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JP2023051929A - 抗ｔａｕ抗体及び使用方法 - Google Patents

抗ｔａｕ抗体及び使用方法 Download PDF

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JP2023051929A JP2022196074A JP2022196074A JP2023051929A JP 2023051929 A JP2023051929 A JP 2023051929A JP 2022196074 A JP2022196074 A JP 2022196074A JP 2022196074 A JP2022196074 A JP 2022196074A JP 2023051929 A JP2023051929 A JP 2023051929A
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Abstract

【課題】抗Ｔａｕ抗体及びその使用方法を提供する。【解決手段】ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、該抗体が、特定のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む、単離抗体、ならびに個体におけるＴａｕタンパク質関連疾患の治療のための医薬品を製造するための、前記単離抗体の使用を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１２月７日に出願された米国仮特許出願第６２／４３１，１８０号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、抗Ｔａｕ抗体及びその使用方法に関する。
神経原線維変化及び神経絨毛糸（ＮＴ）は、アルツハイマー病（ＡＤ）の主要な神経病理学的特徴である。ＮＴは、リン酸化を含む翻訳後修飾を受けた微小管関連Ｔａｕタンパク質から構成され、高リン酸化Ｔａｕコンフォマーの凝集によって発達する。ＡＤは、多くの神経変性タウオパチーと、特に特定の種類の前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）とこの病理を共有する。Ｔａｕタンパク質は、ＡＤ及び関連する神経変性タウオパチーにおける認知崩御における主要な役者であるようである。
Ｔａｕタンパク質を標的とする治療アプローチはほとんどなく、主にＴａｕのリン酸化を病理学的レベルまで増加させると考えられるキナーゼの阻害剤、及び高リン酸化Ｔａｕタンパク質の細胞質凝集を遮断する化合物を含む。これらのアプローチは、特異性及び有効性についての様々な欠点に悩まされる。神経変性障害を引き起こすことが知られるか、または推定される、病理学的タンパク質コンフォマーを標的とする追加の治療剤に対する必要性が存在する。
本開示は、抗Ｔａｕ抗体及びその使用方法を提供する。いくつかの実施形態において、ヒト及びカニクイザルＴａｕへの高い親和性を有する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、例えば、表面プラズモン共鳴によって測定される、１ｎＭ未満または０．５ｎＭ未満または０．３ｎＭ未満のヒトＴａｕへの親和性を有する。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒトＴａｕに結合する抗体断片である。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕは、配列番号２の配列を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号６０３と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号６０３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、（ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１または配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１または配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６または６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６または配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１または配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１または配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体であってもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、ＩｇＧ４抗体であってもよい。いくつかのそのような実施形態において、抗体は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含む。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ変異を含んでもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含んでもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含むＩｇＧ４抗体であってもよい。いくつかの実施形態において、抗体は、抗体断片である。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含み、重鎖定常領域のＣ末端リジン（ｄｅｓ－Ｋ）を欠くＩｇＧ４抗体であってもよい。重鎖定常領域のＣ末端リジンは、Ｃ末端リジンがコードされないように、例えば、抗体の精製中に、または抗体をコードする核酸の組み換え操作によって、除去されてもよい。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、モノマーＴａｕ、リン酸化Ｔａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びオリゴマーＴａｕの各々に、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、または１ｎＭ未満のＫＤで結合する、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、カニクイザルＴａｕに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒトモノマーＴａｕ及び／またはカニクイザルモノマーＴａｕに１ｎＭ未満のＫＤで結合する。
いくつかの実施形態において、単離核酸であって、本明細書に記載される抗体をコードする、単離核酸が提供される。いくつかの実施形態において、宿主細胞であって、本明細書に記載される抗体をコードする単離核酸を含む、宿主細胞が提供される。いくつかの実施形態において、抗体の産生に好適な条件下で、宿主細胞を培養することを含む、抗体の産生方法が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体と、治療剤とを含む、免疫複合体が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体と、検出可能な標識とを含む、標識された抗体が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を、Ｔａｕタンパク質関連疾患を有する個体に投与することを含む、Ｔａｕタンパク質関連疾患の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症（Ｇｕａｄｅｌｏｕｐｅａｎ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ）、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病から選択される。
いくつかの実施形態において、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加方法、または記憶喪失の減速方法であって、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法が提供される。
いくつかの実施形態において、個体におけるＴａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減方法であって、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、医薬品として使用するために提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体におけるタウオパチーの治療に使用するために提供される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病から選択される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速に使用するために提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体におけるＴａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減に使用するために提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体の使用は、個体におけるＴａｕタンパク質関連疾患の治療のための医薬品を製造するために提供される。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病から選択される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体の使用は、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速のための医薬品を製造するために提供される。
いくつかの実施形態において、神経原線維変化、神経絨毛糸、または変性神経突起の検出方法であって、試料を本明細書に記載される抗体と接触させることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態において、試料は、脳試料、脳脊髄液試料、または血液試料である。
本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、方法または使用は、少なくとも１つの追加の療法と組み合わせて本明細書に記載される抗体を投与することを含んでもよい。追加の療法の非限定的な例としては、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、及び他の治療剤が挙げられる。そのような他の治療剤としては、他の抗Ｔａｕ抗体、アミロイド－ベータに対する抗体、ベータ－セクレターゼ１に対する抗体（「ＢＡＣＥ１」）、及びベータ－セクレターゼ１の阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 試験された３つのｐａｎＴａｕ抗体は、ウェスタンブロット（ＷＢ）アッセイを使用すると、アルツハイマー病（ＡＤ）及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。ＡＤ及び対照脳ライセートからのタンパク質抽出物、ならびに組み換えヒトＴａｕの６つのアイソフォームをＳＤＳ－ＰＡＧＥ上で泳動させ、膜を３つのｐａｎＴａｕ抗体（３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３）でブロットした。ＡＤ試料を有するレーンをＡＤ１８、ＡＤ２４、及びＡＤ２７として標識し、対照試料を有するレーンをＣ２５及びＣ２１として標識する。組み換えヒトＴａｕの６つのアイソフォームを泳動させたレーンをｈＴａｕラダーとして標識する。 ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。 Ｆａｂ（左パネル）として及びＩｇＧ（右パネル）として、Ｂｉａｃｏｒｅチップ表面に共有結合的にカップリングされたヒトＴａｕモノマーに結合する３７Ｄ３－Ｈ９を示す、センサグラム。１：１の結合モデルが適用されており、上重ねとして示されている。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。 ３．１、６．３、１２．５、２５、２５、５０、及び１００ｎＭのヒトＴａｕモノマーに対する、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５試料（ｔ＝０（左パネル）及びｔ＝２週間（右パネル））の結合を示す、上重ねセンサグラム。１：１の結合モデルが適用されており、この図においても示されている。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。 個々での（左パネルはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５を示し、中間パネルはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄを示す）、かつ１：１の比率で混合した（右パネル）、モノマーＴａｕに対するｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄの結合。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。 安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。 安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。 安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。 安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。 軽鎖の残基２８～３３（ＮＧＮＴＹＦモチーフ）の位置、ならびに残基２８及び３３の相対位置を示す、３７Ｄ３－Ｈ９ Ｆｖ領域の構造モデル。ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４においてＬｅｕに変異した残基３３が、不安定なＡｓｎ－２８残基の近くにはないことに留意されたい。点線は、残基Ａｓｎ－２８と残基Ｔｙｒ－３２との間の水素結合を示す。ＭＯＥソフトウェアパッケージ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）を使用して生成された図。 単回の１０ｍｇ／ｋｇ静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体３７Ｄ３－Ｈ９の薬物動態を示す。 １ｍｇ／ｋｇの用量の単回静脈内ボーラス注射後の、カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態を示す。 Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１～１５、１０～２４、１９～３３、２８～４２、３７～５１、及び４６～６０に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合を示す。 Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１０～４４、１０～２４、２～２４、２～３４、及び完全長Ｔａｕに対する抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａの結合を示す。 Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１０～４４、１０～２４、２～２４、２～３４、及び完全長Ｔａｕに対する抗体ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１の結合を示す。 ニューロン－ミクログリア共培養物中でのＴａｕ毒性に対するエフェクター機能の影響。様々な抗体及びオリゴマーＴａｕと接触させた、共培養物中のＭＡＰ２断片化パーセント。 ニューロン－ミクログリア共培養物中でのＴａｕ毒性に対するエフェクター機能の影響。様々な抗体及びオリゴマーＴａｕと接触させた、ニューロン（上部パネル）及びニューロン－ミクログリア共培養物（下部パネル）の画像。 抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａまたは抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２を投与したマウスの海馬内のｐＴａｕ２１２／２１４レベル。 ヒトＴａｕ配列とカニクイザルＴａｕ配列との比較。抗体３７Ｄ３－Ｈ９のエピトープを示す。 単回の１０ｍｇ／ｋｇの静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体９４Ｂ２－Ｃ１の薬物動態を示す。 単回の１０ｍｇ／ｋｇの静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体１２５Ｂ１１－Ｈ３の薬物動態を示す。 ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ３９、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ４０、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ４１のカッパ１軽鎖可変領域の整列を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける血漿抗体濃度（Ａ）を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおけるＣＳＦ抗体濃度（Ｂ）を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける血漿総Ｔａｕ濃度及び血漿抗体濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。 対数スケールでプロットした、５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。 直線スケールでプロットした、５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの海馬における抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの小脳における抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの前頭皮質における抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルのＣＳＦにおける抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの血漿における抗体の濃度を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける経時的な血漿総Ｔａｕ濃度の平均を示す。 ５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける経時的な個々の血漿総Ｔａｕ濃度を示す。 親和性成熟ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６抗体、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３抗体、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３抗体と、親ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４抗体との間の配列整列を示す。アミノ酸差異には、黒色で陰影を付けてある。 親和性成熟ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６抗体、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３抗体、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３抗体と、親ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４抗体との間の配列整列を示す。アミノ酸差異には、黒色で陰影を付けてある。 ヒトｔａｕモノマーのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６の親和性測定を示す。 カニクイザルｔａｕモノマーのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６の親和性測定を示す。
Ｉ．定義
本明細書の目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」は、以下に定義される、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、それと同じアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは、アミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態において、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。いくつかの実施形態において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークの配列は、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の合計の強度を指す。別途示されない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は一般に、解離定数（ＫＤ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載される方法を含む当該技術分野において既知である一般的な方法によって測定され得る。結合親和性を測定するための具体的な例証的かつ例示的実施形態が、以下に記載される。
「親和性成熟」抗体とは、改変を持たない親抗体と比較して、１つ以上の超可変領域（ＨＶＲ）内で１つ以上のそのような改変を有し、そのような改変によって抗体の抗原に対する親和性が改善される、抗体を指す。
「抗Ｔａｕ抗体」及び「Ｔａｕに結合する抗体」という用語は、抗体がＴａｕを標的とする際に診断剤及び／または治療剤として有用になるように十分な親和性でＴａｕに結合することができる抗体を指す。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体が非関連非Ｔａｕタンパク質に結合する程度は、例えば、放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される、抗体のＴａｕへの結合の約１０％未満である。特定の実施形態において、Ｔａｕに結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。特定の実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、異なる種由来のＴａｕ間で保存されるＴａｕのエピトープに結合する。本明細書で使用される場合、「抗Ｔａｕ抗体」及び「Ｔａｕに結合する抗体」という用語は、別段具体的に示されない限り、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、及び／またはリン酸化Ｔａｕに結合する抗体を指す。いくつかのそのような実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、互いに５０倍以下だけ異なる親和性などの同等の親和性で、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する抗体は、「ｐａｎ－Ｔａｕ抗体」と呼ばれる。
「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、それらが所望される抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むが、これらに限定されない、様々な抗体構造を包含する。
「抗体断片」とは、無傷抗体が結合する抗原に結合する、無傷抗体の一部分を含む無傷抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；線状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
基準抗体と「同じエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて、基準抗体がその抗原に結合するのを５０％以上遮断する抗体、及び逆に、競合アッセイにおいて、抗体がその抗原に結合するのを５０％以上遮断する基準抗体を指す。例示的な競合アッセイが本明細書に提供される。
「キメラ」抗体という用語は、重鎖及び／または軽鎖の一部分が特定の源または種に由来する一方で、重鎖及び／または軽鎖の残りの部分が異なる源または種に由来する抗体を指す。
抗体の「クラス」とは、その重鎖が持つ定常ドメインまたは定常領域の種類を指す。抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に更に分けることができる。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
本明細書で使用される場合、「細胞傷害性薬剤」という用語は、細胞機能を阻害もしくは阻止する、かつ／または細胞死もしくは破壊を引き起こす物質を指す。細胞傷害性薬剤としては、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体）；化学療法剤または化学療法薬（例えば、メトトレキサート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン、または他の挿入剤）；成長阻害剤；核酸分解酵素などの酵素及びそれらの断片；抗生物質；細菌、真菌、植物、または動物起源の小分子毒素または酵素活性毒素（それらの断片及び／または変異形を含む）などの毒素；ならびに以下に開示される様々な抗腫瘍剤または抗がん剤が挙げられるが、これらに限定されない。
「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより異なる抗体のＦｃ領域に起因する生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。
ある薬剤、例えば、ある薬学的製剤の「有効量」とは、必要な投薬量及び期間で、所望される治療的または予防的結果を達成するために有効な量を指す。
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、定常領域の少なくとも一部分を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するように使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異形Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端に及ぶ。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在する場合もあれば、しない場合もある。別段本明細書で指定されない限り、Ｆｃ領域内または定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１に記載されている、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。
「フレームワーク」または「ＦＲ」とは、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは一般に、４つのＦＲドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般に、ＶＨ（またはＶＬ）において以下の配列：ＦＲ１－Ｈ１（Ｌ１）－ＦＲ２－Ｈ２（Ｌ２）－ＦＲ３－Ｈ３（Ｌ３）－ＦＲ４で出現する。
「完全長抗体」、「無傷抗体」、及び「全抗体」という用語は、本明細書において、天然抗体構造と実質的に同様の構造を有するか、または本明細書に定義されるＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指すように互換的に使用される。
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、互換的に使用され、外因性核酸が中に導入されている細胞を指し、そのような細胞の子孫を含む。宿主細胞は、「形質転換体」及び「形質転換細胞」を含み、これらは、初代形質転換細胞及び継代の数に関わらずそれに由来する子孫を含む。子孫は、親細胞と核酸含有量の点で完全に同一ではないが、変異を含み得る。元来形質転換された細胞についてスクリーニングまたは選択されたものと同じ機能または生物学的活性を有する変異子孫が、本明細書に含まれる。
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞によって産生された抗体、またはヒト抗体レパートリーを利用する非ヒト源に由来する抗体のアミノ酸配列、あるいは他のヒト抗体コード配列に対応するアミノ酸配列を持つものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に関与する抗体の重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然抗体の重鎖及び軽鎖（それぞれ、ＶＨ及びＶＬ）の可変ドメインは一般に、各ドメインが４つの保存フレームワーク領域（ＦＲ）及び３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む同様の構造を有する。（例えば、Ｋｉｎｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｋｕｂｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，ｐａｇｅ９１（２００７）を参照されたい）。単一のＶＨドメインまたはＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体のＶＨドメインまたはＶＬドメインを使用して、その抗原に結合する抗体を単離して、それぞれ相補的ＶＬドメインまたはＶＨドメインのライブラリをスクリーニングすることができる。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：８８０－８８７（１９９３）、Ｃｌａｒｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４－６２８（１９９１）を参照されたい。
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループから行なわれる。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ９１－３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ ＭＤ（１９９１），ｖｏｌｓ．１－３にあるようなサブグループである。いくつかの実施形態において、ＶＬについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）にあるようなサブグループカッパＩである。いくつかの実施形態において、ＶＨについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）にあるようなサブグループＩＩＩである。
「ヒト化」抗体とは、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基及びヒトＦＲ由来のアミノ酸残基を含む、キメラ抗体を指す。特定の実施形態において、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、そのＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全てまたは実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は任意で、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。抗体、例えば、非ヒト抗体の「ヒト化形態」とは、ヒト化を受けた抗体を指す。
本明細書で使用される場合、「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列が超可変（「相補性決定領域」もしくは「ＣＤＲ」）であり、かつ／または構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成し、かつ／または抗原接触残基（「抗原接触体」）を含有する、抗体可変ドメインの領域の各々を指す。一般に、抗体は６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）にあり、３つがＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）にある。本明細書の例示的なＨＶＲとしては、
（ａ）アミノ酸残基２６～３２（Ｌ１）、５０～５２（Ｌ２）、９１～９６（Ｌ３）、２６～３２（Ｈ１）、５３～５５（Ｈ２）、及び９６～１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））、
（ｂ）アミノ酸残基２４～３４（Ｌ１）、５０～５６（Ｌ２）、８９～９７（Ｌ３）、３１～３５ｂ（Ｈ１）、５０～６５（Ｈ２）、及び９５～１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））、
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ～３６（Ｌ１）、４６～５５（Ｌ２）、８９～９６（Ｌ３）、３０～３５ｂ（Ｈ１）、４７～５８（Ｈ２）、及び９３～１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触体（ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６））、ならびに
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６～５６（Ｌ２）、４７～５６（Ｌ２）、４８～５６（Ｌ２）、４９～５６（Ｌ２）、２６～３５（Ｈ１）、２６～３５ｂ（Ｈ１）、４９～６５（Ｈ２）、９３～１０２（Ｈ３）、及び９４～１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／または（ｃ）の組み合わせが挙げられる。
別段示されない限り、可変ドメイン内のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、本明細書においてＫａｂａｔら（上記）に従って番号付けされる。
「免疫複合体」は、細胞傷害性薬剤を含むが、これに限定されない、１つ以上の異種性分子（複数可）に複合体化される抗体である。
「個体」または「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物としては、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、個体または対象は、ヒトである。
「単離」抗体は、その自然環境の構成成分から分離されているものである。いくつかの実施形態において、抗体は、例えば、電気泳動法（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）、またはクロマトグラフ法（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）によって決定される、９５％または９９％を超える純度まで精製される。抗体純度の評価のための方法の概説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ８４８：７９－８７（２００７）を参照されたい。
「単離」核酸とは、その自然環境の構成成分から分離されている核酸分子を指す。単離核酸は、通常は核酸分子を含有する細胞内に含有される核酸分子を含むが、その核酸分子が染色体外に、またはその天然染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。
「抗Ｔａｕ抗体をコードする単離核酸」とは、抗体重鎖及び軽鎖（またはそれらの断片）をコードする１つ以上の核酸分子を指し、単一のベクターまたは別個のベクター内のそのような核酸分子（複数可）を含み、そのような核酸分子（複数可）は、宿主細胞内の１つ以上の位置に存在する。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は同一である、かつ／または同じエピトープに結合するが、例えば、天然に存在する変異を含有するか、またはモノクローナル抗体調製物の産生中に生じる、想定される変異形抗体を除いて、そのような変異形は一般に少量で存在する。異なる決定基（エピトープ）に対して指向される異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向される。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体の特徴を示しており、いかなる特定の方法による抗体の産生も必要とするものとして解釈されるものではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組み換えＤＮＡ法、ファージ提示法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法を含むが、これらに限定されない、様々な技術によって作製することができ、モノクローナル抗体を作製するためのそのような方法及び他の例示的な方法が、本明細書に記載されている。
「裸の抗体」とは、異種性部分（例えば、細胞傷害性部分）または放射標識に複合体化されていない抗体を指す。裸の抗体は、薬学的製剤中に存在してもよい。
「天然抗体」は、様々な構造を有する、天然に存在する免役グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合されている２つの同一の軽鎖及び２つの同一の重鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端まで、各重鎖は、可変重ドメインまたは重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）と、その後に３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３）とを有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端まで、各軽鎖は、可変軽ドメインまたは軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）と、その後に定常軽（ＣＬ）ドメインとを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２種類のうちの１つに割り当てられ得る。
「添付文書」という用語は、そのような治療製品の適応症、使用法、投薬量、投与、併用療法、禁忌症についての情報、及び／またはその使用に関する警告を含有する、治療製品の商業的パッケージに通例含まれる指示書を指すように使用される。
基準ポリペプチド配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入して、最大の配列同一性パーセントを達成した後の、かつ配列同一性の一部としていかなる保存的置換も考慮しない、基準ポリペプチド配列内のアミノ酸残基と同一の候補配列内のアミノ酸残基のパーセンテージと定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定するための整列は、当該技術分野の技術範囲内の様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェア、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長にわたる最大整列を達成するのに必要な任意のアルゴリズムを含む、配列の整列に適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本明細書における目的のために、アミノ酸配列同一性％値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ－２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ－２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって記述され、ソースコードは、ユーザ文書とともに米国著作権局（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ．，２０５５９）に提出されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下に登録されている。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に入手可能であるか、またはソースコードからコンパイルすることができる。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ Ｖ４．０Ｄを含むＵＮＩＸオペレーティングシステムで使用するためには、コンパイルされるべきである。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ－２プログラムによって設定されており、変動しない。
ＡＬＩＧＮ－２がアミノ酸配列比較に用いられる状況において、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対する所与のアミノ酸配列Ａのアミノ酸配列同一性％（あるいは、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対するある特定のアミノ酸配列同一性％を有するか、または含む所与のアミノ酸配列Ａと表現され得る）は、以下のように計算される。
１００×分数Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、配列整列プログラムＡＬＩＧＮ－２によって、そのプログラムのＡとＢとの整列において完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢへのアミノ酸配列同一性％は、ＢのＡへのアミノ酸配列同一性％とは等しくならないことが理解されるだろう。別段具体的に述べられない限り、本明細書で使用される全てのアミノ酸配列同一性％値は、直前の段落に記載されるようにＡＬＩＧＮ－２コンピュータプログラムを使用して得られる。
「薬学的製剤」という用語は、調製物の中に含有される活性成分の生物学的活性が有効になるような形態であり、かつ製剤が投与される対象にとって許容できないほど有毒である追加の構成成分を何ら含有しない調製物を指す。
「薬学的に許容される担体」とは、対象にとって無毒である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体としては、緩衝液、賦形剤、安定剤、または保存剤が挙げられるが、これらに限定されない
本明細書で使用される場合、「Ｔａｕ」という用語は、別段示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む任意の脊椎動物源由来の任意の天然Ｔａｕタンパク質を指す。この用語は、「完全長」非プロセス型Ｔａｕ、及び細胞内のプロセシングから生じる任意の形態Ｔａｕを包含する。この用語はまた、Ｔａｕの天然に存在する変異形、例えば、スプライス変異形または対立遺伝子変異形も包含する。
本明細書で使用される場合、「ｐＴａｕ」という用語は、セリン、スレオニン、またはチロシン残基が、共有結合したリン酸基の添加によって、タンパク質キナーゼによりリン酸化される、Ｔａｕを指す。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン残基上またはスレオニン残基上でリン酸化される。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン４０９位及び／またはセリン４０４位上でリン酸化される。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン４０９位上でリン酸化される。
本明細書で使用される場合、「可溶性Ｔａｕ」または「可溶性Ｔａｕタンパク質」という用語は、完全に可溶化したＴａｕタンパク質／ペプチドモノマー、またはＴａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、またはＴａｕペプチド／タンパク質モノマーの他の誘導体と、Ｔａｕタンパク質オリゴマーとの両方からなるタンパク質を指す。「可溶性Ｔａｕ」は、神経原線維変化（ＮＦＴ）を具体的に除外する。
本明細書で使用される場合、「不溶性Ｔａｕ」という用語は、Ｔａｕペプチドもしくはタンパク質、またはＴａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、または水性培地中インビトロ及び哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には、脳内）インビボの両方において不溶性であるオリゴマーもしくはポリマー構造を形成するＴａｕペプチド／タンパク質の他の誘導体の、複数の凝集したモノマーを指すが、特に、それぞれ、哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には、脳内）で不溶性である、Ｔａｕまたは修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、あるいはそれらの誘導体の、複数の凝集したモノマーを指す。「不溶性Ｔａｕ」は特に、神経原線維変化（ＮＦＴ）を含む。
