JP2024538140A - 抗ｏｘ４０モノクローナル抗体を含む医薬製剤 - Google Patents

Abstract

モノクローナルＯＸ４０抗体、緩衝剤、安定化剤、および界面活性剤を含み、製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与、および／または貯蔵などの種々のシナリオ下で安定性を維持できる医薬製剤が開示される。ＯＸ４０関連疾患、特に、炎症および／または自己免疫疾患を処置するための薬品の調製での医薬製剤の使用ならびに医薬製剤を調製するための方法も開示される。【選択図】なし

Description

[0001]本開示は、医薬製剤、特に、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を含む安定した医薬製剤に関する。

[0002]ヒトＯＸ４０受容体（ＯＸ４０）に対する抗体は、自己免疫疾患、炎症性疾患などの種々の疾患、またはがんなどの他の障害を処置するために開発されてきた。しかし、これらの抗体は十分に安定ではなく、種々の化学的および物理的分解を受けることが多いことが分かっている。特に、抗体の高次構造は非常に脆弱であり、変性、凝集、および沈殿などの構造変化の傾向がある。

[0003]変性とは、抗体の物理的、化学的、および／または生物学的特性の変化のことであり、これは抗体の免疫原性を増大させることに関連していた。タンパク質凝集は、タンパク質分子が１つまたは複数の追加のタンパク質分子と自己会合すると起こり、これにより薬効に影響を及ぼす生理活性が減少し、ならびに患者での免疫学的または抗原性反応の可能性が増加することが多い。沈殿は、例えば、ｐＨまたは疎水性が変化し、タンパク質分子と水環境の間の相互作用が変化するまたは塩もしくは金属の結合を通じてタンパク質分子の官能基の分子内相互作用が崩壊すると起こる。そのような分解または不安定産物、ならびに凝集または沈殿は、生物由来物質の生物活性および安全性に大きな悪影響を及ぼすことがある。例えば、凝集、タンパク質凝集物または治療タンパク質の医薬製剤中に含まれる不活性賦形剤との混合凝集物は、免疫原性反応をもたらすことがある。Ｓｃｈｅｌｌｅｋｅｎｓ、Ｈ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．１：４５７～６２頁（２００２）；およびＨｅｓｍｅｌｉｎｇら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２２：１９９７～２００６頁（２００５）を参照のこと。

[0004]したがって、医薬製剤の安定性が増加し毒性が減少した、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体などの、抗体の新規医薬製剤の必要性が存在する。

[0005]本開示は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体を含む、長期間にわたって均一で安定なままである安定な医薬製剤を提供する。
[0006]一態様では、本開示は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片、緩衝剤、安定化剤、および界面活性剤を含む医薬製剤を提供する。

[0007]ある特定の実施形態では、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体は重鎖および軽鎖を含み、重鎖は
配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、
配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、
配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３
を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含み、
軽鎖は
配列番号４に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、
配列番号５に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、
配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含み、
重鎖はＦｃ領域変異体をさらに含み、Ｆｃ領域変異体はヒトＩｇＧ１ Ｎ２９７Ａである。

[0008]ある特定の実施形態では、重鎖可変領域Ｖ_Ｈは、配列番号７，配列番号９、および配列番号１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0009]ある特定の実施形態では、軽鎖可変領域Ｖ_Ｌは、配列番号８、配列番号１１、および配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

[00010]ある特定の実施形態では、医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度は約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約４０～６０ｍｇ／ｍｌである。
[00011]ある特定の実施形態では、医薬製剤は約５．０～８．０のｐＨを有する。

[00012]ある特定の実施形態では、緩衝剤は、酢酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、クエン酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、アルギニン緩衝剤、クエン酸＆アルギニン緩衝剤、およびグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤からなる群から選択され、医薬製剤中の緩衝剤の濃度は約１～１００ｍｍｏｌ／Ｌである。

[00013]ある特定の実施形態では、安定化剤は、スクロース、ソルビトール、トレハロース、キシリトールおよびマンノースからなる群から選択され、医薬製剤中の安定化剤の濃度は約０．５％～５０％ ｗ／ｖである。

[00014]ある特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０およびポリソルベート２０からなる群から選択され、医薬製剤中の界面活性剤の濃度は約０．００１～０．１％ ｗ／ｖである。

[00015]ある特定の実施形態では、医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度は約４０～６０ｍｇ／ｍｌであり、医薬製剤中の緩衝剤の濃度は約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌであり、医薬製剤中の安定化剤の濃度は約４～１２％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度は約０．０１～０．０５％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤は約５．０～６．０のｐＨを有する。

[00016]ある特定の実施形態では、医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度は約５０ｍｇ／ｍｌであり、医薬製剤中の緩衝剤の濃度は約２０ｍｍｏｌ／Ｌであり、医薬製剤中の安定化剤の濃度は約４．５～８．８％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度は約０．０２～０．０４％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤は約５．０～５．５のｐＨを有する。

[00017]ある特定の実施形態では、医薬製剤中の安定化剤の濃度は約８％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度は約０．０２％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤は約５．０のｐＨを有する。

[00018]ある特定の実施形態では、緩衝剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはその組合せであり、安定化剤は、スクロース、ソルビトール、トレハロース、またはその組合せであり、および／または界面活性剤はポリソルベート８０である。

[00019]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤は、
モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約４０～６０ｍｇ／ｍｌの濃度で、
グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、
スクロースを約４～１２％ ｗ／ｖの濃度で、および
ポリソルベート８０を約０．０１～０．０５％ ｗ／ｖの濃度で
含み、
医薬製剤は約５．０～５．５のｐＨを有する。

[00020]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤は、
モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で、
グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、
スクロースを約８％ ｗ／ｖの濃度で、および
ポリソルベート８０を約０．０２％ ｗ／ｖの濃度で
含み、
医薬製剤は約５．０のｐＨを有する。

[00021]ある特定の実施形態では、医薬製剤は、皮下投与にまたは静脈内投与に適している。
[00022]別の態様では、本開示は、ＯＸ４０関連疾患の処置または予防のための薬物の製造における本明細書で提供される医薬製剤の使用も提供する。

[00023]ある特定の実施形態では、ＯＸ４０関連疾患は、炎症および／または移植片対宿主病などの自己免疫疾患である。
[00024]別の態様では、本開示は、ＯＸ４０関連疾患を処置する必要がある対象においてＯＸ４０関連疾患を処置する方法であって、本明細書で提供される医薬製剤の治療有効量を対象に投与するステップを含む方法も提供する。

[00025]ある特定の実施形態では、投与は皮下注射または静脈内注射による。
[00026]別の態様では、本開示は、本明細書で提供される医薬製剤を調製する方法であって、緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、および薬学的有効量のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を組み合わせるステップを含む方法も提供する。

[00027]別の態様では、本開示は、１つまたは複数の容器に本明細書で提供される医薬製剤を含むキットも提供する。
[00028]ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるキットは、キットを使用するための説明書をさらに含む。

[00029]図１は、可溶性プロファイリング研究でのタンパク質濃度の結果を示す。 [00030]図２は、ｐＨ／緩衝剤スクリーニングでのＤＳＣのオーバーレイを示す。 [00031]図３は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによる主ピークの傾向を示す。 [00032]図４は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによるＨＭＷの傾向を示す。 [00033]図５は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによるＬＭＷの傾向を示す。 [00034]図６は、ｉＣＩＥＦによる主ピークの傾向を示す。 [00035]図７は、ｉＣＩＥＦによる酸性ピークの傾向を示す。 [00036]図８は、ｉＣＩＥＦによる塩基性ピークの傾向を示す。 [00037]図９は、Ｃａｌｉｐｅｒ－ＮＲによる純度の傾向を示す。 [00038]図１０は、Ｃａｌｉｐｅｒ－Ｒによる純度の傾向を示す。 [00039]図１１は、ＤＳＣのオーバーレイを示す。 [00040]図１２は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによる主ピークの傾向を示す。 [00041]図１３は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによるＨＭＷの傾向を示す。 [00042]図１４は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣによるＬＭＷの傾向を示す。 [00043]図１５は、ｉＣＩＥＦによる主ピークの傾向を示す。 [00044]図１６は、ｉＣＩＥＦによる酸性ピークの傾向を示す。 [00045]図１７は、ｉＣＩＥＦによる塩基性ピークの傾向を示す。 [00046]図１８は、Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－ＮＲによる純度の傾向を示す。 [00047]図１９は、Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－Ｒによる純度の傾向を示す。

[00048]本開示の以下の記載は、本開示の種々の実施形態を説明することだけを意図されている。記載される特定の例は、本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本開示の精神および範囲から逸脱することなく、当業者であれば種々の均等物、変種、および改変物を作ってよく、均等物も本明細書に包含されることは理解される。刊行物、特許および特許出願を含む本明細書に引用されるすべての参考文献は、参照によりその全体を本明細書に組み込まれる。

[00049]定義
[00050]本明細書で使用される場合、用語「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」または「その（ｔｈｅ）」とは、文脈が別段はっきり指示しなければ、単数と複数の両方を指す。

[00051]本明細書での「約（ａｂｏｕｔ）」値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータそれ自体を対象とする実施形態を含む（および記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記述は、「Ｘ」の記述を含む。数値的範囲は、範囲を定義する数字を含む。一般的に言えば、用語「約（ａｂｏｕｔ）」とは、変数の指示値および指示値の実験誤差以内である（例えば、平均値に対して９５％信頼区間以内）または指示値の１０パーセント以内である、どちらにせよ大きいほうの変数のすべての値を指す。用語「約（ａｂｏｕｔ）」が期間（年、月、週、日、等）という文脈内で使用される場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、その期間プラスもしくはマイナス次の下位期間の一量（例えば、約１年は１１～１３カ月を意味し；約６カ月は６カ月プラスまたはマイナス１週間を意味し；約１週間は６～８日を意味する、等）、または指示値の１０パーセント以内、どちらにせよ大きいほうを意味する。

[00052]別段定義されなければ、本開示と関連して使用される科学および専門用語は、当業者であれば一般に理解している意味を有するものとする。さらに、文脈により別段要求されなければ、単数形の用語は複数形を含むものとし、複数形の用語は単数形を含むものとする。一般に、本明細書に記載される細胞および組織培養、分子生物学、およびタンパク質およびオリゴ－またはポリヌクレオチド化学の技法、実験手順ならびに分析化学、合成有機化学、および医学および製薬化学の技法に関連して利用される命名法は、当技術分野で周知であり一般に使用されている命名法である。

[00053]本明細書で使用される用語「医薬製剤」とは、特定の疾患を処置するための、１つまたは複数の医薬品有効成分（ＡＰＩ）と、例えば、さらなる処理（例えば、凍結乾燥、再構成、滴定、希釈）、保存、販売、および／または特定の用量での特定の経路による投与のための少なくとも１つの他の成分の組合せのことである。

[00054]用語「医薬品有効成分」または「ＡＰＩ」とは、本明細書で使用される場合、ポリペプチド、核酸、脂質、もしくは炭水化物などの巨大分子、またはその構成要素のことであり、これらは、治療抗体（例えば、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体）またはその抗原結合断片などの治療薬として使用可能である。

[00055]値の範囲を記載する場合、記載されている特長は範囲内の個々の値が可能であることは理解されるべきである。例えば、「約５．０～８．０のｐＨ」は、限定せずに、ｐＨ５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、等、ならびに、上記値の中間の任意の値が可能である。用語「約５．０～８．０のｐＨ」は、製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および／または貯蔵中にｐＨ５．０からｐＨ８．０に範囲を３ｐＨ単位変動させる医薬製剤のｐＨと解釈するべきではなく、それどころか、用語「約５．０～８．０のｐＨ」は、溶液のｐＨについて約５．０～８．０の範囲で値を選び、ｐＨは製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および／または貯蔵中に約選ばれたｐＨ値で緩衝されることを意味する。

[00056]本明細書で使用される状態を「処置する」または「その処置」は、状態を予防するもしくは軽減する、状態の開始もしくは発症速度を遅くする、状態を発症するリスクを低減する、状態に関連する症状の進展を予防するもしくは遅らせる、状態に関連する症状を低減するもしくは終わらせる、状態の完全なもしくは部分的な後退を生み出す、状態を治癒する、またはその一部の組合せを含む。

[00057]用語「対象」は、ヒトおよび非ヒト動物を含む。非ヒト動物は、すべての脊椎動物、例えば、哺乳動物および非ヒト霊長類などの非哺乳動物、マウス、ラット、ネコ、ウサギ、ヒツジ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両生類、および爬虫類を含む。別段指示されなければ、用語「患者」または「対象」は本明細書では互換的に使用される。

[00058]製剤
[00059]この本開示は、多種多様の異なる製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および貯蔵条件下でＡＰＩの増加した安定性を保持する新規の医薬製剤を提供する。本開示の医薬製剤は、毒性の低減および治療効果の増加も示す。本明細書で提供される医薬製剤と一緒に使用されるＡＰＩは、特に、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片などの治療抗体を含みうる。

[00060]一態様では、本開示は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片、緩衝剤、安定化剤、および界面活性剤を含む医薬製剤を提供する。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は約５．０～８．０（例えば、約５．０～６．０、約５．０～５．５、または約５．０）のｐＨを有する。

[00061]さらなる態様では、本開示は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ（例えば、約１～１８０ｍｇ／ｍｌ、約１０～１６０ｍｇ／ｍｌ、約１５～１４０ｍｇ／ｍｌ、約２０～１２０ｍｇ／ｍｌ、約２５～１００ｍｇ／ｍｌ、約３０～８０ｍｇ／ｍｌ、約４０～６０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で、緩衝剤（例えば、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤）を約１～１００ｍｍｏｌ／Ｌ（例えば、約１０～９０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～８０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～７０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌ、または約２０ｍｍｏｌ／Ｌ）の濃度で、安定化剤（例えば、スクロース、ソルビトール、またはトレハロース）を約０．５％～５０％ｗ／ｖ（例えば、約１％～約４０％（ｗ／ｖ）、約２％～約３０％（ｗ／ｖ）、約３％～約２０％（ｗ／ｖ）、約３．２％～約１８％（ｗ／ｖ）、約３．４％～約１６％（ｗ／ｖ）、約３．６％～約１４％（ｗ／ｖ）、約４％～約１２％（ｗ／ｖ）、約６％～約１０％（ｗ／ｖ）、または約８％（ｗ／ｖ））の濃度で、および界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）またはポリソルベート２０（ＰＳ２０））を約０．００１～０．１％（ｗ／ｖ）（例えば、約０．００２％～約０．０８％（ｗ／ｖ）、約０．００４％～約０．０６％（ｗ／ｖ）、約０．００６％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．００８％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０１％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、または約０．０２％（ｗ／ｖ））の濃度で、約５．０～８．０（例えば、約５．０～６．０、約５．０～５．５、または約５．０）のｐＨで含む医薬製剤を提供する。

[00062]さらなる態様では、本開示は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ（例えば、約１～１８０ｍｇ／ｍｌ、約１０～１６０ｍｇ／ｍｌ、約１５～１４０ｍｇ／ｍｌ、約２０～１２０ｍｇ／ｍｌ、約２５～１００ｍｇ／ｍｌ、約３０～８０ｍｇ／ｍｌ、約４０～６０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で、緩衝剤（例えば、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤）を約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、安定化剤（例えば、スクロース、ソルビトール、またはトレハロース）を約４％～約１２％（ｗ／ｖ）、約０．５％～１０％（ｗ／ｖ）、または約４％～１４％（ｗ／ｖ）の濃度で、および界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）を約０．０１％～約０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度で、約５．０～６．０のｐＨで含む医薬製剤も提供する。

[00063]別の態様では、本開示は、十分な安定性を達成するために、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ（例えば、約１～１８０ｍｇ／ｍｌ、約１０～１６０ｍｇ／ｍｌ、約１５～１４０ｍｇ／ｍｌ、約２０～１２０ｍｇ／ｍｌ、約２５～１００ｍｇ／ｍｌ、約３０～８０ｍｇ／ｍｌ、約４０～６０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で、緩衝剤（例えば、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤）を約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、安定化剤（例えば、スクロース、ソルビトール、またはトレハロース）を約８％（ｗ／ｖ）、約４．５％（ｗ／ｖ）、または約８．８％（ｗ／ｖ）の濃度で、および界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）を約０．０１％～約０．０５％（ｗ／ｖ）（例えば、約０．０１％～約０．０４％（ｗ／ｖ）、約０．０１５％～約０．０３５％（ｗ／ｖ）、約０．０２％～約０．０３％（ｗ／ｖ）、約０．０２５％（ｗ／ｖ）、または約０．０２％（ｗ／ｖ））の濃度で、約５．０～６．０（例えば、約５．０～５．５または約５．０）のｐＨで含む医薬製剤も提供する。

