１２）
この化合物を、２－アミノ－４－メトキシピリジン及び４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（９００ｍｇ、５１％）を得た。
中間体ＢＰ１３
Ｎ－［１－メチル－５－（トリフルオロメチル）ピラゾール－３－イル］－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンズアミド（中間体ＢＰ１３）
この化合物を、１－メチル－５－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン及び４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）安息香酸から開始して、中間体ＢＰ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．９ｇ、８０％）を得た。中間体Ｌ
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（Ｅ）－６－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘキサ－５－エニル］カルバメート（中間体Ｌ１）
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ヘキサ－５－イニルカルバメート
６－ヘプチン酸（０．８００ｍＬ、６．３２ｍｍｏｌ）、ジフェニルホスホリルアジド（１．６５ｍＬ、７．６６ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（１．７５ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ－ＢｕＯＨ（６．３ｍＬ）溶液を、還流で４８時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水相をＥｔ２Ｏ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、暗黄色の油を得た。油をＳｉＯ２でのクロマトグラフィー（ヘキサン中１５％ＥｔＯＡｃ）により精製して、透明な無色の油としてｔｅｒｔ－ブチルＮ－ヘキサ－５－イニルカルバメート（０．５４ｇ、４３．３％）を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（Ｅ）－６－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘキサ－５－エニル］カルバメート（中間体Ｌ１）
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ヘキサ－５－イニルカルバメート（０．５４ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）、ＺｒＣｐ２（Ｈ）Ｃｌ（２１１ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（３８５μＬ、２．７６ｍｍｏｌ）、及びピナコールボラン（５９６μＬ、４．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．７５ｍＬ）溶液を、還流で３時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、メタノール（３．１５ｍＬ）を滴下することによってクエンチした。有機溶媒を減圧下で蒸発させて濁った白色の油を得て、これをジエチルエーテル（５ｍＬ）に取り込み、ホウ素ドープＳｉＯ２の薄いパッドを通して濾過した。ジエチルエーテル（２５ｍＬ）で「すすいだ」後、濾液を減圧下で蒸発させて、０．７９ｇ（８８．７％）の透明な無色の油を得た。１Ｈ－ＮＭＲは、約２５％の還元アセチレンの存在を示し、粗生成物を、溶出剤としてヘキサン／酢酸エチル中のホウ素ドープシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー＝９５／５～８／２ｖ／ｖ％によって精製した。表題化合物を含有する画分をプールし、濃縮して、４８１ｍｇの表題化合物を得た（収率５４．０％）。
中間体Ｌ２
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（Ｅ）－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エニル］カルバメート（中間体Ｌ２）
この化合物を、７－ヘプチン酸から開始して、中間体Ｌ１に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（７４２．６ｍｇ、２８．９％）を得た。
中間体Ｌ３
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］エチル］－カルバメート（中間体Ｌ３）
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］エチル］カルバメート
続いて、プロパルギルｐ－トルエンスルホネート（１．０５ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２５ｍＬ）溶液に、Ｎ－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－２－メチルアミノ－エチルアミン塩酸塩（４．７５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．３１ｇ、９．４９ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４時間還流した。水及び５％重炭酸ナトリウム溶液を混合物に添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をＳｉＯ２（酢酸エチル）でのクロマトグラフィーにより精製して、透明な黄色の油としてｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］エチル］カルバメート（０．８８ｇ、８７．３％）を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］エチル］－カルバメート（中間体Ｌ３）
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］エチル］カルバメート（０．８８ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、ＺｒＣｐ２（Ｈ）Ｃｌ（３２１ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（５８４μＬ、４．１９ｍｍｏｌ）、及びピナコールボラン（９０２μＬ、４．１９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液を還流で３時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、メタノール（５．３ｍＬ）を滴下することによってクエンチした。有機溶媒を減圧下で蒸発させて濁った白色の油を得て、これをジエチルエーテル（５ｍＬ）に取り込み、ホウ素ドープＳｉＯ２の薄いパッドを通して濾過した。ジエチルエーテル（２５ｍＬ）で「すすいだ」後、濾液を減圧下で濃縮して、透明な黄色の油を得た。粗生成物を、溶出剤として酢酸エチル中のホウ素ドープシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する画分をプールし、濃縮して、０．８８ｇの表題化合物を得た。（収率：６２．４％）
中間体Ｌ４
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［２－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］－エチル］カルバメート（中間体Ｌ４）
この化合物を、Ｎ－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－２－メチルアミノ－エチルアミン塩酸塩及び３－ブチニルｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．０７ｇ、５２．６％）を得た。
中間体Ｌ５
メチル２－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ５）
（ａ）メチル２－ブタ－３－イノキシアセテート
ＮａＨ（鉱油中６０％分散液、４２８ｍｇ、１０．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）中の冷（０℃）懸濁液に、ＴＨＦ（１ｍＬ）中のブタ－３－イン－１－オール（６２４ｍｇ、８．９２ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分間撹拌した後、混合物を０℃まで冷却し、メチル２－ブロモアセテート（１．３６ｇ、８．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を一晩撹拌し、温度を室温にした。ジエチルエーテル（２５ｍＬ）を混合物に添加し、水（２５ｍＬ）で洗浄した。水層をジエチルエーテル（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２でのクロマトグラフィー（ペンタン／ジエチルエーテル＝１０／０～１／１ｖ／ｖ％）により精製して、透明な無色の油としてメチル２－ブタ－３－イノキシアセテート（６２０ｍｇ、４８％）を得た。
（ｂ）メチル２－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ５）
この化合物を、メチル２－ブタ－３－イノキシアセテートから開始して、中間体Ｌ１のステップｂに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４８０ｍｇ、４２％）を得た。
中間体Ｌ６
メチル（Ｅ）－６－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘキサ－５－エノエート（中間体Ｌ６）
この化合物を、メチル５－ヘキシノエートから開始して、中間体Ｌ１のステップｂに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５５８ｍｇ、４４％）を得た。
中間体Ｌ７
メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ７）
（ａ）メチル２－（プロパ－２－イニルアミノ）アセテート
プロパルギルアミン（２．０ｍＬ、３１．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４．８ｍＬ、３４．４ｍｍｏｌ）の溶液に、メチルブロモアセテート（３．２５ｍＬ、３４．４ｍｍｏｌ）を緩徐に添加した。反応混合物を５０℃で１２時間撹拌した。真空中での混合物の濃縮後に得られた粗生成物を、ＳｉＯ２（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９５／５ｖ／ｖ％）でのクロマトグラフィーによって精製して、オレンジ色の油としてメチル２－（プロパ－２－イニルアミノ）アセテート（２．６３ｇ、６７％）を得た。
（ｂ）メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（プロパ－２－イニル）アミノ］アセテート
メチル２－（プロパ－２イニルアミノ）アセテート（１．５０ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）及びＤｉＰＥＡ（３．９０ｍＬ、２３．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（２．３２ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。混合物を１Ｎ ＫＨＳＯ４（２×６０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、表題化合物（２．４２ｇ、８６％）を得た。
（ｃ）メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ７）
この化合物を、メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（プロパ－２－イニル）アミノ］アセテートから開始して、中間体Ｌ１のステップｂに記載されるのと同様の様式で調製 して、表題化合物（８３１ｍｇ、５３％）を得た。
中間体Ｌ８
メチル２－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ８）
この化合物を、Ｎ－メチル－Ｎ－プロパ－２イニル－アミン及びメチルブロモアセテートから開始して、中間体Ｌ７に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．２２ｇ、６４％）を得た。
中間体Ｌ９
メチル４－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ９）
この化合物を、Ｎ－メチル－Ｎ－プロパ－２イニル－アミン及びメチル４－ブロモブチレートから開始して、中間体Ｌ７に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３４４ｍｇ、１６％）を得た。
中間体Ｌ１０
メチル（Ｅ，６Ｓ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１０）
（ａ）メチル６－オキソ－８－トリメチルシリル－オクタ－７－イノエート
ビス（トリメチルシリル）アセチレン（１２．８ｇ、９６ｍｍｏｌ）及びメチル６－クロロ－６－オキソ－ヘキサノエート（８０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液を、塩化アルミニウム（１２．８ｇ、９６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中の懸濁液に０℃で滴下して添加し、２時間撹拌し、温度を室温にした。反応混合物を氷及び飽和クエン酸水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、ジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。褐色の残渣を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９９：１～９／１ｖ／ｖ％）により精製して、黄色がかった油として表題化合物（４．８６ｇ、２５．３％）を得た。粗画分をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９９：１～９５／５ｖ／ｖ％）により再び精製して、黄色がかった油として表題化合物を得た（５．３７ｇ、２７．９％）。
（ｂ）メチル（６Ｓ）－６－ヒドロキシ－８－トリメチルシリル－オクタ－７－イノエート
（１Ｓ，２Ｓ）－（＋）－Ｎ－（４－トルエンスルホニル）－１，２－ジフェニルエチレンジアミン（２９５ｍｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）、ジクロロ（ｐ－シメン）ルテニウム（ＩＩ）二量体（２４８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、及び水酸化カリウム（３６３ｍｇ、６．４７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中の混合物を、室温で１０分間撹拌した。溶液を水（１０ｍＬ）で処理し、色をオレンジ色から深紫色に変化させた。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をジクロロメタン（２ｍＬ）中に溶解し、室温でメチル６－オキソ－８－トリメチルシリル－オクタ－７－イノエート（４．８６ｇ、２０．２２ｍｍｏｌ）の脱気イソプロパノール（５０ｍＬ）溶液に添加した。一晩撹拌した後、溶液に同量の予め処理したＲｕ－触媒を再充填し、室温で２時間撹拌し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲル（ヘキサン／酢酸エチル＝９８／２～９／１ｖ／ｖ％）で濾過して、黄色／橙色の油として表題化合物（４．２７ｇ、８７．１％）を得た。
（ｃ）メチル（６Ｓ）－６－ヒドロキシオクタ－７－イノエート
メチル（６Ｓ）－６－ヒドロキシ－８－トリメチルシリル－オクタ－７－イノエート（４．２７ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）中に溶解し、室温でフッ化カリウム（２．０５ｇ、３５．２ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）で処理した。３０分後、１Ｍ塩酸（５０ｍＬ）を添加し、生成物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６／４ｖ／ｖ％）によって精製し、黄色がかった油としてメチル（６Ｓ）－６－ヒドロキシオクタ－７－イノエート（２．４ｇ、８０．０％）を得た。
（ｄ）メチル（６Ｓ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシオクタ－７－イノエート
窒素雰囲気下、メチル（６Ｓ）－６－ヒドロキシオクタ－７－イノエート（２．４ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）溶液に、０℃でｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（２．３４ｇ、１５．５１ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（１．９２ｇ、２８．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、水を添加した。水層をＰＥフィルター上で分離し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９９／１～９／１ｖ／ｖ％）によって精製し、無色の油としてメチル（６Ｓ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシオクタ－７－イノエート（３．７９ｇ、２ステップにわたって７５．６％）を得た。
（ｅ）メチル（Ｅ，６Ｓ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１０）
磁気撹拌棒を備えたオーブン乾燥１０ｍＬのシュレンク管に、不活性窒素雰囲気下、シュワルツ試薬（９０．６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、メチル（６Ｓ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシオクタ－７－イノエート（１ｇ、３．５１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（４９μＬ、０．３５ｍｍｏｌ）、及びピナコールボラン（５５２μＬ、３．６９ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、管を密封し、混合物を６０℃で２４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、シリカゲルのパッドに通し、減圧下で室温で濃縮した。粗混合物を、ＳｉＯ２及びヘキサン／酢酸エチル＝９９／１～９／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、３１１．６ｍｇの表題化合物を得た（収率２１．５％）。
中間体Ｌ１１
メチル（Ｅ，６Ｒ）－６－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１１）
この化合物を、メチル６－オキソ－８－トリメチルシリル－オクタ－７－イノエート及び（１Ｒ，２Ｒ）－（＋）－Ｎ－（４－トルエンスルホニル）－１，２－ジフェニルエチレンジアミンから開始し、中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２９５ｍｇ、２０．４％）を得た。
中間体Ｌ１２
メチル（Ｅ，５Ｓ）－５－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エノエート（中間体Ｌ１２）
この化合物を、メチル５－オキソ－７－トリメチルシリル－ヘプタ－６－イノエート及び（１Ｓ，２Ｓ）－（＋）－Ｎ－（４－トルエンスルホニル）－１，２－ジフェニルエチレンジアミンから開始し、中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３６７．６ｍｇ、２０．１％）を得た。
中間体Ｌ１３
メチル（Ｅ，５Ｒ）－５－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エノエート（中間体Ｌ１３）
この化合物を、メチル５－オキソ－７－トリメチルシリル－ヘプタ－６－イノエート及び（１Ｒ，２Ｒ）－（＋）－Ｎ－（４－トルエンスルホニル）－１，２－ジフェニルエチレンジアミンから開始し、中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４００．９ｍｇ、２１．８％）を得た。
中間体Ｌ１４
メチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］－ブタノエート（中間体Ｌ１４）
（ａ）２－ニトロ－Ｎ－プロパ－２－イニル－ベンゼンスルホンアミド
プロパルギルアミン（３．２ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１７．５ｍＬ、１２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に、２－ニトロフェニルスルホニルクロリド（１０．５ｇ、４７．２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（１００ｍＬ）を添加した後、混合物を、１Ｎ ＨＣｌ溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル／ヘプタンで粉砕して、２－ニトロ－Ｎ－プロパ－２－イニル－ベンゼンスルホンアミド（９．５７ｇ、７９％）を得た。
（ｂ）メチル４－［（２－ニトロフェニル）スルホニル－プロパ－２－イニル－アミノ］ブタノエート
４－ニトロ－Ｎ－プロパ－２－イニル－ベンゼンスルホンアミド（１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１．１５ｇ、８．３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）溶液に、ｔ－ブチル－３－ブロモプロピオネート（０．９ｇ、５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４０℃で４時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗混合物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．５ｇの表題化合物を得た（収率：８５％）。
（ｃ）メチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（プロパ－２－イニル）アミノ］ブタノエート
メチル４－［（２－ニトロフェニル）スルホニル－プロパ－２－イニル－アミノ］ブタノエート（０．９５０ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（１．８２ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（１５ｍＬ）溶液に、２－メルカプトエタノール（２３５μＬ、３．３５ｍｍｏｌ）を添加した。これを４０℃で１日間加熱した。その後、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルビカルボネート（０．２４５ｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加した後、混合物を、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗混合物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、０．７３ｇの表題化合物を得た（収率：７２％）。
（ｄ）メチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］－アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ１４）
この化合物を、メチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（プロパ－２－イニル）アミノ］ブタノエートから開始して、中間体Ｌ１のステップｂに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３０４ｍｇ、２８％）を得た。
中間体Ｌ１５
メチル（Ｅ）－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１５）
（ａ）メチルオクタ－７－イノエート
オクタ－７－イン酸（１．８２ｇ、１３ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍｌ）溶液に、濃－Ｈ２ＳＯ４（４滴）を添加した。反応混合物を７０℃で５時間撹拌した。混合物を冷却した後、酢酸エチル（１５０ｍＬ）を添加し、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１．８６ｇのメチルオクタ－７－イノエート（収率９３％）を得た。
（ｂ）メチル２－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ１５）
この化合物を、メチルオクタ－７－イノエートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（８８１ｍｇ、４７％）を得た。
中間体Ｌ１６
メチル（Ｅ）－９－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ノナ－８－エノエート（中間体Ｌ１６）
この化合物を、ノナ－８－イン酸から開始して、中間体Ｌ１５に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（７８５ｍｇ、４５％）を得た。
中間体Ｌ１７
エチル３－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］プロパノエート（中間体Ｌ１７）
（ａ）エチル３－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］プロパノエート
Ｎ－メチルプロパルギルアミン（１．０ｇ、１８．１５ｍｍｏｌ）をアクリル酸エチル（１．２１ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）に添加し、続いて酸性アルミナ（２４．２ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を密封管中、７５℃で３時間撹拌した。混合物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１０／０～３／７ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって直接精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、２．４１ｇの表題化合物を得た（収率：１０６％）。
（ｂ）エチル３－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］プロパノエート（中間体Ｌ１７）
この化合物を、エチル３－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］プロパノエートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１１２ｍｇ、２４％）を得た。
中間体Ｌ１８
メチル２－［（Ｅ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ペンタ－４－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ１８）
（ａ）メチル２－ペンタ－４－イノキシアセテート
水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散液、４２８ｍｇ、１０．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７ｍＬ）中に懸濁し、０℃まで冷却した。次に、４－ペンチン－１－オール（７５０ｍｇ、８．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を室温にし、３０分間撹拌した。得られた懸濁液を再び０℃に冷却し、ＴＨＦ（１ｍＬ）中のメチル２－ブロモアセテート（１．３６ｇ、８．９２ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温にし、一晩撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル（２５ｍＬ）で希釈し、続いて飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）を添加した。水層をジエチルエーテル（１０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して（最初の４６℃、７５０ｍｂａｒ、続いて、室温、７０ｍｂａｒで１５分間）、橙色／茶色の液体を得た。混合物を、ＳｉＯ２及びペンタン／ジエチルエーテル＝９５／５～１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって直接精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、４８０ｍｇの表題化合物を得た（収率３４％）。
（ｂ）メチル２－［（Ｅ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ペンタ－４－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ１８）
この化合物を、メチル２－ペンタ－４－イノキシアセテートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４３０ｍｇ、４９％）を得た。
中間体Ｌ１９
エチル５－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ペンタノエート（中間体Ｌ１９）
この化合物を、Ｎ－メチルプロパ－２－イン－１－アミン及びエチル５－ブロモペンタノエートから開始して、中間体Ｌ９に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５５０ｍｇ、３０％）を得た。
中間体Ｌ２０
エチル３－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］－プロパノエート（中間体Ｌ２０）
この化合物を、プロパルギルアミン及びエチルアクリレートから開始して、中間体Ｌ１７のステップａ及び中間体７のステップｂ及びｃに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５９４ｍｇ、１９％）を得た。
中間体Ｌ２１
エチル５－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］－ペンタノエート（中間体Ｌ２１）
この化合物を、プロパルギルアミン及びエチル５－ブロモペンタノエートから開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５３７ｍｇ、２５％）を得た。
中間体Ｌ２２
メチル（Ｅ）－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エノエート（中間体Ｌ２２）
この化合物を、６－ヘプチン酸から開始して中間体Ｌ１５に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２．１５ｇ、２５％）を得た。
中間体Ｌ２３
メチル３－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］プロパノエート（中間体Ｌ２３）
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエート
プロパルギルアルコール（１．３６ｍＬ、２３．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、少量の塊のナトリウム（約２０．０８ｍｇ、０．８７４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、ナトリウムが完全に可溶化するまで（３０～４５分）６０℃デ加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ＴＨＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルアクリレート（２．２９ｍＬ、１５．６ｍｍｏｌ）を１０分間にわたって滴下した。添加完了後、反応混合物を室温で３時間撹拌した。水（２５ｍＬ）を反応混合物に添加し、二相系を室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水相を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×２０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、無色の油として２．２ｇ（収率７６％）のｔｅｒｔ－ブチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエートを得た。
（ｂ）メチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエート
ｔｅｒｔ－ブチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエート（２．２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（８ｍＬ、１１９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濃縮し、微量のトリフルオロ酢酸をトルエン及びＤＣＭと共蒸発させた。残渣を、ＳｉＯ２及びジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９／１ｖ／ｖ％を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５ｍＬ）中に溶解し、濃 Ｈ２ＳＯ４（４滴）を添加した。反応混合物を７０℃で一晩撹拌した。混合物を冷却した後、酢酸エチル（１５０ｍＬ）を添加し、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１．３４ｇのメチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエート（収率：９１％）を得た。
（ｃ）メチル３－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］プロパノエート（中間体Ｌ２３）
この化合物を、メチル３－プロパ－２－イノキシプロパノエートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（９２０ｍｇ、３７％）を得た。
中間体Ｌ２４
メチル３－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］プロパノエート（中間体Ｌ２４）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及びｔｅｒｔ－ブチルアクリレートから開始して、中間体Ｌ２３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．３２ｇ、３８％）を得た。
中間体Ｌ２５
エチル４－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］ブタノエート（中間体Ｌ２５）
（ａ）３－（２－ブロモエトキシ）プロパ－１－イン
トリフェニルホスフィン（３．９３ｇ、１５ｍｍｏｌ）を、四臭化炭素（４．９７ｇ、１５ｍｍｏｌ）及び２－プロプ－２－イノキシエタノール（１．００ｇ、１０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３３ｍＬ）中の撹拌溶液に、室温で少量ずつ添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、ＳｉＯ２及びペンタン／ジエチルエーテル＝９５／５～８／２ｖ／ｖ％を使用したカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空（５００ｍｂａｒ）中で濃縮して、７３０ｍｇの表題化合物を得た（収率４６％）。
（ｂ）ジエチル２－（２－プロパ－２－イノキシエチル）プロパンジオエート
ＮａＨ（鉱油中６０％分散液、１２２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を、室温でマロン酸ジエチル（４１８μＬ、２．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２３ｍＬ）中の撹拌溶液に慎重に添加した。反応混合物を３０分間撹拌し、その後、３－（２－ブロモエトキシ）プロパ－１－イン（４５０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４．５ｍＬ）溶液を滴下し、続いてヨウ化ナトリウム（４０５ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を５４℃で２４時間撹拌した。混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（２５ｍＬ）を添加した。有機相を分離し、水層をジエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×３０ｍＬ）、ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、５００ｍｇの表題化合物を得、これを次のステップで直接使用した。
（ｃ）エチル４－プロパ－２－イノキシブタノエート
ジエチル２－（２－プロパ－２－イノキシエチル）プロパンジオエート（６３５ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．３ｍＬ）溶液に、水（９４μＬ、５．２４ｍｍｏｌ）及び塩化リチウム（３３１ｍｇ、７．８７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１７０℃で３時間撹拌した。水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）、及びジエチルエーテル（５０ｍＬ）を冷却した混合物に添加した。室温で３０分間撹拌した後、混合物をデカライト（登録商標）で濾過し、濾液の層を分離した。水層をジエチルエーテル（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（１００ｍＬ）、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空（５００ｍｂａｒ）中で濃縮した。混合物を濃縮し、残渣を、ＳｉＯ２及びペンタン／ジエチルエーテル＝９９／１ｖ／ｖ％を使用したカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空（３００ｍｂａｒ）中で濃縮して、１０３ｍｇの表題化合物を得た（収率：５０％の含有量を考慮に入れて４６％）。
（ｄ）エチル４－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］ブタノエート（中間体Ｌ２５）
この化合物を、エチル４－プロパ－２－イノキシブタノエートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５０ｍｇ、２８％）を得た。
中間体Ｌ２６
メチル（２Ｒ）－２－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］プロパノエート（中間体Ｌ２６）
この化合物を、プロパルギルブロミド及び（Ｒ）－（＋）－メチルラクテートから開始して、中間体Ｌ１８に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３８０ｍｇ、４４％）を得た。
中間体Ｌ２７
メチル２－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ２７）
この化合物を、３－ブチニルｐ－トルエンスルホネート及びサルコシンメチルエステル、ＨＣｌから開始して、中間体Ｌ３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３７２ｍｇ、３７％）を得た。
中間体Ｌ２８
メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ペンタ－４－エニル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ２８）
この化合物を、４－ペンチン－１－オール及びグリシンメチルエステル塩酸塩から開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．１８ｇ、８８％）を得た。
中間体Ｌ２９
メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ２９）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及びグリシンメチルエステル塩酸塩から開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（６１５ｍｇ、６５％）を得た。
中間体Ｌ３０
メチル３－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］プロパノエート（中間体Ｌ３０）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及びメチル３－アミノプロパノエート塩酸塩から開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５４４ｍｇ、４７％）を得た。
中間体Ｌ３１
メチル（２Ｓ）－１－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アゼチジン－２－カルボキシレート（中間体Ｌ３１）
この化合物を、メチル（２Ｓ）－アゼチジン－２－カルボキシレート塩酸塩及びブタ－３－イニル４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３４８ｍｇ、３６％）を得た。
中間体Ｌ３２
メチル３－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］－プロパノエート（中間体Ｌ３２）
この化合物を、メチル３－（メチルアミノ）プロパノエート及びブタ－３－イニル４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５７４ｍｇ、４０％）を得た。
中間体Ｌ３３
メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－２－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ３３）
この化合物を、Ｂｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ及びＴＭＳ－アセチレンのワインレブアミドから開始して、中間体７及び中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２４１ｍｇ、３５％）を得た。
中間体Ｌ３４
メチル（３Ｒ）－３－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］－ブタノエート（中間体Ｌ３４）
（ａ）メチル（３Ｒ）－３－［（２－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ブタノエート
（Ｒ）－３－アミノ－酪酸メチルエステル塩酸塩（３ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（８．５ｍＬ、６４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７５ｍＬ）溶液に、２－ニトロフェニルスルホニルクロリド（５．８ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（７５ｍＬ）を添加した後、混合物を０．１Ｎ ＨＣｌ溶液、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗混合物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９／１～４／６ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、メチル（３Ｒ）－３－［（２－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ブタノエートメチル（５．６ｇ、９５％）を得た。
（ｂ）メチル（３Ｒ）－３－［メチル－（２－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート
メチル（３Ｒ）－３－［（２－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ブタノエート（４．０９ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（３．５７ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４４ｍＬ）溶液に、ヨウ化メチル（０．８４ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で２日間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、４．１３ｇの表題化合物を得た（収率１０１％）。
（ｃ）メチル（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ブタノエート
メチル（３Ｒ）－３－［メチル－（２－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（１．６９ｇ、５．３４ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（３．４９ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍＬ）溶液に、２－メルカプトエタノール（１．１ｍＬ、１５．６６ｍｍｏｌ）を添加した。これを４０℃で一晩加熱した。反応混合物を濾過し、ｐＨ１に達するまで２Ｎ ＨＣｌ溶液で酸性化した。次いで、混合物をＳＣＸ－２カラム（２０ｇ）に装填した。カラムが無色になるまでカラムをアセトニトリルで洗浄し、続いてメタノールへの溶媒切り替え、次いで生成物を２Ｎ ＮＨ３／ＭｅＯＨで溶出して、メチル（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ブタノエート（０．５６９ｇ、８１％）を得た。
（ｄ）メチル（３Ｒ）－３－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］－ブタノエート（中間体Ｌ３４）
この化合物を、メチル（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ブタノエート及びブタ－３－イニル４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（９８０ｍｇ、５７％）を得た。
中間体Ｌ３５
メチル２－［メチル－［（Ｅ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ペンタ－４－エニル］アミノ］アセテート（中間体Ｌ３５）
この化合物を、サルコシンメチルエステル塩酸塩及びペンタ－４－イニルメタンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（７６０ｍｇ、３７％）を得た。
中間体Ｌ３６
メチル（２Ｒ）－１－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アゼチジン－２－カルボキシレート（中間体Ｌ３６）
この化合物を、メチル（２Ｒ）－アゼチジン－２－カルボキシレート塩酸塩及びブタ－３－イニル４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．１ｇ、９１％）を得た。
中間体Ｌ３７
メチル４－［メチル－［（Ｅ，１Ｓ）－１－メチル－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］－ブタノエート（中間体Ｌ３７）
この化合物を、メチル４－（メチルアミノ）ブタノエート塩酸塩及び［（１Ｒ）－１－メチルプロパ－２－イニル］４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（７８ｍｇ、２３％）を得た。
中間体Ｌ３８
メチル（３Ｒ）－３－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ３８）
この化合物を、メチル（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ブタノエート及びプロパギルｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２１５ｍｇ、２４％）を得た。
中間体Ｌ３９
メチル（３Ｒ）－３－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ３９）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及び（Ｒ）－３－アミノ－酪酸メチルエステル塩酸塩から開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（７５９ｍｇ、５５％）を得た。
中間体Ｌ４０
メチル２－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］アセテート（中間体Ｌ４０）
この化合物を、プロパルギルアルコール及びメチルブロモアセテートから開始して、中間体Ｌ１８に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３５９ｍｇ、４１％）を得た。
中間体Ｌ４１
メチル（２Ｓ）－１－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アゼチジン－２－カルボキシレート（中間体Ｌ４１）
この化合物を、メチル（２Ｓ）－アゼチジン－２－カルボキシレート塩酸塩及びプロパ－２－イニル４－メチルベンゼンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．８６ｇ、８０％）を得た。
中間体Ｌ４２
メチル２－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］スルファニルアセテート（中間体Ｌ４２）
（ａ）２－プロパ－２－イニルスルファニル酢酸
プロパルギルブロミドのトルエン溶液（１８．４ｍＬ、２１３ｍｍｏｌ）をメルカプト酢酸（１３．０８ｇ、１４２ｍｍｏｌ）のアンモニア水溶液（２４％、２５０ｍＬ）の冷（０℃）溶液に添加した。反応混合物を、０℃で４０分間撹拌した。溶液を濃縮し、濾過し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を添加した。溶液をジクロロメタンで洗浄した。水相を濃ＨＣｌで慎重に酸性化し、ジクロロメタンで抽出した。有機相をＰＥフィルター上で分離し、減圧下で濃縮して、１３．５３ｇの２－プロパ－２－イニルスルファニル酢酸をわずかに緑色の油として得て、緩徐に結晶化して灰白色の結晶を形成した（収率７３．２％）。
（ｂ）２－プロパ－２－イニルスルファニル酢酸
２－プロパ－２－イニルスルファニル酢酸（１３．５３ｇ、１０４ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍＬ）溶液に、１０滴の（濃）Ｈ２ＳＯ４を添加した。反応混合物を還流で３時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、酢酸エチルを添加した。有機層を、５％の ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１４．１１ｇの表題化合物をわずかに褐色の油として得た（収率９４．１％）。
（ｃ）メチル２－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］スルファニル酢酸メチル（中間体Ｌ４２）
この化合物を、２－プロパ－２－イニルスルファニル酢酸から開始して、中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４５５ｍｇ、２５％）を得た。
中間体Ｌ４３
メチル（Ｅ）－１０－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）デカ－９－エノエート（中間体Ｌ４３）
この化合物を、デカ－９－イン酸から開始して中間体Ｌ１５に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（８０１ｍｇ、３９％）を得た。
中間体Ｌ４４
メチル（Ｅ）－１１－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ウンデカ－１０－エノエート（中間体Ｌ４４）
この化合物を、ウンデカ－１０－イン酸から開始して、中間体Ｌ１５に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２７８ｍｇ、１４％）を得た。
中間体Ｌ４５
エチル３－［（Ｅ）－１－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］プロパノエート（中間体Ｌ４５）
この化合物を、４－ペンチン－２－オール及びｔｅｒｔブチルアクリレートから開始して、中間体Ｌ２３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（１．０８ｇ、８７％）を得た。
中間体Ｌ４６
メチル（Ｅ，７Ｓ）－７－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－９－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ノナ－８－エノエート（中間体Ｌ４６）
この化合物を、７－クロロ－７－オキソ－ヘプタノエート及び（１Ｓ，２Ｓ）－（＋）－Ｎ－（４－トルエンスルホニル）－１，２－ジフェニルエチレンジアミンから開始して、中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４７７ｍｇ、２２．２％）を得た。
中間体Ｌ４７
エチル（Ｅ）－６，６－ジジュウテリオ－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ４７）
（ａ）メチル６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサノエート
アジピン酸モノメチルエステル（９５８ｍｇ、５．９８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（９１７μＬ、６．５８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９．５ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、クロロギ酸エチル（６２９μＬ、６．５８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７．０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を１時間撹拌した。温度を室温にした。混合物を濾過し、残渣をＴＨＦ（５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を、ＮａＢＤ４（５００ｍｇ、１１．９ｍｍｏｌ）の水溶液（１４ｍＬ）に０℃で滴下した。反応混合物を１時間撹拌した。混合物を、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加してｐＨを３～４に調整し、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。水層を分離し、ジエチルエーテル（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を０．５Ｎ ＮａＯＨ（２×２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）、及びブライン（５．０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びペンタン／ジエチルエーテル＝４／１～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、メチル６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサノエート（２８０ｍｇ、３２％）を得た。
（ｂ）６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサン酸
メチル６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサノエート（２８０ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／水＝１／１ｖ／ｖ％（１８ｍＬ）中に溶解し、その後、水酸化リチウム（５０ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（を添加し）混合物のｐＨを、２Ｍ ＨＣｌ溶液を添加することによってｐＨ＜３に調整した。有機相を分離し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、２３０ｍｇの６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサン酸（収率９１％）を得た。
（ｃ）６－ブロモ－６，６－ジジュウテリオ－ヘキサン酸
トリフェニルホスフィン（５６３ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）中に溶解し、－７８℃まで冷却した。Ｎ－ブロモスクシンイミド（３８２ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を混合物に一度に添加し、－７８℃で３０分間撹拌し続けた。次に、ジクロロメタン（８ｍＬ）中に溶解した６，６－ジジュウテリオ－６－ヒドロキシ－ヘキサン酸（２３０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を－７８℃で４５分間撹拌し、室温にした。混合物を水で希釈し、室温で１５分間完全に撹拌した。層を分離し、水層をジクロロメタン（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、１０％ Ｎａ２Ｓ２Ｏ４水溶液（２０ｍＬ）、０．２Ｎ ＮａＯＨ溶液で洗浄した。２Ｎ ＨＣｌ水溶液をアルカリ水層に添加して、ｐＨ＜３に調整した。この水層をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層をＰＥフィルターで濾過し、減圧下で濃縮して、２３０ｍｇの表題化合物を得た（収率５４％）。
（ｄ）６，６－ジジュウテリオオクタ－７－イン酸
６－ブロモ－６，６－ジジュウテリオ－ヘキサン酸（４０５ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液を、アセチル化リチウムエチレンジアミン錯体（５６０ｍｇ、６．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の冷（０℃）懸濁液に滴下した。得られた混合物を室温にし、１．５時間撹拌した。混合物を、氷水（３５ｍＬ）及びブライン（２０ｍＬ）の混合物中に０℃で慎重に注いで、０℃で３０分間撹拌した。この温度で、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）、続いて酢酸エチル（２０ｍＬ）を添加し、室温で３０分間撹拌した後、層を分離した。水層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～１／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、６，６－ジジュウテリオオクタ－７－イノイン酸（２００ｍｇ、６９％）を得た。
（ｅ）エチル（Ｅ）－６，６－ジジュウテリオ－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ４７）
この化合物を、エチル６，６－ジジュウテリオオクタ－７－イノエートから開始して、中間体Ｌ１０に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３２０ｍｇ、８６％）を得た。
中間体Ｌ４８
［（Ｅ）－３，３－ジフルオロ－７－メトキシ－７－オキソ－ヘプタ－１－エニル］ボロン酸（中間体Ｌ４８）
この化合物を、Ｏｒｇ． Ｌｅｔｔ． （２０２０）２２， ２９９１－２９９４に記載の手順に従って調製し、表題化合物を得た。
中間体Ｌ４９
Ｏ１－ｔｅｒｔ－ブチルＯ２－メチル（２Ｒ）－４－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］ピペラジン－１，２－ジカルボキシレート（中間体Ｌ４９）
この化合物を、１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル（２Ｒ）－ピペラジン－１，２－ジカルボキシレート及びプロパルギルｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３００ｍｇ、７２％）を得た。
中間体Ｌ５０
メチル２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］－プロパノエート（中間体Ｌ５０）
この化合物を、Ｂｏｃ－Ｄ－Ａｌａ－ＯＭｅ及びプロパルギルブロミドから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５２０ｍｇ、４０％）を得た。
中間体Ｌ５１
メチル（３Ｒ）－１－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］ピロリジン－３－カルボキシレート（中間体Ｌ５１）
この化合物を、メチル（３Ｒ）－ピロリジン－３－カルボキシレート塩酸塩及びプロパルギル ｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（４１０ｍｇ、４０％）を得た。
中間体Ｌ５２
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（２Ｒ）－２－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリルオキシ］プロピル］カルバ－メート（中間体Ｌ５２）
この化合物を、Ｎ－Ｂｏｃ－（Ｒ）－１－アミノ－２－プロパノール及びプロパルギルブロミドから開始して、中間体Ｌ３のステップａ及び中間体１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（５７８ｍｇ、４１％）を得た。
中間体Ｌ５３
メチル（３Ｓ）－３－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ５３）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及び（Ｓ）－３－アミノ－酪酸メチルエステル塩酸塩から開始して、中間体Ｌ１４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（６００ｍｇ、５０％）を得た。
中間体Ｌ５４
メチル（３Ｓ）－３－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ５４）
この化合物を、（Ｓ）－３－アミノ－酪酸メチルエステル塩酸塩及びプロパギルｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（６３０ｍｇ、９５％）を得た。
中間体Ｌ５５
メチル（３Ｓ）－３－［メチル－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エニル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ５５）
この化合物を、（Ｓ）－３－アミノ酪酸メチルエステル塩酸塩及び３－ブチニル ｐ－トルエンスルホネートから開始して、中間体Ｌ３４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３５０ｍｇ、３５％）を得た。
中間体Ｌ５６
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（２Ｒ）－２－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］プロピル］カルバメート（中間体Ｌ５６）
この化合物を、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（２Ｒ）－２－［メチル（プロパ－２－イニル）アミノ］プロピル］カルバメートから開始して、中間体Ｌ１０のステップｅに記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（２７２ｍｇ、８７％）を得た。
中間体Ｌ５７
エチル３－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］ブタノエート（中間体Ｌ５７）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及びｔｅｒｔ－ブチルクロトネートから開始して、中間体Ｌ２３に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３８０ｍｇ、３４％）を得た。
中間体Ｌ５８
メチル（３Ｒ）－３－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ブタノエート（中間体Ｌ５８）
この化合物を、ブタ－３－イン－１－オール及び（Ｒ）－３－アミノ酪酸メチルエステル塩酸塩から開始して、中間体Ｌ３４に記載されるのと同様の様式で調製して、表題化合物（３８７ｍｇ、１６％）を得た。
方法Ａ
実施例１
（ａ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｄ）
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｃ）（１．７２ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１３ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、Ｎ－ヨードスクシンイミド（５４４ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、混合物を室温まで加温した。出発物質の約６％が依然として存在したままであった。追加のＮＩＳ（２９ｍｇ）を反応混合物に添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びジクロロメタン／メタノール／酢酸＝９９／１～９５／５ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．７５ｇの表題化合物を得た（収率：８６％）。
（ｂ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－［（Ｅ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサ－１－エニル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル－アミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロ－ヘキサンカルボン酸
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－［（Ｅ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサ－１－エニル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル－アミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ－［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロ－ヘキサンカルボン酸（１００ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（Ｅ）－６－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘキサ－５－エニル］カルバメート（中間体Ｌ１）（４９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（１２２ｍｇ、０．３７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ／ｗａｔｅｒ＝９／１ ｖ／ｖ％（１ｍＬ）中の混合物 を、３０℃で、窒素で５分間脱気した。ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３（４ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３０℃で窒素で５分間再び脱気した。反応混合物を、６５℃で一晩攪拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濾液を５％クエン酸溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９４／６ｖ／ｖ％）により精製して、３２８ｍｇの表題化合物を得た（収率８１．６％）。
（ｃ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－アミノ－７－［（Ｅ）－６－アミノヘキサ－１－エニル］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸塩酸塩
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－［（Ｅ）－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘプタ－１－エニル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）－メチルアミノ］－３－（３－キノリル）ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（３２４ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍＬ）中に溶解した。４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン溶液（３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒をデカントし、残渣をジクロロメタンで粉砕し、真空中で乾燥させて、定量的粗収率で３４０ｍｇの表題化合物を得た。
（ｄ）実施例１
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－アミノ－７－［（Ｅ）－６－アミノヘキサ－１－エニル］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸塩酸塩（１７０ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７．６ｍＬ）中に溶解し、Ｎ－エチルモルホリン（１１９μＬ、０．９４ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を、０．７ｒｐｍの速度でシリンジポンプを介して、ＨＡＴＵ（２１４ｍｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）及びＮ－エチルモルホリン（７２μＬ、０．５６４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１１．４ｍＬ）中の撹拌溶液に添加した。酢酸エチル（５０ｍＬ）を反応混合物に添加し、混合物を５％ ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９４／６ｖ／ｖ％）によって精製した。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（４１ｍｇ、３６％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．４３分；ｍ／ｚ ６０４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例１について記載される方法Ａに従って合成した。

