JP2024541059A - Ｂｃｍａモノクローナル抗体及び抗体薬物複合体 - Google Patents

Abstract

本開示は、細胞毒素と共役した、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対する抗体若しくはモノクローナル抗体を含む抗体薬物複合体（ＡＤＣ）、又はその抗原結合断片に関する。ＢＣＭＡ抗体とそのＡＤＣは、ＢＣＭＡの検出だけでなく、多発性骨髄腫細胞、Ｂ細胞又は形質細胞媒介疾患、免疫疾患の治療に有用である。更に、医薬組成物及び医学的治療方法が開示される。

Description

本願は、２０２１年１１月３日に出願されたＰＣＴ／ＣＮ２０２１／１２８４５３の利益を主張し、これを参照として本明細書に組み込む。

配列表の参照
本願には、２０２２年１０月１０日に作成され、４０ＫＢを含む、ＦＥ００６８８ＰＣＴ－Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｌｉｓｔｉｎｇ ｘｍｌという名前のファイルに電子配列リストが含まれる。これは参照により本明細書に組み込まれる。

Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ、ＣＤ２６９）は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーのメンバーである（非特許文献１）。ＢＣＭＡは２つの異なるリガンド、Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ；ＢｌｙＳ、ＴＡＬＬ－１、ＴＮＦＳＦ１３Ｂ、及びＴＨＡＮＫとしても知られる）及び増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ、ＴＮＦＳＦ１３）に結合する（非特許文献２及び３）。ＢＣＭＡのリガンドは、更に２つのＴＮＦ受容体、膜貫通活性化因子、カルシウムモジュレーター、シクロフィリンリガンド相互作用因子（ＴＡＣＩ）、及びＢＡＦＦ受容体（ＢＲ３とも呼ばれるＢＡＦＦ－Ｒ）に結合する（非特許文献４）。従って、ＢＣＭＡは、長期の液性免疫を維持する形質細胞の生存を仲介する機能的活性のために、主に知られている。

ＢＣＭＡの発現は、多くのがん、自己免疫疾患、及び感染症と関連付けられている（非特許文献５）。ＢＣＭＡタンパク質は、多発性骨髄腫患者由来の形質細胞の表面に高度に発現している（非特許文献６～８）。そのため、ＢＣＭＡは過去１０年間、多発性骨髄腫及び自己免疫疾患の治療標的として広く研究された（非特許文献９及び１０）。

多発性骨髄腫（ＭＭ）は、世界中で頻繁に発生する血液悪性腫瘍である（非特許文献１１）。これは、モノクローナル免疫グロブリンの産生の有無にかかわらず、形質細胞の増殖を特徴とする血液悪性腫瘍である。ＭＭ患者の管理は通常、導入／ネオアジュバント療法（化学療法、放射線、手術、バイオホスホネートを含む）から始まり、通常は、デキサメタゾンを含むプロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、免疫調節剤（ＩＭＩＤ）、続いて対象となる患者において自家（造血）幹細胞移植（ＡＳＣＴ）が行われる。過去５年間に、米国ＦＤＡは、多発性骨髄腫の治療のための、３個のモノクローナル抗体（ダラツムマブ、イサツキシマブ、エロツズマブ）、エクスポーター－１阻害剤（セリネキソール）、抗ＢＣＭＡ抗体－薬物共役体（ベランタマブマフォドチン）、及び２個のＢＣＭＡキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法（ｉｄｅｃａｂｔａｇｅｎｅｖｉｃｌｅｕｃｅｌ及びｃｉｌｔａｃａｂｔａｇｅｎｅａｕｔｏｌｅｕｃｅｌ）を承認した。多発性骨髄腫のＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＨ５を標的とする二重特異性抗体を含む、新規の標的及び構築物を用いた多くの臨床試験が進行中である。治療レジメンの段階的な改善により、多発性骨髄腫（ＭＭ）患者の生存期間は、大幅に延長した。それでも、ＭＭは依然として予後不良の悪夢であり、この疾患自体は依然として不治の病である（非特許文献１２及び１３）。そして、モノクローナル抗体の使用を含む、複数の治療ライン後に進行した患者の全生存期間の中央値は、わずか８．６か月である。新たに承認されたＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法は、臨床研究で全体的な有効性が８０％を超えることが実証されているが、患者の自己細胞からの製造には、独自の制限や課題があり、結果として非常に高価な治療費がかかる。ファーストインクラスのＢＣＭＡ ＡＤＣであるベランタマブマフォドチンの場合、ＭＭに対する全奏効率がわずか３２％で、更にこのＡＤＣ患者の６０％以上において、用量調整、用量遅延、治療中止を必要とするいくつかの眼毒性という特有の副作用が報告された（非特許文献１４）。従って、実行可能性、安全性、及び有望な有効性の点で、より多くのＭＭ治療の選択肢、特に、既存の薬剤の耐性を克服する治療法が、依然として緊急に必要とされている。

Marino, S. F.，et al, Data Brief. 2015, 6: 394-7. doi: 10. 1016/j.dib.2015.12.023 Schiemann, B, et al, Science. 2001, 293（5537）：2111-4 Vidal-Laliena, M. et al., Cell Imunol. 236(1-2): 6-16 Yan, M. et al., Curr Biol. 2001, 11 (19): 1547-52 Coquery, C. M. and Erickson, L. D. Crit. Rev. Immunol. 2012; 32(4): 287-305 Novak et al., Blood, 103(2): 689-694 (2004) Neri et al., Clinical Cancer Research, 73(19): 5903-5909 (2007) Moreaux et al., Blood、703 (8): 3148-3157 (2004) Ni, B. and Hou, J., Hematology. 2022, 27(1):343-352 Tan, CR and Shah, UA, CurrHematolMalig Rep. 2021, 16(5): 367-383 Sung, H, et al, CA Cancer J Clin.2021, 71(3): 209-249 Davis, JA et al, J Oncol Pharm Pract. 2022 Jan 10, doi: 10.1177/10781552211073517 Fuchsl, F. and Krackhardt, A. M. Cells. 2022 Jan 25;11(3)，doi: 10.3390/cells11030410). Wahab, A. et al, Front Oncol. 2021, 11:678634. doi: 10.3389/fonc.2021.678634

本願において、我々は、ＢＣＭＡ抗体、及びＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対して向けられ、細胞毒性剤と結合したＢＣＭＡモノクローナル抗体又はそのＢＣＭＡ抗原結合断片を含む、抗体－薬物共役体（ＡＤＣ）を開示する。ＢＣＭＡ抗体とそのＡＤＣは、ＢＣＭＡの検出だけでなく、様々ながん、自己免疫性疾患、及び感染症の治療及び診断に有用である。本発明においても、これらのＢＣＭＡ ＡＤＣを構築するために、特異的共役方法（ＰＣＴ／ＣＮ２０２１／１２８４５３）の技法が引き続き適用される。更に、医薬組成物、スクリーニング、及び医学的治療方法が開示される。

本発明は、ＢＣＭＡ（ＣＤ２６９）に特異的に結合する抗原結合タンパク質、例えばＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＣＭＡ受容体へのＢＡＦＦ及び／又はＡＰＲＩＬの結合を阻害する抗体を提供する。本発明はまた、ＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＣＭＡへのＢＡＦＦ及び／又はＡＰＲＩＬの結合を阻害し、且つ内部移行することができる抗原結合タンパク質を提供する。ＢＣＭＡモノクローナル抗体は、（ａ）配列番号１の相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに（ｂ）配列番号４のＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５のＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号６のＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

本発明はまた、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対する、細胞毒性剤と共役したモノクローナル抗体又はその抗原結合断片を含む抗体薬物結合体（ＡＤＣ）を提供する。更なる実施形態では、抗原結合タンパク質は、チューブリシン類縁体、ＰＢＤ二量体、又はオーリスタチン類縁体等の毒素と共役される。

更に、本発明は、前述の抗体－薬物共役体及び薬学的に許容される担体を含む組成物、並びに多発性骨髄腫細胞をＡＤＣと接触させることによって、ＢＣＭＡを発現する多発性骨髄腫細胞（多発性骨髄腫幹細胞を含む）を死滅させる方法を提供する。

本発明の別の態様では、抗体媒介疾患若しくは形質細胞媒介疾患、又は多発性骨髄腫（ＭＭ）等の形質細胞悪性腫瘍等のＢ細胞関連障害若しくは疾患に罹患しているヒト患者を治療する方法が提供される。該方法は、治療有効量の本明細書に記載の抗原結合抗体及び／又はそのＡＤＣを前記患者に投与する工程を含む。

本発明の更なる態様では、関節リウマチ、乾癬、１型糖尿病、又は多発性硬化症に罹患しているヒト患者を治療する方法が提供され、この方法は、治療有効量の本明細書に記載の抗原結合タンパク質及び／又はＡＤＣを前記患者に投与する工程を含む。

組換え発現ＴｒｘＡ－ＢＣＭＡに対する、ハイブリドーマ抗体ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２、及び陽性対照抗体Ｊ６Ｍ０の結合親和性を示す。 組換え発現ＴｒｘＡ－ＢＣＭＡに対する、ハイブリドーマ抗体ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２、キメラ抗体ｃ５Ｄ２、ヒト化抗体ｈｕ５Ｄ２、及び陽性対照抗体Ｊ６Ｍ０の結合親和性を示す。 内在性ＢＣＭＡ発現細胞株ＮＣＩ－Ｈ９２９に対する、ヒト化抗体ｈｕ５Ｄ２、ｈｕ５Ｄ２結合ＡＤＣ、及びアイソタイプ対照抗体の結合親和性を示す。 抗体薬物共役体であるｈｕ５Ｄ２－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）による、ＢＣＭＡ過剰発現ＲＰＭＩ－８２２６細胞株の死滅を示す。 ＡＤＣ Ｊ６Ｍ０－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）、裸のｈｕ５Ｄ２抗体、非共役チューブリシンＢ類縁体（化合物３９０）、及び及びパクリタキセルと比較した、抗体薬物共役体であるｈｕ５Ｄ２－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）による細胞株ＮＣＩ－Ｈ９２９の死滅を示す。 ＡＤＣ Ｊ６Ｍ０－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）、裸のｈｕ５Ｄ２抗体、非共役チューブリシンＢ類縁体（化合物３９０）、及び及びパクリタキセルと比較した、抗体薬物共役体であるｈｕ５Ｄ２－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）による細胞株ＭＭ．１Ｓの死滅を示す。 ＡＤＣ Ｊ６Ｍ０－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）、裸のｈｕ５Ｄ２抗体、非共役チューブリシンＢ類縁体（化合物３９０）、及び及びパクリタキセルと比較した、抗体薬物共役体であるｈｕ５Ｄ２－チューブリシンＢ類縁体共役体（Ｃ－３９０）によるＢＣＭＡ陰性発現細胞株Ｊｕｒｋａｔの死滅を示す。 パクリタキセルと比較した、ＢＣＭＡ抗体（ｈｕ５Ｄ２）－薬物共役体：Ｃ－２２１、Ｃ－２０２、Ｃ－８８、Ｃ－３２６、Ｃ－３０によるＢＣＭＡ発現細胞株U２６６Ｂ１の死滅を示す。 ＢＣＭＡ抗体の糖ペプチドのＭＳ／ＭＳ娘イオン又はプロダクトイオンスペクトルを示す。（ａ）：非グリコシル化ペプチド；（ｂ）：糖ペプチドを含むＭａｎ５；（ｃ）：Ｇ０Ｆ－ＧｌｃＮＡｃ含有糖ペプチド；（ｄ）：Ｇ０含有糖ペプチド；（ｅ）：糖ペプチドを含むＧ０Ｆ；（ｆ）：糖ペプチドを含むＧ１；（ｇ）：糖ペプチドを含むＧ１Ｆ；（ｈ）：糖ペプチドを含むＧ２Ｆ。 Ｎ－脱グリコシル化及び還元後のＢＣＭＡ－チューブリシンＢ類縁体ＡＤＣ（Ｃ－３９０）の中レベルの特性評価。（ａ）脱グリコシル化及びＤＴＴ還元後に得られたＡＤＣ断片のｒｐＨＰＬＣクロマトグラム。０個又は１個の薬物分子が結合した軽鎖（ＬＣ）（Ｌ０及びＬ１）、（ｂ）０個、１個、２個、又は３個の薬物分子が結合した重鎖（Ｈ０、Ｈ１、Ｈ２、及びＨ３）。 ＢＣＭＡ ＡＤＣ（Ｃ－３９０）の薬物搭載ペプチドの割合。（ａ）：０個又は１個の薬剤分子が結合したＬＣペプチド［ＧＥＣ］（Ｄ０及びＤ１）。（ｂ）：アーム部で０個又は１個の薬剤分子が結合したＨＣペプチド［ＳＣＤＫ］（Ｄ０及びＤ１）。（ｃ）：ヒンジ部で０個、１個、又は２個の薬剤分子が結合したＨＣペプチド［ＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫ］（Ｄ０、Ｄ１、及びＤ２）。 ＢＣＭＡ－ＡＤＣ（Ｃ－３９０）の薬物搭載ペプチドのＭＳ／ＭＳ娘イオンスペクトル又はプロダクトイオンスペクトルを示す。 （ａ）：重鎖［ＳＣ_{（２２３）}ＤＫ］＋１ 薬物； （ｂ）：重鎖［ＴＨＴＣ_{（２２９）}ＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫ］＋１ 薬物； （ｃ）：重鎖［ＴＨＴＣＰＰＣ_{（２３２）}ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫ］＋１ 薬物； （ｄ）：重鎖［ＴＨＴＣ_{（２２９）}ＰＰＣ_{（２３２）}ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫ］＋２ 薬物； （ｅ）：軽鎖［ＧＥＣ_{（２１９）}］＋１ 薬物。 ＢＣＭＡ－ｍｃＭＭＡＦ（ベランタマブｍｃＭＭＡＦ）及びＰＢＳ緩衝液（対照）と比較した、ヒト多発性骨髄腫ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞異種移植マウスモデルを用いた、一連の単回用量（３ｍｇ／ｋｇ）による、ＢＣＭＡ（ｈｕ５Ｄ２）ＡＤＣ（Ｃ－６８ａ、Ｃ－１１５、Ｃ－１９２、Ｃ－２０２、Ｃ－２２１、Ｃ－２９０、Ｃ－３０６、Ｃ－３８５、Ｃ－３９０、Ｃ－３９９、Ｃ－４０２、Ｃ－４１７，ＤＡＲは表７に示す。）の腫瘍体積の変化を示す。本図は、１３個の共役体の全てが抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍活性の順序は、Ｃ－３８５＜Ｃ－３０６＜Ｃ－２９０＜Ｃ－６８ａ＜Ｃ－１１５＜ＢＣＭＡ－ｍｃＭＭＡＦ＜Ｃ－１９２＜Ｃ－２０２＜Ｃ－３９９＜Ｃ－３９０＜Ｃ－４１７＜Ｃ－４０２＜Ｃ－２２１であることを示している。 ベランタマブｍｃＭＭＡＦ及びＰＢＳ緩衝液（対照）と比較した、ヒト多発性骨髄腫ＪＪＮ－３細胞異種移植マウスモデルを用いた、一連の単回用量（５ｍｇ／ｋｇ）による、ｈｕ５Ｄ２－ＡＤＣの腫瘍体積の変化を示す。本図は、９個の共役体の全てが抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍活性の順序は、パクリタキセル＜Ｃ－３８５＜ベランタマブｍｃＭＭＡＦ＜Ｃ－１９５＜Ｃ－１３７＜Ｃ－１８１ｂ＜Ｃ－１２６＜Ｃ－８３＜Ｃ－２７７＜Ｃ－２５８であることを示している。 ベランタマブｍｃＭＭＡＦ及びＰＢＳ緩衝液（対照）と比較した、ヒト多発性骨髄腫ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞異種移植マウスモデルを用いた、一連の単回用量（２ｍｇ／ｋｇ）による、ｈｕ５Ｄ２－ＡＤＣの腫瘍体積の変化を示す。本図は、７個の共役体の全てが抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍活性の順序は、ベランタマブｍｃＭＭＡＦ＜Ｃ－４０６＜Ｃ－３９６＜Ｃ－３９９＜Ｃ－４００＜Ｃ－２２１ｂ＜Ｃ－４０２であることを示している。 ビス連結体の成分の一般的な合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス連結体の成分の一般的な合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス連結体の成分の一般的な合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 チューブリシンＢ類縁体の成分の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むカンプトテシン類縁体及びアマニチン類似体の成分の合成を示す。 ビス共役連結体を含むアマニチン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むアマニチン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むアマニチン類縁体の合成を示す。 ビス共役連結体を含むアマニチン類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体及びＰＢＤ類縁体の成分を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むＰＢＤ類縁体の合成を示す。 連結体を含むＰＢＤ類縁体の合成を示す。 連結体を含むＰＢＤ類縁体及び連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の成分の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。 連結体を含むチューブリシンＢ類縁体の合成を示す。

定義

「アルキル」とは、炭素原子から１個又は２個の水素原子を除去することによってアルカンから誘導される脂肪族炭化水素基又は一価基を指す。鎖中にＣ_１～Ｃ_８（１～８の炭素原子）を有する直鎖状又は分岐でもよい。「分岐」とは、直鎖状のアルキル基に１又は複数の低級Ｃ数アルキル基、例えば、メチル、エチル、又はプロピル基が結合していることを指す。アルキル基の具体例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、３－ペンチル、オクチル、ノニル、デシル、シクロペンチル、シクロヘキシル、２，２－ジメチルブチル、２，３－ジメチルブチル、２，２－ジメチルペンチル、２，３－ジメチルペンチル、３，３－ジメチルペンチル、２，３，４－トリメチルペンチル、３－メチルヘキシル、２，２－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルヘキシル、２，５－ジメチルヘキシル、３，５－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルペンチル、２－メチルヘプチル、３－メチルヘプチル、ｎ－ヘプチル、イソヘプチル、ｎ－オクチル、及びイソオクチルが含まれる。Ｃ_１～Ｃ_８アルキル基は未置換でもよく、１又は複数の置換基（但し、次の置換基に制限されない）で置換されてもよい。前記置換基としては、－Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_８アルキル）、－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、－ＳＲ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－ＯＨ、－ハロゲン、－Ｎ_３、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｒ’）、－Ｎ（Ｒ’）_２、及び－ＣＮが挙げられ、尚、Ｒ’はそれぞれ独立にＣ_１～Ｃ_８アルキル及びアリールから選択される。

「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を指し、フッ素及び塩素原子が好ましい。

「ヘテロアルキル」とは、１～４個の炭素原子が独立して、Ｏ、Ｓ、及びＮからなる群から選択されたヘテロ原子よりに置換されたＣ_２～Ｃ_８アルキルをいう。

「炭素環」（Ｃａｒｂｏｃｙｃｌｅ）は、炭素数３～８の単環系又は炭素数７～１３の二環系の飽和又は不飽和環を指す。単環系炭素環類は、３～６、より典型的には５又は６の環原子を有する。二環系炭素環類は、７～１２の環原子を有し、二環系［４，５］、［５，５］、［５，６］、又は［６，６］として配置されるか、あるいは９～１０の環原子を有し、二環系［５，６］又は［６，６］として配置される。代表的なＣ_３～Ｃ_８の炭素環類（Ｃ_３～Ｃ_８ ｃａｒｂｏｃｙｃｌｅｓ）には、－シクロプロピル、－シクロブチル、－シクロペンチル、－シクロペンタジエニル、－シクロヘキシル、－シクロヘキセニル、－１，３－シクロヘキサジエニル、－１，４－シクロヘキサジエニル、－シクロヘプチル、－１，３－シクロヘプタジエニル、－１，３，５－シクロヘプタトリエニル、－シクロオクチル、及び－シクロオクタジエニルが含まれるが、これらに限定されない。

Ｃ_３～Ｃ_８炭素環（Ｃ_３～Ｃ_８ ｃａｒｂｏｃｙｃｌｅ）は、３、４、５、６、７、又は８個の炭素原子を有する飽和又は不飽和非芳香族炭化水素炭素環状化合物を指す。Ｃ_３～Ｃ_８炭素環は未置換のものでもよく、あるいは１以上の置換基で置換されたものでもよい。前記置換基としては、これらに限定されないが、－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_８アルキル）、－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、－ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ’、－ＳＲ’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－ＯＨ、－ハロゲン、－Ｎ_３、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｒ’）、－Ｎ（Ｒ’）_２、及び－ＣＮが含まれ、ここで、Ｒ’はそれぞれ独立にＣ_１～Ｃ_８アルキル及びアリールから選択される。

「アルケニル」は、炭素－炭素二重結合を有する脂肪族炭化水素基を指し、鎖中に２～８個の炭素原子を有する直鎖状又は分岐状でもよい。アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ｎ－ブテニル、ｉ－ブテニル、３－メチルブト－２－エニル、ｎ－ペンテニル、ヘキシレニル、ヘプテニル、オクテニルが含まれる。

「アルキニル」は、炭素－炭素三重結合を有する脂肪族炭化水素基を指し、鎖中に２～８個の炭素原子を有する直鎖又は分枝状であってもよい。アルキニル基には、例えば、エチニル、プロピニル、ｎ－ブチニル、２－ブチニル、３－メチルブチニル、５－ペンチニル、ｎ－ペンチニル、ヘキシリニル、ヘプチニル、オクチニルが含まれる。

「アルキレン」は、親のアルカンの同一又は２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去することにより由来する２個の１価基中心を有する、炭素数１～１８の、飽和の、直鎖状又は分岐状鎖又は環状炭化水素基を指す。典型的なアルキレン基には、メチレン（－ＣＨ_２－）、１，２－エチル（－ＣＨ_２ＣＨ_２－）、１，３－プロピル（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、１，４－ブチル（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）等が含まれるが、これらに限定されない。

「アルケニレン」は、親のアルケンの同一又は２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去することにより由来する２個の１価基中心を有する、炭素数２～１８の、不飽和の、直鎖状又は分岐状鎖又は環状炭化水素基を指す。典型的なアルケニレン基には、１，２－エチレン（－ＣＨ＝ＣＨ－）が含まれるが、これらに限定されない。

「アルキニレン」は、親のアルキンの同一又は２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去することにより由来する２個の１価基中心を有する、炭素数２～１８の、不飽和の、直鎖状又は分岐状鎖又は環状炭化水素基を指す。典型的なアルキニレン基には、アセチレン、プロパルギル、及び４－ペンチニルが含まれるが、これらに限定されない。

「アリール」又はＡｒは、３～１４個の炭素原子、好ましくは６～１０個の炭素原子を含む、１又は数個の環からなる芳香族又はヘテロ芳香族基を指す。「ヘテロ芳香族基」の語は、芳香族基上の１又は数個の炭素、好ましくは１、２、３、又は４個の炭素原子が、Ｏ、Ｎ、Ｓｉ、Ｓｅ、Ｐ、又はＳ、好ましくはＯ、Ｓ、及びＮで置き換えられたものを指す。アリール又はＡｒの語はまた、１又は数個のＨ原子が独立して、－Ｒ’、－ハロゲン、－ＯＲ’、又は－ＳＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－Ｎ＝ＮＲ’、－Ｎ＝Ｒ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ’、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ’、－ＰＲ’Ｒ’’、－Ｐ（Ｏ）Ｒ’Ｒ’’、－Ｐ（ＯＲ’）（ＯＲ’’）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）（ＯＲ’’）、又は－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）（ＯＲ’’）により置き換えられたものも指す。前記Ｒ’、Ｒ’’は独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、カルボニル、又は薬学的塩である。

「複素環」（Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）は、１～４個の環炭素原子が独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｅ、Ｂ、Ｓｉ、及びＰの群からのヘテロ原子で置換されている環系をいう。好ましいヘテロ原子はＯ、Ｎ、及びＳである。複素環は、The Handbook of Chemistry and Physics、第78版、CRC Press、Inc.、1997-1998、p225-226頁に記載されており、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。好ましい非芳香族複素環には、これらに限定されないが、エポキシ、アジリジニル、チラニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキシラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロピラニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、ピラニル、イミダゾリニル、ピロリニル、ピラゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピリジル、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリミジニル、ジヒドロチオピラニル、アゼパニル、並びにフェニル基との縮合から生じる縮合系が含まれる。

「ヘテロアリール」又は芳香族複素環の語は、３～１４員、好ましくは５～１０員の芳香族ヘテロ、単環式、二環式、又は多環式の環をいう。その例には、ピロリル、ピリジル、ピラゾリル、チエニル、ピリミジニル、ピラジニル、テトラゾリル、インドリル、キノリニル、プリニル、イミダゾリル、チエニル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、フラニル、ベンゾフラニル、１，２，４－チアジアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾイル、テトラゾリル、イソキノリル、ベンゾチエニル、イソベンゾフリル、ピラゾリル、カルバゾリル、ベンズイミダゾリル、イソキサゾリル、ピリジル－Ｎ－オキシド、及びフェニル基との縮合から生じる縮合系が含まれる。

「アルキル」、「シクロアルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「複素環基」（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）等には、２個の水素原子が除去されることにより形成される、対応する「アルキレン」、「シクロアルキレン」、「アルケニレン」、「アルキニレン」、「アリーレン」、「ヘテロアリーレン」、「複素環基」（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｎｅ）等をも指す。

「アリールアルキル」は、炭素原子、典型的には末端又はｓｐ^３炭素原子に結合した水素原子の１つがアリール基で置換されている、非環式アルキル基を指す。典型的なアリールアルキル基には、これらに限定されないが、ベンジル、２－フェニルエタン－１－イル、２－フェニルエテン－１－イル、ナフチルメチル、２－ナフチルエタン－１－イル、２－ナフチルエテン－１－イル、ナフトベンジル、２－ナフトフェニルエタン－１－イル等が含まれる。

「ヘテロアリールアルキル」は、炭素原子、典型的には末端又はｓｐ^３炭素原子に結合した水素原子の１つがヘテロアリール基で置換されている、非環式アルキル基を指す。典型的なヘテロアリールアルキル基には、これらに限定されないが、２－ベンズイミダゾリルメチル、２－フリルエチル等が含まれる。

「ヒドロキシ保護基」の例には、これらに限定されないが、メトキシメチルエーテル、２－メトキシエトキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、ベンジルエーテル、ｐ－メトキシベンジルエーテル、トリメチルシリルエーテル、トリエチルシリルエーテル、トリイソプロピルシリルエーテル、ｔ－ブチルジメチルシリルエーテル、トリフェニルメチルシリルエーテル、酢酸エステル、置換酢酸エステル、ピバロエート、ベンゾエート、メタンスルホネート、及びｐ－トルエンスルホネートが含まれる。

「脱離基」とは、別の官能基によって置換されることができる官能基を指す。このような離脱基は、当該技術分野でよく知られており、例えば、これらに限定されないが、ハロゲン化物（例えば、塩化物、臭化物、及びヨウ化物）、メタンスルホニル（メシル）、ｐ－トルエンスルホニル（トシル）、トリフルオロメチルスルホニル（トリフラート）、及びトリフルオロメチルスルホネートが含まれる。脱離基として好ましくは、ニトロフェノール；Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）；フェノール；ジニトロフェノール；ペンタフルオロフェノール；テトラフルオロフェノール；ジフルオロフェノール；モノフルオロフェノール；ペンタクロロフェノール；トリフラート；イミダゾール；ジクロロフェノール；テトラクロロフェノール；１－ヒドロキシベンゾトリアゾール；トシレート；メシレート；２－エチル－５－フェニルイソキサゾリウム－３’－スルホネート、自己若しくは他の酸無水物とで形成された酸無水物（例えば、無水酢酸、無水ギ酸）；又はペプチドカップリング反応のための、若しくはミツノブ反応のための縮合試薬により生成する中間体から選択される。

本明細書で以下の略語を使用することができ、以下に示された定義を有する：Ｂｏｃ、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル；ＢｒｏＰ、ブロモトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート；ＣＤＩ、１，１’－カルボニルジイミダゾール；ＤＣＣ、ジシクロヘキシルカルボジイミド；ＤＣＥ、１，２－ジクロロエタン；ＤＣＭ、ジクロロメタン；ＤＩＡＤ、アゾジカルボン酸ジイソプロピル；ＤＩＢＡＬ－Ｈ、水素化ジイソブチルアルミニウム；ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；ＤＥＰＣ、ジエチルホスホロアニジエート；ＤＭＡ、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド；ＤＭＡＰ、４－（Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジン；ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ、ジメチルスルホキシド；ＤＴＴ、ジチオスレイトール；ＥＤＣ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩；ＥＳＩ－ＭＳ、エレクトロスプレー質量分析；ＨＡＴＵ、Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’－Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩；ＨＯＢｔ、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＰＬＣ、高圧液体クロマトグラフィー；ＮＨＳ、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド；ＭＭＰ、４－メチルモルホリン；ＰＡＢ、ｐ－アミノベンジル；ＰＢＳ、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．０～７．５）；ＰＥＧ、ポリエチレングリコール；ＳＥＣ、サイズ排除クロマトグラフィー；ＴＣＥＰ、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；Ｖａｌ、バリン。

「アミノ酸（複数可）」は、天然及び／又は非天然アミノ酸、好ましくはα－アミノ酸であり得る。天然アミノ酸は、遺伝暗号によってコードされるものであり、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、チロシン、トリプトファン、及びバリンである。非天然アミノ酸は、タンパク質形成アミノ酸の派生形であり、例えば、ヒドロキシプロリン、ランチオニン、２－アミノイソ酪酸、デヒドロアラニン、γ－アミノ酪酸（神経伝達物質）、オルニチン、シトルリン、β－アラニン（３－アミノプロパン酸）、γ－カルボキシグルタメート、セレノシステイン（ほとんどの真核生物と同様に存在するが、ＤＮＡによって直接コードされていない）、ピロリジン（一部の古細菌と１つの細菌にのみ含まれる）、Ｎ－ホルミルメチオニン（多くの場合、細菌、ミトコンドリア、葉緑体のタンパク質の最初のアミノ酸）、５－ヒドロキシトリプトファン、Ｌ－ジヒドロキシフェニルアラニン、トリヨードチロニン、Ｌ－３，４－ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、及びＯ－ホスホセリンが含まれる。アミノ酸という用語は、アミノ酸類縁体及び模倣物も含む。類縁体は、Ｒ基が天然アミノ酸の中に見いだされるものではないことを除いて、天然アミノ酸の同じ一般的なＨ_２Ｎ（Ｒ）ＣＨＣＯ_２Ｈ構造を有する化合物である。類縁体の例には、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニン－スルホキシド、及びメチオニンメチルスルホニウムが含まれる。好ましくは、アミノ酸模倣物は、α－アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、それと同様に機能する化合物である。用語「非天然アミノ酸」は、「Ｄ」の立体化学形態を表すことを意図しており、天然アミノ酸は「Ｌ」形態である。本願において１～８個のアミノ酸が使用される場合、アミノ酸配列はプロテアーゼの切断認識配列であることが好ましい。多くの切断認識配列が当該分野において公知であり、例えば、Matayoshi et al. Science 247: 954 (1990)；Dunn et al. Meth. Enzymol. 241: 254 (1994)；Seidah et al. Meth. Enzymol. 244: 175 (1994)；Thornberry, Meth. Enzymol. 244: 615 (1994)；Weber et al. Meth. Enzymol. 244: 595 (1994)；Smith et al. Meth. Enzymol. 244: 412 (1994)；及びBouvier et al. Meth. Enzymol. 248: 614 (1995)を参照；その開示は参照により本明細書に組み込まれる。特に、配列はＶａｌ－Ｃｉｔ、Ａｌａ－Ｖａｌ、Ａｌａ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｌｙｓ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ａｓｎ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ、Ｃｉｔ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｃｉｔ、Ｓｅｒ、及びＧｌｕからなる群から選択される。

「薬学的に」又は「薬学的に許容される」とは、対応する化合物又は化合物組成物が適切な方法で動物又は人間に投与した際に、有害で、アレルギー又は他の有害反応を生じさせないことを指す。

「薬学的に許容される溶媒和物」又は「溶媒和物」は、1又は複数の溶媒分子と開示された化合物との会合を指す。薬理学的に許容される溶媒和物を形成する溶媒の例には、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、及びエタノールアミンが含まれるが、これらに限定されない。

薬学的に許容される補助材料は、全ての担体、希釈剤、助剤又は成形剤を含み、例えば、保存剤、抗酸化剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、溶剤、分散性媒質、コーティング剤、抗菌剤、抗真菌剤、等張剤、吸収遅延剤等を含む。医薬分野において、活性を有する薬物成分にこれら補助材料を加えるという方法は一般的な方法である。補助材料が薬物活性成分と相容しない場合を除き、薬物成分に補助材料を加入することが妥当であるとは言える。良好な結果を得るために、活性を有する補助材料を薬物成分に加入してもよい。

本願発明において、「薬用可能な塩」とは、本発明の化合物の塩類誘導物を指す。適当な修飾により、本願発明に係る化合物が相応の酸塩又はアルカリ塩に形成され得る。薬用可能な塩としては、常用の無毒の塩又は第四級アンモニウムを含み、これら塩は、本願発明に係る化合物と相応の無毒の無機酸又は有機酸によって調製され得る。例えば、無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、アミノスルホン酸、リン酸及び硝酸等を含み、有機酸としては、酢酸、プロピオ酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、トルエンスルホン酸、シュウ酸、フマル酸、及び乳酸等を含み、これら酸は薬学的に許容される塩に用いることが可能である。他の塩としては、トロメタモール、メグルミン、ピロールエタノール等のアンモニウム塩、及びナトリウム、カリウム、カルシウム、亜鉛、マグネシウム等の金属塩を含む。

本願発明において、薬学的な塩は、従来の化学方法により、酸性又は塩基性残基を含む親化合物から製造することができる。一般的に、これらの塩は、水、有機溶媒、又は両者の混合溶媒中で、これらの化合物の遊離酸又は遊離塩基形態と化学量論的な量の適切な塩基又は酸との反応により得ることができる。非水系の反応溶媒として一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルが好ましい。適切な塩のリストとしては、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，第１７版．Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，第１４１８頁に挙げられ、当該開示は参照として組み込まれる。

「投与する」（Ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）又は「投与」（Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）とは、医薬品又はその他の薬剤を対象に譲渡、送達、導入、運搬する任意の態様をいう。このような態様には、経口投与、局所接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病巣、鼻腔、皮下、又は腔投与が含まれる。また、本発明によって企図されるのは、薬剤を投与する際の装置又は機器の利用である。このような装置は、能動輸送又は受動輸送を利用することができ、低速放出又は高速放出送達装置でもよい。

生物学的緩衝剤の略称及び化学名は以下の通りである：
ＡＣＥＳ（Ｎ－（２－アセトアミド）－２－アミノエタンスルホン酸は、ｐＨ６．１～７．５（ｐＫａ＝６．８８）での緩衝に使用される。
ＡＤＡ（Ｎ－（２－アセトアミド）イミノ二酢酸、Ｎ－（カルバモイルメチル）イミノ二酢酸）は、ｐＨ６．０～７．２（ｐＫａ＝６．６５）での緩衝に有用である。
ＡＭＰＤ（２－アミノ－２－メチル－１，３－プロパンジオール））は、ｐＨ７．８～９．７での緩衝に有用である。
ＡＭＰＳＯ（Ｎ－（１，１－ジメチル－２－ヒドロキシエチル）－３－アミノ－２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）。
ＢＥＳ（Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸）。
Ｂｉｃｉｎｅ（Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）グリシン）、ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ－トリス（ヒドロキシメチル）メタン）は、ｐＨ５．８～７．２（ｐＫａ＝８．３５）での緩衝に使用される。
ＢｉｓＴｒｉｓ （ビス－（２－ヒドロキシエチル）アミノ－トリス（ヒドロキシメチル）メタン）。
ＢｉｓＴｒｉｓビストリスプロパン（１，３－ビス［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］プロパン）。
ＤＩＰＳＯ（Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－３－アミノ－２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）は、ｐＨ７．０～８．２での緩衝に使用される。
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（ジグリシン、グリシル－グリシン）は、ｐＨ７．５～８．９（ｐＫａ＝８．３０）での緩衝に使用される。
ＨＥＢＰＳ（Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－Ｎ’－（４－ブタンスルホン酸）は、より高いｐＫａ（ｐＫａ＝８．３０）を持つＨＥＰＥＳ及びＥＰＰＳの同族体であり、ｐＨ７．６～９．０での緩衝に使用される。
ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸；２－モルホリノエタンスルホン酸；２－（４－モルホリノ）エタンスルホン酸；２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸；モルホリン－４－エタンスルホン酸水和物）は、ｐＨ６．８～８．２での緩衝に広く使用され、２０℃でのｐＫａ：７．４５－７．６５である。
ＨＥＰＰＳ又はＥＰＰＳ（３－［４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル］プロパンスルホン酸水和物、４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－（２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）水和物）は、ｐＨ７．３－８．７（ｐＫａ＝８．００／ピペラジン環）での緩衝剤として使用される。
ＨＥＰＰＳＯ（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－（２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）水和物）。
ＭＥＳ（２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸、一水和物）は、ｐＨ５．２～７．１（ｐＫａ：６．１６）での緩衝剤として使用される。
ＭＯＢＳ（４－モルフォリンブタンスルホン酸；３－（Ｎ－モルフォリノ）ブタンスルホン酸ヘミナトリウム塩）は、より高いｐＫａ／を持つＭＥＳ及びＭＯＰＳの同族体であり、ｐＨ６．９～８．３（ｐＫａ：７．６）の緩衝溶液に使用される。
ＭＯＰＳ（４－モルホリンプロパンスルホン酸ナトリウム塩）。
ＭＯＰＳＯ（β－ヒドロキシ－４－モルホリンプロパンスルホン酸、３－モルホリノ－２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）。
ＰＩＰＥＳ（ピペラジン－１，４－ビス（２―エタンスルホン酸）は、ｐＨ６．１～７．５（ｐＫａ＝６．８０）で緩衝するために使用される。
ＰＯＰＳＯ（ピペラジン－１，４－ビス（２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）二水和物)。
ＴＡＰＳ（［（２－ヒドロキシ－１，１－ビス（ヒドロキシメチル）エチル）アミノ］－１－プロパンスルホン酸）。
ＴＡＰＳＯ（２－ヒドロキシ－３－［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］－１－プロパンスルホン酸）。
ＴＥＳ（２－［（２－ヒドロキシ－１，１－ビス（ヒドロキシメチル）エチル）アミノ］エタンスルホン酸）。
トリシン（ピペラジン－Ｎ，Ｎ’－ビス［２－ヒドロキシプロパンスルホン酸］）は、ｐＨ７．４～８．８（ｐＫａ：８．１６）で緩衝するために使用される。

「抗体」という用語は、本明細書では最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、所望の抗原結合活性を示す抗体断片及び抗体を含む融合タンパク質、並びに抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の修飾された構成を含むが、これらに限定されない様々な抗体構造を包含する。抗体には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、又はＩｇＭ（又はそのサブクラス）等の任意のクラスの抗体が含まれ、抗体は特定のクラスである必要はない。抗体の重鎖の定常領域のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは様々なクラスに割り当てることができる。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらのいくつかは、更にサブクラス（アイソタイプ）、たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に分類できる。免疫グロブリンの様々なクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと呼ばれる。様々なさクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造と三次元構成はよく知られている。「抗体断片」は、無傷の抗体の一部を含み、無傷の抗体が結合する抗原に結合する、無傷の抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、これらに限られないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）_２：ダイアボディ、線状抗体、単鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、抗体断片（複数可）から形成した多特異抗体断片が挙げられる。「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基及びヒトＦＲ由来のアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。特定の実施形態では、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、ＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、かつ全て又は実質的に全てのＨＶＲ（例えばＣＤＲ）が非ヒト抗体の可変ドメインに対応する。実質的に全てのＦＲはヒト抗体のＦＲに対応する。ヒト化抗体は場合により、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部を含んでもよい。抗体の「ヒト化形態」、例えば非ヒト抗体は、ヒト化を受けた抗体を指す。「可変領域」又は「可変ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に関与する抗体重鎖又は軽鎖のドメインを指す。天然抗体の重鎖と軽鎖の可変ドメイン（それぞれＶＨ及びＶＬ）は、一般に同様の構造を持ち、各ドメインは４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む（例えば、Kindt et al., Kuby Immunology, 6^th ed., WH Freeman and Co., page 91 (2007)を参照)。単一のＶＨ又はＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体は、抗原に結合する抗体からＶＨ又はＶＬドメインを使用して単離され、それぞれ相補的なＶＨ又はＶＬドメインのライブラリーをスクリーニングし得る。例えば、Portolano et al., J. Immunol.150: 880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352: 624-628 (1991)。

本明細書で使用する「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均質な抗体の集団から得られた抗体、即ち、集団を構成する個々の抗体は、微量に存在し得る自然発生の突然変異を除いて同一であることを意味する。モノクローナル抗体は、単一の抗原部位に特異的に作用し、高い特異性を有する。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均質な抗体集団から得られた抗体であることを示すものであり、特定の方法による抗体の製造を要求するものと解釈することはできない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５，１９７５によって最初に記載されたハイブリドーマ法、又は米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているような組換えＤＮＡ法によって作製することができる。モノクローナル抗体は、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４，１９９０に記載された技術を使用して生成されたファージライブラリから単離することもできる。

本明細書で使用される場合、「ヒト化」抗体は、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又は非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むその断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、又は抗体のサブシークエンスに結合する他の抗原など）である非ヒト（例えばマウス）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び容量を有するマウス、ラット、又はウサギ等の非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残基によって置換されたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基によって置換される。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、インポートされたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見出されないが、抗体の性能を更に改良及び最適化するために含まれる残基を含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、その中で、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全てが、ヒト免疫グロブリンのコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体は、最適には、免疫グロブリン定常領域又はドメイン（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの定常領域又はドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部も含むであろう。国際公開第９９／５８５７２号に記載されているように、修飾されたＦｃ領域を有する抗体が好ましい。他の形態のヒト化抗体は、元の抗体の１以上のＣＤＲに「由来する」、１以上のＣＤＲとも呼ばれる、元の抗体に対して変更された１以上のＣＤＲ（ＣＤＲ Ｌ１、ＣＤＲ Ｌ２、ＣＤＲ Ｌ３、ＣＤＲ Ｈ１、ＣＤＲ Ｈ２、又はＣＤＲ Ｈ３）を有する。

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／又は本明細書に開示され、若しくは当業者に既知のヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製された抗体を意味する。ヒト抗体のこの定義には、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチド又は少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体が含まれる。そのような一例は、マウス軽鎖及びヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で知られている様々な技術を使用して産生することができる。一実施形態では、ヒト抗体はファージライブラリから選択され、そのファージライブラリはヒト抗体を発現する（Vaughan et al., Nature Biotechnology, 14:309-314, 1996；Sheets et al., Proc. Natl. Acad. Sci (USA) 95:6157-6162, 1998; Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381, 1991; Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581, 1991）。ヒト抗体はまた、内因性遺伝子座の代わりにヒト免疫グロブリン遺伝子座が遺伝子導入された動物、例えば内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的又は完全に不活化されたマウスの免疫化によって作製することもできる。このアプローチは、米国特許第５，５４５，８０７号；５，５４５，８０６号；５，５６９，８２５号；５、６２５、１２６号；５，６３３，４２５号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に対する抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製することもできる（そのようなＢリンパ球は、個体から、またはｃＤＮＡの単一細胞クローニングから回収することができる、又はインビトロで免疫化されている）。例えば、Cole et al. Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss、p. 77、1985; Boerner et al., J. Immunol., 147 (1):86-95, 1991; 及び米国特許第５，７５０，３７３を参照。

用語「キメラ抗体」は、可変領域配列がある種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体、例えば、可変領域配列がマウス抗体に由来し、定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体を指すことを意図している。

用語「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、本明細書では互換的に使用され、任意の長さ、好ましくは比較的短い（例えば、１０～１００アミノ酸）アミノ酸の鎖を指す。鎖は直鎖であっても分枝鎖であってもよく、修飾されたアミノ酸を含んでもよく、及び／又は非アミノ酸によって中断されていてもよい。この用語には、自然に又は介入による修飾、例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、又は標識成分との結合等の他の操作又は修飾がされたアミノ酸鎖も含まれる。また、例えば、１以上のアミノ酸の類縁体（例えば、非天然アミノ酸等を含む）を含むポリペプチド、及び当技術分野で知られている他の修飾もこの定義に含まれる。ポリペプチドは単鎖又は結合鎖として存在し得ることが理解される。

「一価抗体」は、１分子あたり１個の抗原結合部位を含む（例えば、ＩｇＧ又はＦａｂ）。いくつかのケースでは、１価抗体は、１以上の抗原結合部位を有することができるが、結合部位は異なる抗原由来である。

「単一特異的抗体」は、抗原上の同一のエピトープに結合する２個の結合部位のような、１分子あたり２個の同一の抗原結合部位を含む（例えば、ＩｇＧ）。従って、それらは１種類の抗原分子を結合するために競合する。天然に存在する抗体のほとんどは、単一特異的である。いくつかのケースでは、単一特異的抗体が一価抗体（例えば、Ｆａｂ）でもよい。

「二価抗体」は、１分子あたり２個の抗原結合部位を含む（例えば、ＩｇＧ）。いくつかのケースでは、２個の結合部位が同じ抗原特異性を持つ場合がある。しかしながら、二価抗体は二重特異的であり得る。

「二重特異的」（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）又は「二重特異的」（ｄｕａｌ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ）は、２個の異なる抗原結合部位を有するハイブリッド抗体である。二重特異的抗体の２個の抗原結合部位は、同一の又は異なるタンパク質標的に位置する、２個の異なるエピトープに結合する。

「二重機能性」抗体は、両腕に同じ抗原結合部位（即ち、同じアミノ酸配列）を有するが、それぞれが２個の異なる抗原を認識することができる抗体である。

「ヘテロ多量体」、「ヘテロ多量体複合体」、又は「ヘテロ多量体ポリペプチド」は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを少なくとも含み、第２ポリペプチドは、第１ポリペプチドと少なくとも１つのアミノ酸残基において、アミノ酸配列が異なる分子である。ヘテロ多量体は、第１及び第２ポリペプチドにより形成される「ヘテロ二量体」を含んでもよく、又は第１及び第２ポリペプチドに加えてポリペプチドが存在する場合に形成されるより高度な３次構造を含んでもよい。

「ヘテロ二量体」、「ヘテロ二量体タンパク質」、「ヘテロ二量体複合体」、又は「ヘテロ二量体ポリペプチド」は、第１ペプチドと第２ペプチドを含む分子であり、第２ペプチドのアミノ酸配列は、第１ペプチドのアミノ酸配列と少なくとも１つのアミノ酸残基において異なる。

本特許出願において、「ヒンジ領域」、「ヒンジ配列」及びその変異体は、当該分野において良く知られている意味を含み、例えば、Janeway et al., ImmunoBiology: the immune system in health and disease, (Elsevier Science Ltd., NY) (4th ed., 1999); Bloom et al., Protein Science (1997), 6:407-415; Humphreys et al., J. Immunol. Methods (1997), 209:193-202に示されている。

本特許出願において、「免疫グロブリン様ヒンジ領域」、「免疫グロブリン様ヒンジ配列」、及びその変異体は、免疫グロブリン様分子又は抗体様分子（例えば、イムノアドヘシン）のヒンジ領域及びヒンジ配列を指す。いくつかの実施形態において、免疫グロブリン様ヒンジ領域は、そのキメラ形態、例えば、キメラＩｇＧ１／２ヒンジ領域を含む、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４サブタイプのいずれか、又はＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、若しくはＩｇＭから来る、又はそれに由来することができる。

本特許出願において、用語「免疫エフェクター細胞」又は「エフェクター細胞」は、ヒト免疫系における天然の細胞レパートリー内の細胞を意味し、これが活性化されて標的細胞の生存能に影響を及ぼすことができる。標的細胞の生存能には、細胞が生存、増殖、及び／又は他の細胞と相互作用する能力が含まれる。

本発明の抗体は、当該技術分野において周知の技術、例えば、組換え技術、ファージディスプレイ技術、合成技術、又はこれらの技術と当該分野における他の先行技術（例えば、Jayasena, S. D., Clin Chem., 45: 1628-50, 1999及びFellouse, FA, et al., J. Mol. Biol., 373(4): 924-40, 2007を参照）との組み合わせにより調製することができる。

本特許出願において、用語「細胞毒性剤」は、細胞機能を阻害又は防止し、及び／又は細胞死若しくは破壊を引き起こす物質を指す。細胞毒性剤には、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｉｎ１１１、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、Ｚｒ８９、Ｆ１８、及びＬｕの放射性同位体、例えばＬｕ１７７）；化学療法剤又は薬物（例えば、チューブリシン、メイタンシン、オーリスタチン、ＤＮＡ副溝結合剤（ＰＢＤ二量体等）、デュカルマイシン（ｄｕｃａｒｍｙｓｉｎ）、トポイソメラーゼ阻害剤、ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、メトトレキサート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロランブシル、ダウノルビシン又は他の挿入剤）；成長阻害剤；核酸分解酵素等の酵素及びその断片；抗生物質；細菌、真菌、植物、又は動物起源の小分子毒素又は酵素活性毒素等の毒素（その断片及び／又は変異体を含む）；並びに本出願を通じて開示される様々な抗腫瘍剤又は抗癌剤が含まれるが、これらに限定されない。

「連結体」とは、抗体を薬物部分に共有結合させる共有結合又は原子鎖を含む化学部分を指す。様々な実施形態において、連結体には、アルキルジイル、アリールジイル、ヘテロアリールジイル等の二価ラジカル、－（ＣＲ_２）_ｎＯ（ＣＲ_２）_ｎ－等の部分、アルキルオキシの繰り返し単位（例えば、ポリエチレンオキシ、ＰＥＧ、ポリメチレンオキシ)、及びアルキルアミノ（例えば、ポリエチレンアミノ）；二酸エステル及びアミドとしては、コハク酸エステル、コハク酸アミド、ジグリコール酸エステル、マロン酸エステル、及びカプロアミドが挙げられる。様々な実施形態において、連結体は、バリン、フェニルアラニン、リジン、及びホモリジン等の１又は複数のアミノ酸残基を含むことができる。

本明細書及び特許請求の範囲において、用語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」（含む）、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」（含む）、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ」（含む）、及び「ｉｎｃｌｕｄｅｓ」（含む）は、特徴、整数、成分、又は工程の存在を示すために使用され、しかしながら、それらは、１又は複数の他の特徴、整数、成分、工程、若しくはそれら群の存在又は共存を排除するものではない。本明細書に開示された新規の共役体は、架橋連結体を使用する。いくつかの適切な連結体及びそれらの合成例は、本願明細書の実施形態１～４６８に記載されている。

ＢＣＭＡ抗体及びその抗体薬物共役体

本発明は、ＢＣＭＡ（ＣＤ２６９）に特異的に結合するモノクローナル抗体を提供する。特に断りのない限り、ＢＣＭＡはヒトＢＣＭＡを意味する。例示的なヒトの核酸及びアミノ酸配列は、配列番号１及び２によって提供される。文脈から特に明らかでない限り、ＢＣＭＡへの言及は、少なくともタンパク質の細胞外ドメイン（配列番号７のおよそ残基１～５４）及び時には完全なタンパク質を意味する。

本発明は、ヒト対象における医学的障害の治療方法を提供し、この医学的障害は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）を発現する病原性Ｂ細胞の存在に関連しており、この方法は、単離されたモノクローナル抗体又はＢＣＭＡ（ＣＤ２６９）に結合するその抗原結合断片をヒト対象に投与することを含む。

本発明のＢＣＭＡ抗体（例えば、ｈｕ５Ｄ２）は、実施例に記載されているように、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体である。５Ｄ２抗体はハイブリドーマＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２によって産生された。中国典型培養物保存センター（ＣＣＴＣＣ）への寄託は、ブダペスト条約に基づいて、２０２２年６月２３日に行われた。ＣＣＴＣＣは、中国湖北省武漢市、郵便番号４３００００の武漢大学にある。ＣＣＴＣＣの寄託には、ＣＣＴＣＣ Ｃ２０２２１８８のアクセッション番号が割り当てられた。Ｈｕ５Ｄ２抗体は、ＢＣＭＡとそのリガンド（ＡＰＲＩＬ及びＢＡＦＦ）の両方への結合を阻害します。Ｈｕ５Ｄ２抗体は、ヒトＩｇＧ１に結合するとＡＤＣＣを誘発し、Ｆｃγ受容体を介したシグナル伝達を誘発する。Ｈｕ５Ｄ２抗体を抗体薬物共役体に組み込んで、結合した薬物をＢＣＭＡを発現する細胞の内部に送達することもできる。

Ｈｕ５Ｄ２抗体は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、そのリガンドへの結合を阻害し、結合した薬物をＢＣＭＡを発現する細胞の内部に送達できる別のヒト化モノクローナル抗体である。

本発明は、膜結合標的に結合し、内部移行することができる抗原結合タンパク質を提供する。更なる実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質及び細胞毒性剤を含む免疫共役体が提供される。更なる実施形態では、抗原結合タンパク質はＡＤＣＣエフェクター機能を有し、例えば抗原結合タンパク質は、増強されたＡＤＣＣエフェクター機能を有する。

このような一実施形態では、ＢＣＭＡに特異的に結合する、例えばヒトＢＣＭＡ（ｈＢＣＭＡ）に特異的に結合し、ＢＣＭＡ受容体へのＢＡＦＦ及び／又はＡＰＲＩＬの結合を阻害する抗原結合タンパク質又はその断片が提供される。

更なる実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質又は断片は、ＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＣＭＡへのＢＡＦＦ及び／又はＡＰＲＩＬの結合を阻害し、ここで、抗原結合タンパク質又はその断片は、ＦｃγＲＩＩＩＡに結合し、ＦｃｇＲＩＩＩＡ媒介エフェクターを媒介する能力、又は増強されたＦｃ．γＲＩＩＩＡ媒介エフェクター機能を有する。本明細書で提供される本発明の一実施形態では、抗原結合タンパク質は内部移行することができる。

本発明の一態様では、非膜結合ＢＣＭＡ、例えば血清ＢＣＭＡに結合する、本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の一態様では、本明細書に記載の抗原結合タンパク質が提供され、ここで、抗原結合タンパク質は、配列番号３又は配列番号３のバリアントのＣＤＲＨ３を含む。

本発明の更なる態様では、以下の１以上を更に含む、本明細書に記載の抗原結合タンパク質が提供される：配列番号１のＣＤＲＨ１、配列番号２のＣＤＲＨ２、配列番号４のＣＤＲＬ１、配列番号５のＣＤＲＬ２、及び／又は配列番号６のＣＤＲＬ３、並びにそれらのバリアント。

本発明の抗原結合タンパク質は、天然抗体又はその機能的断片若しくは同等物の構造にフォーマットされ得る本発明の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み得る。従って、本発明の抗原結合タンパク質は、適切な軽鎖と組み合わせた場合、全長抗体、（Ｆａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、又はそれらの等価物（ｓｃＦＶ、二量体、三量体、若しくは四量体、タンデム抗体等）にフォーマットされた本発明のＶＨ領域を含み得る。抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４；又はＩｇＭ、 ＩｇＡ、ＩｇＥ若しくはＩｇＤ、あるいはそれらの修飾されたバリアントでもよい。抗体重鎖の定常ドメインは、それに応じて選択され得る。軽鎖定常ドメインは、カッパ又はラムダ定常ドメインであってもよい。更に、抗原結合タンパク質は、全てのクラスの修飾、例えばＩｇＧ二量体、もはやＦｃ受容体に結合しない、又はＣ１ｑ結合を媒介しないＦｃ変異体を含み得る。抗原結合タンパク質は、抗原結合領域及び非免疫グロブリン領域を含む、国際公開第ＷＯ８６／００１５３３号パンフレットに記載されているタイプのキメラ抗体であってもよい。

定常領域は、必要な機能に応じて選択され、例えば、ＩｇＧ１は補体への結合を通じて溶解能力を示し、及び／又はＡＤＣＣ（抗体依存性細胞傷害）を媒介する。

本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号１０及び１１に記載の可変領域を有するマウス抗体、又はその非マウス等価物、例えばラット、ヒト、キメラ若しくはヒト化バリアントに由来する。例えば、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号１０に記載の可変重鎖配列及び／又は配列番号１１に記載の可変軽鎖配列を有する抗体に由来する。

本発明の一態様では、配列番号８、１０、又は１３のいずれか１つから選択される単離重鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の別の態様では、配列番号９、１１、又は１５のいずれか１つから選択される単離された軽鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の更なる態様では、配列番号８、１０、又は１３のいずれか１つから選択される単離された重鎖可変ドメイン及び配列番号９、１１、又は１５のいずれか１つから選択される単離された軽鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質が提供される。

一態様では、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号２０又は２２によってコードされる重鎖可変領域及び配列番号２１又は２３によってコードされる軽鎖可変領域を含む抗原結合タンパク質が提供される。

一態様では、単離された可変重鎖をコードするポリヌクレオチドが提供され、前記ポリヌクレオチドは、配列番号２８、２９、又は３０を含む。

一態様では、単離された可変軽鎖をコードするポリヌクレオチドが提供され、前記ポリヌクレオチドは、配列番号３１、３２、又は３３を含む。

更なる態様では、抗原結合タンパク質は、本明細書に記載の軽鎖のいずれかと組み合わせて、本明細書に記載の可変重鎖のいずれか１つを含み得る。

一態様では、抗原結合タンパク質は、本明細書に記載の本発明による１以上のＣＤＲ、又は本明細書に記載の本発明の重鎖若しくは軽鎖可変ドメインのいずれか１つ若しくは両方を含む、抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態では、抗原結合タンパク質は霊長類ＢＣＭＡに結合する。１つのそのような実施形態において、抗原結合タンパク質は更に、非ヒト霊長類ＢＣＭＡ、例えばカニクイザルＢＣＭＡに結合する。

別の態様では、抗原結合タンパク質は、ｄＡｂ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）、Ｆｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニ抗体、及びミニボディからなる群から選択される。

本発明の一態様では、抗原結合タンパク質はヒト化抗体又はキメラ抗体であり、更なる態様では、抗体はヒト化されている。一態様では、抗体はモノクローナル抗体である。

別の態様では、抗原結合タンパク質は、例えばＢｉａｃｏｒｅによって測定される場合、高い親和性でヒトＢＣＭＡに結合し、抗原結合タンパク質は、２０ｎＭ以下の親和性、又は１５ｎＭ以下の親和性、又は５ｎＭ以下の親和性で、又は１０００ｐＭ以下の親和性、又は５００ｐＭ以下の親和性、又は４００ｐＭ以下の親和性、又は３００ｐＭ以下の親和性、又は例えば約１２０ｐＭの親和性で、ヒトＢＣＭＡに結合する。更なる実施形態では、抗原結合タンパク質は、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定した場合、約１００ｐＭ～約５００ｐＭ、又は約１００ｐＭ～約４００ｐＭ、または約１００ｐＭ～約３００ｐＭで、ヒトＢＣＭＡに結合する。本発明の一実施形態では、抗原結合タンパク質は、１５０ｐＭ未満の親和性で、ＢＣＭＡに結合する。

１つのそのような実施形態では、これは、例えば実施例４に記載されるように、Ｂｉａｃｏｒｅによって測定される。

別の態様では、抗原結合タンパク質はヒトＢＣＭＡに結合し、細胞中和アッセイにおいてＢＣＭＡ受容体に対するリガンドＢＡＦＦ及び／又はＡＰＲＩＬの結合を中和し、ここで、抗原結合タンパク質は約１ｎＭ～約５００ｎＭ、又は約１ｎＭ～約１００ｎＭ、又は約１ｎＭ～約５０ｎＭ、又は約１ｎＭ～約２５ｎＭ、又は約５ｎＭ～約１５ｎＭの１０５０を有する。本発明の更なる実施形態において、抗原結合タンパク質は、細胞中和アッセイにおいてＢＣＭＡに結合し、ＢＣＭＡを中和し、ここで抗原結合タンパク質は約１０ｎＭの１０５０を有する。

抗原結合タンパク質、例えば本発明の抗体は、本発明の抗原結合タンパク質のコード配列を含む発現ベクターによる宿主細胞のトランスフェクションによって産生され得る。発現ベクター又は組換えプラスミドは、抗原結合タンパク質のコード配列を、宿主細胞内での複製及び発現、並びに／又は宿主細胞からの分泌を制御できる従来の調節制御配列と機能的に結合して配置することによって産生される。調節配列には、プロモーター配列、例えばＣＭＶプロモーター、及び他の既知の抗体に由来し得るシグナル配列が含まれる。同様に、相補的な抗原結合タンパク質の軽鎖又は重鎖をコードするＤＮＡ配列を有する第２の発現ベクターを作製することができる。特定の実施形態では、この第２の発現ベクターは、各ポリペプチド鎖が機能的に発現されることを可能な限り保証するために、コード配列及び選択マーカーに関する限りを除いて第１の発現ベクターと同一である。あるいは、抗原結合タンパク質の重鎖及び軽鎖コード配列が単一のベクター上に存在してもよい。

選択された宿主細胞は、従来の技術によって第１及び第２のベクターの両方で同時トランスフェクトされ（又は単に単一のベクターによってトランスフェクトされ）、組換え又は合成の軽鎖及び重鎖の両方を含む本発明のトランスフェクトされた宿主細胞を作製する。次いで、トランスフェクトされた細胞を従来の技術によって培養して、本発明の操作された抗原結合タンパク質を産生する。組換え重鎖及び／又は軽鎖の両方の結合を含む抗原結合タンパク質は、ＥＬＩＳＡ又はＲＩＡ等の適切なアッセイによって培養物からスクリーニングされる。同様の従来技術を使用して、他の抗原結合タンパク質を構築することができる。

本発明の方法及び組成物の構築において使用されるクローニング及びサブクローニング工程に適したベクターは、当業者によって選択され得る。例えば、従来のｐＵＣシリーズのクローニングベクターを使用することができる。ベクターの１つであるｐＵＣ１９は、ＡｍｅｒｓｈａｍＢｉｏ ｓｃｉｅｎｃｅ（英国、バッキンガムシャー）又はＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（中国、南京）等の供給会社から市販されている。更に、容易に複製でき、豊富なクローニング部位及び選択可能な遺伝子（例えば、抗生物質耐性）を有し、容易に操作できる任意のベクターをクローニングに使用することができる。従って、クローニングベクターの選択は、本発明における限定要因ではない。

発現ベクターはまた、異種ＤＮＡ配列、例えば、哺乳動物ジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子（ＤＨＦＲ）の発現を増幅するのに適した遺伝子によって特徴づけることもできる。他のベクター配列には、ウシ成長ホルモン（ＢＧＨ）及びベータグロビン プロモーター配列（ベータグロプロ）などのポリＡシグナル配列が含まれる。本明細書で有用な発現ベクターは、当業者に周知の技術によって合成することができる。

このようなベクターの成分、例えば、レプリコン、選択遺伝子、エンハンサー、プロモーター、シグナル配列等は、商業的又は天然源から得ることができ、あるいは、発現及び／又は選択された宿主内の組換えＤＮＡの産物の分泌を指示する際に使用するための既知の手順によって合成することができる。。哺乳類、細菌、昆虫、酵母、および真菌の発現用に多数の種類が当技術分野で知られている他の適切な発現ベクターも、この目的のために選択され得る。

本発明はまた、本発明の抗原結合タンパク質のコード配列を含む組換えプラスミドでトランスフェクトされた細胞株も包含する。これらのクローニングベクターのクローニング及び他の操作に有用な宿主細胞も従来のものである。しかしながら、大腸菌の様々な株からの細胞は、クローニングベクターの複製及び本発明の抗原結合タンパク質の構築における他の工程に使用することができる。

本発明の抗原結合タンパク質の発現に適した宿主細胞又は細胞株には、ＮＳ０、Ｓｐ２／０、ＣＨＯ（例えばＤＧ４４）、ＣＯＳ、ＨＥＫ、線維芽細胞（例えば３Ｔ３）、及び骨髄腫細胞等の哺乳動物細胞が含まれる。例えば、本発明の抗原結合タンパク質は、ＣＨＯ又は骨髄腫細胞において発現され得る。ヒト細胞を使用することもできるため、分子をヒトのグリコシル化パターンで修飾することが可能になる。

あるいは、他の真核細胞株を使用してもよい。適切な哺乳動物宿主細胞の選択、並びに形質転換、培養、増幅、スクリーニング及び産物の生産及び精製のための方法は、当技術分野で知られている。例えば、Sambrook et al., (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2^nded. Cold Spring Harbor Laboratry, Cold Spring Harbor, N. Y.を参照されたい。

細菌細胞は、本発明の組換えＦａｂ又は他の実施形態の発現に適した宿主細胞として有用であることが証明され得る（例えば、Pluckthun，A.，Immunol.Rev.，130：151-188（1992）を参照）。しかし、細菌細胞内で発現されるタンパク質は、折り畳まれていない、若しくは不適切に折りたたまれた形態、又は非グリコシル化形態となる傾向があるため、細菌細胞内で産生された組換えＦａｂは、抗原結合能の保持についてスクリーニングする必要がある。細菌細胞によって発現される分子が適切に折り畳まれた形で生成される場合、その細菌細胞は望ましい宿主となるか、又は別の実施形態では、分子は細菌宿主内で発現し、その後再び折り畳まれる可能性がある。例えば、バイオテクノロジーの分野では、発現に使用される様々な大腸菌株が宿主細胞としてよく知られている。枯草菌、ストレプトミセス属、他の桿菌等の様々な菌株もこの方法で使用することができる。

所望の場合、当業者に公知の酵母細胞の株も宿主細胞として利用でき、また昆虫細胞、例えばショウジョウバエ及び鱗翅目、並びにウイルス発現系も利用できる。例えば、Miller et al., Genetic Engineering，8：277-298, Plenum Press（1986）及びMcGuire，S et a., Trends Genet. （2004） 20, 384-391, 並びにそこに引用されている参考文献を参照されたい。

ベクターを構築することができる一般的な方法、本発明の宿主細胞を産生するのに必要なトランスフェクション方法、及びそのような宿主細胞から本発明の抗原結合タンパク質を産生するのに必要な培養方法は、全て従来の技術であり得る。典型的には、本発明の培養方法は、通常、懸濁液中で細胞を無血清で培養することによる無血清培養方法である。同様に、本発明の抗原結合タンパク質は、生成後、アンモニウム沈殿、アフィニティーカラム、カラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動等を含む当技術分野の標準手順に従って細胞培養内容物から精製することができる。このような技術は当業者の範囲内であり、本発明を限定するものではない。例えば、改変された抗体の調製は、ＷＯ９９／０５８６７９及びＷＯ９６／０１６９９０に記載されている。抗原結合タンパク質の更に別の発現方法は、米国特許第４，８７３，３１６号に記載されているような、トランスジェニック動物における発現を利用することができる。これは、動物のカゼインプロモーターを使用する発現系に関するものであり、このプロモーターを哺乳動物にトランスジェニックに組み込むと、雌が乳汁中に所望の組換えタンパク質を産生できるようにする。

本発明の更なる実施形態では、本発明の抗体を産生する方法が提供され、この方法は、本発明の抗体の軽鎖及び／又は重鎖をコードするベクターで形質転換又はトランスフェクトされた宿主細胞を培養する工程と、それにより生成された抗体を回収する工程を含む。

本発明によれば、ヒトＢＣＭＡに結合してその活性を中和する本発明の抗ＢＣＭＡ抗体を産生する方法が提供される。抗体の重鎖をコードする第１のベクターを提供する工程と、抗体の軽鎖をコードする第２のベクターを提供する工程と、前記第１及び第２のベクターを用いて哺乳類宿主細胞（例えばＣＨＯ）を形質転換する工程；工程（ｃ）の宿主細胞を、前記宿主細胞から前記培養培地への抗体の分泌を促す条件下で培養する工程；工程（ｄ）の分泌された抗体を回収する工程を含む。

所望の方法で発現させた抗体は、適切なアッセイを使用して、インビトロ活性について検査される。現在、ＢＣＭＡへの抗体の定性的及び定量的な結合を評価するために、従来のＥＬＩＳＡアッセイ形式が使用されている。更に、他のインビトロアッセイを使用して、通常のクリアランス機構にもかかわらず、体内の抗体の残留性を評価するために行われるその後のヒト臨床研究の前に中和効果を検証することもできる。

治療の用量及び期間は、ヒトの循環における本発明の分子（抗体及び抗体薬物共役体）の相対的な持続期間に関連し、治療される状態に応じて当業者によって調整され得る。そして患者の一般的な健康状態。最大の治療効果を達成するには、長期間（例えば、４～６ヶ月）にわたる反復投薬（例えば、週に１回、又は２週間に１回、又は３週間に１回、又は４週間に１回）が必要となり得ることが想定される。

本発明の一実施形態では、少なくとも１つの発現カセットを含む組換え形質転換、トランスフェクト、又は形質導入された宿主細胞が提供され、例えば、発現カセットが本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。更に、本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含むか、または２つの発現カセットがあり、第１のカセットが軽鎖をコードし、第２のカセットが重鎖をコードする。例えば、一実施形態では、第１の発現カセットは、本明細書に記載の本発明による定常領域に連結された定常領域又はその抗原結合断片を含む抗原結合タンパク質の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、更に、本明細書に記載の本発明による定常領域又は定常領域に連結されたその抗原結合断片を含む抗原結合タンパク質の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む第２の発現カセットを含み、例えば、第１の発現カセットは、配列番号１８又は２５から選択される重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、第２の発現カセットは、配列番号１９又は２７から選択される軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。

本発明の別の実施形態では、定常領域又は本明細書に記載の定常領域と結合するその抗原結合断片を含む抗体の重鎖及び／又は軽鎖をコードする１以上の発現カセットを含むベクターを含む、安定に形質転換された宿主細胞が提供される。例えば、そのような宿主細胞は、軽鎖をコードする第１のベクター及び重鎖をコードする第２のベクターを含んでもよく、例えば、第１のベクターは、配列番号１８又は２５から選択される重鎖をコードし、及び第２のベクターは、例えば、配列番号１９又は２７の軽鎖である軽鎖をコードする。そのような例の１つでは、第１のベクターは、配列番号１８から選択される重鎖をコードし、第２のベクターは、例えば、配列番号１９の軽鎖である軽鎖をコードする。

本発明の別の実施形態では、本明細書に記載の本発明による宿主細胞が提供され、ここで細胞は真核細胞、例えば細胞は哺乳動物である。このような細胞株の例としては、ＣＨＯ又はＮＳ０が挙げられる。

本発明の別の実施形態では、本明細書に記載の本発明による定常領域又は定常領域に連結されたその抗原結合断片を含む抗体の産生方法が提供され、この方法は宿主細胞を培地、例えば無血清培地中で培養する工程を含む。

本発明の別の実施形態では、本明細書に記載の本発明による方法であって、前記抗体が、無血清培地を含む前記抗体に対して少なくとも９５％以上（例えば、９８％以上）までさらに精製される方法が提供される。

更に別の実施形態では、抗原結合タンパク質及び薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物が提供される。

本発明の別の実施形態では、本明細書に記載の本発明による組成物を使用説明書と共に含むパーツのキットが提供される。

本発明の治療薬の投与様式は、治療薬を宿主に送達する任意の適切な経路であり得る。本発明の抗原結合タンパク質及び医薬組成物は、非経口投与、即ち、皮下（ｓｃ）、髄腔内、腹腔内、筋肉内（ｉｍ）、又は静脈内（ｉｖ）に特に有用である。このような一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は静脈内又は皮下に投与される。

本発明の治療剤は、薬学的に許容される担体中に活性成分として有効量の本発明の抗原結合タンパク質を含有する医薬組成物として調製され得る。一実施形態では、本発明の予防薬は、直ちに注射できる形態の抗原結合タンパク質を含む水性懸濁液又は溶液である。一実施形態では、懸濁液又は溶液は生理学的ｐＨで緩衝される。一実施形態では、非経口投与用の組成物は、薬学的に許容される担体に溶解された本発明の抗原結合タンパク質の溶液又はそのカクテルを含むであろう。一実施形態では、担体は水性担体である。様々な水性担体、例えば、０．９％生理食塩水、０．３％グリシン等が使用され得る。これらの溶液は無菌にすることができ、一般に粒子状物質を含まない。これらの溶液は、従来の周知の滅菌技術（例えば、濾過）によって滅菌することができる。組成物は、生理学的条件に近づけるために必要に応じて、ｐＨ調整剤及び緩衝剤等の薬学的に許容される補助物質を含んでもよい。そのような薬学的製剤中の本発明の抗原結合タンパク質の濃度は、広範囲に変化し得る、すなわち、約０．５％未満からであり得る。通常、少なくとも約１重量％から約１５又は２０重量％程度であり、選択された特定の投与様式に従って、主に流体量、粘度等に基づいて選択される。

従って、静脈内注入用の本発明の医薬組成物は、約２５０ｍｌの滅菌リンゲル液、及びリンゲル液１ｍｌ当たり約１～約３０または５ｍｇ～約２５ｍｇの本発明の抗原結合タンパク質を含むように作製することができる。非経口投与可能な組成物を調製するための実際の方法は周知であるか、又は当業者には明らかであり、例えば、Remington's Pharmaceutical Science、15. sup. th ed., Mack Publishing Company, PA, USAに更に詳細に記載されている。本発明の静脈内投与可能な抗原結合タンパク質製剤の調製については、Parkins D.and Lasmar U. "The formulation of Biopharmaceutical products", Pharm. Sci. Tech. Today, 3 (2000) 129-137; Wang, W "Instability, stabilisation and formulation of liquid protein pharmaceuticals", Int. J. Pharm 185 (1999) 129-188;Jorgensen, L. et al, “Recent trends in stabilising peptides and proteins in pharmaceutical formulation - considerations in the choice of excipients” Expert Opin Drug Deliv. 6 (2009) 1219-1230; Akers, M. J. “Excipient-Drug interactions in Parenteral Formulations”, J. Pharm Sci 91 (2002) 2283-2300; Imamura, K et al “Effects of types of sugar on stabilization of Protein in the dried state", J Pharm Sci 92 (2003) 266-274; Izutsu, Kkojima, S. "Excipient crystallinity and its protein-structure-stabilizing effect during freeze-drying”, J. Pharm. Pharmacol, 54 (2002) 1033-1039; Johnson, R, et al "Mannitol-sucrose mixtures--versatile formulations for protein lyophilization", J. Pharm. Sci, 91 (2002) 914-922; Kerwin B.“Polysorbates 20 and 80 used in the formulation of protein biotherapeutics: structure and degradation pathways” J. Pharm Sci. 97 (2008) 2924-2935; Ha, E., et al "Peroxide formation in polysorbate 80 and protein stability", J. Pharm Sci, 91 (2002), 2252-2264, and He, F., et al, “Effect of sugar molecules on the viscosity of high concentration monoclonal antibody solutions” Pharm Res. 28 (2011) 1552-1560を参照されたい。その全内容は、参照により本明細書に組み込まれ、読者は特に参照される。

一実施形態では、本発明の抗体は、医薬製剤中にある場合、単位用量形態で存在する。適切な治療上有効な用量は、当業者によって容易に決定されるであろう。適切な用量は、患者の体重に従って計算することができ、例えば、適切な用量は、約０．１～約２００ｍｇ／ｋｇ、例えば約１～約２０ｍｇ／ｋｇ、例えば約１０～約２０ｍｇ／ｋｇ、又は例えば約１～約１５ｍｇ／ｋｇ、例えば約５～約１５ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。ヒトにおける多発性骨髄腫、ＳＬＥ、又はＩＰＴ等の状態を効果的に治療するために、適切な用量は、約０．１～約２０００ｍｇ、例えば約０．１～約５００ｍｇ、例えば約５００ｍｇ、例えば約０．１ｍｇ～約１５０ｍｇ、又は約０．１～約８０ｍｇ、又は約０．１～約６０ｍｇ、又は約０．１～約４０ｍｇ、又は例えば約１～約１００ｍｇ、又は約１～約５０ｍｇの範囲内であり得る。本発明の抗原結合タンパク質は、非経口的に、例えば皮下、静脈内又は筋肉内に投与され得る。このような用量は、必要に応じて、医師が適切に選択した適切な時間間隔で繰り返すことができる。

本明細書に記載の抗原結合タンパク質は、保存のために凍結乾燥し、使用前に適切な担体中で再構成することができる。この技術は、従来の免疫グロブリン及び当技術分野で知られている過酸化物および再構成技術に対して有効であることが示されている。

本発明の別の態様では、医薬に使用するための、本明細書に記載の抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の一態様では、関節リウマチ、１型糖尿病、多発性硬化症、又は乾癬の治療に使用するための、本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質が提供され、前記方法は、治療有効量の本明細書に記載の抗原結合タンパク質を、前記患者に投与する工程を含む。

本発明の一実施形態では、ヒトにおけるがんを治療するための方法であって、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗原結合タンパク質を前記ヒトに投与することを含む方法が提供される。場合によっては、抗原結合タンパク質は免疫複合体の一部である。

本発明の別の態様では、多発性骨髄腫（ＭＭ）、リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非分泌型多発性骨髄腫、くすぶり型多発性骨髄腫、意義不明の単クローン性ガンマ症（ＭＧＵＳ）、孤立性形質細胞腫（骨、髄外）、リンパ形質細胞性リンパ腫（ＬＰＬ）、ワルデンストロムマクログロブリン血症、形質細胞性白血病、原発性アミロイドーシス（ＡＬ）、重鎖疾患、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＰＯＥＭＳ症候群／骨硬化性骨髄腫、Ｉ型およびＩＩ型クリオグロブリン血症、軽鎖沈着病、グッドパスチャー症候群、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、急性糸球体腎炎、天疱瘡および類天疱瘡障害、表皮剥離症後天性水疱症、又はＢＣＭＡ発現を伴う任意の非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞白血病若しくはホジキンリンパ腫（ＨＬ）、又は組換えタンパク質補充療法に対して患者が中和抗体を発現する任意の疾患であって、前記方法が、前記患者に治療有効量の、本明細書に記載の抗原結合タンパク質を投与する工程を含む疾患から選択される、Ｂ細胞媒介疾患若しくは形質細胞媒介疾患、又は抗体媒介疾患若しくは障害の治療に使用するための、本明細書に記載の本発明による抗体が提供される。

Ｂ細胞障害は、Ｂ細胞の発生／免疫グロブリン産生の欠陥（免疫不全）と過剰／制御されていない増殖（リンパ腫、白血病）に分類できる。本明細書で使用される場合、Ｂ細胞障害は、両方のタイプの疾患を指し、抗原結合タンパク質を用いてＢ細胞障害を治療するための方法が提供される。

特定の態様では、疾患又は障害は、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、孤立性形質細胞腫（骨、髄外）、ワルデンストロムマクログロブリン血症からなる群から選択される。

本発明の一態様では、疾患は、多発性骨髄腫、くすぶり多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、又は孤立性形質細胞腫（骨、髄外）である。