[00064]本明細書で提供される医薬製剤は、温度、湿度、時間および物理的運動（例えば、攪拌）などの変化に対する抵抗性が改善された増強された安定性を示す。本明細書で使用される場合、医薬製剤に関する用語「安定性」とは、医薬製剤内部でのＡＰＩ（例えば、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片）の構造、機能、および／または生物学的活性の最適保持（１００％である必要はない）のことである。本明細書で使用される場合、医薬製剤に関する用語「安定性の保持」とは、ある特定の条件下での貯蔵後の医薬製剤の安定性の、そのような貯蔵前の医薬製剤の安定性と比べた相対的値（パーセンテージで表される）のことである。

[00065]医薬製剤の安定性は、ＡＰＩの物理的安定性、化学的安定性および／または物理化学的安定性を含みうる。
[00066]物理的安定性は、タンパク質モノマーのパーセンテージにより反映されることが可能であり、このパーセンテージは、ある特定の条件下での貯蔵前および後のモノマーのパーセンテージの、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）による測定により決定できる。

[00067]化学的安定性は、脱アミド、ピログルタミン酸形成、および／またはリジン切詰めなどの化学的改変のレベルにより反映されることが可能であり、これらの改変はある特定の条件下での貯蔵前および後の電荷不均一性の、例えば、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）および／または陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）分析を用いた画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＩＥＦ）による測定により決定できる。ｉＣＩＥＦ結果は、主ピーク、酸性ピークおよび塩基性ピークを、主ピークのｐＩと共に含みうる。酸性ピークは酸性種を表し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）中の主ピークよりも早くまたは陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）分析中の主ピークよりも後で溶出する抗体変異体として定義される。酸性種は、シアル酸、脱アミド、非古典的ジスルフィド結合、トリスルフィド結合、高マンノース、糖化、マレイン酸（ｍａｌｅｕｒｉｃ ａｃｉｄ）による修飾、システイン化、還元型ジスルフィド結合、非還元種および／または断片を含む改変を通じて形成できる。塩基性ピークは塩基性種を表し、ＣＥＸ中の主ピークよりも後でおよびＡＥＸ分析中の主ピークよりも早く溶出する物質として定義される。塩基性種は、Ｃ末端Ｌｙｓ、Ｎ末端Ｇｌｕ、Ａｓｐの異性化、サクシニミド、Ｍｅｔ酸化、アミド化、不完全ジスルフィド結合、リーダー配列の不完全除去、ＳｅｒからＡｒｇへの突然変異、グリコシル化、断片および／または凝集を含む改変を通じて形成できる。主ピークとは主種のことであり、クロマトグラム上の主ピークとして溶出する標的抗体分子を表す。主種は非改変または非分解抗体と必ずしも一致しない。実際、主ピークは典型的には、３つのタイプの典型的翻訳後修飾：（１）Ｎ末端グルタミン（Ｇｌｎ）のピロＧｌｕへの環化；（２）重鎖Ｃ末端リジン（Ｌｙｓ）の除去；および（３）ＣＨ２ドメイン中の保存されたアスパラギン（Ａｓｎ）残基の中性オリゴ糖でのグリコシル化を有する抗体の種からなる。化学的安定化は、例えば、Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳおよびＳＥＣによる、ある特定の条件下での貯蔵の前および後のＡＰＩの純度（例えば、切詰めまたは断片化レベル）にも反映されることが可能である。

[00068]ＡＰＩの物理化学的安定化は、低分子量パーセンテージ（ＬＭＷ％）のレベルおよび／または高分子量パーセンテージ（ＨＭＷ％）のレベルにより反映されることが可能である。本明細書で使用される場合、用語「低分子量パーセンテージ」とは、用語「ＬＭＷ％」と互換的に使用され、低分子量（ＬＭＷ）不純物（例えば、Ｆａｂ、Ｆｃおよび一本鎖）のパーセンテージのことであり、この不純物は、加水分解、フリーラジカル誘導断片化、および酵素的切断などのいくつかの経路を通じて生じることがあり、製造、貯蔵、輸送および投与中の物理化学的不安定性を示す。本明細書で使用される場合、用語「高分子量パーセンテージ」とは、用語「ＨＭＷ％」と互換的に使用され、高分子量（ＨＭＷ）不純物（例えば、ダイマー、トリマーおよびマルチマー）のパーセンテージのことであり、この不純物は、分子相互作用および化学的架橋などの種々の機構を通じて形成され、製造、貯蔵、輸送および投与中のコロイド性および立体構造不安定性を示す。ＬＭＷ％およびＨＭＷ％は、例えば、ＳＥＣによる、ある特定の条件下での貯蔵の前および後の測定により決定できる。

[00069]医薬製剤の安定性は、熱安定性も含むことができ、これは、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって測定した場合、タンパク質が解け始める温度（すなわち、Ｔｍｏｎｓｅｔ）により、および／または第１の／第２のタンパク質ドメインが半分解ける温度（すなわち、Ｔｍ１／Ｔｍ２）により反映されることが可能である。

[00070]医薬製剤の安定性は、ＡＰＩの熱力学的安定性も含むことができ、この安定性は、動的光散乱（ＤＬＳ）により測定した場合、Ｔａｇｇおよび／またはｋＤにより反映されることが可能である。ＤＬＳは、溶液中の粒子（例えば、抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片）の流体力学サイズおよびサイズ分布の情報を与え、これは一般に時間と温度の関数として調べられる。タンパク質分子（例えば、抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片）がオリゴマー形成するまたは凝集する傾向を示し始める温度は凝集温度（Ｔａｇｇ）と名付けられる。Ｔａｇｇは緩衝剤組成に依存する。Ｔａｇｇが高くなるに従って、タンパク質（例えば、抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片）はそれだけ安定し、タンパク質はそれだけ長い保存可能期間を有すると考えられる。ＤＬＳにより与えられる情報は移動拡散係数を決定するためにも分析することができ、この係数は濃度の関数であり、移動拡散係数対濃度の分析により拡散相互作用パラメータｋＤが得られる。正のｋＤは反発相互作用を知らせ、負のｋＤは引力分子間相互作用を意味する。正のｋＤ値は反発分子間相互作用を表し、負のｋＤ値は引力分子間相互作用を表す。したがって、より大きな正のｋＤ値は凝集する傾向がそれだけ小さいことを意味する。

[00071]一部の実施形態では、抗体タンパク質の濃度、タンパク質の純度、タンパク質の活性、製剤のｐＨ、製剤の浸透圧、製剤の外見、製剤中の不溶性粒子、等は、医薬製剤の安定性の指標としての機能を果たしうる。タンパク質安定性を測定するための種々の分析技法は当技術分野で利用可能であり、Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、２４７～３０１頁、ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ Ｉｎｃ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ｐｒｅｓｓ（１９９１）およびＪｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９～９０頁（１９９３）に概説されている。一部の実施形態では、医薬製剤の安定性は、選択された期間、選択された条件で、当技術分野で公知の方法により測定可能である。

[00072]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＡＰＩの貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後に残っているモノマーのパーセンテージは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、約８０％～約１００％、約８５％～約９９％、約９０％～約９９％、または約９５％～約９９％が可能である。したがって、本開示の医薬製剤内のＡＰＩは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後、開始時点でのＡＰＩの物理的安定性と比べて、その少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．５％、または１００％でさえ保持できる。

[00073]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤内のＡＰＩの、貯蔵（４０℃で２または４週間）または繰り返される凍結解凍（３サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後のＬＭＷ不純物（例えば、Ｆａｂ、Ｆｃおよび一本鎖）は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、約０．１％～約３．４％、約０．１５％～約３．３５％、約０．２％～約３．３％、約０．３％～約３．２％、約０．４％～約３．１％、または約０．６％～約２％である。したがって、本開示の医薬製剤中のＡＰＩは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、貯蔵（４０℃で２または４週間）または繰り返される凍結解凍（３サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後、開始時点でのＡＰＩの物理化学的安定性と比べて、その少なくとも９６．６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９．０％、少なくとも９９．１％、少なくとも９９．２％、少なくとも９９．３％、少なくとも９９．４％、少なくとも９９．５％、少なくとも９９．６％、少なくとも９９．７％、少なくとも９９．８％、または少なくとも９９．９％でさえ保持できる。特に、本明細書で提供される医薬製剤内のＡＰＩの、繰り返される３サイクルでの凍結解凍または２５℃で３日間の攪拌後のＬＭＷ不純物（例えば、Ｆａｂ、Ｆｃおよび一本鎖）は、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、約０．１％にすぎず、したがって、本開示の医薬製剤中のＡＰＩは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより測定した場合、繰り返される３サイクルでの凍結解凍または２５℃で３日間の攪拌後、開始時点でのＡＰＩの物理化学的安定性と比べて、その約９９．９％保持できる。

[00074]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＡＰＩの、貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後の純度は、非還元Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳにより測定された場合、約９０％～約９９％、約９１％～約９９％、約９２％～約９９％、約９３％～約９９％、約９４％～約９９％、または約９５％～約９９％であることが可能である。したがって、本開示の医薬製剤内のＡＰＩは、非還元Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳにより測定された場合、貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後、開始時点でのＡＰＩの化学的安定性と比べて、その少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９．０％、少なくとも９９．１％、少なくとも９９．２％、少なくとも９９．３％、少なくとも９９．４％、少なくとも９９．５％、少なくとも９９．６％、少なくとも９９．７％、少なくとも９９．８％、少なくとも９９．９％、または１００％でさえ保持できる。

[00075]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＡＰＩの、貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後の純度は、還元型Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳにより測定された場合、約９０％～約１００％、約９１％～約１００％、約９２％～約１００％、約９３％～約１００％、約９４％～約１００％、または約９５％～約１００％であることが可能である。したがって、本開示の医薬製剤内のＡＰＩは、還元型Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳにより測定された場合、貯蔵（４０℃で４週間）または繰り返される凍結解凍（５サイクルの凍結解凍）または攪拌（２５℃で３日間の攪拌）後、開始時点でのＡＰＩの化学的安定性と比べて、その少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９．０％、少なくとも９９．１％、少なくとも９９．２％、少なくとも９９．３％、少なくとも９９．４％、少なくとも９９．５％、少なくとも９９．６％、少なくとも９９．７％、少なくとも９９．８％、少なくとも９９．９％、または１００％でさえ保持できる。

[00076]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＴｍｏｎｓｅｔは、ＤＳＣにより測定した場合、約５０℃以上、約５０．５℃以上、約５１℃以上、約５１．５℃以上、約５２℃以上、約５２．５℃以上、または約５３℃以上である。

[00077]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＴｍ１は、ＤＳＣにより測定した場合、約６０℃以上、約６０．１℃以上、約６０．２℃以上、約６０．３℃以上、約６０．４℃以上、約６０．５℃以上、約６０．６℃以上、約６０．７℃以上、約６０．８℃以上、約６０．９℃以上、約６１℃以上、約６１．２℃以上、約６１．４℃以上、約６１．６℃以上、約６１．８℃以上、約６２℃以上、約６２．２℃以上、約６２．４℃以上、約６２．６℃以上、約６２．８℃以上、約６３℃以上、または約６３．２℃以上である。

[00078]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＴｍ２は、ＤＳＣにより測定した場合、約７５℃以上、約７６℃以上、約７６．１℃以上、約７６．２℃以上、約７６．３℃以上、約７６．４℃以上、約７６．５℃以上、約７６．６℃以上、約７６．７℃以上、約７６．８℃以上、約７６．９℃以上、約７７℃以上、約７７．２℃以上、約７７．４℃以上、約７７．６℃以上、約７７．８℃以上、約７８℃以上、約７８．１℃以上、約７８．２℃以上、または約７８．３℃以上である。

[00079]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のｋＤは、２０℃～４０℃でＤＬＳにより測定した場合、約１０以上、約１１以上、約１２以上、約１２．５以上、約１３以上、約１３．５以上、約１４以上、約１５以上、約１６以上、約１７以上、約１８以上、または約１９以上である。

[00080]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤のＴａｇｇは、２ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬの濃度でＡＰＩを含む製剤についてＤＬＳにより測定した場合、約５９℃以上、約５９．２℃以上、約５９．４℃以上、約５９．６℃以上、約５９．８℃以上、約６０℃以上、約６０．２℃以上、約６０．４℃以上、約６０．６℃以上、約６０．８℃以上、約６１℃以上、約６１．２℃以上、または約６１．４℃以上である。

[00081]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤の安定性は、貯蔵（例えば、４０℃で１、２または４週間）、繰り返される凍結解凍（例えば、３または５サイクルでの－７０℃～室温の凍結解凍）または攪拌（例えば、３００ｒｐｍで、２５℃、１または３日間）後の製剤の外見により測定可能である。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤では目に見える粒子は観察されなかった。

[00082]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤の安定性は、貯蔵（例えば、４０℃で１、２または４週間）、繰り返される凍結解凍（例えば、３または５サイクルでの－７０℃～室温の凍結解凍）または攪拌（例えば、３００ｒｐｍで、２５℃、１または３日間）後の製剤のｐＨにより測定可能である。ある特定の実施形態では、開始時点での製剤と比べた場合、貯蔵後の本開示の医薬製剤ではｐＨの変化はほとんど観察されなかった。

[00083]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤の安定性は、貯蔵（例えば、４０℃で２または４週間）、繰り返される凍結解凍（例えば、３または５サイクルでの－７０℃～室温の凍結解凍）または攪拌（例えば、３００ｒｐｍで、２５℃、１または３日間）後の製剤のＡＰＩ濃度により測定可能である。ある特定の実施形態では、分光光度計を使用するＵＶ２８０読みにより決定した場合、ＡＰＩ濃度の変化は、開始時点の製剤のＡＰＩ濃度と比べて、２％以下、１．９％以下、１．８％以下、１．７％以下、１．６％以下、１．５％以下、１．４％以下、１．３％以下、１．２％以下、１．１％以下、１．０％以下、０．９％以下、０．８％以下、０．７％以下、０．６％以下、０．５％以下、０．４％以下、０．３％以下、０．２％以下、０．１％以下である。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤ではＡＰＩ濃度の変化は観察されなかった。

[00084]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤の安定性は、例えば、実施例４の表１８に示されるように、貯蔵（例えば、４０℃で４週間）、繰り返される凍結解凍（例えば、５サイクルでの－７０℃～室温の凍結解凍）または攪拌（例えば、３００ｒｐｍで、２５℃、３日間）後の製剤中の顕微鏡でないと見えない粒子の数により測定可能である。特に、攪拌（例えば、３００ｒｐｍで、２５℃、３日間）後の製剤中の顕微鏡でないと見えない粒子の数は、１５００／ｍＬ、１４００／ｍＬ、１３００／ｍＬ、１２００／ｍＬ、１１００／ｍＬ、１０００／ｍＬ、９００／ｍＬ、８００／ｍＬ、７００／ｍＬ、６００／ｍＬ、５００／ｍＬ、４００／ｍＬ、３００／ｍＬ、２００／ｍＬ、１００／ｍＬ、９０／ｍＬ、８０／ｍＬ、７０／ｍＬ、６０／ｍＬ、５０／ｍＬ、４０／ｍＬ、３０／ｍＬ、２０／ｍＬ、１０／ｍＬより少ない、または２／ｍＬよりさえ少ない。顕微鏡でないと見えない粒子は、患者内で抗薬物抗体を誘導することがあり、これは治療効果に悪影響を与えるおよび／または異常な免疫応答を誘発することがある。

