JP2011241162A

JP2011241162A - FGF-7 PRODUCTION PROMOTER, VEGF PRODUCTION PROMOTER, IGF-1 PRODUCTION PROMOTER, HGF PRODUCTION PROMOTER, TESTOSTERONE 5α-REDUCTASE INHIBITOR, AND HAIR TONIC

Info

Publication number: JP2011241162A
Application number: JP2010113700A
Authority: JP
Inventors: Nobuaki Oto; 信明大戸; Toshiyuki Murakami; 敏之村上; Yasunaga Yamaguchi; 泰永山口
Original assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-05-17
Filing date: 2010-05-17
Publication date: 2011-12-01

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, a testosterone 5α-reductase inhibitor and a hair tonic, which have excellent activity and high safety.SOLUTION: The FGF-7 production promoter, the VEGF production promoter, the IGF-1 production promoter, the HGF production promoter, the testosterone 5α-reductase inhibitor and the hair tonic contain ε-viniferin as an effective component.

Description

本発明は、ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤に関する。 The present invention relates to an FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, a testosterone 5α-reductase inhibitor and a hair growth agent.

毛髪の成長は、成長期、退行期、休止期からなる周期的なヘアサイクル（毛周期）に従って成長及び脱落を繰り返している。このヘアサイクルのうち、休止期から成長期へかけての新たな毛包が形成されるステージが、発毛に最も重要であると考えられている。そして、このステージにおける毛包上皮系細胞の増殖・分化に重要な役割を果たしているのが、毛乳頭細胞であると考えられている。毛乳頭細胞は、毛根近傍にある外毛根鞘細胞とマトリックス細胞とからなる毛包上皮系細胞の内側にあって、基底膜に包まれている毛根の根幹部分に位置する細胞であり、毛包上皮系細胞へ働きかけてその増殖を促す等、毛髪への分化に重要な役割を担っている（例えば、非特許文献１参照）。 Hair growth repeats growth and shedding in accordance with a periodic hair cycle (hair cycle) consisting of a growth phase, a regression phase, and a resting phase. Of these hair cycles, the stage at which new hair follicles are formed from the telogen phase to the growth phase is considered to be the most important for hair growth. It is considered that hair papilla cells play an important role in the proliferation and differentiation of hair follicle epithelial cells at this stage. The hair papilla cells are cells located inside the hair follicle epithelial cells, which are composed of outer root sheath cells and matrix cells in the vicinity of the hair root, and are located in the root trunk portion of the hair root covered by the basement membrane. It plays an important role in hair differentiation by acting on epithelial cells and promoting their proliferation (see, for example, Non-Patent Document 1).

線維芽細胞増殖因子−７（ＦＧＦ−７）は、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）のファミリーのうちの１つであり、ＫＧＦ（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）とも呼ばれる。ＦＧＦには、２０種類以上のファミリーが存在することが知られている。
ＦＧＦは、中胚葉と神経外胚葉から発生した幅広い細胞の増殖を促進する因子であり、例えば、線維芽細胞、血管内皮細胞、筋芽細胞、軟骨細胞、グリア細胞、骨芽細胞等の分裂・成長を誘導する。ＦＧＦは、血管新生作用、コラーゲンやフィブロネクチンの合成抑制作用等を有することや、ヘパリンに対して強い親和性を有することが知られている。 Fibroblast growth factor-7 (FGF-7) is one of the family of fibroblast growth factors (FGF), and is also called KGF (keratinocyte growth factor). It is known that FGF has 20 or more families.
FGF is a factor that promotes the proliferation of a wide range of cells generated from mesoderm and neuroectoderm, and for example, fibroblasts, vascular endothelial cells, myoblasts, chondrocytes, glial cells, osteoblasts, etc. Induce growth. It is known that FGF has an angiogenic action, a collagen and fibronectin synthesis inhibiting action, and has a strong affinity for heparin.

また、毛包の毛乳頭細胞において、ＦＧＦ−７が発現していることが示され（例えば、非特許文献２参照）、ＦＧＦ−７が毛根の活発化を介した育毛効果を有することが明らかになった。また、ノックアウトマウスを用いた研究により、ＦＧＦ−７は、毛の伸びる方向に関与することが示唆されている。
これまでに、ＦＧＦ−７産生の促進作用を有する植物エキスとして、クララ等が知られている（非特許文献３参照）。 In addition, it was shown that FGF-7 is expressed in the hair papilla cells of the hair follicle (see, for example, Non-Patent Document 2), and it is clear that FGF-7 has a hair-growing effect through activation of hair roots. Became. In addition, studies using knockout mice suggest that FGF-7 is involved in the hair growth direction.
Up to now, Clara and the like have been known as plant extracts having an action of promoting FGF-7 production (see Non-Patent Document 3).

血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、分子量３４〜４６ｋＤａの糖蛋白質であり、血管内皮細胞に特異的な増殖因子として脳下垂体の濾胞細胞の培養液から発見され、血管透過性因子（ＶＰＦ）と同一物質であることがわかった。ＶＥＧＦは、下垂体細胞以外に、平滑筋細胞、マクロファージ、肺胞上皮細胞、肝細胞、毛乳頭細胞等の正常細胞で産生され、また、グリオーマ（神経膠腫）、乳癌、胃癌、大腸癌等の多くの腫瘍細胞からも産生されることが知られている。ＶＥＧＦは、血管内皮細胞に働き、細胞の増殖、遊走を促進させたり、血管新生を促進させたりする作用がある。ＶＥＧＦは、胎生期の心臓の形成時期に、強い発現が認められることが知られている。ＶＥＧＦ遺伝子が欠損すると血管系の異常が起こり、胎生期に死亡することが報告されており、ＶＥＧＦが、個体の発達、組織形成において極めて重要なはたらきを持つことが示唆されている。最近では、ＶＥＧＦファミリーの新しいメンバーであるＶＥＧＦ−Ｃが、強力なリンパ管新生因子として皮膚におけるリンパ管の成長を仲介していることが報告された。 Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a glycoprotein having a molecular weight of 34 to 46 kDa, and is found as a growth factor specific to vascular endothelial cells from the culture solution of pituitary follicle cells, and is known as vascular permeability factor (VPF). It turned out to be the same substance. VEGF is produced by normal cells such as smooth muscle cells, macrophages, alveolar epithelial cells, hepatocytes, hair papilla cells, in addition to pituitary cells, and also glioma (glioma), breast cancer, gastric cancer, colon cancer, etc. It is known that it is also produced by many tumor cells of. VEGF acts on vascular endothelial cells and has the action of promoting cell proliferation and migration, and promoting angiogenesis. It is known that VEGF is strongly expressed during the embryonic formation of the heart. It has been reported that deficiency of VEGF gene causes vascular abnormality and death during the embryonic period, and it is suggested that VEGF has an extremely important function in individual development and tissue formation. Recently, a new member of the VEGF family, VEGF-C, was reported to mediate lymphatic vessel growth in the skin as a potent lymphangiogenic factor.

ところで、毛包においては、外毛根鞘細胞及び毛乳頭細胞が、ＶＥＧＦを産生することが知られている（例えば、非特許文献４、５参照）。毛包においてＶＥＧＦの産生を阻害することは、ヘアサイクルの成長期の遅れと毛包サイズの矮小化に繋がることが見出され（例えば、非特許文献６参照）、このことから、毛包の発達や再生にＶＥＧＦが重要であることが示された。 By the way, in hair follicles, it is known that outer root sheath cells and hair papilla cells produce VEGF (see, for example, Non-Patent Documents 4 and 5). Inhibition of VEGF production in hair follicles was found to lead to a delay in the growth phase of the hair cycle and dwarfing of hair follicle size (see, for example, Non-Patent Document 6). It was shown that VEGF is important for development and regeneration.

これまでに、ＶＥＧＦ産生の促進作用を有する植物エキスとして、ヒルガオ科のアサガオカラクサ属植物（例えば、特許文献１参照）、ローヤルゼリー（例えば、特許文献２参照）、Ｌ−グルタミン酸又はその塩、Ｌ−セリン、ＰＣＡ（ピロリドンカルボン酸）又はその塩、モノニトログアヤコールナトリウム、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｖｕｌｇａｒｉｓ）の抽出物、ユズ（Ｃｉｔｒｕｓｊｕｎｏｓ）の果実の抽出物、ウンシュウミカン（Ｃｉｔｒｕｓｕｎｓｈｉｕ）の果皮の抽出物、エイジツ（Ｒｏｓａｍｕｌｔｉｆｌｏｒａ）の果実の抽出物、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ）の葉の抽出物より選択されるもの（例えば、特許文献３参照）等が知られている。 Heretofore, as plant extracts having an action of promoting VEGF production, plants of the genus Morning Glory (Gentianaceae) (for example, refer to Patent Document 1), royal jelly (for example, refer to Patent Document 2), L-glutamic acid or a salt thereof, L- Serine, PCA (pyrrolidone carboxylic acid) or a salt thereof, sodium mononitroguaiacol, an extract of Chlorella vulgaris, an extract of fruits of Citrus junos, an extract of skins of Citrus unshiu, and Ages Known are extracts from fruits of (Rosa multiflora) and leaves of Ginkgo biloba (see, for example, Patent Document 3).

インスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）は、インスリンに非常に良く似た構造及び作用を持つ分子量約７，５００のペプチドホルモンである。ＩＧＦ−１は、細胞の分化を促し、細胞の増殖を助ける等、積極的に細胞を健康な状態に維持し（例えば、非特許文献７、８参照）、老化の進行を阻止することが知られている（例えば、非特許文献９参照）。 Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) is a peptide hormone with a molecular weight of about 7,500, which has a structure and action very similar to that of insulin. It is known that IGF-1 actively promotes cell differentiation, assists cell proliferation, and the like to actively maintain cells in a healthy state (see, for example, Non-Patent Documents 7 and 8) and prevent the progress of aging. (For example, see Non-Patent Document 9).