方法Ｂ
実施例６
（ａ）２－トリメチルシリルエチルｌＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロ－メチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
ジフェニルホスホリルアジド（０．６９ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｃ）（４．９５ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．４４ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）のトルエン（５２ｍＬ）懸濁液に添加し、１００℃で３０分間撹拌した。室温まで冷却した後、２－（トリメチルシリル）エタノール（１．２２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１００℃で１０時間再び撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、混合物を室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水層をトルエン（２×１００ｍＬ、層の緩徐な沈殿）で抽出した。合わせた有機層を、水（１００ｍＬ）、１Ｎ ＮａＯＨ（２×１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、残渣を高真空に供して、薄茶色の泡状物として６．１０ｇの２－トリメチルシリルエチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメートを得た（収率＞９７％）。
（ｂ）２－トリメチルシリルエチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
２－トリメチルシリルエチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシ－フェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（６．１ｇ、７．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３５ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、Ｎ－ヨードスクシンイミド（１．９１ｇ、８．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２時間撹拌して、混合物を室温まで加温した。混合物を酢酸エチルで希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～６／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、５．２ｇの表題化合物を得た（収率：７４％）。
（ｃ）４－［１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－ピラゾロ－［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（骨格Ｅ）
２－トリメチルシリルエチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（５．４ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（５９ｍＬ）中に溶解して、明るい黄色の溶液を得た。フッ化テトラブチルアンモニウム、ＴＨＦ中１Ｍ溶液（６．５ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）を添加し、結果として生じた混合物を６０℃で１８時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液／酢酸エチル（４００ｍＬ）の攪拌した１／１混合物に滴下した。得られた二相系を室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を５％ ＮａＨＣＯ３溶液（３×２００ｍＬ）、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、４．８ｇの表題化合物を得た。（収率：定量的粗製）。
（ｄ）２－［（Ｅ）－４－［１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］ブタ－３－エノキシ］酢酸
４－［１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－ピラゾロ－［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（１００ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、メチル２－［（Ｅ）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ブタ－３－エノキシ］アセテート（中間体Ｌ５）（５３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、及びリン酸三塩基性カリウム（８３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）のジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（２ｍＬ）中の混合液を、３０℃で窒素で５分間脱気した。ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３（４．７ｍｇ、６．５μｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素で３０℃で５分間再び脱気した。反応混合物を、６５℃で一晩攪拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、凍結乾燥させて、１５０ｍｇの表題化合物を得た（収率：定量的粗製物）。
（ｅ）実施例６
２－［（Ｅ）－４－［１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］ブタ－３－エノキシ］酢酸（１５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）をＨＡＴＵ（１４８ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）及びＮ－エチルモルホリン（８３μＬ、０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１１．４ｍＬ）撹拌溶液に少量ずつに分けて添加し、反応混合物を室温で４時間撹拌した。酢酸エチル（５０ｍＬ）を反応混合物に添加し、混合物を５％ ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル＝１０／０～０／１０ｖ／ｖ％）によって精製して、３０ｍｇのＤＭＢ保護大環状分子実施例６を得た。生成物をＴＦＡ／ＴＩＳ／水９０／５／５ ｖ／ｖ％（１ｍＬ）中に溶解し、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）と共蒸発させた。残渣を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１ｖ／ｖ％（３ｍＬ）に溶解し、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液（４ｍＬ）を添加した（ｐＨ＞８）。層を分離し、水層をＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝９／１ｖ／ｖ％（２×３ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＰＥフィルターで濾過し、減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（７ｍｇ）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．１７分；ｍ／ｚ ６０６．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例６について記載される方法Ｂに従って合成した。









