JP2012529449A - ヘッジホッグ経路アンタゴニストおよびそれらの治療的応用 - Google Patents

Abstract

ヘッジホッグシグナル伝達経路を調整するヘテロ環式化合物、それらの医薬組成物およびそれらの治療的応用。

Description

（発明の分野）
本発明は、有機化合物、それらの医薬組成物ならびに哺乳動物における治療および／または予防のためのそれらの使用、特に、ヘッジホッグシグナル伝達経路を調整するヘテロ環式化合物に関する。

（発明の背景）
４５ｋＤａヒトＳｈｈ前駆体タンパク質の自己タンパク質分解は、正常なヘッジホッグシグナル伝達を担う２０ｋＤａＮ末端フラグメントおよびＮ末端フラグメントがコレステロールとコンジュゲートしている自己プロセシング活性に関与する２５ｋＤａＣ末端フラグメントを与える(Ｌｅｅら Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６６ １５２８−１５３７(１９９４)およびＢｕｍｃｒｏｔら Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ.１５ ２２９４−２３０３(１９９５)）。

正常に機能しているヘッジホッグ（Ｈｈ）シグナル伝達は、細胞の分化および増殖を指示することにより胚パターンを指定し、このことは、キイロショウジョウバエ(Drosophilia melanogaster)において最初に報告された(Ｎｕｓｓｌｅｉｎ−Ｖｏｌｌｈａｒｄら Ｒｏｕｘ.Ａｒｃｈ.Ｄｅｖ.Ｂｉｏｌ.１９３：２６７−２８２(１９８４))。分泌されたＨｈポリペプチドに対する細胞応答は、パッチト(Patched)（Ｐｔｃ）およびスムーズンド(Smoothened)（Ｓｍｏ）という２つの内在性膜タンパク質により媒介される。Ｈｈは、１２回膜貫通タンパク質Ｐｔｃに結合し、したがって、７回膜貫通タンパク質ＳｍｏのＰｔｃ媒介性抑制を逆転させる。次いで、このＳｍｏ活性化は、一連の細胞内事象の引き金となり、ついには転写因子キュビタスインターラプタス(Cubitus interruptus)（Ｃｉ）の安定化およびＣｉ依存性遺伝子の発現となる。これらの事象は、３つの異なるＨｈファミリーメンバー［ソニック（Ｓｏｎｉｃ）（Ｓｈｈ）、インディアン（Ｉｎｄｉａｎ）（Ｉｈｈ）、およびデザート（Ｄｅｓｅｒｔ）（Ｄｈｈ）］、２つのＰｔｃタンパク質（Ｐｔｃｈ１およびＰｔｃｈ２）、および３つのＣｉ様転写因子（Ｇｌｉ１、Ｇｉｉ２、およびＧｌｉ３）を包含する、複数のタンパク質相同体を通して哺乳動物の発生および腫瘍形成の間に繰り返される。しかしながら、ショウジョウバエ属(Drosophila)、マウス、およびゼブラフィッシュにおける遺伝子解析により、Ｈｈシグナル伝達のすべての形態と関連付けられているＳｍｏの単一脊椎動物相同体が存在する(Ｃｈｅｎら ＰＮＡＳ ９９(２２)：１４０７１−１４０７６(２００２))。

Ｓｍｏは、Ｇｌｉ転写因子の活性化およびそれらの引き続く核転座を引き起こして標的遺伝子の転写の制御をもたらすシグナルカスケードを開始する。負のフィードバックループを通して、Ｇｌｉは、Ｈｈ経路を阻害するＰｔｃおよびＨｉｐ１(ヘッジホッグ相互作用タンパク質１(Ｈｉｐ１))の転写に影響を及ぼす。Ｈｈ経路の活性化の制御喪失は、髄芽細胞腫(ＲｏｍｅｒおよびＣｕｒｒａｎ、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６５(１２)４９７５−４９７８(２００５))および神経膠芽腫(Ｂａｒら Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ ２５(１０)：２５２４−３３(２００７))などの脳に影響を与えるもの；前立腺癌(Ｓａｎｃｈｅｚら ＰＮＡＳ １０１(３４)１２５６１−１２５６６(２００４))；膵臓癌(Ｔｈａｙｅｒら Ｎａｔｕｒｅ ４２３ ８５１−８５６(２００３))；非小細胞肺癌腫(Ｙｕａｎら Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２６ １０４６−１０５５(２００７))；小細胞肺癌(Ｗａｔｋｉｎｓら Ｎａｔｕｒｅ ４２２ ３１３−３１７(２００３))；乳癌(Ｋｕｂｏら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６４ ６０７１−６０７４(２００４))；様々な消化管腫瘍(Ｂｅｒｍａｎら Ｎａｔｕｒｅ ４２５ ８４６−８５１(２００３）)および(Ｌｅｅｓら Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １２９(５)１６９６−１７１０(２００６))；基底細胞癌腫(Ｗｉｌｌｉａｍｓら ＰＮＡＳ １００(８)４６１６−４６２１(２００３))；悪性黒色腫(ＰｏｎｓおよびＱｕｉｎｔａｎｉｌｌａ Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓ Ｏｎｃｏｌ.８(７)４６６−４７４(２００６))；扁平上皮癌腫(Ｘｕａｎら Ｍｏｄ Ｐａｔｈｏｌ.１９(８)１１３９−４７(２００６))；多発性骨髄腫およびリンパ腫などのＢ細胞悪性腫瘍(Ｄｉｅｒｋｓら Ｎａｔ.Ｍｅｄ.１３(８)９４４−９５１(２００７)；Ｐｅａｃｏｃｋら ＰＮＡＳ １０４(１０）４０４８−４０５３(２００７)）；軟骨肉腫（Ｔｉｅｔら Ａｍ.Ｊ.Ｐａｔｈｏｌ.１６８(１)３２１−３３０(２００６)）、腎臓の明細胞肉腫(Ｃｕｔｃｌｉｆｆｅら Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.１１(２２)：７９８６−９４(２００５))および横紋筋肉腫(Ｔｏｓｔａｒら Ｊ.Ｐａｔｈｏｌ.２０８(１)１７〜２５(２００６))などの間葉性の癌；慢性骨髄性白血病(Ｓｅｎｇｕｐｔａら Ｌｅｕｋｅｍｉａ ２１(５)９４９−９５５(２００７)）；子宮内膜癌腫(Ｆｅｎｇら Ｃｌｉｎ.Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.１３(５)１３８９−１３９８(２００７)；肝細胞癌腫(Ｈｕａｎｇら Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２７(７)１３３４０１３４０(２００６)）；卵巣腫瘍(Ｃｈｅｎら Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ.９８(１)６８〜７６(２００７)）を包含する増加しつつある範囲の癌と関係付けられている。

Ｈｈシグナル伝達が、ＡＢＣ輸送体タンパク質多剤耐性タンパク質１(ＭＤＲ１、ＡＢＣＢ１、Ｐ糖タンパク質)および(ＢＣＲＰ、ＡＢＣＧ２)の発現を調節すること、ならびに低分子干渉ＲＮＡによるＭＤＲ１およびＢＣＲＰ発現の標的ノックダウンが、Ｈｈ誘発性化学療法耐性を部分的に逆転させることも判明している。このことは、Ｈｈ経路が、ＭＤＲを克服し、化学療法の応答を高めるための標的であり得ることを示唆しているであろう(Ｓｉｍｓ−Ｍｏｕｒｔａｄａら Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２６(３８)５６７４−５６７９(２００７))。ソニックヘッジホッグシグナル伝達経路の遮断は、膵臓癌細胞(Ｈｕら Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ.２８(８)１２２４−３０(２００７))および前立腺癌細胞(Ｍｉｍｅａｕｌｔら Ｉｎｔ.Ｊ Ｃａｎｃｅｒ １１８(４)１０２２−３１(２００６))においてＥＧＦＲ阻害剤の抗増殖性効果を増強することが判明した。

ヘッジホッグ経路は、化学放射線療法後の腫瘍再成長および放射線応答を改善するための潜在的な標的としても関係付けられており（Ｓｉｍｓ−Ｍｏｕｒｔａｄａら Ｃｌｉｎ. Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.１２(２１)６５６５−６５７２(２００６)）、ヘッジホッグ経路アンタゴニストであるシクロパミンは、Ｈｈを発現する膵臓癌細胞においてパクリタキセルおよび放射線の細胞傷害効果を高める(Ｓｈａｆａｅｅら Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ.Ｐｈａｒｍａｃｏｌ.５８(６)７６５−７０(２００６)）。

ヘッジホッグシグナル伝達経路の阻害が、炎症、上皮細胞過形成、組織の線維化または免疫障害に関連する一連の疾患の治療に役立つことがあることも報告されている(Ｌａｍｂら ＥＰ１１８３０４０(特許文献１))。ソニックヘッジホッグシグナル伝達の阻害は、ラット同所性小腸移植モデルにおいて、慢性拒絶反応を軽減し同種移植片生着を延長することが報告されている。急性移植片拒絶は、免疫抑制剤によりコントロールすることができるが、ドナー臓器における動脈硬化を特徴とする慢性拒絶反応は、長期同種移植片生着に対する主要な障害である。ラット同所性小腸移植モデルにおける移植片生着は、免疫グロブリンＧ対照と比較して、抗Ｓｈｈ抗体処置後に有意に延長された(１１６日対７７．５日)。腸間膜におけるコラーゲン沈着および血管閉塞は、抗Ｓｈｈ抗体のレシピエントにおいて顕著に軽減された（Ｃｈｅｎら Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ８３(１０)１３５１−１３５７(２００７)；Ｌａｍｂら ＥＰ１１８３０４０Ｂ１）。

ｓＦＲＰ−１が、Ｈｈシグナル伝達の下流標的遺伝子であることおよびＨｈ経路の活性化に続く分泌型フリズルド(frizzled)関連タンパク質１(ｓＦＲＰ−１)の発現上昇が、Ｗｎｔシグナル伝達に対する阻害効果のための分子リンクを提供することも報告されている(Ｈｅら Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２８１(４７)３５５９８−３５６０２(２００６)）。したがって、Ｈｈ経路からｓＦＲＰ−１までをアンタゴナイズすることによるＷｎｔシグナル伝達の調整は、とりわけ骨粗鬆症（Ａｉら Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.２５(１２)４９４６−４９５５(２００５)）などの一連の疾患を治療するための方法を提供するかもしれない（Ｌｕｏら Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ,８７,９７−１０３−(２００７)）。

Ｓｍｏのヘプタヘリカル領域に結合することにより作用すると考えられている天然産物のシクロパミンを包含するＨｈ経路の様々な阻害剤が検討されてきた。さらに、多くのＳｍｏ受容体の合成小分子アンタゴニストが近年になって報告されており：総説については、Ｋｉｓｅｌｙｏｖ Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ６ ４４５−４４９(２００６)を参照されたい。

従来技術
Ｌｕｂｉｓｃｈらは、癌を含む様々な疾患を治癒するため(ＷＯ２００００２６１９２(特許文献２))、および化粧品の分野において(ＷＯ２００１０８２８７７)、有用なＰＡＲＰ阻害剤としての一連の２−フェニル−ベンゾイミダゾールを開示している。繰り返し見られる特徴は、ベンゾイミダゾール環の４位におけるカルバモイル部分の存在である。

Ａｒｉｅｎｔｉら(ＷＯ２００３０３２９８４)およびＡｍｅｒｉｋｓら(ＷＯ２００４０９３８７３およびＵＳ２００４２１４８５７)は、ベンゾイミダゾール環の５位が、カルボキシレート、カルバモイルまたはスルファモイル基のいずれかで常に置換されていることをさらに特徴とする、癌を治癒させるためのチェックポイントキナーゼ２阻害剤としての一連の２−フェニル−ベンゾイミダゾール誘導体を開示している。

Ｏｈｅｍｅｎｇら(ＷＯ９９１１６２７およびＵＳ５９４２５３２)は、抗菌剤としての一連の５−カルボキシイミドアミド−２−フェニル−ベンゾイミダゾール化合物を開示している。

Ｍｊａｌｌｉら(ＷＯ２００３０７５９２１)は、一連の２−フェニル−ベンゾイミダゾール誘導体の医薬的応用を開示している。

Ａｌｅｋｓｈｕｎら(ＷＯ２００４０４１２０９およびＷＯ２００６０７６００９)は、抗生物質活性のある一連の２−フェニル−ベンゾイミダゾロール誘導体を開示している。

Ｋｈａｌｅｄら¹(Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｆａｃｕｌｔｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ(Ｃａｉｒｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ)、４０(１)、７−１３、(２００２)）（非特許文献１）は、２−フェニル−ベンゾイミダゾール誘導体の合成および抗高血圧活性を記載しており、一方、一部の他のもののＤＮＡ結合特性は、Ｋｏｂｕｔａら（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ、２(Ｔｗｅｎｔｙ−ｎｉｎｔｈ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ)、１９３−１９４(２００２)およびＮｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ、３５(Ｔｗｅｎｔｙ−ｔｈｉｒｄ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９６)、１５１−１５２(１９９６)）により記載されている。