本明細書で使用される場合、「モノマーＴａｕ」または「Ｔａｕモノマー」という用語は、水性培地中に凝集した複合体を有しない、完全に可溶化したＴａｕタンパク質を指す。
本明細書で使用される場合、「凝集したＴａｕ」、「オリゴマーＴａｕ」、及び「Ｔａｕオリゴマー」という用語は、Ｔａｕペプチドもしくはタンパク質、またはＴａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、または水性培地中インビトロ及び哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には、脳内）インビボの両方において不溶性もしくは可溶性であるオリゴマーもしくはポリマー構造を形成するＴａｕペプチド／タンパク質の他の誘導体の、複数の凝集したモノマーを指すが、特に、それぞれ、哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には、脳内）で不溶性もしくは可溶性である、Ｔａｕまたは修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、あるいはそれらの誘導体の、複数の凝集したモノマーを指す。
「ｐＴａｕ ＰＨＦ」、「ＰＨＦ」、及び「対らせん状細線維」という用語は、本明細書で同義に使用され、電子顕微鏡上で可視である１６０ｎｍの周期性でらせん状に巻きつけられた線維の対を指す。幅は、１０～２２ｎｍで変動する。ＰＨＦは、アルツハイマー病（ＡＤ）の神経原線維変化及び神経絨毛糸における主要構造である。ＰＨＦはまた、老人斑に関連する変性神経突起の全てではないがいくつかにも見られることがある。ＰＨＦの主要構成成分は、高リン酸化形態の微小管関連タンパク質ｔａｕである。ＰＨＦは一部には、ジスルフィド結合された逆平行高リン酸化Ｔａｕタンパク質から構成され得る。ＰＨＦ Ｔａｕは、そのＣ末端の２０個のアミノ酸残基が切断され得る。ＰＨＦ形成の根底にある機序は不明であるが、Ｔａｕの高リン酸化は、それを微小管から開放し、ニューロン内でＰＨＦが形成され得るＴａｕの可溶性プールを増加させ得る。
本明細書で使用される場合、「治療」（及び「治療する」または「治療すること」などのその文法上の変化形）とは、治療されている個体の自然経過を改変することを目的とした臨床介入を指し、予防のために、または臨床病理過程中に実行され得る。治療の望ましい効果としては、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的病理学的帰結の縮小、転移の予防、疾患進行速度の減少、病状の回復または寛解、及び緩解または予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して、疾患の発症を遅延させるか、または疾患の進行を減速させる。
本明細書で使用される場合、「初期アルツハイマー病」または「初期ＡＤ」という用語（例えば、「初期ＡＤを有すると診断された患者」または「初期ＡＤを患う患者」）は、記憶欠損などのＡＤによる軽度の認知障害を有する患者、及びＡＤバイオマーカーを有する患者、例えば、アミロイド陽性患者を含む。
本明細書で使用される場合、「軽度のアルツハイマー病」または「軽度のＡＤ」という用語（例えば、「軽度のＡＤを有すると診断された患者」）は、２０～２６のＭＭＳＥスコアを特徴とするＡＤの段階を指す。
本明細書で使用される場合、「軽度～中程度のアルツハイマー病」または「軽度～中程度のＡＤ」という用語（例えば、「軽度のＡＤを有すると診断された患者」）は、軽度及び中程度の両方のＡＤを包含し、１８～２６のＭＭＳＥスコアを特徴とする。
本明細書で使用される場合、「中程度のアルツハイマー病」または「中程度のＡＤ」という用語（例えば、「中程度のＡＤを有すると診断された患者」）は、１８～１９のＭＭＳＥスコアを特徴とするＡＤの段階を指す。
「ＭＭＳＥ」という用語は、１～３０のスコアを提供する簡易知能評価スケールを指す。Ｆｏｌｓｔｅｉｎ，ｅｔ ａｌ．，１９７５，Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｒｅｓ．１２：１８９－９８を参照されたい。２６以下のスコアは一般に、欠損を示すと見なされる。ＭＭＳＥ上の数的スコアがより低ければ低いほど、より低いスコアを有する別の個体に対する試験患者の欠損または障害はより大きい。ＭＭＳＥスコアの増加は患者の病態の改善を示し得る一方で、ＭＭＳＥスコアの減少は患者の病態の悪化を意味し得る。
本明細書で使用される場合、「ベクター」という用語は、それが結合している別の核酸を増殖させることができる核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、及びそれが導入されている宿主細胞のゲノム内に組み込まれたベクターを含む。特定のベクターは、それらが作動可能に結合している核酸の発現を指向することができる。そのようなベクターは、本明細書で「発現ベクター」と呼ばれる。
ＩＩ．組成物及び方法
Ｔａｕに結合する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒトモノマーＴａｕに１ｎＭ未満または０．５ｎＭ未満のＫＤで結合する。いくつかの実施形態において、本明細書に提供される抗体は、カニクイザルＴａｕに１ｎＭ未満または０．５ｎＭ未満のＫＤで結合する。いくつかの実施形態において、ＫＤは、３７℃で表面プラズモン共鳴によって決定される。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕに結合するは、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕアミノ酸２～２４内のエピトープに結合し、かつモノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープ、及び配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。
いくつかの実施形態において、本明細書に提供される抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合し、かつモノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。
本発明の抗体は、例えば、神経変性疾患の診断または治療に有用である。
Ａ．例示的な抗Ｔａｕ抗体
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
上記の実施形態のいずれにおいても、抗Ｔａｕ抗体は、ヒト化されている。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、上記の実施形態のいずれかにあるようなＨＶＲを含み、かつアクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークを更に含む。
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号３４０、６０３、６１４、または６１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、基準配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに結合する能力を保持する。特定の実施形態において、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号３４０、６０３、６１４、または６１９内で置換、挿入、及び／または欠失されている。特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域内で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意で、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号３４０、６０３、６１４、または６１９内のＶＨ配列（その配列の翻訳後修飾を含む）を含む。特定の一実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号３４１、６０４、６１５、または６２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。特定の実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、基準配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに結合する能力を保持する。特定の実施形態において、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号３４１、６０４、６１５、または６２０内で置換、挿入、及び／または欠失されている。特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域内で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意で、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号３４１、６０４、６１５、または６２０内のＶＬ配列（その配列の翻訳後修飾を含む）を含む。特定の一実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、
ａ）配列番号６０３と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、
ａ）配列番号６０３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１または配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１または配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１１のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６または６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６または配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１６のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１または配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１または配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２１のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、単離抗体が提供される。
更なる一態様において、本発明は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の実施形態において、３７Ｄ３－Ｈ９、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３から選択される抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸２～２４からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２４からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２０からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸１０～２４からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２１からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸８～２２からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸１１～２５からなるＴａｕ断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、以下のＴａｕ断片：２～２４、７～２４、７～２０、１０～２４、７～２１、８～２２、及び１１～２５のうちの１つ以上または全てに結合する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、配列番号５９３の配列を有するペプチドには結合するが、配列番号５９６または配列番号５９７の配列を有するペプチドには結合しない抗体が提供される。
本発明の更なる一態様において、上記の実施形態のいずれかに従う抗Ｔａｕ抗体は、キメラ、ヒト化またはヒト抗体を含む、モノクローナル抗体である。一実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、またはＦ（ａｂ’）２断片である。別の実施形態において、抗体は、完全長抗体、例えば、無傷ＩｇＧ１もしくはＩｇＧ４抗体、または本明細書において定義される他の抗体クラスもしくはアイソタイプである。
更なる一態様において、上記の実施形態のいずれかに従う抗Ｔａｕ抗体は、以下の節１～７に記載される特徴のいずれかを、単独または組み合わせで組み込み得る。
１．抗体親和性
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
いくつかの実施形態において、ＫＤは、放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。いくつかの実施形態において、ＲＩＡは、目的とされる抗体のＦａｂバージョン及びその抗原で実行される。例えば、Ｆａｂの抗原に対する溶液結合親和性は、非標識抗原の一連の滴定の存在下で、Ｆａｂを最小濃度の（１２５Ｉ）標識抗原と平衡化し、その後、抗Ｆａｂ抗体でコーティングされたプレートで結合した抗原を捕捉することによって、測定される（例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５－８８１（１９９９）を参照されたい）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、その後、室温（約２３℃）でＰＢＳ中２重量体積％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンで２～５時間遮断する。非吸着性プレート（Ｎｕｎｃ番号２６９６２０）において、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［１２５Ｉ］－抗原を、目的とされるＦａｂの段階希釈液と混合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３－４５９９（１９９７）における抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ－１２の評価と一貫する）。その後、目的とされるＦａｂを一晩インキュベートするが、インキュベーションをより長い期間（例えば、約６５時間）続けて、平衡への到達を確実にすることができる。その後、室温でのインキュベーション（例えば、１時間）のために混合物を捕捉プレートに移す。その後、溶液を除去し、プレートをＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ－２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ－２０（商標）、Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマ計数器（Ｐａｃｋａｒｄ）で１０分間計数する。２０％以下の最大結合をもたらす各Ｆａｂの濃度を、競合結合アッセイに使用するために選択する。
別の実施形態に従うと、ＫＤは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）－２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）－３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用するアッセイを、約１０の共鳴単位（ＲＵ）で、固定化抗原ＣＭ５チップで２５℃または３７℃で実行する。いくつかの実施形態において、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）を、供給業者の指示書に従って、Ｎ－エチル－Ｎ’－（３－ジメチルアミノプロピル）－カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）で活性化する。抗原を、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍＬ（約０．２μＭ）になるまで希釈した後に、５μＬ／分の流量で注入して、約１０共鳴単位（ＲＵ）のカップリングしたタンパク質を得る。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して、未反応基を遮断する。動態測定のために、Ｆａｂの２倍段階希釈液（０．７８ｎＭ～５００ｎＭ）を、２５℃の０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ－２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳ中約２５μＬ／分の流量で注入する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を、単純な１対１のラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン３．２）を使用して、会合センサグラムと解離センサグラムとを同時にフィットさせることによって計算する。平衡解離定数（ＫＤ）を、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比率として計算する。例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５－８８１（１９９９）を参照されたい。上記の表面プラズモン共鳴アッセイによるオン速度が１０６Ｍ－１ｓ－１を超える場合、オン速度は、ストップトフローを備えた分光光度計（Ａｖｉｖ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを有する８０００シリーズＳＬＭ－ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定される、増加する抗原濃度の存在下で、２５℃で、ＰＢＳ中２０ｎＭの抗－抗原抗体（Ｆａｂ形態）（ｐＨ７．２）の蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍの帯域通過）の増加または減少を測定する蛍光消光技術を使用することによって決定することができる。
２．抗体断片
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに以下に記載される他の断片が挙げられるが、これらに限定されない。特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）を参照されたい。ｓｃＦｖ断片の概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたく、また、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、かつ増加したインビボ半減期を有するＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４－６４４８（１９９３）を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディもまた、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）に記載されている。
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分、または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部分を含む、抗体断片である。特定の実施形態において、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ、例えば、米国特許第６，２４８，５１６Ｂ１号を参照されたい）。
抗体断片は、本明細書に記載されるように、無傷抗体のタンパク質消化及び組み換え宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ）による産生を含むが、これらに限定されない、様々な技術によって作製することができる。
３．キメラ抗体及びヒト化抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、キメラ抗体である。特定のキメラ抗体が、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４））に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類（サルなど）に由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる一例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のクラスまたはサブクラスから変化した「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、それらの抗原結合断片を含む。
特定の実施形態において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を低減させながら、親非ヒト抗体の特異性及び親和性は保持するようにヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、１つ以上の可変ドメインを含み、そのＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはそれらの部分）は非ヒト抗体に由来し、そのＦＲ（またはそれらの部分）はヒト抗体配列に由来する。任意で、ヒト化抗体はまた、ヒト定常領域の少なくとも一部分も含むであろう。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体内のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元または改善するように、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
ヒト化抗体及びそれらの作製方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）で概説されており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３－３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：１００２９－１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：２５－３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）移植を記載）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９－４９８（１９９１）（「リサーフェイシング」を記載）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：４３－６０（２００５）（「ＦＲシャフリング」を記載）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：６１－６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２－２６０（２０００）（ＦＲシャフリングへの「誘導選択」アプローチを記載）に更に記載されている。
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては、「ベストフィット」法を使用して選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）及びＰｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）、ヒト成熟（体細胞変異した）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞株フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照されたい）、ならびにＦＲライブラリのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１－２２６１８（１９９６）を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。
４．ヒト抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において既知である様々な技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は一般に、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０－４５９（２００８）に記載されている。
ヒト抗体は、抗原投与に応答して、無傷ヒト抗体またはヒト可変領域を有する無傷抗体を産生するように修飾されているトランスジェニック動物に免疫原を投与することによって調製することができる。そのような動物は典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換するか、または染色体外に存在するか、もしくは動物の染色体内にランダムに統合されるヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部分を含有する。そのようなトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７－１１２５（２００５）を参照されたい。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号、ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ－Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、ならびにＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）を記載する米国特許出願公開第ＵＳ２００７／００６１９００号を参照されたい。そのような動物によって生成された無傷抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって更に修飾され得る。
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマに基づく方法によって作製することもできる。ヒトモノクローナル抗体を産生するためのヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が、記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１－６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されるヒト抗体もまた、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）に記載されている。追加の方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載）及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５－２６８（２００６）（ヒト－ヒトハイブリドーマを記載）に記載されるものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）もまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７－９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５－９１（２００５）に記載されている。
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージ提示ライブラリから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって生成することもできる。その後、そのような可変ドメイン配列は、所望されるヒト定常ドメインと組み合わされ得る。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技術が、以下に記載される。
５．ライブラリ由来抗体
本発明の抗体は、所望される活性（複数可）を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることによって単離することができる。例えば、ファージ提示ライブラリを生成し、所望される結合特性を持つ抗体についてそのようなライブラリをスクリーニングするための様々な方法が、当該技術分野において既知である。そのような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ１７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）に概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２－５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）に更に記載されている。
特定のファージ提示法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別個にクローニングされ、ファージライブラリ内でランダムに組み換えられ、それはその後、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３－４５５（１９９４）に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは典型的には、抗体断片を一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして提示する。免疫化源由来のライブラリは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく、免疫原に高親和性抗体を提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５－７３４（１９９３）によって記載されるように、ナイーブレパートリーは、（例えば、ヒトから）クローニングされて、いかなる免疫化もなく、幅広い非自己抗原及びまた自己抗原に対する抗体の単一源を提供することができる。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）によって記載されるように、ナイーブライブラリはまた、幹細胞から再配列されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、かつインビトロで再配列を達成することによって、合成的に作製することもできる。ヒト抗体ファージライブラリを記載している特許公開としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書においてヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
６．多重特異性抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方はアミロイドベータに対するものである。特定の実施形態において、二重特異性抗体は、Ｔａｕの２つの異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体はまた、Ｔａｕを発現する細胞に細胞傷害性薬剤を局所化させるために使用することができる。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製され得る。
多重特異性抗体を作製するための技術としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖対の組み換え同時発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ３０５：５３７（１９８３））、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５（１９９１）を参照されたい）、ならびに「ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂ－ｉｎ－ｈｏｌｅ）」操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、静電的ステアリング効果を操作して抗体Ｆｃ－ヘテロ二量体分子を作製すること（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）、２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、及びＢｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体を産生すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７－１５５３（１９９２）を参照されたい）、「ダイアボディ」技術を使用して二重特異性抗体断片を作製すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４－６４４８（１９９３）を参照されたい）、ならびに一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい）、ならびに例えば、Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載される三重特異性抗体を調製することによっても作製することができる。
「オクトパス抗体」を含む、３つ以上の機能抗原結合部位を有する操作された抗体もまた、本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照されたい）。
本明細書における抗体または断片はまた、Ｔａｕ及び別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む、「二重作用（Ｄｕａｌ Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」も含む（例えば、ＵＳ２００８／００６９８２０を参照されたい）。
７．抗体変異形
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体のアミノ酸配列変異形が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することが望ましくあり得る。抗体のアミノ酸配列変異形は、抗体をコードするヌクレオチド配列内に適切な修飾を導入することによって、またはペプチド合成によって調製することができる。そのような修飾としては、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそこへの挿入、及び／またはその置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを行って、最終構築物に到達することができるが、但し、最終構築物が所望される特性、例えば、抗原結合を持つことを条件とする。
ａ）置換、挿入、及び欠失変異形
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異形が提供される。置換型変異誘発の目的とされる部位としては、ＨＶＲ及びＦＲが挙げられる。保存的置換は、表１において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、アミノ酸側鎖クラスに関連して以下に更に記載される通りである。アミノ酸置換が目的とされる抗体に導入され、産生物が所望される活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善についてスクリーニングされ得る。
表１
Figure 2023051929000001
アミノ酸は、一般的な側鎖特性に従ってグループ化され得る。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーと別のクラスのメンバーとの交換を伴う。
ある種類の置換型変異形は、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上の超可変領域残基を置換することを伴う。一般に、更なる研究のために選択される結果として生じる変異形（複数可）は、親抗体と比較した特定の生物学的特性（例えば、親和性の増加、免疫原性の低減）の修飾（例えば、改善）を有し、かつ／または実質的に保持された親抗体の特定の生物学的特性を有する。例示的な置換型変異形は、例えば、本明細書に記載されるものなどのファージ提示に基づく親和性成熟技術を使用して好都合に生成され得る、親和性成熟抗体である。簡潔には、１つ以上のＨＶＲ残基が変異し、変異形抗体がファージ上に提示され、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
ＨＶＲ内に改変（例えば、置換）を行って、例えば、抗体親和性を改善することができる。そのような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照されたい）、及び／または抗原に接触する残基に行われてもよく、結果として生じる変異形ＶＨまたはＶＬが、結合親和性について試験される。二次ライブラリを構築し、そこから再選択することによる親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ１７８：１－３７に記載されている（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））。親和性成熟のいくつかの実施形態において、多様性が、様々な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャフリング、またはオリゴヌクレオチド指向変異誘発）のいずれかによって、成熟させるために選択された可変遺伝子に導入される。その後、二次ライブラリが作製される。その後、このライブラリがスクリーニングされて、所望される親和性を有する任意の抗体変異形が特定される。多様性を導入するための別の方法は、数個のＨＶＲ残基（例えば、一度に４～６個の残基）がランダム化されるＨＶＲ指向アプローチを伴う。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発またはモデル化を使用して、特異的に特定され得る。特に、ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３が標的とされることが多い。
特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、そのような改変によって抗体が抗原に結合する能力が実質的に低減されない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じ得る。例えば、結合親和性を実質的に低減させない保存的改変（例えば、本明細書に提供される保存的置換）がＨＶＲで行われ得る。そのような変化は、例えば、ＨＶＲ内の抗原接触残基の外側であってもよい。上記に提供される変異形ＶＨ配列及びＶＬ配列の特定の実施形態において、各ＨＶＲは、改変されないか、または１つ以下、２つ以下、もしくは３つ以下のアミノ酸置換を含有するかのいずれかである。
変異誘発のために標的とされ得る抗体の残基または領域の特定に有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５によって記載される「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。この方法において、残基または標的残基群（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕなどの荷電残基）が特定され、中性または負荷電アミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置換されて、抗体と抗原との相互作用に影響が及ぼされたかが決定される。更なる置換が、最初の置換に対する機能感受性を示すアミノ酸位置に導入され得る。あるいは、または加えて、抗体と抗原との間の接触点を特定するための抗原－抗体複合体の結晶構造。そのような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的とされ得るか、または排除され得る。変異形がスクリーニングされて、それらが所望される特性を含有するかが決定され得る。
アミノ酸配列挿入は、長さが１残基から１００以上の残基の範囲を含有するポリペプチドの範囲であるアミノ末端及び／またはカルボキシル末端の融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入変異形としては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴのための）またはポリペプチドへの抗体のＮ末端もしくはＣ末端の融合が挙げられ、これは抗体の血清半減期を増加させる。
ｂ）グリコシル化変異形
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作製または除去されるようにアミノ酸配列を改変することによって好都合に達成され得る。
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が改変され得る。哺乳動物細胞によって産生される天然抗体は典型的には、一般にＮ結合によってＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に結合される分岐状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ１５：２６－３２（１９９７）を参照されたい。オリゴ糖としては、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースを挙げることができる。いくつかの実施形態において、特定の特性が改善された抗体変異形を作製するために、本発明の抗体内のオリゴ糖の修飾が行われ得る。
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域に（直接的または間接的に）結合されたフコースを欠く炭水化物構造を有する抗体変異形が提供される。例えば、そのような抗体内のフコースの量は、１％～８０％、１％～６５％、５％～６５％または２０％～４０％であり得る。フコースの量は、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析法によって測定される、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッド、及び高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７での糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域内の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７はまた、抗体内のわずかな配列変異のため、２９７位から約±３アミノ酸上流または下流に、すなわち、２９４位と３００位との間に位置し得る。そのようなフコシル化変異形は、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）、同第ＵＳ２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照されたい。「脱フコース化」または「フコース欠損」抗体変異形に関する公開の例としては、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Ｏｋａｚａｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９－１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ ｅｔ ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３－５４５（１９８６）、米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８Ａ１号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ）、及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１（Ａｄａｍｓら、特に実施例１１））、ならびにアルファ－１，６－フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（例えば、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０－６８８（２００６）、及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照されたい）が挙げられる。