方法Ｃ
実施例４６
（ａ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
アジ化ジフェニルホスホリル（０．３９ｍＬ、１．４３ｍｍｏｌ）を（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｃ）（９６３ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２１９ｍＬ、１．５７ｍｍｏｌ）のトルエン（１５ｍＬ）懸濁液に添加し、１００℃で１時間撹拌した。室温まで冷却した後、ベンジルアルコール（０．７４ｍＬ、７．１５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で２時間再び撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、５％クエン酸溶液、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１～１／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、６５２ｍｇの表題化合物を得た（収率：５８％）。
（ｂ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－ブロモ－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロ－メチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
ベンジルＮ－［（１Ｒ）－３－［（１Ｒ）－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）－メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（９３２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３５ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、Ｎ－ブロモスクシンイミド（２×２０２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２時間撹拌して、混合物を室温まで加温した。混合物を酢酸エチルで希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～６／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、８５６ｍｇの表題化合物を得た（収率：８３％）。
（ｃ）４－［４－アミノ－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－７－ブロモ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド
ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－ブロモ－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（８５５ｍｇ １ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／Ｈ２Ｏ＝９／１ｖ／ｖ％（１０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を６０℃で５時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、トルエン（３×２５ｍＬ）と共蒸発させた。濃紫色の油をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解し、水（５０ｍＬ）を添加した。室温で１５分間撹拌した後、水層を分離した。水層を、２Ｎ ＮａＯＨ溶液を使用して塩基性化し、１５分間撹拌し、ＤＣＭ／ｓｅｃ－ＢｕＯＨ＝３／２ｖ／ｖ％（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＰＥフィルターで分離し、減圧下で濃縮して、４９０ｍｇの表題化合物を得た（収率８５％）。
（ｄ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－アミノ－７－ブロモ－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
４－［４－アミノ－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－７－ブロモ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（９７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の懸濁液に、続いて、Ｅｔ３Ｎ（４７μｌ、０．３４ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ２Ｏ（４１ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）を混合物に添加し、有機相を水及びブラインで洗浄した。ＤＣＭ層をＰＥフィルターによる濾過によって分離し、減圧下で濃縮して、１１０ｍｇ（９６％）の表題化合物を得た。
（ｅ）メチル（Ｅ）－８－［４－アミノ－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］－３－［４－［［４－（トリフルオロ－メチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－アミノ－７－ブロモ－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（７５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、メチル（Ｅ）－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１５）（４１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、及びリン酸三塩基性カリウム（７０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（１．３ｍＬ）中の混合物を、窒素を用いて３０℃で５分間脱気した。ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３（４ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素を用いて３０℃で５分間再び脱気した。反応混合物を、マイクロ波放射下で、１００℃で１時間撹拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濾液を５％クエン酸溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９／１ｖ／ｖ％）により精製して、７６ｍｇの表題化合物を得た（収率９２％）。
（ｆ）リチウム（Ｅ）－８－［４－アミノ－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエート
メチル（Ｅ）－８－［４－アミノ－１－［（１Ｒ ，３Ｒ ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－シクロヘキシル］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエート（７６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のジオキサン（５５７μＬ）溶液に４Ｎ ＨＣｌ／ジオキサン（５５７μＬ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）中に溶解した残留油を添加した。室温で１５分間撹拌した後、水層を分離した。水層を、２Ｎ ＮａＯＨ溶液を使用して塩基性化し、１５分間撹拌し、ＤＣＭ／ｓｅｃ－ＢｕＯＨ＝３／２ｖ／ｖ％（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＰＥフィルターで分離し、減圧下で濃縮した。粗生成物をジオキサン（１ｍＬ）中に溶解し、その後、水（１６２μＬ）及び０．５Ｎ ＬｉＯＨ溶液（１６２μＬ）を添加した。混合物を室温で４．５時間撹拌した。混合物を凍結乾燥して、５５ｍｇの表題化合物（収率：定量的粗製物）を得た。
（ｇ）実施例４６
リチウム（Ｅ）－８－［４－アミノ－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエート（５５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３．１ｍＬ）中に溶解し、Ｎ－エチルモルホリン（２０μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を、ＨＡＴＵ（８８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及びＮ－エチルモルホリン（２９．４μＬ、０．２３）のＤＭＦ（４．６ｍＬ）中の撹拌溶液に、バッチ式（５分毎に２０×１５５μＬ）で添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、添加が完了した。酢酸エチル（５０ｍＬ）を反応混合物に添加し、混合物を５％ ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９／１ｖ／ｖ％）によって精製した。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（２１ｍｇ、４４％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．０５分；ｍ／ｚ ６１８．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例４６に記載される方法Ｃに従って合成した。