本発明の一態様では、疾患は多発性骨髄腫である。

本発明の一態様では、疾患は全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）である。

本発明の一態様では、疾患は特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）である。

本明細書に記載の疾患及び障害の治療のための薬剤の製造における、本明細書に記載の抗原結合タンパク質の使用も提供される。

例えば、本発明の一態様では、ＢＣＭＡとリガンドＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬとの間の相互作用の調節（阻害又は又はブロック等）に応答する疾患及び障害の治療又は予防における使用のための、本明細書に記載の抗原結合タンパク質の使用が提供される。

本発明の別の態様では、関節リウマチ、１型糖尿病、多発性硬化症、関節リウマチ、又は乾癬から選択される抗体媒介又は形質細胞媒介の疾患又は障害の治療又は予防における使用のための、本明細書に記載の抗原結合タンパク質の使用が提供される。

本発明の別の態様では、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、意義不明の単クローン性ガンマトーシス（ＭＧＵＳ）、くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、孤立性形質細胞腫（骨、髄外）、ワルデンストロム・マクログロブリン血症、原発性アミロイドーシス（ＡＬ）、重鎖疾患、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＰＯＥＭＳ症候群／骨硬化性骨髄腫、Ｉ型およびＩＩ型クリオグロブリン血症、軽鎖沈着疾患、グッドパスチャーズ症候群、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、急性糸球体腎炎、天疱瘡及び類天疱瘡障害及び後天性表皮水疱症、ＢＣＭＡ発現を伴う非ホジキンリンパ腫及び白血病、又は組換えタンパク質補充療法に対して患者が中和抗体を発現する任意の疾患であって、前記方法が、前記患者に治療有効量の、本明細書に記載の抗原結合タンパク質を投与する工程を含む疾患から選択される、形質細胞媒介疾患若しくは障害の治療又は予防に使用するための、本明細書に記載の抗体の使用が提供される。

一態様では、本発明は、関節リウマチ、１型糖尿病、多発性硬化症若しくは乾癬、又は抗体媒介又は形質細胞媒介の疾患又は障害の治療又は予防のための、本発明の抗体又はその機能的断片と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供し、前記抗体媒介又は形質細胞媒介の疾患又は障害は、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン症（ＭＧＵＳ）、くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、孤立性形質細胞腫（骨、髄外）、ワルデンストロムマクログロブリン血症、原発性から選択される細胞媒介疾患または障害アミロイドーシス（ＡＬ）、重鎖疾患、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＰＯＥＭＳ症候群/骨硬化性骨髄腫、Ｉ型及びＩＩ型クリオグロブリン血症、軽鎖沈着疾患、グッドパスチャーズ症候群、特発性血小板減少性紫斑病（ITP）、急性糸球体腎炎、天疱瘡および類天疱瘡障害後天性表皮水疱症、ＢＣＭＡ発現を伴う任意の非ホジキンリンパ腫及び白血病、又は組換えタンパク質補充療法に対して患者が中和抗体を発現する任意の疾患であって、前記方法が、前記患者に治療有効量の、本明細書に記載の抗原結合タンパク質を投与する工程を含む疾患から選択される。

本発明の別の実施形態では、関節リウマチ、１型糖尿病、多発性硬化症若しくは乾癬、又は抗体媒介性若しくは形質細胞媒介性の障害若しくは疾患に罹患しているヒト患者を治療する方法が提供され、その方法は、本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質の治療有効量、例えば、以下から選択される抗体媒介又は形質細胞媒介の疾患又は障害に罹患しているヒト患者を治療する方法が提供される。本発明の別の態様では、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、意義不明のモノクローナルガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）から選択される、抗体媒介性または形質細胞媒介性の疾患または障害の治療に使用するための、本明細書に記載の本発明による抗原結合タンパク質が提供される。）、くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、孤立性形質細胞腫（骨、髄外）、ワルデンストロムマクログロブリン血症、原発性アミロイドーシス（ＡＬ）、重鎖疾患、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＰＯＥＭＳ症候群/骨硬化性骨髄腫、Ｉ型およびＩＩ型クリオグロブリン血症、軽症連鎖沈着病、グッドパスチャーズ症候群、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、急性糸球体腎炎、天疱瘡および類天疱瘡障害および後天性表皮水疱症、ＢＣＭＡ発現を伴う非ホジキンリンパ腫および白血病、または組換えタンパク質補充療法に対して患者が中和抗体を生成する疾患であり、ここで、前記方法は、本発明による抗原結合タンパク質を含む医薬組成物を薬学的に許容される担体と組み合わせて投与する工程を含む。

更なる実施形態では、多発性骨髄腫（ＭＭ）に罹患したヒト患者を治療する方法が提供される。

ＢＣＭＡ抗体は、養子細胞移入（ＡＣＴ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）、及びナノ粒子等、ＢＣＭＡを標的とすることが望ましい任意の治療法に有用である。一実施形態では、本開示は、Ｔ細胞活性化部分に連結された、本明細書に記載のＢＣＭＡモノクローナル抗体の抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を提供する。「キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）」は、Ｔ細胞シグナル伝達部分又はＴ細胞活性化部分に連結された抗体の抗原結合ドメイン（例えば、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ））を含む、人工的に構築されたハイブリッドタンパク質またはポリペプチドである。ＣＡＲ構造は過去２０年にわたって進化し、最も一般的にはモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に由来する一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）とＴＣＲ鎖のシグナル伝達モチーフ（「第一世代」ＣＡＲと呼ばれる（例えば、Okur, FV、Brenner, MK、Methods Mol. Biol., 651: 319-45 (2010); 及びLee et al.、Clin. Cancer. Res.、18(10): 2780-2790 (2012)を参照））を組み込んでいる。最近では、例えばインビボでの増殖、細胞毒性、及び持続性を増強するＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、及び／又はＣＤ１３４（ＯＸ－４０）からの共刺激活性化モチーフを１つ（「第２世代」）又は２つ（「第３世代」）導入した、第２世代及び第３世代のＣＡＲが開発された（例えば、Finney et al., J. Immunol., 172: 104-13 (2004); Altvater et al, Clin Exp Immunol. 144(3): 447-57 (2006); Chu et al., J Transl Med. 20(1): 240 (2022) ; Maher et al., Nat Biotechnol., 20:70-5 (2002); Milone et al., Mol Ther., 17: 1453-64 (2009); SafarzadehKozani et al, Biomark res. 10(1): 24(2022); Xu et al, Blood Sci. 1(2): 156-160 (2019) 及びQian et al., Front Immunol. 13: 841425 (2022)を参照)。

ＣＡＲの抗原結合ドメインは、本明細書に記載されるように、モノクローナル抗体全体又はモノクローナル抗体断片を含み得る。一実施形態では、ＣＡＲの抗原結合ドメインは、抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体の単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み得る。キメラ抗原受容体及びＣＡＲを生成する方法は、例えば、Ohmine K, and Uchibori R. Int J Hematol. 115(6): 799-810 (2022); Ding L, et al, Stem Cell Investig. 8:1 (2021); Riviere、I. and M. Sadelain, Mol. Ther., 25(5): 1117-1124 (2017); Chan L. Y. et al., Biomedicines. 10(4): 804 (2022); Davila, M. L. and M. Sadelain, Int. J. Hematol., 104(1): 6-17 (2016); 及びMohty et al, Leukemia. 33(12): 2767-2778 (2019) に更に記述されている。

「抗体－薬物複合体（ＡＤＣ）」という用語は、化学連結体を介して細胞毒性剤（一般に、高い全身毒性を有する小分子薬物）に結合したモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を含む化合物を指す。ＡＤＣは次の式で表される：

式中、Ｄ、Ｄ_１、及びＤ_２は、一般にペイロードと呼ばれる小分子細胞毒素又は機能性小分子である。Ｌ、Ｌ_１、及びＬ_２は連結体である。いくつかの実施形態では、ＡＤＣは、連結体を含むように化学的に修飾された小分子細胞毒素を含んでもよく、又は連結体は、トレースレス連結体と呼ばれるペイロードの一部である。連結体は一般に、細胞毒素を抗体又はその抗原結合断片に結合させるために使用される。細胞表面上の標的抗原に結合すると、ＡＤＣは内部移行してリソソームに輸送され、そこで切断可能な連結体のタンパク質分解（例えば、リソソームに見られるカテプシンＢによる）、又は切断不可能な連結を介して細胞毒素に結合している場合には、抗体のタンパク質分解のいずれかによって、細胞毒素が放出される。次に、細胞毒素はリソソームから細胞質ゾル又は核に移動し、そこで作用機序に応じて標的に結合する。

抗体－薬物共役体は、抗体全体又は抗体断片を含み得る。抗体全体は通常、重（Ｈ）鎖ポリペプチドの２つの同一コピーと軽（Ｌ）鎖ポリペプチドの２つの同一コピーの４つのポリペプチドで構成される。各重鎖には１つのＮ末端可変（ＶＨ）領域と３つのＣ末端定常（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）領域が含まれ、各軽鎖には１つのＮ末端可変（ＶＬ）領域と１つのＣ末端定常（ＣＬ）が含まれる。軽鎖と重鎖の各ペアの可変領域は、抗体の抗原結合部位を形成する。ＶＨ領域とＶＬ領域は同じ一般構造を持ち、各領域は４つのフレームワーク領域を含み、その配列は比較的保存されている。フレームワーク領域は、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によって接続されている。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３として知られる３つのＣＤＲは、抗原結合を担う抗体の「超可変領域」を形成する。

ＡＤＣは、抗体の抗原結合断片を含み得る。「抗体断片」、「抗原結合断片」、「抗体の機能的断片」、及び「抗原結合部分」という用語は、本明細書では互換的に使用され、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の１又は複数の断片又は部分を指す。抗体断片は、例えば、１つ以上のＣＤＲ、可変領域（又はその一部）、定常領域（又はその一部）、又はそれらの組み合わせを含み得る。抗体フラグメントの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない。（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片。これは、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である；（ｉｉｉ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｉｖ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）。これは、２つのドメインを単一のポリペプチド鎖として合成できるようにする合成連結体によって結合されたＦｖ断片の２つのドメイン（即ち、ＶＬ及びＶＨ）からなる一価の分子である(例えば、 Kabat EA, Wu TT., J Immunol. 1991, 147(5): 1709-19を参照)、並びに（ｖ）ポリペプチド鎖の二量体であるダイアボディであり、各ポリペプチド鎖は、同じポリペプチド鎖上のＶＨとＶＬの間の対形成を可能にするには短すぎるペプチド連結体によるＶＬにより、異なるＶＨ－ＶＬポリペプチド鎖上の相補的ドメイン間の対形成が促進され、２つの機能的な抗原結合部位を有する二量体分子が生成される（例えば、Hudson P. J, Kortt A. A, J Immunol Methods. 1999, 231(1-2): 177-89; Holliger P, Winter G. Cancer Immunol Immunother. 1997, 45(3-4):128-30を参照）。

一実施形態では、本明細書に記載の抗体－薬物共役体は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ、ＣＤ２６９としても知られる）に対するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片を含む。モノクローナル抗体又はその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１の相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域、並びに（ｂ）配列番号４の相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号５のＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号６のＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。別の実施形態では、モノクローナル抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

ＢＣＭＡに対するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片は、ＢＣＭＡ又はそのエピトープに対する任意の適切な結合親和性を含み得る。「親和性」という用語は、２つの薬剤の可逆的結合の平衡定数を指し、解離定数（Ｋ_Ｄ）として表される。対象の抗原又はエピトープに対する抗体又はその抗原結合断片の親和性は、当技術分野で知られている任意の方法を使用して測定することができる。このような方法としては、例えば、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）、表面プラズモン共鳴（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ^ＴＭ、ＰｒｏｔｅＯｎ^ＴＭ）、生体層干渉法（ＢＬＩ、例えば、Ｏｃｔｅｔ）、動態排除アッセイ（例えば、ＫｉｎＥｘＡ^ＴＭ）、分離可能ビーズ（例えば、磁気ビーズ）、抗原パニング、及び／又はＥＬＩＳＡ（例えば、Ｊ Ｒ Ｃｒｏｗｔｈｅｒ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０００、１４９：ＩＩＩ－ＩＶ、１－４１３を参照）。特定の抗体の結合親和性は、結合親和性を分析するために使用される方法に応じて変化することが当技術分野で知られている。

エピトープに対する抗体の親和性等、リガンドに対する結合剤の親和性は、例えば、約１ピコモル（ｐＭ）から約１マイクロモル（１μＭ）（例えば、約１ピコモル（ｐＭ）～約１ナノモル（ｎＭ）、又は約１ｎＭ～約１マイクロモル（μＭ））であり得る。一実施形態では、モノクローナル抗体又はその抗原結合断片は、１００ナノモル以下（例えば、１００ｎＭ、約９０ｎＭ、約８０ｎＭ、約７０ｎＭ、約６０ｎＭ、約５０ｎＭ、約４０ｎＭ、約３０ｎＭ、約２０ｎＭ、もしくは約１０ｎＭ、又は前述の値のいずれか２つによって定義される範囲）のＫｄで、ＢＣＭＡと結合し得る。

別の実施形態では、モノクローナル抗体は、１０ナノモル以下（例えば、約９ｎＭ、約８ｎＭ、約７ｎＭ、約６ｎＭ、約５ｎＭ、約４ｎＭ、約３ｎＭ、約２ｎＭ、約１ｎＭ、約０．９ｎＭ、約０．８ｎＭ、約０．７ｎＭ、約０．６ｎＭ、約０．５ｎＭ、約０．４ｎＭ、約０．３ｎＭ、約０．２ｎＭ、約０．１ｎＭ、約０．０５ｎＭ、約０．０２ｎＭ、約０．０１ｎＭ、約０．００１ｎＭ、又は前述の値のいずれか２つによって定義される範囲）のＫｄで、ＢＣＭＡに結合し得る。

別の実施形態では、モノクローナル抗体は、２００ｐＭ以下（例えば、約１９０ｐＭ、約１７５ｐＭ、約１５０ｐＭ、約１２５ｐＭ、約１１０ｐＭ、約１００ｐＭ、約９０ｐＭ、約８０ｐＭ、約７０ｐＭ、約６０ｐＭ、約５０ｐＭ、約４０ｐＭ、約３０ｐＭ、約２５ｐＭ、約２０ｐＭ、約１５ｐＭ、約１０ｐＭ、約５ｐＭ、約１ｐＭ、又は前述の値のいずれか２つによって定義される範囲）のＫｄで、ＢＣＭＡに結合し得る。

一実施形態では、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定される、モノマー性ＢＣＭＡに対するＢＣＭＡ抗体又はその抗原結合断片の親和性は、約９０ｎＭ、約８０ｎＭ、約７０ｎＭ、約６０ｎＭ、約５０ｎＭ、約４０ｎＭ、約３０ｎＭ、又は前述の値の任意の２つによって規定される範囲、例えば、約５０ｎＭ～約７０ｎＭ、約５５ｎＭ～約６５ｎＭ、又は約５８ｎＭ～約６２ｎＭである。

一実施形態では、ＦＡＣＳによって測定される、膜結合ＢＣＭＡに対するＢＣＭＡ抗体又はその抗原結合断片の親和性は、１０ナノモル以下（例えば、約９ｎＭ、約８ｎＭ、約７ｎＭ、約６ｎＭ、約５ｎＭ、約４ｎＭ、約３ｎＭ、約２ｎＭ、約１ｎＭ、約０．９ｎＭ、約０．８ｎＭ、約０．７ｎＭ、約０．６ｎＭ、約０．５ｎＭ、約０．４ｎＭ、約０．３ｎＭｎＭ、約０．２ｎＭ、約０．１ｎＭ、約０．０５ｎＭ、約０．０２ｎＭ、約０．０１ｎＭ、約０．００１ｎＭ、又は前述の値の任意の２つによって定義される範囲）である。

モノクローナル抗体の抗原結合部分又は断片は、その部分がＢＣＭＡに結合する限り、任意のサイズであり得る。この点において、ＢＣＭＡに対するモノクローナル抗体（本明細書では「抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体」とも呼ばれる）の抗原結合部分又は断片は、望ましくは約５～２５個のアミノ酸を含む（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、３５、又は前述の値の任意の２つによって定義される範囲）。

一実施形態では、抗体－薬物共役体は、抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体の可変領域を含む。この点において、ＡＤＣは、抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体の軽鎖可変領域、重鎖可変領域、又は軽鎖可変領域と重鎖可変領域の両方を含み得る。好ましくは、ＡＤＣは、抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体の軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む。一実施形態では、本明細書に記載されるＡＤＣのモノクローナル抗体は、（ａ）相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）アミノ酸配列ＴＳＦＬＩＨＷ（配列番号１）、ＨＣＤＲ２アミノ酸配列ＦＩＩＰＧＮＧＧＴＫＹＮＱＫＦＱ（配列番号２）、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列ＹＤＧＳＦＥＧＹＦＤＶ（配列番号３）を含む重鎖可変領域、並びに（ｂ）相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）アミノ酸配列ＳＳＱＳＬＶＨＳＤＧＮＴＹＬＨ（配列番号４）、ＬＣＤＲ２アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＤＳ（配列番号５）、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列ＳＱＳＴＨＷＰＷＴ（配列番号６）を含む軽鎖可変領域を含む。別の実施形態では、本明細書に記載されるＡＤＣのモノクローナル抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。

ＢＣＭＡモノクローナル抗体又はその抗原結合断片は、部位特異的又は非部位特異的共役方法を含む当技術分野で公知の任意の適切な方法を使用して、細胞毒素に結合され得る。従来の抗体の共役戦略は、典型的には、リジン又はシステインを介してペイロードを抗体、その抗原結合断片にランダムに（即ち、非特異的に）共役させることに依存している。従って、いくつかの態様では、抗体又はその抗原結合断片は、例えば、抗体又は抗体断片の部分還元、その後の連結部分の有無にかかわらず、所望の薬剤との反応によって、細胞毒性剤にランダムに共役される。例えば、抗体又はその抗原結合断片は、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、ＴＣＥＰ、チオレテノール（ｔｈｉｏｌｅｔｈｅｎｏｌ）、又は類似の還元剤を使用して還元され得る。次いで、連結部分の有無にかかわらず、細胞毒性剤を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はＤＭＡの存在下で、還元された抗体又は抗体断片にモル過剰で添加することができる。共役後、未反応の薬剤をクエンチするために、過剰な遊離システインを添加することができる。細胞毒性剤は、アミノ反応性基、フェノール反応性基、又はその他の反応性基（例えばＮＨＳ、ＰＦＰ）を有する連結部分の有無にかかわらず、共役体を形成するために、ＤＭＳＯ又はＤＭＡの存在下で、抗体又は抗体断片にモル過剰で直接添加することができる。次いで、反応混合物をクロマトグラフィー又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）への緩衝液交換によって精製することができる。

「細胞毒素」（ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ）及び「細胞毒性剤」（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔ）という用語は、細胞の機能を阻害若しくは抑制し、及び／又は細胞の破壊（細胞死）を引き起こし、及び／又は抗増殖効果を及ぼす任意の分子を指す。ＡＤＣの細胞毒素又は細胞毒性物質は、当該技術分野において、ＡＤＣの「ペイロード」とも呼ばれる。多くのクラスの細胞毒性剤が、ＡＤＣ分子において潜在的な有用性を有することが当技術分野で知られており、本明細書に記載のＡＤＣにおいて使用することができる。このような種類の細胞毒性剤としては、例えば、抗微小管剤（例えば、チューブリシン、オーリスタチン、及びメイタンシノイド）、ＤＮＡ副溝結合剤（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）又はインドリノベンゾジアゼピン（ＩＧＮ））、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、アマトキシン）、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤（例えば、カンプトテシン）及びＤＮＡアルキル化剤（例えば、デュオカルマイシン、ＣＣ－１０６５、ピロロベンゾジアゼピン又はインドリノベンゾジアゼピンの擬二量体）を含む。本明細書に記載されるＡＤＣにおいて使用され得る特定の細胞毒性剤は、これらに限定されないが、例えば、チューブリシン、アマニチン、オーリスタチン、カリケアマイシン、カンプトテシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、ドラスタチン、エンジイン、レキシトロプシン、タキサン、ピューロマイシン、メイタンシノイド、ビンカアルカロイド、及びピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）を含む。より具体的には、細胞毒性剤は、例えば、チューブリシン、オーリスタチン（ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ、ＡＥＢ、ＡＥＶＢ、Ｅ）、パクリタキセル、ドセタキセル、ＣＣ－１０６５（デュカルマイシン、ＤＣ１、ＤＣ４、ＣＢＩ二量体）、カンプトテシン（ＳＮ－３８、トポテカン）、モルホリノ－ドキソルビシン、リゾキシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、ドラスタチン－１０、エキノマイシン、コンブレタスタチン、カリケアマイシン、メイタンシン（ＤＭ１、ＤＭ４、ＤＭ２１）、ビンブラスチン、メトトレキサート、ネトロプシン、又はそれらの誘導体若しくは類縁体であり得る。ＡＤＣでの使用に適した細胞毒素は、例えば、国際特許出願公開第ＰＣＴ／ＣＮ２０２１／１２８４５３号にも記載されている。

一般に、化学療法剤又は機能性化合物も本発明のＢＣＭＡ抗体に共役させることができる。化学療法剤又は機能性化合物は、以下からなる群から選択される：

（１）以下からなる群から選択される化学療法剤：
ａ）以下からなる群から選択されるアルキル化剤：ナイトロジェンマスタード：クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキサイド、マンノムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ミトラクトール、ピポブロマン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、チオテパ、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ＣＣ－１０６５並びにアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシンの合成類似体；デュオカルマイシン並びにその合成類似体であるＫＷ－２１８９及びＣＢＩ－ＴＭＩ；ベンゾジアゼピン二量体又はピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、トマイマイシン二量体、インドリノベンゾジアゼピン二量体、イミダゾベンゾチアヂアゼピン二量体、又はオキサゾリジノベンゾジアゼピン二量体；カルムスチン、ロムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチンを含むニトロソ尿素化合物；ブスルファン、トレオスルファン、イムプロスルファン、及びピポスルファンを含むアルキルスルホネート；トリアゼン又はダカルバジン；カルボプラチン、シスプラチン、及びオキサリプラチンを含む白金含有化合物；アジリジン類、ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ、及びウレドパ；エチレンイミン類、並びにアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミン、トリメチロロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含むメチラメラミン類；
ｂ）以下からなる群から選択される植物アルカロイド：ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ナベルビンを含むビンカアルカロイド類；パクリタキセル及びドセタキセルを含むタキソイド類並びにこれらの類似体；ＤＭ１、ＤＭ２、ＤＭ３、ＤＭ４、ＤＭ５、ＤＭ６、ＤＭ７、メイタンシン、アンサマイトシンを含むメイタンシノイド類並びにこれらの類似体；クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８の群を含むクリプトフィシン類；エポチロン類、エリュテロビン、ディスコデルモライド、ブリオスタチン類、ドロスタチン類、オーリスタチン類、チューブリシン類、セファロスタチン類；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；
ｃ）以下から選択されるＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤：９－アミノカンプトテシン、カンプトテシン、クリスナトール、ダウノマイシン、エトポシド、リン酸エトポシド、イリノテカン、ミトキサントロン、ノバントロン、レチノイン酸（レチノール類）、テニポシド、トポテカン、９－ニトロカンプトテシン又はＲＦＳ ２０００を含むエピポドフィリン類；及びマイトマイシン類、並びにそれらの類縁体；
ｄ）以下から選択される代謝拮抗剤：｛［抗葉酸：（ＤＨＦＲ阻害剤：メトトレキサート、トリメトレキサート、デノプテリン、プテロプテリン、アミノプテリン（４－アミノプテロイン酸）、又はその他の葉酸類縁体を含む。）；ＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤（ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン、ＥＩＣＡＲを含む。）；リボヌクレオチド還元酵素阻害薬（ヒドロキシウレア、デフェロキサミンを含む。）］；［ピリミジン類縁体：ウラシル類縁体（アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カペシタビン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、５－フルオロウラシル、フロクスウリジン、ラルチトレキセドを含む。）；シトシン類似体：（シタラビン、シトシンアラビノシド、フルダラビンを含む。）；プリン類縁体：（アザチオプリン、フルダラビン、メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン）を含む。］；フォリン酸等の葉酸補充剤｝、及びニコチンアミドリン酸リボヌクレアーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤；
ｅ）以下から選択されるホルモン療法剤：受容体拮抗薬：［抗エストロゲン：（メゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェンを含む）；ＬＨＲＨアゴニスト：（ゴセレリン、酢酸リュープロリドを含む）；抗アンドロゲン：（ビカルタミド、フルタミド、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、ゴセレリン、リュープロリド、メピチオスタン、ニルタミド、テストラクトン、トリロスタン、及び他の類似のアンドロゲン阻害剤を含む。）］；レチノイド類／三角筋：［ビタミンＤ３類縁体：（ＣＢ１０９３、ＥＢ１０８９、ＫＨ１０６０、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールを含む）；光線力学的療法剤：（ベルテポルフィン、フタロシアニン、光増感剤Ｐｃ４、デメトキシヒポクレリンＡを含む）；サイトカイン類：（インターフェロンα、インターフェロンγ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ＴＮＦドメイン含有ヒトタンパク質を含む）］｝；
ｆ）以下から選択されるキナーゼ阻害剤：ＢＩＢＷ２９９２（抗ＥＧＦＲ／Ｅｒｂ２）、イマチニブ、ゲフィチニブ、ペガプタニブ、ソラフェニブ、ダサチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、ニロチニブ、ラパチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、バンデタニブ、Ｅ７０８０（抗ＶＥＧＦＲ２）、ムブリチニブ、ポナチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、カボザンチニブ、ビスモデギブ、イニパリブ、ルキソリチニブ、ＣＹＴ３８７、アキシチニブ、チボザニブ、ソラフェニブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、イスピネシブ；
ｇ）オラパリブ、ニラパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ９７２２（セファロン）、Ｅ７０１６（エーザイ）、ＢＧＢ－２９０（ベイジーン）、又は３－アミノベンズアミドからなる群から選択されるポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤；
ｈ）エンジイン系抗生物質（カリケアマイシン類、カリケアマイシンγ１、δ１、α１、又はβ１；ダイネミシンＡ及びデオキシダイネミシンを含むダイネミシン；エスペラミシン、ケダルシジン、Ｃ－１０２７、マズロペプチン、又はネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質クロモフォアから選択される。）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、アンスラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン、エピルビシン、エリブリン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン類（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎｓ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｎｉｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンから選択される抗生物質；
ｉ）ポリケチド（アセトゲニン類）、ブラタシン及びブラタシノン；ゲムシタビン、エポキソミシン類及びカルフィルゾミブ、ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドマイド、トセドスタット、ザイブレスタット、ＰＬＸ４０３２、ＳＴＡ－９０９０、スチムバックス（Ｓｔｉｍｕｖａｘ）、アロベクチン－７、ザイゲバ、プロベンジ、エルボイ、イソプレニル化阻害剤及びロバスタチン、ドーパミン作動性神経毒及び１－メチル－４－フェニルピリジンイオン、細胞周期阻害剤（スタウロスポリンを含む。）、アクチノマイシン類（アクチノマイシンＤ、ダクチノマイシンを含む。）、アマニチン類、ブレオマイシン類（ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２、ペプロマイシンを含む。）、アントラサイクリン類（ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、エピルビシン、ピラルビシン、ゾルビシンを含む。）、ミトキサントロン、ＭＤＲ阻害剤又はベラパミル、Ｃａ^２＋ＡＴＰ阻害剤又はタプシガルギン、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、ベリノスタット、ＰＣＩ－２４７８１、エンチノスタット、ＳＢ９３９、レスミノスタット、ギビノスタット、ＡＲ－４２、ＣＵＤＣ－１０１、スルフォラファン、トリコスタチンＡを含む。）；タプシガルギン、セレコキシブ、グリタゾン類、エピガロカテキンガレート、ジスルフィラム、サリノスポラミドＡ、抗副腎薬（アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンカからなる群から選択される）；アセグラトン；アルドホスファミドクリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）；アラビノシド、ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルニチン（ＤＦＭＯ）、エルフォミチン；酢酸エリプチニウム；エトクルシド、硝酸ガリウム、ガシトシン、ヒドロキシ尿素；イバンドロネート、レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テニュアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（Ｔ２トキシン、ベルカリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジンを含む。）；ウレタン、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス医薬；

（２）抗自己免疫疾患薬：シクロスポリン、シクロスポリンＡ、アミノカプロン酸、アザチオプリン、ブロモクリプチン、クロラムブシル、クロロキン、シクロホスファミド、コルチコイド類（アムシノニド、ベタメタゾン、ブデソニド、ヒドロコルチゾン、フルニソリド、フルチカゾンプロピオン酸エステル、フルオコートロンダナゾール（ｆｌｕｏｃｏｒｔｏｌｏｎｅ ｄａｎａｚｏｌ）、デキサメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾンを含む。）、ＤＨＥＡ、エタネルセプト、ヒドロキシクロロキン、インフリキシマブ、メロキシカム、メトトレキサート、モフェチル、ミコフェノール酸、プレドニゾン、シロリムス、タクロリムス；

（３）抗感染症薬（以下を含むがこれらに限定されない）：
ａ）アミノグリコシド類：アミカシン、アストロマイシン、ゲンタマイシン（ネチルマイシン、シソマイシン、イセパマイシン）、ハイグロマイシンＢ、カナマイシン（アミカシン、アルベカシン、ベカナマイシン、ジベカシン、トブラマイシン）、ネオマイシン（フラマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン）、ネチルマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ベルダミシン；
ｂ）アンフェニコール類：アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアンフェニコール；
ｃ）アンサマイシン類：ゲルダナマイシン、ハービマイシン；
ｄ）カルバペネム類：ビアペネム、ドリペネム、エルタペネム、イミペネム、シラスタチン、メロペネム、パニペネム；
ｅ）セフェム類：カルバセフェム（ロラカルベフ）、セファセトリル、セファクロル、セフラジン、セファドロキシル、セファロニウム、セファロリジン、セファロチン又はセファロチン、セファレキシン、セファログリシン、セファマンドール、セファピリン、セファトリジン、セファザフル、セファゼドン、セファゾリン、セフブペラゾン、セフカペン、セフダロキシム、セフェピム、セフミノックス、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキサジン、セフテゾル、セフロキシム、セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェピム、セフェタメト、セフメノキシム、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォタキシム、セフォチアム、セフォゾプラン、セファレキシン、セフピミゾール、セフピラミド、セフピロム、セフポドキシム、セフプロジル、セフキノム、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフチブテン、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトビプロル、セフトリアキソン、セフロキシム、セフゾナム、セファマイシン（セフォキシチン、セフォテタン、セフメタゾールを含む。）、オキサセフェム（フロモキセフ、ラタモキセフ）；
ｆ）糖ペプチド類：ブレオマイシン、バンコマイシン（オリタバンシン、テラバンシンを含む。）、テイコプラニン（ダルババンシン）、ラモプラニン；
ｇ）グリシルサイクリン類：チゲサイクリン；
ｈ）β－ラクタマーゼ阻害剤：ペナム（スルバクタム、タゾバクタム）、クラバム（クラブラン酸）；
ｉ）リンコサミド類：クリンダマイシン、リンコマイシン；
ｊ）リポペプチド類：ダプトマイシン、Ａ５４１４５、カルシウム依存性抗生物質（ＣＤＡ）；
ｋ）マクロライド類：アジスロマイシン、セスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、フルリスロマイシン、ジョサマイシン、ケトライド（テリスロマイシン、セスロマイシン）、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、リファマイシン（リファンピシンン、リファンピン、リファブチン、リファペンチン）、ロキタマイシン、ロキシスロマイシン、スペクチノマイシン、スピラマイシン、タクロリムス（ＦＫ５０６）、トロレアンドマイシン、テリスロマイシンン；
ｌ）モノバクタム類：アズトレオナム、チゲモナム；
ｍ）オキサゾリジノン類：リネゾリド；
ｎ）ペニシリン類：アモキシシリン、アンピシリン、ピバンピシリン、ヘタシリン、バカンピシリン、メタンピシリン、タランピシリン、アジドシリン、アズロシリン、ベンジルペニシリン、ベンザチンベンジルペニシリン、ベンザチンフェノキシメチルペニシリン、クロメトシリン、プロカインベンジルペニシリン、カルベニシリン（カリンダシリン）、クロキサシリン、ジクロキサシリン、エピシリン、フルクロキサシリン、メシリナム（ピブメシリナム）、メズロシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペナメシリン、ペニシリン、フェネチシリン、フェノキシメチルペニシリン、ピペラシリン、プロピシリン、スルベニシリン、テモシリン、チカルシリン；
ｏ）ポリペプチド類：バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ；
ｐ）キノロン類：アラトロフロキサシン、バロフロキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ダノフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、エンロフロキサシン、フロキシン、ガレノキサシン、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、グレパフロキサシン、カノトロバフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、マルボフロキサシン、モキシフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オルビフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、シタフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン；
ｑ）ストレプトグラミン類：プリスチナマイシン、キヌプリスチン／ダルフォプリスチン；
ｒ）スルホンアミド類：マフェニド、プロントジル、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファニルアミド、スルファサラジン、スルフィソキサゾール、トリメトプリム、トリメトプリム－スルファメトキサゾール（コ－トリモキサゾール）；
ｓ）ステロイド系抗菌薬：フシジン酸等；
ｔ）テトラサイクリン類：ドキシサイクリン、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、リメサイクリン、メクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン、ロリテトラサイクリン、テトラサイクリン、グリシルサイクリン（チゲサイクリン等）；
ｕ）その他の抗生物質：アンノナシン、アルスフェナミン、バクトプレノール阻害剤（バシトラシン）、ＤＡＤＡＬ／ＡＲ阻害剤（サイクロセリン）、ジクチオスタチン、ディスコデルモライド、エレウテロビン、エポチロン、エタンブトール、エトポシド、ファロペネム、フシジン酸、フラゾリドン、イソニアジド、ラウリマリド、メトロニダゾール、ムピロシン、マイコラクトン、ＮＡＭ合成阻害剤（ホスホマイシン）、ニトロフラントイン、パクリタキセル、プラテンシマイシン、ピラジナミド、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、リファンピシン（リファンピン）、タゾバクタムチニダゾール、ウバリシン；

（４）抗ウイルス薬：
ａ）侵入／融合阻害剤：アプラビロック、マラビロク、ビクリビロック、ｇｐ４１（エンフビルチド）、ＰＲＯ１４０、ＣＤ４（イバリズマブ）；
ｂ）インテグラーゼ阻害剤：ラルテグラビル、エルビテグラビル、グロボイドナンＡ；
ｃ）成熟阻害剤：ベビリマット、ヴィヴェコン；
ｄ）ノイラミニダーゼ阻害剤：オセルタミビル、ザナミビル、ペラミビル；
ｅ）ヌクレオシド及びヌクレオチド：アバカビル、アシクロビル、アデフォビル、アムドキソビル、アプリシタビン、ブリブジン、シドフォビル、クレブジン、デキセルブシタビン、ジダノシン（ＤＤＩ）、エルブシタビン、エムトリシタビン（ＦＴＣ）、エンテカビル、ファムシクロビル、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、３’－フルオロ置換２’，３’－デオキシヌクレオシド類似体（例えば、３’－フルオロ－２’，３’－ジデオキシチミジン（ＦＬＴ）及び３’－フルオロ－２’，３’－ジデオキシグアノシン（ＦＬＧ）からなる群を含む）、ホミビルセン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、ラミブジン（３ＴＣ）、Ｌ－ヌクレオシド（例えば、β－Ｌ－チミジン及びβ－Ｌ－２’－デオキシシチジンからなる群を含む）、ペンシクロビル、ラシビル、リバビリン、スタンピジン、スタブジンセット（ｄ４Ｔ）、タリバビリン（ビラミジン）、テルビブジン、テノホビル、トリフルリジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ジドブジン（ＡＺＴ）；
ｆ）非ヌクレオシド：アマンタジン、アテビリジン、カプラビリン、ジアリルピリミジン（エトラビリン、リルピビリン）、デラビルジン、ドコサノール、エミビリン、エファビレンツ、ホスカルネット（ホスホリルギ酸）、イミキモド、インターフェロンα、ロビリド、ロデノシン、メチサゾン、ネビラピン、ＮＯＶ－２０５、ペグインターフェロンα、ポドフィロトキシン、リファンピシン、リマンタジン、レシキモド（Ｒ－８４８）、トロマンタジン；
ｇ）プロテアーゼ阻害剤：アンプレナビル、アタザナビル、ボセプレビル、ダルナビル、ホスアンプレナビル、インジナビル、ロピナビル、ネルフィナビル、プレコナリル、リトナビル、サキナビル、テラプレビル（ＶＸ－９５０）、チプラナビル；
ｈ）その他の抗ウイルス薬：アブザイム、アルビドール、カラノリドＡ、セラゲニン、シアノビリン－Ｎ、ジアリルピリミジン、没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）、ホスカルネット、グリフィスシン、タリバビリン（ビラミジン）、ヒドロキシウレア、ＫＰ－１４６１、ミルテフォシン、プレコナリル、ポートマントー阻害剤、リバビリン、セリシクリブ；

（５）^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１８Ｆ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^６４Ｃｕ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９９Ｔｃ、^１１１Ｉｎ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１３３Ｘｅ、^１７７Ｌｕ、^２１１Ａｔ、又は^２１３Ｂｉ（放射性核種）からなる群から選択することができる放射性同位体。

（６）ＵＶ光、蛍光光、ＩＲ光、近ＩＲ光、可視光を吸収する能力を有する発色団分子；黄色素胞、赤色素胞、虹色素胞、白色素胞、黒色素胞、青色素胞；光で光を再放射する蛍光性化学物質である蛍光分子のクラス又はサブクラス；視覚的光感受性分子のクラス又はサブクラス；発光分子のクラス又はサブクラス；ルミネッセンス分子のクラス又はサブクラス；及びルシフェリン化合物のクラス又はサブクラス；以下から選択される非タンパク質有機蛍光体：キサンテン誘導体（フルオレセイン、ローダミン、オレゴングリーン、エオシン、及びテキサスレッドを含む）；シアニン誘導体（シアニン、インドカルボシアニン、オキサカルボシアニン、チアカルボシアニン、及びメロシアニンを含む）；スクアレン誘導体及び環置換スクアライン（Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ、及びＳｑｕａｒｅ色素を含む）；ナフタレン誘導体（ダンシル及びプロダン誘導体を含む）；クマリン誘導体；オキサジアゾール誘導体（ピリジルオキサゾール、ニトロベンゾキサジアゾール、及びベンゾオキサジアゾールを含む）；アントラセン誘導体（ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、及びＣｙＴＲＡＫ Ｏｒａｎｇｅを含むアントラキノン類を含む）；ピレン誘導体（カスケードブルー）；オキサジン誘導体（ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、オキサジン１７０を含む）。アクリジン誘導体（プロフラビン、アクリジンオレンジ、アクリジンイエローを含む）。アリールメチン誘導体（オーラミン、クリスタルバイオレット、マラカイトグリーンを含む）。テトラピロール誘導体（ポルフィン、フタロシアニン、ビリルビンを含む）；以下を含むフルオロフォア化合物の類縁体及び誘導体：ＣＦ色素、ＤＲＡＱ及びＣｙＴＲＡＫプローブ、ＢＯＤＩＰＹ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ、ＤｙＬｉｇｈｔ Ｆｌｕｏｒ、Ａｔｔｏ及びＴｒａｎｃｙ、ＦｌｕｏＰｒｏｂｅｓ、Ａｂｂｅｒｉｏｒ色素、ＤＹ及びＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ色素、ＳｕｌｆｏＣｙ色素、ＨｉＬｙｔｅ Ｆｌｕｏｒ、Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ及びＳｑｕａｒｅ色素、Ｑｕａｓａｒ及びＣａｌ Ｆｌｏｕｒ色素、ＳｕｒｅＬｉｇｈｔ色素（ＡＰＣ、ＲＰＥＰｅｒＣＰ、フィコビリソーム）、ＡＰＣ、ＡＰＣＸＬ、ＲＰＥ、ＢＰＥ、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）、アミノクマリン、ＡＰＣ－Ｃｙ７共役体、ＢＯＤＩＰＹ－ＦＬ、カスケードブルー、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ３Ｂ、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７、フルオレセイン、ＦｌｕｏｒＸ、ヒドロキシクマリン、リサミンローダミンＢ、ルシファーイエロー、メトキシクマリン、ＮＢＤ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｏｒａｎｇｅ、ＰＥ－Ｃｙ５共役体、ＰＥ－Ｃｙ７共役体、ＰｅｒＣＰ、Ｒ－フィコエリトリン（ＰＥ）、Ｒｅｄ６１３、Ｓｅｔａ－５５５－アジド、Ｓｅｔａ－５５５－ＤＢＣＯ、Ｓｅｔａ－５５５－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－５８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－６８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－７８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－ＡＰＣ－７８０、Ｓｅｔａ－ＰｅｒＣＰ－６８０、Ｓｅｔａ－Ｒ－ＰＥ－６７０、ＳｅＴａｕ３８０－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ４０５－マレイミド、ＳｅＴａｕ４０５－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ４２５－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ６４７－ＮＨＳ、テキサスレッド、ＴＲＩＴＣ、ＴｒｕＲｅｄ、Ｘ－ローダミン、７－ＡＡＤ（７－アミノアクチノマイシンＤ、ＣＧ選択性）、アクリジンオレンジ、クロモマイシンＡ３、ＣｙＴＲＡＫオレンジ（赤色励起暗）、ＤＡＰＩ、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、エチジウムブロマイド、ヘキスト３３２５８、ヘキスト３３３４２、ＬＤＳ７５１、ミスラマイシン、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、ＳＹＴＯＸブルー、ＳＹＴＯＸグリーン、ＳＹＴＯＸオレンジ、チアゾールオレンジ、ＴＯ－ＰＲＯ：シアニン単量体、ＴＯＴＯ－１、ＴＯ－ＰＲＯ－１、ＴＯＴＯ－３、ＴＯ－ＰＲＯ－３、ＹＯｓｅｔａ－１、ＹＯＹＯ－１；以下の化合物又はその誘導体を含む蛍光色素：ＤＣＦＨ（２’７’ジクロロジヒドロ－フルオレセイン、酸化型）、ＤＨＲ（ジヒドロローダミン１２３、酸化型、光触媒酸化）、Ｆｌｕｏ－３（ＡＭエステル、ｐＨ＞６）、Ｆｌｕｏ－４（ＡＭエステル、ｐＨ７．２）、Ｉｎｄｏ－１（ＡＭエステル、低／高カルシウム（Ｃａ^２＋））、ＳＮＡＲＦ（ｐＨ６／９）、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）、ＡｍＣｙａｎ１（四量体、Clontech）、ＡｓＲｅｄ２（四量体、Clontech）、Ａｚａｍｉグリーン（単量体）、アズライト、Ｂ－フィコエリトリン（ＢＰＥ）、セルリアン、ＣｙＰｅｔ、ＤｓＲｅｄ単量体（Clontech）、ＤｓＲｅｄ２（「ＲＦＰ」）、ＥＢＦＰ、ＥＢＦＰ２、ＥＣＦＰ、ＥＧＦＰ（弱二量体）、エメラルド（弱二量体）、ＥＹＦＰ（弱二量体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ａ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｃ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｌ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｔ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｆ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｈ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｗ変異体）、ＧＦＰ_ｕｖ、ＨｃＲｅｄ１、Ｊ－Ｒｅｄ、カチューシャ、Ｋｕｓａｂｉｒａ Ｏｒａｎｇｅ（単量体、MBL）、ｍＣＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＣｉｔｒｉｎｅ、Ｍｉｄｒｉｉｓｈｉ Ｃｙａｎ（二量体、MBL）、ｍＫａｔｅ（ＴａｇＦＰ６３５、単量体）、ｍＫｅｉｍａ－Ｒｅｄ（単量体）、ｍＫＯ、ｍＯｒａｎｇｅ、ｍＰｌｕｍ、ｍＲａｓｐｂｅｒｒｙ、ｍＲＦＰ１（単量体）、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ｍＴＦＰ１、ｍＴｕｒｑｕｏｉｓｅ２、Ｐ３（フィコビリソーム複合体）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎ Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ（ＰｅｒＣＰ）、Ｒ－フィコエリトリン（ＲＰＥ）、Ｔ－Ｓａｐｐｈｉｒｅ、ＴａｇＣＦＰ（二量体）、ＴａｇＧＦＰ（二量体）、ＴａｇＲＦＰ（二量体）、ＴａｇＹＦＰ（二量体）、ｔｄＴｏｍａｔｏ（タンデム二量体）、トパーズ、ＴｕｒｂｏＦＰ６０２（二量体）、ＴｕｒｂｏＦＰ６３５（二量体）、ＴｕｒｂｏＧＦＰ（二量体）、ＴｕｒｂｏＲＦＰ（二量体）、ＴｕｒｂｏＹＦＰ６３５（二量体）、ビーナス、天然型ＧＦＰ、ＹＰｅｔ、Ｚｓグリーン１（四量体）、Ｚｓイエロー１（四量体）、並びにそれらの誘導体；

（７）以下から選択することができる細胞受容体アゴニスト又は細胞刺激分子：葉酸誘導体；グルタミン酸尿素誘導体；ソマトスタチン及びその類縁体（オクトレオチド（サンドスタチン）及びランレオチド（ソマチリン）からからなる群から選択される）；芳香族スルホンアミド；下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド（ＰＡＣＡＰ）（ＰＡＣ１）；血管作動性腸管ペプチド（ＶＩＰ／ＰＡＣＡＰ）（ＶＰＡＣ１、ＶＰＡＣ２）；メラノサイト刺激ホルモン（α－ＭＳＨ）；コレシストキニン（ＣＣＫ）／ガストリン受容体アゴニスト、ボンベシン（Ｐｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｓｎ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｍｅｔ－ＮＨ_２からなる群から選択）／ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）；ニューロテンシン受容体リガンド（ＮＴＲ１、ＮＴＲ２、ＮＴＲ３）、サブスタンスＰ（ＮＫ１受容体）リガンド；ニューロペプチドＹ（Ｙ１～Ｙ６）；ＲＧＤ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ）、ＮＧＲ（Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ）、二量体及び多量体環状ＲＧＤペプチド（ｃＲＧＤｆＶから選択）、ＴＡＡＳＧＶＲＳＭＨ、及びＬＴＬＲＷＶＧＬＭＳ（コンドロイチン硫酸プロテオグリカンＮＧ２受容体リガンド）、及びＦ３ペプチドを含むホーミングペプチド；細胞膜透過ペプチド（ＣＰＰ）；ペプチドホルモン、テストステロン産生と同様に、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）を標的として働く、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト及びアンタゴニスト、並びに性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストであって、ブセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ゴナドレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ゴセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－）Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＡｚＧｌｙ－ＮＨ_２）、ヒストレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｈｉｓ（Ｎ－ベンジル）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、リュープロリド（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ナファレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－２Ｎａｌ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、トリプトレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ナファレリン、デスロレリン、アバレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｔｙｒ－Ｄ－Ａｓｎ－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－ＤＡｌａ－ＮＨ_２）、セトロレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｃｉｔ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、デガレリクス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－４－アミノＰｈｅ（Ｌ－ヒドロオロチル）－Ｄ－４－アミノＰｈｅ（カルバモイル）－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、及びガニレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｌｅｕ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）からなる群から選択される；トール様受容体（ＴＬＲ）リガンド、Ｃ型レクチン、及びＮｏｄｌｉｋｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＮＬＲ）リガンドから選択されるパターン認識受容体（ＰＲＲ）；カルシトニン受容体アゴニスト；インテグリン受容体及びその受容体サブタイプ（α_Vβ₁、α_Vβ₃、α_Vβ₅、α_Vβ₆、α₆β₄、α₇β₁、α_Lβ₂、α_IIbβ₃からなる群から選択される）アゴニスト（ＧＲＧＤＳＰＫ、シクロ（ＲＧＤｆＶ）（Ｌ１）及びその誘導体［シクロ（－Ｎ（Ｍｅ）Ｒ－ＧＤｆＶ）、シクロ（Ｒ－Ｓａｒ－ＤｆＶ）、シクロ（ＲＧ－Ｎ（Ｍｅ）Ｄ－ｆＶ）、シクロ（ＲＧＤ－Ｎ（Ｍｅ）ｆ－Ｖ）、シクロ（ＲＧＤｆ－Ｎ（Ｍｅ）Ｖ－）（シレンギチド）］からなる群から選択される；アンチカリン（リポカリンの誘導体）；アドネクチン（１０番目のＦＮ３（フィブロネクチン））；設計されたアンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎｓ）；アビマー；ＥＧＦ受容体又はＶＥＧＦ受容体アゴニスト；

（８）上記の任意の薬物の、薬学的に許容される塩、酸、誘導体、水和物若しくは水和塩；又は結晶構造、又は上記薬物のいずれかの光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー。

別の実施形態では、薬物Ｄは、哺乳動物に投与される場合に、細胞結合抗体又は抗体様タンパク質分子の半減期を延長するために使用されるポリアルキレングリコールとすることができる。ポリアルキレングリコールには、これらに限定されないが、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、ポリ（プロピレングリコール）、及びエチレンオキシドとプロピレンオキシドとの共重合体から選択されるポリアルキレングリコールが含まれる；特に好ましくはＰＥＧであり、より特に好ましくは、単官能的に活性化されたヒドロキシＰＥＧ（例えば、ヒドロキシＰＥＧ－モノカルボン酸、ヒドロキシＰＥＧ－モノアルデヒド、ヒドロキシＰＥＧ－モノアミン、ヒドロキシＰＥＧ－モノヒドラジド、ヒドロキシＰＥＧ－モノカルバジド、ヒドロキシＰＥＧ－モノヨードアセトアミド、ヒドロキシＰＥＧ－モノマレイミド、ヒドロキシＰＥＧ－オルトピリジンジスルフィド、ヒドロキシＰＥＧ－モノオキシム、ヒドロキシＰＥＧ－モノフェニルカーボネート、ヒドロキシＰＥＧ－モノフェニルグリオキサール、ヒドロキシＰＥＧ－モノチアゾリジン－２－チオン、ヒドロキシＰＥＧ－モノチオエステル、ヒドロキシＰＥＧ－モノチオール、ヒドロキシＰＥＧ－モノトリアジン、及びヒドロキシＰＥＧ－モノビニルスルホンを含む、一端で活性化されたヒドロキシＰＥＧ）である。

特定のそのような実施形態では、ポリアルキレングリコールは、約１０ダルトン～約２００ｋＤａ、好ましくは約８８Ｄａ～約４０ｋＤａの分子量；それぞれ約８８Ｄａ～約４０ｋＤａの分子量を有する２つの分岐；及びより好ましくは、それぞれ約８８Ｄａ～約２０ｋＤａの２つの分岐を有する。特定の一実施形態では、ポリアルキレングリコールはポリ（エチレン）グリコールであり、約１０ｋＤａ；約２０ｋＤａ、又は約４０ｋＤａの分子量を有する。特定の実施形態では、ＰＥＧは、ＰＥＧ １０ｋＤａ（直鎖又は分枝）、ＰＥＧ ２０ｋＤａ（直鎖又は分枝）、又はＰＥＧ ４０ｋＤａ（直鎖又は分枝）である。多くの米国特許、例えば、米国特許第5,428,128; 5,621,039; 5,622,986; 5,643,575; 5,728,560; 5,730,990; 5,738,846; 5,811,076; 5,824,701; 5,840,900; 5,880,131; 5,900,402; 5,902,588; 5,919,455; 5,951,974; 5,965,119; 5,965,566; 5,969,040; 5,981,709; 6,011,042; 6,042,822; 6,113,906; 6,127,355; 6,132,713; 6,177,087; 6,180,095が、直鎖又は分枝の「非抗原性」ＰＥＧポリマー及びその誘導体又は共役体の調製を開示している。

更に別の実施形態では、Ｄは、より好ましくは強力な細胞毒性剤であり、チューブリシン及びその類縁体、メイタンシン及びその類縁体、タキサン及びその類縁体、ＣＣ－１０６５及びその類縁体、ダウノルビシン又はドキソルビシン及びその類縁体、アマトキシン及びその類縁体、ベンゾジアゼピン二量体（ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、トマイマイシン、アントラマイシン、インドリノベンゾジアゼピン、イミダゾベンゾチアジアゼピン、又はオキサゾリジノベンゾジアゼピンの二量体）及びその類縁体、カリケアマイシン及びエンジイン抗生物質類縁体、アクチノマイシン及びその類縁体、アザセリン及びその類縁体、ブレオマイシン及びその類縁体、エピルビシン及びその類縁体、タモキシフェン及びその類縁体、イダルビシン及びその類縁体、ドラスタチン及びその類縁体、オーリスタチン（モノメチルオーリスタチン（ＭＭＡＥ）、ＭＭＡＦ、オーリスタチンＰＹＥ、オーリスタチンＴＰ、オーリスタチン２－ＡＱ、６－ＡＱ、ＥＢ（ＡＥＢ）、及びＥＦＰ（ＡＥＦＰ）を含む）及びその類縁体、コンブレタスタチン、デュオカルマイシン及びその類縁体、カンプトテシン及びその類縁体、ゲルダナマイシン及びその類縁体、メトトレキサート及びその類縁体、チオテパ及びその類縁体、ビンデシン及びその類縁体、ビンクリスチン及びその類縁体、ヘミアステリン及びその類縁体、ナズマミド及びその類縁体、スプライセオスタチン、プラジエノリド、ミクロギニン（ｍｉｃｒｏｇｉｎｉｎ）及びその類縁体、ラジオスミン（ｒａｄｉｏｓｕｍｉｎ）及びその類縁体、アルテロバクチン及びその類縁体、ミクロスクレロデルミン及びその類縁体、テオネラミド及びその類縁体、エスペラマイシン及びその類縁体、ＰＮＵ－１５９６８２及びその類縁体、プロテインキナーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＫＳＰ阻害剤、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤、免疫毒素、特定の細胞受容体アゴニスト、細胞刺激分子又は細胞内シグナル分子、１又は２以上のＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、及びＰＩＷＩ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、並びに上述の薬物の立体異性体、等価体、類縁体、又は誘導体から選択される。

チューブリシン及びその類縁体は、当技術分野で周知であり、既知の方法に従って天然源から単離することも、既知の方法に従って合成的に調製することもできる（例えば、Balasubramanian, R., et al. J. Med. Chem., 2009, 52, 238-40; Wipf, P., et al. Org. Lett., 2004, 6, 4057-60; Pando, O., et al. J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 7692-5; Reddy 、J. A., et al. Mol. Pharmaceutics, 2009, 6, 1518-25; Raghavan, B., et al. J. Med. Chem., 2008, 51, 1530-33; Patterson, A. W., et al. J. Org. Chem., 2008, 73, 4362-9; Pando, O., et al. Org. Lett., 2009, 11 (24), 5567-9; Wipf, P., et al. Org. Lett., 2007、9 (8)、1605-7; Friestad, G. K.、Org. Lett.、2004、6、3249-52; Peltier, H.M. et al., J. Am. Chem. Soc.、2006、128、16018-9; Chandrasekhar, S., et al. J. Org. Chem., 2009, 74, 9531-4; Liu, Y., et al. Mol. Pharmaceutics, 2012, 9, 168-75; Friestad, G. K., et al Org. Lett., 2009, 11, 1095-8; Kubicek, K., et al., Angew Chem Int Ed Engl, 2010.49: 4809-12; Chai, Y., et al., Chem Biol, 2010, 17 : 296-309; Ullrich, A., et al.,Angew Chem Int Ed Engl、2009、48、4422-5; Sani, M., et al., Angew Chem Int Ed Engl、2007、46、3526-9。 Domling, A., et al., Angew Chem Int Ed Engl、2006、45、7235-9; 特許出願：Zanda, M., et al., カナダ特許出願CA 2710693 (2011); Chai, Y., et al., 欧州特許出願2174947 (2010), WO 2010034724; Leamon, C., et al., WO2010033733、WO2009002993； Ellman, J., et al., PCT WO2009134279; WO 2009012958、米国出願20110263650、20110021568; Matschiner, G., et al., WO2009095447; Vlahov, I., et al., WO2009055562、WO2008112873; Low, P., et al., WO2009026177; Richter W., WO2008138561； Kjems, J., et al.,WO 2008125116; Davis, M., et al., ＷＯ２００８０７６３３３； Diener, J., et al., 米国特許出願第20070041901、WO2006096754; Matschiner, G., et al., WO2006056464; Vaghefi, F., et al., WO2006033913; Doemling, A., ドイツ特許出願DE102004030227, WO2004005327, WO2004005326, WO2004005269; Stanton, M., et al,米 国特許第20040249130; Hoefle, G., et al, Ger. OffenDE10254439、DE10241152、DE10008089; Leung, D., et al, WO2002077036; Reichenbach, H., et al, Ger. Offen. DE19638870; Wolfgang, R.、US20120129779; Chen, H。本特許出願の方法による細胞結合分子との共役のためのチューブリシンの好ましい構造は、PCT/IB2012/053554の特許出願に記載されている。

以下の式（ＩＶ）を有するチューブリシン類縁体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩；又は多形結晶構造；又はその光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー：

式中、

は独立して、Ｌ_１及び／又はＬ_２と結合する結合部位である。２つの

がＬ_１及びＬ_２の両方に結合する場合、Ｒ_１とＲ_２、又はＺ_２とＺ_３が二重結合であることが好ましい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、又は複素環；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、炭素環、又はアルキルカルボニルである；又はＲ^１Ｒ^２、Ｒ^１Ｒ^３、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^３Ｒ^４、Ｒ^５Ｒ^６、Ｒ^１１Ｒ^１２、又はＲ^１３Ｒ^１４は、３～７員の炭素環、シクロアルキル、複素環、ヘテロシクロアルキル、芳香族、又は複素芳香族環系を形成する；Ｌ_１又はＬ_２に独立して又は同時に結合する場合、Ｒ^１及びＲ^２が独立して欠いてもよい；Ｙ^１はＮ又はＣＨである。

式中、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^８、Ｒ^１０、及びＲ^１１は独立して、Ｈ、又はＣ_１～Ｃ_４アルキル若しくはヘテロアルキルである。

式中、Ｒ^７は独立して、Ｈ、Ｒ^１４、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｘ^１Ｒ^１５；又は－Ｒ^１４Ｘ^１Ｒ^１５である；Ｘ^１はＯ、Ｓ、Ｓ－Ｓ、ＮＨ、ＣＨ_２、又はＮＲ^１４である。

式中、Ｒ^９は、Ｈ、ＯＨ、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲ^１４、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^１４、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ^１４－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^１４ＳＳＲ^１５－、ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１４）－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ^１４Ｒ^１５、ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１４）、又はＯＲ^１４ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１５）から選択される。

Ｒ^１１は独立して、Ｈ、Ｒ^１４、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^１５、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｘ^２Ｒ^１５であり、式中、Ｘ^２は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、又は－Ｎ（Ｒ^１４）－である。

Ｒ^１２は、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＳＨ、－ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＮＨ_２、ＣＯＮＨＮＨＲ^１５、－ＣＯＮＨ（Ｒ^１５）、－ＣＯＯＲ^１５、－Ｒ^１５ＣＯＲ^１６、－Ｒ^１５ＣＯＯＲ^１６、－Ｒ^１５Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、－Ｒ^１５Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ^１６、－ＣＯＳＲ^１５、Ｒ^１５Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ^１６、－Ｒ^１５Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－Ｒ^１５ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－ＣＯＯＣＨ_２ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－ＣＯＸ_２ＳＯ_２Ｒ^１７、－ＣＯＯＲ^１５Ｘ_２Ｒ^１６、テトラゾール、イミダゾール、又はトリアゾールである；Ｘ_２は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｒ^１５）－、－ＯＲ^１５－、－ＳＲ^１５－、ＣＨ_２、又は－ＮＨＲ^１５－である；；Ｒ^１２がＬ_１又はＬ_２に結合する場合、Ｒ^１２は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）_２Ｒ^１５－、又は－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^１５）－である。

Ｒ^１３及びＲ^１４は独立して、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル：Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキルである。

Ｚ^２及びＺ^３は独立して、Ｈ、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ^１５）、ＮＨＮＨ、－ＯＨ、－ＳＨ、－ＮＨ_２、ＮＨ、ＮＨＮＨ２、－ＮＨ（Ｒ^１５）、－ＯＲ^１５、ＣＯ、－ＣＯＸ２、－ＣＯＸ２Ｒ^１６、Ｒ^１７、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＳＲ^１６、ＮＲ^１６Ｒ^１７、Ｎ＝ＮＲ^１６、Ｎ＝Ｒ^１６、ＮＯ２、ＳＯＲ^１６Ｒ^１７、ＳＯ２Ｒ^１６、ＳＯ３Ｒ^１６、ＯＳＯ３Ｒ^１６、ＰＲ^１６Ｒ^１７、ＰＯＲ^１６Ｒ^１７、ＰＯ２Ｒ^１６Ｒ^１７、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１７、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＰＯ（ＯＲ^１６）（ＯＲ^１７）、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１７；－Ｏ－（Ｃ_４～Ｃ_１２グリコシド）、－Ｎ－（Ｃ_４～Ｃ_１２グリコシド）；Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、炭素環式、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール、又は２～８個の炭素原子のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド（ＮＨ（Ａａ）_１～８又はＣＯ（Ａａ）_１～８（Ｎ末端又はＣ末端（Ａａ）_ｒ、ｒ＝１～８個の同一の又は異なるアミノ酸配列）、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０～約１０００の整数である）、あるいはそれらの上記の基の組み合わせである；Ｘ_２は、Ｏ、Ｓ、Ｓ－Ｓ、ＮＨ、ＣＨ_２、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ_２、ＣＨＲ^１５、又はＮＲ^１５である。

Ｒ^１５、Ｒ^１６、及びＲ^１７は独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール、アルキルカルボニル、又はＮａ^＋、Ｋ^＋、Ｃｓ^＋、Ｌｉ^＋、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^＋、Ｚｎ^２＋、Ｎ^＋（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）（Ｒ^４）、若しくはＨＮ^＋（Ｃ_２Ｈ_５ＯＨ）_３塩である。

Ｙ^１及びＹ^２は独立して、Ｎ又はＣＨである；ｑは０又は１である；ｑ＝０の場合、Ｙ^３は存在せず、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は独立して、ＣＨ、Ｎ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、又はＮ（Ｒ１）であるため、Ｙ^２、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は、フラン、ピロールチオフェン、チアゾール、オキサゾール及びイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、チアジアゾールの複素芳香環を形成する；ｑ＝１の場合、Ｙ^３、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は独立して、ＣＨ又はＮであるため、Ｙ^２、Ｙ^３、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は、ベンゼン、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、トリアジン、テトラジン、ペンタジンの芳香環を形成する。

チューブリシン類縁体は特に、以下に示す構造を有する：

式中、Ｒ^２０は、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）；又は炭素原子数１～８個のカルボン酸塩、エステル、エーテル、若しくはアミド；又は１～８個のアミノ酸；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１０００までの整数である）；あるいは、Ｒ^２０が存在せず、酸素原子がケトンを形成する、又は上記の組み合わせである；

Ｚ^２及びＺ^３は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ、ＮＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、Ｒ^１８、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＮＨＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、ＯＳＯ_２（ＯＲ_１８）、Ｏ－（Ｃ_４～Ｃ_１２－グリコシド）、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分岐アルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である。

Ｒ^１７及びＲ^１８は独立して、Ｈ、直鎖又は分枝アルキル又はヘテロアルキル、Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である。

Ｒ^１９は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＯＳＯ_２（ＯＲ^１８）、ＸＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＸＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＸＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＸＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＸＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル又はカルボン酸塩; Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール又はアルキルカルボニル；又は医薬用塩である。

Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、又はＣＨ_２である。

Ｒ_７は、上記の定義と同じである；

式中、式（ＩＶ－０１）～（ＩＶ－７９）中の結合部位

は、式（ＩＶ）に記載の結合部位と同じである。

カリケアマイシン及びその関連するエンジイン抗生物質は、以下に記載されている： Nicolaou, K. C. et al, Science 1992, 256, 1172-1178; Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1993, 90, 5881-8), U.S. Patent Nos. 4, 970, 198; 5, 053, 394; 5, 108, 912; 5, 264, 586; 5, 384, 412; 5, 606, 040; 5, 712, 374; 5, 714, 586; 5, 739, 116; 5, 770, 701; 5, 770, 710; 5, 773, 001; 5, 877, 296; 6, 015, 562; 6, 124, 310; 8, 153, 768。例示的なエンジインとしては、カリケアマイシン、エスペラマイシン、ウンシアラマイシン、ダイネマイシン、及びそれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。カリケアマイシンの構造は好ましくは次の式、又は化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又は多形結晶構造、又はその光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー若しくはエナンチオマーである。

ゲルダナマイシンは、Ｈｓｐ９０（熱ショックタンパク質９０）に結合するベンゾキノンアンサマイシン系抗生物質であり、抗腫瘍薬として使用されている。例示的なゲルダナマイシンには、１７－ＡＡＧ（１７－Ｎ－アリルアミノ－１７－デメトキシゲルダナマイシン）及び１７－ＤＭＡＧ（１７－ジメチルアミノエチルアミノ－１７－デメトキシゲルダナマイシン）が含まれるが、これらに限定されない。

メイタンシン又はその誘導体であるメイタンシノイドは、チューブリンの重合阻害を通じて有糸分裂中の微小管形成を阻害することにより、細胞増殖を阻害する。Remillard et al., Science 189:1002-1005 (1975)を参照。例示的なメイタンシン及びメイタンシノイドとしては、メルタンシン（ＤＭ１、ＤＭ４）、メイタンシノール及びその誘導体、並びにアンサマイトシンが挙げられるが、これらに限定されない。メイタンシノイドは、米国特許第4, 256, 746, 4, 361, 650, 4, 307, 016, 4, 294, 757, 4, 294, 757, 4, 371, 533, 4, 424, 219, 4, 331, 598, 4, 450, 254, 4, 364, 866, 4, 313, 946, 4, 315, 929 4, 362, 663, 4, 322, 348, 4, 371, 533, 4, 424, 219, 5, 208, 020, 5, 416, 064, 5, 208, 020; 5, 416, 064; 6, 333.410; 6, 441, 163; 6, 716, 821, 7, 276, 497, 7, 301, 019, 7, 303, 749, 7, 368, 565, 7, 411, 063, 7, 851, 432,、および 8, 163, 888に記載されている。メイタンシノイドの構造は、好ましくは、次の式で表される：

カンプトテシン（ＣＰＴｓ）とその誘導体は、ＤＮＡの再ライゲーションを防止し、その結果アポトーシスを引き起こす DNA 損傷を生じさせるトポイソメラーゼ阻害剤であり、以下の文献に記載されている：Shang, X. F. et al、Med Res Rev. 2018、38(3) 775-828; Botella, P. and Rivero-Buceta, E.J Control Release 2017、247: 28-54; Martino, E.ら、Bioorg Med Chem Lett. 2017、27(4):701-707; Lu, A., et al.,、Acta Pharmacol Sin 2007、28(2): 307-314。カンプトテシンには、ＳＮ－３８、トポテカン、イリノテカン（ＣＰＴ－１１）、シラテカン（ＤＢ－６７、ＡＲ－６７）、コシテカン（ＢＮＰ－１３５０）、エチリノテカン、エキサテカン、ルルトテカン、ギマテカン（ＳＴ１４８１）、ベロテカン（ＣＫＤ－６０２）、ルビテカン、及び他のいくつかが含まれる（Shang, X. F. et al, Med Res Rev. 2018, 38(3):775-828）。これまでのところ、トポテカン、イリノテカン、ベロテカンの３つのＣＰＴ類縁体が承認され、がん化学療法に使用されており（Palakurthi, S., Expert Opin Drug Deliv. 2015;12(12):1911-21; Shang, X. F. et al, Med Res Rev. 2018, 38(3):775-828）、ＳＮ－３８及びエキサテカンの両者は、臨床試験でＡＤＣ共役体のペイロードとして使用することに成功している（Ocean, A. J. et al, Cancer. 2017, 123(19): 3843-3854; Starodub, A.N., et al, Clin Cancer Res. 2015, 21(17): 3870-8; Cardillo, T.M., et al, Bioconjug Chem. 2015, 26(5): 919-31; Ogitani, Y . et al, Bioorg Med Chem Lett. 2016, 26(20): 5069-5072; Takekawa, N. et al, Int J Cancer. 2017 Oct 15;141(8):1682-1689. 米国特許 7, 591, 994; 7, 999, 083, 8, 080, 250, 8, 268, 317; 米国特許出願20130090458, 20140099258, 20150297748, 20160279259）。

カンプトテシン（ＣＰＴ）は、以下の式に示す構造、又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーである：

式中、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_４は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｏ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；ＮＨ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数２～８個のエステル、エーテル、アミド、カーボネート、尿素、又はカルバメートから選択される；Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｏ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；ＮＨ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；又は炭素原子数２～８個のエステル、エーテル、アミド、カーボネート、尿素、又はカルバメートである；あるいは、Ｒ_１Ｒ_２、Ｒ_２Ｒ_３、及びＲ_３Ｒ_４は独立して、５～７員の炭素環、複素環、ヘテロシクロアルキル、芳香族、又は複素芳香族環系を形成する。

は、Ｌ１又はＬ２と結合できる分子内部位である。

カンプトテシンの構造は、次の式、又は１つ以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーが好ましい：

式中、

はＬ_１又はＬ_２との結合部位である；

Ｐ^１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＮＨＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＮＣＨ_３、ＯＳＯ_２（ＯＲ^１８）、Ｏ－（Ｃ_４－Ｃ_１２－グリコシド）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＣＨ_２Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＣＨ_３、Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状又は分岐状のアルキル）、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状又は分岐状のアルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖状又は分枝状のアルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖状又は分枝上のアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）；Ｒ^１７及びＲ^１８は独立して、Ｈ、直鎖状又は分枝状のアルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖状又は分枝状のアルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８のの直鎖状又は分枝状のアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である。

コンブレタスタチンは、腫瘍内の血管破壊特性を持つ天然のフェノールである。例示的なコンブレタスタチン及びその誘導体には、コンブレタスタチンＡ－４（ＣＡ－４）、ＣＡ４－βＧａｌ、ＣＡ－４ＰＤ、ＣＡ４－ＮＰｓ、及びオンブラブリンが含まれるが、これらに限定されない：

細胞毒性天然物であるパクリタキセル（タキソール）、半合成誘導体であるドセタキセル（タキソテール）を含むタキサン、及び共役に好ましいそれらの類縁体は、K C. Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. 117, 2409-20, (1995); Ojima et al, J. Med. Chem. 39:3889-3896 (1996); 40:267-78 (1997); 45, 5620-3 (2002); Ojima et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 96:4256-61 (1999); Kim et al., Bull. Korean Chem. Soc., 20, 1389-90 (1999); Miller, et al. J. Med. Chem., 47, 4802-5 (2004); U.S. Patent No. 5, 475, 011 5, 728, 849, 5, 811, 452; 6, 340, 701; 6, 372, 738; 6, 391, 913, 6.436, 931; 6, 589, 979; 6, 596, 757; 6, 706, 708; 7, 008, 942; 7, 186, 851; 7, 217, 819; 7, 276, 499; 7, 598, 290; 及び7, 667, 054に例示される。タキサンの構造は、次の式が好ましい。

式中、

は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；Ａｒ及びＡｒ’は独立して、アリール又はヘテロアリールである。

アントラサイクリンは、ＤＮＡ鎖が切断され、抗体様タンパク質に共有結合している酵素－ＤＮＡ複合体を安定化することができる哺乳動物のＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤である。これらの抗がん剤は、過去数十年間、多くの形態の固形腫瘍や急性白血病の治療において重要な役割を果たし続けている。しかし、アントラサイクリンは心血管疾患の罹患及び死亡を引き起こす（Sagi, J.C., et al, Pharmacogenomics. 2016, 17(9), 1075-87; McGowan, J.V., et al, Cardiovasc Drugs Ther. 2017, 31(1), 63-75）。従って、心臓毒性を軽減しながらそのような分子の比活性を高めるために、研究者らは、これらの薬剤の治療指数を改善するための一般的なアプローチとして、アントラサイクリンと細胞結合抗体又は抗体様タンパク質分子との結合を積極的に使用している（Mollaev, M. et al, Int J Pharm. 2018 Dec 29. pii: S0378-5173(18) 30991-8; Rossin, R., et al, Bioconjug Chem. 2016, 27(7):1697-706; Dal Corso, Ａ,. et al, J Control Release. 2017, 264:211-218）。 例示的なアントラサイクリンとしては、ダウノルビシン、ドキソルビシン（即ち、アドリアマイシン）、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンが含まれるが、これらに限定されない。本願に使用されるアントラサイクリンの構造は、好ましくは、次の式で表される：

ビンカアルカロイドは、がん細胞の分裂能力を阻害することによって作用する、抗有糸分裂及び抗微小管アルカロイド剤のセットです。ビンカアルカロイドには、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ロイロシン、ビノレルビン、カタランチン、ビンドリン、ビンカミノール、ビネリジン、ミノビンシン、メトキシミノビンシン、ミノビンシニン、ビンカディフホルミン、デソキシビンカミノール、ビンカマジン、ビンカミン、ビンポセチン、およびビンブルニンが含まれる。ビンカアルカロイドの構造は、好ましくは次の式を有するビンブラスチン、ビンクリスチンである：

ドラスタチン及びそのペプチド類縁体並びに誘導体であるオーリスタチンは、抗がん作用及び抗真菌作用があることが示されている非常に強力な抗有糸分裂剤です。例えば、米国特許第5, 663, 149及びPettit et al., Antimicrob. Agents Chemother. 42:2961-2965, 1998を参照。例示的なドラスタチン及びオーリスタチンとしては、ドラスタチン１０、オーリスタチンＥ（ＡＥ）、オーリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、オーリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）、ＭＭＡＤ（モノメチルオーリスタチンＤまたはモノメチルドラスタチン１０）、ＭＭＡＦ（モノメチルオーリスタチンＦ又はＮ－メチルバリン－バリン－ドライソロイイン－ドラプロイン－フェニルアラニン）、ＭＭＡＥ（モノメチルオーリスタチンＥ又はＮ－メチルバリン－バリン－ドライソロイイン－ドラプロイン－ノルエフェドリン）、５－ベンゾイル吉草酸－ＡＥエステル（ＡＥＶＢ）、オーリスタチンＦフェニレンジアミン（ＡＦＰ）、及びおよびその他の新規オーリスタチンが含まれるが、これらに限定されない。オーリスタチンは、Int. J. Oncol. 15: 367-72 (1999); Molecular Cancer Therapeutics, vol. 3, No. 8, pp. 921-32 (2004)； 米国出願番号 11134826、20060074008、2006022925。米国特許番号 4414205、4753894、4764368、4816444、4879278、4943628、4978744、5122368、 5165923、5169774、5286637、5410024、5521284、5530097、5554725、5585089、5599902、5629197、 5635483、5654399、5663149、5665860、5708146、5714586、5741892、5767236、5767237、5780588、5821337、5840699、5965537、600493 4、6033876、6034065、6048720、6054297、6054561、6124431、6143721、6162930、6214345、6239104、6323315、 6342219、6342221、6407213、6569834、6620911、6639055、6884869、6913748、7090843、7091186、7097840、7098305、7098308、749829 8、7375078、7462352、7553816、7659241、7662387、7745394、7754681、7829531、7837980、7837995、7902338に記載されている。オーリスタチン類縁体の構造は、好ましくは、以下の式（Ｉｈ－０１）、（Ｉｈ－０２）、（Ｉｈ－０３）、（Ｉｈ－０４）、（Ｉｈ－０５）、（Ｉｈ－０６）、（Ｉｈ－０７）、（Ｉｈ－０８）、（Ｉｈ－０９）、（Ｉｈ－１０）、及び（Ｉｈ－１１）、又は１つ以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーである：

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状若しくは分枝状のアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル、エーテル、アミド、アミン、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐ（式中、ｐは１～約５０００の整数である）を有するポリエチレンオキシ単位である；２つのＲ：Ｒ^１Ｒ^２、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^１Ｒ^３、又はＲ^３Ｒ^４は、一緒になってもよい。アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員環を形成することができる。

Ｙ_１及びＹ_２は、接続部位（Ｌ１及び／又はＬ２と独立して結合する）

と結合している場合、独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である；または、接続部位

と結合していない場合、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＲ_５、ＳＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＮＨＣ（Ｏ）ＳＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、及びＣ（Ｏ）ＮＨＲ_１である。

Ｒ_１２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＮＨＣＯＯＨ、Ｏ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－（Ａａ）_ｎＣＯＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＲ_１Ｒ_１’、ＮＨＯＨ、ＮＨＯＲ_１、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＮＨ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１、Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、Ｒ_１－ＯＰＯ_３Ｈ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨ_２、又はＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２であり、Ａａは１～８個の同一又は異なるアミノ酸である；ｐは１～５０００である。

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_５’、Ｚ_１、Ｚ_２、及びｎは、上記の定義と同じである。

ヘミアステリン及びその類縁体（ＨＴＩ－２８６等）は、チューブリンに結合し、正常な微小管の動態を破壊し、化学量論量で微小管を解重合する。メイタンシノイドの構造は、好ましくは次の式である：

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル、エーテル、アミド、アミン、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐを有するポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは１～約５０００の整数である）；Ｒ^２Ｒ^３は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員の環を形成することができる。

エリブリンは、既存の微小管のプラス末端にある少数の高親和性部位に主に結合しており、細胞毒性と非細胞毒性の両方の作用機序を有する。その細胞毒性効果は、その抗有糸分裂活性に関連しており、長期かつ不可逆的な有糸分裂阻害の後にがん細胞のアポトーシスが誘導される（Kuznetsov, G. et al, Cancer Research. 2004, 64 (16): 5760-6.; Towle, M. Jら、Cancer Research、2010、71 (2): 496-505）。ヒト乳がんモデルにおける前臨床研究では、その細胞毒性、抗有糸分裂に基づくメカニズムに加えて、エリブリンがその抗有糸分裂効果とは無関係と思われる生存がん細胞や残存腫瘍の生物学にも複雑な効果を及ぼすことが示されている。エリブリンは、アントラサイクリン系とタキサン系の両方の化学療法を含む、末期疾患に対して少なくとも２つの化学療法レジメンを受けた転移性乳がんの治療薬として、又は手術で除去できない（切除不能）若しくは進行している（転移性）脂肪肉腫（軟部肉腫の一種）の治療薬として、米国ＦＤＡによって承認されている。エリブリンは、ＡＤＣ共役体のペイロードとして使用されている（US20170252458）。エリブリンの構造は、好ましくは次の式Ｅｂ０１である：

ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ阻害剤（ＮＡＭＰＴ）は、その強力な活性の独特のメカニズムにより、興味深いＡＤＣペイロードとなり得る（Sampath D, et al, Pharmacol Ther 2015; 151, 16-31）。ＮＡＭＰＴは細胞内のニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）レベルを調節する。ＮＡＤは、エネルギーと同化代謝をサポートする必須の酸化還元補因子として機能する。ＮＡＤは、代謝においていくつかの重要な役割を果たす。酸化還元反応では補酵素として、ＡＤＰリボシル化反応ではＡＤＰリボース部分の供与体として、セカンドメッセンジャー分子である環状ＡＤＰリボースの前駆体として作用する他、細菌のＤＮＡリガーゼの基質及びＮＡＤ^＋を使用してタンパク質からアセチル基を除去するサーチュインと呼ばれる酵素群としても作用する。これらの代謝機能に加えて、ＮＡＤ^＋はアデニンヌクレオチドとして出現し、自発的に、又は制御された機構によって細胞から放出され（Smyth L. M, et al, J. Biol. Chem. 2004, 279 (47), 48893-903; Billington R. A, et al, Mol Med. 2006, 12, 324-7)、従って、重要な細胞外の役割を持つことができる（Billington R. A, et al, Mol Med. 2006, 12, 324-7）。ＮＡＭＰＴの阻害剤が存在すると、ＮＡＤレベルが代謝に必要なレベルを下回って低下し、エネルギー危機が生じ、細胞死につながる。これまでのところ、臨床ＮＡＭＰＴ阻害剤候補ＦＫ－８６６、ＣＨＳ－８２８、及びＧＭＸ－１７７７が臨床試験に進みましたが、いずれも客観的な反応が得られる前に用量制限毒性に遭遇した (Holen K., et al, Invest New Drugs 2008, 26, 45-51; Hovstadius, P., et al, Clin Cancer Res 2002, 8, 2843-50; Pishvaian, M. J., et al, J Clin Oncol 2009, 27, 3581）。従って、ＮＡＭＰＴ阻害剤の標的送達にＡＤＣを使用すると、全身毒性を回避して、より広範な治療指数を達成できる可能性がある。ＮＡＭＰＴ阻害剤の構造は、好ましくは次の式、ＮＰ０１、ＮＰ０２、ＮＰ０３、ＮＰ０４、ＮＰ０５、ＮＰ０６、ＮＰ０７、ＮＰ０８、及びＮＰ０９、又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーである：

式中、

は上記と同じである；Ｘ_５は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ_１、Ｒ_１、ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＳＯ_３Ｈ、ＮＨＲ_１、ＯＣＯＲ_１、ＮＨＣＯＲ_１である。

ベンゾジアゼピン二量体及びその類縁体（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）若しくは（トマイマイシン）の二量体、インドリノベンゾジアゼピン（ＩＧＮ）の二量体、イミダゾベンゾチアジアゼピンの二量体、又はオキサゾリジノベンゾジアゼピンの二量体）は、二本鎖ＤＮＡに結合するイミン官能基１以上のを含む抗腫瘍剤、又はそれらの同等物である。ＰＢＤ及びＩＧＮ分子は天然産物であるアトラマイシン（ａｔｈｒａｍｙｃｉｎ）に基づいており、プリン－グアニン－プリン配列を優先して配列選択的にＤＮＡと相互作用する。本発明において好ましいベンゾジアゼピン二量体は、以下に例示されている：米国特許第8, 153, 627; 8,034,808; 7,834,005; 7, 741, 319; 7, 704, 924; 7,691,848; 7,678,787; 7,612,062; 7、608、615; 7,557,099; 7, 528, 128; 7, 528, 126; 7,511,032; 7, 429, 658; 7, 407, 951; 7, 326, 700; 7,312、210; 7,265、105; 7,202,239; 7,189,710; 7,173,026; 7,109,193; 7,067,511; 7,064,120; 7,056,913; 7,049,311; 7,022,699; 7,015,215; 6,979,684; 6,951,853; 6,884,799; 6,800,622; 6, 747, 144; 6,660,856; 6, 608, 192; 6,562,806; 6, 977, 254; 6,951,853; 6,909,006; 6, 344, 451; 5,880,122; 4, 935, 362; 4,764,616; 4,761,412; 4,723,007; 4,723,003; 4,683,230; 4,663,453; 4,508,647; 4, 464, 467; 4,427,587; 4,000,304; 米国特許出願公開20100203007、20100316656、20030195196。抗体－ベンゾジアゼピン二量体の共役体の構造の例を、以下のＰＢ０１、ＰＢ０２、ＰＢ０３、ＰＢ０４、ＰＢ０５、ＰＢ０６、ＰＢ０７、ＰＢ０８、ＰＢ０９、ＰＢ１０、ＰＢ１１、ＰＢ１２、ＰＢ１３、ＰＢ１４、ＰＢ１５、ＰＢ１６、ＰＢ１７、ＰＢ１８、ＰＢ１９、及びＰＢ２０に示す。

又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー。

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｚ_１、Ｚ_２、及びｎは、上記と同じ定義である。好ましくは、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、及びＹ_２は独立して、Ｏ、Ｎ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^１’、Ｒ^２’、及びＲ^３’は独立して、Ｈ；Ｆ；Ｃｌ；＝Ｏ；＝Ｓ；ＯＨ；ＳＨ；Ｃ_１－Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、アルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル（ＣＯＯＲ_５又は－ＯＣ（Ｏ）Ｒ_５）、エステル（ＯＲ_５）、アミド（ＣＯＮＲ_５）、カーバメート（ＯＣＯＮＲ_５）、アミン（ＮＨＲ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’）、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン（－Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＨ、－ＯＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_５）；又は１～２０個の天然若しくは非天然アミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐを有するポリエチレンオキシ単位であり、式中、ｐは１～約１０００の整数である；２個のＲ：Ｒ^１Ｒ^２、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^１Ｒ^３、Ｒ^１’Ｒ^２’、Ｒ^２’Ｒ^３’、又はＲ^１’Ｒ^３’は独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員の環を形成することができる。

Ｘ_３及びＹ_３は独立して、Ｎ、ＮＨ、ＣＨ、若しくはＣＲ_１であり、又はＸ_３及びＹ_３はのいずれか１つは欠いてもよい。

Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、ヘテロアリール、アルキルシクロアルキル、アシルオシル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシル、アルキルアリールアミノ、アルキルアリールチオール；又は１～６個の同一の又は異なるアミノ酸／ペプチド配列（Ａｒ）ｒ（ｒ＝１－６）である。

Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_５’、Ｒ_６、Ｒ_１２、及びＲ_１２’は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＮＨ_２、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ＯＺ_３、ＳＺ_３、Ｆ、Ｃｌ、又はＣ_１－Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、アシルオキシルアミンである。

Ｚ_３は、Ｈ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＯＳＯ_３Ｍ_１、又はＯ－グリコシド（グルコシド、ガラクトシド、マンノシド、グルクロノシド／グルクロニド、アロシド、フルクトシド等）、ＮＨ－グリコシド、Ｓ－グリコシド、若しくはＣＨ_２－グリコシドである；Ｍ_１及びＭ_２は独立して、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、ＮＨ_４、ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３である；

Ｘ_６は、ＣＨ、Ｎ、Ｐ（Ｏ）ＮＨ、Ｐ（Ｏ）ＮＲ_１、ＣＨＣ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ_３～Ｃ_８アリール、ヘテロアリール、アルキルシクロアルキル、アシルオキシ、アルキルアリール、アルキルアリールオキシ、アルキルアリールアミノ、又はＡａ（アミノ酸、好ましくはＬｙｓ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｈｉｓ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇから選択される）である。

は、上記と同じ定義である。

ＣＣ－１０６５類縁体及びデュオカルマイシン類縁体も、本発明の方法の共役に好ましく使用される。ＣＣ－１０６５類縁体及びデュオカルマイシン類縁体の例、並びにそれらの合成は、以下に記載されている。Warpehoski, et al, J. Med. Chem. 31:590 603 (1988); D. Boger et al., J. Org. Chem; 66; 6654-61、2001; 米国特許番号: 4169888、4391904、4671958、4816567、4912227、4923990、4952394、4975278、4978757、4994578、5037993、5070092、5084468 、5101038、5117006、5137877、5138059、5147786、5187186、5223409、5225539、5288514、5324483、 5332740、5332837、5334528、5403484、5427908、5475092、5495009、5530101、5545806、5547667、5569825、5571698、5573922、558071 7、5585089、5585499、5587161、5595499、5606017、5622929、5625126、5629430、5633425、5641780、5660829、 5661016、5686237、5693762、5703080、5712374、5714586、5739116、5739350、5770429、5773001、5773435、5786377 5786486、5789650 、5814318、5846545、5874299、5877296、5877397、5885793、5939598、5962216、5969108、5985908、6060608、6066742 、6075181、6103236、6114598、6130237、6132722、6143901、6150584、6162963、6172197、6180370、6194612、6214345、6262271、6281 354、6310209、6329497、6342480、6486326、6512101、6521404、6534660、6544731、6548530、6555313、6555693 、6566336、6、586、618、6593081、6630579、6756397、6759509、6762179、6884869、6897034、6946455、7049316、7087600、7091186、7115573、7129261、7214663、7223837、7304032、7329507 、7,329,760、7,388,026、7,655,660、7,655,661、7,906,545、及び8,012,978。本特許の連結体を介した抗体－ＣＣ－１０６５類縁体の共役体の構造の例は、以下のＣＣ０１、ＣＣ０２、ＣＣ０３、ＣＣ０４、ＣＣ０５、ＣＣ０６、及びＣＣ０７に示されている。

式中、
Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、及びＹ_２は、接続部位

と結合している場合、独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である；または、接続部位

と結合していない場合、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＳＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＮＨＣ（Ｏ）ＳＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、及びＣ（Ｏ）ＮＨＲ_１である。

Ｚ_３は、Ｈ、ＰＯ（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＳＯ_３Ｍ_１、ＣＨ_２ＰＯ（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＣＨ_３Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２ＮＣ（Ｏ）－、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２ＮＣ（Ｏ）－、Ｒ_１、又はグリコシドである；Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｍ_１、Ｍ_２、及びｎは、上記の定義と同じである。

アマトキシン及びその類縁体は、少なくとも１０種類の有毒化合物を含むサブグループであり、いくつかの有毒キノコ属に最初に見出され、最もよく知られているタマゴテングダケ及び他のいくつかのキノコでも本特許の共役に好ましく使用される。これら１０個のアマトキシン類、即ち、α－アマニチン、β－アマニチン、γ－アマニチン、ε－アマニチン、アマヌリン、アマヌリン酸、アマニンアミド、及びアマニン、プロアマヌリンは、３５個のアミノ酸を含むタンパク質の合成前駆体として合成され、最終的に８個のアミノ酸プロリルオリゴペプチダーゼによって開裂された剛直な二環式ペプチドである（Litten, W. 1975 Scientific American232 (3): 90-101;H. E. Hallen, et al 2007 Proc. Nat. Aca. Sci. USA 104, 19097-101; K. Baumann, et al, 1993 Biochemistry 32 (15): 4043-50; Karlson-Stiber C, Persson H. 2003, Toxicon 42 (4): 339-49; Horgen, P. A. et al. 1978 Arch. Microbio. 118 (3): 317-9）。アマトキシン類は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（Ｐｏｌ ＩＩ）を阻害し、遺伝子の転写及びタンパク質の生合成を遮断することにより、細胞を殺す（Brodner, O. G. and Wieland, T. 1976 Biochemistry, 15(16): 3480-4; Fiume, L., Curr Probl Clin Biochem, 1977, 7: 23-8; Karlson-Stiber C, Persson H. 2003, Toxicon 42(4): 339-49; Chafin, D. R. , Guo, H. & Price, D. H. 1995 J. Biol. Chem. 270 (32): 19114-19; Wieland (1983) Int. J. Pept. Protein Res. 22(3): 257-76.）。アマトキシン類は、タマゴテングダケから収集して（Yocum, R. R. 1978 Biochemistry 17(18): 3786-9; Zhang, P. et al, 2005, FEMS Microbiol. Lett.252(2), 223-8)、又は担子菌門（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅ）を用いた発酵により（Muraoka, S. and Shinozawa T., 2000 J. Biosci. Bioeng. 89(1): 73-6)、又はＡ． Ｆｉｓｓａを用いた発酵により（Guo, X. W., et al, 2006 Wei Sheng Wu Xue Bao 46(3): 373-8）、又はコレラタケモシクハヒメアジロガサモドキの培養により（WO/1990/009799, JP11137291）、調製することができる。しかし、これらの単離及び発酵の収率はかなり低い（培養物５ｍｇ／ｌ未満）。過去３０年間において、アマトキシン及びその類縁体の調製方法がいくつか報告されており（W. E. Savige, A. Fontana, Chem. Commun. 1976, 600-1; Zanotti, G., et al, Int J Pept Protein Res, 1981. 18(2): 162-8; Wieland, T., et al, Eur. J. Biochem. 1981, 117, 161-4; P. A. Bartlett, et al, Tetrahedron Lett. 1982, 23, 619-22; Zanotti, G., et al., Biochim Biophys Acta, 1986. 870(3): 454-62; Zanotti, G., et al., Int. J. Peptide Protein Res. 1987, 30, 323-9; Zanotti, G., et al., Int. J. Peptide Protein Res. 1987, 30, 450-9; Zanotti, G., et al., Int J Pept Protein Res, 1988. 32(1): 9-20; G. Zanotti, T. et al, Int. J. Peptide Protein Res. 1989, 34, 222-8; Zanotti, G., et al., Int J Pept Protein Res, 1990. 35(3): 263-70; Mullersman, J. E. and J. F. Preston, 3rd, Int J Pept Protein Res, 1991. 37(6): 544-51; Mullersman, J.E., et al, Int J Pept Protein Res, 1991. 38(5): 409-16; Zanotti, G., et al, Int J Pept Protein Res, 1992. 40(6): 551-8; Schmitt, W. et al, J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 4380-7; Anderson, M.O., et al, J. Org. Chem., 2005, 70(12): 4578-84; J. P. May, et al, J. Org. Chem. 2005, 70, 8424-30; F. Brueckner, P. Cramer, Nat. Struct. Mol. Biol. 2008, 15, 811-8; J. P. May, D. M. Perrin, Chem. Eur. J. 2008, 14, 3404-9; J. P. May, et al, Chem. Eur. J. 2008, 14, 3410-17; Q. Wang, et al, Eur. J. Org. Chem. 2002, 834-9; May, J. P. and D. M. Perrin, Biopolymers, 2007. 88(5): 714-24; May, J. P., et al., Chemistry, 2008. 14(11): 3410-7; S. De Lamo Marin, et al, Eur. J. Org. Chem. 2010, 3985-9; Pousse, G., et al., Org Lett, 2010. 12(16): 3582-5; Luo, H., et al., Chem Biol, 2014. 21(12): 1610-7; Zhao, L., et al., Chembiochem, 2015. 16(10): 1420-5）、これらのほとんどは部分合成法である。その極めて強力な効力と特有の細胞毒性メカニズムにより、アマトキシン類は共役のペイロードとして用いられている（Fiume, L., Lancet, 1969. 2 (7625): 853-4; Barbanti-Brodano, G. and L. Fiume, Nat New Biol, 1973. 243(130): 281-3; Bonetti, E., M. et al, Arch Toxicol, 1976. 35(1): p. 69-73; Davis, M. T., Preston, J. F. Science 1981, 213, 1385-1388; Preston, J.F., et al, Arch Biochem Biophys, 1981. 209(1): 63-71; H. Faulstich, et al, Biochemistry 1981, 20, 6498-504; Barak, L.S., et al., Proc Natl Acad Sci U S A, 1981. 78(5): 3034-8; Faulstich, H. and L. Fiume, Methods Enzymol, 1985. 112: 225-37; Zhelev, Z., A. et al, Toxicon, 1987. 25(9): 981-7; Khalacheva, K., et al, Eksp Med Morfol, 1990. 29(3): 26-30; U. Bermbach, H. Faulstich, Biochemistry 1990, 29, 6839-45; Mullersman, J. E. and J. F. Preston, Int. J. Peptide Protein Res. 1991, 37, 544-51; Mullersman, J.E. and J.F. Preston, Biochem Cell Biol, 1991. 69(7): 418-27; J. Anderl, H. Echner, H. Faulstich, Beilstein J. Org. Chem. 2012, 8, 2072-84; Moldenhauer, G., et al, J. Natl. Cancer Inst. 2012, 104, 622-34; A. Moshnikova, et al; Biochemistry 2013, 52, 1171-8; Zhao, L., et al., Chembiochem, 2015. 16(10): 1420-5; Zhou, B., et al., Biosens Bioelectron, 2015. 68: 189-96; WO2014/043403, US20150218220, EP 1661584）。我々はしばらくの間、アマトキシン類の共役を研究していた。本発明に適用されるアマトキシン類の構造は、好ましくは、以下のＡｍ０１、Ａｍ０２、及びＡｍ０３、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーである：

式中、
Ｘ_１及びＹ_１は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、ＣＨＮＨ、ＣＨ_２Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。

Ｒ_７、Ｒ_８、及びＲ_９は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ_１、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、又は欠いている。

Ｙ_２は、Ｏ、Ｏ_２、ＮＲ_１、ＮＨ、又は欠いている。

Ｒ_１０は、ＣＨ_２、Ｏ、ＮＨ、ＮＲ_１、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）（ＮＲ_１）、（ＮＲ_１）Ｃ（Ｏ）（ＮＲ_１）、Ｃ（Ｏ）Ｒ_１、又は欠いている。

Ｒ_１１は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＮＨＣＯＯＨ、Ｏ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－（Ａａ）_ｒＣＯＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＲ_１Ｒ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２－ＣＯＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＮＨ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐ－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１、Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、Ｒ_１－ＯＰＯ_３Ｈ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、又はＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２－ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２であり、ここで、（Ａａ）_ｒは１～８個のアミノ酸である。

ｎ及びｍ_１は独立して、１～２０である。

ｐは１～５０００である。

Ｒ_１、Ｒ_２、Ａｒ、及び

は、上記の定義と同じである。

スプライセオスタチン類及びプラジエノリド類は、スプライシングを阻害し、スプライセオソームＳＦ３ｂと相互作用する抗腫瘍化合物である。スプライセオスタチン類の例は、これらに限定されないが、Ｓｐ－０１のコア構造を有する、スプライセオスタチンＡ、ＦＲ９０１４６４、及び（２Ｓ，３Ｚ）－５－｛［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－｛（２Ｅ，４Ｅ）－５－［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）－７－（２－ヒドラジニル－２－オキソエチル）－４－ヒドロキシ－１，６－ジオキサスピロ［２．５］オクト－５－イル］－３－メチルペンタ－２，４－ジエン－１－イル－１｝－２，５－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル］アミノ｝－５－オキソペンタ－３－エン－２－イルアセテートである：

プラジエノリド類の例は、これらに限定されないが、プラジエノライドＢ、プラジエノライドＤ、及びＥ７１０７である。

抗体様タンパク質のセリン、スレオニン、又はチロシンアミノ酸にリン酸基（ＰＯ_４）を付加する酵素の作用をブロックするプロテインキナーゼ阻害剤は、タンパク質の機能を調節できる。がんにおけるプロテインキナーゼ（変異体又は過剰発現キナーゼを含む。）の過剰活性、又は他の疾患要因を克服するために細胞機能を調節による疾患の治療に用いることができる。プロテインキナーゼ阻害剤の構造は、好ましくは、以下の式ＰＫ０１～ＰＫ４０を有するアダボセルチブ、アファチニブ、アキシチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、コビメチニブ、クリゾチニブ、カボザンチニブ、ダサチニブ、エントレクチニブ、エルダフィチニブ、エルロチニブ、エルロチニブ、フォスタマチニブ、ゲフィチニブ、イブルチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レンバチニブ、ムブリチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ペガプタニブ、ポナチニブ、レバスチニブ、レゴラフェニブ、ルキソリチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、ＳＵ６６５６、トファシチニブ、バンデタニブ、ベムラフェニブ、エントレクチニブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、アベマシクリブ、ダコミチニブ、ネラチニブ、ロシレチニブ（ＣＯ－１６８６）、オシメルチニブ、ＡＺＤ３７５９、ナザルチニブ（ＥＧＦ８１６）である：

式中、Ｚ_５及びＺ_５’は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１から選択される。

ＭＥＫ阻害剤は、一部のがんで過剰に活性化することが多い分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼＭＥＫ１及び／又はＭＥＫ２を阻害する。ＭＥＫ阻害剤は、ＢＲＡＦ変異黒色腫、ＫＲＡＳ／ＢＲＡＦ変異結腸直腸がん、乳がん、及び非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）の治療に特に使用されます。ＭＥＫ阻害剤は、ＰＤ０３２５９０１、セルメチニブ（ＡＺＤ６２４４）、コビメチニブ（ＸＬ５１８）、レファメチニブ、トラメチニブ（ＧＳＫ１１２０２１２）、ピマセルチブ、ビニメチニブ（ＭＥＫ１６２）、ＡＺＤ８３３０、ＲＯ４９８７６５５、ＲＯ５１２６７６６、ＷＸ－５５４、Ｅ６２０１、ＧＤＣ－０６２３、ＰＤ－３２５９０１、及びＴＡＫ－７３３から選択される。好ましいＭＥＫ阻害剤は、以下の式を有するトラメチニブ（ＧＳＫ１１２０２１２）、コビメチニブ（ＸＬ５１８）、ビニメチニブ（ＭＥＫ１６２）、セルメチニブから選択される：

式中、Ｚ_５は、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１から選択される。

共役体のペイロードとして使用されるプロテアーゼ阻害剤は、好ましくは、以下の構造を有するカルフィルゾミブ、クリンダマイシン、レタパムリン、及びインジブリンから選択される：

免疫毒素は通常、細菌又は植物タンパク質から誘導される細胞毒性タンパク質である高分子薬物であり、例えば、ジフテリア毒素（ＤＴ）、コレラ毒素（ＣＴ）、トリコサンチン（ＴＣＳ）、ジアンチン（Ｄｉａｎｔｈｉｎ）、シュードモナス外毒素Ａ（ＥＴＡ）、発赤毒素、ジフテリア毒素、ＡＢ毒素、ＩＩＩ型外毒素等が挙げられる。また、活性化するためにタンパク質加水分解処理を必要とする、毒性が高い細菌性孔形成プロ毒素でもよい。このプロ毒素の例としては、プロエロリジン及びその遺伝的改変体であるトプサリシンが挙げられる。トプサリシンは、前立腺に存在する酵素によって選択的に活性化されるように設計された修飾された組換えタンパク質であり、隣接する組織及び神経に損傷を与えることなく、局所的な細胞死や組織破壊を引き起こす。本発明における免疫毒素は、好ましくは、本発明における方法によって、遊離のアミノ基、チオール基、又はカルボキシル基を有するアミノ酸、更に好ましくは、Ｎ－末端アミノ酸と共役する。

更に、細胞受容体アゴニスト、細胞刺激分子、又は細胞内シグナル伝達分子は、本発明の方法によって、薬物Ｄとして共役することができる。

細胞結合リガンド及び受容体アゴニストは、以下から選択される：葉酸誘導体；グルタミン酸尿素誘導体；ソマトスタチン及びその類縁体（オクトレオチド（サンドスタチン）及びランレオチド（ソマチリン）からからなる群から選択される）；芳香族スルホンアミド；下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド（ＰＡＣＡＰ）（ＰＡＣ１）；血管作動性腸管ペプチド（ＶＩＰ／ＰＡＣＡＰ）（ＶＰＡＣ１、ＶＰＡＣ２）；メラノサイト刺激ホルモン（α－ＭＳＨ）；コレシストキニン（ＣＣＫ）／ガストリン受容体アゴニスト、ボンベシン（Ｐｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｓｎ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｍｅｔ－ＮＨ_２からなる群から選択）／ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）；ニューロテンシン受容体リガンド（ＮＴＲ１、ＮＴＲ２、ＮＴＲ３）、サブスタンスＰ（ＮＫ１受容体）リガンド；ニューロペプチドＹ（Ｙ１～Ｙ６）；ＲＧＤ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ）、ＮＧＲ（Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ）、二量体及び多量体環状ＲＧＤペプチド（ｃＲＧＤｆＶから選択）、ＴＡＡＳＧＶＲＳＭＨ、及びＬＴＬＲＷＶＧＬＭＳ（コンドロイチン硫酸プロテオグリカンＮＧ２受容体リガンド）、及びＦ３ペプチドを含むホーミングペプチド；細胞膜透過ペプチド（ＣＰＰ）；ペプチドホルモン、テストステロン産生と同様に、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）を標的として働く、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト及びアンタゴニスト、並びに性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストであって、ブセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ゴナドレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ゴセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－）Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＡｚＧｌｙ－ＮＨ_２）、ヒストレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｈｉｓ（Ｎ－ベンジル）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、リュープロリド（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ナファレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－２Ｎａｌ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、トリプトレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ナファレリン、デスロレリン、アバレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｔｙｒ－Ｄ－Ａｓｎ－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－ＤＡｌａ－ＮＨ_２）、セトロレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｃｉｔ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、デガレリクス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－４－アミノＰｈｅ（Ｌ－ヒドロオロチル）－Ｄ－４－アミノＰｈｅ（カルバモイル）－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、及びガニレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｌｅｕ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）からなる群から選択される；トール様受容体（ＴＬＲ）リガンド、Ｃ型レクチン、及びＮｏｄｌｉｋｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＮＬＲ）リガンドから選択されるパターン認識受容体（ＰＲＲ）；カルシトニン受容体アゴニスト；インテグリン受容体及びその受容体サブタイプ（α_Vβ₁、α_Vβ₃、α_Vβ₅、α_Vβ₆、α₆β₄、α₇β₁、α_Lβ₂、α_IIbβ₃からなる群から選択される）アゴニスト（ＧＲＧＤＳＰＫ、シクロ（ＲＧＤｆＶ）（Ｌ１）及びその誘導体［シクロ（－Ｎ（Ｍｅ）Ｒ－ＧＤｆＶ）、シクロ（Ｒ－Ｓａｒ－ＤｆＶ）、シクロ（ＲＧ－Ｎ（Ｍｅ）Ｄ－ｆＶ）、シクロ（ＲＧＤ－Ｎ（Ｍｅ）ｆ－Ｖ）、シクロ（ＲＧＤｆ－Ｎ（Ｍｅ）Ｖ－）（シレンギチド）］からなる群から選択される；アンチカリン（リポカリンの誘導体）；アドネクチン（１０番目のＦＮ３（フィブロネクチン））；設計されたアンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎｓ）；アビマー；ＥＧＦ受容体又はＶＥＧＦ受容体アゴニスト；

細胞結合分子／リガンド又は細胞受容体アゴニストは、以下から選択される：ＬＢ０１（葉酸）、ＬＢ０２（ＰＭＳＡリガンド）、ＬＢ０３（ＰＭＳＡリガンド）、ＬＢ０４（ＰＭＳＡリガンド）、ＬＢ０５（ソマトスタチン）、ＬＢ０６（ソマトスタチン）、ＬＢ０７（オクトレオチド、ソマトスタチン類縁体）、ＬＢ０８（ラマレオチド、ソマトスタチン類縁体）、ＬＢ０９（バプレオチド（サンバー）、ソマトスタチン類縁体）、ＬＢ１０（ＣＡＩＸリガンド）、ＬＢ１１（ＣＡＩＸリガンド）、ＬＢ１２（ガストリン放出ペプチド受容体（ＧＲＰｒ）、ＭＢＡ）、ＬＢ１３（黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ－ＲＨ）リガンド及びＧｎＲＨ）、ＬＢ１４（黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ－ＲＨ）及びＧｎＲＨリガンド）、ＬＢ１５（ＧｎＲＨアンタゴニスト、アバレリックス）、ＬＢ１６（コバラミン、ビタミンＢ１２類縁体）、ＬＢ１７（コバラミン、ビタミンＢ１２類縁体）、ＬＢ１８（α_ｖβ_３インテグリン受容体のための、環状ＲＧＤペンタペプチド）、ＬＢ１９（ＶＥＧＦ受容体のためのヘテロ二価ペプチドリガンド）、ＬＢ２０（ニューロメジンＢ）、ＬＢ２１（Ｇタンパク質共役受容体のためのボンベシン）、ＬＢ２２（トール様受容体のためのＴＬＲ_２）、ＬＢ２３（アンドロゲン受容体のための）、ＬＢ２４（α_ｖインテグリン受容体のためのシレンギチド（Ｃｉｌｅｎｇｉｔｉｄｅ）／シクロ（－ＲＧＤｆＶ－））、ＬＢ２３（フルドロコルチゾン）、ＬＢ２５（リファブチン類縁体）、ＬＢ２６（リファブチン類縁体）、ＬＢ２７（リファブチン類縁体）、ＬＢ２８（フルドロコルチゾン）、ＬＢ２９（デキサメタゾン）、ＬＢ３０（プロピオン酸フルチカゾン）、ＬＢ３１（ジプロピオン酸ベクロメタゾン）、ＬＢ３２（トリアムシノロンアセトニド）、ＬＢ３３（プレドニゾン）、ＬＢ３４（プレドニゾロン）、ＬＢ３５（メチルプレドニゾロン）、ＬＢ３６（ベタメタゾン）、ＬＢ３７（イリノテカン類縁体）、ＬＢ３８（クリゾチニブ類縁体）、ＬＢ３９（ボルテゾミブ類縁体）、ＬＢ４０（カルフィルゾミブ類縁体）、ＬＢ４１（カルフィルゾミブ類縁体）、ＬＢ４２（リュープロリド類縁体）、ＬＢ４３（トリプトレリン類縁体）、ＬＢ４４（クリンダマイシン）、ＬＢ４５（リラグルチド類縁体）、ＬＢ４６（セマグルチド類縁体）、ＬＢ４７（レタパムリン類縁体）、ＬＢ４８（インジブリン類縁体）、ＬＢ４９（ビンブラスチン類縁体）、ＬＢ５０（リキシセナチド類縁体）、ＬＢ５１（オシメルチニブ類縁体）、ＬＢ５２（ヌクレオシド類縁体）、ＬＢ５３（エルロチニブ類縁体）、又はＬＢ５４（ラパチニブ類縁体）；

式中、Ｘ_４及びＹ_１は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_１、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。

別の実施形態では、１又は２以上のＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、及びＰＩＷＩ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）を薬物として、本発明の方法により共役される：

式中、

は、本特許の側鎖連結体との結合部位である。

は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、又はｐｉＲＮＡの一本鎖又は二本鎖である；Ｘ_１及びＹは独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_１、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。

Ｌ_１及びＬ_２は、同一の又は異なる、それぞれ独立して、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＮＨＮＨ、Ｎ（Ｒ_３）、Ｎ（Ｒ_３）Ｎ（Ｒ_３’）、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＯＲ_３、（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）Ｏ）ｐＲ３_ｐＯＲ_３、Ｎ［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＲ_３］［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐ’Ｒ_３’、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３、又はＣＨ_２ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３のポリエチレンオキシ単位（式中、ｐおよびｐ’は独立して、０～約１０００から選択される整数である）、又はそれらの組み合わせ；Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；から選択され、ここで、Ｒ_３及びＲ_３’は独立して、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルのアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数１～８個のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は定義中に記載されている１～８個の天然又は非天然アミノ酸；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１０００までの整数である）、又はそれらの組み合わせである。

Ｌ_１又はＬ_２は、自壊性又は非自壊性成分、ペプチジル単位、ヒドラゾン結合、ジスルフィド、エステル、オキシム、アミド、又はチオエーテル結合を含んでもよく、前記自壊性ユニットは、これらに限定されないが、２－アミノイミダゾール－５－メタノール誘導体、複素環式ＰＡＢ類縁体、β－グルクロニド、及びオルト又はパラアミノベンジルアセタールを含む、パラアミオベンジルカルバモイル（ＰＡＢ）基と電子的に類似する芳香族化合物を含む。

好ましくは、前記自壊性連結体成分は、以下の構造のいずれかを有する：

式中、（^＊）で標識された原子は、追加のスペーサー、放出可能な連結体単位、細胞傷害性薬剤、及び／又は細胞結合分子（ＣＢＡ）との結合点である；Ｘ^１、Ｙ^１、Ｚ^２、及びＺ^３は独立して、ＮＨ、Ｏ又はＳである；Ｚ^１は独立して、Ｈ、ＮＨ、Ｏ、又はＳである；ｖは０又は１である；Ｕ^１は独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ_５、ＳＲ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’、Ｎ＝ＮＲ_５、Ｎ＝Ｒ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’、ＮＯ_２、ＳＯＲ_５Ｒ_５’、ＳＯ_２Ｒ_５、ＳＯ_３Ｒ_５、ＯＳＯ_３Ｒ_５、ＰＲ_５Ｒ_５’、ＰＯＲ_５Ｒ_５’、ＰＯ_２Ｒ_５Ｒ_５’、ＯＰＯ（ＯＲ_５）（ＯＲ_５’）、又はＯＣＨ_２ＰＯ（ＯＲ_５）（ＯＲ_５’）であり、式中、Ｒ_５及びＲ_５’は上記の通りである；好ましくはＲ_５及びＲ_５’は独立して、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアラルキル、アルキルカルボニル；又は薬用陽イオン塩から選択される。

前記非自壊性連結体成分は、以下の構造のいずれかを有する：

式中、（^＊）で標識された原子は、追加スペーサーＲ_１、放出可能連結体単位、細胞毒性剤、及び／又は結合分子との結合点である；Ｘ^１、Ｙ^１、Ｕ^１、Ｒ_５、Ｒ_５’は、上記で定義されたとおりである；ｒは０～１００である；ｍ及びｎは独立して０～６である；

より好ましくは、Ｌ_１又はＬ_２は、６－マレイミドカプロイル（「ＭＣ」）、マレイミドプロパノイル（「ＭＰ」）、バリン－シトルリン（「ｖａｌ－ｃｉｔ」又は「ｖｃ」）、アラニン－フェニルアラニン（「ａｌａ－ｐｈｅ」又は「ａｆ」）、ｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（「ＰＡＢ」）、４－チオペンタン酸（「ＳＰＰ」）、４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１ カルボキシレート（「ＭＣＣ」）、（４－アセチル）アミノ安息香酸（「ＳＩＡＢ」）、４－チオ酪酸（ＳＰＤＢ）、４－チオ－２－ヒドロキシスルホニル酪酸（２－スルホ－ＳＰＤＢ）、又は１～８個の天然又は非天然アミノ酸単位を有する天然又は非天然ペプチドである１又は複数の連結体成分から構成されてもよい。

更に好ましくは、Ｌ_１又はＬ_２は放出可能連結体でもよい。放出可能連結体の語は、ｐＨ不安定性、酸不安定性、塩基不安定性、酸化不安定性、代謝不安定性、生物化学的不安定性、又は酵素不安定性等の、生理的条件で崩壊することができる少なくとも１つの結合を含む連結体を示す。そのような結合の破壊を引き起こす生理的条件は、生物学的又は代謝的プロセスを必ずしも含む必要はなく、その代わりとして、加水分解又は置換反応、例えば、サイトゾルｐＨよりも低いｐＨを有するエンドソーム、及び／又は悪性細胞内のミリモル範囲の豊富なグルタチオン等の細胞内チオールとのジスルフィド結合交換反応のような、標準的な化学反応を含んでもよい。

前記放出可能連結体（Ｌ、Ｌ_１又はＬ_２）の例には、以下が含まれるが、これらに限定されない：
－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（Ａａ）_ｒ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（Ａａ）_ｒ－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（ＣＲ_７＝ＣＲ_８）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（Ａａ）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｔ（ＮＲ_１１ＣＯ）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ－（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フェニル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－チエニル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－イミダゾリル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－モルホリノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－ピペラジノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－Ｎ－メチルピペラジン－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフェニル－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフリル－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チエニル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－イミダゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－モルホリノ－（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－ピペラジノ－（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－Ｎ－メチルピペラジノ－（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（Ａａ）_ｒ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７＝Ｒ_８）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（Ａａ）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｔ（ＮＲ_１１ＣＯ）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フェニル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－チエニル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－イミダゾリル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－モルホリノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－ピペラジノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－Ｎ－メチルピペラジン－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフェニル－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフリル－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チエニル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－イミダゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－モルホリノ－（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－ピペラジノ－（Ａａ）_ｔＧ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－Ｎ－メチルピペラジノ－（Ａａ）_ｔ。

式中、ｍ、Ａａ、ｍ、ｎ、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_５の定義は上記の通りである；ｔ及びｒは独立して０～１００である；Ｒ_６、Ｒ_７、及びＲ_８は独立して、Ｈ；ハロゲン化物；Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、エーテル、エステル、アミン、若しくはアミドから選択され、１以上のハロゲン化物、ＣＮ、ＮＲ_１Ｒ_２、ＣＦ_３、ＯＲ_１、アリール、複素環、Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、ＳＯ_２Ｒ_１、－ＣＯ_２Ｈ、－ＳＯ_３Ｈ、－ＯＲ_１、－ＣＯ_２Ｒ_１、－ＣＯＮＲ_１、－ＰＯ_２Ｒ_１Ｒ_１２、－ＰＯ_３Ｈ、又はＰ（Ｏ）Ｒ_１Ｒ_２Ｒ_３’で任意に置換されていてもよい；ＫはＮＲ_１、－ＳＳ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ＝ＮＨ－Ｏ－、－Ｃ＝Ｎ－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－ＮＨ－、Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、Ｂ、又はＣ_３～Ｃ_６複素芳香環である。

前記連結体Ｌ_１及びＬ_２の構造には、以下の構造又はそれらの組み合わせとすることができる：

式中、Ｘ_２、Ｘ_３、Ｘ_４、Ｘ_５、又はＸ_６は独立して、ＮＨ、ＮＨＮＨ；Ｎ（Ｒ_１２）；Ｎ（Ｒ_１２）Ｎ（Ｒ_１２’）；Ｏ；Ｓ；Ｃ_１～Ｃ_６アルキル；Ｃ_２～Ｃ_６ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；ＣＨ_２ＯＲ_１２、ＣＨ_２ＳＲ_１２、ＣＨ_２ＮＨＲ_１２、又は１～８個のアミノ酸である；式中、Ｒ_１２及びＲ_１２’は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数１～８個のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１００までの整数である）；又はそれらの組み合わせである。

好ましくは、Ｌ_１及びＬ_２は独立して、以下から選択される：

式中、

は薬物又は連結体Ｌ_１若しくはＬ_２と結合する部位である；「＃」は、抗体のＳ（チオール）、Ｏ（フェノール）、ＮＨ（アミノ）、ＣＨＯ（アルデヒド）、Ｃ（＝Ｏ）（ケトン）、Ｃ（Ｏ）（ＮＨ）（アミド）、Ｃ（Ｏ）（ＯＨ）（カルボキシレート）と結合する部位である；ＡａはＬ－又はＤ－天然又は非天然アミノ酸である。

Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＳＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４ＯＨ、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である。

ｒは０～１２である；ｒが０でない場合、（Ａａ）ｒはアミノ酸又は同一若しくは異なる配列のペプチド単位である；

ｍ_１＝１－１８；ｍ_２＝１－１００；ｍ_３＝１－８；ｍ_４＝０－８；ｍ_５＝１－８である。

Ｙ^７は、ＮＨ、ＯＣＨ_２ＮＨ、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、ＳＯ_２、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２Ｎ、ＮＨＣ_６Ｈ_４ＮＨ、ＣＨ_２である；

Ｙ^８は、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）、ＮＨ（ＳＯ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、又はＣ（Ｏ）ＮＨである；

Ｒ_９は、Ｈ、（Ｏ＝）ＣＲ_１、（Ｏ＝）ＣＮＨＲ_１、Ｒ_１ＣＯＯＨ、Ｒ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＨ）ｍ_２Ｈ、Ｒ_１（Ａａ）ｒ、又はＲ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＣＨ_３）_ｍ２Ｈであり、ここで、Ｒ_１は、上記で定義されたものである。

Ｌｖ_１’は以下から選択される：

式中、

は薬物又は連結体Ｌ_１若しくはＬ_２と結合する部位である；「＃」は、抗体のＳ（チオール）、Ｏ（フェノール）、ＮＨ（アミノ）、ＣＨＯ（アルデヒド）、Ｃ（＝Ｏ）（ケトン）、Ｃ（Ｏ）（ＮＨ）（アミド）、Ｃ（Ｏ）（ＯＨ）（カルボキシレート）と結合する部位である；式中、Ｒ_１、Ｘ_１’、及びＸ_２’は上記の通りである；ＸはＯ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ_２である；２つの原子の中央にある結合

は、当該２つの原子のいずれかと結合できることを意味する；

より好ましくは、Ｌ_１及びＬ_２は独立して、以下から選択される：

式中、
ＡａはＬ－又はＤ－天然又は非天然アミノ酸である；
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＳＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４ＯＨ、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である；
ｒは０～１２である；ｒが０でない場合、（Ａａ）ｒはアミノ酸又は同一若しくは異なる配列のペプチド単位である；
ｍ_１＝１－１８；ｍ_２＝１－１００；ｍ_３＝１－８；ｍ_４＝０－８；ｍ_５＝１－８である；
Ｙ^７は、ＮＨ、ＯＣＨ_２ＮＨ、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、ＳＯ_２、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２Ｎ、ＮＨＣ_６Ｈ_４ＮＨ、ＣＨ_２である；
Ｙ^８は、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）、ＮＨ（ＳＯ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、又はＣ（Ｏ）ＮＨである；
Ｒ_９は、Ｈ、（Ｏ＝）ＣＲ_１、（Ｏ＝）ＣＮＨＲ_１、Ｒ_１ＣＯＯＨ、Ｒ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＨ）ｍ_２Ｈ、Ｒ_１（Ａａ）ｒ、又はＲ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＣＨ_３）_ｍ２Ｈであり、ここで、Ｒ_１は、上記で定義されたものである。

特定の実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の共役体は、それぞれ以下の式（ＩＶ）、（Ｖ）および（ＶＩ）を有する化合物と抗体との共役反応を介して調製される：

Ｌｖ_１及びＬｖ_２は反応性基であり、独立して以下から選択される：

式中、Ｘ_１’及び_Ｘ２’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｆ、ＯＭｓ、ＯＣ_６Ｈ_４（ＮＯ_２）、ＯＣ_６Ｈ_３（ＮＯ_２）_２、ＯＣ_６Ｆ_５、ＯＣ_６ＨＦ_４、又はＬｖ_３である；Ｘ_２は、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、またはＣＨ_２である；Ｒ_３及びＲ_５は独立してＨ、Ｒ_１、芳香族、複素芳香族、又は芳香族基であり、１又はいくつかのＨ原子は独立して、－Ｒ_１、－ハロゲン、－ＯＲ_１、－ＳＲ_１、－ＮＲ_１Ｒ_２、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_１、又は－ＣＯＯＲ_１によって置換される；Ｌｖ_３およびＬｖ_３’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロフェノキシル、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）、フェノキシル、ベンゼンチオール、ジニトロフェノキシル、ペンタフルオロフェノキシル、テトラフルオロフェノキシル、ジフルオロフェノキシル、モノフルオロフェノキシル、ペンタクロロフェノキシル、トリフレート、イミダゾール、ジクロロフェノキシル、テトラクロロフェノキシル、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール、トシレート、メシル酸塩、２－エチル－５－フェニルイソオキサゾリウム－３’－スルホネート、自身又は他の無水物とで形成される無水物、無水アセチル、無水ホルミル、又はペプチドカップリング反応若しくはミツノブ反応のための縮合試薬と共に生成される中間分子から選択される脱離基である。

式（Ｖ）及び式（ＶＩ）において、

は、以下から選択することができる。

式中、Ｌｖ_３、Ｌｖ_３’、Ｘ_１’、及びＸ_２’は上記の通りである。２つの原子の中央にある結合

は、当該２つの原子のいずれかと結合できることを意味する。

いくつかの実施形態では、本特許発明の方法の元で、以下に示す式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）を有する連結体を、抗体又は抗体様タンパク質中の選択的に還元されたチオール（通常は、抗体又は抗体様タンパク質がＩｇＧ抗体である場合、重鎖と軽鎖との間のチオール）と最初に反応させ、次いで、細胞毒性剤又は細胞毒性剤／連結体と縮合させて、上記に示す式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成することができる：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｅ_１、Ｌｖ_１、及びＬｖ_２は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、及び（ＶＩ）の上記と同じ定義である。

Ｌｖ_５及びＬｖ_６は独立して、以下から選択される。

式中、Ｘ１’は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｓ（トシレート）、ＯＴｆ（トリフレート）、ＯＭｓ（メシレート）、ＯＣ_６Ｈ_４（ＮＯ_２）、ＯＣ_６Ｈ_３（ＮＯ_２）_２、ＯＣ_６Ｆ_５、ＯＣ_６ＨＦ_４、又はＬｖ_３である；Ｘ_２’は、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、又はＣＨ_２である；Ｒ_３及びＲ_５は独立して、Ｈ、Ｒ_１、芳香族、複素芳香族、又は１若しくはいくつかのＨ原子が独立して、－Ｒ_１、－ハロゲン、－ＯＲ_１、－ＳＲ_１、－ＮＲ_１Ｒ_２、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_１、又は－ＣＯＯＲ_１によって置換された芳香族基である；Ｌｖ_３及びＬｖ_３’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロフェノキシル；Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）；フェノキシル；ベンゼンチオール、ジニトロフェノキシル；ペンタフルオロフェノキシル；テトラフルオロフェノキシル；ジフルオロフェノキシル；モノフルオロフェノキシル；ペンタクロロフェノキシル；トリフレート；イミダゾール；ジクロロフェノキシル；テトラクロロフェノキシル；１－ヒドロキシベンゾトリアゾール；トシレート；メシル酸塩；２－エチル－５－フェニルイソオキサゾリウム－３’－スルホネート、自身又は無水アセチル及び無水ホルミルから選択される他の無水物とで形成される無水物、又はペプチドカップリング反応若しくはミツノブ反応のための縮合試薬と共に生成される中間分子から選択される脱離基である；ここで、反応がＬｖ_１又はＬｖ_２と抗体、特に抗体中のチオールとの間の反応よりも少なくとも１倍速いか遅い限り、官能基Ｌｖ_５及び／又はＬｖ_６は、細胞毒性剤中のチオールとも反応することができる。

いくつかの実施形態では、本特許の方法の元で、抗体様タンパク質に特定のチオールを導入し、通常は、抗体又は抗体様タンパク質がＩｇＧ抗体である場合、重鎖と軽鎖との間にチオールを生成し、次いで、共役方法において、チオールを以下の式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の連結体と同時に又は連続的に反応させて、以下の式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体／連結体複合体分子を形成し、続いて、薬物Ｄ_１又はＤ_２と独立して反応させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成する：

式中、Ｌｖ_５、Ｌｖ_６、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｅ_１、Ｌｖ_１’、Ｌｖ_２’、ｍＡｂ、ｎ、及びｎ’は、上記の定義と同じである。

いくつかの実施形態では、本発明の方法の下で、上記の式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の連結体は、最初に細胞毒性剤と反応して、式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）の細胞毒性剤／連結体複合体分子を形成し、続いて抗体又は抗体様タンパク質中の還元チオールと独立に反応させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成することができる。式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の細胞毒性剤との第１段階の縮合反応は、別個のポット内で行うことができ、得られた式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）の細胞毒性剤／連結体複合体は任意に、抗体様タンパク質中の還元されたチオールと結合させる前に、クロマトグラフィー、抽出、又は沈殿によって精製することができる。抗体様タンパク質におけるジスルフィド結合の特異的還元の第１工程及び式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）との結合反応は、中間体を分離せずに同じポット内で行うことが好ましい。

細胞毒性剤に対するＬｖ_５及び／又はＬｖ_６との間の反応と、抗体様タンパク質中のチオールに対するＬｖ_１及び／又はＬｖ_２との間の反応を区別するために、式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、又は（Ｘ）の連結体が関与する反応は、同一の又は異なる反応ポッドで異なる条件で行うことができる。例えば、アミノ基を有する医薬品は、ＥＤＣ、ＴＢＴＵ、ＢｒｏＰ等の縮合試薬の存在下、連結体中のカルボキシル基と縮合することにより、アミド結合を有する、修飾された式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）の薬剤／連結体複合体を得ることができる。この縮合反応は、アミノ基を有する薬剤と反応して、式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、又は（Ｖ）の薬剤／連結体複合体を提供することができる、式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の連結体の一端にあるカルボキシル基を、ｎ－ヒドロキシイミド（ＮＨＳ）、ペンタフルオロフェニル、ジニトロフェニルエステル、又はカルボン酸塩化物等により活性化させ、その後、同時に又は逐次に、本発明の方法により、抗体様タンパク質のチオールと共役させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成することによって、生理的緩衝液中で進行させることができる。別の実施形態では、一端にチオール反応性基（例えば、マレイミド、ビニルスルホニル、ハロアセチル、アクリル、置換プロピオリック（ｐｒｏｐｉｏｌｉｃ））を有し、他端には、薬物と反応可能な基（例えば、ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）、ペンタフルオロフェニル、ジニトロフェニルエステル、アミノ、アルキルオキシアミノ、又はクリックケミストリーが可能な基（例えば、アジド、アルキン、ジベンゾシクロオクチン、ＢＣＮ（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イルメタノール））の両者を有する式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の連結体は、ｐＨ４．５～７．５、２℃～４０℃（好ましくは２℃～８℃）の緩衝溶液において、０～３０％の水と混合することができる（混溶性）有機溶媒を加えるか、又は加えずに、本願の方法を適用して、抗体様タンパク質（好ましくは、抗体）のチオールとの共役を進め、それぞれ独立して、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体共役体を得ることができる。次いで、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体－連結体共役体中の反応性基と反応することができる薬物を反応溶液に順次又は同時に加え、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を得ることができる。任意に、薬物との縮合前に、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体－連結体共役体を精製することができ、第２工程の縮合条件は、例えば、ｐＨを６．５～８．５に調整する、及び／又は、温度を２０～４５℃に調整する等により、変更することができる。

いくつかの実施形態では、共役方法中、薬物と共役する前に、抗体様タンパク質は、アミンからスルフヒドリル（スクシンイミジル（ＮＨＳ）エステル／マレイミド、ＮＨＳエステル／ピリジルジチオール、ＮＨＳエステル／ハロアセチル）への連結体、ジアジリン（ＳＤＡ）からスルフヒドリルへの連結体、アジドからスルフヒドリルへの連結体、アルキンからスルフヒドリルへの連結体、スルフヒドリルから炭水化物（マレイミド／ヒドラジド、ピリジルジチオール／ヒドラジド、ハロアセチル／ヒドラジド）への連結体、ヒドロキシルからスルフヒドリル（イソシアネート／マレイミド）への連結体、、スルフヒドリルからＤＮＡ（マレイミド/ソラレン、ピリジルジチオール／ソラレン、ハロアセチル／ソラレン）への連結体、、スルフヒドリルからカルボキシル（カルボジイミド）への連結体のような、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）のヘテロ二官能性架橋連結体との結合により修飾され得る。

式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の修飾された抗体－連結体複合体と反応して最終共役体を与える薬物／細胞毒性剤の反応基は、それに応じて異なる方法によることができる。例えば、ジスルフィド結合を介して連結された共役体は、本発明による抗体様タンパク質の還元及び共役により、２℃～８℃、ｐＨ４．５～６．０で、式（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、又は（ＶＩＩＩ）の連結体を抗体に共役する最初の工程と、それに続いて、ｐＨ６．５～８．０、２０℃～４０℃で、遊離チオール基を含む薬物と修飾された抗体に結合した連結体内のジスルフィド結合（例えばピリジルジチオ部分）との間のジスルフィド交換により達成される。共役のための遊離チオールを含む薬物を添加する前に、過剰な還元剤（ＴＣＥＰ又はトリ（３－ヒドロキシルプロピル）ホスフィン等）を反応容器から除去するか、あるいはアジド化合物（例えば、４－（アジドメチル）安息香酸）を添加してクエンチすることが好ましい。チオエーテルを介して連結された共役体の合成は、２℃～８℃、ｐＨ４．５～６．０で、マレイミド、ハロアセチル、エチルスルホニル、又は置換プロピオール基の両方のチオール反応性末端を含む連結体と、本特許出願の方法によって還元された抗体中のチオールとの最初の反応により、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体－連結体複合体を生成し、続いてｐＨ６．５～８．０、２０℃～４０℃で、チオールを含む薬物と反応させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を得ることにより達成される。チオエーテル結合共役体の２段階反応のために、同じｐＨ及び／又は温度条件が選択される場合、反応性の二重末端チオールを含む連結体は、４倍以上の当量で共役に使用される。ジスルフィド又はチオール－エーテル結合共役体の好ましい合成方法は、式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）のジスルフィド又はチオール－エーテル結合を有する薬物－連結体複合体の最初の化学合成と、続いて、本発明の方法に従ってタンパク質（抗体）中のチオールと反応させることによるものであることに留意されたい。酸に不安定なヒドラゾン結合を有する共役体の合成は、当該技術分野で公知の方法により、カルボニル基と連結体中のヒドラジド部分とを反応させることによって達成することができる（例えば、P. Hamann et al., Cancer Res. 53, 3336-34, 1993; B. Laguzza et al., J. Med. Chem., 32; 548-55, 1959; P. Trail et al., Cancer Res., 57; 100-5, 1997）。トリアゾール結合を有する共役体の合成は、クリックケミストリー（Ｈｕｉｓｇｅｎ付加環化）を介して、薬物の１－イン基と連結体内のアジド部分とを反応させることによって達成できる（Lutz, J-F. et al、2008、Adv. Drug Del Rev. 60, 958-70; Sletten, E.M. et al 2011, Acc Chem. Research 44, 666-76）。オキシムを介して結合した共役体の合成は、ケトン又はアルデヒドを含む修飾抗体様タンパク質とオキシアミン基を含む薬物との反応によって達成される。ヒドロキシル基又はチオール基を有する薬物は、弱塩基の存在下、例えば、ｐＨ８．０～９．５で、ハロゲン、特にカルボン酸のαハロゲン化物を有する式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の修飾連結体と反応し、式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）のエーテル又はチオールエーテル結合を有する修飾薬物／連結体複合体を得ることができる。ヒドロキシル基を含む薬物は、ＥＤＣ又はＤＣＣ等の脱水剤の存在下で、カルボキシル基を有する式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の連結体と縮合してエステル結合を形成し、次いで、薬物／連結体複合体は、本発明の方法の下で、抗体との結合を受ける。アミノ基を含む薬剤は、式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体－連結体上の、ＮＨＳ、イミダゾール、ニトロフェノキシルのカルボキシルエステル；Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）；メチルスルホニルフェノキシル；ジニトロフェノキシル；ペンタフルオロフェノキシル；テトラフルオロフェノキシル；ジフルオロフェノキシル；モノフルオロフェノキシル；ペンタクロロフェノキシル；トリフレート；イミダゾール；ジクロロフェノキシル；テトラクロロフェノキシル；１－ヒドロキシベンゾトリアゾール；トシレート；メシレート；２－エチル－５－フェニルイソオキサゾリウム－３’－スルホネートと縮合して、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）のアミド結合を介した共役体を得ることができる。抗体－薬物共役の多くの通常の化学的及び生化学的プロセスが当技術分野で知られている（例えば、 Mada， Y. and Mendelsohn， BA，Expert Opin Biol Ther. 2021, 21(7): 963-975; Puthenveetil, S., Methods Mol Biol. 2020、2078: 99-112; van Delft， F.、およびLambert， JM 編「 Chemical Linkers in Antibody-Drug Conjugates (ADCs)」, Royal Soc. Chem. Pub., 22. 12月. 2021、ISBN 978-1-83916-263-3, doi:10.1039/9781839165153; Tumey， LN編、「Antibody-Drug Conjugates， Methods and Protocols」、Springer Pub.、2020、ISBN: 978-1-4939 -9929-3; Khongorzul， P. et al， Mol Cancer Res. 2020，18(1):3-19; 及びこれらの書籍や論文に組み込まれている多くの参考文献）。

いくつかの実施形態では、ＢＣＭＡ抗体共役体は、好ましくは、以下の３つの重要な工程を含む均一共役方法を介して調製される：
（ａ）抗体内の鎖間ジスルフィド結合を選択的に還元し、チオール基を産生するために、有効量の亜鉛カチオン－アミノキレート／錯体（Ｚｎ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^２＋）及び還元剤（例えば、トリス（２－カルボキシエチル））の存在下、緩衝系（例えば、ＰＢＳ、Ｍｅｓ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓプロパン、Ｐｉｐｅｓ、Ａｃｅｓ、Ｍｏｐｓｏ、Ｂｅｓ、Ｍｏｐｓ、Ｈｅｐｅｓ、Ｔｅｓ、Ｐｉｐｐｓ、Ｄｉｐｓｏ、Ｔａｐｓｏ、Ｈｅｐｐｓｏ、Ｔｒｉｓ－ｕｐ、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、トリシン、Ｈｅｐｐｓ、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ、ビシン、Ｔａｐｓ、Ｈｅｐｅｅ、アセテート、ヒスチジン、クエン酸塩、ＭＥＳ、又はホウ酸塩）で抗体をインキュベートすること；
（ｂ）工程（ａ）で生じたチオール基と反応させるために、チオール反応性基（例えば、マレイミド末端を含む薬物）を有する、式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）若しくは（ＩＸ）の連結体、又は（ＩＶ）、（Ｖ）若しくは（ＶＩ）のペイロード／連結体複合体／アセンブリを有効量添加すること；並びに
（ｃ）未反応のチオール基を再酸化するために、有効量の酸化剤（例えば、デヒドロアスコルビン酸）を加え、次いで得られた共役体を精製すること；
（ｄ）工程（ｃ）は、任意に、チオール反応性基（例えば、マレイミド）を含む過剰な共役連結体又は連結体／ペイロード複合体をクエンチするために、有効量のシスチンを添加し、同時に又は逐次に、未反応の還元剤（例えば、ＴＣＥＰ又はトリス（ヒドロキシプロピル）ホスフィン）をクエンチするために、アジド化合物（例えば、４－（アジドメチル）安息香酸）又はジスルフィド化合物（例えば、シスチン）を添加することに置き換えることができる。未反応の還元剤（例えば、ＴＣＥＰ）をクエンチするためのシスチンの添加は、チオール反応性基（例えば、マレイミド）を含む過剰な共役連結体又は連結体／ペイロード複合体を同時にクエンチすることができるシステインを形成することができる。

式Ｚｎ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^２＋中のＲ_１、Ｒ_２及びＲ_３はそれぞれ独立に、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、又はヘテロアリールから選択される。ｍ１は、１、２、３、４、５、６、７、又は８である。好ましくは、ｍ１は、１、２、３又は４である。

加えて、（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１は、二量体、三量体、四量体、五量体、又は六量体を形成することができ、これらの重合体はＮ、Ｒ_１、Ｒ_２及び／又はＲ_３間で共有結合し、複素環、炭素環、ヘテロ二環、又は炭素二環を形成することができる。

工程（ａ）で使用される前記遷移金属カチオン－アミノ錯体Ｍ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^ｍ２＋の濃度は、タンパク質モルの０．５～２０当量であり、エタノール、メタノール、プロパノール、プロパンジオール、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、ＴＨＦ、又はＣＨ_３ＣＮから選ばれる水混和性有機溶媒と共に、前記反応溶液に加えることができる。

前記還元剤は有機ホスフィンであり、好ましくはトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＥＣＰ）又はトリス（ヒドロキシプロピル）ホスフィンから選択され、反応溶液中で０．０２ｍＭ～１．０ｍＭの濃度で、又はタンパク質モルの１．０～２０当量で使用される。工程（ｃ）で添加される酸化剤は、ＤＨＡＡ、Ｆｅ^３＋、Ｉ_２、Ｃｕ^２＋、Ｍｎ^３＋、ＭｎＯ_２、又はＦｅ^３＋／Ｉ^－の混合物でもよい。前記酸化剤は、０．０２ｍＭ～１．０ｍＭの濃度で、又はタンパク質モルの１～１００当量で、前記反応溶液中で使用される。共役反応における最適ｐＨは通常、約５．０～８．０、好ましくは約５．５～７．５である。結合反応における最適温度は通常、約－５～約４０℃、好ましくは約０～３７℃、より好ましくは約２～８℃である。共役反応の最適時間は通常、約１５分から約４８時間、好ましくは約３０分から一晩（１０～１６時間）である。最適な反応条件（ｐＨ、温度、緩衝液、反応物質の濃度等）は、特に使用する抗体様タンパク質、ペイロード／連結体リンカー複合体、還元剤及び／又はＭ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^ｍ２＋に依存する。

更なる実施形態では、均一共役方法の下で、得られた式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体は、抗体の重鎖と軽鎖の間のシステイン部位に７５％以上結合しており、１５％未満が抗体の重鎖と重鎖の間のシステイン部位（ヒンジ領域）に結合している。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）では、薬物／抗体比（ＤＡＲ）が４に設定されている場合、抗体内の薬物数のパーセンテージの分布は次のようになる：Ｄ０＜１％、Ｄ２＜１０％、Ｄ４＞６５％、Ｄ６＜１０％、Ｄ８＜１０％；式（ＶＩＩ）の場合。

得られた共役体は、標準的な生物化学方法、例えばＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２５又はＳｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ３００カラムによるゲルろ過、吸着クロマトグラフィー、イオン（陽イオンまたは陰イオン）交換、又は透析（限外濾過又は過濾過（ＵＦ）及び透析濾過（ＤＦ））により精製することができる。いくつかの場合では、細胞結合分子として小分子抗体様タンパク質（例えば＜１００ＫＤ）を小分子薬剤で共役させた場合、クロマトグラフィー、例えばＨＰＬＣ、中圧カラムクロマトグラフィー、又はイオン交換クロマトグラフィーによって精製することができる。

一般に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体は、ワンポット反応のように、式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）の薬物／連結体複合体から生成されることが好ましい。抗体様タンパク質から還元されたチオールが式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）の薬物／連結体複合体の末端にあるチオール反応性基と反応する場合、反応中の遊離チオールの数の測定を通じて、ジスルフィド結合の効率的な還元とチオールの共役をモニターするために、エルマン試薬を任意に使用することができる。１９０～３９０ｎｍ、好ましくは２４０～３８０ｎｍ、より好ましくは２４０～３３０ｎｍの範囲の波長でのＵＶ分光分析が、（結合のモニタリングを介して）反応を補助するために使用されることが好ましい。従って、共役反応は、温度制御環境下での石英セル又はパイレックス（登録商標）フラスコ内で測定又は実行できる。共役体の薬物／タンパク質（抗体）比（ＤＡＲ）は、薬物及びタンパク質の濃度の計算を介して、２４０～３８０ｎｍの範囲の波長でＵＶによって、各薬物／タンパク質断片の積分面積の測定を介して、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）によって、あるいはキャピラリー電気泳動（ＣＥ）、及び／又はＬＣ－ＭＳ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ、若しくはＣＥ－ＭＳ（各薬物／タンパク質断片のＬＣ又はＣＥの積分面積とＭＳのピーク強度の両方の測定を介した、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）又はＣＥと質量分析計（ＭＳ）との組み合わせ）によって測定することもできる。本発明の共役方法では、薬物又は薬物／連結体複合体が水系緩衝液によく溶けない場合、最大３０％の水と混和可能な（混和性）有機溶媒、例えばＤＭＡ、ＤＭＦ、エタノール、メタノール、アセトン、アセトニトリル、ＴＨＦ、イソプロパノール、ジオキサン、プロピレングリコール、又はエチレンジオールを共溶媒として、水系緩衝液に追加できる。

抗体様タンパク質の修飾のための水系溶液は、ｐＨ４～９、好ましくは６．０～７．５の間で緩衝され、これらのｐＨ範囲に有用な非求核性緩衝塩を含むことができる。代表的な緩衝剤としては、リン酸塩、酢酸塩、トリエタノールアミンＨＣｌ、ＨＥＰＥＳ、及びＭＯＰＳ緩衝剤が挙げられ、更に、例えばシクロデキストリン、ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン、ポリエチレングリコール、スクロース、及び塩（例えば、ＮａＣｌ、ＫＣｌ）等の追加の成分を含むことができる。共役方法に使用される他の生物学的緩衝液は、定義セクションにリストされている。反応の進行状況は、２５２ｎｍでの吸収の減少又は２８０ｎｍでの吸収の増加、あるいはその他の適切な波長での変化を測定することによって監視することができる。反応が完了した後、修飾された細胞結合剤の単離は、常用の方法、例えば、ゲルろ過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、又はシリカゲル若しくはアルミナ上のカラムクロマトグラフィー、結晶化、予備薄層クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、又はＨＰＬＣにより行うことができる。

抗体様タンパク質の修飾にジスルフィド交換反応を使用する場合、修飾の程度は、ＵＶスペクトルを介して放出されるニトロピリジンチオン、ジニトロピリジンジチオン、ピリジンチオン、カルボキシアミドピリジンジチオン、及びジカルボキシアミドピリジンジチオン基の吸光度を測定することによって評価することができる。発色団基を有しない共役体において、修飾又は共役反応は、ＬＣ－ＭＳ、好ましくはＵＰＬＣ－ＱＴＯＦ質量分析法、又はキャピラリー電気泳動法（ＣＥＭＳ）により監視することができる。本明細書に記載されている側鎖架橋連結体は、適宜の置換基を有する任意の薬剤、好ましくは細胞毒性剤と反応し得る多様な官能基を有する。例えば、アミノ又はヒドロキシ置換基を有する修飾細胞結合分子は、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルを有する薬剤と反応することができ、チオール置換基を有する修飾細胞結合分子は、マレイミド又はハロアセチル基を有する薬剤と反応することができる。更に、カルボニル置換基（ケトン又はアルデヒド）を有する修飾細胞結合分子は、ヒドラジド又はアルキルオキシアミンを有する薬剤と反応することができる。当業者は、連結体上の利用可能な官能基の既知の反応性に基づいて、使用する連結体を容易に決定することができる。

処方と適用

本願のＢＣＭＡ抗体共役体は、液体に製剤化されるか、又は凍結乾燥され、その後液体製剤に再構成されるのに適している。液体処方中又は処方された凍結乾燥粉末中の共役体は、処方中の主要な成分として０．０１重量％～９９重量％を占めることがある。一般に、高レベルの抗体凝集なしで患者に送達するための０．１ｇ／Ｌ～３００ｇ／Ｌの濃度の共役体活性成分を含む凍結乾燥前の液体製剤は、１以上のポリオール（例えば、糖）、ｐＨ４．５～７．５を有する緩衝剤、界面活性剤（例えばポリソルベート２０又は８０）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸及び／又はメチオニン）、等張化剤（例えば、マンニトール、ソルビトール又はＮａＣｌ）、ＥＤＴＡ等のキレート剤、金属錯体（例：Ｚｎ－タンパク質錯体）；ポリエステル等の生分解性ポリマー；保存料（例えば、ベンジルアルコール）、及び／又は遊離アミノ酸を含み得る。

製剤での使用に適した緩衝剤は、これらに限定されないが、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸、又はフタル酸のナトリウム、カリウム、アンモニウム、又はトリヒドロキシエチルアミノ塩等の有機酸塩；トリス、トロメタミン塩酸塩、硫酸塩、又はリン酸塩緩衝液を含む。更に、アミノ酸カチオン成分も緩衝剤として使用できる。このようなアミノ酸成分には、アルギニン、グリシン、グリシルグリシン、及びヒスチジンが含まれるが、これらに限定されない。アルギニン緩衝液には、酢酸アルギニン、塩化アルギニン、リン酸アルギニン、硫酸アルギニン、コハク酸アルギニン等が含まれる。一実施形態では、アルギニン緩衝液は酢酸アルギニンである。ヒスチジン緩衝液の例には、塩化ヒスチジン－塩化アルギニン、酢酸ヒスチジン－酢酸アルギニン、リン酸ヒスチジン－リン酸アルギニン、硫酸ヒスチジン－硫酸アルギニン、コハク酸ヒスチジン－コハク酸アルギニン等が含まれる。緩衝液の製剤のｐＨは４．５～７．５、好ましくは約４．５～約６．５、より好ましくは約５．０～約６．２である。いくつかの実施形態では、緩衝液中の有機酸塩の濃度は、約１０ｍＭから約５００ｍＭである。

製剤中に任意に含まれる「ポリオール」は、複数のヒドロキシル基を有する物質である。ポリオールは、液体製剤及び凍結乾燥製剤の両方において、安定化賦形剤及び／又は等張剤として使用することができる。ポリオールは、生物医薬品を物理的及び化学的分解経路から保護することができる。優先的に除外された共溶媒は、タンパク質界面での溶媒の有効表面張力を増加させ、それによって最もエネルギー的に好ましい構造的コンフォメーションは、表面積が最も小さいものになる。ポリオールには、糖（還元糖及び非還元糖）、糖アルコール及び糖酸が含まれる。「還元糖」は、金属イオンを還元したり、タンパク質のリジンや他のアミノ基と共有結合的に反応したりすることができるヘミアセタール基を含むものであり、「非還元糖」は、還元糖のこれらの特性を持たないものである。還元糖の例は、フルクトース、マンノース、マルトース、ラクトース、アラビノース、キシロース、リボース、ラムノース、ガラクトース、及びグルコースである。非還元糖には、スクロース、トレハロース、ソルボース、メレジトース、及びラフィノースが含まれる。糖アルコールは、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、ラクチトール、エリスリトール、スレイトール、ソルビトール、及びグリセロールから選択される。糖酸には、Ｌ－グルコン酸塩及びその金属塩が含まれる。液体配合物又は調製された凍結乾燥固体中のポリオールは、０．０重量％～２０重量％であり得る。好ましくは、約０．１％～１５％の濃度の非還元糖、スクロース、又はトレハロースが製剤中で選択され、トレハロースの溶液安定性のため、トレハロースはスクロースよりも好ましい。

製剤中に任意に含まれる界面活性剤は、ポリソルベート（ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、ポリソルベート８５等）、ポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８、ポリ（エチレンオキシド）－ポリ（プロピレンオキシド）、ポロキサマー４０７又はポリエチレン－ポリプロピレングリコール等）；トリトン；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ラウリル硫酸ナトリウム；オクチルグリコシドナトリウム；ラウリル－、ミリスチル－、リノレイル－、又はステアリル－スルホベタイン；ラウリル－、ミリスチル－、リノレイル－、又はステアリル－サルコシン；リノレイル－、ミリスチル－、又はセチル－ベタイン；ラウロアミドプロピル－、コカミドプロピル－、リノールアミドプロピル－、ミリスタミドプロピル－、パルミミドプロピル－、又はイソステアラミド－プロピル－ベタイン（例：ラウロアミドプロピル）；ミリスタミドプロピル－、パルミドプロピル－、又はイソステアラミド－プロピル－ジメチルアミン；メチルココイルナトリウム、又はメチルオレイルタウリン酸ナトリウム；ドデシルベタイン、ドデシルジメチルアミンオキシド、コカミドプロピルベタイン、及びココアンフォグリシネート、「ＭＯＮＡＱＵＡＴ」（商標）シリーズ（例：イソステアリルエチルイミドニウムエトサルフェート）；ポリエチルグリコール、ポリプロピレングリコール、及びエチレンとプロピレングリコールとのコポリマー（例：Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、ＰＦ６８等）；から選択される。好適な界面活性剤は、ポリソルベート２０、４０、６０、又は８０（Ｔｗｅｅｎ ２０、４０、６０、又は８０）等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルである。製剤中の界面活性剤の濃度は、０．０重量％～約２．０重量％の範囲である。特定の実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．０１％～約０．２％である。一実施形態では、界面活性剤濃度は約０．０２％である。

製剤中に任意に含まれる「保存剤」は、細菌の活性を本質的に減少させる化合物である。潜在的な防腐剤の例には、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム（アルキル基が長鎖化合物である塩化アルキルベンジルジメチルアンモニウムの混合物）、及び塩化ベンゼトニウムが含まれる。他のタイプの防腐剤には、フェノール、ブチル及びベンジルアルコール等の芳香族アルコール、メチル又はプロピルパラベン等のアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、及びｍ－クレゾールが含まれる。液体配合物又は調製された凍結乾燥粉末中の保存剤は、０．０重量％～５．０重量％であり得る。一実施形態では、本明細書の保存剤は、ベンジルアルコールである。

バルク原料又は製剤中の等張化剤若しくは浸透圧調整剤としての、適切な遊離のアミノ酸は、これらに限定されないが、アルギニン、シスチン、グリシン、リジン、ヒスチジン、オルニチン、イソロイシン、ロイシン、アラニン、グリシングルタミン酸又はアスパラギン酸から選択される。塩基性アミノ酸、即ち、アルギニン、リジン、及び／又はヒスチジンを含むものが好ましい。組成物がヒスチジンを含むと、それは緩衝剤及び遊離のアミノ酸の両方として機能し得るが、ヒスチジン緩衝剤を用いた場合、典型的には非ヒスチジン遊離アミノ酸、例えば、ヒスチジン緩衝剤とリジンを含む。アミノ酸は、Ｄ－及び／又はＬ－のいずれでもよいが、通常はＬ－体である。アミノ酸は、任意の安定な塩、例えば、アルギニン－ＨＣｌ等の塩酸塩で存在してもよい。液体製剤又は調製された凍結乾燥粉末中のアミノ酸は、０．０重量％～３０重量％とすることができる。

製剤中の抗酸化剤は任意に、メチオニン、グルタチオン、システイン、シスチン、又はアスコルビン酸から選択され、液体製剤中の濃度は最大約５ｍｇ／ｍｌ、又は製剤化された凍結乾燥粉末中の濃度は０．０ｗｔ％から５．０ｗｔ％とすることができる。製剤は任意に、例えばＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ等の金属キレート剤を含むことができ、液体製剤中の濃度は最大約２ｍＭ、又は製剤化された凍結乾燥粉末中の濃度は０．０％～０．３％とすることができる。

最終的な製剤は、緩衝液調整剤（例えば、ＨＣｌ、Ｈ_２ＳＯ_４、酢酸、Ｈ_３ＰＯ_４、クエン酸等の酸、又はＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮＨ_４ＯＨ、エタノールアミン、ジエタノールアミン若しくはトリエタノールアミン、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸三ナトリウム、トロメタミン等の塩基）で、好ましいｐＨに調整できる。製剤は、「等張性」に制御する必要がある。これは、対象の製剤が人間の血液と本質的に同じ浸透圧であることを意味する。等張製剤は一般に、約２５０～３５０ｍＯｓｍの浸透圧を有する。等張性は、例えば、蒸気圧又は氷結タイプの浸透圧計を使用して測定することができる。等張剤は、マンニトール、ソルビトール、酢酸ナトリウム、塩化カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸三ナトリウム、又はＮａＣｌから選択される。一般に、緩衝塩及び等張剤の両方は、製剤中で最大３０重量％を占め得る。

特許出願の液体製剤又は凍結乾燥製剤のいずれかで有用であり得る他の賦形剤には、例えば、フコース、セロビオース、マルトトリオース、メリビオース、オクツロース、リボース、キシリトール、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、アラニン、メチオニン、グルタミン酸、リジン、イミダゾール、グリシルグリシン、マンノシルグリセレート、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、Ｐｌｕｏｒｏｎｉｃ Ｆ－１２７、セルロース、シクロデキストリン、（２－ヒドロキシプロピル）－β－シクロデキストリン、デキストラン（１０、４０又は７０ｋＤ）、ポリデキストロース、マルトデキストリン、フィコール、ゼラチン 、ヒドロキシプロピルメタ、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、ＺｎＣｌ_２、亜鉛、酸化亜鉛、クエン酸ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、トロメタミン、銅、フィブロネクチン、ヘパリン、ヒト血清アルブミン、プロタミン、グリセリン、グリセロール、ＥＤＴＡ、メタクレゾール、ベンジルアルコール、フェノール、多価アルコール、又は多価アルコール、第１級又は第２級ヒドロキシル基に還元されたカルボニル基を有する炭水化物の水素化形態が含まれる。

本特許出願の水性医薬組成物で利用できる他の企図される賦形剤には、例えば、香味剤、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、リン脂質又は脂肪酸等の脂質、コレステロール等のステロイド、血清アルブミン（ヒト血清アルブミン）、組換えヒトアルブミン、ゼラチン、カゼイン等のタンパク質賦形剤、ナトリウム等の塩形成対イオン等が含まれる。本発明の製剤での使用に適したこれら及び追加の既知の医薬品賦形剤及び／又は添加剤は、例えば「Ｔｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，４^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２００３）；ａｎｄ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）。」で挙げられているように、本技術分野において周知である。

医薬品容器又は容器は、特許出願の共役体のいずれかの医薬製剤を保持するために使用される。容器は、バイアル、ボトル、プレフィルドシリンジ、プレフィルド、又はオートインジェクターシリンジである。液体処方は、ホウケイ酸バイアル又はソーダ石灰ガラスバイアル中でケーキ又は粉末の形態に凍結乾燥又はドラム乾燥することができる。固体粉末はまた、効率的な噴霧乾燥によって調製され、次いで、保管及び流通のためにバイアル又は製薬容器に詰められてもよい。

更なる実施形態では、本発明は、以下の工程を含む、製剤を調製するための方法を提供する。（ａ）共役体、賦形剤、及び緩衝系を含む製剤を凍結乾燥するステップ、及び（ｂ）工程（ａ）の凍結乾燥混合物を、再構成された製剤が安定するように再構成媒体中で再構成する。工程（ａ）の製剤は、安定剤と、上記の増量剤、塩、界面活性剤及び保存剤を含む群から選択される１以上の賦形剤とを更に含み得る。再構成媒体として、いくつかの希釈された有機酸又は水、即ち滅菌水又は注射用静菌水（ＢＷＦＩ）を使用することができる。再構成媒体は、水、即ち無菌水、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、又は酢酸、プロピオン酸、コハク酸、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化ナトリウムの酸性溶液、塩化マグネシウムの酸性溶液、及びアルギニンの酸性溶液からなる群から、約１０～約２５０ｍＭの量で選択できる。

本願の共役体の液体医薬製剤は、様々な事前定義された特性を示す必要がある。タンパク質／抗体は製造及び保管中に可溶性及び不溶性の凝集体を形成する傾向があるため、液体医薬品の主な懸念の１つは安定性である。更に、溶液中で様々な化学反応（脱アミノ化、酸化、クリッピング、異性化等）が発生し、分解生成物レベルの増加や生物活性の損失につながる可能性がある。好ましくは、液体又は凍結乾燥製剤中の共役体は、２５℃で６ヶ月を超える保存期間を示す必要がある。より好ましくは、共役体は、液体又は凍結乾燥製剤のいずれかで、２５℃で１２ヶ月を超える保存期間を示す必要がある。最も好ましい液体製剤は、２～８℃で約２４～３６か月の保存期間を示し、凍結乾燥製剤は、２～８℃で約６０か月までの保存期間を示す必要がある。液体製剤と凍結乾燥製剤はどちらも－２０℃、又は－７０℃で少なくとも２年間の貯蔵寿命を示す必要がある。

