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JP2006023382A - Scanning optical observation device - Google Patents

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JP2006023382A
JP2006023382A JP2004199499A JP2004199499A JP2006023382A JP 2006023382 A JP2006023382 A JP 2006023382A JP 2004199499 A JP2004199499 A JP 2004199499A JP 2004199499 A JP2004199499 A JP 2004199499A JP 2006023382 A JP2006023382 A JP 2006023382A
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JP
Japan
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light
optical scanning
optical
fiber bundle
optical fiber
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Application number
JP2004199499A
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Japanese (ja)
Inventor
Tatsuo Nakada
竜男 中田
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Olympus Corp
Original Assignee
Olympus Corp
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Publication date
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a clear image of a sample by preventing a photodetector from detecting its self-fluorescence emitted in a clad. <P>SOLUTION: This scanning optical observation device 1 has a light source 6, an optical scanning section 7 to scan using the light from the light source 6, an optical fiber bundle 4 having cores to transmit the scanning light of the scanning section 7 and clads surrounding the cores, an object optical system 5 to focus the light transmitted through the optical fiber bundle 4 on a sample A, and a scanning controller 8 to control the operation of the optical scanning section 7. The scanning controller 8 controls the scanning section 7 to condense the light of the light source 6 for a long time on the clads but for a short time on the cores. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

この発明は、光走査型観察装置に関するものである。   The present invention relates to an optical scanning observation apparatus.

従来、生物試料等の標本を生きたままの状態(in vivo)拡大観察する光学顕微鏡として、特許文献1に示される光ファイバ顕微鏡が提案されている。この顕微鏡は、レーザ光源から発せられたレーザ光を光ファイバ束の一端面に結像させる第1の対物レンズと、光ファイバ束の他端面に配置された第2の対物レンズとを備え、レーザ光走査器により、レーザ光源からのレーザ光を標本上において2次元的に走査させる構造のものである。   Conventionally, an optical fiber microscope disclosed in Patent Document 1 has been proposed as an optical microscope for observing a specimen such as a biological sample in a living state (in vivo). This microscope includes a first objective lens that forms an image of laser light emitted from a laser light source on one end face of an optical fiber bundle, and a second objective lens disposed on the other end face of the optical fiber bundle, and a laser. In this structure, a laser beam from a laser light source is scanned two-dimensionally on a specimen by an optical scanner.

レーザ光走査器としては、ミラー角度を変化させることで、レーザ光の反射方向を変化させるガルバノミラーやポリゴンミラー、レーザ光を通過させるピンホールの位置を変化させることで標本上の光スポットの位置を移動させるディスクスキャン方式等が知られている。
特開2003−344777号公報(図1等)
As a laser beam scanner, the position of the light spot on the specimen can be changed by changing the position of the galvano mirror or polygon mirror that changes the reflection direction of the laser beam by changing the mirror angle, and the pinhole that passes the laser beam. There is known a disk scanning method for moving the disk.
JP 2003-344777 A (FIG. 1 etc.)

このような光ファイバ顕微鏡においては、光ファイバ束は複数のコアとその周囲に配置されるクラッドとを有するものであり、レーザ光走査器により走査された光は、これらのコアおよびクラッドの両方に集光される。
しかしながら、実際に観察に使用される光は、コアに入射されて伝播される光のみであり、クラッドに入射される光は観察には寄与していない。さらに、クラッドに特定波長の光が入射されると、クラッド内において自家蛍光が発生する不都合がある。クラッドにおいて発生した自家蛍光は、標本から発せられコア内を伝播して戻る蛍光とともに光検出器により検出されるため、取得された画像にフレアを生ずる等の不都合がある。
In such an optical fiber microscope, an optical fiber bundle has a plurality of cores and a clad disposed around the core, and light scanned by a laser light scanner is applied to both the core and the clad. Focused.
However, the light actually used for the observation is only the light incident on the core and propagated, and the light incident on the clad does not contribute to the observation. Furthermore, when light of a specific wavelength is incident on the clad, there is a disadvantage that autofluorescence is generated in the clad. Since the autofluorescence generated in the clad is detected by the photodetector together with the fluorescence emitted from the specimen and propagating back through the core, there are disadvantages such as flare in the acquired image.

この発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、クラッドにおいて発せられる自家蛍光が光検出器により検出されることを防止して、標本の鮮明な画像を得ることができる光走査型観察装置を提供することを目的としている。   The present invention has been made in view of the above-described circumstances, and is an optical scanning observation capable of preventing a self-fluorescence emitted from a clad from being detected by a photodetector and obtaining a clear image of a specimen. The object is to provide a device.

上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、光源と、該光源からの光を走査する光走査部と、該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、前記光走査部の動作を制御する走査制御部とを備え、該走査制御部が、前記光ファイバ束のコアに長くクラッドに短く、前記光源からの光を集光させるように前記光走査部を制御する光走査型観察装置を提供する。
In order to achieve the above object, the present invention provides the following means.
The present invention relates to an optical fiber bundle having a light source, an optical scanning unit that scans light from the light source, a plurality of cores that propagate light scanned by the optical scanning unit, and a clad disposed around the core. An objective optical system that forms an image of light propagating in the optical fiber bundle on a specimen, and a scanning control unit that controls the operation of the optical scanning unit, and the scanning control unit includes: Provided is an optical scanning observation apparatus that controls the optical scanning unit so as to collect light from the light source that is long in the core and short in the cladding.

本発明によれば、光源から発せられた光が光走査部の作動により光ファイバ束の一端面に集光され、該光ファイバ束内を伝播させられた後に対物光学系によって標本上に結像される。このとき走査制御部の作動により、光源からの光がコアに長くクラッドに短く集光されるので、クラッドにおいて発生する自家蛍光量を低減し、観察に必要な戻り光の量を増加させることができる。   According to the present invention, the light emitted from the light source is condensed on one end surface of the optical fiber bundle by the operation of the optical scanning unit, propagated in the optical fiber bundle, and then imaged on the sample by the objective optical system. Is done. At this time, since the light from the light source is collected in the core and short in the cladding by the operation of the scanning control unit, the amount of autofluorescence generated in the cladding can be reduced and the amount of return light necessary for observation can be increased. it can.

上記発明においては、前記走査制御部が、前記光走査部による光の集光位置を各コアにおいて停止させるように、階段状に光走査部の動作を制御することが好ましい。
このようにすることで、簡易かつ効果的に観察に必要な戻り光の量を増加させることができる。
In the above invention, it is preferable that the scanning control unit controls the operation of the optical scanning unit in a stepped manner so that the light condensing position by the optical scanning unit is stopped in each core.
By doing in this way, the amount of return light required for observation can be increased simply and effectively.