[00085]一部の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤の安定性は、ＡＰＩの活性（例えば、結合能力）により測定可能である。ＡＰＩの活性は、例えば、ＡＰＩの機能を示すインビトロ、インビボおよび／またはインサイツアッセイを使用して測定可能である。本開示の医薬製剤中のＡＰＩの安定性の保持は、例えば、アッセイの変動性に応じて、４０℃で４週間の貯蔵後、約５０％～約１００％またはそれよりも多いＡＰＩの活性の保持を含むことができる。例えば、本明細書で提供される医薬製剤は、結合アッセイにより測定した場合、本明細書で提供される医薬組成物のＡＰＩの貯蔵または繰り返される凍結解凍または攪拌後、開始時点のＡＰＩの活性と比べて、その約８０％～約９９％、約８５％～約９９％、約８６％～約９９％、約８８％～約９９％、約９０％～約９９％、約９２％～約９９％、約９４％～約９９％、約９６％～約９９％、または約９８％～約９９％保持できる。

[00086]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤のＡＰＩの活性の保持は、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％であることが可能である。一部の他の実施形態では、本開示の医薬製剤のＡＰＩの活性の保持は、医薬組成物のＡＰＩの貯蔵または繰り返される凍結解凍または攪拌後、開始時点のＡＰＩの活性と比べて１００％よりも大きい、例えば、１０２％、１０４％、１０６％、１０８％、１１０％もしくは１１２％またはそれよりも大きいことが可能である。

[00087]用語「開始時点」とは、本明細書で使用される場合、ＡＰＩが医薬製剤において最初に調製されるまたは品質（例えば、物理的および／または化学的安定性）について最初に試験される時間のことであり、この時間はＴ０で表すことができる。

[00088]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、長期間にわたって安定に維持でき、上記のＡＰＩの安定性および／または機能的活性は長い期間比較的一定に維持される。本開示の医薬製剤は、長期安定性の試験を受けてよく、例えば、医薬製剤は２～８℃で１年間保存することができ、試料は測定のため１月目、３月目、６カ月目および１２カ月目に採取される。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、少なくとも１カ月間、少なくとも２カ月間、少なくとも３カ月間、少なくとも４カ月間、少なくとも５カ月間、少なくとも６カ月間、少なくとも７カ月間、少なくとも８カ月間、少なくとも９カ月間、少なくとも１０カ月間、少なくとも１１カ月間、または少なくとも１２カ月間安定で機能的に維持できる。

[00089]本開示の医薬製剤は、法律により製薬使用の承認を与える権限のある国際または国内当局、例えば、中国国家薬品監督管理局（ＮＭＰＡ）、アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）、欧州医薬品審査庁（ＥＭＥＡ）、日本の厚生労働省（ＭＨＬＷ）、豪州治療製品局（ＴＧＡ）、台湾衛生福利部食品薬物管理署（ＴＦＤＡ）、またはこの権限を持つその後続機関（複数可）、特に好ましくはＮＭＰＡまたはこの権限を持つその後続機関（複数可）により製薬使用の承認を受けることができる。

[00090]本開示の利点の１つは、製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および／または貯蔵中に生じることがあるストレスに対する安定化され、減少した毒性および増加した治療有効性を有する医薬製剤を供給することである。本明細書で提供される安定化した医薬製剤は、投与の容易さを増し、投与の頻度を減らし、注射の際に患者が味わう苦痛の量を減らしうる。例えば、医薬製剤が製造、梱包、サブパッケージング、輸送、貯蔵および投与中に物理的、化学的、物理化学的、および／または熱的安定性を維持している場合は、静脈内または皮下の非経口経路による投与のほうが安全で効果的である。

[00091]製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および貯蔵中に生じるストレスに対する医薬組成物中のＡＰＩの安定化は、主に医薬組成物中の種々の賦形剤により与えられる。本明細書で使用される場合、用語「賦形剤」とは、緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、等張化剤、凍結保護剤、充填剤、希釈剤、凍結乾燥保護剤、ビヒクル、金属イオン源、抗酸化剤、保存剤および／またはキレート剤などの治療的不活性物質のことであり、これらの物質は当技術分野では周知であり、その記載は、例えば、Ｗａｎｇ Ｗ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２０３：１～６０頁（２０００）およびＷａｎｇ Ｗ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１８５：１２９～８８頁（１９９９）に見ることができる。本明細書で提供される医薬製剤中の賦形剤の組成は、タンパク質分解の程度を最小限に抑え／タンパク質安定性を最適化し、その結果、ＡＰＩの安全性および有効性を保持した。本開示の医薬製剤で使用される賦形剤の詳細な記載は以下の通りである。

[00092]緩衝剤
[00093]医薬製剤の所望のｐＨを維持すれば、医薬製剤の安定性、有効性、および保存可能期間によい影響を及ぼすと考えられる。ｐＨを維持するため、１つまたは複数の緩衝試薬または緩衝剤を医薬製剤中に含めることができる。用語「緩衝剤」とは、その酸－塩基共役成分の作用によりｐＨの変化に抵抗する緩衝液のことであり、これらの成分は医薬製剤中で使用されても安全であることが分かっており、製剤のｐＨを所望の範囲に維持するまたは制御する。弱酸性ｐＨから弱アルカリ性ｐＨの範囲（例えば、ｐＨ５．０～８．０）にｐＨを制御できる受け入れ可能な緩衝剤は、リン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、アルギニン緩衝剤、２－アミノ－２－ヒドロキシメチル－１，３－プロパンジオール（ＴＲＩＳ）緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、アスパラギン酸緩衝剤、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤、クエン酸＆アルギニン緩衝剤、および同類の物のうちの１つまたは任意の組合せを含むがこれらに限定されない。

[00094]本開示の医薬製剤は、医薬製剤が、５．０～５．５、５．５～６．５、または６．５～８．０のｐＨなどの５．０～８．０のｐＨを有することを可能にする緩衝剤を含みうる。一部の実施形態では、適切な緩衝剤は、本開示の医薬製剤が５．０～６．０のｐＨを有することを可能にする。一部の実施形態では、適切な緩衝剤は、本開示の医薬製剤が５．０～５．５のｐＨを有することを可能にする。特に、本開示の医薬製剤のｐＨは、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９または８．０などの上に収載されるｐＨ範囲のいかなるｐＨ値でもよい。好ましい実施形態では、適切な緩衝剤は、本開示の医薬製剤が約５．０のｐＨを有することを可能にする。

[00095]医薬製剤のｐＨを所望の範囲内に制御できる緩衝剤の例は、酢酸緩衝剤、アルギニン緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、アスパラギン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、および他の有機または無機酸緩衝剤を含む。これらの緩衝剤は、単独で使用可能であり、あるいは、これらの緩衝剤のうちの２つまたはそれよりも多くを組み合わせて使用してもよい。

[00096]「グルタミン酸緩衝剤」とは、「グルタメート緩衝剤」と互換的に使用されるが、任意選択で、そのそれぞれの共役塩基と平衡状態にあるグルタミン酸を含む緩衝剤のことである。グルタミン酸緩衝剤のグルタミン酸型は、グルタミン酸、グルタメートイオンおよび／または、グルタメートのナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムもしくはマグネシウム塩などのグルタメート塩を含むグルタメートを含みうる。この用語は、グルタミン酸のＬ型とＤ型の両方を含む。グルタミン酸緩衝剤の緩衝能は、グルタミン酸のｐＫａ値と高度に関係している。アミノ酸のバッファーゾーンはそのｐＫａ値近傍のｐＨ範囲であることはよく認められている。グルタミン酸は２．２、９．７のｐＫａ値、ならびに４．３の側鎖ｐＫａを有し、アミノ酸のｐＫａ値の詳細な記載は、例えば、Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ、ｔｈｅ Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ－Ｈａｓｓｅｌｂａｌｃｈ Ｅｑｕａｔｉｏｎ、ａｎｄ Ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｐｏｉｎｔｓ．（２０２１年９月２８日）、ｈｔｔｐｓ：／／ｃｈｅｍ．ｌｉｂｒｅｔｅｘｔｓ．ｏｒｇ／＠ｇｏ／ｐａｇｅ／３６４６８から、２０２１年１０月１２日検索）に見ることができる。したがって、グルタメート緩衝剤は、おおよそこれらの値の緩衝能を有すると考えられる。

[00097]「ヒスチジン緩衝剤」とは、ヒスチジンイオンを含む緩衝剤のことである。ヒスチジン緩衝剤は、ヒスチジン、ヒスチジン塩酸塩、ヒスチジン酢酸塩、ヒスチジンリン酸塩、ヒスチジン硫酸塩および同類の物のうちの１つまたは複数を含みうる。ヒスチジンは、１．８、９．２のｐＫａ値、ならびに６．０の側鎖ｐＫａを有し、したがって、ヒスチジン緩衝剤は、おおよそこれらの値の緩衝能を有すると考えられる。一部の実施形態では、ヒスチジン緩衝剤はヒスチジン－ヒスチジン塩酸塩緩衝剤である。一部の実施形態では、ヒスチジン緩衝剤のｐＨは、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、または６．５などの５．５～６．５の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[00098]用語「アスパラギン酸緩衝剤」とは、「アルパルテート緩衝剤」と互換的に使用されるが、任意選択で、その共役塩基と平衡状態にあるアスパラギン酸を含む緩衝剤のことである。この緩衝剤は、アスパラギン酸ナトリウム、アスパラギン酸カリウム、アスパラギン酸アンモニウム、アスパラギン酸カルシウムまたはアスパラギン酸マグネシウムなどのアスパラギン酸塩から作ることができる。アスパラギン酸は、２．１、９．８のｐＫａ、ならびに３．９の側鎖ｐＫａを有し、アスパラギン酸のｐＫａ値の詳細な記載は、例えば、Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ、ｔｈｅ Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ－Ｈａｓｓｅｌｂａｌｃｈ Ｅｑｕａｔｉｏｎ、ａｎｄ Ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｐｏｉｎｔｓ．（２０２１年９月２８日）、ｈｔｔｐｓ：／／ｃｈｅｍ．ｌｉｂｒｅｔｅｘｔｓ．ｏｒｇ／＠ｇｏ／ｐａｇｅ／３６４６８から、２０２１年１０月１２日検索）に見ることができる。したがって、アスパラギン酸緩衝剤は、おおよそこれらの値の緩衝能を有すると考えられる。

[00099]「クエン酸緩衝剤」はクエン酸イオンを含む緩衝剤である。クエン酸緩衝剤は、クエン酸、クエン酸一ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、クエン酸一カリウム、クエン酸二カリウム、クエン酸三カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、および同類の物のうちの１つまたは複数を含みうる。クエン酸緩衝剤のｐＨは、３．０～６．２の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[000100]用語「アルギニン緩衝剤」とは、本明細書で使用される場合、ＨＣｌなどのその共役酸と平衡状態にあるアルギニンを含む緩衝剤のことである。アルギニンは、２．１、９．０のｐＫａ、ならびに１２．５の側鎖ｐＫａを有し、アルギニンのｐＫａ値の詳細な記載は、例えば、Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ、ｔｈｅ Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ－Ｈａｓｓｅｌｂａｌｃｈ Ｅｑｕａｔｉｏｎ、ａｎｄ Ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｐｏｉｎｔｓ．（２０２１年９月２８日）、ｈｔｔｐｓ：／／ｃｈｅｍ．ｌｉｂｒｅｔｅｘｔｓ．ｏｒｇ／＠ｇｏ／ｐａｇｅ／３６４６８から、２０２１年１０月１２日検索）に見ることができる。したがって、アルギニン緩衝剤は、おおよそこれらの値の緩衝能を有すると考えられる。

[000101]用語「アセテート緩衝剤」とは、「酢酸緩衝剤」と互換的に使用されるが、そのそれぞれの共役塩基と平衡状態にある酢酸を含む緩衝剤のことである。その緩衝剤は、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸アンモニウム、酢酸カルシウムまたは酢酸マグネシウムなどの酢酸塩から作ることができる。クエン酸緩衝剤のｐＨは、３．６～５．８の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[000102]用語「グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤」とは、用語「グルタミン酸およびヒスチジン緩衝剤」、「グルタミン酸／ヒスチジン緩衝剤」または「グルタミン／ヒスチジン緩衝剤」と互換的に使用できるが、グルタミン酸緩衝剤およびヒスチジン緩衝剤を含む緩衝系のことであり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤のグルタミン酸部分は、グルタメートのナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたはマグネシウム塩などの、グルタメート塩を含むグルタミン酸、グルタメートイオンおよび／またはグルタメートを含みうる。この用語は、グルタミン酸のＬ型とＤ型の両方を含む。一部の実施形態では、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤はグルタミン酸およびヒスチジンからなり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。一部の実施形態では、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤のｐＨは、５．０～８．０の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[000103]用語「アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤」とは、用語「アスパラギン酸およびヒスチジン緩衝剤」または「アスパラギン酸／ヒスチジン緩衝剤」と互換的に使用できるが、アスパラギン酸緩衝剤およびヒスチジン緩衝剤を含む緩衝系のことであり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤のアスパラギン酸型は、アルパルテートのナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたはマグネシウム塩などの、アルパルテート塩を含むアスパラギン酸、アルパルテートイオンおよび／またはアルパルテートを含みうる。この用語は、アスパラギン酸のＬ型とＤ型の両方を含む。一部の実施形態では、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤はアスパラギン酸およびヒスチジンからなり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。一部の実施形態では、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤のｐＨは、５．０～８．０の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[000104]用語「クエン酸＆アルギニン緩衝剤」とは、用語「クエン酸およびアルギニン緩衝剤」または「クエン酸／アルギニン緩衝剤」と互換的に使用することができるが、クエン酸緩衝剤およびアルギニン緩衝剤を含む緩衝系のことであり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。一部の実施形態では、クエン酸＆アルギニン緩衝剤はクエン酸およびアルギニンからなり、任意選択で、ＨＣｌまたはＮａＯＨなどの最終ｐＨを調整するための酸または塩基を有する。一部の実施形態では、クエン酸＆アルギニン緩衝剤のｐＨは、４．０～８．０の範囲のいかなるｐＨ値でも可能である。

[000105]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を約５．０～８．０のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９または８．０のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０～６．０のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０～５．５のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０のｐＨで含む。

[000106]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、アスパラギン酸およびヒスチジンからなるアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９または８．０のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、アスパラギン酸およびヒスチジンからなるアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０～６．０のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、アスパラギン酸およびヒスチジンからなるアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０～５．５のｐＨで含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、アスパラギン酸およびヒスチジンからなるアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約５．０のｐＨで含む。

[000107]緩衝剤の濃度とは、本明細書で使用される場合、緩衝剤中の緩衝イオンの濃度のことである。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される緩衝剤の適切な濃度は、１～１００ｍｍｏｌ／Ｌでよい。一部の実施形態では、緩衝剤の濃度は上記範囲内のいずれかの濃度値である。例えば、緩衝剤の濃度は、約１０～９０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～８０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～７０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌ、または約２０ｍｍｏｌ／Ｌである。一部の実施形態では、緩衝剤の濃度は上記範囲内のいずれかの濃度値である。例えば、緩衝剤の濃度は、医薬製剤の特定の緩衝剤および所望の安定性に応じて、約１１～２９ｍｍｏｌ／Ｌ、約１２～２８ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３～２７ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４～２６ｍｍｏｌ／Ｌ、約１５～２５ｍｍｏｌ／Ｌ、約１６～２４ｍｍｏｌ／Ｌ、約１７～２３ｍｍｏｌ／Ｌ、約１８～２２ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１９～２１ｍｍｏｌ／Ｌである。

[000108]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の緩衝剤および所望の安定性に応じて、緩衝剤を少なくとも２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８８ｍｍｏｌ／Ｌ 少なくとも８９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９８ｍｍｏｌ／Ｌ、または少なくとも９９ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。

[000109]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の緩衝剤および所望の安定性に応じて、緩衝剤を最大で２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８８ｍｍｏｌ／Ｌ 最大で８９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９８ｍｍｏｌ／Ｌ、または最大で９９ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。

[000110]緩衝剤の他の濃度も、緩衝剤が、製造、梱包、サブパッケージング、輸送、投与および／または貯蔵などのある特定のシナリオでの製剤の選択されたｐＨを維持するのに十分な緩衝能を有することを条件として、本開示の想定内である。

[000111]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を１～１００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を上記の範囲内のいずれかの濃度値で含む。例えば、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約１０～９０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～８０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～７０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌ、または約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、約１１～２９ｍｍｏｌ／Ｌ、約１２～２８ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３～２７ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４～２６ｍｍｏｌ／Ｌ、約１５～２５ｍｍｏｌ／Ｌ、約１６～２４ｍｍｏｌ／Ｌ、約１７～２３ｍｍｏｌ／Ｌ、約１８～２２ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１９～２１ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、上記範囲内のいずれかの濃度値で含む。