Ｇｕｉｃｈｅｒｉｔら(ＷＯ２００６０５０５０６)、Ｂｅａｃｈｙら(ＷＯ２００３０８８９７０)、Ｒｕｂｉｎら(ＷＯ２００３０１１２１９)、Ｙｕａｃｈら(Ｎａｔｕｒｅ、４５５、４０６(２００８)およびＤａｋｉｎら(ＷＯ２００９０２７７４６)は、様々な形態の癌を治癒させるためのヘッジホッグ経路アンタゴニストとしての２−フェニル−ベンゾイミダゾールのアリール−およびアルキル−アミド／ウレイド誘導体を開示している。Ｇｕｉｃｈｅｒｉｔら(ＷＯ２００６０５０５０６)およびＲｕｂｉｎら(ＷＯ２００３０１１２１９)は、同じ目的で２−フェニル−イミダゾピリジンのアリールアミド誘導体を開示している。下記の２２の化合物は、同じ出願人の名前で、同時係属出願ＷＯ２００９０７４３００に開示されている。

欧州特許第１１８３０４０号明細書 国際公開第２０００／０２６１９２号パンフレット

Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｆａｃｕｌｔｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ(Ｃａｉｒｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ)、４０(１)、７−１３、(２００２)

発明の詳細な説明
本発明は、式Ｉの化合物を提供し、

式中、原子価および安定性が許すように、
ｉは、１または２であってよく
Ｒ_１は、Ｈ；直鎖、分岐または環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル基であってよく、
Ｒ_２は、Ｈ、ＣｌまたはＦであってよく、
Ｘは、ＮかＣＲ_３のいずれかであってよく、
Ｒ_３は、Ｈ；ハロゲン；直鎖、分岐または環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアルコキシ基であってよく、
Ｙは、

であってよく、
Ｚは、ＯまたはＮＲｘであってよく、
Ｒｘは、Ｈまたは直鎖、分岐もしくは環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであってよく、
ｋは、１、２、３または４であってよく、
ｎおよびｐは、独立して、１、２または３であってよく、和ｎ＋ｐは、５を超えることはできず、
Ｔは、Ｈまたは直鎖もしくは分岐の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル基であってよく、
Ｔ’は、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−ジアルキルアミノ基か、１つの窒素原子を含有し、場合により、ＮおよびＯから選択される第二のヘテロ原子を含有する４〜６員飽和ヘテロ環のどちらかで置換されている直鎖または分岐のＣ₁〜Ｃ_３アルキル鎖であってよく、そのようなヘテロ環は、場合により、窒素原子において（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル鎖で置換されており；または、１つの窒素原子を含有し、場合により、ＮおよびＯから選択される第二のヘテロ原子を含有する４〜６員飽和ヘテロ環であり、そのようなヘテロ環は、場合により、窒素原子において（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル鎖で置換されており、
ｒは、０、１、２または３であってよく、
Ｒ’は、ハロゲン；ヒドロキシ；アミノ；シアノ；ニトロ；オキソ；１つまたは複数のフッ素原子で場合により置換されている直鎖または分岐の（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、ジハロアルキル、アザアルキル、オキサアルキル、アルキルカルボニル、オキサアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アルケニル、オキサアルケニル、アザアルケニル、アルケニルカルボニル、オキサアルケニルカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプトアルキル、アルコキシ、アルキルチオ基であってよく；ここで、２つのＲ'基は、スピロまたは縮合連結で５〜８員環を形成することがある。

を除く。

一実施形態において、ｉは２と等しく、その結果生じるピペリジン環の４位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ'、ｒおよびＲ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。別の実施形態において、ｉは２と等しく、その結果生じるピペリジン環の３位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ'、ｒおよびＲ'は、上の式Ｉの下に定義されている通りであり；他の実施形態において、ｉは１と等しく、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ'、ｒおよびＲ'は、上の式Ｉの下に定義されている通りであり；一実施形態において、Ｒ_１はＨであり、Ｒ_２はＨではなく、ｉ、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ'、ｒおよびＲ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りであり；別の実施形態において、Ｒ_２はＨであり、Ｒ_１はＨではなく、ｉ、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ'、ｒおよびＲ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。一実施形態において、ＸはＮであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ'は、上の式Ｉの下に定義されている通りであり、別の実施形態において、ＸはＣＲ_３であり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。一実施形態において、Ｒ_３はＨであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ'は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。別の実施形態において、Ｒ_３は、Ｃｌ、Ｆ、ＯＭｅおよびＭｅであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。別の実施形態において、ｒは０と等しく、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、ＴおよびＴ’は、上の式Ｉの下に定義されている通りである。

好ましい実施形態において、Ｙが、

であり、ｋが２と等しく、ｒが１と等しく、Ｒ'がジメチルアミノであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、ＸおよびＲ_３が、上の式Ｉの下に定義されている通りである上の式Ｉの化合物が提供される。

第二の好ましい実施形態において、Ｙが、

であり、ｎとｐが共に２と等しく、ＺがＯであり、ｒが０と等しく、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、ＸおよびＲ_３が、上の式Ｉの下に定義されている通りである上の式Ｉの化合物が提供される。

第三の好ましい実施形態において、ｉが２と等しく、その結果生じるピペリジン環の４位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、ＸがＣＲ_３であり、Ｒ_３がメチルであり、Ｒ_２がＦであり、Ｒ_１、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、上の式Ｉの下に定義されている通りである上の式Ｉの化合物が提供される。

特に興味深い化合物は、下記の：
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン；
アゼパン−１−イル−｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−メタノン；
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピロリジン−１−イル−メタノン；
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペリジン−１−イル−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸（３−ジメチルアミノ−プロピル）−メチル−アミド
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン；
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（４−ピロリジン−１−イル−ピペリジン−１−イル）−メタノン；
｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［４−フルオロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
（３−ジメチルアミノピロリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
｛１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
および｛１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン
である。

式Ｉの化合物の代表的な群の薬理学的活性は、下に記載されている２つのインビトロ(in vitro)アッセイを使用して証明された。したがって、さらなる態様によれば、本発明は、癌または骨粗鬆症を治療する方法であって、対象、好ましくはそれを必要としているヒト対象に、有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を対象とする。そのような方法を使用して治療することができる癌のタイプは、非小細胞肺癌腫；小細胞肺癌；乳癌；卵巣腫瘍；消化管腫瘍；髄芽細胞腫および神経膠芽腫などの脳の癌；前立腺癌；膵臓癌；基底細胞癌腫；悪性黒色腫；扁平上皮癌腫；多発性骨髄腫；リンパ腫；軟骨肉腫、腎臓の明細胞肉腫および横紋筋肉腫などの間葉性の癌；慢性骨髄性白血病；子宮内膜癌腫；肝細胞癌腫を包含するが、それらに限定されるものではない。

一般に、式Ｉの化合物を使用し、化合物をＳｍｏ受容体に結合させることによるヘッジホッグ経路の阻害から恩恵を受けることがあり、骨粗鬆症、ならびに非小細胞肺癌腫；小細胞肺癌；乳癌；卵巣腫瘍；消化管腫瘍；髄芽細胞腫および神経膠芽腫などの脳の癌；前立腺癌；膵臓癌；基底細胞癌腫；悪性黒色腫；扁平上皮癌腫；多発性骨髄腫；リンパ腫；軟骨肉腫、腎臓の明細胞肉腫、および横紋筋肉腫などの間葉性の癌；慢性骨髄性白血病；子宮内膜癌腫；肝細胞癌腫から選択される癌を非限定的に包含する任意の疾患、状態または機能障害を治療することができる。

療法において使用するための化合物の用量は、例えば、投与経路、疾患の性質および重症度に応じて変わることがある。一般に、ヒトにおける許容される薬理学的効果は、０．０１から２００ｍｇ／ｋｇまでの範囲である１日用量で得られることがある。

さらにさらなる態様において、本発明は、薬学的に許容される担体および賦形剤と一緒に、１つまたは複数の式Ｉの化合物を含有する医薬組成物に言及する。医薬組成物は、固体、半固体、または液体調製物の形態、好ましくは、溶液剤、懸濁剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、エアロゾル剤、または制御送達系の形態であってよい。組成物は、経口、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、直腸および鼻内を包含する様々な経路により投与することができ、単位剤形で製剤化されることが好ましい。経口単位剤形は、本発明の化合物約１ｍｇから約１０００ｍｇまでを含有することができる。

遊離塩基の形態であってよいそれらの化合物について、本発明は、それらの酸付加塩、好ましくは、薬学的に許容される酸との塩も包含する。本発明は、化合物Ｉの分離された異性体およびジアステレオマー、またはそれらの混合物(例えばラセミ混合物)も包含する。医薬組成物を調製するための原理および方法は、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ(ＰＡ)に記載されている。

式Ｉの化合物、それらの光学異性体またはジアステレオマーは、キラルなマトリックスによるクロマトグラフィーおよび分別結晶を包含するがそれらに限定されない、よく知られている手順に従って精製または分離することができる。

化合物合成および実験手順
本発明の化合物は、下の一般的方法１〜１１および方法Ａ〜Ｔにより記載されているものを包含する様々な合成経路を使用して調製することができる。

材料および方法
すべての試薬および溶媒は、商業的に入手した。空気および湿気に敏感な液状溶液は、シリンジを介して移した。反応の経過は、薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)および／または液体クロマトグラフィー−質量分析(ＬＣ−ＭＳ)により追跡した。

すべての核磁気共鳴スペクトルは、ＰＦＧ ＡＴＢ Ｂｒｏａｄｂａｎｄプローブを備えたＶａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ Ｐｌｕｓ ４００ＭＨｚ分光計を使用して記録した。

１０分間法は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ_１８ ３．５μｍ ２．１×５０ｍｍカラムを使用し、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ(ＥＳイオン化)およびＷａｔｅｒｓ ＰＤＡ ２９９６を備えたＷａｔｅｒｓ ２７９５分離モジュールを使用して実行した。

分取ＨＰＬＣは、Ｓｕｐｅｌｃｏ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＨＳ Ｃ１８ ５．０ｍ １０×２１．２ｍｍカラムを使用し、バイナリーＧｒａｄｉｅｎｔ Ｍｏｄｕｌｅ Ｗａｔｅｒｓ ２５２５ポンプ付きでＷａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ（ＥＳ）またはＷａｔｅｒｓ ２４８７ ＤＡＤに連結されているＷａｔｅｒｓ ２７６７システムを使用して実行した。

勾配は、方法ａ：指示された実行時間内で勾配５／９５〜９５／５の０．１％ギ酸／水および０．１％ギ酸／アセトニトリル(流量：１ｍＬ／分)か、方法ｂ：指示された実行時間内で勾配５／９５〜８０／２０の０．１％ギ酸／水および０．１％ギ酸／メタノール(流量：０．８ｍＬ／分)のどちらかを使用して実行した。最終化合物のための実行時間は、１０分である。

精製は、シリカゲルカートリッジアイソルート(isolute)フラッシュＳｉで行った。

すべてのＴＬＣ分析は、シリカゲル(Ｍｅｒｃｋ ６０ Ｆ２５４)上で行い、スポットは、２５４ｎｍにおけるＵＶ可視化およびＫＭｎＯ_４またはニンヒドリン染色により明らかにした。

一般的方法１

２−（３−ブロモフェニル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法１−ステップａ ｏ−フェニレンジアミン（８１．８ｇ、７５６．６ｍｍｏｌ）およびシュウ酸（３．４０ｇ、３７．８ｍｍｏｌ）を、８０℃にて前もって温めたＥｔＯＨ−Ｈ_２Ｏ／１：１（２Ｌ）に完全に溶かした。次いで、３−ブロモベンズアルデヒド（４４．１０ｍＬ、３７８．３０ｍｍｏｌ）を、溶液に滴加した。反応混合物を、開放空気に向けて７０℃にて一夜にわたって撹拌した。翌日、固体を濾別し、ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）と共に磨砕すると、黄白色の固体として生成物（２７．５０ｇ）が得られた。３．８ｇが母液から回収された。全収率３１．３０ｇ（３０％）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ ＤＭＳＯ）：δ ７．２４（２Ｈ，ｍ）、７．５４（２Ｈ，ｍ）、７．７０（ｍ，２Ｈ）、８．１９（１Ｈ，ｍ）、８．３７（１Ｈ，ｔ）、１３．２（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ２７３（Ｍ＋Ｈ）^＋；保持時間（方法ａ）＝８．６０（１０分操作）。

２−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法１−ステップｂ ２−（３−ブロモフェニル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（７．８ｇ、２８．６ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（３００ｍｌ）に完全に溶かし、次いで、ＮａＨ６０％ｍ／ｍ（１．４９ｇ、３７．２ｍｍｏｌ）を、澄明な黄色の溶液に少量ずつ加えた。淡褐色の懸濁液を、室温で１時間撹拌し、次いで、ＣＨ_３Ｉ（２．５ｍｌ、４０．０ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を、一夜にわたって室温で撹拌した。反応物を、Ｈ_２Ｏ（３００ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×４５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、蒸発させると、褐色〜黄色の固体として化合物（７．４０ｇ、７０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ ＤＭＳＯ）：δ ３．９０（３Ｈ，ｓ）、７．３０（２Ｈ，ｍ）、７．５５（１Ｈ，ｔ）、７．６４（１Ｈ，ｄ）、７．７０（１Ｈ，ｄ）、７．７７（１Ｈ，ｍ）、７．８８（１Ｈ，ｍ）、８．０５（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ＝２８７［Ｍ＋Ｈ］^＋、保持時間（方法ａ）＝７．７０（１０分操作）。