また、上記発明においては、前記走査制御部が、前記光走査部による光の集光位置を、各コアにおいて遅く、各クラッドにおいて速く移動させるように光走査部の動作を制御することとしてもよい。
光走査部による光の集光位置がコアを通過する速度と、クラッドを通過する速度とに差をもたせることにより、クラッドにおける自家蛍光の発生量を相対的に低減し、観察に必要な戻り光の量を相対的に増加させることができる。
In the above invention, the scanning control unit may control the operation of the optical scanning unit so that the light condensing position by the optical scanning unit is moved slowly in each core and fast in each cladding. .
By making a difference between the speed at which the light condensing position by the optical scanning unit passes through the core and the speed through the clad, the amount of autofluorescence generated in the clad is relatively reduced, and the return light necessary for observation The amount of can be relatively increased.

さらに、上記発明においては、前記光走査部がガルバノミラーからなり、前記走査制御部がガルバノミラーの角度を制御することとしてもよい。
ガルバノミラーの角度制御により、簡易にクラッドにおける自家蛍光の発生を抑制して、鮮明な画像を得ることができる。
Furthermore, in the above invention, the optical scanning unit may be a galvano mirror, and the scanning control unit may control the angle of the galvano mirror.
By controlling the angle of the galvanometer mirror, the generation of autofluorescence in the clad can be easily suppressed and a clear image can be obtained.

また、上記発明においては、前記光走査部が入力される振動周波数に応じて回折角度を変化させる音響光学素子からなり、前記走査制御部が光走査部に入力する振動周波数を制御することとしてもよい。
音響光学素子によれば、比較的高い周波数で集光位置を制御することができる。その結果、標本を高速に走査する場合においても、クラッドにおける自家蛍光の発生を低減して鮮明な画像を得ることができる。
In the above invention, the optical scanning unit may be composed of an acousto-optic element that changes a diffraction angle in accordance with an input vibration frequency, and the scanning control unit may control the vibration frequency input to the optical scanning unit. Good.
According to the acoustooptic device, the condensing position can be controlled at a relatively high frequency. As a result, even when the specimen is scanned at high speed, the generation of autofluorescence in the cladding can be reduced and a clear image can be obtained.

また、上記発明においては、前記光源が、極短パルスレーザ光を発振するレーザ光源からなり、前記光検出器が、前記光ファイバ束と光走査部との間から分岐した戻り光を検出することとしてもよい。
極短パルスレーザ光を標本に照射して、多光子励起現象を発生させ、得られた蛍光が光ファイバ束と光走査部との間から分岐されて光検出器により検出される。多光子励起現象は、標本の深さ方向の所定位置のみにおいて蛍光を発生させることができるので、同一光路を戻す必要がない。したがって、光走査部に戻す前に取り出して検出することができる。
Moreover, in the said invention, the said light source consists of a laser light source which oscillates an ultra-short pulse laser beam, and the said detector detects the return light branched from between the said optical fiber bundle and an optical scanning part. It is good.
The sample is irradiated with an ultrashort pulse laser beam to generate a multiphoton excitation phenomenon, and the obtained fluorescence is branched from between the optical fiber bundle and the optical scanning unit and detected by the photodetector. Since the multiphoton excitation phenomenon can generate fluorescence only at a predetermined position in the depth direction of the specimen, it is not necessary to return the same optical path. Therefore, it can be taken out and detected before returning to the optical scanning unit.

また、本発明は、光源と、該光源からの光を走査する光走査部と、該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、標本からの戻り光を検出する光検出器と、該光検出器の動作を制御する検出器制御部とを備え、該検出器制御部は、前記光ファイバ束のコアからの戻り光を検出し、クラッドからの戻り光を検出しないように前記光検出器の動作を制御する光走査型観察装置を提供する。   The present invention also provides a light source, a light scanning unit that scans light from the light source, a plurality of cores that propagate light scanned by the light scanning unit, and a clad disposed around the core. A fiber bundle, an objective optical system that forms an image of light propagating in the optical fiber bundle on a specimen, a photodetector that detects return light from the specimen, and a detector control that controls the operation of the photodetector An optical scanning observation device that detects the return light from the core of the optical fiber bundle and controls the operation of the photodetector so as not to detect the return light from the cladding. I will provide a.

この発明によれば、光走査部の作動により、光ファイバ束のコアおよびクラッドに光が集光され、光ファイバ束によって伝播された光が標本に照射されることによって、標本において戻り光が発生する。発生した戻り光は、対物光学系、光ファイバ束を介して戻り光検出器によって検出されることになるが、本発明によれば、検出器制御部の作動によりコアを介して標本から戻る戻り光のみを光検出器により検出させることができる。すなわち、クラッドを介して標本から戻る戻り光が光検出器により検出されることがないので、検出された画像にフレア等を発生させることがなく、鮮明な画像を取得することが可能となる。   According to the present invention, the light is condensed on the core and the clad of the optical fiber bundle by the operation of the optical scanning unit, and the light propagated by the optical fiber bundle is irradiated on the specimen, so that return light is generated in the specimen. To do. The generated return light is detected by the return light detector via the objective optical system and the optical fiber bundle. According to the present invention, the return returned from the sample via the core by the operation of the detector control unit. Only light can be detected by the photodetector. That is, since the return light returning from the specimen through the clad is not detected by the photodetector, it is possible to acquire a clear image without causing flare or the like in the detected image.

また、本発明は、光源と、該光源からの光を走査する光走査部と、該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、標本からの戻り光を検出する光検出器と、該光検出器により取得された画像を処理する画像処理部とを備え、該画像処理部が、前記光ファイバ束のコアからの戻り光に対応する画像を抽出する光走査型観察装置を提供する。   The present invention also provides a light source, a light scanning unit that scans light from the light source, a plurality of cores that propagate light scanned by the light scanning unit, and a clad disposed around the core. A fiber bundle, an objective optical system that forms an image of light propagating in the optical fiber bundle on a specimen, a photodetector that detects return light from the specimen, and an image acquired by the photodetector And an image processing unit, wherein the image processing unit extracts an image corresponding to the return light from the core of the optical fiber bundle.