ある実施形態では、製剤は冷凍（例えば、－２０℃又は－７０℃）及び解凍後、例えば１、２、又は３回の冷凍及び解凍サイクル後に安定である。安定性は、薬物／抗体（タンパク質）比率及び凝集体形成の評価（例えば、紫外、サイズ排除クロマトグラフィーの使用、濁度の測定、及び目視検査等）；カチオン交換クロマトグラフィー、イメージキャピラリー等の電気的集束又はキャピラリーゾーン帯電泳動を用いる電荷の異質性の評価；アミノ基末端又はカルボキシル基末端の配列解析；質量分析、又はマトリックス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ ＭＳ）、又はＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ；抗体の減少又は完全性の比較のためのＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析；ペプチドマップ（例えば、トリプシンやリシン－炭素）の分析；抗体の生物活性又は抗原結合機能の評価；等の、様々な方法により定性的及び／又は定量的に評価することができる。不安定性は、凝集、脱アミド化（例えば、Ａｓｎ脱アミド化）、酸化（例えば、Ｍｅｔ酸化）、異性化（例えば、Ａｓｐ異性化）、剪断／加水分解／断裂（例えば、ヒンジ部断裂）、コハク酸イミド形成、不対システイン、Ｎ－末端延長、Ｃ－末端プロセッシング、異化グリコシル化のいずれか１種又は２種以上を含むことができる。

安定な共役体はまた、医薬製剤中で「その生物学的活性を保持する」こと、例えば、特定の時点、例えば１２ヶ月での共役体の生物学的活性が、医薬製剤が調製された時点において抗原結合アッセイ及び／又はインビトロでの細胞毒性アッセイ等により決定された生物学的活性の約２０％以内、好ましくは約１０％以内（アッセイの誤差内）であることも必要である。

インビボ臨床適用のために、本発明の共役体は、溶液の形式又は注射のために滅菌水に再溶解することができる凍結乾燥固体の形式で提供され得る。適切な共役体の投与方法の例は以下のとおりである。８～１０８週間にわたって、毎日、毎週、２週間毎、３週間毎、４週間毎、又は毎月１回、共役体を静脈ボーラス投与する。ボーラス投与量を５０～１０００ｍＬの生理食塩液に溶解させ、生理食塩液に任意にヒト血清アルブミンを加えることができる（例えば、０．５～１ｍｌの濃縮ヒト血清アルブミン溶液を１００ｍｇ／ｍｌ）。薬剤投与量は約５０μｇ～２０ｍｇ／ｋｇ体重・週であり、静脈注射（毎回の注射量が１０μｇ～２００ｍｇ／ｋｇの範囲）である。４～１０８週間の治療が終了後、患者は、第２のコースの治療を受け入れることができる。投与経路、賦形剤、希釈剤、投与量、治療期間を含め、詳細な治療方法は、経験ある外科医によって決定することができる。

インビボ又はエクスビボ法によって細胞群を選択的に死滅させることにより疾患を治療する例としては、いずれかの種類のがん、自己免疫疾患、移植拒絶反応、及び感染症（ウイルス、細菌又は寄生虫を含む）が挙げられる。

所望の生物学的効果を達成するために必要とされる共役体の量は、共役体の化学的特性、有効性及び生物学的利用能、疾患の類型、患者の人種、患者の病的状態、投与経路、並びに必要な投与量を決定する全ての要因、投与される送達及びレジメンを含む多くの要因に応じて変化する。

一般論として、本発明の連結体を介した共役体は、０．１～１０％ｗ／ｖの濃度で該共役体を含むように、生理的緩衝液に溶解した非経口投与のための製剤であってもよい。典型的な用量の範囲は、１日、毎週、２週間、３週間、又は毎月あたり１μｇ／ｋｇ体重～０．１ｇ／ｋｇ体重であり、好ましい用量の範囲は、毎週、２週間、３週間、又は毎月あたり０．０１ｍｇ／ｋｇ体重～２５ｍｇ／ｋｇ体重である。好ましい薬物投与量は、例えば、疾患又は障害の進行の型及び程度、個々の患者の全体的な健康状態、選択された薬物の相対的な生物学的活性、化合物の剤形、投与様式（静脈内、筋肉内、又はその他）、選択された投与様式における薬物の薬物動態学的特性、並びに投与速度（単回注射又は連続注入）及び投与スケジュール（一定時間内に投与の頻度）等の変数に適切に依存する場合がある。

いくつかの実施形態では、再構成された共役体が、皮下、筋肉、又は身体の他の組織に注射される場合、ヒアルロニダーゼ（ＨＡａｓｅ）が共役体と共に投与されることが好ましい。ここでヒアルロニダーゼは、患者の身体に注射された共役体を吸収するのを助けるために使用される。ヒアルロニダーゼは、２０～２００単位用量、好ましくは６０～１６０単位用量で相乗的に使用される。

本発明の共役体は、単位剤量（ｕｎｉｔ ｄｏｓｅ）で投与することもでき、ここで、「単位剤量」とは、一人の患者に投与される一回の用量を意味し、簡単で便利な包装とするで使用することができ、活性な共役体自体又は後述の薬学的に許容される組成物として物理的及び化学的に安定な単位剤量を維持している。そのため、典型的な１日／１週／２週／１月の総投与量の範囲は、０．０１～１００ｍｇ／ｋｇである。一般的な指針として、ヒトに対する単位用量は、１日あたり、又は１週間あたり、２週間あたり（ｂｉｗｅｅｋｌｙ）、３週間あたり、又は１月あたり１～３０００ｍｇの範囲である。好ましくは、単位用量範囲は、１ｍｇ～５００ｍｇを月に１～４回投与し、更に好ましくは、１ｍｇ～１００ｍｇを週に１回、又は２週間に１回、又は３週間に１回投与することである。ここで与えられた共役体は、１種以上の薬学的に許容される賦形剤を医薬組成物に添加することによって調製することができる。単位剤量の薬剤は、経口投与のために、錠剤、単純カプセルまたは軟カプセルとして；鼻腔内投与のために、粉末、点鼻剤、またはエアロゾルとして；または、皮膚投与のために、例えば軟膏、クリーム、ローション、ゲルまたはスプレーまたは皮膚パッチとして投与されることができる。組成物は、好都合には単位剤形で投与することができ、任意の薬学の技術分野における公知の方法で用意することができ、例えば、「Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21th ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005年」に記載の方法を参照できる。

好ましい製剤には、本発明の化合物が経口投与又は非経口投与のために製剤化された医薬組成物が含まれる。例えば、錠剤、丸薬（ピル）、粉末、カプセル、トローチ等の経口投与製剤は、以下の原料又は類似の性質を有する他の化合物の１以上を含むことができる：微結晶性セルロース又はトラガカントゴム等の結合剤；デンプン又はラクトース等の希釈剤；デンプン及びセルロース誘導体等の分散剤；ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤；コロイド状シリカ等の滑剤；スクロース又はサッカリン等の甘味剤；ペパーミント又はサリチル酸メチル等の着香剤。カプセルは、硬質又は軟質の形式で、ゼラチンの混合により、あるいは任意に可塑剤との混合で得られ、デンプンカプセルも同様に得られる。更に、投与単位は、その物理的形態を改変するために、例えば、糖衣、シェラック又は腸溶剤等の様々な異なる材料を含めることができる。シロップ又はエリキシル剤等の他の経口剤形は、甘味剤、保存剤、顔料、着色剤及び調味剤を含むことができる。更に、活性化合物は、別の処理及び製剤で速溶性剤形、徐放性又は持続放出剤形を製造することができ、このような徐放制剤は、二重モードであることが好ましい。好ましい錠剤製剤は、混合物で、ラクトース、コーンスターチ、ケイ酸マグネシウム、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウム、若しくはタルク又はその組み合わせを含有する。

非経口投与用の液体製剤は、無菌の水性又は非水性溶液、懸濁液及びエマルションが挙げられる。液体薬剤は、結合剤、緩衝剤、防腐剤、キレート剤、甘味剤、香味剤及び着色剤等を含有してもよい。非水性溶媒には、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油、及びオレイン酸エチル等の有機酸エステルが含まれる。水性担体には、水及びエタノールの混合物、緩衝剤並びに生理食塩水が含まれる。特に、生体適合性、生分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコライドコポリマー、又はポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレンコポリマーは、活性化合物の放出を制御する原料として使用することができる。静脈投与用の媒体には、流体並びに栄養補充液及びリンゲルデキストロース（Ｒｉｎｇｅｒ’ｓ ｄｅｘｔｒｏｓｅ）に基づく電解質補充液等が含まれる。これらの活性化合物のための他の可能な非経口送達系には、エチレン－酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、移植可能な注入システム、及びリポソームが含まれる。

選択的な他の投与方法は吸入剤を含み、吸入剤は乾燥粉末、エアロゾル及び滴剤を含む。吸入剤は、例えば、ポリオキシエチレン－９－ラウリルエーテル、グリココール酸塩、デオキシコール酸塩を含む水溶液又は点鼻用液滴の形態若しくは鼻腔内適用のためのゲルとして投与するための油性溶液でもよい。口腔内投与用製剤、例えば錠剤又はトローチ剤は、スクロース又はアラビアゴム等の風味剤及びグリココール酸等のその他の添加剤を含有してもよい。直腸投与に適した製剤は、好ましくは、例えば、カカオバター等の固体基剤を含み、サリチル酸を含んでもよい単位投与の坐剤として与えられる。皮膚局所用製剤として好ましくは、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾル又はオイルの形態が好ましい。基剤としてワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール及びアルコール並びにそれらの混合物を含む。経皮投与に適した製剤は、別々のパッチとして与えることができ、また、ポリマー又は接着剤に溶解又は分散された、親油性エマルジョン又は緩衝化された水溶液とすることができる。

更に、別の実施形態では、治療有効量の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）の共役体、又は本特許を通じて記載される任意の共役体を含む医薬組成物は、がん、自己免疫疾患、又は感染症に相乗的に効果的な治療又は予防のために、化学療法剤，放射線療法、免疫療法剤、自己免疫障害剤、抗感染症剤、又は他の共役体等の他の治療薬と共同投与（ｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）することができる。本明細書で使用される「共同投与」という用語は、抗体又はＡＤＣが効果を増強できるように、１以上の追加の治療薬と本明細書に記載の抗体若しくはＡＤＣ、又は抗体若しくはＡＤＣ含有組成物を十分に近い時間で投与すること、又はその逆を指す。この点に関して、抗体若しくはＡＤＣ、又はそれらを含む組成物を最初に投与し、１以上の追加の治療薬を２番目に投与することもでき、あるいはその逆も可能である。例えば、抗体若しくはＡＤＣ、又はそれらを含む組成物は、多発性骨髄腫の治療又は予防のために他の薬剤（例えば、アジュバントとして）と組み合わせて投与され得る。この点において、抗体若しくはＡＤＣ、又は抗体若しくはＡＤＣ含有組成物は、例えば当技術分野で公知の任意の適切な化学療法剤、電離放射線、小分子抗がん剤、がんワクチン、生物学的療法（例、他のモノクローナル抗体、がんを殺すウイルス、遺伝子療法、及び養子Ｔ細胞移植）、及び／又は手術を含む少なくとも１つの他の抗がん剤と組み合わせて使用することができる。一態様では、相乗剤又は放射線療法は、共役体の投与の少なくとも１時間、１２時間、１日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、更なる態様では数ヶ月前又は後に投与することができる。

前記相乗剤は、好ましくは、以下の薬物のうちの１つ又はいくつかから選択される：アバタセプト、酢酸アビラテロン、アブラキサン、アセトアミノフェン／ヒドロコドン、アカラブルチニブ、アデュカヌマブ、アダリムマブ、ＡＤＸＳ３１－１４２、ＡＤＸＳ－ＨＥＲ２、アファチニブジマレイン酸塩、アルデスロイキン、アレクチニブ、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アドトラスツズマブ エムタンシン、アンフェタミン／デキストロアンフェタミン、アナストロゾール、アリピプラゾール、アントラサイクリン、アリピプラゾール、アタザナビル、アテゾリズマブ、アトルバスタチン、アベルマブ、アキシカブタゲン シロロイセル、アキシチニブ、ベリノスタット、生ＢＣＧ、ズマブ、ベキサロテン、ブリナツモマブ、ボルテゾミブ、ボスチニブ、ブレンツキシマブ ベドチン、ブリガチニブ、ブデソニド、ブデソニド／ホルモテロール、ブプレノルフィン、カバジタキセル、カボザンチニブ、カプマチニブ、カペシタビン、カーフィルゾミブ、キメラ抗原受容体改変Ｔ（ＣＡＲ－Ｔ）細胞、セレコキシブ、セリチニブ、セツキシマブ、チダミド、シクロスポリン、シナカルセト、クリゾチニブ、コビメチニブ、コセンティクス、クリゾチニブ、ＣＴＬ０１９、ダビガトラン、ダブラフェニブ、ダカルバジン、ダクリズマブ、ダコモチニブ、ダプトマイシン、ダラツムマブ、ダルベポエチンアルファ、ダルナビル、ダサチニブ、デニロイキン・ディフティトックス、デノスマブ、デパコート、デクスランソプラゾール、キシメチルフェニデート、デキサメタゾン、ジヌツキシマブ、ドキシサイクリン、デュロキセチン、デュベリシブ、デュルバル ウマブ、エロツズマブ、エムトリシタビン／リルピビリン／テノホビル、フマル酸ジソプロキシル、エムトリシットビン／テノホビル／エファビレンツ、エノキサパリン、エンサルチニブ、エンザルタミド、エポエチンα、エルロチニブ、エソメプラゾール、エスゾピクロン、エベロリムス、エクセメスタン、エベロリムス、エクセナチドＥＲ、エゼチミブ、エゼチミブ／シンバスタチン、フェノフィブラート、フィルグラスチム、フィンゴリモド、プロピオン酸フルチカゾン、フルチカゾン／サルメテロール、フルベストラント、ガジバ、ゲフィチニブ、グラチラマー、酢酸ゴセレリン、イコチニブ、イマチニブ、イブリツモマブ チウキセタン、イブルチニブ、イデラリブ、イホスファミド、インフリキシマブ、イミキモド、イムシスト、免疫ＢＣＧ、イニパリブ、インスリンアスパルト、インスリンデテミル、インスリングラルギン、インスリンリスプロ、インターフェロンアルファ、インターフェロンα１ｂ、インターフェロンα２ａ、インターフェロンアルファα２ｂ、インターフェロンβ、インターフェロンβ１ａ、インターフェロンβ１b、インターフェロンγ１ａ、イアパチニブ、イピリムマブ、臭化イプラトロピウム／サルブタモール、イキサゾミブ、鹿沼、酢酸ランレオチド、レナリドミド、レナリオミド、メシル酸レンバチニブ、レトロゾール、レボチロキシン、レボチロキシン、リドカイン、リネゾリド、リラグルチド、エグザムフェタミン、ＬＮ－１４４、ロルラチニブ、メマンチン、メチルフェニデート、メトプロロール、メキニスト、メリシタビン／リルピビリン／テノホビル、モダフィニル、モメタゾン、ミシダック－Ｃ、ネシツムマブ、ネラチニブ、ニロチニブ、ニラパリブ、ニボルマブ、オファツムマブ、オビヌツズマブ、オラパリブ、オルメサルタン、オルメサルタン／ヒドロクロロトジアジド、オマリズマブ、オメガ－３脂肪酸エチルエステル、オンコリン、オセルタミビル、オシメルチニブ、オキシコドン、パルボシクリブ、パリビズマブ、パニツムマブ、パノビノスタット、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ＰＤ－１抗体、ＰＤ－Ｌ１抗体、ペメトレキセド、ペルツズマブ、肺炎球菌複合体ワクチン、ポマリドマイド、ポジオチニブ、プレガバリン、プロスカバックス、プロプラノロール、クエチアピン、ラベプラゾール、塩化ラジウム２２３、ラロキシフェン、ラルテグラビル、ラムシルマブ、ラニビズマブ、レゴラフェニブ、リツキシマブ、リバロキサバン、ロミデプシン、ロスバスタチン、リン酸ルキソリチニブ、サルブタモール、サボリチニブ、セマグルチド、そうですね、シルデナフィル、シルツキシマブ、シプルーセルＴ、シタグリプチン、シタグリプチン／メトホルミン、ソリフェナシン、ソラネズマブ、ソニデギブ、ソラフェニブ、スニチニブ、タクロリムス、タクリムス、タダラフィル、タモキシフェン、タフィンラー、タリモゲン ラヘルパレプベク、タラゾパリブ、テラポレブリブ、ＩＲ／エムトリシタビン、テノフォビル フマル酸ジソプロキシル、テストステロンゲル、サリドマイド、ＴＩＣＥ ＢＣＧ、臭化チオトロピウム、チサゲンルクルーセル、トレミフェン、トラメチニブ、トラスツズマブ、トラスツズマブ デルクステカン、トラベクテジン（エクテイナサイジン７４３）、トラメチニブ、トレメリムマブ、トリフルリジン／チピラシル、トレチノイン、ウステキヌマブ、バルサルタン、ベリパリブ、バンデタニブ、ベムラフェニブ、ベネトクラクス、ボリノスタット、ジブアフリベルセプト、ゾスタバックス、およびそれらの類似体、誘導体、薬学的に許容される塩、担体、希釈剤もしくは賦形剤、またはそれらの組み合わせ。

いくつかの実施形態では、本開示は、上記の抗体又は抗体薬物共役体と、薬学的に許容される（例えば、生理学的に許容される）担体と、を含む組成物も提供する。当技術分野で知られている任意の適切な担体を本発明の範囲内で使用することができる。担体の選択は、部分的には、組成物が投与され得る特定の部位、及び組成物を投与するために使用される特定の方法によって決定される。組成物は場合により無菌であってもよい。組成物は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy， 21st Edition，Lippincott Williams & Wilkins， Philadelphia， PA (2001)に記載されている従来の技術に従って生成することができる。

本発明の組成物は、望ましくは、多発性骨髄腫を治療又は予防するのに有効な量の抗体又はＡＤＣを含む。従って、本開示は、多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法を提供し、該方法は、ＢＣＭＡを発現する多発性骨髄腫細胞を、本明細書に記載の抗体若しくはＡＤＣと、又は本明細書に記載の抗体若しくはＡＤＣを含む組成物と接触させることを含み、それにより、抗体又はＡＤＣが、多発性骨髄腫細胞上のＢＣＭＡに結合し、多発性骨髄腫細胞を死滅させる。本開示はまた、多発性骨髄腫を治療するための薬剤の製造における、本明細書に記載の抗体若しくはＡＤＣ、又は抗体若しくはＡＤＣを含む組成物の使用を提供する。本明細書で考察するように、形質細胞骨髄腫又はケーラー病としても知られる多発性骨髄腫は、通常は抗体の産生を担う白血球の一種である形質細胞のがんである（Raab et al., Lancet, 374: 324-329 (2009))。多発性骨髄腫は、年間１００，０００人あたり１～４人が罹患する。理由はまだ不明であるが、この病気は男性に多く見られ、一般的に、アフリカ系アメリカ人では白人アメリカ人の２倍見られる。多発性骨髄腫は血液悪性腫瘍の中で最も頻度が低く（１４％）、全がんの１％を占める。多発性骨髄腫の治療には通常、大量の化学療法とその後の造血幹細胞移植（同種又は自家）が含まれる。しかし、そのような治療を受けた多発性骨髄腫患者では、一般的に再発率が高い。上記で考察したように、ＢＣＭＡは多発性骨髄腫細胞によって高度に発現される。

本明細書で実証されるように、ＢＣＭＡは、多発性骨髄腫幹細胞上でも発現される。従って、本開示は、多発性骨髄腫幹細胞を死滅させる方法を提供し、この方法は、ＢＣＭＡを発現する多発性骨髄腫幹細胞を、本明細書に記載の抗体－薬物共役体、又は本明細書に記載のＡＤＣを含む組成物と接触させることを含み、それによって、抗体－薬物共役体が、多発性骨髄腫幹細胞上のＢＣＭＡに結合し、多発性骨髄腫幹細胞を死滅させる。多発性骨髄腫幹細胞は、多発性骨髄腫患者の骨髄において、ＣＤ１９の表面発現及びＣＤ１３８表面発現の欠如によって同定できる(例えば、Matsui et al., Blood, 103:2332-6 (2004)を参照)。これらの細胞は独特のクローン原性を持ち、免疫不全マウスに移植されるが、ＣＤ１３８＋ＣＤ１９－として定義される骨髄腫形質細胞は移植されない。多発性骨髄腫幹細胞はまた、現行の治療法に対して耐性がある（Matsui et al., Cancer Res., 68: 190-7 (2008)）。従って、本発明は、ＢＣＭＡを発現するがんを有する、又はがんを有するリスクのある患者を治療する方法であって、上記のＢＣＭＡ抗体又はＢＣＭＡ ＡＤＣを有効なレジメンで患者に投与することを含む方法を提供する。任意選択で、がんは血液がんである。任意選択で、血液がんは、骨髄腫、白血病、又はリンパ腫である。任意選択で、血液がんは多発性骨髄腫である。任意選択で、血液がんは非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）又はホジキンリンパ腫である。任意選択で、血液がんは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖症候群（ＭＰＳ）、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、又はバーケットリンパ腫である。

本明細書で使用される場合、用語「治療」、「治療すること」等は、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを指す。好ましくは、その効果は治療的であり、即ち、その効果は、疾患及び／又は疾患に起因する有害な症状を部分的または完全に治癒する。この目的のために、本発明の方法は、「治療有効量」の抗体若しくはＡＤＣ、又は抗体もしくはＡＤＣと薬学的に許容される担体を含む組成物を投与することを含む。「治療有効量」とは、所望の治療結果を達成するために必要な用量及び期間で有効な量を指す。治療有効量は、個体の病状、年齢、性別、体重、個体において所望の応答を誘発する抗体又はＡＤＣの能力等の要因に応じて変わり得る。例えば、本発明のＡＤＣの治療有効量は、多発性骨髄腫細胞上のＢＣＭＡに結合し、それらを破壊する量である。

治療の薬理学的及び／又は生理学的効果は予防的で、即ち、その効果は疾患又はその症状を完全又は部分的に予防するものであり得る。この点において、本発明の方法は、「予防有効量」のＡＤＣ又はＡＤＣを含む組成物を、多発性骨髄腫の素因のある哺乳動物に投与することを含む。「予防的有効量」とは、所望の予防結果（例えば、疾患発症の予防）を達成するために必要な用量及び期間で有効な量を指す。治療効果又は予防効果は、治療を受けた患者の定期的な評価によって監視できる。一実施形態では、本明細書に記載のＡＤＣは、ＢＣＭＡ発現骨髄腫細胞の増殖を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約１００％）阻害又は抑制する。細胞増殖は、標識ヌクレオシド（例えば、３Ｈ－チミジン又はブロモデオキシウリジンＢｒｄ（Ｕ））のゲノムＤＮＡへの取り込みを測定する等、当技術分野で公知の任意の適切な方法（例えば、Madhavan，HN，J. Stem Cells Regen. Med. 3(1): 12-14 (2007) を参照）を使用して測定することができる。

いくつかの実施態様において、ＢＣＭＡ抗体及びＢＣＭＡ ＡＤＣの発明は更に、効果的な投与計画で、上記の抗体若しくはＡＤＣのいずれかを患者に投与することにより、ＢＣＭＡを発現する免疫細胞によって媒介される免疫障害を有する、又は有するリスクのある患者を治療する方法を提供する。任意選択で、前記障害はＢ細胞媒介性障害である。任意選択で、前記免疫障害は、関節リウマチ、全身性狼瘡Ｅ（ＳＬＥ）、I型糖尿病、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、血小板減少性紫斑病、多発性硬化症、乾癬、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、バセドウ病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、結核、及び移植片対宿主病である。

いくつかの実施態様において、ＢＣＭＡ抗体及びＢＣＭＡ ＡＤＣの発明は更に、効果的な投与計画で、上記の抗体若しくはＡＤＣのいずれかを患者に投与すること、又は上記の抗体若しくはＡＤＣのいずれかと、化学療法剤、放射線療法、免疫療法剤、自己免疫障害剤、抗感染症剤、又は他の共役体等の、他の治療薬とを同時に、患者に投与することにより、がん、自己免疫疾患、感染症、ウイルス疾患、又は病原性感染症を有する、又はそれらを有するリスクのある患者を治療する方法を提供する。

標的となるがんには、これらに限定されるものではないが、副腎皮質がん、肛門がん、膀胱がん、脳腫瘍（成人、脳幹グリオーマ、子供、小脳星状細胞腫、脳星状細胞腫、上衣腫、髄芽腫、テント上原始神経外胚葉性及び松果体腫瘍、視覚路及び視床下部膠腫）、乳がん、カルチノイド腫瘍、胃腸、原発不明がん腫、子宮頸がん腫、大腸がん腫、子宮内膜がん、食道がん、肝外胆管がん、ユーイング・ファミリー腫瘍（ＰＮＥＴ）、頭蓋外悪性胚細胞腫瘍、眼がん、眼内黒色腫、胆嚢がん、胃がん（胃）、胚細胞腫瘍、性腺外、妊娠栄養膜腫瘍、頭頸部がん、下咽頭がん、膵島細胞がん種、腎臓がん（腎細胞がん）、喉頭がん腫、白血病（急性リンパ芽球性、急性骨髄性、慢性リンパ性、慢性骨髄性、毛様細胞）、口唇および口腔がん、肝臓がん、肺がん（非小細胞、小細胞、リンパ腫（ＡＩＤＳ関連、中枢神経系、皮膚Ｔ細胞、ホジキン病、非ホジキン病、悪性中皮腫、黒色腫、メルケル細胞がん腫、原発不明の転移性扁平首がん、多発性骨髄腫及びその他の形質細胞腫瘍、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖症候群、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、口腔がん、咽頭がん、骨肉腫、卵巣がん（上皮、生殖細胞腫瘍、低悪性ポテンシャル腫瘍）、膵臓がん（外分泌腺、膵島細胞がん）、副鼻腔及び鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、褐色細胞腫がん、下垂体がん、形質細胞腫、前立腺がん、横紋筋肉腫、直腸がん、腎細胞がん（腎がん）、腎盂及び尿管（移行細胞）、唾液腺がん、セザリー症候群、皮膚がん、皮膚がん（皮膚様Ｔ細胞リンパ腫、カポジ肉腫、黒色腫）、小腸がん、軟部組織肉腫、胃がん、精巣がん、胸腺腫（悪性）、甲状腺がん、尿道がん、子宮がん（肉腫）、子供の異常ながん、膣がん、外陰がん、ウィルムス腫瘍が含まれる。

前記自己免疫疾患には、これらに限定されないが、自己免疫性胃酸欠乏慢性活動性肝炎、急性散在性脳脊髄炎、急性出血性白質脳炎、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、筋萎縮性側索硬化症、強直性脊椎炎、アンチ－ＧＭＢ／ＴＢＭ腎炎、抗リン脂質症候群、抗シンセターゼ症候群、関節炎、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性心筋症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ球増殖症候群、自己免疫性末梢神経系疾患、自己免疫性膵炎、複数の自己免疫性内分泌障害Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ型、自己免疫性プロゲステロン皮膚炎、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性ブドウ膜炎、バーロー病／バーロー同心性硬化症、ベーチェット病、Ｂｅｒｇｅｒ病、Ｂｉｃｋｅｒｓｔａｆｆ脳炎、Ｂｌａｕ症候群、水疱性類天疱瘡、キャッスルマン病、シャーガス病、慢性疲労性免疫機能障害症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経障害、慢性再発性多病巣性骨髄炎、慢性ライム病、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性肉芽腫性血管炎、瘢痕性類天疱瘡、セリアック病、コーガン症候群、寒冷凝集素症、補体成分Ｃ２欠損症、頭部動脈炎、クレスト症候群、クローン病（特発性炎症性腸疾患）、クッシング症候群、皮膚白血球破砕性血管炎、悪性萎縮性丘疹症、有痛脂肪症、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、１型糖尿病、びまん性皮膚強皮症、心筋梗塞症、円板状紅斑性狼瘡、湿疹、子宮内膜症、付着部炎関連関節炎、好酸球性筋膜炎、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、特発性混合クリオグロブリン血症、エバンス症候群、進行性骨化性線維形成異常症、線維筋痛症、線維筋炎、線維化性肺胞隔炎、胃炎、消化管類天疱瘡、巨細胞性動脈炎、腎球体腎炎、グッドパスチャー症候群、バセドウ病、ギラン・バレー症候群、橋本脳症、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、アレルギー性紫斑病、妊娠性疱疹、化膿性汗腺炎、ヒューズ症候群（抗リン脂質抗体症候群）、低ガンマグロブリン血症、特発性炎症性脱髄疾患、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（自己免疫性血小板減少性紫斑病）、ＩｇＡ腎症（Ｂｅｒｇｅｒ病）、封入体筋炎、炎症性脱髄性多発性神経障害、間質性膀胱炎、過敏性腸症候群、若年性特発性関節炎、若年性関節リウマチ、皮膚粘膜リンパ節症候群、ランバート・イートン筋無力症候群、白血球破壊性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、リニアＩｇＡ疾患（ＬＡＤ）、ルー・ゲーリッグ病（筋萎縮性側索硬化症）、狼瘡様肝炎、紅斑性狼瘡、ブラウ症候群、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎、ミラー・フィッシャー症候群、混合結合組織病、強皮症、ミュシャ－ヤコブ病、マックル・ウェルズ症候群、多発性骨髄腫、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（デビック病）、神経性筋、眼瘢痕性類天疱瘡、オプソクローヌス・ミオクローヌス症候群、オード甲状腺炎、回帰性リウマチ、パンダ症候群（合併連鎖球菌感染症の児童自己免疫神経精神障害）、腫瘍小脳変性症、発作性夜間血色素尿症、パリー・ロンベルク症候群、パーソネージージョージア症候群、扁平部炎症、天疱瘡、尋常性天疱瘡、悪性貧血、静脈周囲性脳脊髓炎、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、リウマチ性多発筋痛、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、進行性炎症性神経障害、乾癬、乾癬性関節炎、壊疽性膿皮症、純赤血球無形成性貧血、ラスムッセン脳炎、レイノー病、再発性多発性軟骨炎、ライター症候群、下肢静止不能症候群、後腹膜線維症、関節リウマチ、リウマチ熱、サルコイドーシス、統合失調症、シュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、脊椎関節症、粘着性血症候群、スティル病、スティッフマン症候群、亜急性細菌性心内膜炎、スザック症候群、急性熱性好中球皮膚病、シデナム舞踏病、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎（巨細胞性動脈炎）、トロサ・ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎（特発性炎症性腸疾患）、未分化結合組織病、未分化脊椎関節症、血管炎、白斑、ウェゲナー肉芽腫症、ウィルソン症候群、ウェストコット－アルドリッチ症候群が含まれる。

前記感染症には、これらに限定されないが、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ眠り病（アフリカトリパノソーマ症）、エイズ（後天性免疫不全症候群）、アメーバ症、アナプラズマ、炭疽菌、細菌結核感染、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、セレウス菌感染症、細菌性肺炎、細菌性膣炎、バクテロイデス感染、バランチジウム症、ベイリー線虫回虫感染症、ＢＫウイルス感染、黒色砂毛、ブラストシスホミニス感染症、ブラストミセス、ボリビア出血熱、ボレリア感染症、ボツリヌス中毒（及び乳児ボツリヌス症）、ブラジル出血熱、ブルセラ症、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、感染カリシウイルス（ノロウイルス、サポウイルス）、カンピロバクター感染症、カンジダ感染症（カンジダ症、鵞口瘡）、キャット・スクラッチ病、蜂巣炎、シャーガス病（アメリカトリパノソーマ症）、軟性下疳、水痘、衣原体、肺炎衣原体感染、霍乱、着色真菌症、肝吸虫病、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、風邪（急性ウイルス性鼻咽頭炎、急性鼻炎）、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア－コンゴ出血熱、クリプトコッカス、クリプトスポリジウム、皮膚幼虫移行、シクロスポラ感染症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染、デング熱、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、包虫症、エールリヒア症、蟯虫（蟯虫感染症）、腸球菌感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑（第五病）、子供急性発疹、肥大吸虫症、片吸虫病、致死性家族性不眠症、フィラリア症、ウェルシュ菌によって引き起こされる食中毒、非寄生アメーバ感染症、フゾバクテリウム感染症、ガス壊疽（クロストリジウム筋壊死）、ジオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ランブル鞭毛虫症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼡径部肉芽腫（ドノヴァン症）、Ａ群連鎖球菌感染症、Ｂ群連鎖球菌感染症、インフルエンザ菌感染症、手足口病（ＨＦＭＤ）、ハンタウイルス肺症候群、ヘリコバクターピロリ感染、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染、人間バルカンウイルス感染、人間エールリヒア症エバンス、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エー．リキア症、ヒト乳頭腫ウイルス感染、ヒトパラインフルエンザウイルス感染、小形条虫症、インフルエンザ、イソスポーラ症、川崎病、単核（球）症、キム菌感染、クールー、ラッサ熱、レジオネラ症（在郷軍人症）、レジオネラ症（ポンティアック熱）、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病（ライムボレリア）、リンパフィラリア症（象皮病）、リンパ球性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、類鼻疽（ホイットモア病）、髄膜炎、髄膜炎菌性疾患、メタゴニムス症、微胞子虫症、伝染性軟属腫、流行性耳下腺炎、発疹チフス（風土病発疹チフス）、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ病、新生児結膜炎（新生児眼炎）、クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ、ｎｖＣＪＤ）、ノカルジア症、オンコセルカ症（失明性のフィラリア症）、副コクシジオイデス症（南米ブラストミセス）、肺吸虫症、パスツレラ病、アタマジラミ（アタマジラミ）、ボディシラミ病（ボディシラミ）、ケジラミ病（ケジラミ、Ｃｒａｒｂｉｃｅ）、骨盤内炎症性疾患、百日咳（Ｗｏｏｐｉｎｇｃｏｕｇｈ）、疫病、肺炎球菌感染症、カリニ肺炎、肺炎、ポリオ、プレボテラ感染症、ＰＡＭＥ、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、ラット咬傷発熱、呼吸器合胞体ウイルス感染、ライノウイルス感染、リケッチア感染症、リケッチア、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）、疥癬、住血吸虫症、敗血症、下痢（赤痢）、帯状疱疹（Ｈｅｒｐｅｓｚｏｓｔｅｒ）、天然痘、スポロトリクム、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染、線虫、梅毒、条虫症、破傷風（開口障害）、白癬性毛瘡（Ｂａｒｂｅｒ’ｓｉｔｃｈ）、手部白癬、黒色ひこう疹、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症（眼幼虫移行症）、トキソカラ症（内臓幼虫移行症）、トキソプラズマ症、旋毛虫、トリコモナス症、クリプトビオシス（鞭虫感染症）、肺結核症、野兎病、尿素分解尿素マイコプラズマ感染、ベネズエラウマ脳炎、ベネズエラ出血熱、ウイルス性肺炎、ウエストナイル熱、白髪根粒菌病、偽結核菌感染症、エルシニア症、黄熱病、接合菌症が含まれる。

前記病原性株には、これらに限定されないが、アシネトバクター・バウマニ、アクチオマイセス・イスラエリー、アクチノマイセス・オドントリチカス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓｏｄｏｎｔｏｌｙｔｉｃｕｓ）、プロピオニバクテリウム・プロピオニカス、トリパノソーマ・ブルーセイ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、赤痢アメーバ、アナプラズマ属、炭疽菌、メチルスヘモリティクム（Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ）、フニンウイルス、回虫、アスペルギルス、アストロウイルス科、バベシア属、セレウス菌細菌属、マルチプル・バクテリア、バクテロイデス属、結腸ポーチ繊毛虫、ベイリー回虫線虫属、ＢＫウイルス、ピエドライア・ホルタエ（Ｐｉｅｄｒａｉａｈｏｒｔａｅ）、ブラストシスティス・ホミニス、皮炎芽生菌病、マクポ・ウイルス、ボレリア属、ボツリヌス菌、サビア、ブルセラ属、通常バークホルデリア・セパシア及び他のバークホルデリア種、マイコバクテリウム・ウルセランス、カリシウイルス科ファミリー、カンピロバクター菌、通常カンジダ・アルビカンス及び他のカンジダ種、バルトネラ・ヘンセラ菌（英：Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａｈｅｎｓｅｌａｅ）、Ａ群連鎖球菌及びブドウ球菌、クルーズトリパノソーマ、軟性下疳菌、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、クラミジア・トラコマチス、クラミジア・ニューモニエ、コレラ菌、フォンセカエ・ペドロソイ、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシレ、コクシジオイデス・イミティス、コクシジオイデス・ポサダシ、コロラドダニ熱ウイルス、ライノウイルス、コロナウイルス、クロイツフェルト・ヤコブ病・プリオン、クリミア－コンゴ出血熱ウイルス、クリプトコックス・ネオフォルマンス、クリプトスポリジウム属、猫鉤虫、共寄生虫、シクロスポラ、有鉤条虫、サイトメガロウイルス、デング熱ウイルス（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３及びＤＥＮ－４）－フラビウイルス、双核アメーバ、コリネバクテリウム・ジフテリア、裂頭条虫属、メジナ虫（Ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓｍｅｄｉｎｅｎｓｉｓ）、エボラウイルス、エキノコックス属、エーリキア属、蟯虫、エンテロコッカス属、エンテロウイルス属、発疹チフス・リケッチア、パルボウイルスＢ１９、ヒトヘルペスウイルス６型、ヒトヘルペスウイルス７型、肥大吸虫、肝蛭及び巨大肝蛭、ＦＦＩプリオン、フィラリアヘッド上科、ウェルシュ菌、フソバクテリウム、ウェルシュ菌、他のクロストリジウム属、ゲオトリクムカンジドウム、ＧＳＳプリオン、ランブル鞭毛虫（Ｇｉａｒｄｉａｌａｍｂｌｉａ）、バークホルデリア鼻疽菌、顎口顎線虫、剛棘顎口虫、淋菌、肉芽腫菌、化膿連鎖球菌、ストレプトコッカス・アガラクティエ、インフルエンザ菌、腸内ウイルス、ほとんどのコクサッキーＡ型ウイルス、腸内ウイルス７１型、シンノンブルウイルス、ヘリコバクター・ピロリ、大腸菌Ｏ１５８：Ｈ７、ブニヤウイルス科、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、ヒストプラスマ・カプスラーツム、十二指腸鉤虫、アメリカ鉤虫、インフルエンザ菌、ボカ人間ウイルス、エーリキア・エウィンギ（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａｅｗｉｎｇｉｉ）、アナプラズマ・ファゴサイトフィルム、ヒトメタニューモウイルス、エールリッヒア・シャフェンシス、ヒトパピローマウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、矮小条虫、縮小条虫、エプスタイン・バー・ウイルス、オルトミクソウイルス科、イソスポーラ・ベリ（Ｉｓｏｓｐｏｒａｂｅｌｌｉ）、キンゲラ・キンゲ（Ｋｉｎｇｅｌｌａｋｉｎｇａｅ）、肺炎桿菌、クレブシエラオツェーナ、クレブシエラリノシェレロモーティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｒｈｉｎｏｓｃｌｅｒｏｍｏｔｉｓ）、クーループリオン、ラッサ熱ウイルス、レジオネラ・ニューモフィラ、レジオネラ・ニューモフィラ、リーシュマニア、ハンセン菌とマイコバクテリウム・レプロマトーシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、レプトスピラ属、リステリア菌、ボレリア病及び他のボレリア種、バンクロフト糸状虫及びマレー糸状虫、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、プラスモジウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｇｅｎｕｓ）、マールブルグウイルス、麻疹ウイルス、偽鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、髄膜炎菌、横川吸虫、微胞子虫門、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ムンプスウイルス、リケッチア・チフィ、マイコプラズマ・ニューモニエ、種々の細菌（アクチノミセトーマ）及び真菌（真菌性菌腫）、寄生ハエの幼虫の双翅目、クラミジア・トラコマチスや淋菌、ｖＣＪＤプリオン、ノカルジア・アステロイデス及び他のノカルジア種、回旋糸状虫、ブラジルブラストミセス、肺吸虫及びその他の肺吸虫属、パスツレラ属、アタマジラミ、コロモジラミ、フチルス・プビス（Ｐｈｔｈｉｒｕｓｐｕｂｉｓ）、百日咳菌、ペスト菌、肺炎球菌、ニューモシスチス嚢虫症、ポリオウイルス、プレボテラ属、ネグレリアのアメーバ、ＪＣウイルス、オウム病クラミジア、コクシエラ・バーネッティ、狂犬病ウイルス、ビーズチェーン大腸菌及びラット咬傷発熱スピロヘータ、呼吸器ＲＳウイルス、リノスポリジウム・セーベリ、ライノウイルス、リケッチア属、リケッチアダニ、リフトバレー熱ウイルス、ロッキー山紅斑熱リケッチア、ロタウイルス、風疹ウイルス、サルモネラ属、非定型肺炎コロナウイルス、疥癬ダニ、住血吸虫属、赤痢菌、水痘帯状疱疹ウイルス、大痘瘡又は小痘瘡、スポロトリックス・シェンキー、ブドウ球菌属、黄色ブドウ球菌、化膿連鎖球菌、糞線虫、梅毒スピロヘータ、条虫属、破傷風菌、白癬、トリコフィトン・トンズランス、白癬、エピデルモフィトン・フロッコースム、紅色白癬菌及び毛瘡白癬菌、紅色白癬菌、ホルテア・ウェルネッキ、白癬、マラセチア属、イヌ回虫や猫回虫、トキソプラズマ、旋毛虫、膣トリコモナス、鞭虫、結核菌、トゥーラホットフランシス細菌、ウレアプラズマ・ウレアリティカム、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、コレラ菌、グアナリトウイルス、西ナイルウイルス、白髪胞子菌、仮性結核菌、腸炎エルシニア、黄熱病ウイルス、ケカビ目（ムコール症）と昆虫メッシュカビ（エントモフトラ症）、緑膿菌、カンピロバクター胎児（ビブリオ）、アエロモナス細菌、エドワードシエラ属、タルダ、ペスト菌、志賀赤痢菌、赤痢菌、赤痢ソンネ、ネズミチフス菌、トレポネーマ・ペルテヌエ、トレポネーマカラテネウム、フェンセンブルグドルフェリ、ボレリア・ブルグドルフェリ、レプトスピラ出血性黄疸、ニューモシスチスカリニ、ウシ流産菌、ブタ流産菌、マルタ熱菌、マイコプラズマ属、発疹チフスリケッチア、リケッチアツツツガムシ、クラミジア属、病原性真菌（アスペルギルス・フミガーツス、カンジダ・アルビカンス、ヒストプラスマカプスラーツム）；原虫（赤痢アメーバ、膣トリコモナス、人トリコモナス、トリパノソーマガンビエンス、ローデシアトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、リーシュマニア熱帯、リーシュマニアブラジル、ニューモシスチスカリニ肺炎、三日熱マラリア原虫、熱帯熱マラリア原虫、悪性マラリア）；又は蠕虫（日本住血吸虫、マンソン住血吸虫、ビルハルツ住血吸虫と鉤虫）が含まれる。

病原性ウイルスには、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：ポックスウイルス科（Ｐｏｘｙｉｒｉｄａｅ）、ヘルペスウイルス科、アデノウイルス科、パポバウイルス科、エンテロウイルス科、ピコルナウイルス科、パルボウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、流行性耳下腺炎、麻疹、呼吸器合胞体ウイルス、風疹、アルボウイルス、ラブドウイルス、アレナウイルス科、非Ａ／非Ｂ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、コロナウイルス、ロタウイルス、腫瘍ウイルス［例えば、ＨＢＶ（肝細胞癌）、ＨＰＶ（子宮頸癌、肛門癌）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（カポジ肉腫）、ＥＢウイルス（鼻咽頭癌、バーキットリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫）、ＭＣＰｙＶ（メルケル細胞癌）、ＳＶ４０（シミアンウイルス４０）、ＨＣＶ（肝細胞癌）、ＨＴＬＶ－Ｉ（成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫）］；ウイルスによって引き起こされる免疫疾患：［例えば、ヒト免疫不全ウイルス（ＡＩＤＳ）］、ＣＮＳウイルス：［例えば、ＪＣＶ（進行性多巣性白質脳症）、ＭｅＶ（亜急性硬化性全脳炎）、ＬＣＶ（リンパ球性脈絡髄膜炎）、アルボウイルス脳炎、オルトミクソウイルスウイルス科（推定）（嗜眠性脳炎）、ＲＶ（狂犬病）、水疱性口内炎、ヘルペスウイルス性髄膜炎、ラムゼイ・ハント症候群ＩＩ型；ポリオウイルス（急性灰白髄炎、ポリオ後症候群）、ＨＴＬＶ－Ｉ（熱帯性痙性麻痺）］；サイトメガロウイルス（ＣＭＶ網膜炎、ＨＳＶ（ヘルペス性角膜炎））；心血管病ウイルス［例えばＣＢＶ（心膜炎、心筋炎）］；呼吸器系／急性鼻咽頭炎／ウイルス性肺炎：［ＥＢウイルス（ＥＢＶ感染症／伝染性単核球症）、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス（重症急性呼吸器系症候群）、オルトミクソウイルスウイルス科：インフルエンザウイルスＡ／Ｂ／Ｃ（インフルエンザ／鳥インフルエンザ）、パラミクソウイルス：ヒトパラインフルエンザウイルス（パラインフルエンザ）、ＲＳＶ（ヒト呼吸器合胞体ウイルス）、ｈＭＰＶ］；消化系ウイルス［ＭｕＶ（流行性耳下腺炎）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ性食道炎）；アデノウイルス（アデノウイルス感染）；ロタウイルス、ノロウイルス、アストロウイルス、コロナウイルス、ＨＢＶ（Ｂ型肝炎ウイルス）、ＣＢＶ、ＨＡＶ（Ａ型肝炎ウイルス）、ＨＣＶ（Ｃ型肝炎ウイルス）、ＨＤＶ（Ｄ型肝炎ウイルス）、ＨＥＶ（Ｅ型肝炎ウイルス）、ＨＧＶ（Ｇ型肝炎ウイルス）］；泌尿生殖器系ウイルス［例えば、ＢＫウイルス、ＭｕＶ（流行性耳下腺炎）］等の該病原性ウイルス疾患が含まれる。

更なる目的によれば、本願発明は、本発明の共役体及び薬学的に受け入れられる担体、希釈剤、又は賦形剤を共に含む、癌、感染症、又は自己免疫疾患を治療するための医薬組成物にも関する。癌、感染症、及び自己免疫疾患を治療するための方法は、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）又はエクスビボ（ｅｘ ｖｉｖｏ）で実行することができる。インビトロ療法の例としては、目標抗原を発現しない望ましい変異体以外の全ての細胞を死滅させるため、又は所望でない抗原を表現する変異体を死滅させるための細胞培養処理を含む。エクスビボ療法の例としては、移植（ＨＳＣＴ）の実行に先立って造血幹細胞（ＨＳＣ）を処理し、患部又は悪性細胞を殺すために、これを同一患者の体内へ戻すことを含む。例えば、癌及び自己免疫疾患の治療における自家移植に先立って、骨髄から癌細胞又はリンパ球細胞を除去するための、又は移植片対宿主病を防ぐために、移植に先立って、同種異系の骨髄又は組織からＴ細胞及び他のリンパ細胞を除去するための臨床的エキソビボ処理は、以下により実施することができる。患者又は他の個体から骨髄細胞を獲得した後、濃度範囲が約１ｐＭ～０．１ｍＭとなるように、本願発明の共役体を加えた血清含有培地で、３７℃で３０分間～約４８時間培養する。的確な濃度条件及び培養時間（＝用量）は、経験豊富な臨床医によって容易に決められる。培養終了後、骨髄細胞を血清含有培地で洗浄し、静脈内注射等の既知の方法によって人体へ戻す。骨髄細胞の獲得及び再注入治療の間に、患者が他の治療（例えば、廃絶化学療法又は全身照射）を受けている場合、処理後の骨髄細胞は、標準的な医療装置を用いた液体窒素により冷凍保存される。

本明細書に引用される出版物、特許出願、及び特許を含む全ての参考文献は、あたかも各参考文献が参照により組み込まれることが個別かつ具体的に示され、その全体が本明細書に記載されるのと同じ程度まで、参照により本明細書に組み込まれる。

本発明を説明する文脈（特に特許請求の範囲の文脈）における用語「ａ」と「ａｎ」、「ｔｈｅ」と「少なくとも１つ」及び同様の指示語の使用は、本明細書に別段の指示がある場合、又は文脈と明らかに矛盾する場合を除き、単数形と複数形の両方を包含すると解釈されるべきである。１以上の項目のリストに続いて「少なくとも１つ」という用語を使用する場合（例えば、「Ａ及びＢの少なくとも１つ」）、本明細書に別段の記載がない限り、又は文脈と明らかに矛盾しない限り、リストされた項目から選択される１つの項目（Ａ又はＢ）、又はリストされた項目の２以上の任意の組み合わせ（Ａ及びＢ）を意味すると解釈されるべきである。「含む」、「有する」、「含む」、及び「含む」という用語は、特に断りのない限り、無制限の用語（即ち、「含むがそれに限定されない」を意味する）として解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の記載は、本明細書に別段の記載がない限り、その範囲内にあるそれぞれの個別の値を個別に参照する簡略的な方法として機能することを単に意図しており、個別の各値は、あたかも本明細書に個別に記載されているかのように明細書に組み込まれる。本明細書に記載される全ての方法は、本明細書に別段の指示がない限り、又は文脈と明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実行することができる。本明細書で提供されるあらゆる例、又は例示的な表現（例えば、「等」）の使用は、単に本発明をより良く理解することを目的としており、別段の請求がない限り、本発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書の如何なる文言も、請求項に記載されていない要素を本発明の実施に必須であると示すものとして解釈されるべきではない。

本明細書では、本発明を実施するための発明者に知られている最良のモードを含めて、本発明の好ましい実施形態について説明する。これらの好ましい実施形態の変形は、前述の説明を読めば当業者には明らかになるであろう。本発明者らは、当業者がそのような変形を必要に応じて採用することを期待しており、本発明が本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施されることを意図している。従って、本発明は、適用される法律によって認められる、本明細書に添付の特許請求の範囲に記載された主題の全ての修正及び均等物を含む。更に、本明細書に別段の指示がない限り、又は文脈と明らかに矛盾しない限り、あらゆる可能な変形における上述の要素の任意の組み合わせが本発明に包含される。

以下の実施例は本発明を更に説明するものであるが、もちろん、いかなる意味においてもその範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

以下の実施例によって本願発明を更に説明するが、これら実施例は、本願の範囲を制限することを意図するものではない。以下の実施例に記載した細胞株は、特に説明のない限り、米国タイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）、ドイツのブラウンシュヴァイクにあるドイツ微生物細胞培養コレクション（ＤＭＳＺ）、又は中国科学院の上海細胞培養研究所により特定された条件に基づいて、培地中で維持した。特に説明のない限り、細胞培養試薬は全てＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社より提供された。無水溶媒は全て市販品であり、且つ窒素封入密封ボトルで貯蔵した。ＰＥＧ化合物は、中国嘉興市のＢｉｏｍａｔｒｉｋ Ｉｎｃから購入した。一部の化合物は、合成を参照していない場合、中国の医薬品開発業務受託機関（ＣＲＯ）（例：Ｗｕｘｉ Ａｐｐｔｅｃ、Ｈａｏｙｕａｎ Ｃｈｅｍｅｘｐｒｅｓｓ、Ｒａｙｂｏｗ Ｐｈａｒｍａ）によって提供された。実験動物は、ＧｅｍＰｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ（中国・ナジン）及びＳｈａｎｇｈａｉ ＳＬＡＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．（中国・上海）経由で、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｏｄｅｌ Ｍｉｃｅから購入した。Ｔ－ＤＭ１は、中国香港の薬局経由でＲｏｃｈｅから購入た。他の全ての試薬及び溶媒は、最高の基準に従って購入し、更なる精製なしで使用した。分取ＨＰＬＣによる分離は、Ｖａｒａｉｎ ＰｒｅＳｔａｒ ＨＰＬＣにより行った。ＨＰＬＣ 分析は Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０で実行された。質量スペクトルデータは、Ｗａｓｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ分離モジュール及びＡｃｑｕｉｔｙ ＴＵＶ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ Ｘｗｖｏ ＱＴＯＦで取得した。ＮＭＲスペクトルは、浙江理工大学化学科にあるＺｈｏｎｇｋｅ－ｎｉｕｊｉｎ ＷＮＭＲ－Ｉ ４００ＭＨｚ装置により記録した。化学シフト（δ）は百万分の１（ｐｐｍ）単位とし、０．００でテトラメチルシランを標準とし、結合定数（Ｊ）の単位はＨｚとした。Ｃ、Ｈ、及び／又はＮの元素分析は、浙江理工大学化学科から提供され、Ｅｌｅｍｅｎｔａｒ ＵＮＩＣＵＢＥで実施された。金属原子の定量分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ＩＣＰＯＥＳ ７３０ ＩＣＰ－ＭＳで行った。

実施例１．Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対するモノクローナル抗体の生成

Kilpatrick et al.， Hybridoma， 16(4): 381-389 (1997)に記載されているＲＩＭＭＳ免疫化レジメンに従って、生後６週齢のＢａｌＢ／ｃに、精製組換えヒト（ｒＨｕ）ＴｒｘＡ－ＢＣＭＡを４回皮下注射をした。マウスは、２～３日の間隔で１３日間かけて免疫化された。免疫化の各ラウンドでは、まずマウスをイソフルランで麻酔した。免疫原は、完全または不完全フロイントアジュバント中で乳化された。金アジュバント（Sigma-Aldrich）を複数の部位に両側に注射した。１３日目に試験採血を採取し、抗原ＥＬＩＳＡで分析した。良好な血清力価を有するマウスは、腹腔内に融合前ブーストを与えられ、１７日目に屠殺された。脾臓細胞が採取され、ポリエチレングリコール融合法(Roche Diagnostics)に従って、骨髄腫細胞株Ｐ３－Ｘ６３－Ａｇ８．６５３と融合され、安定なハイブリドーマが生成された。

抗ＢＣＭＡ特異的ハイブリドーマは、直接結合ＥＬＩＳＡでハイブリドーマ上清をスクリーニングし、続いてＢＣＭＡ発現ＲＰＭＩ－８２２６－ＢＣＭＡ細胞上でＦＡＣＳを行うことによって同定した。陽性ハイブリドーマは、インビトロでＲＰＭＩ－８２２６－ＢＣＭＡ細胞に結合し内部移行する能力について、細胞株上で発現されたＢＣＭＡへのＦＡＣＳ結合により、さらに試験した。

選別及びサブクローンの後、ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２が選択され、抗ＢＣＭＡ抗体Ｊ６Ｍ０（米国特許第９，２７３，１４１号に記載されており、本願ではベランタマブ又はＤＸＡ００９Ｂと呼ばれる）と共に、Ｅｌｉｓａアッセイによって、抗体結合親和性が決定され、その結果を図１に示す。中国典型培養物保存センター（ＣＣＴＣＣ）への寄託は、ブダペスト条約に基づいて、２０２２年６月２３日に行われた。ＣＣＴＣＣは、中国湖北省武漢市、郵便番号４３００００の武漢大学にある。ＣＣＴＣＣの寄託には、ＣＣＴＣＣ Ｃ２０２２１８８のアクセッション番号が割り当てられた。

モノクローナル抗体ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２の重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を表１に示す。

この実施例の結果は、ＢＣＭＡに対するモノクローナル抗体の産生を実証している。

実施例２．ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２のヒト化モノクローナル抗体の生成

ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２（配列番号１０）のＶＨと、ヒトＩｇＧ１ ＨＣ定常ドメイン（配列番号１２、配列番号２３によりコードされる）との融合によって構築されたキメラ抗体ｃ５Ｄ２ ＨＣ（配列番号１３）、及びＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２（配列番号１１）と、ヒトκＬＣ定常ドメイン（配列番号１４、配列番号２６によりコードされる）との融合によって構築されたキメラ抗体ｃ５Ｄ２ ＬＣ（配列番号１５）。ヒト生殖細胞系遺伝子アミノ酸を有する５Ｄ２の対応するアミノ酸の置換によって生成されたヒト化抗体ｈｕ５Ｄ２ ＨＣ（配列番号８）、ヒト生殖細胞系遺伝子アミノ酸を有する５Ｄ２の対応するアミノ酸の置換によって生成されたヒト化抗体ｈｕ５Ｄ２ ＬＣ（配列番号９）。ｈｕ５Ｄ２の親和性を図２に示す。

モノクローナル抗体ｃ５Ｄ２及びｈｕ５Ｄ２の重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を表２に示す。

実施例３．マレイミド基末端を有する細胞毒性剤と共役したＢＣＭＡモノクローナル抗体を含む抗体－薬物共役体（ＡＤＣ）を生成するトリデーショナル（ｔｒｉｄａｔｉｏｎａｌ）法

ｈｕ５Ｄ２モノクローナル抗体を、マレイミド基末端を有する細胞毒性剤と共役させた。具体的には、ＰＢＳ ｐＨ７．２、１ｍＭＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）中で、精製された抗体を、３．２～４．２モル過剰の還元剤ＴＣＥＰ（トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン）と共に、３７℃で１時間インキュベートした。その後、１０％（ｖ／ｖ）ＤＭＡ又はＤＭＳＯ中のストック溶液からの、マレイミド基末端を有する細胞毒素のペイロード約６．５～９．０当量を添加し、続いて穏やかに攪拌させながら室温で１時間から３時間インキュベートした。共役反応は、必要に応じて、４モル当量（ペイロードを超える）のＮ－アセチルシステインを添加することによってクエンチされた。インキュベーション後、１０，０００ＭＷＣＯ透析カセットを使用して、４℃、ｐＨ５．０～７．２のＰＢＳ中で２～１０回透析することにより、還元剤及び過剰なペイロード／連結体複合体を除去した。

共役方法では、０．１～１０％の凝集体が形成される場合がある。高分子凝集体、システインでクエンチされたペイロードを含む共役試薬は、例えば Thompson et al., J. Control Release, 236: 100-116 (2016) に記載されているように、セラミックヒドロキシアパタイトＩＩ型クロマトグラフィー（ＣＨＴ）を使用して除去できる。ＡＤＣは、必要に応じて、２５ｍＭヒスチジン－ＨＣｌ、７％スクロース、０．０２％ポリソルベート－２０又は８０、ｐＨ６中で製剤化された。

モノマー含量、凝集体、及び断片を決定するために、ＴＳＫｇｅｌ．ＲＴＭ．Ｇ３０００ＷＸＬカラム（東ソーバイオサイエンス、東京、日本）にロードされた１００ｍ（１００μＬ容量）の抗体又はＡＤＣを使用して、分析用サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）を実行した。移動相は、０．１Ｍ 硫酸ナトリウム、０．１Ｍ リン酸ナトリウム、及び１０％イソプロパノール、ｐＨ６．８で構成され、流速は１ｍＬ／分であり、各分析は室温で１０～４５分間実行された。疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）は、共役と薬物ロード分布を評価するために使用され、ブチル非多孔質樹脂（ＮＰＲ）カラム（４．６ｍｍ ＩＤ×３．５ｃｍ、２．５μｍ、東ソーバイオサイエンス）を使用して実行された。移動相Ａは、２５ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１．５Ｍ （ＮＨ_４）_２ＳＯ_４、ｐＨ８．０で構成された；移動相Ｂは、２５ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ及び５％イソプロパノール、ｐＨ８．０で構成された。濃度１ｍｇ／ｍＬの抗体又はＡＤＣ１００μＬをロードし、流速１ｍＬ／分、５％Ｂから１００％Ｂの勾配で、１０～３０分間かけて溶出させた。鎖特異的共役を確認するために、還元逆相クロマトグラフィー（ｒＲＰ－ＨＰＬＣ）を使用した。抗体及びＡＤＣは、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中の４２ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）を使用して、３７℃で２０分間還元された。１０μｇの還元抗体又はＡＤＣをポリマー逆相媒体（ＰＬＲＰ－Ｓ）１０００Ａカラム（２．１×５０ｍｍ）（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州サンタクララ）にロードし、８０℃、流速１ｍＬ／分で、５％Ｂから１００％Ｂ（移動相Ａ：水中の０．１％トリフルオロ酢酸；移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸）の勾配で、２０～３５分間かけて溶出させた。

重鎖及び軽鎖での共役及び薬物／抗体比（ＤＡＲ）は、Ａｇｉｌｅｎｔ ６２３０ ＴＯＦ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州サンタクララ）に接続されたＡｇｉｌｅｎｔ １２９０シリーズｕＨＰＬＣで実行される還元液体クロマトグラフィー質量分析（ｒＬＣＭＳ）によって決定された。２μｇの還元抗体又はＡＤＣをＺＯＲＢＡＸ．ＲＴＭ．上にロードし、高速分解能高解像度（ＲＲＨＤ）３００－ジフェニルカラム（２．１×５０ｍｍ、１．８μｍ）（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州サンタクララ）を使用し、２．１分後に８０％Ｂ（移動相Ａ：水中の０．１％ギ酸及び移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％ギ酸）のステップ勾配を使用して、０．５ｍＬ／分の流速で溶出させた。ポジティブ飛行時間型ＭＳスキャンを取得し、ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州サンタクララ）を使用してデータ収集及び処理を実行した。

実施例４．ＢＣＭＡ発現細胞株の作製方法

安定した細胞株は、全長ＢＣＭＡクローン又はＧＦＰタンパク質を共発現する空のベクターのいずれかを、ＲＰＭＩ－８２２６細胞にトランスフェクトすることによって開発された。フローサイトメトリーにより、トランスフェクトされたＢＣＭＡ（ＲＰＭＩ－８２２６－ＢＣＭＡ）の表面でのＢＣＭＡの陽性発現が確認された。これらの細胞株は、その後、クローン化されたＢＣＭＡ抗体の特異性を確認するためのツールとして使用された。

実施例５．可溶性および膜結合型ＢＣＭＡに対する、本明細書に記載のモノクローナルＢＣＭＡ抗体及びＡＤＣの結合親和性

ＢＣＭＡ－Ａ２－６Ｈ４－５Ｄ２、ｈｕ５Ｄ２、及びｃ５Ｄ２の可溶性ＢＣＭＡへの結合は、Ｅｌｉｓａアッセイを使用して決定した。Ｅｌｉｓａアッセイは、３７℃で１時間、１μｇ／ｍｌの可溶性ＢＣＭＡ（５０μＬ／ウェル）でコーティングし、その後、ＰＢＳ＋２％ＢＳＡでブロッキングすることで行った。一定範囲の抗体濃度を希釈し、プレコートしたＥｌｉｓａプレートに添加して、３７℃で１時間インキュベートし、続いてＰＢＳＴ洗浄（ＢｉｏＴｅｋ ４０５）を３回行った後、５０μＬ／ウェルで、ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆａｂ特異的）－ペルオキシダーゼ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）（１：２００００希釈）を、検出のために添加した。検出前に、プレートをＰＢＳＴで３回洗浄し、その後、ＴＭＢを添加し、２Ｍ Ｈ_２ＳＯ_４の添加により停止した。この実験の結果を図２に示す。

ｈｕ５Ｄ２、ｃ５Ｄ２、及びｈｕ５Ｄ２－ｔｕｂ１９６の膜結合型ヒトＢＣＭＡへの結合を、ＢＣＭＡを内因的に発現する多発性骨髄腫細胞株（ＮＣＩ－Ｈ９２９）におけるフローサイトメトリーを使用して評価した。結合アッセイは、抗ＢＣＭＡ抗体を２００，０００細胞と４℃で３０分間インキュベートし、その後ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ（ＦＡＣＳ緩衝液）で２回洗浄することによって実施した。抗体濃度の範囲は、１１点の４倍希釈系列を使用して評価した。次いで、細胞を、５μｇ／ｍＬのヤギ抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ二次抗体、ＰＥ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と共に４℃でインキュベートし、続いてＰＢＳ＋２％ＦＢＳで２回洗浄した。細胞を２００μＬのＰＢＳ＋２％ＦＢＳに再懸濁した。

生存単一細胞の蛍光は、Ｇｕａｖａ ｅａｓｙＣｙｔｅ ＨＴ サイトメーターを使用して測定した。平均蛍光強度値を使用して結合割合を決定し、ＥＣ５０をＰｒｉｓｍソフトウェアを使用して決定した。この実験の結果を図３に示す。

実施例６．抗体－薬物共役体を使用して、インビトロで多発性骨髄腫細胞を死滅させる方法

化合物３２２又は３９０等のチューブリシン類縁体と共役したｈｕ５Ｄ２又はその親和性最適化クローンを含む抗体－薬物共役体による多発性骨髄腫及び形質細胞性白血病細胞株の死滅を、ＣＣＫ８キット（同仁堂研究所、日本）で推奨されているプロトコールを使用して、インビトロで評価した。簡単に説明すると、１８０μＬ ＲＰＭＩ＋１０％ ＦＢＳ中の５０００個の細胞を、９６ウェルプレートの内側のウェルに加えた。以下のＢＣＭＡ発現細胞株について試験した：ＲＰＭＩ－８２２６－ＢＣＭＡ 、ＮＣＩ－Ｈ９２９、ＭＭ．１Ｓ、及びＪｕｒｋａｔも試験した。抗体－薬物共役体を、ＲＰＭＩ＋１０％ ＦＢＳで１０倍ストック（１００μｇ／ｍＬ）に希釈した。次いで、治療薬をＲＰＭＩ＋１０％ ＦＢＳで１：１０に連続希釈した。このシリーズの２０μＬを３つずつ細胞に添加すると、最高濃度の１０μｇ／ｍＬから最低濃度の０ｖｇ／ｍＬまでの範囲の抗体－薬物共役体の８点の用量曲線が得られた。プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で９６時間インキュベートした。インキュベーション期間の終わりに、１０μＬの基質溶液を各ウェルに添加した。ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ｉ３ｘ プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ，ＵＳＡ）を使用して、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。データをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍｏｒ Ｅｘｃｅｌソフトウェアを使用して分析及びグラフ化し、５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）を決定した。この実験の結果を、図４Ａ、４Ｂ、４Ｃ、４Ｄに示す。

実施例７．ＬＣ－ＭＳによる、ＢＣＭＡ抗体のグリコシル化部位分析

サンプル情報：組換えヒト化抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体（ＤＸＡ００９ ＤＳ）、バッチ番号は００９Ａ２２０１Ｂ（本願の出願人であるハンジョウ ＤＡＣ バイオテクノロジー Ｃｏ．，Ｌｔｄ．が製造）。
サンプル調製：アスパラギンの位置にグリカンが結合した糖ペプチドＥＥＱＹＮＳＴＹＲ（配列番号３４）。組換えヒト化抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体（ＤＸＡ００９ ＤＳ、バッチ番号は００９Ａ２２０１Ｂ）を６Ｍ尿素、１０ｍＭジチオスレイトールで５６℃で約４０分間、変性及び還元し、アルキル化を行い（約３０ｍＭヨードアセトアミド、暗所、室温で４０分間）、５０ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ_３で希釈し、トリプシンで消化した（１／５０、酵素／基質重量比、４時間、３７℃）。

糖ペプチドの質量と応答を表３に示す。糖ペプチド種（Ｍａｎ５、Ｇ０Ｆ－ＧｌｃＮＡｃ、Ｇ０、Ｇ０Ｆ、Ｇ１、Ｇ１Ｆ、及びＧ２Ｆを含む）の割合を表４に示す。糖ペプチドのＭＳ／ＭＳ娘イオン又は生成物イオンスペクトルを図５に示す（（ａ）－（ｈ））。

従って、Ｎ－グリコシドの位置は、Ａｓｎ（Ｎ）－３００で確認される。

ＵＰＬＣの条件：ＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｈ－Ｃｌａｓｓシステム；検出器：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＴＵＶ；吸収波長：２１４ｎｍ；トラップカラム：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ、２．１×１００ｍｍカラム。移動相Ａ：水中の０．１％ギ酸（ＦＡ）、移動相Ｂ：ＡＣＮ中の０．１％ギ酸（ＦＡ）；９５分間で１％から４０％、続いて１０分間で４０％から８０％、その後５分間で８０％から８０％の移動相Ｂ（０．１％ＦＡ含有ＡＣＮ）の直線勾配を使用して、流速０．２５ｍｌ／分でクロマトグラフィー分離を実行した。
ＭＳ条件：ＭＳシステム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ－Ｇ２ＸＳ Ｑ－ＴＯＦ；イオン化モード：ＥＳＩポジティブ；感度モード；データ取得：ＭＳ^Ｅ；質量範囲：ｍ／ｚ１００－２５００Ｄａ。インフォマティクス：ＵＮＩＦＩ Ｖ１．８．２．１６９ ソフトウェア（Ｗａｔｅｒｓ）を使用したデータ分析。

実施例８．ＬＣ－ＭＳによる、脱グリコシル化ＢＣＭＡ－Ｔｕｂ ＡＤＣの分子量の減少及びＤＡＲ分析

サンプル調製：５ｍＭジチオスレイトールを使用して、３７℃で約２時間、ＡＤＣ（例：（ＤＸＣ００９ ＤＰ））を還元し、続いてＰＮＧａｓｅ Ｆを使用して、３７℃で一晩、脱グリコシル化工程を行い、図６及び７に示すように、６個の断片が生成した。ＨＣ及びＬＣは、裸の形又は最大３個のペイロードを運ぶ共役形態で存在していた。各ＡＤＣ断片の質量及びＡＤＣの平均ＤＡＲを表５に示す。従来の共役ＡＤＣの平均ＤＡＲの計算には、次の式を使用した。

平均DAR=L1/(L0+L1)×2+H1/(H0+H1+H2+H3)×2+H2/(H0+H1+H2+H3)×2+
H3/(H0+H1+H2+H3)×2

方法の条件：ＵＰＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｈ－Ｃｌａｓｓシステム；検出器：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＴＵＶ；吸収波長：２８０ｎｍ；トラップカラム：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｃ４ １．７μｍ、２．１×５０ｍｍカラム。移動相Ａ：水中の０．１％ギ酸（ＦＡ）、移動相Ｂ：ＡＣＮ中の０．１％ギ酸（ＦＡ）；２分間で５％から２５％、続いて８分間で２５％から４５％、その後２分間で４５％から８５％の移動相Ｂの直線勾配を使用して、流速０．４ｍｌ／分でクロマトグラフィー分離を実行した。
ＭＳ条件：ＭＳシステム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ－Ｇ２ＸＳ Ｑ－ＴＯＦ；イオン化モード：ＥＳＩポジティブ；質量範囲：ｍ／ｚ５００－４０００Ｄａ。インフォマティクス：ＵＮＩＦＩ Ｖ１．８．２．１６９ ソフトウェア（Ｗａｔｅｒｓ）を使用したデータ分析。

実施例９．ＬＣ－ＭＳによるＢＣＭＡ－ＡＤＣの薬物結合部位分析

サンプル調製：組換えヒト化抗ＢＣＭＡモノクローナル抗体－チューブリシンＢ共役体（例：ＤＸＣ００９ＤＰ）、バッチ番号は２２０３０２５１、パックサイズは１００ｍｇ／ボトル、ハンジョウ ＤＡＣ バイオテクノロジーＣｏ．，Ｌｔｄ．によって製造された。ＡＤＣサンプルは変性及び還元され（６Ｍ尿素、１０ｍＭジチオスレイトール、５６℃、約４０分間）、アルキル化され（約３０ｍＭヨードアセトアミド、暗所、室温で４０分間）、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳで希釈し、トリプシンで消化（１／５０、酵素／基質の重量比、４時間、３７℃）。

ＡＤＣの薬物ロードペプチドを表６に示す。各ＡＤＣ断片の質量及び平均ＤＡＲを図７に示す。ＡＤＣの薬物ロードペプチドのＭＳ／ＭＳ娘イオンスペクトル又はプロダクトイオンスペクトルを図２に示す。

方法の条件：ＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｈ－Ｃｌａｓｓシステム；検出器：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＴＵＶ；吸収波長：２１４ｎｍ；トラップカラム：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｃ４ １．７μｍ、２．１×１００ｍｍカラム。移動相Ａ：水中の０．１％ギ酸（ＦＡ）、移動相Ｂ：ＡＣＮ中の０．１％ギ酸（ＦＡ）；９５分間で１％から４０％、続いて１０分間で４０％から８０％、その後５分間で８０％から８０％の移動相Ｂ（０．１％ＦＡ含有ＡＣＮ）の直線勾配を使用して、流速０．２５ｍｌ／分でクロマトグラフィー分離を実行した。
ＭＳ条件：ＭＳシステム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ－Ｇ２ＸＳ Ｑ－ＴＯＦ；イオン化モード：ＥＳＩポジティブ、感度モード；データ取得：ＭＳ^Ｅ；質量範囲：ｍ／ｚ１００－２５００Ｄａ。インフォマティクス：ＵＮＩＦＩ Ｖ１．８．２．１６９ ソフトウェア（Ｗａｔｅｒｓ）を使用したデータ分析。

実施例１０．メソ－２，３－ビス（（２，４－ジメトキシベンジル）アミノ）コハク酸（２）の合成

メソ-2，3-ジブロモコハク酸（500 g、1.80 mol）のエタノール（3.6 L）溶液に、トリメチルアミン（729 g、7.20 mol）を加え、続いて2，4-ジメトキシベンジルアミン（903 g、5.4 mol）を加えた。添加完了後、混合物を９０℃に加熱し、還流下で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、形成された固体を濾過し、エタノールですすぎ、乾燥させて、メソ-2，3-ビス(2，4-ジメトキシベンジルアミノ)コハク酸(600g、収率72%)を得た。

実施例１１．メソ－２，３－ジアミノコハク酸（３）の合成

メソ-2，3-ビス(2，4-ジメトキシベンジルアミノ)コハク酸(800g、1.78mol)のジクロロメタン(100mL)溶液を、室温で一晩、トリフルオロ酢酸(2035g、17.8mol)で処理した。混合物を濃縮し、次いで1N NaOH(6L)をゆっくりと加え、３０分間撹拌した。沈殿物を濾去し、溶液を塩酸水溶液でｐＨ５～６に調整した。得られた白色沈殿を濾過により収集し、水ですすぎ、乾燥させて、メソ-2，3-ジアミノコハク酸(217 g、収率78%)を得た。

実施例１２．メソ－２，３－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）コハク酸（４）の合成

メソ-2，3-ジアミノコハク酸(386g、2.6mol)を2N NaOH(6.5L)に溶解し、1，4-ジオキサン(2.1L)と混合した。溶液を0℃に冷却し、内部温度を５℃未満に維持するような速度でクロロギ酸ベンジル（1333g，7.8モル）を加えた。添加完了後、混合物を３時間撹拌し、０℃に温めた。室温で一晩撹拌した。反応物を水(2L)で希釈し、酢酸エチル(2×1L)で洗浄した。水層を濃塩酸で酸性化した。ｐＨ３に達するまでＨＣｌを加え、次いで酢酸エチル（３×２Ｌ）で抽出した。有機相を合わせ、水（１Ｌ）で洗浄し、無水Na2 SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン／石油エーテル（１：１）で粉砕し、濾過してメソ－２，３－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）コハク酸（900g，83％）を得た。

実施例１３；４，４’－（（２，３－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）スクシニル）ビス（アザンジイル））ジ酪酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（６）の合成

化合物４（１０ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）およびアミノ酪酸ｔｅｒｔ－ブチル塩酸塩（１１．２ｇ、５７．４ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２００ｍＬ）に、ＨＡＴＵ（３２．８ｇ、８６．３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１９ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で一晩撹拌し、水（４００ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌し、濾過し、オーブンで乾燥させて白色固体を得た（１７．７ｇ、収率＞１００％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 51 N 4 O 10計算値、699.35;実測値、699.35。

実施例１４．４，４’－（（２，３－ジアミノスクシニル）ビス（アザンジイル））ジ酪酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（７ ）の合成

化合物６（１６ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）をメタノール（２００ｍＬ）に溶解し、次いでＰｄ／Ｃ（２．０ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を再充填し、６０℃に加熱し、反応が完了するまで撹拌した。濾過および濃縮により、生成物７（９．８ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 20 H 39 N 4 O 6計算値、431.28;実測値、431.28。

実施例１５．化合物９の合成

化合物７（９．８ｇ、２２．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、エキソ－３，６－エポキシ－１，２，３，６－テトラヒドロフタル酸無水物（７．５ｇ、４５．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（６．３ｍｌ、４５．５ミリモル）を加えた。反応が完了するまで室温で撹拌し、次いで濃縮乾固して、白色泡状固体(17.3 g、収率100%)を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 51 N 4 O 14計算値、763.33;実測値、763.33。

実施例１６．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル４，４’－（（２，３－ビス（（４Ｒ，７Ｓ）－１，３－ジオキソ－１，３，３ａ，４，７，７ａ－ヘキサヒドロ－２Ｈ）-4，7-エポキシイソインドール-2-イル)スクシニル)ビス(アザンジイル))ジブチレート ( 10 ) の合成

ＤＭＦ（３００ｍＬ）に溶解した化合物９（１７．３ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣ（１３ｇ、６８．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９．２ｇ、６８．２ｍｍｏｌ）、およびＤＢＵ（１０．４ｇ、６８．２ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。混合物を６０℃に加熱し、５時間撹拌し、室温に冷却し、水（１Ｌ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を２Ｎ ＨＣｌ（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル/酢酸エチル(200mL/500mL)で粉砕し、白色固体を濾別した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムで精製して、白色泡状固体（8.2 g、収率49％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 47 N 4 O 12計算値、727.31。実測値、727.31。

実施例１７ ジ-tert-ブチル 4，4'-((2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)スクシニル)ビス(アザンジイル))ジブチレート（１１）の合成

化合物１０（８．２ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）をトルエン（８０ｍＬ）とＤＭＦ（８０ｍＬ）の混合物に溶解し、１２０℃に加熱し、還流下で４時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、３０分間以上撹拌すると、白色固体が沈殿し、次いでこれを濾過によって収集し、乾燥させて、所望の生成物を得た（３．０ｇ、収率４５％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 28 H 39 N 4 O 10計算値、591.26。実測値、591.26。

実施例１８．４，４’－（（２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）スクシニル）ビス（アザンジイル））ジ酪酸（１２）の合成

化合物１１（１．６ｇ、２．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、次いでジクロロメタンと２回共蒸発させ、残渣をジクロロメタンおよび酢酸エチル（１０ｍＬ／１０ｍＬ）で粉砕して、白色固体（１．３ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 20 H 23 N 4 O 10計算値、479.13;実測値、479.13。

実施例１９．ジベンジル（（３Ｒ，４Ｓ）－２，５－ジオキソテトラヒドロフラン－３，４－ジイル）－ジカルバメート（１３）の合成

メソ-2，3-ビス(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)コハク酸(100g、0.24mol)のAc2O(1L)溶液を90℃で6時間加熱し、冷却し、濃縮した。乾燥。残渣をトルエンと共蒸発させ、次いでアセトン（200mL）と石油エーテル（４００ｍＬ）の混合物で粉砕した。白色固体（８０ｇのジアステレオマー混合物）を収集し、ジクロロメタン（300mL）とともに一晩撹拌した。白色固体としてラセミ混合物（６１ｇ）を収集し、ラセミ/メソ混合物も母液から回収した。これを再処理して、きれいなメソ化合物（２ｇ）および他のラセミ/メソ混合物（１５ｇ）を得た。