また、毛包の毛乳頭細胞において、ＩＧＦ−１が発現していることが示され（例えば、非特許文献１０参照）、ＩＧＦ−１が毛根の活発化を介した育毛効果を有することが明らかになった。現在、ＩＧＦ−１を有効成分とする育毛剤が既に知られている（例えば、特許文献４参照）。しかしながら、ＩＧＦ−１は動物由来成分であって分子量が大きいために、外用塗布による経皮吸収が困難である等の問題がある。また、ＩＧＦ−１産生促進作用を示す植物由来抽出物も見つかってはいるが、より優れたＩＧＦ−１産生促進作用を有する植物由来の物質が求められている。 In addition, it was shown that IGF-1 is expressed in the hair papilla cells of the hair follicle (see, for example, Non-Patent Document 10), and it is clear that IGF-1 has a hair-growing effect through activation of hair roots. Became. At present, a hair-growing agent containing IGF-1 as an active ingredient is already known (see, for example, Patent Document 4). However, since IGF-1 is a component derived from animals and has a large molecular weight, there is a problem that transdermal absorption by external application is difficult and the like. Further, although plant-derived extracts showing an IGF-1 production promoting action have been found, a plant-derived substance having a more excellent IGF-1 production promoting action is required.

肝細胞成長因子（ＨＧＦ）は、肝細胞の増殖を促進する因子として劇症肝炎患者血漿から発見された。ＨＧＦは、肝臓に限らず、各臓器由来の上皮細胞、内皮細胞、造血系細胞等の増殖を促進することが知られている。ＨＧＦの血中濃度は、肝疾患をはじめ、肺炎、白血病、がん、心筋梗塞等の様々な疾患において上昇することが報告されている。また、ＨＧＦは、臓器の障害や線維化を抑制し、再生を促進する効果が認められている。特許文献５には、ＨＧＦを肺線維症予防剤の有効成分として利用する技術が開示されている。 Hepatocyte growth factor (HGF) was discovered in plasma of patients with fulminant hepatitis as a factor that promotes the proliferation of hepatocytes. HGF is known to promote the growth of not only liver but also epithelial cells, endothelial cells, hematopoietic cells derived from various organs. It has been reported that the blood concentration of HGF is elevated in various diseases such as pneumonia, leukemia, cancer, myocardial infarction as well as liver disease. In addition, HGF has been found to have the effect of suppressing organ damage and fibrosis and promoting regeneration. Patent Document 5 discloses a technique of using HGF as an active ingredient of a pulmonary fibrosis preventive agent.

また、毛包の毛乳頭細胞において、ＨＧＦが発現していることが示され（非特許文献２参照）、ＨＧＦが毛根の活発化を介した育毛効果を有することが明らかになった。
これまでに、ＨＧＦ産生の促進作用を有する植物エキスとして、例えば米等が知られている（特許文献６参照）。 In addition, it was shown that HGF was expressed in the hair papilla cells of the hair follicle (see Non-Patent Document 2), and it was revealed that HGF has a hair-growing effect through activation of hair roots.
To date, for example, rice has been known as a plant extract having an action of promoting HGF production (see Patent Document 6).

テストステロン５α−リダクターゼは、男性ホルモンの一種であるテストステロンをジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に変換し、抜け毛の原因を作り出す酵素である。このＤＨＴと呼ばれる活性型男性ホルモンは、テストロテンの１０〜１００倍も抜け毛を促進する働きがある。
テストステロン５α−リダクターゼには１型と２型の２種類が存在し、２型は前頭部やヒゲに分布しており、毛母細胞の活動を抑制する信号を出し、抜け毛を進行させる。１型は頭全体に見られ、２型と同様に毛母細胞の活動を抑制し、抜け毛を進行させ、更に皮脂腺に作用して皮脂を大量に分泌させる。 Testosterone 5α-reductase is an enzyme that converts testosterone, a type of male hormone, into dihydrotestosterone (DHT) and causes hair loss. This active male hormone called DHT has a function of promoting hair loss 10 to 100 times that of testrotene.
There are two types of testosterone 5α-reductase, type 1 and type 2, and type 2 is distributed in the frontal region and whiskers, which gives a signal to suppress the activity of hair matrix cells and promotes hair loss. Type 1 is found in the entire head and, like type 2, suppresses the activity of hair mother cells, promotes hair loss, and acts on the sebaceous glands to secrete a large amount of sebum.

アンドロゲンと総称される男性ホルモンは重要なホルモンであるが、それが過度に作用すると、男性型禿頭、多毛症、脂漏症、座瘡、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等、さまざまな好ましくない症状を誘発する。そこで、過剰のアンドロゲンの作用を抑制することによりこれら好ましくない症状を改善する手法が検討されている。具体的には、テストステロン５α−リダクターゼの作用を阻害することにより、活性型５α−ＤＨＴの生成を抑制する方法が提案されている。
従来、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有する生薬としては、例えばＣｈｏｅｒｏｓｐｏｎｄｉａｓ属に属する植物（特許文献７参照）、五斂子（特許文献８参照）、紅豆杉、鳥欖、幌傘楓、穿心蓮（特許文献９参照）等が知られている。 Androgen, which is collectively called androgen, is an important hormone, but when it acts excessively, it causes various effects such as male pattern baldness, hirsutism, seborrhea, acne, benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, and precocious male sex. Induces unfavorable symptoms. Therefore, methods for improving these unfavorable symptoms by suppressing the action of excessive androgen have been investigated. Specifically, a method of inhibiting the production of active 5α-DHT by inhibiting the action of testosterone 5α-reductase has been proposed.
Conventionally, as a crude drug with testosterone 5α- reductase inhibitory activity, such as plant (see Patent Document 7) belonging to Choerospondias genus, five斂子(see Patent Document 8), Benimamesugi, Tori欖, Horokasakaede,穿心lotus (Patent Reference 9) and the like are known.

以上のように、ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及びこれらの作用及び効果を有する育毛剤に対する需要は極めて高い。 As described above, there is an extremely high demand for a FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, a testosterone 5α-reductase inhibitor, and a hair-growing agent having these actions and effects. ..

特開２００３−１６０５０３号公報JP, 2003-160503, A 特開２００３−１９２５４１号公報JP, 2003-192541, A 特開２００５−００２０６８号公報JP, 2005-002068, A 特公平４−０６０５６７号公報Japanese Patent Publication No. 4-060567 特開２００６−１３１６４９号公報JP, 2006-131649, A 特開２００４−０９９５０３号公報JP 2004-099503 A 特開２００３−０５５１６２号公報JP, 2003-055162, A 特開２００２−２４１２９６号公報JP 2002-241296 A 特開２００２−０８７９７６号公報JP, 2002-087976, A

「ＴｒｅｎｄｓＧｅｎｅｔ」，１９９２年，第８巻，ｐ．５６−６１"Trends Genet", 1992, Volume 8, p. 56-61 アンチエイジングシリーズ（１）、白髪・脱毛・育毛の実際，ＮＴＳ，ｐ．１−１８，２００５年Anti-aging series (1), actual practice of gray hair, hair removal and hair growth, NTS, p. 1-18, 2005 Ｊ．Ｄｅｒｍ．Ｓｃｉ．，３０，ｐ４３−４９，２００２J. Derm. Sci. , 30, p43-49, 2002 Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１０６，１７−２３（１９９６）J. Invest. Dermatol. , 106, 17-23 (1996) Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｒｅｓ．，２０９，６６１−６６８（１９９８）Arch. Dermatol. Res. , 209, 661-668 (1998) Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０７，４０９−４１７（２００１）J. Clin. Invest. , 107, 409-417 (2001) Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１，２８８５３−２８８６０（１９９６）J. Biol. Chem. , 271, 28853-28860 (1996) Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，２０，３２５−３２９（２００２）Dermatology, 20, 325-329 (2002) Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．，１１５，５０１−５０２（２００３）Am. J. Med. , 115, 501-502 (2003) Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，９９，３４３−３４９（１９９２）J. Invest. Dermatol. , 99, 343-349 (1992)

本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れたＦＧＦ−７産生促進作用を有し、安全性の高いＦＧＦ−７産生促進剤を提供することを目的とする。また、本発明は、優れたＶＥＧＦ産生促進作用を有し、安全性の高いＶＥＧＦ産生促進剤を提供することを目的とする。また、本発明は、優れたＩＧＦ−１産生促進作用を有し、安全性の高いＩＧＦ−１産生促進剤を提供することを目的とする。また、本発明は、優れたＨＧＦ産生促進作用を有し、安全性の高いＨＧＦ産生促進剤を提供することを目的とする。また、本発明は、優れたテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有し、安全性の高いテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤を提供することを目的とする。また、本発明は、優れた育毛効果を有し、安全性が高い育毛剤を提供することを目的とする。 It is an object of the present invention to solve the above-mentioned conventional problems and achieve the following objects. That is, it is an object of the present invention to provide a highly safe FGF-7 production promoter having an excellent FGF-7 production promoter action. Another object of the present invention is to provide a highly safe VEGF production promoter having an excellent VEGF production promoting action. Another object of the present invention is to provide an IGF-1 production promoter having an excellent IGF-1 production promoting action and high safety. Another object of the present invention is to provide a highly safe HGF production promoting agent having an excellent HGF production promoting action. Another object of the present invention is to provide a highly safe testosterone 5α-reductase inhibitor having an excellent testosterone 5α-reductase inhibitory action. Moreover, this invention aims at providing the hair-growth agent which has the outstanding hair-growth effect and is highly safe.