この発明によれば、光走査部の作動により、光源からの光が、光ファイバ束のコアおよびクラッドに集光され、光ファイバ束によって伝播された光が標本に照射されることによって、標本において戻り光が発生する。発生した戻り光は、対物光学系、光ファイバ束を介して戻り光検出器によって検出され、画像として取得される。本発明によれば、画像処理部の作動によりコアから戻る戻り光に対応する画像が抽出されるので、クラッドからの戻り光が除外されることになる。クラッドからの戻り光には、クラッドにおける自家蛍光が含まれるが、得られる画像からはクラッドからの戻り光が除外されているので、画像にフレア等を発生させることが防止され、鮮明な画像を取得することができる。   According to the present invention, by the operation of the optical scanning unit, the light from the light source is collected on the core and the clad of the optical fiber bundle, and the light propagated by the optical fiber bundle is irradiated on the specimen, thereby Return light is generated. The generated return light is detected by the return light detector via the objective optical system and the optical fiber bundle, and is acquired as an image. According to the present invention, since the image corresponding to the return light returning from the core is extracted by the operation of the image processing unit, the return light from the clad is excluded. The return light from the clad includes autofluorescence in the clad, but since the return light from the clad is excluded from the obtained image, it is possible to prevent flare and the like from being generated in the image and to produce a clear image. Can be acquired.

また、本発明は、光源と、該光源からの光を走査する光走査部と、該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、光源からの光を選択的に通過させるシャッタ部と、該シャッタ部を制御するシャッタ制御部と、該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、標本からの戻り光を検出する光検出器とを備え、前記シャッタ制御部が、前記光ファイバ束のコアに集光される光を通過させ、クラッドに集光される光を遮断するようシャッタ部を制御する光走査型観察装置を提供する。   The present invention also provides a light source, a light scanning unit that scans light from the light source, a plurality of cores that propagate light scanned by the light scanning unit, and a clad disposed around the core. A fiber bundle, a shutter section that selectively allows light from a light source to pass through, a shutter control section that controls the shutter section, and an objective optical system that forms an image of light propagating through the optical fiber bundle on a specimen; A light detector for detecting return light from the specimen, and the shutter control unit allows the light collected on the core of the optical fiber bundle to pass therethrough and blocks the light collected on the clad. An optical scanning observation apparatus for controlling the above is provided.

本発明によれば、光源からの光が光走査部により走査され、光ファイバ束に向かわせられるが、シャッタ部の作動によりオンオフされ、選択的に通過させられる。この場合に、シャッタ制御部が、コアへの光を通過させ、クラッドへの光を遮断するので、光走査部からの光は光ファイバ束のコアのみに入射される。その結果、クラッドにおける自家蛍光の発生が未然に防止され、画像におけるフレアの発生を防止することができる。   According to the present invention, the light from the light source is scanned by the optical scanning unit and directed toward the optical fiber bundle, but is turned on and off by the operation of the shutter unit and selectively transmitted. In this case, since the shutter control unit passes the light to the core and blocks the light to the clad, the light from the optical scanning unit is incident only on the core of the optical fiber bundle. As a result, the generation of autofluorescence in the clad can be prevented and the occurrence of flare in the image can be prevented.

本発明によれば、クラッドにおいて発せられる自家蛍光が光検出器により検出されることを防止して、標本の鮮明な画像を得ることができるという効果を奏する。   According to the present invention, it is possible to prevent the autofluorescence emitted from the clad from being detected by the photodetector and to obtain a clear image of the specimen.

以下、本発明の一実施形態に係る光走査型観察装置について、図1〜図3を参照して説明する。
本実施形態に係る光走査型観察装置1は、レーザ走査型共焦点顕微鏡であって、図1に示されるように、第1の対物レンズ2を備える装置本体3と、該第1の対物レンズ2の結像位置に一端面4aを配置した光ファイバ束4と、該光ファイバ束4の他端面4b側に配置され、他端面4bから発せられた光を試料A上に結像させる第2の対物レンズ5とを備えている。
Hereinafter, an optical scanning observation apparatus according to an embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS.
An optical scanning observation apparatus 1 according to the present embodiment is a laser scanning confocal microscope, and as shown in FIG. 1, an apparatus main body 3 including a first objective lens 2, and the first objective lens The optical fiber bundle 4 having the one end face 4a disposed at the image forming position 2 and the second end face 4b of the optical fiber bundle 4 are disposed on the side of the other end face 4b and imaged on the sample A. Objective lens 5.

装置本体3には、レーザ光を発生するレーザ光源6と、2つの直交する軸線回りに揺動可能な2枚のガルバノミラー7a,7bにより構成され、レーザ光源6から発せられたレーザ光を、光ファイバ束4を構成する各光ファイバの一端面4aに2次元的に走査させる光走査部7と、該光走査部7を制御する走査制御部8と、瞳投影レンズ9および結像レンズ10と、前記第1の対物レンズ2を介して戻る戻り光からレーザ光を分離するダイクロイックミラー(分岐手段)11と、前記光ファイバ束4の一端面4aと共役な位置に配置される共焦点ピンホール12と、共焦点ピンホール12を通過した光を検出する光検出器13とを備えている。図中、符号14は、共焦点レンズである。   The apparatus main body 3 includes a laser light source 6 that generates laser light and two galvanometer mirrors 7a and 7b that can swing around two orthogonal axes, and the laser light emitted from the laser light source 6 is An optical scanning unit 7 that two-dimensionally scans one end face 4a of each optical fiber constituting the optical fiber bundle 4, a scanning control unit 8 that controls the optical scanning unit 7, a pupil projection lens 9, and an imaging lens 10 A dichroic mirror (branching means) 11 that separates the laser light from the return light returning through the first objective lens 2 and a confocal pin disposed at a position conjugate with the one end face 4a of the optical fiber bundle 4 A hole 12 and a photodetector 13 that detects light that has passed through the confocal pinhole 12 are provided. In the figure, reference numeral 14 denotes a confocal lens.

なお、図中、レーザ光源6が複数設けられているが、異なる波長のレーザ光を試料Aに対して照射可能とするためであり、単一のレーザ光源6であってもよい。また、光検出器13も複数設けた例を示しているが、単一の光検出器13であってもよい。また、符号15,21はダイクロイックミラー、符号16はバンドパスフィルタである。また、符号17は光路を折り曲げるミラーである。   Although a plurality of laser light sources 6 are provided in the figure, this is for enabling laser light of different wavelengths to be irradiated onto the sample A, and a single laser light source 6 may be used. Moreover, although the example provided with two or more photodetectors 13 is shown, the single photodetector 13 may be sufficient. Reference numerals 15 and 21 are dichroic mirrors, and reference numeral 16 is a band-pass filter. Reference numeral 17 denotes a mirror that bends the optical path.