例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分される、二分されたオリゴ糖を有する抗体変異形が更に提供される。そのような抗体変異形は、フコシル化の低減及び／またはＡＤＣＣ機能の改善を有し得る。そのような抗体変異体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ－Ｍａｉｒｅｔら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、及びＵＳ２００５／０１２３５４６号（Ｕｍａｎａら）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体変異形もまた、提供される。そのような抗体変異形は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。そのような抗体変異体は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌら）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載されている。
ｃ）Ｆｃ領域変異形
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入され、それにより、Ｆｃ領域変異形が生成され得る。Ｆｃ領域変異形は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含み得る。
特定の実施形態において、本発明は、全てではないがいくつかのエフェクター機能を持つことにより、インビボでの抗体の半減期が重要であるが、特定のエフェクター機能（補体及びＡＤＣＣなど）が不要または有害である用途に望ましい候補となる抗体変異形を企図する。インビトロ及び／またはインビボ細胞傷害性アッセイを行って、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを行って、抗体がＦｃγＲ結合を欠く（故にＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確実にすることができる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞がＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－４９２（１９９１）の４６４頁の表３に要約されている。目的とされる分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：７０５９－７０６３（１９８６）を参照されたい）及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：１４９９－１５０２（１９８５）、同第５，８２１，３３７号（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１－１３６１（１９８７）を参照されたい）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ方法が用いられてもよい（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ、及びＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照されたい）。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、または加えて、目的とされる分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６５２－６５６（１９９８）に開示されるものなどの動物モデルにおいて評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、抗体がＣ１ｑに結合することができず、故にＣＤＣ活性を欠くことを確認することもできる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイが実行されてもよい（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０１：１０４５－１０５２（２００３）、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ１０３：２７３８－２７４３（２００４）を参照されたい）。ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期決定もまた、当該技術分野において既知である方法を使用して実行することができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９－１７６９（２００６）を参照されたい）。
エフェクター機能が低減している抗体は、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９のうちの１つ以上の置換を有するものを含む（米国特許第６，７３７，０５６号）。そのようなＦｃ変異体は、アラニンへの残基２６５及び２９７の置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸２６５位、２６９位、２７０位、２９７位及び３２７位のうちの２つ以上において置換を有するＦｃ変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号）。
ＦｃＲへの結合が改善または縮小された特定の抗体変異形が記載されている。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照されたい）。
特定の実施形態において、抗体変異形は、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、及び／または３３４位（残基のＥＵ番号付け）での置換を有するＦｃ領域を含む。
いくつかの実施形態において、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８－４１８４（２０００）に記載されるように、改変は、改変した（すなわち、改善または縮小した）Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存症細胞傷害性（ＣＤＣ）をもたらすＦｃ領域内で行われる。
母体ＩｇＧの胎児への移入に関与する、半減期が増加し、かつ新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善された抗体（Ｇｕｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））が、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載されている。それらの抗体は、ＦｃＲｎに対するＦｃ領域の結合を改善する１つ以上の置換を有するＦｃ領域をそこに含む。そのようなＦｃ変異形は、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、４２８、または４３４のうちの１つ以上における置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものを含む（米国特許第７，３７１，８２６号）。
Ｆｃ領域変異形の他の例に関して、Ｄｕｎｃａｎ＆Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ３２２：７３８－４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及びＷＯ９４／２９３５１も参照されたい。
ｄ）システイン操作された抗体変異形
特定の実施形態において、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン操作された抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ」を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、残基の置換は、抗体の接触可能部位において生じる。それらの残基をシステインで置換することによって、反応性チオール基が抗体の接触可能部位に位置付けられ、それを使用して、薬物部分またはリンカー－薬物部分などの他の部分に抗体を複合体化して、本明細書で更に記載される免疫複合体を作製することができる。特定の実施形態において、以下の残基のいずれか１つ以上が、システインで置換され得る：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）、及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システイン操作された抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されるように生成され得る。
ｅ）抗体誘導体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、当該技術分野において既知であり、かつ容易に入手可能な、追加の非タンパク質性部分を含有するように更に修飾され得る。抗体の誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーを含むが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐状または非分岐状であり得る。抗体に結合したポリマーの数は異なり得、２つ以上のポリマーが結合している場合、それらは同じ分子または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、改善される抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が定義される条件下で療法において使用されるかなどを含むが、これらに限定されない、考慮事項に基づいて決定することができる。
別の実施形態において、放射線への曝露によって選択的に加熱され得る、抗体と非タンパク質性部分との複合体が提供される。いくつかの実施形態において、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０２：１１６００－１１６０５（２００５））。放射線は、任意の波長のものであってもよく、通常の細胞を傷つけないが、非タンパク質性部分を、抗体－非タンパク質性部分に近位の細胞を死滅させる温度まで加熱する波長を含むが、これらに限定されない。
Ｂ．組み換え方法及び組成物
抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載される組み換え方法及び組成物を使用して産生され得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体をコードする単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／または抗体のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／または重鎖）をコードし得る。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。そのような一実施形態において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１のベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２のベクターを含む（例えば、それらで形質転換されている）。いくつかの実施形態において、宿主細胞は、真核生物のもの、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体の作製方法であって、上記に提供される抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、その抗体の発現に好適な条件下で培養することと、任意で、抗体を宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収することとを含む、方法が提供される。
抗Ｔａｕ抗体の組み換え産生のために、例えば、上記のものなどの、抗体をコードする核酸が単離され、宿主細胞内での更なるクローニング及び／または発現のために、１つ以上のベクター中に挿入される。そのような核酸は、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、配列決定され得る。
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞は、本明細書に記載される原核細胞または真核細胞を含む。例えば、抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合に、細菌中で産生され得る。細菌中での抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、同第５，７８９，１９９号、及び同第５，８４０，５２３号を参照されたい。（Ｅ．ｃｏｌｉ中での抗体断片の発現を記載する、Ｃｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４もまた参照されたい）。発現後、抗体は、可溶性画分中で細菌細胞ペーストから単離されてもよく、更に精製されてもよい。
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物は、抗体をコードするベクターに好適なクローニングまたは発現宿主であり、これらには、グリコシル化経路が「ヒト化」されており、部分的または完全なヒトグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす、真菌及び酵母株が含まれる。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９－１４１４（２００４）、及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０－２１５（２００６）を参照されたい。
グリコシル化抗体の発現に好適な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。昆虫細胞と併せて、特にＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために使用され得る、多数のバキュロウイルス株が特定されている。
植物細胞培養物もまた、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、同第６，０４０，４９８号、同第６，４２０，５４８号、同第７，１２５，９７８号、及び同第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載）を参照されたい。
脊椎動物細胞もまた、宿主として使用することができる。例えば、懸濁液中で成長するように適合される哺乳動物細胞株が、有用である場合がある。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ－７）によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株、ヒト胚性腎臓株（例えば、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載される２９３または２９３細胞）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）、マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０）に記載されるＴＭ４細胞）、サル腎臓細胞（ＣＶ１）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）、ヒト子宮頚部癌細胞（ＨＥＬＡ）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ３Ａ）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）、マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）、例えば、Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２）に記載されるＴＲＩ細胞、ＭＲＣ５細胞、及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４２１６（１９８０））ならびにＹ０、ＮＳ０、及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株が挙げられる。抗体産生に好適な特定の哺乳動物宿主細胞株の概説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ ａｎｄ Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５－２６８（２００３）を参照されたい。
Ｃ．アッセイ
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体は、それらの物理的／化学的特性及び／または生物学的活性について、当該技術分野において既知である様々なアッセイによって、特定、スクリーニング、または特性評価することができる。
１．結合アッセイ及び他のアッセイ
一態様において、本発明の抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロットなどの既知の方法によってその抗原結合活性について試験される。
別の態様において、競合アッセイを使用して、Ｔａｕへの結合について本明細書に記載される抗体と競合する抗体を特定することができる。特定の実施形態において、そのような競合抗体は、３７Ｄ３－Ｈ９、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、またはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３によって結合される、同じエピトープ（例えば、線状または立体構造エピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）“Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に提供される。
例示的な競合アッセイにおいて、固定化されたＴａｕ（モノマーＴａｕなど）は、Ｔａｕに結合する第１の標識された抗体（例えば、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４などの本明細書に記載される任意の抗体）と、第１の抗体とＴａｕへの結合について競合するその能力について試験される第２の非標識抗体とを含む溶液中で、インキュベートされる。第２の抗体は、ハイブリドーマ上清中に存在してもよい。対照として、固定化されたＴａｕを、第１の標識された抗体を含むが第２の非標識抗体を含まない溶液中でインキュベートする。Ｔａｕに対する第１の抗体の結合を許容する条件下でインキュベートした後、過剰な未結合抗体を除去し、固定化されたＴａｕに関連する標識の量を測定する。固定化されたＴａｕに関連する標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に低減される場合、それは、第２の抗体がＴａｕへの結合について第１の抗体と競合していることを示す。Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）を参照されたい。
２．活性アッセイ
一態様において、生物学的活性を有するその抗Ｔａｕ（例えば、ｐａｎ－Ｔａｕ）抗体を特定するためのアッセイが提供される。生物学的活性としては、例えば、複数の形態のＴａｕ（例えば、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕ）に対するそのような抗体の結合、ならびにＴａｕタンパク質（例えば、脳内、例えば、脳皮質及び／または海馬内の、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減を挙げることができる。インビボ及び／またはインビトロでそのような生物学的活性を有する抗体もまた、提供される。
特定の実施形態において、本発明の抗体は、そのような生物学的活性について試験される。例えば、Ｔａｕトランスジェニックマウス（例えば、Ｐ３０１Ｌ）などのタウオパチーの動物モデルを使用して、脳切片に対する、例えば、トランスジェニックマウスの脳内の神経原線維変化に対する、抗Ｔａｕ抗体の結合を検出することができる。更に、Ｔａｕトランスジェニックマウス（例えば、Ｐ３０１Ｌ）などのタウオパチーの動物モデルを抗Ｔａｕ抗体で治療することができ、当該技術分野において既知である実験的技術を使用して、そのような治療が、マウス脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内の）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルを低減させるかを評価することができる。
Ｄ．免疫複合体
本発明はまた、１つ以上の他の治療剤または放射性同位体に複合体化される本明細書の抗Ｔａｕ抗体を含む免疫複合体も提供する。
別の実施形態において、免疫複合体は、放射性原子に複合体化されて放射性複合体を形成する、本明細書に記載される抗体を含む。様々な放射性同位体が、放射性複合体の産生のために利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体が挙げられる。放射性複合体が検出に使用される場合、それは、シンチグラフィー研究のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍもしくはＩ１２３、または再びヨード－１２３、ヨード－１３１、インジウム－１１１、フッ素－１９、炭素－１３、窒素－１５、酸素－１７、ガドリニウム、マンガン、もしくは鉄などの核磁気共鳴（ＮＭＲ）撮像法（磁気共鳴撮像法、ｍｒｉとしても知られる）のためのスピン標識を含み得る。
抗体の複合体は、Ｎ－サクシニミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオン酸塩（ＳＰＤＰ）、サクシニミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボン酸塩（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（アジプイミド酸ジメチルＨＣｌなど）、活性エステル（スベリン酸ジサクシニミジルなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビス－アジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネートなど）、及びビス－活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼンなど）などの様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製することができる。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製することができる。炭素－１４で標識された１－イソチオシアナトベンジル－３－メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体に複合体化するための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。リンカーは、細胞内での細胞傷害性薬物の放出を容易にする「切断可能リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５２：１２７－１３１（１９９２）、米国特許第５，２０８，０２０号）が使用されてもよい。
本明細書の免疫複合体またはＡＤＣは、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ－ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ－ＥＭＣＳ、スルホ－ＧＭＢＳ、スルホ－ＫＭＵＳ、スルホ－ＭＢＳ、スルホ－ＳＩＡＢ、スルホ－ＳＭＣＣ、及びスルホ－ＳＭＰＢ、ならびに（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）市販されているＳＶＳＢ（サクシニミジル－（４－ビニルスルホン）安息香酸塩）を含むが、これらに限定されない架橋剤試薬で調製されるそのような複合体を明示的に企図するが、これらに限定されない。
Ｅ．診断及び検出のための方法及び組成物
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれも、生体試料中のＴａｕの存在の検出に有用である。本明細書で使用される場合、「検出すること」という用語は、定量的または定性的検出を包含する。特定の実施形態において、生体試料は、脳脊髄液、脳細胞もしくは脳組織（例えば、脳皮質もしくは海馬）、または血液などの細胞または組織を含む。いくつかの実施形態において、生体試料は、脳脊髄液である。
いくつかの実施形態において、診断または検出方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。更なる一態様において、生体試料中のＴａｕの存在の検出方法が提供される。特定の実施形態において、本方法は、Ｔａｕに対する抗Ｔａｕ抗体の結合を許容する条件下で、生体試料を本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体と接触させることと、複合体が抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間で形成されるかを検出することとを含む。そのような方法は、インビトロ方法またはインビボ方法であり得る。更に、試験生体試料中で抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間に形成される複合体は、対照生体試料（例えば、健康な対象（複数可）由来の生体試料）中で形成される複合体と比較され得る。試験生体試料中で抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間に形成される複合体の量はまた、定量化され、対照生体試料（例えば、健康な対象（複数可）由来の生体試料）中で形成される複合体の量、または健康な対象において形成されることが知られる複合体の平均量と比較され得る。
いくつかの実施形態において、例えば、Ｔａｕが患者の選択のためのバイオマーカーである場合、抗Ｔａｕ抗体を使用して、抗Ｔａｕ抗体での療法に適格な対象を選択する。例えば、いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ（例えば、ｐａｎ－Ｔａｕ）抗体を使用して、対象がＴａｕタンパク質疾患もしくは障害を有するか、または対象がＴａｕタンパク質疾患もしくは障害の高いリスクにある（素因がある）かを検出する。
本発明の抗体を使用して診断され得る例示的な疾患または障害としては、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害、及び神経原線維変化または神経絨毛糸によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害が挙げられる。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して診断され得る疾患または障害としては、推理力、状況判断力、記憶容量、学習、及び／または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕタンパク質関連疾患または障害が挙げられる。特に、本発明の抗体を使用して診断され得る疾患または障害としては、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーが挙げられる。本発明の抗体を使用して診断され得る例示的な疾患または障害としては、アルツハイマー病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の抗体を使用して診断され得る更なる非限定的な例示的疾患及び障害としては、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症（Ｇｕａｄｅｌｏｕｐｅａｎ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ）、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病が挙げられる。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して診断され得る障害は、アルツハイマー病（ＡＤ）である。
特定の実施形態において、標識された抗Ｔａｕ抗体が提供される。標識としては、直接的に検出される標識または部分（蛍光標識、発色団標識、電子密度の高い標識、化学発光標識、及び放射性標識など）、ならびに間接的に、例えば、酵素反応または分子相互作用により検出される酵素またはリガンドなどの部分が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な標識としては、放射性同位体３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、及び１３１Ｉ、希土類キレートまたはフルオレセイン及びその誘導体などのフルオロフォア、ローダミン及びその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルセリフェラーゼ（ｌｕｃｅｒｉｆｅｒａｓｅ）、例えば、ホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ（米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３－ジヒドロフタラジンジオン、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖質オキシダーゼ、例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、及びグルコース－６－リン酸塩デヒドロゲナーゼ、過酸化水素を用いて色素前駆体を酸化させる酵素（ＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、またはマイクロペルオキシダーゼなど）とカップリングされたウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼなどの複素環式オキシダーゼ、ビオチン／アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、ならびに安定した遊離ラジカルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
Ｆ．薬学的製剤
本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体の薬学的製剤は、所望される程度の純度を有するそのような抗体と、１つ以上の任意の薬学的に許容される担体、希釈剤、及び／または賦形剤とを混合すること（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））によって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製される。薬学的に許容される担体、希釈剤、及び賦形剤は一般に、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、それらには、無菌水、緩衝剤（リン酸、クエン酸、及び他の有機酸など）；アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤；保存剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール；ブチルもしくはベンジルアルコール；メチルもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）、ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ－２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの介在性（ｉｎｓｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）薬物分散剤を更に含む。ｒＨｕＰＨ２０を含む特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許公開第２００５／０２６０１８６号及び同第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチナーゼなどの１つ以上の追加のグリコサミノグリカナーゼと組み合わされる。
例示的な凍結乾燥抗体製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性抗体製剤は、米国特許第６，１７１，５８６号及びＷＯ２００６／０４４９０８に記載されるものを含み、後者の製剤は、ヒスチジン－酢酸緩衝液を含む。
本明細書の製剤はまた、治療されている特定の適応症の必要に応じて、２つ以上の活性成分、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有する成分を含有してもよい。そのような活性成分は、好適には、意図される目的に有効な量の組み合わせで存在する。
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン－マイクロカプセル、及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中に、またはマクロエマルジョン中に封入され得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、これらのマトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。
インビボ投与に使用される製剤は一般に、無菌のものである。無菌性は、例えば、無菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成することができる。
Ｇ．治療方法及び組成物
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体または免疫複合体のいずれも、治療方法において使用することができる。
一態様において、医薬品として使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。更なる態様において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。いくつかの実施形態において、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。特定の実施形態において、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。抗Ｔａｕ抗体で治療され得る治療され得る例示的なＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーが非限定的に挙げられる。抗Ｔａｕ抗体で治療され得る治療され得る更なる例示的なＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症（Ｇｕａｄｅｌｏｕｐｅａｎ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ）、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病が非限定的に挙げられる。いくつかの実施形態において、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が本明細書に開示される。いくつかの実施形態において、中程度のＡＤ、軽度～中程度のＡＤ、軽度のＡＤ、初期ＡＤ、または前駆ＡＤの治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が本明細書に提供される。更に、抗Ｔａｕ抗体で治療され得るＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、推理力、状況判断力、記憶容量、学習、及び／または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化される疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、治療方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。特定の実施形態において、本発明は、上記のＴａｕ関連疾患または障害のいずれか１つを有する個体の治療方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供し、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、２０～３０の間、２０～２６の間、２４～３０の間、２１～２６の間、２２～２６の間、２２～２８の間、２３～２６の間、２４～２６の間、または２５～２６の間のＭＭＳＥスコアを有する個体を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、患者は、２２～２６の間のＭＭＳＥスコアを有する。本明細書で使用される場合、２つの数字間のＭＭＳＥスコアは、その範囲の両端の数字を含む。例えば、２２～２６の間のＭＭＳＥスコアは、２２及び２６のＭＭＳＥスコアを含む。
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、「ｔａｕ陽性」である個体、例えば、Ｔａｕタンパク質関連障害に典型的である脳ｔａｕ沈着物を有する患者、例えば、陽性のＴａｕ ＰＥＴスキャンを有する患者を治療するために使用される。
更なる実施形態において、本発明は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。例えば、そのような低減は、脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）で生じ得る。いくつかの実施形態において、本発明は、リン酸化Ｔａｕのレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、不溶性Ｔａｕ（例えば、不溶性リン酸化Ｔａｕ）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、高リン酸化Ｔａｕのレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、脳組織内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）の対らせん状細線維（例えば、高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。特定の実施形態において、本発明は、個体における脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減方法であって、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む、方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、哺乳動物、好ましくはヒトである。
いくつかの実施形態において、本発明は、例えば、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの調節に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。
更なる一態様において、本発明は、医薬品の製造または調製における抗Ｔａｕ抗体の使用を提供する。いくつかの実施形態において、医薬品は、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療のためのものである。Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害は、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害であり得る。特定の実施形態において、医薬品は、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療のためのものである。特定の実施形態において、医薬品は、アルツハイマー病（ＡＤ）、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーからなる群から選択される疾患または障害の治療のためのものである。いくつかの実施形態において、医薬品は、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病から選択される疾患または障害の治療のためのものである。いくつかの実施形態において、医薬品は、ＡＤの治療のためのものである。特定の実施形態において、医薬品は、推理力、状況判断力、記憶容量、学習、または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕ関連疾患または障害の治療のためのものである。更なる一実施形態において、医薬品は、上記に列挙される疾患（例えば、ＡＤなどのタウオパチー）の治療方法であって、そのような疾患を有する個体に有効量の医薬品を投与することを含む、方法に使用するためのものである。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。
更なる一実施形態において、医薬品は、Ｔａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減のためのものである。例えば、Ｔａｕタンパク質のそのような低減は、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／もしくは海馬内）または脳脊髄液中で観察され得る。いくつかの実施形態において、医薬品は、対らせん状細線維のレベルの低減のためのものである。更なる一実施形態において、医薬品は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減方法であって、有効量の医薬品を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む、方法に使用するためのものである。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、哺乳動物、好ましくはヒトである。
更なる一態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療のための方法を提供する。本明細書に提供される方法に従って治療され得るＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、本発明は、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療のための方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、アルツハイマー病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーからなる群から選択される疾患または障害の治療のための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、ＰＡＲＴ（原発性年齢関連タウオパチー）、変化優位型認知症、亜急性硬化性汎脳症、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、レビー小体病（ＬＢＤ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、緑内障、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、グアドループ型パーキンソン症、脳内鉄沈着を伴う神経変性、ＳＬＣ９Ａ６関連知的障害、多発性硬化症、ＨＩＶ関連認知症、老人性心アミロイドーシス、及びハンチントン病から選択される疾患または障害の治療のための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療のための方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、推理力、状況判断力、記憶容量、学習、または空間進路決定などの、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕ関連疾患または障害の治療のための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を、上記の疾患または障害のいずれか１つを有する個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を、本明細書に記載される疾患のうちの１つを有する個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、ヒトであり得る。
更なる一態様において、本発明は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減のための方法を提供する。例えば、Ｔａｕタンパク質のレベルのそのような低減は、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／もしくは海馬）または脳脊髄液中で観察され得る。いくつかの実施形態において、本発明は、対らせん状細線維のレベルの低減のための方法を提供する。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む。いくつかの実施形態において、「個体」はヒトである。