[000112]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、少なくとも２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも１９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも２９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも３９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも４９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも５９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも６９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７８ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも７９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも８８ｍｍｏｌ／Ｌ 少なくとも８９ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９１ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９２ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９３ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９４ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９５ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９６ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９７ｍｍｏｌ／Ｌ、少なくとも９８ｍｍｏｌ／Ｌ、または少なくとも９９ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、上記の範囲内のいずれかの濃度値で含む。

[000113]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、最大で２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で１９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で２９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で３９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で４９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で５９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で６９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７８ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で７９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で８８ｍｍｏｌ／Ｌ 最大で８９ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９１ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９２ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９３ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９４ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９５ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９６ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９７ｍｍｏｌ／Ｌ、最大で９８ｍｍｏｌ／Ｌ、または最大で９９ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、グルタミン酸およびヒスチジンからなるグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤を、上記の範囲内のいずれかの濃度値で含む。

[000114]アスパラギン酸はグルタミン酸とは１つのメチレン基のみが異なるので、したがって、上記のグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤中のグルタミン酸をアスパラギン酸で置き換えると類似する技術的効果（例えば、完成した医薬製剤の正確なｐＨを維持する）が達成されると予測できる。

[000115]安定化剤
[000116]本開示の医薬製剤は、１つまたは複数の安定化剤を含みうる。本明細書で使用される場合、用語「安定化剤」とは、完成した医薬製剤が投与に適しているように、ＡＰＩの構造の維持を促進することができるおよび／もしくは静電気的タンパク質－タンパク質相互作用を最小限に抑える薬剤のことであり、ならびに／または所望のモル浸透圧濃度（例えば、等張力、低浸透圧性または高浸透圧性）を医薬製剤に与える薬剤のことである。言い換えると、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤は、薬物に適切な浸透圧を分け与えて、薬物に接触する細胞膜を横切る水のネットフローを回避することができる等張剤の役目も果たすことができる。一部の実施形態では、本開示の製剤は、ヒト血液と実質的に同じ浸透圧を有する。

[000117]例示的安定化剤は、ポリオール（例えば、ソルビトール、マンニトール）、糖（例えば、グルコース、スクロース、トレハロース、ラクトース、ブドウ糖）、および／または塩（例えば、塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、塩化カリウム、リン酸カルシウム）を含むがこれらに限定されない。

[000118]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤は、糖から選択される。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤は、スクロース、トレハロース、またはその組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤は、ポリオールから選択される。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤は、ソルビトール、マンニトール、またはその組合せからなる群から選択される。

[000119]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤で使用される安定化剤のタイプおよび濃度は、最終製剤の所望のモル浸透圧濃度に基づいて決定することができる。例えば、約５％のソルビトールは、等張力を達成することができ、等張力を達成するには約９％のスクロースが必要とされると考えられる。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、安定化剤を約０．５％～５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。一部の実施形態では、安定化剤の濃度は上記範囲内のいずれかの値である。例えば、本開示の医薬製剤は、安定化剤を、約１％～約４０％（ｗ／ｖ）、約１．５％～約３９．５％（ｗ／ｖ）、約２％～約３９％（ｗ／ｖ）、約２．５％～約３８．５％（ｗ／ｖ）、約３％～約３８％（ｗ／ｖ）、約３％～約３６％（ｗ／ｖ）、約３％～約３４％（ｗ／ｖ）、約３％～約３２％（ｗ／ｖ）、約３％～約３０％（ｗ／ｖ）、約３％～約２８％（ｗ／ｖ）、約３％～約２６％（ｗ／ｖ）、約３％～約２４％（ｗ／ｖ）、約３％～約２２％（ｗ／ｖ）、約３％～約２０％（ｗ／ｖ）、約３．２％～約１８％（ｗ／ｖ）、約３．４％～約１６％（ｗ／ｖ）、約２％～約３０％（ｗ／ｖ）、約３％～約２０％（ｗ／ｖ）、約３．２％～約１８％（ｗ／ｖ）、約３．４％～約１６％（ｗ／ｖ）、約３．６％～約１４％（ｗ／ｖ）、約４％～約１２％（ｗ／ｖ）、約６％～約１０％（ｗ／ｖ）、または約８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000120]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の安定化剤および所望の安定性に応じて、安定化剤を、少なくとも０．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１％（ｗ／ｖ）、少なくとも１．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２％（ｗ／ｖ）、少なくとも２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３％（ｗ／ｖ）、少なくとも３．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４％（ｗ／ｖ）、少なくとも４．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも５％（ｗ／ｖ）、少なくとも５．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも６％（ｗ／ｖ）、少なくとも６．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも７％（ｗ／ｖ）、少なくとも７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも８％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．１％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．２％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．３％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．４％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．６％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．７％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．８％（ｗ／ｖ）、少なくとも８．９％（ｗ／ｖ）、少なくとも９％（ｗ／ｖ）、少なくとも９．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも１０．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１１％（ｗ／ｖ）、少なくとも１１．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１２％（ｗ／ｖ）、少なくとも１２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１３％（ｗ／ｖ）、少なくとも１３．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１４％（ｗ／ｖ）、少なくとも１４．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１５．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１６％（ｗ／ｖ）、少なくとも１６．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１７％（ｗ／ｖ）、少なくとも１７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１８％（ｗ／ｖ）、少なくとも１８．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも１９％（ｗ／ｖ）、少なくとも１９．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２０％（ｗ／ｖ）、少なくとも２０．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２１％（ｗ／ｖ）、少なくとも２１．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２２％（ｗ／ｖ）、少なくとも２２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２３％（ｗ／ｖ）、少なくとも２３．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２４％（ｗ／ｖ）、少なくとも２４．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２５．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２６％（ｗ／ｖ）、少なくとも２６．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２７％（ｗ／ｖ）、少なくとも２７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２８％（ｗ／ｖ）、少なくとも２８．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも２９％（ｗ／ｖ）、少なくとも２９．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３０％（ｗ／ｖ）、少なくとも３０．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３１％（ｗ／ｖ）、少なくとも３１．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３２％（ｗ／ｖ）、少なくとも３２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３３％（ｗ／ｖ）、少なくとも３３．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３４％（ｗ／ｖ）、少なくとも３４．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３５．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３６％（ｗ／ｖ）、少なくとも３６．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３７％（ｗ／ｖ）、少なくとも３７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３８％（ｗ／ｖ）、少なくとも３８．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも３９％（ｗ／ｖ）、少なくとも３９．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４０％（ｗ／ｖ）、少なくとも４０．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４１％（ｗ／ｖ）、少なくとも４１．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４２％（ｗ／ｖ）、少なくとも４２．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４３％（ｗ／ｖ）、少なくとも４３．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４４％（ｗ／ｖ）、少なくとも４４．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４５．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４６％（ｗ／ｖ）、少なくとも４６．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４７％（ｗ／ｖ）、少なくとも４７．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４８％（ｗ／ｖ）、少なくとも４８．５％（ｗ／ｖ）、少なくとも４９％（ｗ／ｖ）、または少なくとも４９．５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000121]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の安定化剤および所望の安定性に応じて、安定化剤を、最大１％（ｗ／ｖ）、最大１．５％（ｗ／ｖ）、最大２％（ｗ／ｖ）、最大２．５％（ｗ／ｖ）、最大３％（ｗ／ｖ）、最大３．５％（ｗ／ｖ）、最大４％（ｗ／ｖ）、最大４．５％（ｗ／ｖ）、最大５％（ｗ／ｖ）、最大５．５％（ｗ／ｖ）、最大６％（ｗ／ｖ）、最大６．５％（ｗ／ｖ）、最大７％（ｗ／ｖ）、最大７．５％（ｗ／ｖ）、最大８％（ｗ／ｖ）、最大８．１％（ｗ／ｖ）、最大８．２％（ｗ／ｖ）、最大８．３％（ｗ／ｖ）、最大８．４％（ｗ／ｖ）、最大８．５％（ｗ／ｖ）、最大８．６％（ｗ／ｖ）、最大８．７％（ｗ／ｖ）、最大８．８％（ｗ／ｖ）、最大８．９％（ｗ／ｖ）、最大９％（ｗ／ｖ）、最大９．５％（ｗ／ｖ）、最大１０％（ｗ／ｖ）、最大１０．５％（ｗ／ｖ）、最大１１％（ｗ／ｖ）、最大１１．５％（ｗ／ｖ）、最大１２％（ｗ／ｖ）、最大１２．５％（ｗ／ｖ）、最大１３％（ｗ／ｖ）、最大１３．５％（ｗ／ｖ）、最大１４％（ｗ／ｖ）、最大１４．５％（ｗ／ｖ）、最大１５％（ｗ／ｖ）、最大１５．５％（ｗ／ｖ）、最大１６％（ｗ／ｖ）、最大１６．５％（ｗ／ｖ）、最大１７％（ｗ／ｖ）、最大１７．５％（ｗ／ｖ）、最大１８％（ｗ／ｖ）、最大１８．５％（ｗ／ｖ）、最大１９％（ｗ／ｖ）、最大１９．５％（ｗ／ｖ）、最大２０％（ｗ／ｖ）、最大２０．５％（ｗ／ｖ）、最大２１％（ｗ／ｖ）、最大２１．５％（ｗ／ｖ）、最大２２％（ｗ／ｖ）、最大２２．５％（ｗ／ｖ）、最大２３％（ｗ／ｖ）、最大２３．５％（ｗ／ｖ）、最大２４％（ｗ／ｖ）、最大２４．５％（ｗ／ｖ）、最大２５％（ｗ／ｖ）、最大２５．５％（ｗ／ｖ）、最大２６％（ｗ／ｖ）、最大２６．５％（ｗ／ｖ）、最大２７％（ｗ／ｖ）、最大２７．５％（ｗ／ｖ）、最大２８％（ｗ／ｖ）、最大２８．５％（ｗ／ｖ）、最大２９％（ｗ／ｖ）、最大２９．５％（ｗ／ｖ）、最大３０％（ｗ／ｖ）、最大３０．５％（ｗ／ｖ）、最大３１％（ｗ／ｖ）、最大３１．５％（ｗ／ｖ）、最大３２％（ｗ／ｖ）、最大３２．５％（ｗ／ｖ）、最大３３％（ｗ／ｖ）、最大３３．５％（ｗ／ｖ）、最大３４％（ｗ／ｖ）、最大３４．５％（ｗ／ｖ）、最大３５％（ｗ／ｖ）、最大３５．５％（ｗ／ｖ）、最大３６％（ｗ／ｖ）、最大３６．５％（ｗ／ｖ）、最大３７％（ｗ／ｖ）、最大３７．５％（ｗ／ｖ）、最大３８％（ｗ／ｖ）、最大３８．５％（ｗ／ｖ）、最大３９％（ｗ／ｖ）、最大３９．５％（ｗ／ｖ）、最大４０％（ｗ／ｖ）、最大４０．５％（ｗ／ｖ）、最大４１％（ｗ／ｖ）、最大４１．５％（ｗ／ｖ）、最大４２％（ｗ／ｖ）、最大４２．５％（ｗ／ｖ）、最大４３％（ｗ／ｖ）、最大４３．５％（ｗ／ｖ）、最大４４％（ｗ／ｖ）、最大４４．５％（ｗ／ｖ）、最大４５％（ｗ／ｖ）、最大４５．５％（ｗ／ｖ）、最大４６％（ｗ／ｖ）、最大４６．５％（ｗ／ｖ）、最大４７％（ｗ／ｖ）、最大４７．５％（ｗ／ｖ）、最大４８％（ｗ／ｖ）、最大４８．５％（ｗ／ｖ）、最大４９％（ｗ／ｖ）、最大４９．５％（ｗ／ｖ）、または最大５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000122]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はスクロースを含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はスクロースを、約４％～１２％（ｗ／ｖ）、約５％～１１％（ｗ／ｖ）、約６％～１０％（ｗ／ｖ）、約７％～９％（ｗ／ｖ）または約８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はスクロースを、約８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000123]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はソルビトールを含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はソルビトールを、約０．５％～１０％（ｗ／ｖ）、約１％～９．５％（ｗ／ｖ）、約１．５％～９％（ｗ／ｖ）、約２％～８．５％（ｗ／ｖ）、約２．５％～８％（ｗ／ｖ）、約３％～７．５％（ｗ／ｖ）、約３．５％～７％（ｗ／ｖ）、約４％～６．５％（ｗ／ｖ）、約４．５％～６％（ｗ／ｖ）、約５％～５．５％（ｗ／ｖ）、または約４．５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、ソルビトールを約４．５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000124]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はトレハロースを含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はトレハロースを、約４％～１４％（ｗ／ｖ）、約５％～１３％（ｗ／ｖ）、約６％～１２％（ｗ／ｖ）、約７％～１１％（ｗ／ｖ）、約７．５％～１０．５％（ｗ／ｖ）、約８％～１０％（ｗ／ｖ）、約８．２％～９．８％（ｗ／ｖ）、約８．４％～９．６％（ｗ／ｖ）、約８．６％～９．４％（ｗ／ｖ）、約８．８％～９．２％（ｗ／ｖ）、約９．０％（ｗ／ｖ）、または約８．８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はトレハロースを約８．８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000125]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はモル浸透圧濃度を、約２００～４００ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇ、約２５０～３５０ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇ、約２８０～３２０ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇ、約２８５ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇ、約２９０ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇ、または約３００ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇの範囲で有する。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、３００±１０ｍＯｓｍｏｌ．ｋｇのモル浸透圧濃度を有する。

[000126]界面活性剤
[000127]本開示の医薬製剤は、例えば、液体製剤の工程、凍結乾燥製剤の凍結乾燥、再構成、および／または医薬製剤の輸送中にモル浸透圧濃度を調整する、凝集（例えば、境界面誘導凝集）、粒子形成および／または表面吸着（例えば、表面誘導分解）を予防する、制御する、または最小限に抑えるために、１つまたは複数の界面活性剤をさらに含みうる。具体的には、界面活性剤の表層は、タンパク質分子が境界面で十分な濃度（例えば、約界面活性剤のミセル濃度）で吸着するのを防ぐことができ、したがって、ＡＰＩの表面誘導分解を最小限に抑えることができる。本明細書で使用される場合、用語「界面活性剤」とは、物質が溶解している液体の表面張力を減少させるように機能する物質（例えば、親水性と疎水性の両方である両親媒性構造を有する有機物質）のことである。界面活性剤は、表面活性部分の電荷に応じてイオン性（例えば、アニオン、カチオン）および非イオン性界面活性剤に分類することができる。界面活性剤は当技術分野では周知であり、その記載は、例えば、Ｒａｎｄｏｌｐｈ Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｊｏｎｅｓ Ｌ．Ｓ．，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３：１５９～７５頁（２００２）に見ることができる。

[000128]例示的イオン性界面活性剤は、アニオン、カチオンおよび双性イオン界面活性剤を含むがこれらに限定されない。例示的アニオン界面活性剤は、脂肪酸塩、セッケン、ラウリル硫酸アンモニウム、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）および他のアルキル硫酸塩などの、スルホン酸系界面活性剤またはカルボン酸系界面活性剤を含むがこれらに限定されない。例示的カチオン界面活性剤は、塩化アセチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、臭化アセチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、およびポリエチキシル化牛脂アミン（ＰＯＥＡ）などの第四級アンモニウム系界面活性剤を含むがこれらに限定されない。例示的双性イオン界面活性剤は、ドデシルジメチルアミンオキシド、コカミドプロピルベタイン、ドデシルベタインおよびココアンホグリシネートを含むがこれらに限定されない。

[000129]例示的非イオン性界面活性剤は、アルキルポリ（エチレンオキシド）、アルキルポリグルコシド（例えば、オクチルグルコシドおよびデシルマルトシド）、脂肪アルコール（例えば、アセチルアルコールおよびオレイルアルコール）、コカミドＤＥＡ、コカミドＭＥＡ、コカミドＴＥＡ、ポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７）、トリトン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびエチレングリコールとプロピレングリコールのコポリマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、ＰＦ６８、等）、ならびにポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート２８、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、およびポリソルベート８５）を含むがこれらに限定されない。