（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸エチルエステル
方法１−ステップｃ ２−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（０．８５ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（＋）−ニペコチン酸エチルエステル（０．６０ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．８２ｇ、１４．８０ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥シュレンク管に入れた。同時に、酢酸パラジウム（０．１４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、およびｒａｃ−２,２'ビス(ジフェニルホスフィノ)−１,１'−ビナフチル(binaphtyl)（ＢＩＮＡＰ）（０．５７ｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥７ｍＬバイアルに入れた。次いで、乾燥トルエン（５ｍＬ）を加え、混合物を、窒素下で２０分撹拌した後、第一のフラスコに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、濾別し、不溶の材料を、ＥｔＯＡＣ（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を、減圧下で濃縮し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液：シクロヘキサン１００％からシクロヘキサン４：ＡｃＯＥｔ１までのシクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ勾配）により精製すると、表題化合物０．７５ｇ（７０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．２５（３Ｈ，ｔ）、１．６６〜１．８８（３Ｈ，ｍ）、１．９５〜２．０３（１Ｈ，ｍ）、２．６７〜２．７４（１Ｈ，ｍ）、２．９４〜３．０１（１Ｈ，ｍ）、３．１６〜３．２２（１Ｈ，ｍ）、３．５２〜３．５７（１Ｈ，ｍ）、３．７３〜３．７７（１Ｈ，ｍ）、４．１５（２Ｈ，ｑ）、７．１６〜７．１９（２Ｈ，ｍ）、７．２８〜７．３６（３Ｈ，ｍ）、７．４１〜７．４５（１Ｈ，ｍ）、７．５３〜７．５６（１Ｈ，ｍ）、７．６６〜７．６８（１Ｈ，ｍ）。

（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩
方法１−ステップｄ ６Ｎ ＨＣｌ（４．０ｍＬ）中の（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸エチルエステル（０．７６ｇ、２．０９ｍｍｏｌ）の混合物を、２０分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した；変換を完了するのに３サイクルを必要とした。次いで、溶媒を除去し、粗製物を、アセトン／酢酸エチルの混合物（１：１）と共に磨砕し、固体を濾別し、真空下で乾燥すると、表題化合物０．６０ｇ（８６％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１．５２〜１．８４（３Ｈ，ｍ）、２．０（１Ｈ，ｍ）、２．６５（１Ｈ，ｍ）、３．０２（１Ｈ，ｔ）、３．１６（１Ｈ，ｔ）、３．６４（１Ｈ，ｄ）、３．８０（１ｈ，ｄ）、４．０３（３Ｈ，ｓ）、７．３５〜７．５１（２Ｈ，ｍ）７．５１〜７．７２（４Ｈ，ｍ）、７．８３〜７．９０（１Ｈ，ｍ）、８．０１〜８．０９（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ３３５（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．２７（５分操作）。

一般的方法２

２−（５−ブロモ−２−クロロフェニル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法２−ステップａ 磁気撹拌機を備えた１つ口の丸底フラスコに、５−ブロモ−２−クロロ安息香酸（７０．０ｇ、２９７．３ｍｍｏｌ）、ｏ−フェニレンジアミン（６４．３ｇ、５９４．６ｍｍｏｌ）およびメタンスルホン酸（１４０ｍＬ）を入れ、固体を融解するために１７０℃まで加熱した。系を、この温度にて５時間撹拌し、次いで、室温にした。青色の固体を、ＮａＯＨ３５％（２００ｍＬ）で処理すると、スミレ色の懸濁液（ｐＨ５）が得られ、濾過し、ＮａＯＨ ０．５Ｍ（２Ｌ）およびＨ_２Ｏ（２Ｌ）で洗浄した。生成物を、真空下で乾燥すると（６０℃）、純粋なスミレ色の固体６１．６ｇ（６７％）が得られた。
ｍ／ｚ ３０７／３０９（Ｍ＋Ｈ）^＋；保持時間（方法ａ）＝８．７３（１０分操作）。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法２−ステップｂ−磁気撹拌機を備えた３つ口の丸底フラスコに、２−（５−ブロモ−２−クロロフェニル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（３０．７ｇ、９９．８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１Ｌ）に懸濁させた。次いで、５０％ＮａＯＨ（７２．０ｇ、５９８ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を、撹拌下で１時間にわたって室温にて放置した。（ＢＯＣ）_２Ｏ（３７．０ｇ、１６９．７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶かし、反応混合物に加えた。反応物を、一夜にわたって撹拌下においた。溶媒を、減圧下で蒸発させた。得られた残渣を、水（５００ｍＬ）で希釈し、濾過し、真空下で乾燥すると（６０℃）、褐色の固体３９．８ｇ（９８％）が得られた。
ｍ／ｚ ４０７／４０９（Ｍ＋Ｈ）^＋；保持時間（方法ａ）＝９．１４（１０分操作）。

２−［２−クロロ−５−（（Ｒ）−３−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法２−ステップｃ ２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．５０ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（−）−ニペコチン酸エチルエステル（０．７５ｇ、４．７９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（６．００ｇ、１８．４３ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥シュレンク管に入れた。同時に、酢酸パラジウム（０．１７ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、およびＢＩＮＡＰ（０．７１ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥７ｍＬバイアルに入れた。次いで、乾燥トルエン（５ｍＬ）を加え、混合物を、窒素下で２０分撹拌した後、第一のフラスコに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、濾別し、不溶の材料を、ＥｔＯＡＣ（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を、減圧下で濃縮し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液：シクロヘキサン１００％からシクロヘキサン４：ＡｃＯＥｔ１までのシクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ勾配）により精製すると、表題化合物１．３３ｇ（７４％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．２３（３Ｈ，ｔ）、１．３６（９Ｈ，ｓ）、１．６４〜１．８４（３Ｈ，ｍ）、１．８４〜２．００（１Ｈ，ｍ）、２．６５〜２．７１（１Ｈ，ｍ）、２．９３〜２．９８（１Ｈ，ｍ）、３．１４〜３．１９（１Ｈ，ｍ）、３．４５〜３．５１（１Ｈ，ｍ）、３．６７〜３．７１（１Ｈ，ｍ）、４．１４（２Ｈ，ｑ）、７．１１〜７．１６（２Ｈ，ｍ）、７．３５〜７．３７（１Ｈ，ｍ）、７．４０〜７．４８（２Ｈ，ｍ）、７．７１〜７．７３（１Ｈ，ｍ）、８．１３〜８．１５（１Ｈ，ｍ）。

（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸エチルエステル
方法２−ステップｄ ジクロロメタン（２ｍＬ）中の２−［２−クロロ−５−（（Ｒ）−３−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３０ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）を加え、得られた混合物を、室温にて一夜にわたって撹拌した。固体を濾別し、次いで、１０％ＮａＯＨ（１０ｍＬ）で回収し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮すると、さらに精製することなく表題化合物０．８１ｇ（８５％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．２５（３Ｈ，ｔ）、１．６７〜１．８７（３Ｈ，ｍ）、１．９８〜２．０３（１Ｈ，ｍ）、２．６６〜２．７２（１Ｈ，ｍ）、２．９４〜３．０１（１Ｈ，ｍ）、３．１７〜３．２２（１Ｈ，ｍ）、３．５０〜３．５５（１Ｈ，ｍ）、３．７０〜３．７５（１Ｈ，ｍ）、４．１４（２Ｈ，ｑ）、７．１０〜７．１３（１Ｈ，ｍ）、７．２６〜７．３１（２Ｈ，ｍ）、７．４０〜７．４２（２Ｈ，ｍ）、７．６２（２Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ＝３８４［Ｍ＋Ｈ］^＋、保持時間（方法ａ）＝１．８２（５分操作）。

（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩
方法２−ステップｅ ６ＮのＨＣｌ（４．０ｍＬ）中の（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸エチルエステル（０．８１ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）の混合物を、２０分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した；変換を完了するのに２サイクルを必要とした。次いで、溶媒を除去し、粗製物を、アセトン／酢酸エチルの混合物（１：１）と共に磨砕し、固体を濾別し、真空下で乾燥すると、表題化合物０．６０ｇ（８０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ １．５０〜１．７２５（２Ｈ，ｍ）、１．７２（１Ｈ，ｍ）、２．５４（１Ｈ，ｍ）、２．９３（１Ｈ，ｔ）、３．０６（１Ｈ，ｔ）、３．６３（１Ｈ，ｄ）、３．８０（１Ｈ，ｄｄ）、７．３１（１Ｈ，ｄｄ）、７．５４〜７．５８（２Ｈ，ｍ）、７．６０〜７．６２（２Ｈ，ｍ）、７．８６〜７．９０（２Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ３５５（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．４５（５分操作）。

一般的方法３、４

Ｎ−（２−アミノ−５−フルオロ−フェニル）−５−ブロモ−２−クロロ−ベンズアミド
方法３、４−ステップａ 固体５−ブロモ−２−クロロ安息香酸（７．００ｇ、２９．７９ｍｍｏｌ）、４−フルオロ−ベンゼン−１,２−ジアミン（４．６５ｇ、３６．９４ｍｍｏｌ）およびヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム(ＨＡＴＵ)（１１．８９ｇ、３１．２８ｍｍｏｌ）の混合物に、トリエチルアミン(ＴＥＡ)（４．６０ｍＬ、３２．７７ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１２０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（３０ｍＬ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、水を加え（３０ｍＬ）、沈殿が形成するまで撹拌した。沈殿を濾別し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥すると、表題化合物６．９０ｇ（６９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ ５．２７（２Ｈ，ｓ）、６．３４（１Ｈ，ｔｄ）、６．５０（１Ｈ，ｄｄ）、７．１７（１Ｈ，ｄｄ）、７．５０（１Ｈ，ｄ）、７．６７（１Ｈ，ｄｄ）、７．９７（１Ｈ，ｄ）、９．７２（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ３４５（Ｍ＋２）^＋。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法３、４−ステップｂ 酢酸（４０ｍＬ）中のＮ−（２−アミノ−５−フルオロ−フェニル）−５−ブロモ−２−クロロ−ベンズアミド（６．９０ｇ、２０．１２ｍｍｏｌ）の溶液を、一夜にわたって８０℃にて撹拌し、次いで、溶媒を、減圧下で除去し、粗製物を、ジエチルエーテルから沈殿させることにより精製すると、表題化合物６．００ｇ（９２％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ ７．１０（１Ｈ，ｍ）、７．３５〜７．５０（１Ｈ，ｍ）、７．５６および７．７０（１Ｈ，ｍ）、７．６１（１Ｈ，ｍ）、７．７３（１Ｈ，ｍ）、８．０８（１Ｈ，ｍ）、１２．９２（１Ｈ，ｓ）。ｍ／ｚ ３２７（Ｍ＋２）^＋。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−フルオロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法３−ステップｃ フラスコに、２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（６．００ｇ、１８．４６ｍｍｏｌ）と共に、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（０．２３ｇ、１．８５ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｂｏｃ_２Ｏ）（５．２３ｇ、２４．００ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（９０ｍＬ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、溶媒を、減圧下で除去し、粗製物を、シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／１０：１の混合物から沈殿させると、表題化合物４．６０ｇ（５９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ １．４０（９Ｈ，ｓ）、７．１０〜７．２２（１Ｈ，ｍ）、７．３４（１Ｈ，ｄｄ）、７．４７および７．８３（１Ｈ，ｍ）、７．５５〜７．５９（１Ｈ，ｍ）、７．７１（１Ｈ，ｍ）、７．７４および８．０６（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４２７（Ｍ＋２）^＋。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法４−ステップｃ フラスコに、２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（６．５０ｇ、１９．２９ｍｍｏｌ）と共に、ＤＭＡＰ（０．２３ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ_２Ｏ（５．４７ｇ、２５．０７ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１００ｍＬ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、溶媒を、減圧下で除去した。粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液勾配：シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／５：１から１：２まで）により精製すると、表題化合物４．７０ｇ（５６％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ １．３２（９Ｈ，ｓ）、３．８２（３Ｈ，ｄ）、７．０４（１Ｈ，ｍ）、７．２９および７．６５（１Ｈ，ｍ）、７．５６（２Ｈ，ｍ）、７．７５（１Ｈ，ｍ）、７．８８（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４３８（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝７．４７（１０分操作）。

２−［２−クロロ−５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−５−フルオロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法３、４−ステップｄ ２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−フルオロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０４ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）、ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．４９ｍＬ、３．１９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３．９９ｇ、１２．２９ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥シュレンク管に入れた。同時に、酢酸パラジウム（０．１１ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、およびＢＩＮＡＰ（０．４６ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥７ｍＬバイアルに入れた。次いで、乾燥トルエン（４ｍＬ）を加え、混合物を、窒素下で２０分撹拌した後、第一のフラスコに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、塩を濾別し、有機溶液を、減圧下で濃縮し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液：シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／５：１から１：２までのシクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ勾配）により精製すると、表題化合物０．８４ｇ（６８％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．３５（３Ｈ，ｔ）、１．４５（９Ｈ，ｓ）、１．８０（２Ｈ，ｍ）、１．９９（２Ｈ，ｍ）、２．５２（１Ｈ，ｍ）、２．８８（２Ｈ，ｍ）、３．７２（２Ｈ，ｍ）、４．１３（２Ｈ，ｑ）、７．１０〜７．２８（３Ｈ，ｍ）、７．３５（１Ｈ，ｄ）、７．４３および７．８６（１Ｈ，ｍ）、７．７１および８．１４（１Ｈ，ｄｄ）；ｍ／ｚ ５０２（Ｍ＋Ｈ）^＋，保持時間(方法ａ)＝３．１０(５分操作)。