方法Ｄ
実施例５０
（ａ）［（１Ｓ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］４－メチルベンゼンスルホネート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（中間体ＲＰ４）（１ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（７１２μＬ、５．１１ｍｍｏｌ）及び４－ＤＭＡＰ（５７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５分間撹拌した。ｐ－トルエンスルホニルクロリド（５．１５ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）を４時間かけて少量ずつに分けて添加し、反応混合物を室温で７日間撹拌した。混合物を５％クエン酸溶液で洗浄し、ＰＥフィルターで濾過し、減圧下で濃縮し、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル＝８／２ｖ／ｖ％）により精製して、１．３ｇの表題化合物を得た（収率７５．８％）。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
Ｎ －［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ －ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン（骨格Ａ）（１．６２ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（１．９３ｇ、５．９３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を７０℃まで加温し、［（１Ｓ，３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホネート（１．４６ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を８０℃で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、５％クエン酸、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝９８／２～９／１ｖ／ｖ％）により精製して、表題化合物（５１２ｍｇ、２１．４％）を得た。
（ｃ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［（５－フルオロ－２－メトキシ－ベンゾイル）アミノ］メチル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］カルバメート（５１２ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝２／１ｖ／ｖ％（６．３ｍＬ）中に溶解し、炭酸カリウム（５８３ｍｇ、４．２２ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、［４－［［（５－フルオロ－２－メトキシ－ベンゾイル）アミノ］メチル］－フェニル］ボロン酸（中間体ＢＰ５）（２８２ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、１２０℃で２０分間マイクロ波照射で撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１０／０～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、４８４ｍｇの表題化合物を得た（収率７８％）。
（ｄ）実施例５０
この化合物を、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［（５－フルオロ－２－メトキシ－ベンゾイル）アミノ］メチル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキシル］－カルバメート、及び最後に（Ｅ）－６－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘキサ－５－エノエート（中間体Ｌ６）を使用して、方法Ｃのステップｂ～ｇに記載されるの同様の様式で調製して、粗実施例５０を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（２１ｍｇ、４４％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．４３分；ｍ／ｚ ６０４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例５０に記載される方法Ｄに従って合成した。
方法Ｅ
実施例５４
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］－１－メチル－プロピル］カルバメート
Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン（骨格Ａ）（５ｇ、１２．１９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－プロピル］カルバメート（２．７７ｇ、１４．６３ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（３．８４ｇ、１４．６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２２ｍＬ）中の氷冷（４℃）懸濁液にジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２．８８ｍＬ、１４．６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を４℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで加温し、一晩撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、５．７３ｇのｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨードピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］－１－メチル－プロピル］カルバメート（収率８１％）を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］－１－メチル－プロピル］カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］－１－メチル－プロピル］カルバメート（８００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝３／１ｖ／ｖ％（２５ｍＬ）中に溶解し、炭酸カリウム（９５１ｍｇ、４．２２ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）（５９３ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（５６ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、７７６ｍｇの表題化合物を得た（収率７８％）。
（ｄ）実施例５４
この化合物を、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］－１－メチル－プロピル］－カルバメート、最後にメチル（Ｅ）－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エノエート（中間体Ｌ２２）を使用して、方法Ｃのステップｂ～ｇに記載されるの同様の様式で調製して、粗実施例５４を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（２３ｍｇ、３６％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．１１分；ｍ／ｚ ５７８．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例５４に記載される方法Ｅに従って合成した。