[000130]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、界面活性剤を約０．００１～０．１％ｗ／ｖの濃度で含む。一部の実施形態では、界面活性剤の濃度は、上記範囲内のいずれかの値である。例えば、本開示の医薬製剤は、界面活性剤を約０．００２％～約０．０８％（ｗ／ｖ）、約０．００４％～約０．０６％（ｗ／ｖ）、約０．００６％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．００８％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０１％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０２％～約０．０４％（ｗ／ｖ）、約０．０２％～約０．０３％（ｗ／ｖ）、または約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000131]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の界面活性剤および所望の安定性に応じて、界面活性剤を少なくとも０．００２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００３％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００５％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００７％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．００９％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０１％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０１２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０１４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０１６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０１８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０２２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０２４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０２６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０２８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０３％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０３２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０３４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０３６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０３８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０４２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０４４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０４６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０４８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０５％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０５２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０５４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０５６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０５８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０６２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０６４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０６６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０６８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０７％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０７２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０７４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０７６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０７８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０８２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０８４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０８６％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０８８％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０９％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０９２％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０９４％（ｗ／ｖ）、少なくとも０．０９６％（ｗ／ｖ）、または少なくとも０．０９８％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000132]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、医薬製剤の特定の界面活性剤および所望の安定性に応じて、界面活性剤を最大０．００２％（ｗ／ｖ）、最大０．００３％（ｗ／ｖ）、最大０．００４％（ｗ／ｖ）、最大０．００５％（ｗ／ｖ）、最大０．００６％（ｗ／ｖ）、最大０．００７％（ｗ／ｖ）、最大０．００８％（ｗ／ｖ）、最大０．００９％（ｗ／ｖ）、最大０．０１％（ｗ／ｖ）、最大０．０１２％（ｗ／ｖ）、最大０．０１４％（ｗ／ｖ）、最大０．０１６％（ｗ／ｖ）、最大０．０１８％（ｗ／ｖ）、最大０．０２％（ｗ／ｖ）、最大０．０２２％（ｗ／ｖ）、最大０．０２４％（ｗ／ｖ）、最大０．０２６％（ｗ／ｖ）、最大０．０２８％（ｗ／ｖ）、最大０．０３％（ｗ／ｖ）、最大０．０３２％（ｗ／ｖ）、最大０．０３４％（ｗ／ｖ）、最大０．０３６％（ｗ／ｖ）、最大０．０３８％（ｗ／ｖ）、最大０．０４％（ｗ／ｖ）、最大０．０４２％（ｗ／ｖ）、最大０．０４４％（ｗ／ｖ）、最大０．０４６％（ｗ／ｖ）、最大０．０４８％（ｗ／ｖ）、最大０．０５％（ｗ／ｖ）、最大０．０５２％（ｗ／ｖ）、最大０．０５４％（ｗ／ｖ）、最大０．０５６％（ｗ／ｖ）、最大０．０５８％（ｗ／ｖ）、最大０．０６％（ｗ／ｖ）、最大０．０６２％（ｗ／ｖ）、最大０．０６４％（ｗ／ｖ）、最大０．０６６％（ｗ／ｖ）、最大０．０６８％（ｗ／ｖ）、最大０．０７％（ｗ／ｖ）、最大０．０７２％（ｗ／ｖ）、最大０．０７４％（ｗ／ｖ）、最大０．０７６％（ｗ／ｖ）、最大０．０７８％（ｗ／ｖ）、最大０．０８％（ｗ／ｖ）、最大０．０８２％（ｗ／ｖ）、最大０．０８４％（ｗ／ｖ）、最大０．０８６％（ｗ／ｖ）、最大０．０８８％（ｗ／ｖ）、最大０．０９％（ｗ／ｖ）、最大０．０９２％（ｗ／ｖ）、最大０．０９４％（ｗ／ｖ）、最大０．０９６％（ｗ／ｖ）、最大０．０９８％（ｗ／ｖ）、または最大０．１％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000133]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はポリソルベート２０を含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はポリソルベート８０を含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤はポリソルベート８０を、約０．０１～０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０１２～０．０４８％（ｗ／ｖ）、約０．０１４～０．０４６％（ｗ／ｖ）、約０．０１６～０．０４４％（ｗ／ｖ）、約０．０１８～０．０４２％（ｗ／ｖ）、約０．０２～０．０４％（ｗ／ｖ）、約０．０２２～０．０３８％（ｗ／ｖ）、約０．０２４～０．０３６％（ｗ／ｖ）、約０．０２６～０．０３４％（ｗ／ｖ）、約０．０２８～０．０３２％（ｗ／ｖ）、または約０．０３％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、ポリソルベート８０を約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。

[000134]他の材料
[000135]本開示の医薬製剤は、希釈剤などの、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 第１６版、Ｏｓｏｌ、Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に記載される賦形剤のような１つまたは複数の他の賦形剤を、その１つまたは複数の他の賦形剤が本開示の医薬製剤の所望の特長に悪影響を及ぼさないという条件で、さらに含みうる。

[000136]用語「希釈剤」は、薬学的に許容可能であり、本開示の医薬製剤を希釈するのに使用できる。典型的な希釈剤は、水、生理食塩水、注射用の抗菌剤、ｐＨ緩衝剤、減菌食塩水、リンガー液、またはグルコース溶液を含む。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、０．９％生理食塩水または５％ブドウ糖を含む希釈剤をさらに含む。

[000137]ＡＰＩ
[000138]当業者であれば、本明細書に記載される医薬製剤は、例証されるＡＰＩ（例えば、抗体またはその抗原結合断片）を含む、多くのタイプのＡＰＩ、ならびに当技術分野で公知の他のＡＰＩに等しく適用可能であることを理解する。

[000139]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤のＡＰＩは、モノクローナル抗体またはその抗原結合断片である。
[000140]本明細書で使用される場合、用語「モノクローナル抗体」とは、均一なまたは実質的に均一な単一抗体を含む抗体の集団のことである。モノクローナル抗体は、単一ハイブリドーマ細胞クローンから得ることができる（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ、Ｃ（１９９９）．「Ｔｈｅ ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎ： ａｎ ｏｆｆｓｈｏｏｔ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｒｅｓｅａｒｃｈ」．ＢｉｏＥｓｓａｙｓ．２１（１１）：９６６～７３頁）。完全なモノクローナル抗体は、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）ならびに第１、第２、および第３の定常領域（Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、Ｃ_Ｈ３）からなる。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）および軽鎖定常領域（Ｃ_Ｌ）からなる。重鎖および軽鎖中のＶ_ＨおよびＶ_Ｌのそれぞれは、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する。３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）として知られる近接部分により分離されており、この領域はＣＤＲよりも高度に保存されており、高頻度可変ループを支持するスキャフォールドを形成する。１つの重鎖および１つの軽鎖の６つのＣＤＲは一緒になって抗体の抗原結合部分を構成し、抗体の特異性を決定する。本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、抗原結合機能を有する完全なモノクローナル抗体の断片または誘導体も含む。断片または誘導体は、完全なモノクローナル抗体と同じ抗原結合特異性を有するが、その特異的な抗原への結合のための断片または誘導体の親和性は、完全なモノクローナル抗体の親和性と同じまたはそれとは異なっていてもよい。

[000141]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、抗原結合断片を含む。抗原結合断片とは、抗原に特異的に結合する能力を保持する１つまたは複数の抗体断片のことである。抗原結合断片の例は、限定せずに、（ｉ）Ｆａｂ断片、これはＶ_Ｌ、Ｖ_Ｈ、Ｃ_Ｌ、およびＣ_Ｈ１ドメインで構成された一価断片のことである；（ｉｉ）Ｆａｂ’断片；これはヒンジ領域の一部を含むＦａｂ断片のことである；（ｉｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２断片、これはヒンジ領域においてジスルフィド結合により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片のことである；（ｉｖ）Ｖ_ＨおよびＣ_Ｈ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｖ）抗体の単一アームのＶ_ＬおよびＶ_ＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖｉ）単一可変ドメインを含むｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４～５４６頁（１９８９）；国際公開第９０／０５１４４号）；（ｖｉｉ）単離されたＣＤＲ；（ｖｉｉｉ）一本鎖Ｆｖ断片、これは直接連結されているまたはペプチド鎖を介して連結されているＶ_ＬおよびＶ_Ｈドメインから形成される一価断片のことである（Ｈｕｓｔｏｎ ＪＳら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、８５：５８７９頁（１９８８））を含む。

[000142]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、それが所望の機能的活性を示す限り、重鎖および／または軽鎖の一部が特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一であるまたは相同であり、残りの鎖がその他の種に由来するまたはその他の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体およびその断片の対応する配列と同一であるまたは相同であるキメラモノクローナル抗体を含む。

[000143]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、マウス重鎖および軽鎖可変領域、ならびにヒト重鎖および軽鎖定常領域を有するヒトマウスキメラモノクローナル抗体を含む。

[000144]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、ヒト化モノクローナル抗体を含む。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリンから得られる最小配列を含有するキメラ免疫グロブリン、その免疫グロブリン鎖または断片（例えば、抗体のＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２または他の抗原結合配列）である。一部の例では、ヒト化抗体は、ヒトＣＤＲのアミノ酸配列が非ヒトＶ_ＨおよびＶ_Ｌのアミノ酸配列中に導入されて対応する非ヒトＣＤＲのアミノ酸配列と置き換わるＣＤＲ移植抗体でもよい。他の例では、ヒト化抗体のアミノ酸配列の大半が、レセプターのＣＤＲのアミノ酸残基が、所望の特異性、親和性および能力を有する非ヒト（例えば、マウス、ラット、ウサギ）抗体のＣＤＲのアミノ酸残基に置き換えられているヒト免疫グロブリン（レセプター抗体）に由来してもよい。一般に、ヒト化抗体は、本質的に少なくとも１つ、一般的には２つの可変ドメインを含み、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべてが非ヒト免疫グロブリンの配列に一致しており、フレームワーク（ＦＲ）領域のすべてまたは実質的にすべてがヒト免疫グロブリンの配列である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンの可変領域のフレームワーク領域残基は対応する非ヒト残基で置き換えられている。さらに、ヒト化抗体は、レセプター抗体にも輸入ＣＤＲまたはフレームワーク領域配列にも見い出されない残基を含むことができる。

[000145]ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤のＡＰＩは、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片である。本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体とは、ＯＸ４０受容体タンパク質に特異的に結合するモノクローナル抗体のことである。ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片は、ＯＸ４０媒介シグナル伝達に対する遮断活性を有するアンタゴニスト抗体である。

[000146]ＯＸ４０受容体タンパク質は、ＣＤ１３４または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー、メンバー４（ＴＮＦＲＳＦ４）としても知られるが、受容体のＴＮＦＲスーパーファミリーのメンバーである。ＯＸ４０は二次共刺激免疫チェックポイント分子であり、この分子は休止ナイーブＴ細胞上では構成的に発現されず、Ｔ細胞活性化後に発現することができる。Ｔ細胞上のＯＸ４０受容体にＯＸ４０リガンドが結合すると、Ｔ細胞が死滅するのを防ぎ、その後サイトカイン産生を増加すると考えられる。本開示の医薬製剤のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片は、ＯＸ４０へのＯＸ４０リガンドの結合を遮断してＯＸ４０の三量体形成を妨げ、したがって、Ｔ細胞活性化およびＯＸ４０活性化により誘導される関連炎症応答を抑制することができる。

[000147]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は重鎖および軽鎖を含み、重鎖は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、および配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含み、軽鎖は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、および配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を含む軽可変領域Ｖ_Ｌを含む。

[000148]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号７、配列番号９、および配列番号１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号８、配列番号１１、および配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈおよび配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈおよび配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈおよび配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈおよび配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈおよび配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。

[000149]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、免疫グロブリン定常領域をさらに含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン定常領域は、重鎖定常領域および／または軽鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ１～Ｃ_Ｈ２、またはＣ_Ｈ１～Ｃ_Ｈ３領域を含み、軽鎖定常領域はＣ_Ｌ領域を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、Ｆｃ領域変異体をさらに含み、この変異体はヒトＩｇＧ１ Ｎ２９７Ａである。用語「ＩｇＧ１ Ｎ２９７Ａ」とは、親ポリペプチド（すなわち、ＩｇＧ１の野生型Ｆｃ領域）と比べて２９７位でアスパラギンをアラニンで置換しているＩｇＧ１のＦｃ領域変異体のことであり、この数はＥＵインデックスに一致する。

[000150]一部の実施形態では、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むモノクローナル抗体である。本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の重鎖および軽鎖をコードする核酸配列は、それぞれ配列番号１５および配列番号１６を含む。

[000151]上記のＡＰＩは、グリコシル化、酸化および脱アミドなどの追加の翻訳後修飾を含みうる。例えば、本明細書に記載されるモノクローナル抗ＯＸ４０抗体は、そのＶ_Ｈおよび／またはＶ_Ｌにグリコシル化部位、酸化部位および／または脱アミド部位を含みうる。特に、配列番号７を含むＶ_Ｈおよび配列番号８を含むＶ_Ｌを有するモノクローナル抗ＯＸ４０抗体では、潜在的酸化部位は、下の表１の配列番号７および配列番号８で示されるアミノ酸配列中太字で示される。潜在的脱アミノ部位は、下の表１の配列番号７および配列番号８で示されるアミノ酸配列中イタリックおよび太字で示される。潜在的異性化部位は、下の表１の配列番号７および配列番号８で示されるアミノ酸配列中下線を施され太字で示される。

[000152]一部の実施形態での例示的アミノ酸配列は下の表１に収載される：

[000153]本開示の医薬製剤は、上記のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を０．５～２００ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で含むことができる。一部の実施形態では、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片の濃度は、上記範囲内のいずれかの濃度値である。例えば、必要に応じて、医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度は、約１～１８０ｍｇ／ｍｌ、約１０～１６０ｍｇ／ｍｌ、約１５～１４０ｍｇ／ｍｌ、約２０～１２０ｍｇ／ｍｌ、約２５～１００ｍｇ／ｍｌ、約３０～８０ｍｇ／ｍｌ、約４０～６０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌである。

[000154]ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、上記モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を、少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２ｍｇ／ｍｌ、少なくとも３ｍｇ／ｍｌ、少なくとも４ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも６ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７ｍｇ／ｍｌ、少なくとも８ｍｇ／ｍｌ、少なくとも９ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも３０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも４０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも６０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも８０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも９０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１２０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１４０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１６０ｍｇ／ｍｌ、または少なくとも１８０ｍｇ／ｍｌの濃度で含むことができる。

[000155]ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、上記モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を、最大２００ｍｇ／ｍｌ、最大１８０ｍｇ／ｍｌ、最大１６０ｍｇ／ｍｌ、最大１４０ｍｇ／ｍｌ、最大１２０ｍｇ／ｍｌ、最大１００ｍｇ／ｍｌ、最大９０ｍｇ／ｍｌ、最大８０ｍｇ／ｍｌ、最大７０ｍｇ／ｍｌ、最大６０ｍｇ／ｍｌ、最大５０ｍｇ／ｍｌ、最大４０ｍｇ／ｍｌ、最大３０ｍｇ／ｍｌ、最大２０ｍｇ、最大１０ｍｇ／ｍｌ、最大９ｍｇ／ｍｌ、最大８ｍｇ／ｍｌ、最大７ｍｇ／ｍｌ、最大６ｍｇ／ｍｌ、最大５ｍｇ／ｍｌ、最大４ｍｇ／ｍｌ、最大３ｍｇ／ｍｌ、最大２ｍｇ／ｍｌ、または最大１ｍｇ／ｍｌの濃度で含むことができる。

[000156]ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、１つまたは複数の上記モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を含むことができる。上記モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片の濃度は、例えば、ＡＰＩ活性、投与の様式、治療するべき徴候、治療レジメンおよび医薬製剤が凍結乾燥または液体形態で長期間貯蔵向けであるかどうかなどの種々の要因に応じて、変動することができる。当業者であれば、過度の実験なしでＡＰＩのおよその濃度を容易に決定することができる。

[000157]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体を約４０～６０ｍｇ／ｍｌの濃度で含んでよい。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体を、約３５～５５ｍｇ／ｍｌ、約４０～５０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含んでよい。一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体を約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含んでよい。