前記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、ε−ビニフェリンが、優れたＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有することを見出した。また、ヘアサイクルを調節する因子であるＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１、ＨＧＦ及びテストステロン５α−リダクターゼに対して、ε−ビニフェリンが前記各作用を有することから、ε−ビニフェリンが育毛剤としての用途に適することを見出した。 In order to solve the above-mentioned problems, the inventors of the present invention have made extensive studies, and as a result, have obtained the following findings. That is, it was found that ε-viniferin has an excellent FGF-7 production promoting action, VEGF production promoting action, IGF-1 production promoting action, HGF production promoting action, and testosterone 5α-reductase inhibiting action. In addition, since ε-viniferin has the above-mentioned actions on FGF-7, VEGF, IGF-1, HGF and testosterone 5α-reductase, which are factors that regulate the hair cycle, ε-viniferin is used as a hair-growing agent. It was found to be suitable for the application.

本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とする線維芽細胞増殖因子−７（ＦＧＦ−７）産生促進剤である。
＜２＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とする血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤である。
＜３＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とするインスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）産生促進剤である。
＜４＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とする肝細胞成長因子（ＨＧＦ）産生促進剤である。
＜５＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とするテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤である。
＜６＞ ε−ビニフェリンを有効成分として含有することを特徴とする育毛剤である。
＜７＞ ε−ビニフェリンからなることを特徴とする線維芽細胞増殖因子−７（ＦＧＦ−７）産生促進剤である。
＜８＞ ε−ビニフェリンからなることを特徴とする血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤である。
＜９＞ ε−ビニフェリンからなることを特徴とするインスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）産生促進剤である。
＜１０＞ ε−ビニフェリンからなることを特徴とする肝細胞成長因子（ＨＧＦ）産生促進剤である。
＜１１＞ ε−ビニフェリンからなることを特徴とするテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤である。
＜１２＞前記＜７＞に記載の線維芽細胞増殖因子−７（ＦＧＦ−７）産生促進剤、
前記＜８＞に記載の血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤、
前記＜９＞に記載のインスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）産生促進剤、
前記＜１０＞に記載の肝細胞成長因子（ＨＧＦ）産生促進剤、及び
前記＜１１＞に記載のテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤
の少なくともいずれかを含有することを特徴とする育毛剤である。 The present invention is based on the above findings by the present inventors, and means for solving the above problems are as follows. That is,
<1> A fibroblast growth factor-7 (FGF-7) production promoter comprising ε-viniferin as an active ingredient.
<2> A vascular endothelial growth factor (VEGF) production promoter characterized by containing ε-viniferin as an active ingredient.
<3> An insulin-like growth factor-1 (IGF-1) production promoter characterized by containing ε-viniferin as an active ingredient.
<4> A hepatocyte growth factor (HGF) production promoter, which comprises ε-viniferin as an active ingredient.
<5> A testosterone 5α-reductase inhibitor, which contains ε-viniferin as an active ingredient.
<6> A hair restorer characterized by containing ε-viniferin as an active ingredient.
<7> A fibroblast growth factor-7 (FGF-7) production promoter characterized by comprising ε-viniferin.
<8> A vascular endothelial growth factor (VEGF) production promoter characterized by comprising ε-viniferin.
<9> An insulin-like growth factor-1 (IGF-1) production promoter characterized by comprising ε-viniferin.
<10> A hepatocyte growth factor (HGF) production promoter characterized by comprising ε-viniferin.
<11> A testosterone 5α-reductase inhibitor characterized by comprising ε-viniferin.
<12> The fibroblast growth factor-7 (FGF-7) production promoter according to <7>,
A vascular endothelial growth factor (VEGF) production promoter according to <8>,
Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) production promoter according to <9>,
A hair-growing agent containing at least one of the hepatocyte growth factor (HGF) production promoter according to <10> and the testosterone 5α-reductase inhibitor according to <11>.

本発明のＦＧＦ−７産生促進剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れたＦＧＦ−７産生促進作用を有し、安全性の高いＦＧＦ−７産生促進剤を提供することができる。
本発明のＶＥＧＦ産生促進剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れたＶＥＧＦ産生促進作用を有し、安全性の高いＶＥＧＦ産生促進剤を提供することができる。
本発明のＩＧＦ−１産生促進剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れたＩＧＦ−１産生促進作用を有し、安全性の高いＩＧＦ−１産生促進剤を提供することができる。
本発明のＨＧＦ産生促進剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れたＨＧＦ産生促進作用を有し、安全性の高いＨＧＦ産生促進剤を提供することができる。
本発明のテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れたテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有し、安全性の高いテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤を提供することができる。
本発明の育毛剤によると、従来における諸問題を解決することができ、優れた育毛効果を有し、安全性が高い育毛剤を提供することができる。 According to the FGF-7 production promoter of the present invention, various problems in the past can be solved, and an FGF-7 production promoter having an excellent FGF-7 production promoting action and high safety can be provided. it can.
According to the VEGF production promoter of the present invention, various conventional problems can be solved, and a VEGF production promoter having an excellent VEGF production promoting action and high safety can be provided.
INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the IGF-1 production promoter of the present invention, various problems in the related art can be solved, and an IGF-1 production promoter having an excellent IGF-1 production promoting action and high safety can be provided. it can.
According to the HGF production promoter of the present invention, various problems in the related art can be solved, and an HGF production promoter having an excellent HGF production promoting action and high safety can be provided.
INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the testosterone 5α-reductase inhibitor of the present invention, various problems in the related art can be solved, and a highly safe testosterone 5α-reductase inhibitor having an excellent testosterone 5α-reductase inhibitory action can be provided. it can.
According to the hair restorer of the present invention, various problems in the related art can be solved, and an excellent hair restorer effect and a highly safe hair restorer can be provided.

（ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤）
本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、ε−ビニフェリンを含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。 (FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent)
The FGF-7 production promoter, the VEGF production promoter, the IGF-1 production promoter, the HGF production promoter, the testosterone 5α-reductase inhibitor and the hair-growing agent of the present invention contain ε-viniferin, and are further required. It contains other components accordingly.

＜ε−ビニフェリン＞
ε−ビニフェリン（ε−ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ）は、分子式Ｃ_２８Ｈ_２２Ｏ_６、分子量４５４．４７８の化合物であり、下記構造式で表される。また、ε−ビニフェリンのＩＵＰＡＣ命名法による化合物名は、５−［（２Ｒ，３Ｒ）−６−ｈｙｄｒｏｘｙ−２−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）−４−［（Ｅ）−２−（４−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｅｔｈｅｎｙｌ］−２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−１−ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ−３−ｙｌ］ｂｅｎｚｅｎｅ−１，３−ｄｉｏｌである。 <ε-viniferin>
ε- Biniferin (ε-viniferin) has a molecular formula _C 28 _H 22 _{O 6,} a compound having a molecular weight of 454.478, represented by the following structural formulas. In addition, the compound name according to the IUPAC nomenclature of ε-viniferin is 5-[(2R,3R)-6-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-[(E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl). ]-2,3-Dihydro-1-benzofuran-3-yl] benzene-1,3-diol.

ε−ビニフェリンの由来としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。ε−ビニフェリンは、ε−ビニフェリンを含有する植物抽出物から単離・精製することにより製造することもできるし、合成により製造することもできる。なお、合成により製造する場合、その合成方法は特に限定されるものではなく、公知の方法により合成することができる。 The origin of ε-viniferin is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. [epsilon]-viniferin can be produced by isolation and purification from a plant extract containing [epsilon]-viniferin, or can be produced synthetically. In the case of manufacturing by synthesis, the synthesis method is not particularly limited and can be synthesized by a known method.

ε−ビニフェリンを含有する植物抽出物は、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって得ることができる。ε−ビニフェリンを含有する植物としては、例えば、ブドウ科植物等が挙げられる。ブドウ科植物の中でも、エビヅル（Ｖｉｔｉｓｆｉｃｉｆｏｌｉａ）が特に好ましい。本発明において抽出原料として用いる植物の部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、葉部、茎部、花（蕾）部、種子等の地上部、根部等の地下部等などが挙げられる。中でも、抽出効率の観点から、地上部が好ましい。 The plant extract containing ε-viniferin can be obtained by an extraction method generally used for extracting plants. Examples of plants containing ε-viniferin include plants of the family Vaceae. Among the plants of the family Vitiaceae, the shrimp ( Vitis fififolia ) is particularly preferable. The plant part used as an extraction raw material in the present invention is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose, for example, leaf part, stem part, flower (bud) part, above-ground part such as seed, root part The underground part and the like. Above all, the above-ground part is preferable from the viewpoint of extraction efficiency.

前記ε−ビニフェリンを含有する植物抽出物は、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用い粉砕して溶媒抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用されている乾燥機を用いて行ってもよい。なお、前記抽出原料は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。なお、脱脂等の前処理を行うことにより、抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。 The plant extract containing ε-viniferin can be obtained by drying the extraction raw material and then subjecting it to solvent extraction either as it is or after crushing using a crusher. Drying may be performed in the sun or using a commonly used dryer. The extraction raw material may be used as an extraction raw material after pretreatment such as degreasing with a non-polar solvent such as hexane or benzene. By performing pretreatment such as degreasing, the extraction treatment with the polar solvent of the extraction raw material can be efficiently performed.