前記第2の対物レンズ5は、光ファイバ束4の他端面4bから発せられる光を光源として試料Aの所望の位置に結像させるようになっている。
前記光ファイバ束4は、図3に示されるように、複数のコア4cと、各コア4cの周囲に配置されるクラッド4dとを備えている。
The second objective lens 5 is configured to form an image at a desired position of the sample A using light emitted from the other end surface 4b of the optical fiber bundle 4 as a light source.
As shown in FIG. 3, the optical fiber bundle 4 includes a plurality of cores 4c and a clad 4d disposed around each core 4c.

前記走査制御部8は、図2(a)に示されるように、ガルバノミラー7aの角度Yを段階的に変化させることで、図3に示されるように、光の走査位置をY方向に1列ずつずらすように制御するようになっている。また、図2(b)に示されるように、ガルバノミラー7bの角度Xを段階的に変化させることで、図3に示されるように、光の走査位置を、X方向に1列ずつずらすように制御するようになっている。   The scanning control unit 8 changes the angle Y of the galvanometer mirror 7a stepwise as shown in FIG. 2A, thereby changing the light scanning position in the Y direction by 1 as shown in FIG. Control is performed so that the columns are shifted. Further, as shown in FIG. 2B, by changing the angle X of the galvanometer mirror 7b stepwise, as shown in FIG. 3, the light scanning position is shifted by one column in the X direction. It comes to control.

その結果、光の走査位置は、光ファイバ束4の各コア4cの位置に所定時間にわたって停止された後、隣接するコア4cの位置に瞬時に移動して所定時間にわたって停止される動作が繰り返されるようになっている。すなわち、レーザ光源6からのレーザ光は、各コア4cの位置に長く、コア4c間のクラッド4dの位置には短い時間にわたって集光されるようになっている。   As a result, after the light scanning position is stopped at the position of each core 4c of the optical fiber bundle 4 for a predetermined time, the operation of instantaneously moving to the position of the adjacent core 4c and stopping for a predetermined time is repeated. It is like that. That is, the laser light from the laser light source 6 is long at the position of each core 4c, and is condensed at the position of the clad 4d between the cores 4c for a short time.

このように構成された本実施形態に係る光走査型観察装置1の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る光走査型共焦点観察装置1によれば、レーザ光源6からレーザ光が発せられると、レーザ光はダイクロイックミラー11,15を透過させられて、光走査部7により2次元方向に走査される。光走査部7により偏向されて出射されたレーザ光は、瞳投影レンズ9、ミラー17、結像レンズ10、第1の対物レンズ2を経て光ファイバ束4の一端面4aに入射させられる。
The operation of the optical scanning observation apparatus 1 according to the present embodiment configured as described above will be described below.
According to the optical scanning confocal observation device 1 according to the present embodiment, when laser light is emitted from the laser light source 6, the laser light is transmitted through the dichroic mirrors 11 and 15 and is two-dimensionally directed by the optical scanning unit 7. Scanned. The laser beam deflected and emitted by the optical scanning unit 7 is incident on the one end surface 4 a of the optical fiber bundle 4 through the pupil projection lens 9, the mirror 17, the imaging lens 10, and the first objective lens 2.

光ファイバ束4の一端面4aに入射させられて光ファイバ束4の内部を伝播したレーザ光は、光ファイバ束4の他端面4bから出射される際に一旦広がり、その後段に配されている第2の対物レンズ5によって試料Aの観察対象部位に照射される。レーザ光を照射された試料Aの観察対象部位からは蛍光が発せられ、蛍光は、第2の対物レンズ5、光ファイバ束4、第1の対物レンズ2、結像レンズ10、ミラー17、瞳投影レンズ9および光走査部7を介して戻り、ダイクロイックミラー11により反射されて、レーザ光と分離された後に、共焦点レンズ14により集光させられて共焦点ピンホール12を通過した光のみが光検出器13により検出される。光ファイバ束4の一端面4aは共焦点ピンホールとして機能し、また、共焦点ピンホール12と共役な位置に配置されているので、光ファイバ束4の一端面4aから出射された光のみが共焦点ピンホール12を通過することができ、光検出器13により検出されることになる。   The laser light that has entered the one end surface 4a of the optical fiber bundle 4 and propagated through the inside of the optical fiber bundle 4 once spreads when emitted from the other end surface 4b of the optical fiber bundle 4, and is disposed in the subsequent stage. The observation target region of the sample A is irradiated by the second objective lens 5. Fluorescence is emitted from the observation target portion of the sample A irradiated with the laser light, and the fluorescence is emitted from the second objective lens 5, the optical fiber bundle 4, the first objective lens 2, the imaging lens 10, the mirror 17, and the pupil. Only the light that returns through the projection lens 9 and the optical scanning unit 7, is reflected by the dichroic mirror 11, separated from the laser light, is condensed by the confocal lens 14, and passes through the confocal pinhole 12. It is detected by the photodetector 13. Since one end surface 4a of the optical fiber bundle 4 functions as a confocal pinhole and is disposed at a position conjugate with the confocal pinhole 12, only the light emitted from the one end surface 4a of the optical fiber bundle 4 is present. It can pass through the confocal pinhole 12 and is detected by the photodetector 13.

この場合において、走査制御部8の作動により、光走査部7を構成する各ガルバノミラー7a,7bの角度X,Yが、図2に示されるように段階的に変化させられることで、レーザ光が、コア4cに長く、クラッド4dに短く集光される。すなわち、光検出器13に検出される光は、その大部分が、コア4cを介して標本Aに入射されることによって標本Aから発せられた蛍光となる。その結果、クラッド4dに入射されるレーザ光の光量を抑制して、クラッド4dにおける自家蛍光の発生を抑えることができ、画像におけるフレア等の発生を抑制して、高コントラストの鮮明な画像を得ることができる。   In this case, the operation of the scanning control unit 8 changes the angles X and Y of the galvanometer mirrors 7a and 7b constituting the optical scanning unit 7 stepwise as shown in FIG. However, the light is condensed on the core 4c and short on the clad 4d. That is, most of the light detected by the photodetector 13 becomes fluorescence emitted from the specimen A when it enters the specimen A via the core 4c. As a result, the amount of laser light incident on the clad 4d can be suppressed to suppress the generation of autofluorescence in the clad 4d, and the occurrence of flare or the like in the image can be suppressed to obtain a clear image with high contrast. be able to.