[000158]製剤調製の方法
[000159]本開示は、本明細書で提供される医薬製剤を調製する方法も提供する。方法は、ｐＨ約５．０～約８．０（例えば、約５．０～約５．５）を有する緩衝溶液、安定化剤、界面活性剤、および治療有効量の１つまたは複数のＡＰＩを組み合わせることを含むことができる。本明細書に記載される医薬製剤中の賦形剤のうちの１つまたは複数は、治療有効量の１つまたは複数のＡＰＩと組み合わせて、広範囲の医薬製剤を作製することができる。緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、およびＡＰＩは、上のセクション「製剤」に記載されている。

[000160]一般には、医薬製剤は無菌化するべきであり、これは無菌製造環境において無菌試薬を使用するまたは調製に続いて無菌化されることにより達成できる。例えば、無菌医薬製剤は、精密濾過などの無菌化方法を適用する前に、１つまたは複数のＡＰＩを必要量で、本明細書に記載される他の賦形剤（例えば、安定化剤および界面活性剤）と一緒に緩衝剤中に組み込むことにより調製できる。

[000161]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤を調製する方法は、以下を含む製剤工程を含む：
１）２０ｍＭのグルタミン酸／ヒスチジン緩衝剤中ｐＨ５．０で、濃縮されたＡＰＩ（例えば、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片）を６３±６ｍｇ／ｍｌ（例えば、４７ｍｇ／ｍｌ、４８ｍｇ／ｍｌ、４９ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、５１ｍｇ／ｍｌ、５２ｍｇ／ｍｌ、５３ｍｇ／ｍｌ、５４ｍｇ／ｍｌ、５５ｍｇ／ｍｌ、５６ｍｇ／ｍｌ、５７ｍｇ／ｍｌ、５８ｍｇ／ｍｌ、５９ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、６１ｍｇ／ｍｌ、６２ｍｇ／ｍｌ、または６３ｍｇ／ｍｌ）の濃度で調製する（限外濾過／透析濾過、ＵＦ／ＤＦから）こと；
２）保存液４０％（ｗ／ｖ）からスクロースを濃縮されたＡＰＩに最終濃度８％（ｗ／ｖ）で添加すること；
３）保存液１０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート８０からポリソルベート８０をＵＦ／ＤＦプールに最終濃度０．０２％（ｗ／ｖ）で添加する；
４）製剤化バルクを０．２μｍフィルターを通して濾過し、次にそれをＰＣボトル中に詰めること。スクロース保存液４０％（ｗ／ｗ）、およびポリソルベート８０保存液１０％（ｗ／ｗ）は、２０ｍＭのグルタミン酸／ヒスチジン中ｐＨ５．０で調製できる。

[000162]ある特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬製剤を調製する方法は、上記の製剤工程前に細胞培養工程および精製工程をさらに含むことができる。細胞培養工程は、バイアル解凍およびシェイクフラスコでの種培養増殖、ＲＭバイオリアクターでの細胞増殖、ＸＤＲ ２００ Ｌバイオリアクターでの細胞増殖、ＳＵＢ ５００ Ｌバイオリアクターでの生産培養ならびに深層濾過収穫を用いて進めることができる。精製工程は、アフィニティークロマトグラフィー（ＡＣ）、低ｐＨウイルス不活化および中和（ＶＩＮ）、中間深層濾過（Ｉｎｔ．ＤＦ）、陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィー、陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィー、ウイルス濾過（ＶＦ）ならびに限外濾過／透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）を使用して実行できる。

[000163]医薬製剤が上記の通り調製された後は、医薬製剤内に含まれる１つまたは複数のＡＰＩの安定性は、限定せずに、サイズ排除クロマトグラフィー、粒子計数、陰イオン／陽イオン交換クロマトグラフィー、結合活性などの機能アッセイを含む、実施例において使用される方法などの、当技術分野で公知の方法を使用して査定することができる。

[000164]キット
[000165]１つまたは複数の容器を含有するキットも本明細書で提供され、そのキットのそれぞれが上記の１つまたは複数の賦形剤およびＡＰＩ（複数可）を含む。ある特定の実施形態では、キットは、１つまたは複数の容器に、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤などの緩衝剤、スクロース、ソルビトールまたはトレハロースなどの安定化剤、ＰＳ８０などの界面活性剤、およびモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片、ならびにその使用に関する説明書を含む。

[000166]ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるキットは、本開示の医薬製剤を投与するための、液体シリンジおよびリオシリンジ（ｌｙｏｓｙｒｉｎｇｅｓ）などの１つまたは複数のシングル－またはマルチチャンバーシリンジを含む。本明細書で提供されるキットは、ヒト使用の医薬製剤を含むことができる。

[000167]使用
[000168]別の態様では、本開示は、ＯＸ４０関連疾患を、その処置を必要とする対象において処置する方法であって、治療有効量の本開示の医薬製剤を対象に投与するステップを含む方法をさらに提供する。本明細書で使用される場合、用語「ＯＸ４０関連疾患」とは、ＯＸ４０アゴニストまたはアンタゴニストを用いる処置を必要とする疾患、例えば、がん、または炎症性疾患および／もしくは自己免疫疾患のことである。本明細書で使用される用語「炎症性疾患および／または自己免疫疾患」とは、病的炎症および自己免疫疾患などの、いずれかの炎症性または免疫関連状態のことである。用語「自己免疫疾患」とは、本明細書で使用される場合、対象自身の組織または器官により引き起こされるまたはこれらを標的にする疾患または状態のことであり、例えば、正常な身体組織および抗原を認識する抗体を産生するＢ細胞の生成が自己免疫疾患を引き起こすことがあり；自己抗原に由来するエピトープに特異的な自己抗体の分泌も自己免疫疾患を引き起こすことがある。

[000169]ある特定の実施形態では、がんは、乳がん、黒色腫、小細胞肺がん、腎臓がん、胃がん、肝臓がん、卵巣がん、リンパ白血球黒色腫、前立腺がん、尿路上皮がん、頭頚部がん、非小細胞肺がん、中皮腫、皮膚がん、リンパ腫、白血病、および肉腫からなる群から選択される。

[000170]ある特定の実施形態では、炎症性疾患および／または自己免疫疾患は、特発性皮膚炎、自己免疫性ブドウ膜炎、強皮症、多発性硬化症、ループス（例えば、全身性エリテマトーデス）、関節リウマチ、喘息（例えば、アレルギー性喘息）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、潰瘍性大腸炎、および移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）からなる群から選択される。

[000171]本開示の医薬製剤は、当技術分野で公知の様々な方法のうちの１つまたは複数を使用して１つまたは複数の投与経路により投与することができる。当業者であれば認識するように、投与の経路および／または様式は、所望の結果に応じて変化する。好ましい投与経路は、例えば、注射または注入による、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄または他の非経口投与経路を含む。さらに好ましい投与経路は静脈内または皮下である。本明細書で使用される語句「非経口投与」は、腸内および局所投与以外の、通常は注射による投与様式を意味し、限定せずに、静脈内、筋肉内、動脈内、クモ膜下腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節腔内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射および注入を含む。あるいは、本開示の医薬製剤は、局所的、上皮または粘膜投与経路などの非経口ではない経路により、例えば、鼻腔内に、経口的に、経膣的に、経直腸的に、舌下にまたは局所的に投与することができる。

[000172]一部の実施形態では、本開示の医薬製剤は、皮下投与に、または静脈内注入を経るのが適している。一部の実施形態では、皮下投与に適している本開示の医薬製剤は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその断片を約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で含む。

[000173]本開示の医薬製剤は、単一用量または複数用量で投与することができる。本明細書で使用される場合、用語「用量（ｄｏｓｅ）」または「投与量（ｄｏｓａｇｅ）」は互換的であり、対象の体重あたり投与される原薬の量またはその体重とは無関係に対象に投与される全用量を示す。

[000174]一部の実施形態では、治療有効量の本開示の医薬製剤はそれを必要とする患者に投与される。本明細書で使用される場合、用語「治療有効量」とは、特定の疾患または状態の検出可能な改善または予防を達成するのに必要な最小濃度のことである。特定の疾患または状態を改善するまたは予防する医薬製剤の能力は、例えば、動物モデル系またはインビトロ系において査定することができ、ヒトにおける標的疾患または状態に対する有効性を予測する。本開示の医薬製剤中のＡＰＩの実施の投与量は、処置される領域のサイズおよび位置、対象の体重、対象の症状の重症度、選択されるＡＰＩの性質（例えば、全抗体または断片）、投与様式、ならびに本開示の医薬製剤中のＡＰＩの投与前に、投与時に、または投与後に投与されるいずれかの追加の薬剤などの種々の要因に基づいて決定できる。

[000175]さらに別の態様では、本開示は、ＯＸ４０関連疾患の処置用の薬物の製造での医薬製剤の使用を提供する。
[000176]製剤の他の実施形態
[000177]実施形態１．抗体または抗原結合断片、
グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤から選択される緩衝剤、
スクロース、ソルビトールまたはトレハロースから選択される、約０．５％～約５０％（ｗ／ｖ）の濃度の安定化剤、
ポリソルベート８０である、約０．００１％～約０．１％（ｗ／ｖ）の濃度の界面活性剤
を含み、約５．０～約８．０のｐＨを有する医薬製剤。

[000178]実施形態２．実施形態１の医薬製剤であり、緩衝剤は、約１～１００ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～９０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～８０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～７０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌ、または約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で存在している。

[000179]実施形態３．実施形態１または２の医薬製剤であり、緩衝剤は、約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で存在している。
[000180]実施形態４．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、緩衝剤は、約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で存在している。

[000181]実施形態４．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、医薬製剤は、約５．０～約６．０のｐＨを有する。
[000182]実施形態５．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、医薬製剤は、約５．０～約５．５のｐＨを有する。

[000183]実施形態６．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、医薬製剤は約５．０のｐＨを有する。
[000184]実施形態７．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約０．５％～約５０％（ｗ／ｖ）、約１％～約４０％（ｗ／ｖ）、約２％～約３０％（ｗ／ｖ）、約３％～約２０％（ｗ／ｖ）、約３．２％～約１８％（ｗ／ｖ）、約３．４％～約１６％（ｗ／ｖ）、約３．６％～約１４％（ｗ／ｖ）、約４％～約１２％（ｗ／ｖ）、約６％～約１０％（ｗ／ｖ）、または約８％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。

[000185]実施形態８．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約４％～約１２％（ｗ／ｖ）の濃度のスクロースである。
[000186]実施形態９．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約８％（ｗ／ｖ）の濃度のスクロースである。

[000187]実施形態１０．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約０．５％～約１０％（ｗ／ｖ）の濃度のソルビトールである。
[000188]実施形態１１．実施形態１～７のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約４．５％（ｗ／ｖ）の濃度のソルビトールである。

[000189]実施形態１２．実施形態１～７のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約４％～１４％（ｗ／ｖ）の濃度のトレハロースである。
[000190]実施形態１３．実施形態１～７のいずれか１つの医薬製剤であり、安定化剤は、約８．８％（ｗ／ｖ）の濃度のトレハロースである。

[000191]実施形態１４．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、ポリソルベート８０は、約０．００２％～約０．０８％（ｗ／ｖ）、約０．００４％～約０．０６％（ｗ／ｖ）、約０．００６％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．００８％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０１％～約０．０５％（ｗ／ｖ）、または約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。

[000192]実施形態１５．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、ポリソルベート８０は、約０．０１％～約０．０４％（ｗ／ｖ）、約０．０１％～約０．０３％（ｗ／ｖ）、または約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。

[000193]実施形態１６．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、ポリソルベート８０は、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。
[000194]実施形態１７．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、抗体または抗原結合断片は、約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ、約１～１８０ｍｇ／ｍｌ、約１０～１６０ｍｇ／ｍｌ、約１５～１４０ｍｇ／ｍｌ、約２０～１２０ｍｇ／ｍｌ、約２５～１００ｍｇ／ｍｌ、約３０～８０ｍｇ／ｍｌ、約４０～６０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。

[000195]実施形態１８．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、抗体または抗原結合断片は、約４５～５５ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。

[000196]実施形態１９．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、抗体または抗原結合断片は約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
[000197]実施形態２０．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、抗体または抗原結合断片は、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片である。

[000198]実施形態２１．実施形態２０の医薬製剤であり、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体は重鎖および軽鎖を含み、重鎖は、
配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、
配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、
配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３
を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含み、
軽鎖は、
配列番号４に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、
配列番号５に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、
配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含む。

[000199]実施形態２２．実施形態２１の医薬製剤であり、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体はＦｃ領域変異体をさらに含む。
[000200]実施形態２３．実施形態２２の医薬製剤であり、Ｆｃ領域変異体はヒトＩｇＧ１ Ｎ２９７Ａである。

[000201]実施形態２４．先行する実施形態のいずれか１つの医薬製剤であり、重鎖可変領域Ｖ_Ｈは、配列番号７、配列番号９、および配列番号１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

[000202]実施形態２５．実施形態２０～２４のいずれか１つの医薬製剤であり、軽鎖可変領域Ｖ_Ｌは、配列番号８、配列番号１１、および配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

[000203]実施形態２６．実施形態２０～２５のいずれか１つの医薬製剤であり、重鎖可変領域Ｖ_Ｈと軽鎖可変領域Ｖ_Ｌのペアは、配列番号７と配列番号８、配列番号９と配列番号１１、配列番号１０と配列番号８、配列番号７と配列番号１１、配列番号１０と配列番号１２からなる群から選択される。

[000204]実施形態２７．実施形態１～２６のいずれか１つの医薬製剤であり、医薬製剤は皮下投与にまたは静脈内投与に適している。
[000205]実施形態２８．ＯＸ４０関連疾患の処置または予防用の薬物の製造での実施形態１～２７のいずれか１つの医薬製剤の使用。

[000206]実施形態２９．実施形態２８の使用であり、ＯＸ４０関連疾患は、炎症および／または自己免疫疾患（移植片対宿主病などの）である。
[000207]実施形態３０．ＯＸ関連疾患の処置を、その処置を必要とする対象において行う方法であって、実施形態１～２７のいずれか１つの医薬製剤の治療有効量を対象に投与するステップを含む方法。

[000208]実施形態３１．実施形態３０の方法であって、投与は皮下注射または静脈内注射による、方法。

[000209]本開示は、以下の実施例を参照すればもっとよく理解できる。しかし、以下の実施例は本開示を説明することを目的としており、本開示の範囲を限定するものと理解されるべきではない。本明細書の教唆に照らせば種々の変化および修正を加えてよく、したがって、そのような変化および修正は本開示の範囲内である。

[000210]本研究は、本開示の医薬製剤のための可溶性プロファイリング研究、ｐＨ／緩衝剤スクリーニング、ならびに賦形剤スクリーニングおよび界面活性剤強度スクリーニングを報告した。

[000211]可溶性プロファイリング研究は、ＰＥＧ濃度研究およびＴａｇｇにより酢酸緩衝剤、クエン酸／アルギニン緩衝剤およびアルギニン緩衝剤を調べた。製剤の安定性は、温度４０±２℃および相対湿度７５±５％で、９つの異なるｐＨ／緩衝剤状態において最大４週間インキュベーションで調べられた。

[000212]賦形剤スクリーニングおよび界面活性剤強度スクリーニングでは、７つの異なる製剤が、いくつかの条件下で、すなわち、４０℃で２または４週間のインキュベーション、－７０℃～室温まで３または５サイクルでの凍結解凍および３００ｒｐｍで１または３日間の攪拌で調べられた。

実施例１：分析方法
[000213]外見
[000214]ガラス製バイアルの外壁を拭き、次に２５ｃｍ離れた距離でＹＢ－２ ｌｉｇｈｔｂｏｘのゴボの縁の近くにガラス製バイアルの首を保持した。色、透明性、および目に見える粒子を含む試料の外見を黒白背景に対して、照度２０００～３７５０ Ｌｕｘで調べた。

[000215]ＰＥＧ濃度研究
[000216]最終ＰＥＧ濃度を２．５％～１５％に設定する。５０μＬのＰＥＧ保存液を、タンパク質を含有するよく混ぜ合わせた５０μＬの試料溶液中に添加した。次に、タンパク質濃度をＮａｎｏｄｒｏｐにより検出した。その後、ＰＥＧ濃度対タンパク質濃度の曲線を得た。