前記抽出に用いる溶媒としては、水、親水性有機溶媒、又はこれらの混合溶媒を室温乃至溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したもの等が挙げられる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。なお、前記抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。 As the solvent used for the extraction, it is preferable to use water, a hydrophilic organic solvent, or a mixed solvent thereof at a temperature from room temperature to the boiling point of the solvent or lower.
Examples of water that can be used as the extraction solvent include pure water, tap water, well water, mineral water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, as well as water that has been subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, filtration, ion exchange, adjustment of osmotic pressure, buffering and the like. The water that can be used as the extraction solvent also includes purified water, hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline and the like.

前記親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒等を用いることができる。
なお、前記水と親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する場合には、低級アルコールの場合は水１０質量部に対して１質量部〜９０質量部添加することが好ましく、低級脂肪族ケトンの場合は水１０質量部に対して１質量部〜４０質量部添加することが好ましく、多価アルコールの場合は水１０質量部に対して１質量部〜９０質量部添加することが好ましい。 Examples of the hydrophilic organic solvent include lower alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propyl alcohol and isopropyl alcohol; lower aliphatic ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; 1,3-butylene glycol and propylene glycol. Examples thereof include polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as glycerin, and mixed solvents of these hydrophilic organic solvents and water can be used.
When a mixed solvent of water and a hydrophilic organic solvent is used, it is preferable to add 1 part to 90 parts by mass to 10 parts by mass of water in the case of lower alcohol. In the case, 1 to 40 parts by mass is preferably added to 10 parts by mass of water, and in the case of polyhydric alcohol, 1 to 90 parts by mass is preferably added to 10 parts by mass of water.

抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り、特に制限はなく、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物を更に乾燥すると乾燥物が得られる。 The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble component contained in the extraction raw material can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. For example, the extraction raw material is immersed in 5 to 15 times (mass ratio) the amount of the extraction raw material (mass ratio), the soluble component is extracted at room temperature or under reflux heating, and then extraction is performed by removing the extraction residue. A liquid can be obtained. The solvent is distilled off from the obtained extract to obtain a paste-like concentrate, and the concentrate is further dried to obtain a dry product.

以上のようにして得られた抽出液、当該抽出液の濃縮物又は当該抽出液の乾燥物から前記ε−ビニフェリンを単離・精製する方法としては、特に制限はなく、常法により行うことができる。例えば、植物抽出物を濃縮し、多孔性樹脂等を用いたカラムクロマトグラフィーに供して、水、アルコール（メタノール等）の順で溶出させ、アルコール（メタノール等）で溶出される分画物として得る。このとき、前記分画物に対して、更にＯＤＳ（オクタデシルシリル化シリカゲル）を用いた逆相シリカゲルクロマトグラフィーや再結晶等に供することで、粗精製物を得ることができる。
そして、前記分画物又は粗精製物を、例えば、液体クロマトグラフィー等を用いて分離・精製することにより、精製されたε−ビニフェリンを得ることができる。 The method for isolating and purifying the ε-viniferin from the extract obtained as described above, the concentrate of the extract or the dried product of the extract is not particularly limited and may be performed by a conventional method. it can. For example, the plant extract is concentrated and subjected to column chromatography using a porous resin or the like to elute in the order of water and alcohol (methanol, etc.) to obtain a fraction eluted with alcohol (methanol, etc.) .. At this time, a crude product can be obtained by subjecting the fractionated product to reverse phase silica gel chromatography using ODS (octadecylsilylated silica gel), recrystallization, or the like.
The purified ε-viniferin can be obtained by separating and purifying the fractionated product or the crudely purified product using, for example, liquid chromatography.

精製されたε−ビニフェリンの同定方法としては、特に制限はなく、常法により行うことができる。例えば、^１３Ｃ−ＮＭＲ（ＮｕｃｌｅａｒＭａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅ）分析において、下記の^１３Ｃ−ＮＭＲケミカルシフトδ（帰属炭素）を示す場合に、試験化合物がε−ビニフェリンであると同定することができる。
^１３Ｃ−ＮＭＲケミカルシフトδ（帰属炭素）：
１２９．９（９−Ｃ）、１２８．７（１０、１４−Ｃ）、１１６．３（１１、１３−Ｃ）、１５８．２（１２−Ｃ）、１２３．５（７−Ｃ）、１３０．１（８−Ｃ）、１３６．４（１−Ｃ）、１１９．８（２−Ｃ）、１６２．５（３−Ｃ）、９６．８（４−Ｃ）、１５９．６（５−Ｃ）、１０４．２（６−Ｃ）、１３３．９（１’−Ｃ）、１２７．９（２’、６’−Ｃ）、１１６．１（３’、５’−Ｃ）、１５８．２（４’−Ｃ）、９４．８（７’−Ｃ）、５７．１（８’−Ｃ）、１４７．４（９’−Ｃ）、１０２．１（１２’−Ｃ）、１０７．０（１０’、１４’−Ｃ）、１５９．６（１１’、１３’−Ｃ） The method for identifying the purified ε-viniferin is not particularly limited and can be performed by a conventional method. For example, in ¹³ C-NMR (Nuclear Magnetic Resonance) analysis, when the following ¹³ C-NMR chemical shift δ (attributed carbon) is shown, the test compound can be identified as ε-viniferin.
¹³ C-NMR chemical shift δ (attributed carbon):
129.9 (9-C), 128.7 (10, 14-C), 116.3 (11, 13-C), 158.2 (12-C), 123.5 (7-C), 130. .1 (8-C), 136.4 (1-C), 119.8 (2-C), 162.5 (3-C), 96.8 (4-C), 159.6 (5-). C), 104.2 (6-C), 133.9 (1'-C), 127.9 (2', 6'-C), 116.1 (3', 5'-C), 158. 2(4'-C), 94.8(7'-C), 57.1(8'-C), 147.4(9'-C), 102.1(12'-C), 107. 0 (10', 14'-C), 159.6 (11', 13'-C)

前記ε−ビニフェリンは、ＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用及び育毛作用を有しているため、それらの作用を利用して、ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤として用いることができる。なお、抽出処理により得られた植物抽出物は、前記ε−ビニフェリンを含有しており、そのままＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤として使用し得るが、精製してε−ビニフェリンの純度を高めたものを使用することが好ましい。ε−ビニフェリンの純度を高めたものを使用することによって、より一層使用効果に優れたＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤を得ることができる。
前記ε−ビニフェリンを含有する植物抽出物には、前記ε−ビニフェリンを含有する植物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。 Since the ε-viniferin has FGF-7 production promoting action, VEGF production promoting action, IGF-1 production promoting action, HGF production promoting action, testosterone 5α-reductase inhibitory action and hair growth action, these actions are By utilizing it, it can be used as a FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, a testosterone 5α-reductase inhibitor and a hair growth agent. The plant extract obtained by the extraction treatment contains the above-mentioned ε-viniferin, and as it is, FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α. -Although it can be used as a reductase inhibitor and a hair-growing agent, it is preferable to use a purified product to enhance the purity of ε-viniferin. By using ε-viniferin with a high purity, a FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, and testosterone 5α-reductase which are more excellent in use effect Inhibitors and hair restorers can be obtained.
The ε-viniferin-containing plant extract includes an extract obtained by using the ε-viniferin-containing plant as an extraction raw material, a dilute solution or a concentrated solution of the extract, and a drying obtained by drying the extract. Products, or any of these crudely purified products or purified products.

なお、前記ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤の有効成分として、ε−ビニフェリンそのものが含まれていてもよく、その薬理学的に許容される塩が含まれていてもよい。また、ε−ビニフェリン又はその薬理学的に許容される塩の、水和物又は溶媒和物が含まれていてもよい。また、ε−ビニフェリンは、ＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用及び育毛作用を損なわない限り、修飾又は置換されていてもよい。 In addition, as an active ingredient of the FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent, ε-viniferin itself is contained. Or a pharmaceutically acceptable salt thereof may be contained. Further, a hydrate or solvate of ε-viniferin or a pharmacologically acceptable salt thereof may be contained. Further, ε-viniferin is modified or substituted unless it impairs FGF-7 production promoting action, VEGF production promoting action, IGF-1 production promoting action, HGF production promoting action, testosterone 5α-reductase inhibitory action and hair growth action. May be.

薬理学的に許容される塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素塩、硝酸塩、硫酸水素酸塩、リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ-トルエンスルホン酸塩、樟脳スルホン酸塩、スルファミン酸塩、マンデル酸塩、プロピオン酸塩、グリコール酸塩、ステアリン酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン酸塩、パモン酸塩、フェニル酢酸塩、グルタミン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、スルファニル酸塩、２−アセトキシ安息香酸塩、エタンジスルホン酸塩、シュウ酸塩、イセチオン酸塩、ギ酸塩、トリフルオロ酢酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、アスパラギン酸塩、アジピン酸塩、ヨウ化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩等が挙げられる。 The pharmaceutically acceptable salt is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include hydrochloride, sulfate, hydrobromide, nitrate, hydrosulfate and phosphate. , Acetate, lactate, succinate, citrate, maleate, hydroxymaleate, tartrate, fumarate, methanesulfonate, p-toluenesulfonate, camphorsulfonate, sulfamic acid Salt, mandelate, propionate, glycolate, stearate, malate, ascorbate, pamonate, phenylacetate, glutamate, benzoate, salicylate, sulfanilate, 2- Acetoxybenzoate, ethanedisulfonate, oxalate, isethionate, formate, trifluoroacetate, ethylsuccinate, lactobionate, gluconate, glucoheptonate, 2-hydroxyethanesulfonate, Benzene sulfonate, paratoluene sulfonate, lauryl sulfate, aspartate, adipate, hydroiodide, nicotinate, oxalate, picrate, thiocyanate, undecanoate, etc. Can be mentioned.