なお、本実施形態に係る光走査型観察装置1においては、光走査部7として2枚のガルバノミラー7a,7bからなる、いわゆる近接ガルバノミラー方式を採用した場合について説明したが、ガルバノミラー7a,7b自体の動作周波数は500Hz程度と、それほど速くない。したがって、多数のコア4cを有する光ファイバ束4を用いて解像度を向上する場合等に、高速に走査することを考えると、ガルバノミラー7a,7bをステップ状に動かすことが困難になる場合もある。   In the optical scanning observation apparatus 1 according to the present embodiment, the case where a so-called proximity galvanometer mirror system including two galvanometer mirrors 7a and 7b is adopted as the optical scanning unit 7 has been described. The operating frequency of 7b itself is not so fast as about 500 Hz. Therefore, when the high-speed scanning is considered when the resolution is improved by using the optical fiber bundle 4 having a large number of cores 4c, it may be difficult to move the galvanometer mirrors 7a and 7b stepwise. .

そのような場合には、ガルバノミラー7a,7bに代えて、音響光学素子(図示略)を用いることにしてもよい。音響光学素子は、入力される振動周波数に応じて回折角度を変化させる素子であり、1×10Hz程度の振動数で動作するので、高速に光照射位置を走査させることができる。したがって、X方向およびY方向に回折角度を変化させる2つの音響光学素子を直列に配置して用いることにより、より高速に、2次元的に配列された光ファイバ束4のコア4cに選択的に光を集光することができる。また、同じ時間をかける場合に、走査可能なコア4cの本数を増加させることができ、画像の解像度を向上することができる。 In such a case, an acoustooptic element (not shown) may be used instead of the galvanometer mirrors 7a and 7b. The acousto-optic element is an element that changes the diffraction angle according to the input vibration frequency, and operates at a frequency of about 1 × 10 6 Hz, so that the light irradiation position can be scanned at high speed. Therefore, by using two acousto-optic elements that change the diffraction angle in the X direction and the Y direction in series, the cores 4c of the optical fiber bundle 4 that is two-dimensionally arranged can be selectively selected at higher speed. Light can be collected. Further, when the same time is spent, the number of cores 4c that can be scanned can be increased, and the resolution of the image can be improved.

次に、本発明の第2の実施形態に係る光走査型観察装置30について、図4および図5を参照して以下に説明する。
なお、本実施形態の説明において、上述した第1の実施形態に係る光走査型観察装置1と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を省略することにする。
Next, an optical scanning observation apparatus 30 according to a second embodiment of the present invention will be described below with reference to FIGS.
In the description of the present embodiment, the same reference numerals are given to portions having the same configuration as the optical scanning observation apparatus 1 according to the first embodiment described above, and the description thereof will be omitted.

本実施形態に係る光走査型観察装置30は、図4に示されるように、上述した第1の実施形態における走査制御部8に代えて、光検出器13による検出タイミングを制御する検出器制御部31を備えている。
検出器制御部31は、図5に示されるように、ガルバノミラー7aの角度Yが固定され、ガルバノミラー7bによる同一列に対するX方向の走査が行われているとき(時間P)に、レーザ光が光ファイバ束4のコア4cに配される時間だけ光検出器13をONとし、レーザ光がクラッド4dに配される時間およびガルバノミラー7aが角度Yを変更する時間(時間Q)において光検出器13をOFFとするようになっている。
As shown in FIG. 4, the optical scanning observation apparatus 30 according to the present embodiment is a detector control that controls the detection timing by the photodetector 13 instead of the scanning control unit 8 in the first embodiment described above. The unit 31 is provided.
As shown in FIG. 5, when the angle Y of the galvanometer mirror 7a is fixed and scanning in the X direction is performed on the same column by the galvanometer mirror 7b (time P), the detector control unit 31 Is turned on for the time when the optical fiber bundle 4 is disposed in the core 4c of the optical fiber bundle 4, and the light is detected at the time when the laser light is disposed on the cladding 4d and the time when the galvano mirror 7a changes the angle Y (time Q). The device 13 is turned off.

このように構成された本実施形態に係る光走査型観察装置30によれば、レーザ光源6から発せられたレーザ光は、ダイクロイックミラー11,15を介して光走査部7により走査され、瞳投影レンズ9、ミラー17、結像レンズ10、第1の対物レンズ2を経て光ファイバ束4の一端面4aに入射させられる。このとき、本実施形態によれば、レーザ光は何ら制限されることなく光ファイバ束4の一端面4a全体、すなわち、コア4cおよびクラッド4dの両方に集光される。   According to the optical scanning observation apparatus 30 according to the present embodiment configured as described above, the laser light emitted from the laser light source 6 is scanned by the optical scanning unit 7 via the dichroic mirrors 11 and 15, and pupil projection is performed. The light is incident on one end surface 4 a of the optical fiber bundle 4 through the lens 9, the mirror 17, the imaging lens 10, and the first objective lens 2. At this time, according to the present embodiment, the laser light is focused on the entire one end surface 4a of the optical fiber bundle 4, that is, both the core 4c and the clad 4d without any limitation.

そして、レーザ光が光ファイバ束4により伝播されて第2の対物レンズ5により標本Aに照射されると、標本Aにおいて発生した蛍光が、第2の対物レンズ5、光ファイバ束4、第1の対物レンズ2、結像レンズ10、ミラー17、瞳投影レンズ9および光走査部7を介して戻り、ダイクロイックミラー11により反射されて、レーザ光と分離された後に、共焦点レンズ14により集光させられて共焦点ピンホール12を通過した光のみが光検出器13に入射される。したがって、レーザ光がコア4cに集光されて、標本Aにおいて発生した蛍光のみならず、レーザ光がクラッド4dに集光されることにより、クラッド4dにおいて発生した自家蛍光も光検出器13に到達することになる。   When the laser light propagates through the optical fiber bundle 4 and is irradiated onto the specimen A by the second objective lens 5, the fluorescence generated in the specimen A is converted into the second objective lens 5, the optical fiber bundle 4, and the first. The objective lens 2, imaging lens 10, mirror 17, pupil projection lens 9, and optical scanning unit 7 are returned, reflected by the dichroic mirror 11, separated from the laser beam, and then condensed by the confocal lens 14. Only the light that has passed through the confocal pinhole 12 is incident on the photodetector 13. Accordingly, not only the fluorescence generated in the specimen A by focusing the laser beam on the core 4c but also the autofluorescence generated in the cladding 4d reaches the photodetector 13 by focusing the laser beam on the cladding 4d. Will do.