１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法３、４−ステップｅ ６Ｎ ＨＣｌ（４ｍＬ）中の２−［２−クロロ−５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−５−フルオロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．４２ｇ、０．８４ｍｍｏｌ）の混合物を、数分にわたって室温にて撹拌し、次いで、１５分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した。溶媒を、真空下で除去すると、定量的な収率で表題化合物が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．９５（２Ｈ，ｍ）、２．１３（２Ｈ，ｍ）、２．６５（１Ｈ，ｍ）、３．２０（２Ｈ，ｍ）、３．８３（２Ｈ，ｍ）、７．５３（２Ｈ，ｍ）、７．６９（３Ｈ，ｍ）、７．９１（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ３７４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．６５（５分操作）。

一般的方法５

２−［２−クロロ−５−（３−エトキシカルボニル−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法５−ステップａ ２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（一般的方法４、ステップｃに記載されているようにして得られる）（１．８０ｇ、４．２８ｍｍｏｌ）、ピロリジン−３−カルボン酸メチルエステル（０．９２ｇ、５．５６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（６．９５ｇ、２１．３８ｍｍｏｌ）を、乾燥トルエン（１１ｍＬ）中の酢酸パラジウム（０．１９ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（０．８０ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を含有し、窒素下で２０分にわたって前もって撹拌した窒素下の乾燥フラスコに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、ＡｃＯＥｔ（４０ｍＬ）で希釈し、塩を濾別し、有機層を、水（１×３０ｍＬ）およびブライン(brine）（１×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、次いで、減圧下で濃縮した。粗製物に、溶媒シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／４：１の混合物（１５ｍＬ）を加え、Ｎａ_２ＳＯ_４と共にカラムに通して濾過してすべての塩を除去し、溶媒の混合物で洗浄し、有機層を、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液：シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／４：１)により精製すると、表題化合物１．７１ｇ（８６％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．３０（９Ｈ，ｓ）、１．３８（３Ｈ，ｓ）、２．２０（２Ｈ，ｍ）、３．２４〜３．５１（５Ｈ，ｍ）、３．６３（３Ｈ，ｓ）、６．６８（１Ｈ，ｍ）、６．７４（１Ｈ，ｍ）、７．２３（１Ｈ，ｍ）、７．３０（１Ｈ，ｍ）、７．５４および７．８２（１Ｈ，ｍ）、７．６２および７．８６（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４７０（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝５．１２（１０分操作）。

１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−カルボン酸
方法５−ステップｂ 一般的方法３、４ステップｅに記載されているように、２−［２−クロロ−５−（３−エトキシカルボニル−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから出発し、定量的な収率で表題化合物を得た。

一般的方法６

Ｎ−（２−アミノ−５−メトキシ−フェニル）−５−ブロモ−２−フルオロ−ベンズアミド
方法６−ステップａ ジクロロメタン（２０ｍＬ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）中の５−ブロモ−２−フルオロ−安息香酸（１．５０ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）、４−メトキシ−ベンゼン−１，２−ジアミン二塩酸塩（１．７７ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．７３ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（２．８８ｍＬ、２０．７６ｍｍｏｌ）の混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、次いで、水を加え（５０ｍＬ）、混合物を、２時間にわたって撹拌し、一夜にわたって室温にて放置した。得られた沈殿を濾別し、乾燥すると、表題化合物１．４５ｇ（５０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ^６）：δ ３．６５（３Ｈ，ｓ）、４．９６（２Ｈ，ｂｓ）、６．１５（１Ｈ，ｄｄ）、６．３１（１Ｈ，ｓ）、７．０５（１Ｈ，ｄ）、７．３１（１Ｈ，ｍ）、７．７１（１Ｈ，ｍ）、７．９１（１Ｈ，ｄ）、９．５０（１Ｈ，ｓ）。

２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法６−ステップｂ 酢酸（１５ｍＬ）中のＮ−（２−アミノ−５−メトキシ−フェニル）−５−ブロモ−２−フルオロ−ベンズアミド（１．４５ｇ、４．２８ｍｍｏｌ）の混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱した。溶媒を、減圧下で除去し、粗製物を、ＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）から沈殿させることにより精製し、乾燥し、ジクロロメタン（２０ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）の混合物で回収し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３×５ｍＬ）で洗浄し、有機層を、相分離器に通して濾過することにより回収し、溶媒を、減圧下で除去すると、表題化合物０．８６ｇ（６３％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ^６）：δ ３．７９（３Ｈ，ｓ）、６．８６（１Ｈ，ｄ）、７．０４（１Ｈ，ｂｓ）、７．４１（１Ｈ，ｄｄ）、７．５５（１Ｈ，ｂｓ）、７．６９（１Ｈ，ｍ）、８．３０（１Ｈ，ｍ）、１１．９３（１Ｈ，ｓ）。

２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法６−ステップｃ ｄｃｍ（１０ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（０．８７ｇ、２．７０ｍｍｏｌ）の撹拌した混合物に、Ｂｏｃ_２Ｏ（０．７６ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０３ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、週末にわたって室温にて撹拌した。次いで、ジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（４ｍＬ）、クエン酸（１０％溶液）で洗浄し、有機層を、相分離器に通して濾過することにより回収し、溶媒を、減圧下で除去した。次いで、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液 シクロヘキサン：酢酸エチル／１０：１）により精製すると、２つのジアステレオ異性体の混合物として表題化合物０．８２ｇ（７２％）が得られた。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４５（９Ｈ，ｓ）、１．４７（９Ｈ，ｓ）、３．８８（３Ｈ，ｓ）、３．９０（３Ｈ，ｓ）、６．９８〜７．０６（４Ｈ，ｍ）、７．２５〜７．２７および７．８０〜７．８３（３Ｈ，ｍ）、７．５４〜７．６１（３Ｈ，ｍ）、７．９３（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４２３（Ｍ＋２Ｈ）^＋，保持時間（方法ａ）＝３．０２（５分操作）。

一般的方法７

Ｎ−（２−アミノ−５−クロロ−フェニル）−５−ブロモ−２−フルオロ−ベンズアミド
方法７−ステップａ ジクロロメタン（７０ｍＬ）およびＤＭＦ（１６ｍＬ）中の５−ブロモ−２−フルオロ−安息香酸（３．００ｇ、１３．７０ｍｍｏｌ）、４−クロロ−ベンゼン−１，２−ジアミン（２．４２ｇ、１６．９９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５．４７ｇ、１４．３８ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．９１ｍＬ、１３．８３ｍｍｏｌ）の混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、次いで、水を加え（８０ｍＬ）、一夜にわたって室温にて放置した。有機層を分け、溶媒を、減圧下で除去し、得られた粗製の油を、溶媒ジクロロメタン：シクロヘキサン／３：１の混合物（３０ｍＬ）から結晶化させると、表題化合物２．１９ｇ（５２％）が得られた。
ｍ／ｚ ３４４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間 ＝５．３３（１０分操作）^ａ。

２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
方法７−ステップｂ 酢酸（１０ｍＬ）中のＮ−（２−アミノ−５−クロロ−フェニル）−５−ブロモ−２−フルオロ−ベンズアミド（１．６０ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）の混合物を、一夜にわたって８５℃にて加熱した。溶媒を、減圧下で除去し、得られた固体を、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥すると、表題化合物１．４０ｇ（９３％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ７．２７〜７．３３（２Ｈ，ｍ）、７．６０〜７．６４（２Ｈ，ｍ）、７．６９（１Ｈ，ｍ）、８．３３（１Ｈ，ｄｄ）。

２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−クロロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法７−ステップｃ ｄｃｍ（２８ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（１．４１ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）の撹拌した混合物に、Ｂｏｃ_２Ｏ（１．２３ｇ、５．６３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０５ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌した。反応混合物を、飽和ＮａＨ_４Ｃｌ溶液（２×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液勾配：シクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ ８：１から５：１まで）により精製すると、２つの位置異性体の混合物として表題化合物１．３１ｇ（７１％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４５（９Ｈ，２ｓ）、７．０５（１Ｈ，ｍ）、７．３９（１Ｈ，ｍ）、７．６０（１Ｈ，ｍ）、７．７１（０．５Ｈ，ｄ）、７．７８（０．５Ｈ，ｄ）、７．８３（１Ｈ，ｍ）、７．９９（０．５Ｈ，ｄ）、８．１０（０．５Ｈ，ｄ）。

一般的方法８

２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法８−ステップａ ２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（一般的方法６、ステップｃに記載されているようにして得られる）（０．９４ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）、ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．４８ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３．９０ｇ、１２．０１ｍｍｏｌ）を、乾燥したシュレンク管に入れ、３回の真空(vaccum)／窒素サイクルを行い、次いで乾燥トルエン（４ｍＬ）を加えた。同時に、酢酸パラジウム(ＩＩ)（０．８２ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、およびＢＩＮＡＰ（０．４５ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥したシュレンク管に入れ、３回の真空／窒素サイクルを行った。次いで、乾燥トルエン（２ｍＬ）を加え、窒素下で室温にて、混合物を、第一のシュレンクに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、水（５ｍＬ）を加え、有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で濾過し、次いで、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液：シクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ ８：２）により精製すると、定量的な収率で表題化合物１．１５ｇが得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．２７（３Ｈ，ｔ）、１．４３（９Ｈ，ｓ）、１．８９（２Ｈ，ｍ）、２．０２（２Ｈ，ｍ）、２．４１（１Ｈ，ｍ）、２．５０（３Ｈ，ｓ）、２．８０（２Ｈ，ｍ）、３．５９（２Ｈ，ｍ）、４．１６（２Ｈ，ｑ）、７．０１（２Ｈ，ｍ）、７．２１（２Ｈ，ｍ）、７．６６（１Ｈ，ｄ）、７．９１（１Ｈ，ｄ）。

１−［４−（フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法８−ステップｂ ６Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）中の２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−５−メチル−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１５ｇ、２．３９ｍｍｏｌ）の混合物を、１５分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した（２回の実行が必要であった）。溶媒を、真空下で除去すると、定量的な収率で表題化合物が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ ２．１９（２Ｈ，ｍ）、２．３４（２Ｈ，ｍ）、２．５９（３Ｈ，ｓ）、２．８０（１Ｈ，ｍ）、３．５５（２Ｈ，ｍ）、３．８５（２Ｈ，ｍ）、７．５３（１Ｈ，ｄ）、７．６３〜７．７０（２Ｈ，ｍ）、７．７８（１Ｈ，ｄ）、７．９１〜７．９６（１Ｈ，ｍ）、８．２７〜８．３３（１Ｈ，ｍ）。

一般的方法９

２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法９−ステップａ ２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（一般的方法６、ステップｃに記載されているようにして得られる）（１．０５ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．５１ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．０７ｇ、１２．５０ｍｍｏｌ）を、乾燥したシュレンク管に入れ、３回の真空／窒素サイクルを行い、次いで、乾燥トルエン（４ｍＬ）を加えた。同時に、酢酸パラジウム(ＩＩ)（０．１１ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、およびＢＩＮＡＰ（０．４８ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥したシュレンク管に入れ、３回の真空／窒素サイクルを行った。次いで、乾燥トルエン（２ｍＬ）を加え、窒素下で室温にて、混合物を、第一のシュレンクに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、ＥｔＯＡＣ（２０ｍＬ）を加え、混合物を濾別した。溶媒を除去し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液勾配：シクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ ４：１から３：１まで）により精製すると、表題化合物０．８２ｇ（６９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ，２種の位置異性体）：δ １．２５（６Ｈ，ｔ）、１．４０（１８Ｈ，ｓ）、１．７６〜１．８８（４Ｈ，ｍ）、１．９６〜２．０４（４Ｈ，ｍ）、２．４２〜２．５１（２Ｈ，ｍ）、２．８０（４Ｈ，ｔ）、３．５８〜３．６５（４Ｈ，ｍ）；３．８５（３Ｈ，ｓ）；３．８７（３Ｈ，ｓ）；４．１３（４Ｈ，ｑ）；６．９９〜７．０６（２Ｈ，ｍ）、７．０７〜７．１８（４Ｈ，ｍ）、７．１９〜７．２３（３Ｈ，ｍ）、７．５８（１Ｈ，ｄ）、７．６２（１Ｈ，ｄ）；７．９４（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ ４９８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

１−［４−（フルオロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法９−ステップｂ ６Ｎ ＨＣｌ（４ｍＬ）中の２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．９２ｇ、１．９１ｍｍｏｌ）の混合物を、１時間にわたって室温にて、次いで、１５分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した。溶媒を、真空下で除去し、次いで、アセトン：ジエチルエーテル１：１の混合物（２０ｍＬ）に取り、固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥すると、表題化合物０．２２ｇ（２９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ，）：δ １．９８〜２．１０（２Ｈ，ｍ）、２．１８〜２．２６（２Ｈ，ｍ）、２．６３〜２．７１（１Ｈ，ｍ）、３．２４〜３．３２（２Ｈ，ｍ）、３．７７〜３．８４（２Ｈ，ｍ）；３．９５（３Ｈ，ｓ）；７．２６〜７．３１（２Ｈ，ｍ）、７．５４（１Ｈ，ｄｄ）、７．６５〜７．７１（１Ｈ，ｍ）、７．７５（１Ｈ，ｄｄ）、７．９２〜７．９８（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ３７０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