方法Ｆ
実施例７７
（ａ）ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
Ｎ－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル］－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－アミン（骨格Ａ）（１ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ）－３－ヒドロキシ－ピペリジン－１－カルボキシレート（６３８ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（１ｇ、３．８３）のトルエン（１９ｍＬ）中の氷冷（４℃）懸濁液に、ジ－２－メトキシエチルアゾジカルボキシレート（７９２ｍｇ、３．８３ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を４℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで加温し、一晩撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～４５／５５ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、４８０ｍｇのｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（収率３３％）を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（８３０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（１５ｍＬ）中に溶解し、炭酸カリウム（５８０ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）（６０３ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（５７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、１．１ｇの表題化合物（定量的）を得た。
（ｃ）ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（１．１ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液にＮ－ヨードスクシンイミド（３４６ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２時間撹拌した。混合物を室温まで加温した。混合物を酢酸エチルで希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～１／１ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．０６ｇの表題化合物を得た（収率：８８％）。
（ｄ）実施例７７
この化合物を、ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート、及び最後にメチル（Ｅ）－７－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ヘプタ－６－エノエート（中間体Ｌ２２）を使用して、方法Ｃのステップｃ～ｇに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例７７を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（１４ｍｇ、１８．３％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．７９分；ｍ／ｚ ５９０．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例７７に記載される方法Ｆに従って合成した。

方法Ｇ
実施例８４
（ａ）（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－アリル－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－７－ヨード－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（骨格Ｄ）（７３６ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（５４１ｍｇ、３．２２ｍｍｏｌ）、及びフッ化セシウム（５５９ｍｇ、３．６８ｍｍｏｌ）のジオキサン（９ｍＬ）中の混合物を窒素で脱気した。ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３（２９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を６５℃で２時間撹拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濾液を５％クエン酸溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣をジエチルエーテルで粉砕して、９４８ｍｇの表題化合物を得た（収率１０１％）。
（ｂ）４－［７－アリル－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ペンタ－４－エニルカルバモイル）シクロヘキシル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド
（１Ｒ，３Ｒ）－３－［７－アリル－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－３－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル］シクロヘキサンカルボン酸（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及びペンタ－４－エン－１－アミン塩酸塩（２０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１．４ｍｌ）中に懸濁させた。次いで、Ｎ－エチルモルホリン（５４μｌ、０．１６ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（５９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を５％ ＮａＨＣＯ３溶液／ブラインで洗浄した。有機層を分離し、５％クエン酸水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１０／０～１／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、３０ｍｇの表題化合物を得た（収率：２７％）。
（ｃ）ＤＭＢ保護トランス／シス大環状分子の混合物
４－［７－アリル－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ペンタ－４－エニルカルバモイル）－シクロヘキシル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（３０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）の溶液をジクロロメタン（１ｍＬ）中に溶解し、ホベイダ－グラブス第２世代触媒（２．４ｍｇ、３．８μｍｏｌ）のジクロロメタン（２．８ｍＬ）溶液に滴下した。得られた溶液を、密封管（５ｍＬ）中で還流下で２４時間撹拌した。この手順を繰り返した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を、ＳｉＯ２及びジクロロメタン／酢酸エチル＝１０／０～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、２８ｍｇのＤＭＢ保護トランス－及びシス－大環状分子の混合物を得た（定量的収率）。
（ｄ）実施例８４ａ及び実施例８４ｂ
ＴＦＡ／ＴＩＳ／水＝９０／５／５ｖ／ｖ％を使用して、実施例６のステップｅに記載されるようにＤＭＢ保護トランス／シス－大環状分子の脱保護を行った。 分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物の２種の分離したトランス異性体及びシス異性体を得た。実施例８４ａは、最初の溶出異性体であり、これは、トランス異性体（１１ｍｇ、４７．４％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．０５分； ｍ／ｚ ６０４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。実施例８４ｂは、最後の溶出異性体であり、これはシス異性体（３ｍｇ、１２．３％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．５３分；ｍ／ｚ ６０４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例８４に記載される方法Ｇに従って合成した。



方法Ｈ
実施例９４
この化合物を、４－［１－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロヘキシル］－４－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチル－アミノ］－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－３－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（骨格Ｅ）から開始して、方法Ｇのステップａ～ｄに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例９４を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物の２種の分離したトランス異性体及びシス異性体を得た。実施例９４ａは、最初の溶出異性体であり、これは、トランス異性体（８ｍｇ、３５．６％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．９２分；ｍ／ｚ ６０４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。実施例９４ｂは、最後の溶出異性体であり、これは、シス異性体（３ｍｇ、１３．４％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．２３分；ｍ／ｚ ６０４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例９４に記載される方法Ｈに従って合成した。







方法Ｉ
実施例１１２
実施例１０６（１４ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）のメタノール（２ｍＬ）溶液に、４４μＬの１Ｎ ＨＣｌ溶液及び１４ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを添加した。触媒水素化を室温で１６時間行った。パラジウム触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、１４ｍｇの表題化合物を得た（収率：定量的）。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：９．２３分；ｍ／ｚ ６０４．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例１１２について記載した方法Ｉに従って合成した。




方法Ｊ
実施例１２９
（ａ）ベンジル（３Ｒ）－３－［（３－クロロピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］ピペリジン－１－カルボキシレート
続いて、（Ｒ）－ピペリジン－１，３－ジカルボン酸１－ベンジルエステル（８．３ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１４３ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（１５．４ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（１２．０ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌し、その後、（３－クロロピラジン－２－イル）メタンアミン塩酸塩（７．６８ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、室温で一晩攪拌した。反応混合物を、ブフナーフィルター上で濾過した。濾液を、５％の ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）、５％クエン酸水溶液（１５０ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１４．５ｇの表題化合物を得た（定量的粗収率）。生成物を次のステップで直接使用した。
（ｂ）ベンジル（３Ｒ）－３－（８－クロロイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート
ベンジル（３Ｒ）－３－［（３－クロロピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］ピペリジン－１－カルボキシレート（１４．５ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１３０ｍＬ）中に溶解し、オキシ塩化リン（１４．７ｍＬ、１５８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で７時間、室温で一晩撹拌した。混合物を２５％アンモニア（４００ｍＬ）及び粉砕氷（７００ｍＬ）に慎重に添加し、温度を０℃未満に維持した。酢酸エチル（４００ｍＬ）を添加し、得られた混合物を３０分間撹拌した。水層を分離し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、９ｇの表題化合物を得た（収率７７％）。
（ｃ）ベンジル（３Ｒ）－３－（１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート
Ｎ－ブロモスクシンイミド（４．７４ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）を、ベンジル（３Ｒ）－３－（８－クロロイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート（９ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９８ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を０℃で３時間撹拌した。混合物を、１０％ Ｎａ２Ｓ２Ｏ４水溶液／５％ ＮａＨＣＯ３水溶液／ブライン及び酢酸エチルでクエンチした。相を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１～１／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、９．４ｇの表題化合物を得た（収率：８６％）。
（ｄ）ベンジル（３Ｒ）－３－（８－アミノ－１－ブロモ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート
ベンジル（３Ｒ）－３－（１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）を２５％アンモニア（６ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）中に懸濁し、密封管に入れた。混合物を１２０℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチル中に溶解し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８６０ｍｇ（９０％）の表題化合物を得た。
（ｅ）ベンジル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
ベンジル（３Ｒ）－３－（８－アミノ－１－ブロモ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）ピペリジン－１－カルボキシレート（８６０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（２５ｍＬ）中に溶解し、炭酸カリウム（１．３８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（中間体ＢＰ１）（７８８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（４１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を９０℃で４時間撹拌した。反応混合物を、室温まで冷却した後、酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を、水、０．２Ｍ ＮａＯＨ溶液、水、及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．０ｇの表題化合物を得た（収率：８１％）。
（ｆ）ベンジル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－クロロ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
ベンジル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（１．００ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）の酢酸（６ｍＬ）溶液にＮ－クロロスクシンイミド（２１７ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１時間撹拌した。室温まで冷却した後、混合物を水（２４０ｍＬ）及び酢酸エチル（６０ｍＬ）の撹拌混合物に滴下し、室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、水（３００ｍＬ）、Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１０．６ｇ、５０ｍＬの水中１００ｍｍｏｌ）、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、６４０ｍｇの表題化合物を得た（収率：６１％）。
（ｇ）４－［８－アミノ－５－クロロ－３－［（３Ｒ）－３－ピペリジル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－１－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド
ベンジル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－クロロ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（６４０ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）に３３％ＨＢｒ／酢酸溶液（５．９ｍＬ、３４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で４時間放置した。混合物を水／ブライン（８０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。水相を１Ｎ ＮａＯＨ溶液（６０ｍＬ）で中和し、次いでジクロロメタン／メタノール＝９／１ｖ／ｖ％で抽出した。有機層をＰＥフィルター上で分離した。濾液を真空中で濃縮して、３４０ｍｇの表題化合物（収率６７％）を得た。
（ｈ）２－トリメチルシリルエチル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－クロロ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
ＤｉＰＥＡ（２３４μＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を４－［８－アミノ－５－クロロ－３－［（３Ｒ）－３－ピペリジル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－１－イル］－Ｎ－［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］ベンズアミド（３４０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６．６ｍＬ）溶液に添加した。次に、１－［（２－トリメチルシリル）エトキシカルボニルオキシ］ピロリジン－２，５－ジオン（１８８ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をジクロロメタン（３０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ０を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。水層を分離し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を水（２５ｍＬ）で洗浄し、ＰＥフィルターで濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及び酢酸エチルを使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、３２０ｍｇの表題化合物を得た（収率７３％）。
（ｉ）２－トリメチルシリルエチル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－［（Ｅ）－３－［（５－エトキシ－５－オキソ－ペンチル）－メチル－アミノ］プロパ－１－エニル］－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート
２－トリメチルシリルエチル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－クロロ－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］－フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレート（１６０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、エチル５－［メチル－［（Ｅ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アリル］アミノ］ペンタノエート（中間体Ｌ１９）（１５７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（９９．４ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）のジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（４．５ｍＬ）中の混合物を脱気した。ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標）Ａ Ｐｄ Ｇ３（１１ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素で３０℃で５分間再び脱気した。反応混合物を、マイクロ波照射下で、１００℃で６０分間撹拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濾液を５％クエン酸溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１０／０～９／１ｖ／ｖ％）により精製して、４０ｍｇの表題化合物を得た。
（ｊ）実施例１２９
この化合物を、２－トリメチルシリルエチル（３Ｒ）－３－［８－アミノ－５－［（Ｅ）－３－［（５－エトキシ－５－オキソ－ペンチル）－メチル－アミノ］プロパ－１－エニル］－１－［４－［［４－（トリフルオロメチル）－２－ピリジル］カルバモイル］フェニル］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル］ピペリジン－１－カルボキシレートを使用して、方法Ｃのステップｆ及びｇに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例１２９を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（３ｍｇ、１０％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：６．５２分；ｍ／ｚ ６３３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例１２９に記載される方法Ｊに従って合成した。
方法Ｋ
実施例１３３
（ａ）（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン塩酸塩
（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン塩酸塩を、ＷＯ２０１３／０１０３８０ Ａ１に記載される手順に従って調製した。
（ｂ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］シクロヘキシル］－カルバメート
続いて、（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸（中間体ＲＰ５）（８００ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（１．２ｍＬ、８．６５ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（１．１ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌し、その後、（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン塩酸塩（７４７ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、室温で一晩攪拌した。反応混合物を、ブフナーフィルター上で濾過した。濾液を、５％ ＮａＨＣＯ３水溶液、５％クエン酸水溶液、水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１．７３ｇの表題化合物を得た（定量的粗収率）。生成物を次のステップで直接使用した。
（ｃ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［（６－アリル－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］シクロヘキシル］カルバメート
ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］－シクロヘキシル］カルバメート（１．７３ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（５６０ｍｇ、２．９１ｍｍｏｌ）、及びフッ化セシウム（１．５２ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）のジオキサン（３３ｍＬ）中の混合物を窒素で脱気した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（１３５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１００℃で２時間撹拌した。冷却後、酢酸エチルを添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濾液を５％クエン酸溶液、水、及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮して、１．６２ｇの表題化合物（収率：定量的粗製物）を得た。
（ｄ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（５－アリル－１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）シクロヘキシル］カルバメート
この化合物を、ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－［（６－アリル－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メチルカルバモイル］シクヘキシル］カルバメートを使用して、方法Ｊのステップｂ及びｃに記載されるのと同様の様式で調製し、６８０ｍｇのベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（５－アリル－１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ－［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）シクロヘキシル］カルバメート（収率：４０％）を得た。
（ｅ）ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（５－アリル－８－アミノ－１－ブロモ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）シクロヘキシル］カルバ－メート
ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（５－アリル－１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）シクロヘキシル］－カルバメート（６８０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を２Ｎアンモニア／イソプロパノール（１８ｍＬ）中に懸濁させ、密封管に入れた。混合物を、マイクロ波照射下、１２０℃で１４時間撹拌した。冷却後、混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチル中に溶解し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝１／１～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含むすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、５１５ｍｇの表題化合物を得た（収率：７９％）。
実施例１３３
この化合物を、ベンジルＮ－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（５－アリル－８－アミノ－１－ブロモ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－３－イル）シクロヘキシル］カルバメート及び５－ヘキセン酸を使用して、方法Ｊのステップｅ及びｇ、方法Ｈのステップｂ～ｄに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例１３３を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物の２種の分離したトランス異性体及びシス異性体を得た。実施例１３３ａは、最初の溶出異性体であり、これは、トランス異性体（５ｍｇ、９％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．１６分；ｍ／ｚ ６０４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。実施例１３３ｂは、最後の溶出異性体であり、これは、シス異性体（５ｍｇ、９％）データに対応する。ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．５４分；ｍ／ｚ ６０４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、実施例１３３に記載される方法Ｋに従って合成した。