実施例２０．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル ４，４’－（（（２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）スクシニル）ビス（アザンジイル））ジブチレート（１４）の合成

テトラヒドロフラン（１Ｌ）に溶解した化合物１３（60g，0.151モル）の溶液に、アミノ酪酸ｔｅｒｔ－ブチル塩酸塩（31g，0.151モル）を加えた。溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（42mL，0.302mmol）を加えた。反応物を室温に温め、30分間撹拌した。アミノ酪酸tert-ブチル(31g、0.151mol)、HATU(86.12g、0.226mol)およびトリエチルアミン(42mL、0.302mmol)の別の部分を加え、反応物を室温で一晩撹拌し、水(2L)で希釈し、１０分間撹拌し、濾過して白色固体（93g、収率88.13%）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 51 N 4 O 10計算値、699.35。実測値、699.35。

実施例２１．4，4'-(((2R，3R)-2，3-ジアミノスクシニル）ビス（アザンジイル））ジ酪酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（１５）の合成

化合物１４（93g，0.133モル）をメタノール（２Ｌ）に溶解し、次いでＰｄ／Ｃ（１０ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を再充填し、６０℃に加熱し、６時間撹拌した。濾過および濃縮により、生成物７（５７ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 20 H 39 N 4 O 6計算値、431.28、実測値、431.28。

実施例２２．化合物１６の合成

化合物１５（５７ｇ、０．１３ｍｏｌ）をジクロロメタン（６００ｍＬ）、エキソ－３，６－エポキシ－１，２，３，６－テトラヒドロフタル酸無水物（４６ｇ、０．２７ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３６ｍｌ、０．２７モル）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、濃縮乾固し、ジクロロメタンと共蒸発させて白色泡状固体（１００ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 51 N 4 O 14計算値、763.33;実測値、763.33。

実施例23.ジ-tert-ブチル 4，4'-(((2R，3R)-2，3-ビス((4R，7S)-1，3-ジオキソ-1，3，3a，4，7)，７ａ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）スクシニル）ビス（アザンジイル））ジブチレート（１７）の合成

化合物１６（１００ｇ、０．１３ｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１Ｌ）に、ＥＤＣ（７５ｇ、０．３９ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５３ｇ、０．３９ｍｏｌ）、およびＤＢＵ（５９ｇ、０．３９ｍｏｌ）をゆっくり加えた。混合物を６０℃に加熱し、５時間撹拌し、室温に冷却し、水（２Ｌ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を２Ｎ ＨＣｌ（３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル/酢酸エチル(200mL/500mL)で粉砕し、白色固体を濾別した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムで精製して、白色泡状固体(67 g、収率70%)を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 36 H 47 N 4 O 12計算値、727.31;実測値、727.31。

実施例２４．ジ-tert-ブチル 4，4'-(((2R，3R)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)スクシニル）ビス（アザンジイル））ジブチレート（１８）の合成

化合物１７（６７ｇ、９２ｍｍｏｌ）をトルエン（６００ｍＬ）とＤＭＦ（６０ｍＬ）の混合物に溶解し、１２０℃に加熱し、還流下で４時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、３０分間以上撹拌すると、白色固体が沈殿し、次いでこれを濾過によって収集し、乾燥させて、所望の生成物を得た（４１ｇ、収率７５％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 28 H 39 N 4 O 10計算値、591.26;実測値、591.26。

実施例２５．４，４’－（（（２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）スクシニル）ビス（アザンジイル））二酪酸( 19 ) の合成

化合物１８（４１ｇ、６９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（２００ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応物を濃縮し、次いでジクロロメタンと２回共蒸発させ、残渣をジクロロメタンおよび酢酸エチル（２００ｍＬ／２００ｍＬ）で粉砕して、白色固体（３３ｇ、収率９９％）を得た。

実施例２６．tert-ブチル(S)-(37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)グリシネート( 21 ) の合成

(S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20， 23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-酸（20、4.0 g、5.34 mmol）およびＨ－Ｇｌｙ－Ｏ^ｔＢｕ・ＨＣｌ（0.9 g、5.34 mmol）のTHF（40 mL）溶液に、HATU（3.05 g、8.01 mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（1.5 mL、10.68ミリモル）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）で精製し、化合物２１（４．１ｇ、収率８９％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 41 H 72 N 3 O 16計算値、862.48。実測値、862.48。

実施例２７．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル））グリシネート（２２）の合成

化合物２１（2.9g，3.3mmol）をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（0.3 g）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物２（２．１ｇ、収率８４％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 33 H 66 N 3 O 14計算値、728.45; 実測値728.45。

実施例２８．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（５Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－４，７、12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル) )-3，6，11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサンジオエート( 23 ) の合成

化合物１９（120mg，0.251mmol）および化合物２２（365mg，0.502mmol）のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）混合溶媒中溶液に、ＨＡＴＵ（２８６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（82μL、0.5mmol）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩を加え、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）によって精製して、化合物２３（０．３ｇ、収率６２％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 86 H 149 N 10 O 36計算値、1898.01;実測値、1898.01。

実施例２９．(5S，13S，14S，22S)-13，14-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7，12，15 20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6 、11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサン二酸( 24 ) の合成

化合物２３（０．３ｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）をギ酸（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、次いで６０℃に加熱した。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示されるように完了するまで撹拌し、次いで濃縮して、表題化合物を得た（２８０ｍｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 78 H 133 N 10 O 36計算値、1785.88。実測値1785.88。

実施例３０．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- ((2-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5、８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（２５）の合成

化合物２４（２００ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（１０８ｍｇ、０．２０４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（１１６ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（７１μＬ、０．４０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物２５（１２０ｍｇ、収率４６％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 126 H 173 F 2 N 16 O 42計算値、2620.18;実測値、2620.18。

実施例３１．tert-ブチル (S)-(S)-(37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシネート（２６）の合成

化合物２０（５ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｏ^ｔＢｕ・ＨＣｌ（１．５ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（３．８１ｇ、１０．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．８ｍｌ、１３．３５ミリモル）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）で精製し、化合物２６（３．７ｇ、収率６０％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 43 H 75 N 4 O 17計算値、919.50;実測値、919.50。

実施例３２．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン）-38-オイル)グリシルグリシネート( 27 ) の合成

化合物２６（８１９ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．１ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物２７（７００ｍｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 35 H 69 N 4 O 15計算値、785.47;実測値、785.47。

実施例33. ジ-tert-ブチル(8S，16S，17S，25S)-16，17-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7、10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン) -36-イル)-3，6，9，14，19，24，27，30-オクタアザドトリアコンタンジオアート ( 28 ) の合成

化合物１９（１８０ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）および化合物２７（６４９ｍｇ、０．８２８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）混合溶媒中溶液に、ＨＡＴＵ（４２９ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（186μL、1.13mmol)を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、水（３０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（３０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（３０ｍＬ）、およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩を加え、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）によって精製して、化合物を得た（０．４５ｇ、収率５９％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 90 H 155 N 12 O 38計算値、2012.05;実測値、2012.05。

実施例３４．(8S，16S，17S，25S)-16，17-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7，10，15 18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル) -3，6，9，14，19，24，27，30-オクタアザドトリアコンタン二酸( 29 ) の合成

化合物２８（０．３０ｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）をギ酸（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、次いで６０℃に加熱した。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示されるように完了するまで撹拌し、次いで濃縮して、表題化合物を得た（２８０ｍｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 82 H 139 N 12 O 38計算値、1899.92;実測値、1899.92。

実施例３５ (2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37-( (2-((2-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12，13 ，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバモイル)- ３１，３９－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（３０）の合成

化合物２９（１４２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（６５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（８５ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３７μＬ、０．２２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物を得た（６０ｍｇ、収率２８％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 130 H 179 F 2 N 18 O 4計算値、2734.22;実測値、2734.22。

実施例３６．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（３７－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３１，３８－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９-デカオキサ-32，39-ジアザトリテトラコンタン-43-オイル)グリシネート( 32 ) の合成

化合物２０（５．００ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－アミノブタノイル）グリシネート塩酸塩（３１、１．７１ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（３．８１ｇ、１０．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン (1.8mL、13.35mmol)を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）で精製し、化合物３２（５．４ｇ、収率８５％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C45H78N4O17計算値、947.54;実測値、947.57。

実施例３７．tert-ブチル(S)-(37-アミノ-31，38-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39-ジアザトリテトラコンタン) -43-オイル)グリシネート( 33 ) の合成

化合物３２（８１９ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．１ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物を得た（７００ｍｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 37 H 73 N 4 O 15計算値、813.50;実測値、813.50。

実施例３８．ジ-tert-ブチル(10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，9、12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン) -36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタンジオエート( 34 ) の合成

化合物１９（２４６ｍｇ、０．５１４ｍｍｏｌ）および化合物３３（１．０ｇ、１．２８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）混合溶媒中溶液に、ＨＡＴＵ（５８６ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２４５μＬ、１．５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩を加え、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）によって精製して、表題化合物を得た（０．５４ｇ、収率５１％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 94 H 163 N 12 O 38計算値、2068.11;実測値、2068.11。

実施例３９．(10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，9，12，17 20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル) -3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタン二酸（ 35）の合成

化合物３４（０．５０ｇ、０．２４２ｍｍｏｌ）をギ酸（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、次いで６０℃に加熱した。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示されるように完了するまで撹拌し、次いで濃縮して、表題化合物を得た（４７０ｍｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 86 H 147 N 12 O 38計算値、1955.99;実測値、1955.99。

実施例４０．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- ((4-((2-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12， 13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-4-オキソブチル)カルバモイル) -31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，38-ジアザドテトラコンタン-42-イル)スクシンアミド( 36 ) の合成

化合物３５（200mg，0.102mmol）およびメシル酸エキサテカン（108mg，0.204mmol）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（１１６ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（５３μＬ、０．３０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物を得た（１２０ｍｇ、収率４２％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 130 H 179 F 2 N 18 O 4計算値、2734.22;実測値、2734.22。

実施例４１．ｔｅｒｔ－ブチル（（ベンジルオキシ）カルボニル）グリシルグリシルグリシネート（３８）の合成

Ｃｂｚ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－ＯＨ（２０．３ｇ、７６．２ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｇｌｙ－Ｏ^ｔＢｕ（１０．０ｇ、７６．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、氷水浴中で０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（３４．８ｇ、９１．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３２ｍＬ、２２８．７ｍｍｏｌ）を加えた後、反応物を室温まで温め、一晩撹拌した。反応溶液を飽和食塩水で洗浄、乾燥、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ＝２０：１）で精製し、目的物２５ｇ（収率８６％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 18 H 25 N 3 O 6計算値、380.17;実測値、379.9。

実施例４２．グリシルグリシルグリシンｔｅｒｔ－ブチル（３９）の合成

化合物３８（１６．５ｇ、４３．５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３００ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（２．０ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。４時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、オフホワイトの固体（１０．２ｇ、収率９５％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 10 H 19 N 3 O 4計算値、246.14。実測値、246.14。

実施例４３．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０、２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシルグリシネート（４０）の合成

化合物２０（５．０ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）および化合物３９ （１．６７ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（３．８１ｇ、１０．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．８ｍｌ、１３．３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）で精製し、化合物４０（４．３ｇ、収率６５％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 47 H 77 N 5 O 18計算値、976.53;実測値、976.53。

実施例４４．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ）－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシルグリシネート（４１）の合成

化合物４０（１．５ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．１ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物４１（１．３ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 37 H 71 N 5 O 16計算値、842.49;実測値、842.49。

実施例４５．ジ-tert-ブチル(11S，19S，20S，28S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7、10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジオエート( 42 )の合成

化合物２０（９１１ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）および化合物４１（２２５ｍｇ、０．４７０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（５３６ｍｇ、１．４１１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２３３ｍＬ、１．４１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、その後５０ｍＬの水に注ぎ、４０ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。有機相を２０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで精製して、化合物４２を油状物として得た（６７１ｍｇ、０．３１６ｍｍｏｌ、６７％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 94 H 160 N 14 O 40計算値、2127.37;実測値、2128.16。

実施例４６．(11S，19S，20S，28S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7，10，13 ，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン- ３６－イル）－３，６，９，１２，１７，２２，２７，３０，３３，３６－デカアザオクタトリアコンタン二酸（４３）の合成

化合物４２（６７１ｍｇ、０．３１６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で処理した。８時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、化合物４３を油状物として得た（４５６ｍｇ、０．２２６ｍｍｏｌ、７１％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 86 H 144 N 14 O 40計算値、2015.16;実測値、2016.09。

実施例４７．ビス（ペルフルオロフェニル）（１１Ｓ，１９Ｓ，２０Ｓ，２８Ｓ）－１９，２０－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－４，７10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１７，２２，２７，３０，３３，３６－デカアザオクタトリアコンタンジオエート（４４）の合成

化合物４３（３２３ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、ペンタフルオロフェノール（７３．８ｍｇ、０．４０１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（７６．８ｍｇ、０．４０１ｍｍｏｌ）を加えた。３時間撹拌した後、反応溶液を１０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物４４を油状物として得た（３７６ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ、９９％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 98 H 142 F 10 N 14 O 40計算値、2347.26;実測値、2348.26。

実施例４８．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- ((2-((2-((2-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，38-ジアザドテトラコンタン-42-イル)スクシンアミド（４５）の合成

化合物４４（１８８ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（８７ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（０．０５３ｍＬ、０．３２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１時間撹拌し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物４５を固体として得た（４８ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、２１％）。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 134 H 184 F 2 N 20 O 46計算値、2850.04；実測値、1426.00。

実施例４９．(S)-(S)-(37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)グリシルグリシン( 46 ) の合成

化合物２６（１２．０ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）およびギ酸（４０ｍＬ）に溶解した。３時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水で２回、ブラインで１回洗浄した。溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物４６（１０．４ｇ、収率９２％）を得た。

実施例５０．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)グリシルグリシル-L-アラニネート( 47 ) の合成

３０ｍＬのジクロロメタン中の化合物４６（２．１０ｇ，２．４３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ－Ａｌａ－Ｏ^ｔＢｕ（０．５３ｇ，２．９２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．４１ｇ，３．６５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．６３ｇ，４．８７ｍｍｏｌ）を順次添加し、反応を室温で３０分間実施した。反応溶液に水を加え、層を分離した。有機相を０．５Ｎ ＨＣｌ、０．５Ｎ ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）により精製し、適切な画分を濃縮して表題化合物を得た（１．４ｇ、収率５８％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 46 H 79 N 5 O 18計算値、991.54;実測値、991.20。

実施例５１．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシル-L-アラニネート( 48 ) の合成

化合物４７（１．４ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．１ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物４８（１．２ｇ、収率９９％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 38 H 73 N 5 O 16計算値、856.51;実測値、857.00。

実施例５２．ジ-tert-ブチル(2S，11S，19S，20S，28S，37S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル) -2，37-ジメチル-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17 、２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１７，２２，２７，３０，３３，３６－デカアザオクタトリアコンタンジオエート（４９）の合成

化合物１９（０．３１ｇ、０．６４ミリモル）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）に、化合物４８（１．２ｇ、１．４ミリモル）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）を加え、続いてＨＡＴＵ（０．７５ｇ、１．９３ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｇ、２．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１時間撹拌し、濃縮し、ジクロロメタンに溶解し、水、０．５Ｎ ＨＣｌ、０．５ＮａＨＣＯ_３、およびブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を濃縮して表題を得た。化合物（１．１ｇ、収率７９％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 96 H 164 N 14 O 40計算値、2154.12;実測値、2155.40。

実施例５３．(2S，11S，19S，20S，28S，37S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，37-ジメチル-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23， ２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１７，２２，２７，３０，３３，３６－デカアザオクタトリアコンタン二酸（５０）の合成

化合物４９（１．１ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）およびギ酸（２０ｍＬ）に溶解した。５０℃で２時間撹拌した後、反応溶液を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）で精製して、化合物５０（３００ｍｇ、収率３０％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 88 H 148 N 14 O 40計算値、2042.00;実測値、2043.2。

実施例５４．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- ((2-((2-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2， 3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2 -イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32、 ３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（５１）の合成

化合物５０（７０．０ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１ｍＬ）に、メシル酸エキサテカン（３２．０ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３９．０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）を加え、続いてジイソプロピルエチルアミン（１８ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で３０分間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製した。画分プールを合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、表題化合物を得た(57.3 mg、収率58%)。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 136 H 188 F 2 N 20 O 46計算値、2876.30;実測値、2878.10。

実施例５５．ｔｅｒｔ－ブチル（（ベンジルオキシ）カルボニル）グリシルグリシルグリシルグリシネート（５２）の合成

５０ｍＬのジクロロメタン中の化合物３９（１．９２ｇ、７．８３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ－Ａｌａ－Ｏ^ｔＢｕ（１．９６ｇ，９．４１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３．５６ｇ，９．４１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．２２ｇ，９．４１ｍｍｏｌ）を順次加え、反応物を室温で３０分間撹拌した。そして水で急冷した。相分離後、有機相を０．５Ｎ ＨＣｌ、０．５Ｎ ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物を得た(2.74 g、収率80%)。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 20 H 28 N 4 O 7計算値、437.20; 実測値、437.20。

実施例５６．グリシルグリシルグリシンｔｅｒｔ－ブチルグリシネート（５３）の合成

化合物５２（２．７４ｇ、６．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．１０ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物５３（１．９０ｇ、収率９９％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 12 H 22 N 4 O 5計算値、303.16;実測値、303.18。

実施例５７．tert-ブチル(S)-(S)-(S)-(S)-(37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14、１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシルグリシルグリシネート（５４）の合成

化合物２０（４．５ｇ、６．０１ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｏ^ｔＢｕ（１．９ｇ、６．２８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）およびＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（３．４３ｇ、 ９．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．９ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）で精製し、化合物５４（４．９ｇ、収率７９％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 47 H 81 N 6 O 19計算値、1033.55;実測値、1033.55。

実施例５８．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（Ｓ）－（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）グリシルグリシルグリシルグリシネート（５５）の合成

化合物５４（４．９ｇ、４．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．５ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物を得た（７００ｍｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 39 H 75 N 6 O 17計算値、899.51。実測値、899.51。

実施例５９．ジ-tert-ブチル(14S，22S，23S，31S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7、10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26 、２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１５，２０，２５，３０，３３，３６，３９，４２－ドデカアザテトラテトラコンタンジオエート（５６）の合成

化合物１９（１．０ｇ、２．０９ｍｍｏｌ）および化合物５５（３．７ｇ、４．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）およびＤＭＦ（１５ｍＬ）混合溶媒中溶液に、ＨＡＴＵ（２．３８ｍｇ、６．２７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ、８．３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩を加え、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝１００／０から２０／１から１０／１）によって精製して、表題化合物を得た（３．２ｇ、収率６８％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 98 H 167 N 16 O 42計算値、2240.13;実測値、2240.13。

実施例６０．(14S，22S，23S，31S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ- ３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１５，２０，２５，３０，３３，３６，３９，４２－ドデカアザテトラテトラコンタン二酸（５７）の合成

化合物５６（３．２ｇ、１．４ｍｍｏｌ）をギ酸（２０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、次いで６０℃に加熱した。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示されるように完了するまで撹拌し、次いで濃縮して、表題化合物を得た（６９０ｍｇ、収率２２％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 90 H 151 N 16 O 42計算値、2128.01;実測値、2128.01。

実施例６１．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- ((2-((2-((2-((2-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2， 3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，38-ジアザドテトラコンタン-42-イル)スクシンアミド( 58a ) の合成

化合物５７（４２０ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（２０９ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（２５５ｍｇ、０．５９２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１３０μＬ、０．７８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物を得た（２７４ｍｇ、収率４７％）。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 138 H 191 F 2 N 22 O 48計算値、2962.31；実測値、2962.31。

実施例６２．ｔｅｒｔ－ブチル（（ベンジルオキシ）カルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（５９）の合成

Ｃｂｚ－Ａｌａ－ＯＨ（１５．０ｇ、６７．１ｍｍｏｌ）及びＨ－Ａｌａ－Ｏ^ｔＢｕＨＣｌ（１２．３ｇ、６７．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン (100 mL) に溶解し、０℃に冷却し、EDC (25.7 g、134 mmol)を加え、続いてジイソプロピルエチルアミン（１８．０ｇ、１３４ｍｍｏｌ）を滴下した。約３０分間撹拌した後、反応物を水１００ｍＬ、ブライン１００ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラムで精製し、石油エーテルおよび酢酸エチルで溶出して、無色の液体を得た（１９．２ｇ、収率８１％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 18 H 27 N 2 O 5計算値、351.18;実測値、351.18

実施例６３．（（ベンジルオキシ）カルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニン（６０）の合成

化合物５９（５．０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、２０ｍＬのトリフルオロ酢酸で室温で４時間処理し、濃縮乾固し、５０ｍＬのジクロロメタンと共蒸発させ、濃縮乾固し、酢酸エチル／石油エーテルで洗浄し、濾過し、乾燥させて、白色固体を得た（３．６ｇ、収率８４％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 14 H 19 N 2 O 5計算値、295.12;実測値、295.12。

実施例６４．Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６１）の合成

化合物５９（１０．０ｇ、２９．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８０ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．１ｇ）を加えた。反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、次いで水素バルーン下、室温で４時間、および４５～５０℃で２時間撹拌し、次いで濾過し、濃縮乾固した。酢酸エチル中の２Ｍ ＨＣｌを加え、溶液を蒸発乾固させて、化合物６１を白色固体として得た（５．８ｇ、収率８０％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 10 H 21 N 2 O 3計算値、217.15。実測値、217.15。

実施例６５．ｔｅｒｔ－ブチル（（ベンジルオキシ）カルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（６２）の合成

化合物６０（３．０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）および化合物６１（３．０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、これにＥＤＣ（３．９１ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．６７ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で１時間撹拌し、濾過し、濃縮して、灰色の固体（５．０ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 24 H 37 N 4 O 7計算値、493.26;実測値、493.26。

実施例６６．Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネートｔｅｒｔ－ブチル（６３）の合成

粗化合物６２（５．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）をメタノール（１６０ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．１ｇ）を加えた。反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、次いで水素バルーン下、室温で１時間撹拌し、濾過し、濃縮乾固して油を得た（３．０ｇ、収率８２％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 16 H 31 N 4 O 5計算値、359.22;実測値、359.22。

実施例６７．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-アラニル-L-アラニル-L-アラニル-L-アラニネート（ 64 ）の合成

化合物６３（１．８ｇ、２．４０４ｍｍｏｌ）および化合物２０（1.0g，2.874mmol）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（1.36g，3.592mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（0.7g，4.789mmol）を加えた。反応物を室温で１時間撹拌し、濃縮し、水２０ｍＬおよびジクロロメタン２５ｍＬで希釈し、分離した有機相を５％Ｎａ_２ＣＯ_３、１Ｍ ＨＣｌで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固し、分取ＨＰＬＣにより精製して、無色の液体を得た（１．５ｇ、収率５７％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 51 H 89 N 6 O 19計算値、1089.61。実測値、1089.61。

実施例６８．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル））－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（６５）の合成

化合物６４（１．０ｇ、０．９１８ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２３ｇ）を加え、反応フラスコを３回真空にして水素を再充填し、次いで、水素バルーン下、室温で２時間撹拌し、濾過し、濃縮乾固して油１０（０．９ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 43 H 83 N 6 O 17計算値、955.57。実測値、955.57。

実施例６９．ジ-tert-ブチル(2S，5S，8S，11S，14S，22S，23S，31S，34S，37S，40S，43S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，11，34，37，40，43-オクタメチル-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35 、38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3、６，９，１２，１５，２０，２５，３０，３３，３６，３９，４２－ドデカアザテトラテトラコンタンジオエート（６６）の合成

化合物１９（２０４．９ｍｇ、０．４２８ｍｍｏｌ）および化合物６５（８８０ｍｇ、０．９２１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（４８５ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２１６．５ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で約３０分間撹拌し、濃縮し、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈し、３０ｍＬのブラインで洗浄した。水相を１００ｍＬのジクロロメタンで２回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固して、無色の油を得た(985 mg、収率100%)。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 106 H 183 N 16 O 42計算値、2352.26;実測値、2352.26。

実施例７０．(2S，5S，8S，11S，14S，22S，23S，31S，34S，37S，40S，43S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-2，5，8，11，34，37，40，43-オクタメチル-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12 、15，20，25，30，33，36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタン二酸（ 67 ）の合成

化合物66 (985 mg、0.419 mmol) をジクロロメタン (10 mL) および 20 mL のギ酸に溶解し、55～60℃で 3 時間反応させ、濃縮乾固し、分取 HPLC で精製して、無色の油を得た（０．６ｇ、収率６４％）。MS-ESI (m/z): [M + H]+ C 98 H 167 N 16 O 42計算値、2240.13。実測値、2240.13。

実施例７１．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- (((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2- b]キノリン-1-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル）カルバモイル）－３１，３９－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（６８ａ）； (2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37-(((4S， 7S，10S，13S)-1-((S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-9-メトキシ-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[ 3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-11-イル)-4，7，10-トリメチル-3，6，9，12-テトラオキソ-2，5，8，11 -テトラアザテトラデカン-13-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，38-ジアザドテトラコンタン-42-イル)スクシンアミド（６８ｂ）； (2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37-(( S )-1-(((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-(4-(((S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-9 -メトキシ-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-11-イル)メチル)ピペラジン-1-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバモイル)- ３１，３９－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（６８ｃ）の合成

化合物６７（２０２．２ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１１０．３ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４６．５ｍｇ、０．３６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、それぞれメシル酸エキサテカン（９８．５ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）-11-(アミノメチル)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-9-メトキシ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-3、 14(4H，12H)-ジオン、HCl塩 (86.2 mg、0.187 mmol)、または(S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-9-メトキシ-11-(ピペラジン-1-イルメチル)-1H -ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-3，14(4H，12H)-ジオン、HCl塩 (98.8 mg、0.186 mmol)をそれぞれ加えた。反応物を室温で約３時間撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥して、それぞれ化合物６８ａを淡黄色固体として（１８９．１ｍｇ、収率６７％）、 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 146 H 207 F 2 N 22 O 48計算値、3074.73;実測値、3074.73; ６８ｂを淡黄色固体として（１９２．２ｍｇ、収率７０％）、 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 142 H 203 F 2 N 22 O 50計算値、3054.40。実測値、3054.90;または６８ｃを淡黄色固体としてそれぞれ得た（２０５．８ｍｇ、収率７１％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 150 H 217 F 2 N 24 O 50計算値、3192.51;実測値、3192.95;。

実施例７２．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（１０Ｓ，１８Ｓ，１９Ｓ，２７Ｓ）－１８，１９－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－1-イル)-4，9，12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26 ，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン)) (4R，4'R)-ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタノエート) ( 70 ) の合成

化合物３５（７２０ｍｇ、０．３６８ｍｍｏｌ）および（Ｒ）－５－（３－アミノ－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６９、３５０ｍｇ、０．９２０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、これにＥＤＣＩ（２１１ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０．５時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（H2O中５７％ＭｅＣＮ）により精製して、化合物７０を油状物として得た（２００ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ、２０．２７％）。 MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 126 H 206 N 16 O 46計算値、1342.05;実測値、1341.91。

実施例７３．(4R，4'R)-5，5'-((((10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，9，12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-アミノペンタン酸) ( 71 ) の合成

化合物７０（２００ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加え、反応物を一晩撹拌し、その後濃縮し、ジクロロメタンと２回共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させた。化合物７１を油状物として得た(176.69mg，0.075mmol，100.00％) MS-ESI(m/z)：[M+2H] 2+C108H174N16O42計算値、1184.60；実測値、1185.17。

実施例７４．(4R，4'R)-5，5'-((((10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，9，12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20， 23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13 -トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)ペンタン酸)( 72a );及び (R，R，S，S，S，4R，4'R)-5，5'-((((10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2) ，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，9，12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11， 14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタン-1，36-ジオイル)ビス(アザンジイル) ))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((3S，6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル（－２，８－ジメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）ペンタン酸）（７２ｂ）の合成

化合物７１（８８ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０２５ｍＬ、０．１４９ｍｍｏｌ）に、9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキシラート（Ｔｕｂ－１、６４ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）またはペルフルオロフェニル２－（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｒ，１１Ｒ）－６－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－３，９－ジイソプロピル－２，８－ジメチル－４，７，１３－トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキシレート（Ｔｕｂ－３、６７ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）をそれぞれ加えた。反応物を４時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物７２ａを固体として得て（７２ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、５７％）。 MS-ESI (m/z): [M + 3H] 3+ C 158 H 254 N 24 O 52 S 2計算値、1128.91。実測値、１１２９．７２、または化合物７２ｂを固体として得た（６９ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ、５４％）。MS-ESI (m/z): [M + 3H] 3+ C 160 H 261 N 24 O 52 S 2計算値、1138.26，実測値、1139.15。

実施例７５．(4R，4'R)-5，5'-((((10S，18S，19S，27S)-18，19-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-) 1-イル)-4，9，12，17，20，25，28，33-オクタオキソ-10，27-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26 ，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，8，11，16，21，26，29，34-オクタアザヘキサトリアコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((3S，6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4，7-ジオキソ-12-オキサ－２，５，８－トリアザトリデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）ペンタン酸）（７３）の合成

化合物７１（８３．７５ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）およびペルフルオロフェニル２－（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｒ，１１Ｒ）－６－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－３，９－ジイソプロピル－２，８－ジメチル－４、 7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキシレート( Tub- 2、60 mg、0.088 mmol)をDMF (1.5 mL)に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン(0.023 mL、 ０．１４１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２時間撹拌し、分取ＨＰＬＣで精製して固体の化合物７３（５４ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、４５％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + 3H] 3+ C 158 H 258 N 24 O 50 S 2計算値、1120.68;実測値、1120.48。

実施例７６．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-バリル-L-アラニネート( 74 ) の合成

化合物２０（８．０ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｏ^ｔＢｕ（２．７ｇ，１０．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（５．４ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（２．８ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）で精製し、表題化合物９．４ｇ（収率９０％）を得た。MS m/z: 976.1 ([M+H]+)。

実施例７７．((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-バリル-L-アラニン( 75 ) の合成

化合物７４（9.4g，9.6mmol）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）で室温で１時間処理した。反応溶液を濃縮してトリフルオロ酢酸の大部分を除去し、２００ｍＬのジクロロメタンで希釈し、溶液をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、８．１ｇの表題化合物を収率８２%で得た。MS m/z: 919.9 ([M + H] + )。

実施例７８．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（（Ｓ）－３７－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３、２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－バリル－Ｌ－アラニネート（７６）の合成

化合物７５（８．１ｇ、８．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２０ｍＬ）に溶解し、ＥＤＣＩ（６．１ｇ、３２ｍｍｏｌ）およびＮＨＳ（２．５ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、反応物を０℃で撹拌した。１時間反応させた後、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、８．１ｇの表題化合物を得た（収率９１％）。MS m/z: 1017.1([M + H] + )。

実施例７９．(2S，4R)-5-(3-((37S，40S，43S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41 -トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル) )アミノ)-2-メチルペンタン酸( 78 ) の合成

化合物７６（８．１ｇ、７．９ｍｍｏｌ）および（２Ｓ，４Ｒ）－５－（３－アミノ－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－メチルペンタン酸（７７、２．７ｇ、７．９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶解し、５０℃に加熱し、一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）で精製して、８．０ｇの表題化合物を得た（収率８２％）。 MS m/z: 1240.1([M + H] + )。

実施例８０．(2S，4R)-5-(3-((37S，40S，43S)-37-アミノ-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8、11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸( 79 ) の合成

化合物７８（８．０ｇ、６．４ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１００ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１０重量％、２ｇ）を加え、反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、５０℃で４時間加熱した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、６．８ｇの表題化合物を得た（収率９６％）。 MS m/z: 1106.1([M + H] + )。

実施例８１．ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）４，４’－（（（２Ｓ，３Ｓ）－２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－））ピロール-1-イル)スクシニル)ビス(アザンジイル))ジブチレート ( 80 ) の合成

化合物１９（２．４０ｇ、５．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解し、ＥＤＣＩ（2.86g，15mmol）およびＮＨＳ（1.41g，12mmol)）を０℃で加え、反応物を０℃で１時間撹拌し、その後濃縮した。残渣をジクロロメタンで希釈し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、３．１９ｇの表題化合物を得た（収率９５％）。

実施例８２．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2 ，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ- 8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19 、２４，２７，３０－オクタアザドトリアコンタンジイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－メチルペンタン酸）（８１）の合成

化合物８０（４００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および化合物７９（１．３ｇ、１．２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解し、５０℃に加熱し、一晩撹拌した。反応溶液を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥後に６７０ｍｇの表題化合物を得た（収率４２％）。MS: m/z=1328.0[1/2M+H+]。

実施例８３．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2 ，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ- 8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19 、２４，２７，３０－オクタアザドトリアコンタンジイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－アミノ－２－メチルペンタン酸）（８２）の合成

化合物８１（６７０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）とともに室温で１時間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥後に５００ｍｇの表題化合物を得た（収率８０％）。 MS m/z: 1227.1([M + 2H] 2+ )。

実施例８４．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2 ，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ- 8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19 ，24，27，30-オクタアザドトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)- 2-メチルペンタン酸) ( 83 )の合成

化合物８２（２００ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（１２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（３０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応溶液を分取ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥後に５０ｍｇの生成物を得た（収率１８％）。MS m/z: 1736.1([M + 2H] 2+ )。

実施例８５．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－５－（３－（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８４）の合成

Cbz-Gly-OH(2.09g、10.0mmol)をジクロロメタン(150mL)に溶解し、化合物69 (4.19g、11.0mmol)およびEDCI(3.83g、20.0mmol)を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラム（20％-50％EA/PE）で精製して、化合物８４を得た（４．８８g、収率８５％）。

実施例８６．（Ｒ）－５－（３－（２－アミノアセトアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８５）の合成

化合物８４（１．４４ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％湿潤、０．３ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を３回再充填し、次いで水素バルーン下で６時間撹拌し、濾過し、濃縮し、５０ｍＬのジクロロメタンと共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させて、化合物８５を得た（０．９ｇ、収率８２％）。

実施例８７．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（１１Ｓ，１９Ｓ，２０Ｓ，２８Ｓ）－１９，２０－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－）） 1-イル)-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20 ，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ) -3，1-フェニレン))(4R，4'R)-ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタン酸) ( 86 ) の合成

１００ｍＬの一口反応フラスコ中で、化合物２９ （８４０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で磁気撹拌し、次に化合物８５（３９１ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（３６２ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室温で１時間実施し、次いでブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物８６（２４４ｍｇ、収率２０％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 126 H 204 N 18 O 48計算値、1370.55。実測値、1370.56。

実施例８８．(4R，4'R)-5，5'-((((11S，19S，20S，28S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14， 17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－アミノペンタン酸）（８７）の合成

１００ｍＬの一口反応フラスコ中で、化合物８６（２４４ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（８ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（８ｍＬ）を室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、オイルポンプに載せて化合物８７を得、これをさらに精製せずに使用した（収率１００％と仮定した。）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 108 H 172 N 18 O 44計算値、1214.33;実測値、1214.02。

実施例８９．(4R，4'R)-5，5'-((((11S，19S，20S，28S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14， 17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス( 4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8 （－テトラメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）ペンタン酸）（８８）の合成

１００ｍＬの一口反応フラスコ中で、化合物８７（前工程からの粗生成物、０．０８９ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１(128mg，0.185mmol)のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（128mg、0.990mmol）を滴下した。室温で５時間撹拌した後、反応物を減圧下で濃縮した。残渣を１０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、０．２ｍＬのギ酸を滴下し、混合物を濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物８８（４０ｍｇ、収率１３％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 158 H 252 N 26 O 54 S 2計算値、1723.00。実測値、1722.84。

実施例９０．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（１４Ｓ，２２Ｓ，２３Ｓ，３１Ｓ）－２２，２３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－1-イル)-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14 、17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，15，20，25，30，33，36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))(4R，4'R)-ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタンノエート) (89 ) の合成

化合物43 (350 mg、0.17 mmol)および化合物85 (170 mg、0.38 mmol)のジクロロメタン(5 mL)溶液にEDCI (100 mg、0.52 mmol)を加え、反応物を室温で2時間撹拌した。LCMSは反応の完了を示した。そして、反応溶液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨを含む水）により精製して、１７０ｍｇの表題化合物を得た（収率３４％）。

実施例９１．(4R，4'R)-5，5'-((((14S，22S，23S，31S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8， 11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，15，20，25，30，33，36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-アミノペンタン酸) ( 90 ) の合成

化合物８９（１７０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）と室温で２時間反応させた。反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨを含む水）により精製して、１４０ｍｇの表題化合物を得た。(収率93%)。 MS m/z: 1271.0 ([M + 2H] 2+ )。

実施例９２：(4R，4'R)-5，5'-((((14S，22S，23S，31S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-)ピロール-1-イル)-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11 、14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，15，20，25，30，33，36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル- ２，３，３，８－テトラメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）ペンタン酸）（９１）の合成

化合物９０（１４０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（９５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、次いでＤＩＥＡ（２０ｍｇ）を溶液に加え、室温で１時間撹拌した。ＬＣＭＳは反応の完了を示した。そして、反応溶液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨを含む水）により精製して、１５０ｍｇの表題化合物を得た（収率７５％）。 MS m/z: 1780.0 ([M + 2H] 2+ )。

実施例９３．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（１３Ｓ，２１Ｓ，２２Ｓ，３０Ｓ）－２１，２２－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－４，７，12，15，20，23，28，31，36，39-デカオキソ-13，30-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，11，14，19，24，29，32，37，40-デカアザドテトラコンタンジオエート( 92 ) の合成

化合物３５（８７０ｍｇ、０．４４５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、ペンタフルオロフェノール（２４５ｍｇ、１．３３４ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（２２４ｍｇ、１．７７９ｍｍｏｌ）を加えた。１時間撹拌した後、Ｈ－Ｇｌｙ－Ｏ^ｔＢｕ・ＨＣｌ（１６４ｍｇ、０．９７８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２９４ｍＬ、１．７７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２５分間撹拌し、次いで２０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して化合物９２を油として得た（９７０ｍｇ、０．４４４ｍｍｏｌ、９９％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 98 H 168 N 14 O 40計算値、2183.48;実測値、2185.45。

実施例９４．(13S，21S，22S，30S)-21，22-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4，7，12，15 20，23，28，31，36，39-デカオキソ-13，30-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン- ３６－イル）－３，６，１１，１４，１９，２４，２９，３２，３７，４０－デカアザドテトラコンタン二酸（９３）の合成

化合物９２（０．９７ｇ、０．４４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で処理した。反応溶液を一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、油を得た（６３６ｍｇ、０．３０７ｍｍｏｌ、６９％）。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 90 H 152 N 14 O 40計算値、2071.26;実測値、2071.72。

実施例９５．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（１６Ｓ，２４Ｓ，２５Ｓ，３３Ｓ）－２４，２５－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－1-イル)-4，7，10，15，18，23，26，31，34，39，42，45-ドデカオキソ-16，33-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14 、17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，17，22，27，32，35，40，43，46-ドデカアザオクタテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))(4R，4'R)-ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタン酸) (94 ) の合成

化合物９３（６３６ｍｇ、０．３０７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、化合物８５（２９６ｍｇ、０．６７６ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（１７７ｍｇ、０．９２２ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応混合物を２０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物９４を油状物として得た（２６３ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ、２９％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 134 H 218 N 20 O 50計算値、1456.15。実測値、1455.84。

実施例９６．(4R，4'R)-5，5'-((((16S，24S，25S，33S)-24，25-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，7，10，15，18，23，26，31，34，39，42，45-ドデカオキソ-16，33-ビス(31-オキソ-2，5，8， 11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，17，22，27，32，35，40，43，46-ドデカアザオクタテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-アミノペンタン酸) ( 95 ) の合成

化合物９４（２６３ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（６ｍＬ）で処理した。反応物を５時間撹拌し、濃縮乾固した。化合物９５を油として得た（２３４ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ、９９％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 116 H 186 N 20 O 46計算値、1299.93;実測値、1299.77。

実施例９７．(4R，4'R)-5，5'-((((16S，24S，25S，33S)-24，25-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)-4，7，10，15，18，23，26，31，34，39，42，45-ドデカオキソ-16，33-ビス(31-オキソ-2，5，8， 11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，17，22，27，32，35，40，43，46-ドデカアザオクタテトラコンタンジオイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((3S，6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3 、９－ジイソプロピル－２，８－ジメチル－４，７－ジオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザトリデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）ペンタン酸）（９６）の合成

化合物９５（２３４ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－２（１５２ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．０６０ｍＬ、０．３６０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を５時間撹拌し、そしてギ酸で中和した。混合物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物９６を固体として得た（１００ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ、３１％）。MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 166 H 270 N 28 O 54 S 2計算値、1794.63。実測値、1794.83。

実施例９８．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，１３Ｓ，２１Ｓ，２２Ｓ，３０Ｓ，４１Ｓ）－２１，２２－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）-2，41-ジメチル-4，7，12，15，20，23，28，31，36，39-デカオキソ-13，30-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17 、２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，１１，１４，１９，２４，２９，３２，３７，４０－デカアザドテトラコンタンジオエート（９７）の合成

化合物３５（８２７ｍｇ、０．４２３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、ペンタフルオロフェノール（２３３．４６ｍｇ、１．２６８ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（２１３．４１ｍｇ、１．６９１ｍｍｏｌ）を加えた。１時間撹拌した後、Ｈ－Ａｌａ－ＯｔＢｕ・ＨＣｌ（１６９ｍｇ、０．９３０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２８０ｍＬ、１．６９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１時間撹拌し、次いで２０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、化合物９７を油として得た（９３４ｍｇ、０．４２３ｍｍｏｌ、９９．９４％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 100 H 172 N 14 O 40計算値、2211.53;実測値、2212.50。

実施例９９；（２Ｓ，１３Ｓ，２１Ｓ，２２Ｓ，３０Ｓ，４１Ｓ）－２１，２２－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－２，４１－ジメチル－４，７，１２，１５，２０，２３，２８，３１，３６，３９－デカオキソ－１３，３０－ビス（３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，１１，１４，１９，２４，２９，３２，３７，４０－デカアザドテトラコンタン二酸（９８）の合成。

化合物９７（０．９３ｇ、０．４２１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で一晩処理した。反応溶液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物９８を油状物として得た（６９５ｍｇ、０．３３１ｍｍｏｌ、７９％）。MS-ESI (m/z): [M + H]⁺ C₉₂H₁₅₆N₁₄O₄₀計算値、2099.32;実測値、2100.87。

実施例１００；ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（２Ｓ，５Ｓ，１６Ｓ，２４Ｓ，２５Ｓ，３３Ｓ，４４Ｓ，４７Ｓ）－２４，２５－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－２，５，４４，４７－テトラメチル－４，７，１０，１５，１８，２３，２６，３１，３４，３９，４２，４５－ドデカオキソ－１６，３３－ビス（３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１４，１７，２２，２７，３２，３５，４０，４３，４６－ドデカアザオクタテトラコンタンジイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））（４Ｒ，４’Ｒ）－ビス（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタノエート）（１００）の合成

化合物９８（６９５ｍｇ、０．３３１ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－５－（３－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸（９９、３２９ｍｇ、０．７２９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、ＥＤＣＩ（１９０ｍｇ、０．９９４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１時間撹拌し、次いで２０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物１００を油状物として得た（２３１ｍｇ、０．０７６ｍｏｌ、２３．５２％）。MS-ESI(m/z)：[M+2H]²⁺C₁₃₈H₂₂₆N₂₀O₅₀ 計算値、1484.21; 実測値、1484.44。

実施例１０１；（４Ｒ，４’Ｒ）－５，５’－（（（（２Ｓ，５Ｓ，１６Ｓ，２４Ｓ，２５Ｓ，３３Ｓ，４４Ｓ，４７Ｓ）－２４，２５－ビス（２，５－ジオキソ）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－２，５，４４，４７－テトラメチル－４，７，１０，１５，１８，２３，２６，３１，３４，３９，４２，４５－ドデカオキソ－１６，３３－ビス（３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１４，１７，２２，２７，３２，３５，４０，４３，４６－ドデカアザオクタテトラコンタンジオイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－アミノペンタン酸）（１０１）の合成

化合物１００（２３１ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）で処理した。反応物を３時間撹拌し、次いで濃縮し、ジクロロメタンと２回共蒸発させた。化合物１０１を油として得た（２０６ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ、９９％）。 MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 120 H 194 N 20 O 46計算値、1327.98;実測値、1327.73。

実施例１０２．(4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，16S，24S，25S，33S，44S，47S)-24，25-ビス(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，44，47-テトラメチル-4，7，10，15，18，23，26，31，34，39，42，45-ドデカオキソ-16，33-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14 、17，22，27，32，35，40，43，46-ドデカアザオクタテトラコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((3S，6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4，7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)ペンタン酸) ( 102 ) の合成

化合物１０１（２０６ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－２（１３１ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｍＬ、０．３１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を４時間撹拌し、ギ酸で中和し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水、０．１％ギ酸を含む）で精製して、化合物１０２を固体として得た（９０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、収率３０％） 。 MS-ESI (m/z): [M + 4H] 4+ C 170 H 278 N 28 O 54 S 2計算値、911.84。実測値、911.67。

実施例１０３．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（（ベンジルオキシ）カルボニル）－Ｌ－アラニネート（１０３）の合成

Cbz-Ala-OH (8.93 g、40 mmol) をジクロロメタン (300 mL) に溶解し、NHS (9.20 g、80 mmol) を加え、5 分間撹拌した後、EDCI (23.00 g、120 mmol) を分けて加えた。添加完了後、反応物を室温で３時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程で使用し、収率１００％とした。

実施例１０４．(2S，4R)-5-(3-((S)-2-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)プロパンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ) -2-メチルペンタン酸 ( 104 ) の合成

化合物１０３（前工程からの粗生成物、４０ｍｍｏｌ）および化合物７７（１３．５４ｇ、４０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）に溶解し、還流下で１６時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでジクロロメタンで希釈し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ／ジクロロメタン）によって精製して、化合物１０４（１３．５ｇ、収率６２％）を得た。

実施例１０５．(2S，4R)-5-(3-((S)-2-アミノプロパンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸(105)の合成

化合物１０４（３．７０ｇ、６．８０ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％湿潤、０．７ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を３回再充填し、次いで水素バルーン下で６時間撹拌し、濾過し、濃縮し、５０ｍＬのジクロロメタンと共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させて、化合物１０５（ ２．７９ｇ、収率１００％）。

実施例１０６．(2S，4R)-5-(3-((S)-2-((S)-2-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)プロパンアミド)プロパンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4 -((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸( 106 ) の合成

化合物１０５（２．７９、６．８ｍｍｏｌ）および化合物１０３（２．１８ｇ、６．８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解し、還流下で４時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでジクロロメタンで希釈し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ／ジクロロメタン）によって精製して、化合物１０６（２．２ｇ、収率５３％）を得た。

実施例１０７．(2S，4R)-5-(3-((S)-2-((S)-2-アミノプロパンアミド)プロパンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ) -2-メチルペンタン酸( 107 ) の合成

化合物１０６（１．３９ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％湿潤、０．３ｇ）を加えた。反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、次いで水素バルーン下で４時間撹拌し、濾過し、濃縮し、５０ｍＬのジクロロメタンと共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させて、化合物１０７（１．０１ｇ、収率９３％）。

実施例１０８．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-アラニネート( 108 ) の合成

H-Ala-O t Bu HCl(3.63g，2.00mmol)および化合物２０（１．４８ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（１．３６ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３３ｍＬ、２．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１時間撹拌し、濃縮し、水２０ｍＬおよびジクロロメタン２５ｍＬで希釈し、分離した有機相を５％Na2CO3 、 1M HClで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、無色の液体を得た（１．５１ｇ、収率８６％）。 MS-ESI (m/z): [M + H]+ C 42 H 73 N 3 O 16計算値、876.50。実測値、876.50。

実施例１０９．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）)-L-アラニネート ( 109 ) の合成

化合物１０８（１．５０ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）をメタノール（８０ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２０ｇ）を加え、反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、次いで、水素バルーン下、室温で２時間撹拌し、濾過し、乾燥するまで濃縮して油を得た（１．２６ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 34 H 67 N 3 O 14計算値、742.46;実測値、742.50。

実施例１１０．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）-2，25-ジメチル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29 -デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサンジオエート( 110 ) の合成

化合物１９（０．４１ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）および化合物１０９（１．２６ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（０．７８ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２８ｍＬ、２．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で約３０分間撹拌し、濃縮し、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈し、３０ｍＬのブラインで洗浄した。水相を１００ｍＬのジクロロメタンで２回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固して、無色の油（１．４４ｇ、収率８８％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 88 H 152 N 10 O 36計算値、1926.04;実測値、1926.04。

実施例１１１．(2S，5S，13S，14S，22S，25S)-13，14-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，25-ジメチル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサン二酸( 111 ) の合成

化合物１１０（１．４４ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）およびギ酸（２０ｍＬ）に溶解し、５５～６０℃で３時間撹拌し、濃縮乾固し、分取ＨＰＬＣで精製して無色油状物を得た(1.36 g、収率100%)。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 80 H 136 N 10 O 36計算値、1813.91。実測値、1813.95。

実施例１１２．ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）（２Ｓ，５Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ）-ピロール-1-イル)-2，25-ジメチル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17， ２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，１１，１６，２１，２４－ヘキサアザヘキサコサンジオエート（１１２）の合成

化合物１１１（０．５０ｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、ＮＨＳ（０．１３ｇ、１．１０３ｍｍｏｌ）を加え、５分間撹拌し、次いで、ＥＤＣＩ（０．３２ｇ、１．６５６ｍｍｏｌ）を氷水下で加えた。次いで、反応物を室温に温め、３時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して粗生成物を得、これを精製せずに直接使用した（収率１００％と仮定）。 MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 88 H 142 N 12 O 40計算値、1005.08。実測値、1004.80。

実施例１１３．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S，31S，34S，37S)-19，20 -ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21、 26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル) -3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル) )アミノ)-2-メチルペンタン酸) ( 113 ) の合成

化合物１１２（前工程からの粗生成物、０．２７６ｍｍｏｌ）および化合物１０７（０．２５ｇ、０．５２１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。濃縮後、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、化合物１１３（２６８ｍｇ、収率３５％）を得た。MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 126 H 204 N 18 O 48計算値、1370.55。実測値、1370.93。

実施例１１４．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S，31S，34S，37S)-19，20 -ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21、 26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル) -3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-アミノ-2-メチルペンタン酸）（１１４）の合成

１００ｍＬの一口反応フラスコ中で、化合物１１３（２６８ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１２ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、オイルポンプに載せて化合物１１４を得、これをさらに精製することなくそのまま使用した（収率１００％と仮定）。

実施例１１５．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S，31S，34S，37S)-19， 20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21 、26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-( (6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－２－メチルペンタン酸）（１１５）の合成

１００ｍＬの一口反応フラスコ中で、化合物１１４（前の工程からの粗生成物、０．０９８ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（１２２ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１０１ｍｇ、１０ｍＬ）を滴下した。室温で５時間撹拌した後、反応物を減圧下で濃縮した。残渣を１０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、０．２ｍＬのギ酸を滴下し、混合物を濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、表題化合物を得た（１０６ｍｇ、収率３０％）。 MS-ESI (m/z): [M + 2H] 2+ C 166 H 268 N 26 O 54 S 2計算値、1779.11;実測値、1779.40。

実施例１１６．tert-ブチル(R)-5-(3-((S)-2-((S)-2-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)プロパンアミド)プロパンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸（１１６）の合成

化合物９９（１．３３ｇ、２．９４５ｍｍｏｌ）およびＣｂｚ－Ａｌａ－ＯＨ（０．６９ｇ、３．０９３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣＩ（１．１３ｇ、５．８９１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、表題化合物を得た（１．６５ｇ、２．５１２ｍｍｏｌ、８５％）。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 34 H 48 N 4 O 9計算値、657.34; 実測値、657.31。

実施例１１７．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－５－（３－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）プロパンアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸（１１７）の合成

化合物１１６（１．６５ｇ、０．００３ｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２７ｇ、０．００３ｍｏｌ）を加え、反応フラスコを真空にし、水素を３回充填した。次いで、水素バルーン下、室温で２時間撹拌し、濾過し、濃縮乾固して、化合物１１７（１．２４ｇ、収率９５％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 26 H 42 N 4 O 7計算値、523.31;実測値523.29。

実施例１１８．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１９Ｓ，２０Ｓ，２８Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ，３７Ｓ）－１９，２０－ビス（２，５－））ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35 -デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9、 12，17，22， 27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン)) (4R，4'R)-ビス(4-((tert-ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸）（１１８）の合成

化合物１１２（０．３４ｇ、０．６４７ｍｍｏｌ）および化合物１１７（０．６５ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解した。反応混合物を１時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物１１８（０．２５ｇ、収率２７％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 132 H 216 N 18 O 48計算値、1411.75。実測値1412.88。

実施例119. (4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S， 31S，34S，37S)-19，20-bis( 2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29 、32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3、 ６，９，１２，１７，２２，２７，３０，３３，３６－デカアザオクタトリアコンタンジオイル）－ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－アミノペンタン酸）（１１９）の合成

化合物１１８（０．２５ｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（８ｍＬ）に溶解した。１時間撹拌した後、反応溶液を濃縮して化合物１１９（０．４１３ｇ、収率＞１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 114 H 184 N 18 O 44計算値、1255.63。実測値 1256.01。

実施例１２０．(4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S，31S，34S，37S)-19，20-bis(2)，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29， 32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6 、9，12，17，22，27， 30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11 -イル)チアゾール-4-カルボキサミド)ペンタン酸) ( 120 ) の合成

化合物１１９（０．１２ｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（０．２２ｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（０．１１６ｍＬ、０．７０１ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を２時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１２０（０．１１９ｇ、収率３８％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 164 H 264 N 26 O 54 S 2計算値、1763.91; 実測値 1765.30。

実施例１２１．(2S，2'S，4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-bis(2)，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ- 8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19 ，24，27，30-オクタアザドトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((3S，6S，9R，11R)-6-((S )-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4，7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-2-メチルペンタン酸）（１２１）の合成

化合物８２（２５０ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－２（２０７ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（０．０３４ｍＬ、０．２０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１２１（１８０ｍｇ、収率５１％）を得た。 ESI-MS (m/z): [M+2H] 2 + C 164 H 270 N 24 O 50 S 2計算値、1720.94。実測値1721.94。

実施例１２２．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－５－（３－（（３７Ｓ，４０Ｓ，４３Ｓ）－３７－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－４０－イソプロピル－４３－メチル－３１，３８、 41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタン酸（１２２）の合成

化合物７６（６．０ｇ、５．９ｍｍｏｌ）および化合物６９（２．７ｇ、７．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、６０℃で２０時間加熱した。反応物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ＝２０：１）で精製して、７．１ｇの所望の生成物を灰色固体として得た（収率９３％）。

実施例１２３．tert-ブチル(R)-5-(3-((37S，40S，43S)-37-アミノ-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5， 8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタン酸 ( 123 )の合成

化合物１２２（７．１ｇ、５．７ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（８０ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％湿潤、０．８ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を３回充填し、水素バルーン下で５０℃で２．５時間撹拌し、濾過し、濃縮し、オイルポンプで乾燥させて、灰色の固体（５．９ｇ、収率９３％）。

実施例１２４．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル５，５’－（（（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１６Ｓ，１７Ｓ，２５Ｓ，２８Ｓ，３１Ｓ）－１６，１７－ビス（２，５－ジオキソ－２、 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31 -オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19，24，27，30-オクタアザドトリアコンタンジイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））（４Ｒ，４’Ｒ）－ビス（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタノエート）（１２４）の合成

化合物８０（５１０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）および化合物１２３（１９００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。Ｎ－メチルモルホリン(190mg、1.9mmol)を加え、反応を０℃で3時間継続した。反応溶液をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（４×６０ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を濃縮し、シリカゲルカラム（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ＝２０：１～６：１）で精製し、目的物１．２ｇを褐灰色の油として得た（収率５８％）。ESI-MS (m/z): [M+2H] 2+ C 130 H 214 N 16 O 46計算値、1368.75。 1369.34実測値。

実施例１２５．(4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19，24，27 、３０－オクタアザドトリアコンタンジオイル）ビス（アザンジイル））ビス（４－ヒドロキシ－３，１－フェニレン））ビス（４－アミノペンタン酸）（１２５）の合成

化合物１２４（５００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で２時間処理した。反応溶液を濃縮して、600 mgの粗生成物を橙赤色の油として得た。 ESI-MS (m/z): [M+2H] 2+ C 112 H 182 N 16 O 42計算値、1213.63; 実測値1213.83。

実施例１２６．(4R，4'R)-5，5'-((((2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，14，19，24，27 ，30-オクタアザドトリアコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4-ヒドロキシ-3，1-フェニレン))ビス(4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル) -9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)ペンタン酸) ( 126 ）の合成

化合物125 (440 mg、0.18 mmol) およびTub-1 (320 mg、0.45 mmol) を DMF (5 mL) に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン (70 mg、0.54 mmol) を０℃で加えて撹拌し、反応物を０℃で３時間継続した。反応溶液を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、９２ｍｇの所望の生成物を白色固体として得た（収率１５％）。ESI-MS (m/z): [M+2H] 2+ C 162 H 262 N 24 O 52 S 計算値、1720.90; 実測値1721.66。

実施例１２７．tert-ブチル((S)-35-アミノ-24-メチル-1-(11-オキシダニル)-29-オキソ-3，6，9，12，15，18，21，24l3，27 -ノナオキサ-30-アザヘキサトリアコンタン-36-オイル)-L-バリル-L-アラニネート( 127 ) の合成

化合物７４（１５ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（１５０ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１０重量％、２．０ｇ）を加え、反応フラスコを真空にし、水素を３回充填した。２日間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物１２７（１２ｇ、収率９２％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 39 H 77 N 4 O 15計算値、841.53; 実測値841.53。

実施例１２８．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１６Ｓ，１７Ｓ，２５Ｓ，２８Ｓ，３１Ｓ）－１６，１７－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－）1-イル)-5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8) 、１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１４，１９，２４，２７，３０－オクタアザドトリアコンタンジオエート（１２８）の合成

化合物１２７（５．５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）および化合物１９（１．５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（４．８ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（１．３ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで真空下で濃縮し、水(200mL)に注ぎ、ジクロロメタン(3×100mL)で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物１２８（６．５ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 98 H 171 N 12 O 38計算値、1063.08。実測値 1063.78。

実施例１２９．(2S，5S，8S，16S，17S，25S，28S，31S)-16，17-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)- 5，28-ジイソプロピル-2，31-ジメチル-4，7，10，15，18，23，26，29-オクタオキソ-8，25-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14， １７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１４，１９，２４，２７，３０－オクタアザドトリアコンタン二酸（１２９）の合成

化合物１２８（６．５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）に溶解した。混合物を２時間撹拌し、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物１２９（３．１ｇ、収率５０％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 90 H 155 N 12 O 38計算値、1006.03; 実測値1006.13。

実施例１３０．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37 -(((S)-1-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2 ，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-1-オキソプロパン- 2-イル)アミノ)-3-メチル-1-オキソブタン-2-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ- ３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（１３０）の合成

化合物１２９（２８０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（１４８ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（１５８ｍｇ、０．４１７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（９２μＬ、０．５５７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物１３０（１０１ｍｇ、収率２５％）を得た。 MS-ESI (m/z): C 138 H 195 F 2 N 18 O 44 [M+2H] 2+計算値: 1424.18、実測値 1425.00。

実施例１３１．ｔｅｒｔ－ブチル（（ベンジルオキシ）カルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（１３１）の合成

化合物６１（４．０ｇ、１８．４９ｍｍｏｌ）およびＣｂｚ－Ａｌａ－ＯＨ（４．１ｇ、１８．４９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、これにＥＤＣＩ（７．０ｇ、３６．５１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４．７ｇ、３６．３６ｍｍｏｌ）を加えた。を５℃で添加した。約０．５時間撹拌した後、反応物を水およびブラインで洗浄し、シリカゲルカラムで精製し、ジクロロメタンおよびメタノールで溶出して、化合物１３１を白色固体として得た（１．６ｇ、収率２０％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 21 H 32 N 3 O 6計算値、422.22; 実測値422.22。

実施例１３２．Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１３２）の合成

化合物１３１（１．６ｇ、３．７９ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．１６ｇ）を加え、反応フラスコを真空にし、水素を３回充填し、次いで水素バルーン下、室温で１時間撹拌し、濾過し、濃縮して、化合物１３２を無色の液体として得た（１．１ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 13 H 26 N 3 O 4計算値、288.18; 実測値288.18。

実施例１３３．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-アラニル-L-アラニル-L-アラニネート( 133 ) の合成

化合物１３２（１．１ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）および化合物２０ （２．６ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（２．０ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．９ｇ、６．９４ｍｍｏｌ）を５℃で加えた。約０．５時間撹拌した後、反応物を濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水（１００ｍＬ）、5％Na 2 CO 3 (80mL)、1M HCl(80mL)で洗浄し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで精製し、ジクロロメタンおよびメタノールで溶出して、化合物133を白色固体として得た(2.9g、収率81%)。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 48 H 84 N 5 O 18計算値、1018.57; 実測値 1018.57。

実施例１３４．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル））－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（１３４）の合成

化合物１３３（２．９ｇ、２．８４ｍｍｏｌ）をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２９ｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を３回再充填し、次いで水素バルーン下、室温で１時間撹拌し、濾過し、濃縮して、化合物１３４を無色油状物として得た（２．５ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 40 H 78 N 5 O 16計算値、884.54; 実測値884.54。

実施例１３５．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１９Ｓ，２０Ｓ，２８Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ，３７Ｓ）－１９，２０－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－）1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27， 30，33，36-デカアザオクタトリアコンタンジオエート ( 135 ) の合成

化合物１３４（０．８３ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）および化合物１９（２０４．３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合溶媒に溶解した。HATU(470mg、1.24mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(216mg、1.67mmol)を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応物を濃縮し、ジクロロメタン１００ｍＬで希釈し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、化合物１３５を無色油状物として得た（０．９２４ｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z): [M+2H] 2+ C 100 H 173 N 14 O 40計算値、1106.04; 実測値1106.25。

実施例１３６．(2S，5S，8S，11S，19S，20S，28S，31S，34S，37S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1) -イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29， 32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ- 2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36 -デカアザオクタトリアコンタン二酸（ 136 ）の合成

化合物１３５（９２４．１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンおよび２０ｍＬのギ酸に溶解した。５５～６０℃で３時間撹拌した後、反応物を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、化合物１３６を白色固体として得た（０．４２ｇ、収率４８％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 92 H 157 N 14 O 40計算値、1050.03; 実測値1050.03。

実施例１３７．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37 -(((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10 ，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11 、１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（１３７）の合成

化合物１３６（２０２．５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびエキサテカン（１１１．１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、ＨＡＴＵ（１１０．０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（５０．０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で約３０分間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１３７を白色固体として得た（１７６．０ｍｇ、収率６２％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 140 H 197 F 2 N 20 O 46計算値、1467.18。実測値1468.62。

実施例１３８．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，２８Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ，３７Ｓ）－１９，２０－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－）1-イル)-2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18， 21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ) -2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33， 36-デカアザオクタトリアコンタンジオエート ( 138 ) の合成

化合物１３４（４．０７ｇ、４．６０ｍｍｏｌ）および化合物１２（１．００ｇ、２．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍｌ）中溶液に、ＨＡＴＵ（２．３８ｇ、６．２７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．６９ｍＬ、４．１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで真空下で濃縮し、水(200mL)で希釈し、ジクロロメタン(3×100mL)で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、生成物１３８（４．６ｇ、収率１００％ ）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 100 H 173 N 14 O 40計算値、2210.19; 実測値2210.19。

実施例１３９．(2S，5S，8S，11S，28S，31S，34S，37S)-19，20-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)- 2，5，8，31，34，37-ヘキサメチル-4，7，10，13，18，21，26，29，32，35-デカオキソ-11，28-ビス(31-オキソ-2，5， 8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，17，22，27，30，33，36-デカアザオクタトリアコンタン二酸 ( 139 ）の合成

化合物１３８（４．６ｇ、１．２ｍｍｏｌ）をギ酸（４０ｍＬ）およびジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した。混合物を６０℃に加熱し、３時間撹拌し、次いで、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物１３９（２．７ｇ、収率６１％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 92 H 158 N 14 O 40計算値、2098.06; 実測値 2098.06。

実施例１４０．２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ１－（（Ｓ）－３１，３９－ジオキソ－３７－（（（ S)-1-オキソ-1-(((S)-1-オキソ-1-(((S)-3-オキソブタン-2-イル)アミノ)プロパン-2-イル)アミノ)プロパン-2-イル)カルバモイル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，38-ジアザドテトラコンタン-42-イル)-N4-((S)-37-(((S )-1-(((S)-1-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ- 1，2，3，9，10，12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-1 -オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17， ２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（１４０）の合成

化合物１３９（３００ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（１５２ｍｇ、０．２８６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（１６３ｍｇ、０．４２９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（９４μＬ、０．５７２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物１４０（２６３ｍｇ、収率６２％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 140 H 197 F 2 N 20 O 46計算値、2932.36; 実測値2932.36。

実施例１４１．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-バリネート( 141 ) の合成

化合物２０（１０．０ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｖａｌ－ＯｔＢｕ・ＨＣｌ（２．４０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（７．６０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４．４ｍＬ、２６．７ミリモル）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩を加え、濾過し、濃縮して化合物１４１（１２．０ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 44 H 78 N 3 O 16計算値、904.53; 実測値904.53。

実施例１４２．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）)-L-バリネート( 142 ) の合成

化合物１４１（１０．０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（１．０ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物１４２（８．６ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 36 H 72 N 3 O 14計算値、770.49。実測値 770.49。

実施例１４３．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）-2，25-ジイソプロピル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29 -デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサンジオエート ( 143 ) の合成

化合物１９（１．２０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）および化合物１４２（４．１０ｇ、５．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）及びＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合溶液に、ＨＡＴＵ（２．８０ｇ、７．５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ナトリウム上で乾燥させた。硫酸塩で洗浄し、濾過し、濃縮して表題化合物を得た（４．８ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 92 H 161 N 10 O 36計算値、1982.10; 実測値1982.10。

実施例１４４．(2S，5S，13S，14S，22S，25S)-13，14-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，25-ジイソプロピル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，11，16，21，24-ヘキサアザヘキサコサン二酸( 144 ) の合成

化合物１４３（４．８ｇ、２．５ｍｍｏｌ）をギ酸（４０ｍＬ）およびジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、次いで６０℃に加熱した。反応物を、ＬＣ－ＭＳによって示される完了まで撹拌し、次いで濃縮して、表題化合物を得た（２．２ｇ、収率４８％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 84 H 145 N 10 O 36計算値、1869.97; 実測値1869.97。

実施例１４５．（２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）メチルアセテート（１４６ ）の合成。

Ｎ_２下でFmoc-Gly-Gly-OH (7.3 g、20.6 mmol) のテトラヒドロフラン (100 mL) およびトルエン (30 mL) 溶液に、ピリジン (2 mL、24.8 mmol) を加え、続いて、四酢酸鉛(11g、２４．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５時間加熱還流し、室温に冷却し、次いで濾過した。濾液を濃縮し、酢酸エチル（３００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で希釈した。分離した有機相をブライン(50mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで精製し、石油エーテル/酢酸エチルで溶出して、白色固体(7.1 g、収率76%)を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 20 H 20 N 2 O 5計算値、369.14; 実測値369.14。

実施例１４６．ベンジル（２－ヒドロキシアセチル）－Ｌ－アラニネート（１４７）の合成

グリコール酸（3.3 g、43.39 mmol）およびH-Ala-OBn・HCl（8.5 g、39.44 mmol）をジクロロメタン（100 mL）に溶解し、これにEDCI（11.3 g、59.17 mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（13.0 ml、78.89 mmol）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで水(50ml)、ブライン(50ml)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をシリカゲルカラム（ＰＥ／ＥＡ＝１０／０から１／１から０／１０）によって精製して、表題化合物を得た（２．９ｇ、収率３１％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 12 H 16 NO 4計算値、238.10; 実測値238.10。

実施例１４７．ベンジル（２－（（２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）メトキシ）アセチル）－Ｌ－アラニネート（１４８）の合成

トルエン（６０ｍｌ）中の化合物１４７（２．９ｇ、１２．２２ｍｍｏｌ）および化合物１４６（４．５ｇ、１２．２２ｍｍｏｌ）および触媒量のＰＰＴＳ（０．３ｇ）の混合物を、１００℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、得られた白色固体を濾別し、濾液を濃縮し、酢酸エチル１００ｍＬで希釈し、水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ＰＥ／ＥＡ＝１０／０から１／１から１／３から０／１０）で精製し、表題化合物を得た（２．８ｇ、収率４２％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 30 H 32 N 3 O 7計算値、546.22; 実測値546.22。

実施例１４８．（２－（（２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）メトキシ）アセチル）－Ｌ－アラニン（１４９）の合成

化合物１４８（２．０ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）に溶解し、１０％パラジウム炭素（０．２ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物１４９（１．４５ｇ、収率８６％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 23 H 26 N 3 O 7計算値、456.17; 実測値456.17。

実施例１４９．(9H-フルオレン-9-イル)メチル(2-(((2-(((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ)） -4-メチル-10，13-ジオキソ-2，3，9，10，13，15-ヘキサヒドロ-1H，12H-ベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2] -b]キノリン-1-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)メチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバメート (150 ) の合成

化合物１４９（３００ｍｇ、０．６５９ｍｍｏｌ）およびメシル酸エキサテカン（３５０ｍｇ、０．６５９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（３７５ｍｇ、０．９８８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２１７μＬ、１．３１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物１５０（４００ｍｇ、収率７０％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 47 H 45 FN 6 O 10計算値、873.32; 実測値873.32。

実施例１５０．(S)-2-(2-((2-アミノアセトアミド)メトキシ)アセトアミド)-N-((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル- 10，13-ジオキソ-2，3，9，10，13，15-ヘキサヒドロ-1H，12H-ベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン- １－イル）プロパンアミド（１５１）の合成

化合物１５０（１７０ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４ｍＬ）とピペリジン（０．４ｍＬ）の混合物に溶解し、反応が完了するまで室温で撹拌した。溶媒を除去し、残渣をＤＭＦ（３ｍＬ）と共蒸発させて表題化合物を得、これをさらに精製せずに次の工程で直接使用した（０．１３ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 32 H 35 FN 6 O 8計算値、651.25; 実測値 651.26。

実施例１５１．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- (((2S，13S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10， 12，13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2，14-ジメチル-1，4，9 ，12-テトラオキソ-6-オキサ-3，8，11-トリアザペンタデカン-13-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ－３２，３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（１５２）の合成

化合物１４４（１８０ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）および化合物１５１（１２５ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、約０℃に冷却した。 HATU(109mg、0.289mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(31μL、0.193mmol)を加え、反応物を室温に温め、完了するまで撹拌した。溶媒を除去し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、化合物１５２（１０１ｍｇ、収率３４％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+3H] 3+ C 148 H 210 F 2 N 22 O 50計算値、1045.81。実測値 1046.10。

実施例１５２．（２－（（２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）メトキシ）アセチル）グリシン（１５４）の合成

化合物１５３（６００．３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＭｅＯＨに溶解し、１０重量％Ｐｄ／Ｃ（１０．１ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。１時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、酢酸エチルで粉砕した。白色固体を濾過により回収した（４２０．２ｍｇ、収率８４％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 22 H 24 N 3 O 7計算値、442.15;実測値: 442.15。

実施例１５３．（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（２－（（２－（（（１Ｓ，９Ｓ）－９－エチル－５－フルオロ－９－ヒドロキシ－４－メチル）） -10，13-ジオキソ-2，3，9，10，13，15-ヘキサヒドロ-1H，12H-ベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)メチル)アミノ)-2-オキソエチル)カルバメート( 155 ) の合成

化合物１５４（３０２．１ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、氷水浴上で０℃まで冷却した。エキサテカン(325.1 mg、0.61 mmol)およびHATU (387.5 mmol、1.01 mmol)を加え、続いてジイソプロピルエチルアミン(180.2μL、1.36 mmol)を滴下した。反応物を室温で約２０分間撹拌し、濾過した。濾液を分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物を得た（１３５．２ｍｇ、収率２３％）。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 46 H 44 FN 6 O 10計算値、859.30;実測値: 859.30。

実施例１５４．２－アミノ－Ｎ－（（２－（（２－（（（１Ｓ，９Ｓ）－９－エチル－５－フルオロ－９－ヒドロキシ－４－メチル－１０，１３－ジオキソ－２））、3，9，10，13，15-ヘキサヒドロ-1H，12H-ベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)- ２－オキソエチル）アミノ）－２－オキソエトキシ）メチル）アセトアミド（１５６）の合成

化合物１５５（１３５ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解し、０．５ｍＬのピペリジンを加え、反応物を室温で２０分間撹拌し、濃縮し、ＤＭＦに再溶解し、再度濃縮して表題化合物を得た (100.9 mg、収率 > 100%)。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 31 H 34 FN 6 O 8計算値、637.23;実測値: 637.23。

実施例１５５．(2S，3S)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-N1，N4-ビス((S)-37- (((S)-1-(((1S，9S)-9-エチル-5-フルオロ-9-ヒドロキシ-4-メチル-10，13-ジオキソ-1，2，3，9，10，12， 13，15-オクタヒドロベンゾ[de]ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-1-イル)アミノ)-14-メチル-1，4，9，12-テトラオキソ-6-オキサ-3，8，11-トリアザペンタデカン-13-イル)カルバモイル)-31，39-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32、３８－ジアザドテトラコンタン－４２－イル）スクシンアミド（ １５７ ）の合成

化合物１４４（１４０．２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）および化合物１５６（１００．９ｍｇ、０．１５７ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解し、０℃に冷却し、ＨＡＴＵ（８６．２ｍｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）を加え、続いてジイソプロピルエチルアミン（２３．６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を室温まで温め、２０分間撹拌した後、混合物を分取ＨＰＬＣで精製した。画分を濃縮し、凍結乾燥して、表題化合物を得た(36.6 mg、収率16%)。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 146 H 207 F 2 N 22 O 50計算値、3106.42;実測値: 3106.42。

実施例１５６．１－（２－アミノ－４－フルオロ－５－メトキシフェニル）－２－クロロエタン－１－オン（１５８）の合成

３－フルオロ－４－メトキシアニリン（５ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液を、氷水で冷却した三塩化ホウ素（ジクロロメタン中１Ｍ、３８．９ｍＬ）溶液に滴下した。反応物を１０分間撹拌し、次いでクロロアセトニトリル（３．２ｇ、４２．５ミリモル）および三塩化アルミニウム（５．２ｇ、３８．９ミリモル）を加えた。添加が完了した後、反応物を室温まで温め、次いで一晩還流した。次いで、反応混合物を約０℃に冷却し、２Ｍ ＨＣｌ（８０ｍＬ）でクエンチし、室温で２時間撹拌した。層を分離し、水相をジクロロメタン(3×80mL)で抽出した。合わせた有機相を水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラムで精製し、石油エーテル／酢酸エチルで溶出して、化合物１５８（２ｇ、収率２６％）を黄色の物質として得た。固体。 ESI-MS m/z: [M + H] + C 9 H 9 ClFNO 2計算値、218.03; 実測値218.03。

実施例１５７．(S)-11-(クロロメチル)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-9-メトキシ-1，12-ジヒドロ-14H-ピラノ[3'，4':6， 7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-3，14(4H)-ジオン ( 160 )の合成

化合物１５８（０．５０ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）および化合物１５９（０．５７ｇ、２．１９ｍｍｏｌ）を無水トルエン（４０ｍＬ）に溶解し、ｐ－トルエンスルホン酸（４２ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を２日間加熱還流し、室温まで放冷した。約３分の２のトルエンを除去した後、残渣を濾過し、フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄し、風乾して、化合物１６０（０．７ｇ、収率７２％）を灰色の粉末状固体として得た。 ESI-MS m/z: [M + H] + C 22 H 18 ClFN 2 O 5計算値、445.09; 実測値445.09。

実施例１５８．（Ｓ）－（１－（（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１６１）の合成

p-アミノベンジルアルコール（5.0 g、0.04 mol）およびBoc-L-アラニン（8.0 g、0.042 mol）を無水THF（100 mL）に溶解し、2-エトキシ-1-エトキシカルボニル-1，2-ジヒドロキノリン（11 ｇ、０．０４４モル）を加え、室温で一晩撹拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を酢酸エチル／石油エーテル（１：３）で粉砕し、濾過して、化合物１６１（９．８ｇ、収率８４％）を白色固体として得た。ESI-MS m/z: [M + H] + C 15 H 22 N 2 O 4計算値、295.16。実測値295.16。

実施例１５９．（Ｓ）－（１－（（４－（ブロモメチル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１６２）の合成

化合物１６１（３．５ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（５．９ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８０ｍＬ）に溶解し、約０℃に冷却し、トリフェニルホスフィン（４．７ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に温め、３０分間撹拌し、次いで２０ｇのシリカゲルを加え、混合し、ロータリーエバポレーターで乾燥し、シリカゲルカラム（１００ｇのシリカゲル）にロードし、石油エーテル／エチルで溶出した。酢酸塩を生成させて化合物１６２（２．６ｇ、収率６２％）を得た。ESI-MS m/z: [M + H] + C 15 H 21 BrN 2 O 3計算値、357.07; 実測値357.07。

実施例１６０．(S)-4-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)-1-(4-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)プロパンアミド)ベンジル)-1-メチルピペラジン-1-イウム（ 164 ）の合成

化合物１６２（２．３ｇ、６．４ｍｍｏｌ）および（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル４－メチルピペラジン－１－カルボキシラート（１６３、２．１ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、室温で一晩撹拌した。ほとんどのＴＨＦをロータリーエバポレーターで除去した後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を残渣に加えた。得られたスラリーを濾過して、白色固体(3.8 g、収率87%)を得た。 ESI-MS m/z: M + C 35 H 43 N 4 O 5計算値、599.32。実測値599.32。

実施例１６１．（Ｓ）－１－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１６５）の合成

化合物１６４（３．１２ｇ、４．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶解し、ピペリジン（３ｍＬ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、２００ｍＬの酢酸エチルを加え、１０分間撹拌した。混合物を濾過して、白色固体(1.54 g、収率77%)を得た。 ESI-MS m/z: M + C 20 H 33 N 4 O 3計算値、377.26。実測値377.26。

実施例１６２．１－（４－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル）－４－（（（Ｓ）－４－エチル－８－フルオロ－４－ヒドロキシ－）9-メトキシ-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-11-イル)メチル) -1-メチルピペラジン-1-イウム ( 166 ) の合成

化合物１６５（０．３０ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、化合物１６０（０．２５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中混合物を０℃で３０分間撹拌し、次にＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４９μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に温め、一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／ギ酸を含む水）により精製して、化合物１６６（０．４０ｇ、収率８０％）を得た。 ESI-MS m/z: C 42 H 50 FN 6 O 8のM +計算値、785.37。実測値 785.37。