この場合において、本実施形態に係る光走査型観察装置30によれば、レーザ光がコア4cに入射されている時間は光検出器13がONとなって、標本Aからの蛍光が検出される一方、レーザ光がクラッド4dに入射されている時間は光検出器13がOFFとなって検出が行われない。その結果、レーザ光がクラッド4dに入射されることにより、クラッド4dにおいて自家蛍光が発生しても、その自家蛍光が発生している時間は光検出器13による検出が行われないので、取得される画像にフレア等が生ずることを防止することができる。
したがって、本実施形態に係る光走査型観察装置30によっても、第1の実施形態に係る光走査型観察装置1と同様に、高コントラストの鮮明な画像を得ることができる。
In this case, according to the optical scanning observation apparatus 30 according to the present embodiment, the photodetector 13 is turned on and the fluorescence from the specimen A is detected during the time when the laser light is incident on the core 4c. On the other hand, during the time when the laser beam is incident on the clad 4d, the photodetector 13 is turned off and no detection is performed. As a result, even if autofluorescence is generated in the clad 4d when the laser light is incident on the clad 4d, the time during which the autofluorescence is generated is not detected by the photodetector 13, and thus is acquired. It is possible to prevent flare and the like from occurring in the image.
Therefore, also with the optical scanning observation apparatus 30 according to the present embodiment, a clear image with high contrast can be obtained, as with the optical scanning observation apparatus 1 according to the first embodiment.

なお、本実施形態に係る光走査型観察装置30においては、光検出器13の動作を制御することにより、クラッド4dにレーザ光が入射した場合の蛍光検出を行わないように処理したが、これに代えて、図6に示されるように、光検出器13においては、全ての蛍光を検出しておき、その後段に配される画像処理部32において、クラッド4dにレーザ光が入射した場合の蛍光を画像上から除外する処理を行い、処理後の画像をモニタ33に表示することにしてもよい。   In the optical scanning observation apparatus 30 according to the present embodiment, the operation of the photodetector 13 is controlled so that the fluorescence detection is not performed when the laser light is incident on the clad 4d. Instead, as shown in FIG. 6, in the photodetector 13, all fluorescence is detected, and in the image processing unit 32 arranged in the subsequent stage, the laser light is incident on the clad 4 d. Processing to exclude fluorescence from the image may be performed, and the processed image may be displayed on the monitor 33.

次に、本発明の第3の実施形態に係る光走査型観察装置40について、図7を参照して以下に説明する。
なお、本実施形態の説明において、上述した実施形態に係る光走査型観察装置1,30と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を省略することにする。
Next, an optical scanning observation apparatus 40 according to a third embodiment of the present invention will be described below with reference to FIG.
In the description of the present embodiment, portions having the same configuration as those of the optical scanning observation apparatuses 1 and 30 according to the above-described embodiments are denoted by the same reference numerals and description thereof is omitted.

本実施形態に係る光走査型観察装置40は、レーザ光源6からの光を選択的に透過あるいは遮断するシャッタ41と、該シャッタ41の動作を制御するシャッタ制御部42とを備えている。シャッタ制御部42は、図5(c)に示された検出器制御部31の動作と同様に、レーザ光がコア4cに入射される角度X,Yにガルバノミラー7a,7bが配置されているときにON状態として、シャッタ41を開いてレーザ光を通過させ、レーザ光がクラッド4dに入射される角度X,Yにガルバノミラー7a,7bが配置されているときにOFF状態として、シャッタ41を閉じてレーザ光を遮断するようになっている。   The optical scanning observation apparatus 40 according to this embodiment includes a shutter 41 that selectively transmits or blocks light from the laser light source 6 and a shutter control unit 42 that controls the operation of the shutter 41. As in the operation of the detector control unit 31 shown in FIG. 5C, the shutter control unit 42 has the galvanometer mirrors 7a and 7b arranged at angles X and Y at which the laser light is incident on the core 4c. When the galvano mirrors 7a and 7b are disposed at angles X and Y at which the shutter 41 is opened to allow the laser light to pass therethrough and the laser light is incident on the clad 4d. It is closed to block the laser beam.

このように構成された本実施形態に係る光走査型観察装置40によれば、クラッド4dにレーザ光が入射されることがなく、コア4cにレーザ光が入射されるときの蛍光のみが光検出器13に検出されるので、高コントラストの鮮明な画像を得ることができる。
なお、本実施形態においては、シャッタ41を図7に示されるように、ダイクロイックミラー11,15間に配置したが、これに限定されるものではなく、光ファイバ束4の前段、光走査部7の前段または後段、光検出器13の前段のいずれの位置に配置してもよい。また、シャッタ41としては、メカニカルシャッタの他、高周波数でのON/OFFが求められる場合には、AOTFのような音響光学素子を採用してもよい。
According to the optical scanning observation apparatus 40 according to the present embodiment configured as described above, the laser beam is not incident on the clad 4d, and only the fluorescence when the laser beam is incident on the core 4c is detected. Therefore, a clear image with high contrast can be obtained.
In the present embodiment, the shutter 41 is disposed between the dichroic mirrors 11 and 15 as shown in FIG. 7, but the present invention is not limited to this, and the optical scanning unit 7 and the optical scanning unit 7 are not limited thereto. It may be arranged at any position of the front stage or the rear stage, or the front stage of the photodetector 13. As the shutter 41, in addition to a mechanical shutter, an acoustooptic device such as AOTF may be employed when ON / OFF at a high frequency is required.

次に、本発明の第4の実施形態に係る光走査型観察装置50について、図8を参照して以下に説明する。
なお、本実施形態の説明において、上述した実施形態に係る光走査型観察装置1と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を省略することにする。
Next, an optical scanning observation apparatus 50 according to a fourth embodiment of the present invention will be described below with reference to FIG.
In the description of the present embodiment, portions having the same configuration as those of the optical scanning observation apparatus 1 according to the above-described embodiment are denoted by the same reference numerals and description thereof is omitted.