以下の実施例を、表に図示される方法に従って合成した。
方法Ｌ
実施例１３９
（ａ）３－ブロモ－４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン
４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン（１．６１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）中の懸濁液に、Ｎ－ブロモスクシンイミド（１．８７ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を還流下で３時間撹拌した。冷却後、混合物を室温で一晩撹拌し、その上に沈殿物が形成された。混合物を濃縮し、残渣を、水／エタノール＝１／９ｖ／ｖ％（２０ｍＬ）中で室温で１時間撹拌した。次に、追加の水／エタノール＝９／１ｖ／ｖ％を滴下し、室温で３０分間撹拌を継続した。固体を濾過し、残渣を真空中で乾燥させて、１．３ｇの３－ブロモ－４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン（収率５３％）を得た。
（ｂ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（３－ブロモ－４－クロロ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－ヒドロキシ－１－メチル－プロピル］カルバメート（１．３ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）、３－ブロモ－４－クロロ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン（１．３３ｇ、５．７２ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（１．８０ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５７ｍＬ）の氷冷（０℃）溶液にジ－２－メトキシエチルアゾジカルボキシレート（１．６１ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を４℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで加温し、一晩撹拌した。混合物に、水／５％クエン酸水溶液／酢酸エチル＝１／１／１ｖ／ｖ％（１５０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。層を分離し、水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を５％クエン酸水溶液（２×７５ｍＬ）、水（７５ｍＬ）、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有する全ての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．４３ｇのｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（３－ブロモ－４－クロロ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート（８４／１６比の異性体混合物）（収率：６２％）を得た。
（ｃ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（４－アミノ－３－ブロモ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（３－ブロモ－４－クロロ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート（７１５ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）を２Ｎアンモニア／イソプロパノール（９ｍＬ）及び２５％アンモニア溶液（９ｍＬ）中に懸濁させ、密封管に入れた。混合物を、マイクロ波照射下、１２０℃で２０時間撹拌した。冷却後、混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチル中に溶解し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、４７０ｍｇの表題化合物を得た（収率３５％）。
（ｄ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（４－アミノ－３－ブロモ－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］－カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（４－アミノ－３－ブロモ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリ－ジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート（２２０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．７ｍＬ）中の冷（０℃）溶液に、Ｎ－ヨードスクシンイミド（１９２ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、混合物を室温まで加温した。混合物を酢酸エチルで希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、２５０ｍｇの表題化合物を得た（収率：８６％）。
（ｅ）ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［３－ブロモ－１－［（３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ブチル］－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－イル］－Ｎ－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－カルバメート
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１Ｒ）－３－（４－アミノ－３－ブロモ－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－１－イル）－１－メチル－プロピル］カルバメート（２５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及び４－ＤＭＡＰ（１．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４．９ｍＬ）懸濁液にジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボネート（１６０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（１０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を添加した。水層を分離し、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（１０ｍＬ）、５％クエン酸水溶液（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＰＥフィルターで濾過し、濃縮して、３４０ｍｇのｔｅｒｔ－ブチルＮ－［３－ブロモ－１－［（３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ブチル］－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－イル］－Ｎ－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－カルバメート（収率９５％）を得た。
（ｆ）メチル（Ｅ）－８－［４－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３－ブロモ－１－［（３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－アミノ）ブチル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエート
Ｎ－［３－ブロモ－１－［（３Ｒ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ブチル］－７－ヨード－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－イル］－Ｎ－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－カルバメート（２４０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をジオキサン／水＝４／１ｖ／ｖ％（１２ｍＬ）中に溶解し、炭酸セシウム（３２６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を窒素で５分間パージし、メチル（Ｅ）－８－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）オクタ－７－エノエート（中間体Ｌ１５）（１２０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（２９ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を８２℃で４時間撹拌した。反応混合物を、室温まで冷却した後、酢酸エチルで希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（商標）で濾過した。濾液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９５／５～０／１０ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、２２０ｍｇの表題化合物を得た（収率６９％）。
（ｇ）実施例１３９
この化合物を、メチル（Ｅ）－８－［４－［ビス（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３－ブロモ－１－［（３Ｒ）－３－（ｔｅｒ ｔ－ブトキシカルボニル－アミノ）ブチル］ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－７－イル］オクタ－７－エノエートを使用して、方法Ｃのステップｆ及びｇに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例１３９を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（４ｍｇ、１３．４％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：８．０５分；ｍ／ｚ ５８５．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、表に図示される方法に従って合成した。











方法Ｍ
実施例１８４
（ａ）エチル（Ｅ）－８－［３－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］－１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－５－イル］オクタ－７－エノエート
この化合物を、中間体ＲＰ５、中間体Ｌ１５、及び（６－ブロモ－３－クロロ－ピラジン－２－イル）メタンアミン塩酸塩を使用して、方法Ｋのステップａ～ｄ、ならびに方法Ｊのステップｂ及びｃに記載されるのと同様の様式で調製して、８８０ｍｇの表題化合物を得た。
（ｂ）エチル（Ｅ）－８－［３－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］－１－ブロモ－８－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－５－イル］オクタ－７－エノエート
エチル（Ｅ）－８－［３－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］－１－ブロモ－８－クロロ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－５－イル］オクタ－７－エノエート（９２４ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）の１－ブタノール（１５ｍＬ）懸濁液に２，４－ジメトキシベンジルアミン（６５８μＬ、４．３８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１１０℃で２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチル／水３／１ｖ／ｖ％（１００ｍＬ）中に溶解した。有機層を分離し、５％ ＮａＨＣＯ３溶液（２５ｍＬ）及びブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＳｉＯ２及びヘプタン／酢酸エチル＝９／１～１／４ｖ／ｖ％を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物を含有するすべての画分を収集し、真空中で濃縮して、１．０１ｇの表題化合物を得た（収率：９１％）。
（ｃ）実施例１８４
この化合物を、エチル（Ｅ）－８－［３－［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］－１－ブロモ－８－［（２，４－ジメトキシフェニル）メチルアミノ］イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－５－イル］オクタ－７－エノエートから開始して、最後の工程で中間体ＢＰ６を使用して、方法Ｊ、Ｋ、及びＬに記載されるのと同様の様式で調製して、粗実施例１８４を得た。分取ＨＰＬＣを使用して精製を行い、表題化合物（５ｍｇ、１３％）を得た。データ：ＬＣＭＳ（Ｂ）Ｒｔ：７．００分；ｍ／ｚ ５７５．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
以下の実施例を、表に図示される方法に従って合成した。










実施例Ａ
生化学的キナーゼアッセイｗｔ－ＢＴＫ
ｗｔ－ＢＴＫ酵素活性に対する化合物の阻害活性を測定するために、ＩＭＡＰ（登録商標）アッセイ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用した。化合物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で連続希釈し、その後、１０ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ１５ ７．５、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．０１％のＴｗｅｅｎ－２０、０．１％のＮａＮ３、及び１ｍＭの新たに調製されたジチオトリトール（ＤＴＴ）からなるＩＭＡＰ反応緩衝液中の４％ＤＭＳＯ中で連続希釈した。化合物溶液を、ＩＭＡＰ反応緩衝液中の等体積の全長ｗｔ－ＢＴＫ酵素（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－１８０）と混合した。室温で暗所で１時間プレインキュベートした後、フルオレセイン標識されたＭＢＰ由来基質ペプチド（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、カタログ番号ＲＰ）を添加し、続いてＡＴＰを添加して、反応を開始した。最終酵素濃度は１．２ｎＭ、最終基質濃度は５０ｎＭ、最終ＡＴＰ濃度は４μＭであった。反応を暗所で室温で２時間進行させた。製造業者（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のプロトコルに従って、ＩＭＡＰ進行性結合溶液でクエンチすることによって反応を停止した。フルオレセイン偏光をＥｎｖｉｓｉｏｎマルチモードリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、マサチューセッツ州ウォルサム、米国）で測定した。ＩＣ５０は、ＸＬｆｉｔ（商標）５ソフトウェア（ＩＤ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｌｔｄ．，サリー、英国）を使用して計算した。
ｗｔ－ＢＴＫ結合親和性の結果を以下の表１に示す。
ＩＣ５０ ｗｔ－ＢＴＫ：
Ａは、ＩＣ５０が５ｎＭ未満であることを意味する
Ｂは、ＩＣ５０が５～５０ｎＭであることを意味する
Ｃは、ＩＣ５０が５０ｎＭ超５００ｎＭ未満であることを意味する
実施例Ｂ
生化学キナーゼアッセイＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ
ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ酵素活性に対する化合物の阻害活性を測定するために、ＩＭＡＰ（登録商標）アッセイ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用した。化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で連続希釈し、その後、１０ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ１５ ７．５、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．０１％のＴｗｅｅｎ－２０、０．１％のＮａＮ３、及び１ｍＭの新たに調製されたジチオトリトール（ＤＴＴ）からなるＩＭＡＰ反応緩衝液中の４％ＤＭＳＯ中で連続希釈した。化合物溶液を、ＩＭＡＰ反応緩衝液中の等体積の完全長ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ酵素（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－５４７）と混合した。室温で暗所で１時間プレインキュベートした後、フルオレセイン標識されたＭＢＰ由来基質ペプチド（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、カタログ番号ＲＰ７１２３）を添加し、続いてＡＴＰを添加して、反応を開始した。最終酵素濃度は１．２ｎＭ、最終基質濃度は５０ｎＭ、最終ＡＴＰ濃度は７μＭであった。反応を暗所で室温で２時間進行させた。製造業者（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のプロトコルに従って、ＩＭＡＰ進行性結合溶液でクエンチすることによって反応を停止した。フルオレセイン偏光をＥｎｖｉｓｉｏｎマルチモードリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、マサチューセッツ州ウォルサム、米国）で測定した。ＩＣ５０は、ＸＬｆｉｔ（商標）５ソフトウェア（ＩＤ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｌｔｄ．，サリー、英国）を使用して計算した。
ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ結合親和性の結果を以下の表１に示す。
ＩＣ５０ ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ：
Ａは、ＩＣ５０が５ｎＭ未満であることを意味する
Ｂは、ＩＣ５０が５～５０ｎＭであることを意味する
Ｃは、ＩＣ５０が５０ｎＭ超５００ｎＭ未満であることを意味する
実施例Ｃ
細胞増殖アッセイ
ｗｔ－ＲＥＣ－１マントル細胞リンパ腫細胞を、Ｓｙｎｔｈｅｇｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（カタログ番号ＣＲＬ－３００４、ＡＴＣＣ）を介してＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入した。凍結ストックを解凍し、細胞を、１０％（ｖ／ｖ）のウシ胎児血清及び１％のペニシリン／ストレプトアビジンを補充したＲＰＭＩ－１６４０細胞培養培地（カタログ番号６１８７００３６、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で希釈した。１ウェル当たり３２００個の細胞（４５μｌ）を、白色の３８４ウェル培養プレート（カタログ番号７８１０８０、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）に播種し、３７℃、湿度９５％、５％ＣＯ２で２４時間放置した。５μｌの化合物溶液を細胞に添加し、７２時間（３日）インキュベーションを継続し、続いて、２４μｌのＡＴＰｌｉｔｅ １Ｓｔｅｐ（商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｇｒｏｎｉｎｇｅｎ オランダ）溶液を各ウェルに添加した。発光をＥｎｖｉｓｉｏｎマルチモードリーダーで記録した。インキュベーション開始時の細胞シグナルは、細胞集団の増殖と細胞死とを区別するために別々に記録した。さらに、０．３％ ＤＭＳＯの存在下で化合物を含まない二連のインキュベーションによって最大増殖を決定した。成長の割合を主要なｙ軸シグナルとして使用した。ＩＣ５０は、４パラメータロジスティック曲線を使用したＩＤＢＳ ＸＬｆｉｔ（商標）５を使用した非線形回帰によってフィッティングされ、最大信号、最小信号、ヒルパラメータ、及びＩＣ５０を得た。
ｗｔ－ＲＥＣ－１増殖の結果を以下の表１に示す。
ＩＣ５０ ｗｔ－ＲＥＣ－１：
Ａは、ＩＣ５０が１００ｎＭ未満であることを意味する
Ｂは、ＩＣ５０が１００ｎＭ～１μＭであることを意味する
Ｃは、ＩＣ５０が１μＭ超１０μｍＭ未満であることを意味する
実施例Ｄ
細胞増殖アッセイ
ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉノックイン細胞株の生成
変異型ＢＴＫを発現するｗｔ－ＲＥＣ－１細胞株をＳｙｎｔｈｅｇｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎで作製した。ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉを発現する細胞株を、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９を介して生成した。モノクローナルＲＥＣ－１ Ｔ４７４Ｉ細胞株を、単一細胞クローニングによって得た。すべての細胞株の変異状態を、配列決定を介して確認した。凍結ストックを解凍し、細胞を、１０％（ｖ／ｖ）のウシ胎児血清及び１％のペニシリン／ストレプトアビジンを補充したＲＰＭＩ－１６４０細胞培養培地（カタログ番号６１８７００３６、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で希釈した。１ウェル当たり３２００個の細胞（４５μｌ）を、白色の３８４ウェル培養プレート（カタログ番号７８１０８０、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）に播種し、３７℃、湿度９５％、５％ＣＯ２で２４時間放置した。５μｌの化合物溶液を細胞に添加し、７２時間（３日）インキュベーションを継続し、続いて、２４μｌのＡＴＰｌｉｔｅ １Ｓｔｅｐ（商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｇｒｏｎｉｎｇｅｎ、オランダ）溶液を各ウェルに添加した。発光をＥｎｖｉｓｉｏｎマルチモードリーダーで記録した。インキュベーション開始時の細胞シグナルは、細胞集団の増殖と細胞死とを区別するために別々に記録した。さらに、０．３％ ＤＭＳＯの存在下で化合物を含まない二連のインキュベーションによって最大増殖を決定した。成長の割合を主要なｙ軸シグナルとして使用した。ＩＣ５０は、４パラメータロジスティック曲線を使用したＩＤＢＳ ＸＬｆｉｔ（商標）５を使用した非線形回帰によってフィッティングされ、最大信号、最小信号、ヒルパラメータ、及びＩＣ５０を得た。
ＲＥＣ－１ Ｔ４７４Ｉ増殖の結果を以下の表１に示す。
ＩＣ５０ ＲＥＣ－１ Ｔ４７４Ｉ：
Ａは、ＩＣ５０が１００ｎＭ未満であることを意味する
Ｂは、ＩＣ５０が１００ｎＭ～５００ｎＭであることを意味する
Ｃは、ＩＣ５０が５００ｎＭ超および１０μＭ未満であることを意味する
表１：インビトロ生化学アッセイ及び細胞アッセイのＩＣ５０値。