実施例１６３．１－（４－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）ベンジル）－４－（（（Ｓ）－４－エチル－８－フルオロ－４－ヒドロキシ－９－メトキシ－３，１４－）ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-11-イル)メチル)-1-メチルピペラジン-1-イウム( 167 ) の合成

化合物１６６（０．３０ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）をジクロロメタンとトリフルオロ酢酸の混合物（３ｍＬ／３ｍＬ）に溶解し、室温で３０分間撹拌した。次いで、混合物を濃縮し、真空ポンプで乾燥させて、化合物１６７（０．２７ｇ、収率１００％）を黄色固体として得た。 ESI-MS m/z: M + C 37 H 42 FN 6 O 6計算値、685.31。実測値 685.31。

実施例１６４：化合物１６８の合成。

化合物２０（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）および化合物１６７（１６０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（１２０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間０℃で撹拌した。反応溶液を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨを含む水）により直接精製して、８６ｍｇの化合物１６８を収率４６％で得た。 ESI-MS m/z：M 2+C 94 H 102 F 2 N 16 O 20計算値、906.4；実測値907.1。

実施例１６５．１－（２－アミノ－４－フルオロ－５－メトキシフェニル）エタン－１－オン（１６９）の合成

３－フルオロ－４－メトキシアニリン（５．０ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、ＢＣｌ３（１Ｍ、３９．０ｍＬ）のジクロロメタン溶液を０℃で加え、続いてＣＨ３ＣＮ（２．２ｍＬ、４２．５ｍｍｏｌ）およびＡｌＣｌ３（５．２ｇ、３８．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を加熱還流し、還流下で一晩撹拌し、０℃に冷却した。２Ｎ ＨＣｌ（８０ｍＬ）を加え、２時間撹拌し、次いで酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで精製して、黄色固体(0.7 g、収率11%)を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 9 H 11 FNO 2計算値、184.07; 実測値184.07。

実施例１６６．１－（２－アミノ－４－フルオロ－５－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（１７０）の合成

化合物１６９（０．７１ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、ＢＢｒ３（１Ｍ、７．７ｍＬ）を加えた。溶液を室温に温め、４８時間撹拌し、０℃に冷却し、水（１００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで精製して、黄色の固体(0.4 g、収率60%)を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 8 H 9 FNO 2計算値、170.05; 実測値170.05。

実施例１６７．(S)-4-エチル-8-フルオロ-4，9-ジヒドロキシ-11-メチル-1，12-ジヒドロ-14H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1]，2-b]キノリン-3，14(4H)-ジオン ( 171) の合成

トルエン（８０ｍＬ）中の化合物170 (2.65 g、10.05 mmol) および (S)-4-エチル-4-ヒドロキシ-7，8-ジヒドロ-1H-ピラノ[3，4-f]インドリジン-3，6，10（４Ｈ）－トリオン（２．６５ｇ、１０．０５ｍｍｏｌ）に、ｐ－トルエンスルホン酸（０．１ｇ）を加え、混合物を加熱還流し、２４時間撹拌し、室温まで冷却した。得られた固体を濾過した。ジクロロメタンですすぎ、乾燥させて、化合物１７１（１．３ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 21 H 18 FN 2 O 5計算値、397.11; 実測値397.11。

実施例１６８．(S)-1-(tert-ブチル) 4-(4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-)テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル)ピペラジン-1，4-ジカルボキシラート(172 ) の合成

1-ピペラジンカルボン酸tert-ブチル(1.0 g、5.36 mmol)およびピリジニウム(0.65 ml、8.05 mmol)のジクロロメタン(5 mL)溶液に、０℃でトリホスゲン(1.9 g、6.44 mmol)を加えた。混合物を室温に温め、１時間撹拌し、次いで、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、黄色固体を得た。（１．３ｇ、収率１００％）。

化合物１７１（４００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．３３ｍＬ、２．０２ｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、上記化合物（３２６ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を室温に温め、４時間撹拌し、次いで、真空下で濃縮し、シリカゲルカラムによって精製して、茶色の固体（４３０ｍｇ、収率７０％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 31 H 33 FN 4 O 8計算値、609.23; 実測値609.23。

実施例１６９．(S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル ピペラジン-1-カルボキシレート ( 173 ) の合成

化合物１７２（１００ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）に溶解し、反応物を３０分間撹拌し、その後濃縮し、ジクロロメタンと２回共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させた。化合物１７３を茶色の固体として得た（８３ｍｇ、１００．００％）。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 26 H 26 FN 4 O 6計算値、509.18; 実測値509.18。

実施例１７０．tert-ブチル((S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)グリシルグリシル-L-アラニル-L-アラニネート( 174 ) の合成

化合物４６（３．０２ｇ、３．５ｍｍｏｌ）およびＨ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｏ^ｔＢｕ（０．９ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（１．９９ｇ、５．２３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（1.1 mL、6.95ミリモル）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで真空下で濃縮し、水(100mL)に注ぎ、ジクロロメタン(3×50mL)で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）、２Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）、およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、化合物１７４（３．６g、を収率100％）得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C49H84N6O19計算値、1061.58。実測値 1061.58。

実施例１７１．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３７－アミノ－３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル））グリシルグリシル-L-アラニル-L-アラニネート（ 175 ）の合成

化合物１７４（３．６ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１０重量％、０．４ｇ）を加え、反応フラスコを排気し、水素を３回充填した。２時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物１７５（２．６ｇ、収率７４％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 41 H 79 N 6 O 17計算値、927.54; 実測値 927.54。

実施例１７２．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２３Ｓ，３１Ｓ，４０Ｓ，４３Ｓ）－２２，２３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－）1-イル)-2，5，40，43-テトラメチル-4，7，10，13，16，21，24，29， 32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ) -2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，15，20，25，30，33， 36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタンジオエート ( 176 ) の合成

化合物１７５（２．６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）および化合物１９（０．６ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／ＤＭＦ（２０ｍＬ／４ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（１．４３ｇ、３．７６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．６２ｍＬ、３．７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで真空下で濃縮し、水(200mL)に注ぎ、ジクロロメタン(3×100mL)で抽出した。合わせた有機相を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物１７６（２．８ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 102 H 175 N 16 O 42計算値、2296.20; 実測値2296.20。

実施例１７３．(2S，5S，14S，22S，23S，31S，40S，43S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)- 2，5，40，43-テトラメチル-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5， 8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6，9，12，15，20，25，30，33，36，39，42 -ドデカアザテトラテトラコンタン二酸（ 177 ）の合成

化合物１７６（２．８ｇ、１．２ｍｍｏｌ）をギ酸（４０ｍＬ）およびジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した。混合物を５０℃に加熱し、一晩撹拌し、次いで、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１７７ （１．６ｇ、収率６１％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 94 H 159 N 16 O 42計算値、2184.07; 実測値2184.07。

実施例１７４．ビス((S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'， 4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル) 4，4'-((2S，5S，14S，22S，23S，31S，40S，43S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，40，43-テトラメチル-4，7，10，13，16，21，24，29，32、 35，38，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3 、６，９，１２，１５，２０，２５，３０，３３，３６，３９，４２－ドデカアザテトラテトラコンタンジオイル）ビス（ピペラジン－１－カルボキシレート）（１７８ ）の合成

化合物１７７（１２５ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）および化合物１７３（５８ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（６５ｍｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３８μＬ、０．２３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１７８（６７ｍｇ、収率３７％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 146 H 205 F 2 N 24 O 52計算値、3164.40; 実測値3164.40。

実施例１７５．(S)-tert-ブチル(4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3] '，4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル)エタン-1，2-ジイルビス(メチルカルバメート) ( 179 ) の合成

０℃で、ｔｅｒｔ－ブチル ２－（メチルアミノ）エチルカルバメート（１．０ｇ、５．７４ｍｍｏｌ）及びピリジニウム（０．６９ｍｌ、８．６１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２０ｍＬ）に、トリホスゲン（２．０ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に温め、１時間撹拌し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、黄色の油（１．３ｇ、収率１００％）を得た。

０℃で、化合物１７１（７１２ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．５９ｍｌ、３．５９ｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、上記化合物（７１０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に温め、一晩撹拌し、次いで真空下で濃縮し、シリカゲルカラムによって精製して、褐色固体(700 mg、収率65%)を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 30 H 34 FN 4 O 8計算値、597.23; 実測値597.23。

実施例１７６． (S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'，4] ':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル メチル(2-(メチルアミノ)エチル)カルバメート ( 180 ) の合成

化合物１７９（５５ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加え、反応物を３０分間撹拌し、次いで濃縮し、ジクロロメタンと２回共蒸発させ、オイルポンプで乾燥させて、化合物１８０を褐色固体として得た（５０ｍｇ、収率＞１００．００％）。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 25 H 26 FN 4 O 6計算値497.18。 実測値497.18。

実施例１７７．ビス((S)-4-エチル-8-フルオロ-4-ヒドロキシ-11-メチル-3，14-ジオキソ-3，4，12，14-テトラヒドロ-1H-ピラノ[3'， 4':6，7]インドリジノ[1，2-b]キノリン-9-イル) ((5S，8S，17S，25S，26S，34S，43S，46S)-25，26-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3，5，8，43，46，49-ヘキサメチル-4，7，10，13，16，19，24，27，32，35 、38，41，44，47，48-ペンタデカオキソ-17，34-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36 -イル)-3，6，9，12，15，18，23，28，33，36，39，42，45，49-テトラデカアザヘンペンタコンタン-1，51-ジイル)ビス(メチルカルバメート)( 181 )の合成

化合物１７３（１６８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）および化合物１８０（８１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（５２μＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１８１（９７ｍｇ、収率３９％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 144 H 207 F 2 N 22 O 50計算値、3081.42、実測値 3081.42。

実施例１７８．(4-(4-((4-(((S)-1-カルボキシ-2-メチルプロピル)アミノ)-4-オキソブチル)アミノ)-2，3-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-4-オキソブタンアミド)ブタノイル)-L-バリン ( 184)の合成

化合物１２（２．０ｇ、４．１８ｍｍｏｌ）の混合物に、３－（エチルイミノメチリデンアミノ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（３．２ｇ、１６．７２ｍｍｏｌ）およびＮ－ヒドロキシスクシンイミド（1.9 g、16.72 ミリモル）を加えた。混合物を完全に変換するまで室温で撹拌し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。

得られた化合物をDMF(50mL)に溶解し、バリン(1.5g、12.54mmol)を加えた。混合物を完全に変換するまで室温で撹拌し、次いで分取ＨＰＬＣによって直接精製して、化合物１８４（２．２ｇ、収率７８％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 30 H 40 N 6 O 12計算値、677.27;実測値、677.53。

実施例１７９．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（４－（２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－４－（（４ -(((R)-1-((2，5-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ)-3-メチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-4-オキソブチル)アミノ)-4-オキソブタンアミド)ブタノイル)-L-バリネート ( 185 )の合成

化合物184 (1.0g、1.48mmol)の無水アセトニトリル（４０ｍＬ）の混合物に、3-(エチルイミノメチリデンアミノ)-N，N-ジメチルプロパン-1-アミン塩酸塩(1.2g、5.92mmol)およびN-ヒドロキシスクシンイミド( 685mg、5.92mmol）を加えた。混合物を完全に変換するまで室温で撹拌し、DCM (50 mL)で希釈し、ブライン(150 mL)で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、化合物１８５（１．２ｇ、収率９３％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M + H] + C 38 H 46 N 8 O 16計算値、871.30;実測値、871.65。

実施例１８０．（Ｓ）－１－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル）－４－（クロロカルボニル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１８７）の合成

１８６（３００ｍｇ、０．７９６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液に、トリホスゲン（９８ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１８７（１９０ｍｇ、収率５４％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M] + C 21 H 32 ClN 4 O 4計算値、439.20; 実測値439.35。

実施例１８１．化合物１８８の合成

化合物187 (42.9 mg、0.099 mmol) の DMF (1 mL)溶液に、ジイソプロピルエチルアミン (12.6 mg、0.099 mmol) を０℃で加えた。反応物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いで分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１８９（３６ｍｇ、収率８３％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M] + C 60 H 85 N 14 O 18 S 計算値、1321.58; 実測値 1321.69。

実施例１８２．化合物１８９の合成

化合物１８８（３６ｍｇ、２７．２μｍｏｌ）のＴＦＡ／ＤＣＭ（１／１０、１ｍＬ）溶液を、変換が完了するまで室温で撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、化合物１８９（３５ｍｇ、粗生成物、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M] + C 55 H 77 N 14 O 16 S +計算値、1221.58; 実測値1221.70。

実施例１８３．化合物１９０の合成

化合物１８５（４ｍｇ、４．５９μｍｏｌ）および化合物１８９（１１．８ｍｇ、９．６５μｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）混合物に、０℃でジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍｇ、１１．４７μｍｏｌ）を加えた。

混合物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物１９０（８．６ｍｇ、収率６０％）をオフホワイトの固体として得た。MS-ESI (m/z): [M] + C 140 H 190 N 34 O 42 S 2計算値、1541.66;実測値、1541.69。

実施例１８４．ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）（２Ｓ，５Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－）1H-ピロール-1-イル)-2，25-ジイソプロピル-4，7，12，15，20，23-ヘキサオキソ-5，22-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17 、２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，１１，１６，２１，２４－ヘキサアザヘキサコサンジオエート（１９１）の合成

化合物１４４（１００ｍｇ、５３．４７μｍｏｌ）の混合物に、３－（エチルイミノメチリデンアミノ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（４１ｍｇ、２１４μｍｏｌ）およびＮ－ヒドロキシスクシンイミド（25mg、214μmol）を加えた。混合物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いでＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、ブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、化合物１９１（１００ｍｇ、収率９１％）を油状物として得た。MS-ESI (m/z): [M + H] + C 92 H 150 N 12 O 40計算値、2064.01;実測値2064.12。

実施例１８５：化合物１９２の合成

０℃で、化合物１９１（８ｍｇ、３．８８μｍｏｌ）および化合物１８９（１０ｍｇ、８．１４μｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍｇ、１１．４７μｍｏｌ）を加えた。混合物が完全に変換するまで０℃で撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物１９２（１０．６ｍｇ、収率６４％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M] + C 194 H 294 N 38 O 66 S 2計算値、2138.03;実測値、2138.03。

実施例１８６．（２Ｓ，５Ｓ，２２Ｓ，２５Ｓ）－１３，１４－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－５，２２－ジイソプロピル－２，２５－ジメチル－４，７，１２，１５，２０，２３－ヘキサオキソ－３，６，１１，１６，２１，２４－ヘキサアザヘキサコサン二酸（１９３）の合成

化合物１８５（６００ｍｇ、６８９μｍｏｌ）およびＬ－アナリン（１８４ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）混合物に、０℃でジイソプロピルエチルアミン（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物１９３（５１０ｍｇ、収率９１％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 36 H 50 N 8 O 14計算値、819.36。実測値、819.53。

実施例１８７．２，３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ１，Ｎ４－ビス（４－（（（Ｓ）－３－メチル－）1-オキソ-1-(((S)-1-オキソ-1-((4-オキソシクロヘキシル)アミノ)プロパン-2-イル)アミノ)ブタン-2-イル)アミノ)-4-オキソブチル)スクシンアミド ( 194 ）の合成

０℃で、化合物１９３（１００ｍｇ、１２２μｍｏｌ）および４－アミノシクロヘキサン－１－オン塩酸塩（５５ｍｇ、３６６μｍｏｌ）の混合物に、４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン－２－イル）－４－メチルモルホリニウムクロリド (DMTMM、135 mg、488μmol）を加えた。混合物が完全に変換するまで０℃で撹拌し、ＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、ブライン（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムで精製して、化合物194 (110mg、収率89%)をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 48 H 68 N 10 O 14計算値、1009.49;実測値、1009.68。

実施例１８８．化合物１９５の合成

化合物１９１（５ｍｇ、４．９５μｍｏｌ）、トルエン－４－スルホン酸（１ｍｇ、５．８６μｍｏｌ）およびα－アマンチン（１８２、９．６ｍｇ、１０．４１μｍｏｌ）の混合物の無水ＴＨＦ溶液（５ｍＬ）を、完全に変換されるまで６０℃で撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物１９５（４．６ｍｇ、収率３３％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 128 H 174 N 28 O 42 S 2計算値、2840.18;実測値、2840.75。

実施例１８９；３－（４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）フェニル）アクリル酸（１９７）の合成

０℃で、4-アミノ桂皮酸 (1.0 g、6.13 mmol)及びN-(9-フルオレニルメトキシカルボニルオキシ) スクシンイミド (2.3 g、6.74 mmol) の DCM (20 mL) 混合物に、トリメチルアミン (930 mg、9.21 mmol) を加えた。混合物が完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムで精製して、化合物197 (2.2g、収率93%)を白色固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 24 H 19 NO 4計算値、386.13;実測値、386.24。

実施例１９０；（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｅ）－（４－（３－（メトキシ（メチル）アミノ）－３－オキソプロパ－１－エン－１－イル）フェニル）カルバメート（１９８）の合成

０℃で、化合物１９７（２．０ｇ、５．１９ｍｍｏｌ）およびＮ－メトキシメタンアミン（６１０ｍｇ、６．２３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（３．０ｇ、７．８０ｍｍｏｌ）およびトリメチルアミン（１．１ｇ、１０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物が完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムで精製して、化合物198 (1.8g、収率81%)を白色固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 26 H 24 N 2 O 4計算値、429.17;実測値、429.30

実施例１９１．（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｅ）－（４－（３－オキソプロパ－１－エン－１－イル）フェニル）カルバメート（１９９）の合成

化合物１９８（１．８ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中混合物を、Ｎ２下で－６０℃まで冷却した。水素化ジイソブチルアルミニウム(12.6mL、12.6mmol、THF中1.0M)を混合物に滴下した。追加後、混合物を完全に変換するまで－６０℃で撹拌した。反応を１０％ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムで精製して、化合物199 (900mg、収率58%)をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 24 H 19 NO 3計算値、370.17;実測値、370.58。

実施例１９２．化合物２００の合成

化合物199 (8.8 mg、23.94 μmol)、トルエン-4-スルホン酸(1 mg、5.86 μmol)およびα-アマンチン(20.0 mg、21.76 μmol)の混合物を、完全に変換するまで、６０℃で撹拌し、真空下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムで精製して、化合物２００（１６ｍｇ、収率５７．９％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 63 H 71 N 11 O 16 S 計算値、1270.48。実測値、1270.85。

実施例１９３．化合物２０１の合成

化合物２００（１６ｍｇ、１２．６０μｍｏｌ）のピペリジン／ＤＭＦ（１ｍＬ、１／１０）中溶液を室温で１０分間撹拌し、真空下で濃縮して化合物２０１（１６ｍｇ、粗製）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 48 H 61 N 11 O 14 S 計算値、1048.48。実測値、1048.85。

実施例１９４．化合物２０２の合成

０℃で、無水ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物１９３（５ｍｇ、６．１１μｍｏｌ）および化合物２０１（１３ｍｇ、１２．８１μｍｏｌ）の混合物に、ＤＭＴＭＭ（４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン-2-イル)-4-メチルモルホリニウムクロリド) (7 mg、24.44μmol)を加えた。混合物が完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いで分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２０２（１０ｍｇ、収率５７％）をオフホワイトの固体として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 132 H 168 N 30 O 40 S 2計算値、2878.44;実測値、2878.92。

実施例１９５；（２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－４－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソブチル）アミノ）－４－オキソブタン酸（２０３）の合成

化合物１３（４．２５ｇ、１０．６８ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＭＡＰ（１３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、０．０１当量）の混合物に、アミノ酪酸ｔ－ブチル（１．７８ｇ、１１．２１ｍｍｏｌ、 1.05当量）の無水DCM溶液（10 mL）に加えた。添加が完了した後、化合物１３は完全に溶解し、反応物を室温で一晩撹拌した。粗生成物をシリカゲルカラムにロードし、３～５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出した。画分を合わせて濃縮し、残渣をＰＥ／ＤＣＭ（１：１）で粉砕して、３．３ｇの白色固体を得た（収率５６％）。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 28 H 36 N 3 O 9計算値558.2。実測値、558.2。

実施例１９６．１－ベンジル２５－（ｔｅｒｔ－ブチル）（１８Ｒ，１９Ｒ）－１８，１９－ビス（（（ベンジルオキシ）－カルボニル）アミノ）－１７，２０－ジオキソ－４，７，１０-13-テトラオキサ-16，21-ジアザペンタコサンジオエート ( 204 ) の合成

ベンジル 1-アミノ-3，6，9，12-テトラオキサペンタデカン-15-オエート (365 mg、1.03 mmol、1.0 当量) を10 mL の DMF に溶解し、氷水浴上で冷却した。これに、ＤＩＰＥＡ（０．５３ｇ、４．１２ｍｍｏｌ、４．０当量）、化合物２０３ （０．５６ｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＨＡＴＵ（１．１７ｇ、３．０９ｍｍｏｌ、３．０当量）を順に加えた。氷水浴上で１時間撹拌した後、１００ｍＬの水を加え、固体が沈殿した。固体を濾過により回収し、水で洗浄し、DCMに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を少量のＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムにロードし、０～１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離して、０．６０ｇの淡黄色泡状物を得た（収率６５％）。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C46H62N4O14計算値895.43。;実測値、895.40。

実施例１９７．(20R，21R)-20，21-ビス(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-3，19，22-トリオキソ-1-フェニル-2，6，9，12，15-ペンタオキサ-１８，２３－ジアザヘプタコサン－２７－酸（２０５）の合成

化合物２０４（０．６０ｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．０当量）を５ｍＬのＤＣＭに溶解し、５ｍＬのＴＦＡとともに室温で３時間撹拌し、反応の完了をＬＣＭＳによって監視した。ＤＣＭを除去し、残留物をＤＣＭと３回共蒸発させ、高真空ポンプ上に置いた。粗生成物を少量のＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムにロードし、次いで15～20%MeOH/DCMで溶出した。画分を合わせ、濃縮して、０．３４ｇの白色泡状物を得た（収率６０％）。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 42 H 54 N 4 O 14計算値839.36、実測値、839.45。

実施例１９８．１－ベンジル２５－（ペルフルオロフェニル）（１８Ｒ，１９Ｒ）－１８，１９－ビス（（（ベンジル－オキシ）カルボニル）アミノ）－１７，２０－ジオキソ－４，７，１０，１３－テトラオキサ-16，21-ジアザペンタコサンジオエート( 206 ) の合成

化合物２０５（０．３４ｇ、０．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を１０ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにペンタフルオロフェノール（０．０８１ｇ、０．４４ｍｍｏｌ、１．１当量）及びＥＤＣ（０．３８ｇ、２．０ｍｍｏｌ、５．０当量）を加えた。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで（２×１０ｍＬ）及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物を次のステップで直接使用した。MS-ESI (m/z)： [M+H]⁺ C₄₈H₅₃F₅N₄O₁₄計算値1561.6;実測値、1561.6。

実施例１９９；化合物２０７の合成

前の工程からの粗生成物（０．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、氷水浴上で冷却した。これに、化合物１８３（０．３９ｇ、０．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＤＩＰＥＡ（０．１５ｇ、１．２ｍｍｏｌ、３．０当量）を順次加えた。氷水浴上で１時間撹拌した後、反応物を濃縮し、少量のＤＣＭに再溶解し、シリカゲルカラムに負荷し、０～２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出して、無色の油を得た（０．４０ｇ、収率５８％）。MS-ESI (m/z)： [M+2H]²⁺ C₈₁H₁₀₇N₁₅O₂₆S計算値: 869.86; 実測値、869.96。

実施例２００；化合物２０８の合成

化合物２０７（０．４０ｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）をメタノール５ｍＬに溶解し、乾燥パラジウム炭素（０．１ｇ、１０重量％）を加え、反応フラスコを排気し、Ｈ_２を３回充填した。反応混合物をＨ_２下で一晩撹拌し、濾過し、濾液を濃縮して０．３２ｇの粗物質を得て、これを次の反応に直接使用した。MS-ESI (m/z)： [M+2H]²⁺ C₅₈H₈₉N₁₅O₂₂S計算値690.80。実測値、690.85。

実施例２０１；化合物２０９の合成

前の工程からの粗生成物（０．３２ｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）を２ｍＬのエタノール及び０．２ｍＬの０．１Ｍ ＮａＨ２ＰＯ４に溶解し、N-(4-マレイミドブチリルオキシ)スクシンイミド(0.19g、0.69mmol、3.0当量)を加え、反応物を室温で一晩撹拌し、次いで濃縮し、DCMに再溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残留物を少量のＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムに負荷し、０～２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出して、無色の油（０．１３ｇ、収率３３％）を得た。MS-ESI (m/z) : [M+2H] 2+C 74 H 103 N 17 O 28 S計算値855.84。実測値、855.86。

実施例２０２；ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（６Ｓ，１３Ｓ）－９，１０－ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－５，８，１１，１４－テトラオキソ－６，１３－ビス（４－（（（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル）アミノ）ブチル）－４，７，１２，１５－テトラアザオクタデカンジオアート（２１１）の合成

ＤＭＡ（６０ｍＬ）中の(S)-3-(2-アミノ-6-(((2，2，2-トリクロロエトキシ)カルボニル)アミノ)ヘキサンアミド)プロパン酸tert-ブチル(6.88 g、14.4 mmol)及び2，3-ビス（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）コハク酸（５．００ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）に、ＥＤＣ・ＨＣｌ（２．７６ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．７ｍＬ、２６．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１５０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、分液漏斗中の１００ｍＬの水に注いだ。有機相を分離し、ブライン(2×50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(10～80%酢酸エチル/石油エーテル)で精製して、表題化合物211 (13.0g、収率85%)を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] +C 52 H 72 Cl 6 N 8 O 16計算値638.16。実測値、638.18。

実施例２０３．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（６Ｓ，１３Ｓ）－９，１０－ジアミノ－５，８，１１，１４－テトラオキソ－６，１３－ビス（４－（（（２，２，２－トリクロロエトキシ））)カルボニル)アミノ)ブチル)-4，7，12，15-テトラアザオクタデカンジオエート( 212) の合成

化合物２１１（１２．４ｇ、９．７２ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）溶液に、水素化ボトル中のＰｄ／Ｃ（１０重量％、０．１０ｇ）を加えた。ボトルを排気し、水素を３回再充填した後、混合物を２時間振盪し、セライト（濾過助剤）を通して濾過し、濾液を濃縮して、化合物２１２（９．４７ｇ、収率９７％）を無色の油として得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 36 H 60 Cl 6 N 8 O 12 計算値1007.25。実測値、1007.82。

実施例２０４．ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（６Ｓ，１３Ｓ）－９，１０－ビス（３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパンアミド）－５、８，１１，１４－テトラオキソ－６，１３－ビス（４－（（（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル）アミノ）ブチル）－４，７，１２，１５－テトラアザオクタデカン二酸（２１３）の合成

化合物２１０（９．４７ｇ、９．４０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液に、３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパン酸（１．９１ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（２．１７ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を加え、続いてＤＩＰＥＡ（４．０ｍＬ、２３．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、次いで水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン(30mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（１０～８０％酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、無色の油（９．４９ｇ、収率７７％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+2H] 2+C 50 H 70 Cl 6 N 10 O 18計算値655.15。実測値、655.10。

実施例２０５．(6S，13S)-9，10-ビス(3-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)プロパンアミド)-5，8，11，14 -テトラオキソ-6，13-ビス(4-(((2，2，2-トリクロロエトキシ)カルボニル)アミノ)ブチル)-4，7，12，15-テトラアザオクタデカン二酸( 214 ) の合成

化合物２１３（９．４９ｇ、７．６０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を、０℃で３０分間、４Ｎ ＨＣｌ（２ｍＬ）で処理し、その後濃縮し、短シリカゲルカラムにロードし、０～１５％メタノール／ジクロロメタンで溶出させて無色の油を得た（８．５０ｇ、収率９３％）。 MS-ESI (m/z) : [M+2H] 2+C 42 H 54 Cl 6 N 10 O 18計算値599.08。実測値、599.10。

実施例２０６．化合物２１５の合成。

化合物１８３（１０．０ｍｇ、０．０１０９ｍｍｏｌ）および化合物２１４（６．５ｍｇ、０．００５４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、ＴＢＴＵ（３．５０ｍｇ、０．０１０９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．０μＬ、０．０１０９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。高真空下でＤＭＦを除去した後、残渣を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）により精製して、無色の油状物（１４．０ｍｇ）を得た。この油をTHF (1.0 mL)に溶解し、0℃で30分間、TBAF (THF中1.0 M、35 μL)で処理し、その後濃縮し、短シリカゲルカラム(0-10% メタノール/ジクロロメタン)で精製し、無色の油状物(10.0 mg、収率34%)を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+3H] 3+ C 114 H 158 N 32 O 38 S 2計算値883.36。実測値、883.36。

実施例２０７．tert-ブチル((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31-オキソ-2，5，８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（２１６）の合成

化合物１３４（１．７０ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）および４－マレイミドブタン酸（０．３５ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＤＣＭに溶解し、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．７４ｇ）を加えた。０℃で２時間撹拌した後、反応物を５０ｍＬのＤＣＭで希釈し、５０ｍＬの水、５０ｍＬのブラインで洗浄し、濃縮して白色固体（１．９ｇ、収率９４％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 48 H 85 N 6 O 19計算値1049.58; 実測値、1049.58。

実施例２０８．((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31-オキソ-2，5，8，11、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニン（２１７）の合成

化合物２１６（1.9g，1.81mmol）を１５ｍＬのＤＣＭおよび１５ｍＬのＴＦＡに溶解した。室温で１時間撹拌した後、反応物を濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣによって精製して、無色の液体（１．１ｇ、収率６３％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 44 H 77 N 6 O 19計算値993.52; 実測値、993.52。

実施例２０９．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１－オキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニネート（２１８）の合成

化合物２１７（1.1g，1.14mmol）を４０ｍＬのＤＣＭに溶解し、ＮＨＳ（０．２１ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（０．４５ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応物を水５０ｍＬ、ブライン５０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して白色固体（１．０ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z): [M+H] + C 48 H 80 N 7 O 21計算値1090.53;実測値、1090.55。

実施例２１０．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S， 46S)-37-(4-(2，5-ジオキソ- 2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，46-トリメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23 、２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４２，４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２１９）の合成

化合物２１８（1.00g，0.91mmol）および化合物７７（0.43g，1.27mmol）を４０ｍＬのＴＨＦに溶解した。５０℃で一晩撹拌した後、反応物を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、無色の液体（０．５０ｇ、収率３３％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] + C 61 H 101 N 8 O 23 計算値1313.69; 実測値、1313.69.・

実施例２１１．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S， 46S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40， 43， 46-トリメチル-31， 38， 41， 44-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ- ３２、３９、４２、４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２２０）の合成

化合物２１９（２８６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭおよび１０ｍＬのＴＦＡに溶解した。室温で１時間撹拌した後、反応物を濃縮して、淡黄色の液体（５６３ｍｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z): [M+H] +C 56 H 93 N 8 O 21 計算値1213.64;実測値、1213.64。

実施例２１２．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S， 46S)-37- (4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，46-トリメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8 、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２、４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２２１）の合成

化合物２２０（２６０．０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（１７８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４９９ｍｇ、３．８６ｍｍｏｌ）をｐＨ～９になるまで加えた。０℃で０．５時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色の液体（４０７ｍｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 81 H 133 N 12 O 26 S計算値1721.91。実測値、1721.91。

実施例２１３．tert-ブチル(S)-(S)-(37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシネート（２２２）の合成

化合物２７（６．１０ｇ、０．００７モル）をＤＣＭ（８０ｍＬ）に溶解し、ペンタフルオロフェノール（１．８３ｇ、０．０１０モル）およびＮ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（１．６７ｇ、０．０１３モル）を加えた。１時間攪拌した後、４－マレイミドブタン酸（１．２２ｇ、０．００７モル）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２．２ｍＬ、０．０１３モル）を加えた。反応物を１時間撹拌し、１００ｍＬの水、ブライン、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１００／１２）で精製して、化合物２２２（６．８５ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 47 H 82 N 6 O 19計算値1035.56; 実測値、 1035.61 。

実施例２１４．(S)-(S)-(37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ-2、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシン（２２３）の合成

化合物２２２（６．８５ｇ、０．００７モル）をＤＣＭ（３０ｍＬ）およびＴＦＡ（１５ｍＬ）に溶解した。反応物を一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２２３（６．０３ｇ、収率９３％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 43 H 74 N 6 O 19計算値979.50;実測値、980.21 。

実施例２１５．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル））ブタンアミド）－３１、３８－ジオキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシネート（２２４）の合成

化合物２２３（３．５２ｇ、０．００４モル）をＤＣＭ（４０ｍＬ）に溶解し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（０．５４ｇ、０．００５モル）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（１．２４ｇ、０．００６モル）を加えた。反応物を１．５時間撹拌し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、化合物２２４（３．２０ｇ、収率８．３％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 47 H 77 N 7 O 21計算値1076.52;実測値、1076.69。

実施例２１６．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ- 1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 43， 46-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44， 47 -テトラアザノナトトラコンタン-49-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 225 )の合成

化合物２２４（３．２０ｇ、０．００３モル）および化合物７７（１．２１ｇ、０．００４モル）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、２５℃で２日間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２２５を得た（２．６６ｇ、収率６９％）。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 60 H 98 N 8 O 23計算値1299.67;実測値、1300.30。

実施例２１７．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル))ブタンアミド)-31， 38， 43， 46-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44， 47-テトラアザノナテトラコンタン-49-アミド) -4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 226 ) の合成

化合物２２５（２．６６ｇ、０．００２モル）をＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＴＦＡ（２０ｍＬ）に溶解した。反応物を２時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２２６（２．４６ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 55 H 90 N 8 O 21 計算値 1199.62; 実測値、1199.92。

実施例２１８．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 43， 46-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29 -デカオキサ-32，39，44，47-テトラアザノナテトラコンタン-49-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 227 ) の合成

化合物２２６ （２．４６ｇ、０．００２モル）およびＴｕｂ－１（１．７１ｇ、０．００２モル）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．３３９ｍＬ、０．００２モル）を加えた。反応物を１時間撹拌した。濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して化合物２２７（１．２２５ｇ、収率３５％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 80 H 130 N 12 O 26 S計算値1707.89; 実測値、1708.42。

実施例２１９．tert-ブチル (S)-(S)-(S)-(37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-３１，３８－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシルグリシネート（２２８）の合成

化合物４１（１．８５ｇ、２．００ｍｍｏｌ）および４－マレイミドブタン酸（０．４６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＤＣＭに溶解し、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．５８ｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で２時間撹拌した後、反応物を５０ｍＬのＤＣＭで希釈し、５０ｍＬの水、５０ｍＬのブラインで洗浄し、濃縮して白色固体（２．１０ｇ、収率９５％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 49 H 85 N 7 O 20計算値1092.58;実測値、1092.58。

実施例２２０．(S)-(S)-(S)-(37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31、３８－ジオキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシルグリシン（２２９）の合成

化合物２２８（２．１０ｇ 、１．９２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）およびＴＦＡ（１５ｍＬ）に溶解した。反応物を一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２２９（１．８３ｇ、収率９２％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 45 H 75 N 7 O 20計算値1036.52; 実測値、1036.55。

実施例２２１．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｓ）－（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１-イル)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39-ジアザトリテトラコンタン-43-オイル)グリシルグリシルグリシネート(230 ) の合成

化合物２２９（５００ｍｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（６７ｍｇ、０．５７９ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（１３９ｍｇ、０．７２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で６時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物２３０（５４６ｍｇ、収率９９％）を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 49 H 80 N 8 O 22計算値1133.54;実測値、1134.01。

実施例２２２．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ- 1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31、38、43、46、49-ペンタオキソ-2、5、8、11、14、17、20、23、26、29-デカオキサ-32、39、44 、４７、５０－ペンタアザドペンタコンタン－５２－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２３１）の合成

化合物２３０（３６０ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）および化合物７７（１２９ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）およびＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解した。反応物を室温で一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２３１（２００ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、収率４６％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 62 H 101 N 9 O 24計算値 1356.70; 実測値、1357.00。

実施例２２３．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル))ブタンアミド)-31、38、43、46、49-ペンタオキソ-2、5、8、11、14、17、20、23、26、29-デカオキサ-32、39、44、47、50-ペンタアザドペンタコンタン- 52-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 232 ) の合成

化合物２３１（２００ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解した。２時間撹拌した後、反応溶液を濃縮して２３２（１８５ｍｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 57 H 93 N 9 O 22計算値1256.64;実測値、1257.07。

実施例２２４；（２Ｓ，４Ｒ）－４－（２－（（６Ｓ，９Ｒ，１１Ｒ）－６－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－９－イソプロピル－２，３，３，８－テトラメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１，３８，４３，４６，４９－ペンタオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２、３９、４４、４７、５０－ペンタアザドペンタコンタン－５２－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２３３）の合成

化合物２３２（１８５ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（１０２ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０９７ｍＬ、０．５８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を一晩撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物２３３（１０７ｍｇ、収率４１％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 82 H 133 N 13 O 27 S計算値1764.92;実測値、1765.19。

実施例２２５；ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－２－（（４－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１，３８，４３－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）ベンジル）オキシ）アセテート（２３６）の合成

化合物２３４（８．４０ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）および化合物２３５（２．５９ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を６０ｍＬのＤＣＭに溶解した。EDC・HCl( 3.48g、18.2mmol)およびN，N-ジイソプロピルエチルアミン( 3.49g、18.2mmol )を加えた。反応物を０℃で１時間撹拌し、水１００ｍＬで洗浄し、水相をＤＣＭ５０ｍＬで抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を、酢酸エチル／石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムおよび分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２３６を茶色の液体として得た（３．０ｇ、収率２９％）。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 54 H 89 N 6 O 20計算値1141.61;実測値、1141.61。

実施例２２６．（Ｓ）－２－（（４－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１，３８，４３－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）ベンジル）オキシ）酢酸（２３７）の合成

化合物２３６（３．０ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのギ酸および３０ｍＬのＤＣＭに溶解した。反応物を４０～５０℃で３時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２３７を無色の液体として得た（１．２ｇ、収率４２％）。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 50 H 81 N 6 O 20計算値1085.54; 実測値、1085.54。

実施例２２７．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｓ）－２－（（４－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル））ブタンアミド)-31， 38， 43-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44-トリアザヘキサテトラコンタン-46-アミド)ベンジル)オキシ)アセテート ( 238 ) の合成

化合物２３７（４５０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）およびＮ－ヒドロキシスクシンイミド（７１ｍｇ、０．６１７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭに溶解し、次いでＥＤＣ・ＨＣｌ（１２６ｍｇ、０．６５７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間撹拌した後、反応物を水３０ｍＬ、ブライン３０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、２３８を無色の液体として得た（０．７１ｇ 、収率１００％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 54 H 84 N 7 O 22計算値1182.56; 実測値、1182.56。

実施例２２８．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-(2-(((4-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32、 ３９、４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）ベンジル）オキシ）アセトアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２３９）の合成

化合物２３８（710mg，0.41mmol）および化合物７７（１７４ｍｇ、０．５１ミリモル）を１０ｍＬのＴＨＦに溶解し、５０～５５℃で一晩撹拌した。次いで、反応物を濃縮し、３０ｍＬのＤＣＭで希釈し、３０ｍＬの水、３０ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、無色の液体を得た（１１４ｍｇ、収率２０％）MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 67 H 105 N 8 O 24計算値1405.72;実測値、1405.72。

実施例２２９；（２Ｓ，４Ｒ）－４－アミノ－５－（３－（２－（（４－（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１，３８，４３－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）ベンジル）オキシ）アセトアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２４０）の合成

化合物２３９（100mg，0.07mmol）を１０ｍＬのＤＣＭおよび３ｍＬのＴＦＡに溶解した。０℃で２時間撹拌した後、反応物を濃縮して無色の液体（０．５０ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 62 H 97 N 8 O 22計算値13.5.66; 実測値、1305.66。

実施例２３０．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチルの合成-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-(2-((4-((S)-37) -(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20， ２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）ベンジル）オキシ）アセトアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２４１）の合成

化合物２３９（92.8mg，0.07mmol）およびTub-1 (60.2mg，0.08mmol)を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４４５ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で０．５時間、室温で２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体（７５ｍｇ、収率５８％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 87 H 137 N 12 O 27 S計算値1813.94。実測値、1813.94。

実施例２３１．tert-ブチル(S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43，48-テトラオキソ-2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、49-ウンデカオキサ-32、39、44、47-テトラアザヘンペンタコンタン-51-オエート(244 ) の合成

化合物２４３（２．８０ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）および化合物２４２（４．４４ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）、ＨＡＴＵ（２．１４ｇ、５．６４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２．５ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ）に溶解した。反応物を３時間撹拌し、次いで濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１００／８）によって精製して、化合物２４４（４．７０ｇ、収率８６％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 48 H 84 N 6 O 20計算値1065.57; 実測値、1065.94。

実施例２３２．(S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43，48-テトラオキソ-2，５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９、４９－ウンデカオキサ－３２、３９、４４、４７－テトラアザヘンペンタコンタン－５１－酸（２４５）の合成

化合物２４４（4.70g，0.004mol）をDCM(40mL)およびＴＦＡ（２０ｍＬ）に溶解した。反応物を一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２４５（１．００ｇ、収率２２％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 44 H 76 N 6 O 20計算値1009.51;実測値、1009.72。

実施例２３３．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ- 1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 43， 48-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29， 49-ウンデカオキサ-32， 39， 44 、４７－テトラアザヘンペンタコンタン－５１－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２４６）の合成

化合物２４５（343mg，0.340mmol）をDCM(10mL)に溶解し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド(47mg，0.408mmol)およびＥＤＣ・ＨＣｌ（９８ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を４時間撹拌し、ブライン（５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を２０ｍＬの無水ＴＨＦに溶解し、化合物７７（１３８ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２４６（１７７ｍｇ、収率３９％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 61 H 100 N 8 O 24計算値1329.69; 実測値、1329.98。

実施例２３４．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル))ブタンアミド)-31， 38， 43， 48-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29， 49-ウンデカオキサ-32， 39， 44， 47-テトラアザヘンペンタコンタン-51-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸 ( 247 ) の合成

化合物２４６（１７７ｍｇ、０．１３３ｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解した。反応物を１時間撹拌し、濃縮して化合物２４７（０．１６ｇ、収率９７％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 56 H 92 N 8 O 22 計算値1229.63; 実測値、1231.31。

実施例２３５．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6， 9-ジイソプロピル-2， 3， 3， 8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12 -オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ- 1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 43， 48-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29， 49-ウンデカオキサ-32， 39， 44 、４７－テトラアザヘンペンタコンタン－５１－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２４８）の合成

化合物２４７（１６０ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（９０ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１７ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を４時間撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物２４８（１２７ｍｇ、収率５６％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 81 H 132 N 12 O 27 S計算値1737.90; 実測値、1738.58。

実施例２３６．ｔｅｒｔ－ブチル（６Ｓ、９Ｓ、１２Ｓ、１５Ｓ）－６－（３－メトキシ－３－オキソプロピル）－２、２、９、１２、１５－ペンタメチル－４、７、１０、１３－テトラオキソ-3-オキサ-5，8，11，14-テトラアザヘキサデカン-16-オエート(249) の合成

化合物１３２（４．００ｇ、０．０１４ｍｏｌ）およびＢｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＭｅ）－ＯＨ（３．６４ｇ、０．０１４ｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解し、ＨＡＴＵ（７．９４ｇ、０．０２１ｍｏｌ）およびＴＥＡ（３．８７０ｍｏｌ）を加えた。反応物を１．５時間撹拌し、ブライン（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物２４９（７．３９ｇ、収率１００％）を得た。これをさらに精製せずに次の工程で直接使用した。MS-ESI (m/z)： [M+H] +C 24 H 42 N 4 O 9計算値531.30; 実測値、531.26。

実施例２３７．((S)-2-アミノ-5-メトキシ-5-オキソペンタノイル)-L-アラニル-L-アラニル-L-アラニン(250)の合成

化合物２４９（７．３９ｇ、０．０１４モル）をＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＴＦＡ（２０ｍＬ）に溶解した。反応物を一晩撹拌し、濃縮して化合物２５０（５．２１ｇ、収率１００％）を得た。さらに精製せずに次の工程で使用した。MS-ESI (m/z)：[M+H] +C 15 H 26 N 4 O 7計算値375.18; 実測値、375.22。

実施例２３８．((S)-2-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-5-メトキシ-5-オキソペンタノイル)-L-アラニル-L-アラニル-L-アラニン ( 251 ) の合成

化合物２５０（１．３８ｇ、０．００４ｍｏｌ）をＤＣＭ（６０ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍＬ、０．００７ｍｏｌ）を加え、続いて４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（２．０６ｇ、０．００８ｍｏｌ）を加えた。３時間撹拌した後、反応物を水（２×１００ｍＬ）で抽出し、水相を濃縮して白色固体（１．４０ｇ、収率７０％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 23 H 33 N 5 O 10 計算値540.22;実測値、540.29。

実施例２３９．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）－１６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－１１－（３－メトキシ－３－オキソプロピル）－２，５，８－トリメチル－４，７，１０，１３－テトラオキソ－３，６，９，１２－テトラアザヘキサデカノエート（２５２）の合成

化合物２５１（１．４０ｇ、０．００３ｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解し、ＮＨＳ（０．３３ｇ、０．００３ｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（０．９９ｇ、０．００５ｍｏｌ）を加えた。反応物を１時間撹拌し、５０ｍＬのブラインで洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物２５２（１．６５ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 27 H 36 N 6 O 12計算値637.24; 実測値、637.36。

実施例２４０．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((6S， 9S， 12S， 15S)-6-(4-(2，5-ジオキソ- 2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-9，12，15-トリメチル-3，7，10，13-テトラオキソ-2-オキサ-8，11，14-トリアザヘキサデカン-16-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸 ( 253 )。

化合物252 (1.65 g、0.003 mol)および化合物77 (0.88 g、0.003 mol)をTHF (50 mL)に溶解し、50℃で一晩反応させた。濃縮および分取HPLCによる精製により、化合物253 (0.17 g、7.6 ％ 収率）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 40 H 57 N 7 O 14計算値860.40; 実測値、860.44。

実施例２４１．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((6S， 9S， 12S， 15S)-6-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H) -ピロール-1-イル)ブタンアミド)-9，12，15-トリメチル-3，7，10，13-テトラオキソ-2-オキサ-8，11，14-トリアザヘキサデカン-16-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)- 2-メチルペンタン酸 ( 254 ) の合成

化合物２５３（0.17g，0.198mmol）をＤＣＭ（４ｍＬ）およびＴＦＡ（４ｍＬ）に溶解した。反応物を１時間撹拌し、濃縮して化合物２５４（０．１５ｇ、収率１００％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 35 H 49 N 7 O 12計算値760.34;実測値、760.42。

実施例２４２．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((6S， 9S， 12S， 15S)-6- (4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-9，12，15-トリメチル-3，7，10，13-テトラオキソ-2-オキサ-8 、１１，１４－トリアザヘキサデカン－１６－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２５５）の合成

化合物２５４（０．１４ｇ、０．２０ｍｍｏｌ ）およびＴｕｂ－１（０．１５ｇ、０．２１ｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０９８ｍＬ、０．００１ｍｏｌ）を加えた。１時間撹拌し、分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物２５５（５５ｍｇ、収率２２％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 60 H 89 N 11 O 17 S計算値1268.62;実測値、1268.94。

実施例２４３．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29 -デカオキサ-32，39，42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 256 )の合成

ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（２．６ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物７９（１．９５ｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびＮ－メチルモルホリン（０．５３ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を加えた。室温で一晩撹拌した後、反応物をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体を得た（１．８ｇ、収率８０％）。 MS-ESI (m/z) ：[M + H ] + C 60 H 99 N 7 O 22計算値1270.68; 実測値、1271.24。

実施例２４４．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール) -1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39、 ４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２５７）の合成

化合物２５６（1.8g，1.4mmol）をＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＴＦＡ（１０ｍＬ）に溶解した。反応物を室温で２時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物２５７（１．６ｇ、収率９５％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H ] +C 55 H 91 N 7 O 20計算値、1170.63;実測値、1171.10。

実施例２４５．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4 -(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14 、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２５８）の合成

化合物２５７（５２０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（３２０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。０℃で２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、オフホワイトの固体（４３５ｍｇ、収率５８％）を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H ] + C 80 H 131 N 11 O 25 S 計算値1678.90;実測値、1679.56。

実施例２４６；（２Ｓ，４Ｒ）－４－アミノ－５－（４－ヒドロキシ－３－ニトロフェニル）－２－メチルペンタン酸（２６０）の合成

化合物２５９（２．０ｇ、５．４３ｍｍｏｌ）をメタノール性ＨＣｌ（４Ｍ、２０ｍＬ）に溶解し、３時間撹拌し、次いで濃縮して黄色油を得た（１．６６ｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z)：[M+H]+ C12H16N2O5計算値269.12。実測値、269.32。

実施例２４７．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-ヒドロキシ-3-ニトロフェニル)-2-メチルペンタン酸 ( 261 ）の合成

化合物２６０（１．５ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（３．９ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＤＭＦに溶解し、０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．５ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で２時間撹拌した後、反応物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（４×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体を得た（３．５ｇ、収率８０％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 37 H 56 N 6 O 10 S計算値777.38。実測値、 777.58。

実施例２４８．ベンジル (2S， 4R)-5-(4-(ベンジルオキシ)-3-ニトロフェニル)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル))-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-2-メチルペンタン酸( 262 ) の合成

化合物２６１（３．５ｇ、４．５１ｍｍｏｌ）および臭化ベンジル（２．３ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（６０ｍＬ）に溶解し、氷水浴中で０℃に冷却した。水素ナトリウム(540mg、60wt%)を少しずつ加え、添加後、反応物を室温に温め、一晩撹拌した。溶液をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、ブライン（４×１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮し、シリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１～１０：１）によって精製して、黄色の固体（２．８ｇ、収率６５％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 51 H 68 N 6 O 10 S計算値957.47。実測値、 957.85。

実施例２４９．ベンジル(2S， 4R)-5-(3-アミノ-4-(ベンジルオキシ)フェニル)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-)ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-2-ペンタン酸メチル（２６３）の合成

化合物２６２（２．８ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を収率９５％のエタノール（５０ｍＬ）に溶解し、塩化アンモニウム（１．６ｇ、２９．２５ｍｍｏｌ）および鉄粉（１．６ｇ、２９．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流下で加熱した。一晩中。溶液をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を濃縮し、シリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０～２０：１）で精製して、黄色の固体（２．３ｇ、収率８５％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 51 H 70 N 6 O 8 S計算値、927.51 ;実測値、 927.65。

実施例２５０；ベンジル（２Ｓ，４Ｒ）－５－（３－（（Ｓ）－３７－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３１，３８，４１－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，４４－ウンデカオキサ－３２，３９，４２－トリアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－（ベンジルオキシ）フェニル）－４－（２－（（６Ｓ，９Ｒ，１１Ｒ）－６－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－９－イソプロピル－２，３，３，８－テトラメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－２－メチルペンタン酸（２６５）の合成

化合物２６４（７５０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および化合物２６３（７００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をＤＭＣ（２０ｍＬ）に溶解し、ＰｙＢｒＯＰ（３６０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１～１０：１）で精製して、黄褐色の固体（４２０ｍｇ、収率２９％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 99 H 142 N 10 O 25 S計算値1903.99。実測値、 1904.53。

実施例２５１．ベンジル(2S，4R)-5-(3-((S)-37-アミノ-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23， 26， 29， 44-ウンデカオキサ-32， 39， 42-トリアザヘプタテトラコンタン-47-アミド)-4-(ベンジルオキシ)フェニル)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)- sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4，7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)- 2-メチルペンタン酸 ( 266 )の合成

化合物２６５（４２０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１００ｍｇ、１０ｗｔ％）を加え、反応フラスコを真空にし、水素を３回充填し、５０℃で３時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して白色固体を得た（１１０ｍｇ、収率３３％）。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 70 H 120 N 10 O 23 S計算値 1501.83 ;実測値、 1502.12。

実施例２５２．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29， 44 -ウンデカオキサ-32，39，42-トリアザヘプタテトラコンタン-47-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 267 ) の合成

化合物２６６（１１０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）および４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（２１ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、Ｎ－メチルモルホリン（１０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で一晩撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物２６７（１５ｍｇ、収率１２％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 78 H 127 N 11 O 26 S計算値 1666.87 ;実測値、 1667.52。

実施例２５３．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）-5-ウレイドペンタン酸 ( 269 ) の合成

２００ｍＬのＤＣＭ中の化合物２６８（４．００ｇ、８．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨＳ（１．３９ｇ、１２．１０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（３．０９ｇ、１６．１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を４時間撹拌し、１００ｍＬの水で希釈し、濾過して、４．４０ｇの白色固体を得た（収率９２％）。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 30 H 35 N 5 O 8 計算値594.25;実測値、594.25。

実施例２５４．(2S， 4R)-5-(3-((S)-2-((S)-2-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-3 -メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸( 270 ) の合成

１５０ｍＬの無水ＴＨＦ中の化合物２６９（２．００ｇ、３．３７ｍｍｏｌ）および化合物７７（１．２５ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）の溶液を７０℃で一晩加熱した。反応物を濃縮し、シリカゲルカラム(11% MeOH/DCM)で精製して、赤色固体(0.79 g、収率29%)を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 43 H 56 N 6 O 10 計算値817.41;実測値、817.32。

実施例２５５．(2S， 4R)-5-(3-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-( (tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸( 271 )の合成

化合物２７０（０．７９ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液をピペリジン（０．５０ｍＬ）とともに室温で１０分間撹拌し、次いで濃縮し、５ｍＬのＴＨＦと共蒸発させて、化合物２７１を得た（０．８７ｇ、収率＞１００％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 28 H 46 N 6 O 8計算値595.34;実測値、595.35。

実施例２５６．(2S， 4R)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-43 -(3-ウレイドプロピル)-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-( (tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-メチルペンタン酸( 273 ) の合成

粗化合物２７１（０．９７ｍｍｏｌ）および化合物２７２（１．３４ｍｍｏｌ）の２０ｍＬの無水ＴＨＦ中溶液を、７０℃で０．５時間加熱した。反応物を濃縮し、シリカゲルカラム（１３％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製して、化合物２７３（１．１３ｇ、収率８８％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 63 H 104 N 8 O 22計算値1325.73;実測値、1326.28。

実施例２５７．(2S， 4R)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-アミノ-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-43-(3-ウレイドプロピル)-2、5、8、11、14、17、20、23、26、29-デカオキサ-32、39、42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)- 2-メチルペンタン酸 ( 274 ) の合成

化合物２７３（１．１３ｇ、８．５２ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（３１０ｍｇ、１０ｗｔ％）を加え、反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、３０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して化合物２７４（０．７７ｇ、収率７５％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 55 H 98 N 8 O 20計算値1191.69;実測値、1192.10。

実施例２５８．(2S， 4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-43-(3-ウレイドプロピル)-2， 5 ， 8， 11， 14， 17， 20， 23 、２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２７５）の合成

化合物２７４（０．７７ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）および４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（０．１８ｇ、６．５５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を３０℃で１時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）により精製し、化合物２７５（０．６６ｇ、収率７６％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 63 H 105 N 9 O 23計算値1356.73;実測値、1356.33。

実施例２５９．(2S， 4R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール) -1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-31，38，41-トリオキソ-43-(3-ウレイドプロピル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ- ３２，３９，４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２７６）の合成

化合物２７６（０．６６ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液をＴＦＡ（１０ｍＬ）とともに４０分間撹拌した。次いで濃縮して、粗生成物を得た（１．０２ｇ、収率＞１００％）。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 58 H 97 N 9 O 21計算値1256.68;実測値、1257.23。

実施例２６０．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4 -(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-31，38，41-トリオキソ-43-(3-ウレイドプロピル)-2，5，8 、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２７７）の合成

化合物２７６（０．３１ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（０．１７ｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１６３μＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２７７（３４３ｍｇ、収率７９％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] +C 83 H 137 N 13 O 26 S計算値1764.95;実測値、1765.99。

実施例２６１．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－（Ｓ）－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１、３８－ジオキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシネート（２７８）の合成

化合物２３４（１．６０ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）、ペンタフルオロフェノール（０．４７ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（０．４３ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＤＣＭに溶解し、２時間撹拌した。次いで、H-Gly-O t Bu(0.32g 、 1.91mmol)およびN，N-ジイソプロピルエチルアミン( 0.45g 、 3.47mmol)を加え、反応物を一晩撹拌し、50mLの水、50mLのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固した。粗製物をシリカゲルカラムで精製して、化合物２７８を淡黄色液体として得た（１．５ｇ、収率８３％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 47 H 83 N 6 O 19 計算値1035.56;実測値、1035.56。

実施例２６２．(S)-(S)-(37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ-2、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシルグリシン（２７９）の合成

化合物２７８（１．５０ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、２０ｍＬのギ酸とともに撹拌した。４０℃で２時間撹拌した後、反応物を濃縮して、化合物２７９を無色の液体として得た（１．５０ｇ、収率１００％）。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 43 H 75 N 6 O 19計算値979.50;実測値、979.50。

実施例２６３．tert-ブチル((2R，4S)-1-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル))ブタンアミド)-31， 38， 43， 46-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44， 47-テトラアザノナテトラコンタン-49-アミド) -4-ヒドロキシフェニル)-5-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)-4-メチル-5-オキソペンタン-2-イル)カルバメート( 281 ) の合成

化合物２７９（５００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および化合物２８０（２３４ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭおよび３ｍＬのＤＭＦに溶解し、０℃で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、シリカゲルカラムで精製して、化合物２８１を淡黄色液体として得た（０．２２ｇ、収率３２％） MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 62 H 104 N 9 O 23計算値1342.72;実測値、1342.72。

実施例２６４．Ｎ－（（Ｓ）－６－（（４－（（２－（（２－（（５－（（２Ｒ，４Ｓ）－２－アミノ－５－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）） )-4-メチル-5-オキソペンチル)-2-ヒドロキシフェニル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-4-オキソブチル)アミノ)-5-(4-(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-6-オキソヘキシル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサヘントリアコンタン-31-アミド ( 282 ）の合成

化合物２８１（０．１１ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を６ｍＬのＤＣＭおよび２ｍＬのＴＦＡに溶解した。反応物を０℃で２時間撹拌し、次いで濃縮して、化合物２８２を淡黄色液体として得た（ ０．１０ｇ、収率１００％）。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 57 H 96 N 9 O 21計算値1242.66;実測値、1242.66。

実施例２６５．(1R， 3R)-3-((2S， 3S)-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド)-N， 3-ジメチルペンタンアミド)-1-(4-(((2R) 、４Ｓ）－１－（３－（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１、３８、４３、４６ -テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44， 47-テトラアザノナテトラコンタン-49-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-5-((2 -ヒドロキシエチル)アミノ)-4-メチル-5-オキソペンタン-2-イル)カルバモイル)チアゾール-2-イル)-4-メチルペンチルアセテート( 283 )の合成

化合物282 ( 0.10 g、0.08 mmol )およびTub-1 (61 mg、0.08 mmol) を 5 mL の DMF に溶解し、N，N-ジイソプロピルエチルアミン( 125 mg、0.96 mmol ) を0℃で添加して pH を～９に調整した。反応物を０℃で２時間、室温で１時間撹拌し、分取ＨＰＬＣで直接精製して、化合物２８３を淡黄色液体として得た（４５ｍｇ、収率３１％）。MS-ESI (m/z) ： [M+H] + C82H136N13O26S計算値1750.94。実測値、1750.94。

実施例２６６．(2S， 4R)-4-(2-((6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7-ジオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-( 2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17 、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（２８４）の合成

化合物２５７（３００ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－３（１７５ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６６ｍｇ、０．５１２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を０℃で２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物２８４（６０ｍｇ、収率１４％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H ] + C 79 H 131 N11O 24 S計算値 1650.90。実測値、 1651.50。

実施例２６７．tert-ブチル (R)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-40-イソプロピル-43-メチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタノエート（２８６）の合成

化合物７６（６．０ｇ、５．９ｍｍｏｌ）および化合物６９ （２．７ｇ、７．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液を６０℃で２０時間加熱し、次いで濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１）で精製して、化合物２８６をオフホワイトの固体として得た（７．１ｇ、収率９３％）。 MS-ESI (m/z)：[M+H ] + C 164 H 266 N 24 O 52 S 2計算値3472.19; 実測値、 3472.95 。

実施例２６８．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ、４３Ｓ）－３７－アミノ－４０－イソプロピル－４３－メチル－３１、３８、４１－トリオキソ－２、５、 8、11、14、17、20、23、26、29-デカオキサ-32、39、42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ペンタノエート ( 287 )の合成

イソプロパノール（８０ｍＬ）中の化合物２８６（７．１ｇ、５．７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（５重量％、８００ｍｇ）を加えた。反応フラスコを排気し、水素を再充填することを３回繰り返した後、５０℃に加熱し、２．５時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮して、オフホワイトの固体(5.9 g、収率93%)を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H ] +C 55 H 98 N 6 O 19 計算値1147.69;実測値、1148.12 。

実施例２６９．tert-ブチル(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2)、5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31、38、41-トリオキソ-2、5、8、11、14、17、20、23、26、 ２９－デカオキサ－３２，３９，４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタノエート（２８８）の合成

化合物２８７（２．０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）、４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（２．６ｍｍｏｌ）およびＮ－メチルモルホリン（０．５３ｇ、５．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液を室温で一晩撹拌した。次いで、混合物をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム( DCM/MeOH=20:1 )で精製して、化合物288 (2.1g、収率91%)を淡褐色油状物として得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H ] +C 63 H 105 N 7 O 22計算値1312.73;実測値、1313.12。

実施例２７０．(R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1) -イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 289 ) の合成

化合物２８８（２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液を、室温で２時間、ＴＦＡ（１０ｍＬ）で処理した。次いで、溶液を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、白色固体（１．４ｇ、収率７８％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 54 H 89 N 7 O 20計算値1156.63; 実測値、1157.23。

実施例２７１．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ、４３Ｓ）－３７－（４－（ 2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17 、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（２９０）の合成

化合物２８９（１．３７ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）、Ｔｕｂ－１（０．９０ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．３１ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。溶液を０℃で２時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、白色固体を得た（８８０ｍｇ、収率４５％）。 MS-ESI (m/z)：[M+H] +C 79 H 129 N 11 O 25 S計算値1664.89。実測値、1665.63。

実施例２７２．(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40， 43-ジメチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32 、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（２９３）の合成

化合物２９１（４７０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および化合物２９２（２５０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ・ＨＣｌ（１２０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。１時間後、反応溶液を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム(DCM/MeOH=10:1)で精製して、化合物293 ( 390mg、収率56%)を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 57 H 93 N 7 O 22計算値1229.64;実測値、1229.64。

実施例２７３．(R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1) -イル)ブタンアミド)-40， 43-ジメチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン- ４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（２９４ ）の合成

化合物２９３（３９０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を、室温で１時間、ＴＦＡ（５ｍＬ）で処理し、その後濃縮して化合物２９４（５８０ｍｇ、収率＞１００％）を得て、次の工程で直接使用した。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 52 H 85 N 7 O 20計算値1129.64;実測値、1129.64。

実施例２７４．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ、４３Ｓ）－３７－（４－（ 2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43-ジメチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20 、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（２９５）の合成

化合物２９４（５８０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、Ｔｕｂ－１（２１０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．３ｍＬ）を０℃で加えた。溶液を０℃で２時間撹拌した後、濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して白色固体（２２７ｍｇ、収率４６％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 77 H 125 N 11 O 25 S計算値1636.86;実測値、1636.86。

実施例２７５．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１－オキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２－アザオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－バリネート（２９７）の合成

化合物２９６（８７９．０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液に、ＮＨＳ（１２６．６ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（３８３．４ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、水でクエンチした。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を得た(1.1g、収率>100)。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 44 H 74 N 5 O 19 計算値976.49;実測値: 976.49 。

実施例２７６．tert-ブチル(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5) -ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32、 ３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（２９８）の合成

化合物２９７（５５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。化合物８５（２１５．０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、完全に消費されるまで撹拌した。反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２９８（２０１ｍｇ、収率３１％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 62 H 104 N 7 O 22計算値1298.72;実測値、1298.72。

実施例２７７．(R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル))ブタンアミド)-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド) -4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸 ( 299 ) の合成

化合物２９８（１０１ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液を、室温で１時間、ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理し、その後濃縮して化合物２９９（１２８ｍｇ、収率＞１００％）を得て、次の工程で直接使用した。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 53 H 88 N 7 O 20計算値1142.60;実測値、1142.60。

実施例２７８．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ）－３７－（４－（２、 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26 、２９－デカオキサ－３２，３９，４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３００）の合成

化合物２９９（７０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、Ｔｕｂ－１（４０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。溶液を室温で２時間撹拌した後、濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、白色固体を得た（３８ｍｇ、収率３８％）。MS-ESI (m/z)： [M+H] +C 78 H 128 N 11 O 25 S計算値1650.87;実測値、1650.87 。

実施例２７９．Ｎ－（（Ｓ）－５－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－６－（（（Ｓ）－１）-(((S)-1-(2，5-ジオキソピロリジン-1-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-6-オキソヘキシル)-2、 ５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサヘントリアコンタン－３１－アミド（３０２ ）の合成

化合物３０１（３００ｍｇ、０．３２５ｍｍｏｌ）、ＮＨＳ（４２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（９５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液を室温で２時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、化合物３０２（２８０ｍｇ、収率８５％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 45 H 72 N 6 O 20計算値1017.48; 実測値1017.48。

実施例２８０．tert-ブチル(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((37S， 40S， 43S， 46S)-37-(4-(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，46-トリメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17，20、 ２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４２，４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３０４）の合成

化合物３０２（２８０ｍｇ、０．２８ミリモル）および化合物３０３（２００ｍｇ、０．４４ミリモル）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液を室温で２時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０：１）で精製して、化合物３０４（１８０ｍｇ、収率４８％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 64 H 106 N 8 O 23 計算値1355.74;実測値、1355.74。

実施例２８１．(R)-4-アミノ-5-(3-((37S， 40S， 43S， 46S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール) -1-イル)ブタンアミド)-40， 43， 46-トリメチル-31， 38， 41， 44-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32、 ３９，４２，４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３０５）の合成

化合物３０７（１８０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）溶液を、室温で１時間、ＴＦＡ（３ｍＬ）で処理し、次いで濃縮して化合物３０５（３００ｍｇ、収率＞１００％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 55 H 90 N 8 O 21計算値1199.62;実測値、1199.62。

実施例２８２．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ、４３Ｓ、４６Ｓ）－３７－（４-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，46-トリメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11 、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２、４５－テトラアザヘプタテトラコンタン－４７－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３０６）の合成

化合物３０５（１６０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、Ｔｕｂ－１（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温に温め、１時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、白色固体を得た（５８ｍｇ、収率２５％）。MS-ESI (m/z)： [M+H] +C 80 H 130 N 12 O 26 S計算値1707.89;実測値、1707.89。

実施例２８３．メチル(S)-5-(((S)-1-(((S)-1-(((S)-1-((5-((R)-5-(tert-ブトキシ)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-オキソペンチル)-2-ヒドロキシフェニル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン－２－イル）アミノ）－４－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－５－オキソペンタノエート（３０７）の合成

化合物２５１（０．２８ｇ、０．５ｍｍｏｌ）および化合物６９（０．２０ｇ、０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（０．３０ｇ、０．８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３０μＬ、０．８ミリモル）を加えた。反応物を室温で１０分間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって直接精製して、白色固体を得た（３２４ｍｇ、収率６９％）。MS-ESI(m/z) ：[M+H] +C 43 H 63 N 7 O 14計算値902.44;実測値、902.81。

実施例２８４．(R)-4-アミノ-5-(3-((6S， 9S， 12S， 15S)-6-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール) -1-イル)ブタンアミド)-9，12，15-トリメチル-3，7，10，13-テトラオキソ-2-オキサ-8，11，14-トリアザヘキサデカン-16-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 308 ）の合成

化合物３０７ (0.32g，0.36mmol)のDCM(10mL)中溶液を、室温で１時間、ＴＦＡ（１０ｍＬ）で処理し、次いで濃縮して化合物３０８（０．２７ｇ、収率＞１００）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 34 H 47 N 7 O 12計算値746.33;実測値、746.67。

実施例２８５．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（６Ｓ、９Ｓ、１２Ｓ、１５Ｓ）－６－（４-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-9，12，15-トリメチル-3，7，10，13-テトラオキソ-2-オキサ-8，11 、１４－トリアザヘキサデカン－１６－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３０９）の合成

化合物３０８ (0.27g，0.36mmol)、 Tub-1 ( 0.25g ， 0.36mmol )のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１８０μＬ、１．０９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で３０分間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣで精製して白色固体（３６７ｍｇ、収率５９％）を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 59 H 87 N 11 O 17 S 計算値1254.60;実測値、1255.32。

実施例２８６．(1R， 3R)-1-(4-(((R)-5-アミノ-1-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23 、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－５－オキソペンタン－２－イル）カルバモイル）チアゾール－２－イル）－３－（（２Ｓ、３Ｓ）－２－（２－（ジメチルアミノ）－２－メチルプロパンアミド）－Ｎ，３－ジメチルペンタンアミド）－４－メチルペンチルアセテート（３１０）の合成

化合物２９０（３００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＮＨＳ（３１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（５２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を０℃で１時間撹拌し、塩化アンモニウム(15mg、0.4mmol)およびN-メチルモルホリン(55mg、0.54mmol)を加えた。反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。ＬＣ－ＭＳは中間体の完全な変換を示し、次いで粗生成物を分取ＨＰＬＣによって直接精製して、化合物３１０（１４０ｍｇ、収率４７％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 79 H 130 N 12 O 24 S計算値1663.90、実測値 1664.93。

実施例２８７．(1R， 3R)-3-((2S， 3S)-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド)-N， 3-ジメチルペンタンアミド)-1-(4-(((R )-1-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43 -メチル-31， 38， 41-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 42-トリアザテトラテトラコンタン-44-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)－５－ヒドラジニル－５－オキソペンタン－２－イル）カルバモイル）チアゾール－２－イル）－４－メチルペンチルアセテート（３１２）の合成

化合物２９０（３００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＮＨＳ（４２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を0℃で１時間撹拌し、ヒドラジン(20mg 、 0.36mmol)およびN，N-ジイソプロピルエチルアミン(70mg 、 0.54mmol)を加えた。反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。LC-MSは、中間体の完全な変換を示し、次いで、粗生成物を分取HPLCによって直接精製して、化合物312 (100mg、収率33%)を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 79 H 131 N 13 O 24 S計算値1678.92;実測値、1678.90。

実施例２８８．(S，E)-37-((4-((2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)アミノ)-4-オキソブチル)カルバモイル)-31，39，44-トリオキソ-2、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３８、４３－トリアザヘプタテトラコント－４５－エン－４７－酸（３１４）の合成

化合物３１３（１．３ｇ、０．００１モル）のアセトニトリル（２０ｍＬ）および炭酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ）中の混合物を一晩撹拌した。有機溶媒を除去し、３０ｍＬの水を溶液に加えた。希塩酸でpHを弱酸性に調整した後、溶液をDCM (5×30 mL)で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物３１４（１．３０ｇ、収率９８％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 45 H 81 N 5 O 19計算値996.55;実測値、996.65。

実施例２８９．１－（ｔｅｒｔ－ブチル）２０－メチル（Ｓ、Ｅ）－４、９、１２、１７－テトラオキソ－１０－（３１－オキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，８，１１，１６－テトラアザイコス－１８－エンジオエート（３１５）の合成

化合物３１４（１．３０ｇ、０．００１ｍｏｌ）の溶液に、氷水浴上で塩化チオニル（０．０９５ｍＬ、０．００１ｍｏｌ）を滴下した。浴を取り外した後、反応物を室温で一晩撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物３１５（４７４ｍｇ、収率３６％）を得た。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 46 H 83 N 5 O 19計算値1010.57; 実測値1010.61。

実施例２９０．(S，E)-(37-(4-(4-メトキシ-4-オキソブト-2-エンアミド)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ-2，5，8，11，14，17、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシン（３１６）の合成

化合物３１５（４７４ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液を、室温で４時間、ＴＦＡ（５ｍＬ）で処理し、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物３１６（２１３ｍｇ、４７．３３％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 42 H 75 N 5 O 19計算値954.51。実測値、954.87 。

実施例２９１．メチル（Ｓ，Ｅ）－３７－（（４－（（２－（（５－（（Ｒ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－）） 5-オキソペンチル)-2-ヒドロキシフェニル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-4-オキソブチル)カルバモイル)-31，39，44-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23， ２６，２９－デカオキサ－３２，３８，４３－トリアザヘプタテトラコント－４５－エン－４７－オエート（３１７）の合成

化合物３１６（２１３ｍｇ、０．２２３ミリモル）および化合物６９（１４４ｍｇ、０．３７８ミリモル）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣ・ＨＣｌ（７４ｍｇ、０．３８６ミリモル）を加えた。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物３１７（１７１ｍｇ、収率５９％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 62 H 105 N 7 O 23計算値1316.73;実測値、1317.66。

実施例２９２．(R)-4-アミノ-5-(4-ヒドロキシ-3-((S)-37-(4-((E)-4-メトキシ-4-オキソブト-2-エナミド)ブタンアミド)-31， 38， 43-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44-トリアザヘキサテトラコンタン-46-アミド)フェニル)ペンタン酸( 318 ）の合成

化合物３１７（１７１ｍｇ 、０．１３０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３ｍＬ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）に溶解した。溶液を室温で２時間撹拌し、濃縮して化合物３１８（０．１５ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI(m/z) C 53 H 89 N 7 O 21 [M+H] +計算値1160.61;実測値、1161.26。

実施例２９３．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-ヒドロキシ-3-((S)-37-(4-((E )-4-メトキシ-4-オキソブト-2-エナミド)ブタンアミド)-31， 38， 43-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39 、４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）フェニル）ペンタン酸（３１９）の合成

化合物３１８（１５０ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（８９ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０２１ｍＬ、０．１２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１．５時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって直接精製して、化合物３１９（１７ｍｇ、収率８％）を得た。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 78 H 129 N 11 O 26 S計算値1668.88;実測値、1669.34。

実施例２９４．tert-ブチル(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ) -1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31、38、43、48-テトラオキソ-2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、49-ウンデカオキサ-32、39、 ４４，４７－テトラアザヘンペンタコンタン－５１－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３２０）の合成

化合物２４５（３２７ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）および化合物６９（１４８ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、ＥＤＣ・ＨＣｌ（７５ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１時間撹拌し、そして直接次の工程に進んだ。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 64 H 106 N 8 O 24計算値1371.73;実測値、1372.41。

実施例２９５．(R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド) )-31， 38， 43， 48-テトラオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29， 49-ウンデカオキサ-32， 39， 44， 47-テトラアザヘンペンタコンタン-51-アミド) -4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 321 ) の合成。

前の工程の反応混合物に、 10 mLのTFAを加えた。反応物を１時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物３２１（０．２０ｇ、収率５１％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 55 H 90 N 8 O 22 計算値1215.62;実測値、1216.25。

実施例２９６．(R)-4-(2-((6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4、7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43，48-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，49 -ウンデカオキサ-32，39，44，47-テトラアザヘンペンタコンタン-51-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 322 ) の合成

化合物３２１（２００ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（１１４ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０２７ｍＬ、０．１６５ｍｍｏｌ）を加え、４時間撹拌した。反応物を分取ＨＰＬＣにより直接精製して、化合物３２２（９４ｍｇ、収率３３％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 80 H 130 N 12 O 27 S計算値1723.89; 測値、1724.81。

実施例２９７．２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｓ）－（３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１、３８－ジオキソ－２、５、８、１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－オイル）グリシネート（３２３）の合成

化合物２３４（１．０ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、ＮＨＳ（０．１５ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（０．４３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、水でクエンチした。層を分離し、有機相をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物３２３（１．１ｇ、収率９９％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 45 H 75 N 6 O 20計算値1019.50;実測値、 1019.50。

実施例２９８．tert-ブチル(R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ) -1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38， 43-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44-トリアザヘキサテトラコンタン- 46-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 324 ) の合成

化合物３２３（１．１ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。化合物６９（２１５．０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を溶液に加え、室温で一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、シリカゲルカラム（６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、化合物３２４（２００ｍｇ、収率１５％）を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 61 H 102 N 7 O 22計算値1284.70;実測値、 1284.70。

実施例２９９．(R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド) )-31， 38， 43-トリオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32， 39， 44-トリアザヘキサテトラコンタン-46-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸酸( 325 ) の合成

化合物３２４（１８０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）溶液を、室温で２時間、ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理し、濃縮し、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で粉砕して化合物３２５を得た（１７４ｍｇ、収率> 100%）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 52 H 86 N 7 O 20計算値1128.58;実測値、1128.58。

実施例３００．（Ｒ）－４－（２－（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｒ，１１Ｒ）－６－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－３，９－ジイソプロピル－２，８－ジメチル－４，７，１３－トリオキソ－１２－オキサ－２，５，８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－３１，３８，４３－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタン－４６－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３２６）の合成

化合物３２５（１７４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５ｍＬ）に、Ｔｕｂ－４（９８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．５ｍＬ）を加え、続いてＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加えた。。溶液を室温で３０分間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物３２６を得た（３．４ｍｇ、収率１４％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H]⁺ C₇₈H₁₂₈N₁₁O₂₅S計算値1650.87;実測値1650.87。

実施例３０１．(2S， 4R)-4-(2-((3S， 6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，44-トリアザヘキサテトラコンタン-46-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 328 ) の合成

Tub-4 (95 mg、0.13 mmol)および化合物327 (150 mg、0.13 mmol)のDMF (2 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン(34 mg、0.36 mmol)を0℃で加えた。反応物を室温に温め、２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３２８ （５０ｍｇ、収率２３％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 79 H 130 N 11 O 25 S計算値1666.01;実測値、 1666.01。

実施例３０２．(R)-4-(2-((3S， 6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3， 9-ジイソプロピル-2， 8-ジメチル-4、7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38-ジオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39 -ジアザトリテトラコンタン-43-アミド)-4-ヒドロキシフェニル)ペンタン酸( 330 ) の合成

Tub-4 (49 mg、0.070 mmol) および化合物329 (74 mg、0.070 mmol) のDMF (2 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン (0.036 mL、0.28 mmol) を室温で加えた。３時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３０（５１ｍｇ、収率４６％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 76 H 124 N 10 O 24 S 計算値1593.85;実測値、1594.62。

実施例３０３．(2S， 4R)-4-(2-((3S， 6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2， 5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31， 38-ジオキソ-2， 5， 8， 11， 14， 17， 20， 23， 26， 29-デカオキサ-32 、３９－ジアザトリテトラコンタン－４３－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（３３２）の合成

Tub-4 (100 mg、0.14 mmol) および化合物331 (146 mg、0.14 mmol) のDMF (2 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン (0.073 mL、0.42 mmol) を室温で加えた。３．５時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３２（８２ｍｇ、収率３７％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 75 H 122 N 10 O 23 S計算値1563.84;実測値、1564.46。