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の１つ以上の症状の緩和のための方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の１つ以上の症状の緩和のための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の症状の数または１つ以上の症状の重症度の低減のための方法、あるいはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の症状の数または１つ以上の症状の重症度の低減のための、抗Ｔａｕ抗体または抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、認知障害である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、学習及び／または記憶障害である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、長期記憶喪失である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、認知症である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、錯乱、易刺激性、攻撃性、気分変動、または言語障害である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、推理力、状況判断力、記憶容量、及び／または学習などの１つ以上の認知機能の障害または喪失である。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
特定の態様において、本発明は、認知記憶容量の保持もしくは増加のための方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害に関連付けられる記憶喪失の減速のための方法、あるいは認知記憶容量の保持もしくは増加、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）に関連付けられる記憶喪失の減速のための、抗Ｔａｕ抗体または抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、記憶喪失または記憶容量の減少の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の進行速度の減少のための方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の進行速度の減少のための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の発症の予防のための方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の発症の予防のための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害のリスクにある）個体に投与することを含む。
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の発症の遅延のための方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の発症の遅延のための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
更なる一態様において、本発明は、例えば、上記の治療方法のいずれかに使用するための、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかを含む、薬学的製剤を提供する。いくつかの実施形態において、薬学的製剤は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかと、薬学的に許容される担体とを含む。別の実施形態において、薬学的製剤は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかと、例えば、以下に記載される少なくとも１つの追加の治療剤とを含む。
本発明の抗体は、療法において、単独で、または他の薬剤と組み合わせて使用することができる。例えば、本発明の抗体は、少なくとも１つの追加の治療剤と同時投与されてもよい。
例えば、本発明に従う組成物は、例えば、タウオパチー及び／またはアミロイドーシスの薬物療法、アミロイド及びアミロイド様タンパク質（アルツハイマー病に関与するアミロイドβタンパク質など）に関連する疾患及び障害の群において使用される既知の化合物などの生物活性物質または化合物などの追加の治療剤を含む、他の組成物と組み合わせて投与されてもよい。
一般に、他の生物活性化合物は、ニューロン－伝達エンハンサー、心理療法薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、カルシウムチャネル遮断剤、生体アミン、ベンゾジアゼピン精神安定剤、アセチルコリン合成、貯蔵もしくは放出エンハンサー、アセチルコリンシナプス後受容体アゴニスト、モノアミン酸化酵素ＡもしくはＢ阻害剤、Ｎ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸グルタミン酸受容体アンタゴニスト、非ステロイド性抗炎症薬、酸化防止剤、セロトニン受容体アンタゴニスト、または他の治療剤を含み得る。特に、生物活性剤または化合物は、酸化応力に対する化合物、抗アポトーシス性化合物、金属キレート剤、ＤＮＡ修復の阻害剤（ピレンゼピン及び代謝物など）、３－アミノ－１－プロパンスルホン酸（３ＡＰＳ）、１，３－プロパンジスルホン酸（１，３ＰＤＳ）、セクレターゼ活性化剤、ベータ－及びガンマ－セクレターゼ阻害剤、ｔａｕタンパク質、抗Ｔａｕ抗体（ＷＯ２０１２０４９５７０、ＷＯ２０１４０２８７７７、ＷＯ２０１４１６５２７１、ＷＯ２０１４１００６００、ＷＯ２０１５２００８０６、ＵＳ８９８０２７０、及びＵＳ８９８０２７１に開示される抗体を含むが、これらに限定されない）、神経伝達物質、ベータ－シートブレーカー、抗炎症性分子、「非定型抗精神病剤」（例えば、クロザピン、ジプラシドン、リスペリドン、アリピプラゾールもしくはオランザピンなど）、またはコリンエステラーゼ阻害剤（ＣｈＥＩ）（タクリン、リバスチグミン、ドネペジル、及び／もしくはガランタミンなど）、ならびに他の薬物及び栄養素補助剤（例えば、ビタミンＢ１２、システイン、アセチルコリンの前駆体、レシチン、コリン、イチョウ、アシエチル（ａｃｙｅｔｙｌ）－Ｌ－カルニチン、イデベノン、プロペントフィリン、もしくはキサンチン誘導体など）から選択される少なくとも１つの化合物を、本発明に従う結合ペプチド（抗体、特にモノクローナル抗体及びそれらの活性断片を含む）、ならびに任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤、ならびに疾患の治療の指示書とともに含み得る。
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、神経薬と組み合わせて投与されてもよい。そのような神経薬としては、ベータセクレターゼ、プレセニリン、アミロイド前駆体タンパク質またはその部分、アミロイドベータペプチドまたはそれらのオリゴマーもしくは原線維、細胞死受容体６（ＤＲ６）、最終糖化産物の受容体（ＲＡＧＥ）、パーキン、及びハンチンチン；ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（すなわち、メマンチン）、モノアミン枯渇剤（すなわち、テトラベナジン）；メシル酸エルゴロイド；抗コリン抗パーキンソン症候群剤（すなわち、プロシクリジン、ジフェンヒドラミン、トリヘキシルフェニジル、ベンズトロピン、ビペリデン及びトリヘキシフェニジル）；ドパミン系抗パーキンソン症候群剤（すなわち、エンタカポン、セレギリン、プラミペキソール、ブロモクリプチン、ロチゴチン、セレギリン、ロピニロール、ラサギリン、アポモルヒネ、カルビドパ、レボドパ、ペルゴリド、トルカポン、及びアマンタジン）；テトラベナジン；抗炎症剤（非ステロイド性抗炎症薬（すなわち、インドメチシン（ｉｎｄｏｍｅｔｈｉｃｉｎ）及び上記に列挙される他の化合物）を含むが、これらに限定されない）；ホルモン（すなわち、エストロゲン、プロゲステロン及びリュープロリド）；ビタミン（すなわち、葉酸及びニコチンアミド）；ディメボリン（ｄｉｍｅｂｏｌｉｎ）；ホモタウリン（すなわち、３－アミノプロパンスルホン酸、３ＡＰＳ）；セロトニン受容体活性調節剤（すなわち、キサリプロデン）；インターフェロン、ならびにグルココルチコイドまたはコルチコステロイドから選択される標的に特異的に結合する、抗体または他の結合分子（小分子、ペプチド、アプタマー、もしくは他のタンパク質結合剤を含むが、これらに限定されない）が挙げられるが、これらに限定されない。「コルチコステロイド」という用語は、フルチカゾン（プロピオン酸フルチカゾン（ＦＰ）を含む）、ベクロメタゾン、ブデソニド、シクレソニド、モメタゾン、フルニソリド、ベータメサゾン、及びトリアムシノロンを含むが、これらに限定されない。「吸入可能コルチコステロイド」とは、吸入による送達に好適なコルチコステロイドを意味する。例示的な吸入可能コルチコステロイドは、フルチカゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデノシド、フロ酸モメタゾン、シクレソニド、フルニソリド、及びトリアムシノロンアセトニドである。
いくつかの実施形態において、１つ以上の抗アミロイドベータ（抗Ａｂｅｔａ）抗体が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのような抗Ａｂｅｔａ抗体の非限定的な例としては、クレネズマブ、ソラネズマブ、バピネオズマブ、アデュカヌマブ、ガンテネルマブ、及びＢＡＮ－２４０１（Ｂｉｏｇｅｎ，Ｅｉｓａｉ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のベータ－アミロイド凝集阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。非限定的な例示的ベータ－アミロイド凝集阻害剤としては、ＥＬＮＤ－００５（ＡＺＤ－１０３またはシロ－イノシトールとも呼ばれる）、トラミプロセート、及びＰＴＩ－８０（Ｅｘｅｂｒｙｌ－１（登録商標）、ＰｒｏｔｅｏＴｅｃｈ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のＢＡＣＥ阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのようなＢＡＣＥ阻害剤の非限定的な例としては、Ｅ－２６０９（Ｂｉｏｇｅｎ，Ｅｉｓａｉ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、ＡＺＤ３２９３（ＬＹ３３１４８１４、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ＆Ｃｏ．としても知られる）、ＭＫ－８９３１（ベルベセスタット（ｖｅｒｕｂｅｃｅｓｔａｔ））、及びＪＮＪ－５４８６１９１１（Ｊａｎｓｓｅｎ，Ｓｈｉｏｎｏｇｉ Ｐｈａｒｍａ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のＴａｕ阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのようなＴａｕ阻害剤の非限定的な例としては、メチルチオニニウム、ＬＭＴＸ（ロイコ－メチルチオニニウムまたはＴｒｘ－０２３７、ＴａｕＲｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｌｔｄ．としても知られる）、Ｒｅｍｂｅｒ（商標）（メチレンブルーまたは塩化メチルチオニニウム［ＭＴＣ］、Ｔｒｘ－００１４、ＴａｕＲｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｌｔｄ）、ＰＢＴ２（Ｐｒａｎａ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、及びＰＴＩ－５１－ＣＨ３（ＴａｕＰｒｏ（商標）、ＰｒｏｔｅｏＴｅｃｈ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上の他の抗Ｔａｕ抗体が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのような他の抗Ｔａｕ抗体の非限定的な例としては、ＢＭＳ－９８６１６８（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）及びＣ２Ｎ－８Ｅ１２（ＡｂｂＶｉｅ，Ｃ２Ｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，ＬＬＣ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ＮＰＴ０８８（ＮｅｕｒｏＰｈａｇｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）などの一般的なミスフォールディング阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。
いくつかの実施形態において、本発明に従う組成物は、抗体、特にモノクローナル抗体及びそれらの活性断片を含む、本発明に従うキメラ抗体またはヒト化抗体とともに、ナイアシンまたはメマンチンと、任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤とを含み得る。
いくつかの実施形態において、本発明に従うキメラ抗体もしくはヒト化抗体、またはそれらの活性断片とともに、例えば、クロザピン、ジプラシドン、リスペリドン、アリピプラゾールもしくはオランザピンなどの、陽性及び陰性精神病症状（幻覚、妄想、思考障害（著しい思考散乱、脱線、脱線思考によって顕在化される）、ならびに奇異挙動または混乱挙動、ならびに快感消失、平坦化情動、感情鈍麻、及び引きこもりを含む）の治療のための「非定型抗精神病剤」と、任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤とを含む、組成物が提供される。
本発明に従うキメラ抗体またはヒト化抗体に加えて、組成物中で好適に使用され得る他の化合物は、治療薬標的（３６～３９頁）、アルカンスルホン酸及びアルカノール硫酸（３９～５１頁）、コリンエステラーゼ阻害剤（５１～５６頁）、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（５６～５８頁）、エストロゲン（５８～５９頁）、非ステロイド性抗炎症薬（６０～６１頁）、酸化防止剤（６１～６２頁）、ペルオキシソーム増殖因子－活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニスト（６３～６７頁）、コレステロール低下剤（６８～７５頁）；アミロイド阻害剤（７５～７７頁）、アミロイド形成阻害剤（７７～７８頁）、金属キレート剤（７８～７９頁）、抗精神病剤及び抗鬱剤（８０～８２頁）、栄養補助剤（８３～８９頁）、及び脳内で生物活性物質の利用能を増加させる化合物（８９～９３頁を参照されたい）、ならびにプロドラッグ（９３及び９４頁）を含む、例えば、ＷＯ２００４／０５８２５８（特に１６及び１７頁を参照されたい）に開示されるものであり、この文書は、特に上記に示される頁に言及される化合物が、参照により本明細書に組み込まれる。
上記に述べられるそのような併用療法は、組み合わせ投与（２つ以上の治療剤が同じまたは別個の製剤中に含まれる）及び別個の投与を包含し、別個の投与の場合、本発明の抗体の投与は、追加の治療剤（複数可）の投与の前、それと同時、及び／またはその後に生じ得る。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体の投与及び追加の治療剤の投与は、互いの約１ヶ月以内、または約１週間、２週間、もしくは３週間以内、または約１、２、３、４、５、もしくは６日以内に生じる。
本発明の抗体（及び任意の追加の治療剤）は、非経口投与、肺内投与、及び鼻腔内投与、ならびに局所治療で所望される場合、病変内投与を含む、任意の好適な手段によって投与することができる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与を含む。投薬は、任意の好適な経路によるもの、例えば、一部には、投与が短時間であるか、または慢性的であるかに応じて、静脈内注射または皮下注射などの注射によるものであり得る。単回投与または様々な時点にわたる複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むが、これらに限定されない、様々な投薬スケジュールが本明細書で企図される。
本発明の抗体は、良好な医療行為と一貫する様式で、製剤化され、投薬され、かつ投与されるだろう。この文脈において考慮する要因としては、治療されている特定の障害、治療されている特定の哺乳動物、個々の患者の臨床病態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジューリング、及び医師に既知である他の要因が挙げられる。抗体は必然的にではなく任意で、問題の障害を予防または治療するために現在使用される１つ以上の薬剤とともに製剤化される。そのような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、障害または治療の種類、及び上記に考察される他の要因に依存する。これらは一般に、本明細書に記載されるものと同じ投薬量及び投与経路で、または本明細書に記載される投薬量の約１～９９％で、または適切であると経験的／臨床的に決定される任意の投薬量及び任意の経路で使用される。
疾患の予防または治療について、本発明の抗体の適切な投薬量は（単独で、または１つ以上の他の追加の治療剤と組み合わせて使用される場合）、治療される疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、抗体が予防目的または治療目的で投与されるか、以前の療法、患者の病歴及び抗体への応答、ならびに主治医の裁量に依存するだろう。抗体は、１回で、または一連の治療にわたって患者に好適に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、例えば、１回以上の別個の投与によるものであれ、連続注入によるものであれ、約１μｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ）の抗体が、患者への投与のための初回候補投薬量であり得る。１つの典型的な１日投薬量は、上記に言及される要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。病態に応じて数日間以上にわたる反復投与について、治療は一般に、疾患症状の所望される抑制が生じるまで持続されるだろう。抗体の例示的な投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内であるだろう。したがって、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、もしくは１０ｍｇ／ｋｇ（またはこれらの任意の組み合わせ）の１回以上の用量が、患者に投与され得る。そのような用量は、断続的に、例えば、毎週または３週間毎（例えば、患者が約２～約２０回、または例えば、約６回の用量の抗体を受容するように）投与されてもよい。より高い初回負荷用量、続いて１回以上のより低い用量が、投与されてもよい。しかしながら、他の投薬量レジメンも有用であり得る。この療法の進行は、従来の技術及びアッセイによって容易に監視される。
上記の製剤または治療方法のいずれも、抗Ｔａｕ抗体の代わりに、またはそれに加えて、本発明の免疫複合体を使用して実行され得ることが理解される。
Ｈ．製造品
本発明の別の態様において、上記の障害の治療、予防、及び／または診断に有用な材料を含有する製造品が提供される。製造品は、容器と、容器上のまたは容器に関連するラベルまたは添付文書とを含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、静脈注射溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、それ自体によって、または別の組成物と組み合わせて、病態の治療、予防及び／または診断に有効である組成物を保持し、無菌アクセス口を有してもよい（例えば、容器は、静脈注射溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、本発明の抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が、選択した病態を治療するために使用されることを示す。更に、製造品は、（ａ）本発明の抗体を含む組成物をその中に収容した第１の容器、及び（ｂ）更なる細胞傷害性薬剤、または別の治療剤を含む組成物をその中に収容した第２の容器を含み得る。本発明のこの実施形態の製造品は、組成物を使用して、特定の病態を治療することができることを示す添付文書を更に含み得る。あるいは、または加えて、製造品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、及びデキストロース溶液などの薬学的に許容される緩衝液を含む、第２の（または第３の）容器を更に含み得る。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、及びシリンジを含む、商業的観点及びユーザの観点から望ましい他の材料を更に含み得る。
上記の製造品のいずれも、抗Ｔａｕ抗体の代わりに、またはそれに加えて本発明の免疫複合体を含み得ることが理解される。
ＩＩＩ．実施例
以下は、本発明の方法及び組成物の実施例である。上記に提供される概要を仮定して、様々な他の実施形態が実践され得ることが理解される。
実施例１：免疫化のためのＴａｕの生成
モノマー組み換えＴａｕの生成
組み換えヒトＴａｕ構築物、２Ｎ４Ｒアイソフォーム（アミノ酸２－４４１）をＮ末端Ｈｉｓタグに融合させて、精製及び特性評価を容易にした。例えば、図１５を参照されたい。融合構築物をｐＥＴ５２ｂベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現させた。細胞を採取し、７Ｍの塩化グアニジウムを使用して、４℃で撹拌しながら、変性条件下で一晩溶解させた。細胞細片を４０，０００ｒｐｍで１時間ペレット化した。組み換えＨｉｓタグタンパク質を、ニッケル親和性クロマトグラフィー（Ｎｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ優良親和性樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって、その後、サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって変性条件下で単離した。回収されたタンパク質を、２０ｍＭのＭＥＳ、５０ｍＭのＮａＣｌ、及び１ｍＭのＴＣＥＰ（ｐＨ６．８）へと透析することによって、塩化グアニジウムを除去した。その後、ＴＥＶプロテアーゼを使用してＨｉｓタグを除去し、その後、カチオン交換クロマトグラフィー（Ｍｏｎｏ Ｓカラム、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して最終精製して、切断されたＨｉｓタグを除去した。精製緩衝液は、エンドトキシンを除去するための０．１体積％（ｖ／ｖ）のＴｒｉｔｏｎ ｘ－１１４を含有した。精製されたタンパク質を、１ｍＭのＴＣＥＰを有するＰＢＳへと交換した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びＳＥＣ－ＭＡＬＬＳによって、純度及びモノマー状態を分析した。質量分析法によって、同一性を確認した。２８０ｎｍでのＵＶ吸光によって、タンパク質濃度を決定した。最終産生物は、動態学的リムルスアメボサイトライセート（ＬＡＬ）アッセイによって決定される、エンドトキシンを含まなかった（＜０．５ＥＵ／ｍｇ）。
リン酸化Ｔａｕの生成
上記の方法を使用して調製したＴａｕ２－４４１構築物を使用して、リン酸化Ｔａｕを生成した。他の残基の中でも特に、セリン４０９をリン酸化する、０．５μＭのＰＫＡキナーゼ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、タンパク質構築物をリン酸化した。反応混合物を、１ｍＭのＡＴＰ、５ｍＭのＭｇＣｌ２とともに室温で７２時間インキュベートした。質量分析法によって、リン酸化を確認した。サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、キナーゼを除去した。上記のように、リン酸化タンパク質調製物の純度、モノマー状態、及びエンドトキシンレベルを実質的に分析した。
モノマーＴａｕのインビトロオリゴマー化
モノマーＴａｕ２－４４１構築物を使用して、オリゴマーＴａｕを生成した。まず、モノマータンパク質を、２０ｍＭのＮ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、２５ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ７．４）へと交換し、その後、タンパク質と等モル濃度で、７５μＭのアラキドン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）及び１８ｋＤａのヘパリン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、３７℃で３日間オリゴマー化した。チオフラビンＴ蛍光アッセイ、動的光散乱法（ＤＬＳ）、及び分析的サイズ排除クロマトグラフィーによって、オリゴマー化を確認した。場合によっては、オリゴマーＴａｕは、「オリゴＴａｕ」とも呼ばれる。
実施例２：抗Ｔａｕ抗体の生成
方法
ハイブリドーマの生成
生後９週間のメスＣ５７ＢＬ／６ＪＯｌａＨｓｄ（Ｃ５７ＢＬ／６）及びＢＡＬＢ／ｃ ＯｌａＨｓｄ（Ｂａｌｂ／ｃ）野生型マウス（Ｈａｒｌａｎ，ＵＳＡ）を受容した。生後６及び９週間のＴａｕノックアウトマウス（Ｂ６．１２９－Ｍａｐｔｔｍ１Ｈｎｄ／Ｊ、Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＵＳＡ）を受容した。生後１２～１５週間でワクチン接種を開始した。マウスに、オリゴマー化ヒトＴａｕをワクチン接種した。ワクチン接種前に、オリゴＴａｕを、本研究において使用される２つのアジュバント（５０体積％（ｖ／ｖ）のＲｉｂｉ Ａｄｊｕｖａｎｔ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｉｂｉ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、またはＣｐＧ一本鎖合成ＤＮＡオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ、Ｍｉｃｒｏｓｙｎｔｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）と水酸化アルミニウム（Ａｌ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）との組み合わせ）のうちの一方と混合した。Ｒｉｂｉは、スクアレン油中にモノホスホリルリピドＡ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａから単離）及び合成トレハロースジコリノミコラート（Ｔｕｂｅｒｃｌｅ ｂａｃｉｌｌｕｓのコードファクターから単離）と、０．２％のＴｗｅｅｎ－８０と、水とを含有する、２％のスクアレン水中油エマルジョンである。
腹腔内（ｉ．ｐ．）及び踵関節投与の組み合わせを受容したＤ及びＧ群を除いて、マウスを皮下注射（ｓ．ｃ．）によってワクチン接種した。Ｄ群のマウスには、５０μｇのオリゴＴａｕを腹腔内、及び１０μｇのオリゴＴａｕを踵関節注射として投与した。Ｇ群のマウスには、８μｇのオリゴＴａｕを腹腔内、及び２μｇのオリゴＴａｕを踵関節注射として投与した。表２を参照されたい。
ＣｐＧ及びＡｌ（ＣｐＧ／Ａｌ）をアジュバントとして含有するワクチン接種について、２００μＬの各注射は、６０μｇ（３０ｎｍｏｌ）のＣｐＧ、１ｍｇのＡｌ、及び５０μｇのオリゴＴａｕを含有した。全ての研究群について、マウスは、０、１４、３５、及び５６日目に注射した。骨髄腫融合に使用したマウス（Ｎａｎｏｔｏｏｌｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）には、アジュバントを添加せずに、１日３回のオリゴＴａｕのブースター注射（１回の腹腔内注射当たり５０μｇ）を追加でワクチン接種した。
表２．マウス及びワクチン接種プロトコル
Figure 2023051929000002
３回のブースター注射の最終注射の１日後に、マウスを失血させ、屠殺し、脾細胞を骨髄腫細胞と融合させて、抗体産生ハイブリドーマを生成した。
サブクローニングのためのハイブリドーマの選択
融合について、合計１０回の融合（１つの群は２回の融合、第２の群は４回の融合、及び第３の群は４回の融合）のためにマウスを３つの群に分け、２９９個のハイブリドーマを生成した。血清含有選択培地を使用して、生存可能なハイブリドーマを成長させ、その後、以下に記載される完全長ヒトＴａｕ及びオリゴＴａｕ結合のためのＥＬＩＳＡアッセイを使用して、最良のハイブリドーマをサブクローニングのために選択した。限界希釈の後、最終ハイブリドーマを無血清培地中で成長させ、抗体スクリーニング及び選択のために、安定したコロニーから培地を収集した。
ＥＬＩＳＡスクリーニングアッセイ
安定したハイブリドーマから無血清上清を採取した。その後、目的とされる抗体を含有する上清をＥＬＩＳＡアッセイによってスクリーニングして、抗体特性を特性評価し、更なる発達のために抗体を選択した。ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、以下、完全長ヒトＴａｕ（ｆｌＴａｕ、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）への結合、高リン酸化ｆｌＴａｕ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，ＵＳＡ）への結合、ｆｌＴａｕのオリゴマー対モノマー調製物への結合、及び特定の抗体Ｔａｕエピトープ（複数可）への結合を決定した。簡潔には、９６ウェルのＭａｘｉＳｏｒｐ ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を、表３に示される標的のうちの１つでコーティングした。
表３．ＥＬＩＳＡスクリーニングアッセイに使用した標的。
Figure 2023051929000003
コーティングを、４℃のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中で一晩行った。プレートを０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳで徹底的に洗浄し、その後、３７℃で、０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ中１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）で１時間遮断した。その後、ハイブリドーマ上清中に含有された抗体を示された希釈度で添加し、３７℃で２時間インキュベートしてから、プレートを既に記載したように洗浄した。
直接ＥＬＩＳＡのために、ＡＰ複合体化抗マウスＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を、０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ中、１／６０００の希釈度で、３７℃で２時間添加した。最終洗浄後、プレートをｐ－ニトロフェニルリン酸二ナトリウム六水和物（ｐＮＰＰ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）ホスファターゼ基質溶液とともにインキュベートし、ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して４０５ｎｍで読み取った。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）として表す。
オリゴＴａｕ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡのために、無血清無菌ハイブリドーマ上清中に含有される抗体を、５００倍の希釈度で抗ＩｇＧコーティングしたプレート上で固定化し、その後、オリゴＴａｕまたはモノＴａｕを、ともにＡＶＩタグによる部位特異的ビオチン標識とともにインキュベートした。標的インキュベーションを５μｇ／ｍＬで開始し、その後、８倍または１６倍に希釈した。プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）のシグナル定量化のために、ストレプトアビジン－ＨＲＰ及びＡＢＴＳ基質を使用した。結果をＯ．Ｄ．として表す。
親和性推定
無血清ハイブリドーマ上清中の非精製抗体の親和性を、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ－１００機器（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、表面プラズモン共鳴によって推定した。抗体を抗ＩｇＧバイオセンサチップ上に固定化し、ｆｌＴａｕ（ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）を標的分析物として使用した。１：１のラングミュアフィットモデルを使用して、動態分析を行った。
ＳＤＳ－ＰＡＧＥアッセイ及びウェスタンブロットアッセイ
ヒト脳内での、Ｔａｕに対する選択したｐａｎＴａｕ抗体の結合を、３人のＡＤドナー及び２人の同年齢の非ＡＤ対照ドナーに由来する脳ライセート（Ｔｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、ウェスタンブロット（ＷＢ）で試験した。ライセートをプロセシングして、無洗剤可溶性Ｔａｕ画分を得た。プロセシングしたライセートを４～１２％のビス－トリスゲル（Ｎｏｖｅｘ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に充填し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ ＰＶＤＦ膜上に移し、それとともに試験される抗体及びＩＲＤｙｅ８００ＣＷヤギ抗マウス二次抗体（Ｌｉ－Ｃｏｒ，ＵＳＡ）でブロットした。
ヒト脳ライセートを使用するＥＬＩＳＡアッセイ
ＡＤ及び対照脳ライセート中での、非変性ヒトＴａｕに対する選択された抗体の結合を評価するために、ハイブリドーマ上清に由来する抗体、または陰性及び陽性対照抗体を、上記の９６ウェルプレート上で固定化した。その後、ＡＤ対象または同年齢対照対象に由来する可溶性ヒト脳ライセート（４００μｇ／ｍＬのタンパク質、全てＴｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍから）中のＴａｕを捕捉し、ポリクローナルウサギｐａｎＴａｕ抗体（ＡｂＣａｍ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）、その後、Ｆｃ－γ断片特異的抗ウサギＩｇＧ－ＡＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，ＵＳＡ）を使用して、検出を実行した。Ｔａｕノックアウトマウスに由来する脳ライセートを、陰性試料対照として使用した。プレートをｐＮＰＰ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）ホスファターゼ基質溶液とともにインキュベートし、ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して４０５ｎｍで読み取った。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）として表す。
抗体ハイブリドーマの配列決定
可変領域遺伝子配列決定のために、ハイブリドーマ細胞ライセートをＡｎｔｉｔｏｐｅ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）に供給した。簡潔には、ＩｇＧ可変重鎖（ＶＨ）、ＩｇＭ ＶＨ、Ｉｇカッパ可変軽鎖（ＫＶＬ）、及びＩｇ λ ＶＬの各々の定常領域プライマーとともに、マウスシグナル配列の縮重プライマープールを使用して、ＲＴ－ＰＣＲを実行した。ＩｇＭまたはＩｇＧ特異的定常領域プライマーのいずれかとともに、ＶＨシグナル配列に特異的な６つの縮重プライマープール（ＨＡ～ＨＦ）の組を使用して、重鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。κまたはλ定常領域プライマーのいずれかとともに、８つのシグナル配列特異的縮重プライマープール（７つはκクラスター（ＫＡ～ＫＧ）のもの、１つはλクラスター（ＬＡ）のもの）の組を使用して、軽鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。成功した増幅から得られたＰＣＲ産生物を精製し、「ＴＡ」クローニングベクター（ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ、Ｐｒｏｍｅｇａ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉへと形質転換し、個々のコロニーを配列決定した。抗体ＶＨ及びＶＬ領域のヌクレオチド及びアミノ酸配列を、２７個の抗体ハイブリドーマの配列によって決定した。
結果
サブクローニングのためのハイブリドーマの選択
３巡の融合の各々から生成されたハイブリドーマ（１０回の融合に由来する合計２９９個のハイブリドーマ）を、まずｆｌＴａｕへの結合についてアッセイし、選択されたハイブリドーマをｐＴａｕ及びオリゴマー化Ｔａｕへの結合について追加でアッセイした。この目的は、Ｔａｕ及び翻訳後修飾されたＴａｕ（リン酸化またはオリゴマーＴａｕなど）に同等に良好に結合する抗体を選択することであった。このために、ハイブリドーマ上でアッセイを実行して、最良のｐａｎＴａｕ特性を選択した。抗体結合領域及び特異的Ｔａｕエピトープを決定するために、まず異なるＴａｕ断片、その後、最長のヒトＴａｕアイソフォームの全４４１個のアミノ酸（ａａ）配列に及ぶ、１５アミノ酸長の重複Ｔａｕペプチドのライブラリを使用して、結合領域を決定した。異なる翻訳後修飾形態のＴａｕ、及びヒトに存在する６つ全ての異なるヒトＴａｕアイソフォームへの結合を最大化する目的で、Ｔａｕの所定の領域に結合する抗体の群を意図的に回避した。
３連の融合は、１３３個のサブクローニング安定ハイブリドーマの生成をもたらし、それらを最良のｐａｎＴａｕ特性についてスクリーニングした。異なるスクリーニングアッセイの組み合わせを使用して、ｐａｎＴａｕ抗体に好ましい特性を有する抗体ハイブリドーマの数を狭めた。ｆｌＴａｕ及びｐＴａｕ結合を比較するために、９０個のハイブリドーマをアッセイし、２４個のハイブリドーマの結果を図１Ａ～Ｆに示す。最初のスクリーニングは、アルツハイマー病（ＡＤ）及び他のタウオパチーにおいて高密度のリン酸化されている残基を有することが知られるＴａｕの領域に結合する抗体の選択を回避するために、Ｔａｕ断片を使用して実行されたため、試験されたほとんどの抗体は、このＥＬＩＳＡによって決定されるものと同様の結合特性で、ｆｌＴａｕ及びｐＴａｕの両方に結合した。
いくつかの実施形態において、ｐａｎＴａｕ抗体が、一方または他方に対する強い優先度なく、Ｔａｕのモノマー形態及びオリゴマー形態の両方に結合することが望ましい。捕捉ＥＬＩＳＡを設定して、抗体がｆｌＴａｕのモノマー形態及びオリゴマー形態の両方に結合したかを決定した。捕捉モードで実行したＥＬＩＳＡは、予備オリゴマー化Ｔａｕのオリゴマー立体構造、及びモノＴａｕのモノマー状態を、標的がＥＬＩＳＡプレート上に固定化される直接ＥＬＩＳＡとして実行した場合よりも、良好に保存する。
試験される９０個全ての抗体に対する２つの形態のＴａｕの結合を直接比較することによって、各アッセイを実行した。いずれかのオリゴＴａｕへの好ましい結合を有することが知られる抗体、またはＴａｕの２つの形態を区別しない抗体を、各アッセイにおいて対照として使用した。１８個のハイブリドーマの結果を、図２Ａ～Ｅに示す。
高密度の潜在的なｐＴａｕ残基（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及びＴｙｒ）を有する領域に結合する抗体が回避され得るため、エピトープのマッピングは、良好なｐａｎＴａｕ特性を有する抗体の選択にとって重要である。ヒトＴａｕの６つ全てのアイソフォームへの結合もまた、ｐａｎＴａｕ抗体の選択基準として使用した。最初に選択された抗体のｐａｎＴａｕエピトープを、各々がヒトＴａｕの完全長に及ぶ１５個のアミノ酸（ａａ）（６ａａ残基の重複及び９ａａのオフセットを有する）を有する、４９個のペプチドのライブラリを使用して、改善された精度で検証し、決定した。残基数は、ヒトＴａｕの最長のアイソフォーム（４４１ａａ）に基づく。１／１０の高い希釈度で非精製抗体を使用して、全てのペプチドに対する結合対非結合を検証した。既にＥＬＩＳＡによって選択した１１２個のハイブリドーマからの抗体のスクリーニングは、２０個の異なるＴａｕエピトープへの結合を示した（表４）。
表４：抗体のＴａｕエピトープ
Figure 2023051929000004
Figure 2023051929000005
ｆｌＴａｕへの親和性測定のために、Ｂｉａｃｏｒｅ機器上でＳＰＲを使用して４６個の抗体を測定し、ＫＤを決定した。抗ＩｇＧチップ上に抗体を固定化し、ｆｌＴａｕを標的分析物として使用することによって、Ｂｉａｃｏｒｅ親和性測定を行った。３２個の抗体の結果を表５に示し、抗体はｆｌＴａｕへの親和性に基づいて順位付けした。ｆｌＴａｕへの親和性について測定された抗体のうち、２２個の抗体が２０ｎＭよりも良好な親和性を有し、そのうち１４個の抗体が５ｎＭ未満のＫＤを有し、抗体３７Ｄ３－Ｈ９が１ｎＭのＫＤ（親和性）を有した。
表５：ｆｌＴａｕへの親和性
Figure 2023051929000006
６つ全てのヒトＴａｕのアイソフォームに対する、選択された抗体の結合を検証するために、ＳＤＳ－ＰＡＧＥに６つ全てのアイソフォームを含有する組み換えＴａｕラダーを泳動させ、３つの選択されたＴａｕ抗体を使用してウェスタンブロット（ＷＢ）を行った。３つ全てのｐａｎＴａｕ抗体が、６つ全てのＴａｕアイソフォームに結合する（図３）。更に、３人のＡＤ及び２人の同年齢対照に由来する脳ホモジネートを、比較のために同時に泳動させた。予想通り、マッピングされたエピトープに基づいて、このアッセイにおいて試験された３つ全ての抗体が、６つ全てのＴａｕアイソフォームへの結合を示した。ヒトＡＤドナーと対照ドナーとの間の帯域パターンにおいて観察される差異は、ＡＤ対象において存在することが予想される、より大きなリン酸化及び／またはＳＤＳ安定Ｔａｕ凝集を表し得る。
ヒトアルツハイマー病（ＡＤ）試料及び対照試料を、非変性ＥＬＩＳＡ捕捉アッセイにおいて追加で泳動させて、ヒト脳内におけるＴａｕへの結合を検証した。２人のＡＤ対象及び２人の非ＡＤ同年齢対照対象に由来する、可溶性Ｔａｕについてプロセシングした試料ライセートを、８つの希釈度で泳動させ、３つの抗体を試験した（図４Ａ～Ｃ）。
２７個のハイブリドーマ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）について、抗体可変鎖配列を決定した。特定の重鎖及び軽鎖可変ドメインならびに超可変領域（ＨＶＲ）のタンパク質配列を、配列表に示す。
実施例３：特性評価抗Ｔａｕ抗体
遺伝子合成、及び結果として生じるＤＮＡの、マウスＩｇＧ２ａ（重鎖）及びマウスカッパ（軽鎖）哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、抗体重鎖及び軽鎖を構築した。重鎖及び軽鎖プラスミドの一過性同時トランスフェクションによって、抗体をＣＨＯ細胞及び２９３Ｔ細胞内で発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で精製した。マウスＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用するＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００表面プラズモン共鳴機器上で、精製された組み換え抗体を、Ｔａｕモノマータンパク質への結合についてスクリーニングした。１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中に希釈したｍＩｇＧ２ａ形式の抗体を、１０μｌ／分の流量を使用して、１μｇ／ｍｌの濃度で３０もしくは４５秒間（抗体２６Ｃ１、９４Ｂ２－Ｃ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２、１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１、１２５Ｂ１１－Ｈ３、１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２、及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１）、または０．１μｇ／ｍｌの濃度で７０もしくは１５０秒間（抗体１９Ｈ６－Ｆ７、３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１、及び３７Ｄ３－Ｈ９）捕捉した。３０μｌ／分の流量と、抗体２６Ｃ１及び９４Ｂ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０、及び５００ｎＭ、抗体５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１及び５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０、５００、及び１０００ｎＭ、抗体１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３では６、１９、５６、５６、１６７、及び５００ｎＭ、抗体１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２、及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１では５、１６、４９、１４８、１４８、４４４、１３３３、及び４０００ｎＭ、１９Ｈ６－Ｆ７では０．４、１．６、６．３、２．５、１００、及び４００ｎＭ、ならびに３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１、及び３７Ｄ３－Ｈ９では０．２、０．８、４、４、２０、及び１００ｎＭの濃度とを使用して、ＨＢＳＰ中のＴａｕモノマーの結合を２５℃で監視した。会合及び解離時間を、それぞれ１８０～４８０秒間及び３００～６００秒間監視した。高い親和性（表６）及びＣＤＲ中のＮＸＳ／Ｔグリコシル化モチーフの不在のため、抗体３７Ｄ３－Ｈ９を更なる分析のために選択した。
表６：ヒトＴａｕモノマーへのマウス抗体のＫＤ（ｎＭ）示されるデータは、１：１の結合モデルの結果を表す。
Figure 2023051929000007