[000217]タンパク質濃度
[000218]試料を均一に混ぜ合わせた後、タンパク質濃度は、ＮａｎｏＤｒｏｐ ２０００分光光度計を使用してＵＶ２８０読取り値により決定した。吸光係数は１．６２ ＡＵ^＊ｍＬ^＊ｍｇ^－１＊ｃｍ^－１であった。測定はすべて、毎回ローディング容積２．５μＬで２度繰り返され、平均を取った。

[000219]ｐＨ
[000220]ｐＨメーターは使用に先立って３つの異なる標準緩衝剤（ｐＨ４．０１、７．００および９．２１）を用いて較正した。較正傾きは９５．０％～１０５．０％であり、ゼロドリフトは－６０．０ｍｖ～＋６０．０ｍｖであった。その後、ｐＨをそれぞれの試料についてローディング容積５０μＬで測定した。

[000221]浸透圧
[000222]２０μＬの無希釈試料の浸透圧は、最新型２０２０オズモメーターにより２度測定し、平均を取った。測定前および後、オズモメーターは２９０ｍＯｓｍ参照溶液により較正した。

[000223]ＤＳＣ
[000224]ＤＳＣは、試料と参照の温度を上げるのに必要な熱量の差を温度の関数として測定する熱分析技法である。試料はその参照緩衝剤で１ｍｇ／ｍＬまで希釈した。４００μＬのそれぞれの参照緩衝剤を９６ウェルプレートの奇数ウェル中に添加し、４００μＬの試料を同じプレートの偶数ウェル中に添加した。実験パラメータは、スキャン温度が９０℃／ｈの速度で１０～９５℃の傾斜が付くように設定した。温度記録の解析は、ＭｉｃｒｏＣａｌ ＰＥＡＱ ＤＳＣ自動データ解析ソフトウェアで実施した。

[000225]Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ
[000226]Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳは、生産および貯蔵工程中の生体分子の切詰めまたは断片化を判定するのに利用される純度方法である。Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳは、マイクロチップを用いて、タンパク質をその電気泳動移動度に基づいて分離する。キャピラリー中ではサイズが小さいタンパク質のほうが移動は速くサイズが大きいタンパク質のほうが移動は遅い。

[000227]本研究では、試料は、最初に超純水で１．０ｍｇ／ｍＬまで希釈し、次に、試料緩衝剤、ＳＤＳおよびＮ－エチルマレイミド（非還元法用に）またはジチオスレイトール（還元法用に）で構成された変性溶液と混ぜ合わせた。混合物は７０℃で１０分間インキュベートし、その後９６ウェルプレートに移した。プレートを機器のプレートホルダ上に載せた後、試料は少しずつ取り、染色し、分離し、マイクロチップに検出した。データはＬａｂＣｈｉｐ ＧＸ Ｒｅｖｉｅｗｅｒを用いて獲得した。

[000228]主ピークのパーセンテージは、非還元Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ（Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－ＮＲ）中の試料の純度として報告された。還元法では（Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－Ｒ）、ＬＣ＋ＨＣの合計のパーセンテージ（純度）が報告された。

[000229]ＳＥＣ－ＨＰＬＣ
[000230]ＳＥＣ－ＨＰＬＣを使用して、ある特定の条件下、例えば、貯蔵中のタンパク質の凝集により測定した場合のタンパク質の安定性に関する情報を提供した。データは、主ピーク（モノマー）のパーセンテージとして提示することができ、主ピークパーセンテージが大きいほどタンパク質の凝集が少ない（例えば、ダイマーおよび他の高分子量凝集）ことを意味する。

[000231]ＳＥＣは、ＳＥＣカラム（３００×７．８ｍｍ、５μｍ）を用いたＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣシステムで実施された。試料採取器の温度は５±３℃まで設定し、カラムオーブン温度は２５±３℃として設定した。移動相は、５０ｍＭのＰＢ、３００ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ６．８±０．１であり、流速は１．０ｍＬ／分として設定した。１００μｇのそれぞれの試料を注入した。検出波長は２８０ｎｍに設定し、実行時間は２０分であった。

[000232]ｉＣＩＥＦ
[000233]画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＩＥＦ）は、それぞれの変異体の等電点（ｐＩ）および分布を決定することによりチャージバリアント種をモニターするのに使用される純度方法である。

[000234]タンパク質のチャージバリアントはそれ独自のｐＩに基づいて分離され、ｐＩは特定のタンパク質の内在特性であり、タンパク質分子が正味荷電を全く保有しないｐＨである。外部電場下では、チャージバリアントは、両性電解質により形成される連続するｐＨ勾配に沿って移動し、ｐＨがそのｐＩに等しくなる位置で停止する。

[000235]本研究では、タンパク質試料は最初に、超純水で１．０ｍｇ／ｍＬまで希釈された。次に、２０μＬの希釈試料は、キャピラリー等電点電気泳動システムによる電気泳動のためにキャピラリー中にロードする前に、ｐＩマーカー４．６５／９．２２、両性担体（３～１０）、メチルセルロースおよび尿素で構成された８０μＬのマスターミックスと混ぜ合わせた。

[000236]主ピーク、酸性ピークおよび塩基性ピークのパーセンテージは、主ピークのｐＩと一緒に最終結果に報告された。酸性ピークは酸性種を表し、これは陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）中に主ピークよりも早く、または陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）分析中主ピークよりも遅く溶出する抗体変異体として定義される。酸性種は、シアル酸、脱アミド、非古典的ジスルフィド結合、トリスルフィド結合、高マンノース、糖化、マレウル酸による改変、システイン化、還元型ジスルフィド結合、非還元型種および／または断片を含む改変を通じて形成できる。塩基性ピークは塩基性種を表し、これはＣＥＸ中に主ピークよりも遅くおよびＡＥＸ分析中主ピークよりも早く溶出する物質として定義される。塩基性種は、Ｃ末端Ｌｙｓ、Ｎ末端Ｇｌｕ、Ａｓｐの異性化、サクシニミド、Ｍｅｔ酸化、アミド化、不完全ジスルフィド結合、リーダー配列の不完全除去、ＳｅｒからＡｒｇへの突然変異、グリコシル化、断片および／または凝集体を含む改変を通じて形成できる。主ピークとは主種のことであり、クロマトグラム上で主要ピークとして溶出する標的抗体分子を表す。主種は、非改変または非分解抗体と必ずしも一致しない。実際、主ピークは典型的には、３つのタイプの典型的翻訳後修飾：（１）Ｎ末端グルタミン（Ｇｌｎ）のピロＧｌｕへの環化；（２）重鎖Ｃ末端リジン（Ｌｙｓ）の除去；および（３）ＣＨ２ドメイン中の保存されたアスパラギン（Ａｓｎ）残基の中性オリゴ糖でのグリコシル化を有する抗体の種からなる。

[000237]ＭＦＩ
[000238]顕微鏡でないと見えない粒子はＭＦＩシステム５２００によりモニターされた。１．５ｍＬ容積のそれぞれの試料を、分析のためにバイオ安全フード中のＭＦＩ９６ウェルプレートに移した。結果はベンダーのソフトウェアにより解析した。円相当径≧２μｍ、≧５μｍ、≧１０μｍおよび≧２５μｍでの顕微鏡でないと見えない粒子の量が報告された。

[000239]Ｔａｇｇ（凝集温度）
[000240]Ｔａｇｇは、タンパク質の熱力学的安定性を予測するのに使用される熱分析パラメータであり、この熱力学的安定性は動的光散乱（ＤＬＳ）法により特徴付けることができる。

[000241]測定は、Ｗｙａｔｔ ＤｙｎａＰｒｏプレートリーダーＩＩ上で実施された。実験前、３８４ウェルプレートの両面をきれいな窒素で浄化して、そこを清潔に保ち、次に、２０μＬの試料を対応する位置に添加し、４０００ｒｐｍの速度で５分間遠心分離し、最後に１５μＬのパラフィンオイルを液体シールのために試料上に滴下する。検出中、試料は２５℃から７５℃まで加熱し、データ解析は、機器製造業者が提供するソフトウェアにより完了させた。

[000242]ｋＤ
[000243]ｋＤは、タンパク質の熱力学的安定性を予測するのに使用される熱分析パラメータであり、この熱力学的安定性はＤＬＳ法により特徴付けることができる。測定は、Ｗｙａｔｔ ＤｙｎａＰｒｏプレートリーダーＩＩ上で実施された。実験前、３８４ウェルプレートの両面をきれいな窒素で浄化して、そこを清潔に保ち、次に、２０μＬの試料を対応する位置に添加し、４０００ｒｐｍの速度で５分間遠心分離し、最後に１５μＬのパラフィンオイルを液体シールのために試料上に滴下する。検出中、試料は２０℃、２５℃、３０℃、３５℃および４０℃でインキュベートし、データ解析は、機器製造業者が提供するソフトウェアにより完了させた。

実施例２：可溶性プロファイリング
[000244]目的
[000245]本研究は、可溶性、ｐＨおよびｐＨ／緩衝剤スクリーニングのためのイオン強度の間の関係を理解することを狙いとしていた。

[000246]材料
[000247]抗ＯＸ４０抗体原薬（ＤＳ）は、配列番号１３の重鎖および配列番号１４の軽鎖を有する。

[000248]実験方法
[000249]抗ＯＸ４０抗体原薬（ＤＳ）は、超遠心分離濾過により、酢酸緩衝剤（本質的に、酢酸および酢酸ナトリウムからなる緩衝系）、クエン酸／アルギニン緩衝剤（本質的に、クエン酸およびアルギニンからなる緩衝系）、およびアルギニン緩衝剤（本質的に、アルギニンおよびアルギニン－ＨＣｌからなる緩衝系）に交換された。２ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度は、０．２２μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターを通じて濾過された。ＰＥＧ濃度を２．５％～１５％に設定し、次に、５０μＬの試料は５０μＬのＰＥＧとよく混ぜ合わされた。その後、タンパク質濃度はＵＶ２８０により決定された。８％のスクロースをＴａｇｇ試験のためにそれぞれの試料に添加した。研究計画は表２に示された。

[000250]

[000251]結果
[000252]ＰＥＧ
[000253]表３および図１に示されるように、酢酸緩衝剤ｐＨ４．５でのタンパク質濃度に明らかな変化は観察されなかった。アルギニン緩衝剤中のタンパク質濃度は、ＰＥＧ濃度が１０％であった場合に減少した。

[000254]

[000255]Ｔａｇｇ
[000256]表４に示されるように、抗ＯＸ４０抗体のＴａｇｇ温度は、ｐＨ４．５、５．０、８．０および８．５でそれぞれ５９．１℃、６０．３℃、５８．７℃および５９．０℃であった。

[000257]

[000258]まとめ
[000259]可溶性プロファイリング研究の結果に基づいて、抗ＯＸ４０抗体の可溶性は、他の緩衝剤よりもｐＨ４．５の酢酸緩衝剤で最良であり、抗ＯＸ４０抗体は、イオン強度が低いほど高い凝集温度を有している。

実施例３：ｐＨ／緩衝剤スクリーニング研究
[000260]目的
[000261]本研究は、最適なタンパク質貯蔵のためのｐＨ／緩衝剤スクリーニングを狙いとしていた。

[000262]材料
[000263]抗ＯＸ４０抗体原薬（ＤＳ）は、配列番号１３の重鎖および配列番号１４の軽鎖を有する。酢酸緩衝剤は、本質的に、酢酸および酢酸ナトリウムからなる緩衝系であり、グルタミン／ヒスチジン緩衝剤は、本質的に、グルタミン酸およびヒスチジンからなる緩衝系であり、アルギニン緩衝剤は、本質的に、アルギニンおよびアルギニン－ＨＣｌからなる緩衝系であり、任意選択で、最終ｐＨを調整するための酸（例えば、ＨＣｌ）または塩基（例えば、ＮａＯＨ）を有する。

[000264]実験方法
[000265]抗ＯＸ４０抗体ＤＳは、限外濾過および透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）により酢酸、グルタミン／ヒスチジンおよびアルギニン緩衝剤に交換された。５０ｍｇ／ｍＬのタンパク質は、０．２２μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターを通して濾過され、続いて２Ｒバイアルに等分された（５０ｍｇ／バイアル）。バイアルは栓をして蓋をかぶせ、表５に示されるように４０℃下で安定性研究に供した。

[000266]

[000267]結果
[000268]ＤＳＣ
[000269]ＤＳＣ結果は表６および図２に示された。アルギニン緩衝剤ｐＨ８．０（５７．０℃）中の抗ＯＸ４０抗体ＤＳのＴｍｏｎｓｅｔは、他の緩衝剤中でのＴｍｏｎｓｅｔよりも高かった。酢酸緩衝剤中の抗ＯＸ４０抗体ＤＳのＴｍｏｎｓｅｔは、グルタミン／ヒスチジン緩衝剤中のＴｍｏｎｓｅｔに近かった。これらの結果により、抗ＯＸ４０抗体ＤＳの熱安定性は低ｐＨでのほうが悪いことが示された。Ｔｍｏｎｓｅｔは、タンパク質が解け始める温度を表し、タンパク質の最初のドメインが解け始める温度を示す。Ｔｍｌは熱転移中間点を表し、最初のタンパク質ドメインが半分解けている温度を示す。

[000270]

[000271]外見、ｐＨおよびタンパク質濃度
[000272]外見、ｐＨおよびタンパク質濃度は表７に示された。４週間後すべての緩衝剤において目に見える粒子が観察された。アルギニン緩衝剤だけが、粒子は１週間後に観察された。色、ｐＨまたはタンパク質濃度にはっきりした変化は観察されなかった。

[000273]

[000274]ＳＥＣ－ＨＰＬＣ
[000275]ＳＥＣ－ＨＰＬＣ結果は表８にまとめられており、主ピーク、凝集および断片の組成は図３、図４および図５に提示された。ｐＨ４．５の主ピークは、酢酸緩衝剤およびグルタミン／ヒスチジン緩衝剤でそれぞれ最大１１．４％および１１．１％の低下を示した。ＨＭＷピークは７．０％および６．１％増加したが、ＬＭＷピークは４．３％および５．０％増加した。グルタミン／ヒスチジン緩衝剤での主ピークは、ｐＨ５．５でごく少量の４．７％の低下を示した。

[000276]ｉＣＩＥＦ
[000277]ｉＣＩＥＦ結果は表８にまとめられ、主ピーク、酸性ピークおよび塩基性ピークの組成は図６、図７および図８に示された。アルギニン緩衝剤中の主ピークはｐＨ８．５で５６．４％の最大低下を示した。主ピークは、ｐＨ４．５の酢酸緩衝剤およびグルタミン／ヒスチジン緩衝剤でそれぞれ２９．４％および２９．２％減少した。

[000278]Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ（還元＆非還元）（Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－Ｒ＆Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ－ＮＲ）
[000279]Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ（還元＆非還元）結果は表８にまとめられており、抗ＯＸ４０抗体ＤＳの純度の変化は図９および図１０に提示された。アルギニン緩衝剤中ｐＨ８．５での非還元タンパク質の純度は１２．８％低下した。酢酸およびグルタミン／ヒスチジン緩衝剤中ｐＨ５．０および５．５での非還元タンパク質の純度は約３％低下し、他のｐＨ条件での純度は約７％低下した。

[000280]還元タンパク質の純度は、酢酸緩衝剤中ｐＨ５．０および５．５で２．５％および１．４％低下し、この値はグルタミン／ヒスチジン緩衝剤中の値に近い。酢酸緩衝剤中ｐＨ４．５およびアルギニン緩衝剤中ｐＨ８．５では、還元タンパク質の結果はそれぞれ１０．９％および１０．３％の最大低下を示した。

[000281]

[000282]効力
[000283]効力は、以下のステップ：被覆プレート、被覆抗原（ＯＸ４０－Ｆｃ）、プレート遮断、インキュベーション、停止および読取りを用いて実行される結合アッセイ法により測定された。％で表される結合効力とは、開始時点で抗原に結合している抗ＯＸ４０抗体ＤＳのレベルと比べた場合の、貯蔵後の抗原（ＯＸ４０－Ｆｃ）に結合している抗ＯＸ４０抗体ＤＳのレベルのパーセンテージのことである。効力の結果は表９に示された。効力にはっきりした変化は観察されなかった。

[000284]