実施例３０４．(R)-4-(2-((3S， 6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3， 9-ジイソプロピル-2， 8-ジメチル-4、7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32 、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３３４）の合成

Tub-4 (117 mg、0.17 mmol) および化合物333 (180 mg、0.17 mmol) の DMF (2 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン (45 mg、0.33 mmol) を室温で加えた。２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３４（７３ｍｇ、収率２７％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 76 H 124 N 11 O 25 S計算値1622.84;実測値、 1622.84。

実施例３０５．(R)-4-(2-((3S， 6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3， 9-ジイソプロピル-2， 8-ジメチル-4、７、１３－トリオキソ－１２－オキサ－２、５、８－トリアザテトラデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（３－（（３７Ｓ、４０Ｓ、４３Ｓ）－３７－（４－（ 2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17 、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３３５）の合成

Tub-4 (185 mg、0.256 mmol)および化合物316 (300 mg、0.256 mmol)のDMF (5 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン(66 mg、0.512 mmol)を0℃で加えた。反応物を０℃で２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３５ （１２０ｍｇ、収率２９％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 80 H 131 N 11 O 25 S計算値1678.90;実測値、1679.30。

実施例３０６．(2S， 4R)-4-(2-((3S， 6S， 9R， 11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3，9-ジイソプロピル-2，8-ジメチル-4， 7， 13-トリオキソ-12-オキサ-2， 5， 8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4 -(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14 、１７、２０、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（３３６）の合成

Tub-2 (180 mg、0.256 mmol)および化合物257 (300 mg、0.256 mmol)のDMF (5 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン(66 mg、0.512 mmol)を0℃で加えた。反応物を０℃で２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３６ （９０ｍｇ、収率２０％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H + ] C 80 H 133 N 11 O 24 S計算値1664.92。実測値、1665.50。

実施例３０７．(R)-4-(2-((3S， 6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3， 9-ジイソプロピル-2， 8-ジメチル-4、7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((37S， 40S， 43S)-37-(4-(2， 5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20 、２３、２６、２９－デカオキサ－３２、３９、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３３７）の合成

Tub-2 (58.1 mg、0.085 mmol)および化合物316 (128.0 mg、0.094 mmol)のDMF (2 mL)溶液に、 N，N-ジイソプロピルエチルアミン(20 mg、0.17 mmol)を0℃で加えた。反応物を室温に温め、２時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３７（２６ｍｇ、収率１９％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 79 H 132 N 11 O 24 S計算値1650.91;実測値、1650.91。

実施例３０８．(R)-4-(2-((3S， 6S， 9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-3， 9-ジイソプロピル-2， 8-ジメチル-4、7-ジオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザトリデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ- 2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，41-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39 、４２－トリアザテトラテトラコンタン－４４－アミド）－４－ヒドロキシフェニル）ペンタン酸（３３８）の合成

Tub-2 ( 37.0 mg、0.055 mmol)および化合物333 (60.0 mg、0.055 mmol)のDMF (2 mL)溶液に、N，N-ジイソプロピルエチルアミン(0.009 mL、0.055 mmol)を0℃で加えた。反応物を室温に温め、２．５時間撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３３８（５２ｍｇ、収率６０％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 75 H 123 N 11 O 24 S計算値594.83;実測値、1596.26。

実施例３０９．（４－（ベンジルオキシ）－５－メトキシ－２－ニトロフェニル）（（２Ｒ）－２－（ヒドロキシメチル）シクロペンチル）メタノン（３４２）の合成

化合物３４０（３０．３ｇ、０．１モル）、化合物３４１（１０．１ｇ、０．１モル）のＤＭＦ（５００ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（２０．１ｇ、０．２モル）およびＨＡＴＵ（４９．４ｇ、０．１３モル）を室温で加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、ＤＣＭ（２Ｌ）で希釈し、水、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルカラム（ＥＡ／ＰＥ）で精製した。 = 30%-100%)、表題化合物を得た(36.8 g、収率95%)。

実施例３１０；（１Ｒ）－２－（４－（ベンジルオキシ）－５－メトキシ－２－ニトロベンゾイル）シクロペンタン－１－カルバルデヒド（３４３）の合成

N2下、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中の塩化オキサリル（４．３４ｇ、３４．１９ｍｍｏｌ）の溶液をドライアイス／アセトンバッチ上で冷却し、これにＤＣＭ（３０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（５．５７ｇ、７１．２３ｍｍｏｌ）を滴下し、反応物を-65℃以下に20分間維持した。滴下後、１００ｍＬのＤＣＭ中の化合物３４２（１１．０１ｇ、２８．４９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、反応物を－６５℃未満に保ち、２０分間撹拌した。６０ｍＬのＤＣＭ中のＴＥＡ（１４．４２ｇ、１４２．４７ｍｍｏｌ）の溶液を最後に滴下した。添加完了後、ドライアイス／アセトン浴を取り外し、反応物を室温まで徐々に温め、１時間撹拌し、次いで０．２Ｎ ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー精製（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～１００％）により、表題化合物を得た（９．１ｇ、収率８３％）。

実施例３１１．(S)-8-ヒドロキシ-7-メトキシ-1，2，3，10，11，11a-ヘキサヒドロ-5H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-5-オン( 344 ) の合成

化合物３４３（９．１ｇ、２３．６７ｍｍｏｌ）、パラジウム／炭素（２．０ｇ、１０重量％）を水素化反応フラスコに投入し、反応物を水素下、室温で一晩撹拌し、濾過し、濃縮して得た。表題化合物（５．８ｇ、収率９８％）。

実施例３１２．(S)-8-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-1，2，3，10，11，11a-ヘキサヒドロ-5H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2- a][1，4]ジアゼピン-5-オン( 345 )の合成

化合物３４４（４．３ｇ、１７．３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５０ｍＬ）溶液に、イミダゾール（２．４ｇ、３４．６４ｍｍｏｌ）およびＴＢＳＣｌ（３．１ｇ、２０．７８ｍｍｏｌ）を加えた。添加後、混合物を室温で２時間反応させ、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（(EA/PE＝20％-100％)によって精製して、表題化合物を得た（３．７ｇ、収率５９％）。

実施例３１３．(9H-フルオレン-9-イル)メチル(S)-(2-(8-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-2-オキソエチル)カルバメート( 347 ) の合成

化合物３４５（１．０９ｇ、３．００ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．３６ｇ、４．５０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中溶液を氷／水で冷却した。化合物３４６（１．１４ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。反応溶液を０．３Ｎ ＨＣｌ溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～１００％）によって精製して、表題化合物を得た（１．３５ｇ、収率７０％）。

実施例３１４．(S)-10-グリシル-8-ヒドロキシ-7-メトキシ-1，2，3，10，11，11a-ヘキサヒドロ-5H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][ 1，4]ジアゼピン-5-オン( 348 ) の合成

化合物３４７（１．０１ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、これにピロリジン（１ｍＬ）を室温で加えた。添加後、反応物を室温で３時間撹拌し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０％～３０％）により表題化合物を得た（０．４１ｇ、収率８５％）。

実施例３１５．tert-ブチル (S)-(2-(8-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2- a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-2-オキソエチル)カルバメート( 349 )の合成

化合物３４８（０．４１ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、二炭酸ジ－ｔ－ブチル（０．３５ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を室温で加えた。添加後、反応物を室温で２時間撹拌し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～１００％）によって精製して、表題化合物を得た（０．２０ｇ、収率３７％）。

実施例３１６．(4-(ベンジルオキシ)-5-メトキシ-2-ニトロフェニル)((2R)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)シクロペンチル)メタノン(350)の合成

化合物３４２（３８．０ｇ、０．１０ｍｏｌ）のＤＣＭ（１０００ｍＬ）溶液に、イミダゾール（２７．２ｇ、０．４０ｍｏｌ）およびＴＢＳＣｌ（３０．１ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。添加後、反応物を室温で２時間撹拌し、次いで水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１０％～５０％）によって精製して、表題化合物（４５．０ｇ、収率９０％）を得た。

実施例３１７．（２－アミノ－４－ヒドロキシ－５－メトキシフェニル）（（２Ｒ）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）シクロペンチル）メタノン（３５１）の合成

化合物３５０（４５ｇ、９０ｍｍｏｌ）、メタノール（８００ｍＬ）、パラジウム／炭素（８．０ｇ、１０重量％）を水素化反応フラスコに入れた。フラスコを３回排気し、水素を再充填し、室温で一晩撹拌した。濾過し、オイルポンプ下で濃縮して、表題化合物を得た（３４ｇ、収率１００％）。

実施例３１８．(2-アミノ-5-メトキシ-4-((トリイソプロピルシリル)オキシ)フェニル)((2R)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)シクロペンチル)メタノン(352)の合成

化合物３５１（１９．０ｇ、０．０５ｍｏｌ）、イミダゾール（６．８ｇ、０．１ｍｏｌ）およびＴＩＰＳＣｌ（１４．４ｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（３０ｍＬ）中混合物を加熱還流し、１時間撹拌した。冷却後、DCMを加え、混合物を水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１０％～５０％）によって精製して、表題化合物を得た（２２ｇ、収率８２％）。

実施例３１９；アリル(2-((2R)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)シクロペンタン-1-カルボニル)-4-メトキシ-5-((トリイソプロピルシリル)オキシ)フェニル)カルバメート( 353 ）の合成

化合物３５２（９２．７ｇ、０．１７３ｍｏｌ）のＤＣＭ（５００ｍＬ）溶液に、ピリジン（３１．３ｇ、０．３９７ｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。混合物をドライアイス/アセトン浴で冷却し、クロロギ酸アリル(24.97 g、0.207 mol)を約-65℃で滴下した。添加後、ドライアイス/アセトン浴を取り外し、反応物を室温まで自然に温め、3時間撹拌した。反応溶液を０．３Ｎ ＨＣｌ溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗生成物（１０４ｇ、収率９９％）を得た。

実施例３２０．アリル（２－（（２Ｒ）－２－（ヒドロキシメチル）シクロペンタン－１－カルボニル）－４－メトキシ－５－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）フェニル）カルバメート（３５４）の合成

化合物３５３（１０４ｇ、０．１７３モル）の酢酸（６００ｍＬ）、メタノール（８５ｍＬ）、ＴＨＦ（８５ｍＬ）および水（１７０ｍＬ）中溶液を室温で８時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、洗浄した。水で３回、ブラインで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝３０％～７０％）によって精製して、表題化合物を得た（５９ｇ、２工程にわたる収率６９％）。

実施例321. アリル(11aS)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-8-((トリイソプロピルシリル)オキシ)-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1]，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 355 ) の合成

Ｎ２下、ＤＣＭ（４００ｍＬ）中の塩化オキサリル（１９．９ｇ、１５５ｍｍｏｌ）の溶液をドライアイス／アセトンバッチ上で冷却し、これにＤＣＭ５０ｍＬ中のＤＭＳＯ（２３．４ｇ、２９９ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。を滴下し、反応物を-65℃以下に20分間維持した。追加後、２００ｍＬのＤＣＭ中の化合物３５４（５９．０ｇ、１１９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、反応物を－６５℃未満に保ち、２０分間撹拌した。１００ｍＬのＤＣＭ中のＴＥＡ（６０．６ｇ、５９８ｍｍｏｌ）の溶液を最後に滴下した。添加完了後、ドライアイス／アセトン浴を取り外し、反応物を室温まで徐々に温め、１時間撹拌し、次いで０．２ＮＨＣｌ、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー精製（ＥＡ／ＰＥ＝１０％～５０％）により、表題化合物を得た（４９．７ｇ、収率８４％）。

実施例３２２ アリル(11aS)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-8-((トリイソプロピルシリル)オキシ)-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 356 ) の合成

化合物３５５（５．８ｇ、１１．８２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液に、２，６－ルチジン（５．０７ｇ、４７．２８ｍｍｏｌ）およびＴＢＳＯＴｆ（９．３７ｇ、３５．４６ｍｍｏｌ）を加えた。添加後、反応物を室温で２時間撹拌し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝１０％～５０％）によって精製して、表題化合物を得た（６．３ｇ、収率８８％）。

実施例３２３ アリル(11aS)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-8-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ [1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 357 ) の合成

化合物３５６（６．３ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ）および酢酸リチウム（０．６９ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で４時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水で３回、ブラインで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝３０％～１００％）によって精製して、表題化合物を得た（３．３ｇ、収率７０％）。

実施例３２４；アリル(11aS)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-8-((5-ヨードペンチル)オキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ- 1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 358 ) の合成

化合物３５７（１．３９ｇ、３ｍｍｏｌ）のアセトン（１００ｍＬ）溶液に、ジヨードペンタン（４．８６ｇ、１５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．６２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。添加後、反応物を還流下で８時間加熱し、冷却後、カラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～８０％）によって直接精製して、表題化合物（１．８５ｇ、収率９３％）を得た。

実施例３２５．アリル（１１ａＳ）－８－（（５－（（（Ｓ）－１０－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）グリシル）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，１０，１１），11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート(359 ) の合成

化合物３４９（１２１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をアセトン（２０ｍＬ）に溶解し、これに化合物３５９（１９７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（８３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。反応物を還流下で８時間加熱し、冷却後、カラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０％～１０％）によって直接精製して、表題化合物を得た（２４０ｍｇ、収率８５％）。

実施例３２６．アリル（１１ａＳ）－８－（（５－（（（Ｓ）－１０－グリシル－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，１０，１１，１１ａ－ヘキサヒドロ－１Ｈ－ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 360 ) の合成

化合物３５９（１９９．９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＴＦＡおよび６ｍＬのＤＣＭに溶解し、室温で約３時間撹拌し、１０ｍＬのＤＣＭで希釈し、５ｍＬのブラインおよび５ｍＬの飽和重炭酸ナトリウムで洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、淡黄色泡状固体（１７７．５ｍｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI(m/z) ：[M+H] +C 37 H 48 N 5 O 10 計算値721.33;実測値721.33。

実施例３２７．Ｎ－（（Ｓ）－５－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－６－（（（Ｓ）－１-(((S)-1-((2-((S)-7-メトキシ-8-(((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2 -イル)アミノ)-6-オキソヘキシル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサヘントリアコンタン-31-アミド( 361 ) の合成

化合物３６０（７７．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で２０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、２ｍＬのＤＣＭ中の化合物291 (147.6mg，0.16mmol)およびEDC・HCl(40.9mg，0.21mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体（６５ｍｇ、収率４１％）を得た。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 74 H 111 N 10 O 24 計算値1523.77; 実測値1523.77。

実施例３２８．Ｎ－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１４Ｓ）－１４－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－１－（(S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2- a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1 ，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-5，8，11-トリメチル-1，4，7，10，13-ペンタオキソ-3，6，9，12-テトラアザオクタデカン-18-イル)-2、 5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサヘントリアコンタン-31-アミド( 362 )の合成

化合物３６０（７７．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を４ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で２０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、２ｍＬのＤＣＭ中の化合物217 (175.3mg，0.17mmol)およびEDC・HCl(41.0mg，0.21mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体（１８．６ｍｇ、収率１１％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 77 H 116 N 11 O 25計算値1594.81; 実測値1594.81。

実施例３２９．（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｓ）－（１－クロロ－１－オキソプロパン－２－イル）カルバメート（３６４）の合成

Fmoc-Ala-OH(10.4g，33.40mmol)を100mL DCMに溶解し、これに６滴のＤＭＦ、１２ｍＬのＳＯＣｌ_２を加えた。反応混合物を４０～５０℃に加熱し、１時間還流し、室温に冷却し、濃縮した。残渣を５０ｍＬのｎ－ヘキサンで粉砕し、濾過し、乾燥させて、白色固体を得た（９．７ｇ、収率８８％）。MS-ESI(m/z)：[M+H] + C 18 H 18 NO 4計算値312.12; 実測値312.12。

実施例３３０．(9H-フルオレン-9-イル)メチル((S)-1-((S)-8-(ベンジルオキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート(366 ) の合成

化合物３６４（１．２３ｇ、３．０３ｍｍｏｌ）および化合物３６５（１．００ｇ、３．０３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭに溶解し、室温で約５時間撹拌した。反応物を４０ｍＬのＤＣＭで希釈し、４０ｍＬの０．３Ｎ ＨＣｌ、５０ｍＬのブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をシリカゲルカラム（酢酸エチル／石油エーテル）で精製して、淡黄色固体（１．４ｇ、収率７３％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 38 H 38 N 3 O 6計算値632.27; 実測値632.27。

実施例３３１．(S)-10-(L-アラニル)-8-(ベンジルオキシ)-7-メトキシ-1，2，3，10，11，11a-ヘキサヒドロ-5H-ベンゾ[e]ピロロ[1]、2-a][1，4]ジアゼピン-5-オン( 367 ) の合成

１０ｍＬのＤＣＭ中の化合物366 (0.66g，1.04mmol)の混合物および１ｍＬのピロリジンを室温で１時間撹拌し、濃縮して、淡黄色固体（１．０６ｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 23 H 28 N 3 O 4計算値410.20; 実測値 410.20。

実施例３３２．ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（Ｓ）－８－（ベンジルオキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］）ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート( 368 ) の合成

化合物３６７（４３０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（９０１．１ｍｇ、４．１３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１０℃で撹拌した。室温で３時間放置し、シリカゲルカラム（酢酸エチル／石油エーテル）で直接精製して、無色の油を得た（２９７．１ｍｇ、収率５５％）。MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 28 H 36 N 3 O 6計算値510.25; 実測値510.25。

実施例３３３．tert-ブチル((S)-1-((S)-8-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[ 1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート( 369 )の合成

化合物３６８（５６７ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、メタノール（６０ｍＬ）、パラジウム／炭素（１２６ｍｇ、１０重量％）を水素化反応フラスコに入れた。フラスコを３回排気し、水素を再充填し、室温で一晩撹拌した。濾過し、オイルポンプ下で濃縮して、無色の油を得た(469mg、収率100%)。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 21 H 30 N 3 O 6計算値420.21; 実測値420.21。

実施例３３４；アリル(11aS)-8-((5-(((S)-10-((tert-ブトキシカルボニル)-L-アラニル)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5， 10，11，11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ) -7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート(370 )の合成

化合物４０ｍＬのアセトン中の化合物３６９（２５４ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）および化合物３５８（５９８ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）の混合物、並びに炭酸カリウム（１６７．０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を加熱還流し、７時間撹拌した。反応物を濃縮し、シリカゲルカラム(酢酸エチル/石油エーテル、次いでジクロロメタン/メタノール)で精製して、淡黄色固体(413mg、収率72%)を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 49 H 72 IN 5 O 12 Si 計算値950.49;実測値950.49。

実施例３３５．アリル（１１ａＳ）－８－（（５－（（（Ｓ）－１０－（Ｌ－アラニル）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，１０，１１，１１ａ－ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3、 11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 371 ) の合成

化合物３７０（４１３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＴＦＡおよび６ｍＬのＤＣＭに溶解し、室温で２時間撹拌し、濃縮した。残渣を２０ｍＬのＤＣＭで希釈し、６ｍＬのブライン、６ｍＬの飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、淡黄色固体（３３４ｍｇ、収率１００％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 38 H 50 IN 5 O 10計算値736.35; 実測値736.35。

実施例３３６．Ｎ－（（Ｓ）－５－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－６－（（４－（（（Ｓ）－１－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－１０（５Ｈ）－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－４－オキソブチル）アミノ）－６－オキソヘキシル）－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサヘントリアコンタン－３１－アミド（３７２）の合成

化合物３７１（７９．９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、８ｍＬのＤＣＭ中の化合物242 (140mg，0.16mmol)およびEDC・HCl(42.0mg，0.22mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、茶色の油を得た（３３ｍｇ、収率２０％）。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 73 H 110 IN 9 O 23計算値1480.76;実測値1480.76。

実施例３３７．Ｎ－（（Ｓ）－５－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－６－（（４－（（２ -(((R)-1-((S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2- a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-2-オキソエチル)アミノ)-4-オキソブチル)アミノ)-6-オキソヘキシル）－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサヘントリアコンタン－３１－アミド（３７３）の合成

化合物３７１（７９．９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、８ｍＬのＤＣＭ中の化合物234 (150mg，0.16mmol)およびEDC・HCl(42.0mg，0.22mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色固体（３２ｍｇ、収率１９％）を得た。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 75 H 113 IN 10 O 24計算値1537.79; 実測値1537.79。

実施例３３８．Ｎ－（（Ｓ）－５－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－６－（（（Ｓ）－１-(((S)-1-(((R)-1-((S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3、 5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-6-オキソヘキシル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサヘントリアコンタン-31-アミド( 374 ) の合成

化合物３７１（７９．９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、１０ｍＬのＤＣＭ中の化合物291 (164mg，0.17mmol)およびEDC・HCl(42.0mg，0.22mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、茶色の油を得た（５６ｍｇ、収率３２％）。MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 75 H 113 IN 10 O 24計算値1537.79; 実測値1537.79。

実施例３３９．Ｎ－（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１４Ｓ）－１４－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－１-((S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1， 2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a] [1，4]ジアゼピン-10(5H)-イル)-2，5，8，11-テトラメチル-1，4，7，10，13-ペンタオキソ-3，6，9，12-テトラアザオクタデカン-18-イル)-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサヘントリアコンタン-31-アミド( 375 ) の合成

化合物３７１（７９．９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（７．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、１０ｍＬのＤＣＭ中の化合物217 (162mg，0.16mmol)およびEDC・HCl(43.0mg，0.22mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、茶色の油を得た（４５ｍｇ、収率２５％）。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 78 H 118 IN 11 O 25計算値1608.82; 測値1608.82。

実施例３４０．４－ニトロフェニル（Ｓ）－８－（ベンジルオキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－１０（５Ｈ）－カルボキシレート（３７７）の合成

化合物３６５（２．０３ｇ、６．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．９３ｇ、７．２ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸４－ニトロフェニル（１．３３ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。添加後、混合物を室温で一晩撹拌し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～１００％）によって精製して、表題化合物を得た（２．６ｇ、収率８６％）。

実施例３４１．４－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル（Ｓ）－８－（ベンジルオキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 379 ) の合成

化合物３７８（０．７１ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）およびＤＭＡ（１０ｍＬ）中溶液を氷塩バッチ中で０℃未満に冷却した。ＬｉＨＭＤＳ（２．４ｍＬ、１ｍｏｌ／Ｌ）をＮ２下で滴下し、反応物を０℃未満に２０分間維持した。tert-ブチル(S)-(1-((4-(ヒドロキシメチル)-フェニル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート(化合物 377) (1.01 g、2 mmol) の 10 mL溶液ＴＨＦを滴下し、反応物を０℃以下に２０分間維持し、室温に温めて４時間撹拌した。反応溶液をＤＣＭで希釈し、塩化アンモニウム溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ＝２０％～１００％）によって精製して、表題化合物を得た（０．８４ｇ、収率６３％）。

実施例３４２．４－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル（Ｓ）－８－ヒドロキシ－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 380 ) の合成

化合物３７９（１．１７ｇ、１．７７ｍｍｏｌ）、メタノール（２５ｍＬ）、パラジウム／炭素（０．２０ｇ、１０重量％）を水素化反応フラスコに入れた。フラスコを排気し、水素を再充填することを３回繰り返し、０℃で１時間撹拌した。濾過し、オイルポンプ下で濃縮して、表題化合物を得た（０．９１ｇ、収率９０％）。

実施例３４３；アリル(11aR)-8-((5-(((R)-10-(((4-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)プロパンアミド)ベンジル)オキシ)カルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，10，11，11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a] [1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 381 ) の合成

８０ｍＬのアセトン中の化合物３８０（０．９１ｇ、１．６ｍｍｏｌ）および化合物３５８（１．３７ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の混合物、並びに炭酸カリウム（０．４４ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加熱還流し、８時間撹拌した。反応物をシリカゲルカラム（０～１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって直接精製して、表題化合物を得た（１．４ｇ、収率７９％）。

実施例３４４；アリル(11aR)-8-((5-(((R)-10-(((4-((S)-2-アミノプロパンアミド)ベンジル)オキシ)カルボニル)-7-メトキシ-5 -オキソ-2，3，5，10，11，11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11 -ヒドロキシ-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 382 ）の合成

化合物３８１（０．７０ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのＤＣＭに溶解し、５℃に冷却し、これにＴＦＡ（５ｍＬ）を加え、室温で４０分間撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、１０％飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラム（０～１５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、表題化合物を得た（０．３８ｇ、収率６６％）。

実施例３４５．４－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）ベンジル（Ｒ）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｒ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 383 ) の合成

化合物３８２（６２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（４．７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４（１ｍｇ）を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物をDMFで希釈し、蒸発させてDCMを除去した。得られた粗生成物のDMF溶液を次の工程で直接使用した。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 42 H 50 N 6 O 9 計算値:783.90; 実測値783.85。

実施例３４６．４－（（３７Ｓ，４０Ｓ，４３Ｓ，４６Ｓ，４９Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－４０，43，46，49-テトラメチル-31，38，41，44，47-ペンタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45 ，48-ペンタアザペンタコンタン-50-アミド)ベンジル (S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 384 ) の合成

化合物３８２（１００ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（８．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物を０～５℃に冷却し、１０ｍＬのＤＣＭ中の化合物217 (156mg，0.17mmol)およびEDC・HCl(86.6mg，0.45mmol)を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して白色固体を得た（４３ｍｇ、収率２２％）。MS-ESI(m/z) ：[M+H] + C 86 H 125 IN 12 O 27計算値1756.87; 実測値1756.87。

実施例３４７；（（（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１４Ｓ，２２Ｓ，２３Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ，３７Ｓ，４０Ｓ，４３Ｓ）－２２，２３－ビス（２，５－ジオキソ－２，５－）ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－２，５，８，１１，３４，３７，４０，４３－オクタメチル－４，７，１０，１３，１６，２１，２４，２９，３２，３５，３８，４１－ドデカオキソ－１４，３１－ビス（３１－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２－アザヘキサトリアコンタン－３６－イル）－３，６，９，１２，１５，２０，２５，３０，３３，３６，３９，４２－ドデカアザテトラテトラコンタンジイル）ビス（アザンジイル））ビス（４，１－フェニレン））ビス（メチレン）（１１ａＳ，１１ａ’Ｓ）－ビス（７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－５－オキソ－２，３，５，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－１０（５Ｈ）－カルボキシレート）（３８５）の合成

化合物１３６（７３ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中溶液を室温で１５分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ中の３８３の粗生成物（０．０７ｍｍｏｌ）を反応溶液に加え、続いてＤＩＰＥＡ（１４ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣにより直接精製して、淡黄色固体（４５ｍｇ、収率１８％）を得た。MS-ESI (m/z)：[2M+H] + C 176 H 252 N 26 O 56計算値:1815.08; 実測値1815.11。

実施例３４８．(S)-2，5-ジオキソピロリジン-1-イル 37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，44-トリアザヘキサテトラコンタン-46-オエート( 387 ) の合成

化合物２３４（１２．６ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５０ｍＬ）に溶解し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（３．２ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（７．９ｇ、４１．２ｍｍｏｌ）を氷水浴上で加えた。反応物を室温で３．５時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物３８７（１４．０ｇ）を得、これを次の工程で直接使用した。 MS-ESI (m/z) ： [M+H] +C 4 5 H 7 5 N 6 O 2 0 計算値10 19 .5 0;実測値1019. 58。

実施例３４９．(2S，4R)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール) -1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，44-トリアザヘキサテトラコンタンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 388 ) の合成

化合物３８７（１４．０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）および化合物７７（４．２ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶解し、２５℃で８時間撹拌し、濃縮し、酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。水相を塩化固形物で飽和させ、ジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）で精製して、化合物３８８（７．６ｇ、２工程で収率５０％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 58 H 9 6 N 7 O 2 2計算値12 42.65。実測値、1 242.65 。

実施例350．(2S，4R)-4-アミノ-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド) -31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，44-トリアザヘキサテトラコンタンアミド)-4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 389 ）の合成

化合物３８８（０．５０ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＴＦＡ（５ｍＬ）に溶解した。反応物を１時間撹拌し、次いで濃縮して化合物３８９（０．４６ｇ）を得た。これを次の工程で直接使用した。MS-ESI(m/z) ：[M+H] +C 5 3 H 88 N 7 O 2 0計算値11 42.60。実測値、11 42.62 。

実施例３５１．(2S，4R)-4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(3-((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ) -2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31，38，43-トリオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32、３９，４４－トリアザヘキサテトラコンタンアミド）－４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（３９０）の合成

化合物３８９（０．４６ｇ 、 ０．４０ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－１（０．３０ｇ、０．４４ｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．５２ｇ、４．０ｍｏｌ）を加えた。氷塩浴上に加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）およびギ酸（０．５ｍＬ）に溶解し、再度濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物３９０（０．２６ｇ、収率４０％）を得た。MS-ESI(m/z) ：[M+H] +C 78 H 1 28 N 1 1 O 2 5 S計算値1 650.87。実測値、1 650.87 。

実施例３５２．(5S，8S，11S)-tert-ブチル 11-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-5，8-ジメチル-4，7，10，17-テトラオキソ-19，22，25，28，31、３４，３７，４０，４３，４６－デカオキサ－２，３，６，９，１６－ペンタアザヘプタテトラコンタン－１－オエート（３９２）の合成

化合物３９１（２．６７ｇ、３．００ｍｍｏｌ）およびカルバジン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．４８ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．６９ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を撹拌した１時間洗浄し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）で精製して、表題化合物を得た（２．５６ｇ、収率８５％）。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 46 H 80 N 6 O 18計算値1005.55。実測値、1005.65。

実施例３５３．(5S，8S，11S)-tert-ブチル 11-アミノ-5，8-ジメチル-4，7，10，17-テトラオキソ-19，22，25，28，31，34，37，40，43，46-デカオキサ-2，3，6，9，16-ペンタアザヘプタテトラコンタン-1-オエート( 393 ) の合成

化合物392 (2.56 g、2.55 mmol) のメタノール (20 mL) 溶液に、10 wt% Pd/C (0.30 g) を加え、反応フラスコを排気し、水素を再充填することを 3 回繰り返した。次いで、水素バルーン下、室温で２時間撹拌し、濾過し、濃縮乾固して、化合物３９３（２．１０ｇ、収率９４％）を得た。 MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 38 H 74 N 6 O 16計算値871.52。実測値、871.56。

実施例３５４．(5S，8S，11S)-tert-ブチル 11-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-5，8-ジメチル-4７，１０，１７－テトラオキソ－１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６－デカオキサ－２，３，６，９，１６－ペンタアザヘプタテトラコンタン－１－オエート（３９４）の合成

化合物３９３（２．１０ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）および４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（０．８１ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２５ｍＬ）中溶液に、Ｎ－メチルモルホリン（０．２９ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で一晩撹拌し、濃縮し、次いでシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、化合物３９４（２．３０ｇ、収率９２％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M + H] + C 46 H 81 N 7 O 19計算値1036.56;実測値、 1037.20。

実施例３５５．N-((S)-5-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-6-(((S)-1-((( S)-1-ヒドラジニル-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-6-オキソヘキシル)-2，5，8，11，14，17，20，23、 ２６，２９－デカオキサヘントリアコンタン－３１－アミド（３９５）の合成

化合物３９４（０．５２ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液をＴＦＡ（５ｍＬ）とともに３０分間撹拌した。次いで、濃縮して粗生成物（０．４５ｇ）を得、これを次のステップで直接使用する。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] +C 41 H 73 N 7 O 17 936.51。実測値、936.55。

実施例３５６．(1R，3R)-3-((2S，3S)-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド)-N，3-ジメチルペンタンアミド)-1-(4-(((37S，40S， 43S，48S，50R)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，48-トリメチル-31，38，41、 44，47-ペンタオキソ-51-フェニル-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45，46-ペンタアザヘンペンタコンタン-50-イル)カルバモイル)チアゾール－２－イル）－４－メチルペンチルアセテート（３９６）の合成

０℃で、化合物３９５（０．０４５ｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）およびTub-5 (0.039g，0.055mmol)の混合物に、ＨＡＴＵ（０．０２１ｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）およびトリメチルアミン（５．５ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を完全に変換するまで０℃で撹拌し、次いでブライン（２０ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３９６（０．０４２ｇ、収率５２％）を白色泡状物として得た。 MS -ESI (m/z) ：[M+2H] 2+ C 78 H 128 N 12 O 23 S計算値、817.45;実測値、817.56。

実施例３５７．(2S，4R)-4-(2-((6S，9R，11R)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-13-(4-ニトロフェノキシ)-4，7，13-トリオキソ－６－プロピル－１２－オキサ－２，５，８－トリアザトリデカン－１１－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－２－メチル－５－フェニルペンタン酸（３９７）の合成

０℃で、Ｔｕｂ－６（０．０３４ｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）および４－ニトロベンゾイルクロリド（０．０１１ｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（８ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）を加えた。３０分間撹拌した後、反応混合物を短いシリカゲルカラムにロードし、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出した。画分を合わせ、濃縮して、表題化合物を得た(0.030 g、収率72%)。MS-ESI (m/z)： [M+H] + C 41 H 56 N 6 O 10 S計算値825.38。実測値、825.60。

実施例３５８．N-((S)-6-(((S)-1-(((S)-1-((2-アミノエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-1-オキソプロパン- 2-イル)アミノ)-5-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-6-オキソヘキシル)-2，5，8，11，14 、１７，２０，２３，２６，２９－デカオキサヘントリアコンタン－３１－アミド（３９８ ）の合成

tert-ブチル ((37S，40S，43S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43-ジメチル-31、 38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45-テトラアザヘプタテトラコンタン-47-イル)カルバメート(0.043 g、0.040 mmol)をジクロロメタン(5mL)に溶解し、TFA(2.5mL)で30分間処理し、次いで反応物を濃縮して表題化合物を得た。これを次の工程で直接使用した。

実施例３５９．(2S，4R)-4-(2-((37S，40S，43S，51R，53R，56S)-56-((S)-sec-ブチル)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-53-イソプロピル-40，43，54，59，59，60-ヘキサメチル-31，38，41，44，49，55，58 -ヘプタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，50-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48，54，57，60-オクタアザヘンヘキサコンタン-51-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-2-メチル-5-フェニルペンタン酸( 399 ) 。

化合物３９７（０．０３０ｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）および化合物398 (0.040mmol)のDMF(5mL)溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を０℃で撹拌し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物３９９ （５３ｍｇ、収率９０％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+2H] 2+C 79 H 130 N 12 O 24 S 計算値832.45。実測値、832.56。

実施例360．(1R，3R)-3-((2S，3S)-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド)-N，3-ジメチルペンタンアミド)-1-(4-(((37S，40S， 43S，50S，52R)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43，50-トリメチル-31，38，41、 44，49-ペンタオキソ-53-フェニル-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45，48-ペンタアザトリペンタコンタン-52-イル)カルバモイル)チアゾール－２－イル）－４－メチルペンチルアセテート（４００）の合成

氷水浴上で冷却したＴｕｂ－５（２９ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）および化合物398 (0.040mmol)のDMF(10mL)溶液に、ＨＡＴＵ（０．１９ｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１０ｍｇ、０．１０ミリモル）を加えた。反応物を室温に温め、一晩撹拌し、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮し、分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、白色泡状物（５５ｍｇ、収率８３％）を得た。 MS -ESI (m/z)：[M + 2H] 2+C 80 H 132 N 12 O 23 S計算値831.46;実測値、832.58。

実施例３６１．(37S，40S，43S)-2，5-ジオキソピロリジン-1-イル 37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40、 43-ジメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45-テトラアザヘプタテトラコンタン-47-オアート( 401 ）の合成

((S)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザオクタトリアコンタン-38-オイル)-L-アラニル-L-アラニルグリシン(0.98 g、0.10 mmol) の DCM ( 10 mL )溶液に、 N-ヒドロキシスクシンイミド ( １４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（２３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ ）を氷水浴上で加えた。反応物を室温で３．５時間撹拌し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物４０１（０．１１ｇ）を得、これを次の工程で直接使用した。 MS-ESI (m/z) ：[M+H] + C 47 H 77 N 7 O 21 計算値1076.52;実測値、1077.50。

実施例３６２．(2S，4R)-4-(2-((6S，9R，11R)-6-((S)-sec-ブチル)-9-イソプロピル-2，3，3，8-テトラメチル-4， 7，13-トリオキソ-12-オキサ-2，5，8-トリアザテトラデカン-11-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-((37R，40R，43R)-37-(4-(2 ，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-40，43-ジメチル-31，38，41，44-テトラオキソ-2，5，8，11，14，17， ２０，２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４２，４５－テトラアザヘプタテトラコンタンアミド）フェニル）－２－メチルペンタン酸（４０２ ） 。

化合物４０１（０．１１ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－７（４４ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、淡黄色の液体（６２ｍｇ、収率６１％）を得た。MS-ESI (m/z) ：[M+2H] 2+ C 80 H 130 N 12 O 25 S計算値846.45。実測値、846.40。

実施例３６３．ベンジル((37S，40S，43S)-40-イソプロピル-43-メチル-31，38，41，44，47，50-ヘキサオキソ-2，5，8，11，14，17，20、２３，２６，２９－デカオキサ－３２，３９，４２，４５，４８－ペンタアザペンタコンタン－３７－イル）カルバメート（４０３）の合成

ジクロロメタン (5 mL ) 中のベンジル ((37S，40S，43S)-40-イソプロピル-50-メトキシ-43-メチル-31，38，41，44，47-ペンタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，51-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48-ペンタアザドペンタコンタン-37-イル)カルバメート(102 mg、0.10 mmol) に、p-トルエンスルホンアミド(1.7 mg、0.010 mmol)を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、濃縮し、高速シリカゲルカラム(酢酸エチル/ジクロロメタン)で精製して、無色の油を得た(69 mg、収率68%) 。 MS-ESI (m/z)：[M+2H] 2+ C 47 H 80 N 6 O 18計算値509.27。実測値、509.26。

実施例３６４．(2S，4R)-4-(2-((37S，40S，43S，55S，58R，60R)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-55-((S)- sec-ブチル)-40，58-ジイソプロピル-43，51，52，52，57-ペンタメチル-31，38，41，44，47，53，56，62-オクタオキソ-2，5，8，11，14 、17，20，23，26，29，61-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48，51，54，57-オクタアザトリヘキサコンタン-60-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-(ベンジルオキシ）フェニル）－２－メチルペンタン酸（４０４）の合成

０℃で、化合物４０３（６９ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）およびＴｕｂ－８（４８ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（２．０ｍＬ）溶液に、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３８ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、白色泡状物（９２ｍｇ、収率８５％）を得た。 MS-ESI (m/z) ：[M+2H] 2+C 90 H 141 N 11 O 25 S計算値904.99。実測値、 905.10 。

実施例３６５．(2S，4R)-4-(2-((37S，40S，43S，55S，58R，60R)-37-アミノ-55-((S)-sec-ブチル)-40，58 -ジイソプロピル-43，51，52，52，57-ペンタメチル-31，38，41，44，47，53，56，62-オクタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26 ，29，61-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48，51，54，57-オクタアザトリヘキサコンタン-60-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-ヒドロキシフェニル)-2-メチルペンタン酸( 405 ）の合成

化合物４０４（９２ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１０ｗｔ％、１０ｍｇ）を加え、反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、１時間撹拌した。 4時間。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して表題化合物を得た(77 mg、収率96%)。 MS-ESI (m/z) ：[M+2H] 2+ C 75 H 129 N 11 O 23 S計算値、792.95。実測値、973.91。

実施例３６６．(2S，4R)-4-(2-((37S，40S，43S，55S，58R，60R)-55-((S)-sec-ブチル)-37-(4-(2 ，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-60-ヒドロキシ-40，58-ジイソプロピル-43，51，52，52，57-ペンタメチル-31，38，41， 44，47，53，56-ヘプタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45，48，51，54，57-オクタアザヘキサコンタン- ６０－イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（４０６）の合成

化合物４０５（７７ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）および４－マレイミド酪酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（１３ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５ｍＬ）およびＰＢＳ（ｐＨ６．２、１．０ｍＬ）中溶液を室温で一晩撹拌し、濃縮した次いで、分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、化合物４０６（４７ｍｇ、収率５８％）を得た。MS-ESI (m/z)：[M+2H] 2+ C 81 H 134 N 12 O 25 S計算値854.46。実測値、 854.20。

実施例３６７．(2S，4R)-ベンジル 4-(2-((37S，40S，43S，53R，55R)-37-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-52-((2S，3S)の合成-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド)-3-メチルペンタノイル)-53-イソプロピル-40，43-ジメチル-31，38，41，44，49，57-ヘキサオキソ-2，5，8， 11，14，17，20，23，26，29，56-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48，52-ヘキサアザオクタペンタコンタン-55-イル)チアゾール-4-カルボキサミド)-5-(4-(ベンジルオキシ) ）フェニル）－２－メチルペンタン酸（４０８）の合成

化合物407 (50mg，0.05mmol)およびTub-9 (58mg，0.06mmol)をＤＭＦ（２．５ｍＬ）に溶解し、これにＥＤＣ・ＨＣｌ（１７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０．５時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）により精製して、化合物４０８を油状物として得た（８３ｍｇ、収率８８％）。MS-ESI (m/z) ：[M + 2H] 2+ C 96 H 145 N 11 O 25 S計算値942.00。実測値、942.12。

実施例３６８．(2S，4R)-4-(2-((37S，40S，43S，53R，55R)-52-((2S，3S)-2-(2-(ジメチルアミノ)-2-メチルプロパンアミド))-3-メチルペンタノイル)-37-(4-(2，5-ジオキソ-2，5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ブタンアミド)-53-イソプロピル-40，43-ジメチル-31，38、 41，44，49，57-ヘキサオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29，56-ウンデカオキサ-32，39，42，45，48，52-ヘキサアザオクタペンタコンタン-55-イル）チアゾール－４－カルボキサミド）－５－（４－ヒドロキシフェニル）－２－メチルペンタン酸（４０９）の合成

化合物４０８（８３ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭素（１０ｗｔ％、１０ｍｇ）を加え、反応フラスコを３回排気し、水素を再充填し、一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、THF(1.5mL)およびPBS(pH6.2、1.0mL)に再溶解し、4-マレイミド酪酸N-ヒドロキシスクシンイミドエステル(1.2mg 、 0.04.3mmol )を加えた。室温で一晩撹拌した。反応物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（水／アセトニトリル）によって精製して、表題化合物を得た（３４ｍｇ 、収率４５ ％ ）。MS-ESI (m/z) ：[M+2H] 2+ C 82 H 134 N 12 O 26 S計算値867.46 ; 実測値 868.02。

実施例３６９．４－ニトロフェニル（Ｓ）－８－（ベンジルオキシ）－７－メトキシ－２－メチレン－５－オキソ－２，３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１、 2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 410 )の合成

ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の(S)-8-(ベンジルオキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-1，2，3，10，11，11a-ヘキサヒドロ-5H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a]［１，４］ジアゼピン－５－オン（２．１１８ｇ、６．０５１ｍｍｏｌ）に、ＤＩＰＥＡ（０．９３１ｇ、７．２０１ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸４－ニトロフェニル（１．３３１ｇ、６．６０１ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。添加後、混合物を室温で一晩撹拌し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＤＣＭ＝１５％～４５％）で精製して、表題化合物を得た（２．６１８ｇ、収率８４％）。[M+H]+ C28H26N3O7計算値：516.177; 実測値、 516.195 。

実施例３７０．４－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル（Ｓ）－８－（ベンジルオキシ）－７－メトキシ－２－メチレン－５－オキソ－２，３，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 411 ) の合成

化合物４１０（０．７０ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）およびＤＭＡ（１０ｍＬ）中溶液を氷塩バッチ中で０℃未満に冷却した。ＬｉＨＭＤＳ（２．４ｍＬ、１ｍｏｌ／Ｌ）をＮ２下で滴下し、反応物を０℃未満に２０分間維持した。 tert-ブチル (S)-(1-((4-(ヒドロキシメチル)-フェニル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート (化合物 377) (1.01 g、2.0 mmol) の 10 mLＴＨＦ溶液を滴下し、反応物を０℃以下に２０分間維持し、室温に温めて４時間撹拌した。反応溶液をＤＣＭで希釈し、塩化アンモニウム溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＤＣＭ＝１５％～４０％）で精製して、表題化合物を得た（０．５９ｇ、収率６５％）。MS， [M+H]+ C37H43N4O8計算値：671.31; 実測値、 671.60 。

実施例３７１．４－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）ベンジル（Ｓ）－８－ヒドロキシ－７－メトキシ－２－メチレン－５－オキソ－２，３，１１，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 412 ) の合成

ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の化合物４１１ (1.10g，1.64mmol)を、室温で４５分間、ＡｌＣｌ_３（０．６５ｇ、４．９３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルアニリン（０．３０ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をＤＣＭ（１５ｍｌ）で希釈し、０．１Ｍ ＨＣｌ（１０ｍｌ）、ブライン（１０ｍｌ）、５％ＮａＨＣＯ_３溶液およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー(EA/DCM=20%-40%)によって精製し、表題化合物を得た(0.685g、収率72%)。MS，[M+H] +C 30 H 37 N 4 O 8計算値：581.26; 実測値、 581.40 。

実施例３７２．(11aR)-アリル11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-8-((5-ヨードペンチル)オキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11， 11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート ( 413 ) の合成

(11aR)-アリル 11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-8-ヒドロキシ-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[ e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシラート（1.45 g、3.06 mmol）のアセトン（100 mL）溶液に、ジヨードペンタン（4.86 g、15 mmol）および炭酸カリウム（０．６２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。添加後、反応物を還流下で８時間加熱し、冷却後、カラムクロマトグラフィー（ＥＡ／ＤＣＭ＝１５％～３０％）によって直接精製して、表題化合物（１．８７ｇ、収率９１％）を得た。 MS，[M+H] + C 29 H 44 IN 2 O 6 Si計算値：671.20; 実測値、 671.45 。

実施例３７３．(11aR)-アリル8-((5-(((R)-10-(((4-((S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-プロパンアミド)ベンジル)オキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，5，10，11，11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e ]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート ( 414 ) の合成

８０ｍＬのアセトン中の化合物４１３（０．９０ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）および化合物４１２（０．８０ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の混合物、および炭酸カリウム（０．４４ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加熱還流し、８時間撹拌した。反応物をシリカゲルカラム（０～１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により直接精製して、表題化合物を得た（１．１３ｇ、収率７５％）。MS，[M+H] +C 59 H 79 N 6 O 14 Si 計算値1123.542; 実測値、 1123.565 。

実施例３７４．(11aR)-アリル8-((5-(((R)-10-(((4-((S)-2-アミノプロパンアミド)ベンジル)-オキシ)カルボニル)-7-メトキシ- 2-メチレン-5-オキソ-2，3，5，10，11，11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 415 ) の合成

化合物４１４（０．７０ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのジオキサンに溶解し、５℃に冷却し、これに濃ＨＣｌ（５ｍＬ）を加え、室温で４０分間撹拌した。反応物をジオキサン/トルエンで希釈し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラム（１：５：２５、Ｅｔ３Ｎ／ＭｅＯＨ／アセトン）によって精製して、表題化合物（０．４１ｇ、収率７２％）を得た。 MS，[M+H] + C 48 H 57 N 6 O 12計算値：909.40実測値、 909.60 。

実施例３７５．(R)-4-((S)-2-アミノプロパンアミド)ベンジル 7-メトキシ-8-((5-(((R)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-2-メチレン-5-オキソ-2 、３，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－１０（５Ｈ）－カルボキシレート（４１５）の合成

化合物４１４（１１５ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＣＭに溶解し、これにピロリジン（１９．０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４（３ｍｇ）を加え、次いで室温で３０分間撹拌した。反応物をDMFで希釈し、蒸発させてDCMを除去した。得られた粗生成物のDMF溶液を次の工程で直接使用した。 MS-ESI (m/z)：[M+H] + C 44 H 51 N 6 O 9計算値:807.37; 実測値807.50。

実施例３７６．４－（（３７Ｓ，４０Ｓ，４３Ｓ，４６Ｓ，４９Ｓ）－３７－（４－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ブタンアミド）－４０，43，46，49-テトラメチル-31，38，41，44，47-ペンタオキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32，39，42，45 ，48-ペンタアザペンタコンタン-50-アミド)ベンジル (S)-7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a][1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート( 416 ) の合成

化合物４１５（約１０５ｍｇ、約０．１３１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解し、これに化合物２１８（１５８．０ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１ｍｌ）を加えた。２時間撹拌した後、反応物を濃縮し、分取Ｃ－１８ ＨＰＬＣによって精製して、白色固体を得た（１１８ｍｇ、収率５１％）。MS-ESI(m/z)：[M+H] + C 88 H 125 IN 12 O 27計算値1780.87; 実測値1781.25。

実施例３７７．((((2S，5S，8S，11S，14S，22S，23S，31S，34S，37S，40S，43S)-22，23-ビス(2，5-ジオキソ-2，5-)ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-2，5，8，11，34，37，40，43-オクタメチル-4，7，10，13，16，21，24，29，32，35，38 ，41-ドデカオキソ-14，31-ビス(31-オキソ-2，5，8，11，14，17，20，23，26，29-デカオキサ-32-アザヘキサトリアコンタン-36-イル)-3，6， 9，12，15，20，25，30，33，36，39，42-ドデカアザテトラテトラコンタンジイル)ビス(アザンジイル))ビス(4，1-フェニレン))ビス(メチレン) (11aS，11a'S)-ビス(7-メトキシ-8-((5-(((S)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2，3，5，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a] [1，4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ペンチル)オキシ)-2-メチレン-5-オキソ-2，3，11，11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1，2-a] [1，4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート) ( 417 ) の合成

化合物１３６（７３ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中溶液を室温で１５分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ中の４１５の粗生成物（６０ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を反応溶液に加え、続いてＤＩＰＥＡ（５ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で９０分間撹拌した後、反応混合物を分取ＨＰＬＣにより直接精製して、淡黄色固体（６１ｍｇ、収率４７％）を得た。MS-ESI (m/z)： [M+H] 2+C 180 H 253 N 26 O 56計算値:1837.3875; 実測値1837.3960。

実施例３７８；均一共役反応によるＢＣＭＡ共役体の調製

２～８℃で、ＢＣＭＡ抗体を含む溶液（１０～３０ｍｇ／ｍＬ、２０ｍＭＰＢＳ、ｐＨ５．５～７．５）に、亜鉛アミノ錯体（例えば、亜鉛２－メチルプロパン－１，２－ジアミン塩化物錯体）（１０～６０ｍＭ、使用した抗体の１．０～５．０当量）及びＴＣＥＰ（１００ｍＭ、使用した抗体の２．５～４．５当量）を順に加えた。２～８℃で１２～１６時間（一晩）インキュベートした後、ペイロード／連結体複合体（１００～２００ｍＭ、使用した抗体の２．０～８．０当量）を導入し、２～８℃でさらに２～４時間インキュベートした。インキュベート後、シスチン又は４－（アジドメチル）安息香酸（１００～２００ｍＭ、使用した抗体の４．０～８．０当量）を添加して、過剰なＴＣＥＰを除去し、システイン（１００～２００ｍＭ、２．０～６．０当量）を添加して、過剰なペイロードを除去し、ＥＤＴＡ（１００～２００ｍＭ、抗体の４．０～６．０当量）を添加して、亜鉛をトラップし、ＤＨＡＡ（１００～２００ｍＭ、抗体の８．０～３０．０当量）を添加して、抗体内の遊離チオール基を酸化（再架橋）した。反応混合物は最終的に脱塩カラム（Ｚｅｂａ Ｓｐｉｎ Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ Ｃｏｌｕｍｎｓ、４０Ｋ ＭＷＣＯ）、ＵＦ／ＤＦ、又はイオン交換クロマトグラフィーを使用して精製され、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ又はＨＰＬＣ－ＭＳを使用して、薬物／抗体比（ＤＡＲ）を分析した。

従来の共役方法と均一共役方法の両方で調製された共役体の構造を以下に示す：

式中、ｍＡｂは本発明の抗体であり、ｎ＝１～２０、好ましくはｎ＝２～８である。

実施例３７９；ＤＡＲ分析

ＨＩＣ－ＨＰＬＣを使用して、ＤＡＲを分析した。ＨＰＬＣパラメーターは次のとおりである：

実施例３８０；共役体の製剤の一般的な調製

４ｍＬの滅菌水中、２４０ｍｇのスクロース、０．８ｍｇのポリソルベート－８０、２４ｍｇのクエン酸ナトリウムを含む１０ｍＬのホウケイ酸バイアル中の８０ｍｇの各共役体（ＢＣＭＡ、Ｈｅｒ２、ＥＧＦＲ、ＣＤ３３、Ｔｒｏｐ２、Ｓｔｅａｐ１、ＣＤ５６、ＰＳＭＡ、Ｂ７Ｈ３、及びＨｅｒ３の抗体を含む）：Ｃ－２５，Ｃ－３０，Ｃ－３６，Ｃ－４５，Ｃ－５１，Ｃ－５８，Ｃ－６８ａ，Ｃ－６８ｂ，Ｃ－６８ｃ，Ｃ－７２ａ，Ｃ－７２ｂ，Ｃ－７３，Ｃ－８３，Ｃ－８８，Ｃ－９１，Ｃ－９６，Ｃ－１０２，Ｃ－１１５，Ｃ－１２０，Ｃ－１２１，Ｃ－１２６，Ｃ－１３０，Ｃ－１３７，Ｃ－１４０，Ｃ－１５２，Ｃ－１５７，Ｃ－１６８，Ｃ－１７８，Ｃ－１８１ａ，Ｃ－１８１ｂ，Ｃ－１８１ｃ，Ｃ－１８１ｄ，Ｃ－１９０，Ｃ－１９２，Ｃ－１９５，Ｃ－２０２，Ｃ－２０９，Ｃ－２１５，Ｃ－２２１，Ｃ－２２７，Ｃ－２３３，Ｃ－２４１，Ｃ－２５５，Ｃ－２５８，Ｃ－２６７，Ｃ－２７７，Ｃ－２８３，Ｃ－２８４，Ｃ－２９０，Ｃ－２９５，Ｃ－３００，Ｃ－３０６，Ｃ－３０９，Ｃ－３１０，Ｃ－３１２，Ｃ－３１９，Ｃ－３２２，Ｃ－３２６，Ｃ－３２８，Ｃ－３３０，Ｃ－３３２，Ｃ－３３４，Ｃ－３３５，Ｃ－３３６，Ｃ－３３７，Ｃ－３３８，Ｃ－３６１，Ｃ－３６２，Ｃ－３７２，Ｃ－３７３，Ｃ－３７４，Ｃ－３７５，Ｃ－３８４，Ｃ－３８５，Ｃ－３９０，Ｃ－３９６，Ｃ－３９９，Ｃ－４００，Ｃ－４０２，Ｃ－４０６，Ｃ－４０９，Ｃ－４１６，Ｃ－４１７の液体製剤を、クエン酸を用いてｐＨ６．０に調整した。次に、各共役体溶液を－６５℃～０℃の温度で凍結乾燥し、室温まで減圧し（５～１０Ｔｏｒｒ）、乾燥ケーキを形成した。ケーキ複合体は２～８℃で保存し、その後使用するために４ｍＬの滅菌水で再構成した。

実施例３８１；パクリタキセル及び従来の共役方法（Doronina, S, O., et al, Bioconjug Chem. 2006, 17(1):114-24）を用いて社内で調製されたベランタマブｍｃ－ＭＭＡＦ共役体と比較した、ＢＣＭＡ共役体：Ｃ－２５，Ｃ－３０，Ｃ－３６，Ｃ－４５，Ｃ－５１，Ｃ－５８，Ｃ－６８ａ，Ｃ－６８ｂ，Ｃ－６８ｃ，Ｃ－７２ａ，Ｃ－７２ｂ，Ｃ－７３，Ｃ－８３，Ｃ－８８，Ｃ－９１，Ｃ－９６，Ｃ－１０２，Ｃ－１１５，Ｃ－１２０，Ｃ－１２１，Ｃ－１２６，Ｃ－１３０，Ｃ－１３７，Ｃ－１４０，Ｃ－１５２，Ｃ－１５７，Ｃ－１６８，Ｃ－１７８，Ｃ－１８１ａ，Ｃ－１８１ｂ，Ｃ－１８１ｃ，Ｃ－１８１ｄ，Ｃ－１９０，Ｃ－１９２，Ｃ－１９５，Ｃ－２０２，Ｃ－２０９，Ｃ－２１５，Ｃ－２２１，Ｃ－２２７，Ｃ－２３３，Ｃ－２４１，Ｃ－２５５，Ｃ－２５８，Ｃ－２６７，Ｃ－２７７，Ｃ－２８３，Ｃ－２８４，Ｃ－２９０，Ｃ－２９５，Ｃ－３００，Ｃ－３０６，Ｃ－３０９，Ｃ－３１０，Ｃ－３１２，Ｃ－３１９，Ｃ－３２２，Ｃ－３２６，Ｃ－３２８，Ｃ－３３０，Ｃ－３３２，Ｃ－３３４，Ｃ－３３５，Ｃ－３３６，Ｃ－３３７，Ｃ－３３８，Ｃ－３６１，Ｃ－３６２，Ｃ－３７２，Ｃ－３７３，Ｃ－３７４，Ｃ－３７５，Ｃ－３８４，Ｃ－３８５，Ｃ－３９０，Ｃ－３９６，Ｃ－３９９，Ｃ－４００，Ｃ－４０２，Ｃ－４０６，Ｃ－４０９，Ｃ－４１６，Ｃ－４１７のインビトロ細胞毒性評価

細胞毒性アッセイに用いた細胞株は、（１）ＡＴＣＣから入手したＮＣＩ－Ｈ９２９、ＪＪＮ３、Ｕ２６６、及びＭＭ１Ｓ、並びにＭＭ１Ｓ８２２６－２Ａ１細胞、８２２６－２Ａ１細胞は、ＡＴＣＣのＲＰＭＩ－８２２６の培養及びクローンピッキングによる、ミエローマ抗原発現細胞である。細胞は提供者のマニュアルに従って増殖させた。アッセイを実行するために、細胞（１８０μｌ、６０００細胞）を９６ウェルプレートのウェルにそれぞれ加え、３７℃、５％ＣＯ_２で２４時間インキュベートした。次いで、適切な細胞培養培地（総量０．２ｍＬ）中で、細胞を種々の濃度の試験用化合物（２０μｌ）で処理した。対照ウェルは、細胞と培地を含むが、試験化合物を欠いている。プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で１２０時間インキュベートした。次いでＭＴＴ（５ｍｇ／ｍｌ）をウェル（２０μｌ）に添加し、プレートを３７℃で１．５時間インキュベートした。その後、培地を注意深く除去し、ＤＭＳＯ（１８０μｌ）を加えた。１５分間振とうした後、６２０ｎｍの基準フィルタを用いて４９０ｎｍと５７０ｎｍで吸光度を測定した。阻害率％は次の式に従って計算された：阻害率％＝［１－（分析値－ブランク）／（対照－ブランク）］×１００。ＢＣＭＡ－ＡＤＣのＭＴＴ結果を表７に示す。

表７；腫瘍細胞ＮＣＩ－Ｈ９２９、ＭＭ１Ｓ、ＪＪＮ－３に対するＢＣＭＡ抗体共役体のＭＴＴアッセイ（６０００細胞、９６時間インキュベーション）。表７に示されるＤＡＲは、本発明の均一結合プロセスによって調製された結合ＤＡＲであった：

実施例３８２；インビボでの抗腫瘍活性（異種移植片腫瘍としてそれぞれ、ＮＣＩ－Ｈ９２９又はＭＭ１Ｓを有するＢＡＬＢ／ｃヌードマウス）

ヒト多発性骨髄腫ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞又はＪＪＮ－３細胞に対する、Ｂｅｌａｎｔａｍａｂｍｃ－ＭＭＡＦと併用したＢＣＭＡ共役体Ｃ－６８ａ，Ｃ－８３，Ｃ－１１５，Ｃ－１２６，Ｃ－１３７，Ｃ－１８１ｂ，Ｃ－１９２，Ｃ－１９５，Ｃ－２０２，Ｃ－２１２ｂ，Ｃ－２５８，Ｃ－２７７，Ｃ－２９０，Ｃ－３０６，Ｃ－３８５，Ｃ－３９０，Ｃ－３９６，Ｃ－３９９，Ｃ－４００，Ｃ－４０２，Ｃ－４０６，及びＣ－４１７のインビボでの有効性を、異種移植モデルにおいて評価した。生後５週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（１群あたり６匹）に、０．１ｍＬの無血清培地中の各がん細胞（５×１０^６細胞／マウス）を右肩下の領域に皮下接種した。腫瘍を６～８日間で１５０ｍｍ^３の平均サイズまで、又は８～９日間で２００ｍｍ^３の平均サイズまで増殖させた。次いで、動物を無作為に異なる群に分けた（１群あたり６匹）。第１群のマウスは対照群として、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）ビヒクルで処理した。他の群は、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞モデルの場合は２又は３ｍｇ／Ｋｇの用量で、ＪＪＮ－３細胞モデルの場合は５ｍｇ／Ｋｇの用量で静脈内投与され、それぞれＰＢＳ中の共役体で処理した。腫瘍の３つの寸法を３日又は４日ごと（週２回）に測定し、腫瘍体積を式：腫瘍体積＝１／２（長さ×幅×高さ）を用いて計算した。動物の体重も同時に測定した。以下の基準の１つに該当する場合、マウスを屠殺した：（１）前処理重量から２０％を超える体重減少、（２）１５００ｍｍ^３より大きい腫瘍体積、（３）食物及び水に到達するにはあまりにも元気がない、又は（４）皮膚壊死。腫瘍が触診できなかった場合、マウスは腫瘍がないと判断した。

結果を図９～１１にプロットした。全ての共役体が、投与された用量では動物の体重減少を引き起こさなかった。全ての共役体は、ＰＢＳ緩衝液と比較して、抗腫瘍活性を示し、ＢＣＭＡ共役体の多くは、Ｂｅｌａｎｔａｍａｂｍｃ－ＭＭＡＦよりも優れた抗腫瘍活性を示した。

本明細書に記載されている配列は以下の通りである：

配列番号１-hu5D2-HCDR1
TSFLIHW
配列番号２-hu5D2-HCDR2
FIIPGNGGTKYNQKFQ
配列番号３-hu5D2-HCDR3
YDGSFEGYFDV
配列番号４-hu5D2-LCDR1
SSQSLVHSDGNTYLH
配列番号５-hu5D2-LCDR2
KVSNRDS
配列番号６-hu5D2-LCDR3
SQSTHWPWT
配列番号７-BCMA-extracellular-domain
mlqmagqcsqneyfdsllhacipcqlrcssntppltcqrycnasvtnsvkgtna
配列番号８-hu5D2-heavy-chain
qvqlvqsgaevvkpgasvkmsckasgytftsflihwvkqapgqglewigfiipgnggtkynqkfqgkatltsdtssstaymelsslrsedsavyycarydgsfegyfdvwgqgttltvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk
配列番号９-hu5D2-Light-chain
dvvmtqsplslpvslrqpasiscrssqslvhsdgntylhwylqkpgqsprlliykvsnrdsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedlgvyfcsqsthwpwtfgqgtkleikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec
配列番号１０-5D2-VH
evqlqqsgpelvkpgasvkmsckasgytftsflihwvkqkpgqglewigfiipyndgtkynekfkgkatltsdkssstaymelssltsedsavyycarydgsfegyfdvwgagttltvssa
配列番号１１-5D2-VL
dvlmtqtplslpvslrdqasiscrssqslvhsdgntylhwylqkpgqspklliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedlgvyfcsqsthvpwtfgggtkleik
配列番号１２-IgG1-constant
stkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk
配列番号１３-c5D2-HC
evqlqqsgpelvkpgasvkmsckasgytftsflihwvkqkpgqglewigfiipyndgtkynekfkgkatltsdkssstaymelssltsedsavyycarydgsfegyfdvwgagttltvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk
配列番号１４-Kappa-constant
tvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec
配列番号１５-c5D2-LC
dvlmtqtplslpvslrdqasiscrssqslvhsdgntylhwylqkpgqspklliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedlgvyfcsqsthvpwtfgggtkleiktvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec
配列番号１６-hu5D2-VH
qvqlvqsgaevvkpgasvkmsckasgytftsflihwvkqapgqglewigfiipgnggtkynqkfqgkatltsdtssstaymelsslrsedsavyycarydgsfegyfdvwgqgttltvssa
配列番号１７-hu5D2-VL
dvvmtqsplslpvslrqpasiscrssqslvhsdgntylhwylqkpgqsprlliykvsnrdsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedlgvyfcsqsthwpwtfgqgtkleikr
配列番号１８-hu5D2-heavy-chain
atggagttcggcctgtcctgggtgttcctggtggccctgtttaggggagtgcagtgccaggtgcagctggtgcagagcggagctgaggtggtgaagccaggagctagcgtgaagatgtcttgtaaggcctccggctacaccttcacatcttttctgatccactgggtgaagcaggctccaggacagggactggagtggatcggcttcatcatccctggcaacggcggcaccaagtacaatcagaagtttcagggcaaggccaccctgacatccgacacctccagctctacagcttatatggagctgtccagcctgaggtctgaggattccgccgtgtactattgcgctcggtacgacggcagcttcgagggctattttgacgtgtggggccagggcaccacactgacagtgtctagcgcttctaccaagggaccatccgtgttcccactggccccctccagcaagtccaccagcggaggaacagccgctctgggatgcctggtgaaggactacttcccagagcccgtgacagtgagctggaactctggcgctctgacctccggcgtgcacacatttccagctgtgctgcagtcttccggcctgtacagcctgagctctgtggtgaccgtgccctccagctctctgggcacccagacatatatctgcaacgtgaatcacaagccatccaatacaaaggtggacaagaaggtggagcccaagagctgtgataagacccatacatgccccccttgtcctgccccagagctgctgggaggaccatccgtgttcctgtttccacccaagcctaaggacaccctgatgatctctaggacccccgaggtgacatgcgtggtggtggacgtgtcccacgaggaccccgaggtgaagtttaactggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgctaagaccaagcctagggaggagcagtacaacagcacctatcgggtggtgtctgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaggagtataagtgcaaggtgagcaataaggccctgcccgctcctatcgagaagaccatctctaaggccaagggccagcctagagagccacaggtgtacacactgcctccaagccgcgaggagatgaccaagaaccaggtgtctctgacatgtctggtgaagggcttctatccttctgacatcgctgtggagtgggagtccaatggccagccagagaacaattacaagaccacaccccctgtgctggactccgatggcagcttctttctgtattccaagctgaccgtggataagagcagatggcagcagggcaacgtgttttcttgctccgtgatgcatgaggctctgcacaatcattatacacagaagagcctgtctctgtcccctggcaagtga
配列番号１９-hu5D2-Light-chain
atggagttcggcctgtcctgggtgttcctggtggccctgtttagaggcgtgcagtgcgacgtggtcatgacacagtcccccctgagcctgcctgtgagcctgagacagcccgcttctatctcctgtcgctccagccagtctctggtgcattccgatggcaacacctacctgcattggtatctgcagaagccaggccagtctccccgcctgctgatctacaaggtgagcaatagggactctggcgtgcctgatcggttcagcggctctggctccggaaccgactttacactgaagatctccagggtggaggccgaggatctgggcgtgtatttctgcagccagtctacccactggccatggacatttggccagggcaccaagctggagatcaagcggacagtggcggcgccgtccgtgttcatctttccccctagcgacgagcagctgaagagcggcaccgcctctgtggtgtgcctgctgaacaatttctacccaagggaggccaaggtgcagtggaaggtggataacgctctgcagagcggcaattctcaggagtccgtgaccgagcaggacagcaaggattctacatattccctgtccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaagcacaaggtgtatgcttgcgaggtgacccatcagggcctgtcttcccccgtgacaaagtcctttaaccggggcgagtgttgatga
配列番号２０-hu5D2-VH
caggtgcagctggtgcagagcggagctgaggtggtgaagccaggagctagcgtgaagatgtcttgtaaggcctccggctacaccttcacatcttttctgatccactgggtgaagcaggctccaggacagggactggagtggatcggcttcatcatccctggcaacggcggcaccaagtacaatcagaagtttcagggcaaggccaccctgacatccgacacctccagctctacagcttatatggagctgtccagcctgaggtctgaggattccgccgtgtactattgcgctcggtacgacggcagcttcgagggctattttgacgtgtggggccagggcaccacactgacagtgtctagcgct
配列番号２１-hu5D2-VL
gacgtggtcatgacacagtcccccctgagcctgcctgtgagcctgagacagcccgcttctatctcctgtcgctccagccagtctctggtgcattccgatggcaacacctacctgcattggtatctgcagaagccaggccagtctccccgcctgctgatctacaaggtgagcaatagggactctggcgtgcctgatcggttcagcggctctggctccggaaccgactttacactgaagatctccagggtggaggccgaggatctgggcgtgtatttctgcagccagtctacccactggccatggacatttggccagggcaccaagctggagatcaag
配列番号２２-5D2-VH
gaggtccagctccagcagtctggacctgagctggtaaagcctggggcttcagtgaagatgtcctgcaaggcttctggatacacattcactagctttcttatacactgggtgaagcagaagcctgggcagggccttgagtggattggatttattattccttacaatgatggtactaagtacaatgagaagttcaaaggcaaggccacactgacttcagacaaatcctccagcacagcctacatggaactcagcagcctgacctctgaagactctgcggtctattactgtgcaagatatgatggtagcttcgagggttacttcgatgtctggggcgcagggaccactctcacagtctcctcggcc
配列番号２３-5D2-VL
gacgttttgatgacccagactccactctccctgcctgtcagtcttagagatcaagcctccatctcttgcagatctagtcagagccttgtacacagtgatggaaacacctatttacattggtacctgcagaagccaggccagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttcaggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcagcagagtggaggctgaggatctgggagtttatttctgctctcaaagtacacatgttccgtggacgttcggtggaggcaccaagctggaaatcaaa
配列番号２４-IgG1-constant
tctaccaagggaccatccgtgttcccactggccccctccagcaagtccaccagcggaggaacagccgctctgggatgcctggtgaaggactacttcccagagcccgtgacagtgagctggaactctggcgctctgacctccggcgtgcacacatttccagctgtgctgcagtcttccggcctgtacagcctgagctctgtggtgaccgtgccctccagctctctgggcacccagacatatatctgcaacgtgaatcacaagccatccaatacaaaggtggacaagaaggtggagcccaagagctgtgataagacccatacatgccccccttgtcctgccccagagctgctgggaggaccatccgtgttcctgtttccacccaagcctaaggacaccctgatgatctctaggacccccgaggtgacatgcgtggtggtggacgtgtcccacgaggaccccgaggtgaagtttaactggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgctaagaccaagcctagggaggagcagtacaacagcacctatcgggtggtgtctgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaggagtataagtgcaaggtgagcaataaggccctgcccgctcctatcgagaagaccatctctaaggccaagggccagcctagagagccacaggtgtacacactgcctccaagccgcgaggagatgaccaagaaccaggtgtctctgacatgtctggtgaagggcttctatccttctgacatcgctgtggagtgggagtccaatggccagccagagaacaattacaagaccacaccccctgtgctggactccgatggcagcttctttctgtattccaagctgaccgtggataagagcagatggcagcagggcaacgtgttttcttgctccgtgatgcatgaggctctgcacaatcattatacacagaagagcctgtctctgtcccctggcaag
配列番号２５-c5D2-HC
gaggtccagctccagcagtctggacctgagctggtaaagcctggggcttcagtgaagatgtcctgcaaggcttctggatacacattcactagctttcttatacactgggtgaagcagaagcctgggcagggccttgagtggattggatttattattccttacaatgatggtactaagtacaatgagaagttcaaaggcaaggccacactgacttcagacaaatcctccagcacagcctacatggaactcagcagcctgacctctgaagactctgcggtctattactgtgcaagatatgatggtagcttcgagggttacttcgatgtctggggcgcagggaccactctcacagtctcctcggcctctaccaagggaccatccgtgttcccactggccccctccagcaagtccaccagcggaggaacagccgctctgggatgcctggtgaaggactacttcccagagcccgtgacagtgagctggaactctggcgctctgacctccggcgtgcacacatttccagctgtgctgcagtcttccggcctgtacagcctgagctctgtggtgaccgtgccctccagctctctgggcacccagacatatatctgcaacgtgaatcacaagccatccaatacaaaggtggacaagaaggtggagcccaagagctgtgataagacccatacatgccccccttgtcctgccccagagctgctgggaggaccatccgtgttcctgtttccacccaagcctaaggacaccctgatgatctctaggacccccgaggtgacatgcgtggtggtggacgtgtcccacgaggaccccgaggtgaagtttaactggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgctaagaccaagcctagggaggagcagtacaacagcacctatcgggtggtgtctgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaggagtataagtgcaaggtgagcaataaggccctgcccgctcctatcgagaagaccatctctaaggccaagggccagcctagagagccacaggtgtacacactgcctccaagccgcgaggagatgaccaagaaccaggtgtctctgacatgtctggtgaagggcttctatccttctgacatcgctgtggagtgggagtccaatggccagccagagaacaattacaagaccacaccccctgtgctggactccgatggcagcttctttctgtattccaagctgaccgtggataagagcagatggcagcagggcaacgtgttttcttgctccgtgatgcatgaggctctgcacaatcattatacacagaagagcctgtctctgtcccctggcaag
配列番号２６-Kappa-constant
cgtgaggtggcggcgccgtccgtgttcatctttccccctagcgacgagcagctgaagagcggcaccgcctctgtggtgtgcctgctgaacaatttctacccaagggaggccaaggtgcagtggaaggtggataacgctctgcagagcggcaattctcaggagtccgtgaccgagcaggacagcaaggattctacatattccctgtccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaagcacaaggtgtatgcttgcgaggtgacccatcagggcctgtcttcccccgtgacaaagtcctttaaccggggcgagtgt
配列番号２７-c5D2-LC
gacgttttgatgacccagactccactctccctgcctgtcagtcttagagatcaagcctccatctcttgcagatctagtcagagccttgtacacagtgatggaaacacctatttacattggtacctgcagaagccaggccagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttcaggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcagcagagtggaggctgaggatctgggagtttatttctgctctcaaagtacacatgttccgtggacgttcggtggaggcaccaagctggaaatcaaacgtgaggtggcggcgccgtccgtgttcatctttccccctagcgacgagcagctgaagagcggcaccgcctctgtggtgtgcctgctgaacaatttctacccaagggaggccaaggtgcagtggaaggtggataacgctctgcagagcggcaattctcaggagtccgtgaccgagcaggacagcaaggattctacatattccctgtccagcaccctgacactgtctaaggccgactacgagaagcacaaggtgtatgcttgcgaggtgacccatcagggcctgtcttcccccgtgacaaagtcctttaaccggggcgagtgt
配列番号２８-hu5D2-HCDR1
acatcttttctgatccactgg
配列番号２９-hu5D2-HCDR2
ttcatcatccctggcaacggcggcaccaagtacaatcagaagtttcag
配列番号３０-hu5D2-HCDR3
tacgacggcagcttcgagggctattttgacgtg
配列番号３１-hu5D2-LCDR1
tccagccagtctctggtgcattccgatggcaacacctacctgcat
配列番号３２-hu5D2-LCDR2
aaggtgagcaatagggactct
配列番号３３-hu5D2-LCDR3
Agccagtctacccactggccatggaca
配列番号３４
EEQYNSTYR
配列番号３５
THTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPK

Claims (21)

1. Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ又はＣＤ２６９）と結合する、単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合フラグメントであって、
   前記抗体またはその抗原結合フラグメントは、
   （ｉ）配列番号１（ＴＳＦＬＩＨＷ）を含むＣＤＲ Ｈ１、配列番号２（ＦＩＩＰＧＮＧＧＴＫＹＮＱＫＦＱ）を含むＣＤＲ Ｈ２、及び配列番号３（ＹＤＧＳＦＥＧＹＦＤＶ）を含むＣＤＲ Ｈ３を含むＶＨドメイン；並びに
   （ｉｉ）配列番号４（ＳＳＱＳＬＶＶＨＳＤＧＮＴＹＬＨ）を含むＣＤＲ Ｌ１、配列番号５（ＫＶＳＮＲＤＳ）を含むＣＤＲ Ｌ２、及び配列番号６（ＳＱＳＴＨＷＰＷＴ）を含むＣＤＲ Ｌ３を含むＶＬドメイン；
   を含み、
   前記病原性Ｂ細胞の存在に関連する医学的障害は、形質細胞のがん又はＢリンパ細胞のがんである、単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合フラグメント。
2. 前記形質細胞のがんが、多発性骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、若しくは形質細胞白血病である、又は前記Ｂリンパ球のがんがホジキン病である、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合断片。
3. ＶＬ及びＶＨドメインがそれぞれ、ヒトＩｇ ｋａｐｐａ（配列番号１４又は配列番号２６でコードされている）及びＩｇＧ１（配列番号１２又は配列番号２４でコードされている）の定常ドメインと融合している、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合断片。
4. 配列番号１０若しくは配列番号１６を含むＶＨドメインと、配列番号１１若しくは配列番号１７を含むＶＬドメインと、を含む；
   配列番号８若しくは配列番号１３を含む重鎖を含む；又は、
   配列番号９若しくは配列番号１５を含む軽鎖を含む、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合断片。
5. キメラ、ヒト化、部分ヒト化、二重特異的、若しくは単鎖抗体、又はその組み合わせである、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合断片。
6. （ｉ）配列番号２０若しくは配列番号２２によってコードされる配列を含むＶＨドメイン；及び（ｉｉ）配列番号２１若しくは配列番号２３によってコードされる配列を含むＶＬドメインを含む、又は
   配列番号１８若しくは配列番号２５によってコードされる重鎖を含む；
   配列番号１９若しくは配列番号２７によってコードされる軽鎖を含む、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合断片。
7. グリコシル化されている、請求項１に記載の単離されたモノクローナル抗体又は抗原結合断片。
8. 重鎖のＡｓｎ３００にＮ－結合オリゴ糖鎖を含む、請求項７に記載の単離されたモノクローナル抗体又はその抗原結合断片。
9. 細胞毒素と共役し、モノクローナル抗体又はその抗原結合断片を含む、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対する抗体－薬物共役体（ＡＤＣ）であって、
   前記モノクローナル抗体は、
   （ａ）配列番号１のアミノ酸配列である相補性決定領域１（ＣＤＲ Ｈ１）、配列番号２のアミノ酸配列であるＣＤＲ Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列であるＣＤＲ Ｈ３を含む重鎖可変領域；並びに、
   （ｂ）配列番号４のアミノ酸配列である相補性決定領域１（ＣＤＲ Ｌ１）、配列番号５のアミノ酸配列であるＣＤＲ Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列であるＣＤＲ Ｌ３を含む軽鎖可変領域；
   を含む、抗体－薬物共役体（ＡＤＣ）。
10. 次の式を有する、請求項９に記載の抗体－薬物共役体：
    

    

    
    