３７Ｄ３－Ｈ９は、Ｔａｕタンパク質に結合する際の結合活性を示す。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ａｍｉｎｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｋｉｔ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、ヒトモノマーＴａｕタンパク質をＢｉａｃｏｒｅ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップに共有結合的にカップリングし、約１２８ＲＵのレベルの固定化をもたらした。各々３００秒間の会合期間を有する単一サイクル動態実験形式、ならびに１、２、４、８、及び１６ｎＭ（ＩｇＧ）または５、１０、２０、４０、及び８０ｎＭ（Ｆａｂ）の抗体濃度を使用して、Ｆａｂ形式及びＩｇＧ形式の両方における３７Ｄ３－Ｈ９の直接的な結合を監視した。解離を７２００秒間（Ｆａｂ）または１４４００秒間（ＩｇＧ）監視した。解離速度の値を、１：１の結合モデルをデータにフィットさせることによって計算した。計算された解離速度は、３７Ｄ３－Ｈ９ Ｆａｂでは５．０×１０－４、及び３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧでは１．１×１０－５であり、４５倍の差異であった。図５は、Ｆａｂ（左パネル）及びＩｇＧ（右パネル）の解離速度の差異を図示し、３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧが結合活性を示すことを示す。
実施例４：抗Ｔａｕ抗体のヒト化
抗体ＣＤＲ及び選択された可変領域フレームワーク残基を、ヒト抗体コンセンサスフレームワーク上に移植することによって、抗体３７Ｄ３－Ｈ９をヒト化した（Ｄｅｎｎｉｓ，Ｍ．Ｓ．（２０１０）．ＣＤＲ ｒｅｐａｉｒ：Ａ ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，Ｓ．Ｊ．Ｓｈｉｒｅ，Ｗ．Ｇｏｍｂｏｔｚ，Ｋ．Ｂｅｃｈｔｏｌｄ－Ｐｅｔｅｒｓ ａｎｄ Ｊ．Ａｎｄｙａ，ｅｄｓ．（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．９－２８）。コンセンサスＶＨ３、Ｖκ２、及びＶκ１フレームワーク上への移植を評価した。重鎖移植片は、４９位（Ｋａｂａｔ番号付けシステム）のマウス残基を含んだ。Ｖκ２移植片は、フレームワーク２位及び４位のマウス残基を含んだ。Ｖκ１移植片は、フレームワーク２位、４位、及び４３位のマウス残基を含んだ。遺伝子合成、及びヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４及びカッパ鎖哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、ヒト化変異形を構築した。ＣＨＯ細胞への、重鎖及び軽鎖プラスミドの同時トランスフェクションによって、抗体を発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅで精製した。ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップ、及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、ヒト化変異形をヒトＴａｕモノマーへの親和性についてスクリーニングした。抗体を２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分で１５秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量で、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中の１００、３３、１１、及び３．７ｎＭのヒトＴａｕモノマーの会合及び解離を、それぞれ１８０秒間及び６００秒間監視した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表７）。
表７：モノマーヒトＴａｕのヒト化変異形の親和性スクリーニング
Figure 2023051929000008
表面プラズモン共鳴によって、追加の抗体濃度及びより長い会合／解離時間で、抗体変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ６を更に特性評価した。これらの変異形を、より広い範囲のヒトＴａｕモノマー濃度（１．２、３．７、１１．１、１１．１、３３．３、１００ｎＭ）ならびに増加した会合（３００秒間）及び解離（１２００秒間）期間で分析した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表８）。
表８：表面プラズモン共鳴による、ヒトＴａｕへの、選択された変異形の結合動態の詳細な分析
Figure 2023051929000009
ＹＴＥ（Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ）変異を、特定のＩｇＧ４抗体に組み込んだ。Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ（ＹＴＥ）などのＦｃ受容体新生児（ＦｃＲｎ）結合ドメイン変異が、ＦｃＲｎ結合を増加させ、したがって、抗体の半減期を増加させることが記載されている。米国公開特許出願第２００３／０１９０３１１号及びＤａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：２３５１４－２３５２４（２００６）を参照されたい。
抗体１２５Ｂ１１－Ｈ３を、ＶＨ３及びＶκ１コンセンサスフレームワーク上にヒト化した。重鎖移植片は、７８位（Ｋａｂａｔ番号付けシステム）のマウス残基を含んだ。Ｖκ１移植片は、フレームワーク４３位及び８７位のマウス残基を含んだ。１１３Ｆ５－Ｆ７の軽鎖もまた、フレームワーク４３位及び８７位の追加のマウス残基を有して、Ｖκ１フレームワーク上にヒト化した。ヒト化変異形重鎖（１２５Ｂ１１）ならびに軽鎖（１２５Ｂ１１及び１１３Ｆ５－Ｆ７）を、複数の組み合わせで同時トランスフェクトし、上記の９６ウェル形式で精製した。その後、ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップ、及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、ヒト化変異形をヒトＴａｕモノマーへの親和性についてスクリーニングした。抗体を２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分で１５秒間捕捉した。４０μｌ／分の流量で、ＨＢＳＰ中の０、１００、及び５００ｎＭのヒトＴａｕモノマーの会合及び解離を、それぞれ１８０秒間及び３００秒間監視した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表９）。
表９：表面プラズモン共鳴による、１２５Ｂ１１－Ｈ３及び１１３Ｆ５－Ｆ７ヒト化変異形のスクリーニング
Figure 2023051929000010
＊Ｔａｕモノマーへの最小結合。
ＮＴ、試験せず。
親和性スクリーニングに基づいて、高解像度動態分析のために、変異形ｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ１７（ＨＣ３＋ＬＣ１）、ｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ２６（ＨＣ４＋ＬＣ２）、及びｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ２８（ＨＣ４＋ＬＣ４）を選択した（表１０）。抗体９４Ｂ２－Ｃ１を、ＶＨ１及びＶκ２フレームワーク上にヒト化した。重鎖移植片はまた、２８、２９、６７、６９、７１、及び７３位（Ｋａｂａｔ番号付けシステム）のマウス残基も含んだ。Ｖκ２移植はまた、フレームワーク２、３６、及び４６位のマウス残基も含んだ。８つの重鎖と８つの軽鎖との組み合わせを発現させ、精製し、上記の１２５Ｂ１１について記載されるように表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によってスクリーニングした。ＳＰＲスクリーニングの結果を、表１１に示す。変異形ｈｕ９４Ｂ２．ｖ１０５（重鎖変異形９４Ｂ２．ＨＣ１、軽鎖変異形９４Ｂ２．ＬＣ１３）を、詳細なＳＰＲ特性評価のために選択した（表１１）。
表１０：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
Figure 2023051929000011
表１１：表面プラズモン共鳴による、９４Ｂ２ヒト化変異形のスクリーニング
Figure 2023051929000012
実施例５：ヒト化抗Ｔａｕ抗体の安定性分析
化学的不安定性の特定
抗体試料に熱応力をかけて、産生物の保存期間にわたる安定性を模倣した。試料を、２０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）またはリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）へと緩衝液交換し、１ｍｇ／ｍｌの濃度に希釈した。１ｍｌの試料に４０℃で２週間応力をかけ、２番目を対照として－７０℃で保管した。その後、トリプシンを使用して両方の試料を消化して、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）－質量分析法（ＭＳ）分析を使用して分析され得るペプチドを作製した。試料中の各ペプチドについて、ＬＣからの保持時間、ならびに高解像度精密質量及びペプチドイオン断片化情報（アミノ酸配列情報）を、ＭＳにおいて取得した。抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）を、±１０ｐｐｍのウィンドウにおけるデータ組から目的とされるペプチド（天然及び修飾ペプチドイオン）について行い、ピークを統合して、面積を決定した。（修飾ペプチドの面積）を（修飾ペプチドの面積＋天然ペプチドの面積）で除し、１００を乗ずることによって、各試料に対する修飾の相対的パーセンテージを計算した。その後、対照（ｔ＝０）試料と応力をかけた（ｔ＝２週間）試料との間のこれらの相対的パーセンテージを比較した。示されるパーセンテージは、応力をかけた（ｔ＝２週間）値から対照（ｔ＝０）値を引いたものを表す。抗体ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の脱アミド化分析は、軽鎖ＣＤＲ－１内の配列Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０（Ｋａｂａｔ番号付け）が脱アミド化を受けやすいという観察をもたらした。脱アミド化Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０の増加は、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１では１６．５％、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５では１１％であることが見出された。
抗原に結合する抗体に対する、脱アミド化の影響
ヒトＴａｕへの親和性に対する、Ｎ２８脱アミド化の影響を評価するために、広く分離されたＮ２８脱アミド化状態を有する２つの試料を得ることが望ましかった。Ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを、リン酸緩衝食塩水（ｐＨ７．４）中１ｍｇ／ｍｌの濃度で、４０℃で２週間インキュベートした。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、Ｎ２８Ｇ２９モチーフの脱アミド化を測定した。ｔ＝２週間の応力をかけた試料は、ｔ＝０の応力をかけていない試料と比較して、４３．１％の増加脱アミド化を有した。ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用する表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）によって、応力をかけた抗体及び応力をかけていない抗体を、Ｔａｕ結合について分析した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間（ｔ０試料）または１７秒間（ｔ２試料）捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相、及び１８００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、３．１、６．３、１２．５、２５、２５、５０、及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングを含む機器初期設定を使用して、１：１の結合モデルをデータにフィットさせた。図６及び表１２に示す結果は、この実験では、応力をかけた抗体が応力をかけていない抗体よりも高いレベルで固定化されたものの、（パラメータＲｍａｘの大きさによって表される）Ｔａｕ結合シグナルの大きさは著しくより低かったことを示す。捕捉レベルの差異のＲｍａｘ値を正規化した後、応力をかけた（ｔ＝２週間）試料は、応力をかけていない試料の約半分の総Ｔａｕ結合能力を示すようであった（正規化Ｒｍａｘの５６％の低減によって示される）。計算された親和性は、変化しないようであった。つまり、この分析では、ｔ＝０の試料とｔ＝２週間の試料との間のＫＤの差異は、２％未満であった（ｔ＝０及びｔ＝２週間について、ＫＤ＝０．７ｎＭ）。この結果は、有意に低減した高親和性抗体の集団を含有するｔ＝２週間の試料と一貫する。
表１２：表面プラズモン共鳴による、モノマーＴａｕに対する、応力をかけた及び応力をかけていないｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５試料の相対的結合
Figure 2023051929000013
抗原に結合する抗体に対する脱アミド化の影響及び「正規化Ｒｍａｘ」の計算
アスパラギン脱アミド化が、アスパラギン酸及びイソアスパラギン酸産生物をもたらすことが予想されることを仮定して（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ Ｒ．＆Ｋｏｌｂｅ Ｈ．Ｖ．Ｊ．（１９９４）．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔ．５，６６２，ｐ２６１－２７８）、ヒトＴａｕモノマーの親和性に対する、Ｎ２８をＤ２８（変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ）で置換する影響を分析した。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で２２秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相、及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、６．３、１２．５、２５、２５、５０、１００、２００、及び４００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。１：１の結合モデルをデータにフィットさせ、動態分析を使用して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５．３（本明細書においてｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとも呼ばれる）の親和性を計算した。１：１のフィッティングに使用されるパラメータは、「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングの機器初期設定を含んだ。結果を、図７及び表１３に示す。
計算されたｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ変異形のＫＤは、同じ条件下で分析したｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の１．５×１０－９Ｍ（平均、ｎ＝４の実験内決定）と比較して、１６０×１０－９Ｍであった。したがって、Ｎ２８のＤ２８への転換は、親和性の１００倍超の低減を引き起こした。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ変異形の比較的低い親和性、及び比較的急速な動態を仮定して、本発明者らは、Ｎ２８変異形とＤ２８変異形との混合物の動態分析は、より高い親和性集団によって支配されると、及びより低い親和性の変異形の存在は、正規化Ｒｍａｘの低減によって反映される可能性があると判断した。この判断を検証するために、抗体変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８ＤのＴａｕ結合プロファイルを、等しい量でともに混合した２つの抗体のＴａｕ結合プロファイルと比較した。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５単独と比較して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５とｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとの１：１の混合物は、正規化Ｒｍａｘの４５％の低減をもたらした（表１３）。本発明者らは、熱応力時の正規化Ｒｍａｘの変化は、応力をかけた試料中での高親和性抗体の集団の低減を示す可能性があると結論付けた。したがって、本発明者らは、正規化Ｒｍａｘの変化を使用して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９の変異形を安定性の改善についてスクリーニングすることができると判断した。
表１３：ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の熱応力時、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５と期待される脱アミド化産生物ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとの混合時に観察される正規化Ｒｍａｘの変化
Figure 2023051929000014
＊正規化Ｒｍａｘ＝Ｒｍａｘ（ＲＵ）／リガンドレベル（ＲＵ）。基準抗体の正規化Ｒｍａｘ＝０．３３（４つの実験内決定の平均、標準偏差＜０．０１）。
抗体の最適化及び選択
９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形をＢｉａｃｏｒｅによって評価して、２週間、４０℃での熱応力期間のありまたはなしでの、それらの機能的安定性を比較した。変異形は、Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０Ｔ３１モチーフのほとんどの単一変異形、Ｇ２９Ａ変異を含有する二重変異、それらを水素結合残基へと機能的に置換し得るＡｓｎ－２８及びＴｙｒ－３２の二重変異、ならびに元の３７Ｄ３－Ｈ９抗体中に存在する残基または対応する生殖細胞株残基変異形のいずれかとしての残基２、４、３３、及び９３の全ての想定される並べ替えを含んだ。加えて、Ａｓｎ－２８残基の親和性または安定性に影響を与えない、残基１がＡｓｐまたはＧｌｕである文脈において変異を試験した。
９６ウェル形式で、Ｅｘｐｉ２９３細胞の一過性トランスフェクションによって抗体を発現させ、５００μＬのＭＣＡ９６ヘッドを有するＴｅｃａｎ ｆｒｅｅｄｏｍ ＥＶＯ２００液体ハンドリングシステム上で自動化精製を実行した。簡潔には、２０μＬのＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ樹脂（Ｇｌｙｇｅｎ Ｃｏｒｐ＆ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）でカスタム充填された先端カラムを使用して、１ｍＬの培養物中のＩｇＧを捕捉した。１×ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄した後、ＩｇＧを１６０μＬの５０ｍＭリン酸（ｐＨ３）中に溶出させ、１２μＬの２０×ＰＢＳ（ｐＨ１１）で中和した。ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ先端カラムを０．１ＭのＮａＯＨ中で取り除き、１×ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で再生させて、最大１５回連続使用した。Ｈａｍｉｌｔｏｎ Ｓｔａｒ液体ハンドリングロボットを使用して、９６ウェル形式の精製された抗体を０．１ｍｇ／ｍｌに正規化した。「応力前」試料を約４℃で維持し、「応力後」試料をＰＣＲ機械内、４０℃で２週間インキュベートした。表面プラズモン共鳴動態実験を実行することによって、「応力前」及び「応力後」抗体調製物で、変異形の機能的安定性を比較した。ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して生成された、ヒト抗体捕捉ＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、抗体を評価した。１５秒間の注入時間及び１０μｌ／分の流量を使用して、２μｇ／ｍｌまで希釈した抗体を固定化した。４０μｌ／分の流量使用時、２５℃、０ｎＭ、２６．５ｎＭ、及び２６５ｎＭでのＴａｕモノマーへの結合を、１８０秒間の会合相の間、その後、３００秒間の解離相の間監視した。複数サイクル動態形式を使用して、試料を、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（ＨＢＳＰ）中に泳動させた。ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して、データを分析し、１：１の結合モデルにフィットさせた。結果として生じる親和性（ＫＤ）値を、図８Ａ～Ｄに示す。（例えば、重要な残基の脱アミド化のために）親和性が損なわれた抗体が、ＩｇＧ捕捉レベル（「リガンドレベル」）には等しく寄与するが、測定されるＴａｕ結合にはより少ない寄与をすることが予想されるという理論的根拠、及びこれが実験的に導き出されるＲｍａｘの値に反映されるという理論的根拠を使用して、安定性指数もまた計算した。捕捉される各抗体の量の変化を説明するために、Ｒｍａｘを（「リガンドレベル」、つまり抗体捕捉中に固定化される応答単位によって測定される）抗体捕捉レベルについて正規化した。したがって、正規化Ｒｍａｘは、「リガンドレベル」（ｈＩｇＧ捕捉ステップ中に捕捉されたＲＵを表す評価結果、単位＝ＲＵ）によって導き出される実験的Ｒｍａｘ（単位＝ＲＵ）として計算され、安定性指数は、本明細書において、正規化Ｒｍａｘ（応力後）を正規化Ｒｍａｘ（応力前）で割ったものとして計算される。
選択された抗体を、ＣＨＯ細胞の一過性トランスフェクションによって発現させ、精製した。その後、抗体に１ｍｇ／ｍｌで２週間応力をかけ、ＤＴＴ還元によるＲＣＭトリプシンペプチドマッピング、ＩＡＡキャッピング、及びｐＨ８．２消化を使用して、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって脱アミド化分析した。結果（表１４）は、変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４が、Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０モチーフ上、脱アミド化に対する感受性の低減を有したことを示した。残基はＡｓｎ－２８残基のすぐ近くに位置しておらず（図９）、Ｆ３３Ｌ変異がいかにＡｓｎ－２８を安定化し得るのかが明らかではないため、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４の脱アミド化の低減は予想外であった。
表１４：脱アミド化の応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４変異形の安定性
Figure 2023051929000015
実施例６：ヒト化抗Ｔａｕ抗体選択及び特性評価
抗体選択及び特性評価：ヒトＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、選択された抗体の親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．２５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相、及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３、及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３ＭのＭｇＣｌの２回連続の３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた（表１５）。
表１５：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
Figure 2023051929000016
抗体特性評価：ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ形式のヒトＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＦＡｂ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１８０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相、及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３、及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．１）の２回連続の６０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１６に示す。
表１６：表面プラズモン共鳴による、モノマーヒトＴａｕへのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの結合動態
Figure 2023051929000017
抗体特性評価：カニクイザルＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間捕捉した。１．２～１００ｎＭの間の最低５つの異なる非ゼロ濃度（１つの反復濃度）で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相、及び６００秒間の解離相を使用して、動態を評価した。サイクル間に、１０μｌ／分の流量で、３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の再生注入を実行した。結果を１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１７に示す。
表１７：ヒト化抗Ｔａｕ抗体のモノマーカニクイザルＴａｕに対する親和性
Figure 2023051929000018
ヒト化抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ｆ１もまた、リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に結合する。
実施例７：抗Ｔａｕ抗体の薬物動態
インビボでの抗Ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ抗体の薬物動態を評価するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（意識のあるマウス）に、１０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内（ＩＶ）または腹腔内（ＩＰ）ボーラス注射を投与した。用量後最大２８日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
マウス血漿中の投薬された抗体の濃度を、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ－ビオチン複合体、及びその後、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたストレプトアビジンを添加することによって終了した。アッセイは、１．５６～２００ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．１６μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
図１０は、抗Ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａの薬物動態分析の結果を示す。抗Ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａは、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有し、クリアランスは６．３１ｍＬ／日／ｋｇであった。
インビボでの抗Ｔａｕ ９４Ｂ２－Ｃ１ ｍＩｇＧ２ａ及び抗ｔａｕ １２５Ｂ１１－Ｈ３ ｍＩｇＧ２ａの薬物動態を評価するために、意識のあるＣ５７ＢＬ／６マウスに、１０ｍｇ／ｋｇの用量で抗体の単回腹腔内ボーラス注射を投与した。用量後最大２８日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
マウス血漿中の投薬された抗体の濃度及びを、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ－ビオチン複合体、及びその後、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたストレプトアビジンを添加することによって終了した。アッセイは、０．７８～１００ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０７８μｇ／ｍＬの検出限界を有した。濃度はまた、組み換えＴａｕをコートとして使用して特異的ＥＬＩＳＡでも測定し、その後、１：１０の希釈度で開始して血漿試料を添加し、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ｍＩｇＧ２ａを添加することによって終了した。アッセイは、０．０７８～１０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０００８μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
それらの実験の結果を図１６及び１７に示す。一般的アッセイを使用して濃度を分析した場合、抗Ｔａｕ ９４Ｂ２ ｍＩｇＧ２ａは、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有したが、特異的アッセイを使用して濃度を分析した場合、より低い曝露及びより速いクリアランスを有した。図１６を参照されたい。一般的アッセイによって決定されるクリアランスは４．０６ｍＬ／日／ｋｇであり、特異的アッセイによって決定されるクリアランスは７．５３ｍＬ／日／ｋｇであった。これらの結果は、抗体が、それがその標的を認識する能力を損なうインビボ変化を経時的に受ける可能性があることを示唆する。抗Ｔａｕ １２５Ｂ１１－Ｈ３ ｍＩｇＧ２ａは、どのアッセイが濃度を生成したかに関わらず、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有した。図１７を参照されたい。一般的アッセイによって決定されるクリアランスは４．９６ｍＬ／日／ｋｇであり、特異的アッセイによって決定されるクリアランスは４．９０ｍＬ／日／ｋｇである。
表１８は、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３の薬物動態パラメータを示す。
表１８：抗Ｔａｕ抗体の薬物動態パラメータ
Figure 2023051929000019
インビボでのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ抗体及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の薬物動態を評価するために、カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）（意識のあるサル）に、１ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内ボーラス注射を投与した。用量後最大４９日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
サル血漿中の投薬された抗体の濃度及びを、ヒツジ抗ヒトＩｇＧ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ヒトＩｇＧを添加することによって終了した。アッセイは、０．１５６～２０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０２μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
図１１は、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態分析の結果を示す。図１１において、各組のデータ点は１匹の動物を表し、線は抗体及びアッセイ群内の全ての動物の平均を表す。表１９は、カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態パラメータを示す。
表１９：カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態パラメータ
Figure 2023051929000020
実施例８：抗Ｔａｕ抗体の更なるエピトープ特性評価
ビオチン標識されたＴａｕモノマー及びビオチン標識されたペプチド（ＭＡＰＴ＿１０－２４）に対する３７Ｄ３－Ｈ９の結合の比較後、追加のビオチン標識されたペプチドへの３７Ｄ３－Ｈ９の結合もまた、評価した。Ｎｕｎｃ ｍａｘｉｓｏｒｐの９６ウェルマイクロプレートを、４℃で１２時間超、５０ｍＭの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）中２μｇ／ｍｌに希釈したＮｅｕｔｒａｖｉｄｉｎでコーティングした。その後の全てのインキュベーションは、室温で実行した。コーティング後、プレートをＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で２時間遮断し、その後、ＰＢＳ、０．０５％のポリソルベート２０で徹底的に洗浄した。その後、１μｇ／ｍｌのビオチン標識されたＴａｕペプチド（表２０）またはＡｖｉタグでビオチン標識されたＴａｕモノマーにウェルを１時間曝露し、既にあるように洗浄した。標準的固相Ｆｍｏｃ化学（例えば、Ｆｍｏｃ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ；Ｃｈａｎ，Ｗ．Ｃ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｐ．Ｄ．，Ｅｄｓ．；Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２０００を参照されたい）を使用してペプチドを合成した。９０％のＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液中、５００ｎＭから５０ｐＭまで段階希釈した抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１を、ビオチン標識されたＴａｕでコーティングされたウェルに９０分間結合させた。ウェルを既にあるように洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）遮断緩衝液（それぞれ、ウサギ抗マウスＩｇＧまたはヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ））中１／１０００に希釈したペルオキシダーゼ複合体化二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で結合した抗体を検出した。２０分後、ウェルを既にあるように洗浄し、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ２－Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（ＫＰＬ）でシグナルを発生させた。１Ｍのリン酸を添加することによって反応を停止させ、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２プレートリーダーで４５０ｎＭでの吸光度を測定した。
表２０：ペプチド配列
Figure 2023051929000021
その実験の結果を図１２に示す。図１２Ａは、示されるペプチドに対する示される抗体の各々の結合を示す。その実験において、抗体３７Ｄ３－Ｈ９及び９４Ｂ２－Ｃ１はともに断片１０～２４に強い結合を示し、抗体９４Ｂ２－Ｃ１もまた断片１～１５に強い結合を示した。抗体１９Ｆ８－Ｃ１１及び１２３Ｅ９－Ａ１は断片１９～３３に強い結合を示した一方で、抗体８９Ｆ４－Ａ１は断片２８～４２及び３７～５１に強い結合を示した。図１２Ａを参照されたい。抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１はともにＴａｕ断片２～２４及び２～３４に強い結合を示し、断片１０～２４に弱い結合を示した。図１２Ｂ及び１２Ｃを参照されたい。これらの結果は、抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１が、成熟タンパク質のアミノ酸２～２４内のＴａｕのエピトープに結合することを示唆する。
アラニンスキャニング置換実験において、変異Ｙ１８Ａ及びＬ２０Ａは、マウス抗体３７Ｄ３－Ｈ９によるＴａｕ断片（断片２－２１）への結合を抑止することが見出され、これは、抗体がこれらのＴａｕ残基に接触することを示唆した。一連の１５アミノ酸長のオフセットペプチドを使用すると、マウス抗体３７Ｄ３－Ｈ９が、断片１０－２４と同様の結合を断片９－２３に対して示すことが見出され、断片７－２１、８－２２、及び１１－２５に対する中程度の結合もまた示された。
実施例９：３７Ｄ３－Ｈ９ヒト化抗体の細胞に基づく特性評価
方法
一次海馬及びミクログリア培養物ならびに海馬－ミクログリア共培養物
胎生期（１６～１７日）の野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスから、解離した一次海馬ニューロンを調製した。細胞を、ＰＤＬ／ラミニンでコーティングされた８ウェルのＣｈａｍｂｅｒ Ｓｌｉｄｅ（Ｂｉｏｃｏａｔ、３５４６８８Ｃｏｒｎｉｎｇ）上に２５，０００個の細胞／ウェルでプレーティングした。細胞をプレーティングし、ＮｂＡｃｔｉｖ４（ＢｒａｉｎＢｉｔｓ）中で維持し、半分の培地を１週間に２回交換した。組み換えｔａｕ及び抗体を、１８細胞分裂で培養物に適用した。
ミクログリア培養物について、出生後１～２日のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウスに由来する皮質及び海馬を解離させ、２２５ｍｍ２の培養フラスコ内、ＤＭＥＭ中１０％のＦＢＳ中で１０～１２日間成長させた。培養フラスコを穏やかに振盪してミクログリア解離させ、ＤＭＥＭ中１０％のＦＢＳ中の細胞を、撮像のために、３０，０００個の細胞／ウェルでＰＤＬ／ラミニンでコーティングされた８ウェルのＣｈａｍｂｅｒ Ｓｌｉｄｅ上に、またはサイトカインアッセイのために、１００，０００個の細胞／ウェルでコーティングされていない４８ウェルプレート（３５４８、Ｃｏｒｎｉｎｇ）上のいずれかに再プレーティングした。プレーティングの４～５時間後、細胞を無血清低グルコースＤＭＥＭに交換し、一晩維持してから、組み換えｔａｕ及び抗体で処理した。
２２５ｍｍ２の培養フラスコから解離させたミクログリアを、８ウェルのＳｌｉｄｅ Ｃｈａｍｂｅｒ（１ウェル当たり１２，５００個のミクログリア及び２５，０００個のニューロン）中、インビトロでの培養日数が１８日の一次海馬ニューロン上に再プレーティングすることによって、海馬－ミクログリア共培養物を調製した。ミクログリアプレーティングの４時間後、共培養物を組み換えｔａｕ及び抗体で処理した。
組み換えｔａｕ及び抗体のインビトロ処理
インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物または海馬－ミクログリア共培養物について、組み換えヒトオリゴマーｔａｕ及び抗体（１：１比率で各５００ｎＭ）または対照を、３７℃で、ニューロン培養培地（インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物：新鮮なＮｂＡｃｔｉｖ４（１：１）に由来する馴化培地）中で１時間プレインキュベートしてから、それらを細胞に添加した。細胞を、培地中、ｔａｕ抗体混合物または対照とともに７２時間（海馬培養物）または４８時間（海馬－ミクログリア共培養物）インキュベートした。細胞をＰＢＳで３回洗浄してから、固定した。
ミクログリア培養物について、組み換えヒトオリゴマーｔａｕ及び抗体または対照を、血清の不在下、３７℃で、低グルコースＤＭＥＭ中、各１２５ｎＭ（免疫細胞化学／撮像法）または各２５０ｎＭ（サイトカインアッセイ）で１時間プレインキュベートしてから、細胞に添加した。免疫細胞化学／撮像法について、細胞をｔａｕ抗体混合物または対照とともに１０分間インキュベートし、ＰＢＳで３回洗浄してから、固定した。サイトカインアッセイについて、細胞をｔａｕ抗体混合物または対照とともに２４時間インキュベートし、各ウェルの培地をサイトカインアッセイのために収集した。
免疫細胞化学、撮像法、及び定量化
細胞をＰＢＳ中４％のパラホルムアルデヒドで１５分間固定し、ＰＢＳ中０．１％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００で１０分間透過処理した。１０％のロバ血清を遮断に使用し、細胞を、４℃、ＰＢＳ中で一次抗体とともに一晩インキュベートし、その後、ロバにおいて発達される適切な種（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に対するＡｌｅｘａ－フルオロフォアで標識された二次抗体とともにインキュベートした。使用した一次抗体は、抗ｔａｕ（ＤＡＫＯ）（アミノ酸１１－２４に及ぶヒトＴａｕ Ｎ末端領域に対して発達した、ウサギ抗ヒトＴａｕ）、抗ＭＡＰ２（ａｂ５３９２、Ａｂｃａｍ）、及び抗Ｉｂａ－１（ａｂ５０７６、Ａｂｃａｍ）であった。スライドをＰｒｏｌｏｎｇ Ｇｏｌｄ ＤＡＰＩ（Ｐ３６９３５、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び１番カバースリップとともにマウントした。
Ｚｅｎ２０１０ソフトウェア（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｉｎｃ．）を使用するＬＳＭ７８０（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｉｎｃ．）によって、共焦点蛍光撮像法を実行した。海馬培養物及び海馬－ミクログリア共培養物の撮像のために、Ｐｌａｎ Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ２０×／０．８Ｍ２７対物レンズを使用して、０．９８μｍ間隔の５つのｚスタック画像を収集した。ＭＡＰ２断片化アッセイのために、画像スタックの最大強度のｚ投射を作製し、Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）を使用して分析した。メジアンフィルタ及び最近傍逆重畳を使用して、ノイズを低減した。神経突起成長モジュール、その後、形態学的処理を使用して、神経突起及び細胞体長を分析した。１５ピクセル（６．２２５μｍ）未満の断片を、総シグナル長に対して正規化して、ＭＡＰ２断片化の基準を得た。
α－Ｐｌａｎ Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ１００×／１．４６Ｍ２７対物レンズで、ミクログリアを撮像した。Ｉｍａｇｅ Ｊ（１．４３ｕ、６４ビット、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）で、細胞内での組み換えｔａｕの取り込みの定量化を実行した。Ｉｂａ－１シグナルを基準として使用して、細胞面積の関心領域を手作業で描いた。関心領域のｔａｕ免疫活性の面積及び統合強度を測定して、面積に対して正規化されたｔａｕ免疫活性を得た。全ての分析は、実験条件に対して盲検方式で実行した。
結果
この実験の結果を図１３に示す。図１３Ａに示されるように、完全なエフェクター機能を有する抗体は、ニューロン－ミクログリア共培養物中、Ｔａｕ毒性に対して保護されなかった。図１３Ｂは、オリゴマーＴａｕ及び抗体と接触したニューロン－ミクログリア共培養物の画像（下部パネル）を示す。エフェクター機能を欠く抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ４及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１（Ｎ２９７Ｇ）はＴａｕ毒性に対して保護されていた一方で、３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１は保護されていなかった。
実施例１０：３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧ２ａまたは３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧ２ａ ＤＡＮＧを投与したＴａｕ Ｔｇマウスにおける、Ｔａｕ病理の用量依存性低減