一般的方法１０

５−クロロ−２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法１０−ステップａ ２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−５−クロロ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（一般的方法７、ステップｃに記載されているようにして得られる）（１．０６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２(ｄｂａ)_３（０．３６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、２−ジ−ｔ−ブチルホスフィノ−２',４',６'−トリ−ｉ−プロピル−１,１'ビフェニル(ｔ−ＢｕＸｐｈｏｓ)（０．３２ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４８ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を、乾燥したバイアルに入れ、数回の真空／窒素サイクルを行った。次いで、乾燥トルエン（５ｍＬ）およびピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．５０ｍＬ、３．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって８５℃にて加熱し、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（３×５ｍＬ）および水（３×３ｍＬ）で洗浄した。有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ：シクロヘキサン／１：５から１：２までの勾配）により精製すると、表題化合物０．３０ｇ（２４％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．２６（３Ｈ，ｔ）、１．４３（９Ｈ，ｓ）、１．６０（２Ｈ，ｍ）、１．９０（２Ｈ，ｍ）、２．４２（１Ｈ，ｍ）、２．８１（２Ｈ，ｍ）、３．６０（２Ｈ，ｍ）、４．１６（２Ｈ，ｑ）、７．０５（２Ｈ，ｍ）、７．３６（２Ｈ，ｍ）、７．６９（１Ｈ，ｄ）、８．０９（１Ｈ，ｓ）。

１−［３−（５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法１０−ステップｂ ６Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）中の５−クロロ−２−［５−（４−エトキシカルボニル−ピペリジン−１−イル）−２−フルオロ−フェニル］−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．３０ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の混合物を、１５分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱し、２回のサイクルが必要であった。溶媒を、真空下で除去し、次いで、固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥すると、表題化合物０．１７ｇ（７０％）が得られた。

一般的方法１１

１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル
方法１１−ステップａ ２−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（一般的方法１、ステップｂに記載されているようにして得られる）（５．００ｇ、１７．４０ｍｍｏｌ）、ピペリジン−４−カルボン酸エチル(esthyl)エステル（３．５６ｇ、２２．６２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（２８．３４ｇ、８７ｍｍｏｌ）を、窒素下で丸底フラスコに入れた。同時に、酢酸パラジウム（０．７９ｇ、３．４８ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（３．３３ｇ、５．２２ｍｍｏｌ）を、窒素下でフラスコに入れた。次いで、乾燥トルエン（１８ｍＬ）を加え、混合物を、窒素下で２０分撹拌した後、第一のフラスコに加えた。反応混合物を、２日にわたって８０℃にて加熱し、次いで、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、Ｎａ_２ＳＯ_４に通して濾過し、水（２×５０ｍＬ）およびブライン（ｂｒｉｎｅ）（１×５０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を、減圧下で濃縮し、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液：シクロヘキサン：ＡｃＯＥｔ／４：１)により精製すると、表題化合物３．４５ｇ（５５％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ １．１９（３Ｈ，ｔ）、１．６８（２Ｈ，ｑｄ）、１．９３（２Ｈ，ｄｄ）、２．４９〜２．５８（１Ｈ，ｍ）、２．８６（２Ｈ，ｔｄ）；３．７５（２Ｈ，ｄｔ）；３．８６（３Ｈ，ｓ）；４．０９（２Ｈ，ｑ）、７．１０〜７．４２（６Ｈ，ｍ）、７．５９（１Ｈ，ｄ）、７．６７（１Ｈ，ｄ）。

１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法１１−ステップｂ ６Ｎ ＨＣｌ（２５．０ｍＬ）中の１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（３．１０ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）の混合物を、２０分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した。次いで、溶媒を除去すると、定量的な収率で表題化合物が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ １．６５〜１．８５（２Ｈ，ｍ）、１．９４（２Ｈ，ｄ）、２．４８〜２．５７（１Ｈ，ｍ）、３．０４（２Ｈ，ｔ）、３．７９（２Ｈ，ｄ）、４．０５（３Ｈ，ｓ）、７．３７〜７．５４（２Ｈ，ｍ）、７．５５〜７．７１（４Ｈ，ｍ）、７．８４〜７．９１（１Ｈ，ｍ）、８．０３〜８．０９（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ３３３（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝１．９５（１０分操作）。

方法Ａ

例１：｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン塩酸塩
４−｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボニル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法Ａ−ステップａ （Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸（０．１０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）（一般的方法１、ステップｄに記載されているようにして得られる）、ＨＡＴＵ（０．１２ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０９ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−１−ピペラジンカルボキシレート（０．０７ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ジクロロメタン（２ｍＬ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、溶媒を除去し、粗製物を、分取ＨＰＬＣおよびＮＨ２カラム濾過により精製すると、表題化合物０．０４ｇ（２７％）が得られた。
ｍ／ｚ ５０３（Ｍ＋Ｈ）^＋，保持時間（方法ａ）＝２．５２（１０分操作）。

｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン塩酸塩
方法Ａ−ステップｂ ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の４−｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボニル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０４ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ ＨＣｌ（２ｍＬ）を加え、得られた混合物を、室温にて一夜にわたって撹拌した。溶媒を除去すると、定量的な収率で塩酸塩として表題化合物０．０４ｇが得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ １．７４（１Ｈ，ｍ）、１．９２〜２．１７（１Ｈ，ｍ）、３．０３〜３．５１（７Ｈ，ｍ）、３．８９（６Ｈ，ｍ）、４．１４（３Ｈ，ｓ）、７．５４〜７．８１（４Ｈ，ｍ）、７．８３〜７．９１（２Ｈ，ｍ），７．９６〜８．０２（２Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４０４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝０．２０（１０分操作）。

方法Ｂ

例２：｛（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−ピロリジン−１−イル−メタノン
方法Ｂ−ステップａ （Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法２、ステップｅに記載されているようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）（一般的方法２に記載されているようにして得られる）、ＨＡＴＵ（０．１１ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）（０．０９ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−１−ピペラジンカルボキシレート（０．０８ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ジクロロメタン（２ｍＬ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、溶媒を除去し、粗製物を、分取ＨＰＬＣおよびＮＨ２カラム濾過により精製すると、表題化合物０．０６ｇ（５５％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ １．５９〜２．０６（８Ｈ，ｍ）、２．７５〜２．８９（２Ｈ，ｍ）、２．９４（２Ｈ，ｔ）、３．３５〜３．４８（２Ｈ，ｍ）、３．８４（２Ｈ，ｔ）、７．１２（１Ｈ，ｄｄ）、７．２４〜７．３２（２Ｈ，ｍ）、７．３７〜７．４４（２Ｈ，ｍ）、７．５５〜７．７２（１Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ ４０９（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝２．２７（１０分操作）。

方法Ｃ

例３：｛１−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペリジン−１−イル−メタノン
５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ−（４−ニトロ−ピリジン−３−イル）−ベンズアミド
方法Ｃ−ステップａ ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の５−ブロモ−２−クロロ安息香酸（５．００ｇ、２１．２３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（８．４８ｇ、２２．２９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．９７ｍＬ、２１．４４ｍｍｏｌ）を加えた、室温における３０分の撹拌後、４−ニトロ−ピリジン−３イルアミン（２．３６ｇ、１６．９９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって４０℃にて撹拌し、溶媒を除去した。次いで、粗製物を、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈し、最初に飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（６×３０ｍＬ）、次いで、１Ｎ ＨＣｌ（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、放置した。得られた沈殿を濾過すると、表題化合物４．７５ｇ（６３％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ ７．５６（１Ｈ，ｄ）、７．７７〜７．９２（３Ｈ，ｍ）、８．８２（１Ｈ，ｄ）、９．１４（１Ｈ，ｓ）、１１．３５（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ３５５（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝２．３２（５分操作）。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン
方法Ｃ−ステップｂ 酢酸（６ｍＬ）中の５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ−（４−ニトロ−ピリジン−３−イル）−フェニルアミン（０．５０ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）の混合物に、鉄（０．１６ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を、１．５時間にわたって８０℃にて加熱した。次いで、反応混合物を、室温まで冷却した。水を加え（３０ｍＬ）、ｄｃｍ（２０ｍＬ）による抽出を行って未反応出発材料を除去した。次いで、水層に、飽和ロッシェル塩溶液（５０ｍＬ）および飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（３０ｍＬ）を加え、次いで、抽出を、ｄｃｍ（２０ｍＬ）で行った。有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発させると、さらに精製することなく表題化合物０．２８ｇ（６５％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ ７．４５（１Ｈ，ｄ）、７．５９〜７．６８（２Ｈ，ｍ）、７．９８（１Ｈ，ｄ）、８．２６（１Ｈ，ｄ）、８．８７（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ３０９（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．１３（５分操作）。

２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法Ｃ−ステップｃ ｄｃｍ（５０ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジンの混合物に、Ｂｏｃ_２Ｏ（０．３６ｇ、１６．３６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．２０ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌した。次いで、溶媒を、減圧下で除去し、粗製物を、Ｓｉカラム（溶離液として酢酸エチル）に通して濾過することにより精製すると、表題化合物４．８０ｇ（８０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ １．４１（１８Ｈ，ｄ）、７．５２（２Ｈ，ｄｄ）、７．７３〜７．８７（５Ｈ，ｍ）、８．１５（１Ｈ，ｄｄ）、８．５６（２Ｈ，ｔ）、９．０２（１Ｈ，ｓ）、９．３８（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ４０９（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．０３（５分操作）。

１−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル
方法Ｃ−ステップｄ ２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．５０ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（Ｐｄ_２ｄｂａ_３）（０．１３ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル（Ｘｐｈｏｓ）（０．１７ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．２０ｇ、３．６８ｍｍｏｌ）を、乾燥したシュレンクに入れ、数回の真空／窒素サイクルを行った。次いで、乾燥ジオキサン（２．００ｍＬ）およびピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．３８ｍＬ、２．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、４時間にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、硫酸ナトリウム（Ｎａ_２ＳＯ_４）に通して濾過した。粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液勾配：ＥｔＯＡｃ１００％〜ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ／９５：５）により精製すると、表題化合物と脱保護された出発材料の混合物（７：３）０．６０ｇが得られた。混合物を、次のステップに使用した。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ １．２６（３Ｈ，ｔ）、１．７１〜１．９２（２Ｈ，ｍ）、１．９２〜１．９４（２Ｈ，ｍ）、２．４５〜２．５９（１Ｈ，ｍ）、２．８８（２Ｈ，ｔ）、３．７１〜３．８０（２Ｈ，ｍ）、４．０６〜４．２２（２Ｈ，ｑ）、７．１１〜７．１８（ｄｄ，１Ｈ）、７．４２（２Ｈ，ｑ）、７．６７（１Ｈ，ｄ）、８．３５（１Ｈ，ｄ）、８．９４（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ３８４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．４２（５分操作）。

１−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩
方法Ｃ−ステップｅ ６Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）中の１−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル（０．６０ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）の混合物を、２０分にわたって１２０℃にてマイクロ波中で加熱した；変換を完了するのに２回のサイクルが必要であった。溶媒を、真空下で除去すると、７：３の比で、表題化合物と２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（前のステップに由来する）の混合物０．６１ｇが得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ２．２７〜２．３８（４Ｈ，ｍ）、２．９０（１Ｈ，ｍ）、３．８０〜３．８７（４Ｈ，ｍ）、７．６３（１Ｈ，ｄｄ）、７．９１（１Ｈ，ｍ）、８．２５（１Ｈ，ｄ）、８．３７（１Ｈ，ｍ）、８．６４（１Ｈ，ｄ）、９．４３（１Ｈ，ｓ）。

｛１−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペリジン−１−イル−メタノン
方法Ｃ−ステップｆ １−［４−クロロ−３−（３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩（０．０９ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン(ＴＥＡ)（０．０８ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）、ピペリジン（０．０３ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（２ｍＬ）の混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（３ｍＬ）で洗浄し、粗製物をＳＣＸ（溶離液：ＭｅＯＨ中ＮＨ３ ２Ｎ）およびフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＡｃＯＥｔ：ＭｅＯＨ、９：１）により精製すると、表題化合物０．０４ｇ（３７％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．５４〜１．７０（６Ｈ，ｍ）、１．７９〜１．９１（４Ｈ，ｍ）、２．８３〜２．９２（３Ｈ，ｍ）、３．５３〜３．５９（４Ｈ，ｍ）、３．８６（２Ｈ，ｄ）、７．１６（１Ｈ，ｄｄ）、７．４３（２Ｈ，ｍ）、７．６９（１Ｈ，ｄ）、８．３６（１Ｈ，ｄ）、８．９４（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ４２４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝３．３８（１０分操作）。