[000285]結論
[000286]ｐＨ／緩衝剤スクリーニング研究の結果に基づいて、抗ＯＸ４０抗体ＤＳの安定性は、酢酸緩衝剤およびグルタミン／ヒスチジン緩衝剤中ｐＨ５．０および５．５でのほうが他の緩衝剤中よりも良好であった。ＳＥＣ－ＨＰＬＣおよびＣａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ結果は、ｐＨ４．５および８．５で凝集および断片が観察されることを示した。グルタミン／ヒスチジン緩衝剤中のＨＭＷの結果は酢酸緩衝剤中よりも良好であった。

[000287]ｉＣＩＥＦ結果によれば、ｐＨ５．０および５．５での抗ＯＸ４０抗体ＤＳの化学的変化は他のｐＨ条件よりも遅いことが示された。
[000288]まとめると、２０ｍＭのグルタミン／ヒスチジン緩衝剤ｐＨ５．０が、抗ＯＸ４０抗体ＤＳについて提案され、ｐＨ５．５はバックアップのために追加される。

実施例４：賦形剤スクリーニングおよび界面活性剤強度スクリーニング
[000289]目的
[000290]本研究は、最適タンパク質貯蔵のための賦形剤スクリーニングおよび界面活性剤強度スクリーニングを狙いとしていた。

[000291]材料
[000292]抗ＯＸ４０抗体原薬（ＤＳ）は、配列番号１３の重鎖および配列番号１４の軽鎖を有する。

[000293]実験方法
[000294]抗ＯＸ４０抗体ＤＳは、２０ｍＭのグルタミン／ヒスチジン緩衝剤に対して透析された。４０％スクロース、４４％トレハロース２Ｈ_２Ｏ、２２．５％ソルビトール、１０％ＰＳ８０および１０％ＰＳ２０保存液をそれぞれ製剤中に配合した（表１０参照）。それぞれの製剤は、０．２２μｍのＰＶＤＦ膜フィルターを通して濾過し、次に、２Ｒバイアル中に無菌で充填した（２ｍＬ／バイアル）。すべてのバイアルは、充填後直ちに栓で塞いで蓋をした。それぞれの製剤で満たされたバイアルはストレス、すなわち、４０℃インキュベーター、凍結解凍（－７０℃～ＲＴ）および攪拌（３００ｒｐｍ、２５℃）条件下に置いた。試料は、表１１に記載される試料採取時点毎に試験した。

[000295]

[000296]

[000297]結果
[000298]ＤＳＣ
[000299]ＤＳＣの結果は、表１２および図１１に示された。製剤Ｆ７での抗ＯＸ４０抗体ＤＳのＴｍｏｎｓｅｔ（５３．０℃）は、約５１℃であった他の製剤でのＴｍｏｎｓｅｔよりも高かった。

[000300]

[000301]外見、ｐＨ、タンパク質濃度および浸透圧
[000302]外見、ｐＨおよびタンパク質濃度の結果は表１３に示された。ＰＳ８０なしの４０℃で４週間のインキュベーション、凍結解凍および攪拌後の製剤４においておよび４０℃で４週間のインキュベーション後の製剤Ｆ６において、少数の目に見える粒子が観察された。調査中のすべての製剤についてｐＨおよびタンパク質濃度に有意な変化はなかった。これらのデータにより、例えば、凍結解凍、４０℃で４週間の貯蔵（ＰＳ８０はＰＳ２０よりも好ましい）、および／または３日間の攪拌中、本開示の医薬組成物の安定性に界面活性剤が不可欠であることが示唆される。

[000303]

[000304]

[000305]ＳＥＣ－ＨＰＬＣ
[000306]表１５に示されるように、主ピーク、凝集および断片の組成は図１２、図１３および図１４に提示されたが、５サイクルの凍結解凍および２５℃で３日間の攪拌後ＳＥＣ－ＨＰＬＣに有意な変化は観察されなかった。４０℃での４週間の貯蔵後、主ピークは、製剤Ｆ５で１４．０％の最大の低下を、製剤Ｆ４で５．１％のごくわずかな低下を示した。

[000307]ｉＣＩＥＦ
[000308]主ピーク、酸性ピークおよび塩基性ピークの組成の結果は表１５、図１５、図１６および図１７に示された。５サイクルの凍結解凍および２５℃で３日間の攪拌後ｉＣＩＥＦに有意な変化は観察されなかった。４０℃での４週間の貯蔵後、主ピークの結果は、製剤Ｆ５で２９．５％の最大の低下を、製剤Ｆ４で２３．７％のごくわずかな低下を示した。

[000309]Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ（Ｎ＆ＮＲ）
[000310]抗ＯＸ４０抗体ＤＳの純度の変化は、表１５、図１８および図１９に提示された。５サイクルの凍結解凍および２５℃で３日間の攪拌後Ｃａｌｉｐｅｒ－ＳＤＳ（Ｒ＆ＮＲ）に有意な変化は観察されなかった。４０℃での４週間の貯蔵後、製剤Ｆ３およびＦ７での非還元の結果は、それぞれ５．５％および５．３％のより低下を示した。製剤Ｆ７での還元の結果は、１．３％のごくわずかな低下を示し、他の製剤では有意差は観察されなかった。

[000311]

[000312]顕微鏡でないと見えない粒子
[000313]表１６に示されるように、４０℃で４週間のインキュベーション後、製剤Ｆ６では顕微鏡でないと見えない粒子が増加した。ＰＳ８０なしの製剤Ｆ４では、５サイクルの凍結解凍および２５℃で３日間の攪拌後、顕微鏡でないと見えない粒子が増加した。

[000314]

[000315]効力
[000316]表１７に示されるように、４０℃で４週間のインキュベーション後、効力の有意な変化は観察されなかった。

[000317]

[000318]ｋＤおよびＴａｇｇ
[000319]目的
[000320]賦形剤スクリーニングおよび界面活性剤強度スクリーニング研究の結果に基づいて、ｋＤおよびＴａｇｇは、異なる界面活性剤強度を用いてタンパク質の拡散および凝集を調べた。

[000321]実験方法
[000322]製剤Ｆ４のスペア試料（２０ｍＭのグルタミン／ヒスチジン ｐＨ５．０、８％（ｗ／ｖ）スクロース）は、０．２２μｍのＰＶＤＦ膜フィルターを通して濾過し、製剤緩衝剤により異なるタンパク質濃度まで希釈した。１０％のＰＳ８０保存液を製剤中に配合した。タンパク質濃度および界面活性剤強度を表１８に示した。２ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬだけをＴａｇｇにより調べた。ｋＤの温度は、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃および４０℃であった。

[000323]

[000324]ｋＤ結果
[000325]表１９に示されるように、０．０４％のＰＳ８０を有する製剤中のｋＤの結果は他の製剤よりも悪かった。

[000326]

[000327]Ｔａｇｇ結果
[000328]表２０に示されるように、すべての製剤で有意差は観察されなかった。
[000329]

[000330]結論
[000331]抗ＯＸ４０抗体ＤＳの安定性は、４０℃で４週間のインキュベーション、５サイクルの凍結解凍および３００ｒｐｍでの攪拌後に、それぞれスクロース、トレハロース、ソルビトール、ＰＳ８０、ＰＳ２０を含有する異なる製剤条件および異なる界面活性剤強度で調べられた。

[000332]結果は、タンパク質を安定化させるのにスクロース、トレハロースおよびソルビトール間に有意な相違を示さなかった。４０℃で４週間のインキュベーション後ＰＳ２０を有する製剤に目に見える粒子が観察された。ＳＥＣ－ＨＰＬＣの主ピークは、０．０８％のＰＳ８０を有する製剤で１４．０％の最大の低下を示し、これは、界面活性剤強度が高いほどタンパク質立体構造にとってよくなかったことを意味する。

[000333]ｋＤの結果は、０．０１％のＰＳ８０および０．０２％のＰＳ８０を有するまたはＰＳ８０なしの製剤よりも、０．０４％のＰＳ８０を有する製剤での抗ＯＸ４０抗体ＤＳの拡散は弱かったが、それでも許容できることを示した。

[000334]したがって、２０ｍＭのグルタミン／ヒスチジン緩衝剤ｐＨ５．０、８％（ｗ／ｖ）スクロース、０．０２％（ｗ／ｖ）ＰＳ８０および２０ｍＭのグルタミン／ヒスチジン緩衝剤ｐＨ５．０、８％（ｗ／ｖ）スクロース、０．０４％（ｗ／ｖ）ＰＳ８０である２つの製剤が、製剤確認研究において抗ＯＸ４０抗体ＤＳのための製剤として推奨された。

[000335]最適化された医薬製剤は下の表２１にまとめられている。
[000336]

実施例５：医薬製剤のための長期安定性研究
[000337]本開示の医薬製剤の２つのバッチ（非ＧＭＰ バッチ番号１およびＧＭＰ バッチ番号２、表２２参照）を、抗ＯＸ４０抗体ＤＳ、グルタミン／ヒスチジン緩衝剤（９．３９ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミン酸および１０．６１ｍｍｏｌ／Ｌのヒスチジンより調製）、スクロースおよびポリソルベート８０を使用して調製し、抗ＯＸ４０抗体ＤＳの濃度は５０ｍｇ／ｍｌであり、グルタミン／ヒスチジン緩衝剤の濃度は２０ｍｍｏｌ／Ｌであり、スクロースの濃度は８％（ｗ／ｖ）であり、ポリソルベート８０の濃度は０．０２％（ｗ／ｖ）であり、製剤のｐＨは約５．０であった。長期安定性試験を、医薬製剤の２つのバッチを表２３に示される貯蔵条件下で保存することにより２つのバッチで実施し、試料は定期的に採取して医薬製剤の安定性を測定した。モニターした品質特性は、色、透明さ、ｐＨ、ポリソルベート８０含量、目に見える粒子、顕微鏡でないと見えない粒子状物質、ＣＥＸ－ＨＰＬＣ、ＳＥＣ－ＵＰＬＣ、ＣＥ－ＳＤＳ（還元および非還元）、タンパク質濃度、結合能、無菌性および容器完全性試験（ＣＣＩＴ）を含んだ。ＣＣＩＴは、年間時点でおよび長期貯蔵条件の満了時に実施した。

[000338]非ＧＭＰ バッチ番号１およびＧＭＰ バッチ番号２についての３カ月安定性データは表２４および表２５に示されている。長期貯蔵条件で２つのバッチに何の傾向も有意差も観察されなかった。

実施例６：毒性およびトキシコキネティクスについての動物研究
[000339]目的
[000340]本研究の目的は、カニクイザルに２９日間にわたって静脈内（ＩＶ）注入により投与された場合の、本明細書で提供される医薬製剤の潜在的毒性を１日目、８日目、１５日目、２２日目および２９日目に判定することである。２８日の回復期間に続く毒性効果の可逆性、残留性、または遅延発生を査定することでもある。さらに、本明細書で提供される医薬製剤のトキシコキネティクス（ＴＫ）、免疫原性、および安全性薬理評価が判定される。

[000341]実験設計
[000342]４０頭（２０／性別）のカニクイザルを５／性別／群の４つの群に無作為に割り当てて、週１回の静脈内（ＩＶ）注入後、表２６に示される医薬製剤の毒性を１日目、８日目、１５日目、２２日目および２９日目に判定する。対照群は溶媒を投与する。動物は体重に基づいてＰｒｏｖａｎｔｉｓにより群に無作為に割り当てられる。研究設計は表２７に示されている。

[000343]

[000344]最後の２つのサル／性別／群は回復用に割り当てられる。
[000345]群１～４のすべての利用可能な投薬期動物は３０日目に死体解剖される。群１～４のすべての利用可能な回復動物は５８日目に死体解剖される。

[000346]評価基準
[000347]評価基準は、生存率（罹患率／死亡率）、臨床所見、体重、摂食量、臨床病理（血液学、血液性化学検査、血液凝固、尿検査）、体温、臓器重量、肉眼的（死体解剖）評価、組織病理学的評価、免疫原性／免疫毒性学評価およびトキシコキネティクスを含んだ。

Claims (23)

1. モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片、緩衝剤、安定化剤、および界面活性剤を含む医薬製剤。
2. モノクローナル抗ＯＸ４０抗体が、重鎖および軽鎖を含み、重鎖が
   配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、
   配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、
   配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３
   を含む重鎖可変領域Ｖ_Ｈを含み、
   軽鎖が
   配列番号４に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、
   配列番号５に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、
   配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
   を含む軽鎖可変領域Ｖ_Ｌを含み、
   重鎖がＦｃ領域変異体をさらに含み、Ｆｃ領域変異体がヒトＩｇＧ１ Ｎ２９７Ａである、
   請求項１に記載の医薬製剤。
3. 重鎖可変領域Ｖ_Ｈが、配列番号７、配列番号９、および配列番号１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１～２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
4. 軽鎖可変領域Ｖ_Ｌが、配列番号８、配列番号１１、および配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
5. 医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度が、約０．５～２００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約４０～６０ｍｇ／ｍｌである、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
6. 医薬製剤が約５．０～８．０のｐＨを有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
7. 緩衝剤が、酢酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、クエン酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、アルギニン緩衝剤、クエン酸＆アルギニン緩衝剤、およびグルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤からなる群から選択され、医薬製剤中の緩衝剤の濃度が約１～１００ｍｍｏｌ／Ｌである、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
8. 安定化剤が、スクロース、ソルビトール、トレハロース、キシリトールおよびマンノースからなる群から選択され、医薬製剤中の安定化剤の濃度が約０．５％～５０％ ｗ／ｖである、請求項１～７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
9. 界面活性剤が、ポリソルベート８０およびポリソルベート２０からなる群から選択され、医薬製剤中の界面活性剤の濃度が約０．００１～０．１％ ｗ／ｖである、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬製剤。
10. 医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度が約４０～６０ｍｇ／ｍｌであり、医薬製剤中の緩衝剤の濃度が約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌであり、医薬製剤中の安定化剤の濃度が約４～１２％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度が約０．０１～０．０５％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤が約５．０～６．０のｐＨを有する、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬製剤。
11. 医薬製剤中のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体の濃度が約５０ｍｇ／ｍｌであり、医薬製剤中の緩衝剤の濃度が約２０ｍｍｏｌ／Ｌであり、医薬製剤中の安定化剤の濃度が約４．５～８．８％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度が約０．０２～０．０４％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤が約５．０～５．５のｐＨを有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の医薬製剤。
12. 医薬製剤中の安定化剤の濃度が約８％ ｗ／ｖであり、医薬製剤中の界面活性剤の濃度が約０．０２％ ｗ／ｖであり、および／または医薬製剤が約５．０のｐＨを有する、請求項１１に記載の医薬製剤。
13. 緩衝剤が、グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤、アスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはその組合せであり、および／または
    安定化剤が、スクロース、ソルビトール、トレハロース、またはその組合せであり、および／または
    界面活性剤がポリソルベート８０である、
    請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
14. モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約４０～６０ｍｇ／ｍｌの濃度で、
    グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を約１０～３０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、
    スクロースを約４～１２％ ｗ／ｖの濃度で、および
    ポリソルベート８０を約０．０１～０．０５％ ｗ／ｖの濃度で
    含み、
    医薬製剤が約５．０～５．５のｐＨを有する、
    請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
15. モノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を約５０ｍｇ／ｍｌの濃度で、
    グルタミン酸＆ヒスチジン緩衝剤またはアスパラギン酸＆ヒスチジン緩衝剤を約２０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で、
    スクロースを約８％ ｗ／ｖの濃度で、および
    ポリソルベート８０を約０．０２％ ｗ／ｖの濃度で
    含み、
    医薬製剤は約５．０のｐＨを有する、
    請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
16. 医薬製剤が、皮下投与にまたは静脈内投与に適している、請求項１～１５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
17. ＯＸ４０関連疾患の処置または予防のための薬物の製造における請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬製剤の使用。
18. ＯＸ４０関連疾患が、移植片対宿主病などの炎症および／または自己免疫疾患である、請求項１７に記載の使用。
19. ＯＸ４０関連疾患を処置する必要がある対象においてＯＸ４０関連疾患を処置する方法であって、請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬製剤の治療有効量を対象に投与するステップを含む方法。
20. 投与が、皮下注射または静脈内注射による、請求項１９に記載の方法。
21. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬製剤を調製する方法であって、緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、および薬学的有効量のモノクローナル抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合断片を組み合わせるステップを含む方法。
22. １つまたは複数の容器に請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬製剤を含むキット。
23. キットを使用するための説明書をさらに含む、請求項２２に記載のキット。
    

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