実施例Ｅ
ｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ及びＢＴＫ Ｔ４７４Ｓ（表面プラズモン共鳴）の結合動態測定
Ｂｉａｃｏｒｅの使い捨てキット及びメンテナンスキットであるストレプトアビジン被覆チップ（カタログ番号ＢＲ１００５３１）は、Ｃｙｔｉｖａ（オランダ、インドホベン）から購入した。ビオチニル化ｗｔ－ＢＴＫ酵素（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－４８０－２０Ｎ）、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－４１７－２０Ｎ）、ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－４１８－２０Ｎ）、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－４１９－２０Ｎ）、又はＢＴＫ Ｔ４７４Ｓ（Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号０８－４２０－２０Ｎ）を、Ｂｉａｃｏｒｅバッファー（５０ ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ ７．５， ０．０５ ％ （ｖ／ｖ） Ｔｗｅｅｎ－２０， １５０ ｍＭ ＮａＣｌ ｃ ５ ｍＭ ＭｇＣｌ２）＋１ｍＭのＴＣＥＰを用いて、ストレプトアビジンコートチップ上に約８０００共鳴単位（ＲＵ）まで固定化した。残りのストレプトアビジンを、ビオチンでブロックした。固定化を４℃で行った。その後のアッセイ工程を２２℃で行った。緩衝液を１％（ｖ／ｖ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）でＢｉａｃｏｒｅ緩衝液に変化させた後、３０μｌ／分の流量で少なくとも３０分間実行して、安定な表面を得た。化合物の動態定数を、３．１６～３１６ｎＭの範囲で化合物濃度を増加させながら、５回の連続注射を用いた単一サイクル動態を用いて決定した。解離時間が増加した不可逆的阻害剤などの長い標的滞留時間を有する化合物を除いて、濃度当たり１００秒の会合時間及び１２００秒の解離時間で実験を実施した。物質輸送の制限の問題を回避するために、３０μｌ／分の流量を使用した。化合物を注入する前に、同じ条件を用いたブランクランを行った。ＳＰＲセンサーグラムを、二重参照の方法を使用してＢｉａｃｏｒｅ評価ソフトウェアで分析した。まず、固定化タンパク質を含有するチャネルから基準チャネルを減算した。その後、緩衝液注入で得られた参照曲線を減算した。得られた曲線に１：１結合モデルをフィッティングした。誘導適合モデルに従って結合した化合物に、２状態反応モデルを適合させた。二連の速度定数（ｋａ、ｋｄ、ＫＤ）を幾何学的に平均した。１：１結合モデルの標的滞留時間（τ）を、式τ＝１／ｋｄでの解離定数ｋｄから計算した。誘導適合モデルの標的滞留を、記載されるように計算した（Ｔｕｍｍｉｎｏ ａｎｄ Ｃｏｐｅｌａｎｄ，２００８）。
実施例１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８７、１８９、１９２、１９３、１９５、１９８～２０１、２０３～２０５、２０７、２１０、２１１、２１３、２１５～２１７および２２２～２２６の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ｗｔ－ＢＴＫ）値を示した。
実施例１、６、７、８、９、１０、１７、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４、１７５、１７９、１８３、１８４、１９８～２０２、２０４および２０７の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ）値を示した。
実施例１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２および１７４～１７６の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ３１６Ａ）値を示した。
実施例８、９、５０、５１、５２、５３、５６、５９、７６、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３９、１４６、１５６および２１１の化合物は、１０ｎＭ超のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ）値を示し、実施例１、２、６、７、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５４、５７、６１、６８、７１、７９、８３、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１４１、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９、１８０、１８２～１８９、１９２、１９３、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７および２２２～２２６の化合物は、１０ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ）値＜１０ｎＭを示した。
実施例６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１４７、１５０、１５１、１５２、１５３、１５５、１５６、１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８１、１８３および１８７の化合物は、５ｎＭ未満のＫＤ（ＢＴＫ Ｔ４７４Ｓ）値を示した。
代表的な例の目標滞留時間を以下の表２ａ～ｅに示す。





実施例Ｆ
インビトロ細胞（変異体）ＢＴＫ阻害、及び阻害剤のウォッシュアウト
ＧｒｉｐＴｉｔｅ ２９３ ＭＳＲ細胞を発現するヒトｗｔ－ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉの生成。
本明細書で以下、２９３細胞と呼称するＧｒｉｐＴｉｔｅ ２９３ ＭＳＲ細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号Ｒ７９５０７）を、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１５１４０１２２）、１０％ウシ胎児血清（Ｂｉｏｗｅｓｔ、カタログ番号Ｓ１８１０－５００）、１ｘ ＭＥＭ非必須アミノ酸（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１１１４００５０）およびμｇ／ｍｌのジェネティシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１０１３１０３５）を補充したＤＭＥＭ／Ｆ－１２、ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）サプリメント培地（ｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１０５６５０１８）中で培養した。細胞を、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）３０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、完全長野生型－ＢＴＫ（正準配列ＮＭ＿００００６１）、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、またはＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉ（ＢａｓｅＣｌｅａｒ）のいずれかを含むｐＥＦ６／Ｖ５－ＨｉｓＢ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒのカタログ番号Ｖ９６１２０）発現ベクターでトランスフェクトした。ＢＴＫのコード配列の末端の終止コドンは保存されているため、発現ベクター中に存在するＨｉｓタグは使用されていない。トランスフェクションの直後に、細胞を、ジェネティシンを含まない培地中で培養し、２４時間後、５０μｇ／ｍｌのジェネティシンを添加した。トランスフェクションの４８時間後、培地を除去し、ジェネティシン（５０μｇ／ｍｌ）及びブラストサイジン（１０μｇ／ｍｌ）Ｓ ＨＣｌの両方を含有する培地（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号Ａ１１１３９０３）に交換した。得られたトランスフェクタントを、１８～３５継代にわたってブラストサイジン選択圧力下で培養して、安定した野生型ＢＴＫ（ｗｔ－ＢＴＫ）、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉ発現細胞プールを得た。２９３細胞プールにおける（変異体）ＢＴＫ発現の安定性を、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、続いてウェスタンブロッティングにより確認した（図１Ａ）。非トランスフェクト２９３細胞は、ＢＴＫを発現しない（図１Ｂ）。両方の実験について、１０μｇのタンパク質を４～１２％のビストリスポリアクリルアミドゲル上で分離した。
ＰＡＧＥ及びウェスタンブロッティング。
２９３細胞を発現する野生型ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、又はＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉを、プロテアーゼ阻害剤（Ｍｅｒｃｋ、カタログ番号Ｐ８３４０）及びホスファターゼ阻害剤（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号７８４２６）を補充した溶媒緩衝液で溶解した。タンパク質濃度を、Ｐｉｅｒｃｅ ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒカタログ番号２３２２７）で決定した。溶解物を、１６７ｍＭ ＤＴＴ（Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ、カタログ番号１０６８６８４１）を加えたＮｕＰａｇｅ（登録商標）ＬＤＳ Ｓａｍｐｌｅ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号ＮＰ０００８）で１μｇ／μｌの濃度に希釈し、９５°Ｃで５分間変性させた。試料（１０μｇタンパク質）を、あらかじめ染色したタンパク質ラダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号２６６１６）とともに、４～１２％ Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓポリアクリルアミドゲル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号ＮＰ０３２４ＢＯＸ）で分離した。続いて、分離したタンパク質を、メタノールを含まないトランスファー緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号３５０４５）中で、ニトロセルロース膜（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号８８０１８）。ブロットを最初に、ホスホ－ＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３）ウサギｍＡｂ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号５０８２Ｓ）、及びベータ－アクチンウサギｍＡｂ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号４９６７Ｓ）、続いてペルオキシダーゼコンジュゲートヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号７０７４Ｓ）で染色した。その後、ウエスタンブロットストリッピング緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒカタログ番号４６４２８）を使用して抗体を除去し、（総）ＢＴＫマウスｍＡｂ（Ａｂｎｏｖａ、カタログ番号ＭＡＢ０７９８）、続いてペルオキシダーゼコンジュゲートウマ抗マウスＩｇＧ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号７０７６Ｓ）で染色を繰り返した。すべてのブロットについて、ＥＣＬ西洋ワサビペルオキシダーゼ基質（ＢｉｏＲａｄ、カタログ番号１７０－５０６０）を用いて発色を行った。
細胞ベースのＢＴＫ阻害。
２９３細胞を発現する野生型ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉは、播種すると指数関数的に増殖した。細胞を、６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ ｃｅｌｌ ｓｔａｒ、カタログ番号６５７１６０）中に、８００，０００細胞／ウェルの密度で、ブラストサイジンを含まない培養培地に播種し、３７℃のＣＯ２インキュベーターに入れた。播種後１６時間から２４時間の間に、実施例４６の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または実施例２５の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または実施例２６の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または実施例８３の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または実施例６８の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または実施例４５の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５の化合物を添加した培地（０．１～１０００ｎＭの範囲の最終濃度をもたらす）、または０．０５％ＤＭＳＯ（化合物なし）を細胞に添加した。阻害剤の添加の２４時間後、０．２５％トリプシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号２５２０００５６）を使用して細胞をウェルから分離した。収集後、細胞をＰＢＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１４１９０－０９４）で２回洗浄し、細胞ペレットを急速凍結し、－８０℃で保存した。化合物を添加した２４時間後、細胞を収集し、ＢＴＫリン酸化のレベル（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））をウエスタンブロットで決定した（図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２Ｄ、２Ｅ、２Ｆ及び２Ｇ）。ベータ－アクチン（ＡＣＴＢ）及びＢＴＫ（総ＢＴＫ）レベルを、負荷及びＢＴＫ発現対照として決定した（図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２Ｄ、２Ｅ、２Ｆ及び２Ｇ）。
細胞ベースのウォッシュアウト。
２９３細胞を発現する野生型ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉは、２５ｃｍ２の細胞培養フラスコ（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－ｏｎｅ、カタログ番号６９０１７５）に、２、０００，０００細胞／４ｍｌ／ウェルの密度でブラストサイジンを含まない培地に播種すると、指数関数的に増殖した。フラスコを３７°ＣのＣＯ２インキュベーターに１６～２４時間置き、その後、５０００ｎＭの実施例４６若しくは実施例２０１、又は実施例１８４、又は実施例２０４の化合物、又は実施例４５若しくは（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５、又は０．０５％ ＤＭＳＯ（化合物なし）を含有する１ｍｌ培養培地を添加した。阻害剤（０時間）の添加の２時間後、細胞を収集するか、又は５ｍｌ培養培地で２回洗浄する。洗浄後、５ｍｌの培養培地（ブラストサイジンを含まない）を添加し、細胞をＣＯ２インキュベーター中、３７℃で０．５、１、２、４、６、又は２４時間インキュベートした後、収集した。０．２５％トリプシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号２５２０００５６）を使用して、細胞を採取した。採取後、細胞ペレットをＰＢＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１４１９０－０９４）で２回洗浄し、急速凍結し、－８０℃で保存した。
２９３細胞を発現する野生型ＢＴＫ、ＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ、ＢＴＫ Ｔ４７４Ｉ、及びＢＴＫ Ｃ４８１Ｓ／Ｔ４７４Ｉのウォッシュアウトウエスタンブロットの結果を、実施例４６の化合物について図３Ａ及び図３Ｈに、（＋／－）Ｌｏｘｏ－３０５（ピルトブルチニブはＬｏｘｏ－３０５である）について図３Ｂ及び図３Ｆに（ピルトプロットはＬｏｘｏ－３０５である）に、実施例２０１の化合物について図３Ｃ及び図３Ｆに、実施例１８４の化合物について図３Ｄ及び図３Ｆに、実施例２０４の化合物について図３Ｅ及び図３Ｆに、ならびに実施例４５の化合物について図３Ｇ及び図３Ｈに示す。対照細胞（化合物なし）を０．０１％ＤＭＳＯ（Ｄ）と２時間インキュベートし、０時間（０時間）、すなわち、脱落開始時、及び２４時間（２４時間）で採取した。リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを、ウエスタンブロットで決定した。ベータ－アクチン（ＡＣＴＢ）及びＢＴＫ（総ＢＴＫ）レベルを、ローディング対照及びＢＴＫ発現対照として決定した。
参照化合物Ｌｏｘｏ－３０５は、リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを禁止または低下させないが、実施例４６、実施例２５、実施例２０１、実施例１８４、実施例２０４、および実施例４５の化合物はすべて、ＢＴＫの変異型を発現する細胞株であっても、少なくとも６時間から少なくとも２４時間まで、リン酸化ＢＴＫ（ｐＢＴＫ（Ｔｙｒ２２３））のレベルを禁止または低下させることが、ウォッシュアウト実験から明らかである。これは、本発明による化合物の標的滞留が、化合物の溶液を除去した後の当該期間中に完了することが依然として実質的であることを示す。
実施例Ｇ
細胞増殖アッセイ
ｗｔ－ＴＭＤ８びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫細胞を、東京医科及び歯科大学から購入し、１０％（ｖ／ｖ）の熱不活化ウシ胎児血清及び１％のペニシリン／ストレプトアビジンを補充したＲＰＭＩ－１６４０細胞培養培地（カタログ番号６１８７００３６、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で培養した。１ウェル当たり１６００個の細胞（４５μｌ）を、白色の３８４ウェル培養プレート（カタログ番号７８１０８０、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）に播種し、３７°Ｃ、湿度９５％、５％ ＣＯ２で少なくとも５時間放置した。５μｌの化合物溶液を細胞に添加し、１２０時間（５日間）培養を続けた後、２４μｌのＡＴＰｌｉｔｅ １ＳｔｅｐTM（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社、オランダ、フローニンゲン）溶液を各ウェルに添加した。発光をＥｎｖｉｓｉｏｎマルチモードリーダーで記録した。インキュベーション開始時の細胞シグナルは、細胞集団の増殖と細胞死とを区別するために別々に記録した。さらに、０．３％ ＤＭＳＯの存在下で化合物を含まない二連のインキュベーションによって最大増殖を決定した。成長の割合を主要なｙ軸シグナルとして使用した。ＩＣ５０は、４パラメータロジスティック曲線を使用したＩＤＢＳ ＸＬｆｉｔ（商標）５を使用した非線形回帰によってフィッティングされ、最大信号、最小信号、ヒルパラメータ、及びＩＣ５０を得た。
ｗｔ－ＴＭＤ８増殖の結果を以下の表３に示す。
ＩＣ５０ ｗｔ－ＴＭＤ８：
Ａは、ＩＣ５０が１００ｎＭ未満であることを意味する
Ｂは、ＩＣ５０が１００ｎＭ～１μＭであることを意味する
Ｃは、ＩＣ５０が１μＭ超１０μｍＭ未満であることを意味する