方法Ｄ

例４：（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン
方法Ｄ−ステップａ （Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法１、ステップｄに記載されているようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）（方法Ａ、ステップｄに記載されているようにして得られる）およびＨＡＴＵ（０．１１ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ＴＥＡ（０．０８ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（２ｍＬ）を加え、次いで、ジメチル−ピロリジン−３−イル−アミン（０．０４ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、次いで、塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）を加え、二相溶液を、数分にわたって撹拌した。有機層を回収し、粗製物を、ＳＣＸカラム（溶離液 ｄｃｍ：ＭｅＯＨ １：１からＭｅＯＨ中２Ｎ ＮＨ３まで）、およびＰｒｅｐＨＰＬＣにより精製すると、ギ酸塩(formiate salt)として表題化合物のジアステレオ異性(diasteroisomeric)混合物０．０７ｇ（６５％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：１．６２〜２．１１（ｍ，１０Ｈ）；２．６６〜２．３９（ｍ，２Ｈ）；２．５３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，６Ｈ）；２．６１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，６Ｈ）；２．７８〜２．９９（ｍ，６Ｈ）、３．３５（ｍ，４Ｈ）、３．５０（ｍ，１Ｈ）；３．６２〜３．７３（ｍ，２Ｈ）；３．８２〜３．９０（ｍ，１２Ｈ）；４．０２（ｍ，１Ｈ）、７．１９（ｍ，４Ｈ）；７．３２（ｍ，６Ｈ）；７．４４（ｍ，２Ｈ）；７．５６（ｍ，２Ｈ）；７．６８（ｍ，２Ｈ）８．３３（ｓ，２Ｈ）；ｍ／ｚ ４３２（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝０．７０（１０分操作）。

方法Ｅ

例５：｛１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン
方法Ｅ−ステップａ １−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−カルボン酸（一般的方法５、ステップｂに記載されているようにして得られる）(０．０９ｇ、０．２５ｍｍｏｌ)、ＨＡＴＵ(０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ)、ＴＥＡ(０．０７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ)およびモルホリン(０．０３ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ)が入ったバイアルに、ジクロロメタン(２ｍＬ)を加え、反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液(２ｍＬ)を、撹拌しながら加え、有機層を、相分離器に通して濾過することにより回収し、溶媒を、減圧下で除去した。粗製物を、ＮＨ２カラム（溶離液：ジクロロメタン：ＭｅＯＨ １０：０から５：５まで）、およびＳＣＸにより精製すると、表題化合物０．０５ｇ（４６％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ ２．２０〜２．３２（２Ｈ，ｍ）、２．４８（３Ｈ，ｓ）、３．３４〜３．５２（３Ｈ，ｍ）、３．５３〜３．６３（４Ｈ，ｍ）、３．６４〜３．７２（６Ｈ，ｍ）、６．７１（１Ｈ，ｄｄ）、７．０１（１Ｈ，ｄ）、７．１２（１Ｈ，ｄ）、７．３４（１Ｈ，ｄ）、７．４１（１Ｈ，ｓ）、７．５０（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ ４２５（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝２．１３（１０分操作）。

方法Ｆ

例６：｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ（ｍｅｔｈｙｏｘｙ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−４−イル｝−ピロリジン−１−イル−メタノンギ酸塩
２−｛２−クロロ−５−［４−（ピロリジン−１−カルボニル）−ピペリジン−１−イル］−フェニル｝−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法Ｆ−ステップａ ２−（５−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（一般的方法４、ステップｃに記載されているようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、ピペリジン−４−イル−ピロリジン−１−イル−メタノン（０．０５ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．３７ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を、乾燥したバイアルに入れ、３回の真空／窒素サイクルを行い、次いで、乾燥トルエン（０．２０ｍＬ）を加えた。同時に、酢酸パラジウム（０．０１ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、およびＢＩＮＡＰ（０．０４ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥した４ｍＬバイアルに入れ、３回の真空／窒素サイクルを行った。次いで、乾燥トルエン（０．４０ｍＬ）を加え、窒素下で室温にて、混合物を、第一のバイアルに加えた。反応混合物を、一夜にわたって８０℃にて加熱し、室温まで冷却し、ＥｔＯＡＣ（３ｍＬ）を加え、混合物を濾別した。溶媒を除去し、粗製物を、ＥｔＯＡｃ（３．５ｍＬ）で回収し、２ｇシリカカラム(溶離液ＥｔＯＡｃ)に通して濾過すると、さらに精製することなく表題化合物０．１０ｇ（８２％）が得られた。

｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−４−イル｝−ピロリジン−１−イル−メタノンギ酸塩
方法Ｆ−ステップｂ Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ ＨＣｌ(２ｍＬ)中の２−｛２−クロロ−５−［４−（ピロリジン−１−カルボニル）−ピペリジン−１−イル］−フェニル｝−５−メトキシ−ベンゾイミダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．１０ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に、数滴のジクロロメタンおよびメタノールを加えて出発材料の溶解度を改善した。得られた混合物を、室温にて一夜にわたって撹拌し、Ｅｔ２Ｏを加え（５ｍＬ）、沈殿を濾別し、次いで、ＰｒｅｐＨＰＬＣにより精製すると、定量的な収率で、塩酸塩(hycrochloride salt)として表題化合物０．０３ｇが得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．８３〜１．９３（６Ｈ，ｍ）、１．９５〜２．０４（２Ｈ，ｍ）、２．６５〜２．７４（１Ｈ，ｍ）、２．７９〜２．９０（２Ｈ，ｍ）、３．４１（２Ｈ，ｔ）、３．６０（２Ｈ，ｔ）、３．８１〜３．８８（２Ｈ，ｍ）、３．８６（３Ｈ，ｓ）、６．９２（１Ｈ，ｄｄ）、７．０７〜７．１４（２Ｈ，ｍ）、７．３７〜７．４１（２Ｈ，ｍ）、７．５１（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ ４３９（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝２．２３（１０分操作）。

方法Ｇ

例７：｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン
４−｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−カルボニル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法Ｇ−ステップａ ｄｃｍ（４ｍＬ）中の１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−カルボン酸（一般的方法２、ステップｅに記載されているようにして得られる）（０．０１ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)（０．１４ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−１−ピペラジンカルボキシレート（０．０６ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、室温まで冷却し、水（２×５ｍＬ）および飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（２×５ｍＬ）で洗浄した。有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発させると、粗製物が得られ、ジエチルエーテル（３ｍＬ）と共に磨砕し、濾過し、乾燥した。次いで、沈殿を、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液勾配：ＥｔＯＡｃ１００％〜ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｍ)／４：０．８)により精製し、次いで、ＳＣＸカートリッジ上の濾過を実行すると(溶離液勾配：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ／１：１〜ＭｅＯＨ中ＮＨ３)、表題化合物０．１１ｇ（６７％）が得られた。

｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン
方法Ｇ−ステップｂ ｄｃｍ（１ｍＬ）中の４−｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−カルボニル｝−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．１１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ ＨＣｌ（４ｍＬ）を加えた。混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、得られた沈殿を濾別し、Ｅｔ_２Ｏで洗浄した。次いで、沈殿を、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３ｍＬ）で回収し、ｄｃｍ（２×３ｍＬ）で抽出し、溶媒を除去し、組成物を、ＳＣＸカートリッジに通して濾過すると、表題化合物０．０５ｇ（５７％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ２．０９〜２．２３（２Ｈ，ｍ）、２．６９〜２．７８（４Ｈ，ｍ）、３．２８〜３．４４（３Ｈ，ｍ）、３．４７〜３．５６（６Ｈ，ｍ）、６．６１〜６．６４（１Ｈ，ｍ）、６．９２〜６．９３（１Ｈ，ｍ）、７．１６〜７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．２４〜７．２７（１Ｈ，ｍ）、７．５３（２Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ ４１０（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝０．８８（１０分操作）。

方法Ｈ

例８：１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸（３−ジメチルアミノ−プロピル）−メチル−アミド
方法Ｈ−ステップａ ジクロロメタン（２ｍＬ）中の１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ＴＥＡ（０．０７ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ,Ｎ'−トリメチル−１,３−プロパンジアミン（０．３２ｍｍｏｌ、０．０５ｍＬ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、溶媒を除去し、粗製物を、ＰｒｅｐＨＰＬＣおよびＳＣＸカラムにより精製すると、表題化合物０．０６ｇ（４９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ １．５０〜１．７２（６Ｈ，ｍ）、２．１５（８Ｈ，ｍ）、２．８０（４Ｈ，ｍ）、３．０２（２Ｈ，ｓ）、３．３０（２Ｈ，ｍ）、３．７０（２Ｈ，ｍ）、７．０６（２Ｈ，ｍ）、７．２８〜７．５６（３Ｈ，ｍ）、７．６９（１Ｈ，ｍ）、１２．７４（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ ４７２（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．６８（１０分操作）。

方法Ｉ

例９：｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル）−ピペラジン−１−イル−メタノン
４−｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボニル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
方法Ｉ−ステップａ ジクロロメタン（２ｍＬ）中の［１−［４−（フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩（一般的方法８、ステップｂに記載されるようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ＴＥＡ（０．０８ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−１−ピペラジンカルボキシレート（０．３２ｍｍｏｌ、０．０６ｇ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、水（３×２ｍＬ）および飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（３×２ｍＬ）で洗浄した。次いで、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＥｔＯＡｃ)により精製し、次いで、ＮＨ２カートリッジ上の濾過を実行すると(溶離液ＥｔＯＡｃ)、表題化合物０．０２ｇ（１５％）が得られた。

｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル）−ピペラジン−１−イル−メタノン
方法Ｉ−ステップｂ Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ ＨＣｌ（３ｍＬ）中の４−｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボニル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０２ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて２日にわたって撹拌し、次いで、溶媒を除去し、粗製物を、ＮＨ２カートリッジに通して濾過すると(溶離液ＥｔＯＡｃ)、定量的な収率で表題化合物０．０２ｇが得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．８３（２Ｈ，ｍ）、１．９６〜２．０７（２Ｈ，ｍ）、２．５０（３Ｈ，ｓ）、２．５６〜２．６３（１Ｈ，ｍ）、２．７７〜２．９３（６Ｈ，ｍ）、３．５８（４Ｈ，ｄ）、３．７９（２Ｈ，ｄ）、６．９８（１Ｈ，ｍ）、７．１０（２Ｈ，ｍ）、７．２９〜７．３９（１Ｈ，ｍ）、７．６２〜７．７２（１Ｈ，ｍ）、８．００（１Ｈ，ｄｄ）、９．７８（１Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ ４２１（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ａ）＝１．３７（１０分操作）。

方法Ｊ

例１０：１−［３−（５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸メチル−（１−メチル−ピロリジン−３−イル）−アミド
方法Ｊ−ステップａ ｄｃｍ（２ｍＬ）中の１−［３−（５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩（一般的方法１０、ステップｂに記載されるようにして得られる）（０．０１ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０７ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ'−ジメチル−３−アミノピロリジン（０．０４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、室温まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（２ｍＬ）および水（２ｍＬ）で洗浄した。次いで、有機層を、ＮＨ２カートリッジ上で濾過し、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液： ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３ ２Ｎ／９：１)によりさらに精製すると、表題化合物０．０３ｇ（３０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．７９〜１．９４（５Ｈ，ｍ）、２．０８〜２．３０（２Ｈ，ｍ）、２．３７（３Ｈ，ｓ）、２．４６〜２．５４（２Ｈ，ｍ）、２．６２〜２．６９（２Ｈ，ｍ）、２．７２〜２．９２（２Ｈ，ｍ）、３．１０（３Ｈ，ｓ）、３．７９（２Ｈ，ｄ）、５．１６（１Ｈ，ｍ）、７．１４〜７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．２６（１Ｈ，ｄｄ）、７．５８〜７．６３（２Ｈ，ｍ）、７．７３（１Ｈ，ｄｄ）；ｍ／ｚ ４７０（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝１．８０（１０分操作）。

方法Ｋ

例１１：（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド
方法Ｋ−ステップａ ｄｃｍ（２ｍＬ）中の（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．０１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０８ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ）および２−モルホリノエチルアミン（０．０４ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）で洗浄し、相分離器に通して濾過し、有機溶媒を除去した。次いで、粗製物を、ＳＣＸカラムおよびフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＥｔＯＡｃからＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｍ)／１０：１までの勾配)により精製すると、表題化合物０．０５ｇ（４０％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．６６〜１．９８（４Ｈ，ｍ）、２．４０〜２．６４（７Ｈ，ｍ）、２．９４（１Ｈ，ｍ）、３．０６（１Ｈ，ｄｄ）、３．３６（２Ｈ，ｍ）、３．５７〜３．８０（６Ｈ，ｍ）、７．０４〜７．１６（２Ｈ，ｍ）、７．３３（１３Ｈ，ｂｓ）、７．４２（２Ｈ，ｍ）、７．６２（１Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ ４８６（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．９７（１０分操作）。