    式中、Ｄ、Ｄ_１、及びＤ_２は、一般にペイロードと呼ばれる小分子細胞毒素又は機能性小分子である；Ｌ、Ｌ１、及びＬ２は連結体である；ｍＡｂは、請求項１～８のいずれか１項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。
11. 前記細胞毒素又は機能性小分子Ｄ、Ｄ_１、及びＤ_２が、以下からなる群から独立して選択される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    １）以下からなる群から選択される化学療法剤：
    ａ）以下からなる群から選択されるアルキル化剤：ナイトロジェンマスタード：クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキサイド、マンノムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ミトラクトール、ピポブロマン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、チオテパ、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ＣＣ－１０６５並びにアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシンの合成類似体；デュオカルマイシン並びにその合成類似体であるＫＷ－２１８９及びＣＢＩ－ＴＭＩ；ベンゾジアゼピン二量体又はピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、トマイマイシン二量体、インドリノベンゾジアゼピン二量体、イミダゾベンゾチアヂアゼピン二量体、又はオキサゾリジノベンゾジアゼピン二量体；カルムスチン、ロムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチンを含むニトロソ尿素化合物；ブスルファン、トレオスルファン、イムプロスルファン、及びピポスルファンを含むアルキルスルホネート；トリアゼン又はダカルバジン；カルボプラチン、シスプラチン、及びオキサリプラチンを含む白金含有化合物；アジリジン類、ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ、及びウレドパ；エチレンイミン類、並びにアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミン、トリメチロロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含むメチラメラミン類；
    ｂ）以下からなる群から選択される植物アルカロイド：ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ナベルビンを含むビンカアルカロイド類；パクリタキセル及びドセタキセルを含むタキソイド類並びにこれらの類似体；ＤＭ１、ＤＭ２、ＤＭ３、ＤＭ４、ＤＭ５、ＤＭ６、ＤＭ７、メイタンシン、アンサマイトシンを含むメイタンシノイド類並びにこれらの類似体；クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８の群を含むクリプトフィシン類；エポチロン類、エリュテロビン、ディスコデルモライド、ブリオスタチン類、ドロスタチン類、オーリスタチン類、チューブリシン類、セファロスタチン類；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；
    ｃ）以下から選択されるＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤：９－アミノカンプトテシン、カンプトテシン、クリスナトール、ダウノマイシン、エトポシド、リン酸エトポシド、イリノテカン、ミトキサントロン、ノバントロン、レチノイン酸（レチノール類）、テニポシド、トポテカン、９－ニトロカンプトテシン又はＲＦＳ ２０００を含むエピポドフィリン類；及びマイトマイシン類、並びにそれらの類縁体；
    ｄ）以下から選択される代謝拮抗剤：｛［抗葉酸：（ＤＨＦＲ阻害剤：メトトレキサート、トリメトレキサート、デノプテリン、プテロプテリン、アミノプテリン（４－アミノプテロイン酸）、又はその他の葉酸類縁体を含む。）；ＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤（ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン、ＥＩＣＡＲを含む。）；リボヌクレオチド還元酵素阻害薬（ヒドロキシウレア、デフェロキサミンを含む。）］；［ピリミジン類縁体：ウラシル類縁体（アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カペシタビン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、５－フルオロウラシル、フロクスウリジン、ラルチトレキセドを含む。）；シトシン類似体：（シタラビン、シトシンアラビノシド、フルダラビンを含む。）；プリン類縁体：（アザチオプリン、フルダラビン、メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン）を含む。］；フォリン酸等の葉酸補充剤｝、及びニコチンアミドリン酸リボヌクレアーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤；
    ｅ）以下から選択されるホルモン療法剤：受容体拮抗薬：［抗エストロゲン：（メゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェンを含む）；ＬＨＲＨアゴニスト：（ゴセレリン、酢酸リュープロリドを含む）；抗アンドロゲン：（ビカルタミド、フルタミド、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、ゴセレリン、リュープロリド、メピチオスタン、ニルタミド、テストラクトン、トリロスタン、及び他の類似のアンドロゲン阻害剤を含む。）］；レチノイド類／三角筋：［ビタミンＤ３類縁体：（ＣＢ１０９３、ＥＢ１０８９、ＫＨ１０６０、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールを含む）；光線力学的療法剤：（ベルテポルフィン、フタロシアニン、光増感剤Ｐｃ４、デメトキシヒポクレリンＡを含む）；サイトカイン類：（インターフェロンα、インターフェロンγ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ＴＮＦドメイン含有ヒトタンパク質を含む）］｝；
    ｆ）以下から選択されるキナーゼ阻害剤：ＢＩＢＷ２９９２（抗ＥＧＦＲ／Ｅｒｂ２）、イマチニブ、ゲフィチニブ、ペガプタニブ、ソラフェニブ、ダサチニブ、スニチニブ、エルロチニブ、ニロチニブ、ラパチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、バンデタニブ、Ｅ７０８０（抗ＶＥＧＦＲ２）、ムブリチニブ、ポナチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、カボザンチニブ、ビスモデギブ、イニパリブ、ルキソリチニブ、ＣＹＴ３８７、アキシチニブ、チボザニブ、ソラフェニブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ラニビズマブ、パニツムマブ、イスピネシブ；
    ｇ）オラパリブ、ニラパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ９７２２（セファロン）、Ｅ７０１６（エーザイ）、ＢＧＢ－２９０（ベイジーン）、又は３－アミノベンズアミドからなる群から選択されるポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤；
    ｈ）エンジイン系抗生物質（カリケアマイシン類、カリケアマイシンγ１、δ１、α１、又はβ１；ダイネミシンＡ及びデオキシダイネミシンを含むダイネミシン；エスペラミシン、ケダルシジン、Ｃ－１０２７、マズロペプチン、又はネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質クロモフォアから選択される。）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、アンスラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン、エピルビシン、エリブリン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン類（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎｓ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｎｉｇｒｉｎ）、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンから選択される抗生物質；
    ｉ）ポリケチド（アセトゲニン類）、ブラタシン及びブラタシノン；ゲムシタビン、エポキソミシン類及びカルフィルゾミブ、ボルテゾミブ、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドマイド、トセドスタット、ザイブレスタット、ＰＬＸ４０３２、ＳＴＡ－９０９０、スチムバックス（Ｓｔｉｍｕｖａｘ）、アロベクチン－７、ザイゲバ、プロベンジ、エルボイ、イソプレニル化阻害剤及びロバスタチン、ドーパミン作動性神経毒及び１－メチル－４－フェニルピリジンイオン、細胞周期阻害剤（スタウロスポリンを含む。）、アクチノマイシン類（アクチノマイシンＤ、ダクチノマイシンを含む。）、アマニチン類、ブレオマイシン類（ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２、ペプロマイシンを含む。）、アントラサイクリン類（ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、エピルビシン、ピラルビシン、ゾルビシンを含む。）、ミトキサントロン、ＭＤＲ阻害剤又はベラパミル、Ｃａ^２＋ＡＴＰ阻害剤又はタプシガルギン、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、ベリノスタット、ＰＣＩ－２４７８１、エンチノスタット、ＳＢ９３９、レスミノスタット、ギビノスタット、ＡＲ－４２、ＣＵＤＣ－１０１、スルフォラファン、トリコスタチンＡを含む。）；タプシガルギン、セレコキシブ、グリタゾン類、エピガロカテキンガレート、ジスルフィラム、サリノスポラミドＡ、抗副腎薬（アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンカからなる群から選択される）；アセグラトン；アルドホスファミドクリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）；アラビノシド、ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルニチン（ＤＦＭＯ）、エルフォミチン；酢酸エリプチニウム；エトクルシド、硝酸ガリウム、ガシトシン、ヒドロキシ尿素；イバンドロネート、レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テニュアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（Ｔ２トキシン、ベルカリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジンを含む。）；ウレタン、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス医薬、核酸分解酵素；
    ２）抗自己免疫疾患薬：シクロスポリン、シクロスポリンＡ、アミノカプロン酸、アザチオプリン、ブロモクリプチン、クロラムブシル、クロロキン、シクロホスファミド、コルチコイド類（アムシノニド、ベタメタゾン、ブデソニド、ヒドロコルチゾン、フルニソリド、フルチカゾンプロピオン酸エステル、フルオコートロンダナゾール（ｆｌｕｏｃｏｒｔｏｌｏｎｅ ｄａｎａｚｏｌ）、デキサメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾンを含む。）、ＤＨＥＡ、エタネルセプト、ヒドロキシクロロキン、インフリキシマブ、メロキシカム、メトトレキサート、モフェチル、ミコフェノール酸、プレドニゾン、シロリムス、タクロリムス；
    ３）抗感染症薬（以下を含むがこれらに限定されない）：
    ａ）アミノグリコシド類：アミカシン、アストロマイシン、ゲンタマイシン（ネチルマイシン、シソマイシン、イセパマイシン）、ハイグロマイシンＢ、カナマイシン（アミカシン、アルベカシン、ベカナマイシン、ジベカシン、トブラマイシン）、ネオマイシン（フラマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン）、ネチルマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ベルダミシン；
    ｂ）アンフェニコール類：アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアンフェニコール；
    ｃ）アンサマイシン類：ゲルダナマイシン、ハービマイシン；
    ｄ）カルバペネム類：ビアペネム、ドリペネム、エルタペネム、イミペネム、シラスタチン、メロペネム、パニペネム；
    ｅ）セフェム類：カルバセフェム（ロラカルベフ）、セファセトリル、セファクロル、セフラジン、セファドロキシル、セファロニウム、セファロリジン、セファロチン又はセファロチン、セファレキシン、セファログリシン、セファマンドール、セファピリン、セファトリジン、セファザフル、セファゼドン、セファゾリン、セフブペラゾン、セフカペン、セフダロキシム、セフェピム、セフミノックス、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキサジン、セフテゾル、セフロキシム、セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェピム、セフェタメト、セフメノキシム、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォタキシム、セフォチアム、セフォゾプラン、セファレキシン、セフピミゾール、セフピラミド、セフピロム、セフポドキシム、セフプロジル、セフキノム、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフチブテン、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトビプロル、セフトリアキソン、セフロキシム、セフゾナム、セファマイシン（セフォキシチン、セフォテタン、セフメタゾールを含む。）、オキサセフェム（フロモキセフ、ラタモキセフ）；
    ｆ）糖ペプチド類：ブレオマイシン、バンコマイシン（オリタバンシン、テラバンシンを含む。）、テイコプラニン（ダルババンシン）、ラモプラニン；
    ｇ）グリシルサイクリン類：チゲサイクリン；
    ｈ）β－ラクタマーゼ阻害剤：ペナム（スルバクタム、タゾバクタム）、クラバム（クラブラン酸）；
    ｉ）リンコサミド類：クリンダマイシン、リンコマイシン；
    ｊ）リポペプチド類：ダプトマイシン、Ａ５４１４５、カルシウム依存性抗生物質（ＣＤＡ）；
    ｋ）マクロライド類：アジスロマイシン、セスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、フルリスロマイシン、ジョサマイシン、ケトライド（テリスロマイシン、セスロマイシン）、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、リファマイシン（リファンピシンン、リファンピン、リファブチン、リファペンチン）、ロキタマイシン、ロキシスロマイシン、スペクチノマイシン、スピラマイシン、タクロリムス（ＦＫ５０６）、トロレアンドマイシン、テリスロマイシンン；
    ｌ）モノバクタム類：アズトレオナム、チゲモナム；
    ｍ）オキサゾリジノン類：リネゾリド；
    ｎ）ペニシリン類：アモキシシリン、アンピシリン、ピバンピシリン、ヘタシリン、バカンピシリン、メタンピシリン、タランピシリン、アジドシリン、アズロシリン、ベンジルペニシリン、ベンザチンベンジルペニシリン、ベンザチンフェノキシメチルペニシリン、クロメトシリン、プロカインベンジルペニシリン、カルベニシリン（カリンダシリン）、クロキサシリン、ジクロキサシリン、エピシリン、フルクロキサシリン、メシリナム（ピブメシリナム）、メズロシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペナメシリン、ペニシリン、フェネチシリン、フェノキシメチルペニシリン、ピペラシリン、プロピシリン、スルベニシリン、テモシリン、チカルシリン；
    ｏ）ポリペプチド類：バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ；
    ｐ）キノロン類：アラトロフロキサシン、バロフロキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ダノフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、エンロフロキサシン、フロキシン、ガレノキサシン、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、グレパフロキサシン、カノトロバフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、マルボフロキサシン、モキシフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オルビフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、シタフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン；
    ｑ）ストレプトグラミン類：プリスチナマイシン、キヌプリスチン／ダルフォプリスチン；
    ｒ）スルホンアミド類：マフェニド、プロントジル、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファニルアミド、スルファサラジン、スルフィソキサゾール、トリメトプリム、トリメトプリム－スルファメトキサゾール（コ－トリモキサゾール）；
    ｓ）ステロイド系抗菌薬：フシジン酸等；
    ｔ）テトラサイクリン類：ドキシサイクリン、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、リメサイクリン、メクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン、ロリテトラサイクリン、テトラサイクリン、グリシルサイクリン（チゲサイクリン等）；
    ｕ）その他の抗生物質：アンノナシン、アルスフェナミン、バクトプレノール阻害剤（バシトラシン）、ＤＡＤＡＬ／ＡＲ阻害剤（サイクロセリン）、ジクチオスタチン、ディスコデルモライド、エレウテロビン、エポチロン、エタンブトール、エトポシド、ファロペネム、フシジン酸、フラゾリドン、イソニアジド、ラウリマリド、メトロニダゾール、ムピロシン、マイコラクトン、ＮＡＭ合成阻害剤（ホスホマイシン）、ニトロフラントイン、パクリタキセル、プラテンシマイシン、ピラジナミド、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、リファンピシン（リファンピン）、タゾバクタムチニダゾール、ウバリシン；
    ４）抗ウイルス薬：
    ａ）侵入／融合阻害剤：アプラビロック、マラビロク、ビクリビロック、ｇｐ４１（エンフビルチド）、ＰＲＯ１４０、ＣＤ４（イバリズマブ）；
    ｂ）インテグラーゼ阻害剤：ラルテグラビル、エルビテグラビル、グロボイドナンＡ；
    ｃ）成熟阻害剤：ベビリマット、ヴィヴェコン；
    ｄ）ノイラミニダーゼ阻害剤：オセルタミビル、ザナミビル、ペラミビル；
    ｅ）ヌクレオシド及びヌクレオチド：アバカビル、アシクロビル、アデフォビル、アムドキソビル、アプリシタビン、ブリブジン、シドフォビル、クレブジン、デキセルブシタビン、ジダノシン（ＤＤＩ）、エルブシタビン、エムトリシタビン（ＦＴＣ）、エンテカビル、ファムシクロビル、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、３’－フルオロ置換２’，３’－デオキシヌクレオシド類似体（例えば、３’－フルオロ－２’，３’－ジデオキシチミジン（ＦＬＴ）及び３’－フルオロ－２’，３’－ジデオキシグアノシン（ＦＬＧ）からなる群を含む）、ホミビルセン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、ラミブジン（３ＴＣ）、Ｌ－ヌクレオシド（例えば、β－Ｌ－チミジン及びβ－Ｌ－２’－デオキシシチジンからなる群を含む）、ペンシクロビル、ラシビル、リバビリン、スタンピジン、スタブジンセット（ｄ４Ｔ）、タリバビリン（ビラミジン）、テルビブジン、テノホビル、トリフルリジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ジドブジン（ＡＺＴ）；
    ｆ）非ヌクレオシド：アマンタジン、アテビリジン、カプラビリン、ジアリルピリミジン（エトラビリン、リルピビリン）、デラビルジン、ドコサノール、エミビリン、エファビレンツ、ホスカルネット（ホスホリルギ酸）、イミキモド、インターフェロンα、ロビリド、ロデノシン、メチサゾン、ネビラピン、ＮＯＶ－２０５、ペグインターフェロンα、ポドフィロトキシン、リファンピシン、リマンタジン、レシキモド（Ｒ－８４８）、トロマンタジン；
    ｇ）プロテアーゼ阻害剤：アンプレナビル、アタザナビル、ボセプレビル、ダルナビル、ホスアンプレナビル、インジナビル、ロピナビル、ネルフィナビル、プレコナリル、リトナビル、サキナビル、テラプレビル（ＶＸ－９５０）、チプラナビル；
    ｈ）その他の抗ウイルス薬：アブザイム、アルビドール、カラノリドＡ、セラゲニン、シアノビリン－Ｎ、ジアリルピリミジン、没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）、ホスカルネット、グリフィスシン、タリバビリン（ビラミジン）、ヒドロキシウレア、ＫＰ－１４６１、ミルテフォシン、プレコナリル、ポートマントー阻害剤、リバビリン、セリシクリブ；
    （５）本発明により調製される共役体に用いられる薬物には、放射性同位体も含まれる。放射性同位体（放射性核種）の例は、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１８Ｆ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^６４Ｃｕ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９９Ｔｃ、^１１１Ｉｎ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１３３Ｘｅ、^１７７Ｌｕ、^２１１Ａｔ、又は^２１３Ｂｉである；
    ６）ＵＶ光、蛍光光、ＩＲ光、近ＩＲ光、可視光を吸収する能力を有する発色団分子；黄色素胞、赤色素胞、虹色素胞、白色素胞、黒色素胞、青色素胞；光で光を再放射する蛍光性化学物質である蛍光分子のクラス又はサブクラス；視覚的光感受性分子のクラス又はサブクラス；発光分子のクラス又はサブクラス；ルミネッセンス分子のクラス又はサブクラス；及びルシフェリン化合物のクラス又はサブクラス；
    以下から選択される非タンパク質有機蛍光体：キサンテン誘導体（フルオレセイン、ローダミン、オレゴングリーン、エオシン、及びテキサスレッドを含む）；シアニン誘導体（シアニン、インドカルボシアニン、オキサカルボシアニン、チアカルボシアニン、及びメロシアニンを含む）；スクアレン誘導体及び環置換スクアライン（Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ、及びＳｑｕａｒｅ色素を含む）；ナフタレン誘導体（ダンシル及びプロダン誘導体を含む）；クマリン誘導体；オキサジアゾール誘導体（ピリジルオキサゾール、ニトロベンゾキサジアゾール、及びベンゾオキサジアゾールを含む）；アントラセン誘導体（ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、及びＣｙＴＲＡＫ Ｏｒａｎｇｅを含むアントラキノン類を含む）；ピレン誘導体（カスケードブルー）；オキサジン誘導体（ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、オキサジン１７０を含む）。アクリジン誘導体（プロフラビン、アクリジンオレンジ、アクリジンイエローを含む）。アリールメチン誘導体（オーラミン、クリスタルバイオレット、マラカイトグリーンを含む）。テトラピロール誘導体（ポルフィン、フタロシアニン、ビリルビンを含む）；
    以下を含むフルオロフォア化合物の類縁体及び誘導体：ＣＦ色素、ＤＲＡＱ及びＣｙＴＲＡＫプローブ、ＢＯＤＩＰＹ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ、ＤｙＬｉｇｈｔ Ｆｌｕｏｒ、Ａｔｔｏ及びＴｒａｎｃｙ、ＦｌｕｏＰｒｏｂｅｓ、Ａｂｂｅｒｉｏｒ色素、ＤＹ及びＭｅｇａＳｔｏｋｅｓ色素、ＳｕｌｆｏＣｙ色素、ＨｉＬｙｔｅ Ｆｌｕｏｒ、Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ及びＳｑｕａｒｅ色素、Ｑｕａｓａｒ及びＣａｌ Ｆｌｏｕｒ色素、ＳｕｒｅＬｉｇｈｔ色素（ＡＰＣ、ＲＰＥＰｅｒＣＰ、フィコビリソーム）、ＡＰＣ、ＡＰＣＸＬ、ＲＰＥ、ＢＰＥ、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）、アミノクマリン、ＡＰＣ－Ｃｙ７共役体、ＢＯＤＩＰＹ－ＦＬ、カスケードブルー、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ３Ｂ、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７、フルオレセイン、ＦｌｕｏｒＸ、ヒドロキシクマリン、リサミンローダミンＢ、ルシファーイエロー、メトキシクマリン、ＮＢＤ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｏｒａｎｇｅ、ＰＥ－Ｃｙ５共役体、ＰＥ－Ｃｙ７共役体、ＰｅｒＣＰ、Ｒ－フィコエリトリン（ＰＥ）、Ｒｅｄ６１３、Ｓｅｔａ－５５５－アジド、Ｓｅｔａ－５５５－ＤＢＣＯ、Ｓｅｔａ－５５５－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－５８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－６８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－７８０－ＮＨＳ、Ｓｅｔａ－ＡＰＣ－７８０、Ｓｅｔａ－ＰｅｒＣＰ－６８０、Ｓｅｔａ－Ｒ－ＰＥ－６７０、ＳｅＴａｕ３８０－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ４０５－マレイミド、ＳｅＴａｕ４０５－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ４２５－ＮＨＳ、ＳｅＴａｕ６４７－ＮＨＳ、テキサスレッド、ＴＲＩＴＣ、ＴｒｕＲｅｄ、Ｘ－ローダミン、７－ＡＡＤ（７－アミノアクチノマイシンＤ、ＣＧ選択性）、アクリジンオレンジ、クロモマイシンＡ３、ＣｙＴＲＡＫオレンジ（赤色励起暗）、ＤＡＰＩ、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、エチジウムブロマイド、ヘキスト３３２５８、ヘキスト３３３４２、ＬＤＳ７５１、ミスラマイシン、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、ＳＹＴＯＸブルー、ＳＹＴＯＸグリーン、ＳＹＴＯＸオレンジ、チアゾールオレンジ、ＴＯ－ＰＲＯ：シアニン単量体、ＴＯＴＯ－１、ＴＯ－ＰＲＯ－１、ＴＯＴＯ－３、ＴＯ－ＰＲＯ－３、ＹＯｓｅｔａ－１、ＹＯＹＯ－１；以下の化合物又はその誘導体を含む蛍光色素：ＤＣＦＨ（２’７’ジクロロジヒドロ－フルオレセイン、酸化型）、ＤＨＲ（ジヒドロローダミン１２３、酸化型、光触媒酸化）、Ｆｌｕｏ－３（ＡＭエステル、ｐＨ＞６）、Ｆｌｕｏ－４（ＡＭエステル、ｐＨ７．２）、Ｉｎｄｏ－１（ＡＭエステル、低／高カルシウム（Ｃａ^２＋））、ＳＮＡＲＦ（ｐＨ６／９）、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）、ＡｍＣｙａｎ１（四量体、Clontech）、ＡｓＲｅｄ２（四量体、Clontech）、Ａｚａｍｉグリーン（単量体）、アズライト、Ｂ－フィコエリトリン（ＢＰＥ）、セルリアン、ＣｙＰｅｔ、ＤｓＲｅｄ単量体（Clontech）、ＤｓＲｅｄ２（「ＲＦＰ」）、ＥＢＦＰ、ＥＢＦＰ２、ＥＣＦＰ、ＥＧＦＰ（弱二量体）、エメラルド（弱二量体）、ＥＹＦＰ（弱二量体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ａ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｃ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｌ変異体）、ＧＦＰ（Ｓ６５Ｔ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｆ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｈ変異体）、ＧＦＰ（Ｙ６６Ｗ変異体）、ＧＦＰ_ｕｖ、ＨｃＲｅｄ１、Ｊ－Ｒｅｄ、カチューシャ、Ｋｕｓａｂｉｒａ Ｏｒａｎｇｅ（単量体、MBL）、ｍＣＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＣｉｔｒｉｎｅ、Ｍｉｄｒｉｉｓｈｉ Ｃｙａｎ（二量体、MBL）、ｍＫａｔｅ（ＴａｇＦＰ６３５、単量体）、ｍＫｅｉｍａ－Ｒｅｄ（単量体）、ｍＫＯ、ｍＯｒａｎｇｅ、ｍＰｌｕｍ、ｍＲａｓｐｂｅｒｒｙ、ｍＲＦＰ１（単量体）、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ｍＴＦＰ１、ｍＴｕｒｑｕｏｉｓｅ２、Ｐ３（フィコビリソーム複合体）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎ Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ（ＰｅｒＣＰ）、Ｒ－フィコエリトリン（ＲＰＥ）、Ｔ－Ｓａｐｐｈｉｒｅ、ＴａｇＣＦＰ（二量体）、ＴａｇＧＦＰ（二量体）、ＴａｇＲＦＰ（二量体）、ＴａｇＹＦＰ（二量体）、ｔｄＴｏｍａｔｏ（タンデム二量体）、トパーズ、ＴｕｒｂｏＦＰ６０２（二量体）、ＴｕｒｂｏＦＰ６３５（二量体）、ＴｕｒｂｏＧＦＰ（二量体）、ＴｕｒｂｏＲＦＰ（二量体）、ＴｕｒｂｏＹＦＰ６３５（二量体）、ビーナス、天然型ＧＦＰ、ＹＰｅｔ、Ｚｓグリーン１（四量体）、Ｚｓイエロー１（四量体）、並びにそれらの誘導体；
    ７）以下から選択される細胞受容体アゴニスト又は細胞刺激分子：葉酸誘導体；グルタミン酸尿素誘導体；ソマトスタチン及びその類縁体（オクトレオチド（サンドスタチン）及びランレオチド（ソマチリン）からからなる群から選択される）；芳香族スルホンアミド；下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド（ＰＡＣＡＰ）（ＰＡＣ１）；血管作動性腸管ペプチド（ＶＩＰ／ＰＡＣＡＰ）（ＶＰＡＣ１、ＶＰＡＣ２）；メラノサイト刺激ホルモン（α－ＭＳＨ）；コレシストキニン（ＣＣＫ）／ガストリン受容体アゴニスト、ボンベシン（Ｐｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｓｎ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｍｅｔ－ＮＨ_２からなる群から選択）／ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）；ニューロテンシン受容体リガンド（ＮＴＲ１、ＮＴＲ２、ＮＴＲ３）、サブスタンスＰ（ＮＫ１受容体）リガンド；ニューロペプチドＹ（Ｙ１～Ｙ６）；ＲＧＤ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ）、ＮＧＲ（Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ）、二量体及び多量体環状ＲＧＤペプチド（ｃＲＧＤｆＶから選択）、ＴＡＡＳＧＶＲＳＭＨ、及びＬＴＬＲＷＶＧＬＭＳ（コンドロイチン硫酸プロテオグリカンＮＧ２受容体リガンド）、及びＦ３ペプチドを含むホーミングペプチド；細胞膜透過ペプチド（ＣＰＰ）；ペプチドホルモン、テストステロン産生と同様に、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）を標的として働く、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト及びアンタゴニスト、並びに性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストであって、ブセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ゴナドレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ゴセレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－）Ｔｙｒ－Ｄ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＡｚＧｌｙ－ＮＨ_２）、ヒストレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｈｉｓ（Ｎ－ベンジル）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、リュープロリド（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ）、ナファレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－２Ｎａｌ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、トリプトレリン（Ｐｙｒ－Ｈｉｓ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－ＮＨ_２）、ナファレリン、デスロレリン、アバレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｔｙｒ－Ｄ－Ａｓｎ－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－ＤＡｌａ－ＮＨ_２）、セトロレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－Ｃｉｔ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、デガレリクス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－４－アミノＰｈｅ（Ｌ－ヒドロオロチル）－Ｄ－４－アミノＰｈｅ（カルバモイル）－Ｌｅｕ－イソプロピルＬｙｓ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）、及びガニレリックス（Ａｃ－Ｄ－２Ｎａｌ－Ｄ－４－クロロＰｈｅ－Ｄ－３－（３－ピリジル）Ａｌａ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｄ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｌｅｕ－（Ｎ９，Ｎ１０－ジエチル）－ホモＡｒｇ－Ｐｒｏ－Ｄ－Ａｌａ－ＮＨ_２）からなる群から選択される；トール様受容体（ＴＬＲ）リガンド、Ｃ型レクチン、及びＮｏｄｌｉｋｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＮＬＲ）リガンドから選択されるパターン認識受容体（ＰＲＲ）；カルシトニン受容体アゴニスト；インテグリン受容体及びその受容体サブタイプ（α_Vβ₁、α_Vβ₃、α_Vβ₅、α_Vβ₆、α₆β₄、α₇β₁、α_Lβ₂、α_IIbβ₃からなる群から選択される）アゴニスト（ＧＲＧＤＳＰＫ、シクロ（ＲＧＤｆＶ）（Ｌ１）及びその誘導体［シクロ（－Ｎ（Ｍｅ）Ｒ－ＧＤｆＶ）、シクロ（Ｒ－Ｓａｒ－ＤｆＶ）、シクロ（ＲＧ－Ｎ（Ｍｅ）Ｄ－ｆＶ）、シクロ（ＲＧＤ－Ｎ（Ｍｅ）ｆ－Ｖ）、シクロ（ＲＧＤｆ－Ｎ（Ｍｅ）Ｖ－）（シレンギチド）］からなる群から選択される；アンチカリン（リポカリンの誘導体）；アドネクチン（１０番目のＦＮ３（フィブロネクチン））；設計されたアンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎｓ）；アビマー；ＥＧＦ受容体又はＶＥＧＦ受容体アゴニスト；
    （８）上記の任意の薬物の、薬学的に許容される塩、酸、誘導体、水和物若しくは水和塩；又は結晶構造；又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー。
12. 前記細胞毒素Ｄ、Ｄ_１及びＤ_２は独立して、抗微小管剤、ＤＮＡ小溝結合剤、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ阻害剤、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ又はＩＩＩ阻害剤、又はＤＮＡアルキル化剤であり、チューブリシン、アマニチン、オーリスタチン（ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ、ＡＥＢ、ＡＥＢＡ、Ｅの類縁体を含む。）、カリケアマイシン、カンプトテシン（ＳＮ－３８、トポテカン、又はエキサテカンを含む。）、エトポシド、テニポシド、ダウノマイシン、ドキソルビシン（モルノリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシンを含む。）、デュオカルマイシン（ＣＣ１６０５類縁体、ＤＣ１、ＤＣ４、ＣＢＩ－二量体を含む。）、ドラスタチン、エンジイン、エリブリン、レキシトロプシン、タキサン、ピューロマイシン、メイタンシノイド、ビンカアルカロイド、パクリタキセル、ドセタキセル、ピロロベンゾジアゼピン類（ＰＢＤ、ＩＧＮを含む）、リゾキシン、ドラスタチン、エキノマイシン、コンブレスタチン、ビンカアルカロイド、カリケアマシシン、メイタンシン（ＤＭ１、ＤＭ４、ＤＭ２１）、ゲルダナマイシン、ビンブラスチンン、メソトレキセート、ヘミアステリン、ネトロプシン、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ阻害剤（ＮＡＭＰＴ）、スプライセオスタチン、プラジエノリド、プロテインキナーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、プロテイナーゼ阻害剤、免疫毒素、細胞受容体アゴニスト、及びこれらの誘導体物又は類縁体から選択される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    
    （ａ）以下の式（ＩＶ）を有するチューブリシン及びその類縁体、又は１以上の同位体を有する誘導体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又は多形結晶構造、又はその光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    は、それらのうちの１つ又は２つが独立して、Ｌ_１及び／又はＬ_２に結合できる結合部位である；２つの
    

    

    
    
    がＬ_１とＬ_２の両方に結合する場合、Ｒ^１及びＲ^２、又はＺ^２とＺ^３が二重結合部位であることが好ましい。
    
    Ｒ^１、Ｒ^１’、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、又は複素環；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、炭素環、又はアルキルカルボニルである；又はＲ^１Ｒ^２、Ｒ^１Ｒ^３、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^３Ｒ^４、Ｒ^５Ｒ^６、Ｒ^１１Ｒ^１２、又はＲ^１３Ｒ^１４は、３～７員の炭素環、シクロアルキル、複素環、ヘテロシクロアルキル、芳香族、又は複素芳香族環系を形成する；Ｌ_１又はＬ_２に独立して又は同時に結合する場合、Ｒ^１及びＲ^２が独立して欠いてもよい；
    Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^８、Ｒ^１０、及びＲ^１１は独立して、Ｈ、又はＣ_１～Ｃ_４アルキル若しくはヘテロアルキルであり；
    Ｒ^７は独立して、Ｈ、Ｒ^１４、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｘ^１Ｒ^１５；又は－Ｒ^１４Ｘ^１Ｒ^１５である；Ｘ^１はＯ、Ｓ、Ｓ－Ｓ、ＮＨ、ＣＨ_２、又はＮＲ^１４である；
    Ｒ^９は、Ｈ、ＯＨ、＝Ｏ、－ＯＲ^１４、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^１４、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ^１４－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^１４Ｒ^１５－、ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１４）_２－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ^１４Ｒ^１５、又はＯＲ^１４ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１５）_２から選択される；Ｒ^９がＬ_１又はＬ_２に結合する場合、Ｒ^９は、－Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、又は－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^１４）－である；
    Ｒ^１１は独立して、Ｈ、Ｒ^１４、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^１５、－Ｒ^１４Ｃ（＝Ｏ）Ｘ^２Ｒ^１５であり、式中、Ｘ^２は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、又は－Ｎ（Ｒ^１４）－である；
    Ｒ^１２は、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＳＨ、－ＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＨＮＨ_２、ＣＯＮＨＮＨＲ^１５、－ＣＯＮＨ（Ｒ^１５）、－ＣＯＯＲ^１５、－Ｒ^１５ＣＯＲ^１６、－Ｒ^１５ＣＯＯＲ^１６、－Ｒ^１５Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、－Ｒ^１５Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ^１６、－ＣＯＳＲ^１５、Ｒ^１５Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ^１６、－Ｒ^１５Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－Ｒ^１５ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－ＣＯＯＣＨ_２ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－ＣＯＸ_２ＳＯ_２Ｒ^１７、－ＣＯＯＲ^１５Ｘ_２Ｒ^１６、テトラゾール、イミダゾール、又はトリアゾールである；Ｘ_２は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｒ^１５）－、－ＯＲ^１５－、－ＳＲ^１５－、ＣＨ_２、又は－ＮＨＲ^１５－である；；Ｒ^１２がＬ_１又はＬ_２に結合する場合、Ｒ^１２は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）_２Ｒ^１５－、又は－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^１５）－である；
    Ｒ^１３及びＲ^１４は独立して、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル：Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキルである；
    Ｚ^２及びＺ^３は独立して、Ｈ、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ^１５）、ＮＨＮＨ、－ＯＨ、－ＳＨ、－ＮＨ_２、ＮＨ、ＮＨＮＨ２、－ＮＨ（Ｒ^１５）、－ＯＲ^１５、ＣＯ、－ＣＯＸ２、－ＣＯＸ２Ｒ^１６、Ｒ^１７、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＳＲ^１６、ＮＲ^１６Ｒ^１７、Ｎ＝ＮＲ^１６、Ｎ＝Ｒ^１６、ＮＯ２、ＳＯＲ^１６Ｒ^１７、ＳＯ２Ｒ^１６、ＳＯ３Ｒ^１６、ＯＳＯ３Ｒ^１６、ＰＲ^１６Ｒ^１７、ＰＯＲ^１６Ｒ^１７、ＰＯ２Ｒ^１６Ｒ^１７、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣＨ２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１７、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＰＯ（ＯＲ^１６）（ＯＲ^１７）、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１７；－Ｏ－（Ｃ_４～Ｃ_１２グリコシド）、－Ｎ－（Ｃ_４～Ｃ_１２グリコシド）；Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、炭素環式、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール、又は２～８個の炭素原子のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド（ＮＨ（Ａａ）_１～８又はＣＯ（Ａａ）_１～８（Ｎ末端又はＣ末端（Ａａ）_ｒ、ｒ＝１～８個の同一の又は異なるアミノ酸配列）、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０～約１０００の整数である）、あるいはそれらの上記の基の組み合わせである；Ｘ_２は、Ｏ、Ｓ、Ｓ－Ｓ、ＮＨ、ＣＨ_２、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ_２、ＣＨＲ^１５、又はＮＲ^１５である；
    Ｒ^１５、Ｒ^１６、及びＲ^１７は独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール、アルキルカルボニル、又はＮａ^＋、Ｋ^＋、Ｃｓ^＋、Ｌｉ^＋、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^＋、Ｚｎ^２＋、Ｎ^＋（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）（Ｒ^４）、若しくはＨＮ^＋（Ｃ_２Ｈ_５ＯＨ）_３塩である；
    Ｙ^１及びＹ^２は独立して、Ｎ又はＣＨである；ｑは０又は１である；ｑ＝０の場合、Ｙ^３は存在せず、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は独立して、ＣＨ、Ｎ、ＮＨ、Ｏ、Ｓ、又はＮ（Ｒ１）であるため、Ｙ^２、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は、フラン、ピロールチオフェン、チアゾール、オキサゾール及びイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、チアジアゾールの複素芳香環を形成する；ｑ＝１の場合、Ｙ^３、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は独立して、ＣＨ又はＮであるため、Ｙ^２、Ｙ^３、Ｙ^４、Ｙ^５、Ｙ^６、及びＹ^７は、ベンゼン、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、トリアジン、テトラジン、ペンタジンの芳香環を形成する；
    
    チューブリシン類縁体は特に、以下に示す構造を有する：
    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    Ｒ^２０は、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）；又は炭素原子数１～８個のカルボン酸塩、エステル、エーテル、若しくはアミド；又は１～８個のアミノ酸；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１０００までの整数である）；あるいは、Ｒ^２０が存在せず、酸素原子がケトンを形成する、又は上記の組み合わせである；
    Ｚ^２及びＺ^３は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ、ＮＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、Ｒ^１８、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＮＨＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、ＯＳＯ_２（ＯＲ_１８）、Ｏ－（Ｃ_４～Ｃ_１２－グリコシド）、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分岐アルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である；
    Ｒ^１７及びＲ^１８は独立して、Ｈ、直鎖又は分枝アルキル又はヘテロアルキル、Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖又は分枝アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖又は分枝アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である；
    Ｒ^１９は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＯＳＯ_２（ＯＲ^１８）、ＸＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＸＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＸＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＸＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＸＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル又はカルボン酸塩; Ｃ_２～Ｃ_８アルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール又はアルキルカルボニル；又は医薬用塩である；
    Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、又はＣＨ_２である；
    Ｒ^７は、上記の定義と同じである；
    式（ＩＶ－０１）～（ＩＶ－９４）中の結合部位
    

    

    
    
    は、ここでは省略されるが、請求項１２－（ａ）の式（ＩＶ）に示されるのと同じ位置に続いている。
    
    （ｂ）以下の式を有するカリケアマイシン及びその関連するエンジイン抗生物質、又は化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又は多形結晶構造、又はその光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーは以下の構造式を有し、カリケアマイシン、ゲルダナマイシン、メイタンシノイド、エリブリン、及びスプライセオスタチンはそれぞれ、以下の構造式を有する：
    

    

    
    
    （ｃ）以下の構造を有するゲルダナマイシン：
    

    

    
    式中、ＸはＯ、ＮＨ、ＣＨ_２であり、
    

    

    
    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である。
    
    （ｄ）以下の式を有するメイタンシン又はその誘導体であるメイタンシノイド、又は１以上の同位体を有する誘導体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又は多形結晶構造、又はその光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    （ｅ）以下の式で表されるカンプトテシン（ＣＰＴ）若しくはその誘導体、又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    式中、
    Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_４は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｏ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；ＮＨ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数２～８個のエステル、エーテル、アミド、カーボネート、尿素、又はカルバメートから選択される；
    Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｏ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；ＮＨ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；又は炭素原子数２～８個のエステル、エーテル、アミド、カーボネート、尿素、又はカルバメートである；
    あるいは、Ｒ_１Ｒ_２、Ｒ_２Ｒ_３、及びＲ_３Ｒ_４は独立して、５～７員の炭素環、複素環、ヘテロシクロアルキル、芳香族、又は複素芳香族環系を形成する；
    

    

    
    
    は、Ｌ１又はＬ２と結合できる分子内部位である；
    
    前記カンプトテシン（ＣＰＴ）又はその誘導体（Ｃｐｔ－Ｉ）、又は１つ以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマーは、特に以下の式を有する：
    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    Ｐ^１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＮＨＰＯ（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１８、ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１８）_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＮＣＨ_３、ＯＳＯ_２（ＯＲ^１８）、Ｏ－（Ｃ_４－Ｃ_１２－グリコシド）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＣＨ_２Ｎ（Ｃ_２Ｈ_４）_２ＣＨ_３、Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状又は分岐状のアルキル）、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状又は分岐状のアルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖状又は分枝状のアルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８の直鎖状又は分枝上のアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）；Ｒ^１７及びＲ^１８は独立して、Ｈ、直鎖状又は分枝状のアルキル又はヘテロアルキル；Ｃ_２～Ｃ_８の直鎖状又は分枝状のアルケニル、アルキニル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８のの直鎖状又は分枝状のアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；カーボネート（－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７）、カーバメート（－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１７Ｒ^１８）である；
    Ｒ_１及びＲ_２は独立して、Ｈ；Ｏ－Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アラルキルから選択される；
    上記ＣＰＴ構造（Ｉｃｐ－０１～Ｉｃｐ－２４）における接続部位
    

    

    
    
    はここでは省略されるが、（Ｃｐｔ－Ｉ）で示される位置と同じその定義である。
    
    （ｆ）以下の式を有するコンブレタスタチン、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    
    
    （ｇ）以下の式を有するタキサン及びその誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；Ａｒ及びＡｒ’は独立して、アリール又はヘテロアリールである。
    
    （ｈ）以下の式を有するアントラサイクリン及びその誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    

    
    
    （ｉ）以下の式を有するビンカアルカロイド及びその誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    

    
    
    （ｊ）以下の式（Ｉｈ－０１）、（Ｉｈ－０２）、（Ｉｈ－０３）、（Ｉｈ－０４）、（Ｉｈ－０５）、（Ｉｈ－０６）、（Ｉｈ－０７）、（Ｉｈ－０８）、（Ｉｈ－０９）、（Ｉｈ－１０）、及び（Ｉｈ－１１）を有するドラスタチン、オーリスタンチン、及びそれらの誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    
    
    式中、
    Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖状若しくは分枝状のアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル、エーテル、アミド、アミン、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ又は（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐ（式中、ｐは１～約５０００の整数である）を有するポリエチレンオキシ単位である；２つのＲ：Ｒ^１Ｒ^２、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^１Ｒ^３、又はＲ^３Ｒ^４は、一緒になってもよい、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員環を形成することができる；
    Ｙ_１及びＹ_２は、接続部位（Ｌ１及び／又はＬ２と独立して結合する）
    

    

    と結合している場合、独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＨＲ_１である；または、接続部位
    

    

    と結合していない場合、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＲ_５、ＳＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＮＨＣ（Ｏ）ＳＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、及びＣ（Ｏ）ＮＨＲ_１である；
    Ｒ_１２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＮＨＣＯＯＨ、Ｏ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－（Ａａ）_ｎＣＯＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＲ_１Ｒ_１’、ＮＨＯＨ、ＮＨＯＲ_１、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＮＨ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１、Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、Ｒ_１－ＯＰＯ_３Ｈ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨ_２、又はＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２であり、Ａａは１～８個の同一又は異なるアミノ酸である；ｐは１～５０００である；
    Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_５’、Ｚ_１、Ｚ_２、及びｎは、上記の定義と同じである。
    
    （ｋ）以下の式を有するヘミアステリン及びその誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル、エーテル、アミド、アミン、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン；又は１～８個のアミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐを有するポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは１～約５０００の整数である）；Ｒ^２Ｒ^３は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員の環を形成することができる。
    
    （ｌ）以下の式を有するエリブリン及びその誘導体、又は１種以上の元素同位体置換体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は旋光異性体、ラセミ体、非鏡像異性体、若しくは鏡像異性体：
    

    

    
    （ｍ）以下の式ＮＰ０１、ＮＰ０２、ＮＰ０３、ＮＰ０４、ＮＰ０５、ＮＰ０６、ＮＰ０７、ＮＰ０８、及びＮＰ０９を有する、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤、又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    は上記と同じである；
    Ｘ_５は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ_１、Ｒ_１、ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＳＯ_３Ｈ、ＮＨＲ_１、ＯＣＯＲ_１、ＮＨＣＯＲ_１である；
    
    （ｎ）式ＰＢ０１、ＰＢ０２、ＰＢ０３、ＰＢ０４、ＰＢ０５、ＰＢ０６、ＰＢ０７、ＰＢ０８、ＰＢ０９、ＰＢ１０、ＰＢ１１、ＰＢ１２、ＰＢ１３、ＰＢ１４、ＰＢ１５、ＰＢ１６、ＰＢ１７、ＰＢ１８、ＰＢ１９、ＰＢ２０を有する、ベンゾジアゼピン二量体及びその類縁体、又は１以上の化学元素の同位体、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、及びＹ_２、Ｚ_１、Ｚ_２、及びｎは上記と同じ定義である；好ましくは、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、及びＹ_２は独立して、Ｏ、Ｎ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である；
    Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^１’、Ｒ^２’、及びＲ^３’は独立して、Ｈ；Ｆ；Ｃｌ；＝Ｏ；＝Ｓ；ＯＨ；ＳＨ；Ｃ_１－Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、アルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、エステル（ＣＯＯＲ_５又は－ＯＣ（Ｏ）Ｒ_５）、エステル（ＯＲ_５）、アミド（ＣＯＮＲ_５）、カーバメート（ＯＣＯＮＲ_５）、アミン（ＮＨＲ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’）、ヘテロシクロアルキル、又はアシルオキシルアミン（－Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＨ、－ＯＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_５）；又は１～２０個の天然若しくは非天然アミノ酸を含むペプチド、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐを有するポリエチレンオキシ単位であり、式中、ｐは１～約１０００の整数である；２個のＲ：Ｒ^１Ｒ^２、Ｒ^２Ｒ^３、Ｒ^１Ｒ^３、Ｒ^１’Ｒ^２’、Ｒ^２’Ｒ^３’、又はＲ^１’Ｒ^３’は独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、又はアルキルシクロアルキル基の３～８員の環を形成することができる；
    Ｘ_３及びＹ_３は独立して、Ｎ、ＮＨ、ＣＨ、若しくはＣＲ_１であり、又はＸ_３及びＹ_３はのいずれか１つは欠いてもよい；
    Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１～Ｃ_８の直鎖又は分枝鎖アルキル、ヘテロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、ヘテロアリール、アルキルシクロアルキル、アシロキシル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシル、アルキルアリールアミノ、アルキルアリールチオール；又は１～６個の同一の又は異なるアミノ酸／ペプチド配列（Ａｒ）ｒ（ｒ＝１－６）である；
    Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_５’、Ｒ_６、Ｒ_１２、及びＲ_１２’は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＮＨ_２、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ＯＺ_３、ＳＺ_３、Ｆ、Ｃｌ、又はＣ_１－Ｃ_８直鎖若しくは分岐アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、アシルオキシルアミンである；
    Ｚ_３は、Ｈ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＯＣＨ_２ＯＰ（Ｏ）（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＯＳＯ_３Ｍ_１、又はＯ－グリコシド（グルコシド、ガラクトシド、マンノシド、グルクロノシド／グルクロニド、アロシド、フルクトシド等）、ＮＨ－グリコシド、Ｓ－グリコシド、若しくはＣＨ_２－グリコシドである；Ｍ_１及びＭ_２は独立して、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、ＮＨ_４、ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３である；
    Ｘ_６は、ＣＨ、Ｎ、Ｐ（Ｏ）ＮＨ、Ｐ（Ｏ）ＮＲ_１、ＣＨＣ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ_３－Ｃ_８アリール、ヘテロアリール、アルキルシクロアルキル、アシルオキシル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシル、アルキルアリールアミノ、又はＡａ（アミノ酸、好ましくはＬｙｓ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｈｉｓ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇから選択される。）である；
    

    

    
    は、上記の定義と同じである；
    
    （ｏ）式ＣＣ０１、ＣＣ０２、ＣＣ０３、ＣＣ０４、ＣＣ０５、ＣＣ０６、及びＣＣ０７の構造を有する、ＣＣ－１０６５類縁体及びドカルマイシン（ｄｏｕｃａｒｍｙｃｉｎ）類縁体並びにそれらの誘導体：
    

    

    

    
    
    式中、
    Ｘ_１、Ｘ_２、Ｙ_１、及びＹ_２は、接続部位
    

    

    
    と結合している場合、独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である；または、接続部位
    

    

    
    と結合していない場合、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＳＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＯＣ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、ＮＨＣ（Ｏ）ＳＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、及びＣ（Ｏ）ＮＨＲ_１である；
    Ｚ_３は、Ｈ、ＰＯ（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＳＯ_３Ｍ_１、ＣＨ_２ＰＯ（ＯＭ_１）（ＯＭ_２）、ＣＨ_３Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２ＮＣ（Ｏ）－、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２ＮＣ（Ｏ）－、Ｒ_１、又はグリコシドである；
    Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｍ_１、Ｍ_２、及びｎは、上記の定義と同じである。
    
    （ｐ）以下の式Ａｍ０１、Ａｍ０２、及びＡｍ０３を有する、アマトキシン及びその類縁体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    式中、
    Ｘ_１及びＹ_１は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、ＣＨＮＨ、ＣＨ_２Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である；
    Ｒ_７、Ｒ_８、及びＲ_９は独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ_１、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、又は欠いている；
    Ｙ_２は、Ｏ、Ｏ_２、ＮＲ_１、ＮＨ、又は欠いている；
    Ｒ_１０は、ＣＨ_２、Ｏ、ＮＨ、ＮＲ_１、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）（ＮＲ_１）、（ＮＲ_１）Ｃ（Ｏ）（ＮＲ_１）、Ｃ（Ｏ）Ｒ_１、又は欠いている；
    Ｒ_１１は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＲ_１、ＮＨＮＨ_２、ＮＨＮＨＣＯＯＨ、Ｏ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ｒ_１－ＣＯＯＨ、ＮＨ－（Ａａ）_ｒＣＯＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、ＮＲ_１Ｒ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２－ＣＯＯＨ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＣＯＯＨ、ＮＨ－Ａｒ－ＮＨ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＳＯ_３Ｈ、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐ－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１、Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、Ｒ_１－ＯＰＯ_３Ｈ_２、Ｏ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ_３Ｈ_２、ＯＲ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、ＮＨ－Ｒ_１－ＮＨＰＯ_３Ｈ_２、又はＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＣＨ_２－ＣＨ_２ＮＨＰＯ_３Ｈ_２であり、ここで、（Ａａ）_ｒは１～８個のアミノ酸である；
    ｎ及びｍ_１は独立して、１～２０である；
    ｐは１～５０００である；
    Ｒ_１、Ｒ_２、Ａｒ、及び
    

    

    
    は、上記の定義と同じである。
    
    （ｑ）以下の式を有する、スプライセオスタチン類及びプラジエノリド類並びにそれらの誘導体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    （ｒ）以下の式ＰＫ０１～ＰＫ４０を有する、プロテインキナーゼ阻害剤及びその誘導体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    Ｚ_５及びＺ_５’は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１から選択される；
    

    

    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；
    
    （ｓ）以下の式を有する、ＭＥＫ阻害剤及びその誘導体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    
    式中、
    Ｚ_５は、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_５、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１から選択される；
    

    

    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；
    
    （ｔ）以下の式を有する、プロテアーゼ阻害剤及びその誘導体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    
    （ｕ）本発明の共役体のペイロードとして有用な免疫毒素は、ジフテリア毒素（ＤＴ）、コレラ毒素（ＣＴ）、トリコサンチン（ＴＣＳ）、ジアンチン（Ｄｉａｎｔｈｉｎ）、シュードモナス外毒素Ａ（ＥＴＡ）、発赤毒素、ジフテリア毒素、ＡＢ毒素、ＩＩＩ型外毒素、プロアエロリシン（ｐｒｏａｅｒｏｌｙｓｉｎ）、及びトプサリシン（ｔｏｐｓａｌｙｓｉｎ）から選択される；免疫毒素は、タンパク質融合のバイオエンジニアリングを介して、又は免疫毒素のアミノ酸の遊離アミノ基、チオール、又はカルボキシル基を介して、本発明の抗体と組み立てられる；
    
    （ｖ）以下の式を有する、細胞結合分子／リガンド又は細胞受容体アゴニスト及びそれらの誘導体、又は１若しくは複数の化学元素の同位体置換、又は薬学的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多結晶構造、又は光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、若しくはエナンチオマー：
    

    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    は、Ｌ_１又はＬ_２との結合部位である；Ｘ_４及びＹ_１は独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_１、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。
    
    （ｗ）以下の構造を有する、化学療法剤／機能性化合物として本発明のＢＣＭＡ抗体と共役される１又は２以上のＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、及びＰＩＷＩ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）：
    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    は、本特許の側鎖連結体との結合部位である；
    

    

    
    は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、又はｐｉＲＮＡの一本鎖又は二本鎖である；
    Ｘ_１及びＹは独立して、Ｏ、ＮＨ、ＮＨＮＨ、ＮＲ_１、Ｓ、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｓ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、Ｎ（Ｒ_１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１）、ＣＨ_２、Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨＣ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ_１である。
13. 連結体Ｌ_１及びＬ_２が独立して、以下からなる群から選択される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    Ｏ、ＮＨ、Ｓ、ＮＨＮＨ、Ｎ（Ｒ_３）、Ｎ（Ｒ_３）Ｎ（Ｒ_３’）、又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＯＲ_３、（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）Ｏ）ｐＲ３_ｐＯＲ_３、Ｎ［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＲ_３］［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐ’Ｒ_３’、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３、又はＣＨ_２ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３のポリエチレンオキシ単位（式中、ｐおよびｐ’は独立して、０～約１０００から選択される整数である）、又はそれらの組み合わせ；Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；から選択され、ここで、Ｒ_３及びＲ_３’は独立して、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルのアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数１～８個のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は定義中に記載されている１～８個の天然又は非天然アミノ酸；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１０００までの整数である）、又はそれらの組み合わせである；
    
    Ｌ_１又はＬ_２は、自壊性又は非自壊性成分、ペプチジル単位、ヒドラゾン結合、ジスルフィド、エステル、オキシム、アミド、又はチオエーテル結合を含んでもよく、前記自壊性ユニットは、２－アミノイミダゾール－５－メタノール誘導体、複素環式ＰＡＢ類縁体、β－グルクロニド、及びオルト又はパラアミノベンジルアセタールを含む、パラアミオベンジルカルバモイル（ＰＡＢ）基を含む；
    
    前記自壊性連結体成分は、以下の構造のいずれかを有する；
    

    

    
    
    式中、（^＊）で標識された原子は、追加のスペーサー、放出可能な連結体単位、細胞傷害性薬剤、及び／又は細胞結合分子（ＣＢＡ）との結合点である；Ｘ^１、Ｙ^１、Ｚ^２、及びＺ^３は独立して、ＮＨ、Ｏ又はＳである；Ｚ^１は独立して、Ｈ、ＮＨ、Ｏ、又はＳである；ｖは０又は１である；Ｕ^１は独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ_５、ＳＲ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’、Ｎ＝ＮＲ_５、Ｎ＝Ｒ_５、ＮＲ_５Ｒ_５’、ＮＯ_２、ＳＯＲ_５Ｒ_５’、ＳＯ_２Ｒ_５、ＳＯ_３Ｒ_５、ＯＳＯ_３Ｒ_５、ＰＲ_５Ｒ_５’、ＰＯＲ_５Ｒ_５’、ＰＯ_２Ｒ_５Ｒ_５’、ＯＰＯ（ＯＲ_５）（ＯＲ_５’）、又はＯＣＨ_２ＰＯ（ＯＲ_５）（ＯＲ_５’）であり、式中、Ｒ_５及びＲ_５’は上記の通りである；好ましくはＲ_５及びＲ_５’は独立して、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアラルキル、アルキルカルボニル；又は薬用陽イオン塩から選択される；
    
    前記非自壊性連結体成分は、以下の構造のいずれかを有する；
    

    

    

    
    
    式中、（^＊）で標識された原子は、追加スペーサーＲ_１、放出可能連結体単位、細胞毒性剤、及び／又は結合分子との結合点である；Ｘ^１、Ｙ^１、Ｕ^１、Ｒ_５、Ｒ_５’は、上記で定義されたとおりである；ｒは０～１００である；ｍ及びｎは独立して０～６である；
    
    Ｌ_１又はＬ_２は独立して、６－マレイミドカプロイル（「ＭＣ」）、マレイミドプロパノイル（「ＭＰ」）、バリン－シトルリン（「ｖａｌ－ｃｉｔ」又は「ｖｃ」）、アラニン－フェニルアラニン（「ａｌａ－ｐｈｅ」又は「ａｆ」）、ｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（「ＰＡＢ」）、４－チオペンタン酸（「ＳＰＰ」）、４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１ カルボキシレート（「ＭＣＣ」）、（４－アセチル）アミノ安息香酸（「ＳＩＡＢ」）、４－チオ酪酸（ＳＰＤＢ）、４－チオ－２－ヒドロキシスルホニル酪酸（２－スルホ－ＳＰＤＢ）、又は１～８個の天然又は非天然アミノ酸単位を有する天然又は非天然ペプチドである１又は複数の連結体成分から構成されてもよい。
    
    Ｌ_１又はＬ_２は、ｐＨ不安定性、酸不安定性、塩基不安定性、酸化不安定性、代謝不安定性、生物化学的不安定性、又は酵素不安定性等の、生理的条件で崩壊することができる少なくとも１つの結合を含む連結体でもよい。前記放出可能連結体（Ｌ_１又はＬ_２）の例には、以下が含まれる：－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（Ａａ）_ｒ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（Ａａ）_ｒ－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（ＣＲ_７＝ＣＲ_８）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（Ａａ）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｔ（ＮＲ_１１ＣＯ）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ－（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フェニル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－チエニル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－イミダゾリル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－モルホリノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－ピペラジノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－Ｎ－メチルピペラジン－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフェニル－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフリル－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チエニル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－イミダゾリル（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－モルホリノ－（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－ピペラジノ－（Ａａ）_ｔ－、－（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－Ｎ－メチルピペラジノ－（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（Ａａ）_ｒ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（Ａａ）_ｒ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＲ_７＝Ｒ_８）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（Ａａ）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（Ａａ）_ｔ（ＮＲ_１１ＣＯ）（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＮＲ_１１ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＯＣＮＲ_７）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_９Ｒ_１０）_ｎ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｒ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フェニル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－フリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－チエニル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－イミダゾリル－（ＣＯ）（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－モルホリノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－ピペラジノ－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｔ－Ｎ－メチルピペラジン－（ＣＯ）（Ａａ）_ｔ（ＣＲ_７Ｒ_８）_ｎ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフェニル－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－（Ａａ）_ｔフリル－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－オキサゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チアゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－チエニル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－イミダゾリル（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－モルホリノ－（Ａａ）_ｔ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－ピペラジノ－（Ａａ）_ｔＧ－、－Ｋ（ＣＲ_５Ｒ_６）_ｍ－Ｎ－メチルピペラジノ－（Ａａ）_ｔ；式中、ｍ、Ａａ、ｍ、ｎ、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_５の定義は上記の通りである；ｔ及びｒは独立して０～１００である；Ｒ_６、Ｒ_７、及びＲ_８は独立して、Ｈ；ハロゲン化物；Ｃ_１～Ｃ
    _８アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、エーテル、エステル、アミン、若しくはアミドから選択され、１以上のハロゲン化物、ＣＮ、ＮＲ_１Ｒ_２、ＣＦ_３、ＯＲ_１、アリール、複素環、Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、ＳＯ_２Ｒ_１、－ＣＯ_２Ｈ、－ＳＯ_３Ｈ、－ＯＲ_１、－ＣＯ_２Ｒ_１、－ＣＯＮＲ_１、－ＰＯ_２Ｒ_１Ｒ_１２、－ＰＯ_３Ｈ、又はＰ（Ｏ）Ｒ_１Ｒ_２Ｒ_３’で任意に置換されていてもよい；ＫはＮＲ_１、－ＳＳ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ＝ＮＨ－Ｏ－、－Ｃ＝Ｎ－ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－ＮＨ－、Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、Ｂ、又はＣ_３～Ｃ_６複素芳香環である。
    
    前記連結体Ｌ_１及び／又はＬ_２の構造は、以下の構造又はそれらの組み合わせとすることができる：
    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    Ｘ_２、Ｘ_３、Ｘ_４、Ｘ_５、又はＸ_６は独立して、ＮＨ、ＮＨＮＨ；Ｎ（Ｒ_１２）；Ｎ（Ｒ_１２）Ｎ（Ｒ_１２’）；Ｏ；Ｓ；Ｃ_１～Ｃ_６アルキル；Ｃ_２～Ｃ_６ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；ＣＨ_２ＯＲ_１２、ＣＨ_２ＳＲ_１２、ＣＨ_２ＮＨＲ_１２、又は１～８個のアミノ酸である；式中、Ｒ_１２及びＲ_１２’は独立して、Ｈ；Ｃ_１～Ｃ_８アルキル；Ｃ_２～Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３～Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数１～８個のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１００までの整数である）；又はそれらの組み合わせである；
14. 連結体Ｌ_１及びＬ_２が独立して、以下からなる群から選択される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    

    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    
    は薬物又は連結体Ｌ_１若しくはＬ_２と結合する部位である；「＃」は、抗体のＳ（チオール）、Ｏ（フェノール）、ＮＨ（アミノ）、ＣＨＯ（アルデヒド）、Ｃ（＝Ｏ）（ケトン）、Ｃ（Ｏ）（ＮＨ）（アミド）、Ｃ（Ｏ）（ＯＨ）（カルボキシレート）と結合する部位である；ＡａはＬ－又はＤ－天然又は非天然アミノ酸である；
    Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＳＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４ＯＨ、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である；
    ｒは０～１２である；ｒが０でない場合、（Ａａ）ｒはアミノ酸又は同一若しくは異なる配列のペプチド単位である；
    ｍ_１＝１－１８；ｍ_２＝１－１００；ｍ_３＝１－８；ｍ_４＝０－８；ｍ_５＝１－８である；
    Ｙ^７は、ＮＨ、ＯＣＨ_２ＮＨ、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、ＳＯ_２、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２Ｎ、ＮＨＣ_６Ｈ_４ＮＨ、ＣＨ_２である；
    Ｙ^８は、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）、ＮＨ（ＳＯ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、又はＣ（Ｏ）ＮＨである；
    Ｒ_９は、Ｈ、（Ｏ＝）ＣＲ_１、（Ｏ＝）ＣＮＨＲ_１、Ｒ_１ＣＯＯＨ、Ｒ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＨ）ｍ_２Ｈ、Ｒ_１（Ａａ）ｒ、又はＲ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＣＨ_３）_ｍ２Ｈであり、ここで、Ｒ_１は、上記で定義されたものである。
    
    Ｌｖ_１’は以下から選択される：
    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    

    

    
    
    は薬物又は連結体Ｌ_１若しくはＬ_２と結合する部位である；「＃」は、抗体のＳ（チオール）、Ｏ（フェノール）、ＮＨ（アミノ）、ＣＨＯ（アルデヒド）、Ｃ（＝Ｏ）（ケトン）、Ｃ（Ｏ）（ＮＨ）（アミド）、Ｃ（Ｏ）（ＯＨ）（カルボキシレート）と結合する部位である；式中、Ｒ_１、Ｘ_１’、及びＸ_２’は上記の通りである；ＸはＯ、ＮＨ、Ｓ、ＣＨ_２である；２つの原子の中央にある結合
    

    

    
    
    は、当該２つの原子のいずれかと結合できることを意味する；
15. 連結体Ｌ_１及びＬ_２が独立して、以下の式（Ｉｆ）及び（Ｉｇ）である、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    

    

    
    
    式中、
    ＡａはＬ－又はＤ－天然又は非天然アミノ酸である；
    Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＮＨ_２、ＳＨ、ＳＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５、ＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_４ＯＨ、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である；
    ｒは０～１２である；ｒが０でない場合、（Ａａ）ｒはアミノ酸又は同一若しくは異なる配列のペプチド単位である；
    ｍ_１＝１－１８；ｍ_２＝１－１００；ｍ_３＝１－８；ｍ_４＝０－８；ｍ_５＝１－８である；
    Ｙ^７は、ＮＨ、ＯＣＨ_２ＮＨ、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＮＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、ＳＯ_２、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ、ＮＨＳ（Ｏ）_２ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２）_２Ｎ、ＮＨＣ_６Ｈ_４ＮＨ、ＣＨ_２である；
    Ｙ^８は、ＮＨＣ（＝Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）、ＮＨ（ＳＯ）、ＮＨＳ（Ｏ_２）ＮＨ、ＮＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＮＨ、又はＣ（Ｏ）ＮＨである；
    Ｒ_９は、Ｈ、（Ｏ＝）ＣＲ_１、（Ｏ＝）ＣＮＨＲ_１、Ｒ_１ＣＯＯＨ、Ｒ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＨ）ｍ_２Ｈ、Ｒ_１（Ａａ）ｒ、又はＲ_１（ＣＯＣＨ_２ＮＣＨ_３）_ｍ２Ｈであり、ここで、Ｒ_１は、上記で定義されたものである。
16. 以下の式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）を有する薬物／連結体複合体をそれぞれ、本発明の抗体中のアミノ酸と反応させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成することにより調製される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    

    

    
    
    式中、
    Ｌｖ_１及びＬｖ_２は反応性基であり、独立して以下から選択される：
    

    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、
    Ｘ_１’及び_Ｘ２’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｆ、ＯＭｓ、ＯＣ_６Ｈ_４（ＮＯ_２）、ＯＣ_６Ｈ_３（ＮＯ_２）_２、ＯＣ_６Ｆ_５、ＯＣ_６ＨＦ_４、又はＬｖ_３である；Ｘ_２は、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、またはＣＨ_２である；Ｒ_３及びＲ_５は独立してＨ、Ｒ_１、芳香族、複素芳香族、又は芳香族基であり、１又はいくつかのＨ原子は独立して、－Ｒ_１、－ハロゲン、－ＯＲ_１、－ＳＲ_１、－ＮＲ_１Ｒ_２、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_１、又は－ＣＯＯＲ_１によって置換される；Ｌｖ_３およびＬｖ_３’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロフェノキシル、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）、フェノキシル、ベンゼンチオール、ジニトロフェノキシル、ペンタフルオロフェノキシル、テトラフルオロフェノキシル、ジフルオロフェノキシル、モノフルオロフェノキシル、ペンタクロロフェノキシル、トリフレート、イミダゾール、ジクロロフェノキシル、テトラクロロフェノキシル、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール、トシレート、メシル酸塩、２－エチル－５－フェニルイソオキサゾリウム－３’－スルホネート、自身又は他の無水物とで形成される無水物、無水アセチル、無水ホルミル、又はペプチドカップリング反応若しくはミツノブ反応のための縮合試薬と共に生成される中間分子から選択される脱離基である；
    
    Ｌ_１’及びＬ_２’は、同一の又は異なる、それぞれ独立して、Ｏ、ＮＨ、Ｓ、Ｓ－Ｓ、ＮＨＮＨ、Ｎ（Ｒ_３）、Ｎ（Ｒ_３）Ｎ（Ｒ_３’）、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；Ｃ_２－Ｃ_８（２～８個の炭素原子）のエステル、エーテル、又はアミド；上記定義に記載された１～８個の天然又は非天然アミノ酸；式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ、（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐ、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＯＲ_３、（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＯＲ_３、ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）Ｏ）ｐＲ３_ｐＯＲ_３、Ｎ［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＲ_３］［（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｐＲ_３’］、（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３、又はＣＨ_２ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐＣＯＯＲ_３のポリエチレンオキシ単位（式中、ｐ及びｐ’は独立して、０～約１０００から選択される整数である）、又はそれらの組み合わせであり、ここで、Ｒ_３及びＲ_３’は独立して、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル；Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルのアリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、ヘテロアリール；又は炭素原子数１～８個のエステル、エーテル、若しくはアミド；又は定義中に記載されている１～８個の天然又は非天然アミノ酸；又は式（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ若しくは（ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３））_ｐのポリエチレンオキシ単位（式中、ｐは０から約１０００までの整数である）、又はそれらの組み合わせである；
    
    Ｌ_１’及び／又はＬ_２’は、自壊性又は非自壊性成分、ペプチジル単位、ヒドラゾン結合、ジスルフィド、エステル、オキシム、アミド、又はチオエーテル結合を含んでもよい。前記自壊性ユニット及び非自壊性成分はいずれも、請求項１３の定義と同じである。
    
    式（Ｖ）及び式（ＶＩ）において、
    

    

    
    
    は、以下から選択することができる：
    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、Ｌｖ_３、Ｌｖ_３’、Ｘ_１’、及びＸ_２’は上記の通りである；２つの原子の中央にある結合
    

    

    
    
    は、当該２つの原子のいずれかと結合できることを意味する；
17. 先に、以下に示す式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）を有する連結体が、細胞毒性剤と反応して式（ＩＶ）、（Ｖ）、又は（ＶＩ）の化合物を形成し、次いで、前記抗体中のアミノ酸と反応して、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成することにより調製される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    

    

    
    
    式中、Ｌ_１’、Ｌ_２’、Ｅ_１、Ｌｖ_１、及びＬｖ_２は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、及び（ＶＩ）について上記と同じ定義である；
    
    Ｌｖ_５及びＬｖ_６は独立して、以下から選択される：
    

    

    

    
    
    式中、
    Ｘ１’は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｓ（トシレート）、ＯＴｆ（トリフレート）、ＯＭｓ（メシレート）、ＯＣ_６Ｈ_４（ＮＯ_２）、ＯＣ_６Ｈ_３（ＮＯ_２）_２、ＯＣ_６Ｆ_５、ＯＣ_６ＨＦ_４、又はＬｖ_３である；Ｘ_２’は、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｒ_１）、又はＣＨ_２である；Ｒ_３及びＲ_５は独立して、Ｈ、Ｒ_１、芳香族、複素芳香族、又は１若しくはいくつかのＨ原子が独立して、－Ｒ_１、－ハロゲン、－ＯＲ_１、－ＳＲ_１、－ＮＲ_１Ｒ_２、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ_１、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_１、又は－ＣＯＯＲ_１によって置換された芳香族基である；
    
    Ｌｖ_３及びＬｖ_３’は独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロフェノキシル；Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）；フェノキシル；ベンゼンチオール、ジニトロフェノキシル；ペンタフルオロフェノキシル；テトラフルオロフェノキシル；ジフルオロフェノキシル；モノフルオロフェノキシル；ペンタクロロフェノキシル；トリフレート；イミダゾール；ジクロロフェノキシル；テトラクロロフェノキシル；１－ヒドロキシベンゾトリアゾール；トシレート；メシル酸塩；２－エチル－５－フェニルイソオキサゾリウム－３’－スルホネート、自身又は無水アセチル及び無水ホルミルから選択される他の無水物とで形成される無水物、又はペプチドカップリング反応若しくはミツノブ反応のための縮合試薬と共に生成される中間分子から選択される脱離基である；ここで、反応がＬｖ_１又はＬｖ_２と抗体中のチオールとの間の反応よりも少なくとも１倍速いか遅い限り、官能基Ｌｖ_５及び／又はＬｖ_６は、細胞毒性剤中のチオールとも反応することができる。
18. 請求項１０に記載の抗体－薬物共役体は、ジスルフィド結合の還元により、前記抗体中にチオール基を生成し、次いで、該チオールと請求項１７の式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、又は（ＩＸ）の連結体とを同時に又は逐次的に反応させて、以下の式（Ｘ）、（ＸＩ）、又は（ＸＩＩ）の抗体／連結体複合体分子を形成し、続いて、細胞毒性薬Ｄ_１又はＤ_２と独立に反応させて、式（Ｉ）、（ＩＩ）、又は（ＩＩＩ）の共役体を形成する：
    

    

    
    
    式中、Ｌｖ_５、Ｌｖ_６、Ｌ１、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｅ_１、Ｌｖ_１’、及びＬｖ_２’、ｍＡｂ、ｎ、及びｎ’は、請求項１３、１４、１５、１６、及び１７と同じ定義である。
19. 以下の工程を含む均質共役方法により製造される、請求項１０に記載の抗体－薬物共役体：
    （ａ）抗体内の鎖間ジスルフィド結合を選択的に還元し、メルカプト基を産生するために、有効量の亜鉛カチオン－アミノキレート／錯体（Ｚｎ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^ｍ２＋）及び還元剤の存在下、緩衝系で本発明の抗体をインキュベートすること；
    （ｂ）工程（ａ）で生じたチオール基と反応させるために、請求項１６に記載の式（ＩＶ）、（Ｖ）、若しくは（ＶＩ）のペイロード／連結体複合体、又は請求項１７に記載の式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、若しくは（ＩＸ）の連結体を有効量添加すること；及び
    （ｃ）任意に、未反応のメルカプト基を再酸化するために、有効量の酸化剤（例えば、デヒドロアスコルビン酸）を加えること；
    （ｄ）及び次いで、得られた共役体を精製すること；
    （ｅ）任意の前記工程（ｃ）は、未反応の還元剤をクエンチするために、有効量のシスチン又は関連するジスルフィド化合物を添加し、一方、チオール反応性基を含む連結体又は連結体／ペイロード複合体の過剰な共役をクエンチするために、シスチンの還元からシステインを生成することに置き換えることができ、過剰の連結体又は連結体／ペイロード複合体分子をクエンチするために、有効量のシステイン又は関連メルカプト化合物を添加することもできる；
    前記亜鉛カチオン－アミノキレート／錯体Ｚｎ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^ｍ２＋中のＲ_１、Ｒ_２及びＲ_３はそれぞれ独立に、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_２－Ｃ_８ヘテロアルキル、アルキルシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル；Ｃ_３－Ｃ_８アリール、Ａｒ－アルキル、複素環、炭素環、シクロアルキル、ヘテロアルキルシクロアルキル、アルキルカルボニル、又はヘテロアリールから選択され；ｍ１は、１、２、３、又は４であり；
    前記Ｚｎ（ＮＲ_１Ｒ_２Ｒ_３）_ｍ１ ^ｍ２＋は、以下から選択される；Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ（ＣＨ_３）_２）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ３）_２）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ_２ＣＨ_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_２）_２ ^２＋、Ｚｎ（Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_３）_２ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ（ＣＨ_３）_２）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ_２ＣＨ_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_４ ^２＋、Ｚｎ（ＮＨ（ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_２）_４ ^２＋、Ｚｎ（Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ）_３）_４ ^２＋、
    

    

    

    
    
    全ての前記錯体カチオンは、Ｃｌ^－、Ｂｒ^－、Ｉ^－、ＳＯ_４ ^２－、ＨＳＯ_４ ^－、ＮＯ_３ ^－、ＰＯ_４ ^３－、ＨＰＯ_４ ^２－、Ｈ_２ＰＯ_４ ^－、ＣＯ_３ ^２－、ＨＣＯ_３ ^－、ＨＣＯＯ^－、ＣＨ_３ＣＯＯ^－、Ｆ_３ＣＣＯＯ^－、Ｃｌ_３ＣＣＯＯ^－、ＦＣＨ_２ＣＯＯ^－、ＣｌＣＨ_２ＣＯＯ^－、Ｆ_２ＣＨＣＯＯ^－、Ｃｌ_２ＣＨＣＯＯ^－、ＢＦ_４ ^－、ＳＯ_３ ^２－、ＨＳＯ_３ ^－、ＣＨ_３ＳＯ_３ ^－、Ｃ_６Ｈ_５ＣＨ_２ＳＯ_３ ^－、Ｃ_６Ｈ_５ＳＯ_３ ^－、Ｃ_６Ｈ_５ＣＯＯ^－、Ｃ_６Ｈ_５ＣＨ_２ＣＯＯ^－、Ｃ_６Ｆ_５Ｏ^－、Ｃ_６Ｈ_４（ＯＨ）ＣＯＯ^－、Ｃ_６Ｈ_２Ｆ_３Ｏ^－、Ｃ_６Ｈ_４（ＮＯ_２）Ｏ^－、及びＣ_６Ｈ_２（ＮＯ_２）_３Ｏ^－から選択されるアニオンと共に塩として形成されていてもよい；
    前記反応溶液中の前記遷移金属カチオン－アミノ錯体の濃度は、０．０１ｍＭ～１．０ｍＭ、又は抗体モルあたり０．５～２０当量であり、エタノール、メタノール、プロパノール、プロパンジオール、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、ＴＨＦ、又はＣＨ_３ＣＮから選ばれる水混和性有機溶媒と共に、前記反応溶液に加えることができる。
    前記還元剤は、トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）（Ｐ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）_３）又はトリス（ヒドロキシプロピル）ホスフィン（Ｐ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）_３）であり、これらは、抗体モルあたり１．０～２０当量で用いられる；
    前記酸化剤は、ＤＨＡＡ、Ｆｅ^３＋、Ｉ_２、Ｃｕ^２＋、Ｍｎ^３＋、ＭｎＯ_２、又はＦｅ^３＋／Ｉ^－の混合物から選択される；反応溶液中で使用される前記酸化剤の濃度は、０．０２ｍＭ～１．０ｍＭ、又は抗体モルあたり１～１００当量である；
    共役反応のｐＨは通常、約５．０から８．０、好ましくは約５．５から７．５である；共溶媒として、最大３０％のＤＭＡ、ＤＭＦ、エタノール、メタノール、アセトン、アセトニトリル、ＴＨＦ、イソプロピルアルコール、ジオキサン、プロピレングリコール、又はエチレングリコールから選択される水と混合（混和）可能な有機溶媒を、水系緩衝溶液に加えることができる；
    共役反応の最適温度は通常、約－５℃から４０℃、好ましくは約０℃から３７℃；更に好ましくは約２℃から８℃である；共役反応の最適反応時間は約１５分から約４８時間、好ましくは３０分から１６時間である；
    前記共役体は、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２５又はＳｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ３００カラムゲル濾過、吸着クロマトグラフィー、イオン（カチオン又はアニオン）交換クロマトグラフィー、又は透析（限外濾過又は超濾過（ＵＦ）及び／又は透析濾過（ＤＦ）により精製することができる。
20. 請求項１９に記載の均質共役方法により製造され、得られた式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（Ｘ）、（ＸＩ）または（ＸＩＩ）の共役体は、主に（６０％超）、抗体の重軽鎖間のシステイン部位と結合しており、薬物／抗体比率（ＤＡＲ）を４とした場合、抗体中の薬物百分率分布は、Ｄ０＜５％、Ｄ２＜１０％、Ｄ４＞６０％、Ｄ６＜１０％、Ｄ８＜１０％であり、
    前記共役体の薬物／抗体比（ＤＡＲ）は、ＵＶ（検出波長２４０～３８０ｎｍ）、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）、逆相クロマトグラフィー（ＲＰ－ＨＰＬＣ）、毛細管電気泳動法（ＣＥ）、ＬＣ－ＭＳ、ＣＥ－ＭＳ、又はＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって測定される。
21. 請求項１０又は２０に記載の抗体－薬物共役体は、以下の構造を有する：
    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    
    
    式中、ｍＡｂは本発明の抗体であり、ｎ＝１～２０、好ましくはｎ＝２～８である。