本実施形態に係る光走査型観察装置50は、レーザ光源51として、パルス幅が約100fsec(フェムト秒)の近赤外極短パルスレーザ光を発振する光源、例えば、チタンサファイアレーザ光源を採用している。また、光検出器13は、第1の対物レンズ2と結像レンズ10との間に配置されたダイクロイックミラー52により分岐された蛍光を検出するようになっている。
なお、走査制御部8により光走査部7を構成するガルバノミラー7a,7bの角度を制御する点は、第1の実施形態に係る光走査型観察装置1と同様である。
The optical scanning observation apparatus 50 according to the present embodiment employs, as the laser light source 51, a light source that oscillates near-infrared ultrashort pulse laser light having a pulse width of about 100 fsec (femtoseconds), for example, a titanium sapphire laser light source. ing. Further, the photodetector 13 detects fluorescence branched by a dichroic mirror 52 disposed between the first objective lens 2 and the imaging lens 10.
In addition, the point which controls the angle of the galvanometer mirrors 7a and 7b which comprise the optical scanning part 7 by the scanning control part 8 is the same as that of the optical scanning observation apparatus 1 which concerns on 1st Embodiment.

このように構成された本実施形態に係る光走査型観察装置50の作用について以下に説明する。
本実施形態によれば、極短パルスレーザ光源51から極短パルスレーザ光が出射されると、走査制御部8により制御されたタイミングで、光走査部7のガルバノミラー7a,7bが作動させられ、瞳投影レンズ9、ミラー17、結像レンズ10、第1の対物レンズ2を経て光ファイバ束4の一端面4aに入射させられる。光ファイバ束4を伝播した極短パルスレーザ光は第2の対物レンズ5によって標本Aに入射させられ、標本Aの所定の深さ位置に集光させられる。そして、その深さ位置において、多光子励起現象により蛍光を発生させる。発生した蛍光は、第2の対物レンズ5、光ファイバ束4および第1の対物レンズ2を介して戻り、ダイクロイックミラー52によって入射光路から分岐されて集光レンズ53,バンドパスフィルタ16を介して光検出器13により検出される。
The operation of the optical scanning observation apparatus 50 according to the present embodiment configured as described above will be described below.
According to the present embodiment, when an ultrashort pulse laser beam is emitted from the ultrashort pulse laser light source 51, the galvanometer mirrors 7a and 7b of the optical scanning unit 7 are operated at a timing controlled by the scanning control unit 8. Then, the light is incident on one end surface 4 a of the optical fiber bundle 4 through the pupil projection lens 9, the mirror 17, the imaging lens 10, and the first objective lens 2. The ultrashort pulse laser beam propagated through the optical fiber bundle 4 is incident on the specimen A by the second objective lens 5 and is condensed at a predetermined depth position of the specimen A. Then, at the depth position, fluorescence is generated by the multiphoton excitation phenomenon. The generated fluorescence returns via the second objective lens 5, the optical fiber bundle 4, and the first objective lens 2, and is branched from the incident optical path by the dichroic mirror 52 and passes through the condenser lens 53 and the band pass filter 16. It is detected by the photodetector 13.

この場合において、本実施形態においても、走査制御部8の作動により、光走査部7が制御され、コア4cに長く、クラッド4dに短く極短パルスレーザ光が入射させられるので、クラッド4dにおける自家蛍光の発生を抑制し、鮮明な画像を得ることができる。
特に、本実施形態においては、標本Aの所定の深さ位置においてピンポイント式に蛍光を発生させる多光子励起現象を利用しているので、共焦点ピンホールが不要であり、また、角度制御される光走査部7に、発生した蛍光を通過させる必要がない。したがって、装置の構成を簡易にすることができる。
In this case, also in the present embodiment, the optical scanning unit 7 is controlled by the operation of the scanning control unit 8, and the ultrashort pulse laser light is incident on the core 4c and the clad 4d. Generation of fluorescence can be suppressed and a clear image can be obtained.
In particular, in the present embodiment, since a multiphoton excitation phenomenon that generates fluorescence in a pinpoint manner at a predetermined depth position of the specimen A is used, a confocal pinhole is unnecessary and the angle is controlled. It is not necessary to pass the generated fluorescence through the optical scanning unit 7. Therefore, the configuration of the apparatus can be simplified.

なお、本実施形態においては、第1の実施形態と同様に、走査制御部8によりダイクロイックミラー7a,7bからなる光走査部7を制御することとしたが、これに代えて、音響光学素子からなる光走査部7を採用し、あるいは、第2の実施形態と同様に、検出器制御部31によって撮像タイミングを制御し、あるいは、画像処理部32によりクラッド4dに極短パルスレーザが入射された画像部分を除去し、あるいは、第3の実施形態と同様にシャッタ制御部42によりシャッタ41を制御することとしてもよい。   In the present embodiment, as in the first embodiment, the scanning controller 8 controls the optical scanning unit 7 including the dichroic mirrors 7a and 7b. In the same manner as in the second embodiment, the image scanning timing is controlled by the detector control unit 31, or the ultrashort pulse laser is incident on the clad 4d by the image processing unit 32. The image portion may be removed, or the shutter 41 may be controlled by the shutter control unit 42 as in the third embodiment.

本発明の第1の実施形態に係る光走査型観察装置を示す全体構成図である。1 is an overall configuration diagram showing an optical scanning observation apparatus according to a first embodiment of the present invention. 図1の光走査型観察装置における走査制御部による光走査部の動作パターンを示す図である。It is a figure which shows the operation | movement pattern of the optical scanning part by the scanning control part in the optical scanning observation apparatus of FIG. 図2の動作パターンにより光走査部が駆動されたときのレーザ光の走査パターンを示す図である。It is a figure which shows the scanning pattern of a laser beam when an optical scanning part is driven with the operation | movement pattern of FIG. 本発明の第2の実施形態に係る光走査型観察装置を示す全体構成図である。It is a whole block diagram which shows the optical scanning type observation apparatus which concerns on the 2nd Embodiment of this invention. 図4の光走査型観察装置における光走査部の動作パターンおよび検出器制御部による検出器の動作パターンを示す図である。FIG. 5 is a diagram showing an operation pattern of an optical scanning unit and an operation pattern of a detector by a detector control unit in the optical scanning observation apparatus of FIG. 4. 図4の光走査型観察装置の変形例を示す全体構成図である。It is a whole block diagram which shows the modification of the optical scanning type observation apparatus of FIG. 本発明の第3の実施形態に係る光走査型観察装置を示す全体構成図である。It is a whole block diagram which shows the optical scanning type observation apparatus which concerns on the 3rd Embodiment of this invention. 本発明の第4の実施形態に係る光走査型観察装置を示す全体構成図である。It is a whole block diagram which shows the optical scanning type observation apparatus which concerns on the 4th Embodiment of this invention.