方法Ｌ

例１２：｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン
方法Ｌ−ステップａ ｄｃｍ（２ｍＬ）中の（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．０１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０８ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ）および２−モルホリノエチルアミン（０．０４ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって室温にて撹拌し、塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）で洗浄し、相分離器に通して濾過し、有機溶媒を除去した。次いで、粗製物を、ＳＣＸカラムおよびフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：シクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ／１：１〜０：１からＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｍ)／１０：１までの勾配)により精製した。分取ＨＰＬＣによるさらなる精製を行うと、表題化合物０．０３ｇ（２９％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．５７〜１．８８（３Ｈ，ｍ）、１．９５（１Ｈ，ｍ）、２．８１（１Ｈ，ｔｄ）、２．９８（２Ｈ，ｍ）、３．５０〜３．８５（１０Ｈ，ｍ）、７．１０（２Ｈ，ｍ）、７．３２（１Ｈ，ｍ）、７．４０（２Ｈ，ｍ）、７．６０（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４４３（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝４．９８（１０分操作）。

方法Ｍ

例１３
（４−メトキシ−ピペリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン
方法Ｍ−ステップａ ｄｃｍ（２．５ｍＬ）中の（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法１、ステップｄに記載されているようにして得られる）（０．０１ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）（方法Ａ、ステップｄに記載されているようにして得られる）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１２ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０９ｍＬ、０．６３ｍｍｏｌ）および４−メトキシピペリジン（０．０４ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、室温まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（３ｍＬ）で洗浄し、相分離器に通して濾過し、有機溶媒を除去した。次いで、粗製物を、ＳＣＸカラム(溶離液：最初に、ｄｃｍ：ＭｅＯＨ／１：１、次いで、ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｎ))およびフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＥｔＯＡｃ：シクロヘキサン／１０：０から０：１０までの勾配)により精製すると、表題化合物０．０５ｇ（３８％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．４２〜１．６９（３Ｈ，ｍ）、１．７３〜１．９６（５Ｈ，ｍ）、２．７８〜２．９３（１Ｈ，ｍ）、２．９３〜３．０７（２Ｈ，ｍ）、３．２５〜３．５０（６Ｈ，ｍ）、３．７９〜３．９４（７Ｈ，ｍ）、７．１６〜７．１９（２Ｈ，ｍ）、７．２８〜７．３６（３Ｈ，ｍ）、７．４２〜７．４６（１Ｈ，ｍ）、７．５４〜７．５６（１Ｈ，ｍ）、７．６６〜７．６８（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４３３（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝３．６３（１０分操作）。

方法Ｎ

例１４：（４−ジメチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン
方法Ｎ−ステップａ ｄｃｍ（２．５ｍＬ）中の（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法１、ステップｄに記載されているようにして得られる）（０．０１ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）（方法Ａ、ステップｄに記載されているようにして得られる）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１２ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０９ｍＬ、０．６３ｍｍｏｌ）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピペリジン（０．０４ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、室温まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（３ｍＬ）で洗浄し、相分離器に通して濾過し、有機溶媒を除去した。次いで、粗製物を、ＳＣＸカラム(溶離液：最初に、ｄｃｍ：ＭｅＯＨ／１：１、次いで、ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｎ))およびフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｎ)／１０：０から９：１までの勾配)により精製すると、表題化合物０．０５ｇ（３７％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．２６〜１．４３（２Ｈ，ｍ）、１．５９〜２．００（６Ｈ，ｍ）、２．２６〜２．３１（６Ｈ，ｍ）、２．４３〜２．４９（１Ｈ，ｍ）、２．５７〜２．６４（１Ｈ，ｍ）、２．７９〜３．１８（４Ｈ，ｍ）、３．７９〜３．８６（２Ｈ，ｍ）、３．８９（３Ｈ，ｓ）、４．１２〜４．１６（１Ｈ，ｍ）、４．５８〜４．６１（１Ｈ，ｍ），７．１６〜７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．２８〜７．３７（３Ｈ，ｍ）、７．４２〜７．４６（１Ｈ，ｍ）、７．５４〜７．５６（１Ｈ，ｍ）、７．６６〜７．６８（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４４６（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝１．６３（１０分操作）。

方法Ｏ

例１５：（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド
方法Ｏ−ステップａ （Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）および２−モルホリン−４−イル−エチルアミン（０．０４ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ジクロロメタン（２ｍＬ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２ｍＬ）を、撹拌しながら加え、有機層を、相分離器に通して濾過することにより回収し、溶媒を、減圧下で除去した。粗製物を、ＳＣＸおよびフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：シクロヘキサン：酢酸エチル１００：０から３：１までの勾配)により精製すると、表題化合物０．０５ｇ（４２％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ １．６６〜１．９７（４Ｈ，ｍ）、２．４２〜２．５０（６Ｈ，ｍ）、２．４８（３Ｈ，ｓ）、２．５５〜２．６２（１Ｈ，ｍ）、２．８９〜２．９７（１Ｈ，ｍ）、３．０６（１Ｈ，ｄｄ）、３．２８〜３．４１（２Ｈ，ｍ）、３．６０（４Ｈ，ｄｄ）、３．６３〜３．６９（１Ｈ，ｍ）、３．７１〜３．７７（１Ｈ，ｍ）、７．０９〜７．１５（２Ｈ，ｍ）、７．３８〜７．５４（４Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ ４８２（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．５７（１０分操作）。

方法Ｐ

例１６：｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン
方法Ｐ−ステップａ １−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−カルボン酸塩酸塩（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．１０ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）および１−メチル−ピペラジン（０．０４ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）が入ったバイアルに、ジクロロメタン（２ｍＬ）を加え、反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱した。反応物を、室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２ｍＬ）を、撹拌しながら加え、有機層を、相分離器に通して濾過することにより回収し、溶媒を、減圧下で除去した。粗製物を、ＳＣＸ、ジエチルエーテルからのトリチュレーションにより、最後に、分取ＨＰＬＣにより精製すると、表題化合物０．０４ｇ（３４％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ ２．２０〜２．３３（２Ｈ，ｍ）、２．４１（３Ｈ，ｓ）、２．５１〜２．６６（４Ｈ，ｍ）、３．３７〜３．５４（３Ｈ，ｍ）、３．５６〜３．７６（６Ｈ，ｍ）、３．８６（３Ｈ，ｓ）、６．７１（１Ｈ，ｄｄ）、６．９３（１Ｈ，ｄｄｄ）、７．０１（１Ｈ，ｄ）、７．１２（１Ｈ，ｄ）、７．３４（１Ｈ，ｄｄ）、７．５２（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ ４５４（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．１３（１０分操作）。

方法Ｑ

例１７：１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸メチル−（１−メチル−ピロリジン−１−イル）−アミド
方法Ｑ−ステップａ ｄｃｍ（２ｍＬ）中の１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩（一般的方法３、４、ステップｅに記載されるようにして得られる）（０．０１ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＡＴＵ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）およびメチル−（１−メチル−ピロリジン−３−イル）−アミン（０．０３ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一夜にわたって３５℃にて加熱し、室温まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）で洗浄し、相分離器に通して濾過し、有機相を、ＳＣＸカラム(溶離液：最初に、ｄｃｍ：ＭｅＯＨ／１：１、次いで、ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｎ))により濾過した。この後処理を、Ｚｉｎｓｓｅｒ Ｓｐｅｅｄｙ(バージョン６．１．３)を使用して行った。次いで、粗製物を、フラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＥｔＯＡｃからＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ中ＮＨ３(２Ｎ)／１０：１までの勾配)により精製すると、表題化合物０．０４ｇ（３７％）が得られた。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．７６〜１．９３（５Ｈ，ｍ）、２．０８〜２．２３（２Ｈ，ｍ）、２．３６〜２．４８（６Ｈ，ｍ）、２．５１〜３．０９（９Ｈ，ｍ）、３．８３〜３．８６（２Ｈ，ｍ）、５．１３〜５．２０（１Ｈ，ｍ）、７．０９〜７．１３（２Ｈ，ｍ）、７．３８〜７．４０（３Ｈ，ｍ）、７．５１（１Ｈ，ｂｓ）；ｍ／ｚ ４６６（Ｍ＋Ｈ）^＋、保持時間（方法ｂ）＝２．３０（１０分操作）。

表は、表の第３欄に指示され例１〜１７の合成について詳細に上で議論されている方法に従って調製された、合成された化合物の選択を示している。

Ｓｍｏのクローニングおよび安定な組み換えＳｍｏ発現細胞系の生成
ヒトＳｍｏコーディング配列は、標準的条件を使用してＰＣＲにより増幅した。テンプレートは、ＯｒｉｇｅｎｅからのｐｃＭＶ６−ＸＬ５−Ｓｍｏ（ｃａｔ．ＴＣ１２２７２４）とした。プライマーは、下記の通り設計した；
フォワード（５’ ＧＡＴＣＧＧＴＡＣＣＧＧＧＣＴＴＴＴＧＣＴＧＡＧＴＴ ３’）は、ＫｐｎＩ制限部位を有し；
リバース（５’ ＧＡＴＣＧＣＧＧＣＣＧＣＣＴＡＣＴＴＡＴＣＧＴＣＧＴＣＡＴＣＣＴＴＧＴＡＡＴＣＧＡＡＧＴＣＣＧＡＧＴＣＴＧＣ ３’）は、５’末端にＮｏｔＩ制限部位、終止コドンおよびＦＬＡＧコーディング配列を有する。

得られたアンプリコンは、２４２４ｂｐの長さがあり、完全Ｓｍｏコーディング配列、ＦＬＡＧタグ、および各末端に１つの２つの制限部位を含有した。アンプリコンを、ＫｐｎＩおよびＮｏｔＩ制限酵素で二重消化し、ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴプラスミド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）をクローニング用に選択した。ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴプラスミド内へのＳｍｏ−ＦＬＡＧコーディング配列のライゲーションおよびクローニングは、ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ＿Ｓｍｏ−ＦＬＡＧと名付けられて７４３２ｂｐの長さがあるプラスミドを作り出した。

ＦｌｐＩＮ技法(Invitrogen)を使用し、ＦｌｐＩＮ２９３細胞系(Invitrogen、ＲＴ５０−０７)を使用して安定な発現Ｓｍｏ−ＦＬＡＧ細胞系(expressing Smo-FLAG cell line)を作成した。これは、ゼオシン耐性ＦｌｐＩＮ２９３宿主細胞系を生成するためのｐＦＲＴ／ｌａｃＺｅｏプラスミドによる安定なトランスフェクションによるＨＥＫ２９３細胞から誘導される系である。ＦｌｐＩＮ２９３細胞は、統合されたＦｌｐ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｔａｒｇｅｔ(ＦＲＴ)部位(Invitrogen)を含有する安定な哺乳動物細胞系を作成するのに適している。

ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ＿Ｓｍｏ−ＦＬＡＧプラスミドによるトランスフェクション(または、偽トランスフェクト細胞(mock transfected cells)、空プラスミドによるトランスフェクションの場合）は、宿主細胞におけるＦＲＴ部位とそれぞれｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ＿Ｓｍｏ−ＦＬＡＧ発現ベクターまたはｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ空ベクターとの間の相同的組み換えを触媒するＦｌｐリコンビナーゼを運ぶ、ｐＯＧ４４プラスミドのトランスフェクションと一緒に行った。Ｓｍｏ−ＦＬＡＧ発現細胞ならびに偽トランスフェクト細胞は、ハイグロマイシンＢ耐性を持ち、β−ギャル染色に対して陰性である。ＳｍｏおよびＦＬＡＧ抗原の発現は、ウエスタンブロットによってもチェックした。生成された２つの細胞系は、偽トランスフェクト細胞系を示す２９３ＦｌｐＩＮ／クローンＥ−３およびＳｍｏ−ＦＬＡＧトランスフェクト細胞系を示す２９３ＦｌｐＩＮ／クローン３−５と名付けられた。

細胞培養条件
細胞は、１０％ウシ胎仔血清を含有するＤＭＥＭ(共にInvitrogenから)中に、０．２５ｍｇ／ｍｌハイグロマイシンＢ(Invitrogen)を添加して維持した。細胞は、９５％空気−５％二酸化炭素の十分に加湿された環境中で３７℃にて維持し、解凍後２２〜２５サイクルまで使用した。

結合アッセイ開発
化合物のＳｍｏ受容体との相互作用は、置換されることになる標識リガンドとしてＳｍｏ受容体用の蛍光リガンド(Ｂｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ、Ｔｏｒｏｎｔｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｃ、ｃａｔ＃Ｂ６７４８００)を使用する置換結合アッセイにより試験した。

蛍光リガンドのＫｄ(最大結合の５０％に到達するリガンドの濃度)およびＢｍａｘ(生物学的調製物において受容体に特異的に結合することができるリガンドの最大量)を決定するため、特異的結合(ＳＢ)を、全結合(ＴＢ)から非特異的結合(ＮＳＢ)を減じることにより算出した。ＴＢは、漸増濃度のＢｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅを細胞に添加することにより決定し、一方、ＮＳＢは、漸増濃度のＢｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅの飽和濃度の十分に実証された(well described)アンタゴニスト(この場合、１０μＭのＮ−[３−(１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−４−クロロフェニル]−３,５−ジメトキシ−ベンズアミド(Ｒｕｂｉｎら ＷＯ２００３０１１２１９)が選択された)との混合物を細胞に添加することにより決定した。各濃度のＢｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅについて、ＳＢを、ＴＢからＮＳＢの値を減じることにより算出した。ＳＢ曲線からＢｍａｘおよびＫｄを算出した。この場合、安定な偽トランスフェクト細胞系クローンＥ−３は、１１５ｎＭのＫｄを有することが判明し、一方、安定なＳｍｏ−ＦＬＡＧトランスフェクト細胞系クローン３−５は、４４．３ｎＭのＫｄを有することが判明した。Ｋｉは、標識リガンドの特異的結合(ＳＢ)の５０％を阻害する非標識リガンドの濃度であり、標識リガンドの有効使用濃度について補正されている。Ｋｉは、Ｋｉ＝ＩＣ_５０／［１＋［ｂｏｄｉｐｙ−ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ］／Ｋｄ）］としてＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式に従って算出した。