Ｔｈｙ１プロモーター下、ヒトＴａｕ Ｐ３０１Ｌを発現するトランスジェニックマウス（Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ）を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）バックグラウンド上で維持した。Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ及び野生型のマウスの同腹仔を治療群に割り当て、１週間に１回、３０ｍｇ／ｋｇのＩｇＧ２ａ対照（抗ｇｐ１２０）、３、１０、または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａ、３、１０、または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２ａのいずれかを、腹腔内（ｉ．ｐ．）に投薬した。ＤＡＮＧとはＩｇＧ２ａにおけるＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ｇ変異を指し、これはエフェクター機能を抑止する。全ての抗体投薬溶液は、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ５．８）、６％のスクロース、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０中に１０ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。治療は、生後１３週間で開始した。インビボ研究のマウス群はオスであり、３つのコホートへとずらした。加えて、いかなる治療も受けさせることなく、３匹のＴａｕＰ３０１Ｌ－Ｔｇマウスを生後３ヶ月で採取して、治療開始時の病理のベースラインレベルを決定した。
組織を採取するために、２．５％のトリブロモエタノール（２５ｇの体重当たり０．５ｍｌ）でマウスを麻酔し、ＰＢＳで経心灌流した。脳を採取し、二分した。右半球を４％のパラホルムアルデヒド中に４℃で一晩固定し、その後、リン酸緩衝食塩水に移してから、免疫組織化学的検査のために処理した。左半球を氷上で解剖分割し、その後、生化学的分析のために－８０℃で凍結させた。全てのマウスから尾クリップを取って、遺伝子型を確認した。
ＭｕｌｔｉＢｒａｉｎ（登録商標）ブロック（ＮｅｕｒｏＳｃｉｅｎｃｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮ）を使用して、ゼラチンマトリックスに半脳を多重包埋処理し、２５μｍの厚さで冠状に切開した。各ブロック内で、遺伝子型及び治療に対して脳の位置をランダム化した。個々のマウスの半脳またはＭｕｌｔｉＢｒａｉｎ（登録商標）ブロックの浮遊切片を既に記載されるように染色（Ｌｅ Ｐｉｃｈｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，８（４）：ｅ６２３４２）したが、Ｔｒｉｓ緩衝食塩水の代わりにＰＢＳで洗浄し、室温の代わりに４℃で一次抗体インキュベーションした。一次抗体は、ウサギ抗ｐＴａｕ２１２／２１４（自家生成、０．０１μｇ／ｍｌ）であった。高バックグラウンド染色を回避するために、サブタイプ特異的なマウス一次抗体の場合、本発明者らは、対応するサブタイプ特異的二次抗体（例えば、ビオチン標識された抗マウスＩｇＧ３、Ｂｅｔｈｙｌ Ａ９０－１１１Ｂ）を使用した。
２００×の拡大率で０．５μｍ／ピクセルの解像度である、Ｌｅｉｃａ ＳＣＮ４００（Ｌｅｉｃａ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｂｕｆｆａｌｏ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ）全スライドスキャニングシステムを使用して、免疫組織化学染色したスライドを撮像した。１匹の動物当たり４つの一致した海馬レベル上に、関心領域（ＲＯＩ）を手作業で描き、これらのＲＯＩ内の染色の量を、以下に記載される２つのエンドポイントを使用して自動化した様式で定量化した。全ての画像分析は、遺伝子型及び治療群に対して盲検方式で実行した。ＩＨＣ染色の定量化のための正ピクセル面積分析のために、抗体標識された脳切片のデジタル画像を既に記載されるように分析した（Ｌｅ Ｐｉｃｈｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。総正ピクセルをＲＯＩの総ピクセル面積に対して正規化することによって、染色された面積パーセントを計算した。正ピクセル面積にのみ、ランベルト・ベールの法則、吸光度＝－ｌｏｇ（伝達された光強度／入射光強度）を使用して、統合強度を計算した。
その実験の結果を図１４に示す。抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａまたは抗ｔａｕ ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２ａの投与は、海馬内でｐＴａｕ２１２／２１４の用量依存性の低減をもたらした。
実施例１１：ヒト化３７Ｄ３－Ｈ９カッパ１変異形
カッパ１軽鎖を有するｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１に基づくヒト化抗体変異形を作製し、Ｎ２８安定性について試験した。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１で試験した３つの変異形の軽鎖可変領域の整列を、図１８に示す。３つの変異形の軽鎖可変領域は互いに異なり、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ３９は変異Ｆ３３Ｌを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４０は変異Ｇ２９Ｔを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４１は変異Ｎ３０Ｑを含有する。
抗体試料に以下のように熱応力をかけた。試料を、２０ｍＭの酢酸ヒスチジン、２４０ｍＭのスクロース（ｐＨ５．５）へと緩衝液交換し、１ｍｇ／ｍｌの濃度に希釈した。１ｍｌの試料に４０℃で２週間応力をかけ、２番目を対照として－７０℃で保管した。その後、トリプシンを使用して両方の試料を消化して、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）－質量分析法（ＭＳ）分析を使用して分析され得るペプチドを作製した。試料中の各ペプチドについて、ＬＣからの保持時間、ならびに高解像度精密質量及びペプチドイオン断片化情報（アミノ酸配列情報）を、ＭＳにおいて取得した。抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）を、±１０ｐｐｍのウィンドウにおけるデータ組から目的とされるペプチド（天然及び修飾ペプチドイオン）について行い、ピークを統合して、面積を決定した。（修飾ペプチドの面積）を（修飾ペプチドの面積＋天然ペプチドの面積）で除し、１００を乗ずることによって、各試料に対する修飾の相対的パーセンテージを計算した。その後、対照（ｔ＝０）試料と応力をかけた（ｔ＝２週間）試料との間のこれらの相対的パーセンテージを比較した。示されるパーセンテージは、応力をかけた（ｔ＝２週間）値から対照（ｔ＝０）値を引いたものを表す。結果を表２１に示す。結果は、Ｆ３３Ｌ変異がカッパ１ヒト化軽鎖内の脱アミド化の低減に有効であることを示す。
表２１－脱アミド化の応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形の安定性
Figure 2023051929000022
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＦＡｂ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、ヒト化抗体変異形の親和性を２５℃で測定した。抗体を、ＨＢＳＰ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）中、１μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１８０秒間捕捉した。単一サイクル動態方法論及び３０μｌ／分の流量を使用して、ＨＢＳＰ中、１．２、３．７、１１、３３、及び１００ｎＭで注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。各濃度のＴａｕモノマーを３分間注入し、解離を１０分間監視した。サイクル間に、１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．１）の２回連続の１分間の注入で、表面を再生させた。ＢＩＡＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して、データを１：１の結合モデルにフィットさせた。各抗体を実験内で２回分析し、表２２のデータは平均±範囲として示す。
表２２：ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形のモノマーＴａｕへの親和性
Figure 2023051929000023
実施例１２：カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態及び薬力学
インビボでのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ抗体及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の薬物動態及び薬力学を評価するために、１群当たり５匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、第１相において５０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内ボーラス注射を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大３５日目までの様々な時点で、血漿及びＣＳＦ試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。最終試料収集後、第２相の開始前に動物を６３～６４日間回復させた。第２相において、第１相の１５匹の動物＋追加の３匹の動物を２つの群に分け、第１の群（ｎ＝９）に抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを投与し、第２の群（ｎ＝９）にｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体を、ともに５０ｍｇ／ｋｇで投与した。用量後２日目及び１０日目に、１群当たり４または５匹の動物の脳を採取した。
カニクイザル血漿、ＣＳＦ、及び脳ホモジネート（以下に記載）内のヒトＩｇＧ４抗体を、ヒツジ抗ヒトＩｇＧサル吸着抗体コートを使用してＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加、１：２０の希釈度で開始してＣＳＦ試料を添加、または１：１０の希釈度で開始してホモジネート試料を添加し、検出のためにサル吸着した西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ヒトＩｇＧ抗体を添加することによって終了した。３，３’，５，５’－テトラメチルベンジジンを使用して色を発生させ、１Ｍのリン酸を使用して中和した。４５０／６２０ｎｍで試料を読み取った。アッセイは、０．１５６～２０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、ならびに血漿では０．０２μｇ／ｍＬ、ＣＳＦでは０．００３μｇ／ｍＬ、及びホモジネートでは０．００２μｇ／ｍＬの検出限界を有する。この濃度未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
薬物動態分析の結果を、図１９Ａ（血漿）及び１９Ｂ（ＣＳＦ）、ならびに表２３及び２４に示す。抗治療抗体陽性（ＡＴＡ＋）であると疑われた動物は、分析から除外した。これらのデータは、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８ＰのＦｃ領域へのＹＴＥ変異の導入が、約２倍だけ、抗体の末梢及びＣＳＦクリアランス率を減速させたことを示す。
表２３：単回静脈内ボーラス用量後の平均（±標準偏差）血漿クリアランス及びＣｍａｘ推定
Figure 2023051929000024
表２４：単回静脈内ボーラス用量後の平均（±標準偏差）ＣＳＦ Ｃｍａｘ推定
Figure 2023051929000025
注射後２及び１０日目の抗体の脳濃度を、以下のように決定した。脳組織を秤量し、その後、ｃＯｍｐｌｅｔｅ（商標）、Ｍｉｎｉ、無ＥＤＴＡプロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤を含有するリン酸緩衝食塩水中１％のＮＰ－４０中でホモジナイズした。その後、ホモジナイズした脳試料を４℃で１時間回転させてから、１４，０００ｒｐｍで２０分間スピンした。上記のＥＬＩＳＡによる脳抗体測定のために上清を単離した。その実験の結果を図２１Ａ～Ｄに示す。脳内の抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの濃度、及び抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの脳：血漿濃度の比率は、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐよりも高い傾向にあった。
血漿中での薬力学的応答もまた、決定した。電気化学ルミネセンス（ＥＣＬ）イムノアッセイ（Ｒｏｃｈｅ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（ＲＰＤ），Ｐｅｎｚｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、Ｋ２ＥＤＴＡ血漿中の総Ｔａｕの濃度を決定した。Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）イムノアッセイをヒトＣＳＦ内の総Ｔａｕの定量化について検証し、ヒトＴａｕとカニクイザルＴａｕとの間の類似性のために、ＣＳＦ及び血漿中のカニクイザルＴａｕの測定に許容されると見なされた。アッセイは、ヒトＴａｕ及びカニクイザルＴａｕのアミノ酸１５９－２２４（リン酸化状態とは独立して、全ての既知のアイソフォームに存在する領域）を捕捉し、検出する。アッセイの検出下限（ＬＤＬ）は、１．０１ｐｇ／ｍＬである。アッセイは、１５．０ｍｇ／ｍＬのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを許容する。
薬力学的分析の結果を図２０に示す。ＡＴＡ＋であると疑われた動物、及びベースライン値を欠いた別の動物を除外した後、１群当たり３匹の動物が存在した。驚くべきことに、投薬の第１日目の間に、血漿Ｔａｕレベルは、非ＹＴＥ変異形で治療した動物に対して、ＹＴＥ変異形で治療した動物において、より大きな程度まで上昇する。更に、初期時点では変異形間でＰＫは同様であるため、その結果は薬物動態応答（図２０）からは予想されていない。試料採取の期間全体にわたってＹＴＥ変異形で治療した動物では、より頑強な応答が持続される。
実施例１３：カニクイザル脳内のｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態及び薬力学
脳内の抗体薬物動態を評価するために、１群当たり１２匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、５０ｍｇ／ｋｇの用量でｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの単回静脈内ボーラス注射を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大４２日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。加えて、最大４２日目までの様々な時点で、２匹のサルを屠殺し、抗体の脳及びＣＳＦ濃度を決定した。
抗体濃度は、実施例１２に実質的に記載されるように決定した。
図２２Ａ～Ｂは、対数（Ａ）及び直線（Ｂ）スケールでプロットした、用量後の様々な時点でのカニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。表２５は、脳濃度パラメータを示す。
表２５：単回静脈内ボーラス用量後の、平均（±標準偏差）脳ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000026
ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体は、抗ｇＤと比較して、終了時点で脳濃度の増加を示した。
海馬、小脳、及び前頭皮質を含む、脳の様々な領域内の抗体の濃度もまた決定した。図２３Ａ～Ｃ及び表２６～２８は、その分析の結果を示す。
表２６：単回静脈内ボーラス用量後の、平均海馬ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000027
表２７：単回静脈内ボーラス用量後の、平均小脳ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000028
表２８：単回静脈内ボーラス用量後の、平均前頭皮質ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000029
その実験の結果は、単回静脈内注射後の、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥへの、脳の様々な領域の曝露を示す。脳内の全体的曝露は２つの群にわたって同等であったが、血漿中での観察と同様に、抗ｇＤを投薬した動物と比較して、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを投薬した動物において、終了時点で、脳内の抗体濃度の約２倍の増加が存在した。図２３を参照されたい。これらの結果は、ＹＴＥ抗体の投薬後、脳内でのより高いトラフ（終了時）濃度の維持を示唆する。
経時的なＣＳＦ及び血漿中での抗体の濃度もまた、決定した。図２３Ｄ（ＣＳＦ）及び２３Ｅ（血漿）ならびに以下の表２９及び３０は、その分析の結果を示す。
表２９：単回静脈内ボーラス用量後の、平均ＣＳＦ ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000030
表３０：単回静脈内ボーラス用量後の、平均血漿ＰＫパラメータ推定
Figure 2023051929000031
再び、血漿及び脳薬物動態と同様に、抗ｇＤを投薬した動物と比較して、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを投薬した動物において、終了時点で、ＣＳＦ及び血漿中、約２倍の抗体濃度の増加が存在した。図２３を参照されたい。
カニクイザルから収集された血漿試料を使用して、単回静脈内５０ｍｇ／ｋｇ用量後の、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ及び対照抗体の血漿薬力学を評価した。実施例１２において考察したＥｌｅｃｓｙｓ（登録商標）イムノアッセイを使用して、血漿Ｔａｕを定量化した。
薬力学的分析の結果を図２４Ａ～Ｂに示す。図２４Ａは、ベースラインに対して正規化された平均総血漿Ｔａｕ濃度を示す。図２４Ｂは、本研究の個々のサルにおける、ベースラインに対して正規化された総血漿Ｔａｕ濃度を示す。実施例１２において観察された結果と同様に、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの投与は、有意な血漿Ｔａｕレベルの増加をもたらした。いかなる特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、これらのデータは、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥが脳内でＴａｕに結合し、結果としてＴａｕが脳から末梢へと除去されることを示唆する。これらの結果は、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥによる脳内の標的結合と一貫する。
実施例１４：抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４の親和性成熟
スキャニング変異誘発ライブラリのディープ配列決定によって、３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４の親和性成熟を行った。各抗体鎖について１つずつ、２つのライブラリを設計し、任意のアミノ酸またはアンバー終止コドンをコードするＮＮＫ（ＩＵＰＡＣコード）コドンで重鎖または軽鎖可変領域内の選択された位置をランダム化した。この設計は、１つのクローン当たり抗体可変領域内に１つのアミノ酸変化のみを許容する。位置は、ＣＤＲに直接接触しているか、またはＣＤＲの近くにあるＣＤＲ及びフレームワーク位置から選択された。軽鎖Ｋａｂａｔ番号付け１～５、２４～２７、２９～３６、３８、４３、４４、４６～５８、６０、６３～７１、８７、及び８９～９７、ならびに重鎖Ｋａｂａｔ番号付け１、２、４、２４～３９、４３、４５～８１、８２ａ、８２ｂ、８３、８５、８６、９１、及び９３～１０３をＮＮＫコドンでランダム化した。２８位をランダム化しなかった軽鎖クローンは、野生型Ａｓｎの代わりに２８位にＳｅｒを有した。２つの異なるＤＮＡ断片を使用して、軽鎖の２８位をランダム化した。一方のクローンはコドンＶＮＫを有し、他方のクローンはＮＹＫコドンを有し、これはＴｙｒ、Ｃｙｓ、Ｔｒｐ、及び終止コドンを除く任意のアミノ酸を許容した。ＤＮＡ合成（ＧｅｎｅＷｉｚ）によってライブラリを作製し、軽鎖について６０個及び重鎖について７５個の独立した線状ＤＮＡ断片を産生し、各断片内の１つの位置は、ＮＮＫコドンまたはＶＮＫ／ＮＹＫ混合物でランダム化した。各鎖の線状ＤＮＡ断片をプールし、一価Ｆａｂ断片ファージ提示ベクターへとクローニングした（Ｌｅｅ ＣＶ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２８４：１１９－１３２（２００４）を参照されたい）。軽鎖ライブラリクローンは野生型重鎖可変領域を有した一方で、重鎖ライブラリクローンはＮ２８Ｓ変異を有する軽鎖可変領域を有した。連結産生物をＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＸＬ－１へと電気穿孔し、Ｍ１３ ＫＯ７ヘルパーファージ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）で重感染させ、記載されるように成長させた（Ｋｏｅｎｉｇ Ｐ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９０：２１７７３－２１７８６（２０１５）を参照されたい）。
ＥＬＩＳＡプレートに吸着したＴａｕモノマータンパク質（１巡目）、またはヒトＴａｕの残基２～２４（ビオチン－ＰＥＧ－ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ、配列番号６２４）を包含するＮ末端がビオチン標識されたペプチドの溶液（２及び３巡目）を使用して、３巡の連続選別を実行した。第１巡目に、ファージ（１ＯＤ２６８／ｍｌ）を、周囲温度でＴａｕでコーティングされたＥＬＩＳＡプレートとともに２時間インキュベートした。第２及び第３巡目に、ファージ（５ＯＤ２６８／ｍｌ）を、周囲温度で１００ｎＭのビオチン標識されたＴａｕペプチドとともに２時間インキュベートし、その後、５倍に希釈し、ニュートラアビジン（Ｐｉｅｒｃｅ）でコーティングされたＥＬＩＳＡプレート上に１０分間捕捉した。ファージ捕捉及び洗浄後、捕捉されたファージを含有するウェルを結合緩衝液（ＰＢＳ、０．５％のウシ血清アルブミン）とともに更に２０分間インキュベートすることによって、第３巡目に厳密性を増加させた。その後、洗浄ステップを反復した。０．１Ｍの塩酸とともにインキュベートすることによって、ファージをＥＬＩＳＡプレートから溶出させ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉの感染、その後、Ｍ１３ＫＯ７ヘルパーファージ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）での重感染によって増殖させた。次世代配列決定によって分析を容易にするために、３巡目に直前に記載される選択と並行して「偽」選択を実行した。陰性対照または基準試料を提供することが意図される「偽」選択は、直前に記載される３巡目と同じであるが、ビオチン標識されたペプチドの添加を省略した方法を使用して実行した。
個々のコロニーのサンガー配列決定によって、初期結果を得た。
加えて、ファージ増幅に使用したＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＸＬ－１集団からプラスミドＤＮＡを抽出した。Ｐｈｕｓｉｏｎ ＤＮＡポリメラーゼ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）を使用する１８サイクルＰＣＲ増幅、その後、増幅産物のアガロースゲル精製によって、挿入物を増幅した。既に記載されるように、Ｉｌｌｕｍｉｎａ配列決定によって、増幅産物を配列決定した（Ｋｏｅｎｉｇ Ｐ．，ｅｔ ａｌ．（２０１５）．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９０，２１７７３－２１７８６）。ＰＣＲプライマー配列を使用して、かつ親配列よりも長いもしくは短い配列、または可変領域内に２つ以上のコード変異を含有する配列を除去することによって、配列を濾過した。１つの集団における所与の位置での所与の変異の頻度を、第２の集団における全く同じ変異の頻度で除することによって、濃縮比率を計算した。以下の略称を使用して、集団を命名した。
Ｒ０－未選別のライブラリ
Ｒ２－１００ｎＭのビオチン標識されたペプチドを使用する２巡目の選択に由来するファージ
Ｒ３－１００ｎＭのビオチン標識されたペプチドを使用する３巡目の選択に由来するファージ
Ｒ３Ｍ－３巡目の「偽」選択に由来するファージ
個々または組み合わせのいずれかで、選択された変異をｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４可変ドメイン上に移し、合成し、ＩｇＧ哺乳動物細胞発現ベクターへとクローニングした。場合によっては、選択された変異を、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４とは異なるようにヒト化されている可変ドメイン上に移した。上記のファージ提示手順によって特定される変異を含有する別のヒト化抗体の例としては、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３が挙げられる。
一過性トランスフェクションによって重鎖及び軽鎖プラスミドをＥｘｐｉ２９３細胞内で発現させ、樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を有する親和性クロマトグラフィーを使用して上清からＩｇＧを精製した。表面プラズモン共鳴を使用して、精製されたＩｇＧをヒトＴａｕモノマーに対する結合について分析した。簡潔には、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ及びヒトＩｇＧ捕捉キット（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して生成されたヒトＩｇＧ捕捉チップ上に抗体を捕捉した。捕捉された抗体を溶液中のヒトＴａｕモノマーに曝露し、会合相及び解離相を監視した。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して１：１の結合モデルを動態データにフィットさせることによって、親和性を計算した。
ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３と、親ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４との軽鎖及び重鎖可変領域の比較を、図２５Ａ～Ｂに示す。黒色の陰影は、親和性成熟抗体と親抗体との間で異なるアミノ酸を示す。
親和性成熟ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３抗体を、それらとヒト及びカニクイザル組み換えＴａｕモノマーとの一価相互作用について評価した。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐを使用して、３７℃でヒト及びカニクイザルＴａｕへの親和性を測定した。抗体を、泳動緩衝液ＨＢＳ－ＥＰ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）中、１μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の接触時間、及び９００秒間の解離時間を使用して、各々に０、０．１、０．４、１．２、３．７、１１．１、及び３３．３ｎＭで注射したヒト及びカニクイザルＴａｕモノマーの結合のデータを収集した。サイクル間に、３Ｍの塩化マグネシウムの注入で、表面を再生させた。ＢＩＡＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して、データを１：１の結合モデルにフィットさせた。
図２６Ａは、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６抗体のヒトＴａｕモノマーへの親和性データを提示し、各曲線は、異なる抗体濃度を表す。図２６Ｂは、カニクイザル（ｃｙｎｏ）Ｔａｕモノマーについてのこれらのデータを提示する。親和性精製ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ７６、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ８３、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ９３抗体は各々、表３１に示されるように、ヒト及びカニクイザルＴａｕモノマーの両方について３７℃で０．１ｎＭのＫＤを有した。並行実験において、親ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４抗体は、５～８ｎＭのＫＤを有した（データ示さず）。
表３１：ｈｕ３７Ｄ３親和性成熟抗体の親和性測定
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前述の発明が明瞭な理解のために例証及び実施例によって多少詳細に説明されているが、これらの説明及び実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に引用される全ての特許及び科学文献の開示は、それらの全体が参照により明示的に組み込まれる。
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本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、方法または使用は、少なくとも１つの追加の療法と組み合わせて本明細書に記載される抗体を投与することを含んでもよい。追加の療法の非限定的な例としては、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、及び他の治療剤が挙げられる。そのような他の治療剤としては、他の抗Ｔａｕ抗体、アミロイド－ベータに対する抗体、ベータ－セクレターゼ１に対する抗体（「ＢＡＣＥ１」）、及びベータ－セクレターゼ１の阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
＜本発明の更なる実施態様＞
［実施形態１］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む、前記単離抗体。
［実施形態２］
前記抗体が、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、実施態様１に記載の抗体。
［実施形態３］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、前記単離抗体。
［実施形態４］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、前記単離抗体。
［実施形態５］
前記抗体が、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する、実施態様１に記載の抗体。
［実施形態６］
前記抗体が、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する、実施態様１または実施態様２に記載の抗体。
［実施形態７］
モノクローナル抗体である、実施態様１～３のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態８］
ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態９］
ヒトＴａｕに結合する抗体断片である、先行実施態様のいずれか一に記載の抗体。
［実施形態１０］
前記ヒトＴａｕが、配列番号２の配列を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の抗体。
［実施形態１１］
前記抗体が、
ａ）配列番号６０３と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む、先行実施態様のいずれか一に記載の抗体。
［実施形態１２］
前記抗体が、
ａ）配列番号６０３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｂ）配列番号６０４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
ｄ）配列番号６１４の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｅ）配列番号６１５の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
ｇ）配列番号６１９の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
ｈ）配列番号６２０の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む、先行実施態様のいずれか一に記載の抗体。
［実施形態１３］
前記抗体が、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態１４］
前記抗体が、配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態１５］
前記抗体が、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態１６］
前記抗体が、（ａ）配列番号３４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｂ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｃ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｄ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｅ）配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｆ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｇ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｈ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態１７］
前記抗体が、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態１８］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、前記単離抗体。
［実施形態１９］
前記抗体が、
ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
ｂ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
ｃ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
ｄ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
ｅ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
ｆ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態２０］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、（ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、前記単離抗体。
［実施形態２１］
ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、前記単離抗体。
［実施形態２２］
前記抗体が、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体である、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態２３］
前記抗体が、ＩｇＧ４抗体である、実施態様２２に記載の単離抗体。
［実施形態２４］
前記抗体が、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含む、実施態様２３に記載の単離抗体。
［実施形態２５］
前記抗体が、Ｓ２２８Ｐ変異を含む、実施態様２３または実施態様２４に記載の単離抗体。
［実施形態２６］
抗体断片である、実施態様１～１８及び２２～２５のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態２７］
前記抗体が、モノマーＴａｕ、リン酸化Ｔａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びオリゴマーＴａｕの各々に、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、または１ｎＭ未満のＫ Ｄ で結合する、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態２８］
前記抗体が、ヒトモノマーＴａｕに１ｎＭ未満のＫ Ｄ で結合する、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態２９］
Ｋ Ｄ が、３７℃で表面プラズモン共鳴によって決定される、実施態様２７または実施態様２８に記載の単離抗体。
［実施形態３０］
カニクイザルＴａｕに結合する、先行実施態様のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態３１］
先行実施態様のいずれか一に記載の抗体をコードする、単離核酸。
［実施形態３２］
実施態様３１に記載の核酸を含む、宿主細胞。
［実施形態３３］
前記抗体の産生に好適な条件下で、実施態様３２に記載の宿主細胞を培養することを含む、抗体の産生方法。
［実施形態３４］
実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体と、第２の治療剤と、を含む、免疫複合体。
［実施形態３５］
実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体と、検出可能な標識と、を含む、標識された抗体。
［実施形態３６］
実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
［実施形態３７］
Ｔａｕタンパク質関連疾患の治療方法であって、実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体、または実施態様３６に記載の薬学的組成物を、Ｔａｕタンパク質関連疾患を有する個体に投与することを含む、前記方法。
［実施形態３８］
前記Ｔａｕタンパク質関連疾患が、タウオパチーである、実施態様３７に記載の方法。
［実施形態３９］
前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、実施態様３８に記載の方法。
［実施形態４０］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症（ｆｒｏｎｔｏｔｅｔｅｍｐｏｒａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病（Ｈａｌｌｅｖｏｒｄｅｎ－Ｓｐａｔｚ ｄｉｓｅａｓｅ）、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症（Ｐａｌｌｉｄｏ－ｐｏｎｔｏ－ｎｉｇｒａｌ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、実施態様３７または実施態様３８に記載の方法。
［実施形態４１］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、実施態様３８～４０のいずれか一に記載の方法。
［実施形態４２］
個体における認知記憶容量の保持もしくは増加方法、または記憶喪失の減速方法であって、実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体、または実施態様３６に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
［実施形態４３］
個体におけるＴａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減方法であって、実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体、または実施態様３６に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
［実施形態４４］
前記方法が、少なくとも１つの追加の療法を投与することを含む、実施態様３７～４３のいずれか一に記載の方法。
［実施形態４５］
前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、Ｔａｕ阻害剤、抗アミロイドベータ抗体、ベータ－アミロイド凝集阻害剤、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、実施態様４４に記載の方法。
［実施形態４６］
医薬品として使用するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態４７］
個体におけるタウオパチーの治療に使用するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態４８］
前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、実施態様４７に記載の単離抗体。
［実施形態４９］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、実施態様４７または実施態様４８に記載の単離抗体。
［実施形態５０］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、実施態様４７～４９のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態５１］
個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速に使用するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態５２］
個体におけるＴａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減に使用するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態５３］
前記抗体が、少なくとも１つの追加の療法とともに使用するためのものである、実施態様４７～５２のいずれか一に記載の単離抗体。
［実施形態５４］
前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、抗アミロイドベータ抗体、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、実施態様５３に記載の単離抗体。
［実施形態５５］
個体におけるＴａｕタンパク質関連疾患の治療のための医薬品を製造するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体の使用。
［実施形態５６］
前記Ｔａｕタンパク質関連疾患が、タウオパチーである、実施態様５５に記載の使用。
［実施形態５７］
前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、実施態様５６に記載の使用。
［実施形態５８］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、実施態様５６または実施態様５７に記載の使用。
［実施形態５９］
前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、実施態様５６～５８のいずれか一に記載の使用。
［実施形態６０］
個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速のための医薬品を製造するための、実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体の使用。
［実施形態６１］
前記医薬品が、少なくとも１つの追加の療法とともに投与するためのものである、実施態様５５～６０のいずれか一に記載の使用。
［実施形態６２］
前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、抗アミロイドベータ抗体、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、実施態様６１に記載の使用。
［実施形態６３］
神経原線維変化、神経絨毛糸、または変性神経突起の検出方法であって、試料を実施態様１～３０のいずれか一に記載の抗体と接触させることを含む、前記方法。
［実施形態６４］
前記試料が、脳試料、脳脊髄液試料、または血液試料である、実施態様６３に記載の方法。
＜配列表＞
SEQUENCE LISTING