本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、ε−ビニフェリンそのものであってもよいし、ε−ビニフェリンを含有する植物抽出物のみからなるものでもよいし、ε−ビニフェリン又はε−ビニフェリンを含有する植物抽出物を製剤化したものでもよいが、精製してε−ビニフェリンの純度を高めたものを使用することが好ましい。ε−ビニフェリンの純度を高めたものを使用することによって、より一層使用効果に優れたＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤を得ることができる。 The FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent of the present invention may be ε-viniferin itself, or ε. -It may consist only of a plant extract containing vinyliferin, or may be a formulation of a plant extract containing ε-biniferin or ε-viniferin, but purified to enhance the purity of ε-viniferin Is preferably used. By using ε-viniferin with a high purity, a FGF-7 production promoter, a VEGF production promoter, an IGF-1 production promoter, an HGF production promoter, and testosterone 5α-reductase which are more excellent in use effect Inhibitors and hair restorers can be obtained.

前記ＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤中のε−ビニフェリンの含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。 The content of ε-viniferin in the FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent is not particularly limited, It can be appropriately selected according to the purpose.

＜その他の成分＞
前記ε−ビニフェリンは、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化して提供することができ、他の組成物（例えば、皮膚化粧料等）に配合して使用できるほか軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味剤、矯臭剤等を用いることができる。 <Other ingredients>
The ε-viniferin is formulated into an arbitrary dosage form such as powder, granules, tablets, and liquid according to a conventional method, using a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin and cyclodextrin and any other auxiliary agent. The composition can be provided in the form of an ointment, a liquid preparation for external use, a patch, and the like, as well as being used by being mixed with other compositions (for example, skin cosmetics and the like). At this time, as the auxiliary agent, for example, an excipient, a binder, a disintegrating agent, a lubricant, a stabilizer, a corrigent, a flavoring agent or the like can be used.

前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。また、前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられ、前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられ、前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられ、前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられ、前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。 Examples of the excipient include lactose, sucrose, sodium chloride, glucose, starch, calcium carbonate, kaolin, microcrystalline cellulose, silicic acid and the like. Examples of the binder include water, ethanol, propanol, simple syrup, glucose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylstarch, methylcellulose, ethylcellulose, shellac, calcium phosphate, polyvinylpyrrolidone, etc. Examples of the disintegrator include dry starch, sodium alginate, agar powder, sodium hydrogen carbonate, calcium carbonate, sodium lauryl sulfate, stearic acid monoglyceride, lactose, and the like, and examples of the lubricant include , Purified talc, stearates, borax, polyethylene glycol and the like, and examples of the stabilizer include sodium pyrosulfite, EDTA, thioglycolic acid, thiolactic acid, and the like, and the flavoring/flavoring agent. Examples include sucrose, orange peel, citric acid, tartaric acid and the like.

なお、本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、必要に応じてＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用及び育毛作用のいずれかを有する他の天然抽出物等を、前記ε−ビニフェリンとともに配合して有効成分として用いることができる。 The FGF-7 production promoting agent, VEGF production promoting agent, IGF-1 production promoting agent, HGF production promoting agent, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair-growing agent of the present invention have an FGF-7 production promoting action as necessary. , VEGF production promoting action, IGF-1 production promoting action, HGF production promoting action, other natural extracts having any of the testosterone 5α-reductase inhibitory action and hair-growth action, etc. are blended together with the above-mentioned ε-viniferin to be an active ingredient. Can be used as

前記ＦＧＦ−７産生促進剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、ＦＧＦ−７産生促進作用を発揮する。
前記ＶＥＧＦ産生促進剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、ＶＥＧＦ産生促進作用を発揮する。
前記ＩＧＦ−１産生促進剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、ＩＧＦ−１産生促進作用を発揮する。
前記ＨＧＦ産生促進剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、ＨＧＦ産生促進作用を発揮する。
前記テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を発揮する。
前記育毛剤は、有効成分として含有されるε−ビニフェリンの作用により、育毛作用を発揮する。 The FGF-7 production promoter exhibits an FGF-7 production promoting action by the action of ε-viniferin contained as an active ingredient.
The VEGF production promoter exhibits a VEGF production promoting action by the action of ε-viniferin contained as an active ingredient.
The IGF-1 production promoter exhibits an IGF-1 production promoting action by the action of ε-viniferin contained as an active ingredient.
The HGF production promoter exhibits an HGF production promoting action by the action of ε-viniferin contained as an active ingredient.
The testosterone 5α-reductase inhibitor exhibits a testosterone 5α-reductase inhibitory action by the action of ε-biniferin contained as an active ingredient.
The hair-growing agent exerts a hair-growing action by the action of ε-viniferin contained as an active ingredient.

本発明のＦＧＦ−７産生促進剤によると、優れたＦＧＦ−７産生促進作用を通じて、例えば、線維芽細胞、血管内皮細胞、筋芽細胞、軟骨細胞、グリア細胞、骨芽細胞等の分裂・成長を誘導したり、毛根の活性化を介して育毛を促進したり、脱毛症等を改善乃至治療したりすることができる。ただし、本発明のＦＧＦ−７産生促進剤は、これらの用途以外にもＦＧＦ−７産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。 According to the FGF-7 production promoter of the present invention, through excellent FGF-7 production promoting action, for example, division/growth of fibroblasts, vascular endothelial cells, myoblasts, chondrocytes, glial cells, osteoblasts, etc. Can be induced, hair growth can be promoted through activation of hair roots, and alopecia and the like can be improved or treated. However, the FGF-7 production-promoting agent of the present invention can be used for all uses other than these uses, which are significant in exerting an action of promoting FGF-7 production.

本発明のＶＥＧＦ産生促進剤によると、優れたＶＥＧＦ産生促進作用を通じて、例えば、血管内皮細胞の増殖や遊走、血管新生、血液凝固、血圧調節、皮膚におけるリンパ管の成長等を促進したり、脱毛症、冠動脈疾患、閉塞性末梢動脈硬化症、軟骨損傷、血管形成不全、虚血性脚部疾患等を改善乃至治療したりすることができる。ただし、本発明のＶＥＧＦ産生促進剤は、これらの用途以外にもＶＥＧＦ産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。 The VEGF production promoter of the present invention promotes, for example, proliferation and migration of vascular endothelial cells, angiogenesis, blood coagulation, blood pressure regulation, growth of lymphatic vessels in the skin, and hair loss through an excellent VEGF production promoting action. , Coronary artery disease, obstructive peripheral arteriosclerosis, cartilage damage, angiogenesis failure, ischemic leg disease and the like can be improved or treated. However, the VEGF production-promoting agent of the present invention can be used for all uses other than these uses that are significant in exhibiting a VEGF production-promoting action.

本発明のＩＧＦ−１産生促進剤によると、優れたＩＧＦ−１産生促進作用を通じて、例えば、細胞全般の分化・増殖・成長、老化の進行抑制、血糖降下、生殖機能の調節、軟骨への硫酸イオンの取込み等を促進したり、脱毛症、皮膚老化、糖尿病、下垂体機能低下症、下垂体性小人症等改善乃至治療したりすることができる。ただし、本発明のＩＧＦ−１産生促進剤は、これらの用途以外にもＩＧＦ−１産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。 According to the IGF-1 production promoter of the present invention, for example, through excellent IGF-1 production promotion action, for example, differentiation/proliferation/growth of cells in general, suppression of aging progress, hypoglycemia, regulation of reproductive function, sulfate to cartilage It is possible to promote the uptake of ions and to improve or treat alopecia, skin aging, diabetes, hypopituitarism, pituitary dwarfism and the like. However, the IGF-1 production promoter of the present invention can be used for all uses other than these uses, which are significant in exerting an IGF-1 production promoting action.

本発明のＨＧＦ産生促進剤によると、優れたＨＧＦ産生促進作用を通じて、例えば、各臓器由来の上皮細胞、内皮細胞、造血系細胞等の増殖を促進したり、臓器の障害や線維化を抑制し、再生を促進したり、脱毛症、線維症、肝臓疾患、閉塞性動脈硬化症等を改善乃至治療したりすることができる。ただし、本発明のＨＧＦ産生促進剤は、これらの用途以外にもＨＧＦ産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。 According to the HGF production promoter of the present invention, through excellent HGF production promoting action, for example, promotion of proliferation of epithelial cells, endothelial cells, hematopoietic cells, etc. derived from each organ, and inhibition of organ damage and fibrosis are suppressed. , Promote regeneration, and improve or treat alopecia, fibrosis, liver disease, arteriosclerosis obliterans, and the like. However, the HGF production-promoting agent of the present invention can be used for all uses other than these uses, which have significance in exerting an HGF production-promoting action.

本発明のテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤によると、優れたテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を通じて、例えば男性型脱毛の予防、皮脂分泌の抑制等に好適に利用することができる。ただし、本発明のテストステロン５α−リダクターゼ阻害剤は、これらの用途以外にもテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。 The testosterone 5α-reductase inhibitor of the present invention can be suitably used, for example, for preventing male pattern hair loss, suppressing sebum secretion, etc. through its excellent testosterone 5α-reductase inhibitory action. However, the testosterone 5α-reductase inhibitor of the present invention can be used for all uses other than these uses, which are significant in exhibiting a testosterone 5α-reductase inhibitory action.