結合アッセイで化合物を試験すること
２９３ＦｌｐＩＮ／クローンＥ−３および２９３ＦｌｐＩＮ／クローン３−５細胞を、Ｂｕｒｋｅｒチャンバーでカウントし、１０００００細胞／１００μｌ ＤＭＥＭ １％ＦＢＳを、２つの９６ウェルプレート(Ｕ底、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、ｃａｔ＃Ｍ８１８５−１００ＥＡ)に移した。２９３ＦｌｐＩＮ／クローンＥ−３細胞を内部対照として使用し、Ｓｍｏを過剰発現する２９３ＦｌｐＩＮ／クローン３−５細胞の蛍光(ＦＬＵ)変化を適切な時間にチェックした。

対照および化合物は、ＤＭＥＭ１％ＦＢＳ中で調製し、１００μｌを細胞に添加した。すべての対照および化合物を、最終濃度５ｎＭのＢｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅと共にインキュベートした。

化合物を、ＤＭＳＯ(ストック１０ｍＭ)に溶かし、まず１０μＭにて試験し(単一濃度アッセイ)；各化合物を、少なくとも２回繰り返した(２つの異なるプレートで)。Ｂｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅが３０％閾値を超えて置換された場合、化合物を、濃度−応答アッセイによって１プレートあたり８化合物のスループットで再試験し、濃度範囲は、１００、１０、１、０．５、０．１、０．０１、０．０５、０．００１および０．０００１μＭとした。

陰性対照として、ＤＭＳＯを加えて単一濃度アッセイ用には１：１０００に、濃度応答アッセイ用には１：１００に希釈した２９３ＦｌｐＩＮ／クローン３−５細胞を使用した。

Ｂｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ結合を完全に置換する陽性対照として、Ｎ−[３−(１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−４−クロロフェニル]−３,５−ジメトキシベンズアミド(Ｒｕｂｉｎら ＷＯ２００３０１１２１９)を、１０μＭの濃度で使用した。

２つのプレートを、ロッキングプラットフォーム上で光を防ぎながら室温にて４時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートを、１６００ｒｐｍにて５分にわたって遠心分離し、２％ＦＢＳを含有するＰＢＳで２回洗浄した。最後に、細胞を、洗浄緩衝液１７０μｌに再懸濁し、蛍光シグナルを、ＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒ ＨＴＳシステム(Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ)で取得した。

機器取得パラメーターは、未処理の非標識２９３ＦｌｐＩＮ／クローンＥ−３細胞を使用して各プレートの読み取り開始時に設定した。使用したＨＴＳ取得プログラムは、ＢＤ(商標)Ｐｌａｔｅ Ｍａｎａｇｅｒ(ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ)とし、データ解析は、ＢＤ ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ(商標)Ｐｒｏソフトウェア(ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ)を使用して行った。

定量化は、陽性および陰性対照のＦＬ１−Ｈヒストグラムをオーバーレイし、２つの曲線間の交点にマーカーを設定することにより行った。設定されたマーカーより蛍光が強い事象のみを定量化した。次いで、値を、陰性対照(０％Ｂｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ置換)および陽性対照(１００％Ｂｏｄｉｐｙ−Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ置換)に従って正規化した。

例１〜１９３の化合物は、上の条件で試験した場合、すべてが、０．８ｎＭと２１．６μＭの間の範囲であるＫｉ値を示す。

アルカリホスファターゼアッセイで化合物を試験すること
Ｓｈｈは、マウス間葉細胞系Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２において、骨芽細胞分化のマーカーであるアルカリホスファターゼ(ＡＰ)を誘導することがｉｎ ｖｉｔｒｏで証明されている(Ｋａｔｓｕｕｒａら、１９９９；Ｋｉｎｔｏら、１９９７；Ｍｕｒｏｎｅら、１９９９；Ｎａｋａｍｕｒａら、１９９７、Ｗｕら、２００４。したがって、小分子のヘッジホッグ−Ｇｌｉシグナル伝達の妨害を分析するため、このマウス細胞系におけるＡＰの活性化に基づく機能アッセイを実施した。ＡｔｔｏＰｈｏｓ(登録商標)キット(Ｃａｔ Ｓ１０００、Ｐｒｏｍｅｇａ)の基質を使用し、溶液中のＡＰを検出した。手短に言うと、下記の手順を適用した。

ポリリシンをコーティングした透明な平底９６ウェルプレート(Ｃｏｒｎｉｎｇ、Ｃａｔ．３６６７)を、１ウェルあたり細胞培養液１００μｌ中の１０．０００個の細胞で満たした。細胞培養培地は、１％Ｇｌｕｔａｍａｘ(Ｃａｔ ３５０５０−０３８)、１％ペニシリン／ストレプトマイシン(Ｃａｔ １５１４０−１２２)および１％ Ｈｅｐｅｓ(１５６３０−０５６)を含むＤＭＥＭ(Ｃａｔ ２１９６９−０３５)からなった。すべての試薬は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手した。プレートを、５％二酸化炭素と共に３７℃にて一夜にわたってインキュベートした。次いで、培地を除去し、化合物か基準アンタゴニスト(Ｎ−[３−(１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル)−４−クロロフェニル]−３,５−ジメトキシ−ベンズアミド(Ｒｕｂｉｎら ＷＯ２００３０１１２１９))のどちらかを含有する新鮮な培地１００μｌを、ウェルに添加した。すべての化合物溶液および基準溶液は、２μＭの濃度でアゴニストプルモルファミン(purmorphamine)（Ｓｉｎｈａら Ｎａｔｕｒｅ Ｃｈｅｍ.Ｂｉｏｌ.２,２９−３０(２００５)）を含有した。化合物は、１００ｐＭと５０μＭの間の範囲において三つ組みで１０濃度にて試験した。各サンプル中の最終ＤＭＳＯ濃度は、培養培地中で１％に調整した。細胞を、５％二酸化炭素存在下で３７℃にて７２時間にわたって化合物溶液と共にインキュベートした。細胞培養培地を、プレートから除去し、１：５希釈した溶解溶液(Ｃａｔ Ｅ１９４Ａ、Ｐｒｏｍｅｇａ)４０μｌを、各ウェルに添加した。次いで、プレートを、振盪機上で２０分にわたって暗所でインキュベートした。最後に、再構成したＡｔｔｏＰｈｏｓ基質溶液４０μを、ウェルに添加し、続いて、振盪機上で１５分間さらにインキュベートした。ＡｔｔｏＰｈｏｓ基質は、供給業者の説明書に従って再構成したが、基質溶液は、常に−８０℃にて保存した。Ｓａｆｉｒｅ２プレートリーダー(Ｔｅｃａｎ)を使用し、４３０ｎｍの励起波長および５６０ｎｍの発光波長で、サンプルにおける蛍光強度の変化を測定した。

例１〜１９３の化合物は、上の条件で試験した場合、すべてが、１．１μＭと１４．８μＭの間の範囲であるＩＣ_５０値を示した。

Claims (20)

1. 式Ｉの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩
   

   

   
   （式中、原子価が許すように、
   ｉは、１または２であり、
   Ｒ_１は、Ｈ；直鎖、分岐または環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル基であり、
   Ｒ_２は、Ｈ、ＣｌまたはＦであり、
   Ｘは、ＮかＣＲ_３のどちらかであり、
   Ｒ_３は、Ｈ；ハロゲン；直鎖、分岐または環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアルコキシ基であり、
   Ｙは、
   

   

   であり、
   Ｚは、ＯまたはＮＲｘであり、
   Ｒｘは、Ｈまたは直鎖、分岐もしくは環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり、
   ｋは、１、２、３または４であり、
   ｎおよびｐは、独立して、１、２または３であり、和ｎ＋ｐは、５を超えることはできず、
   Ｔは、Ｈまたは直鎖もしくは分岐の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル基であり、
   Ｔ’は、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−ジアルキルアミノ基か、１つの窒素原子を含有し、ＮおよびＯから選択される第二のヘテロ原子を含有する４〜６員飽和ヘテロ環のどちらかで置換されている直鎖または分岐のＣ₁〜Ｃ_３アルキル鎖でもよく、そのようなヘテロ環は、場合により、窒素原子において（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル鎖で置換されており；または、１つの窒素原子を含有し、ＮおよびＯから選択される第二のヘテロ原子を含有する４〜６員飽和ヘテロ環でもよく、そのようなヘテロ環は、窒素原子において（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル鎖で置換されていてもよく、
   ｒは、０、１、２または３であり、
   Ｒ’は、ハロゲン；ヒドロキシ；アミノ；シアノ；ニトロ；オキソ；１つまたは複数のフッ素原子で置換されていてもよい直鎖または分岐の（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、ジハロアルキル、アザアルキル、オキサアルキル、アルキルカルボニル、オキサアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アルケニル、オキサアルケニル、アザアルケニル、アルケニルカルボニル、オキサアルケニルカルボニル、アルケニルオキシカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプトアルキル、アルコキシ、アルキルチオ基であり；ここで、２つのＲ’基は、スピロまたは縮合連結で５〜８員環を形成することがあり；
   

   

   
   を除く）。
2. ｉが２であり、その結果生じるピペリジン環の４位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
3. ｉが２であり、その結果生じるピペリジン環の３位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
4. ｉが１であり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｒ_１がＨであり、Ｒ_２がＣｌまたはＦであり、ｉ、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
6. Ｒ_２がＨであり、Ｒ_１が、直鎖、分岐または環式の（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル基であり、ｉ、Ｘ、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
7. ＸがＮであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
8. ＸがＣＲ_３であり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
9. Ｒ_３がＨであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項８で定義されている通りである、請求項８に記載の化合物。
10. Ｒ_３が、Ｃｌ、Ｆ、ＯＭｅまたはＭｅであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
11. ｒが０である、請求項１に記載の化合物。
12. Ｙが、
    

    

    であり、ｋが２であり、ｒが１であり、Ｒ’がジメチルアミノであり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、およびＲ_３が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
13. Ｙが、
    

    

    であり、ｎとｐが共に２であり、ＺがＯであり、ｒが０であり、ｉ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｘ、およびＲ_３が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
14. ｉが２であり、その結果生じるピペリジン環の４位が−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙであり、ＸがＣＲ_３であり、Ｒ_３がメチルであり、Ｒ_２がＦであり、Ｒ_１、Ｙ、Ｚ、Ｒｘ、ｋ、ｎ、ｐ、Ｔ、Ｔ’、ｒおよびＲ’が、請求項１で定義されている通りである、請求項１に記載の化合物。
15. ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペラジン−１−イル−メタノン；
    アゼパン−１−イル−｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−メタノン；
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピロリジン−１−イル−メタノン；
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−ピペリジン−１−イル−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    １−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−カルボン酸（３−ジメチルアミノ−プロピル）−メチル−アミド
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン；
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（４−ピロリジン−１−イル−ピペリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［４−フルオロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    （３−ジメチルアミノピロリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    （３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛（Ｓ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
    （３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛（Ｒ）−１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（５−メトキシ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    （３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−｛１−［３−（１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピロリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｒ）−１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛（Ｓ）−１−［３−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−４−クロロ−フェニル］−ピペリジン−３−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン；
    ｛１−［４−クロロ−３−（５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−（３−ジメチルアミノ−ピロリジン−１−イル）−メタノン；
    および｛１−［４−クロロ−３−（５−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−フェニル］−ピペリジン−４−イル｝−モルホリン−４−イル−メタノン、
    からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、
    または薬学的に許容されるその塩。
16. 薬学的に許容される担体または賦形剤と共に請求項１から１５に記載の化合物を含有する医薬組成物。
17. 骨粗鬆症または癌を治療または予防するための医薬品を調製するための、請求項１から１５に記載の化合物の使用。
18. 非小細胞肺癌腫、小細胞肺癌、乳癌、卵巣腫瘍、消化管腫瘍、脳の癌、前立腺癌、膵臓癌、基底細胞癌腫、悪性黒色腫、扁平上皮癌腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、間葉性の癌、慢性骨髄性白血病、子宮内膜癌腫、肝細胞癌腫から選択される癌を治療するための、請求項１７に記載の使用。
19. ヘッジホッグ経路の阻害から恩恵を受ける疾患、状態、または機能障害を治療するための方法であって、それを必要としている対象に、有効量の請求項１から１５に記載の化合物を投与することを含む方法。
20. 骨粗鬆症または癌、特に、非小細胞肺癌腫、小細胞肺癌、乳癌、卵巣腫瘍、消化管腫瘍、脳の癌、前立腺癌、膵臓癌、基底細胞癌腫、悪性黒色腫、扁平上皮癌腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、間葉性の癌、慢性骨髄性白血病、子宮内膜癌腫、肝細胞癌腫を治療するための、請求項１９に記載の方法。