<110> AC IMMUNE SA
GENENTECH, INC.

<120> ANTI-TAU ANTIBODIES AND METHODS OF USE

<130> 01147-0007-00PCT

<150> US 62/431,180
<151> 2016-12-07

<160> 624

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1
<211> 456
<212> PRT
<213> Homo sapiens


<220>
<221> misc_feature
<223> Human Tau sequence

<400> 1

Met His His His His His His Gly Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser
1 5 10 15


Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
20 25 30


Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His Gln
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Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu Gln
50 55 60


Thr Pro Thr Glu Asp Gly Ser Glu Glu Pro Gly Ser Glu Thr Ser Asp
65 70 75 80


Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Asp Val Thr Ala Pro Leu Val Asp
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Glu Gly Ala Pro Gly Lys Gln Ala Ala Ala Gln Pro His Thr Glu Ile
100 105 110


Pro Glu Gly Thr Thr Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly Asp Thr Pro Ser
115 120 125


Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala Arg Met Val Ser
130 135 140


Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys Ala Lys Gly Ala
145 150 155 160


Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala Ala Pro Pro Gly
165 170 175


Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala Lys Thr Pro Pro
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Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro Lys Ser Gly Asp
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210 215 220


Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro Pro Thr Arg Glu Pro Lys Lys
225 230 235 240


Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser Ser Ala Lys Ser
245 250 255


Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met Pro Asp Leu Lys Asn Val Lys
260 265 270


Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln Pro Gly Gly Gly
275 280 285


Lys Val Gln Ile Ile Asn Lys Lys Leu Asp Leu Ser Asn Val Gln Ser
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Lys Cys Gly Ser Lys Asp Asn Ile Lys His Val Pro Gly Gly Gly Ser
305 310 315 320


Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser Lys Val Thr Ser Lys
325 330 335


Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro Gly Gly Gly Gln Val
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Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp Arg Val Gln Ser Lys
355 360 365


Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro Gly Gly Gly Asn Lys
370 375 380


Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu Asn Ala Lys Ala Lys
385 390 395 400


Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser Pro Val Val Ser Gly
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Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser Ser Thr Gly Ser Ile
420 425 430


Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ala Asp Glu Val Ser
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<212> PRT
<213> Homo sapiens


<220>
<221> misc_feature
<223> Human Tau epitope (2-24)

<400> 2

Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
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Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys
20


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<212> PRT
<213> Macaca fascicularis


<220>
<221> misc_feature
<223> Cynomolgus monkey Tau sequence

<400> 3

Met His His His His His His Gly Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser
1 5 10 15


Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Asp Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
20 25 30


Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Glu Gly Tyr Thr Met Leu Gln
35 40 45


Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu Gln
50 55 60


Thr Pro Ala Glu Asp Gly Ser Glu Glu Leu Gly Ser Glu Thr Ser Asp
65 70 75 80


Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Asp Val Thr Ala Pro Leu Val Asp
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Glu Arg Ala Pro Gly Glu Gln Ala Ala Ala Gln Pro His Met Glu Ile
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Pro Glu Gly Thr Thr Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly Asp Thr Pro Ser
115 120 125


Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala Arg Met Val Ser
130 135 140


Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys Ala Lys Gly Ala
145 150 155 160


Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala Ala Pro Pro Gly
165 170 175


Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala Lys Thr Pro Pro
180 185 190


Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro Lys Ser Gly Asp
195 200 205


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Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser Ser Ala Lys Ser
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Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln Pro Gly Gly Gly
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Lys Val Gln Ile Ile Asn Lys Lys Leu Asp Leu Ser Asn Val Gln Ser
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Lys Cys Gly Ser Lys Asp Asn Ile Lys His Val Pro Gly Gly Gly Ser
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Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser Lys Val Thr Ser Lys
325 330 335


Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro Gly Gly Gly Gln Val
340 345 350


Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp Arg Val Gln Ser Lys
355 360 365


Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro Gly Gly Gly Asn Lys
370 375 380


Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu Asn Ala Lys Ala Lys
385 390 395 400


Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser Pro Val Val Ser Gly
405 410 415


Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser Ser Thr Gly Ser Ile
420 425 430


Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ala Asp Glu Val Ser
435 440 445


Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu
450 455


<210> 4
<211> 23
<212> PRT
<213> Macaca fascicularis


<220>
<221> misc_feature
<223> Cynomolgus monkey Tau epitope (2-24)

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000

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<400> 6
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<400> 7
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<400> 8
000

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<400> 9
000

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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Ala Lys Pro Gly Gly
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Ser Leu Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
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Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
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<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: 37D3-H9 light chain variable region (VL)

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20 25 30


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35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


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65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
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Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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Thr Ile Ser Gly Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15


Gly



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Ser Leu Lys Val Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Asp Trp Val
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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
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Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


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35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
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50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
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Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
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Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
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50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile
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Gly Leu Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Val Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
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Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
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Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala



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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser
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Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
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Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
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Gly



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Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Arg Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
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Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser
65 70 75 80


Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile Tyr
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Asp Arg Val Asn Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gly Leu Leu Ile
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Tyr Ser Ala Ser Ile Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60


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65 70 75 80


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Trp Met Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ala Ser Asn Phe Ser
65 70 75 80


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20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly His Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Arg Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ile Asn Val Gln Ser
65 70 75 80


Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Phe Ser Thr Tyr Pro Tyr
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Thr Phe Gly Val Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Tyr
20 25 30


Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Phe Pro Lys Phe
50 55 60


Gln Gly Lys Ala Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Ser Lys Thr Ala Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Asn Ala Trp Arg Ala Arg Ala Thr Asn Ser Ala Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110


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20 25 30


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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
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Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
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Tyr Met Lys Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45


Gly Asp Leu Asn Pro Lys Asn Gly Gly Ile Ile Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60


Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80


Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Phe Tyr Cys
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Ala Arg Ser Gly Gly Tyr Gly Asp Ser Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
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Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
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Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asn Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Phe Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110


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Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp
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Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Ser Lys Phe
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Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Thr Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Leu Asp Phe Ala Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val
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Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


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100 105 110


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Gly



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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Lys Gly
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Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
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Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Arg Ile Arg Ser Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Ala Tyr Phe Ala Asp
50 55 60


Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Gln Thr Met
65 70 75 80


Leu Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr
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Ser Glu Gln Arg Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
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Ser Pro Lys Leu Leu Ile Ser Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
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Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80


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Lys Ser Ser Gln Ser Val Phe Tyr Ser Ser Glu Gln Arg Asn Tyr Leu
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Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
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Tyr Val Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Leu Ile Asn Pro Asn Asn Gly Arg Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
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Asn Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Phe
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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser
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Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
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Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Ala Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
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Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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Leu Ile Asn Pro Asn Asn Gly Arg Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Asn
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Asp



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Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe
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Tyr Met Glu Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45


Ala Ala Ser Lys Asn Lys Ala Asn Asp Tyr Thr Thr Glu Tyr Asn Ala
50 55 60


Ser Val Lys Asp Arg Phe Phe Val Ser Arg Asp Thr Ser Gln Ser Ile
65 70 75 80


Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr
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Tyr Cys Ala Arg Asp Ala Leu Gly Thr Val Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
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Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
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Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
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Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Phe Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95


Thr Leu Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110


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Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His
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Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Ile Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr
20 25 30


Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45


Val Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Thr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60


Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80


Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
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Arg Gln Gly Gly Phe Ile Thr Thr Ala Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110


Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120


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Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
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Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30


Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45


Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60


Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80


Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln
85 90 95


Ser Tyr Asn Leu Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110


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Ser Tyr Gly Val His
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Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Thr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser
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Gln Gly Gly Phe Ile Thr Thr Ala Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
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Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu
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Ala



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Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
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Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Cys
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Ser Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45


Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Phe
65 70 75 80


Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Ser Tyr Phe Cys
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Gly Thr Ala Tyr Tyr Arg Tyr Asp Gly Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
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Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120


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Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
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Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser
20 25 30


Ser Tyr Ser Tyr Met His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45


Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60


Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80


Pro Val Glu Glu Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
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Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
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Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Lys Glu Asp Thr Ala Thr Phe Phe Cys
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Asn Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly
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Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Leu Leu
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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu
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Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr His Tyr
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Trp Met His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Tyr Ile Tyr Pro Thr Asn Asp Tyr Thr Lys Tyr Asn Gln Asn Phe
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Arg Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Asn Ser Ala Tyr
65 70 75 80


Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Tyr Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
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Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60


Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80


Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
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Leu Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
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Asp



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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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50 55 60


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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
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Glu Asp Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


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Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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Gly



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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220


Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240


Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255


Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270


Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285


Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300


Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320


Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335


Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350


Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365


Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380


Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400


Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415


Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430


His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445


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Glu Asp Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160


Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205


Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215


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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser
115


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Glu Asp Val Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15


Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


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Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15


Gly



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Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Phe Glu
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Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Leu Thr Gly Tyr
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Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Leu Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Val Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
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Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80


Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Gln Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110


Ser



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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser
20 25 30


Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Gln Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
85 90 95


Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


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Leu Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Val Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
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Gly



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Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30


Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
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Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Ile Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Phe Arg Thr Tyr Pro Tyr
85 90 95


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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
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Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Gln Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu
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Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
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Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Tyr Ser Ala Ser Ile Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30


Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Gln Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu
50 55 60


Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80


Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
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Tyr Cys Thr Gly Gly Thr Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110


Val Ser Ser
115


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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Ile Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Arg Thr Tyr Pro Tyr
85 90 95


Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105


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Asn Tyr Trp Met Asn
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Gln Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu Ser
1 5 10 15


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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser
115


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Asp Asp Val Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
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Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


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Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15


Gly



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<220>
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1 5


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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15


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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


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435 440


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20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160


Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205


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Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Arg Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30


Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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100 105 110


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Gly Leu Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Val Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
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100 105 110


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20 25 30


Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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20 25 30


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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
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Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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65 70 75 80


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65 70 75 80


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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Ala Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
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<213> Artificial Sequence

<220>
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<220>
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser His Gly Asn Thr Tyr Phe Glu
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Lys Gly Asn Thr Tyr Phe Glu
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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<400> 542

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Arg Gly Asn Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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<400> 543

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Gly Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Val Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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<400> 545

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Ile Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


<210> 546
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Pro Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Phe Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.6 HVR-L1