本発明の育毛剤によると、優れたＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用等を通じて、例えば男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等の、疾患や好ましくない症状を予防又は治療するために好適に利用することができる。
なお、本明細書における「育毛剤」とは、毛を発育させること、毛の発育を促進すること、毛の健康状態を保つこと、脱毛を予防すること及び脱毛を低減させることのいずれかの効果を持つ薬剤を意味し、「養毛剤」をも包含する。したがって、本発明の育毛剤は養毛剤としても好適に用いることができる。 According to the hair-growing agent of the present invention, for example, androgenetic alopecia, hirsutism, through excellent FGF-7 production promoting action, VEGF production promoting action, IGF-1 production promoting action, HGF production promoting action, testosterone 5α-reductase inhibitory action and the like. It can be preferably used for preventing or treating diseases and unfavorable symptoms such as illness, seborrhea, acne (acne and the like), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, precocious boys and the like.
In addition, the "hair-growth agent" in the present specification means any one of growing hair, promoting hair growth, maintaining hair health, preventing hair loss and reducing hair loss. It means a drug having an effect and also includes "hair restorer". Therefore, the hair restorer of the present invention can be preferably used as a hair nourishing agent.

本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、優れた作用を有するとともに、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているため、頭髪用育毛剤、頭髪化粧料等の皮膚外用剤に配合するのに好適である。前記皮膚外用剤の投与部位としては、頭髪、頭髪の毛根、頭皮、頭皮の皮脂腺等の頭部が好ましい。前記皮膚外用剤の剤形としては、軟膏、クリーム、ローション、ゲル、ゾル、スプレー、溶液等が挙げられる。頭髪化粧料としては、例えば、ヘアトニック、ヘアリキッド、シャンプー、ポマード、リンス等が挙げられる。 INDUSTRIAL APPLICABILITY The FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair-growing agent of the present invention have excellent actions and when applied to the skin. It has excellent usability and safety, and is suitable for blending in a skin external preparation such as a hair-growth agent for hair and a cosmetic for hair. The administration site of the external preparation for skin is preferably the head such as hair, hair roots, scalp, and sebaceous glands of the scalp. Examples of the dosage form of the external preparation for skin include ointments, creams, lotions, gels, sols, sprays, solutions and the like. Examples of hair cosmetics include hair tonics, hair liquids, shampoos, pomades and conditioners.

また、本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、優れた作用を有するとともに、消化管で消化されるようなものではないことが確認されているので、美容用飲食品又は経口用医薬に配合するのに好適である。 In addition, the FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair-growing agent of the present invention have an excellent action and in the digestive tract. Since it has been confirmed that it is not digested, it is suitable for incorporation into cosmetic foods and drinks or oral medicines.

また、本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、優れた作用を有するので、ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１、ＨＧＦ、テストステロン５α−リダクターゼの機能の研究や、ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１、ＨＧＦ、テストステロン５α−リダクターゼに関連する疾患の研究のための試薬として好適に利用できる。 Further, the FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair-growing agent of the present invention have excellent effects, so FGF-7 , VEGF, IGF-1, HGF, and testosterone 5α-reductase can be suitably used as a reagent for studying the functions of FGF-7, VEGF, IGF-1, HGF, and testosterone 5α-reductase. ..

なお、本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。 The FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent of the present invention are preferably applied to humans. However, it can be applied to animals other than humans as long as the respective effects are exhibited.

以下に本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。 Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these examples.

（製造例１：エビヅル抽出物の製造）
エビヅルの茎を抽出原料として、以下の方法によりエビヅル抽出物を得た。
エビヅルの茎の粉砕物９８．６ｇをメタノール５Ｌに投入し、穏やかに攪拌しながら３時間、８０℃に保った後、ろ過した。再びメタノール５Ｌを加え、同様の操作を繰り返した。ろ液を４０℃で減圧下に濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥してエビヅル抽出物５．７ｇ（粉末状）を得た。エビヅル抽出物の収率は５．９％であった。 (Production Example 1: Production of shrimp extract)
The shrimp vine extract was obtained by the following method using the shrimp vine stem as an extraction raw material.
98.6 g of the ground product of the shrimp's vine was added to 5 L of methanol, and the mixture was kept at 80° C. for 3 hours while gently stirring, and then filtered. 5 L of methanol was added again and the same operation was repeated. The filtrate was concentrated at 40° C. under reduced pressure, and further dried by a reduced pressure drier to obtain 5.7 g (powder form) of shrimp vine extract. The yield of the shrimp vine extract was 5.9%.

（製造例２：ε−ビニフェリンの製造）
得られたエビヅル抽出物５．７ｇを、クロロホルム：メタノール：水＝１０：３：１（容量比）の混合溶媒に溶解し、シリカゲル（商品名シリカゲル６０、メルク株式会社）を充填したガラス製のカラム上部から注入して、シリカゲルに吸着させた。次いで、移動相としてクロロホルム：メタノール：水＝１０：３：１（容量比）を流し、その溶出液を集め、脱溶媒して、ε−ビニフェリン濃縮物３１２ｍｇを得た。
得られたε−ビニフェリン濃縮物３１２ｍｇを下記の条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて分画し、１７５ｍｇのε−ビニフェリンを単離した。 (Production Example 2: Production of ε-viniferin)
5.7 g of the obtained shrimp vine extract was dissolved in a mixed solvent of chloroform:methanol:water=10:3:1 (volume ratio), and a glass-filled silica gel (trade name: Silica Gel 60, Merck Co., Ltd.) was filled. It was injected from the top of the column and adsorbed on silica gel. Then, chloroform:methanol:water=10:3:1 (volume ratio) was passed as a mobile phase, and the eluate was collected and desolvated to obtain 312 mg of ε-viniferin concentrate.
The obtained ε-viniferin concentrate 312 mg was fractionated by high performance liquid chromatography under the following conditions to isolate 175 mg of ε-viniferin.

＜高速液体クロマトグラフィー条件１＞
固定相：ＪＡＩＧＥＬＧＳ−３１０（日本分析工業社製）を２本連結
カラム径：２０ｍｍ
カラム長：５００ｍｍ
移動相：メタノール
移動相流量：５ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＲＩ <High performance liquid chromatography condition 1>
Stationary phase: JAIGEL GS-310 (manufactured by Nippon Analytical Industry Co., Ltd.) 2 connected column diameter: 20 mm
Column length: 500 mm
Mobile phase: Methanol Mobile phase flow rate: 5 mL/min
Detection: RI

＜高速液体クロマトグラフィー条件２＞
固定相：ＹＭＣ−ＰａｃｋＯＤＳ−Ａ（ＹＭＣ製）
カラム径：２０ｍｍ
カラム長：２５０ｍｍ
移動相：アセトニトリル：水＝４：７
移動相流量：９ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＲＩ <High performance liquid chromatography condition 2>
Stationary phase: YMC-Pack ODS-A (made by YMC)
Column diameter: 20 mm
Column length: 250 mm
Mobile phase: acetonitrile:water=4:7
Mobile phase flow rate: 9 mL/min
Detection: RI

前記ε−ビニフェリンについて、^１３Ｃ−ＮＭＲ（ＮｕｃｌｅａｒＭａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅ）分析を行い、単離化合物がε−ビニフェリンであることを確認した。下記にその結果を示す。 ¹³ C-NMR (Nuclear Magnetic Resonance) analysis was performed on the ε-viniferin, and it was confirmed that the isolated compound was ε-viniferin. The results are shown below.

−ε−ビニフェリン−
^１３Ｃ−ＮＭＲケミカルシフトδ（帰属炭素）：
１２９．９（９−Ｃ）、１２８．７（１０、１４−Ｃ）、１１６．３（１１、１３−Ｃ）、１５８．２（１２−Ｃ）、１２３．５（７−Ｃ）、１３０．１（８−Ｃ）、１３６．４（１−Ｃ）、１１９．８（２−Ｃ）、１６２．５（３−Ｃ）、９６．８（４−Ｃ）、１５９．６（５−Ｃ）、１０４．２（６−Ｃ）、１３３．９（１’−Ｃ）、１２７．９（２’、６’−Ｃ）、１１６．１（３’、５’−Ｃ）、１５８．２（４’−Ｃ）、９４．８（７’−Ｃ）、５７．１（８’−Ｃ）、１４７．４（９’−Ｃ）、１０２．１（１２’−Ｃ）、１０７．０（１０’、１４’−Ｃ）、１５９．６（１１’、１３’−Ｃ） -Ε-viniferin-
¹³ C-NMR chemical shift δ (attributed carbon):
129.9 (9-C), 128.7 (10, 14-C), 116.3 (11, 13-C), 158.2 (12-C), 123.5 (7-C), 130. .1 (8-C), 136.4 (1-C), 119.8 (2-C), 162.5 (3-C), 96.8 (4-C), 159.6 (5-). C), 104.2 (6-C), 133.9 (1'-C), 127.9 (2', 6'-C), 116.1 (3', 5'-C), 158. 2(4'-C), 94.8(7'-C), 57.1(8'-C), 147.4(9'-C), 102.1(12'-C), 107. 0 (10', 14'-C), 159.6 (11', 13'-C)

（実施例１：ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１及びＨＧＦの産生促進試験）
製造例２にて単離したε−ビニフェリンを試料として用い、下記の試験法によりＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１及びＨＧＦのｍＲＮＡ発現率を測定した。 (Example 1: Production promotion test of FGF-7, VEGF, IGF-1 and HGF)
Using the ε-viniferin isolated in Production Example 2 as a sample, the mRNA expression rates of FGF-7, VEGF, IGF-1 and HGF were measured by the following test methods.