符号の説明Explanation of symbols

A 試料
1 光走査型観察装置
4 光ファイバ束
4c コア
4d クラッド
5 第2の対物レンズ
6 レーザ光源(光源)
7 光走査部(光走査部)
7a,7b ガルバノミラー
8 走査制御部
31 検出器制御部
32 画像処理部
41 シャッタ(シャッタ部)
42 シャッタ制御部
51 極短パルスレーザ光源(光源)
A Sample 1 Optical scanning observation device 4 Optical fiber bundle 4c Core 4d Clad 5 Second objective lens 6 Laser light source (light source)
7 Optical scanning unit (optical scanning unit)
7a, 7b Galvano mirror 8 Scanning control unit 31 Detector control unit 32 Image processing unit 41 Shutter (shutter unit)
42 Shutter controller 51 Ultrashort pulse laser light source (light source)

Claims (9)

光源と、
該光源からの光を走査する光走査部と、
該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、
該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、
前記光走査部の動作を制御する走査制御部とを備え、
該走査制御部が、前記光ファイバ束のコアに長くクラッドに短く、前記光源からの光を集光させるように前記光走査部を制御する光走査型観察装置。
A light source;
An optical scanning unit that scans light from the light source;
An optical fiber bundle having a plurality of cores that propagate the light scanned by the optical scanning unit and a clad disposed around the cores;
An objective optical system that forms an image of light propagating through the optical fiber bundle on the specimen;
A scanning control unit for controlling the operation of the optical scanning unit,
An optical scanning observation apparatus in which the scanning control unit controls the optical scanning unit so as to collect light from the light source, which is long in the core of the optical fiber bundle and short in the cladding.
前記走査制御部が、前記光走査部による光の集光位置を各コアにおいて停止させるように、階段状に光走査部の動作を制御する請求項1に記載の光走査型観察装置。   The optical scanning observation apparatus according to claim 1, wherein the scanning control unit controls the operation of the optical scanning unit in a stepped manner so that the light condensing position by the optical scanning unit is stopped in each core. 前記走査制御部が、前記光走査部による光の集光位置を、各コアにおいて遅く、各クラッドにおいて速く移動させるように光走査部の動作を制御する請求項1に記載の光走査型観察装置。   The optical scanning observation apparatus according to claim 1, wherein the scanning control unit controls the operation of the optical scanning unit so that the light condensing position by the optical scanning unit is moved slowly in each core and fast in each cladding. . 前記光走査部がガルバノミラーからなり、
前記走査制御部がガルバノミラーの角度を制御する請求項1から請求項3のいずれかに記載の光走査型観察装置。
The optical scanning unit is composed of a galvanometer mirror,
The optical scanning observation apparatus according to claim 1, wherein the scanning control unit controls an angle of the galvanometer mirror.
前記光走査部が入力される振動周波数に応じて回折角度を変化させる音響光学素子からなり、
前記走査制御部が光走査部に入力する振動周波数を制御する請求項1から請求項3のいずれかに記載の光走査型観察装置。
The optical scanning unit is composed of an acousto-optic element that changes a diffraction angle according to an input vibration frequency,
The optical scanning observation apparatus according to claim 1, wherein the scanning control unit controls a vibration frequency input to the optical scanning unit.
前記光源が、極短パルスレーザ光を発振するレーザ光源からなり、
前記光検出器が、前記光ファイバ束と光走査部との間から分岐した戻り光を検出する請求項1から請求項5のいずれかに記載の光走査型観察装置。
The light source comprises a laser light source that oscillates an ultrashort pulse laser beam,
The optical scanning observation apparatus according to claim 1, wherein the optical detector detects return light branched from between the optical fiber bundle and an optical scanning unit.
光源と、
該光源からの光を走査する光走査部と、
該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、
該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、
標本からの戻り光を検出する光検出器と、
該光検出器の動作を制御する検出器制御部とを備え、
該検出器制御部が、前記光ファイバ束のコアからの戻り光を検出し、クラッドからの戻り光を検出しないように前記光検出器の動作を制御する光走査型観察装置。
A light source;
An optical scanning unit that scans light from the light source;
An optical fiber bundle having a plurality of cores that propagate the light scanned by the optical scanning unit and a clad disposed around the cores;
An objective optical system that forms an image of light propagating through the optical fiber bundle on the specimen;
A photodetector for detecting the return light from the specimen;
A detector control unit for controlling the operation of the photodetector,
An optical scanning observation apparatus in which the detector control unit detects the return light from the core of the optical fiber bundle and controls the operation of the photodetector so as not to detect the return light from the clad.
光源と、
該光源からの光を走査する光走査部と、
該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、
該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、
標本からの戻り光を検出する光検出器と、
該光検出器により取得された画像を処理する画像処理部とを備え、
該画像処理部が、前記光ファイバ束のコアからの戻り光に対応する画像を抽出する光走査型観察装置。
A light source;
An optical scanning unit that scans light from the light source;
An optical fiber bundle having a plurality of cores that propagate the light scanned by the optical scanning unit and a clad disposed around the cores;
An objective optical system that forms an image of light propagating through the optical fiber bundle on the specimen;
A photodetector for detecting the return light from the specimen;
An image processing unit that processes an image acquired by the photodetector,
An optical scanning observation apparatus in which the image processing unit extracts an image corresponding to return light from the core of the optical fiber bundle.
光源と、
該光源からの光を走査する光走査部と、
該光走査部により走査された光を伝播する複数のコアおよび該コアの周囲に配置されたクラッドを有する光ファイバ束と、
光源からの光を選択的に通過させるシャッタ部と、
該シャッタ部を制御するシャッタ制御部と、
該光ファイバ束内を伝播した光を標本上に結像させる対物光学系と、
標本からの戻り光を検出する光検出器とを備え、
前記シャッタ制御部が、前記光ファイバ束のコアに集光される光を通過させ、クラッドに集光される光を遮断するようシャッタ部を制御する光走査型観察装置。
A light source;
An optical scanning unit that scans light from the light source;
An optical fiber bundle having a plurality of cores that propagate the light scanned by the optical scanning unit and a clad disposed around the cores;
A shutter that selectively allows light from the light source to pass through;
A shutter control unit for controlling the shutter unit;
An objective optical system that forms an image of light propagating through the optical fiber bundle on the specimen;
A photodetector for detecting the return light from the specimen,
An optical scanning observation apparatus in which the shutter control unit controls the shutter unit so as to allow the light collected on the core of the optical fiber bundle to pass and block the light collected on the clad.
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