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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Tyr Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Arg Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Val Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.9 HVR-L1

<400> 551

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Ile Tyr Phe Glu
1 5 10 15


<210> 552
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.10 HVR-L1

<400> 552

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Pro Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.11 HVR-L1

<400> 553

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Phe Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.12 HVR-L1

<400> 554

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Tyr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.13 HVR-L1

<400> 555

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Asn Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v31.14 HVR-L1

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Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Ala Asn Arg Tyr Phe Glu
1 5 10 15


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Human Tau 7-24 peptide

<400> 557

Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr Tyr Gly Leu Gly Asp
1 5 10 15


Arg Lys



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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Human Tau 7-20 peptide

<400> 558

Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr Tyr Gly Leu
1 5 10


<210> 559

<400> 559
000

<210> 560
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 heavy chain variable region (VH)

<400> 560

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser
115


<210> 561
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 light chain variable region (VL)

<400> 561

Glu Asp Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
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<400> 562

Ser Tyr Gly Met Ser
1 5


<210> 563
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 HVR-H2

<400> 563

Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15


Gly



<210> 564
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 HVR-H3

<400> 564

Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr
1 5


<210> 565
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 HVR-L1

<400> 565

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15


<210> 566
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 HVR-L2

<400> 566

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5


<210> 567
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 HVR-L3

<400> 567

Phe Gln Gly Ser Leu Val Pro Trp Thr
1 5


<210> 568
<211> 444
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 IgG4-S228P.YTE heavy chain

<400> 568

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440


<210> 569
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v39 IgG4-S228P.YTE light chain

<400> 569

Glu Asp Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160


Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205


Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215


<210> 570
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 heavy chain variable region (VH)

<400> 570

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser
115


<210> 571
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 light chain variable region (VL)

<400> 571

Glu Asp Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Thr Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


<210> 572
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-H1

<400> 572

Ser Tyr Gly Met Ser
1 5


<210> 573
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-H2

<400> 573

Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15


Gly



<210> 574
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-H3

<400> 574

Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr
1 5


<210> 575
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-L1

<400> 575

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Thr Asn Thr Tyr Phe Glu
1 5 10 15


<210> 576
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-L2

<400> 576

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5


<210> 577
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 HVR-L3

<400> 577

Phe Gln Gly Ser Leu Val Pro Trp Thr
1 5


<210> 578
<211> 444
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3.v40 IgG4-S228P.YTE heavy chain

<400> 578

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
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Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
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Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


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370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


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Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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50 55 60


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65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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20 25 30


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100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


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130 135 140


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145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


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195 200 205


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225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Gln Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


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Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160


Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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50 55 60


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100 105 110


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115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


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245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
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Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
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Asn Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
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Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Ser Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160


Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
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Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
1 5 10 15


Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys
20


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Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
1 5 10 15


Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His Gln
20 25 30


Asp



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Gln Gly Gly Tyr Thr Met His Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala
20 25 30


Gly Leu Lys
35


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1 5 10 15


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20


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1 5 10 15


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20


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1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Arg Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


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65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Phe Ser Thr Tyr Pro Tyr
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Arg Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Phe Ser Thr Tyr Pro Tyr
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Arg Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Thr Tyr Pro Tyr
85 90 95


Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105


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<211> 107
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<400> 601

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1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala
20 25 30


Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45


Tyr Ser Ala Ser Arg Arg Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60


Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80


Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Thr Tyr Pro Tyr
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105


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<400> 602

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


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65 70 75 80


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100 105 110


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115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440


<210> 603
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<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v76 heavy chain variable region (VH)

<400> 603

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


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100 105 110


Val Thr Val Ser Ser
115


<210> 604
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<212> PRT
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<220>
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20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45


Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Thr Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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100 105 110


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145 150 155 160


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165 170 175


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Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


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50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


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Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
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Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
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Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
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Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


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Asp Asp Leu Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
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20 25 30


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50 55 60


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65 70 75 80


Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Thr Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


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Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


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Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
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Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
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Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
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Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
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Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
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Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
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Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
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Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
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Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
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340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
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435 440


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<400> 617

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
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Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
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Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
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Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
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Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440


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<212> PRT
<213> Artificial Sequence

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Asp Asp Leu Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
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Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Thr Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
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115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
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Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175


Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190


Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205


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210 215


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<213> Artificial Sequence

<220>
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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100 105 110


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Glu Asp Leu Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
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85 90 95


Thr Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


<210> 621
<211> 444
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


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50 55 60


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65 70 75 80


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Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


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260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
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Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440


<210> 622
<211> 443
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v93 IgG4-S228P.YTE des-K heavy chain

<400> 622

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15


Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Ile Phe Arg Ser Tyr
20 25 30


Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45


Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Thr Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60


Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80


Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95


Ala Asn Ser Tyr Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110


Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125


Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140


Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160


Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175


Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190


Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205


Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220


Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240


Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val
245 250 255


Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270


Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285


Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300


Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320


Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335


Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350


Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365


Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380


Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400


Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415


Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430


Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440


<210> 623
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220>
<223> Synthetic: Hu37D3-H9.v93 IgG4-S228P.YTE light chain

<400> 623

Glu Asp Leu Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15


Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30


Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser
35 40 45


Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60


Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80


Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95


Thr Leu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110


Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125


Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140


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165 170 175


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195 200 205


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210 215


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Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly Thr
1 5 10 15


Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys
20

Claims (64)

  1. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む、前記単離抗体。
  2. 前記抗体が、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項１に記載の抗体。
  3. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、前記単離抗体。
  4. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号６０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号６０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６０９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号６１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、前記単離抗体。
  5. 前記抗体が、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する、請求項１に記載の抗体。
  6. 前記抗体が、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する、請求項１または請求項２に記載の抗体。
  7. モノクローナル抗体である、請求項１～３のいずれか１項に記載の単離抗体。
  8. ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  9. ヒトＴａｕに結合する抗体断片である、先行請求項のいずれか１項に記載の抗体。
  10. 前記ヒトＴａｕが、配列番号２の配列を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の抗体。
  11. 前記抗体が、
    ａ）配列番号６０３と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｂ）配列番号６０４と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
    ｄ）配列番号６１４と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｅ）配列番号６１５と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
    ｇ）配列番号６１９と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｈ）配列番号６２０と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の抗体。
  12. 前記抗体が、
    ａ）配列番号６０３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｂ）配列番号６０４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ、
    ｄ）配列番号６１４の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｅ）配列番号６１５の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ、
    ｇ）配列番号６１９の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、
    ｈ）配列番号６２０の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
    ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の抗体。
  13. 前記抗体が、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  14. 前記抗体が、配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  15. 前記抗体が、配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  16. 前記抗体が、（ａ）配列番号３４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｂ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｃ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｄ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１、６０４、６１５、及び６２０から選択される配列を含む軽鎖可変領域と、（ｅ）配列番号６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号３４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｆ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｇ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、（ｈ）配列番号３４０、６０３、６１４、及び６１９から選択される配列を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  17. 前記抗体が、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  18. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、（ａ）配列番号６０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、（ｂ）配列番号６１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または（ｃ）配列番号６１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、前記単離抗体。
  19. 前記抗体が、
    ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
    ｂ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
    ｃ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
    ｄ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
    ｅ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３の配列と少なくとも９５％、少なくとも９７％、もしくは少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖、または
    ｆ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  20. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、（ａ）配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列を含む軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、前記単離抗体。
  21. ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、前記抗体が、配列番号６１１もしくは配列番号６１２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１３のアミノ酸配列からなる軽鎖、（ｂ）配列番号６１６もしくは配列番号６１７のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６１８のアミノ酸配列からなる軽鎖、または（ｃ）配列番号６２１もしくは配列番号６２２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号６２３のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、前記単離抗体。
  22. 前記抗体が、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  23. 前記抗体が、ＩｇＧ４抗体である、請求項２２に記載の単離抗体。
  24. 前記抗体が、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含む、請求項２３に記載の単離抗体。
  25. 前記抗体が、Ｓ２２８Ｐ変異を含む、請求項２３または請求項２４に記載の単離抗体。
  26. 抗体断片である、請求項１～１８及び２２～２５のいずれか１項に記載の単離抗体。
  27. 前記抗体が、モノマーＴａｕ、リン酸化Ｔａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びオリゴマーＴａｕの各々に、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、または１ｎＭ未満のＫＤで結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  28. 前記抗体が、ヒトモノマーＴａｕに１ｎＭ未満のＫＤで結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  29. ＫＤが、３７℃で表面プラズモン共鳴によって決定される、請求項２７または請求項２８に記載の単離抗体。
  30. カニクイザルＴａｕに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の単離抗体。
  31. 先行請求項のいずれか１項に記載の抗体をコードする、単離核酸。
  32. 請求項３１に記載の核酸を含む、宿主細胞。
  33. 前記抗体の産生に好適な条件下で、請求項３２に記載の宿主細胞を培養することを含む、抗体の産生方法。
  34. 請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体と、第２の治療剤と、を含む、免疫複合体。
  35. 請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体と、検出可能な標識と、を含む、標識された抗体。
  36. 請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
  37. Ｔａｕタンパク質関連疾患の治療方法であって、請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体、または請求項３６に記載の薬学的組成物を、Ｔａｕタンパク質関連疾患を有する個体に投与することを含む、前記方法。
  38. 前記Ｔａｕタンパク質関連疾患が、タウオパチーである、請求項３７に記載の方法。
  39. 前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、請求項３８に記載の方法。
  40. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症（ｆｒｏｎｔｏｔｅｔｅｍｐｏｒａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病（Ｈａｌｌｅｖｏｒｄｅｎ－Ｓｐａｔｚ ｄｉｓｅａｓｅ）、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症（Ｐａｌｌｉｄｏ－ｐｏｎｔｏ－ｎｉｇｒａｌ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、請求項３７または請求項３８に記載の方法。
  41. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、請求項３８～４０のいずれか１項に記載の方法。
  42. 個体における認知記憶容量の保持もしくは増加方法、または記憶喪失の減速方法であって、請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体、または請求項３６に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
  43. 個体におけるＴａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減方法であって、請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体、または請求項３６に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。
  44. 前記方法が、少なくとも１つの追加の療法を投与することを含む、請求項３７～４３のいずれか１項に記載の方法。
  45. 前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、Ｔａｕ阻害剤、抗アミロイドベータ抗体、ベータ－アミロイド凝集阻害剤、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、請求項４４に記載の方法。
  46. 医薬品として使用するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体。
  47. 個体におけるタウオパチーの治療に使用するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体。
  48. 前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、請求項４７に記載の単離抗体。
  49. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、請求項４７または請求項４８に記載の単離抗体。
  50. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、請求項４７～４９のいずれか１項に記載の単離抗体。
  51. 個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速に使用するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体。
  52. 個体におけるＴａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減に使用するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離抗体。
  53. 前記抗体が、少なくとも１つの追加の療法とともに使用するためのものである、請求項４７～５２のいずれか１項に記載の単離抗体。
  54. 前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、抗アミロイドベータ抗体、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、請求項５３に記載の単離抗体。
  55. 個体におけるＴａｕタンパク質関連疾患の治療のための医薬品を製造するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体の使用。
  56. 前記Ｔａｕタンパク質関連疾患が、タウオパチーである、請求項５５に記載の使用。
  57. 前記タウオパチーが、神経変性タウオパチーである、請求項５６に記載の使用。
  58. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される、請求項５６または請求項５７に記載の使用。
  59. 前記タウオパチーが、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である、請求項５６～５８のいずれか１項に記載の使用。
  60. 個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速のための医薬品を製造するための、請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体の使用。
  61. 前記医薬品が、少なくとも１つの追加の療法とともに投与するためのものである、請求項５５～６０のいずれか１項に記載の使用。
  62. 前記追加の療法が、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、抗Ｔａｕ抗体、抗アミロイドベータ抗体、抗ＢＡＣＥ１抗体、及びＢＡＣＥ１阻害剤から選択される、請求項６１に記載の使用。
  63. 神経原線維変化、神経絨毛糸、または変性神経突起の検出方法であって、試料を請求項１～３０のいずれか１項に記載の抗体と接触させることを含む、前記方法。
  64. 前記試料が、脳試料、脳脊髄液試料、または血液試料である、請求項６３に記載の方法。
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ZA (1) ZA201903578B (ja)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10501531B2 (en) 2013-03-13 2019-12-10 Prothena Biosciences Limited Tau immunotherapy
IL300670B2 (en) 2015-06-05 2025-02-01 Genentech Inc Anti-tau antibodies and methods of use
JP7170316B2 (ja) 2016-05-02 2022-11-14 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド タウ免疫療法
AU2017259038B2 (en) 2016-05-02 2024-05-23 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing Tau
WO2018106776A2 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Genentech, Inc. Anti-tau antibodies and methods of use
CN110290801B (zh) 2016-12-07 2024-01-26 基因泰克公司 抗tau抗体和使用方法
BR112019017021A2 (pt) 2017-02-17 2020-04-14 Denali Therapeutics Inc anticorpos anti-tau e métodos de uso dos mesmos
CU24636B1 (es) 2017-05-02 2022-12-12 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que reconocen tau en los residuos 257-271 o 320-334 de la seq id no: 1
US11958889B2 (en) 2017-10-25 2024-04-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions of phosphorylated tau peptides and uses thereof
SG11202108312PA (en) 2019-02-08 2021-08-30 Ac Immune Sa Method of safe administration of phosphorylated tau peptide vaccine
CU20210073A7 (es) 2019-03-03 2022-04-07 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que se unen dentro de la región de unión a microtúbulos de tau definida por cdrs
EA202192891A1 (ru) * 2019-04-24 2022-02-04 Янссен Фармасьютикалз, Инк. Гетерологичное введение анти-тау вакцин
GB202010652D0 (en) * 2020-07-10 2020-08-26 Wista Lab Ltd Anti-tau antibodies
CN112694532B (zh) * 2021-01-12 2023-04-18 倍而达药业（苏州）有限公司 抗Siglec-15的抗体或其抗原结合片段及应用
WO2023079485A1 (en) * 2021-11-03 2023-05-11 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anti-tau antibody compositions, dosage forms, and methods
US20250034559A1 (en) 2021-11-17 2025-01-30 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of tau-related disorders

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015532592A (ja) * 2012-08-16 2015-11-12 アイピエリアン，インコーポレイティド タウオパチーの処置方法
JP2016525502A (ja) * 2013-06-10 2016-08-25 アイピエリアン，インコーポレイティド タウオパチーの処置方法
JP2020511938A (ja) * 2016-12-07 2020-04-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｔａｕ抗体及び使用方法

Family Cites Families (128)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5811310A (en) 1986-09-30 1998-09-22 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva Univ. The Alz-50 monoclonal antibody and diagnostic assay for alzheimer's disease
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
JP3101690B2 (ja) 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
EP0368684B2 (en) 1988-11-11 2004-09-29 Medical Research Council Cloning immunoglobulin variable domain sequences.
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
EP0604580A1 (en) 1991-09-19 1994-07-06 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab') 2? ANTIBODIES
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
DE69334255D1 (de) 1992-02-06 2009-02-12 Novartis Vaccines & Diagnostic Marker für Krebs und biosynthetisches Bindeprotein dafür
CA2149329C (en) 1992-11-13 2008-07-15 Darrell R. Anderson Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of b cell lymphoma
CA2163345A1 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Susan Adrienne Morgan Antibodies
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
AU757627B2 (en) 1997-06-24 2003-02-27 Genentech Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
CA2307166A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Genentech, Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
ATE531812T1 (de) 1997-12-05 2011-11-15 Scripps Research Inst Humanisierung von nager-antikörpern
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
IL138608A0 (en) 1998-04-02 2001-10-31 Genentech Inc Antibody variants and fragments thereof
PT2180007E (pt) 1998-04-20 2013-11-25 Roche Glycart Ag Engenharia de glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
CA2359067C (en) 1999-01-15 2017-03-14 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
EP3031917A1 (en) 1999-04-09 2016-06-15 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
AU782626B2 (en) 1999-10-04 2005-08-18 Medicago Inc. Method for regulating transcription of foreign genes
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
JP4668498B2 (ja) 1999-10-19 2011-04-13 協和発酵キリン株式会社 ポリペプチドの製造方法
WO2001044463A1 (en) 1999-12-15 2001-06-21 Genentech, Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
LT2857516T (lt) 2000-04-11 2017-09-11 Genentech, Inc. Multivalentiniai antikūnai ir jų panaudojimas
EP2314686B2 (en) 2000-10-06 2023-06-21 Kyowa Kirin Co., Ltd. Cells producing antibody compositions
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
CN101940189A (zh) 2000-11-30 2011-01-12 米德列斯公司 用于生产人类抗体的转基因转染色体啮齿动物
ATE489395T1 (de) 2000-12-12 2010-12-15 Medimmune Llc Moleküle mit längeren halbwertszeiten, zusammensetzungen und deren verwendung
AT500379B8 (de) 2001-02-02 2009-08-15 Axon Neuroscience Tau-proteine
JP2005524379A (ja) 2001-08-03 2005-08-18 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性の増強を伴う抗体グリコシル化改変体
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
KR20050000380A (ko) 2002-04-09 2005-01-03 교와 핫꼬 고교 가부시끼가이샤 게놈이 개변된 세포
US20050031613A1 (en) 2002-04-09 2005-02-10 Kazuyasu Nakamura Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa
CA2481656A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells in which activity of the protein involved in transportation of gdp-fucose is reduced or lost
AU2003236015A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing antibody composition
US7691568B2 (en) 2002-04-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Antibody composition-containing medicament
JPWO2003085119A1 (ja) 2002-04-09 2005-08-11 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物のＦｃγ受容体ＩＩＩａに対する結合活性を高める方法
CA2488441C (en) 2002-06-03 2015-01-27 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
EP3263596A1 (en) 2002-12-16 2018-01-03 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
US20060135403A1 (en) 2002-12-24 2006-06-22 Francine Gervais Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases
US20050079574A1 (en) 2003-01-16 2005-04-14 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
EP1688439A4 (en) 2003-10-08 2007-12-19 Kyowa Hakko Kogyo Kk HYBRID PROTEIN COMPOSITION
US20070134759A1 (en) 2003-10-09 2007-06-14 Harue Nishiya Process for producing antibody composition by using rna inhibiting the function of alpha1,6-fucosyltransferase
EP2348051B1 (en) 2003-11-05 2018-12-19 Roche Glycart AG CD20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function
WO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
BRPI0508761A (pt) 2004-03-31 2007-08-14 Genentech Inc anticorpo humanizado, composição que compreende um anticorpo humanizado, ácido nucléico isolado, vetor, célula hospedeira, processo de produção de anticorpo humanizado, método de tratamento de disfunção tgf-beta, método de detecção de tgf-beta, artigo industrializado e método de tratamento de cáncer
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
CN1942483B (zh) 2004-04-13 2012-09-26 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗p型选凝素抗体
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
CN101065151B (zh) 2004-09-23 2014-12-10 健泰科生物技术公司 半胱氨酸改造的抗体和偶联物
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP1957531B1 (en) 2005-11-07 2016-04-13 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
EP1973951A2 (en) 2005-12-02 2008-10-01 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
TW200812616A (en) 2006-05-09 2008-03-16 Genentech Inc Binding polypeptides with optimized scaffolds
EP2059533B1 (en) 2006-08-30 2012-11-14 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
GB0624500D0 (en) 2006-12-07 2007-01-17 Istituto Superiore Di Sanito A novel passive vaccine for candida infections
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
UA107571C2 (xx) 2009-04-03 2015-01-26 Фармацевтична композиція
US8609097B2 (en) 2009-06-10 2013-12-17 Hoffmann-La Roche Inc. Use of an anti-Tau pS422 antibody for the treatment of brain diseases
SG187673A1 (en) 2010-08-02 2013-03-28 Regeneron Pharma Mice that make binding proteins comprising vl domains
MY164376A (en) * 2010-10-07 2017-12-15 Univ Leuven Kath Phosphospecific antibodies recognizing tau
SG189174A1 (en) 2010-10-11 2013-05-31 Biogen Idec Internat Neuroscience Gmbh Human anti-tau antibodies
PT2654790T (pt) 2010-12-22 2019-05-16 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Anticorpo modificado com semivida melhorada
EP2670434B1 (en) 2011-01-31 2018-12-26 Tau Bio-Logic Corp. Treatment of tauopathies
GB201112056D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Univ Leuven Kath Antibodies
CA2848346A1 (en) 2011-09-19 2013-03-28 Axon Neuroscience Se Protein-based therapy and diagnosis of tau-mediated pathology in alzheimer's disease
CN104080806B (zh) * 2011-10-07 2018-01-19 Ac免疫有限公司 识别Tau的磷酸化特异抗体
PT2794654T (pt) * 2011-12-20 2019-09-10 Janssen Biotech Inc Anticorpos anti-phf-tau e suas utilizações
JP6293731B2 (ja) * 2012-04-05 2018-03-14 エーシー イミューン エス．エー． ヒト化タウ抗体
EP2870176A4 (en) 2012-07-03 2016-09-28 Univ Washington ANTIBODIES DIRECTED AGAINST TAU
WO2014031697A2 (en) 2012-08-21 2014-02-27 The Institute Of Molecular Medicine COMPOSITIONS AND METHODS RELATED TO DISEASES ASSOCIATED WITH DEPOSITS OF AMYLOID, TAU, AND α-SYNUCLEIN
US20140056901A1 (en) 2012-08-21 2014-02-27 The Institute For Molecular Medicine Anti-tau antibodies and compositions for and methods of making and using in treatment, diagnosis and monitoring of tauopathies
CA2887933A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Arizona Board Of Agents, On Behalf Of Arizona State University Antibody based reagents that specifically recognize toxic oligomeric forms of tau
BR112015014751A8 (pt) * 2012-12-21 2018-01-16 Biogen Int Neuroscience Gmbh anti-corpos anti-tau humanos e fragmento de ligação a tau dos mesmo, seu uso na preparação de um medicamento, bem como polipeptídeos codificando os mesmos.
US9039633B2 (en) 2012-12-24 2015-05-26 Transmed7, Llc Automated, selectable, soft tissue excision biopsy devices and methods
US8980270B2 (en) 2013-01-18 2015-03-17 Ipierian, Inc. Methods of treating a tauopathy
US10501531B2 (en) 2013-03-13 2019-12-10 Prothena Biosciences Limited Tau immunotherapy
BR112015023262B8 (pt) 2013-03-15 2024-02-06 Ac Immune Sa Anticorpo isolado, imunoconjugado, formulação farmacêutica e usos do anticorpo
BR112016010454A2 (pt) 2013-11-27 2017-12-05 Ipierian Inc métodos para tratar uma taupatia
LT3083680T (lt) 2013-12-20 2020-04-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Humanizuoti anti-tau(ps422) antikūnai ir jų naudojimo būdai
CN105939722A (zh) 2014-02-14 2016-09-14 伊皮埃里安股份有限公司 Tau肽，抗Tau抗体，及其使用方法
TWI734975B (zh) 2014-06-27 2021-08-01 美商Ｃ２Ｎ醫療診斷有限責任公司 人類化抗-tau抗體
WO2016055941A1 (en) 2014-10-10 2016-04-14 National Research Council Of Canada Anti-tau antibody and uses thereof
US10323082B2 (en) 2014-10-14 2019-06-18 The Research Foundation For Mental Hygiene, Inc. Treatment of tauopathies by passive immunization targeting the N-terminal projection domain of tau
CA2874083C (en) 2014-12-05 2024-01-02 Universite Laval Tdp-43-binding polypeptides useful for the treatment of neurodegenerative diseases
WO2016137950A1 (en) 2015-02-24 2016-09-01 Rpeptide, Llc Anti-tau antibodies
TWI669314B (zh) 2015-02-26 2019-08-21 美國禮來大藥廠 針對ｔａｕ之抗體及其用途
IL300670B2 (en) * 2015-06-05 2025-02-01 Genentech Inc Anti-tau antibodies and methods of use
US20200030445A1 (en) 2015-06-12 2020-01-30 C2N Diagnostics, Llc Stable formulations of humanized anti-tau antibody
MA42377A (fr) 2015-07-06 2018-05-16 Ucb Biopharma Sprl Anticorps se liant à tau
KR102742965B1 (ko) 2015-07-06 2024-12-13 유씨비 바이오파마 에스알엘 타우 결합 항체
JO3711B1 (ar) 2015-07-13 2021-01-31 H Lundbeck As أجسام مضادة محددة لبروتين تاو وطرق استعمالها
EP3448875A4 (en) * 2016-04-29 2020-04-08 Voyager Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS FOR TREATING A DISEASE
AU2017259038B2 (en) 2016-05-02 2024-05-23 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing Tau
MA56165A (fr) 2016-07-12 2022-04-20 H Lundbeck As Anticorps spécifiques de la protéine tau hyperphosphorylée et leurs procédés d'utilisation
WO2018106776A2 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Genentech, Inc. Anti-tau antibodies and methods of use
WO2018183175A1 (en) 2017-03-28 2018-10-04 Genentech, Inc. Methods of treating neurodegenerative diseases

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015532592A (ja) * 2012-08-16 2015-11-12 アイピエリアン，インコーポレイティド タウオパチーの処置方法
JP2016525502A (ja) * 2013-06-10 2016-08-25 アイピエリアン，インコーポレイティド タウオパチーの処置方法
JP2020511938A (ja) * 2016-12-07 2020-04-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｔａｕ抗体及び使用方法

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