まず、正常ヒト頭髪毛乳頭細胞（ＴＯＹＯＢＯ社、ＣＡ６０２０５）を毛乳頭細胞増殖培地（ＴＯＹＯＢＯ社、ＴＰＧＭ−２５０）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２×１０^５個／ｍＬの濃度になるように１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地で希釈した後、直径６０ｍｍシャーレに５ｍＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、被験試料を添加した無血清ＤＭＥＭ培地に交換し６時間培養した後、ＩＳＯＧＥＮ（ニッポンジーン社、Ｃａｔ．Ｎｏ．３１１−０２５０１）にて総ＲＮＡを抽出し、それぞれのＲＮＡ量を分光光度計にて測定し、２００μｇ／ｍＬになるように総ＲＮＡを調製した。 First, normal human hair papilla cells (TOYOBO, CA60205) were cultured using a hair papilla cell growth medium (TOYOBO, TPGM-250), and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with 10% FBS-containing DMEM medium so as to have a concentration of 2×10 ⁵ cells/mL, and then seeded in a Petri dish having a diameter of 60 mm in an amount of 5 mL each and cultured overnight. After completion of the culture, the medium was replaced with a serum-free DMEM medium containing a test sample and cultured for 6 hours, and then total RNA was extracted with ISOGEN (Nippon Gene Co., Cat. No. 311-02501), and the amount of each RNA was measured spectrophotometrically. Total RNA was prepared so as to be 200 μg/mL.

この総ＲＮＡを鋳型とし、ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１、ＨＧＦ及び内部標準であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定した。検出はリアルタイムＰＣＲ装置ＳｍａｒｔＣｙｃｌｅｒ（Ｃｅｐｈｅｉｄ社）を用いて、ＴａＫａＲａＳＹＢＲＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ^ＴＭＲＴ−ＰＣＴＫｉｔ（ＰｅｒｆｅｃｔＲｅａｌＴｉｍｅ）（ｃｏｄｅＮｏ．ＲＲ０６３Ａ）によるリアルタイム２ＳｔｅｐＲＴ−ＰＣＲ反応により行った。 Using this total RNA as a template, the expression levels of FGF-7, VEGF, IGF-1, HGF and the internal standard GAPDH mRNA were measured. The detection was carried out by using a real-time PCR device, Smart Cycler (Cepheid), in a real-time 2 Step RT-PCR reaction using TaKaRa SYBR PrimeScript ^™ RT-PCT Kit (Perfect Real Time) (code No. RR063A).

ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１、ＨＧＦ及びＧＡＰＤＨの各遺伝子を検出するために、下記の配列を有するセンスプライマー及びアンチセンスプライマーを使用した（タカラバイオ社）。 In order to detect each gene of FGF-7, VEGF, IGF-1, HGF and GAPDH, the sense primer and antisense primer having the following sequences were used (Takara Bio Inc.).

ＦＧＦ−７遺伝子検出用プライマー
センスプライマー：５’−ｔｃｔｇｔｃｇａａｃａｃａｇｔｇｇｔａｃｃｔｇａｇ−３’（配列番号１）
アンチセンスプライマー：５’−ｇｃｃａｃｔｇｔｃｃｔｇａｔｔｔｃｃａｔｇａ−３’（配列番号２） FGF-7 gene detection primer Sense primer: 5'-tctgtcgaacacagtgtgtaccgtag-3' (SEQ ID NO: 1)
Antisense primer: 5'-gccactgtctcctgattttccatga-3' (SEQ ID NO: 2)

ＶＥＧＦ遺伝子検出用プライマー
センスプライマー：５’−ｇａｇｃｃｔｔｇｃｃｔｔｇｃｔｇｃｔｃｔａｃ−３’（配列番号３）
アンチセンスプライマー：５’−ｃａｃｃａｇｇｇｔｃｔｃｇａｔｔｇｇａｔｇ−３’（配列番号４） VEGF gene detection primer Sense primer: 5'-gagccttgcctttgctgctctac-3' (SEQ ID NO: 3)
Antisense primer: 5'-caccagggtctcgatttggatg-3' (SEQ ID NO: 4)

ＩＧＦ−１遺伝子検出用プライマー
センスプライマー：５’−ｔｃｔｔｃａｇｔｔｃｇｔｇｔｇｔｇｇａｇａｃａｇ−３’（配列番号５）
アンチセンスプライマー：５’−ｇｇｇｔｇｃｇｃａａｔａｃａｔｃｔｃｃａｇ−３’（配列番号６） IGF-1 gene detection primer Sense primer: 5'-tcttcagtttcgtgtgtgtggagacag-3' (SEQ ID NO: 5)
Antisense primer: 5'-gggtgcgcaatacatatctccag-3' (SEQ ID NO: 6)

ＨＧＦ遺伝子検出用プライマー
センスプライマー：５’−ｔｇｇｃｃａｔｇａａｔｔｔｇａｃｃｔｃｔａｔｇａ−３’（配列番号７）
アンチセンスプライマー：５’−ｇｇｃｔｇａｃａｔｔｔｇａｔｇｃｃａｃｔｃｔｔａ−３’（配列番号８） HGF gene detection primer Sense primer: 5'-tggccatgaattttgaccctattga-3' (SEQ ID NO: 7)
Antisense primer: 5'-ggctgacattttgatgccactctta-3' (SEQ ID NO: 8)

ＧＡＰＤＨ遺伝子検出用プライマー
センスプライマー：５’−ｇｃａｃｃｇｔｃａａｇｇｃｔｇａｇａａｃ−３’（配列番号９）
アンチセンスプライマー：５’−ａｔｇｇｔｇｇｔｇａａｇａｃｇｃｃａｇｔ−３’（配列番号１０） GAPDH gene detection primer Sense primer: 5′-gcaccgtgtcaaggctgagaac-3′ (SEQ ID NO: 9)
Antisense primer: 5'-atggtggtgaagagccgcagt-3' (SEQ ID NO: 10)

ＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１及びＨＧＦのｍＲＮＡの発現量について、同一サンプルにおけるＧＡＰＤＨの発現量の値で補正を行った後、下記（１）式によりＦＧＦ−７、ＶＥＧＦ、ＩＧＦ−１及びＨＧＦのｍＲＮＡ発現促進率（％）を算出した。各々の結果を表１〜４に示す。
各遺伝子のｍＲＮＡ発現促進率（％）＝Ｂ／Ａ × １００・・・（１）
［ただし、前記（１）式中、
Ａ：試料無添加時の補正値、
Ｂ：試料添加時の補正値、を表す。］ The expression levels of FGF-7, VEGF, IGF-1 and HGF mRNA were corrected by the value of GAPDH expression level in the same sample, and then FGF-7, VEGF, IGF-1 and The HGF mRNA expression promotion rate (%) was calculated. The respective results are shown in Tables 1 to 4.
MRNA expression promoting rate (%) of each gene=B/A×100 (1)
[However, in the above formula (1),
A: Correction value when no sample was added,
B: represents the correction value when the sample was added. ]

表１〜４の結果から、ε−ビニフェリンが、高いＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用及びＨＧＦ産生促進作用を有することが認められた。また、ε−ビニフェリンは、これらのヘアサイクル調節因子の中で、特にＦＧＦ−７に対して顕著に高い産生促進作用を示し、その作用は濃度依存的であることが認められた。 From the results of Tables 1 to 4, it was confirmed that ε-viniferin has a high FGF-7 production promoting action, a VEGF production promoting action, an IGF-1 production promoting action and an HGF production promoting action. In addition, ε-viniferin showed a remarkably high production-promoting action on FGF-7 among these hair cycle regulators, and it was confirmed that the action is concentration-dependent.

（実施例２：テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用試験）
製造例２にて単離したε−ビニフェリンを試料として用い、下記の試験法によりテストステロン５α−リダクターゼ阻害作用試験を行った。 (Example 2: Testosterone 5α-reductase inhibitory action test)
Using ε-viniferin isolated in Production Example 2 as a sample, a testosterone 5α-reductase inhibitory action test was conducted by the following test method.

まず、蓋付Ｖ底試験管にて、プロピレングリコールで調製した４．２ｍｇ／ｍＬテストステロン２０μＬ、１ｍｇ／ｍＬＮＡＤＰＨ（還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸）含有５ｍｍｏｌ／ｍＬＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．１３）８２５μＬを混合した。これに、エタノール、８０％エタノール又は精製水で調製した被験試料８０μＬ及びＳ−９（オリエンタル酵母工業株式会社）７５μＬを加え再び混合し、３７℃にて３０分反応させた後、塩化メチレン１ｍＬを加え反応を停止した。これを遠心（１，６００×ｇ、１０分）し、塩化メチレン層をガスクロマトグラフィーにより分析した。前記ガスクロマトグラフィーの条件は以下の通りである。また、同様の方法で空試験を行った。
なお、前記Ｓ−９とは、ＳＤラットの雄に酵素誘導剤（フェノバルビタール、５，６−ベンゾフラボン）を腹腔内投与したのち肝臓をすりつぶして、９，０００×ｇで遠心した上清である。 First, in a V-bottom test tube with a lid, 4.2 mg/mL testosterone 20 μL prepared with propylene glycol, 1 mg/mL NADPH (reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate)-containing 5 mmol/mL Tris-HCl buffer (pH 7) .13) 825 μL were mixed. To this, 80 μL of a test sample prepared with ethanol, 80% ethanol or purified water and 75 μL of S-9 (Oriental Yeast Industry Co., Ltd.) were added and mixed again, and after reacting at 37° C. for 30 minutes, 1 mL of methylene chloride was added. The addition was stopped. This was centrifuged (1,600 xg, 10 minutes), and the methylene chloride layer was analyzed by gas chromatography. The conditions of the gas chromatography are as follows. A blank test was conducted in the same manner.
The S-9 is a supernatant obtained by intraperitoneally administering an enzyme inducer (phenobarbital, 5,6-benzoflavone) to SD rat males, grinding the liver, and centrifuging at 9,000×g. is there.