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Claims (31)

  1. 式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、及び／又は溶媒和物であって、前記化合物が、以下からなる群から選択され：

    式中、Ｒ１が、

    であり、ここで
    Ｗが、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であって、前記アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル及びアルコキシ基のいずれかは、任意選択的かつ独立的に、１、２又は３個のフルオロで置換され、
    Ｖが、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１つであり、
    Ｒ１ｖが、水素又は（１－２Ｃ）アルキルであり、
    Ｕが、６～１０個の炭素を有するアリール基、又は１～５個の炭素を有するヘテロアリール基であり、前記アリール基及びヘテロアリール基のいずれかは、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基のいずれかは、任意選択的かつ独立的に、１、２又は３個のハロゲンで置換される）であり、
    Ｒ２が、以下からなる群から選択される式（ＩＩ－ａ）～式（ＩＩ－ｆ）のものであり、

    式中、Ｑが、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３が、ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２－、Ｏ、Ｎ及び直接結合で独立的に選択され、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル及びアルキル基のいずれかが、ハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル又は（３－４Ｃ）シクロアルキルから選択される１個以上の置換基で、任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される）からなる群から選択され、
    Ｒ３及びＲ４が、ひとまとめに、以下から選択される、式（ＩＩＩ－１～ＩＩＩ－４０）を有するリンカーを表し：

    式中、前記

    が、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、それによって、前記

    が、式ＩＩ－ａ～式ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
    前記リンカーのいずれかが、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、式（Ｉ－ａ）～（Ｉ－ｈ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、及び／又は溶媒和物。
  2. Ｒ３及びＲ４によって表される前記リンカーが、以下からなる群から選択され：

    前記

    が、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、前記

    が、式ＩＩ－ａ～式ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し、
    前記リンカーのいずれかが、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ３及びＲ４によって表される前記リンカーが、以下からなる群から選択され：

    前記

    が、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、前記

    が、式ＩＩ－ａ～式ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
    前記リンカーのいずれかが、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１又は２に記載の化合物。
  4. Ｒ３及びＲ４によって表される前記リンカーが、以下からなる群から選択され：

    前記

    が、式Ｉ－ａ～Ｉ－ｈのうちのいずれか１つのＲ３の位置を示し、前記

    が、式ＩＩ－ａ～式ＩＩ－ｆのうちのいずれか１つのＲ４の位置を示し；
    前記リンカーのいずれかが、重水素、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、ＣＤ３、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、（３－６Ｃ）シクロアルコキシ、及び（１－６Ｃ）アルキルカルボニルから選択される１個以上の置換基で任意選択的かつ独立的に置換され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。
  5. Ｒ２が、以下からなる群から選択され：

    Ｑが、（３－７Ｃ）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、
    Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３が、ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２、Ｏ、Ｎ、及び直接結合から独立的に選択され、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかが、任意選択的かつ独立的にハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル、又は（３－４Ｃ）シクロアルキルで置換され、前記アルキル及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。
  6. Ｒ２が、以下からなる群から選択され：

    Ｑが、（３－７）シクロアルキル及び（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択される単環式環であり、
    Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３が、ＣＨ２、Ｏ、Ｎ、及び直接結合から独立的に選択され、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかが、任意選択的かつ独立的にハロゲン、ヒドロキシ、（１－３Ｃ）アルキル、（１－３Ｃ）アルコキシ、（１－４Ｃ）アルキルカルボニル、又は（３－４Ｃ）シクロアルキルで置換され、前記アルキル及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物。
  7. Ｒ２が、以下からなる群から選択され、

    前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びアルキル基のいずれかが、ヒドロキシ、メチル、アセチル、又はメトキシで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物。
  8. 前記化合物が、以下ら選択される二環式骨格を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。
  9. Ｒ１が、以下からなる群から選択され：

    Ｒ１ｗ及びＲ２ｗが、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。
  10. Ｒ１が、以下のいずれかであり、

    Ｒ１ｗ及びＲ２ｗが、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
    Ｒ１ｕ及びＲ２ｕが、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから独立的に選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
    Ｘｕが、ＣＨ及びＮから選択される、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。
  11. Ｖが、Ｏ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ（Ｒ１ｖ）－のうちのいずれか１個であり、Ｒ１ｖが、水素又は（１－２Ｃ）アルキルである、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
  12. Ｒ１が、以下のいずれか１つであり、

    Ｒ１ｗ及びＲ２ｗが、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから独立的に選択され、前記アルキル又はアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
    Ｒ１ｕ及びＲ２ｕが、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから独立的に選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のハロゲンで任意選択的かつ独立的に置換され、
    Ｘｕが、ＣＨ及びＮから選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物。
  13. Ｒ１が、以下のいずれか１つであり、

    Ｒ２ｗが、水素、ハロゲン、（１－２Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシから選択され、前記アルキル又はアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換され、
    Ｒ３ｕが、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－５Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物。
  14. Ｒ１が、

    のいずれか１つであり、Ｒ２ｗが、水素、フルオロ、メチル、又はメトキシから選択され、
    Ｒ３ｕが、水素、ハロゲン、シアノ、（１－４Ｃ）アルキル、（１－２Ｃ）アルコキシ、（３－６Ｃ）シクロアルキル、又は（３－６Ｃ）ヘテロシクロアルキルから選択され、前記アルキル基及びアルコキシ基のいずれかが、１、２、又は３個のフルオロで任意選択的かつ独立的に置換される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の化合物。
  15. 前記化合物が、以下からなる群から選択される、部分式１～２２６を有する、請求項１に記載の化合物。




















  16. 前記化合物が、１～５７、５９～６４、６８～８６、８７ｂ～９０、９２～９４ｂ、９７ｂ～９８ｂ、９９ｂ、１００ｂ～１０３ｂ、１０４ｂ、１０８～１０９ａ、１１０、１１２、１１４～１１５、１１７～１３３ｂ、１３７～１３９、１４１～１４３、１４６～１５３、１５５～１７０、１７２～１８８、１９１～２０７、２０９～２１９及び２２２～２２５からなる群から選択される部分式を有する、請求項１５に記載の化合物。
  17. 前記化合物が、１、２、６、７、８、９、１０、１１、１７、１８、２０、２１、２４、２５、２６、２７、２８、３３、３４、３９、４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５６、５７、５９、６１、６８、７１、７６、７９、８３、８５ｂ、８７ｂ、８８ｂ、８９ｂ、９８ｂ、１００ｂ、１１４、１１５、１３０、１３１、１３２、１３３ｂ、１３９、１４１、１４６、１５０～１５３、１５５～１５７、１６２～１６５、１６８～１７０、１７２、１７４～１７６、１７９～１８９、１９２、１９３、１９８～２０５、２０７、２１０、２１３、２１５～２１７及び２２２～２２６からなる群から選択される、１５に記載の部分式を有する、請求項15に記載の化合物。
  18. 前記化合物が、以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。



  19. 医薬として使用するための、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
  20. 治療に使用するための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
  21. ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害の治療に使用するための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
  22. 前記ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害が、アレルギー性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、血栓塞栓性疾患、骨関連疾患、及び癌からなる群から選択される、請求項２１に記載の化合物。
  23. 前記ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害が、アレルギー性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、血栓塞栓性疾患、骨関連疾患、及び癌からなる群から選択される、請求項２１に記載の化合物。
  24. 癌、リンパ腫、又は白血病の治療に使用するための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
  25. Ｂ細胞悪性腫瘍、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、非ホジキンリンパ腫、例えばＡＢＣ－ＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリー細胞白血病Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、リフター変換、多発性骨髄腫、骨癌、骨転移、慢性リンパ性リンパ腫、Ｂ細胞プロリンパ球白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、形質細胞リンパ腫、形質細胞腫、結節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、結節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、バーキットリンパ腫／白血病、リンパ腫様肉芽腫症からなる群から選択される疾患の治療に使用するための、請求項１～１８、請求項２１又は請求項２４のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
  26. 関節リウマチ、乾癬性関節炎、感染性関節炎、進行性慢性関節炎、変形性関節炎、変形性関節症、外傷性関節炎、痛風性関節炎、レイター症候群、多発性軟骨炎、急性滑膜炎及び脊椎炎、糸球体腎炎（ネフローゼ症候群を伴う、又は伴わない）、自己免疫性血液疾患、溶血性貧血、無形成性貧血、特発性血小板減少症及び好中球減少、自己免疫性胃炎及び自己免疫性炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、宿主対移植片疾患、同種移植片拒絶反応、慢性甲状腺炎、グレーブス病、強皮症、糖尿病（Ｉ型及びＩＩ型）、活動性肝炎（急性及び慢性）、膵炎、原発性胆道肝硬変、重症筋無力症、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹、皮膚の日焼け血管炎（例えば、ベーチェット病）、慢性腎不全、スティーブンス・ジョンソン症候群、炎症性疼痛特発性スプルー、悪液質、サルコイド症、ギラン・バレー症候群、ブドウ膜炎、結膜炎、角化結膜炎、中耳炎、歯周病、肺間質性線維症、喘息、気管支炎、鼻炎、副鼻腔炎、じん肺症、肺不全症候群、肺気腫、肺線維症、けい肺症、慢性炎症性肺疾患、及び慢性閉塞性肺疾患からなる群から選択される疾患の治療に症するための、請求項１～１８又は請求項２１のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩。
  27. 医薬の製造のための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
  28. 請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、及び１種以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含む、医薬組成物。
  29. 少なくとも１種の追加の治療活性剤をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
  30. 治療を必要とする対象において癌を治療する方法であって、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を、癌を治療するのに有効な量で前記対象に投与することを含む、方法。
  31. ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）媒介性障害に罹患している対象を治療する方法であって、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を、前記ＢＴＫ媒介性障害を治療するのに有効な量で前記対象に投与することを含む、方法。
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