＜ガスクロマトグラフィーの条件＞
使用機器：ＳｈｉｍａｄｚｕＧＣ−７Ａ
カラム：ＤＢ−１７０１（φ０．５３ｍｍ×３０ｍ、膜厚；１．０μｍ）
カラム／注入温度：２４０℃／３００℃
検出器：ＦＩＤ
キャリアガス：窒素ガス <Conditions for gas chromatography>
Equipment used: Shimadzu GC-7A
Column: DB-1701 (φ0.53 mm×30 m, film thickness; 1.0 μm)
Column/injection temperature: 240°C/300°C
Detector: FID
Carrier gas: Nitrogen gas

あらかじめ、３α−アンドロスタンジオール（ＳＩＧＭＡ社）、ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ、東京化成工業株式会社）及びテストステロン（東京化成工業株式会社）の標準品の塩化メチレン溶液をガスクロマトグラフィーにより分析し、これら３化合物の精秤量とピーク面積よりピーク面積あたりの化合物量を算出した。
そして、Ｓ−９による反応後の３α−アンドロスタンジオール、ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）及びテストステロンをガスクロマトグラフィーにより分析し、それぞれのピーク面積あたりの濃度を、下記の（２）式に従って算出した。次に、被験試料の変換率を下記の（３）式に従って算出した。そして、前記変換率に基づいて、テストステロン５α−リダクターゼ活性阻害率を、下記の（４）式に従って算出した。結果を表５に示す。また、５０％阻害活性濃度（ＩＣ_５０：μｇ／ｍＬ）を算出した結果を表６に示す。 A standard methylene chloride solution of 3α-androstanediol (SIGMA), dihydrotestosterone (DHT, Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) and testosterone (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) was analyzed by gas chromatography in advance, and these three compounds were analyzed. The amount of compound per peak area was calculated from the precisely weighed amount and the peak area.
Then, 3α-androstanediol, dihydrotestosterone (DHT) and testosterone after the reaction with S-9 were analyzed by gas chromatography, and the concentration of each peak area was calculated according to the following formula (2). Next, the conversion rate of the test sample was calculated according to the following equation (3). Then, based on the conversion rate, the testosterone 5α-reductase activity inhibition rate was calculated according to the following equation (4). The results are shown in Table 5. Table 6 shows the results of calculating the 50% inhibitory activity concentration (IC ₅₀ : μg/mL).

濃度（％）＝（被験試料のピーク面積×標準品濃度）／標準品のピーク面積・・・（２） Concentration (%)=(peak area of test sample×concentration of standard product)/peak area of standard product (2)

変換率（％）＝（Ａ＋Ｂ）／（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）・・・（３）
〔ただし、前記（３）式中、
Ａ：３α−アンドロスタンジオールの濃度、
Ｂ：ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）の濃度、
Ｃ：テストステロンの濃度、を表す。〕 Conversion rate (%)=(A+B)/(A+B+C) (3)
[However, in the formula (3),
A: concentration of 3α-androstanediol,
B: dihydrotestosterone (DHT) concentration,
C: represents the concentration of testosterone. ]

テストステロン５α−リダクターゼ活性阻害率（％）＝（１−Ｅ／Ｄ）×１００・・・（４）
〔ただし、前記（４）式中、
Ｄ：空試験での変換率、
Ｅ：被験試料添加での変換率、を表す。〕 Testosterone 5α-reductase activity inhibition rate (%)=(1−E/D)×100 (4)
[However, in the formula (4),
D: Conversion rate in blank test,
E: represents the conversion rate when the test sample was added. ]

実施例２の結果によれば、ε−ビニフェリンが、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用を有することが示された。また、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用の程度は、ε−ビニフェリンの濃度によって調節できることが示された。 The results of Example 2 showed that ε-viniferin has a testosterone 5α-reductase inhibitory action. It was also shown that the degree of testosterone 5α-reductase inhibitory action can be regulated by the concentration of ε-biniferin.

（配合例１：育毛用ヘアトニック）
下記組成の育毛用のヘアトニックを常法により製造した。
ε−ビニフェリン０．１ｇ
塩酸ピリドキシン０．１ｇ
レゾルシン０．０１ｇ
Ｄ−パントテニルアルコール０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム０．１ｇ
ｌ−メントール０．０５ｇ
１，３−ブチレングリコール４．０ｇ
ニンジンエキス０．５ｇ
エタノール２５．０ｇ
香料適量
精製水残部
合計１００．０ｇ
(Compound example 1: Hair tonic for hair growth)
A hair tonic for growing hair having the following composition was produced by a conventional method.
ε-viniferin 0.1 g
Pyridoxine hydrochloride 0.1 g
Resorcin 0.01g
D-pantothenyl alcohol 0.1 g
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1g
l-menthol 0.05g
1,3-butylene glycol 4.0 g
Carrot extract 0.5g
Ethanol 25.0g
Fragrance suitable amount
Purified water balance 100.0 g total

（配合例２：育毛用ヘアトニック）
下記組成の育毛用のヘアトニックを常法により製造した。
ε−ビニフェリン０．１ｇ
酢酸トコフェロール適量
セファランチン０．００２ｇ
イソプロピルメチルフェノール０．１ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム０．１５ｇ
ビワ葉エキス１．０ｇ
グリセリン１５ｇ
エタノール１５ｇ
香料適量
キレート剤（エデト酸ナトリウム）適量
防腐剤（ヒノキチオール）適量
可溶化剤（ポリオキシエチレンセチルエーテル）適量
精製水残部
合計１００．０ｇ
(Formulation Example 2: Hair tonic for hair growth)
A hair tonic for growing hair having the following composition was produced by a conventional method.
ε-viniferin 0.1 g
Tocopherol acetate suitable amount cepharanthin 0.002g
Isopropylmethylphenol 0.1g
Sodium hyaluronate 0.15g
Loquat leaf extract 1.0g
Glycerin 15g
Ethanol 15g
Fragrance Suitable amount Chelating agent (sodium edetate) Suitable amount Preservative (hinokitiol) Suitable amount Solubilizing agent (polyoxyethylene cetyl ether) Suitable amount
Purified water balance 100.0 g total

（配合例３：育毛用シャンプー）
下記組成の育毛用の透明シャンプーを常法により製造した。
ε−ビニフェリン０．１ｇ
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム１０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン１０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド４．０ｇ
プロピレングリコール２．０ｇ
香料適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）０．１５ｇ
精製水残部
合計１００．０ｇ
(Compound example 3: shampoo for hair growth)
A transparent shampoo for hair growth having the following composition was produced by a conventional method.
ε-viniferin 0.1 g
Coconut oil fatty acid methyl taurine sodium 10.0g
Coconut oil fatty acid amide propyl betaine 10.0g
Sodium polyoxyethylene alkyl ether sulfate 20.0g
Coconut oil fatty acid diethanolamide 4.0 g
Propylene glycol 2.0g
Fragrance Suitable amount of preservative (methyl paraoxybenzoate) 0.15g
Purified water balance 100.0 g total

（配合例４：育毛用シャンプー）
下記組成の育毛用のコンディショニングシャンプーを常法により製造した。
ε−ビニフェリン０．１ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム３０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン３０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム２０．０ｇ
ヤシ油ジエタノールアミド３．０ｇ
ジステアリン酸エチレングリコール２．０ｇ
香料適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）０．１５ｇ
１，３−ブチレングリコール３．０ｇ
精製水残部
合計１００．０ｇ (Compound example 4: shampoo for hair growth)
A conditioning shampoo for hair growth having the following composition was produced by a conventional method.
ε-viniferin 0.1 g
Sodium polyoxyethylene alkyl ether sulfate 30.0g
Coconut oil fatty acid amide propyl betaine 30.0g
Coconut oil fatty acid methyl taurine sodium 20.0g
Coconut oil diethanolamide 3.0g
Ethylene glycol distearate 2.0g
Fragrance Suitable amount of preservative (methyl paraoxybenzoate) 0.15g
1,3-butylene glycol 3.0 g
Purified water balance 100.0 g total

本発明のＦＧＦ−７産生促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＩＧＦ−１産生促進剤、ＨＧＦ産生促進剤、テストステロン５α−リダクターゼ阻害剤及び育毛剤は、優れたＦＧＦ−７産生促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＩＧＦ−１産生促進作用、ＨＧＦ産生促進作用、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用及び育毛作用を有するので、頭髪化粧料をはじめとする皮膚外用剤に配合したり、美容用化粧品及び医薬に配合したり、研究用の試薬として好適に利用できる。 The FGF-7 production promoter, VEGF production promoter, IGF-1 production promoter, HGF production promoter, testosterone 5α-reductase inhibitor and hair growth agent of the present invention have excellent FGF-7 production promotion action and VEGF production promotion. Since it has an action, an IGF-1 production promoting action, an HGF production promoting action, a testosterone 5α-reductase inhibitory action, and a hair-growing action, it is incorporated into a skin external preparation such as hair cosmetics, or incorporated into cosmetics and pharmaceuticals. Alternatively, it can be suitably used as a reagent for research.

Claims

A fibroblast growth factor-7 (FGF-7) production promoter comprising ε-viniferin as an active ingredient.

An agent for promoting the production of vascular endothelial growth factor (VEGF), which contains ε-viniferin as an active ingredient.

An insulin-like growth factor-1 (IGF-1) production promoter, which contains ε-viniferin as an active ingredient.

A hepatocyte growth factor (HGF) production promoter comprising ε-viniferin as an active ingredient.

A testosterone 5α-reductase inhibitor, which contains ε-viniferin as an active ingredient.

A hair restorer containing ε-viniferin as an active ingredient.